CH622808A5

CH622808A5 -

Info

Publication number: CH622808A5
Application number: CH655977A
Authority: CH
Inventors: Renato Cricchio
Original assignee: Lepetit Spa
Priority date: 1976-05-28
Filing date: 1977-05-27
Publication date: 1981-04-30
Also published as: AU510254B2; IE45729L; PH16894A; IE45729B1; SE439311B; FI62098B; HK15079A; NL181011C; DE2720088A1; JPS5321199A; AU2411077A; DE2720088C2; SE7706190L; FI62098C; IL51861A0; JPS603316B2; GB1523199A; DK233877A; DK149859B; US4144234A

Description

La présente invention a pour objet des procédés pour la préparation de dérivés de thiazolorifamycine de formule:

Me Me

HO

OH

RO

OH

Meo.

Me dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou le groupe CH3CO — et Rj est un atome d'hydrogène ou le groupe — CH2OH.

Les deux composés de formule I dans laquelle R est CH3CO et Ri est un atome d'hydrogène et le groupe — CH2OH correspondent respectivement aux produits naturels définis dans le brevet Belge N° 832921 comme étant la rifamycine P et la rifamycine Q. Ces deux métabolites microbiologiquement actifs étaient obtenus ensemble avec d'autres produits naturels par la fermentation de souches de Nocardia mediterranei identifiées par des numéros A.T.C.C. 31064, 31065, 31066.

Les procédés de la présente invention présentent l'avantage d'une voie plus commode pour la préparation des deux produits décrits antérieurement, en ce qui concerne les rendements, les coûts et la pureté des produits. Les deux composés de formule I dans laquelle R est un atome d'hydrogène, c'est-à-dire les dérivés 25-désacetyl de la rifamycine P et de la rifamycine Q respectivement sont de nouvelles substances antibactériennes.

Les procédés de préparation du composé de formule I impliquent la réaction de la rifamycine S de formule:

CH

KO

OK

Me dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou le groupe CH3CO avec un ester de cystéine de formule:

HS - CH2 - CH - COOR2

I

NH2 (II)

dans laquelle R2 est un groupe alkoyle, cycloalkoyle, phényle ou benzyle ou un de leurs sels d'addition d'acide tel qu'un halogèn-hydrate ou un sulfate. Le terme «alkoyle» dans la présente description et les revendications identifie un groupe aliphatique à chaîne droite ou ramifiée ayant de 1 à 8 atomes de carbone. Le terme «cycloalkoyle» identifie un noyau cycloaliphatique ayant 5 à 8 membres qui facultativement peut porter un ou deux substituants alkoyle inférieurs. Dans la description et les revendications les termes «phényle» et «benzyle» représentent les groupes phényle et benzyle non substitués ainsi que des groupes phényle et benzyle substitués par un ou deux radicaux choisis parmi les suivants: chloro, bromo, fluoro, nitro, alkoxy

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inférieur, cyano, trifluorométhyle, sulfamoyle et (alkoyle inférieur) Le schéma suivant où Ri et R2 ont les mêmes significations sulfonyle. que ci-dessus résume la voie réactionnelle du présent procédé chimique.

Mû MU

Me O

Me f:1£

rifamycine S

e

0-CH --ÇH-C0OR.,

NH

2~ÇH-a oj

Me o cyclisation oxydante j*t e

Me

COOR,

Me o i ri hydrolyse alcaline douce

(di;c. ui.«. j.-:y ] uLion)

I (Ä1=H)

dérivé de rifamycine réduction

1 fR1=CH20H)

dérivé de rifamycine Q

On peut obtenir les composés de formule I dans laquelle R est un atome d'hydrogène directement par le procédé décrit ci-dessus ainsi que par l'hydrolyse des composés respectifs de formule I dans laquelle R est le groupe CH3CO dans un milieu fortement alcalin.

La réaction conduisant à l'intermédiaire de formule III qui est la thiazolorifamycine peut être conduite en une seule étape et également en deux étapes. Lorsqu'on conduit la réaction en deux

étapes, l'agent d'oxydation nécessaire pour produire la cyclisation oxydante est ajouté au mélange réactionnel après la réaction du dérivé de cystéine avec la rifamycine S (première étape) est complète. On conduit la première étape par la mise 65 en contact de proportions environ équimoléculaires des deux corps réagissant dans un solvant organique miscible à l'eau tels qu'un alcanol inférieur, le dioxanne ou le tétrahydrofuranne. La température de la réaction peut aller de la température

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ordinaire jusqu'à la température d'ébullition du mélange.

Le temps réactionnel dépend principalement de la température réactionnelle et généralement, on le détermine en observant la disparition de la rifamycine S par Chromatographie sur couche mince. La 3-(éthylthio 2-substitué)-rifamycine SV, c'est-à-dire l'intermédiaire ainsi obtenu est alors mise en contact avec un agent oxydant pour amorcer la deuxième étape réactionnelle. Ledit agent oxydant est habituellement choisi parmi un vaste groupe de substances y compris des quinones, des nitrites organiques, des peroxides, des persulfates, l'acide nitreux, des dérivés de manganèse et de plomb tétravalent, des dérivés de fer trivalent, des sels mercurique et cuprique.

Parmi les agents oxydants préférés, on peut citer par exemple, la p-quinone, la 2,5 diméthyl-p-quinone, la 2,6-diméthoxy-p-quinone, la tétrachloro-p-quinone (chloranil), la dichlorodicyano-p-quinone, la duroquinone, la rifamycine S, des nitrites d'alkoyle, l'eau oxygénée, des persulfates de métal alcalin, des ferricyanures de métal alcalin, l'acétate cuprique, l'acétate mercurique et le dioxyde de manganèse.

Lorsque la première étape est complète, on ajoute l'agent oxydant au mélange réactionnel et on maintient la valeur du pH comprise entre 2 et 6,5 avantageusement entre 4 et 5 et de préférence entre 4,2 et 4,8 au cours de la réaction ultérieure. Un moyen approprié pour régler le pH consiste à ajouter un agent tampon aqueux. Cette deuxième étape de la réaction appelée «cyclisation oxydante» est conduite avantageusement à une température comprise entre la température ordinaire et la température d'ébullition du mélange réactionnel. Une gamme de températures préférée est comprise entre environ 18°C et environ 45° C. On suit généralement la marche réactionnelle par Chromatographie sur couche mince (mélange 9:1 de chloroforme: méthanol comme éluant) du moment que la formation de la thiazolorifamycine III est facilement détectée sous forme d'une tâche jaune fluorescente ayant une valeur Rf d'environ 0,4. Lorsque la réaction est complète, on travaille le mélange afin d'éliminer l'agent oxydant ou ses produits réactionnels. Le procédé suivi dépend généralement du type d'agent oxydant utilisé. En général, il s'agit d'opérations de filtration et d'extraction; notamment, lorsqu'on utilise des quinones comme agents oxydants dans certains cas, il peut être utile d'éliminer le dérivé hydroquinone obtenu en l'oxydant de nouveau en la quinone d'origine et en extrayant simultanément cette dernière avec un solvant approprié. Lorsqu'on a éliminé les produits secondaires réactionnels, on peut facilement isoler la thiazolorifamycine III sous forme d'un produit cristallin en suivant les techniques habituelles.

La réaction conduisant au composé intermédiaire III peut être conduite en une seule étape si on utilise un agent oxydant qui ne gêne pas les deux autres corps réagissant. Des agents oxydants appropriés dans ce but sont la rifamycine S elle-même ou une quinone tétra-substituée telle que la duroquinone, le chloranile, ou la dichlorodicyano-p-quinone. Lorsqu'on conduit le procédé en une seule étape, on dissout des proportions environ équimoléculaires de substrat de rifamycine S et de l'ester de cystéine qui est un des corps réagissant dans un solvant organique miscible à l'eau tels qu'un alcanol inférieur, le dioxanne, le tétrahydrofuranne en présence d'au moins la quantité stoechiométrique d'un agent oxydant choisi de manière appropriée. On laisse reposer le mélange à une température comprise entre 18° C et 45° C en présence d'un tampon aqueux à un pH compris entre 2 et 6,5, avantageusement entre 4 et 5 et de préférence entre 4,2 et 4,8. On règle la marche réactionnelle par Chromatographie sur couche mince qui indique la disparition de la rifamycine S de départ et la présence de la nouvelle tache jaune fluorescente due à la thiazolorifamycine III. En général, après un temps allant de 10 à 80 h, la réaction est terminée et on travaille le mélange pour éliminer les produits secondaires et isoler la thiazolorifamycine comme indiqué ci-dessus.

L'ester de la thiazolorifamycine de formule III obtenu selon les procédés décrits plus haut, est alors décarboxylé par hydrolise alcaline douce suivie d'acidification en le composé de formule I dans laquelle Ri est un atome d'hydrogène. Des conditions d'hydrolise appropriées sont établies au moyen d'hydroxydes d'alcali dilués ou de carbonates d'alcali.

Selon une forme d'exécution préférée de l'invention, on dissout le composé intermédiaire III dans un mélange d'un solvant organique miscible à l'eau et du carbonate de sodium aqueux à 10% puis on laisse reposer à la température ordinaire pendant 2 à 6 h. L'acidification avec un acide minéral fort, l'extraction avec un solvant non miscible à l'eau et la concentration de l'extrait organique donne le composé de formule I précité. Le composé de formule I dans laquelle R et le groupe CH3CO s'est montré identique à un échantillon de rifamycine P obtenu par fermentation conformément au brevet belge N° 832921. On a prouvé l'identité en se basant sur des propriétés physico-chimiques tels que le point de fusion, le comportement chromatographique dans différents mélanges de solvants,

l'analyse élémentaire, le spectre de masse, le spectre de résonance magnétique nucléaire, les spectres d'absorption I.R.,

U.V. et de la lumière visible et aussi par des essais microbiologiques.

La thiazolorifamycine intermédiaire de formule III ayant un groupe carboxyester sur le noyau de thiazole peut être réduite avec un hydrure de métal alcalin-aluminium en le dérivé correspondant ayant un groupe hydroxyméthyle en la même position. Pour cette étape de réduction, on peut aussi utiliser d'autres agents réducteurs connus pour avoir un effet identique envers le fragment carboxyester, par exemple, A1H3, LiAlH(OCH3)3, NaBHU (excès de) [(CH3)2 - CH -CH2 -]2A1H, NaAl(OCH2-CH2OCH3)2H2, NaB(OCH3)3H, CaCl2/NaBH4. Le produit réactionnel, c'est-à-dire un composé de formule I dans laquelle Rt est le groupe — CH2OH est facilement isolé du mélange réactionnel après que le contrôle par Chromatographie sur couche mince a môntré la disparition complète de la thiazolorifamycine de départ. L'isolement est conduit suivant les techniques habituelles qui comprennent la dilution du mélange réactionnel avec de l'eau et l'extraction avec un solvant non miscible à l'eau suivi de l'évaporation de l'extrait jusqu'à un petit volume. On a trouvé que le produit ainsi obtenu lorsque R et le groupe CH3CO est identique à un échantillon de rifamycine Q obtenu par fermentation conformément au Brevet belge N° 832921. L'identité est prouvée en se basant sur les propriétés physico-chimiques telles que le point de fusion, le comportement chromatographique dans différents systèmes de solvant, l'analyse élémentaire, le spectre de masse, le spectre de résonance magnétique nucléaire, les spectres d'absorption I.R., U.V. et de la lumière visible.

Comme on l'a indiqué plus haut, les composés dans lesquels R et le groupe CH3CO peuvent être facilement transformés en les dérivés désacétylés correspondants par une hydrolise alcaline forte. Des conditions hydrolitiques appropriées sont, par exemple, obtenues au moyen d'hydroxydes de métal alcalin aqueux à 10% ou plus concentrés ou des alkoxides et des hydrures de métal alcalin. Ces conditions hydrolitiques peuvent être utilisées déjà pendant l'étape de décarboxylation ou de réduction conduisant ainsi directement aux composés 25-désacétyle de formule I.

Les composés obtenus au moyen du procédé décrit ici sont utiles comme agents antibactériens. Ils possèdent, notamment, une activité antibactérienne in vitro et in vivo très élevée contre des micro-organismes Gram positif et Gram négatif tels que Staphylococcus aureus, Streptococcus haemolyticus,

Streptococcus faecalis, Diplococcus pneumoniae, Proteus vulgaris et Mycobacterium tuberculosis.

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10

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25

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50

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60

65

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6

La 25-désacétyle-rifamycine P est un nouveau composé dont l'activité antimicrobienne in vitro est rapportée ci-dessous:

Concentration

inhibitrice

minimale

(Hg/ml)

Staphylococcus aureus

0,025

Staphylococcus aureus Tour

0,1

Staphylococcus aureus Tour

+30% sérum bovin

0,05

Streptococcus haemolyticus

0,1

Streptococcus faecalis

0,4

Diplococcus pneumoniae

0,1

Proteus vulgaris

0,78

Escherichia coli

6,25

Klebsiella pneumoniae

12,5

Pseudomonas aeruginosa

12,5

Mycobacterium tuberculosis H37RV

0,62

Les exemples suivants illustrent l'invention sans la limiter. Exemple 1 :

Préparation de la rifamycine P (I;R—CHîCO,

R,=H)

A une solution de 7 g (0,01 mol) de rifamycine S dans 300 ml de méthanol et 20 ml d'un tampon de pH = 4,6 (solution aqueuse d'acide citrique et de Na2HP04-12 H2O) on ajoute 0,850 g (0,005 mol) de chlorhydrate de méthyle ester de cystéine et on laisse la solution obtenue à la température ordinaire pendant 72 h; et alors la Chromatographie sur couche mince (mélange 9:1 de CHCl3:CH3OH comme éluant) indique la disparition de la rifamycine S de départ, la présence d'une nouvelle tache ayant une valeur Rf d'environ 0,4 et la tache due à la rifamycine SV ayant une valeur Rf 0,05, ainsi que des traces de sous-produits. On dilue le mélange réactionnel avec 11 d'eau puis on l'extrait avec 500 ml d'acétate d'éthyle. On ajoute à la phase organique une solution de 6 g de ferricyanure de potassium dans 500 ml de tampon ayant un pH=7,38 et on agite le mélange pendant quelques minutes pour oxyder la rifamycine SV en rifamycine S qu'à son tour on extrait à l'acétate d'éthyle. On

Exemple 2 :

Préparation de la rifamycine P

A une solution de 7 g de rifamycine S dans 300 ml de méthanol on ajoute 1,8 g du chlorhydrate de méthylester de cystéine et 1,53 ml de triéthylamine. On chauffe le mélange à reflux pendant 20 mn puis, après refroidissement on le verse dans l'eau. Après acidification, on extrait le mélange aqueux avec l'acétate d'éthyle et on évapore l'extrait à sec pour obtenir 6 g de 3-(2-amino-2-carbométhoxyéthylthio)rifamycine SV qui fond au-dessus de 160°C avec décomposition. Le composé a les propriétés suivantes:

Analyse élémentaire pour GUH54N2O14.S:

Calculé: C 59,26 H 6,55 N 3,37 S 3,86%

Trouvé: C 57,38 H 6,51 N 3,22 S 3,65%

(Tableau en tête de la colonne suivante)

On dissout 8,30 mg du produit décrit plus haut dans 30 ml de méthanol et on ajoute 2 ml d'un tampon de pH = 4,6 (solution aqueuse d'acide citrique et de Na2HP04-12 H20) et 230 mg de dichlorodicyano-p-quinone au mélange. Après 15 h

Bandes d'absorption U.V. et visible; tampon 7,38:

X max

_1% 1 cm

227

455

318

260

454

160

à la température ordinaire, on évapore le mélange réactionnel et on reprend le résidu dans le chloroforme. On extrait alors la phase organique avec un tampon aqueux de pH=8,04. Après séparation du tampon aqueux de la phase chloroformique on acidifie puis on extrait à l'acétate d'éthyle. En concentrant la solution d'acétate d'éthyle, le composé intermédiaire qui est la thiazolorifamycine de formule III (R=CH3CO, R2=CH3) se sépare par cristallisation. Le rendement est de 200 mg. On transforme ce produit en rifamycine P en procédant comme dans l'exemple 1.

On répété la réaction, en utilisant à la place de la 2,3-dichloro-5,6-dicyano-p-quinone un des agents oxydants suivants:

tétrachloro-p-quinone, dioxyde de manganèse, 2,5-diméthyle-p-quinone, 2,6-diméthoxy-p-quinone, tétraméthyle-p-quinone, p-quinone. Dans chaque cas, les rendements sont de même ordre que précédemment.

Exemple 3 :

Préparation de la rifamycine P

A une solution de 7 g de rifamycine S dans 200 ml de méthanol, on ajoute 1,8 g de chlorhydrate de méthylester de cystéine et 1,53 g de triéthylamine. On chauffe le mélange à un reflux pendant 20 mn puis on ajoute 20 ml d'un tampon de pH=4,6 et 2,2 g de dichlorodicyano-p-quinone. On laisse reposer le mélange à la température ordinaire pendant 15 h, puis on le traite comme il est décrit dans l'exemple 1 pour obtenir la rifamycine P. Le rendement est 2,8 g du produit désiré.

Exemple 4:

Préparation de la rifamycine Q (I; R=CH3CO,

R,=CH2OH)

A une suspension agitée de 0,5 g de LÌAIH4 dans 10 ml de tétrahydrofuranne, on ajoute à la température ordinaire 1 g du composé intermédiaire de formule III (R=CH3CO; R2=CH3) acidifie les solutions tamponnées réunies avec de l'HCl à 10%

puis on extrait à l'acétate d'éthyle. On sépare la phase organique, on la lave à l'eau et on la rend anhydre et on concentre sous vide jusqu'à un petit volume. Le produit se sépare par cristallisation, et après réfrigération, on le récolte sur un filtre et on le sèche (2,4 g). Ce composé correspond à la thiazolorifamycine de formule III dans laquelle R. est le groupe CH3CO et R2 est le groupe CH3. Le composé a les propriétés suivantes:

Point de fusion: 190-205°C (avec décomposition).

Bandes d'absorption U.V. et visible; tampon de pH = 7,38

Ä.max

„1% E,

1 cm

225

573

295

364

394

238

On dissout 2 g des composés obtenus selon le procédé décrit plus haut dans un mélange de 150 ml d'acétone et 100 ml de

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

n i

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carbonate de sodium aqueux à 10% et on laisse à la température ordinaire pendant 4 h en l'agitant.

On acidifie la solution avec de l'HCl à 10% et on extrait à l'acétate d'éthyle. On sépare la phase organique, on la lave à l'eau, on la rend anhydre (Na2S04) et on la concentre jusqu'à un un petit volume. La rifamycine P se sépare par cristallisation; on en obtient 1,7 g.

Le produit a les propriétés suivantes:

Point de fusion: le composé fond au-dessus de 190°C avec décomposition.

Analyse pour C38H46N2O11S:

Calculé: C 61,77 H 6,27 N3,79 S 4,34%

Trouvé: C 60,27 H 6,35 N3,68 S 4,19%

Bandes d'absorption U.V. et visible:

Le composé a les valeurs suivantes:

Méthanol

X max (mu) E? /o v ™ 1 cm

0,IN HCl

X max (mu) e} /o v 1 cm

408

176

416

175

350

(épaulement)

303

292

300

314

231

450

268

349

228

424

Le spectre complet est représenté dans la fig. 1.

Spectre infrarouge:

Les pics d'absorption les plus importants dans le Nujol ont lieu aux fréquences suivantes (cm-1):

3700-3200 (m, br); 3120-3080 (w); 3000-2850 (vs);

1465 (s) ; 1380 (b) ; Nujol ; 1725 (m) ; 1640 (m, br) ; 1580 (m) ; 1520 (m) ; 1325 (m); 1250 (s, br); 1155 (m); 1130 (w); 1070 (m, br); 1045 (w); 975 (m); 950 (m); 920 (w); 880 (m); 805 (w); 760 (w); 730 (w).

L'identité à la rifamycine P obtenue par fermentation est aussi confirmée par le comportement chromatographique dans différents systèmes de solvants et par la spectrométrie de masse et de résonance magnétique nucléaire. Ceci est illustré dans la fig. 2.

dissous dans 25 ml de tétrahydrofuranne. Après 10 mn, la Chromatographie sur couche mince (l'éluant est un mélange 9:1 de CHCl3:CH3OH) indique la disparition de la rifamycine de départ et la présence d'une nouvelle tache avec Rf=0,4. On dilue le mélange réactionnel avec de l'eau, on l'acidifie avec de l'HCl à 10% et on l'extrait à l'acétate d'éthyle.

On sépare la phase organique, on la lave à l'eau, on la rend anhydre (Na2S04) et on concentre jusqu'à un petit volume; 0,700 g de rifamycine Q se sépare par cristallisation. On peut préparer les composés avec pratiquement le même rendement en utilisant 1 g de NaBH4 au lieu de 0,5 g de LiAlH4. Le Le produit a les propriétés suivantes:

Point de fusion: le composé fond à 178-180°C avec décomposition.

Analyse élémentaire pour C39H48N2O12S:

Calculé: C 60,92 H 6,29 N 3,64 S 4,17%

Trouvé: C 60,69 H 6,26 N 3,60 S 4,16%

Bandes d'absorption U.V. et visible:

Le composé a les valeurs suivantes (méthanol):

1 cl%

A, max E,

1 cm

410 176

350 (épaulement)

300 332

260 ' 384

225 536

Les spectres sont représentés dans la fig. 3.

Spectre infrarouge:

3700-3100 (s, br); 3030-2800 (vs); 1460 (s); 1375 (s);

Nujol; 1720 (m); 1650 (s, br); 1580 (s, br); 1515 (m, br); 1320 (w); 1260 (m); 1240 (m); 1155 (m); 1090 (m); 1065 (m, br); 1020 (w); 970 (w); 950 (w); 910 (m); 805 (m); 765 (w); 725 (w).

L'identité à la rifamycine Q obtenue par fermentation est aussi confirmée par le comportement chromatographique dans différents systèmes de solvants et respectivement par la spectrométrie de masse et de résonance magnétique nucléaire («g- 4).

Exemple 5:

Préparation de la 25-désacétylerifamycine P

(I; R=H, Ri=H)

A une solution de 750 mg de rifamycine P dans un mélange de 40 ml d'acétone et 10 ml d'eau, on ajoute 20 ml d'hydroxyde de sodium à 10% à 0-5° C en agitant. On maintient le mélange pendant 24 h à la température ordinaire puis on le verse dans de l'eau glacée acidifiée jusqu'à environ pH=2 avec de l'HCl dilué puis on extrait à l'acétate d'éthyle.

On concentre à sec l'extrait organique, on le dissout dans le chloroforme, puis on le purifie par chromatographisme sur colonne à travers du Silicagel (l'éluant est CHCI3 avec des rapports croissants en CH3OH jusqu'à 3%).

On évapore à sec les fractions distinctes réunies,

puis on précipite le produit résiduel après dissolution d'un acétate d'éthyle en ajoutant de l'éther de pétrole. Le rendement est de 400 mg. Le produit a les propriétés suivantes :

Point de fusion: le composé fond à 172-174°C avec décomposition.

Analyse élémentaire pour C36H44N2O10S:

Calculé: C 62,05 H 6,36 N4,02 S 4,60%

Trouvé: C 61,98 H 6,32 N4,04 S 4,56%

Le spectre U.V. est pratiquement identique à celui de la rifamycine P.

Le spectre R.M.N. complet est représenté dans la fig. 5. En procédant comme il est décrit ci-dessus mais en utilisant la rifamycine Q comme matière de départ, on obtient la 25-désacétyle-rifamycine Q comme produit final.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

R

5 feuilles dessins

Claims

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2

REVENDICATIONS

1. Procédé de préparation d'une thiazolorifamycine de formule I:

Me Me

HO

OH

ro

OH

OH

Mf O

MC

dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou le groupe CH3 —CO— et R! est un atome d'hydrogène, caractérisé en ce qu'on fait réagir la rifamycine S ou son dérivé 25-désacétylé avec un ester de cystéine de formule:

HS-CH2-CH-COOR2 I

nh2

dans laquelle R2 représente un groupe alcoyle ayant 1 à 8 atomes de carbone, un groupe cycloalcoyle ayant 5-8 membres, qui facultativement peut porter un ou deux substituants alcoyle inférieurs, phényle ou benzyle non substitués ou substitués par un ou deux radicaux choisis parmi les suivants:

chloro, bromo, fluoro, nitro, alcoxy inférieur, cyano, trifluoro-méthyle, sulfamoyle et (alcoyle inférieur) sulfonyle, ou un de ses sels d'addition d'acide, obtenant ainsi un dérivé 3-(éthylthio-2-substitué)-rifamycine SV de formule:

HP

Me

OH

RO Me

Ht

MtO

S-CH -CH-COOR

NH

OH

M»

dans laquelle R et R2 ont la même signification que ci-dessus,

en ce qu'on met en contact ce dérivé avec un agent oxydant à un pH réglé entre 2 et 6,5, en ce qu'on soumet le carboxy-ester de thiazolorifamycine ainsi obtenu à une décarboxylation.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la réaction entre le dérivé de rifamycine S et le dérivé de cystéine est conduite dans un solvant organique miscible à l'eau à une température comprise entre la température ordinaire et la température d'ébullition du mélange réactionnel.
3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'agent oxydant est choisi parmi les quinones, les nitrites organiques, les peroxydes, les persulfates, l'acide nitreux, les dérivés de manganèse et de plomb tétravalents, les dérivés de fer trivalent, les sels mercuriques et cupriques.
4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le pH est compris entre 4,2 et 4,8.
5. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce qu'on choisit le solvant parmi un alcanol inférieur, le dioxanne et le tétrahydrofuranne.
6. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que l'agent oxydant est choisi parmi la p-quinone, la 2,5-diméthyl-p-quinone, la 2,6-diméthoxy-p-quinone, la tétrachloro-p-quinone, la dichlorodicyano-p-quinone, la duroquinone, la rifamycine S, les nitrites d'alcoyle, l'eau oxygénée, les persulfates de métal alcalin, les ferricyanures de métal alcalin, l'acétate cuprique, l'acétate mercurique et le dioxyde de manganèse.
7. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la réaction entre le dérivé de rifamycine S et le dérivé de cystéine et la mise en contact subséquente du dérivé 3-(éthylthio-2-substitué)-rifamycine SY avec un agent oxydant sont conduits en une seule étape.
8. Procédé selon la revendication 7, caractérisé, en ce que la rifamycine S et le dérivé de cystéine sont mis en réaction en présence d'un agent oxydant choisi parmi la rifamycine S, la duroquinone, le chloranile et la dichlorodicyano-p-quinone à un pH réglé entre 4,2 et 4,8.
9. Procédé selon la revendication 1, pour la préparation de la rifamycine P, caractérisé en ce qu'on décarboxyle le carboxyester de thiazolorifamycine au moyen d'une hydrolyse alcaline douce suivie d'acidification.
10. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on prépare la rifamycine P et qu'en outre on soumet la rifamycine P à une hydrolyse alcaline pour obtenir le dérivé 25-désacétylé correspondant.
11. 25-désacétylrifamycine P de formule:

M« Me

HO

OH

OH

Me

obtenue par le procédé selon la revendication 11.
12. Procédé de préparation d'une thiazolorifamycine de formule I:

Me ne

HO

OH

ro

OH

Me dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou le groupe CH3 —CO— et Ri est le groupe — CH2OH, caractérisé en ce qu'on fait réagir la rifamycine S ou son dérivé 25-désacétylé avec un ester de cystéine de formule:

HS - CH2 - CH - COOR2

I

nh2

dans laquelle R2 représente un groupe alcoyle ayant 1 à 8 atomes de carbone, un groupe cycloalcoyle ayant 5-8 membres, qui

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

facultativement peut porter un où deux substituants alcoyle inférieurs, phényle ou benzyle non substitués ou substitués par un ou deux radicaux choisis parmi les suivants: chloro, bromo, fluoro, nitro, alcoxy inférieur, cyano, trifluorométhyle, sulfamoyle et (alcoyle inférieur) sulfonyle, ou un de ses sels d'addition d'acide, obtenant ainsi un dérivé 3-(éthylthio-2-substitué)-rifamycine SV de formule:

Me

OH

RO Me

Ht

£-ch -ch-coor I

nh

OH

M»

dans laquelle R et R2 ont la même signification que ci-dessus, en ce qu'on met en contact ce dérivé avec un agent oxydant à un pH réglé entre 2 et 6,5 et en ce qu'on réduit le groupe carboxyester du carboxyester de thiazolorifamycine ainsi obtenu en un groupe hydroxyméthyle.
13. Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que la réaction entre le dérivé de rifamycine S et le dérivé de cystéine est conduite dans un solvant organique miscible

à l'eau à une température comprise entre la température ordinaire et la température d'ébullition du mélange réactionnel.
14. Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que l'agent oxydant est choisi parmi les quinones, les nitrites organiques, les peroxydes, les persulfates, l'acide nitreux, les dérivés de manganèse et de plomb tétravalents, les dérivés de fer trivalent, les sels mercuriques et cupriques.
15. Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que le pH est compris entre 4,2 et 4,8.
16. Procédé selon la revendication 13, caractérisé en ce qu'on choisit le solvant parmi un alcanol inférieur, le dioxanne et le tétrahydrofuranne.
17. Procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce que l'agent oxydant est choisi parmi la p-quinone, la 2,5-diméthyl-p-quinone, la 2,6-diméthoxy-p-quinone, la tétrachloro-p-quinone, la dichlorodicyano-p-quinone, la duroquinone, la rifamycine S, les nitrites d'alcoyle, l'eau oxygénée, les persulfates de métal alcalin, les ferricyanures de métal alcalin, l'acétate cuprique, l'acétate mercurique et le dioxyde de manganèse.
18. Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que la réaction entre le dérivé de rifamycine S et le dérivé de cystéine et la mise en contact subséquente du dérivé 3-(éthylthio-2-substitué)-rifamycine SV avec un agent oxydant sont conduits en une seule étape.
19. Procédé selon la revendication 18, caractérisé en ce que la rifamycine S et le dérivé de cystéine sont mis en réaction en présence d'un agent oxydant choisi parmi la rifamycine S, la duroquinone, le chloranile et la dichlorodicyano-p-quinone à un pH réglé entre 4,2 et 4,8.
20. Procédé selon la revendication 12, pour la préparation de la rifamycine Q, caractérisé en ce que le fragment carboxyester de la thiazolorifamycine est réduit en un groupe hydroxyméthyle au moyen d'un agent réducteur choisi parmi les suivants: NaAlH4, LÌAIH4, AIH3, LiAlH (OCH3)3, excès de NaBH4 [(CH3)2CH - CH2 - ]2A1H, NaAl(OCH2 - CH2OCH3)2H2, NaB(OCH3)3H et CaCl2/NaBH4.

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