Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf die neue optisch aktive Verbindung (-)-(3R)-3-Methyl-4- 4-[4-(4-pyridyl)piperazin-1-yl]phenoxyÜbuttersäure [hier im Folgenden (-)-(3R)] und pharmazeutisch annehmbare Salze, Ester, Amide oder Solvate davon. Die Erfindung bezieht sich auch auf Verfahren zur Herstellung der optisch aktiven Verbindung, pharmazeutische Zusammensetzungen, die sie enthalten, und ihre Verwendung zur Unterdrückung der zellulären Adhäsion, z.B. der Agglutination der Blutplättchen.
Organische Verbindungen können in optisch aktiven Formen vorliegen. Solche Verbindungen haben die Fähigkeit, die Ebene von linear polarisiertem Licht in dextrorotatorischer Weise [Präfix (+)] oder laevorotatorischer Weise [Präfix (-)] zu drehen. Üblicherweise enthält eine optisch aktive Verbindung ein asymmetrisches oder chirales Atom, wie etwa ein tetrahedrales Kohlenstoffatom, das an vier verschiedene Atome oder Gruppen gebunden ist. Die vier verschiedenen Atome oder Gruppen können um das asymmetrische Kohlenstoffatom auf zwei Arten angeordnet werden, wodurch zwei chirale Verbindungen entstehen, die von der Struktur her eine Bild/Spiegelbild-Beziehung zueinander haben. Solche Verbindungen werden als Stereoisomere oder Enantiomere bezeichnet.
Enantiomere weisen identische physikalische und chemische Eigenschaften auf, ausser dass sie die Ebene von linear polarisiertem Licht in gegensätzliche Richtungen um den gleichen Betrag drehen. Eine racemische Mischung ist eine Mischung gleicher Mengen eines Enantiomerenpaares. Eine solche Mischung bewirkt keine Drehung der Ebene von linear polarisiertem Licht.
Die stereochemische Reinheit einer organischen Verbindung kann in den Gebieten der pharmazeutischen Chemie und der Pharmakologie von Bedeutung sein. Viele Makromoleküle, wie die Enzyme und Rezeptoren bei Warmblüteren, die mit dem Erhalt des Lebens zu tun haben, sind aus chiralen Bausteinen, wie den chiralen Aminosäuren, aufgebaut. Die einzelnen Enantiomere, die zusammen eine racemische Mischung einer pharmakologisch aktiven Verbindung bilden, können in verschiedenem Ausmass mit einem chiralen Makromolekül, wie etwa einem Enzym oder einem Rezeptor, Wechselwirkungen eingehen. Die einzelnen Enantiomere können daher als Enzyminhibitoren oder Rezeptorantagonisten unterschiedlich wirksam sein.
Ausserdem kann die beobachtete Rate und das Ausmass der Absorption, der Verteilung, des Metabolismus und der Ausscheidung, wenn ein Enantiomer einem Warmblüter verabreicht wird, anders sein als was beobachtet wird, wenn die spiegelbildliche Form in gleicher Form verabreicht wird, d.h. die Enantiomere können verschiedene pharmakokinetische Eigenschaften aufweisen.
Des Weiteren kann die stereochemische Reinheit einer organischen Verbindung auch wichtig sein im Hinblick auf Art und Ausmass der Nebenwirkungen, die auftreten, wenn eine pharmakologisch aktive Verbindung verabreicht wird. Es kann etwa ein Enantiomer eine nützliche Verbindung sein, während das andere Enantiomer schädliche Nebenwirkungen hervorrufen oder toxisch sein kann. Es wurde zum Beispiel vermutet, dass eines der Enantiomere des Thalidomids ein sicheres und wirksames Beruhigungsmittel sei, während das andere Enantiomer die teratogene Nebenwirkung der racemischen Mischung verursachte.
Die optisch aktive Verbindung der vorliegenden Erfindung ist ein optisches Isomer der racemischen Mischung (3RS)-3-Methyl-4- 4-[4-(4-pyridyl)piperazin-1-yl]phenoxyÜbutter säure [hier im Folgenden die (3RS)-racemische Mischung], die als Trifluoroacetat-Salz in Beispiel 132 der internationalen Patentanmeldung Nr. WO 94/22 834 und in Beispiel 203 der internationalen Patentanmeldung Nr. WO 94/22 835 offenbart ist. Es wird dort offenbart, dass solche Verbindungen für die Behandlung verschiedener Krankheiten, die mit der Zelladhäsion zu tun haben, von Nutzen sind, so die Bildung von Blutgerinnseln nach der Agglutination von Blutplättchen.
Blutgerinnsel können zu Krankheiten wie Thrombosen, Schlaganfällen, thrombotischen Zwischenfällen als Begleiterscheinung bei instabiler Angina, Myokardinfarkten, Atherosklerose, Thromboembolien und Reokklusion nach thrombolytischer Therapie führen.
Die die Agglutination der Blutplättchen verhindernde Wirkung der Verbindungen wird der Fähigkeit dieser Verbindungen zugeschrieben, die Bindung von Adhäsionsmolekülen wie dem Fibrinogen und dem von Willebrand-Faktor an das Glycoprotein IIb/IIIa [hier im Folgenden GPbIIb/IIIa), das sich in der Membran jedes Blutplättchens befindet, zu unterdrücken. Daher findet die notwendige Aktivierung und Dimerisierung des - zum Beispiel - plättchentragenden Fibrinogens nicht statt und Vorgänge wie die Bildung von Gerinnseln und die Agglutination der Blutplättchen werden unterdrückt. Als mögliche Hilfe bei der Suche nach Verbindungen mit verbessertem therapeutischem Wirkungsgrad wäre es wünschenswert, eine Verbindung mit gegenüber den in den internationalen Patentanmeldungen Nr. WO 94/22 834 und WO 94/22 835 offenbarten Verbindungen zu finden.
Es ist auch bekannt, dass es verschiedene Gruppen von Adhäsionsmolekülen gibt, wie etwa die Integrine, die Selektine und die Cadherine. Integrine werden auf Leukozyten und Blutplättchen gefunden, Selektine werden auf Leukozyten und Endothelialzellen gefunden. Jede der Gruppen von Adhäsions molekülen besteht aus vielen Mitgliedern. Die Familie der Integrine schliesst zum Beispiel GPIIb/IIIa, das Fibrinogen bindet, das Integrin alpha v beta 3, das Vitronectin bindet, und das Integrin alpha 5 beta 1, das Fibronectin bindet, ein. Es wird angenommen, dass die nützlicheren Inhibitoren der Agglutination der Blutplättchen eine Selektivität in der inhibierenden Wirkung gegenüber einzelnen Gruppen von Adhäsionsmolekülen und gegenüber den Familienmitgliedern jeder Gruppe von Adhäsionsmolekülen aufweisen.
Es wäre daher auch wünschenswert, eine Verbindung zu finden, die eine solche Selektivität oder eine im Vergleich zu bekannten Inhibitoren der Agglutination der Blutplättchen höhere Selektivität aufweisen.
Es ist des Weiteren bekannt, dass es verschiedene Gruppen von GPIIb/IIIa-Antagonisten gibt. Es wurden zum Beispiel monoklonale Antikörper-Antagonisten gegen GPIIb/IIIa entwickelt. Zusätzlich sind kleine Moleküle bekannt, die die Bindung von Adhäsionsmolekülen an GPIIb/IIIa verhindern, so etwa aus den Patentschriften US-A-5 039 805 und US-A-5 084 446, aus den Patentanmeldungen CA-A-2 008 161, CA-A-2 037 153 und CA-A-2 061 661, und aus Alig et al., al, J. Med. Chem., 1992, 35, 4383. Üblicherweise sind die Strukturen dieser Verbindungen an die bindenden Bereiche der Adhäsionsmoleküle angepasst, zum Beispiel an die Aminosäuresequenz RGD (Arginyl Glycyl Aspartat) innerhalb der Fibrinogen-Struktur.
Es wird angenommen, dass solche Verbindungen verwendet werden können, um die Agglutination der Blutplättchen und - zum Beispiel - die Gerinnselbildung für genügend lange Zeit zu unterdrücken, um die Heilung beschädigten Gewebes ohne die schädlichen Nachfolgeeffekte von Vorgängen der überstarken Agglutination der Blutplättchen zu ermöglichen. Es ist eine theoretische, die verschiedenen Gruppen von GPIIb/IIa-Antagonisten betreffende Schwierigkeit, dass die Unterdrüc kung der Agglutination der Blutplättchen eine Verringerung der Geschwinigkeit der Blutgerinnung und damit eine Zunahme in der Häufigkeit und Länge von Blutungen bewirkt. Obwohl eine geringe Zunahme in der Blutungsdauer annehmbar ist, könnten bestimmte klinische relevante Blutungen, so Blutungen im Schädelinnern, lebensbedrohend werden.
Es wäre daher wünschenswert, eine Verbindung zu finden, die den Vorteil der starken Aktivität als GPIIb/IIIa-Antagonist der in Beispiel 132 der internationalen Patentanmeldung W094/22 834 offenbarten Verbindung aufweist, und die Nachteile der Zunahme der Blutungsdauer und der Häufigkeit schädlicher klinisch relevanter Blutungen, wie sie für vorbekannte GPIIb/IIIa-Antagonisten bekannt sind, nicht aufweist oder in geringerem Mass aufweist.
Gemäss der vorliegenden Erfindung wird die optisch aktive Erfindung (-)-(3R)-3-Methyl-4- 4-[4-(4-pyridyl)piperazin-1-yl]phenoxyÜbuttersäure oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz, Ester, Amid oder Solvat davon zur Verfügung gestellt, wobei diese im Wesentlichen frei vom (+)-(3S)-Stereoisomer sind.
Die (-)-(3R)-Verbindung weist eine wesentlich höhere Wirkung als GPIIb/IIIa-Antagonist auf als das entsprechende (+)-(3S)-Isomer auf (mehr als 10fach höhere Aktivität). Die (-)-(3R)-Verbindung weist eine Selektivität in der inhibierenden Wirkung gegenüber den Gruppen von Adhäsionsmolekülen und gegenüber den Familienmitgliedern dieser Gruppen auf. Die Verbindung weist zum Beispiel Aktivität gegen die Bindung von GPIIb/IIIa an Fibrinogen auf (pIC50 = 7,65), nicht jedoch gegen die Bindung von alpha v beta 3 an Vitronectin (pIC50 weniger als 4) oder gegen die Bindung von alpha 5 beta 1 an Fibronectin (pIC50 weniger als 4) auf.
Entsprechend ist die (-)-(3R)-Verbindung ein neuer, aktiver und selektiver Fibrinogenreceptor-Antagonist, der die An fälligkeit auf oder Möglichkeit widriger Effekte wie etwa übermässige Blutung, die mit der Verabreichung anderer Fibrinogen-Antagonisten, so etwa der (3RS)-Racematmischung, verbunden sind, wesentlich verringert. Die Verwendung der (-)-(3R)-Verbindung vermeidet auch die Anfälligkeit auf schädliche Effekte, die mit der Verabreichung der in der (3RS)-Racematmischung vorhandenen, therapeutisch weniger wirksamen (+)-(3S)-Verbindung verknüpft ist. Die Verwendung der (-)-(3R)-Verbindung gestattet eine genauere Analyse von Struktur/Aktivität/Toxizität und ergibt einen verbesserten therapeutischen Wirkungsgrad.
Es ist daher wünschenswert, die (-)-(3R)-Verbindung der vorliegenden Erfindung statt der (3RS)-Racematmischung vom Beispiel 132 aus der Internationalen Patentanmeldung Nr. WO 94/22 834 einzusetzen.
Besondere pharmazeutisch annehmbare Salze der (-)-(3R)-Verbindung der vorliegenden Erfindung schliessen zum Beispiel Salze mit Säuren ein, die ein physiologisch annehmbares Anion liefern, so etwa Salze mit Mineralsäuren, wie etwa ein Halogenwasserstoff, z.B. Chlorwasserstoff und Bromwasserstoff, wie Schwefelsäure oder Phosphorsäure, und Salze mit organischen Säuren, wie etwa Trifluoressigsäure.
Andere pharmazeutisch annehmbare Salze schliessen zum Beispiel Salze mit anorganischen Basen, wie etwa Alkalimetall- und Erdalkalimetallsalze, so etwa Natriumsalze, Ammoniumsalze und Salze mit organischen Aminen und quaternären Basen, die ein physiologisch annehmbares Kation bilden, ein, so etwa Salze mit Methylamin, Dimethylamin, Trimethylamin, Ethylendiamin, Piperidin, Morpholin, Pyrrolidin, Piperazin, Ethanolamin, Triethanolamin, N-Methylglucamin, Tetramethylammoniumhydroxid und Benzyltrimethylammoniumhydroxid. Besondere pharmazeutisch annehmbare Ester der (-)-(3R)Verbindung der Erfindung schliessen zum Beispiel Ester derivate der Carbonsäuregruppe in der Verbindung der Erfindung ein, zum Beispiel Ester, die aus Alkoholen wie etwa die (1 bis 6C)Alkohole (z.B. Methanol, Ethanol, Propanol und tert-Butanol), Indanol, Adamantol, (1 bis 6C)Alkanyloxy(1 bis 4C)alkohole (z.B.
Pivaloyloxymethanol) und (1 bis 4C)Alkoxycarbonyl(1 bis 4C)alkohole (z.B. Methoxycarbonylmethanol) gebildet sind.
Besondere pharmazeutisch annehmbare Amide der (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung schliessen zum Beispiel Amidderivate der Carbonsäuregruppe in der Verbindung der Erfindung ein, zum Beispiel Amide, die aus Aminen wie etwa Ammoniak, (1 bis 4C)Alkylaminen (z.B. Methylamin), Di-(1-4C)alkylaminen (z.B. Dimethylamin, N-Ethyl-N-methylamin und Diethylamin), (1 bis 4C)Alkoxy(2 bis 4C)alkylaminen (z.B. 2-Methoxyethylamin), Phenyl(1 bis 4C)alkylaminen (z.B. Benzylamin) und Aminosäuren (z.B. Glyin oder seine Ester) gebildet sind. Besondere Amide der (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung schliessen etwa die N-Methyl-, N,N-Dimethyl, N-Ethyl-N-methyl und N,N,-Diethyl-Butyramide ein.
Besondere pharmazeutisch annehmbare Solvate der (-)-(3R)Verbindung der Erfindung schliessen zum Beispiel die Hydrate, z.B. das Hemihydrat, Monohydrat, Dihydrat oder Trihydrat oder eine andere Menge davon ein.
Der Satz "im Wesentlichen frei von dem (+)-(3S)-Stereoisomer", wie er hier vorher verwendet wurde, bedeutet, dass mindestens 90 Gewichtsprozente des (-)-(3R)-Isomers und 10 Gewichtsprozente oder weniger des entsprechenden (+)-(3S)-Isomers vorhanden sind. Bevorzugt sind mindestens 95 Gewichtsprozente des (-)-(3R)-Isomers und 5 Gewichtsprozente oder weniger des (+)-(3S)-Isomers vorhanden. Eher bevorzugt sind mindestens 99 Gewichtsprozente des (-)-(3R)-Isomers und 1 Gewichtsprozent oder weniger des (+)-(3S)-Isomers vorhanden.
Die (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz, Ester, Amid oder Solvat davon kann über irgend in der Technik bekanntes Verfahren zur Herstellung einer solchen Verbindung hergestellt werden. Geeignete Verfahren schliessen die asymmetrische Synthese mittels eines geeigneten chiralen Zwischenproduktes und die Spaltung der (3RS)-Racematmischung ein. Solche Verfahren schliessen Folgendes ein:
a) Umsetzung von 4-[4-(4-Pyridyl)piperazin-1-yl]phenol, oder ein reaktives Derivat davon, mit dem chiralen Zwischenprodukt (3R)-4-Hydroxy-3-methylbuttersäure oder einem Ester davon oder einem reaktiven Derivat davon.
Die Umsetzung wird zweckmässig in Anwesenheit einer starken Base wie einem Alkalimetallydrid, so zum Beispiel Natriumhydrid, durchgeführt. Geeignete Lösungsmittel schliessen Amide wie etwa Dimethylformamid ein. Die Reaktion wird zweckmässig bei einer Temperatur im Bereich von 0 bis 100 DEG C durchgeführt.
Geeignete Ester des chiralen Zwischenprodukts (3R)-4-Hydroxy-3-methylbuttersäure schliessen zum Beispiel den Methyl-, den Ethyl-, den Propyl- und den tert-Butylester ein. Geeignete reaktive Derivate davon schliessen zum Beispiel die (3R)-4-Halogeno-3-methylbuttersäure oder ein Ester davon (z.B. der Methyl- oder Ethylester), z.B. die 4-Chlor- oder 4-Bromderivate, die (3R)-4-Alkylsulfonyloxy-3-methylbuttersäure oder ein Ester davon (z.B. der Methyl- oder Ethylester), so etwa das 4-Methansulfonyloxyderivat, oder die (3R)-4-Arylsulfonyloxy-3-methylbuttersäure oder ein Ester davon (z.B. der Methyl- oder Ethylester), so etwa das 4-p-Toluolsulfonyloxyderivat, ein.
b) Umsetzung einer Verbindung der Formel I
EMI9.1
in der L ein Abgangsatom oder eine Abgangsgruppe bedeutet, mit dem chiralen Zwischenprodukt (3R)-3-Methyl-4-[4(piperazin-1-yl)phenoxy]buttersäure oder einem Säureadditionssalz davon.
Beispiele von Angaben für L schliessen Halogen wie Chlor oder Brom, und Cyano ein.
Beispiele für Säureadditionssalze der (3R)-3-Methyl-4-[4(piperazin-1-yl)phenoxy]buttersäure schliessen zum Beispiel die Hydrochloride ein.
Die Reaktion kann zweckmässig bei einer Temperatur im Bereich von -10 bis 120 DEG C, bevorzugt von 10 bis 100 DEG C, durchgeführt werden. Geeignete Lösungsmittel schliessen z.B. Ether wie etwa Tetrahydrofuran und Dioxan, Amide wie etwa Dimethylformamid, Nitrile wie etwa Acetonitril, halogenierte Kohlenwasserstoffe wie etwa Dichlormethan, Alkohole wie etwa Ethanol und Wasser ein.
In einigen Fällen, zum Beispiel wenn ein Säureadditionssalz der (3R)-3-Methyl-4-[4-(piperazin-1-yl)phenoxy]buttersäure als Ausgangsmaterial verwendet wird, kann die Reaktion vorteilhaft in Anwesenheit einer Base durchgeführt werden. Beispiele für geeignete Basen schliessen tertiäre Amine wie etwa Triethylamin, Alkalimetallhydroxide, -carbonate und -hydrogencarbonate, so etwa Natrium- oder Kaliumhydroxid, -carbonat oder -hydrogencarbonat, ein.
c) Zersetzung eines Esters der Formel II
EMI10.1
in der R eine Carboxyl-Schutzgruppe bedeutet.
R kann irgend eine herkömmliche Carboxylschutzgruppe sein, die entfernt werden kann, ohne dass andere Teile des Moleküls angegriffen werden. Beispiele für Carboxylschutzgruppen schliessen (1 bis 6C)Alkylgruppen (wie etwa Methyl, Ethyl, Propyl, oder t-Butyl), Phenyl und Benzyl, wobei die Phenylgruppe bei allen diesen wahlweise 1 oder 2 Halogen-, (1 bis 4C)Alkyl-, (1 bis 4C)Alkoxy- oder Nitrogruppen tragen kann.
Die Zersetzung kann unter Verwendung aller aus der Technik bekannten herkömmlichen Reagentien und Bedingungen zur Umwandlung von Carboxylestern zu Carbonsäuren durchgeführt werden. Die Zersetzung kann zum Beispiel durch basenkatalysierte Hydrolyse, z.B. unter Verwendung eines Alkalimetallhydroxids wie etwa Lithium-, Kalium- oder Natriumhydroxid oder eines tertiären Amins wie etwa Triethylamin, in Gegenwart von Wasser durchgeführt werden. Die basenkatalysierte Hydrolyse kann in Gegenwart eines Lösungsmittels wie eines Alkohols, z.B. Methanol oder Ethanol, oder eines Ethers wie etwa Tetrahydrofuran oder Dioxan durchgeführt werden. Als Alternative kann die Zersetzung über eine saure Hydrolyse, z.B. unter Verwendung von wässeriger Essigsäure oder Trifluoressigsäure durch geführt werden.
Die Temperatur liegt zweckmässig im Bereich von -10 bis 100 DEG C, zum Beispiel von 10 bis 50 DEG C. Wenn der Alkoholrest t-Butyl ist, kann dieser durch Erhitzen, z.B. auf eine Temperatur im Bereich von 80 bis 150 DEG C, entfernt werden, ob allein für sich oder in Anwesenheit eines geeigneten Verdünnungsmittels wie etwa Diphenylether oder Diphenylsulfon. Eine Benzylgruppe kann durch katalytische Hydrierung entfernt werden, z.B. durch Hydrierung in Anwesenheit von Palladium auf Kohle bei einer Temperatur im Bereich von -10 bis 100 DEG C, in Gegenwart eines Lösungsmittels wie eines Alkohols, zum Beispiel Methanol oder Ethanol.
d) Spaltung der (3RS)-Racematmischung der (3RS)-3-Methyl-4- 4-[4-(4-pyridyl)-piperazin-1-yl]phenoxyÜbuttersäure. Die Spaltung des Buttersäurederivates in der (3RS)-Racematmischung kann über herkömmliche Mittel durchgeführt werden, zum Beispiel durch Salzbildung unter Verwendung einer optisch aktiven Base gefolgt von Auftrennung, zum Beispiel über fraktionierte Kristallisation, der beiden so gebildeten Salze und Freisetzung der aufgetrennten (-)-(3R)- und (+)-(3S)-Verbindungen durch Ansäuern der aufgetrennten Salze.
Die Spaltung des Buttersäurederivates in der (3RS)-Racematmischung kann auch über das herkömmliche Mittel der Bildung diastereomerer Esterpaare erfolgen, indem mit einem optisch aktiven Alkohol umgesetzt wird, der Trennung der Ester, z.B. über Chromatographie, und Freisetzung der getrennten (-)-(3R)- und (+)-(3S)-Verbindungen durch Hydrolyse der getrennten Ester. Ein analoger Weg, der die Herstellung eines diastereomeren Paars von Amiden beinhaltet, kann ebenfalls eingeschlagen werden.
Die Herstellung der (-)-(3R)-Verbindung und des chiralen Zwischenproduktes werden durch die begleitenden, nicht ein schränkenden Beispiele beschrieben, die nur zum Zweck der Veranschaulichung beigefügt sind.
Gewisse, hier vorher definierte chirale Zwischenprodukte sind neu, daher wird die Verbindung tert-Butyl-(3R)-3-methyl-4-hydroxybutyrat oder ein reaktives Derivat davon in einer im Wesentlichen vom (3S)-Stereoisomer freien Form beschrieben. Ein besonderes reaktives Derivat, das erwähnt werden kann, ist tert-Butyl-(3R)-methyl-4-(p-toluolsulfonyloxy)butyrat.
Der Satz "im Wesentlichen vom (3S)-Stereoisomer frei", wie er hier im Vorherigen verwendet wurde, hat dieselbe Bedeutung wie sie im Zusammenhang mit der (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung angegeben wurde.
Wenn ein pharmazeutisch annehmbares Salz der (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung benötigt wird, kann es zum Beispiel erhalten werden, indem die besagte Verbindung mit einer geeigneten Säure oder Base unter Verwendung eines herkömmlichen Verfahrens umgesetzt wird. Wenn ein pharmazeutisch annehmbarer Ester oder ein Amid der (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung benötigt wird, können diese zum Beispiel erhalten werden, indem die besagte Verbindung mit einem geeigneten Alkohol bzw. Amin unter Verwendung eines herkömmlichen Verfahrens umgesetzt werden.
Die Fähigkeit der (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung, die Agglutination der Blutplättchen zu unterdrücken und die Bindung des Fibrinogens an GPIIb/IIIa zu unterdrücken, kann gezeigt werden, indem die in der internationalen Patentanmeldung Nr. WO 94/22 834 offenbarten Standard-Testverfahren (a) und (b) verwendet werden, wobei diese Testverfahren hier durch Bezugnahme eingeschlossen sind.
Die (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung besitzt Aktivität gegen die durch Adenosin-Diphosphat (ADP) bewirkte Agglutina tion menschlicher Blutplättchen mit einem pA2 = 7,3, und gegen die Bindung von Fibrinogen an GPIIIb/IIIa mit einem pIC50 = 7, 65.
Wie vorher festgestellt kann die (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung in der Therapie oder Prävention von Krankheiten verwendet werden, bei denen die Zelladhäsion (insbesonders die Agglutination der Blutplättchen) eine Rolle spielen, so zum Beispiel venöse oder arterielle Thrombosen (z.B. Lungenembolien, Schlaganfall und thrombotische Zwischenfälle im Zusammenhang mit instabiler Angina und die vorübergehende ischämische Attacke), der Myokardinfarkt, der Atherosklerose, dem Thromboembolismus und der Reokklusion während und nach einer thrombolytischen Therapie. Die Verbindungen können auch bei der Verhütung der Reokklusion und der Restenose nach der perkutanen transluminalen koronaren Angioplasie (PTCA) oder der Verpflanzung eines Koronararterien-Bypass nützlich sein.
Es wird auch geschätzt werden, dass die Verbindungen in der Behandlung anderer, durch die Bindung von Adhäsionsmolekülen an GPIIb/IIIa vermittelter Krankheiten, zum Beispiel dem Krebs, nützlich sein können.
Gemäss einem weiteren Aspekt der Erfindung wird eine Verwendung der (-)-(3R)-Verbindung oder eines Salzes, Esters, Amids oder Solvates davon in im Wesentlichen vom (3S)-Stereoisomer freier Form als Arzneimittel bereitgestellt.
Es wird auch ein Verfahren zur Verhinderung der Agglutination der Blutplättchen bei einem Warmblüter, das diese Behandlung benötigt, beschrieben, das die Verabreichung einer wirksamen Menge der (-)-(3R)-Verbindung oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes, Esters, Amids oder Solvats davon in im Wesentlichen vom (3S)-Stereoisomer freier Form umfasst.
Es wird auch ein Verfahren zur Verhinderung thrombotischer, die instabile Angina begleitender Zwischenfälle bei einem Warmblüter, das diese Behandlung benötig, beschrieben, das die Verabreichung einer wirksamen Menge der (-)-(3R)-Verbindung oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes, Esters, Amids oder Solvats davon in im Wesentlichen vom (3S)-Stereoisomer freier Form umfasst.
Es wird auch ein Verfahren zur Verhinderung der Agglutination der Blutplättchen unter wesentlicher Verringerung schädlicher, mit der Verabreichung der (3RS)-Racematmischung verknüpfter Effekte bei einem Warmblüter, das diese Behandlung benötigt, beschrieben, das die Verabreichung einer wirksamen Menge der (-)-(3R)-Verbindung oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes, Esters, Amids oder Solvats davon in im Wesentlichen vom (3S)-Stereoisomer freier Form umfasst.
Gemäss einem weiteren Aspekt der Erfindung wird eine Verwendung der (-)-(3R)-Verbindung oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes, Esters, Amids oder Solvats davon in im Wesentlichen vom (3S)-Stereoisomer freier Form zur Herstellung eines Medikamentes zur Prävention oder Behandlung einer Krankheit, die mit der Agglutination der Blutplättchen zu tun hat, bereitgestellt.
Gemäss einem weiteren Aspekt der Erfindung wird eine Verwendung der (-)-(3R)-Verbindung oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes, Esters, Amids oder Solvats davon in im Wesentlichen vom (3S)-Stereoisomer freier Form zur Herstellung eines Medikamentes zur Prävention oder Behandlung einer Krankheit, die mit der Bindung von Fibrinogen an GPIIb/IIIa zu tun hat, bereitgestellt.
Gemäss einem weiteren Aspekt der Erfindung wird eine Verwendung der (-)-(3R)-Verbindung oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes, Esters, Amids oder Solvats davon in im Wesentlichen vom (3S)-Stereoisomer freier Form zur Herstel lung eines Medikamentes für die Prävention oder Behandlung thrombotischer, die instabile Angina begleitender Ereignisse bereitgestellt.
Im Allgemeinen wird die (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung zu diesem Zweck über einen oralen, rektalen, topikalen, intravenösen, subkutanen, intramuskularen oder inhalativen Weg verabreicht, sodass, je nach Verabreichungsweg, Alter und Geschlecht des Patienten sowie Ernst des Zustandes eine im Bereich von 0,01 bis 50 mg pro kg Körpergewicht liegende Dosis verabreicht wird.
Die (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung wird in der Regel in Form einer pharmazeutischen, die (-)-(3R)-Verbindung oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz, Ester, Amid oder Solvat davon in im Wesentlichen vom (3S)-Stereoisomer freier Form umfassenden pharmazeutischen Zusammensetzung verwendet werden, als Mischung mit einem pharmazeutisch annehmbaren Verdünnungsmittel oder Träger. Eine solche Zusammensetzung wird als weiteres Merkmal der Erfindung bereitgestellt und kann in einer Vielfalt von Dosierformen vorliegen.
Sie kann zum Beispiel in Form von Tabletten, Kapseln, Lösungen oder Suspensionen zur oralen Verabreichung; in Form von Crèmen oder Salben oder als transdermales (Haut-)plaster zur topikalen Verabreichung; in Form eines Zäpfchens zur rektalen Verabreichung; in Form einer sterilen Lösung oder Suspension zur intravenösen oder intramuskulären Injektion; in Form eines Aerosols oder einer Zerstäubungslösung oder -suspension zur Verabreichung über Inhalation; und in Form eines Pulvers, zusammen mit pharmazeutisch annehmbaren, inerten, festen Verdünnungsmitteln wie etwa Laktose zur Verabreichung über Schnupfen vorliegen.
Je nach dem Verabreichungsweg kann die Zusammensetzung zum Beispiel 0,1 bis 99,9 Gewichtsprozente der (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung umfassen.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können über herkömmliche Verfahren, unter Verwendung aus der Technik gut bekannter Verdünnungsmittel und Träger, erhalten werden. Tabletten und Kapseln für die orale Verabreichung können zweckmässig mit einem enterischen Überzug, umfassend zum Beispiel Celluloseacetat-Phthalat, gebildet werden, um den Kontakt der (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung mit den Magensäuren möglichst gering zu halten.
Die (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung kann zusammen mit einem oder mehreren Agentien, von denen bekannt ist, dass sie bei den zu behandelnden Krankheiten oder Zuständen wertvoll sind, verabreicht oder formuliert werden, es kann zum Beispiel nützlicherweise ein bekannter Inhibitor der Agglutination der Blutplättchen (z.B. Aspirin, ein Thromboxan-Antagonist oder ein Inhibitor der Thromboxansynthase), ein hypolipidemisches Agens, ein Mittel gegen Bluthochdruck, ein thrombolytisches Agens (so etwa Streptokinase, Urokinase, Prourokinase, ein Aktivator des Gewebe-Plasminogens und Derivate davon), ein beta-adrenergischer Blocker oder ein gefässerweiterndes Mittel ebenfalls in einer pharmazeutischen Zusammensetzung der Erfindung zur Behandlung einer Herz- oder Gefässerkrankung oder -kondition anwesend sein.
Zusätzlich zu ihrer Verwendung in der therapeutischen Medizin ist die (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung auch nützlich als pharmakologisches Werkzeug in der Entwicklung und Vereinheitlichung von Testsystemen zur Bestimmung der Wirkung von Adhäsionsmolekülen bei Labortieren wie etwa Katzen, Hunden, Kaninchen, Affen, Ratten und Mäusen, als ein Teil der Suche nach neuen therapeutischen Agentien.
Die (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung kann auch wegen ihrer Eigenschaft, die Agglutination der Blutplättchen zu unterdrücken, verwendet werden, um die Lagerung von Blut zu verbessern oder um die Lebensfähigkeit von Blut und Blutgefä ssen bei Warmblüteren (oder Teilen davon) zu erhalten, die an eine künstliche Zirkulation angeschlossen sind, zum Beispiel während einer Glied- oder Organtransplantation. Wird die (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung zu diesem Zweck verwendet, wird sie im Allgemeinen so verabreicht werden, dass im Blut eine Gleichgewichtskonzentration im Bereich von zum Beispiel 0,1 bis 10 mg pro Liter erreicht wird.
Die Erfindung wird nun durch die folgenden, nicht einschränkenden Beispiele veranschaulicht werden, in denen, sofern nicht anders angegeben, folgendes gilt:
i) Aufkonzentrierungen und Verdampfungen wurden durch Rotationsverdampfung in vacuo durchgeführt;
ii) die Arbeiten wurden bei Umgebungstemperatur durchgeführt, d.h. im Bereich von 18 bis 26 DEG C;
iii) Säulenchromatographien wurden auf Silicagel (Merck 7736), das von E. Merck und Co., Darmstadt, Deutschland, erhältlich ist, durchgeführt;
iv) die Ausbeuten sind nur zur Veranschaulichung angegeben und stellen nicht notwendigerweise das durch sorgfältige Verfahrensentwicklung erreichbare Maximum dar;
v) Protonen-NMR-Spektren wurden in der Regel bei 200 MHz oder 250 MHz gemessen, wobei Tetramethylsilan (TMS) als interner Standard verwendet wurde, und sind als chemische Verschiebungen (Delta-Werte) in ppm bezüglich TMS angegeben, und es gelten die herkömmlichen Abkürzungen zur Bezeichnung der Hauptsignale: s, Singulett; m, Multiplett; t, Triplett; br, breit; d, Dublett; und
vi) die folgenden Abkürzungen wurden für einzelne organische Lösungsmittel verwendet: THF für Tetrahydrofuran, DMF für N,N-Dimethylformamid und DMSO für Dimethylsulfoxid.
Beispiel 1
(-)-(3R)-3-Methyl-4- 4-[4-(4-pyridyl)piperazin-1-yl]phenoxyÜbuttersäure-Hydrochlorid
Natriumhydrid (60% Dispersion in Mineralöl, 2,44 g) wurde zu einer gerührten Suspension von 4-[4-(4-Pyridyl)piperazin-1-yl]phenol (15,5 g) in trockenem DMF (120 ml) gegeben und die Mischung wurde für 45 min gerührt. Es wurde tert-Butyl-(3R)-3-methyl-4-(p-toluolsulfonyloxy)butyrat (20 g) zugegeben und die Mischung für 20 Stunden gerührt. Die Mischung wurde eingedampft und der Rückstand zwischen Dichlormethan und Wasser partitioniert. Die organische Phase wurde mit Wasser gewaschen, durch phasentrennendes Papier (Whatman IPS) filtriert und eingedampft. Der Rückstand wurde unter Diethylether zerrieben. Der so erhaltene Feststoff wurde aus Ethylacetat umkristallisiert, wodurch tert-Butyl-(-)-(3R)-3-Methyl-4- 4-[4-(4-pyridyl)piperazin-1-yl]phenoxyÜbutyrat (10,6 g) erhalten wurde.
Schmp. 112-113 DEG C;
alpha D = -5,5 DEG (Konz. = 1 g / 100 ml Methanol; 20 DEG C);
NMR (CDCl3) delta 8,3 (2H,d), 6,89 (4H,m), 6,7 (2H,m) 3,79 (2H,d), 3,46 (4H,m), 3,28 (4H,m), 2,31-2,53 (2H,m), 2,08-2,21 (1H,m), 1,44 (9H,s), 1,07 (3H,d).
Eine Mischung von tert-Butyl-(-)-(3R)-3-methyl-4- 4-[4-(4-pyridyl)piperazin-1-yl]phenoxyÜbutyrat (10,53 g) und 1N wässeriger Salzsäure (250 ml) wurde während 44 Stunden gerührt. Es wurde 1N wässerige Natriumhydroxidlösung (250 ml) zugegeben und die Mischung auf 5 DEG C abgekühlt. Die Mischung wurde filtriert und das Filtrat eingedampft. Es wurde Wasser (150 ml) zugegeben und die erhaltene Fällung der Reihe nach mit Wasser, Aceton und Diethylether gewaschen. Das so erhaltene Material wurde mit 1N wässeriger Salzsäure (25 ml) während 16 Stunden gerührt. Die Mischung wurde auf 5 DEG C abgekühlt und filtriert. Der so erhaltene Festkörper wurde der Reihe nach mit Wasser, Aceton und Diethylether gewaschen und getrocknet, wodurch (-)-(3R)-3-Methyl-4- 4-[4-(4pyridyl)piperazin-1-yl]phenoxylÜbuttersäure-Hydrochlorid (7,9 g) erhalten wurde.
Schmp. 203-205 DEG C;
alpha D = -6,2 DEG (Konz. = 1 g / 100 ml Methanol; 20 DEG C);
NMR (d6-DMSO) delta 13,8 (1H, br), 12,1 (1H, br), 8,27 (2H, d), 7,28 (2H,d), 6,9 (4H,m), 3,8 (6H,m), 3,18 (4H,t), 2,45 (1H,m), 2,23 (1H,m), 2,12 (1H,m), 1,0 (3H,d);
m/e 356 (M+H)<+>.
Berechnet für C20H25N3O3 x HCl x H2O: C 58,5; H 6,8; N 10,2;
Gefunden: C 58,3; H 6,9; N 10,2%.
Das benötigte chirale Ausgangsmaterial wurde wie folgt hergestellt:
Natrium-bis(trimethylsilyl)amid (1M in THF, 170 ml) wurde tropfenweise zu einer Lösung von (4S)-4-Isopropyl-3-propionyloxyazolidin-2-on (J. Am. Chem. Soc. 1981, 103, 2127; 28,4 g) in trockenem THF (500 ml), die auf -70 DEG C gekühlt und unter eine Argonatmosphäre gebracht worden war, gegeben. Die Geschwindigkeit der Addition wurde so eingestellt, dass die Temperatur des Reaktionsgemisches nicht über -67 DEG C stieg. Die erhaltene Lösung wurde bei -70 DEG C während 30 min gerührt. Es wurde tert-Butyl-Bromacetat (42,3 g) tropfenweise zugegeben und die Lösung während 3 Stunden bei -70 DEG C gerührt. Die Lösung wurde dann allmählich auf Raumtemperatur aufwärmen gelassen. Das Lösungsmittel wurde abgedampft und der Rückstand zwischen Diethylether und Wasser partitioniert.
Die organische Phase wurde abgetrennt, durch phasentrennendes Papier (Whatman IPD) filtriert und eingedampft. Der Rückstand wurde unter Hexan bei -40 DEG C zerrieben, wodurch ein Feststoff (21,6 g) erhalten wurde. Eine zweite Fraktion des Festkörpers (4,4 g) wurde erhalten, indem die Hexanlösung eingedampft und der Rückstand mittels Filtrationschromatographie auf Kieselgel, beginnend mit Hexan und allmählich übergehend auf Ethylacetat:Hexan 1:10, gereinigt wurde. Die zwei Fraktionen des Festkörpers wurden vereinigt und aus Hexan umkristallisiert, wodurch (4S)-3-[(2R)-3-tert-Butoxycarbonyl-2-methylpropionyl]-4-isopropyloxazolidin-2-on (22,5 g) erhalten wurde.
Schmp. 64-65 DEG C;
NMR (CDCl3) delta 4,4,1 (1H,m), 4,21 (2H,m), 4,12 (1H,m), 2,79 (1H,m), 2,28-2,4 (2H,m), 1,41 (9H,s), 1,16 (3H,d), 0,9 (6H,m).
Wasserstoffperoxid (30%, 44 ml) und Lithiumhydroxid-Monohydrat (6,38 g) wurden nacheinander zu einer gerührten Mischung von (4S)-3-[(2R)-3-tert-Butoxycarbonyl-2-methylpropionyl]-4-isopropyloxazolidin-2-on (22,5 g), Wasser (280 ml) und THF (800 ml), die auf 5 DEG C gekühlt worden war, zugegeben. Die erhaltene Mischung wurde während 3 Stunden bei 5 DEG C gerührt. Es wurde eine gesättigte wässerige Lösung von Natriummetabisulfit zugegeben, um den Überschuss Wasserstoffperoxid zu zerstören, und das Lösungsmittel abgedampft. Der Rückstand wurde mit Dichlormethan extrahiert. Die wässerige Lösung wurde durch Zugabe einer wässerigen Lösung von Zitronensäure angesäuert und mit Dichlormethan extrahiert. Die Extrakte wurden vereinigt, mit Wasser gewaschen und durch phasentrennendes Filterpapier filtriert.
Das Filtrat wurde eingedampft, wodurch 1-tert-Butyl-(3R)-3-methylsuccinat (12,9 g) als \l erhalten wurde.
NMR (CDCl3) delta 2,9 (1H,m), 2,64 (1H,m), 2,37 (1H,m), 1,4 (9H,s), 1,23 (3H,d).
Zu einer gerührten Mischung von 1-tert-Butyl-(3R)-3-methylsuccinat (12,9 g) und THF (200 ml), die auf -10 DEG C abgekühlt und unter eine Argonatmosphäre gebracht worden war, wurde Boran-Dimethylsulfid-Komplex (10M, 10,3 ml) während 15 min zugegeben. Die Mischung wurde bei -10 DEG C während 30 min gerührt. Die Mischung wurde auf Raumtemperatur aufwärmen gelassen und während einer Stunde gerührt. Die Mischung wurde wieder auf 5 DEG C abgekühlt und es wurde Methanol (50 ml) portionenweise zugegeben. Die Mischung wurde auf Raumtemperatur aufwärmen gelassen und während 30 min gerührt. Die Mischung wurde eingedampft und der Rückstand zwischen Dichlormethan (100 ml) und Wasser (100 ml) partitioniert. Die organische Phase wurde durch phasentrennendes Papier filtriert und eingedampft, wodurch tert-Butyl-(3R)-4-hydroxy-3-methylbutyrat (11 g) als ein \l erhalten wurde.
NMR (CDCl3) delta 3,55 (2H,m), 2,1-2,4 (3H,m), 1,46 (9H,s) 0,98 (3H,d).
Zu einer gerührten Mischung von tert-Butyl-(3R)-4-hydroxy-3-methylbutyrat (11 g), Triethylamin (21 ml) und Dichlormethan (120 ml) wurde p-Toluolsulfonsäurechlorid (13,2 g) portionenweise zugegeben und die Mischung während 20 Stunden gerührt. Die Mischung wurde der Reihe nach mit Wasser und verdünnter wässeriger Natriumcarbonatlösung gewaschen. Die organische Lösung wurde durch phasentrennendes Papier filtriert und eingedampft, wodurch tert-Butyl-(3R)-3-Methyl-4-)(p-toluolsulfonyloxy)butyrat (20 g) als ein \l erhalten wurde.
NMR (CDCl3) delta 7,6 (2H,d), 7,33 (2H,d), 3,92 (2H,d), 2,45 (3H,S), 2,18-2,47 (2H,m), 2,0-2,15 (1H,m), 1,42 (9H,s), 0,95 (3H,d).
Beispiel 2
Veranschaulichende pharmazeutische Dosierformen, die zur Verabreichung der Verbindung der Erfindung für therapeutische oder prophylaktische Zwecke geeignet sind, schliessen die folgenden ein, die über herkömmliche, aus der Technik gut bekannte Verfahren erhalten werden können:
<tb><TABLE> Columns=2
<tb>Head Col 1: a) Tablette I
<tb>Head Col 2: mg/Tablette
<tb><SEP>Aktive Zutat<SEP>1,0
<tb><SEP>Laktose Ph. Eur.<SEP>93,25
<tb><CEL AL=L>Natrium-Croscarmellose<SEP>4,0
<tb><SEP>Maisstärke-Paste (5% g/v wässerige Paste)<SEP>0,75
<tb><CEL AL=L>Magnesiumstearat <SEP>1,0
<tb></TABLE>
<tb><TABLE> Columns=2
<tb>Head Col 1: b) Tablette II
<tb>Head Col 2: mg/Tablette
<tb><SEP>Aktive Zutat<SEP>50
<tb><SEP>Laktose Ph.
Eur.<SEP>223,75
<tb><CEL AL=L>Natrium-Croscarmellose<SEP>6,0
<tb><SEP>Maisstärke<SEP>15,0
<tb><SEP>Polyvinylpyrrolidon (5% g/v wässerige Paste)<SEP>2,25
<tb><SEP>Magnesiumstearat <SEP>3,0
<tb></TABLE>
<tb><TABLE> Columns=2
<tb>Head Col 1: c) Tablette III
<tb>Head Col 2: mg/Tablette
<tb><SEP>Aktive Zutat<SEP>100
<tb><SEP>Laktose Ph. Eur.<SEP>182,75
<tb><CEL AL=L>Natrium-Croscarmellose<SEP>12,0
<tb><SEP>Maisstärke (5% g/v wässerige Paste)<SEP>12,0
<tb><SEP>Polyvinylpyrrolidon<SEP>2,25
<tb><CEL AL=L>Magnesiumstearat<SEP>3,0
<tb></TABLE>
<tb><TABLE> Columns=2
<tb>Head Col 1: c) Kapsel
<tb>Head Col 2: mg/Kapsel
<tb><SEP>Aktive Zutat<SEP>10
<tb><SEP>Laktose Ph.
Eur.<SEP>488,5
<tb><CEL AL=L>Magnesiumstearat<SEP>1,5
<tb></TABLE>
<tb><TABLE> Columns=2
<tb><SEP>c) Injektion<SEP>mg/ml
<tb><SEP>Aktive Zutat (Säureadditionssalz)<SEP>1,0
<tb><CEL AL=L>Natriumchlorid<SEP>9,0
<tb><SEP>Gereinigtes Wasser auf 1,0 ml
<tb></TABLE>
Beispiel 3
Es folgt eine Beschreibung einer Studie der Wirkungen der (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung und der entsprechenden (3RS)-Racematmischung bei Ratten. Vier Gruppen von zehn Alderley Park Wistar-Ratten (jede Gruppe umfassend fünf männliche und fünf weibliche Ratten) wurden oral mit der (3RS)-Racematmischung mit einer Tagesdosis von 0, 25, 100 oder 500 mg/kg behandelt. Die Behandlung wurde über eine Gesamtzahl von sieben Tagen fortgeführt. Die Tiere wurden getötet und untersucht. Es wurden Schädigungswirkungen in den Lebern von 6 Ratten aus der Zehnergruppe beobachtet, die mit 500 mg/kg/Tag behandelt worden war.
Vier Gruppen von zehn Alderley Park Wistar-Ratten (jede Gruppe umfassend fünf männliche und fünf weibliche Ratten) wurden oral mit der (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung mit Tagesdosen von 0, 50, 250 oder 1000 mg/kg behandelt. Die höchste Dosis wurde nicht toleriert. Nach vier oder fünf Tagen wurden vier der Tiere aus dieser Gruppe getötet. Die verbleibenden sechs Tiere wurden für den Rest der Studie mit 500 mg/kg/Tag behandelt. Die Behandlung wurde während einer Gesamtzahl von vierzehn Tagen weitergeführt. Die Tiere wurden getötet und untersucht. Es wurden keine Schädigungswirkungen in den Lebern der Ratten aus der mit 250 mg/kg/Tag behandelten Gruppe beobachtet. Die sechs Tiere, die während drei oder vier Tagen mit 1000 mg/kg/Tag und dann mit 500 mg/kg/Tag während zehn oder elf Tagen behandelt wurden, zeigten ebenfalls keine Schädigungswirkung in der Leber.
Gestützt auf solche Beobachtungen ist ersichtlich, dass die (-)-(3R)-Verbindung der Erfindung keine wesentlichen Schädigungswirkung in der Rattenleber bei 500 mg/kg/Tag verursacht.
Daraus folgt, dass die (-)-(3R)-Verbindung weniger giftig ist als die (3RS)-Racematmischung.
The present invention relates to the new optically active compound (-) - (3R) -3-methyl-4- 4- [4- (4-pyridyl) piperazin-1-yl] phenoxy-butyric acid [hereinafter (-) - (3R)] and pharmaceutically acceptable salts, esters, amides or solvates thereof. The invention also relates to methods of making the optically active compound, pharmaceutical compositions containing it and their use in suppressing cellular adhesion, e.g. B. platelet agglutination.
Organic compounds can exist in optically active forms. Such compounds have the ability to rotate the plane of linearly polarized light in a dextrorotatory fashion [prefix (+)] or laevorotatory fashion [prefix (-)]. Typically, an optically active compound contains an asymmetric or chiral atom, such as a tetrahedral carbon atom, attached to four different atoms or groups. The four different atoms or groups can be arranged around the asymmetric carbon atom in two ways, creating two chiral compounds that have an image / mirror-image relationship to each other in structure. Such compounds are referred to as stereoisomers or enantiomers.
Enantiomers have identical physical and chemical properties, except that they rotate the plane of linearly polarized light in opposite directions by the same amount. A racemic mixture is a mixture of equal amounts of a pair of enantiomers. Such a mixture does not cause the plane of linearly polarized light to rotate.
The stereochemical purity of an organic compound can be important in the fields of pharmaceutical chemistry and pharmacology. Many macromolecules, such as the enzymes and receptors in warm-blooded animals that have to do with the preservation of life, are made up of chiral building blocks, such as the chiral amino acids. The individual enantiomers, which together form a racemic mixture of a pharmacologically active compound, can interact to different degrees with a chiral macromolecule, such as an enzyme or a receptor. The individual enantiomers can therefore act differently as enzyme inhibitors or receptor antagonists.
In addition, the observed rate and extent of absorption, distribution, metabolism and excretion when an enantiomer is administered to a warm-blooded animal may be different from what is observed when the mirror image is administered in the same form, i.e. H. the enantiomers can have various pharmacokinetic properties.
Furthermore, the stereochemical purity of an organic compound can also be important in view of the nature and extent of the side effects that occur when a pharmacologically active compound is administered. For example, one enantiomer can be a useful compound, while the other enantiomer can cause harmful side effects or be toxic. For example, it was suspected that one of the enantiomers of thalidomide was a safe and effective sedative, while the other enantiomer caused the teratogenic side effect of the racemic mixture.
The optically active compound of the present invention is an optical isomer of the racemic mixture (3RS) -3-methyl-4- 4- [4- (4-pyridyl) piperazin-1-yl] phenoxybutter acid [hereinafter the (3RS) racemic mixture], which is used as the trifluoroacetate salt in example 132 of international patent application no. WO 94/22 834 and in example 203 of international patent application no. WO 94/22 835 is disclosed. It is disclosed there that such compounds are useful for the treatment of various diseases related to cell adhesion, such as the formation of blood clots after platelet agglutination.
Blood clots can lead to diseases such as thrombosis, strokes, thrombotic incidents that accompany unstable angina, myocardial infarction, atherosclerosis, thromboembolism and reocclusion after thrombolytic therapy.
The antiplatelet activity of the compounds is attributed to the ability of these compounds to bind adhesion molecules such as fibrinogen and von Willebrand factor to glycoprotein IIb / IIIa [hereinafter GPbIIb / IIIa], which is found in the membrane of each Suppress platelets. Therefore, the necessary activation and dimerization of the - for example - platelet-bearing fibrinogen does not take place and processes such as the formation of clots and the agglutination of the platelets are suppressed. As a possible aid in the search for compounds with improved therapeutic efficacy, it would be desirable to use a compound with the one described in international patent application no. WO 94/22 834 and WO 94/22 835 to find compounds disclosed.
It is also known that there are different groups of adhesion molecules, such as the integrins, the selectins and the cadherins. Integrins are found on leukocytes and platelets, selectins are found on leukocytes and endothelial cells. Each of the groups of adhesion molecules consists of many members. The integrin family includes, for example, GPIIb / IIIa, which binds fibrinogen, integrin alpha v beta 3, which binds vitronectin, and integrin alpha 5 beta 1, which binds fibronectin. The more useful inhibitors of platelet agglutination are believed to have a selectivity in inhibitory activity towards individual groups of adhesive molecules and towards the family members of each group of adhesive molecules.
It would therefore also be desirable to find a compound which has such a selectivity or a higher selectivity in comparison with known inhibitors of platelet agglutination.
It is also known that there are different groups of GPIIb / IIIa antagonists. For example, monoclonal antibody antagonists against GPIIb / IIIa have been developed. In addition, small molecules are known which prevent the binding of adhesion molecules to GPIIb / IIIa, for example from US Pat. Nos. 5,039,805 and 5,084,446, from patent applications CA-A-2 008 161, CA. -A-2 037 153 and CA-A-2 061 661, and from Alig et al. , al, J. Med. Chem. , 1992, 35, 4383. The structures of these compounds are usually adapted to the binding regions of the adhesion molecules, for example to the amino acid sequence RGD (arginyl glycyl aspartate) within the fibrinogen structure.
It is believed that such compounds can be used to suppress platelet agglutination and - for example - clot formation for a sufficient period of time to allow damaged tissue to heal without the deleterious after effects of excessive platelet agglutination processes. It is a theoretical difficulty affecting the various groups of GPIIb / IIa antagonists that suppression of platelet agglutination causes a decrease in the rate of blood clotting and thus an increase in the frequency and length of bleeding. Although a slight increase in bleeding duration is acceptable, certain clinically relevant bleeding, such as bleeding inside the skull, could become life-threatening.
It would therefore be desirable to find a compound that has the benefit of high GPIIb / IIIa antagonist activity of the compound disclosed in Example 132 of International Patent Application WO94 / 22834, and the disadvantages of increasing bleeding duration and frequency of more deleterious clinically relevant Bleeding, as it is known for known GPIIb / IIIa antagonists, does not have or shows to a lesser extent.
According to the present invention, the optically active invention is (-) - (3R) -3-methyl-4- 4- [4- (4-pyridyl) piperazin-1-yl] phenoxy-butyric acid or a pharmaceutically acceptable salt, ester, amide or Solvat provided, which are essentially free of the (+) - (3S) stereoisomer.
The (-) - (3R) compound has a significantly higher activity than the GPIIb / IIIa antagonist than the corresponding (+) - (3S) isomer (more than 10 times higher activity). The (-) - (3R) compound has a selectivity in inhibitory activity towards the groups of adhesion molecules and towards the family members of these groups. For example, the compound exhibits activity against the binding of GPIIb / IIIa to fibrinogen (pIC50 = 7.65), but not against the binding of alpha v beta 3 to vitronectin (pIC50 less than 4) or against the binding of alpha 5 beta 1 on fibronectin (pIC50 less than 4).
Accordingly, the (-) - (3R) compound is a new, active, and selective fibrinogen receptor antagonist that is susceptible to or susceptible to adverse effects such as excessive bleeding associated with the administration of other fibrinogen antagonists, such as the (3RS ) Racemate mixture, are significantly reduced. The use of the (-) - (3R) compound also avoids the susceptibility to deleterious effects associated with the administration of the less therapeutically effective (+) - (3S) compound present in the (3RS) racemate mixture. The use of the (-) - (3R) compound allows a more detailed analysis of structure / activity / toxicity and results in an improved therapeutic efficiency.
It is therefore desirable to use the (-) - (3R) compound of the present invention instead of the (3RS) racemate mixture of Example 132 from International Patent Application No. WO 94/22 834 to use.
Particular pharmaceutically acceptable salts of the (-) - (3R) compound of the present invention include, for example, salts with acids that provide a physiologically acceptable anion, such as salts with mineral acids such as a hydrogen halide, e.g. B. Hydrogen chloride and hydrogen bromide, such as sulfuric acid or phosphoric acid, and salts with organic acids, such as trifluoroacetic acid.
Other pharmaceutically acceptable salts include, for example, salts with inorganic bases, such as alkali metal and alkaline earth metal salts, such as sodium salts, ammonium salts and salts with organic amines and quaternary bases, which form a physiologically acceptable cation, such as salts with methylamine, dimethylamine, Trimethylamine, ethylenediamine, piperidine, morpholine, pyrrolidine, piperazine, ethanolamine, triethanolamine, N-methylglucamine, tetramethylammonium hydroxide and benzyltrimethylammonium hydroxide. Particular pharmaceutically acceptable esters of the (-) - (3R) compound of the invention include, for example, ester derivatives of the carboxylic acid group in the compound of the invention, for example esters derived from alcohols such as the (1 to 6C) alcohols (e.g. B. Methanol, ethanol, propanol and tert-butanol), indanol, adamantol, (1 to 6C) alkanyloxy (1 to 4C) alcohols (e.g. B.
Pivaloyloxymethanol) and (1 to 4C) alkoxycarbonyl (1 to 4C) alcohols (e.g. B. Methoxycarbonylmethanol) are formed.
Particular pharmaceutically acceptable amides of the (-) - (3R) compound of the invention include, for example, amide derivatives of the carboxylic acid group in the compound of the invention, for example amides derived from amines such as ammonia, (1 to 4C) alkylamines (e.g. B. Methylamine), di- (1-4C) alkylamines (e.g. B. Dimethylamine, N-ethyl-N-methylamine and diethylamine), (1 to 4C) alkoxy (2 to 4C) alkylamines (e.g. B. 2-methoxyethylamine), phenyl (1 to 4C) alkylamines (e.g. B. Benzylamine) and amino acids (e.g. B. Glyin or its esters) are formed. Particular amides of the (-) - (3R) compound of the invention include, for example, the N-methyl, N, N-dimethyl, N-ethyl-N-methyl and N, N, -diethyl-butyramides.
Particular pharmaceutically acceptable solvates of the (-) - (3R) compound of the invention include, for example, the hydrates, e.g. B. the hemihydrate, monohydrate, dihydrate or trihydrate, or some other amount.
The phrase "substantially free of the (+) - (3S) stereoisomer" as used herein previously means that at least 90 percent by weight of the (-) - (3R) isomer and 10 percent by weight or less of the corresponding ( +) - (3S) isomers are present. Preferably at least 95 percent by weight of the (-) - (3R) isomer and 5 percent by weight or less of the (+) - (3S) isomer are present. More preferably, at least 99 percent by weight of the (-) - (3R) isomer and 1 percent by weight or less of the (+) - (3S) isomer are present.
The (-) - (3R) compound of the invention, or a pharmaceutically acceptable salt, ester, amide or solvate thereof, can be prepared by any method known in the art for the preparation of such a compound. Suitable methods include asymmetric synthesis using a suitable chiral intermediate and cleavage of the (3RS) racemate mixture. Such procedures include the following:
a) Reaction of 4- [4- (4-pyridyl) piperazin-1-yl] phenol, or a reactive derivative thereof, with the chiral intermediate (3R) -4-hydroxy-3-methylbutyric acid or an ester thereof or a reactive one Derivative thereof.
The reaction is conveniently carried out in the presence of a strong base such as an alkali metal dride, for example sodium hydride. Suitable solvents include amides such as dimethylformamide. The reaction is expediently carried out at a temperature in the range from 0 to 100 ° C.
Suitable esters of the chiral intermediate (3R) -4-hydroxy-3-methylbutyric acid include, for example, the methyl, ethyl, propyl and tert-butyl esters. Suitable reactive derivatives thereof include, for example, the (3R) -4-halogeno-3-methylbutyric acid or an ester thereof (e.g. B. the methyl or ethyl ester), e.g. B. the 4-chloro or 4-bromo derivatives, the (3R) -4-alkylsulfonyloxy-3-methylbutyric acid or an ester thereof (e.g. B. the methyl or ethyl ester), such as the 4-methanesulfonyloxy derivative, or the (3R) -4-arylsulfonyloxy-3-methylbutyric acid or an ester thereof (e.g. B. the methyl or ethyl ester), such as the 4-p-toluenesulfonyloxy derivative.
b) implementation of a compound of formula I.
EMI9. 1
in which L represents a leaving atom or a leaving group with the chiral intermediate (3R) -3-methyl-4- [4 (piperazin-1-yl) phenoxy] butyric acid or an acid addition salt thereof.
Examples of data for L include halogen such as chlorine or bromine, and cyano.
Examples of acid addition salts of (3R) -3-methyl-4- [4 (piperazin-1-yl) phenoxy] butyric acid include, for example, the hydrochlorides.
The reaction can expediently be carried out at a temperature in the range from -10 to 120 ° C., preferably from 10 to 100 ° C. Suitable solvents include z. B. Ethers such as tetrahydrofuran and dioxane, amides such as dimethylformamide, nitriles such as acetonitrile, halogenated hydrocarbons such as dichloromethane, alcohols such as ethanol and water.
In some cases, for example when an acid addition salt of (3R) -3-methyl-4- [4- (piperazin-1-yl) phenoxy] butyric acid is used as the starting material, the reaction can advantageously be carried out in the presence of a base. Examples of suitable bases include tertiary amines such as triethylamine, alkali metal hydroxides, carbonates and bicarbonates, such as sodium or potassium hydroxide, carbonate or bicarbonate.
c) decomposition of an ester of formula II
EMI10. 1
in which R denotes a carboxyl protecting group.
R can be any conventional carboxyl protecting group that can be removed without attacking other parts of the molecule. Examples of carboxyl protecting groups include (1 to 6C) alkyl groups (such as methyl, ethyl, propyl, or t-butyl), phenyl and benzyl, the phenyl group in all of these optionally 1 or 2 halogen, (1 to 4C) alkyl, (1 to 4C) can carry alkoxy or nitro groups.
The decomposition can be carried out using all conventional reagents and conditions known in the art for converting carboxylic esters to carboxylic acids. The decomposition can be carried out, for example, by base-catalyzed hydrolysis, e.g. B. using an alkali metal hydroxide such as lithium, potassium or sodium hydroxide or a tertiary amine such as triethylamine in the presence of water. The base catalyzed hydrolysis can be carried out in the presence of a solvent such as an alcohol, e.g. B. Methanol or ethanol, or an ether such as tetrahydrofuran or dioxane. Alternatively, the decomposition can be carried out via acid hydrolysis, e.g. B. be carried out using aqueous acetic acid or trifluoroacetic acid.
The temperature is expediently in the range from -10 to 100 ° C., for example from 10 to 50 ° C. If the alcohol residue is t-butyl, this can be done by heating, e.g. B. to a temperature in the range from 80 to 150 ° C., whether alone or in the presence of a suitable diluent such as diphenyl ether or diphenyl sulfone. A benzyl group can be removed by catalytic hydrogenation, e.g. B. by hydrogenation in the presence of palladium on carbon at a temperature in the range from -10 to 100 ° C., in the presence of a solvent such as an alcohol, for example methanol or ethanol.
d) Cleavage of the (3RS) racemate mixture of (3RS) -3-methyl-4- 4- [4- (4-pyridyl) piperazin-1-yl] phenoxy-butyric acid. The cleavage of the butyric acid derivative in the (3RS) racemate mixture can be carried out by conventional means, for example by salt formation using an optically active base, followed by separation, for example by fractional crystallization, of the two salts thus formed and release of the separated (-) - (3R) - and (+) - (3S) compounds by acidifying the separated salts.
The cleavage of the butyric acid derivative in the (3RS) racemate mixture can also be carried out via the conventional means of forming diastereomeric ester pairs by reacting with an optically active alcohol, the separation of the esters, e.g. B. via chromatography, and release of the separated (-) - (3R) - and (+) - (3S) compounds by hydrolysis of the separated esters. An analogous approach involving the preparation of a diastereomeric pair of amides can also be followed.
The preparation of the (-) - (3R) compound and the chiral intermediate are described by the accompanying, non-limiting examples, which are provided for the purpose of illustration only.
Certain chiral intermediates previously defined here are new, therefore the compound tert-butyl (3R) -3-methyl-4-hydroxybutyrate or a reactive derivative thereof is described in a form essentially free of the (3S) stereoisomer. A particular reactive derivative that can be mentioned is tert-butyl- (3R) -methyl-4- (p-toluenesulfonyloxy) butyrate.
The phrase "substantially free from the (3S) stereoisomer" as used herein before has the same meaning as given in connection with the (-) - (3R) compound of the invention.
For example, if a pharmaceutically acceptable salt of the (-) - (3R) compound of the invention is needed, it can be obtained by reacting said compound with an appropriate acid or base using a conventional method. If a pharmaceutically acceptable ester or an amide of the (-) - (3R) compound of the invention is required, these can be obtained, for example, by said compound with a suitable alcohol or Amine can be reacted using a conventional method.
The ability of the (-) - (3R) compound of the invention to suppress platelet agglutination and to suppress fibrinogen binding to GPIIb / IIIa can be demonstrated by the methods described in International Patent Application No. WO 94/22 834 disclosed standard test methods (a) and (b) can be used, which test methods are incorporated herein by reference.
The (-) - (3R) compound of the invention has activity against adenosine diphosphate (ADP) agglutination of human platelets with a pA2 = 7.3 and against binding of fibrinogen to GPIIIb / IIIa with a pIC50 = 7, 65.
As previously stated, the (-) - (3R) compound of the invention can be used in the therapy or prevention of diseases in which cell adhesion (especially platelet agglutination) plays a role, such as venous or arterial thrombosis (e.g. . B. Pulmonary embolism, stroke and thrombotic incidents associated with unstable angina and the transient ischemic attack), myocardial infarction, atherosclerosis, thromboembolism and reocclusion during and after thrombolytic therapy. The compounds can also be useful in preventing reocclusion and restenosis after percutaneous transluminal coronary angioplasia (PTCA) or in transplanting a coronary artery bypass.
It will also be appreciated that the compounds may be useful in the treatment of other diseases mediated by the adhesion of molecules to GPIIb / IIIa, for example cancer.
According to a further aspect of the invention there is provided a use of the (-) - (3R) compound or a salt, ester, amide or solvate thereof in a form essentially free of the (3S) stereoisomer as a medicament.
There is also described a method of preventing platelet agglutination in a warm-blooded animal in need of this treatment, which involves administering an effective amount of the (-) - (3R) compound or a pharmaceutically acceptable salt, ester, amide or solvate thereof in a form essentially free of the (3S) stereoisomer.
A method of preventing thrombotic incidents accompanying unstable angina in a warm-blooded animal in need of this treatment is also described, which involves administering an effective amount of the (-) - (3R) compound or a pharmaceutically acceptable salt, ester, amide or solvates thereof in a form substantially free of the (3S) stereoisomer.
There is also described a method of preventing platelet agglutination while substantially reducing deleterious effects associated with the administration of the (3RS) racemate mixture in a warm-blooded animal in need of this treatment, which comprises administering an effective amount of the (-) - ( 3R) compound or a pharmaceutically acceptable salt, ester, amide or solvate thereof in a form substantially free of the (3S) stereoisomer.
According to a further aspect of the invention, a use of the (-) - (3R) compound or a pharmaceutically acceptable salt, ester, amide or solvate thereof in a form essentially free of the (3S) stereoisomer is used for the manufacture of a medicament for prevention or treatment a disease related to platelet agglutination.
According to a further aspect of the invention, a use of the (-) - (3R) compound or a pharmaceutically acceptable salt, ester, amide or solvate thereof in a form essentially free of the (3S) stereoisomer is used for the manufacture of a medicament for prevention or treatment a disease related to the binding of fibrinogen to GPIIb / IIIa.
According to a further aspect of the invention, the use of the (-) - (3R) compound or a pharmaceutically acceptable salt, ester, amide or solvate thereof in a form essentially free of the (3S) stereoisomer for the manufacture of a medicament for prevention or treatment of thrombotic events accompanying the unstable angina.
In general, the (-) - (3R) compound of the invention is administered for this purpose via an oral, rectal, topical, intravenous, subcutaneous, intramuscular or inhalation route, so that, depending on the route of administration, the age and gender of the patient and the seriousness of the Condition a dose in the range of 0.01 to 50 mg per kg body weight is administered.
The (-) - (3R) compound of the invention is typically in the form of a pharmaceutical, the (-) - (3R) compound or a pharmaceutically acceptable salt, ester, amide or solvate thereof in essentially the (3S) Stereoisomer free form pharmaceutical composition comprising, used as a mixture with a pharmaceutically acceptable diluent or carrier. Such a composition is provided as a further feature of the invention and can be in a variety of dosage forms.
For example, it can be in the form of tablets, capsules, solutions or suspensions for oral administration; in the form of creams or ointments or as a transdermal (skin) plaster for topical administration; in the form of a suppository for rectal administration; in the form of a sterile solution or suspension for intravenous or intramuscular injection; in the form of an aerosol or an atomizing solution or suspension for administration by inhalation; and in the form of a powder, together with pharmaceutically acceptable, inert, solid diluents such as lactose for administration via a runny nose.
For example, depending on the route of administration, the composition may comprise 0.1 to 99.9 percent by weight of the (-) - (3R) compound of the invention.
The pharmaceutical compositions can be obtained by conventional methods using diluents and carriers well known in the art. Tablets and capsules for oral administration may conveniently be formed with an enteric coating comprising, for example, cellulose acetate phthalate, in order to minimize the contact of the (-) - (3R) compound of the invention with the stomach acids.
The (-) - (3R) compound of the invention can be administered or formulated together with one or more agents known to be valuable in the diseases or conditions to be treated, for example a useful inhibitor platelet agglutination (e.g. B. Aspirin, a thromboxane antagonist or an inhibitor of thromboxane synthase), a hypolipidemic agent, an antihypertensive agent, a thrombolytic agent (such as streptokinase, urokinase, prourokinase, an activator of tissue plasminogen and derivatives thereof), a beta-adrenergic blocker or a vasodilator may also be present in a pharmaceutical composition of the invention for the treatment of heart or vascular disease or condition.
In addition to its use in therapeutic medicine, the (-) - (3R) compound of the invention is also useful as a pharmacological tool in the development and unification of test systems for determining the effect of adhesion molecules in laboratory animals such as cats, dogs, rabbits, monkeys , Rats and mice as part of the search for new therapeutic agents.
The (-) - (3R) compound of the invention can also be used to improve the storage of blood or the viability of blood and blood vessels in warm-blooded animals (or parts thereof) because of their ability to suppress platelet agglutination ) that are connected to an artificial circulation, for example during a limb or organ transplant. When the (-) - (3R) compound of the invention is used for this purpose, it will generally be administered so that an equilibrium concentration in the blood, for example in the range of 0.1 to 10 mg per liter, is achieved.
The invention will now be illustrated by the following, non-limiting examples, in which, unless stated otherwise, the following applies:
i) Concentrations and evaporations were carried out by rotary evaporation in vacuo;
ii) the work was carried out at ambient temperature, d. H. in the range from 18 to 26 ° C;
iii) Column chromatographies were carried out on silica gel (Merck 7736) manufactured by E. Merck and Co. , Darmstadt, Germany, is available;
iv) yields are given for illustration only and are not necessarily the maximum attainable through careful process development;
v) Proton NMR spectra were typically measured at 200 MHz or 250 MHz, using tetramethylsilane (TMS) as the internal standard, and are given as chemical shifts (delta values) in ppm with respect to TMS, and the Conventional abbreviations to denote the main signals: s, singlet; m, multiplet; t, triplet; br, broad; d, doublet; and
vi) The following abbreviations have been used for individual organic solvents: THF for tetrahydrofuran, DMF for N, N-dimethylformamide and DMSO for dimethyl sulfoxide.
example 1
(-) - (3R) -3-Methyl-4- 4- [4- (4-pyridyl) piperazin-1-yl] phenoxy-butyric acid hydrochloride
Sodium hydride (60% dispersion in mineral oil, 2.44 g) was added to a stirred suspension of 4- [4- (4-pyridyl) piperazin-1-yl] phenol (15.5 g) in dry DMF (120 ml) and the mixture was stirred for 45 min. Tert-Butyl (3R) -3-methyl-4- (p-toluenesulfonyloxy) butyrate (20 g) was added and the mixture was stirred for 20 hours. The mixture was evaporated and the residue partitioned between dichloromethane and water. The organic phase was washed with water, filtered through phase separating paper (Whatman IPS) and evaporated. The residue was triturated under diethyl ether. The solid so obtained was recrystallized from ethyl acetate to give tert-butyl - (-) - (3R) -3-methyl-4- 4- [4- (4-pyridyl) piperazin-1-yl] phenoxy-butyrate (10.6 g ) was obtained.
Mp 112-113 ° C;
alpha D = -5.5 DEG (conc. = 1 g / 100 ml methanol; 20 ° C);
NMR (CDCl3) delta 8.3 (2H, d), 6.89 (4H, m), 6.7 (2H, m) 3.79 (2H, d), 3.46 (4H, m), 3 , 28 (4H, m), 2.31-2.53 (2H, m), 2.08-2.21 (1H, m), 1.44 (9H, s), 1.07 (3H, i.e. ).
A mixture of tert-butyl - (-) - (3R) -3-methyl-4- 4- [4- (4-pyridyl) piperazin-1-yl] phenoxyubutyrate (10.53 g) and 1N aqueous hydrochloric acid (250 ml) was stirred for 44 hours. 1N aqueous sodium hydroxide solution (250 ml) was added and the mixture was cooled to 5 ° C. The mixture was filtered and the filtrate evaporated. Water (150 ml) was added and the precipitate obtained was washed in turn with water, acetone and diethyl ether. The material so obtained was stirred with 1N aqueous hydrochloric acid (25 ml) for 16 hours. The mixture was cooled to 5 ° C. and filtered. The solid obtained in this way was washed in succession with water, acetone and diethyl ether and dried, giving (-) - (3R) -3-methyl-4- 4- [4- (4pyridyl) piperazin-1-yl] phenoxylbutyric acid hydrochloride (7.9 g) was obtained.
Mp 203-205 ° C;
alpha D = -6.2 DEG (conc. = 1 g / 100 ml methanol; 20 ° C);
NMR (d6-DMSO) delta 13.8 (1H, br), 12.1 (1H, br), 8.27 (2H, d), 7.28 (2H, d), 6.9 (4H, m ), 3.8 (6H, m), 3.18 (4H, t), 2.45 (1H, m), 2.23 (1H, m), 2.12 (1H, m), 1.0 (3H, d);
m / e 356 (M + H) <+>.
Calculated for C20H25N3O3 x HCl x H2O: C 58.5; H 6.8; N 10.2;
Found: C 58.3; H 6.9; N 10.2%.
The chiral starting material required was prepared as follows:
Sodium bis (trimethylsilyl) amide (1M in THF, 170 ml) was added dropwise to a solution of (4S) -4-isopropyl-3-propionyloxyazolidin-2-one (J. Am. Chem. Soc. 1981, 103, 2127 ; 28.4 g) in dry THF (500 ml), which had been cooled to -70 ° C. and placed under an argon atmosphere. The rate of addition was adjusted so that the temperature of the reaction mixture did not rise above -67 ° C. The solution obtained was stirred at -70 ° C. for 30 minutes. Tert-butyl bromoacetate (42.3 g) was added dropwise and the solution was stirred at -70 ° C. for 3 hours. The solution was then allowed to gradually warm up to room temperature. The solvent was evaporated and the residue partitioned between diethyl ether and water.
The organic phase was separated, filtered through phase separating paper (Whatman IPD) and evaporated. The residue was triturated under hexane at -40 ° C to give a solid (21.6 g). A second fraction of the solid (4.4 g) was obtained by evaporating the hexane solution and purifying the residue by filtration chromatography on silica gel starting with hexane and gradually changing to ethyl acetate: hexane 1:10. The two fractions of the solid were combined and recrystallized from hexane to give (4S) -3 - [(2R) -3-tert-butoxycarbonyl-2-methylpropionyl] -4-isopropyloxazolidin-2-one (22.5 g) .
Mp 64-65 ° C;
NMR (CDCl3) delta 4.4.1 (1H, m), 4.21 (2H, m), 4.12 (1H, m), 2.79 (1H, m), 2.28-2.4 (2H, m), 1.41 (9H, s), 1.16 (3H, d), 0.9 (6H, m).
Hydrogen peroxide (30%, 44 ml) and lithium hydroxide monohydrate (6.38 g) were added in succession to a stirred mixture of (4S) -3 - [(2R) -3-tert-butoxycarbonyl-2-methylpropionyl] -4-isopropyloxazolidine -2-one (22.5 g), water (280 ml) and THF (800 ml), which had been cooled to 5 ° C., were added. The mixture obtained was stirred at 5 ° C. for 3 hours. A saturated aqueous solution of sodium metabisulfite was added to destroy the excess hydrogen peroxide and the solvent was evaporated. The residue was extracted with dichloromethane. The aqueous solution was acidified by adding an aqueous solution of citric acid and extracted with dichloromethane. The extracts were combined, washed with water and filtered through phase separating filter paper.
The filtrate was evaporated to give 1-tert-butyl- (3R) -3-methylsuccinate (12.9 g) as \ l.
NMR (CDCl3) delta 2.9 (1H, m), 2.64 (1H, m), 2.37 (1H, m), 1.4 (9H, s), 1.23 (3H, d).
Borane dimethyl sulfide was added to a stirred mixture of 1-tert-butyl- (3R) -3-methylsuccinate (12.9 g) and THF (200 ml), which had been cooled to -10 ° C. and placed under an argon atmosphere -Complex (10M, 10.3 ml) added over 15 min. The mixture was stirred at -10 ° C. for 30 minutes. The mixture was allowed to warm to room temperature and stirred for one hour. The mixture was cooled again to 5 ° C. and methanol (50 ml) was added in portions. The mixture was allowed to warm to room temperature and stirred for 30 minutes. The mixture was evaporated and the residue partitioned between dichloromethane (100 ml) and water (100 ml). The organic phase was filtered through phase separating paper and evaporated to give tert-butyl (3R) -4-hydroxy-3-methylbutyrate (11 g) as one.
NMR (CDCl3) delta 3.55 (2H, m), 2.1-2.4 (3H, m), 1.46 (9H, s) 0.98 (3H, d).
To a stirred mixture of tert-butyl (3R) -4-hydroxy-3-methylbutyrate (11 g), triethylamine (21 ml) and dichloromethane (120 ml), p-toluenesulfonic acid chloride (13.2 g) was added in portions and the Mixture stirred for 20 hours. The mixture was washed in turn with water and dilute aqueous sodium carbonate solution. The organic solution was filtered through phase separating paper and evaporated to give tert-butyl (3R) -3-methyl-4 -) (p-toluenesulfonyloxy) butyrate (20 g) as a \ l.
NMR (CDCl3) delta 7.6 (2H, d), 7.33 (2H, d), 3.92 (2H, d), 2.45 (3H, S), 2.18-2.47 (2H , m), 2.0-2.15 (1H, m), 1.42 (9H, s), 0.95 (3H, d).
Example 2
Illustrative pharmaceutical dosage forms suitable for administering the compound of the invention for therapeutic or prophylactic purposes include the following, which can be obtained via conventional methods well known in the art:
<tb> <TABLE> Columns = 2
<tb> Head Col 1: a) Tablet I
<tb> Head Col 2: mg / tablet
<tb> <SEP> Active ingredient <SEP> 1.0
<tb> <SEP> lactose Ph. Eur. <SEP> 93.25
<tb> <CEL AL = L> sodium croscarmellose <SEP> 4.0
<tb> <SEP> corn starch paste (5% w / v aqueous paste) <SEP> 0.75
<tb> <CEL AL = L> Magnesium stearate <SEP> 1.0
<tb> </TABLE>
<tb> <TABLE> Columns = 2
<tb> Head Col 1: b) Tablet II
<tb> Head Col 2: mg / tablet
<tb> <SEP> Active ingredient <SEP> 50
<tb> <SEP> lactose Ph.
Eur. <SEP> 223.75
<tb> <CEL AL = L> sodium croscarmellose <SEP> 6.0
<tb> <SEP> cornstarch <SEP> 15.0
<tb> <SEP> polyvinylpyrrolidone (5% w / v aqueous paste) <SEP> 2.25
<tb> <SEP> magnesium stearate <SEP> 3.0
<tb> </TABLE>
<tb> <TABLE> Columns = 2
<tb> Head Col 1: c) tablet III
<tb> Head Col 2: mg / tablet
<tb> <SEP> Active ingredient <SEP> 100
<tb> <SEP> lactose Ph. Eur. <SEP> 182.75
<tb> <CEL AL = L> sodium croscarmellose <SEP> 12.0
<tb> <SEP> corn starch (5% w / v aqueous paste) <SEP> 12.0
<tb> <SEP> polyvinyl pyrrolidone <SEP> 2.25
<tb> <CEL AL = L> Magnesium stearate <SEP> 3.0
<tb> </TABLE>
<tb> <TABLE> Columns = 2
<tb> Head Col 1: c) capsule
<tb> Head Col 2: mg / capsule
<tb> <SEP> Active ingredient <SEP> 10
<tb> <SEP> lactose Ph.
Eur. <SEP> 488.5
<tb> <CEL AL = L> Magnesium stearate <SEP> 1.5
<tb> </TABLE>
<tb> <TABLE> Columns = 2
<tb> <SEP> c) injection <SEP> mg / ml
<tb> <SEP> active ingredient (acid addition salt) <SEP> 1.0
<tb> <CEL AL = L> sodium chloride <SEP> 9.0
<tb> <SEP> Purified water to 1.0 ml
<tb> </TABLE>
Example 3
The following is a description of a study of the effects of the (-) - (3R) compound of the invention and the corresponding (3RS) racemate mixture in rats. Four groups of ten Alderley Park Wistar rats (each group comprising five male and five female rats) were treated orally with the (3RS) racemate mixture at a daily dose of 0, 25, 100 or 500 mg / kg. The treatment was continued for a total of seven days. The animals were killed and examined. Damage effects were observed in the livers of 6 rats from the group of ten treated with 500 mg / kg / day.
Four groups of ten Alderley Park Wistar rats (each group comprising five male and five female rats) were treated orally with the (-) - (3R) compound of the invention at daily doses of 0, 50, 250 or 1000 mg / kg. The highest dose was not tolerated. After four or five days, four of the animals in this group were sacrificed. The remaining six animals were treated with 500 mg / kg / day for the rest of the study. The treatment was continued for a total of fourteen days. The animals were killed and examined. No damage effects were observed in the livers of the rats from the group treated with 250 mg / kg / day. The six animals treated with 1000 mg / kg / day for three or four days and then with 500 mg / kg / day for ten or eleven days also showed no damage to the liver.
Based on such observations, it can be seen that the (-) - (3R) compound of the invention does not cause any significant damaging effect in the rat liver at 500 mg / kg / day.
It follows that the (-) - (3R) compound is less toxic than the (3RS) racemate mixture.