CN100357730C - 脂蛋白微流控芯片电泳检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种脂蛋白微流控芯片电泳检测方法，标本预处理，得到电泳待测标本，将电泳待测标本加入芯片电泳仪中进行电泳处理，得到脂蛋白检测峰等步骤。本发明步骤简便、易操作，检测的信噪比达到15左右。
Description
技术领域：
本发明涉及一种脂蛋白检测方法。
背景技术：
血清中存在大量的离子、小分子蛋白等干扰电信号的物质，现有的方法有采用先超速离心法分离脂蛋白，后再对其组分进行透析，再进行电泳确认脂蛋白组份，这样的方法程序复杂，操作麻烦。
发明内容：
本发明的目的在于提供一种易操作，步骤简便的脂蛋白微流控芯片电泳检测方法。
本发明的技术解决方案是：
一种脂蛋白微流控芯片电泳检测方法，其特征是：包括下列步骤：
①标本预处理：将待测血清20μl与80μl双蒸水、50μl 0.1mg/mlNBD-ceramide〔中文名：硝基苯-环氧-偶氮-C6酰基鞘氨醇，Sigma公司产品〕混合后37℃孵育1分钟，避光、冰箱保存，使用前加入250μl电泳缓冲液，作为电泳待测标本，
所述电泳缓冲液为：0.2mol/LTricine〔中文名：N-三(羟甲基)甲基甘氨酸，Sigma公司产品〕20ml和0.1mol/L甲基葡胺40ml混合后加入蒸馏水至100ml，并用1NNaOH调至PH10.1；
②将上述电泳待测标本加入芯片电泳仪中进行电泳处理，样本在进样和分离时由负极至正极，进样电压为600V，进样时间为30秒，分离电压为2000V，运行温度为20℃，得到脂蛋白检测峰。
在电泳处理前，先对芯片进行处理：先用电泳缓冲液进行预电泳。
本发明步骤简便、易操作，检测的信噪比达到15左右。
图1是本发明实施例1的电泳结果图谱。
图2是实施例1的电泳结果图谱。
具体实施方式：
实施例1：
一种脂蛋白微流控芯片电泳检测方法，包括下列步骤：
①标本预处理：将待侧血清20μl与80μl双蒸水、50μl 0.1mg/mlNBD-ceramide混合后37℃孵育1分钟，避光、冰箱保存，使用前加入250μl电泳缓冲液，作为电泳待测标本，
所述电泳缓冲液为：0.2mol/LTricine20ml和0.1mol/L甲基葡胺40ml混合后加入蒸馏水至100ml，并用1NNaOH调至PH10.1；
②在电泳处理前，先对芯片进行处理：先用电泳缓冲液进行预电泳。然后将上述电泳待测标本加入芯片电泳仪中进行电泳处理，样苯在进样和分离时由负极至正极，进样电压为600V，进样时间为30秒，分离电压为2000V，运行温度为20℃，整个电泳时间2分钟结束，得到脂蛋白检测峰，如图1所示。
实施例2：
一种脂蛋白微流控芯片电泳检测方法，包括下列步骤：
①标本预处理：将待侧血清20μl与80μl双蒸水、50μl 0.1mg/mlNBD-ceramide混合后37℃孵育1分钟，避光、冰箱保存，使用前加入250μl电泳缓冲液，作为电泳待测标本，
所述电泳缓冲液为：0.2mol/LTricine20ml和0.1mol/L甲基葡胺40ml混合后加入蒸馏水至100ml，并用1NNaOH调至PH10.1；
②在电泳处理前，先对芯片进行处理：先用电泳缓冲液进行预电泳。然后将上述电泳待测标本加入芯片电泳仪中进行电泳处理，样苯在进样和分离时由负极至正极，进样电压为600V，进样时间为30秒，分离电压为2000V，运行温度为20℃，连续进行5次电泳，得到脂蛋白检测峰，如图2所示。
Claims (2)
1、一种脂蛋白微流控芯片电泳检测方法，其特征是：包括下列步骤：
①标本预处理：将待测血清20μl与80μl双蒸水、50μl 0.1mg/ml硝基苯-环氧-偶氮-C6酰基鞘氨醇混合后37℃孵育1分钟，避光、冰箱保存，使用前加入250μl电泳缓冲液，作为电泳待测标本，
所述电泳缓冲液为：0.2mol/L N-三(羟甲基)甲基甘氨酸20ml和0.1mol/L甲基葡胺40ml混合后加入蒸馏水至100ml，并用1NNaOH调至PH10.1；
②将上述电泳待测标本加入芯片电泳仪中进行电泳处理，样本在进样和分离时由负极至正极，进样电压为600V，进样时间为30秒，分离电压为2000V，运行温度为20℃，得到脂蛋白检测峰。
2、根据权利要求1所述的脂蛋白微流控芯片电泳检测方法，其特征是：在电泳处理前，先对芯片进行处理：先用电泳缓冲液进行预电泳。
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