CN100391491C - 一种治疗心血管疾病的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种治疗心血管疾病的药物组合物及其制备方法和质量控制方法。该组合物是由如下原料药制成的：菊花500-900重量份、金银花300-700重量份、山楂500-900重量份、槐花300-700重量份、夏枯草300-700重量份。本发明同时公开该组合物用于治疗冠心病或高血压。

Description

一种治疗心血管疾病的药物组合物及其制备方法

发明领域

本发明涉及一种药物组合物及其制备方法，特别是涉及一种治疗心血管疾病的药物组合物及其制备方法。

背景技术

高血脂、高血压等心血管疾病，主要发生于中老年人，是临床的常见病、多发病，也是严重威胁人类健康的一类疾病。脂质代谢紊乱，血脂过高，是动脉硬化的主要致病因素；冠心病则是冠状动脉粥样硬化，冠状动脉血流量降低所致，并且往往伴发高血脂和高血压。这类心血管病的发病率在我国呈上升趋势。目前已成为中老年人中常见病，多发病，十分影响健康，死亡率亦高。对这类病的预防和治疗是当前的重要任务之一。因此，研究预防和治疗这类疾病的药物，具有巨大的临床意义和应用前景。

发明内容

本发明目的在于提供一种治疗高血脂、高血压等心血管疾病的药物组合物；本发明目的还在于提供一种治疗高血脂、高血压等心血管疾病的药物组合物的制备方法。

本发明目的是通过如下技术方案实现的。

本发明药物组合物原料药组成为：

菊花500-900重量份    金银花300-700重量份    山楂500-900重量份

槐花300-700重量份    夏枯草300-700重量份

本发明药物组合物原料药组成优选配比为：

菊花750重量份    金银花500重量份    山楂750重量份

槐花500重量份    夏枯草500重量份；

菊花600重量份    金银花600重量份    山楂600重量份

槐花600重量份    夏枯草400重量份；

菊花800重量份    金银花400重量份    山楂850重量份

槐花400重量份    夏枯草650重量份。

上述本发明药物组合物可以制成临床可接受的任何剂型，如茶剂、丸剂、散剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸、口服液体制剂、注射剂等。

本发明药物组合物的制备方法为：夏枯草全部及菊花、金银花、槐花各半量混合，粉碎成粗粉，过筛，取粗粉量30-50％，备用；取粗粉后的残留物和菊花等三味余下的半量加8-12倍量水煎煮2-4次，每次20-60分钟，合并煎液，滤过；滤液浓缩至相对密度为70～80℃测1.24～1.26的清膏，备用；山楂用5-9倍量水温浸1-3次，每次0.5-2小时，合并滤液；滤过，滤液浓缩至相对密度为70～80℃测1.24～1.26的清膏，备用；取上述粗粉与两种清膏混合，加入常规辅料，制成临床可接受的任何剂型，如茶剂、丸剂、散剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸、口服液体制剂等。

优选方法为：夏枯草全部及菊花、金银花、槐米各1/2混合粉碎成粗粉，取14～20目粗粉量的43-44％残留物和菊花等三味剩下的1/2加10倍量水煎煮二次，每次沸30分钟，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为70～80℃测1.24～1.26的清膏备用；山楂用适量水80℃温浸二次，每次1小时，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为70～80℃测1.24～1.26的清膏备用；取粗粉与上述两种浓缩液混合，加入常规辅料，制成临床可接受的任何剂型，如丸剂、茶剂、散剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸、口服液体制剂等。

本发明药物组合物茶剂的质量检测方法包括如下鉴别当中的一种或几种：

a.取茶剂，置显微镜下观察：花粉粒类圆形或圆三角形，直径61～97um，黄色，雕纹细颗粒状，有萌发孔3个：非腺毛多为单细胞，多折断，壁厚，有细小疣状突起；腺毛头部倒圆锥形，6～33个细胞，直径27～106um，有的内含黄色物质，柄2～5个细胞，直径13～57um，多折断；草酸钙簇晶散在或见于薄壁细胞中，直径9～37um，棱角顶端较钝。花粉粒圆球形，直径22～38um，浅黄色或近无色，雕纹刺状，萌发孔3个。花粉粒圆球形，直径14～22um，近无色或浅黄色，表面较光滑，有萌发孔3个，较大。非腺毛多细胞，常有1个或几个细胞收缩，多数不完整，棕黄色，表面有细小的疣状突起。

b.取茶剂5g，置烧瓶中，加入石油醚(60～90℃)50ml，同流20分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥干，加稀盐酸5ml与醋酸乙酯100ml回流提取1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取绿原酸对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10ul、对照品溶液5ul，分别点于同一硅胶H薄层板上，以7∶2.5∶2.5醋酸丁酯-甲酸-水的上层溶液为展开剂，湿度控制在32％，上行展开12～15cm，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

c.取茶剂5g，置烧瓶中，加入乙醇50ml，回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加石油醚(30～60℃)浸泡2次，每次15ml，2分钟；倾去石油醚液，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取熊果酸对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10ul、对照品溶液5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以20∶5∶8∶0.5环己烷-氯仿-醋酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

d.取茶剂5g，置烧瓶中，加入甲醇50ml，密塞，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加于聚酰胺柱上，用水100ml洗脱，弃去水液，再用乙醇100ml洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芦丁对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液8ul、对照品溶液3ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8∶1∶1醋酸乙酯-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二氯比铝试液，置紫外光灯(365nm)下检视供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

本发明药物组合物茶剂的质量检测方法还包括如下含量测定：

精密称取120℃干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100ml量瓶中，加30％甲醇适量，振摇使溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得每1ml含无水芦丁0.2mg的对照品溶液；

精密量取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml与6.0ml，分别置于25ml量瓶中，各加30％甲醇至6ml，加5％亚硝酸钠溶液1ml，使混匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加30％甲醇至刻度，摇匀，以相应的溶液为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VB)试验，在500nm波长处立即测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

取在60℃干燥至恒重的样品0.5g，精密称定，置三角瓶中，精密加入甲醇100ml，称重，超声250W，50KHZ)处理40分钟，放冷，加甲醇补足重量，滤过，精密量取续滤液15ml，置50ml量瓶中，加水定容至刻度，摇匀；精密量取3ml，置25ml量瓶中，加30％甲醇稀释至刻度，摇匀作为空白对照；另精密量取3ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加30％甲醇至6ml”起，依法立即测定吸收度，从标准曲线读出供试品溶液中；相当于芦丁的重量，计算，即得；茶剂每g含总黄酮以芦丁(C₂₇H₃₀O₁₆)计，不得少于100mg。

本发明药物组合物中菊花为君药；金银花、槐米、夏枯草为臣药；山楂为臣药兼佐药。具有平肝清热、活血化瘀、消痰降脂等功效。主要成分有挥发油、黄酮类、绿原酸、异绿原酸、芸香甙、三萜皂甙、游离的熊果酸、齐墩果酸、柠檬酸、山楂酸、糖类及甙类等。本发明组合物能使头痛、眩晕、失眠等症减轻，并对高血压患者降低其血压有明显的作用；本发明药物组合物制成的制剂具有抗心肌缺血、抗心肌缺氧、降血脂和降血压等作用，故对冠心病、高脂血症、高血压病等有疗效。

下列实验例及实施例用于说明但不限于本发明。

实验例1：抗异丙肾上腺素所致大鼠急性心肌缺作用试验

选取健康SD大鼠50只，体重200-260g雌雄各半。按动物的体重及性别随机搭配平均分成五组，分别作为本发明组合物茶剂(下称茶剂)高、中、低三种剂量组、阳性药物对照组和生理盐水对照组。茶剂三种剂量组大鼠腹腔注射茶剂的剂量分别为24g/kg、12g/kg和5g/kg(浓度分别为31.5和0.75g/ml，给药体积为0.8ml/100g体重，分别为临床成年人日用剂量的40倍、20倍和10倍)。即阳性药物对照组大鼠腹腔注射复方丹参注射液3.2ml/kg体重，(0.32ml/100g，为临床成年人日用剂量的40倍)。盐水对照组(空白对照组)大鼠则腹腔注射生理盐水0.6ml/100g体重。试验结果见1和表2。

表1茶剂对异丙肾上腺素引起大鼠急性心肌缺血心电图(ST段)的影响

注：与生理盐水组比较，经统计学处理，*P＞0.05，**P＜0.05，***P＜0.01。

表2茶剂对异丙肾上腺素引起大鼠急性心肌缺血心电图(T波)的影响

注：与生理盐水组比较，*P＞0.05，**P＜0.05。

从表1可见，生理盐水组大鼠在腹腔注射盐酸异丙肾上腺素后，由于大剂量异丙肾上腺素可造成心肌收缩过快，收缩力过大，冠脉充盈不足，心肌耗氧大大超过供氧，出现心肌缺血，产生心肌损害的心电图变化，即ST段偏移值较大。在同样的实验方法和条件下，大鼠腹腔注射茶剂三种剂量以及腹腔注射复方丹参注射液后，都能显著拮抗异丙肾上腺素所引起的急性心肌缺血心电图ST段的损害性改变。茶剂三种给药剂量指抗异丙肾上腺素所致大鼠急性心肌缺血心电图ST段损害改变的作用比较，中剂量12g/kg和低剂6g/kg给药的疗效比高剂量24g/kg给药后的疗效要好一些。这可能是由于腹腔注射给药时，高剂量组药物的浓度为3g/ml，浓度较高，可能进入腹腔后其渗透压较高而减少了药物的吸收(即降低了生物利用度)，故出现高剂量给药反而疗效较差的结果。从表2可见，仅茶剂的中剂量(12g/kg)给药组对异丙肾上腺素所致大鼠急性心肌缺血心电图T波高度增高有拮抗作用，而茶剂高剂量(24g/kg)和低剂量(6g/kg)以及复方丹参注射液高剂量给药后却均无此作用。总之，从表1和表2可见，茶剂给药后(预防给药)，对异丙肾上腺素所致大鼠急性心肌缺血有显著拮抗保护作用，而复方丹参注射液也有此作用。

实验例2：降血脂作用试验

选取健康小鼠75只，体重24-26g，雌雄各半。按动物体重及性别随机分为五组，分别作为茶剂高、低剂量组、阳性药物对照组、生理盐水对照组和正常动物对照组。前四组小鼠均摄食高脂饮食复制小鼠高脂血症模型。茶剂高、低剂量组小鼠每次灌胃茶剂12g/kg和6g/kg(药液浓度分别为0.6和0.3g/ml，给药体积为0.4ml/20g体重，分别相当于成年人日服剂量的20倍和10倍)。阳性药物对照小鼠每次灌胃云南花粉田七口服液0.32ml/20g体重(相当于成年人日服剂量的20倍)。生理盐水对照组及服食普通饲料的正常对照组小鼠则每次灌胃生理盐水0.4ml/20g体重。各组动物每天灌胃给药1次，连续给药7天。在末次给药后24小时，将小鼠断颈处死，收集血液进行血清总胆固醇和甘油三酯测定。试验结果见表3。

表3茶剂对高脂血症小鼠血清脂质含量的影响试验

注：与高脂血证模型组比较*970.05，**P＜0.05，***P＜0.01。

从表3可见，小鼠在摄食“高脂饮食”7天后，血清中总胆固醇含量大幅度升高。高脂血症模型组小鼠的血清总胆固醇含量比正常对照组平均升高22.62％(P＜0.01)，说明小鼠高胆固醇血症模型的复制是成功的。但小鼠摄食“高脂饮食”后其血清甘油三酯的含量未见明显升高。茶剂12g/kg和6g/kg可使高脂血症小鼠的血清总胆固醇含量分别降低25.26％(P＜0.05)和17.59％(P＞0.05)。表明茶剂在12g/kg剂量具有显著降低血清胆固醇含量的作用。而云南花粉田七口服液在与茶剂12g/kg等临床剂量倍数(均为成年人日服剂量的20倍)的剂量给药后，则未见明显的降胆固醇作用，仅比高脂血症模型下降11.38％(P＞0.05)。试验结果表明茶剂的降血清胆固醇作用优于云南花粉田七口服液。

实验例3：抗缺氧作用试验

选取健康雄性小鼠70只，体重1g-20g。按小鼠体重随机平均分成五组，分别作为茶剂高、中、低三种剂量给药组、阳性药物对照组和重量盐水对照组。茶剂三种剂量组小鼠灌胃茶剂24g/kg、12g/kg和6g/kg(药液浓度分别为1.2、0.6和0.3g/ml，给药体积为0.4ml/20g体重，分别为成年人日服剂量的40倍、20倍和10倍)。阳性药物对照组小鼠灌胃云南花粉田七口服液0.32ml/20g体重(相当于成年人日服剂量的20倍)。生理盐水对照组则灌胃生理盐水0.4ml/20g体重。为了增强心肌兴奋性、增加心肌耗氧量，在各组小鼠灌胃给药30分钟后，给每只小鼠皮下注射0.1％盐酸异丙肾上腺素注射液0.2ml/10g体重。注射异丙肾上腺素后立即将每只小鼠单独放入容积为250ml的广口磨口瓶内。瓶口涂以凡士林加盖密封。瓶内放有纱布包裹的钠石灰5g，以吸收小鼠呼出的水分和二氧化碳。记录各只小鼠放入瓶内至死亡的时间存活时间，以存活时间作为评定药物抗缺氧作用的指标。计算各组小鼠的存活时间和按下列公式计算给药组动物存活时间和延长的百分率(％)。试验结果见表4。

表4茶剂对小鼠常压缺氧耐受性的影响

从表4可见，各组小鼠皮下注射大剂量的异丙肾上腺素，可极大程度地增强心肌收缩力，加快心率、加速传导、增加心肌代谢和耗氧量，造成心肌缺氧而加速其死亡。茶剂12g/kg和6g/kg给药后，可使心肌缺氧模型动物的存活时间有不同程度的延长，比生理盐水对照的分别延长20.66％(P＜0.05)和14.26％(P＞0.05)。但是，茶剂在24g/kg较高剂量或者云南花粉田七口服液给小鼠灌胃给药后均未见使动物存活时间延长的作用。试验结果表明，茶剂在适当剂量下能显著延长小鼠在常压条件下因心肌缺氧所致死亡的时间，即可认它对心肌缺氧小鼠有拮抗性保护作用。

实施例1：

菊花750g，金银花500g，山楂750g，槐花500g，夏枯草500g，夏枯草全部及菊花、金银花、槐米各1/2混合粉碎成粗粉，取14～20目粗粉600g，备用；取粗粉后的残留物(包煎)和菊花等三味剩下的1/2加10倍量水煎煮二次，每次30分钟，滤过，合并滤液，浓缩至675ml，相对密度为1.24～1.26(70～80℃)的清膏备用；山楂用适量水80℃温浸二次，每次1小时，滤过，合并滤液，浓缩至125ml，相对密度为1.24～1.26(70～80℃)的清膏备用；取粗粉与上述两种浓缩液混合制粒，80℃干燥，整粒，得茶剂颗粒1000g(±1％)，包装，即得。服用方法：开水浸泡5分钟后饮用，一次5g，一日3次。

实施例2：

取菊花600g，金银花600g，山楂600g，槐花600g，夏枯草400g，夏枯草全部及菊花、金银花、槐花各半量混合，粉碎成粗粉，过筛，取粗粉量50％，备用；取粗粉后的残留物和菊花等三味余下的半量加8倍量水煎煮3次，每次40分钟，合并煎液，滤过；滤液浓缩至相对密度为70～80℃测1.24～1.26的清膏，备用；山楂用5倍量水温浸3次，每次0.5小时，合并滤液；滤过，滤液浓缩至相对密度为70～80℃测1.24～1.26的清膏，备用；取上述粗粉与两种清膏混合，加常规辅料制成胶囊。

实施例3：

菊花800g，金银花400g，山楂850g，槐花400g，夏枯草650g，夏枯草全部及菊花、金银花、槐花各半量混合，粉碎成粗粉，过筛，取粗粉量30％，备用；取粗粉后的残留物和菊花等三味余下的半量加12倍量水煎煮4次，每次20分钟，合并煎液，滤过；滤液浓缩至相对密度为70～80℃测1.24～1.26的清膏，备用；山楂用9倍量水温浸1次，时间2小时，合并滤液；滤过，滤液浓缩至相对密度为70～80℃测1.24～1.26的清膏，备用；取上述粗粉与两种清膏混合，加入常规辅料，制成滴丸。

实施例4：质量检测方法

如实施例1制备本发明组合物进行质量检测：

a.取颗粒剂，置显微镜下观察：花粉粒类圆形或圆三角形，直径61～97um，黄色，雕纹细颗粒状，有萌发孔3个：非腺毛多为单细胞，多折断，壁厚，有细小疣状突起；腺毛头部倒圆锥形，6～33个细胞，直径27～106um，有的内含黄色物质，柄2～5个细胞，直径13～57um，多折断；草酸钙簇晶散在或见于薄壁细胞中，直径9～37um，棱角顶端较钝。花粉粒圆球形，直径22～38um，浅黄色或近无色，雕纹刺状，萌发孔3个。花粉粒圆球形，直径14～22um，近无色或浅黄色，表面较光滑，有萌发孔3个，较大。非腺毛多细胞，常有1个或几个细胞收缩，多数不完整，棕黄色，表面有细小的疣状突起。

b.取颗粒剂5g，置烧瓶中，加入石油醚(60～90℃)50ml，同流20分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥干，加稀盐酸5ml与醋酸乙酯100ml回流提取1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取绿原酸对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10ul、对照品溶液5ul，分别点于同一硅胶H薄层板上，以7∶2.5∶2.5醋酸丁酯-甲酸-水的上层溶液为展开剂，湿度控制在32％，上行展开12～15cm，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

c.取颗粒剂5g，置烧瓶中，加入乙醇50ml，回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加石油醚(30～60℃)浸泡2次，每次15ml，2分钟；倾去石油醚液，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取熊果酸对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10ul、对照品溶液5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以20∶5∶8∶0.5环己烷-氯仿-醋酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点

实施例5：质量检测方法

如实施例1制备本发明组合物进行质量检测：

a.取颗粒剂，置显微镜下观察：花粉粒类圆形或圆三角形，直径61～97um，黄色，雕纹细颗粒状，有萌发孔3个：非腺毛多为单细胞，多折断，壁厚，有细小疣状突起；腺毛头部倒圆锥形，6～33个细胞，直径27～106um，有的内含黄色物质，柄2～5个细胞，直径13～57um，多折断；草酸钙簇晶散在或见于薄壁细胞中，直径9～37urn，棱角顶端较钝。花粉粒圆球形，直径22～38um，浅黄色或近无色，雕纹刺状，萌发孔3个。花粉粒圆球形，直径14～22um，近无色或浅黄色，表面较光滑，有萌发孔3个，较大。非腺毛多细胞，常有1个或几个细胞收缩，多数不完整，棕黄色，表面有细小的疣状突起。

b.取颗粒剂5g，置烧瓶中，加入石油醚(60～90℃)50ml，同流20分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥干，加稀盐酸5ml与醋酸乙酯100回流提取1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取绿原酸对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10ul、对照品溶液5ul，分别点于同一硅胶H薄层板上，以7∶2.5∶2.5醋酸丁酯-甲酸-水的上层溶液为展开剂，湿度控制在32％，上行展开12～15cm，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

c.取颗粒剂5g，置烧瓶中，加入乙醇50ml，回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加石油醚(30～60℃)浸泡2次，每次15ml，2分钟；倾去石油醚液，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取熊果酸对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10ul、对照品溶液5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以20∶5∶8∶0.5环己烷-氯仿-醋酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

d.取颗粒剂5g，置烧瓶中，加入甲醇50ml，密塞，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加于聚酰胺柱上，用水100ml洗脱，弃去水液，再用乙醇100ml洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芦丁对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液8ul、对照品溶液3ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8∶1∶1醋酸乙酯-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二氯比铝试液，置紫外光灯(365nm)下检视供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

精密称取120℃干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100ml量瓶中，加30％甲醇适量，振摇使溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得每1ml含无水芦丁0.2mg的对照品溶液；

精密量取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml与6.0ml，分别置于25ml量瓶中，各加30％甲醇至6ml，加5％亚硝酸钠溶液1ml，使混匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加30％甲醇至刻度，摇匀，以相应的溶液为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VB)试验，在500nm波长处立即测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

取在60℃干燥至恒重的样品0.5g，精密称定，置三角瓶中，精密加入甲醇100ml，称重，超声250W，50KHZ)处理40分钟，放冷，加甲醇补足重量，滤过，精密量取续滤液15ml，置50ml量瓶中，加水定容至刻度，摇匀；精密量取3ml，置25ml量瓶中，加30％甲醇稀释至刻度，摇匀作为空白对照；另精密量取3ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加30％甲醇至6ml”起，依法立即测定吸收度，从标准曲线读出供试品溶液中；相当于芦丁的重量，计算，即得；颗粒剂每g含总黄酮以芦丁(C₂₇H₃₀O₁₆)计，不得少于100mg。

Claims (11)

1.一种治疗心血管疾病的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由如下原料药制成的：

菊花500-900重量份 金银花300-700重量份 山楂500-900重量份

槐花300-700重量份 夏枯草300-700重量份。

2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由如下原料药制成的：

菊花750重量份 金银花500重量份 山楂750重量份

槐花500重量份 夏枯草500重量份。

3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由如下原料药制成的：

菊花600重量份 金银花600重量份 山楂600重量份

槐花600重量份 夏枯草400重量份。

4.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由如下原料药制成的：菊花800重量份 金银花400重量份 山楂850重量份 槐花400重量份 夏枯草650重量份。

5.如权利要求1、2、3或4所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为：

夏枯草全部及菊花、金银花、槐花各半量混合，粉碎成粗粉，过筛，取粗粉量30-50％，备用；取粗粉后的残留物和菊花、金银花、槐花三味余下的半量加8-12倍量水煎煮2-4次，每次20-60分钟，合并煎液，滤过；滤液浓缩至相对密度为70～80℃测1.24～1.26的清膏，备用；山楂用5-9倍量水温浸1--3次，每次0.5-2小时，合并滤液；滤过，滤液浓缩至相对密度为70～80℃测1.24～1.26的清膏，备用；取上述粗粉与两种清膏混合，加入常规辅料，制成茶剂、丸剂、散剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸或口服液体制剂。

6.如权利要求5所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为：

夏枯草全部及菊花、金银花、槐花各1/2混合粉碎成粗粉，取14～20目粗粉量的43-44％残留物和菊花、金银花、槐花三味剩下的1/2加10倍量水煎煮二次，每次30分钟，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为70～80℃测1.24～1.26的清膏备用；山楂用适量水80℃温浸二次，每次1小时，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为70～80℃测1.24～1.26的清膏备用；取粗粉与上述两种浓缩液混合，加入常规辅料，制成茶剂、丸剂、散剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸或口服液体制剂。

7.如权利要求1、2、3或4所述的药物组合物的茶剂的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别中的一种或几种：

a.取茶剂，置显微镜下观察：花粉粒类圆形或圆三角形，直径61～97um，黄色，雕纹细颗粒状，有萌发孔3个：非腺毛多为单细胞，多折断，壁厚，有细小疣状突起；腺毛头部倒圆锥形，6～33个细胞，直径27～106um，有的内含黄色物质，柄2～5个细胞，直径13～57um，多折断；草酸钙簇晶散在或见于薄壁细胞中，直径9～37um，棱角顶端较钝；花粉粒圆球形，直径22～38um，浅黄色或近无色，雕纹刺状，萌发孔3个；花粉粒圆球形，直径14～22um，近无色或浅黄色，表面较光滑，有萌发孔3个，较大；非腺毛多细胞，常有1个或几个细胞收缩，多数不完整，棕黄色，表面有细小的疣状突起；

b.取茶剂5g，置烧瓶中，加入60～90℃的石油醚50ml，回流20分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥干，加稀盐酸5ml与醋酸乙酯100ml回流提取1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取绿原酸对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10ul、对照品溶液5ul，分别点于同一硅胶H薄层板上，以7∶2.5∶2.5醋酸丁酯-甲酸-水的上层溶液为展开剂，湿度控制在32％，上行展开12～15cm，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

c.取茶剂5g，置烧瓶中，加入乙醇50ml，回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加30～60℃石油醚浸泡2次，每次15ml，2分钟；倾去石油醚液，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取熊果酸对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10ul、对照品溶液5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以20∶5∶8∶0.5环己烷-氯仿-醋酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

d.取茶剂5g，置烧瓶中，加入甲醇50ml，密塞，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加于聚酰胺柱上，用水100ml洗脱，弃去水液，再用乙醇100ml洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芦丁对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液8ul、对照品溶液3ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8∶1∶1醋酸乙酯-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二氯比铝试液，置紫365nm外光灯下检视供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

8.如权利要求7所述的药物组合物的茶剂的质量检测方法，其特征在于该方法还包括如下含量测定：

精密称取120℃干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100ml量瓶中，加30％甲醇适量，振摇使溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得每1ml含无水芦丁0.2mg的对照品溶液；

精密量取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml与6.0ml，分别置于25ml量瓶中，各加30％甲醇至6ml，加5％亚硝酸钠溶液1ml，使混匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加30％甲醇至刻度，摇匀，以相应的溶液为空白，照分光光度法试验，在500nm波长处立即测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

取在60℃干燥至恒重的样品0.5g，精密称定，置三角瓶中，精密加入甲醇100ml，称重，250W，50KHZ超声处理40分钟，放冷，加甲醇补足重量，滤过，精密量取续滤液15ml，置50ml量瓶中，加水定容至刻度，摇匀；精密量取3ml，置25ml量瓶中，加30％甲醇稀释至刻度，摇匀作为空白对照；另精密量取3ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加30％甲醇至6ml”起，依法立即测定吸收度，从标准曲线读出供试品溶液中；相当于芦丁的重量，计算，即得；茶剂每g含总黄酮以芦丁C₂₇H₃₀O₁₆计，不得少于100mg。

9.如权利要求1、2、3或4所述的药物组合物在制备治疗冠心病或高血压病的药物中的应用。

10.如权利要求9所述的药物组合物的应用，其特征在于所述的治疗冠心病是指抗心肌缺血。

11.如权利要求9所述的药物组合物的应用，其特征在于所述的治疗高血压病是指抗心肌缺氧。