CN100341899C

CN100341899C - 新的壳聚糖衍生物、其制法及其用于制备眼科制剂的用途

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Publication number: CN100341899C
Application number: CNB2005100951332A
Authority: CN
Inventors: 平其能; 张灿; 曹艳霞; 汤晓燕
Original assignee: China Pharmaceutical University
Current assignee: Hydron Contact Lens Co., Ltd.
Priority date: 2005-11-01
Filing date: 2005-11-01
Publication date: 2007-10-10
Anticipated expiration: 2025-11-01
Also published as: CN1760212A

Abstract

本发明涉及高分子化学领域及药物制剂领域，具体涉及一种新的温度敏感型壳聚糖衍生物(Ⅰ)。它作为新的药用辅料添加到眼科药物中，当在常温下药物是滴眼液，当滴入眼部后，药液迅速转变成凝胶，这样可以增加药物在角膜的滞留时间，延长药物作用时间而达到缓释长效的目的。为临床上治疗眼科疾病，提供了一个安全有效的药物载体。本发明还公开了该新的温度敏感型壳聚糖衍生物的制备方法、及含该温度敏感型壳聚糖衍生物的眼用组合物。

Description

新的壳聚糖衍生物、其制法及其用于制备眼科制剂的用途

技术领域

本发明涉及高分子化学领域及药物制剂领域，具体涉及一种新的温度敏感型壳聚糖衍生物。本发明还公开了该新的温度敏感型壳聚糖衍生物的制备方法、用于眼科制剂的用途及含该温度敏感型壳聚糖衍生物的眼用组合物。

背景技术

壳聚糖是可生物降解和具有生物相容性的天然聚合物，来源广泛、价格便宜、安全无毒。由于壳聚糖具有优良的成膜性和增粘性能，CN02110501.4A公开了壳聚糖用于隐性眼镜药水及作为润眼液的用途，CN02122397.1A公开了壳聚糖作为人工泪液用于治疗干眼病的用途。由于壳聚糖不能溶解在水和有机溶剂中，只能溶于弱酸溶液，因此大大限制了它的应用。CN02129937.4公开了将壳聚糖改性成水溶性的壳聚糖衍生物，再制备滴眼液治疗干眼病，但这种滴眼液对环境温度无智能响应性。

聚(N-异丙基丙烯酰胺)(PNIPAAm)对环境温度具有很强的敏感性，在水中低温为溶液状态，高温为凝胶状态，敏感温度为32℃。文献报道的制备方法有两种：方法一，将N-异丙基丙烯酰胺在过硫酸钾(KPS)的作用下，通过自由基聚合，接枝到壳聚糖或羧甲基壳聚糖的2-NH₂上(S.G.Gholap；M.V.Badiger.Synthesis and Characterization of Polyamphoteric HydrogelMembrane Based on Chitosan.Journal of Applied Polymer Science.2004，93，1454-1461.张胜兰，沈新元，杨庆热敏性壳聚糖-g-N-异丙基丙烯酰胺的制备及表征化学世界，2000；182。郑静，王俊卿，苏致兴壳聚糖与N-异丙基丙烯酰胺接枝共聚应用化学，12，2003，1204-1207)。用此方法制备出的结构式见III和IV。方法二，壳聚糖在引发剂硝酸铈铵(CAN)作用下发生开环，将N-异丙基丙烯酰胺再接枝到壳聚糖的3-C上(Kim，So Yeon；Cho，Sung Min；Lee，YoungMoo；Kim.Seon Jeong.Thermo-and pH-responsive behaviors of graft copolymer and blend basedon chitosan and N-isopropylacrylamide.Journal of Applied Polymer Science，2000，78，1381-139l。J.W.Lee；M.C.Jung；H.D.Park；K.D.Park；G.H.Ryu.Synthesis and characterization ofthermosensitive chitosan copolymer as a novel biomaterial.J.Biomater.Sci.Polymer Edn，2004；15(8)：1065-1079)，用此方法制备的结构式见V。由于这些方法都是在催化剂的作用下直接将N-异丙基丙烯酰胺单体接枝到壳聚糖上，产物中存在较多的均聚物聚异丙基丙烯酰胺副产物，影响产率。

发明内容

本发明公开了一种新的壳聚糖衍生物，其含有温度敏感基团聚(N-异丙基丙烯酰胺)，结构见I，其具备III、IV、V的温度敏感特性，而制备方法比III、IV、V要简单得多，适合工业化大生产。

本课题组在对温度敏感型壳聚糖衍生物的研究中发现，将N-异丙基丙烯酰胺先聚合，制得聚(N-异丙基丙烯酰胺)的羧酸衍生物，然后其-COOH与壳聚糖的2-NH₂反应，制备得到接枝共聚物。这样制备得到结构为I的壳聚糖衍生物，与现有技术中报道的用方法一和方法二制备得到的聚(N-异丙基丙烯酰胺)的结构不同，为一新型结构：

该新型结构的壳聚糖衍生物制备方法简单、副产物少，并且可根据反应条件制得不同取代度的温敏性壳聚糖衍生物，同时使壳聚糖具有水溶性及对温度的敏感等特性。

本发明的壳聚糖衍生物I平均分子量为3万-800万，聚(N-异丙基丙烯酰胺)的取代度为0.08-0.52。

本发明结构式为I的壳聚糖衍生物可以用以下方法制备得到：

a、聚(N-异丙基丙烯酰胺)的羧酸衍生物(II)的合成

甲醇或乙醇溶液，在惰性气体保护下升温至65-75℃，缓慢加入N-异丙基丙烯酰胺、偶氮双异丁腈和3-巯基丙酸在65-75℃下搅拌10-48h，蒸去溶剂，混合物用丙酮或者乙醚溶解，滴加石油醚或者正己烷，沉淀物过滤，制得II；

b、聚(N-异丙基丙烯酰胺)壳聚糖(I)的合成

壳聚糖溶解于1-10％盐酸或乙酸中，加入a制得的II的水溶液，二环己基碳二亚胺或1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺和四甲基乙二胺溶液滴入上述反应液中，搅拌，室温反应48-96h，过滤，滤液透析2-4d，过滤，滤去水不溶物，干燥，得结构式I的壳聚糖衍生物。作为原料的壳聚糖比较适合的粘均分子量为20,000-100,000，脱乙酰度90％以上。更为优选的制备方法为：

a、甲醇溶液在氮气或氩气保护下升温至70℃，缓慢加入N-异丙基丙烯酰胺、偶氮双异丁腈和3-巯基丙酸在70℃下搅拌22-26小时，蒸去溶剂，混合物用丙酮溶解，滴加正己烷，沉淀物过滤，制得II；

b、壳聚糖溶解于1％-10％盐酸或乙酸中，搅拌下，加入a制得的II的水溶液，二环己基碳二亚胺或1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺和少量四甲基乙二胺溶液滴入上述反应液中，室温反应70-74h，过滤，滤液透析2-4d，过滤，滤去水不溶物，冷冻干燥，即得。

本发明的温度敏感型壳聚糖衍生物相转变温度(LCST)为32℃，接近人体表面体温，共聚物在温度低于LCST时，溶液澄清透明。温度高于LCST时，共聚物上的支链发生相变由液态转变为凝胶态。发明人首次将其用作眼部给药的载体，发现其可用作眼用原位凝胶材料，它具有良好的生物相容性、刺激小，常温下它为液态，当滴入眼部后，可以迅速转变成为凝胶，因此，如果将它作为新的药用辅料添加到眼科药物中，当在常温下药物是滴眼液，当滴入眼部后，药液迅速转变成凝胶，这样可以增加药物在角膜的滞留时间，延长药物作用时间而达到缓释长效的目的。为临床上治疗眼科疾病，提供了一个安全有效的药物载体。

本发明还公开了一种滴眼液组合物，其特征是含有治疗有效量的眼用药物及本发明的壳聚糖衍生物I。由于其在室温下是液体，当滴入眼睛后即成凝胶，因此，也称这种滴眼液为原位凝胶滴眼液。

上述原位凝胶滴眼液中所述的眼科药物优选马来酸噻吗洛尔、阿昔洛韦、红霉素、利福平、硫酸庆大霉素、氯霉素、羟苄唑、碘苷、环丙沙星、磺胺醋酰钠、利巴韦林、诺氟沙星、妥布霉素、氧氟沙星、硝酸毛果芸香碱、盐酸卡替洛尔、盐酸地匹福林、盐酸可乐定、醋酸可的松、地塞米松磷酸钠或氟甲松龙。

在本发明的原位凝胶滴眼液组合物，壳聚糖衍生物I优选的含量为0.01-0.5％，为重量体积百分比。试验证明，当滴眼液中壳聚糖衍生物I的含量低于0.01％时，滴入眼睛时就不容易形成凝胶膜；而当壳聚糖衍生物I的含量高于0.5％时，则形成的凝胶会影响眼睛的透明度，因此，优选0.01-0.5％。

本发明还公开了马来酸噻吗洛尔的原位凝胶滴眼液组合物，它主要含0.25％-0.5％重量百分比的马来酸噻吗洛尔和0.01％-0.04％重量百分比的本发明壳聚糖衍生物I。更为优选的滴眼液组合物的组成为：

马来酸噻吗洛尔：0.25-0.5％

壳聚糖衍生物I：0.01-0.1％

氯化钠：0-0.9％

抑菌剂：0.001％-0.05％

余量为水均为重量体积百分比。

其中抑菌剂是苯扎溴铵、对羟苯基甲基酯或对羟苯基乙基酯。选用苯扎溴铵时，最优选的重量体积百分比为0.01％。其它两个抑菌剂更优选的重量体积比为0.02％-0.05％。

上述配方中，氯化钠起着等渗作用，当药物及辅料在一定浓度下溶液已达到等渗时，则不需添加等渗剂，如果未达等渗，则添加至等渗。

经局部刺激性试验发现，本发明的壳聚糖衍生物作为辅料用于眼部给药后，对眼睛无任何刺激反应。药效实验结果证明：加了本发明的壳聚糖衍生物I的原位凝胶药物与普通滴眼液相比，在同样剂量下，本发明的原位凝胶药物组合物比普通滴眼液不仅起效快，并且维持药效的时间长。

下面是部分动物试验及数据：

一.温度敏感凝胶局部刺激性试验

1.单次用药眼刺激试验

1.1兔眼刺激性试验目的：

观察动物眼睛单次接触温度敏感凝胶溶液后产生的刺激反应。

1.2试验动物：

取健康家兔6只，体重2.0-2.5kg，雌雄各半，受试动物眼睛保证无任何炎性反应和眼损伤。

1.3受试物：

壳聚糖温度敏感凝胶溶液(0.04％(W/V))，试验时直接滴入试验动物眼内，每次一滴。

1.4试验方法：

采用同体自身对照的方法，选6只家兔，用药前观察并记录各家兔角膜、虹膜及结膜等情况，已有病变或炎症者，剔除不用。试验中，左眼滴入壳聚糖温度敏感凝胶溶液1滴，右眼0.9％生理盐水1滴作对照，滴入后使眼睛被动闭合10s，观察2、4、6、8、24、48、96h眼睛局部反应情况。

1.5判断标准及试验结果：

按参考文献(新药(西药)临床前研究指导原则汇编(药学、药理学、毒理)，中华人民共和国卫生部药政局编，1993：208-209)中眼刺激性评价标准进行评分。

1.6试验结果：

温度敏感壳聚糖凝胶溶液单次给药后在2、4、6、8、24、48、96h，眼刺激积分与对照相比没有显著差异，各观察点眼刺激反应积分为0分。

1.7试验结论：

单次给温度敏感壳聚糖凝胶溶液后，眼部刺激反应积分与对照眼相比均无明显差异，且各兔、各时间点眼刺激反应积分均为0分。温度敏感壳聚糖作为眼用凝胶基质单次用药对眼无刺激性。

2.多次给药眼刺激试验

2.1兔眼刺激性试验目的：

观察动物眼睛多次接触温度敏感凝胶溶液后产生的刺激反应情况。

2.2试验动物：

取健康家兔2只，体重2.0-2.5kg，雌雄各半，受试动物眼睛保证无任何炎性反应和眼损伤。

2.3受试物：

壳聚糖温度敏感凝胶溶液(0.04％(W/V))，试验时直接滴入试验动物眼中。

2.4试验方法：

采用同体自身对照的方法，选2只家兔，用药前观察并记录各家兔角膜、虹膜及结膜等情况，已有病变或炎症者，剔除不用。试验中，左眼滴入壳聚糖温度敏感凝胶溶液1滴，右眼0.9％生理盐水1滴作对照，滴入后使眼睛被动闭合10s，每日给受试物两次，连续7d，用药期间每日观察两次局部反应情况，将两次分值平均，作为该日分值。

2.5判断标准及试验结果：

(1)判断标准：同1.5。

(2)试验结果：温度敏感壳聚糖凝胶溶液多次给药刺激积分各时间点均为0分。

2.6结论：

兔眼连续滴加温度敏感壳聚糖凝胶溶液7d，并且连续观察开始滴加后7d内的眼部情况，眼部刺激反应积分与对照眼相比没有显著变化，并且兔眼各时间点眼部刺激反应积分均为0分。温度敏感凝胶溶液在多次给兔眼后没有眼部刺激性。

二.兔眼滞留时间试验

1试验目的：

选用荧光素作为显色材料，观察温度敏感壳聚糖眼用凝胶与水溶液在动物眼内滞留时间的差异情况。

2试验动物

成年健康家兔6只，体重2.0-2.5kg，雌雄各半，受试动物眼睛无任何炎性反应和眼损伤。

3材料

荧光素钠温度敏感壳聚糖凝胶溶液；荧光素钠水溶液。

称取温度敏感壳聚糖0.02g溶解在50ml的注射用水中，均匀分散后，缓慢加入荧光素钠溶液2ml，制备成为荧光素钠温度敏感壳聚糖凝胶溶液，待用；

量取50ml注射用水，滴加荧光素钠2ml溶液待用，制备成荧光素钠水溶液，待用。

4仪器

UV-I型多功能三用紫外分析仪(上海禾汽化工科技有限公司)；BS110S电子分析天平(北京塞多利斯天平有限公司)

5试验方法：

选用健康家兔6只，试验时将各兔固定头部，提起下眼睑，把结膜囊拉成环状，右眼滴入荧光素钠凝胶2d，左眼滴入荧光素钠溶液2d作为对照，被动关闭30s，放置后观察显色及消褪时间。

6判断标准及试验结果：

荧光素钠在365nm紫外线照射下有明显的黄色荧光，给药后观察兔眼角膜、结膜和结膜囊中荧光滞留时间。结果分析时以在兔眼内三个部位肉眼能够观察到荧光的最长时间为标准。

观察中发现，荧光素钠溶液在兔眼角膜上难以停留，一般给药后10min后荧光即全部消失。

荧光素钠温度敏感凝胶在角膜、结膜、结膜囊内都可以形成持久的凝胶膜，在紫外灯下明显看到兔眼表面有黄色荧光，随时间延长，荧光强度虽然减弱，但是肉眼仍然可以长时间观测到荧光。

结果如图1表明，荧光素钠水溶液在兔眼的平均滞留时间为6min(n＝6)，荧光素钠温度敏感凝胶在兔眼的平均滞留时间114min(n＝6)。温度敏感凝胶在兔眼内的平均滞留时间和水溶液中的平均滞留时间相比，两者有显著的差异(p＜0.01)。

7实验结论：

兔眼滞留时间试验结果说明原位凝胶当滴入眼部后，迅速转变成凝胶，粘度增加，延长了在角膜的滞留时间。

三.对试验型兔高眼压模型的影响

1.试验目的：

马来酸噻吗洛尔原位凝胶滴眼液药效学研究。本试验以家兔为模型动物，通过α-糜蛋白酶诱发的青光眼兔模型，考察马来酸噻吗洛尔原位凝胶滴眼液的初步药效。

2.试验动物和仪器：

Tonometer压陷式眼压计(苏州医疗器械厂)，实施例3制得的马来酸噻吗洛尔原位凝胶滴眼液，市售普通马来酸噻吗洛尔滴眼液(25mg:5ml)，α-糜蛋白酶(北京化学试剂公司)

新西兰白兔4只，体重2-3kg、健康、无眼疾，雌雄兼用，连续测量3d眼压正常且稳定。

3.动物模型：

家兔以戊巴比妥钠麻醉后固定于兔台上，再用针管沿角膜上缘插人眼前房，注入0.5ml等渗α-糜蛋白酶溶液(含15ulα-糜蛋白酶)，2-7日内测定眼压变化情况，当连续3日达到50mmHg以上时，即建模成功。

4.给药后眼压测定：

选用建模成功患有青光眼的家兔4只，将头部固定好后，提起下眼睑，结膜囊拉成环状，右眼滴入普通马来酸噻吗洛尔滴眼液2滴，左眼滴入实施例3制备的马来酸噻吗洛尔原位凝胶滴眼液2滴作为对照，眼睛被动关闭30s，滴眼后，分别在0、0.5、1、2、4、5、6、8、10、12、24h测定眼压，各时刻的眼压下降值用ΔIOP表示：ΔIOP＝(IOP)t-(IOP)t₀，式中(ΔIOP)为t时间内的眼压下降值，(IOP)t为t时间的眼压实测值，(IOP)t₀为0时间点眼压实测值。

5.试验结果：

马来酸噻吗洛尔原位凝胶滴眼液与马来酸噻吗洛尔滴眼液对慢性眼高压模型的降眼压作用的4组实验结果如图3表明，普通滴眼液在4h左右达到最大降压值2.4kpa，而温度敏感凝胶溶液在2h达到最大降压值3.4kpa，对数据进行t-text和3p87统计分析，马来酸噻吗洛尔原位凝胶滴眼液和马来酸噻吗洛尔滴眼液的曲线下面积AUC和平均滞留时间t_MRT有显著性变化，p＜0.05具有显著性差异。

6结论：

药效实验结果说明马来酸噻吗洛尔原位凝胶滴眼液较普通滴眼液降眼压作用强，并且起效时间早。

附图说明：

图1是荧光素钠眼部滞留时间比较

图2是本发明壳聚糖衍生物相转变温度LCST的测定曲线

图3是本发明的马来酸噻吗洛尔原位凝胶滴眼液与马来酸噻吗洛尔滴眼液对新西兰兔慢性眼高压模型的降眼压曲线

具体实施方式

实施例1

温度敏感型壳聚糖衍生物I的合成：

壳聚糖的脱乙酰度90％以上，粘均分子量为60,000。所用试剂均为分析纯和化学纯。透析袋截留分子量为10000(MWCO＝10000)。

1.1聚(N-异丙基丙烯酰胺)的羧酸衍生物(PNIPAAm-COOH)的合成

三颈瓶中加入10ml甲醇溶液，在氮气保护下升温至70℃，缓慢加入N-异丙基丙烯酰胺(IPN，1g，8.9mmol)、偶氮双异丁腈(AIBN，20mg，0.12mmol)和3-巯基丙酸(3-MPA，0.2ml，0.11mmol)，继续通氮气，并在70℃下搅拌24h，蒸去溶剂，混合物用20ml丙酮溶解，滴加1ml正己烷，沉淀物过滤，在40℃下真空干燥，制得PNIPAAm-COOH 980mg。

通过滴定法测定产物的-COOH含量，可推算出产物的平均分子量。本实验中用0.01mol/L的NaOH溶液滴定聚合物末端羧基，得到的PNIPAAm-COOH分子量为2500左右。

1.2聚(N-异丙基丙烯酰胺)壳聚糖(PNIPAAm-CS)的合成

壳聚糖(250mg，1.55mmol)溶解于10ml 2％盐酸中，搅拌下，加入1.1步制得的980mgPNIPAAm-COOH的10ml水溶液，二环己基碳二亚胺(DCC，200mg，1.24mmol)及0.5ml四甲基乙二胺(TEMED)溶液滴入上述反应液中，搅拌，室温反应72h，过滤，滤液置于透析袋(MWCO＝10 000)中用蒸馏水透析4d，再次过滤，滤去水不溶物，冻干，得浅棕色粉末141mg。

PNIPAAm-CS的元素分析数据：N 6.52％，C 36.29％，H 7.16％，C/N＝6.52(摩尔比)，根据元素分析数据可计算PNIPAAm的取代度为52％。

实施例2

原位凝胶溶液的相转变温度LCST的测定

配制5mg/ml的共聚物溶液，室温搅拌24h，放入聚苯乙烯比色皿，在紫外分光光度计上测定透光率。将样品池放在水浴加热到测定温度后，放入样品槽，在500nm处测定透光率。温度从26-40℃，每隔1℃测定一次。

如图2，当温度在32-33℃该合成的壳聚糖衍生物迅速发生相转变，并且该相转变具有可逆性，因此应用到眼部可以很快转变成为凝胶。贮存温度升高时发生的相变，只要给予适当降温也会恢复原来的性状。

实施例3

马来酸噻吗洛尔原位凝胶滴眼液及其制备方法

温度敏感马来酸噻吗洛尔原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为5.0g马来酸噻吗洛尔，温度敏感型壳聚糖衍生物I 0.4g，氯化钠9g，苯扎溴铵0.12g，碳酸钠调节pH，其余为灭菌注射用水。

取温度敏感的壳聚糖衍生物加入适量灭菌注射用水，搅拌，使其充分溶胀，制成空白凝胶溶液；另将处方主药马来酸噻吗洛尔、氯化钠、苯扎溴铵、溶于灭菌注射用水中，搅拌使其溶解，过滤，将滤液加入空白凝胶溶液中，混匀，用碳酸钠调节pH为7。加入灭菌注射用水至足量，搅拌使成为均匀溶液，即得，以上操作均在30℃以下无菌条件下进行。

实施例4

阿昔洛韦原位凝胶滴眼液及其制备方法

温度敏感原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为1g阿昔洛韦，温度敏感型壳聚糖衍生物0.2g，硼酸9.3g，硼砂4.8g，苯扎溴铵0.12g，吐温-80 2ml，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例5

利巴韦林原位凝胶滴眼液

温度敏感利巴韦林(三氮唑核苷)原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为11g利巴韦林，温度敏感型壳聚糖衍生物0.8g，氯化钠9g，对羟基苯甲酸乙酯0.3g，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例6

利福平原位凝胶滴眼液及其制备方法

温度敏感利福平原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为1g利福平，温度敏感型壳聚糖衍生物0.5g，吐温-80 10ml，1mol/L的盐酸94ml，1mol/L氢氧化钾94ml，硼酸11.7g，其余为灭菌注射用水。

取处方量的硼酸及吐温-80，加适量灭菌注射用水，搅拌使之溶解，过滤，加注射用水至500ml，搅匀；另取利福平，加入1mol/L的盐酸94ml置于300ml容量瓶中，溶解后加入上述溶液中，再缓慢加入1mol/L氢氧化钾94ml，搅拌。温度敏感的壳聚糖衍生物加入适量灭菌注射用水，搅拌，使其充分溶胀，制成空白凝胶溶液，加入到上述制备的溶液，混合，加灭菌注射用水至1000ml，搅匀，过滤，即得(以上操作均在30℃以下无菌条件下进行)。

实施例7

硫酸庆大霉素原位凝胶滴眼液

温度敏感硫酸庆大霉素原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为3g硫酸庆大霉素，温度敏感型壳聚糖衍生物0.6g，氯化钠9g，羟苯乙酯0.3g，碳酸钠调节pH，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例8

氯霉素原位凝胶滴眼液

温度敏感氯霉素原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为1g氯霉素，温度敏感型壳聚糖衍生物0.4g，硼酸12g，硼砂0.57g，氯化钠2.2g，羟苯乙酯0.3g，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例9

盐酸羟苄唑原位凝胶滴眼液

温度敏感盐酸羟苄唑原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为1g盐酸羟苄唑，温度敏感型壳聚糖衍生物0.8g，氯化钠9g，苯扎溴铵0.12g，磷酸氢二钠调节pH，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例10

碘苷原位凝胶滴眼液

温度敏感碘苷原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为5.0g碘苷，温度敏感型壳聚糖衍生物0.3g，氯化钠9g，苯扎溴铵0.12g，碳酸钠调节pH，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例11

盐酸环丙沙星原位凝胶滴眼液

温度敏感盐酸环丙沙星原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为3g盐酸环丙沙星，温度敏感型壳聚糖衍生物0.5g，氯化钠6.6g，羟苯乙酯0.3g，乙二胺四乙酸二钠0.1g，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例12

磺胺醋酰钠原位凝胶滴眼液

温度敏感磺胺醋酰钠原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为150g磺胺醋酰钠，0.8g温度敏感型壳聚糖衍生物，0.1g依地酸，10g硫代硫酸钠，0.3g羟苯乙酯，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例13

红霉素原位凝胶滴眼液及其制备方法

温度敏感原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为5g红霉素，温度敏感型壳聚糖衍生物0.1g，氯化钠9g，苯扎溴铵0.12g，磷酸氢二钠调节pH，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例14

诺氟沙星(氟哌酸)原位凝胶滴眼液的制备方法

温度敏感原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为3g诺氟沙星，温度敏感型壳聚糖衍生物0.9g，氯化钠9g，苯扎溴铵0.12g，盐酸(0.1mol/l)75ml，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例15

妥布霉素原位凝胶滴眼液的制备方法

温度敏感妥布霉素原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为3g妥布霉素，温度敏感型壳聚糖衍生物0.4g，硼酸16g，硫柳汞0.02g，枸橼酸钠2g，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例16

氧氟沙星(氟嗪酸)原位凝胶滴眼液的制备方法

温度敏感氧氟沙星(氟嗪酸)原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为3g氧氟沙星，温度敏感型壳聚糖衍生物0.2g，氯化钠9g，羟苯乙酯0.3g，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例17

硝酸毛果芸香碱(匹鲁卡品)原位凝胶滴眼液的制备方法

温度敏感硝酸毛果芸香碱原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为10g硝酸毛果芸香碱，温度敏感型壳聚糖衍生物0.7g，依地酸二钠0.5g，羟苯乙酯0.3g，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例18

盐酸卡替洛尔原位凝胶滴眼液的制备方法

温度敏感盐酸卡替洛尔原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为10g盐酸卡替洛尔，温度敏感型壳聚糖衍生物0.1g，氯化钠9g，苯扎溴铵0.12g，碳酸钠调节pH，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例19

盐酸地匹福林原位凝胶滴眼液的制备方法

温度敏感盐酸地匹福林原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为1g盐酸地匹福林，温度敏感型壳聚糖衍生物0.3g，氯化钠9g，苯扎溴铵0.12g，碳酸钠调节pH，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例20

盐酸可乐定原位凝胶滴眼液的制备方法

温度敏感盐酸可乐定原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为1g可乐定，温度敏感型壳聚糖衍生物1.0g，氯化钠9g，苯扎溴铵0.12g，碳酸钠调节pH，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例21

醋酸氢化可的松原位凝胶滴眼液的制备方法

温度敏感醋酸氢化可的松原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为5g醋酸氢化可的松，温度敏感型壳聚糖衍生物1g，硼酸20g，吐温-80 0.8g，硝基苯汞0.02g，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例22

地塞米松磷酸钠原位凝胶滴眼液的制备方法

温度敏感地塞米松磷酸钠原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为0.25g地塞米松磷酸钠，温度敏感型壳聚糖衍生物0.6g，氯化钠9g，新洁尔灭0.5g，氢氧化钠(1mol/l)调节pH7，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

实施例23

氟甲松龙(氟米龙)原位凝胶混悬滴眼液的制备方法

温度敏感氟甲松龙原位凝胶滴眼液1000ml，其组成为1g氟甲松龙，温度敏感型壳聚糖衍生物0.25g，硼酸16g，硼砂2.10g，苯扎溴铵0.12g，EDTA-2Na 0.1g，其余为灭菌注射用水。

制备方法同实施例3。

Claims

1、下式结构I的壳聚糖衍生物：

平均分子量为3万-800万，聚(N-异丙基丙烯酰胺)的取代度为0.08-0.52。

2、权利要求1的壳聚糖衍生物的制备方法，包括：将N-异丙基丙烯酰胺先聚合，制得聚(N-异丙基丙烯酰胺)的羧酸衍生物，然后其羧基-COOH与壳聚糖的2-NH₂反应，即得。

3、权利要求2的制备方法，包括：

a、聚(N-异丙基丙烯酰胺)的羧酸衍生物(II)的合成：

b、聚(N-异丙基丙烯酰胺)壳聚糖(I)的合成：

壳聚糖溶解于1％-10％盐酸或乙酸中，加入a步骤制得的(II)的水溶液，二环己基碳二亚胺或1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺和四甲基乙二胺溶液滴入上述反应液中，搅拌，室温反应48-96h，过滤，滤液透析2-4天，过滤，滤去水不溶物，干燥，得结构式(I)的壳聚糖衍生物。

4、权利要求3的制备方法，包括：

甲醇溶液在氮气或氩气保护下升温至70℃，缓慢加入N-异丙基丙烯酰胺、偶氮双异丁腈和3-巯基丙酸在70℃下搅拌22-26小时，蒸去溶剂，混合物用丙酮溶解，滴加正己烷，沉淀物过滤，制得(II)；

壳聚糖溶解于2％盐酸中，搅拌下，加入a步骤制得的(II)的水溶液，二环己基碳二亚胺或1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺和四甲基乙二胺溶液滴入上述反应液中，室温反应70-74h，过滤，滤液透析2-4天，过滤，滤去水不溶物，冷冻干燥，即得。

5、权利要求1的壳聚糖衍生物用于眼部给药载体的用途。

6、一种滴眼液组合物，其中含有治疗有效量的眼科药物及权利要求1的壳聚糖衍生物。

7、权利要求6的滴眼液组合物，其中的眼科药物是马来酸噻吗洛尔、阿昔洛韦、红霉素、利福平、硫酸庆大霉素、氯霉素、盐酸羟苄唑、碘苷、盐酸环丙沙星、磺胺醋酰钠、利巴韦林、诺氟沙星、妥布霉素、氧氟沙星、硝酸毛果芸香碱、盐酸卡替洛尔、盐酸地匹福林、盐酸可乐定、醋酸可的松、地塞米松磷酸钠或氟甲松龙。

8、权利要求6的滴眼液组合物，其中含有0.01％-0.5％g/ml的权利要求1的壳聚糖衍生物。

9、权利要求6的滴眼液组合物，其中含有0.25％-0.5％g/ml的马来酸噻吗洛尔，0.01-0.1％g/ml的权利要求1的壳聚糖衍生物，余量为水。

10、权利要求8的滴眼液组合物，其中含有：

马来酸噻吗洛尔：0.25-0.5％

壳聚糖衍生物：0.01-0.1％

氯化钠：0-0.9％

抑菌剂：0.001％-0.05％

余量为水重量体积百分比单位均为g/ml

其中抑菌剂是苯扎溴铵、对羟苯基甲基酯或对羟苯基乙基酯。