BRPI1007666B1

BRPI1007666B1 - Método para preparar um composto a partir do sangue e dispositivo de extração

Info

Publication number: BRPI1007666B1
Application number: BRPI1007666-2A
Authority: BR
Inventors: Eduardo Anitua Aldecoa
Original assignee: Biotechnology Institute, I Mas D, S.L.
Priority date: 2009-05-14
Filing date: 2010-05-12
Publication date: 2021-04-27
Also published as: CA2761603C; US8349189B2; KR20120027340A; MX2011011921A; BRPI1007666B8; CA2761603A1; RU2560843C2; US20100288706A1; PL2430977T3; TW201043276A; CN102421362B; KR101740518B1; MX336273B; PT2430977T; US8727133B2; RU2011150825A; JP2017051665A; JP2012526781A; CL2011002558A1; PE20150961A1

Abstract

método para preparar pelo menos um composto a partir do sangue e dispositivo de extração. método para preparar pelo menos um composto com propriedades biológicas a partir do sangue, desenvolvido em recipientes selados a urna pressão abaixo da pressão atmosférica, reduzindo ou evitando a contaminação bacteriana do composto através de manuseio. o método compreende a repetição, quantas vezes for necessário, das seguintes etapas: conectar um segundo recipiente que é selado a vácuo a um dispositivo de extração conectado novamente a um primeiro recipiente que contém sangue separado em frações, esperando por um período de tempo até a ( s) fração ( ões) exigida ( s) ser/serem transferida(s), remover dito segundo recipiente, sendo possível obter vários segundos recipientes com diferentes compostos para aplicações médicas diferentes, incluindo terapias biológicas. as etapas podem ser realizadas em sistema selado, sem remover as tampas dos recipientes ou, alternativamente, o primeiro recipiente pode ser aberto antes da introdução do dispositivo de extração.

Description

Campo técnico

[001] A invenção refere-se a um método para preparar pelo menos um composto a partir do sangue, por exemplo, um composto rico em sinais de células. A invenção também refere-se a um dispositivo para ser utilizado na execução do método.

Estado da Técnica

[002] O pedido de patente US2003232712, intitulado Centrifuge system utilizing disposable components and automated processing of blood to collect platelet rich plasma, refere-se a um método centrífugo e sistema correspondente para processar sangue para coletar plasma rico em plaquetas. Uma câmara de separação é preenchida com sangue de uma seringa de preenchimento, girando a câmara de separação a uma taxa de rotação de preenchimento e bombeando o sangue da seringa de preenchimento. Um giro suave é usado para separar inicialmente os glóbulos vermelhos das plaquetas, girando a câmara de separação a uma taxa de giro suave. Uma porcentagem do sangue é retirada da câmara de separação de volta para a seringa de preenchimento para remover os glóbulos vermelhos separados. Uma segunda porção do sangue separado é retirada da câmara de separação até que uma interface de glóbulos vermelhos/plaquetas seja detectada. Um giro duro é realizado girando a câmara de separação a uma taxa mais alta e a tubulação de conexão é removida dos glóbulos vermelhos, extraindo um volume de remoção predeterminado. O plasma rico em plaquetas é então coletado na seringa de coleta.

[003] A patente US5733545, intitulada Platelet glue wound sealant, descreve um concentrado de revestimento de camada leucoplaquetária que compreende plasma, plaquetas a uma concentração de pelo menos 1,0x109 células/ml e fibrinogênio a uma concentração de pelo menos 5 mg/ml. O concentrado de revestimento de plasma-buffy pode ser combinado com um ativador de fibrinogênio para formar um selante de ferida com cola de plaquetas. Também é fornecido um método para processar sangue para produzir o concentrado de revestimento de plasma-buffy. O método compreende a centrifugação de sangue anticoagulado para remover os glóbulos vermelhos e produzir uma mistura de revestimento leucoplaquetário. A água é removida da mistura para produzir o concentrado de revestimento. Um ativador de fibrinogênio é misturado com o concentrado de revestimento de plasma para produzir um selante de ferida, que pode ser aplicado a uma ferida para facilitar a vedação e cicatrização da ferida.

[004] A patente US4004975, intitulada Method of isolating and cryopreserving human white cells from whole blood, refere-se a um método de recuperação de granulócitos, ou células brancas, da camada leucoplaquetária do sangue total centrifugado. A sequência de operações que leva à separação de glóbulos vermelhos, glóbulos brancos, plaquetas e plasma é apresentada em um diagrama de fluxo de um sistema de bolsas para a criopreservação de leucócitos, com o congelamento dos glóbulos brancos realizado pela introdução de uma combinação de amido hidroxietilado (HES), que funciona como um agente sedimentador e um agente crioprotetor e como dimetilsulfóxido (DMSO), um agente crioprotetor. Uma combinação preferida é 4% de HES com 5% de DMSO. A separação dos glóbulos brancos faz interface com os métodos de coleta de plasma e plaquetas, a fim de conservar todos os principais tipos de células.

[005] A publicação WO03074077, intitulada Purification of Red Blood Cells by Separation and Diafiltration, refere-se à purificação de glóbulos vermelhos através da separação do sangue total, como por centrifugação, para formar uma fração de glóbulos vermelhos e uma fração líquida. O sangue total pode ser desfibrinado ou tratado para evitar a coagulação antes da separação. De preferência, o sangue total é sangue bovino. A fração de glóbulos vermelhos é então diafiltrada para purificar os glóbulos vermelhos. Os glóbulos vermelhos purificados podem então ser lisados para formar um lisado de glóbulos vermelhos purificados. Os glóbulos vermelhos purificados e o lisado de glóbulos vermelhos purificados são adequados para uso na produção de substituto sanguíneo da hemoglobina.

[006] A patente US6569204 revela um método para preparar uma composição rica em fatores de crescimento do sangue que, ao longo do tempo, tem mostrado prover propriedades biológicas muito interessantes e benéficas para uma variedade de aplicações médicas. Este método, que pode ser desenvolvido em clínicas (sem necessidade de facilidades complexas ou cirurgias), compreende essencialmente as seguintes etapas: centrifugar um tubo contendo sangue e anticoagulante por um período de tempo e em uma velocidade e temperatura específicas, o sangue sendo desse modo separado em diferentes frações; extrair uma fração intermediária, localizada acima dos glóbulos vermelhos (fração baixa), onde dita fração intermediária é um plasma rico em plaquetas; transferir dito plasma para um segundo tubo onde pode ser adicionado cloreto de cálcio, que age como um coagulante e ativador do plasma (um agente capaz de começar o processo em que os fatores de crescimento são liberados pelas plaquetas); esperar um certo período de tempo para permitir que o plasma ative e coagule até atingir a consistência necessária para a aplicação. Essa composição tem sido usada com resultados favoráveis em áreas médicas tais como a da regeneração do osso (geralmente em implante ou traumatologia), tratamento de dor das juntas, tratamento de pele, etc. Alguns deles estão descritos na US6569204 e no pedido de patente US2009035382.

[007] O método revelado na patente US6569204, como muitos outros métodos conhecidos para a preparação de compostos sanguíneos com propriedades biológicas desejáveis, envolve um certo risco de o paciente receber o composto final tornando-se infectado pelo fato de que, em algumas fases, eles não estão imunes à infecção bacteriana. Pode haver várias razões para dita contaminação bacteriana: septicemia que envia germes para o fluxo vascular, assepsia inadequada da pele no momento em que a veia é punçada, ou devido o manuseamento de sangue e compostos subsequentes enquanto o método está sendo desenvolvido. Um dos fatores que contribui para o risco de contaminação bacteriana no manuseamento dos procedimentos é o fato de que o método revelou na patente US6569204 e outros métodos desenvolvidos em tubos abertos, por exemplo, tubos que não foram fechados ou selados a vácuo, com o resultado de que o plasma centrifugado e os compostos obtidos durante o processo entre em contato com o ar nas imediações (que é conhecido como um “circuito aberto”).

[008] Esta invenção objetiva prover um procedimento melhorado para preparação de um composto com propriedades biológicas úteis obtidas do sangue, onde, dentre outros avanços em relação aos procedimentos conhecidos, o risco de contaminação bacteriana do composto final resultante do manuseio do sangue e outras substâncias subsequentes durante o curso do procedimento é reduzido, e o produto final é armazenado em um recipiente estéril e selado.

Breve Descrição da Invenção

[009] É um objetivo da invenção prover um método para a preparação de pelo menos um composto com propriedades biológicas desejáveis a partir do sangue, em que dito método usa tubos selados a vácuo (por exemplo, tubos tendo uma pressão interior que está abaixo da pressão atmosférica). Para maior parte da duração do método, e preferivelmente para uma duração completa, o plasma ou qualquer outro composto envolvido no método é evitado de entrar em contato com o ar ao redor. O método de acordo com a invenção garante uma maior extensão de não contaminação do composto final ou compostos e suas ótimas condições biológicas e médicas.

[010] O método da presente invenção compreende as seguintes etapas: dispor uma certa quantidade de sangue em um primeiro recipiente que é selado a vácuo (em uma pressão abaixo da pressão atmosférica) e opcionalmente contém anticoagulante; separar o sangue em uma série de frações, uma delas uma fração do plasma com um gradiente de concentração de plaqueta; introduzir um dispositivo de fração substancialmente acima do nível superior de uma fração maior contida no primeiro recipiente; conectar o segundo recipiente que é selado a vácuo (pressão abaixo da pressão atmosférica e abaixo daquela do primeiro recipiente) para o primeiro recipiente e esperar por um certo período de tempo até uma quantidade de plasma necessária e/ou outras frações ser/serem transferidas do primeiro recipiente para o segundo recipiente, como resultado da diferença nas pressões; e remover o segundo recipiente. As etapas envolvem conectar o segundo recipiente, esperar por um período de tempo e remover o segundo recipiente podendo ser repetido para propósitos de obter mais do que um segundo recipiente (estando certo de que a profundidade para qual o dispositivo de extração é inserido esteja adequadamente ajustada), cada um contendo uma composição que tem uma concentração de plaqueta e outras características biológicas que são específicas às aplicações médicas para a qual ela está sendo usada.

[011] Em uma realização, todas as etapas são desenvolvidas em um sistema fechado, sem que os recipientes sejam abertos ou qualquer outra ação sendo realizada que leve os conteúdos dos recipientes a entrarem em contato com o ar ao redor. Nessa realização, um sistema de ventilação do ar (permitindo a entrada de pequenas quantidades de ar filtrado) pode ser opcionalmente inserido no primeiro recipiente antes da conexão do segundo recipiente para o primeiro recipiente.

[012] Em outra realização, o primeiro recipiente pode ser aberto seguindo a separação do sangue em frações e antes da introdução do dispositivo de extração, simplificando assim a conexão do segundo recipiente e a transferência do plasma e/ou outras frações, não havendo necessidade de perfurar uma tampa com um septo. Esse método pode ser igualmente seguro em termos de contaminação bacteriana possível do composto quando o primeiro recipiente é aberto, antes da transferência para o segundo recipiente se, por exemplo, o método é desenvolvido em uma câmara de fluxo laminar, em um ambiente estéril tal como uma sala cirúrgica. Assim, em muitos casos o composto final é aplicado em um ambiente aberto (por exemplo em uma cirurgia oral ou no tratamento de ulceração da pele), como resultado do qual não é nem mesmo necessário desenvolver o método em ambiente estéril.

[013] O procedimento inventivo provê muitos aspectos interessantes e vantagens sobre procedimentos convencionais.

[014] Primeiramente, o método inventivo não envolve extração automática ou compulsória de fração de plasma total ou frações totais variadas. Ao contrário, o método inventivo permite a extração, em condições estéreis, da quantidade de plasma necessária e/ou outra fração do primeiro recipiente, dependendo da aplicação. Em outras palavras é possível extrair as quantidades necessárias de plasma dependendo das características desejadas do produto final. Como afirmado, é também possível obter vários segundos recipientes com diferentes compostos para diferentes aplicações médicas a partir de uma única amostra de sangue (um único primeiro recipiente). O método permite, assim, que a dose de plaquetas seja personalizada a partir da fração extraída ou frações. Isto significa que é possível adaptar o(s) composto(s) final(ais) para aplicações médicas para as quais eles são projetados.

[015] Em segundo lugar, o produto deixado no segundo recipiente é armazenado em um recipiente lacrado e estéril e está portanto pronto para receber os tratamentos subsequentes: manuseando ainda (por exemplo, a adição de um agente ativador, esperando por um período de tempo, submetendo-o a uma certa temperatura, e a centrifugação, etc.), infiltrações de outras substâncias ou produtos, armazenamento, congelamento, etc.

[016] O composto fabricado de acordo com o método da presente invenção pode ser usado para várias aplicações como a regeneração óssea e o tratamento de doenças degenerativas das juntas.

Breve descrição das figuras

[017] Detalhes da invenção podem ser vistos nas figuras anexas, que não são limitativas da mesma:

[018] As Figuras 1 e 2 mostram uma vista esquemática de uma realização do dispositivo de extração de acordo com a invenção, nas condições montada e desmontada, respectivamente.

[019] As Figuras 3 e 4, respectivamente, mostram perspectivas completa e parcial da carcaça compreendido na realização da Figura 1.

Descrição detalhada da Invenção

[020] A invenção define um método para a preparação de pelo menos um composto a partir do sangue, compreendendo as seguintes etapas:

[021] i) Prover uma certa quantidade de sangue em um primeiro recipiente que é selado a vácuo, ou seja, a uma pressão abaixo da pressão atmosférica.

[022] ii) Separar o sangue dentro de pelo menos as seguintes frações: uma fração de glóbulos vermelhos na parte de baixo do primeiro recipiente; uma pequena fração que contém glóbulos brancos e plaquetas acima do anterior e, no topo, uma fração de plasma com concentração de gradiente de plaqueta, dito gradiente diminuindo em direção a parte do topo do primeiro recipiente (o plasma poderia até mesmo compreender, dependendo das condições de centrifugação, uma parte do topo sem as plaquetas).

[023] iii) Inserir um dispositivo de extração (cateter, agulha ou dispositivo similar) substancialmente acima do nível do topo da fração mais alta contida no primeiro recipiente.

[024] iv) Desenvolver, pelo menos, as etapas de conectar um segundo recipiente que é selado a vácuo em uma pressão abaixo daquela do primeiro recipiente para o dispositivo de extração; esperar por um certo período de tempo até uma quantidade necessária de fração de plasma; a fração de glóbulos brancos e plaquetas e/ou a fração de glóbulos vermelhos é/são transferido(s), como resultado de uma diferença de pressão, para o segundo recipiente, removendo o segundo recipiente, e, no caso de outras extrações serem desenvolvidas, ajustar o grau para o qual o dispositivo de extração seja inserido de modo que ele possa novamente alcançar o nível do topo de frações remanescentes.

[025] Como resultado, a invenção permite obter uma divisão seletiva de várias frações do primeiro recipiente (o plasma com o gradiente de concentração já mencionado, e/ou outras frações).

[026] Com relação à primeira etapa do método e, em particular, ao primeiro recipiente em que uma certa quantidade de sangue é provida como ponto de início para o método, dito primeiro recipiente pode apresentar uma série de características específicas.

[027] Em uma realização, o primeiro recipiente é selado e não é aberto em nenhum momento, portanto criando um sistema fechado ou circuito fechado em que o sangue e outros componentes obtidos sequencialmente não entrem em contato com o ar ao redor sem estar filtrado, assim reduzindo o risco de contaminação bacteriana através do manuseio, assegurando a esterilidade e mantendo a bioestabilidade e biossegurança do resultado do produto final. Nessa realização um sistema de ventilação de ar pode ser opcionalmente introduzido no primeiro recipiente, permitindo, assim a entrada de ar filtrado em dito recipiente. Além disso, o dispositivo de extração é preferivelmente provido com um septo para manter o circuito lacrado.

[028] Em outra realização, o primeiro recipiente é aberto após a separação do sangue em frações e antes da introdução do dispositivo de extração.

[029] O primeiro recipiente é geralmente feito de plástico ou vidro, e selado ou tampado com rosca fêmea ou tampa pressurizada. A tampa pode ser portátil para possibilitar a conexão selada do dispositivo de extração. Além disso, o primeiro recipiente é preferivelmente um tubo cilíndrico com uma capacidade dentre 4 e 50ml.

[030] Dito primeiro recipiente pode conter opcionalmente pelo menos um anticoagulante, dependendo do uso subsequente para ser feito de compostos obtidos como resultado do procedimento. O citrato de sódio é geralmente usado tanto como um anticoagulante como é um componente natural que pode ser encontrado na corrente sanguínea e atua como um agente quelante de cátion de cálcio divalente (Ca 2+). Entretanto outros anticoagulantes são contemplados, como o EDTA, que é um anticoagulante artificial, embora seja menos específico para cátion de cálcio divalente (Ca 2+).

Exemplos de primeiros recipientes

[031] A Coleção de Tubos TE5 ou TE9 PRGF ®, comercializados pelo requerente, são dois exemplos de primeiros recipientes que podem ser usados nessa invenção. Ambos são tubos plásticos estéreis compreendendo um corpo principal e tampa perfurável e têm volumes respectivos de 5 e 9ml. O uso do tubo também é determinado pelas exigências da aplicação médica específica, e ambos são rotulados. Ditos rótulos compreendem uma escala indicando o volume e aumentando em direção a parte de baixo do tubo. Os tubos contêm uma concentração de citrato de sódio de 3,8% como anticoagulante e portanto presente nas seguintes características: TUBO TE5 Capacidade: 5 ml Volume a Vácuo (pressão): 4,5 ml Volume de citrato de sódio: 0,5 ml Tamanho: 13 x 75 mm TUBO TE9 Capacidade: 9 ml Volume a Vácuo (pressão): 8,1 ml Volume de citrato de sódio: 0,9 ml Tamanho: 16 x 100 mm

[032] A segunda etapa do método envolve a separação do sangue em diferentes frações, que é preferivelmente realizada através da centrifugação do primeiro recipiente (em uma velocidade de centrifugação específica e por um certo período de tempo) ou colocando o tubo em uma prateleira e esperando por frações para separar através da sedimentação.

[033] No caso do primeiro recipiente ser centrifugado, dita centrifugação pode apresentar uma série de características específicas. O primeiro recipiente é preferivelmente centrifugado a uma velocidade entre 100 e 900 G por um período de 3 a 12 minutos em uma temperatura ambiente ou não (por exemplo, a qualquer temperatura). Nessas faixas, é especificamente vantajoso se a centrifugação for realizada a uma velocidade entre 300 e 800 G por um período de 5 a 9 minutos. Estas faixas de parâmetros de centrifugação separa as várias frações (se qualquer plasma com concentração de variação de plaqueta, mais claramente glóbulos brancos com plaquetas, glóbulos vermelhos e outros).

[034] A etapa em que o sistema de ventilação de ar é inserido no primeiro recipiente é opcional. Se não for inserido, o plasma e/ou outra(as) fração(ões) é/são transferidas até a equipe clínica remover o segundo recipiente ou até os níveis de pressão no primeiro e segundo recipientes tornarem-se os mesmos (o que depende da pressão do segundo recipiente). Se, entretanto, o sistema de ventilação de ar for inserido, isto permite que o ar filtrado entre no primeiro recipiente selado, como resultado a pressão do primeiro recipiente é sempre maior do que a pressão do segundo recipiente. Consequentemente, a extração somente termina quando a equipe clínica remove o segundo recipiente, quando o dispositivo de extração é movido acima do nível mais alto, ou quando, com certeza, todo o conteúdo do primeiro recipiente tiver sido transferido para o segundo recipiente.

[035] Com relação às seguintes etapas envolvidas no método, com relação à inserção de um dispositivo de extração, à conexão de um segundo recipiente, à extração de uma parte do plasma ou outra fração do segundo recipiente e à remoção de dito segundo recipiente, ditas etapas e o segundo recipiente podem apresentar uma série de características específicas.

[036] O dispositivo de extração é inserido substancialmente acima do nível do topo da maior fração contida no primeiro recipiente. Se uma extração sucessiva ou sequencial de diferentes frações para uma série de segundo recipientes for desenvolvida, dita extração sempre envolve a sucção da parte do topo do líquido que permanece. Em outras palavras, a inserção do dispositivo de extração é sempre ajustada no topo de um líquido assim que o nível de líquido diminui durante a sucção. Consequentemente, se para uma aplicação médica for necessário, por exemplo, extrair a parte de baixo do plasma (a parte com maior concentração de plaquetas), primeiro o plasma situado acima da parte requerida é extraído de uma ou várias etapas (este plasma, que contém uma concentração mais baixa de plaquetas, pode ser descartado ou usado para outras aplicações médicas).

[037] A invenção oferece numerosas possibilidades com relação as frações ou combinações de frações que podem ser extraídas. A posterior pode ser extraída: somente o plasma (toda ou parte da fração, contendo uma concentração variável de plaquetas ou mesmo nenhuma plaqueta se a centrifugação for realizada a alta velocidade); somente os glóbulos brancos com as plaquetas (toda ou parte da fração), somente glóbulos vermelhos (toda ou parte da fração); plasma (toda ou parte da fração) junto com a fração completa dos glóbulos brancos e parte ou toda fração de glóbulos vermelhos; ou parte ou toda fração de glóbulos brancos junto com parte ou toda fração de glóbulos vermelhos.

[038] Além disso, o segundo recipiente permanece selado e não é aberto até pelo menos o final do procedimento, portanto criando um sistema fechado ou circuito fechado no qual o plasma e outros componentes não entram em contato com o ar (como com o primeiro recipiente). Geralmente, é selado ou tampado com rosca fêmea ou tampa pressurizada. A tampa é perfurável. O segundo recipiente é preferivelmente um tubo cilíndrico com uma capacidade entre 4 e 50ml.

[039] O segundo recipiente pode opcionalmente conter pelo menos um coagulante, procoagulante ou ativador de plaqueta, dependendo das exigências da aplicação médica específica para qual o composto final é projetado. Uma concentração de 10% de cloreto de cálcio é geralmente usado como um coagulante, embora outros coagulantes sejam contemplados, tais como trombina bovina, trombina humana, etc. A invenção também contempla o uso, no segundo recipiente, de aceleradores de coagulação tais como aditivos inertes especiais que ajudam na coagulação (sílica, etc.) e o fato do segundo recipiente ser feito de material de aceleração de coagulação (vidro). A invenção também contempla que o segundo recipiente possa conter outros biomateriais ou agentes necessários para a aplicação médica para a qual o composto contido em dito segundo recipiente seja projetado.

[040] O coagulante, procoagulante, agente ativador ou outros biomateriais ou agentes podem ser adicionados ao segundo recipiente antes da transferência do primeiro recipiente (por exemplo, durante a fabricação do segundo recipiente), ou uma vez que a transferência seja completada.

[041] O segundo recipiente é geralmente feito de plástico ou vidro. É usado o plástico que pode ser útil para certas aplicações devido a sua capacidade para atrasar o processo de coagulação, um efeito que é ainda acentuado se um segundo recipiente de plástico não conter um coagulante.

Exemplos de segundos recipientes

[042] Os Tubos de Fracionamento de Plasma TF5-EST ou TF9-EST PRGF ® comercializados pela requerente, são dois exemplos de segundos recipientes que podem ser usados com esta invenção. Ambos são tubos de plásticos estéreis compreendendo um corpo principal e tampa perfurável e têm volumes respectivos de 5 e 9 ml. O uso do tubo também é determinado pelas exigências da aplicação médica específica, e ambos são rotulados. Ditos rótulos compreendem uma escala indicando o volume e aumento em direção a parte do topo do tubo. Estes tubos têm uma pressão negativa diferente e podem ser fabricados com diferentes pressões de acordo com as exigências técnicas.

[043] Observa-se que a invenção contempla que a extração pode ser desenvolvida somente uma vez afim de separar a quantidade exigida de pelo menos uma fração em um segundo recipiente para uma aplicação específica. A invenção também contempla que esta etapa pode ser repetida por mais de uma vez afim de separar diferentes partes do plasma (com uma concentração diferente de plaquetas ou mesmo sem plaquetas) ou outras frações em diferentes segundos recipientes para diferentes aplicações. Por exemplo, uma parte do plasma com concentração mais baixa de plaquetas ou sem plaquetas (a parte do topo da fração do topo do tubo) pode ser extraído para uma aplicação e uma parte do plasma com maior concentração de plaquetas (situado mais abaixo, mais perto da fração de glóbulos brancos) pode ser extraído em um estágio mais tardio para outra aplicação específica que requer um produto final mais rico em sinais de célula, portanto fazendo uso do gradiente de concentração de plaqueta da fração do plasma. Exemplos dos procedimentos explicando o conceito do processo inventivo da extração são comentados a seguir.

Exemplo do procedimento 1

[044] O sangue é provido no primeiro recipiente feito de plástico sem anticoagulante (o fato do anticoagulante não ser usado significa que não há necessidade de usar o coagulante e ativador em um estágio posterior). Após a centrifugação, a fração de plasma completa é extraída para o segundo recipiente feito de vidro, ou para um segundo recipiente feito de plástico com um acelerador de coagulação com retração do coagulo sendo portanto obtido. O composto final tem uma consistência semi- sólida e, portanto, pode ser usado como uma tampa de fibrina ou membrana em aplicações tais como estabilização de um enxerto ósseo particulado antes de fechar a sutura em cirurgia oral e maxilofacial, para o tratamento de uma pós-extração de alvéolo, etc.

Exemplo do procedimento 2

[045] O sangue é provido em um primeiro recipiente feito de plástico sem anticoagulante (o fato do anticoagulante não ser usado significa que não há necessidade para usar um coagulante ativador em um estágio posterior). Após a centrifugação, a fração de plasma completa é extraída para um segundo recipiente feito de plástico sem acelerador de coagulação, a coagulação do plasma portanto é prorrogada. O composto final portanto tem uma consistência líquida e pode ser usado para aplicações tais como infiltração em regeneração de tecido articular ou em injeções intradérmica ou intramuscular, ou para sua adição como um biomaterial afim de coagular dito biomaterial, etc.

Exemplo do procedimento 3

[046] O sangue é provido em um primeiro recipiente feito de plástico com anticoagulante (portanto retardando ou evitando a coagulação). Após a centrifugação:

[047] Primeiramente, uma certa quantidade da parte do topo do plasma (em outras palavras, um plasma com uma baixa concentração de plaquetas ou sem plaquetas) é extraída para um segundo recipiente feito de vidro e consistindo de cloreto de cálcio (coagulante e ativador). Um composto semi-sólido é formado, que pode ser usado como uma tampa de fibrina em aplicações tais como aquelas referidas no exemplo do procedimento 1;

[048] Em segundo lugar, a parte do topo do plasma que permanece no primeiro recipiente (em outras palavras, um plasma com maior concentração de plaquetas em relação ao plasma extraído anteriormente) é extraída para um segundo recipiente feito de plástico e consistindo de cloreto de cálcio (coagulante e ativador). O cloreto de cálcio pode ser também adicionado em um estágio posterior. Um composto líquido é formado, que pode ser usado para aplicações tais como sua mistura com ósseo autólogo particulado do paciente (de quem o sangue usado no método pode ser obtido) em uma região do corpo onde o osso está para ser regenerado, para infiltração cutânea ou articular ou em qualquer outro uso.

Exemplo do procedimento 4

[049] O sangue é provido em um primeiro recipiente feito de plástico e consistindo de anticoagulante. Após a centrifugação, a fração de plasma completa é extraída para o segundo recipiente de plástico com um coagulante e ativador. Este agente pode também ser adicionado em um estágio posterior. O composto final tem uma consistência líquida e pode ser usado para aplicações tais como a infiltração do tecido articular, infiltrações intradérmica ou intramuscular, etc.

Exemplo do procedimento 5

[050] O sangue é provido em um primeiro recipiente feito de plástico sem anticoagulante (o fato do anticoagulante não ser usado significa que não há necessidade de usar um coagulante e ativador em um estágio posterior). Após a centrifugação, o primeiro recipiente é aberto e a fração de plasma completa é extraída para um segundo recipiente feito de vidro, ou para um segundo recipiente feito de plástico consistindo de um acelerador de coagulação, com coágulo de retração sendo portanto obtido. O composto final tem uma consistência semissólida e, portanto, pode ser usada como uma tampa de fibrina ou membranas em aplicações tais como a estabilização de um enxerto ósseo particulado posterior para o fechamento da sutura em cirurgia maxilofacial para tratamento de uma pós-extração de alvéolo, etc.

[051] Outro objetivo da invenção é prover um dispositivo de extração de material do primeiro recipiente para o segundo recipiente. As Figuras 1 e 2 mostram uma visão esquemática de uma realização de dito dispositivo de extração inventivo, mostrado em seus aspectos montado e desmontado, respectivamente. O dispositivo de extração (1) compreende principalmente uma primeira agulha (2) para ser inserida no segundo recipiente de acordo com o método, uma segunda agulha (4) para ser inserida em um segundo recipiente de acordo com o método, e um meio que pode ser operado pelo usuário para abrir e fechar a passagem do material da primeira agulha para a segunda agulha, provido por uma unidade comutadora (3). Geralmente a primeira agulha (2) é provida com uma ponta chanfrada no caso do método ser desenvolvido em um ambiente selado, em outras palavras com o primeiro recipiente selado (portanto permitindo que dita ponta chanfrada perfure a tampa do primeiro recipiente). Se, entretanto, o método é para ser desenvolvido em um ambiente aberto (abrindo o primeiro recipiente uma vez que ele tenha sido centrifugado) não é necessário para a primeira agulha (2) ter uma ponta chanfrada. Preferivelmente, os meios para abertura e fechamento da passagem do material da primeira agulha (2) para a segunda agulha (4) são providos por uma unidade comutadora (3) dotada de um botão (3a), como mostrado nas figuras, permitindo uso fácil e eficiente do dispositivo.

[052] Na realização mostrada, o sistema consiste de um conector (6) para adaptar a conexão macho da segunda agulha (4) e a conexão macho da unidade de mudança (3). Este conector (6), é claro, nem sempre é necessário.

[053] Preferivelmente, o dispositivo também compreende uma carcaça (1) da qual a primeira agulha (2) se projeta. A carcaça (1) provê meios para abrir e fechar a passagem do material da primeira agulha (2) para a segunda agulha (4) para ser operada. Em uma segunda realização mostrada, por exemplo, o botão (3a) da unidade comutadora (3) sobressai da carcaça (1) e pode ser facilmente operado pelo usuário do dispositivo.

[054] Preferivelmente a carcaça (1) também compreende uma área de alojamento (5) que recebe (total ou parcialmente) um segundo recipiente de acordo com o método. Dita área de alojamento (5) pode ser vista na Figura 4, que mostra uma perspectiva parcial da carcaça (1) mostrada na Figura 1. A Figura 3 mostra uma perspectiva da carcaça completa (1), onde podem ser vistos o orifício (7), através do qual o botão (3a) de unidade comutadora (3) se projeta e o orifício (8), através do qual a primeira agulha (2) se projeta.

[055] A carcaça (1) pode também compreender orifícios que permitem a inserção de um sistema de ventilação de ar e meios para guiar o sistema de ventilação de ar para o primeiro recipiente. O sistema de ventilação de ar, que permite a entrada de pequenas quantidades de ar filtrado, é útil quando o procedimento inventivo é realizado com o primeiro recipiente selado, em casos onde a passagem do material não deve ser interrompida pela equalização de pressões entre o primeiro recipiente e o segundo recipiente.

[056] O sistema mostrado é utilizado da seguinte forma: o segundo recipiente é inserido na área de alojamento (5) e, exercendo pressão suficiente sobre ele, a segunda agulha (4) é capaz de perfurar a tampa de dito segundo recipiente. A primeira agulha (2) é então inserida no primeiro recipiente (aberto ou fechado). O botão (3a) da unidade comutadora (3) é então pressionado, com o material (de acordo com o procedimento inventivo) sendo transferido de um primeiro recipiente para o segundo recipiente como resultado da diferença nas pressões.

Claims

1. Método para preparar um composto a partir do sangue, compreendendo as etapas de: i) prover sangue num primeiro recipiente selado com uma pressão abaixo da pressão atmosférica; ii) separar o sangue nas seguintes frações: uma fração de glóbulos vermelhos na parte de baixo do primeiro recipiente, uma fração de glóbulos brancos e plaquetas por cima da citada e, por acima, uma fração de plasma com uma concentração de gradiente de plaqueta, dito gradiente diminuindo em direção da parte do topo do primeiro recipiente; caracterizado por compreender as seguintes etapas: iii) inserir um dispositivo de extração ao nível da fração mais superior contida no primeiro recipiente; iv) realizar as etapas de conectar ao dispositivo de extração um segundo recipiente que é selado a vácuo e tem uma pressão menor do que a do primeiro recipiente, esperar por um certo período de tempo até que seja transferida por diferença de pressões uma quantidade desejada de plasma, glóbulos brancos com plaquetas e/ou glóbulos vermelhos, para o segundo recipiente, retirar o segundo recipiente e, no caso de extrações posteriores serem realizadas, ajustar o grau de introdução do dispositivo de extração de forma que novamente alcance o nível superior das frações remanescentes.

2. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o primeiro recipiente é aberto após a separação do sangue em frações e antes da introdução do dispositivo de extração.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que todas as etapas que são realizadas de acordo com um sistema selado.

4. Método de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que junto com o dispositivo de extração, é introduzido no primeiro recipiente um sistema de ventilação de ar para permitir a entrada de ar filtrado no mesmo e assegurar que a pressão do primeiro recipiente se mantenha maior do que a do segundo recipiente.

5. Método de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que o dispositivo de extração compreende um septo para manter o circuito selado.

6. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o primeiro recipiente contém um agente anticoagulante.

7. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o primeiro recipiente não contém um agente anticoagulante.

8. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o segundo recipiente contém um agente anticoagulante, um agente procoagulante, um agente ativador ou qualquer outro biomaterial ou agente, antes de transferir do primeiro recipiente ou adicionado posteriormente.

9. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o segundo recipiente contém um agente acelerador da coagulação

10. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o sangue é separado em frações por sedimentação.

11. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o sangue é separado em frações através da centrifugação do primeiro recipiente.

12. Método de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o primeiro recipiente é centrifugado a uma velocidade de centrifugação entre 100 e 900 G por um tempo de 3 a 12 minutos.

13. Método de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que o primeiro recipiente é centrifugado a uma velocidade de centrifugação entre 300 e 800G por um período de tempo de 5 a 9 minutos.

14. Dispositivo de extração, para executar o método de acordo com as reivindicações precedentes, caracterizado pelo fato de que compreende: - uma primeira agulha (2) para ser inserida no primeiro recipiente selado até um primeiro nível para a extração de uma primeira fração de sangue de dito primeiro nível, dito primeiro recipiente sendo mantido a uma pressão abaixo da pressão atmosférica e adaptado para conter frações de sangue em diferentes níveis; - uma segunda agulha (4) para ser inserida no segundo recipiente selado, ditas primeira e segunda agulhas estando em comunicação fluida para transferência de dita primeira fração de sangue para o segundo recipiente selado o qual é mantido a uma pressão inferior àquela do primeiro recipiente selado; e - uma unidade comutadora (3) disposta entre a primeira e a segunda agulhas provendo a abertura e o fechamento da comunicação fluida entre ditas primeira e segunda agulhas, dita unidade comutadora sendo acionada por um botão (3a).

15. Dispositivo de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de compreender uma carcaça (1) que serve de suporte para a primeira agulha (2), para a segunda agulha (4), para a unidade comutadora (3) e o respectivo botão (3a), em que a primeira agulha (2) se projeta para fora a partir da carcaça (1) e em que a carcaça (1) compreende um orifício (7) através do qual o botão (3a) é acessível por um usuário, permitindo que o usuário possa pressionar o botão (3a) e operar a unidade comutadora (3).

16. Dispositivo de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de compreender uma carcaça (1) da qual a primeira agulha (2) se projeta e que provê meios para abrir e fechar a passagem do material da primeira agulha (2) para a segunda agulha (4).

17. Dispositivo de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que a carcaça (1) compreende uma área de alojamento (5) que recebe internamente um recipiente de fluido, a segunda agulha (4) projetando-se apenas para dentro da referida área de alojamento.

18. Dispositivo de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que compreende orifícios para permitir a inserção de um sistema de ventilação de ar e meios para guiar o sistema de ventilação de ar para o primeiro recipiente.