CN100493504C - 青藤碱或其盐的缓释微球及其制备方法和缓释注射制剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种青藤碱或其盐的缓释微球及其制备方法，该缓释微球包括活性成分青藤碱或其药用盐，以及辅料白蛋白，其中活性成分与白蛋白的重量比为1∶8～2∶1。本发明还公开了一种含有该缓释微球的青藤碱或其盐的缓释注射制剂。该缓释微球具有较好的包封率和载药量，以及明显的缓释作用。该缓释注射制剂可用于肌肉或关节腔内注射，治疗风湿及类风湿性关节炎，药效持久且平稳，可减少用药次数，提高用药依从性。

Description

青藤碱或其盐的缓释微球及其制备方法和缓释注射制剂

技术领域

本发明涉及制药领域，特别涉及一种青藤碱或其盐的缓释微球及其制备方法，以及含有该缓释微球的青藤碱或其盐的缓释注射制剂。

背景技术

青藤碱(sinomenine)是从传统中药青风藤(Sinomenium scutum Rehd.etWils.)中提取的有效成分，是治疗风湿、类风湿性关节炎的有效单体，药用多用其盐酸盐。1996年被正式批准为国家中药保护品种，收载于卫生部药品标准(中药成方制剂)第十八册。由于该品种疗效显著，现已成为常用药物。

目前，市场上的青藤碱制剂除口服的盐酸青藤碱片、毛青藤总碱片、青藤碱缓释片外还有盐酸青藤碱注射剂。常规口服制剂虽有良好的抗炎、镇痛疗效，但需一日服药三次，使用不便，缓释片可减少患者用药次数，提高顺应性，但难以避免口服药物所致的胃肠道不适。现有注射剂需一日注射两次，亦存在用药顺应性问题。

国内在该药物的新剂型开发上有不少报道，如凝胶剂(雷嘉川，中国医院药学杂志，2003，23(3)：175—176)、喷雾剂(祝清芬，中成药，2005，27(2)：231—232)、口服缓释微丸(CN 1582931A)等。但缓释注射剂尚无报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种具有良好缓释效果、且适用于注射制剂的青藤碱或其盐的缓释微球及其制备方法，并提供一种含有该缓释微球的青藤碱或其盐的缓释注射制剂。

本发明人经过诸多试验研究发现，由于青藤碱的盐，如现常用的其药用盐—盐酸青藤碱有极好的水溶性，故将其制成缓释注射剂困难较大。曾经尝试将其制成聚合物(PLA、PLGA)纳米粒和脂质体等缓释注射剂，但都由于其高水溶性的特点，难以提高包封率和载药量，缓释效果也差。本发明人最终筛选到以白蛋白为辅料，采用喷雾干燥法制备载药微球，可使药物与辅料一步成球，药物损失极少，包封率高，且经体内外释放试验研究均具有明显缓释效果。

因此，本发明青藤碱或其盐的缓释微球的技术方案为：一种青藤碱或其盐的缓释微球，其包括活性成分青藤碱或其药用盐，以及辅料白蛋白，其中活性成分与白蛋白的重量比为1:8～2:1。

其中，上述活性成分与白蛋白的重量比例太小，特别是小于1:8，则载药量太低；反之，该比例太大，则微球的突释效应明显。因此，该重量比本发明更优选1:2～2:1，最优选1:2。

至于本发明青藤碱或其盐的缓释微球的制备方法，本发明人在研制过程中进行了一系列筛选实验，发现采用传统的乳化-加热固化法制得的微球，药物包封率低、损失大，而采用喷雾干燥法制备微球，药物包封率高，且工艺简单，易于放大生产。另外，对喷雾干燥得到的固体微球进行加热或不加热的干燥固化处理，可以调节所载药物的释放速率。

因此，本发明青藤碱或其盐的缓释微球的制备方法采用喷雾干燥法或喷雾干燥-加热固化法。

其中，所述的喷雾干燥-加热固化法中，随着温度升高、时间延长，释药速度减慢。因而本发明加热固化的温度优选80℃-120℃，时间为1-24小时；更优选的温度为100℃，时间为2-12小时。

而本发明的一种青藤碱或其盐的缓释注射制剂，其包括上述的缓释微球和溶媒。由于本发明的缓释微球无法在注射用水中迅速分散，需采用特殊的注射溶媒。所用的可注射溶媒可以是注射用油，选自于橄榄油、玉米油、芝麻油、花生油、大豆油、杏仁油、椰子油、罂粟籽油、棉籽油、蓖麻油，或其他注射用溶剂包括液态聚乙二醇、丙二醇、甘油、肉豆蔻异丙酯、油酸乙酯、苯甲酸苄酯、聚氧乙烯油酸甘油三酯等中的一种或一种以上。所用的分散方法可选用超声法或振荡法。

本发明青藤碱或其盐的缓释微球具有较好的包封率和载药量，其体外释放试验表明其具有明显的缓释作用。该制备方法具有工艺流程短、操作简便、重现性好、缓释药物稳定可靠、适于工业化生产等优点。而本发明缓释注射制剂可用于肌肉或关节腔内注射，治疗风湿及类风湿性关节炎等，抗炎镇痛作用持久、平稳，可减少患者用药次数，提高用药依从性。

附图说明

图1为原料药溶液与本发明喷雾干燥缓释微球(未加热固化)的体外释药曲线。

图2为本发明不同温度加热固化6个小时的缓释微球的体外释药曲线。

图3为本发明100℃加热固化不同时间的缓释微球的体外释药曲线。

图4为本发明青藤碱或其盐的缓释注射制剂的大鼠体内药动学曲线。

图5为本发明青藤碱或其盐的缓释注射制剂的小鼠醋酸扭体实验数据统计图。

具体实施方式

下面用实施例来进一步说明本发明，但本发明并不受其限制。

实施例1

取盐酸青藤碱取1.0g，牛血清白蛋白2.0g，加水100ml使其充分溶解后过滤得澄清溶液。将该溶液用喷雾干燥器进行喷雾干燥，得到的白色粉末置室温下硅胶干燥器中放置3天，即得载药白蛋白缓释微球。取微球100mg，加入注射用大豆油2ml，超声30秒，使微球充分混悬即得本发明盐酸青藤碱的缓释注射制剂。

实施例2

取盐酸青藤碱2.0g，牛血清白蛋白2.0g，加水100ml使其充分溶解后过滤得澄清溶液。将该溶液用喷雾干燥器进行喷雾干燥，得到的白色粉末置120℃烘箱中加热固化4小时后放至室温，即得载药白蛋白缓释微球。取微球75mg，加入注射用芝麻油2ml，超声30秒，使微球充分混悬即得本发明盐酸青藤碱的缓释注射制剂。

实施例3

取盐酸青藤碱4.0g，人血清白蛋白2.0g，加水100ml使其充分溶解后过滤得澄清溶液。将该溶液用喷雾干燥器进行喷雾干燥，得到的白色粉末置100℃烘箱中加热固化8小时后放至室温，即得载药白蛋白缓释微球。取微球50mg，加入聚乙二醇200 0.2ml、注射用水1.8ml，超声30秒，使微球充分混悬即得本发明盐酸青藤碱的缓释注射制剂。

实施例4

取盐酸青藤碱0.5g，人血清白蛋白2.0g，加水100ml使其充分溶解后过滤得澄清溶液。将该溶液用喷雾干燥器进行喷雾干燥，得到的白色粉末置80℃烘箱中加热固化12小时后放至室温，即得载药白蛋白缓释微球。取微球150mg，加入丙二醇0.5ml、注射用水1.5ml，超声30秒，使微球充分混悬即得本发明盐酸青藤碱的缓释注射制剂。

实施例5

取盐酸青藤碱0.25g，人血清白蛋白2.0g，加水100ml使其充分溶解后过滤得澄清溶液。将该溶液用喷雾干燥器进行喷雾干燥，得到的白色粉末置100℃烘箱中加热固化24小时后放至室温，即得载药白蛋白缓释微球。取微球200mg，加入聚氧乙烯油酸甘油三酯0.1ml、丙二醇0.1ml、注射用水1.8ml，振荡60秒，使微球充分混悬即得本发明盐酸青藤碱的缓释注射制剂。

实施例6

取盐酸青藤碱1.0g，牛血清白蛋白2.0g，加水100ml使其充分溶解后过滤得澄清溶液。将该溶液用喷雾干燥器进行喷雾干燥，得到的白色粉末置100℃烘箱中加热固化6小时后放至室温，即得载药白蛋白缓释微球。取微球25mg，加入注射用大豆油2ml，超声30秒，使微球充分混悬即得本发明盐酸青藤碱的缓释注射制剂。

实施例7

取盐酸青藤碱1.0g，牛血清白蛋白2.0g，加水100ml使其充分溶解后过滤得澄清溶液。将该溶液用喷雾干燥器进行喷雾干燥，得到的白色粉末置80℃烘箱中加热固化12小时后放至室温，即得载药白蛋白缓释微球。取微球25mg，加入注射用大豆油2ml，超声30秒，使微球充分混悬即得本发明盐酸青藤碱的缓释注射制剂。

实施例8

取盐酸青藤碱1.0g，牛血清白蛋白2.0g，加水100ml使其充分溶解后过滤得澄清溶液。将该溶液用喷雾干燥器进行喷雾干燥，得到的白色粉末置120℃烘箱中加热固化4小时后放至室温，即得载药白蛋白缓释微球。取微球25mg，加入注射用大豆油2ml，超声30秒，使微球充分混悬即得本发明盐酸青藤碱的缓释注射制剂。

上述实施例制得的本发明缓释微球，其粒径范围为1～3μm。

试验实施例1 本发明盐酸青藤碱缓释微球的包封率及载药量

用常规方法测定实施例1～5不同药物(SM)/辅料(BSA)比例的缓释微球的包封率和载药量。

其中，包封率的测定方法为：取喷干微球适量，加入0.01mol/L HCL溶解后经高效液相色谱测定药物含量；

载药量＝微球中测得药物重量/微球重量；

包封率＝微球中测得药物重量/微球中药物理论重量。结果如下表所示。

  

SM/BSA	包封率(％)	载药量(％)
			1/8(实施例5)	80.3	8.54
1/4(实施例4)	83.2	16.78
			1/2(实施例1)	94.4	31.6
1/1(实施例2)	95.4	47.7
			2/1(实施例3)	97.3	64.9

可见，本发明一定比例范围内的青藤碱或其盐与辅料白蛋白制得的缓释微球均具有较佳的包封率。且随着药物含量的加大，载药量也增大，而包封率没有下降。

试验实施例2 本发明盐酸青藤碱缓释微球的体外释放试验

采用动态透析法进行微球的体外释放试验。称取微球适量，装入处理好的透析袋中，两端系紧，置于转篮中。以pH7.3磷酸盐缓冲液200ml为释放介质，在37±0.5℃，50r/min条件下进行体外释放实验。分别于2h、6h、1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天取样，同时补加等量新鲜介质。将待测液进行高效液相色谱仪测定，计算药物累积释放量。

1、不同固化条件制得的缓释微球的体外释放速率

对实施例6、7、8进行体外释放速率测定，结果如下表所示。

 

组别	固化温度	固化时间	释药50％时间
				实施例7	80℃	12h	12h
实施例6	100℃	6h	24h
				实施例8	120℃	4h	72h

2、不同药物/辅料比例的缓释微球的体外释放试验

试验方法同上。

试验组：实施例1；及将盐酸青藤碱分别取2.0、4.0g，余同实施例1的方法喷干制得的缓释微球。

对照组：原料药。

试验组和对照组的释药曲线请参见图1。可见本发明将青藤碱或其盐与辅料白蛋白按一定比例制成的微球可明显延缓药物的释放速度，且随着白蛋白比例的增加，突释效应减小。

3、不同固化温度制得的缓释微球的体外释放试验

试验方法同上。

试验组：实施例6；未加热固化、余同实施例6的方法喷干制得的缓释微球；以及加热固化温度分别为120℃、80℃，余同实施例6的方法喷干-加热固化制得的缓释微球(MPs)。

对照组：原料药。

试验组和对照组的释药曲线请参见图2。可见加热固化的温度影响微球中药物释放速度，且温度越高释药越慢。

4、不同固化时间制得的缓释微球的体外释放试验

试验方法同上。

试验组：实施例6，及加热固化时间分别为4、8、10、12小时，余同实施例6的方法喷干-加热固化制得的缓释微球。

各试验组的释药曲线请参见图3。可见加热固化的时间可影响微球中药物释放速度，且随固化时间的延长微球释药速度逐渐减慢。

试验实施例3 本发明盐酸青藤碱缓释微球的体内药动学试验

实验动物：Sprague-Dawley大鼠12只，体重200±20g，雌雄各半。随机分为两组，每组6只，分别作为试验组和对照组。

试验组：按照实施例6制备的盐酸青藤碱缓释注射制剂。给大鼠右腿肌注给药(0.4ml/只，一次给药)后分别于不同时间从大鼠尾尖取血，分离血浆，测定不同时间血浆药物浓度，绘制大鼠体内药动学曲线图。

对照组：给大鼠肌注同等剂量的盐酸青藤碱普通注射剂，其余操作同试验组。

结果见图4。可见本发明较原普通注射剂明显延长了药物在体内的滞留时间，具缓释效果。

试验实施例4 本发明盐酸青藤碱缓释微球的体内药效学试验

实验动物：昆明小鼠136只，体重20±2g，雄性。

空白组：小鼠8只。右腿肌注生理盐水0.1ml/只。0.5h后腹腔注射0.6％醋酸溶液0.2ml/只，记录15分钟内小鼠扭体次数，计算平均扭体次数。

试验组：小鼠64只。按照实施例6制备的盐酸青藤碱缓释注射制剂，给小鼠肌注给药(0.1ml/只)后，随机分为8组，每组8只，分别于给药后0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、10h、12h后进行醋酸扭体实验，扭体实验操作同空白组，计算每组平均扭体次数。

对照组：小鼠64只。相同剂量普通注射剂肌注给药，其余操作同试验组。

根据试验结果，分别计算对照组和本发明(试验组)的镇痛百分率，绘制醋酸扭体实验数据统计图。镇痛百分率的计算方法为：

镇痛百分率(％)＝(空白组平均扭体次数—给药组平均扭体次数)/空白组平均扭体次数×100％

结果普通注射液在给药后4小时已无镇痛效果，而微球注射液在给药12小时后仍具有明显镇痛效果。结果见图5。

Claims (8)

1、一种青藤碱或其盐的缓释微球，其包括活性成分青藤碱或其药用盐，以及辅料白蛋白，其中活性成分与白蛋白的重量比为1:8～2:1。

2、如权利要求1所述的缓释微球，其特征在于所述的活性成分与白蛋白的重量比为1:2～2:1。

3、如权利要求1所述的缓释微球，其特征在于所述的活性成分与白蛋白的重量比为1:2。

4、如权利要求1所述的缓释微球，其特征在于所述的药用盐为盐酸青藤碱。

5、如权利要求1～4任一项所述的缓释微球的制备方法，其特征在于该制备方法采用喷雾干燥法或喷雾干燥-加热固化法。

6、如权利要求5所述的制备方法，其特征在于所述的喷雾干燥-加热固化法中加热固化的温度为80℃-120℃，时间为1-24小时。

7、如权利要求6所述的制备方法，其特征在于所述的加热固化的温度为100℃，时间为2-12小时。

8、一种青藤碱或其盐的缓释注射制剂，其包括如权利要求1～4任一项所述的缓释微球，以及溶媒；所述的溶媒选自橄榄油、玉米油、芝麻油、花生油、大豆油、杏仁油、椰子油、罂粟籽油、棉籽油、蓖麻油、液态聚乙二醇、丙二醇、甘油、肉豆蔻异丙酯、油酸乙酯、苯甲酸苄酯以及聚氧乙烯油酸甘油三酯中的一种或几种。

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