CN100355781C - 肽 - Google Patents
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Abstract
可引起T细胞免疫的来自移码突变基因的癌相关蛋白的多种肽在癌疫苗和抗癌治疗的组合物中的应用。
Description
发明概要
本发明涉及作为由基因移码突变引起的蛋白产物的片段的肽，这些肽可引起T细胞免疫，本发明还涉及包含所述肽的用于抗癌治疗的癌疫苗和组合物。
本发明还涉及鉴定这些作为基因移码突变引起的蛋白产物片段的肽的方法，所述肽可引起对抵抗所述突变基因相关的癌症有用的T细胞免疫。
本发明还涉及编码至少一个移码突变肽的DNA序列，以及包含至少一个插入位点的载体，所述插入位点含有编码至少一个移码突变肽的DNA序列。
本发明进一步涉及治疗或预防基因移码突变相关癌症的方法，所述方法通过施用至少一个移码突变肽、或包含至少一个插入位点的重组病毒载体、或含有编码至少一个移码突变肽的DNA序列的分离的DNA序列来进行，其中所述插入位点含有编码至少一个移码突变肽的DNA序列。
本发明代表基于应用肽产生激活和强化机体自身免疫系统T细胞的抗癌活性的抗癌治疗或预防的进一步发展。
技术背景
肿瘤抗原现状：
目前已在广谱的癌症类型中表征了多种T细胞识别抗原。根据其表达，这些抗原可划分为若干主要类群。发育分化有关抗原(睾丸肿瘤抗原、癌胚抗原等，如MAGE抗原和CEA)和组织特异分化抗原(酪氨酸酶、gp 100等)构成了两个主要类群。含有真正肿瘤特异抗原的类群含有由于其编码基因突变而改变的蛋白质。在大多数情况下，突变是独特的，并在单个或少数肿瘤中检测到。这些抗原有几个似乎在肿瘤形成中起作用。
癌疫苗现状：
癌疫苗开发的焦点是在一种形式的癌(如黑素瘤)或多种癌中高度表达的抗原。其原因之一是为了增加加入到临床研究中的患者数。该领域正处于快速发展期，这由目前在NCI的PDQ数据库中注册的癌疫苗方法列表就可以说明。
可遗传的癌/癌基因检测：
遗传形式的癌在人群中以一定的频率发生。对于若干这些形式的癌症，已对其根本遗传缺陷作图。在构成可遗传癌重要类群的Lynch综合症癌中也是如此。在患有该综合症的家族中，家族成员遗传编码DNA错配修复(MMR)酶的缺陷基因。这种MMR缺陷的携带者常常会患有结肠直肠癌(HNPCC)或其他形式的癌(表？)。MMR酶中的突变可以以检测其它癌相关基因相同的方式采用基因检测来检测。
在这种情况下危险人群的基因检测处于一个无药的困境，因为不存在预防治疗可接受的形式。目前，手术除去有患癌危险的器官成为唯一的治疗选择。在这些患者中，只要能开发有效的疫苗，癌疫苗将是非常(有意义的)预防形式。
错配DNA有效修复的缺乏在DNA一条链中导致缺失和插入，这种情况尤其在含有重复单元(重复序列)的DNA节段中发生。迄今，焦点集中在非编码微卫星座位中的重复序列。的确，微卫星不稳定性是MMR缺陷引起的癌症的特征。我们则采取了另一种途径，集中到在编码致癌过程有关蛋白的DNA序列中发生的移码突变。这种移码突变在蛋白质的C端产生全新的氨基酸序列，并在新终止密码子出现的地方过早地终止。这导致两个重要的结果：
1)移码产生的截短蛋白质通常是没有功能的，在大多数情况下导致一项重要的细胞功能的“敲除”。异常蛋白质也可能获得新的功能如聚集并形成斑的能力。在这两种情况下移码都会导致疾病。
2)阅读框移动产生的新的短C端氨基酸序列(“移码序列”)对机体而言是外源的。在突变前它并不存在，而且仅在含有突变的细胞即肿瘤细胞及其前恶性祖细胞中存在。因为它们是全新的，因而对携带者的免疫系统来说是外源的，所以它们可被携带者体内的T细胞识别。到目前为止，没有人集中在移码突变的这个方面，也没有描述蛋白质编码区的移码肽作为肿瘤抗原的报道。因此这个概念是新颖的，它形成了开发基于这些序列的疫苗的基础。然后，这些疫苗也可在遗传了属于MMR机制的缺陷酶的人中预防性地使用。因此这种疫苗将填补遗传形式癌症的治疗方法中的空白。
已显示细胞内“自身”蛋白质的单氨基酸替代可产生的肿瘤排斥抗原，由与正常肽在其氨基酸序列上不同的肽组成。识别肿瘤细胞表面主要组织相容性复合物(MHC)中的这些肽的T细胞能杀死这些肿瘤细胞，从而从宿主中排斥肿瘤。
典型地，B细胞产生的抗体识别天然构象的游离抗原，进一步可识别抗原表面暴露的几乎任何位点，相比之下，T细胞只有在抗原被MHC分子结合和呈递时才识别抗原，通常这种结合只有在适当的抗原加工之后才发生，抗原加工包括该蛋白质的蛋白水解断裂，以便获得的肽片段适合MHC分子的裂隙。由此T细胞也能识别来自细胞内蛋白的肽。因此，T细胞能识别无论来自肿瘤细胞何处的肿瘤细胞表面MHC分子中的异常肽，并能随后被激活以清除含有异常肽的肿瘤细胞。
M.Barinaga，科学(Science)，257，880-881，1992给出了一个MHC怎样结合肽的短评。本发明技术背景更全面的解释可在D.Male等，高等免疫学(Advanced Immunology)，1987，J.B.lippincott公司，Philade lphia中找到。两篇文献在此完整并入本文。
人MHC分子正常指HLA(人白细胞抗原)分子。它们由人类第6号染色体的HLA区域编码。
根据编码它们的染色体区域和与之相互作用并由此主要激活的T细胞亚群的不同，HLA分子表现为两个不同的类型。I型分子由HLA A、B和C亚座位编码，它们主要激活CD8+细胞毒性T细胞。HLA II型分子由DR、DP和DQ亚座位编码，并主要激活包括辅助细胞和细胞毒性细胞的CD4+T细胞。
每个个体正常有6种HLA I型分子，通常A、B和C三组中各两种。相应地，所有个体都有他们自己的HLA II型分子选择，同样DP、DQ和DR三组中各两种。A、B、C组和DP、DQ和DR组每个均再分为几个亚组。在某些情况下，由于两个HLA亚组的重叠，不同的HLA I型或II型分子的数目会减少。
所有这些基因产物都是高度多态的。因此不同的个体表达与其它个体的HLA分子不同的独特HLA分子。这是在移植时难以找到HLA匹配的器官供体的根据。HLA分子的遗传多样性在免疫学中的意义通过其作为免疫应答基因的作用反映出来。通过其多肽结合能力，特定HLA分子的存在或缺乏决定了个体对多肽表位应答的能力。因此，HLA分子决定对疾病的抗性或易感性。
T细胞可通过多种机制控制癌的发生和生长。细胞毒性T细胞HLAI型限制的CD8+和HLA II型限制的CD4+细胞，可直接杀死带有适当肿瘤抗原的肿瘤细胞。在细胞毒性CD8+T细胞应答和抗体应答，以及巨噬细胞和LAK细胞杀伤诱导中均需要CD4+辅助T细胞。
I型和II型HLA结合的必要条件是多肽必须含有结合基序，对于不同HLA组和亚组结合基序通常是不同的。结合基序的特征是需要在多肽的特定位置有特定类型的氨基酸，例如带有大的疏水或正电荷侧链基团，以便实现与HLA裂隙口袋的紧密匹配。这种匹配以及在结合裂隙内肽长度限制在8-10个氨基酸的结果是结合一类I型HLA分子的肽极不可能也与另一类结合。因此，例如，极有可能均属于I型的HLA-A1和HLA-A2亚组的多肽结合基序是不同的，就象HLA-A1和HLA-B1分子的结合基序是不同的一样。
由于同样的原因，完全相同的氨基酸序列不可能位于不同的II型分子的结合裂隙内。对于HLA II型分子，肽的结合序列可能更长，已发现它们通常含有10-16个氨基酸，其中在一或两端的一些氨基酸不是HLA裂隙结合基序的部分。
然而，可能出现几种HLA I型和II型分子的不同肽结合基序的重叠。具有至少两种不同的HLA分子结合序列重叠的肽被称为含有“重叠的T细胞表位”。“重叠表位肽”所含有的各种表位可通过抗原呈递细胞加工肽形成，之后与不同HLA分子结合呈递给T细胞。人HLA分子的个体差异使含有重叠表位的肽比仅能结合一类HLA分子的肽作为通用疫苗更为有用。
只有患者的至少一类HLA I型和/或II型分子可结合全长或被患者自身抗原呈递细胞加工和修剪的疫苗肽，才能实现个体的有效接种。
作为大多数人群通用疫苗的肽的实用性随其全长或抗原呈递细胞加工后形式可结合的不同HLA分子数的增加而增加。
为了使用来源于突变基因编码蛋白质的肽作为疫苗或抗癌剂以产生抗肿瘤CD4+和/或CD8+T细胞，有必要研究所述突变蛋白并鉴定最终被抗原呈递细胞加工成更短的肽之后能刺激T细胞的肽。
现有技术
在我们的国际申请PCT/NO92/00032(公开号为WO92/14756)中，我们描述了与其原癌基因或肿瘤抑制基因蛋白相比具有一个点突变或易位的合成肽和癌基因蛋白片段。这些肽相应于、完全覆盖由癌细胞或其它抗原呈递细胞呈递的加工的癌基因蛋白片段或肿瘤抑制基因片段，或为其片段，并在每个个体中由至少一个等位以HLA-肽复合物呈递。这些肽还显示通过加工和在HLA分子中呈递可诱导对细胞产生的实际癌基因蛋白特异的T细胞应答。具体地，我们描述了来自p21 ras蛋白的在特定氨基酸位点即位点12、13和61具有点突变的肽。这些肽已显示对调节体外癌细胞生长有效。而且显示通过在接种疫苗或癌治疗策略中施用这些蛋白可引发抗含有突变的p21 ras癌基因蛋白的癌细胞的CD4+T细胞免疫。之后我们显示通过上述施用这些肽还引起抗含有突变的p21 ras癌基因蛋白的癌细胞的CD8+T细胞免疫。
然而，上述肽只对某些癌有用，即那些涉及在原癌或肿瘤抑制基因中具有点突变或易位的癌基因的癌。因此非常需要有效抗更普遍癌症的抗癌治疗或疫苗。
通常，对于肿瘤细胞中发现的遗传改变，不同肿瘤是非常不同的。这暗示癌疫苗潜在的治疗效果和预防作用将随该疫苗能引发T细胞免疫抵抗的靶数目的增加而增加。多靶疫苗还可通过治疗原发肿瘤的逃避变体来降低形成新肿瘤的危险。
本发明所解决问题的定义
一直存在基于抗原多肽的新抗癌剂的需要，该抗原多肽可引起抗携带癌有关的突变基因的肿瘤和癌细胞的特异T细胞应答和毒性。本发明将极为有助于提供在与癌症的斗争和防护中有用的新肽，作为多靶抗癌疫苗的成分。
本发明解决的另一个问题是可对遗传性癌症高危家族或群体中的个体提供保护和治疗。在许多例子中遗传性癌症与对本发明所述对移码突变(即错配修复基因突变)易感的基因相关。目前可以诊断患遗传性癌症的危险，但还没有避免癌症发生的药物学方法。
本发明定义
本发明的一个主要目标是获得可用于刺激T细胞的相应于癌细胞产生的突变蛋白质的肽片段的肽。
本发明的另一个主要目标是开发基于T细胞免疫的癌症治疗方法，该T细胞免疫可通过用根据本发明的肽在体内或体外刺激其T细胞来在患者体内诱导。
本发明的第三个主要目标是开发防止癌症发生或根除癌症的疫苗，该疫苗完全或部分基于本发明肽相应的肽，其可用于产生和激活产生抗含有突变基因的细胞的细胞毒性T细胞免疫的T细胞。
本发明的第四个主要目标是设计特别适于需要这种治疗或预防的人类个体的抗癌治疗或预防，其包括施用至少一种本发明的肽。
本发明的这些目标和其它目标通过所附权利要求来实现。
因为移码突变导致过早的终止密码子从而导致蛋白质的大部分缺失，所以通常认为具有移码突变的蛋白质没有免疫原性，所以没有人将其考虑为免疫治疗的目标。因此，现在令人惊奇的发现，肿瘤相关基因移码突变产生的整个一群新肽可用于引发对含有该移码突变基因的癌细胞的T细胞应答。
含有至少5个残基的单核苷酸重复序列(例如8个脱氧腺苷碱基(AAAAAAAA))或至少4个二核苷酸碱基单位(例如两个脱氧腺苷-脱氧胞苷单位(ACAC))的二核苷酸碱基重复序列的基因对移码突变易感。分别通过在重复序列中插入一或两个单核苷酸碱基残基或一或两个二核苷酸碱基单位，或分别通过在重复序列中缺失一或两个单核苷酸碱基残基或一或两个二核苷酸碱基单位来产生移码突变。从突变点开始，含有移码突变的基因将编码一个与正常基因产物相比具有完全不同氨基酸序列的新蛋白。在羧基端具有新突变氨基酸序列的该突变蛋白对于带有修饰基因的所有细胞将是特异的。
在本说明书的其余部分和权利要求中移码突变肽的名称将包括这些蛋白和其肽片段。
根据本发明已发现这种在癌细胞中由基因的移码突变产生的新蛋白质可产生在HLA分子中可被T细胞识别的肿瘤排斥抗原。
根据本发明还发现一组与癌细胞中由基因移码突变产生的突变蛋白质的片段相应的肽，该肽可用于产生T细胞。因此所述肽还可用于引起抗含有上述移码突变基因的癌细胞的T细胞激活。
这些肽至少8个氨基酸长，并且其全长或被抗原呈递细胞加工后相应于人癌症患者的癌细胞产生的突变基因蛋白或其片段。
根据本发明的肽的特征在于：
a)至少8个氨基酸长，并是癌细胞基因移码突变产生的突变蛋白的片段；和
b)含有所述基因编码的蛋白质序列的突变部分的至少一个氨基酸；和
c)含有突变序列氨基端之前的蛋白质序列正常部分的羧基端0-10个氨基酸，并可进一步延伸至该基因移码突变产生的新终止密码子所确定的蛋白质突变部分的羧基端；和
d)以其全长或被抗原呈递细胞加工后的形式诱导T细胞应答。
本发明肽优选含有8-25、9-20、9-16、8-12或20-25个氨基酸。例如它们可包括9、12、13、16或21个氨基酸。
最优选本发明肽长至少9个氨基酸，例如9-18个氨基酸，但由于抗原呈递细胞加工的可能性，更长的肽也非常适于本发明。因此，如果其包含8个或更多氨基酸，整个突变氨基酸序列可用作根据本发明的移码突变肽。
本发明还涉及与基因移码突变有关的癌症易感个体的疫苗接种方法，其包括一或多次施用至少一种本发明肽，其施用量足以诱导对移码突变基因编码的突变蛋白产生T细胞免疫。
本发明还涉及治疗基因移码突变有关癌症的患者的方法，其包括一或多次施用至少一种本发明肽，其施用量足以诱导对癌细胞基因移码突变形成的突变蛋白产生T细胞免疫。
进一步，根据本发明已发现鉴定与基因移码突变形成的蛋白质片段相应的新肽的方法。该方法可用如下步骤来表征：
1)鉴定癌细胞中对移码突变易感的基因，该基因具有至少5个残基的单核苷酸碱基重复序列，或至少4个二核苷酸碱基单位的二核苷酸碱基重复序列；和
2)分别从该重复序列中除去一个核苷酸碱基残基或一个二核苷酸碱基单位，并鉴定包含一个新终止密码子的改变的基因序列编码的蛋白质氨基酸序列；和/或
3)分别从该重复序列中除去两个核苷酸碱基残基或两个二核苷酸碱基单位，并鉴定包含一个新终止密码子的改变的基因序列编码的蛋白质氨基酸序列；和/或
4)分别在该重复序列中插入一个核苷酸碱基残基或一个二核苷酸碱基单位，并鉴定包含一个新终止密码子的改变的基因序列编码的蛋白质氨基酸序列；和/或
5)分别在该重复序列中插入两个核苷酸碱基残基或两个二核苷酸碱基单位，并鉴定包含一个新终止密码子的改变的基因序列编码的蛋白质氨基酸序列。
为了确定由此鉴定的肽是否在本发明用于治疗或预防癌症的组合物和方法中有用，应进一步进行如下步骤：
6)确定该新肽全长或更短片段是否能刺激T细胞。可选择性地进一步加入如下步骤：
7)鉴定含有不同主要HLA I型和/或II型分子的重叠表位的肽。
本发明详细描述
在本说明书和权利要求中，氨基酸用本领域已知的单字母简写表示。
将通过两个不同实施方案清楚地举例说明本发明的肽，其中癌症发生基于特定基因即BAX基因和TGF β RII基因的移码突变：
1)BAX基因
已经证明BAX基因通过促进细胞凋亡参与调节细胞的存活或死亡。人BAX基因在第3个外显子含有8个脱氧鸟苷碱基(G8)重复序列，其跨越密码子38至41(AT
G GGG GGG GAG)。
结肠癌细胞和前列腺癌细胞均在该G8重复中观察到移码突变，即G7(AT
G GGG GGG AGG)和G9(AT
G GGG GGG GGA)重复。在检查的病例中这种发生概率超过50％(Rampino，N.等，“微卫星突变基因表型结肠癌中BAX基因的体细胞移码突变”，科学(Science)(Washington DC)，275：967-969，1997)。该修饰BAX基因的产物不能促进细胞凋亡，因此使进一步的肿瘤发展成为可能。而且该修饰基因产物仅在癌细胞中发现，因此是特异免疫治疗的靶标。
根据本发明，相应于BAX基因移码突变引起的转化BAX蛋白产物的肽可用作能引发抗癌症患者癌细胞的免疫系统(T细胞)细胞免疫的抗癌治疗剂或疫苗，其中所述癌症与改变的BAX基因相关。
BAX基因移码突变产生突变肽序列，与正常BAX蛋白相比，改变序列的第一个氨基酸在第41位(表1，seq.id.no.1-4)。
表1
氨基酸位置 41 51 61 71
正常bax肽； EAPELALDPV PQDASTKKLS ECLKRIGDEL
DS...
seq.id.no.1(bax-1G)； RHPSWPWTRC LRMRPPRS
seq.id.no.4(bax+2G)； GRHPSWPWTR CLRMRPPRS
seq.id.no.2(bax-2G)； GTRAGPGPGA SGCVHQEAER VSQAHRGRTG Q
seq.id.no.3(bax+1G)； GGTRAGPGPG ASGCVHQEAE RVSQAHRGRT GQ
表2显示本发明的一组肽：
表2
seq.id.no.5： IQDRAGRMGGRHPSWPWTRCLRMRPPRS
seq.id.no.6： IQDRAGRMGGGRHPSWPWT
seq.id.no.7： IQDRAGRMGGGGTRAGPGPGASGCVHQEAERVSQAHRGRTGQ
seq.id.no.8： IQDRAGRMGGGTRAGPGPG
表3中所列的肽用于体外产生识别突变BAX肽的T细胞。
表3.
seq id no 1： RHPSWPWTRCLRMRPPRS
seq id no 9： IQDRAGRMGGRHPSWPWTRCLR
seq id no 6： IQDRAGRMGGGRHPSWPWT
seq id no 10： ASGCVHQEAERVSQAHRGRTGQ
seq id no 11： GGTRAGPGPGASGCVHQEAERV
seq id no 12： IQDRAGRMGGGGTRAGPGPGAS
seq id no 8： IQDRAGRMGGGTRAGPGPG
根据本发明的该实施例，最优选肽列在表4中：
表4
seq id no 1： RHPSWPWTRCLRMRPPRS
seq id no 2： GTRAGPGPGASGCVHQEAERVSQAHRGRTGQ
seq id no 3： GGTRAGPGPGASGCVHQEAERVSQAHRGRTGQ
seq id no 4： GRHPSWPWTRCLRMRPPRS
seq.id.no.5： IQDRAGRMGGRHPSWPWTRCLRMRPPRS
seq.id.no.6： IQDRAGRMGGGRHPSWPWT
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seq id no 8： IQDRAGRMGGGTRAGPGPG
seq id no 9： IQDRAGRMGGRHPSWPWTRCLR
seq id no 10： ASGCVHQEAERVSQAHRGRTGQ
seq id no 11： GGTRAGPGPGASGCVHQEAERV
seq id no 12： IQDRAGRMGGGGTRAGPGPGAS
2)TGF β RII
已经证明TGF β RII基团参与细胞生长的调节，TGF β RII是下调细胞生长的TGF β的受体。人TGF β RII编码基因包含从第709碱基到718碱基的10个脱氧腺苷碱基(A10)的重复序列(G
AA AAA AAA AAG CCT)。在大约80％的结肠癌和前列腺癌受检病例中观察到在该A10中存在移码突变，既有A9(G
AA AAA AAA AGC CT)又有A11(G
AA AAA AAA AAA GCC)重复(Yamamoto，H.“遗传性非多发性息肉结肠直肠癌中DNA错配修复和原凋亡基因的体细胞移码突变(Somatic frameshift mutations inDNA mismatch repair and proapoptosis genes in hereditarynonpolyposis colorectal cancer.)”，癌症研究58，997-1003，3月1日，1998)。修饰的TGF β RII基因产物不能结合TGF β而且细胞生长下调信号消失，因此使进一步的肿瘤发展成为可能。而且，修饰基因产物只在癌细胞中发现，因此是免疫治疗的靶标。
因此，TGF β RII基因移码突变引起的转化TGF β RII蛋白产物相应的肽可用作能引发抗癌症患者癌细胞的免疫系统(T细胞)细胞免疫的抗癌治疗剂或疫苗，其中所述癌症与改变的TGF β RII基因相关。
TGF β RII基因移码突变产生突变肽序列，与正常TGF β RII蛋白相比，改变序列的第一个氨基酸位于第133位(一或两个碱基缺失)或第134位(1或2个碱基插入)(表5，seq.id.no.13和21)。
表5
氨基酸位置 133
正常TGF β RII； K PGETFFMCSC SSDECNDNII FSEEYNTSNP
DLLL
seq id no 13(-1A)； S LVRLSSCVPV ALMSAMTTSS SQKNITPAIL TCC
seq id no 13(+2A)； SLVRLSSCVP VALMSAMTTS SSQKNITPAI
LTCC
TGFbRII+1A)； AW
TGFbRII-2A)； AW
表6显示本发明的一组肽：
表6
seq id no 14：SPKCIMKEKKSLVRLSSCVPVALMSAMTTSSSQKNITPAILTCC
seq id no 15：PKCIMKEKKKSLVRLSSCV
seq id no 19：SPKCIMKEKKAW
seq id no 20：PKCIMKEKKKAW
表7中所列的肽用于体外产生识别突变TGF β RII肽的T细胞。
表7
seq id no 15： PKCIMKEKKKSLVRLSSCV
seq id no 16： ALMSAMTTSSSQKNITPAILTCC
seq id no 17： SLVRLSSCVPVALMSAMTTSSSQ
seq id no 18： SPKCIMKEKKSLVRLSSCVPVA
seq id no 19： SPKCIMKEKKAW
seq id no 20： PKCIMKEKKKAW
seq id no 21： AMTTSSSQKNITPAILTCC
seq id no 428： SLVRLSSCV
本发明该实施方案最优选的肽是：
表8
seq id no 13：SLVRLSSCVPVALMSAMTTSSSQKNITPAILTCC
seq id no 14：SPKCIMKEKKSLVRLSSCVPVALMSAMTTSSSQKNITPAILTCC
seq id no 15：PKCIMKEKKKSLVRLSSCV
seq id no 16：ALMSAMTTSSSQKNITPAILTCC
seq id no 17：SLVRLSSCVPVALMSAMTTSSSQ
seq id no 18：SPKCIMKEKKSLVRLSSCVPVA
seq id no 19：SPKCIMKEKKAW
seq id no 20：PKCIMKEKKKAW
seq id no 21：AMTTSSSQKNITPAILTCC
seq id no 428：SLVRLSSCV
本发明的其它肽可以是上述表1至8所列举的肽的片段。这些肽最优选长9-16个氨基酸，并包括蛋白突变部分的至少一个氨基酸。
本说明书和权利要求中所用术语片段是指一个更长的肽或蛋白的较短部分。
含有核苷酸碱基重复序列因而对移码突变敏感，并由此成为根据本发明潜在候选肽(表9中的序列号在括弧内给出)的其它癌症相关基因见如下：
人TGF-β-2(hTGF β 2)基因(seq id nos 22-29)
结肠直肠癌缺失(DCC)基因(seq.id.nos.30-34)
人乳腺和卵巢癌易感性(BRCA1)基因(seq.id.nos.378-387)
人乳腺癌易感性(BRCA2)基因(seq.id.nos.35-94)
人蛋白酪氨酸磷酸酶(hPTP)基因(seq.id.nos.95-102)
人DNA拓扑异构酶II(top 2)基因(seq.id.nos.103-108)
人激酶(TTK)基因(seq.id.nos.109-120)
人转录抑制(CTCF)基因(seq.id.nos.121-127)
人FADD同源性ICE/CED-3样蛋白酶基因(seq.id.nos.128-133)
推测的人错配修复/结合蛋白(hMSH3)基因(seq.id.nos.134-147)
人成视网膜细胞瘤结合蛋白I同型I(hRBPI)基因(seq.id.nos.148-156)
人FMR1(hFMR1)基因(seq.id.nos.157-161)
人TINUR基因(seq.id.nos.162-169)
b-raf癌基因(seq.id.nos.170-175)
人神经纤维蛋白(NF1)基因(seq.id.nos.176-181)
人种系n-myc基因(seq.id.nos.182-188)
人n-myc基因(seq.id.nos.189-194)
人ras抑制基因(seq.id.nos.195-199)
人hMSH6基因(seq.id.nos.200-203 and 293-297)
人鼻咽癌EBV BNLF-1基因(seq.id.nos.204-210)
人细胞周期调节蛋白(E1A-结合蛋白)p300基因(seq.id.nos.211-218)
人B细胞淋巴瘤3编码的蛋白(bc1-3)基因(seq.id.nos.219-226)
人转化生长因子β诱导的基因产物(BIGH3)(seq.id.nos.227-232)
人转录因子ETV1基因(seq.id.nos.233-239)
人胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP4)基因(seq.id.nos.240-246)
人MUC1基因(seq.id.nos.247-266)
人蛋白酪氨酸激酶(JAK1)基因(seq.id.nos.267-271)
人蛋白酪氨酸激酶(JAK3)基因(seq.id.nos.272-279)
人Flt4基因(编码跨膜酪氨酸激酶)(seq.id.nos.280-284)
人p53相关基因(seq.id.nos.285-292)
人can(hCAN)基因(seq.id.nos.298-300)
人DBL(hDBL)原癌基因/人MCF2PO(hMCF2PO)基因(seq.id.nos.301-306)
人dek(hDEK)基因(seq.id.nos.307-309)
人成视网膜细胞瘤相关蛋白(p107)基因(seq.id.nos.310-313)
人G蛋白偶联受体(hGPR1)基因(seq.id.nos.314-319)
推测的人RNA结合蛋白(hRBP56)基因(seq.id.nos.320-325)
人转录因子(hITF-2)基因(seq.id.nos.326-327)
人恶性黑素瘤转移抑制(hKiSS-1)基因(seq.id.nos.328-334)
人端粒酶相关蛋白TP-I(hTP-1)基因(seq.id.nos.335-348)
人FDF-5(hFDF-5)基因(seq.id.nos.349-356)
人转移相关mtal(hMTA1)基因(seq.id.nos.357-362)
人转录因子TFIIB 90kDa亚基(hTFIIB90)基因(seq id nos 363-369)
人肿瘤抑制(hLUCA-1)基因(seq id nos 370-377)
人Wilm肿瘤(WIT-1)相关蛋白(seq id nos 388-393)
人半胱氨酸蛋白酶(ICErel-III)基因(seq id nos 394-398和459)
人Fas配体(FasL)基因(seq id nos 399-403)
人BRCA1相关RING域蛋白(BARD1)基因(seq id nos 404-417)
人mcf.2(hMCF.2)基因(seq id nos 418-422)
人Fas抗原(fas)基因(seq id nos 423-427)
人DPC4基因(seq id nos 429-437).
根据本发明，这些基因移码突变造成的突变肽列举在表9中。
表9
seq id no 22； TVGRPHISC
seq id no 23； KTVGRPHISC
seq id no 24； KQWEDPTSPANVIALLQT
seq id no 25； QWEDPTSPANVIALLQT
seq id no 26； QKTIKSTRKKTVGRPHISC
seq id no 27； QKTIKSTRKKKTVGRPHISC
seq id no 28； QKTIKSTRKKKQWEDPTSPANVIALLQT
seq id no 29； QKTIKSTRKKQWEDPTSPANVIALLQT
seq id no 30； AADLQQQFVHFLDCWDVSSIPFTLHLPQAQDITT
seq id no 31； GKDAKEKSS
seq id no 32； GKDAKEKKSS
seq id no 33； GKDAKEKKAADLQQQFVHFLDCWDVSSIPFTLHLPQAQDITT
seq id no 34； GKDAKEKAADLQQQFVHFLDCWDVSSIPFTLHLPQAQDITT
seq id no 35； FSMKQTLMNVKNLKTK
seq id no 36； KFSMKQTLMNVKNLKTK
seq id no 37； VRTSKTRKKFSMKQTLMNVKNLKTK
seq id no 38； VRTSKTRKKKFSMKQTLMNVKNLKTK
seq id no 39； VRTSKTRKKNFP
seq id no 40； VRTSKTRKNFP
seq id no 41； IKKKLLQFQK
seq id no 42； KIKKKLLQFQK
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seq id no 44； SRRNYFNFKNNCQSRL
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seq id no 47； TNLRVIQKKSRRNYFNFKNNCQSRL
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seq id no 51； NIDKIPEKKIMIT
seq id no 52； IINAN
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seq id no 55； NDKTVSEKKIINAN
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seq id no 71； LRIVSYSKKKKKIQLY
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-SCNFKI
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-SCNFKI
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seq id no 87； DETFYKGKNTERPKIRTN
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seq id no 92； NIQLAATKKKLSINNYRFQMKFYFRFTSHGSPFTSANF
seq id no 93； NIQLAATKKNSVSTTTGFR
seq id no 94； NIQLAATKNSVSTTTGFR
seq id no 95； MEHVAPGRMSASPQSPTQ
seq id no 96； KMEHVAPGRMSASPQSPTQ
seq id no 97； KWSTWLQAECQHLHSPQRSDKPQQAGLDQQHHCFALDS-
-SPGPRPVFLQLLGLMGQGRHD
seq id no 98； WSTWLQAECQHLHSPQRSDKPQQAGLDQQHHCFALDS-
-SPGPRPVFLQLLGLMGQGRHD
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-QHHCFALDSSPGPRPVFLQLLGLMGQGRHD
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-QHHCFALDSSPGPRPVFLQLLGLMGQGRHD
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seq id no 107； KGGKAKGKKNTNG
seq id no 108； KGGKAKGKNTNG
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seq id no 110； KVNNFFKKL
seq id no 111； LSQGNVKKVNNFFKKL
seq id no 112； LSQGNVKKKVNNFFKKL
seq id no 113； GEKNDLQLFVMSDRRYKIYWTVILLNPCGNLHLKTTSL
seq id no 114； KGEKNDLQLFVMSDRRYKIYWTVILLNPCGNLHLKTTSL
seq id no 115； KGKKMICSYS
seq id no 116； GKKMICSYS
seq id no 117； SSKTFEKKGEKNDLQLFVMSDRRYKIYWTVILLNPCGN-
-LHLKTTSL
seq id no 118； SSKTFEKKKGEKNDLQLFVMSDRRYKIYWTVILLNPCGN-
-LHLKTTSL
seq id no 119； SSKTFEKKKGKKMICSYS
seq id no 120； SSKTFEKKGKKMICSYS
seq id no 121； QRKPKRANCVIQRRAKM
seq id no 122； KQRKPKRANCVIQRRAKM
seq id no 123； NKENQKEQTALLYRGGQRCRCVCLRF
seq id no 123； NKENQKEQTALLYRGGQRCRCVCLRF
seq id no 124； PDYQPPAKKQRKPKRANCVIQRRAKM
seq id no 125； PDYQPPAKKKQRKPKRANCVIQRRAKM
seq id no 126； PDYQPPAKKNKENQKEQTALLYRGGQRCRCVCLRF
seq id no 127； PDYQPPAKNKENQKEQTALLYRGGQRCRCVCLRF
seq id no 128； NLSSLLI
seq id no 129； TCLPF
seq id no 130； QPTFTLRKNLSSLLI
seq id no 131； QPTFTLRKKNLSSLLI
seq id no 132； QPTFTLRKKTCLPF
seq id no 133； QPTFTLRKTCLPF
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seq id no 135； GQHFYWHCGSAACHRRGCV
seq id no 136； KENVRDKKRATFLLSLWECSLPQARLCLIVSRTGLLVQS
seq id no 137； KENVRDKKKRATFLLSLWECSLPQARLCLIVSRTGLLVQS
seq id no 138； KENVRDKKKGQHFYWHCGSAACHRRGCV
seq id no 139； KENVRDKKGQHFYWHCGSAACHRRGCV
seq id no 140； ITHTRWGITTWDSWSVRMKANWIQAQQNKSLILSPSFTK
seq id no 141； KITHTRWGITTWDSWSVRMKANWIQAQQNKSLILSPSFTK
seq id no 142； KLLTPGGELPHGILGQ
seq id no 143； LLTPGGELPHGILGQ
seq id no 144； PPVCELEKITHTRWGITTWDSWSVRMKANWIQAQQNKS-
-LILSPSFTK
seq id no 145； PPVCELEKKITHTRWGITTWDSWSVRMKANWIQAQQNKS-
-LILSPSFTK
seq id no 146； PPVCELEKKLLTPGGELPHGILGQ
seq id no 147； PPVCELEKLLTPGGELPHGILGQ
seq id no 148； SLKDELEKMKI
seq id no 149； SLKDELEKKMKI
seq id no 150； LGQSSPEKKNKN
seq id no 151； LGQSSPEKNKN
seq id no 152； RLRRINGRGSQIRSRNAFNRSEE
seq id no 153； EPKVKEEKKT
seq id no 154； EPKVKEEKKKT
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seq id no 158； GPNAPEEKNH
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seq id no 161； GPNAPEEKTFRYKGKQHPFFST
seq id no 162； MQNTCV
seq id no 163； KMQNTCV
seq id no 164； KCKIRVFSK
seq id no 165； CKIRVFSK
seq id no 166； FFKRTVQKMQNTCV
seq id no 167； FFKRTVQKKMQNTCV
seq id no 168； FFKRTVQKKCKIRVFSK
seq id no 169； FFKRTVQKCKIRVFSK
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seq id no 171； CLITWLTN
seq id no 172； GSTTGLSATPLPHYLAH
seq id no 173； GSTTGLSATPPLPHYLAH
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seq id no 177； DLPTSPDQTRSGPVHVSVEP
seq id no 178； DSAAGCSGTPRFADKPRPN
seq id no 179； DSAAGCSGTPPRFADKPRPN
seq id no 180； DSAAGCSGTPPDLPTSPDQTRSGPVHVSVEP
seq id no 181； DSAAGCSGTPDLPTSPDQTRSGPVHVSVEP
seq id no 182； AHPETPAQNRLRIPCSRREVRSRACKPPGAQGSDER-
-RGKASPGRDCDVRTGRP
seq id no 183； PAHPETPAQNRLRIPCSRREVRSRACKPPGAQGSDER-
-RGKASPGRDCDVRTGRP
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seq id no 185； VAIRGHPRPPAHPETPAQNRLRIPCSRREVRSRACKP-
-PGAQGSDERRGKASPGRDCDVRTGRP
seq id no 186； VAIRGHPRPPPAHPETPAQNRLRIPCSRREVRSRACKP-
-PGAQGSDERRGKASPGRDCDVRTGRP
seq id no 187； VAIRGHPRPPRPTRRHPRRIASGSPAVGGR
seq id no 188； VAIRGHPRPRPTRRHPRRIASGSPAVGGR
seq id no 189； RGRTSGRSLSCCRRPRCRPAVASRSTAPSPRAGSR-
-RCCLRTSCGAARPRRTRSACGDWVASPPTRSS-
-SRTACGAASPPARSWSAP
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-STAPSPRAGSRRCCLRTSCGAARPRRTRSACGD-
-WVASPPTRSSSRTACGAASPPARSWSAP
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-STAPSPRAGSRRCCLRTSCGAARPRRTRSACGDW-
-VASPPTRSSSRTACGAASPPARSWSAP
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seq id no 197； LSQSSELDPPPSSR
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seq id no 201； VILLPEDTPPPS
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seq id no 210； APRPPLGPPLLFHRPCSPSPALGATVLAVYRYE
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-RAFCQPGPEFNAFSAC
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-RAFCQPGPEFNAFSAC
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-WTGSCPGQPHGTRAFCQPGPEFNAFSAC
seq id no 218； PSPRPQSQPPLQSFPKDAASAFSTPRFPTDKFPTS-
-WTGSCPGQPHGTRAFCQPGPEFNAFSAC
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-HDVPHGTPPFC
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-DVPHGTPPFC
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-EPAYTPIPHDVPHGTPPFC
seq id no 226； DLPAVPGPPRPGPAGGALLPRSLTAFVPHSGHGLPVSSG-
-EPAYTPIPHDVPHGTPPFC
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seq id no 228； NGDCHGCPEGRQSL
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-PYQIAATPWTTDFAASFFLNPVTPFLLCRRCQGKDV-
-LCTNARCLSQTSPSHHKALSRTTTQCMNT-
-TPWLAVRPAKAFPLL
seq id no 234； PHHPARQCPHCIMHLQTQLIHRNLTGPSQLTSLHRS-
-PYQIAATPWTTDFAASFFLNPVTPFLLCRRCQGK-
-DVLCTNARCLSQTSPSHHKALSRTTTQCMNTTP-
-WLAVRPAKAFPLL
seq id no 235； HTIQHASVPTASCISKLNSYTEN
seq id no 236； PQVGMRPSNPPHHPARQCPHCIMHLQTQLIHRNLT-
-GPSQLTSLHRSPYQIAATPWTTDFAASFFLNPVTPFL-
-LCRRCQGKDVLCTNARCLSQTSPSHHKALSRTTTQC-
-MNTTPWLAVRPAKAFPLL
seq id no 237； PQVGMRPSNP PPHHPARQCPHCIMHLQTQLIHRNLTGPS-
-QLTSLHRSPYQIAATPWTTDFAASFFLNPVTPFLLCRRC-
-QGKDVLCTNARCLSQTSPSHHKALSRTTTQCMNTTPWLA-
-VRPAKAFPLL
seq id no 238； PQVGMRPSNPPHTIQHASVPTASCISKLNSYTEN
seq id no 239； PQVGMRPSNPHTIQHASVPTASCISKLNSYTEN
seq id no 240； WAARSWCERRAAAVAPLAPWAWGCPAGCTPPVAARAC-
-AATRPEGWRSPCTH
seq id no 241； PWAARSWCERRAAAVAPLAPWAWGCPAGCTPPVAA-
-RACAATRPEGWRSPCTH
seq id no 242； RGLRGAGARGGLRLLRHLRPGLGDALRGVHPPLR-
-LGPALLPAPRGGEAPAHTDARARRVHGAGGDRGHPGPAAL
seq id no 243； EEKLARCRPPWAARSWCERRAAAVAPLAPWAWGCPAGC-
-TPPVAARACAATRPEGWRSPCTH
seq id no 244； EEKLARCRPPPWAARSWCERRAAAVAPLAPWAWGCPA-
-GCTPPVAARACAATRPEGWRSPCTH
seq id no 245； EEKLARCRPPRGLRGAGARGGLRLLRHLRPGLGDA-
-LRGVHPPLRLGPALLPAPRGGEAPAHTDARARRVHGAGG-
-DRGHPGPAAL
seq id no 246； EEKLARCRPRGLRGAGARGGLRLLRHLRPGLGDALRG-
-VHPPLRLGPALLPAPRGGEAPAHTDARARRVHGAGG-
-DRGHPGPAAL
seq id no 247； QPPVSPRPRRPGRPRAPPPPQPMVSPRRRTTGPPW-
-RPPPLQSTMSPPPQALHQAQLLLWCTTAPLPGLPQPQ-
-PARALHSQFPATTLILLPPLPAIAPRLMPVALTIARYL-
-LSPPPITALLPSCLLGSLSFSCLFTFQTSSLIPLW-
-KIPAPTTTKSCRETFLKW
seq id no 248； SPGCHLGPGDQAAPGLHRPPSPWCHLGAGQQARLGVHR-
-PSSPQCHLGLRLCIRLSFYSGAQRHLCQGYHNPSQQEHS-
-ILNSQPPL
seq id no 249； KPAPGSTAPQPPVSPRPRRPGRPRAPPPPQPMVSPRR-
-RTTGPPWRPPPLQSTMSPPPQALHQAQLLLWCTTAP-
-LPGLPQPQPARALHSQFPATTLILLPPLPAIAPRLMPVA-
-LTIARYLLSPPPITALLPSCLLGSLSFSCLFTFQTS-
-SLIPLWKIPAPTTTKSCRETFLKW
seq id no 250； KPAPGSTAPPQPPVSPRPRRPGRPRAPPPPQPMVSPR-
-RRTTGPPWRPPPLQSTMSPPPQALHQAQLLLWCT-
-TAPLPGLPQPQPARALHSQFPATTLILLPPLPAIAP-
-RLMPVALTIARYLLSPPPITALLPSCLLGSLSFSCLF-
-TFQTSSLIPLWKIPAPTTTKSCRETFLKW
seq id no 251； KPAPGSTAPPSPGCHLGPGDQAAPGLHRPPSPWCHL-
-GAGQQARLGVHRPSSPQCHLGLRLCIRLSFYSGA-
-QRHLCQGYHNPSQQEHSILNSQPPL
seq id no 252； KPAPGSTAPSPGCHLGPGDQAAPGLHRPPSPWCHL-
-GAGQQARLGVHRPSSPQCHLGLRLCIRLSFYSGAQ-
-RHLCQGYHNPSQQEHSILNSQPPL
seq id no 253； QPMVSPRRRTTGPPWRPPPLQSTMSPPPQALHQAQL-
-LLWCTTAPLPGLPQPQPARALHSQFPATTLILLPPLP-
-AIAPRLMPVALTIARYLLSPPPITALLPSCLLGSL-
-SFSCLFTFQTSSLIPLWKIPAPTTTKSCRETFLKW
seq id no 254； SPWCHLGAGQQARLGVHRPSSPQCHLGLRLCIRLSF-
-YSGAQRHLCQGYHNPSQQEHSILNSQPPL
seq id no 255； RPPPGSTAPQPMVSPRRR
seq id no 256； RPPPGSTAPPQPMVSPRRR
seq id no 257； RPPPGSTAPPSPWCHLGA
seq id no 258； RPPPGSTAPSPWCHLGA
seq id no 259； RPRAPPPPSPWCHL
seq id no 260； RPRAPPPPPSPWC
seq id no 261； RPRAPPPPAHGVTSAP
seq id no 262； RPRAPPPPPAHGV
seq id no 263； APGLHRPPQPMVSP
seq id no 264； AAPGLHRPQPMVSPR
seq id no 265； PGLHRPPPAHGVT
seq id no 266； APGLHRPPAHGVTS
seq id no 267； VDRPQHTEWLSWSNLYRIRHQ
seq id no 268； HYLCTDVAPR
seq id no 269； HYLCTDVAPPR
seq id no 270； HYLCTDVAPPVDRPQHTEWLSWSNLYRIRHQ
seq id no 271； HYLCTDVAPVDRPQHTEWLSWSNLYRIRHQ
seq id no 272； SAYLSPLGTTWLRTCACRLPRPAASCLCTTPSLLW-
-PRRTCPAGSPRATSSPWRMPAPKSCCTTGLAFTS-
-PIGLGWRSATASGYARIWPVLSLTCQSWSTSLPSTAVTW
seq id no 273； PSAYLSPLGTTWLRTCACRLPRPAASCLCTTPSLLWP-
-RRTCPAGSPRATSSPWRMPAPKSCCTTGLAFTSP-
-IGLGWRSATASGYARIWPVLSLTCQSWSTSLPSTAVTW
seq id no 274； PAPIFLLWGPLG
seq id no 275； APIFLLWGPLG
seq id no 276； LPARAPGPPSAYLSPLGTTWLRTCACRLPRPAASCL-
-CTTPSLLWPRRTCPAGSPRATSSPWRMPAPKSCC-
-TTGLAFTSPIGLGWRSATASGYARIWPVLSLT-
-CQSWSTSLPSTAVTW
seq id no 277； LPARAPGPPPSAYLSPLGTTWLRTCACRLPRPAAS-
-CLCTTPSLLWPRRTCPAGSPRATSSPWRMPAPKSCC-
-TTGLAFTSPIGLGWRSATASGYARIWPVLSLTC-
-QSWSTSLPSTAVTW
seq id no 278； LPARAPGPPPAPIFLLWGPLG
seq id no 279； LPARAPGPPAPIFLLWGPLG
seq id no 280； DLEHHGGVTRHRHR
seq id no 281； LVSDYSMTPRP
seq id no 282； LVSDYSMTPPRP
seq id no 283； LVSDYSMTPPDLEHHGGVTRHRHR
seq id no 284； LVSDYSMTPDLEHHGGVTRHRHR
seq id no 285； FHHIATDVGPFVRIGFLKIKGKIKGKSLRKPNW-
-KTQHKLKRALMFLIVKKL
seq id no 286； PFHHIATDVGPFVRIGFLKIKGKIKGKSLRKPNWK-
-TQHKLKRALMFLIVKKL
seq id no 287； PSITLQQMLAPS
seq id no 298； SITLQQMLAPS
seq id no 289； TSCNEMNPPFHHIATDVGPFVRIGFLKIKGKIKGKSL-
-RKPNWKTQHKLKRALMFLIVKKL
seq id no 290； TSCNEMNPPPFHHIATDVGPFVRIGFLKIKGKIKG-
-KSLRKPNWKTQHKLKRALMFLIVKKL
seq id no 291； TSCNEMNPPSITLQQMLAPS
seq id no 292； TSCNEMNPPPSITLQQMLAPS
seq id no 293； LEMILFLMTF
seq id no 294； HPCITKTFLEMILFLMTF
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特别适于用一种或几种该化合物的组合治疗的癌症的例子是：结肠直肠癌、乳腺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、肝癌(原发性和继发性)、肾癌、黑素瘤、卵巢癌、脑癌、头颈癌、胰脏癌、胃癌、食管癌、前列腺癌、白血病、或淋巴瘤。
以下列出这些突变可导致引起肿瘤的基因产物的例子：
结肠直肠癌的产生被认为是由一系列遗传改变所致。结肠直肠癌缺失(DCC)基因(seq id nos 30-34)、人半胱氨酸蛋白酶(ICErel-III)基因(seq id nos 394-398和459)、推测的人错配修复/结合蛋白(hMSH3)基因(Seq id nos 134-147)、人hMSH6基因(seq id nos 200-203和293-297)、人n-myc基因(seq id nos 189-194)、人TGF β2(hTGFβ2)基因(seq id nos 22-29)、人p53相关基因(seq id nos 285-292)可能参与了结肠直肠癌。
人乳腺癌易感性(BRCA2)(seq id nos 35-94)和人BRCA1-相关RING域蛋白(BARD1)基因(seq id nos 404-417)参与了乳腺癌，而卵巢癌人hMSH6基因(seq id nos 200-203和293-297)可能参与了脑肿瘤。
基因改变在许多类型的腺癌中是很频繁的，以下列出在许多癌中突变的一些基因：
人乳腺癌易感性(BRCA2)基因(seq id nos 35-94)、结肠直肠癌缺失(DCC)基因(seq id nos 30-34)、推测的人错配修复/结合蛋白(hMSH3)基因(seq id nos 134-147)、人hMSH6基因(seq id nos 200-203和293-297)、人N-MYC基因(seq id nos 189-194)、人TGFb2(hTGFb2)基因(seq id nos 22-29)、人p53相关基因(seq id nos 285-292)、人MUC1基因(seq id nos 247-266)、人种系n-myc基因(seq id nos182-188)、人Wilm氏肿瘤(WIT-1)相关蛋白(seq id nos 388-393)、人鼻咽癌EBV BNLF-1基因(seq id nos 204-210)、人转化生长因子β诱导的基因产物(BIGH3，seq id nos 227-232)。
许多突变基因可导致白血病和淋巴瘤的产生：例如人神经纤维蛋白(NF1)基因(seq id nos 176-181)、b-raf癌基因(seg id nos170-175)、人蛋白酪氨酸激酶(JAK1)基因(seq id nos 267-271)、人蛋白酪氨酸激酶(JAK3)基因(seq id nos 273-279)。
参与恶性黑素瘤的基因：人恶性黑素瘤转移抑制(hKiSS-1)基因(seq id nos 328-334)，参与转移的基因：人转移相关mtal(hMTA1)基因(seq id nos 357-362)。
细胞周期控制和信号转导是被严格调控的。这些基因的移码突变可导致不受控制的细胞生长。易感基因的例子是：人蛋白酪氨酸磷酸酶(hPTP)基因(seq id nos 95-102)、人激酶(TTK)基因(seq id nos109-120)、人转录抑制子(CTCF)基因(seq id nos 121-127)、人细胞周期调控蛋白(E1A-结合蛋白)p300基因(seq id nos 211-218)、人转化生长因子β诱导的基因产物(BIGH3)(seq id nos 227-232)、人FLt4基因(编码跨膜酪氨酸激酶)(seq id nos 280-284)、人G蛋白偶联受体(hGPR1)基因(seq id nos 314-319)、人转录因子(hlTF-2)基因(seq id nos 326-327)、人端粒酶相关蛋白TP-1(hTP-1)基因(seq idnos 335-348)、人转录因子TFIIB的90kDa亚基(hTFBIIB90)基因(seq id nos 363-369)、人FADD同源性ICE/CED-3样蛋白酶基因(seqid nos 128-133)。
DNA合成或修复酶的突变也可导致不受控制的细胞生长。例如，人DNA端粒酶II(top2)基因(seq id nos 103-108)和推测的人错配修复/结合蛋白(hMSH3)基因(seq id nos 134-147)和(hMSH6)基因(seg idnos200-203和293-297)。
以下是肿瘤抑制基因：人成视网膜细胞瘤结合蛋白1的同型I(hRBP1)基因(seq id nos 148-156)、人神经纤维蛋白(NF1)基因(seqid nos 176-181)、人p53相关基因(seq id nos 285-292)、人成视网膜细胞瘤相关蛋白(p107)基因(seq id nos 310-313)、人肿瘤抑制(hLUCA-1)基因(seq id nos 370-377)。这些基因的突变可导致癌的产生。
以下是癌基因、原癌基因或推测的癌基因：人种系n-myc基因(seqid nos 182-188)、人n-myc基因(seq id nos 189-194)、人can(hCAN)基因(seq id nos 298-300)、人dek(hDEK)基因(seq id nos 307-309)、b-raf癌基因(seq id nos 170-175)、人DBL(hDBL)原癌基因/人MCF2PO(hMCF2PO)基因(seq id nos 301-306)。这些基因的移码突变可导致癌产生。
生物实验
附图描述
图1：
已证明，用含有突变BAX和突变TGF β RII肽的肽混合物可刺激正常供体的T细胞。图1显示了，6个不同供体的血液样品中的肽混合物依赖性T细胞增殖。结果通过用突变BAX肽(seq id nos 1，9-12)和突变TGF β RII肽(seq id nos 15-21)的混合物刺激每个供体的外周血单核细胞(PBMCs)来获得。混合物中每种肽的浓度是20uM。两星期后以及之后的每周，用10-25uM肽混合物处理的自体PBMC再刺激大培养物。4-5次再刺激后，按标准增殖分析方法测试用单独PBMC(作为对照)或25uM肽处理的PBMC(作为抗原呈递细胞(APC))处理的该大培养物。
图2：
进一步发现，用在大培养物刺激实验中使用的分离肽混合物可产生T细胞克隆。图2显示，通过在U型底96孔微量滴定板中每孔接种5个细胞并使用25uM的突变BAX肽(seq id no 12)处理的自体PBMC作为饲养细胞来克隆来自供体1(图1)的大培养物，可获得T细胞克隆521-2的增殖。在增殖实验中采用自体B-类淋巴母细胞作为APC。
图3
图3显示，可使用突变BAX肽和突变TGF β RII肽刺激乳腺癌患者的T细胞(PBMC)。使用相同癌症患者的树突细胞(DCs)作为APC。通过用突变BAX肽(seq id nos 1，9-12)混合物和突变TGF β RII肽(seqid id nos 15-21)混合物分开处理DC，然后加入自体PBMC和10ng/ml肿瘤坏死因子，获得T细胞的刺激(图3)。用于处理的混合物中每种肽的浓度是25uM。通过白细胞除去法从一直进行粒细胞集落刺激因子(G-CSF)治疗的乳腺癌患者中获得PBMC和DC。在获得DC之前，用标准方法从细胞产物中分离CD34+细胞。
图4
图4显示从胰腺癌患者腹水获得的T细胞识别突变BAX(seq id nos1，9-12)和突变TGF β RII(seq id nos 15，17-21)的不同合成肽并增殖的能力。该T细胞系是在胰腺癌患者腹水中存在的T细胞扩增之后获得的。该T细胞系通过用100U/ml重组白细胞介素2(rlL-2)(Amersham，Aylesbury，UK)培养以体外扩增，然后用于增殖分析测试。
将5×104个照射过(30Gy)的自体PBMC接种在U型底96孔板中(Costar，Cambridge，MA)，并用单个20uM的合成肽处理两小时。每孔加入5×104个T细胞，培养板37℃孵育4天，收获前最后12小时添加18.5×104Bq/mL 3H-胸苷。该培养板在液体闪烁计数仪(PackardTopcount)上计数。数据代表对不同合成肽特异的T细胞增殖，数值是3个重复培养物的平均值。这些结果显示从胰腺癌患者分离的体细胞能应答具有源自突变BAX和TGF β RII的氨基酸序列的一组肽。
图5
图5进一步证明从另一个胰腺癌患者腹水获得的T细胞识别突变BAX(seq id nos 1，9-12)和突变TGF β RII(seq id nos 15，17-21)的不同合成多肽并增殖的能力。该T细胞系是在胰腺癌患者腹水中存在的T细胞扩增之后获得的。该实验按上述相同的方式进行。数据代表对于不同合成肽特异的T细胞增殖，数值是3个重复培养物的平均值。
为了研究后一胰腺癌患者的T细胞应答，克隆应答的T细胞。照射(30Gy)腹膜巨噬细胞，将1×104个细胞和20uM的每一种肽一起接种在U型底96孔板中(Costar)。在显微镜下计数T细胞分裂球丝，并每孔加入5个分裂球丝和100U/ml人重组白介素2(r1L-2)(Amersham，Aylesbury，UK)，总体积200ml。 14天后将T细胞克隆转移至含有1mg/mL植物凝集素(PHA，Wellcome，Dartford，UK)、100U/ml rlL-2和作为饲养层细胞的同种异体照射过的PBMC的24孔培养板(Costar)中，并在7天和14天后筛选肽特异性。
图6
挑选T细胞克隆520.5、520.7和520.8，用于进一步分析和表达细胞表面表型CD3+、CD8+和TcR+。图6显示T细胞克隆520.5、520.7和520.8对用seq id no 10肽处理的肽-处理自体靶细胞的识别和细胞毒性。用3H-胸苷(9.25×104Bq/ml)标记Epstein-barr病毒转化的自体B细胞过夜，洗涤一次并在培养基中含有或不含25mM合成肽(seq id no 10)和1％DMSO的96孔培养板中每孔接种2500个细胞。37℃孵育30分钟后，洗涤培养板，之后加入T细胞。培养板在37℃再孵育4小时，然后收获，之后在液体闪烁计数仪(Packard Topcount)上计数。数据代表在效应细胞/靶细胞比为10/1的情况下3H-胸苷标记的肽处理的靶细胞的特异溶解百分比。数值是三个重复培养的平均值。这些结果显示，来自胰腺癌患者腹水的三种不同T细胞克隆表现出对突变BAX相关肽(seq id no 10)处理的自体EBV靶标的特异细胞毒性。
图7
图7显示获自相同患者的3个不同T细胞克隆的细胞溶解特性。将这些T细胞克隆按如上所述培养和扩增，但它们是用含有来自突变TGF β RII的氨基酸序列的合成肽(seq id no 17肽)产生的。T细胞克隆538.1、538.3和538.4均显示细胞表面表型CD3+、CD8+和TcR+。实验条件见如上所述(图6)。数据代表在效应细胞/靶细胞比为10/1的情况下用seq id no 428肽处理的3H-胸苷标记靶细胞的特异溶解百分比。数值是三个重复培养的平均值。这些结果显示，来自胰腺癌患者腹水的三种不同T细胞克隆表现出对突变TGF β RII相关肽(seqid no 428)处理的自体EBV靶标的特异细胞毒性。
图8：
图8显示从在结肠基部患有腺癌的患者的肿瘤活检获得的两种CD4+T细胞克隆IMT8和IMT9的特异性。免疫组织化学揭示患者有主要由CD4+T细胞造成的大量浸润，其中许多T细胞携带激活标志。在CD4 T细胞浸润区，观察到HLA DR阳性肿瘤细胞岛。从活检组织生长出来的肿瘤浸润淋巴细胞中获得T细胞克隆，之后将其在含有15U/mL重组人IL-2的培养基中培养16小时。通过在含有照射过的肽处理的APC和100U/ml IL-2的Terasaki培养板上有限稀释(1细胞/孔)，克隆这些培养物的T细胞。用TGF β RII移码突变肽(seq id no.15、17和18)混合物(每种肽1ug/ml)在存在3ug/ml纯化人β2微球蛋白和10ng/ml重组人TNFα时37℃处理自体APC细胞3小时。在能扩增的14个克隆中，初步实验显示两个克隆与用于克隆的肽混合物反应。扩增后筛选在标准增殖分析中与单个肽反应的克隆。结果显示IMT8和IMT9均与TGF β RII移码突变肽seg.id.no.17特异反应，而未观察到与被测的其它两个移码突变肽的反应。
该图(图8)描述了传统T细胞增殖分析的结果，其中将克隆T细胞(5×104)与照射过的APC(5×104)在收获前共培养3天，一式3份。为了测定该培养物的增殖能力，在收获前向该培养物加入3H-胸苷(3.7×104Bq/孔)，孵育过夜。数值是三个重复实验的平均每分钟计数(cpm)。
图9：
图9说明用特异结合HLA-DR分子的抗体处理细胞可完全阻断两个T细胞克隆IMT8和IMT9对seq.id.no.17肽的特异反应性，因为阻断后的反应性和不存在该肽时这些克隆与APC的背景反应活性相同。另一方面HLA II型同种型HLA-DQ和HLA-DP的抗体不能阻断这些克隆与肽处理的APC的反应。该实验明确地说明HLA-DR是负责给这两个T细胞克隆呈递该肽的分子。抗体阻断实验中采用同源EBV转化细胞系9601(IHWS9命名法)作为APC。该APC用15ug/ml浓度的肽在37℃处理1小时，然后加入10ug/ml的阻断抗体L243(pan-DR抗体)、SPVL3(pan-DQ抗体)和B7.21(pan-DP抗体)。未处理的APC和在无阻断抗体存在时肽处理的APC分别充当阴性和阳性对照。结果表示如同图8。
图10
患者的IMT是HLA类型的，并证明是HLA：A1，2；B7，8；DR3，14；DQ1，2。为确定哪一种HLA-DR分子负责seg.id.no.17肽的呈递，获得一组HLA加工产生的同源BCL细胞系，并用seg.id.no.17肽处理。图10描述了HLA-DR14(DRA*0102，DRB*1401)鉴定为负责将seq.id.no.17肽呈递给T细胞克隆IMT8和IMT9的HLA-DR分子。当用自体EBV转化细胞系(Auto APC)以及细胞系9054(EK)和9061(31227ABO)呈递肽时，观察到特异的增殖应答，其中9054和9061细胞系在细胞表面表达仅有的DR分子DR14。同源细胞系给出更高的应答，反映了由于该DR分子编码基因双倍剂量的作用引起了相关II型/肽复合物的更高水平表达。当用表达HLA-DR3(9018，L0081785)的细胞系呈递该肽时没有获得应答，HLA-DR3代表患者APC表达的其它DR分子，用不相关的HLA-DR分子也无应答。该实验按图9所述进行，只是不进行抗体阻断。结果表示如同图8中。
图11
图11说明用递增浓度的肽seq.id.no.17处理细胞系9054获得的剂量应答曲线。IMT8和IMT9均显示对肽的增殖应答的剂量依赖性增加。结果用本图(图11)所标示的肽浓度按图9和图10中所述获得。结果表示如同图8中。
图12：
图12描述通过每周用肽(seq.id.no.16、17和21)处理过的照射过的自体树突细胞体外刺激从健康血液供体(供体2892)的外周血分离的T细胞所产生的细胞系的反应性。当T细胞与肽seq.id.no.21处理的自体树突细胞共孵育时，获得高于背景值以上的特异应答。在第一和第二次体外刺激后培养物中没有检测到活性。这些数据说明正常个体的T细胞库含有能识别来自正常人不存在的TGF β RII突变的移码肽的少数前体细胞。在另外两个血液供体(#2706和#2896)中，具有相关特异性的前体细胞的水平极低以至无法检测。这些结果表示为用传统IFNg ELISPOT分析所测定的每104个T细胞的点数。该分析测定可特异与给定抗原反应的细胞混合物中存在的细胞数目。简要的说，用作为APC的2-5×106照射过的肽处理自体树突细胞(DC)每周刺激107个T细胞(非贴壁细胞)。按照文献所述标准程序在重组人GM-CSF和IL-4中培养贴壁细胞群体，产生DC。以15ug/ml肽处理过夜后，和重组TNFα一起培养，获得完全成熟的DC。每孔中加入104个培养T细胞进行双份实验，分别加入104个处理或未处理的DC作为APC，然后根据已知的标准程序进行ELISPOT。结果为每104个T细胞点数的平均数。
图13
图13显示用seq.id.no.15-21的肽体外刺激健康血液供体(供体322)的T细胞所获得的结果。按图12所述进行体外培养。当用21肽刺激seq.id.no.16和21肽混合物预先处理的T细胞培养物，以及用同样的肽刺激s eq.id.no.17肽预先处理的培养物之后，可见到超过背景值的增殖应答。这些结果说明正常血液供体具有少量的特异于这些移码突变肽的循环T细胞，并说明通过用移码突变肽刺激可扩增培养物中的这些细胞。这些结果还证实了图8-11所述的结果，说明seq.id.no.17肽在人体中具有免疫原性，并且指出seq.id.no.21肽也可作为人的癌症疫苗。这些结果按图8所述方式表示。
图14
图14显示的结果说明HLA I型表位特异的CD8+T细胞可从健康血液供体(供体905)的T细胞库中存在的T细胞产生。第二轮体外再刺激后使用任何肽均未见到超过背景以上的反应性。第四次再刺激后，肽seq.id.no.428特异的T细胞的频率从不可检测水平增加到约细胞的2.5％。这些结果说明CD8+表型的CTL前体细胞存在于健康血液供体的未预先处理的T细胞库中。这种T细胞可在体外通过使用肽seq.id.no.428特异刺激来扩增。这形成了使用该肽作为产生对这种突变的癌症患者的移码肽特异的细胞毒性T细胞的基础。该T细胞通过每周再刺激从外周血分离并经肽处理的自体DC刺激的T细胞来产生，所述刺激按图12所述进行，只是根据产生CD8表型的细胞毒性T细胞(CTL)的标准程序在培养过程中加入了Il-7和I1-2。所用肽是seq.id.no.428、439、446和451的肽。用图12所述的ELISPOT分析检测细胞。结果按图12所述表示。
选择并设计肽seq.id.no.17，以包含若干HLA I型和HLA II型分子的结合基序。因此这些肽含有CD4+和CD8+T细胞的表位，并预测只要癌细胞中天然存在的异常TGF β RII蛋白发生加工并产生重叠肽，则会在癌症患者体内引起CD4和CD8两种T细胞应答。这对于CD4 T细胞现已由图8-11的结果得到证明。这些结果提示：
1)图8结果证明在高比例的有错配修复机构缺陷的癌症患者中存在的TGF β RII受体突变形式是一种肿瘤特异抗原。
2)在直肠结肠癌中常见的浸润T细胞的抗原特异性通常是未知的。图8的结果说明组成该患者肿瘤中肿瘤浸润淋巴细胞群的T细胞的一个成分是移码突变特异的，说明TGF β RII移码肽在体内是具有免疫原性的，偶尔引起自发T细胞激活。
3)从该观察得出，共同移码突变形成的TGF β RII受体非功能形式被进行了加工。该加工可在肿瘤细胞内作为异常蛋白天然降解的一部分发生，或在肿瘤细胞本身或释放形式的受体被专门APC摄取之后发生，或者是两种情况都有。
4)图8的结果还指出肽seq.id.no.17能结合HLA II型分子，因为用该肽处理APC导致对该肽的特异增殖应答，而且CD4 T细胞应答总是II型限制的。这种情况可用图9所示实验结果说明。这里显示对肽seq.id.no.17特异的应答被HLA-DR的抗体完全阻断，而不被其它两种HLA II型分子HLA-DQ和HLA-DP的抗体阻断。而且，通过使用一组标准同源Epstein Barr病毒(EBV)转化的覆盖患者自身APC中存在的相关HLA II型分子的B细胞系(BCL)，我们得以鉴定出负责将肽seq.id.no.17呈递给TLC IMT8和IMT9的II型分子是HLA-DR 14。同时这些发现极好地符合在来自相同肿瘤活检的平行部分中获得的免疫组织化学观察，其中我们能说明激活的CD4+T细胞在已诱导表达HLA-DR分子的肿瘤细胞附近大量存在。图11的结果说明这些T细胞克隆能对一定范围的肽剂量产生增殖应答，而且该应答是剂量依赖性的。
5)因为这些T细胞克隆是通过克隆从肿瘤活检分离的T细胞获得的，所以我们的发现的另一个提示是对肽seq.id.no.17特异的激活T细胞在刺激后能返回至肿瘤组织。
6)因为肽seq.id.no.17是肿瘤特异抗原，而且产生该肽或具有重叠序列的多个肽的移码突变在具有酶缺陷的癌中是常见的，其中所述酶是错配修复机构的一部分，该肽可用作在癌症患者或癌症高危人体中引起T细胞应答的疫苗。这种T细胞应答可潜在地影响现有肿瘤的生长或抑制手术或其它形式治疗后肿瘤的再生长，或在检测到或怀疑有错配酶缺陷的遗传性癌症患者和很有可能患上发生这种错配修复突变的癌症的患者中引起这种T细胞应答。
合成
使用连续流动固相肽合成来合成所述肽。采用具有适当侧链保护的N-a-Fmoc-氨基酸。为了偶联将Fmoc-氨基酸活化成五氟苯基酯，或在偶联之前采用TBTU或二异丙基碳化二亚胺活化。每次偶联后使用溶于DMF中的20％哌啶选择性除去Fmoc。从树脂分离和最终除去侧链保护用含适当清除剂的95％TFA来进行。用反向(C18)HPLC纯化和分析这些肽。通过使用电喷质谱法(Finnigan mat SSQ710)证实这些肽的身份。
用于T细胞刺激体内研究的这些肽通过这种方法合成。
本领域技术人员可使用数种其它熟知的方法来合成这些肽。
测定新的移码突变肽的方法的实施例
在本实施例中，使用BAX基因说明原理。
在下列步骤的每一步中，第一行是基因序列，第二行是氨基酸序列。
在步骤2-5中，有下划线的序列代表蛋白的突变部分。
第一步：
正常的BAX。
AT
G GGG GGG GAG GCA CCC GAG CTG GCC CTG GAC CCG GTG.....
M G G E A P E L A L D P V...
第二步：
从基因序列缺失1个G。
ATG GGG GGG
AGG CAC CCG AGC TGG CCC TGG ACC CGG TGC CTC
M G G R H P S W P W T R C L
AGG ATG CGT CCA CCA AGA AGC
TGA
R M R P P R S 终止密码子
第三步：
从基因序列缺失2个G。
ATG GGG
GGA GGC ACC CGA GCT GGC CCT GGA CCC GGT GCC
M G G G T R A G P G P G A
TCA GGA TGC GTC CAC CAA GAA GCT GAG CGA GTG TCT CAA GCG
S G C V H Q E A E R V S Q A
CAT CGG GGA CGA ACT GGA CAG
TAA
H R G R T G Q 终止密码子
第四步：
在基因序列中插入1个G。
ATG GGG GGG
GGA GGC ACC CGA GCT GGC CCT GGA CCC GGT GCC
M G G G G T R A G P G P G A
TCA GGA TGC GTC CAC CAA GAA GCT GAG CGA GTG TCT CAA GCG
S G C V H Q E A E R V S Q A
CAT CGG GGA CGA ACT GGA CAG
TAA
H R G R T G Q 终止密码子
第五步：
在基因序列中插入2个G。
ATG GGG GGG GGG
AGG CAC CCG AGC TGG CCC TGG ACC CGG TGC
M G G G R H P S W P W T R C
CTC AGG ATG CGT CCA CCA AGA AGC
TGA
L R M R P P R S 终止密码子
在下一个实施例中，使用TGF β RII基因来说明该原理。
在下列步骤的每一步中，第一行是基因序列，第二行是氨基酸序列。
在步骤2-5中，有下划线的序列代表蛋白的突变部分。
第一步：
正常的TGF β RII。
G
AA AAA AAA AAG CCT GGT GAG ACT TTC TTC ATG TGT TCC....
E K K K P G E T F F M C S...
第二步：
从基因序列缺失1个A。
G
AA AAA AAA AGC CTG GTG AGA CTT TCT TCA TGT GTT CCT GTA
E K K S L V R L S S C V P V
GCT CTG ATG AGT GCA ATG ACA ACA TCA TCT TCT CAG AAG AAT
A L M S A M T T S S S Q K N
ATA ACA CCA GCA ATC CTG ACT TGT TGC
TAG
I T P A I L T C C 终止密码子
第三步：
从基因序列缺失2个A。
G
AA AAA AAA GCC TGG
TGA
E K K A W 终止密码子
第四步：
在基因序列中插入1个A。
G
AA AAA AAA AAA GCC TGG
TGA
E K K K A W 终止密码子
第五步：
在基因序列中插入2个A。
G
AA AAA AAA AAA AGC CTG GTG AGA CTT TCT TCA TGT GTT CCT
E K K K S L V R L S S C V P
GTA GCT CTG ATG AGT GCA ATG ACA ACA TCA TCT TCT CAG AAG
V A L M S A M T T S S S Q K
AAT ATA ACA CCA GCA ATC CTG ACT TGT TGC
TAG
N I T P A I L T C C 终止密码子
因此，本发明的肽可用于治疗癌细胞携带移码突变基因的癌症的方法，其中治疗包括给需要这种治疗的病人体内或离体施用至少一种本发明的肽。
在另一个实施方案中，本发明的肽可用于通过给所述人施用至少一种本发明的肽，作为疫苗给癌细胞携带移码突变基因的癌症的易感人群接种。
另一个优点是给人类个体施用本发明肽的混合物，由此本发明的每一种肽都能结合该个体不同类型的HLA I型和/或II型分子。
进一步期望，如果包括本发明的肽，上述PCT/NO92/00032申请中公开的抗癌疫苗或肽药物的作用可极大地增强。因此，在本发明的另一个实施方案中，本发明的肽与PCT/NO92/00032中所公开的肽同时或以随意次序共同施用。
还认为，这些肽可与化合物如细胞因子和/或生长因子如白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素12(IL-12)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、Flt-3配体等一起同时或分开使用，以增强本领域已知的免疫应答。
根据本发明的肽可单独、或联合其它物质例如标准佐剂、或以本领域已知可诱导高亲和细胞毒T淋巴细胞的脂蛋白结合物形式(K.Deres，自然(Nature)，第342卷，(1989年11月))在疫苗或治疗组合物中使用。
根据本发明的肽可用于包括在基于肽或重组片段的疫苗中。
根据本发明的肽可与本领域已知的普通添加物、稀释剂、稳定剂等一起包括在药物组合物或疫苗中。
根据本发明，药物组合物或疫苗可仅包括本发明的肽或联合至少一种药物学上可接受的载体或稀释剂。
更进一步，疫苗或治疗组合物可包含作为突变蛋白质片段的肽，所述突变蛋白质是由基因重复序列中碱基插入或缺失引起的。
更进一步，疫苗组合物可包含至少一种选用于一种癌症的肽，该疫苗可施用给具有该特定癌症遗传易感性的人。
更进一步，疫苗组合物可包含至少一种选用于一种癌症的肽，该疫苗可施用给属于该特定癌症高危人群的人。
根据本发明的癌疫苗还可施用给普通人群，例如作为能对各种与移码突变基因相关的常见癌症引起T细胞免疫的肽混合物施用。
根据本发明的肽可作为一种肽或多种肽的混合物施用。作为替代，这些肽可相互共价连接形成更大的多肽甚至环型多肽。
根据本发明的癌症治疗可在体内或离体进行，主要目标是产生对与患者所患癌症类型相关的突变基因产物特异的T细胞系或克隆。
更进一步，本发明的移码突变肽可通过各种途径施用给患者，包括但不限于皮下、肌内、真皮内、腹膜内、静脉内等。在一个实施方案中，本发明的肽通过真皮内途径施用。这些肽可按治疗或预防有效的剂量在单个或多个注射位点施用给患者。
本发明的肽在1-2个月期间内仅施用一次或施用数次，如每周一次，以后可按重复次序施用，所有这些均根据治疗患者的需要来进行。
对于待接种疫苗的每个病人或个体，本发明的肽可施用1微克(1ug)-1克(1g)范围内的量。优选每次给药使用1微克(1ug)-1毫克(1mg)范围内的更小剂量。
本发明还包括编码移码突变肽的DNA序列。
此外，本发明包括含有编码至少一种移码突变肽的DNA序列的分离的DNA序列，以及作为治疗或预防与该基因移码突变相关的癌症的疫苗施用这种分离的DNA序列。
根据本发明的肽可以DNA疫苗的形式给个体施用。编码这些肽的DNA可以是克隆的质粒DNA或合成的寡核苷酸的形式。该DNA可与细胞因子如IL-2和/或其它共刺激分子一起使用。这些细胞因子和/或其它共刺激分子本身可以质粒或寡核苷酸DNA的形式施用。已显示，对DNA疫苗的应答可通过免疫刺激DNA序列(ISS)的存在来增强。这些免疫刺激DNA序列可根据下式采取含有甲基化CpG的六聚物基序的形式：5’-嘌呤-嘌呤-CG-嘧啶-嘧啶-3’。因此，我们的DNA疫苗可在编码这些肽的DNA、或编码细胞因子或其它共刺激分子的DNA、或这两种分子中包含这些ISS或其他ISS。Tighe等(1998，现代免疫学(Immunology Today)，19(2)，89-97)提供了DNA疫苗接种的优点的综述。
在一个实施方案中，编码突变BAX肽的DNA序列包含：
正常BAX。
AT
G GGG GGG GAG GCA CCC GAG CTG GCC CTG GAC CCG GTG.....
从BAX基因序列缺失1个G。
ATG GGG GGG
AGG CAC CCG AGC TGG CCC TGG ACC CGG TGC CTC
AGG ATG CGT CCA CCA AGA AGC
TGA
从BAX基因序列缺失2个G。
ATG GGG
GGA GGC ACC CGA GCT GGC CCT GGA CCC GGT GCC
TCA GGA TGC GTC CAC CAA GAA GCT GAG CGA GTG TCT CAA GCG
CAT CGG GGA CGA ACT GGA CAG
TAA
在BAX基因序列中插入1个G。
ATG GGG GGG
GGA GGC ACC CGA GCT GGC CCT GGA CCC GGT GCC
TCA GGA TGC GTC CAC CAA GAA GCT GAG CGA GTG TCT CAA GCG
CAT CGG GGA CGA ACT GGA CAG
TAA
在BAX基因序列中插入2个G。
ATG GGG GGG GGG
AGG CAC CCG AGC TGG CCC TGG ACC CGG TGC
CTC AGG ATG CGT CCA CCA AGA AGC
TGA
在第二个实施方案中，编码突变TGF β RII肽的DNA序列包含：
正常TGF β RII基因。
G
AA AAA AAA AAG CCT GGT GAG ACT TTC TTC ATG TGT TCC....
从TGF β RII基因序列缺失1个A。
G
AA AAA AAA AGC CTG GTG AGA CTT TCT TCA TGT GTT CCT GTA
GCT CTG ATG AGT GCA ATG ACA ACA TCA TCT TCT CAG AAG AAT
ATA ACA CCA GCA ATC CTG ACT TGT TGC
TAG
从TGF β RII基因序列缺失2个A。
G
AA AAA AAA GCC TGG
TGA
在TGF β RII基因序列中插入1个A。
G
AA AAA AAA AAA GCC TGG
TGA
在TGF β RII基因序列中插入2个A。
G
AA AAA AAA AAA AGC CTG GTG AGA CTT TCT TCA TGT GTT CCT
GTA GCT CTG ATG AGT GCA ATG ACA ACA TCA TCT TCT CAG AAG
AAT ATA ACA CCA GCA ATC CTG ACT TGT TGC
TAG
本发明还包括含有移码突变肽编码DNA序列的载体或质粒。所述载体包括但不限于大肠杆菌(E.Coli)质粒、李斯特杆菌属(Listeria)载体和重组病毒载体。重组病毒载体包括但不限于含有移码突变肽编码DNA序列的正痘病毒、金丝雀病毒、山羊痘病毒、猪痘病毒、牛痘病毒、杆状病毒、人腺病毒、SV40、牛乳头瘤病毒等。
还相信，抗癌治疗或预防也可通过给患者施用有效剂量的包含至少一个移码突变肽编码DNA序列插入位点的重组病毒载体或质粒，由此该患者的抗原呈递细胞转变成该载体/质粒的宿主细胞，而且获得HLA/移码突变肽复合物的呈递。
使用本发明的肽，本领域技术人员将能发现其它可能的应用组合，这些也应包括在本发明权利要求的范围之内。
本发明的肽可通过本领域已知的传统方法产生，如化学肽合成、重组DNA技术或移码突变基因编码的蛋白或肽的蛋白酶切割。化学合成的一种方法在下面的描述中阐述。
为了使癌疫苗或基于特异T细胞免疫的特定癌症治疗方法有效，必须满足三个条件：
1.所用肽必须以其全长或由抗原呈递细胞加工后的形式与癌细胞或其它抗原呈递细胞上HLA I型和/或II型分子呈递的加工后突变蛋白片段相应，
2.所用肽必须以免疫原性形式与HLA I型和/或II型分子结合，和
3.能识别并应答HLA/肽复合物的T细胞必须存在于人循环系统中。
已证明，对于本发明的一些代表性的肽，所有这些条件均符合。根据本发明的肽在体外引起特异T细胞免疫应答。已证明根据本发明的肽相应于加工过的突变蛋白片段。例如相应于转化突变BAX和TGFβ RII肽的片段的肽。
通过本发明可获得下列优点：
-提供治疗患有基因移码突变引起的癌症的患者的可能性，其中大部分目前已知的癌症还没有任何好的替代治疗方法。
-提供给具有遗传易感性或属于其它高危人群的人预防性接种疫苗的可能性。
-提供为特定癌症如直肠结肠癌或胰腺癌准备联合治疗的可能性，其中该癌症通常与基因移码突变或点突变有关。
-因为所述移码突变在大量癌症中发生，有可能使用这些多肽联合现有疫苗或将来的疫苗获得多靶向治疗。
-同样，与多个基因的多移码突变相关的癌症患者可通过联合治疗更有效地治疗。
序列表
所有序列的共同信息：
序列类型：肽
序列单位：氨基酸
拓扑类型：线性
SEQ ID NO：1
序列长度：18氨基酸
R H P S W P W T R C L R M R P P R S
1 5 10 15
SEQ ID NO：2
序列长度：31氨基酸
G T R A G P G P G A S G C V H Q E A E R V S Q A H R G R T G
1 5 10 15 20 25 30
Q
SEQ ID NO：3
序列长度：32氨基酸
G G T R A G P G P G A S G C V H Q E A E R V S Q A H R G R T
1 5 10 15 20 25 30
G Q
SEQ ID NO：4
序列长度：19氨基酸
G R H P S W P W T R C L R M R P P R S
1 5 10 15
SEQ ID NO：5
序列长度：28氨基酸
I Q D R A G R M G G R H P S W P W T R C L R M R P P R S
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：6
序列长度：19氨基酸
I Q D R A G R M G G G R H P S W P W T
1 5 10 15
SEQ ID NO：7
序列长度：42氨基酸
I Q D R A G R M G G G G T R A G P G P G A S G C V H Q E A E
1 5 10 15 20 25 30
R V S Q A H R G R T G Q
35 40
SEQ ID NO：8
序列长度：19氨基酸
I Q D R A G R M G G G T R A G P G P G
1 5 10 15
SEQ ID NO：9
序列长度：22氨基酸
I Q D R A G R M G G R H P S W P W T R C L R
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：10
序列长度：22氨基酸
A S G C V H Q E A E R V S Q A H R G R T G Q
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：11
序列长度：22氨基酸
G G T R A G P G P G A S G C V H Q E A E R V
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：12
序列长度：22氨基酸
I Q D R A G R M G G G G T R A G P G P G A S
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：13
序列长度：34氨基酸
S L V R L S S C V P V A L M S A M T T S S S Q K N I T P A I
1 5 10 15 20 25 30
L T C C
SEQ ID NO：14
序列长度：44氨基酸
S P K C I M K E K K S L V R L S S C V P V A L M S A M T T S
1 5 10 15 20 25 30
S S Q K N I T P A I L T C C
35 40
SEQ ID NO：15
序列长度：19氨基酸
P K C I M K E K K K S L V R L S S C V
1 5 10 15
SEQ ID NO：16
序列长度：23氨基酸
A L M S A M T T S S S Q K N I T P A I L T C C
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：17
序列长度：23氨基酸
S L V R L S S C V P V A L M S A M T T S S S Q
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：18
序列长度：22氨基酸
S P K C I M K E K K S L V R L S S C V P V A
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：19
序列长度：12氨基酸
S P K C I M K E K K A W
1 5 10
SEQ ID NO：20
序列长度：12氨基酸
P K C I M K E K K K A W
1 5 10
SEQ ID NO：21
序列长度：19氨基酸
A M T T S S S Q K N I T P A I L T C C
1 5 10 15
SEQ ID NO：22
序列长度：9氨基酸
T V G R P H I S C
1 5
SEQ ID NO：23
序列长度：10氨基酸
K T V G R P H I S C
1 5 10
SEQ ID NO：24
序列长度：18氨基酸
K Q W E D P T S P A N V I A L L Q T
1 5 10 15
SEQ ID NO：25
序列长度：17氨基酸
Q W E D P T S P A N V I A L L Q T
1 5 10 15
SEQ ID NO：26
序列长度：19氨基酸
Q K T I K S T R K K T V G R P H I S C
1 5 10 15
SEQ ID NO：27
序列长度：20氨基酸
Q K T I K S T R K K K T V G R P H I S C
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：28
序列长度：28氨基酸
Q K T I K S T R K K K Q W E D P T S P A N V I A L L Q T
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：29
序列长度：27氨基酸
Q K T I K S T R K K Q W E D P T S P A N V I A L L Q T
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：30
序列长度：34氨基酸
A A D L Q Q Q F V H F L D C W D V S S I P F T L H L P Q A Q
1 5 10 15 20 25 30
D I T T
SEQ ID NO：31
序列长度：9氨基酸
G K D A K E K S S
1 5
SEQ ID NO：32
序列长度：10氨基酸
G K D A K E K K S S
1 5 10
SEQ ID NO：33
序列长度：42氨基酸
G K D A K E K K A A D L Q Q Q F V H F L D C W D V S S I P F
1 5 10 15 20 25 30
T L H L P Q A Q D I T T
35 40
SEQ ID NO：34
序列长度：41氨基酸
G K D A K E K A A D L Q Q Q F V H F L D C W D V S S I P F T
1 5 10 15 20 25 30
L H L P Q A Q D I T T
35 40
SEQ ID NO：35
序列长度：9氨基酸
F S M K Q T L M N V K N L K T K
1 5 10 15
SEQ ID NO：36
序列长度：17氨基酸
K F S M K Q T L M N V K N L K T K
1 5 10 15
SEQ ID NO：37
序列长度：25氨基酸
V R T S K T R K K F S M K Q T L M N V K N L K T K
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：38
序列长度：26氨基酸
V R T S K T R K K K F S M K Q T L M N V K N L K T K
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：39
序列长度：12氨基酸
V R T S K T R K K N F P
1 5 10
SEQ ID NO：40
序列长度：11氨基酸
V R T S K T R K N F P
1 5 10
SEQ ID NO：41
序列长度：10氨基酸
I K K K L L Q F Q K
1 5 10
SEQ ID NO：42
序列长度：11氨基酸
K I K K K L L Q F Q K
1 5 10
SEQ ID NO：43
序列长度：17氨基酸
K S R R N Y F N F K N N C Q S R L
1 5 10 15
SEQ ID NO：44
序列长度：16氨基酸
S R R N Y F N F K N N C Q S R L
1 5 10 15
SEQ ID NO：45
序列长度：18氨基酸
T N L R V I Q K I K K K L L Q F Q K
1 5 10 15
SEQ ID NO：46
序列长度：19氨基酸
T N L R V I Q K K I K K K L L Q F Q K
1 5 10 15
SEQ ID NO：47
序列长度：25氨基酸
T N L R V I Q K K S R R N Y F N F K N N C Q S R L
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：48
序列长度：24氨基酸
T N L R V I Q K S R R N Y F N F K N N C Q S R L
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：49
序列长度：5氨基酸
K I M I T
1 5
SEQ ID NO：50
序列长度：12氨基酸
N I D K I P E K I M I T
1 5 10
SEQ ID NO：51
序列长度：13氨基酸
N I D K I P E K K I M I T
1 5 10
SEQ ID NO：52
序列长度：5氨基酸
I I N A N
1 5
SEQ ID NO：53
序列长度：6氨基酸
K I I N A N
1 5
SEQ ID NO：54
序列长度：13氨基酸
N D K T V S E K I I N A N
1 5 10
SEQ ID NO：55
序列长度：14氨基酸
N D K T V S E K K I I N A N
1 5 10
SEQ ID NO：56
序列长度：14氨基酸
N G L E K E Y L M V N Q K E
1 5 10
SEQ ID NO：57
序列长度：23氨基酸
S Q T S L L E A K N G L E K E Y L M V N Q K E
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：58
序列长度：24氨基酸
S Q T S L L E A K K N G L E K E Y L M V N Q K E
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：59
序列长度：12氨基酸
S Q T S L L E A K K M A
1 5 10
SEQ ID NO：60
序列长度：11氨基酸
S Q T S L L E A K M A
1 5 10
SEQ ID NO：61
序列长度：6氨基酸
T L V F P K
1 5
SEQ ID NO：62
序列长度：7氨基酸
K T L V F P K
1 5
SEQ ID NO：63
序列长度：14氨基酸
L K N V E D Q K T L V F P K
1 5 10
SEQ ID NO：64
序列长度：15氨基酸
L K N V E D Q K K T L V F P K
1 5 10 15
SEQ ID NO：65
序列长度：10氨基酸
L K N V E D Q K K H
1 5 10
SEQ ID NO：66
序列长度：9氨基酸
L K N V E D Q K H
1 5
SEQ ID NO：67
序列长度：6氨基酸
K K I Q L Y
1 5
SEQ ID NO：68
序列长度：7氨基酸
K K K I Q L Y
1 5
SEQ ID NO：69
序列长度：36氨基酸
R K R F S Y T E Y L A S I I R F I F S V N R R K E I Q N L S
1 5 10 15 20 25 30
S C N F K I
35
SEQ ID NO：70
序列长度：15氨基酸
L R I V S Y S K K K K I Q L Y
1 5 10 15
SEQ ID NO：71
序列长度：16氨基酸
L R I V S Y S K K K K K I Q L Y
1 5 10 15
SEQ ID NO：72
序列长度：45氨基酸
L R I V S Y S K K R K R F S Y T E Y L A S I I R F I F S V N
1 5 10 15 20 25 30
R R K E I Q N L S S C N F K I
35 40 45
SEQ ID NO：73
序列长度：44氨基酸
L R I V S Y S K R K R F S Y T E Y L A S I I R F I F S V N R
1 5 10 15 20 25
30
R K E I Q N L S S C N F K I
35 40
SEQ ID NO：74
序列长度：18氨基酸
Q D L P L S S I C Q T I V T I Y W Q
1 5 10 15
SEQ ID NO：75
序列长度：19氨基酸
K Q D L P L S S I C Q T I V T I Y W Q
1 5 10 15
SEQ ID NO：76
序列长度：25氨基酸
N R T C P F R L F V R R M L Q F T G N K V L D R P
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：77
序列长度：27氨基酸
G F V V S V V K K Q D L P L S S I C Q T I V T I Y W Q
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：78
序列长度：28氨基酸
G F V V S V V K K K Q D L P L S S I C Q T I V T I Y W Q
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：79
序列长度：34氨基酸
G F V V S V V K K N R T C P F R L F V R R M L Q F T G N K V
1 5 10 15 20 25 30
L D R P
SEQ ID NO：80
序列长度：33氨基酸
G F V V S V V K N R T C P F R L F V R R M L Q F T G N K V L
1 5 10 15 20 25 30
D R P
SEQ ID NO：81
序列长度：8氨基酸
Y R K T K N Q N
1 5
SEQ ID NO：82
序列长度：9氨基酸
K Y R K T K N Q N
1 5
SEQ ID NO：83
序列长度：10氨基酸
N T E R P K I R T N
1 5 10
SEQ ID NO：84
序列长度：17氨基酸
D E T F Y K G K K Y R K T K N Q N
1 5 10 15
SEQ ID NO：85
序列长度：18氨基酸
D E T F Y K G K K K Y R K T K N Q N
1 5 10 15
SEQ ID NO：86
序列长度：19氨基酸
D E T F Y K G K K N T E R P K I R T N
1 5 10 15
SEQ ID NO：87
序列长度：18氨基酸
D E T F Y K G K N T E R P K I R T N
1 5 10 15
SEQ ID NO：88
序列长度：28氨基酸
L S I N N Y R F Q M K F Y F R F T S H G S P F T S A N F
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：89
序列长度：29氨基酸
K L S I N N Y R F Q M K F Y F R F T S H G S P F T S A N F
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：90
序列长度：10氨基酸
N S V S T T T G F R
1 5 10
SEQ ID NO：91
序列长度：37氨基酸
N I Q L A A T K K L S I N N Y R F Q M K F Y F R F T S H G S
1 5 10 15 20 25 30
P F T S A N F
35
SEQ ID NO：92
序列长度：38氨基酸
N I Q L A A T K K K L S I N N Y R F Q M K F Y F R F T S H G
1 5 10 15 20 25 30
S P F T S A N F
35
SEQ ID NO：93
序列长度：19氨基酸
N I Q L A A T K K N S V S T T T G F R
1 5 10 15
SEQ ID NO：94
序列长度：18氨基酸
N I Q L A A T K N S V S T T T G F R
1 5 10 15
SEQ ID NO：95
序列长度：18氨基酸
M E H V A P G R M S A S P Q S P T Q
1 5 10 15
SEQ ID NO：96
序列长度：19氨基酸
K M E H V A P G R M S A S P Q S P T Q
1 5 10 15
SEQ ID NO：97
序列长度：59氨基酸
K W S T W L Q A E C Q H L H S P Q R S D K P Q Q A G L D Q Q
1 5 10 15 20 25 30
H H C F A L D S S P G P R P V F L Q L L G L M G Q G R H D
35 40 45 50 55
SEQ ID NO：98
序列长度：58氨基酸
W S T W L Q A E C Q H L H S P Q R S D K P Q Q A G L D Q Q H
1 5 10 15 20 25 30
H C F A L D S S P G P R P V F L Q L L G L M G Q G R H D
35 40 45 50 55
SEQ ID NO：99
序列长度：26氨基酸
T F S V W A E K M E H V A P G R M S A S P Q S P T Q
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：100
序列长度：27氨基酸
T F S V W A E K K M E H V A P G R M S A S P Q S P T Q
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：101
序列长度：67氨基酸
T F S V W A E K K W S T W L Q A E C Q H L H S P Q R S D K P
1 5 10 15 20 25 30
Q Q A G L D Q Q H H C F A L D S S P G P R P V F L Q L L G L
35 40 45 50 55 60
M G Q G R H D
65
SEQ ID NO：102
序列长度：66氨基酸
T F S V W A E K W S T W L Q A E C Q H L H S P Q R S D K P Q
1 5 10 15 20 25 30
Q A G L D Q Q H H C F A L D S S P G P R P V F L Q L L G L M
35 40 45 50 55 60
G Q G R H D
65
SEQ ID NO：103
序列长度：18氨基酸
H K W L K F C L L R L V K E S F H E
1 5 10 15
SEQ ID NO：104
序列长度：19氨基酸
K H K W L K F C L L R L V K E S F H E
1 5 10 15
SEQ ID NO：105
序列长度：27氨基酸
K G G K A K G K K H K W L K F C L L R L V K E S F H E
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：106
序列长度：28氨基酸
K G G K A K G K K K H K W L K F C L L R L V K E S F H E
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：107
序列长度：13氨基酸
K G G K A K G K K N T N G
1 5 10
SEQ ID NO：108
序列长度：12氨基酸
K G G K A K G K N T N G
1 5 10
SEQ ID NO：109
序列长度：8氨基酸
V N N F F K K L
1 5
SEQ ID NO：110
序列长度：9氨基酸
K V N N F F K K L
1 5
SEQ ID NO：111
序列长度：16氨基酸
L S Q G N V K K V N N F F K K L
1 5 10 15
SEQ ID NO：112
序列长度：17氨基酸
L S Q G N V K K K V N N F F K K L
1 5 10 15
SEQ ID NO：113
序列长度：38氨基酸
G E K N D L Q L F V M S D R R Y K I Y W T V I L L N P C G N
1 5 10 15 20 25 30
L H L K T T S L
35
SEQ ID NO：114
序列长度：39氨基酸
K G E K N D L Q L F V M S D R R Y K I Y W T V I L L N P C G
1 5 10 15 20 25 30
N L H L K T T S L
35
SEQ ID NO：115
序列长度：10氨基酸
K G K K M I C S Y S
1 5 10
SEQ ID NO：116
序列长度：9氨基酸
G K K M I C S Y S
1 5
SEQ ID NO：117
序列长度：46氨基酸
S S K T F E K K G E K N D L Q L F V M S D R R Y K I Y W T V
1 5 10 15 20 25 30
I L L N P C G N L H L K T T S L
35 40 45
SEQ ID NO：118
序列长度：47氨基酸
S S K T F E K K K G E K N D L Q L F V M S D R R Y K I Y W T
1 5 10 15 20 25 30
V I L L N P C G N L H L K T T S L
35 30 45
SEQ ID NO：119
序列长度：18氨基酸
S S K T F E K K K G K K M I C S Y S
1 5 10 15
SEQ ID NO：120
序列长度：17氨基酸
S S K T F E K K G K K M I C S Y S
1 5 10 15
SEQ ID NO：121
序列长度：17氨基酸
Q R K P K R A N C V I Q R R A K M
1 5 10 15
SEQ ID NO：122
序列长度：18氨基酸
K Q R K P K R A N C V I Q R R A K M
1 5 10 15
SEQ ID NO：123
序列长度：26氨基酸
N K E N Q K E Q T A L L Y R G G Q R C R C V C L R F
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：124
序列长度：26氨基酸
P D Y Q P P A K K Q R K P K R A N C V I Q R R A K M
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：125
序列长度：27氨基酸
P D Y Q P P A K K K Q R K P K R A N C V I Q R R A K M
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：126
序列长度：35氨基酸
P D Y Q P P A K K N K E N Q K E Q T A L L Y R G G Q R C R C
1 5 10 15 20 25 30
V C L R F
35
SEQ ID NO：127
序列长度：34氨基酸
P D Y Q P P A K N K E N Q K E Q T A L L Y R G G Q R C R C V
1 5 10 15 20 25 30
C L R F
SEQ ID NO：128
序列长度：7氨基酸
N L S S L L I
1 5
SEQ ID NO：129
序列长度：5氨基酸
T C L P F
1 5
SEQ ID NO：130
序列长度：15氨基酸
Q P T F T L R K N L S S L L I
1 5 10 15
SEQ ID NO：131
序列长度：16氨基酸
Q P T F T L R K K N L S S L L I
1 5 10 15
SEQ ID NO：132
序列长度：14氨基酸
Q P T F T L R K K T C L P F
1 5 10
SEQ ID NO：133
序列长度：13氨基酸
Q P T F T L R K T C L P F
1 5 10
SEQ ID NO：134
序列长度：31氨基酸
R A T F L L S L W E C S L P Q A R L C L I V S R T G L L V Q
1 5 10 15 20 25 30
S
SEQ ID NO：135
戽列长度：19氨基酸
G Q H F Y W H C G S A A C H R R G C V
1 5 10 15
SEQ ID NO：136
序列长度：39氨基酸
K E N V R D K K R A T F L L S L W E C S L P Q A R L C L I V
1 5 10 15 20 25 30
S R T G L L V Q S
35
SEQ ID NO：137
序列长度：40氨基酸
K E N V R D K K K R A T F L L S L W E C S L P Q A R L C L I
1 5 10 15 20 25 30
V S R T G L L V Q S
35 40
SEQ ID NO：138
序列长度：28氨基酸
K E N V R D K K K G Q H F Y W H C G S A A C H R R G C V
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：139
序列长度：27氨基酸
K E N V R D K K G Q H F Y W H C G S A A C H R R G C V
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：140
序列长度：39氨基酸
I T H T R W G I T T W D S W S V R M K A N W I Q A Q Q N K S
1 5 10 15 20 25 30
L I L S P S F T K
35
SEQ ID NO：141
序列长度：40氨基酸
K I T H T R W G I T T W D S W S V R M K A N W I Q A Q Q N K
1 5 10 15 20 25 30
S L I L S P S F T K
35 40
SEQ ID NO：142
序列长度：16氨基酸
K L L T P G G E L P H G I L G Q
1 5 10 15
SEQ ID NO：143
序列长度：15氨基酸
L L T P G G E L P H G I L G Q
1 5 10 15
SEQ ID NO：144
序列长度：47氨基酸
P P V C E L E K I T H T R W G I T T W D S W S V R M K A N W
1 5 10 15 20 25 30
I Q A Q Q N K S L I L S P S F T K
35 40 45
SEQ ID NO：145
序列长度：48氨基酸
P P V C E L E K K I T H T R W G I T T W D S W S V R M K A N
1 5 10 15 20 25 30
W I Q A Q Q N K S L I L S P S F T K
35 40 45
SEQ ID NO：146
序列长度：24氨基酸
P P V C E L E K K L L T P G G E L P H G I L G Q
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：147
序列长度：23氨基酸
P P V C E L E K L L T P G G E L P H G I L G Q
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：148
序列长度：11氨基酸
S L K D E L E K M K I
1 5 10
SEQ ID NO：149
序列长度：12氨基酸
S L K D E L E K K M K I
1 5 10
SEQ ID NO：150
序列长度：12氨基酸
L G Q S S P E K K N K N
1 5 10
SEQ ID NO：151
序列长度：11氨基酸
L G Q S S P E K N K N
1 5 10
SEQ ID NO：152
序列长度：23氨基酸
R L R R I N G R G S Q I R S R N A F N R S E E
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：153
序列长度：10氨基酸
E P K V K E E K K T
1 5 10
SEQ ID NO：154
序列长度：11氨基酸
E P K V K E E K K K T
1 5 10
SEQ ID NO：155
序列长度：32氨基酸
E P K V K E E K K R L R R I N G R G S Q I R S R N A F N R S
1 5 10 15 20 25 30
E E
SEQ ID NO：156
序列长度：31氨基酸
E P K V K E E K R L R R I N G R G S Q I R S R N A F N R S E
1 5 10 15 20 25 30
E
SEQ ID NO：157
序列长度：14氨基酸
T F R Y K G K Q H P F F S T
1 5 10
SEQ ID NO：158
序列长度：10氨基酸
G P N A P E E K N H
1 5 10
SEQ ID NO：159
序列长度：11氨基酸
G P N A P E E K K N H
1 5 10
SEQ ID NO：160
序列长度：23氨基酸
G P N A P E E K K T F R Y K G K Q H P F F S Y
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：161
序列长度：22氨基酸
G P N A P E E K T F R Y K G K Q H P F F S T
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：162
序列长度：6氨基酸
M Q N T C V
1 5
SEQ ID NO：163
序列长度：7氨基酸
K M Q N T C V
1 5
SEQ ID NO：164
序列长度：9氨基酸
K C K I R V F S K
1 5
SEQ ID NO：165
序列长度：8氨基酸
C K I R V F S K
1 5
SEQ ID NO：166
序列长度：14氨基酸
F F K R T V Q K M Q N T C V
1 5 10
SEQ ID NO：167
序列长度：15氨基酸
F F K R T V Q K K M Q N T C V
1 5 10 15
SEQ ID NO：168
序列长度：17氨基酸
F F K R T V Q K K C K I R V F S K
1 5 10 15
SEQ ID NO：169
序列长度：16氨基酸
F F K R T V Q K C K I R V F S K
1 5 10 15
SEQ ID NO：170
序列长度：7氨基酸
L P H Y L A H
1 5
SEQ ID NO：171
序列长度：8氨基酸
C L I T W L T N
1 5
SEQ ID NO：172
序列长度：17氨基酸
G S T T G L S A T P L P H Y L A H
1 5 10 15
SEQ ID NO：173
序列长度：118氨基酸
G S T T G L S A T P P L P H Y L A H
1 5 10 15
SEQ ID NO：174
序列长度：19氨基酸
G S T T G L S A T P P C L I T W L T N
1 5 10 15
SEQ ID NO：175
序列长度：18氨基酸
G S T T G L S A T P C L I T W L T N
1 5 10 15
SEQ ID NO：176
序列长度：9氨基酸
R F A D K P R P N
1 5
SEQ ID NO：177
序列长度：20氨基酸
D L P T S P D Q T R S G P V H V S V E P
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：178
序列长度：19氨基酸
D S A A G C S G T P R F A D K P R P N
1 5 10 15
SEQ ID NO：179
序列长度：20氨基酸
D S A A G C S G T P P R F A D K P R P N
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：180
序列长度：31氨基酸
D S A A G C S G T P P D L P T S P D Q T R S G P V H V S V E
1 5 10 15 20 25 30
P
SEQ ID NO：181
序列长度：30氨基酸
D S A A G C S G T P D L P T S P D Q T R S G P V H V S V E P
1 5 10 15 20 25 30
SEQ ID NO：182
序列长度：53氨基酸
A H P E T P A Q N R L R I P C S R R E V R S R A C K P P G A
1 5 10 15 20 25 30
Q G S D E R R G K A S P G R D C D V R T G R P
35 40 45 50
SEQ ID NO：183
序列长度：54氨基酸
P A H P E T P A Q N R L R I P C S R R E V R S R A C K P P G
1 5 10 15 20 25 30
A Q G S D E R R G K A S P G R D C D V R T G R P
35 40 45 50
SEQ ID NO：184
序列长度：20氨基酸
R P T R R H P R R I A S G S P A V G G R
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：185
序列长度：63氨基酸
V A I R G H P R P P A H P E T P A Q N R L R I P C S R R E V
1 5 10 15 20 25 30
R S R A C K P P G A Q G S D E R R G K A S P G R D C D V R T
35 40 45 50 55 60
G R P
SEQ ID NO：186
序列长度：64氨基酸
V A I R G H P R P P P A H P E T P A Q N R L R I P C S R R E
1 5 10 15 20 25 30
V R S R A C K P P G A Q G S D E R R G K A S P G R D C D V R
35 40 45 50 55 60
T G R P
SEQ ID NO：187
序列长度：30氨基酸
V A I R G H P R P P R P T R R H P R R I A S G S P A V G G R
1 5 10 15 20 25 30
SEQ ID NO：188
序列长度：29氨基酸
V A I R G H P R P R P T R R H P R R I A S G S P A V G G R
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：189
序列长度：85氨基酸
R G R T S G R S L S C C R R P R C R P A V A S R S T A P S P
1 5 10 15 20 25 30
R A G S R R C C L R T S C G A A R P R R T R S A C G D W V A
35 40 45 50 55 60
S P P T R S S S R T A C G A A S P P A R S W S A P
65 70 75 80 85
SEQ ID NO：190
序列长度：8氨基酸
G G G H L E E V
1 5
SEQ ID NO：191
序列长度：94氨基酸
Y F G G P D S T P R G R T S G R S L S C C R R P R C R P A V
1 5 10 15 20 25 30
A S R S T A P S P R A G S R R C C L R T S C G A A R P R R T
35 40 45 50 55 60
R S A C G D W V A S P P T R S S S R T A C G A A S P P A R S
65 70 75 80 85 90
W S A P
SEQ ID NO：192
序列长度：95氨基酸
Y F G G P D S T P P R G R T S G R S L S C C R R P R C R P A
1 5 10 15 20 25 30
V A S R S T A P S P R A G S R R C C L R T S C G A A R P R R
35 40 45 50 55 60
T R S A C G D W V A S P P T R S S S R T A C G A A S P P A R
65 70 75 80 85 90
S W S A P
95
SEQ ID NO：193
序列长度：18氨基酸
Y F G G P D S T P P G G G H L E E V
1 5 10 15
SEQ ID NO：194
序列长度：17氨基酸
Y F G G P D S T P G G G H L E E V
1 5 10 15
SEQ ID NO：195
序列长度：6氨基酸
H R V A D P
1 5
SEQ ID NO：196
序列长度：13氨基酸
L S Q S S E L D P P S S R
1 5 10
SEQ ID NO：197
序列长度：14氨基酸
L S Q S S E L D P P P S S R
1 5 10
SEQ ID NO：198
序列长度：16氨基酸
L S Q S S E L D P P H R V A D P
1 5 10 15
SEQ ID NO：199
序列长度：15氨基酸
L S Q S S E L D P H R V A D P
1 5 10 15
SEQ ID NO：200
序列长度：11氨基酸
V I L L P E D T P P S
1 5 10
SEQ ID NO：201
序列长度：12氨基酸
V I L L P E D T P P P S
1 5 10
SEQ ID NO：202
序列长度：14氨基酸
V I L L P E D T P P L L R A
1 5 10
SEQ ID NO：203
序列长度：13氨基酸
V I L L P E L D P L L R A
1 5 10
SEQ ID NO：204
序列长度：5氨基酸
P S P L P
1 5
SEQ ID NO：205
序列长度：25氨基酸
P L L F H R P C S P S P A L G A T V L A V Y R Y E
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：206
序列长度：24氨基酸
L L F H R P C S P S P A L G A T V L A V Y R Y E
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：207
序列长度：13氨基酸
A P R P P L G P P S P L P
1 5 10
SEQ ID NO：208
序列长度：14氨基酸
A P R P P L G P P P S P L P
1 5 10
SEQ ID NO：209
序列长度：34氨基酸
A P R P P L G P P P L L F H R P C S P S P A L G A T V L A V
1 5 10 15 20 25 30
Y R Y E
SEQ ID NO：210
序列长度：33氨基酸
A P R P P L G P P L L F H R P C S P S P A L G A T V L A V Y
1 5 10 15 20 25 30
R Y E
SEQ ID NO：211
序列长度：28氨基酸
T Q V L P Q G C S L S L L H T T F P H R Q V P H I L D W
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：212
序列长度：29氨基酸
P T Q V L P Q G C S L S L L H T T F P H R Q V P H I L D W
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：213
序列长度：54氨基酸
P L Q S F P K D A A S A F S T P R F P T D K F P T S W T G S
1 5 10 15 20 25 30
C P G Q P H G T R A F C Q P G P E F N A F S A C
35 40 45 50
SEQ ID NO：214
序列长度：53氨基酸
L Q S F P K D A A S A F S T P R F P T D K F P T S W T G S C
1 5 10 15 20 25 30
P G Q P H G T R A F C Q P G P E F N A F S A C
35 40 45 50
SEQ ID NO：215
序列长度：38氨基酸
P S P R P Q S Q P P T Q V L P Q G C S L S L L H T T F P H R
1 5 10 15 20 25 30
Q V P H I L D W
35
SEQ ID NO：216
序列长度：39氨基酸
P S P R P Q S Q P P P T Q V L P Q G C S L S L L H T T F P H
1 5 10 15 20 25 30
R Q V P H I L D W
35
SEQ ID NO：217
序列长度：64氨基酸
P S P R P Q S Q P P P L Q S F P K D A A S A F S T P R F P T
1 5 10 15 20 25 30
D K F P T S W T G S C P G Q P H G T R A F C Q P G P E F N A
35 40 45 50 55 60
F S A C
SEQ ID NO：218
序列长度：63氨基酸
P S P R P Q S Q P P L Q S F P K D A A S A F S T P R F P T D
1 5 10 15 20 25 30
K F P T S W T G S C P G Q P H G T R A F C Q P G P E F N A F
35 40 45 50 55 60
S A C
SEQ ID NO：219
序列长度：30氨基酸
T A W P G R R R F T T P E P Y C L C T P L G P W A P R F L W
1 5 10 15 20 25 30
SEQ ID NO：220
序列长度：31氨基酸
P T A W P G R R R F T T P E P Y C L C T P L G P W A P R F L W
1 5 10 15 20 25 30
SEQ ID NO：221
序列长度：50氨基酸
P R P G P A G G A L L P R S L T A F V P H S G H G L P V S S
1 5 10 15 20 25 30
G E P A Y T P I P H D V P H G T P P F C
35 40 45 50
SEQ ID NO：222
序列长度：49氨基酸
R P G P A G G A L L P R S L T A F V P H S G H G L P V S S G
1 5 10 15 20 25 30
E P A Y T P I P H D V P H G T P P F C
35 40 45
SEQ ID NO：223
序列长度：39氨基酸
D L P A V P G P P T A W P G R R R F T T P E P Y C L C T P L
1 5 10 15 20 25 30
G P W A P R F L W
35
SEQ ID NO：224
序列长度：40氨基酸
D L P A V P G P P P T A W P G R R R F T T P E P Y C L C T P
1 5 10 15 20 25 30
L G P W A P R F L W
35 40
SEQ ID NO：225
序列长度：59氨基酸
D L P A V P G P P P R P G P A G G A L L P R S L T A F V P H
1 5 10 15 20 25 30
S G H G L P V S S G E P A Y T P I P H D V P H G T P P F C
35 40 45 50 55
SEQ ID NO：226
序列长度：58氨基酸
D L P A V P G P P R P G P A G G A L L P R S L T A F V P H S
1 5 10 15 20 25 30
G H G L P V S S G E P A Y T P I P H D V P H G T P P F C
35 40 45 50 55
SEQ ID NO：227
序列长度：8氨基酸
Q W G L S W M S
1 5
SEQ ID NO：228
序列长度：14氨基酸
N G D C H G C P E G R Q S L
1 5 10
SEQ ID NO：229
序列长度：17氨基酸
F T M D R V L T P Q W G L S W M S
1 5 10 15
SEQ ID NO：230
序列长度：18氨基酸
F T M D R V L T P P Q W G L S W M S
1 5 10 15
SEQ ID NO：231
序列长度：24氨基酸
F T M D R V L T P P N G D C H G C P E G R Q S L
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：232
序列长度：23氨基酸
F T M D R V L T P N G D C H G C P E G R Q S L
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：233
序列长度：115氨基酸
H H P A R Q C P H C I M H L Q T Q L I H R N L T G P S Q L T
1 5 10 15 20 25 30
S L H R S P Y Q I A A T P W T T D F A A S F F L N P V T P F
35 40 45 50 55 60
L L C R R C Q G K D V L C T N A R C L S Q T S P S H H K A L
65 70 75 80 85 90
S R T T T Q C M N T T P W L A V R P A K A F P L L
95 100 105 110 115
SEQ ID NO：234
序列长度：116氨基酸
P H H P A R Q C P H C I M H L Q T Q L I H R N L T G P S Q L
1 5 10 15 20 25 30
T S L H R S P Y Q I A A T P W T T D F A A S F F L N P V T P
35 40 45 50 55 60
F L L C R R C Q G K D V L C T N A R C L S Q T S P S H H K A
65 70 75 80 85 90
L S R T T T Q C M N T T P W L A V R P A K A F P L L
95 100 105 110 115
SEQ ID NO：235
序列长度：23氨基酸
H T I Q H A S V P T A S C I S K L N S Y T E N
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：236
序列长度：126氨基酸
P Q V G M R P S N P P H H P A R Q C P H C I M H L Q T Q L I
1 5 10 15 20 25 30
H R N L T G P S Q L T S L H R S P Y Q I A A T P W T T D F A
35 40 45 50 55 60
A S F F L N P V T P F L L C R R C Q G K D V L C T N A R C L
65 70 75 80 85 90
S Q T S P S H H K A L S R T T T Q C M N T T P W L A V R P A
95 100 105 110 115 120
K A F P L L
125
SEQ ID NO：237
序列长度：127氨基酸
P Q V G M R P S N P P P H H P A R Q C P H C I M H L Q T Q L
1 5 10 15 20 25 30
I H R N L T G P S Q L T S L H R S P Y Q I A A T P W T T D F
35 40 45 50 55 60
A A S F F L N P V T P F L L C R R C Q G K D V L C T N A R C
65 70 75 80 85 90
L S Q T S P S H H K A L S R T T T Q C M N T T P W L A V R P
95 100 105 110 115 120
A K A F P L L
125
SEQ ID NO：238
序列长度：34氨基酸
P Q V G M R P S N P P H T I Q H A S V P T A S C I S K L N S
1 5 10 15 20 25 30
Y T E N
SEQ ID NO：239
序列长度：33氨基酸
P Q V G M R P S N P H T I Q H A S V P T A S C I S K L N S Y
1 5 10 15 20 25 30
T E N
SEQ ID NO：240
序列长度：51氨基酸
W A A R S W C E R R A A A V A P L A P W A W G C P A G C T P
1 5 10 15 20 25 30
P V A A R A C A A T R P E G W R S P C T H
35 40 45 50
SEQ ID NO：241
序列长度：52氨基酸
P W A A R S W C E R R A A A V A P L A P W A W G C P A G C T
1 5 10 15 20 25 30
P P V A A R A C A A T R P E G W R S P C T H
35 40 45 50
SEQ ID NO：242
序列长度：74氨基酸
R G L R G A G A R G G L R L L R H L R P G L G D A L R G V H
1 5 10 15 20 25 30
P P L R L G P A L L P A P R G G E A P A H T D A R A R R V H
35 40 45 50 55 60
G A G G D R G H P G P A A L
65 70
SEQ ID NO：243
序列长度：61氨基酸
E E K L A R C R P P W A A R S W C E R R A A A V A P L A P W
1 5 10 15 20 25 30
A W G C P A G C T P P V A A R A C A A T R P E G W R S P C T H
35 40 45 50 55 60
SEQ ID NO：244
序列长度：62氨基酸
E E K L A R C R P P P W A A R S W C E R R A A A V A P L A P
1 5 10 15 20 25 30
W A W G C P A G C T P P V A A R A C A A T R P E G W R S P C T H
35 40 45 50 55 60
SEQ ID NO：245
序列长度：84氨基酸
E E K L A R C R P P R G L R G A G A R G G L R L L R H L R P
1 5 10 15 20 25 30
G L G D A L R G V H P P L R L G P A L L P A P R G G E A P A
35 40 45 50 55 60
H T D A R A R R V H G A G G D R G H P G P A A L
65 70 75 80
SEQ ID NO：246
序列长度：83氨基酸
E E K L A R C R P R G L R G A G A R G G L R L L R H L R P G
1 5 10 15 20 25 30
L G D A L R G V H P P L R L G P A L L P A P R G G E A P A H
35 40 45 50 55 60
T D A R A R R V H G A G G D R G H P G P A A L
65 70 75 80
SEQ ID NO：247
序列长度：163氨基酸
Q P P V S P R P R R P G R P R A P P P P Q P M V S P R R R T
1 5 10 15 20 25 30
T G P P W R P P P L Q S T M S P P P Q A L H Q A Q L L L W C
35 40 45 50 55 60
T T A P L P G L P Q P Q P A R A L H S Q F P A T T L I L L P
65 70 75 80 85 90
P L P A I A P R L M P V A L T I A R Y L L S P P P I T A L L
95 100 105 110 115 120
P S C L L G S L S F S C L F T F Q T S S L I P L W K I P A P
125 130 135 140 145 150
T T T K S C R E T F L K W
155 160
SEQ ID NO：248
序列长度：85氨基酸
S P G C H L G P G D Q A A P G L H R P P S P W C H L G A G Q
1 5 10 15 20 25 30
Q A R L G V H R P S S P Q C H L G L R L C I R L S F Y S G A
35 40 45 50 55 60
Q R H L C Q G Y H N P S Q Q E H S I L N S Q P P L
65 70 75 80 85
SEQ ID NO：249
序列长度：172氨基酸
K P A P G S T A P Q P P V S P R P R R P G R P R A P P P P Q
1 5 10 15 20 25 30
P M V S P R R R T T G P P W R P P P L Q S T M S P P P Q A L
35 40 45 50 55 60
H Q A Q L L L W C T T A P L P G L P Q P Q P A R A L H S Q F
65 70 75 80 85 90
P A T T L I L L P P L P A I A P R L M P V A L T I A R Y L L
95 100 105 110 115 120
S P P P I T A L L P S C L L G S L S F S C L F T F Q T S S L
125 130 135 140 145 150
I P L W K I P A P T T T K S C R E T F L K W
155 160 165 170
SEQ ID NO：250
序列长度：173氨基酸
K P A P G S T A P P Q P P V S P R P R R P G R P R A P P P P
1 5 10 15 20 25 30
Q P M V S P R R R T T G P P W R P P P L Q S T M S P P P Q A
35 40 45 50 55 60
L H Q A Q L L L W C T T A P L P G L P Q P Q P A R A L H S Q
65 70 75 80 85 90
F P A T T L I L L P P L P A I A P R L M P V A L T I A R Y L
95 100 105 110 115 120
L S P P P I T A L L P S C L L G S L S F S C L F T F Q T S S
125 130 135 140 145 150
L I P L W K I P A P T T T K S C R E T F L K W
155 160 165 170
SEQ ID NO：251
序列长度：65氨基酸
K P A P G S T A P P S P G C H L G P G D Q A A P G L H R P P
1 5 10 15 20 25 30
S P W C H L G A G Q Q A R L G V H R P S S P Q C H L G L R L
C I R L S F Y S G A Q R H L C Q G Y H N P S Q Q E H S I L N
35 40 45 50 55 60
S Q P P L
65
SEQ ID NO：252
序列长度：94氨基酸
K P A P G S T A P S P G C H L G P G D Q A A P G L H R P P S
1 5 10 15 20 25 30
P W C H L G A G Q Q A R L G V H R P S S P Q C H L G L R L C
35 40 45 50 55 60
I R L S F Y S G A Q R H L C Q G Y H N P S Q Q E H S I L N S
65 70 75 80 85 90
Q P P L
SEQ ID NO：253
序列长度：113氨基酸
Q P M V S P R R R T T G P P W R P P P L Q S T M S P P P Q A
1 5 10 15 20 25 30
L H Q A Q L L L W C T T A P L P G L P Q P Q P A R A L H S Q
35 40 45 50 55 60
F P A T T L I L L P P L P A I A P R L M P V A L T I A R Y L
65 70 75 80 85 90
L S P P P I T A L L P S C L L G S L S F S C L F T F Q T S S
L I P L W K I P A P T T T K S C R E T F L K W
95 100 105 110
SEQ ID NO：254
序列长度：65氨基酸
S P W C H L G A G Q Q A R L G V H R P S S P Q C H L G L R L
1 5 10 15 20 25 30
C I R L S F Y S G A Q R H L C Q G Y H N P S Q Q E H S I L N
35 40 45 50 55 60
S Q P P L
65
SEQ ID NO：255
序列长度：18氨基酸
R P P P G S T A P Q P M V S P R R R
1 5 10 15
SEQ ID NO：256
序列长度：19氨基酸
R P P P G S T A P P Q P M V S P R R R
1 5 10 15
SEQ ID NO：257
序列长度：18氨基酸
R P P P G S T A P P S P W C H L G A
1 5 10 15
SEQ ID NO：258
序列长度：17氨基酸
R P P P G S T A P S P W C H L G A
1 5 10 15
SEQ ID NO：259
序列长度：14氨基酸
R P R A P P P P S P W C H L
1 5 10
SEQ ID NO：260
序列长度：13氨基酸
R P R A P P P P P S P W C
1 5 10
SEQ ID NO：261
序列长度：16氨基酸
R P R A P P P P A H G V T S A P
1 5 10 15
SEQ ID NO：262
序列长度：13氨基酸
R P R A P P P P P A H G V
1 5 10
SEQ ID NO：263
序列长度：14氨基酸
A P G L H R P P Q P M V S P
1 5 10
SEQ ID NO：264
序列长度：15氨基酸
A A P G L H R P Q P M V S P R
1 5 10 15
SEQ ID NO：265
序列长度：13氨基酸
P G L H R P P P A H G V T
1 5 10
SEQ ID NO：266
序列长度：14氨基酸
A P G L H R P P A H G V T S
1 5 10
SEQ ID NO：267
序列长度：21氨基酸
V D R P Q H T E W L S W S N L Y R I R H Q
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：268
序列长度：10氨基酸
H Y L C T D V A P R
1 5 10
SEQ ID NO：269
序列长度：11氨基酸
H Y L C T D V A P P R
1 5 10
SEQ ID NO：270
序列长度：31氨基酸
H Y L C T D V A P P V D R P Q H T E W L S W S N L Y R I R H
1 5 10 15 20 25 30
Q
SEQ ID NO：271
序列长度：30氨基酸
H Y L C T D V A P V D R P Q H T E W L S W S N L Y R I R H Q
1 5 10 15 20 25 30
SEQ ID NO：272
序列长度：108氨基酸
S A Y L S P L G T T W L R T C A C R L P R P A A S C L C T T
1 5 10 15 20 25 30
P S L L W P R R T C P A G S P R A T S S P W R M P A P K S C
35 40 45 50 55 60
C T T G L A F T S P I G L G W R S A T A S G Y A R I W P V L
65 70 75 80 85 90
S L T C Q S W S T S L P S T A V T W
95 100 105
SEQ ID NO：273
序列长度：109氨基酸
P S A Y L S P L G T T W L R T C A C R L P R P A A S C L C T
1 5 10 15 20 25 30
T P S L L W P R R T C P A G S P R A T S S P W R M P A P K S
35 40 45 50 55 60
C C T T G L A F T S P I G L G W R S A T A S G Y A R I W P V
65 70 75 80 85 90
L S L T C Q S W S T S L P S T A V T W
95 100 105
SEQ ID NO：274
序列长度：12氨基酸
P A P I F L L W G P L G
1 5 10
SEQ ID NO：275
序列长度：11氨基酸
A P I F L L W G P L G
1 5 10
SEQ ID NO：276
序列长度：117氨基酸
L P A R A P G P P S A Y L S P L G T T W L R T C A C R L P R
1 5 10 15 20 25 30
P A A S C L C T T P S L L W P R R T C P A G S P R A T S S P
35 40 45 50 55 60
W R M P A P K S C C T T G L A F T S P I G L G W R S A T A S
65 70 75 80 85 90
G Y A R I W P V L S L T C Q S W S T S L P S T A V T W
95 100 105 110 115
SEQ ID NO：277
序列长度：118氨基酸
L P A R A P G P P P S A Y L S P L G T T W L R T C A C R L P
1 5 10 15 20 25 30
R P A A S C L C T T P S L L W P R R T C P A G S P R A T S S
35 40 45 50 55 60
P W R M P A P K S C C T T G L A F T S P I G L G W R S A T A
65 70 75 80 85 90
S G Y A R I W P V L S L T C Q S W S T S L P S T A V T W
95 100 105 110 115
SEQ ID NO：278
序列长度：21氨基酸
L P A R A P G P P P A P I F L L W G P L G
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：279
序列长度：20氨基酸
L P A R A P G P P A P I F L L W G P L G
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：280
序列长度：14氨基酸
D L E H H G G V T R H R H R
1 5 10
SEQ ID NO：281
序列长度：11氨基酸
L V S D Y S M T P R P
1 5 10
SEQ ID NO：282
序列长度：12氨基酸
L V S D Y S M T P P R P
1 5 10
SEQ ID NO：283
序列长度：24氨基酸
L V S D Y S M T P P D L E H H G G V T R H R H R
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：284
序列长度：23氨基酸
L V S D Y S M T P D L E H H G G V T R H R H R
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：285
序列长度：51氨基酸
F H H I A T D V G P F V R I G F L K I K G K I K G K S L R K
1 5 10 15 20 25 30
P N W K T Q H K L K R A L M F L I V K K L
35 40 45 50
SEQ ID NO：286
序列长度：52氨基酸
seq id no 286；
P F H H I A T D V G P F V R I G F L K I K G K I K G K S L R
1 5 10 15 20 25 30
K P N W K T Q H K L K R A L M F L I V K K L
35 40 45 50
SEQ ID NO：287
序列长度：12氨基酸
P S I T L Q Q M L A P S
1 5 10
SEQ ID NO：288
序列长度：11氨基酸
S I T L Q Q M L A P S
1 5 10
SEQ ID NO：289
序列长度：60氨基酸
T S C N E M N P P F H H I A T D V G P F V R I G F L K I K G
1 5 10 15 20 25 30
K I K G K S L R K P N W K T Q H K L K R A L M F L I V K K L
35 40 45 50 55 60
SEQ ID NO：290
序列长度：61氨基酸
T S C N E M N P P P F H H I A T D V G P F V R I G F L K I K
1 5 10 15 20 25 30
G K I K G K S L R K P N W K T Q H K L K R A L M F L I V K K
35 40 45 50 55 60
L
SEQ ID NO：291
序列长度：20氨基酸
T S C N E M N P P S I T L Q Q M L A P S
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：292
序列长度：21氨基酸
T S C N E M N P P P S I T L Q Q M L A P S
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：293
序列长度：10氨基酸
L E M I L F L M T F
1 5 10
SEQ ID NO：294
序列长度：18氨基酸
H P C I T K T F L E M I L F L M T F
1 5 10 15
SEQ ID NO：295
序列长度：19氨基酸
H P C I T K T F F L E M I L F L M T F
1 5 10 15
SEQ ID NO：296
序列长度：11氨基酸
H P C I T K T F F W R
1 5 10
SEQ ID NO：297
序列长度：10氨基酸
H P C I T K T F W R
1 5 10
SEQ ID NO：298
序列长度：22氨基酸
L M F E H S Q M R L N S K N A H L P I I S F
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：299
序列长度：30氨基酸
E Y G S I I A F L M F E H S Q M R L N S K N A H L P I I S F
1 5 10 15 20 25 30
SEQ ID NO：300
序列长度：31氨基酸
E Y G S I I A F F L M F E H S Q M R L N S K N A H L P I I S
1 5 10 15 20 25 30
F
SEQ ID NO：301
序列长度：15氨基酸
H L N K G R R L G D K I R A T
1 5 10 15
SEQ ID NO：302
序列长度：16氨基酸
F H L N K G R R L G D K I R A T
1 5 10 15
SEQ ID NO：303
序列长度：23氨基酸
V T S G T P F F H L N K G R R L G D K I R A T
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：304
序列长度：24氨基酸
V T S G T P F F F H L N K G R R L G D K I R A T
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：305
序列长度：10氨基酸
V T S G T P F F F I
1 5 10
SEQ ID NO：306
序列长度：9氨基酸
V T S G T P F F I
1 5
SEQ ID NO：307
序列长度：10氨基酸
C E I E R I H F F F
1 5 10
SEQ ID NO：308
序列长度：11氨基酸
C E I E R I H F F S K
1 5 10
SEQ ID NO：309
序列长度：10氨基酸
C E I E R I H F S K
1 5 10
SEQ ID NO：310
序列长度：8氨基酸
F R Y I S K S I
1 5
SEQ ID NO：311
序列长度：7氨基酸
R Y I S K S I
1 5
SEQ ID NO：312
序列长度：16氨基酸
F K K Y E P I F F R Y I S K S I
1 5 10 15
SEQ ID NO：313
序列长度：15氨基酸
F K K Y E P I F R Y I S K S I
1 5 10 15
SEQ ID NO：314
序列长度：56氨基酸
F P D S D Q P G P L Y P L D P S C L I S S A S N P Q E L S D
1 5 10 15 20 25 30
C H Y I H L A F G F S N W R S C P V L P G H C G V Q
35 40 45 50 55
SEQ ID NO：315
序列长度：55氨基酸
P D S D Q P G P L Y P L D P S C L I S S A S N P Q E L S D C
1 5 10 15 20 25 30
H Y I H L A F G F S N W R S C P V L P G H C G V Q
35 40 45 50 55
SEQ ID NO：316
序列长度：9氨基酸
L N M F A S V F S
1 5
SEQ ID NO：317
序列长度：10氨基酸
L N M F A S V F F S
1 5 10 15
SEQ ID NO：318
序列长度：64氨基酸
L N M F A S V F F P D S D Q P G P L Y P L D P S C L I S S A
1 5 10 15 20 25 30
S N P Q E L S D C H Y I H L A F G F S N W R S C P V L P G H
35 40 45 50 55 60
C G V Q
SEQ ID NO：319
序列长度：63氨基酸
L N M F A S V F P D S D Q P G P L Y P L D P S C L I S S A S
1 5 10 15 20 25 30
N P Q E L S D C H Y I H L A F G F S N W R S C P V L P G H C
35 40 45 50 55 60
G V Q
SEQ ID NO：320
序列长度：63氨基酸
A M E E T V V V A V A T V E T E V E A M E E T G V V A A M E
1 5 10 15 20 25 30
E T E V G A T E E T E V A M E A K W E E E T T T E M I S A T
35 40 45 50 55 60
D H T
SEQ ID NO：321
序列长度：55氨基酸
L W V R P W L W E W L R W R P K W R L W R R Q E W W R L W R
1 5 10 15 20 25 30
R P R W G L R R R P R W L W R E N G R K K R L Q K
35 40 45 50 55
SEQ ID NO：322
序列长度：71氨基酸
Y G G D R S R G A M E E T V V V A V A T V E T E V E A M E E
1 5 10 15 20 25 30
T G V V A A M E E T E V G A T E E T E V A M E A K W E E E T
35 40 45 50 55 60
T T E M I S A T D H T
65 70
SEQ ID NO：323
序列长度：72氨基酸
Y G G D R S R G G A M E E T V V V A V A T V E T E V E A M E
1 5 10 15 20 25 30
E T G V V A A M E E T E V G A T E E T E V A M E A K W E E E
35 40 45 50 55 60
T T T E M I S A T D H T
65 70
SEQ ID NO：324
序列长度：64氨基酸
Y G G D R S R G G L W V R P W L W E W L R W E P K W R L W R
1 5 10 15 20 25 30
R Q E W W R L W R R P R W G L R R R P R W L W R E N G R K K
35 40 45 50 55 60
R L Q K
SEQ ID NO：325
序列长度：63氨基酸
Y G G D R S R G L W V R P W L W E W L R W E P K W R L W R R
1 5 10 15 20 25 30
Q E W W R L W R R P R W G L R R R P R W L W R E N G R K K R
35 40 45 50 55 60
L Q K
SEQ ID NO：326
序列长度：9氨基酸
E F G G G R R Q K
1 5
SEQ ID NO：327
序列长度：8氨基酸
E F G G R R Q K
1 5
SEQ ID NO：328
序列长度：15氨基酸
R R A K G G G A G A S N P R Q
1 5 10 15
SEQ ID NO：329
序列长度：16氨基酸
G R R A K G G G A G A S N P R Q
1 5 10 15
SEQ ID NO：330
序列长度：21氨基酸
D V G L R E G A L E L P T R G N K R N V A
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：331
序列长度：24氨基酸
M R G G G G V G G R R A K G G G A G A S N P R Q
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：332
序列长度：25氨基酸
M R G G G G V G G G R R A K G G G A G A S N P R Q
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：333
序列长度：30氨基酸
M R G G G G V G G D V G L R E G A L E L P T R G N K R N V A
1 5 10 15 20 25 30
SEQ ID NO：334
序列长度：29氨基酸
M R G G G G V G D V G L R E G A L E L P T R G N K R N V A
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：335
序列长度：25氨基酸
V W Q L A G P M L A G W R S L G S W F C R M Y G I
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：336
序列长度：46氨基酸
C G S W P A L C W R A G G V W A V G S A G C M E Y D P E A L
1 5 10 15 20 25 30
P A A W G P A A A A T V H P R R
35 40 45
SEQ ID NO：337
序列长度：33氨基酸
R R Y P C E W G V W Q L A G P M L A G W R S L G S W F C R M
1 5 10 15 20 25 30
Y G I
SEQ ID NO：338
序列长度：34氨基酸
R R Y P C E W G G V W Q L A G P M L A G W R S L G S W F C R
1 5 10 15 20 25 30
M Y G I
SEQ ID NO：339
序列长度：55氨基酸
R R Y P C E W G G C G S W P A L C W R A G G V W A V G S A G
1 5 10 15 20 25 30
C M E Y D P E A L P A A W G P A A A A T V H P R R
35 40 45 50 55
SEQ ID NO：340
序列长度：54氨基酸
R R Y P C E W G C G S W P A L C W R A G G V W A V G S A G C
1 5 10 15 20 25 30
M E Y D P E A L P A A W G P A A A A T V H P R R
35 40 45 50
SEQ ID NO：341
序列长度：43氨基酸
L W L W A G W T V W W S C G P G E K G H G W P S L P T M A L
1 5 10 15 20 25 30
L L L R F S C M R V A S Y
35 40
SEQ ID NO：342
序列长度：44氨基酸
G L W L W A G W T V W W S C G P G E K G H G W P S L P T M A
1 5 10 15 20 25 30
L L L L R F S C M R V A S Y
35 40
SEQ ID NO：343
序列长度：84氨基酸
G C G C G P A G Q Y G G A V G L A R R G T A G C L P C P P W
1 5 10 15 20 25 30
L C C C C A F P A C G L P G T D G W R G W Q G S G C V R V S
35 40 45 50 55 60
G S A P W A P G F P F S P P C P L C G T Q P R W
65 70 75 80
SEQ ID NO：344
序列长度：83氨基酸
C G C G P A G Q Y G G A V G L A R R G T A G C L P C P P W L
1 5 10 15 20 25 30
C C C C A F P A C G L P G T D G W R G W Q G S G C V R V S G
35 40 45 50 55 60
S A P W A P G F P F S P P C P L C G T Q P R W
65 70 75 80
SEQ ID NO：345
序列长度：51氨基酸
L A F N V P G G L W L W A G W T V W W S C G P G E K G H G W
1 5 10 15 20 25 30
P S L P T M A L L L L R F S C M R V A S Y
35 40 45 50
SEQ ID NO：346
序列长度：52氨基酸
L A F N V P G G G L W L W A G W T V W W S C G P G E K G H G
1 5 10 15 20 25 30
W P S L P T M A L L L L R F S C M R V A S Y
35 40 45 50
SEQ ID NO：347
序列长度：92氨基酸
L A F N V P G G G C G C G P A G Q Y G G A V G L A R R G T A
1 5 10 15 20 25 30
G C L P C P P W L C C C C A F P A C G L P G T D G W R G W Q
35 40 45 50 55 60
G S G C V R V S G S A P W A P G F P F S P P C P L C G T Q P
65 70 75 80 85 90
R W
SEQ ID NO：348
序列长度：91氨基酸
L A F N V P G G C G C G P A G Q Y G G A V G L A R R G T A G
1 5 10 15 20 25 30
C L P C P P W L C C C C A F P A C G L P G T D G W R G W Q G
35 40 45 50 55 60
S G C V R V S G S A P W A P G F P F S P P C P L C G T Q P R
65 70 75 80 85 90
W
SEQ ID NO：349
序列长度：17氨基酸
P P M P M P G Q R E A P G R Q E A
1 5 10 15
SEQ ID NO：350
序列长度：18氨基酸
G P P M P M P G Q R E A P G R Q E A
1 5 10 15
SEQ ID NO：351
序列长度：24氨基酸
G H Q C Q C Q G K G R H R A D R R P D T A Q E E
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：352
序列长度：23氨基酸
H Q C Q C Q G K G R H R A D R R P D T A Q E E
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：353
序列长度：25氨基酸
G G H S Y G G G P P M P M P G Q R E A P G R Q E A
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：354
序列长度：26氨基酸
G G H S Y G G G G P P M P M P G Q R E A P G R Q E A
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：355
序列长度：32氨基酸
G G H S Y G G G G H Q C Q C Q G K G R H R A D R R P D T A Q
1 5 10 15 20 25 30
E E
SEQ ID NO：356
序列长度：31氨基酸
G G H S Y G G G H Q C Q C Q G K G R H R A D R R P D T A Q E
1 5 10 15 20 25 30
E
SEQ ID NO：357
序列长度：10氨基酸
A P C P Q S S G G G
1 5 10
SEQ ID NO：358
序列长度：17氨基酸
L P A P S Q A A A D E L D R R P G
1 5 10 15
SEQ ID NO：359
序列长度：18氨基酸
T K V R L I R G A P C P Q S S G G G
1 5 10 15
SEQ ID NO：360
序列长度：xx氨基酸
TKVRLIRGGAPCPQSSGGG
1 5 10
SEQ ID NO：361
序列长度：26氦基酸
T K V R L I R G G L P A P S Q A A A D E L D R R P G
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：362
序列长度：25氨基酸
T K V R L I R G L P A P S Q A A A D E L D R R P G
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：363
序列长度：45氨基酸
C S L A K D G S T E D T V S S L C G E E D T E D E E L E A A
1 5 10 15 20 25 30
A S H L N K D L Y R E L L G G
35 40 45
SEQ ID NO：364
序列长度：46氨基酸
G C S L A K D G S T E D T V S S L C G E E D T E D E E L E A
1 5 10 15 20 25 30
A A S H L N K D L Y R E L L G G
35 40 45
SEQ ID NO：365
序列长度：21氨基酸
A A A W Q K M A P P R T P R P A C V A R R
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：366
序列长度：54氨基酸
E N S R P K R G G C S L A K D G S T E D T V S S L C G E E D
1 5 10 15 20 25 30
T E D E E L E A A A S H L N K D L Y R E L L G G
35 40 45 50
SEQ ID NO：367
序列长度：55氨基酸
E N S R P K R G G G C S L A K D G S T E D T V S S L C G E E
1 5 10 15 20 25 30
D T E D E E L E A A A S H L N K D L Y R E L L G G
35 40 45 50 55
SEQ ID NO：368
序列长度：30氨基酸
E N S R P K R G G A A A W Q K M A P P R T P R P A C V A R R
1 5 10 15 20 25 30
SEQ ID NO：369
序列长度：29氨基酸
E N S R P K R G A A A W Q K M A P P R T P R P A C V A R R
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：370
序列长度：10氨基酸
H C V L A A S G A S
1 5 10
SEQ ID NO：371
序列长度：11氨基酸
G H C V L A A S G A S
1 5 10
SEQ ID NO：372
序列长度：28氨基酸
G T A S S R P L G L P K P H L H R P V P I R H P S C P K
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：373
序列长度：27氨基酸
T A S S R P L G L P K P H L H R P V P I R H P S C P K
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：374
序列长度：18氨基酸
A G T L Q L G G H C V L A A S G A S
1 5 10 15
SEQ ID NO：375
序列长度：19氨基酸
A G T L Q L G G G H C V L A A S G A S
1 5 10 15
SEQ ID NO：376
序列长度：35氨基酸
A G T L Q L G G T A S S R P L G L P K P H L H R P V P I R H
1 5 10 15 20 25 30
P S C P K
35SEQ ID NO：377
序列长度：36氨基酸
A G T L Q L G G G T A S S R P L G L P K P H L H R P V P I R
1 5 10 15 20 25 30
H P S C P K
35
SEQ ID NO：378
序列长度：9氨基酸
R R T P S T E K R
1 5
SEQ ID NO：379
序列长度：10氨基酸
R R T P S T E K K R
1 5 10
SEQ ID NO：380
序列长度：14氨基酸
R R T P S T E K K G R S E C
1 5 10
SEQ ID NO：381
序列长度：13氨基酸
R R T P S T E K G R S E C
1 5 10
SEQ ID NO：382
序列长度：46氨基酸
S T T K C Q S G T A E T Y N S W K V K N L Q L E P R R V T S
1 5 10 15 20 25 30
Q M N R Q V K D M T A I L S Q S
35 40 45
SEQ ID NO：383
序列长度：17氨基酸
V Q P N A S Q A Q Q K P T T H G R
1 5 10 15
SEQ ID NO：384
序列长度：54氨基酸
S S E E I K K K S T T K C Q S G T A E T Y N S W K V K N L Q
1 5 10 15 20 25 30
L E P R R V T S Q M N R Q V K D M T A I L S Q S
35 40 45 50
SEQ ID NO：385
序列长度：55氨基酸
S S E E I K K K K S T T K C Q S G T A E T Y N S W K V K N L
1 5 10 15 20 25 30
Q L E P R R V T S Q M N R Q V K D M T A I L S Q S
35 40 45 50 55
SEQ ID NO：386
序列长度：26氨基酸
S S E E I K K K K V Q P N A S Q A Q Q K P T T H G R
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：387
序列长度：xx氨基酸
S S E E I K K K V Q P N A S Q A Q Q K P T T H G R
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：388
序列长度：9氨基酸
N R G W V G A G E
1 5
SEQ ID NO：389
序列长度：4氨基酸
I E A G
SEQ ID NO：390
序列长度：17氨基酸
V H N Y C N M K N R G W V G A G E
1 5 10 15
SEQ ID NO：391
序列长度：18氨基酸
V H N Y C N M K K N R G W V G A G E
1 5 10 15
SEQ ID NO：392
序列长度：13氨基酸
V H N Y C N M K K I E A G
1 5 10
SEQ ID NO：393
序列长度：12氨基酸
V H N Y C N M K I E A G
1 5 10
SEQ ID NO：394
序列长度：25氨基酸
Q L R C W N T W A K M F F M V F L I I W Q N T M F
1 5 10 15 20 25
SEQ ID NO：395
序列长度：33氨基酸
V K K D N H K K Q L R C W N T W A K M F F M V F L I I W Q N
1 5 10 15 20 25 30
T M F
SEQ ID NO：396
序列长度：34氨基酸
V K K D N H K K K Q L R C W N T W A K M F F M V F L I I W Q
1 5 10 15 20 25 30
N T M F
SEQ ID NO：397
序列长度：11氨基酸
V K K D N H K K K N S
1 5 10
SEQ ID NO：398
序列长度：10氨基酸
V K K D N H K K N S
1 5 10
SEQ ID NO：399
序列长度：35氨基酸
G A E E S G P F N R Q V Q L K V H A S G M G R H L W N C P A
1 5 10 15 20 25 30
F W S E V
35
SEQ ID NO：400
序列长度：10氨基酸
H P S P P P E K R S
1 5 10
SEQ ID NO：401
序列长度：11氨基酸
H P S P P P E K K R S
1 5 10
SEQ ID NO：402
序列长度：44氨基酸
H P S P P P E K K G A E E S G P F N R Q V Q L K V H A S G M
1 5 10 15 20 25 30
G R H L W N C P A F W S E V
35 40
SEQ ID NO：403
序列长度：43氨基酸
H P S P P P E K G A E E S G P F N R Q V Q L K V H A S G M G
1 5 10 15 20 25 30
R H L W N C P A F W S E V
35 40
SEQ ID NO：404
序列长度：39氨基酸
M Q V L S K T H M N L F P Q V L L Q M F L R G L K R L L Q D
1 5 10 15 20 25 30
L E K S K K R K L
35
SEQ ID NO：405
序列长度：8氨基酸
R C K S A R L I
1 5
SEQ ID NO：406
序列长度：48氨基酸
V Q T Q P A I K K M Q V L S K T H M N L F P Q V L L Q M F L
1 5 10 15 20 25 30
R G L K R L L Q D L E K S K K R K L
35 40 45
SEQ ID NO：407
序列长度：49氨基酸
V Q T Q P A I K K K M Q V L S K T H M N L F P Q V L L Q M F
1 5 10 15 20 25 30
L R G L K R L L Q D L E K S K K R K L
35 40 45
SEQ ID NO：408
序列长度：17氨基酸
V Q T Q P A I K K R C K S A R L I
1 5 10 15
SEQ ID NO：409
序列长度：16氨基酸
V Q T Q P A I K R C K S A R L I
1 5 10 15
SEQ ID NO：410
序列长度：11氨基酸
A R S G K K Q K R K L
1 5 10
SEQ ID NO：411
序列长度：12氨基酸
A R S G K K Q K K R K L
1 5 10
SEQ ID NO：412
序列长度：13氨基酸
A R S G K K Q K K E N S F
1 5 10
SEQ ID NO：413
序列长度：12氨基酸
A R S G K K Q K E N S F
1 5 10
SEQ ID NO：414
序列长度：14氨基酸
K A S A R S G K S K K R K L
1 5 10
SEQ ID NO：415
序列长度：15氨基酸
K A S A R S G K K S K K R K L
1 5 10 15
SEQ ID NO：416
序列长度：16氨基酸
K A S A R S G K K A K K E N S F
1 5 10 15
SEQ ID NO：417
序列长度：15氨基酸
K A S A R S G K A K K E N S F
1 5 10 15
SEQ ID NO：418
序列长度：15氨基酸
H L N K G R R L G D K I R A T
1 5 10 15
SEQ ID NO：419
序列长度：23氨基酸
V T S G T P F F H L N K G R R L G D K I R A T
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：420
序列长度：24氨基酸
V T S G T P F F F H L N K G R R L G D K I R A T
1 5 10 15 20
SEQ ID NO：421
序列长度：10氨基酸
V T S G T P F F F I
1 5 10
SEQ ID NO：422
序列长度：9氨基酸
V T S G T P F F I
1 5
SEQ ID NO：423
序列长度：51氨基酸
V T L L Y V N T V T L A P N V N M E S S R N A H S P A T P S
1 5 10 15 20 25 30
A K R K D P D L T W G G F V F F F C Q F H
35 40 45 50
SEQ ID NO：424
序列长度：60氨基酸
K C R C K P N F F V T L L Y V N T V T L A P N V N M E S S R
1 5 10 15 20 25 30
N A H S P A T P S A K R K D P D L T W G G F V F F F C Q F H
35 40 45 50 65 60
SEQ ID NO：425
序列长度：61氨基酸
K C R C K P N F F F V T L L Y V N T V T L A P N V N M E S S
1 5 10 15 20 25 30
R N A H S P A T P S A K R K D P D L T W G G F V F F F C Q F
35 40 45 50 65 60
H
SEQ ID NO：426
序列长度：10氨基酸
K C R C K P N F F L
1 5 10
SEQ ID NO：427
序列长度：9氨基酸
K C R C K P N F L
1 5
SEQ ID NO：428
序列长度：9氨基酸
S L V R L S S C V
1 5
SEQ ID NO：429
序列长度：14氨基酸
L V K K L K E K K M N W I L
1 5 10
SEQ ID NO：430
序列长度：15氨基酸
L V K K L K E K K K M N W I L
1 5 10 15
SEQ ID NO：431
序列长度：10氨基酸
L V K K L K E K K R
1 5 10
SEQ ID NO：432
序列长度：9氨基酸
L V K K L K E K R
1 5
SEQ ID NO：433
序列长度：9氨基酸
A A I V K D C C R
1 5
SEQ ID NO：434
序列长度：11氨基酸
S Q P A S I L G R K L
1 5 10
SEQ ID NO：435
序列长度：12氨基酸
S Q P A S I L G K R K L
1 5 10 15
SEQ ID NO：436
序列长度：18氨基酸
S Q P A S I L G K A A I V K D C C R
1 5 10 15
SEQ ID NO：437
序列长度：17氨基酸
S Q P A S I L G A A I V K D C C R
1 5 10 15
SEQ ID NO：438
序列长度：18氨基酸
K S L V R L S S C V P V A L M S A M
1 5 10 15
SEQ ID NO：439
序列长度：9氨基酸
R L S S C V P V A
1 5
SEQ ID NO：440
序列长度：9氨基酸
V R L S S C V P V
1 5
SEQ ID NO：441
序列长度：9氨基酸
L V R L S S C V P
1 5
SEQ ID NO：442
序列长度：9氨基酸
S C V P V A L M S
1 5
SEQ ID NO：443
序列长度：9氨基酸
S S C V P V A L M
1 5
SEQ ID NO：444
序列长度：9氨基酸
L S S C V P V A L
1 5
SEQ ID NO：445
序列长度：9氨基酸
V P V A L M S A M
1 5
SEQ ID NO：446
序列长度：9氨基酸
C V P V A L M S A
1 5
SEQ ID NO：447
序列长度：9氨基酸
K K K S L V R L S
1 5
SEQ ID NO：448
序列长度：9氨基酸
E K K K S L V R L
1 5
SEQ ID NO：449
序列长度：9氨基酸
K E K K K S L V R
1 5
SEQ ID NO：450
序列长度：9氨基酸
M K E K K K S L V
1 5
SEQ ID NO：451
序列长度：9氨基酸
I M K E K K K S L
1 5
SEQ ID NO：452
序列长度：9氨基酸
K C I M K E K K A
1 5
SEQ ID NO：453
序列长度：9氨基酸
C I M K E K K A W
1 5
SEQ ID NO：454
序列长度：9氨基酸
C I M K E K K K A
1 5
SEQ ID NO：455
序列长度：9氨基酸
I M K E K K K A W
1 5
SEQ ID NO：456
序列长度：13氨基酸
H P S W P W T R C L R M R
1 5 10
SEQ ID NO：457
序列长度：14氨基酸
R H P S W P W T R C L R M R
1 5 10
SEQ ID NO：458
序列长度：16氨基酸
G A S G C V H Q E A E R V S Q A
1 5 10 15
SEQ ID NO：459
序列长度：20氨基酸
N T W A K M F F M V F L I I W Q N T M F
1 5 10 15 20
Claims (14)
1.一种来自TGF-β-RII基因移码突变的肽，它
a)长至少8个氨基酸，并是癌细胞基因移码突变产生的突变蛋白质的片段；和
b)包含所述基因编码蛋白质序列的突变部分的至少一个氨基酸；和
c)包含在突变序列的氨基端之前该蛋白质序列正常部分的羧基端的0-10个氨基酸，并可能进一步延伸至移码突变产生的新终止密码子确定的该蛋白质突变部分的羧基端；和
d)以其全长或由抗原呈递细胞加工后的形式诱导T细胞应答；
其特征在于，蛋白质突变部分具有选自序列标识号13-21和428序列的序列。
2.含有权利要求1中所述肽或权利要求1中所述突变蛋白质和药学上可接受的载体或稀释剂的药物组合物。
3.含有权利要求1中所述肽或权利要求1中所述突变蛋白质和药学上可接受的载体或稀释剂的癌疫苗。
4.根据权利要求1中所述肽或权利要求1中所述突变蛋白质在制备治疗或预防癌症的药物组合物中的应用。
5.含有至少一种权利要求1的肽或权利要求1中所述突变蛋白质和至少一种突变的p21-ras肽的药物组合物。
6.含有至少一种权利要求1的肽或权利要求1中所述突变蛋白质和至少一种突变的p21-ras肽的疫苗组合物。
7.编码作为权利要求1中所述片段的肽的分离的DNA序列。
8.根据权利要求7的分离的DNA序列，其编码序列选自如下的蛋白质的片段：seq.id.nos.13-21和seq.id.no.428。
9.权利要求7中所述的DNA序列或编码权利要求1中所述蛋白质的DNA序列在制备治疗或预防癌症的药物组合物中的应用。
10.含有权利要求7的DNA序列的载体。
11.根据权利要求10的载体，其为质粒或病毒。
12.根据权利要求11的载体，其中该载体是大肠杆菌质粒或李斯特杆菌属载体。
13.根据权利要求11的载体，其中该载体是正痘病毒、金丝雀病毒、山羊痘病毒、猪痘病毒、牛痘病毒、杆状病毒、人腺病毒、SV40或牛乳头瘤病毒。
14.权利要求10的载体或编码权利要求1中所述蛋白质的载体在制备治疗或预防癌症的药物组合物中的应用。
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110734474A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-01-31 | 中山大学 | 一种抗菌肽的筛选方法及其应用 |
Families Citing this family (64)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| GB2361701A (en) * | 2000-04-28 | 2001-10-31 | Norsk Hydro As | DNA polymerase delta mutants |
| GB0031430D0 (en) | 2000-12-22 | 2001-02-07 | Norsk Hydro As | Polypeptides |
| CA2471735A1 (en) * | 2001-08-29 | 2003-03-13 | Kyogo Itoh | Desensitizers |
| EP1369126A1 (en) * | 2002-04-18 | 2003-12-10 | MTM Laboratories AG | Use of coding microsatellite region frameshift mutation-derived peptides for treating cancer |
| AU2003232485A1 (en) | 2002-04-18 | 2003-10-27 | Mtm Laboratories Ag | Neopeptides and methods useful for detection and treatment of cancer |
| US20050221350A1 (en) * | 2002-05-29 | 2005-10-06 | Toni Weinschenk | Method for identifying immunoreactive peptides |
| US8343502B2 (en) * | 2002-12-16 | 2013-01-01 | Globeimmune, Inc. | Yeast-based vaccines as immunotherapy |
| ES2676503T3 (es) * | 2002-12-16 | 2018-07-20 | Globeimmune, Inc. | Vacunas basadas en levadura como inmunoterapia |
| US7439042B2 (en) * | 2002-12-16 | 2008-10-21 | Globeimmune, Inc. | Yeast-based therapeutic for chronic hepatitis C infection |
| WO2006029343A2 (en) * | 2004-09-07 | 2006-03-16 | The Burnham Institute | Peptides that selectively home to heart vasculature and related conjugates and methods |
| US7501486B2 (en) * | 2004-09-07 | 2009-03-10 | Burnham Institute For Medical Research | Peptides that selectively home to heart vasculature and related conjugates and methods |
| BRPI0516356A (pt) | 2004-10-18 | 2008-09-02 | Globeimmune Inc | terapia à base de levedura para infecções crÈnicas da hepatite c |
| CA2614884A1 (en) * | 2005-07-11 | 2007-01-18 | Globeimmune, Inc | Compositions and methods for eliciting an immune response to escape mutants of targeted therapies |
| US9732131B2 (en) | 2006-02-27 | 2017-08-15 | Calviri, Inc. | Identification and use of novopeptides for the treatment of cancer |
| US20090186042A1 (en) * | 2006-02-27 | 2009-07-23 | Arizona Board Of Regents For And On Behalf Of Arizona State University | Identification and use of novopeptides for the treatment of cancer |
| ES2709176T3 (es) | 2006-08-11 | 2019-04-15 | Life Sciences Res Partners Vzw | Péptidos inmunogénicos y su uso en trastornos inmunitarios |
| KR20100015661A (ko) * | 2007-03-19 | 2010-02-12 | 글로브이뮨 | 암의 표적 치료법의 돌연변이성 이탈의 표적 절제를 위한 조성물 및 방법 |
| US20080293050A1 (en) * | 2007-05-25 | 2008-11-27 | Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware | Gene analysis for determination of a treatment characteristic |
| EP2623115A1 (en) * | 2008-02-14 | 2013-08-07 | Life Sciences Research Partners VZW | Immunogenic control of tumours and tumour cells |
| EP3075391A1 (en) * | 2008-02-14 | 2016-10-05 | Life Sciences Research Partners VZW | Strategies to prevent and/or treat immune responses to soluble allofactors |
| EP2623124A1 (en) | 2008-02-14 | 2013-08-07 | Life Sciences Research Partners VZW | Elimination of immune responses to viral vectors |
| CA2715517C (en) * | 2008-02-14 | 2018-07-24 | Life Sciences Research Partners Vzw | Immunogenic peptides and their use in preventing or treating allograft rejection |
| ES2545886T3 (es) | 2008-02-14 | 2015-09-16 | Life Sciences Research Partners Vzw | Inmunoterapia dirigida a patógenos intracelulares |
| WO2009101207A1 (en) | 2008-02-14 | 2009-08-20 | Life Sciences Research Partners Vzw | Cd4+ t-cells with cytolytic properties |
| WO2010033841A1 (en) | 2008-09-19 | 2010-03-25 | Globeimmune, Inc. | Immunotherapy for chronic hepatitis c virus infection |
| GB0821616D0 (en) | 2008-11-26 | 2008-12-31 | Lytix Biopharma As | Compounds |
| KR20110136825A (ko) | 2009-03-09 | 2011-12-21 | 바이오아트라, 엘엘씨 | 미락 단백질 |
| US10023847B2 (en) | 2010-11-25 | 2018-07-17 | Imnate Sarl | Immunogenic peptides for use in the prevention and/or treatment of infectious diseases, autoimmune diseases, immune responses to allofactors, allergic diseases, tumors, graft rejection and immune responses against viral vectors used for gene therapy or gene vaccination |
| BR112014009176B1 (pt) * | 2011-10-28 | 2022-08-30 | Oncotherapy Science, Inc | Composição para indução de linfócito t citotóxico (ctl), uso no tratamento e profilaxia de câncer e indução de resposta imune contra câncer e métodos in vitro para indução de ctl |
| GB201201511D0 (en) | 2012-01-30 | 2012-03-14 | Univ Leuven Kath | Modified epitopes for boosting CD4+ T-cell responses |
| EP2834264A1 (en) * | 2012-04-04 | 2015-02-11 | Yeda Research and Development Co. Ltd. | Lipopeptide conjugates comprising sphingolipid and hiv gp41 derived peptides |
| JP5890769B2 (ja) * | 2012-12-13 | 2016-03-22 | ループレヒト−カルルス・ウニヴェルジテート・ハイデルベルクＲｕｐｒｅｃｈｔ−Ｋａｒｌｓ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｅｔ Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ | がんの予防及び治療のためのｍｓｉ特異的なフレームシフトペプチド（ｆｓｐ） |
| US9205140B2 (en) | 2012-12-13 | 2015-12-08 | Ruprecht-Karls-Universität | MSI-specific frameshift peptides (FSP) for prevention and treatment of cancer |
| GB201309469D0 (en) | 2013-05-28 | 2013-07-10 | Imcyse Sa | Detection of CD4+ T lymphocytes |
| GB201418433D0 (en) | 2014-10-17 | 2014-12-03 | Imcyse Sa | Novel immunogenic peptides |
| WO2016085904A1 (en) * | 2014-11-26 | 2016-06-02 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Anti-mutated kras t cell receptors |
| MA42420A (fr) | 2015-05-13 | 2018-05-23 | Agenus Inc | Vaccins pour le traitement et la prévention du cancer |
| US10729791B2 (en) | 2015-05-18 | 2020-08-04 | Imcyse Sa | Animal models for evaluating pharmaceutical compounds |
| JP2016028025A (ja) * | 2015-07-29 | 2016-02-25 | ループレヒト−カルルス・ウニヴェルジテート・ハイデルベルクＲｕｐｒｅｃｈｔ−Ｋａｒｌｓ−Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｅｔ Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ | がんの予防及び治療のためのｍｓｉ特異的なフレームシフトペプチド（ｆｓｐ） |
| CN108289941B (zh) | 2015-09-25 | 2022-06-21 | 易姆赛斯股份公司 | 用于消除对治疗剂的免疫应答的改进的方法和化合物 |
| AU2016340763B2 (en) * | 2015-10-23 | 2021-04-22 | Jai Prakash | Integrin binding peptides and uses thereof |
| EP3400004A1 (en) | 2016-01-08 | 2018-11-14 | Vaccibody AS | Therapeutic anticancer neoepitope vaccine |
| EP3779447B1 (en) * | 2016-03-15 | 2023-02-08 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Method to activate the anti-tumoral cd8+t cell response of a patient affected with a cancer |
| CN109069605B (zh) | 2016-04-19 | 2022-11-29 | 易姆赛斯股份公司 | 新免疫原性CD1d结合肽 |
| GB201608052D0 (en) * | 2016-05-09 | 2016-06-22 | Univ Oslo Hf | T-cell receptors which recognise frameshift mutants of TGF-beta RII |
| WO2018039302A1 (en) * | 2016-08-23 | 2018-03-01 | The Cleveland Clinic Foundation | Cancer treatment using cx26 blocking peptides |
| WO2018157773A1 (zh) * | 2017-02-28 | 2018-09-07 | 暨南大学 | 一种促进创伤后组织修复与再生的修复肽及其应用 |
| CN108503690B (zh) * | 2017-02-28 | 2020-07-03 | 暨南大学 | 一种促进创伤后组织修复与再生的修复肽及其应用 |
| WO2018223092A1 (en) | 2017-06-02 | 2018-12-06 | Arizona Board Of Regents On Behalf Of Arizona State University | A method to create personalized cancer vaccines |
| US12025615B2 (en) | 2017-09-15 | 2024-07-02 | Arizona Board Of Regents On Behalf Of Arizona State University | Methods of classifying response to immunotherapy for cancer |
| MA52363A (fr) | 2018-04-26 | 2021-03-03 | Agenus Inc | Compositions peptidiques de liaison à une protéine de choc thermique (hsp) et leurs méthodes d'utilisation |
| WO2020022901A1 (en) | 2018-07-26 | 2020-01-30 | Frame Pharmaceuticals B.V. | Cancer vaccines for uterine cancer |
| CA3106564A1 (en) | 2018-07-26 | 2020-01-30 | Frame Pharmaceuticals B.V. | Cancer vaccines for breast cancer |
| EP3827265A1 (en) | 2018-07-26 | 2021-06-02 | Frame Pharmaceuticals B.V. | Cancer vaccines for kidney cancer |
| EP3827264A1 (en) | 2018-07-26 | 2021-06-02 | Frame Pharmaceuticals B.V. | Arid1a, cdkn2a, kmt2b, kmt2d, tp53 and pten vaccines for cancer |
| WO2020022902A1 (en) | 2018-07-26 | 2020-01-30 | Frame Pharmaceuticals B.V. | Cancer vaccines for colorectal cancer |
| PL3840767T3 (pl) * | 2019-05-29 | 2024-03-04 | Hubro Therapeutics As | Peptydy |
| WO2021067550A1 (en) | 2019-10-02 | 2021-04-08 | Arizona Board Of Regents On Behalf Of Arizona State University | Methods and compositions for identifying neoantigens for use in treating and preventing cancer |
| CN113061165A (zh) * | 2020-01-02 | 2021-07-02 | 厦门大学 | EB病毒BNLF2b基因编码多肽及其检测用途 |
| WO2021142007A1 (en) * | 2020-01-09 | 2021-07-15 | Arizona Board Of Regents On Behalf Of Arizona State University | Antibodies and method of producing antibodies |
| WO2021239980A2 (en) * | 2020-05-28 | 2021-12-02 | Hubro Therapeutics As | A peptide cocktail |
| WO2024052542A2 (en) * | 2022-09-09 | 2024-03-14 | Hubro Therapeutics As | A peptide cocktail |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996018409A1 (en) * | 1994-12-14 | 1996-06-20 | The Scripps Research Institute | In vivo activation of tumor-specific cytotoxic t cells |
Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB9103974D0 (en) | 1991-02-26 | 1991-04-10 | Norsk Hydro As | Therapeutically useful peptides or peptide fragments |
| US5700638A (en) * | 1993-08-26 | 1997-12-23 | Washington University | Cell death regulator |
| GB9410922D0 (en) | 1994-06-01 | 1994-07-20 | Townsend Alain R M | Vaccines |
| US5866323A (en) * | 1995-04-07 | 1999-02-02 | Case Western Reserve University | Cancer diagnosis prognosis and therapy based on mutation of receptors for transforming growth factor β and homologous growth controlling factors |
| WO1997012992A2 (en) | 1995-10-02 | 1997-04-10 | Royal Netherlands Academy Of Arts And Sciences | Diagnosis method for a disease caused by a frameshift mutation in a gene and reagents therefore |
| US5973018A (en) * | 1995-10-04 | 1999-10-26 | Owens-Corning Fiberglas Technology, Inc. | Process for producing shaped phenolic foams |
| US5840839A (en) | 1996-02-09 | 1998-11-24 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Alternative open reading frame DNA of a normal gene and a novel human cancer antigen encoded therein |
| AU4907797A (en) | 1996-10-10 | 1998-05-05 | Wistar Institute Of Anatomy And Biology, The | Methods and compositions for inducing a protective immune response to cancers |
| GB2328689A (en) * | 1997-08-27 | 1999-03-03 | Norsk Hydro As | Peptides based on the p21 ras proto-oncogene protein for the treatment of cancer |
| NO314086B1 (no) * | 1998-05-08 | 2003-01-27 | Gemvax As | Peptider og farmasöytiske sammensetninger inneholdende disse, nukleinsyresekvenser som koder for slike peptider, plasmider og virusvektoreromfattende slike DNA-sekvenser samt anvendelse av disse for fremstilling avfarmasöytiske preparater til |
| NO315238B1 (no) * | 1998-05-08 | 2003-08-04 | Gemvax As | Peptider som stammer fra leserammeforskyvingsmutasjoner i TBF<beta>II- eller BAX-genet, og farmasöytiske sammensetninger inneholdende disse,nukleinsyresekvenser som koder for slike peptider, plasmider og virusvektoreromfattende slikenukleinsy |
| GB0031430D0 (en) * | 2000-12-22 | 2001-02-07 | Norsk Hydro As | Polypeptides |
-
1998
- 1998-05-08 NO NO19982097A patent/NO315238B1/no not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-05-03 AU AU54516/99A patent/AU755712B2/en not_active Expired
- 1999-05-03 WO PCT/NO1999/000143 patent/WO1999058552A2/en active IP Right Grant
- 1999-05-03 CA CA2327549A patent/CA2327549C/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-05-03 PL PL99344341A patent/PL344341A1/xx not_active Application Discontinuation
- 1999-05-03 JP JP2000548356A patent/JP4591983B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1999-05-03 EP EP10183767.2A patent/EP2374814B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-05-03 HU HU0101432A patent/HUP0101432A3/hu active IP Right Revival
- 1999-05-03 EP EP99940722.4A patent/EP1078000B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-05-03 CN CNB998073555A patent/CN100355781C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1999-05-03 US US09/674,973 patent/US6759046B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-05-03 ES ES10183767.2T patent/ES2463825T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-05-10 AR ARP990102199A patent/AR018346A1/es unknown
-
2001
- 2001-11-08 HK HK01107827A patent/HK1036997A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2004
- 2004-02-12 US US10/776,224 patent/US7192927B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2006
- 2006-08-03 US US11/498,194 patent/US7863244B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2011
- 2011-01-03 US US12/983,510 patent/US8614177B2/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996018409A1 (en) * | 1994-12-14 | 1996-06-20 | The Scripps Research Institute | In vivo activation of tumor-specific cytotoxic t cells |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110734474A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-01-31 | 中山大学 | 一种抗菌肽的筛选方法及其应用 |
| CN110734474B (zh) * | 2019-11-29 | 2021-10-19 | 中山大学 | 一种抗菌肽的筛选方法及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP1078000A2 (en) | 2001-02-28 |
| ES2463825T3 (es) | 2014-05-29 |
| HK1036997A1 (en) | 2002-01-25 |
| JP4591983B2 (ja) | 2010-12-01 |
| WO1999058552A3 (en) | 2000-03-02 |
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| AR018346A1 (es) | 2001-11-14 |
| EP1078000B1 (en) | 2017-03-29 |
| CN1305495A (zh) | 2001-07-25 |
| WO1999058552A2 (en) | 1999-11-18 |
| NO982097L (no) | 1999-11-09 |
| EP2374814A2 (en) | 2011-10-12 |
| CA2327549C (en) | 2014-10-07 |
| NO315238B1 (no) | 2003-08-04 |
| US20050074849A1 (en) | 2005-04-07 |
| JP2002519999A (ja) | 2002-07-09 |
| CA2327549A1 (en) | 1999-11-18 |
| AU755712B2 (en) | 2002-12-19 |
| EP2374814A3 (en) | 2012-01-11 |
| NO982097D0 (no) | 1998-05-08 |
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| US7192927B2 (en) | 2007-03-20 |
| US20110105721A1 (en) | 2011-05-05 |
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