BRPI0910937B1 - Composições cosméticas compreendendo exopolissacarídeos derivados de esteiras microbianas e uso das mesmas - Google Patents

Abstract

COMPOSIÇÕES COSMÉTICAS COMPREENDENDO EXOPOLISSACARÍDEOS DERIVADOS DE ESTEIRAS MICROBIANAS E USO DAS MESMAS. É aqui descrita uma composição cosmética compreendendo pelo menos um exopolissacarídeo (EPS) originário de uma esteira microbiana, em que o EPS está em uma concentração de cerca de 0,001% p/p até cerca de 1,5% p/p da composição. Preferivelmente, o EPS é derivado de micro-organismo isolado de esteiras microbianas encontradas na Polinésia Francesa. A composição é útil para reduzir e prevenir os sinais de envelhecimento da pele e danos ambientais pela alteração do metabolismo celular da pele e melhoria da hidratação.

Description

REFERÊNCIA CRUZADA AOS PEDIDOS RELACIONADOS

[0001] Este pedido reivindica prioridade, de acordo com 35 USC § 119 (e), do Pedido Provisório Americano No. de Série 61/044.992, depositado em 15 de abril de 2008. Todos os documentos acima são incorporados aqui em sua totalidade por referência.

CAMPO DA INVENÇÃO

[0002] A presente invenção se refere, de modo geral, a composições cosméticas e métodos de uso das mesmas. ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[0003] A pele é uma barreira física ao ambiente. É a alteração das propriedades de barreira e dano efetivo a esta barreira que causa as condições da pele.

[0004] A epiderme e a derme, separadas pela membrana basal, constituem o revestimento cutâneo na hipoderme A epiderme é a camada mais superficial da pele e confere a ela resistência e impermeabilidade. A alteração desta camada irá afetar negativamente a qualidade perceptível da pele e irá conduzir eventualmente ao envelhecimento cutâneo. A derme, a camada interna da pele, é tecido conjuntivo composto de células (essencialmente fibroblastos) dispersas em um meio complexo chamado de matriz extracelular (ECM). Essa matriz é constituída por fibras de colágeno e elastina, glicoproteínas (fibronectina e laminina) e proteoglicanas. A matriz extracelular serve como uma estrutura para as células, permitindo que os tecidos e órgãos venham a aderir em organismos pluricelulares.

[0005] O envelhecimento cutâneo é um fenômeno complexo responsável pelas mudanças progressivas da pele. O envelhecimento da pele resulta de dois processos: (1) um processo intrínseco, correspondendo ao envelhecimento cronológico, e (2) um processo extrínseco decorrente principalmente do efeito prejudicial da exposição aos estresses ambientais. Genética, exposição aos raios UV, fatores climáticos (aspereza/vento/frio/quente), poluição (química, radicais livres, contaminantes, óxido de nitrogênio, metais), consumo de álcool ou fumo são fatores envolvidos no envelhecimento cutâneo.

[0006] Embora diferentes tipos de células coexistam na epiderme, queratinócitos formam a maior parte dessa camada e desempenham um papel na resistência oferecida pela barreira mucocutânea. Eles estão envolvidos em um programa extremamente preciso da diferenciação e maturação, que é submetido a numerosas interações entre os compartimentos epidérmicos e dérmicos. A atividade principal dessas células é a síntese de queratina, que representa perto de 90% de toda a proteína na epiderme. As camadas inferiores de células adjacentes à derme são as células basais que se reproduzem. Conforme a células envelhece, elas se movem em direção à camada mais externa da pele, levando à diferenciação terminal das células. Durante o processo de maturação, a fisiologia, composição química, forma e orientação das células mudam. Quando as células atingem a camada superior da pele - o estrato córneo - as células são chamadas corneócitos e não são mais viáveis. Os corneócitos não têm um núcleo e estruturas celulares. Corneócitos são células planas hexagonais cheias de proteínas queratina, cercadas por um envelope proteico e lipídeos, que retêm água. A forma e orientação celular das proteínas de queratina conferem resistência ao estrato córneo. Existem de 10 a 30 camadas de corneócitos empilhados. As células permanecem conectadas entre si por pontes de proteína chamadas desmossomos. As bicamadas empilhadas de lipídeos cercam as células no espaço extracelular. A estrutura resultante é a barreira física natural e de retenção de água da pele.

[0007] Durante o processo de maturação, as células viáveis que se movem em direção ao estrato córneo começam a aglutinar proteínas em grânulos. Estes grânulos estão presentes na camada de células granulares da pele e são preenchidos com uma proteína chamada filagrina. Filagrina se complexa com proteínas de queratina nas células granulares. Este complexo protege a filagrina da quebra proteolítica. Uma vez que as células em processo de degeneração avançam para a camada externa da pele, as enzimas quebram o complexo queratina-filagrina. A filagrina está do lado de fora dos corneócitos e a queratina que retém água permanece no interior dos corneócitos do estrato córneo. Quando o teor de umidade da pele é reduzido, enzimas proteolíticas específicas no estrato córneo são disparadas para quebrar ainda mais filagrina em aminoácidos livres Os aminoácidos livres, juntamente com outras substâncias químicas fisiológicas, tais como ácido láctico, uréia e sais, estão presentes no estrato córneo. Juntos, esses produtos químicos são chamados de “fatores de umidificação natural” e são responsáveis por manter a pele úmida e flexível, atraindo e mantendo a propriedade de água. O teor de água do estrato córneo é normalmente de cerca de 30%. A quebra proteolítica da filagrina em aminoácidos só acontece quando a pele está seca para controlar a pressão osmótica da pele e a quantidade de água que possui. A transglutaminase é uma enzima envolvida na formação do estrato córneo e é um marcador específico de diferenciação dos queratinócitos em corneócitos

[0008] A descamação é outro fator importante para manter a pele suave. Descamação é o processo enzimático de dissolução dos desmossomos, as conexões proteicas entre os corneócitos, e o eventual espalhamento destas células. Ao contrário da produção de aminoácidos da degradação proteolítica de proteínas filagrina, enzimas proteolíticas responsáveis pela função de descamação na presença de um estrato córneo bem hidratado. Estas enzimas estão localizadas intercelularmente. Na ausência de água, as células não descamam normalmente, e o resultado é uma pele engrossada, seca, áspera e escamosa.

[0009] O último fator que é necessário para explicar como a barreira natural da pele trabalha para manter a pele úmida e flexível é a função dos lipídeos intercelulares. Estes lipídeos formam bicamadas empilhadas (multilamelares) em torno dos corneócitos no estrato córneo e incorporam água na sua arquitetura. Os lipídeos são derivados da degradação das células na camada granular da pele (semelhante à origem dos grânulos de proteína). Estruturas lipídicas especiais chamadas de grânulos lamelares são liberadas nos espaços extracelulares das células em degradação. Há também a liberação de lipídeos das membranas celulares antigas. Estes lipídeos liberados incluem o colesterol, ácidos graxos livres e esfingolipídeos. Ceramida, um tipo de esfingolipídeo derivado dos grânulos lamelares, é um dos principais componentes lipídicos responsável pela geração de estruturas lipídicas empilhadas. Estes lipídeos aprisionam moléculas de água em suas regiões hidrofílicas (atração de água). Os lipídeos empilhados recém-formados em torno dos corneócitos fornecem uma barreira impermeável para a passagem de água para fora do estrato córneo e a prevenção dos fatores de umidificação naturais da lixiviação das camadas superficiais da pele. As camadas lipídicas retêm água e circundam os corneócitos para fornecer barreira de permeabilidade. Os lipídeos intercelulares e corneócitos contendo proteínas e fatores de umidificação naturais trabalham juntos para fornecer uma barreira eficaz contra a perda de água e retenção de água para manter a flexibilidade da pele. As forças de protetoras protegem a pele contra agressões ambientais e dessecação. Existem bruscas reduções nos lipídeos intercelulares após 40 anos de idade, resultando em maior suscetibilidade às condições de pele seca.

[0010] A exposição a substâncias irritantes compromete a função de barreira do estrato córneo e diminui sua capacidade de proteger a pele contra o stress ambiental (por exemplo, irradiação ultravioleta, agentes infecciosos, etc.) A exposição repetida e prolongada aos irritantes ambientais resulta em proteínas de pele desnaturadas, desorganização das camadas lamelares lipídicas, remoção dos lipídeos intercelulares protetores, perda de fatores de umidificação naturais e diminuição da coesão entre as células. Estes danos também são responsáveis pela perda da função das enzimas responsáveis pela descamação dos corneócitos. Existe uma acentuação desses problemas com a exposição à poluição, frio, sol, vento, baixa umidade ou substâncias químicas. Um irritante é qualquer agente que é capaz de produzir dano celular se houver exposição por tempo suficiente e em concentrações suficientes. A severidade do dano depende do tipo e intensidade da exposição a esses fatores de irritação. Há também os fatores endógenos que tornam uma pessoa suscetível aos danos da pele por fatores externos. Esses fatores incluem ter doença de pele ativa, tais como psoríase, eczema, condições de pele seca hereditárias, histórico prévio de doença de pele, pele sensível e/ou idade avançada.

[0011] A exposição ao UV é responsável pelos danos à epiderme e derme. O UVB solar (290-315 nm) afeta essencialmente a epiderme, enquanto que UVA (315-400 nm) atinge principalmente a derme. Um estudo detalhado de alterações histológicas devido à exposição ao UV revela espessamento da pele, perda de resiliência e diminuição das funções imunes. Radiações UV crônicas causam alteração das propriedades biomecânicas da derme, que fazem com que as rugas apareçam. A radiação actínica afeta a epiderme e derme em diferentes níveis. O desencadeamento do processo de elastose corresponde à implementação de um tecido anormal na região superior da derme, que é muito característico da ação crônica do UVB. Este novo tecido caracteriza-se por uma hiperplasia de fibras elásticas anormais e pela ocorrência de fibras danificadas com a perda da organização paralela de microfibrilas ao redor da elastina (Klingman LH, J Invest. Dermatol 1985-84-272-6).

[0012] Este processo está associado com um aumento do acúmulo de fibras compostas por fibronectina e de compostos fibrilares que são diferentes de elastina. A criação de tal tecido é responsável pela perda das propriedades físico-químicas da derme. Fibras de colágeno alteradas pelo UVB apresentam-se em si como grupos densos observáveis. A radiação UVB, cuja energia luminosa é absorvida diretamente pelo DNA, está levando principalmente a alterações da base pirimídica.

[0013] Portanto, existe uma necessidade de desenvolver novas abordagens para a prevenção e/ou tratamento de sinais de envelhecimento da pele e outras doenças e distúrbios da pele.

RESUMO DA INVENÇÃO

[0014] Mais especificamente, de acordo com a presente invenção, é fornecido uma composição de cuidados com a pele compreendendo pelo menos, um exopolissacarídeo (EPS) oriundo de uma matriz microbiana, o EPS estando em uma concentração de cerca de 0,001% a cerca de 1,5% p/p da composição.

[0015] Em uma modalidade específica, a matriz microbiana é uma matriz microbiana marinha. Em outra modalidade específica, pelo menos um EPS é gerado pela fermentação de um microrganismo isolado da matriz microbiana. Em outra modalidade específica, pelo menos um EPS compreende pelo menos dois EPSS, cada EPS provenientes de diferentes microrganismos isolados da matriz microbiana. Em outra modalidade específica, pelo menos um EPS compreende pelo menos dois EPSS, cada EPS originários de várias matrizes microbianas. Em outra modalidade específica, a matriz microbiana se origina da Polinésia Francesa. Em outra modalidade específica, pelo menos um EPS é quimicamente ou fisicamente modificado. Em outra modalidade específica, pelo menos um EPS é despolimerizado. Em outra modalidade específica, pelo menos um EPS é um EPS natural. Em outra modalidade específica, pelo menos um EPS possui sulfato, acetato, lactato, succinato ou piruvato.

[0016] Em outra modalidade específica, a composição da presente invenção é para uso em cuidados anti- envelhecimento da pele. Em outra modalidade específica, a composição da presente invenção é para uso em cuidados com a pele após o sol. Em outra modalidade específica, a composição do presente invenção é para uso no cuidado da pele de protetor solar. Em outra modalidade específica, a composição da presente invenção é para uso para prevenir ou reduzir, pelo menos, um sinal de envelhecimento da pele.

[0017] Em uma modalidade específica da composição é para melhorar a hidratação Em outra modalidade específica, a composição é para melhorar a morfologia do estrato córneo. Em outra modalidade específica, a composição é para melhorar o microrrelevo da pele. Em outra modalidade específica, a composição é para melhorar a descamação. Em outra modalidade específica, a composição é para melhorar a diferenciação de queratinócitos. Em outra modalidade específica, a composição é para reduzir a adesão bacteriana na superfície da pele. Em outra modalidade específica, a cepa bacteriana é Staphylococcus epidermidis ou Staphylococcus aureus. Em outra modalidade específica, a composição é para estimular a produção de ácido hialurônico pelos fibroblastos humanos senescentes. Em outra modalidade específica, a composição é para estimular a síntese de lipídeos total da epiderme. Em outra modalidade específica, a composição é para estimular a expressão de pelo menos um gene envolvido na descamação da pele. Em outra modalidade específica, o gene é calicreína 5, neurosina ou a enzima quimiotrípsica do estrato córneo. Em outra modalidade específica, a composição é para estimular a expressão de pelo menos um gene envolvido na diferenciação de queratinócitos. Em outra modalidade específica, o gene é filagrina, loricrina ou involucrina. Em outra modalidade específica, a composição é para estimular a expressão da transglutaminase. Em outra modalidade específica, a composição é para reduzir os peróxidos lipídicos intracelulares das células da pele irradiadas.

[0018] De acordo com outro aspecto da presente invenção, é fornecido um uso de pelo menos um exopolissacarídeo (EPS) proveniente de uma matriz microbiana, para a fabricação de uma composição de cuidados com a pele. Em uma modalidade específica do uso da presente invenção, a composição de cuidados com a pele é uma composição de cuidados anti-envelhecimento da pele, e uma composição de cuidados com a pele após o sol ou uma composição de cuidados da pele de protetor solar.

[0019] De acordo com outro aspecto da presente invenção, é fornecido o uso de pelo menos um exopolissacarídeo (EPS) originário de uma matriz microbiana, para prevenir ou reduzir pelo menos um sinal anti- envelhecimento da pele.

[0020] Em uma modalidade específica, o uso é para melhorar a hidratação. Em outra modalidade específica, o uso é para melhorar a morfologia do estrato córneo. Em outra modalidade específica, o uso é para a melhoria do microrrelevo da pele. Em outra modalidade específica, o uso é para melhorar a descamação. Em outra modalidade específica, o uso é para melhorar a diferenciação de queratinócitos. Em outra modalidade específica, o uso é para reduzir a aderência de bactérias na superfície da pele. Em outra modalidade específica, a cepa bacteriana é Staphylococcus epidermidis ou Staphylococcus aureus. Em outra modalidade específica, o uso é para estimular a produção de ácido hialurônico pelos fibroblastos humanos senescentes. Em outra modalidade específica, o uso é para estimular a síntese de lipídeos totais da epiderme. Em outra modalidade específica, o uso é para estimular a expressão de pelo menos um gene envolvido na descamação da pele. Em outra modalidade específica, o gene é calicreína 5, neurosina ou enzima quimiotrípsica do estrato córneo. Em outra modalidade específica, o uso é para estimular a expressão de pelo menos um gene envolvido na diferenciação de queratinócitos. Em outra modalidade específica, o gene é filagrina, loricrina ou involucrina. Em outra modalidade específica, o uso é para estimular a expressão da transglutaminase. Em outra modalidade específica, o uso é para reduzir os peróxidos lipídicos intracelulares das células da pele irradiadas.

[0021] De acordo com outro aspecto da presente invenção, é fornecido um método de prevenção ou redução de um sinal de envelhecimento da pele em um indivíduo, compreendendo a administração de uma composição compreendendo uma quantidade eficaz de pelo menos um exopolissacarídeo (EPS) oriunda de uma matriz microbiana na pele do indivíduo, através do que o sinal de envelhecimento da pele é evitado ou reduzido.

[0022] Outros objetos, vantagens e características da presente invenção se tornarão mais evidentes na leitura da seguinte descrição não-restritiva das suas modalidades específicas, dadas somente a título de exemplo com referência aos desenhos associados.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0023] Nos desenhos em anexo:

[0024] Figura 1 são fotografias de explantes no dia cinco depois do contato com poluentes sem tratamento EPS (painel da esquerda inferior) e com tratamento EPS (painel da direita);

[0025] Figura 2 mostra marcação de filagrina em explantes não-deslipidados após 3 horas sem tratamento;

[0026] Figura 3 mostra marcação de filagrina em um explante deslipidado após 3 horas sem tratamento;

[0027] Figura 4 mostra marcação de filagrina em um explante deslipidado após 3 horas com tratamento EPS (Pol- 6);

[0028] Figura 5 mostra marcação de filagrina em um explante deslipidado após 3 horas com tratamento EPS (Pol-6 e Pol-3) ;

[0029] Figura 6 marcação de filagrina em um explante deslipidado após 3 horas com tratamento EPS (Pol-6 e Pol-8);

[0030] Figura 7 mostra marcação de transglutaminase em um explante não-deslipidado após 3 horas sem tratamento;

[0031] Figura 8 mostra marcação de transglutaminase em um explante deslipidado após 3 horas sem tratamento;

[0032] Figura 9 mostra marcação de transglutaminase em um explante deslipidado depois de 3 horas com tratamento EPS (Pol-6);

[0033] Figura 10 mostra fotografias da morfologia de uma pele muito hidratada (painel superior) e muito seca (painel inferior);

[0034] Figura 11 mostra fotos antes e depois do estado de hidratação das camadas superficiais da pele tratadas com EPS;

[0035] Figura 12 mostra fotos antes e depois do estado de hidratação das camadas superficiais da pele tratadas com placebo,

[0036] Figura 13 mostra graficamente a diferença na hidratação entre o tratamento EPS e com placebo das Figuras 11 e 12, respectivamente;

[0037] Figura 14 mostra fotos antes e depois do estado de microrrelevo da pele tratada com EPS;

[0038] Figura 15 mostra fotos antes e depois do estado de microrrelevo da pele tratada com placebo; e

[0039] Figura 16 mostra graficamente a diferença da hidratação entre o tratamento com EPS e placebo das Figuras 14 e 15, respectivamente.

DESCRIÇÃO DAS MODALIDADES ILUSTRATIVAS

[0040] Matrizes microbianas se desenvolvem em uma grande variedade de áreas costeiras, como praias de areia, pântanos, deltas e estuários, salinas e lagoas. Estes ecossistemas únicos são geralmente constituídos de camadas viscosas verticalmente laminadas produzidas pelo desenvolvimento de diferentes microrganismos Eles são submetidos a variações extremas de temperatura, salinidade, acidez e raios UV. As células da maior parte das bactérias são cercados por camadas externas mucilaginosas essencialmente constituídas por polissacarídeos Estas camadas são mais ou menos ligadas à superfície celular. Polissacarídeos também podem estar presentes no meio de cultura. Estes tipos de polissacarídeos são referidos como exopolissacarídeos (EPS) (Gautret P, Trichet J Automicrites in modern cyanobacterial stromatolite deposits of Rangiroa, Arquipélago de Tuamotu, Polinésia Francesa: Biochemical parameters underlaying their formation 2005. Sedimentary Geology 178: 55-73, Mao Che L, Andréfouet S, Bothorel V, Guezennec M, Rougeaux H, Guezennec J, Deslandes E, Trichet J, Matheron R, Le Campion T, Payri C e Caumette P Physical, chemical, and microbiological characteristics of microbial mats (KOPARA) in the South Pacific atolls of French Polynesia 2001 Can. J. Microbiol. 47: 994-101; Richert L, Golubic S, Le Guédès R, Ratiskol J, Payri C, Guezennec J. 2005. Characterization of Exopolysaccharides Produced by Cyanobacteria Isolated from Polynesian Microbial Mats Current Microbiology 51: 379-384; Richert L, Golubic S, Le Guédès R, Hervé A, Payri C. Cyanobacterial populations that build 'kopara' microbial mats in Rangiroa, Tuamotu Archipelago, French Polynesia European. 2006. Journal of Phycology 41 (3): 259-279).

[0041] Na Polinésia Francesa, matrizes microbianas estão crescendo nos recifes de coral de atóis e ilhotas (motu) de algumas ilhas principais do arquipélago Society. Suas espessuras dependem dos locais e das condições ambientais e pode variar de poucos milímetros até várias dezenas de centímetros. No Arquipélago Tuamotu estas matrizes avermelhadas e gelatinosas microbianas são denominadas “Kopara”. Anos atrás, esse recurso natural foi consumido quando a comida era escassa; parece que ele ainda é utilizado para a alimentação em alguns arquipélagos do noroeste do Oceano Pacífico. Ele também foi utilizado como chapa de cura. Devido a algumas de suas propriedades, especialmente as nutricionais e medicinais, Kopara pode ser de interesse em várias áreas, por exemplo, nas médicas e paramédicas (propriedades antibacterianas e de cura), indústria de alimentos (carotenóides usados como agentes corantes) e pedologia (estabilizadores).

[0042] Qualquer que seja o tipo de lagoa onde Koparas são encontrados, a sua estrutura é bastante homogênea; ela consiste em uma matriz microbiana verticalmente laminada. Como a maioria das matrizes microbianas, ela é dominada por alguns microrganismos caracterizados por seus grupos funcionais: cianobactérias (aquelas do gênero Phormidium juntamente com Scytonema, Schizothrix e Chlorococcales), bactérias fotossintéticas sulfurosas como, por exemplo, Chromatium e Thiocapsa, bactérias vermelhas não-sulfurosas (PNSB incluindo Rhodospirillum e Rhodopseudomonas/Rhodobium/Blastochloris) e redutores de sulfato (principalmente Desulfovibrio).

[0043] Estas espécies foram descritas parcialmente na literatura e, embora a maioria dessas espécies não patogênicas pertençam a gêneros conhecidos, certas espécies são, entretanto, novas. Algumas destas bactérias, que vivem e se reproduzem sob condições extremas, foram consideradas como sendo capazes de crescer em condições de cultura de laboratório, para sintetizar e secretar no meio de cultura uma variedade de moléculas.

[0044] Mais precisamente, a presente invenção se refere às propriedades vantajosas nas áreas de cosméticos e de dermatologia da EPS secretadas de bactérias provenientes de matrizes microbianas.

[0045] Essas EPSs são polímeros de alto peso molecular (tipicamente de cerca de 100.000 Daltons a mais de cerca de 5.000.000 Daltons). Eles consistem de cadeias de vários açúcares neutros ou ácidos. Sabe-se que alguns desses EPSs são ramificados, mas a estrutura de outros permanece desconhecida.

[0046] Nos exemplos a seguir é apresentada a capacidade de nove EPS (Pol-1, Pol-2... Pol-9) isolados de matrizes microbianas para estimular a descamação e melhorar a função de barreira da pele, mantendo a hidratação. Esses EPSs diferem quimicamente uns dos outros, e são derivados a partir da fermentação de nove espécies diferentes de bactérias de matrizes microbianas originárias da Polinésia Francesa. Características de cada um desses EPSs são apresentadas na Tabela I abaixo.

[0047] As Tabelas II e III abaixo fornecem a proporção molar de vários açúcares em EPSs Pol-3 e Pol-6, com base na Glicose = 10,0 para açúcares neutros e com base no ácido glicurônico = 10,0 para açúcares ácidos.

[0048] Em relação ao Pol-5, nenhum substituinte foi detectado nas porções de açúcar conforme determinado por HPLC e Dionex. As proporções de monossacarídeos foram determinadas por cromatografia a gás. D-Glicose: 17,2% (razão molar: 3,2), D-galactose: 15,3% (MR: 2,9), D-manose: 2,6% (MR: 0,5); Ácido D-glicurônico 13,0% (MR: 2,0), ácido D-galacturônico: 6,4% (MR: 1,0).

[0049] A presente invenção engloba métodos de administração de pelo menos um EPS em uma quantidade eficaz para proporcionar um resultado desejado. Em modalidades específicas da presente invenção, exopolissacarídeos da presente invenção são usados em uma concentração entre cerca de 0,01 g/L até cerca de 15 g/L na composição de cuidados com a pele. Eles podem ser incluídos em uma concentração de 0,001% a cerca de 1,5% p/p da composição.

[0050] Os exopolissacarídeos da presente invenção podem ser formulados em uma composição cosmética topicamente aplicável (por exemplo, uma formulação tópica). Exemplos não-limitativos de tais composições topicamente aplicáveis incluem o creme de cuidados com a pele, cremes de limpeza, pomada, loção de cuidados com a pele, gel de cuidados com a pele, espuma de cuidados com a pele, composição protetora solar, cuidados com a pele ao sol, creme de remoção de maquiagem, loções de remoção de maquiagem, creme de base, base líquida, preparação de banho e ducha, composição desodorante, composição antitranspirante, composição de produtos de barbear, gel ou loção pós-barba, composição de adjuvantes de beleza, creme depilatório, composição de sabão, composição limpadora de mãos, barra de limpeza, de cuidados com o bebê, de cuidados com o cabelo, xampú, loção fixadora, loção de tratamento, cremes para cabelos, gel de cabelo, composição corante, composição de reestruturação, composição permanente, composição anti-perda de cabelo ou qualquer outra composição que seja adaptada ao uso em um regime cosmético de aplicação tópica.

[0051] Cremes, como é bem conhecido nas técnicas de formulação farmacêutica e cosmecêutica, são líquidos viscosos ou emulsões semi-sólidas, sejam óleo-em-água ou água-em-óleo. Bases de cremes são laváveis em água, e contêm uma fase oleosa, um emulsificante e uma fase aquosa. A fase oleosa, também chamada de fase “interna”, é geralmente compreendida de petrolato e um álcool graxo como o álcool cetílico ou álcool estearílico. A fase aquosa normalmente, embora não necessariamente, excede a fase oleosa em volume, e geralmente contém um umectante. O emulsificante em uma formulação de creme é geralmente um tensoativo não-iônico, aniônico, catiônico ou anfotérico.

[0052] As loções são preparações para serem aplicadas à superfície da pele sem fricção, e são tipicamente preparações líquidas ou semi-líquidas, nas quais as partículas sólidas, incluindo o agente ativo, estão presentes em uma base de água ou álcool. As loções são geralmente suspensões de sólidos, e preferivelmente, para o presente propósito, compreendem uma emulsão oleosa líquida do tipo óleo-em-água. Loções são formulações preferidas para o tratamento de grandes áreas do corpo, por causa da facilidade de aplicação de uma composição mais fluida. Geralmente, é necessário que a matéria insolúvel em uma loção seja finamente dividida. Loções tipicamente contêm agentes de suspensão para produzir dispersões melhores, bem como compostos úteis para a localização e retenção do agente ativo em contato com a pele, por exemplo, metilcelulose, carboximetilcelulose sódica ou semelhante.

[0053] As soluções são misturas homogêneas preparadas pela dissolução de uma ou mais substâncias químicas (solutos) em um líquido tal que as moléculas da substância dissolvida estão dispersas entre aqueles do solvente. A solução pode conter outras substâncias químicas cosmeceuticamente aceitáveis para tamponar, estabilizar ou o soluto. Exemplos comuns dos solventes utilizados na preparação de soluções são o etanol, água, propilenoglicol ou outros veículos cosmeceuticamente aceitáveis.

[0054] Géis são sistemas semi-sólidos, tipo suspensão. Géis monofásicos contêm macromoléculas orgânicas distribuídas substancialmente de maneira uniforme em todo o líquido carreador, que é tipicamente aquoso, mas também, de preferência, contém um álcool, e, opcionalmente óleo. “Macromoléculas orgânicas”, isto é, os agentes gelificantes, são polímeros reticulados de ácido acrílico, como a família de “carbômero” de polímeros, por exemplo, carboxipolialquilenos que podem ser obtidos comercialmente com o nome Carbopol™. Outros exemplos são polímeros hidrofílicos tais como óxidos de polietileno, copolímeros de polioxietileno-polioxipropileno e álcool polivinílico; polímeros celulósicos, tais como hidroxipropilcelulose, hidroxietilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, ftalato de hidroxipropilmetilcelulose e metilcelulose; gomas, como goma tragacanto e goma xantana; alginato de sódio; e gelatina. Para preparar um gel uniforme, agentes de dispersão, como o álcool ou glicerina podem ser adicionados, ou o agente de gelificação pode ser disperso por trituração, mistura ou agitação mecânica ou combinações dos mesmos.

[0055] Os unguentos são preparações semi-sólidas que são tipicamente à base de petrolato ou outros derivados de petróleo. A base de unguento específica a ser usada, como será evidente pelas pessoas versadas na técnica, é uma que irá fornecer uma série de características desejáveis, por exemplo, emoliência ou similares. Tal como acontece com outras carreadores ou veículos, uma base de unguento deve ser inerte, estável, não-irritante e não-sensibilizante. Conforme explicado em Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19a Ed (Easton, Pa: Mack Publishing Co., 1995), nas páginas 1399-1404, e as bases de unguento podem ser agrupadas em quatro classes: bases oleaginosas; bases emulsificáveis, bases de emulsão e bases solúveis em água. Bases de unguento oleaginosas incluem, por exemplo, óleos vegetais, gorduras obteníveis de animais, e hidrocarbonetos semi-sólidos obtido de petróleo. Bases de unguento emulsificáveis, também conhecidas como bases de unguento absorventes, contêm pouca ou nenhuma água e incluem, por exemplo, sulfato de hidroxiestearina, lanolina anidra, e petrolato hidrofílico. As bases de unguento de emulsão são ou emulsões água-em-óleo (W/O) ou emulsões óleo-em-água (O/W) e incluem, por exemplo, álcool cetílico, monoestearato de glicerila, lanolina e ácido esteárico. Bases de unguento solúveis em água preferidas são preparadas a partir de polietilenoglicóis de pesos moleculares variáveis; novamente, ver Remington: The Science and Practice of Pharmacy para informações adicionais.

[0056] Pastas são formas de dosagem semi-sólidas em que o agente ativo é suspenso em uma base adequada. Dependendo da natureza da base, as pastas são divididas entre as pastas graxas ou aquelas feitas a partir de géis aquosos de fase única. A base em uma pasta graxa é geralmente petrolato ou petrolato hidrofílico ou semelhantes. As pastas feitas a partir de géis aquosos de fase única geralmente incorporam carboximetilcelulose ou similares como uma base.

[0057] Formulações também podem ser preparadas com lipossomas, micelas e microesferas. Lipossomas são vesículas microscópicas tendo uma parede lipídica compreendendo uma bicamada lipídica e, no presente contexto, que encapsulam um ou mais componentes das formulações anti-envelhecimento. Preparações lipossomais aqui incluem preparações catiônicas (carga positiva), aniônicas (carga negativa) e neutras. Lipossomas catiônicos são prontamente disponíveis. Por exemplo, lipossomas N[1-2,3-dioleilóxi)propil]-N,N,N- trietilamônio (DOTMA) são disponíveis sob a marca Lipofectin™ (GIBCO BRL, Grand Island, N.Y.). Da mesma forma, os lipossomas aniônicos e neutros são prontamente disponíveis, bem como, por exemplo, de Avanti Polar Lipids (Birmingham, Ala), ou podem ser facilmente preparados usando materiais prontamente disponíveis. Tais materiais incluem fosfatidilcolina, colesterol, fosfatidiletanolamina, dioleofosfatidil colina (DOPC), dioleolifosfatidil glicerol (DOPG), e dioleoilfosfatidil etanolamina (DOPE), entre outros. Estes materiais também podem ser misturados com DOTMA em proporções apropriadas. Métodos para fazer lipossomas utilizando estes materiais são bem conhecidos na técnica.

[0058] Micelas são conhecidas na técnica como compreendido de moléculas tensoativas dispostas de modo que seus grupos de cabeça polar formem uma camada esférica externa, enquanto que as cadeias hidrofóbicas de hidrocarboneto são orientados em direção ao centro da esfera, formando um núcleo. Micelas formam em uma solução aquosa contendo tensoativos em uma concentração suficientemente alta para que micelas se formem naturalmente. Tensoativos úteis para formar micelas incluem, mas não se limitado, a laurato de potássio, octanossulfonato de sódio, decanossulfonato de sódio, dodecanossulfonato de sódio, laurilsulfato de sódio, docusato sódico, brometo de deciltrimetilamônio, brometo de dodeciltridecilamônio, brometo de tetradeciltrimetilamônio, cloreto de tetradeciltrimetilamônio, cloreto de dodecilamônio, éter polioxil-8-dodecílico, éter polioxil-12-dodecílico, nonoxinol 10 e nonoxinol 30.

[0059] Microesferas, da mesma forma, podem ser incorporadas nas presentes formulações. Da mesma forma que lipossomas e micelas, microesferas essencialmente encapsulam um ou mais componentes das presentes formulações. Eles são geralmente, mas não necessariamente formados a partir de lipídeos, de preferência lipídeos carregados, como fosfolipídeos. A preparação de microesferas lipídicas é bem conhecida na técnica e descrita nos textos e literatura pertinentes.

[0060] Em uma modalidade, a composição da presente invenção ainda compreende pelo menos um ingrediente ativo/agente adicional. Em uma modalidade adicional, o acima referido pelo menos um ingrediente ativo adicional modular pelo menos um dentre diferenciação celular, atividade metabólica celular, estrutura celular, proliferação celular, processos extracelulares e pigmentação.

[0061] A composição da presente invenção pode ainda compreender pelo menos um de um agente que modula a diferenciação ou proliferação celular, um agente anestésico, um agente anti-acne, um agente antienvelhecimento, um agente antibacteriano, um agente anticelulite, um agente antifúngico, um agente antiinflamatório, um agente antiirritante, um agente antioxidante, um agente antiparasitário, um agente antiprurítico, um agente anti- rosácea, um agente anti-seborréia, um agente antiestresse, um agente anti-telangiectasia, um agente antiviral, um agente anti-rugas, agente de cuidados com o bebê, um agente de banho copo, um agente tranquilizante, um agente de limpeza, um agente de síntese de colágeno, um agente inibidor da elastase, um agente esfoliante, um agente de peeling facial, um agente de fixação, um agente de cuidados com os pés, um agente sequestrador de radicais livres, um agente modulador da função imune, um agente queratolítico, um agente suspensor, um agente removedor de maquiagem, um agente estimulador da melanogênese, um agente de cuidados com o cabelo, um agente inibitório da matriz de metaloproteinase, um agente umidificante, um agente absorvente de óleo, um agente osmorregulator, um agente anti-fotoenvelhecimento, um agente protetor, um agente rejuvenescedor, um agente regenerador, um agente de reestruturação, um agente de pele sensível, um agente de produto de barbear, um agente intensificador de defesa da pele, um agente clarificador da pele, um agente de reparação da pele, um agente de emagrecimento, um agente de suavização, um agente de alisamento, um agente suavizante, um agente de cuidados com o sol, um agente de bronzeamento artificial, um agente de elasticidade e um agente clareador, ou qualquer outro agente adaptado para uso em um regime cosmético que compreende a aplicação tópica da referida composição cosmética, e que complementa ou suplementa o efeito dos EPS da presente invenção.

[0062] Sem ser tão limitados, os agentes que modulam a diferenciação ou proliferação celular incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos de derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem o ácido retinóico e seus derivados (retinol, retinaldeído, palmitato de retinila, ácido trans-retinóico, ácido 13-cis-retinóico, ácido 9-cis-retinóico, retinoil glicuronídeos, tretinoína, isotretinoína, etretinato, acitretina, tazaroteno, adapaleno, β-caroteno, éster retinílico), vitamina D e seus derivados (colecalciferol, ergocalciferol, 25- hidroxicolecalciferol), fatores de crescimento, derivados de estradiol. Também inclui qualquer combinação destes.

[0063] Sem ser tão limitado, anestésicos incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem cloridrato de lidocaína e seus derivados. Ele também inclui qualquer combinação destes.

[0064] Sem ser tão limitado, agentes anti-acne incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem o peróxido de benzoíla, ácido retinóico e seus derivados (retinol, retinaldeído, palmitato de retinila, ácido trans-retinóico, ácido 13-cis-retinóico, ácido 9-cis-retinóico, retinoil glicuronóides, tretinoína, isotretinoína, etretinato, acitretina, tazaroteno, adapaleno, β-caroteno, éster retinílico), ácido salicílico, enxofre, cal sulfurada, álcool e acetona. Ele também inclui qualquer combinação destes.

[0065] Sem ser tão limitado, agentes anti- envelhecimento/anti-rugas incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem o ácido hialurônico, 2-pirrolidona carboxilato de sódio, glicosaminoglicanos, cinetina, ácido retinóico e seus derivados (retinol, retinaldeído, palmitato de retinila, ácido trans-retinóico, ácido 13-cis-retinóico, ácido 9-cis-retinóico, retinoil glicuronóides, tretinoína, isotretinoína, etretinato, acitretina, tazaroteno, adapaleno, β-caroteno, éster,retinílico), fator de crescimento epidérmico, ceramida, cloreto de etilbisiminometilguaiacol manganês, inibidores de glicação, extrato de crisantélio índico e extrato de aphanizomenon flos aquae. Eles também incluem qualquer combinação destes produtos.

[0066] Sem ser tão limitado, agentes antibacterianos incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem extrato de eucalipto, fosfato de clindamicina, cavacrol, eritromicina e antibióticos pertencentes ao grupo de tetraciclinas. Ele também inclui uma combinação destes.

[0067] Sem ser tão limitado, agentes antifúngicos incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem econazol, cetoconazol, miconazol, anfotericina B, terbinafina e octopirox. Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0068] Sem ser tão limitado, agentes anti- inflamatórios incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem alantoína, vitamina E e seus derivados (a-tocoferol, δ- tocoferol, y-tocoferol), óleo de camomila, óleo de gingko biloba e extrato de camellia sinensis. Isto também inclui qualquer combinação dos mesmos.

[0069] Sem ser tão limitado, agentes anti- irritantes/suavizantes/alisantes/calmantes incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos , extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem alantoína, extrato de Camellia sinensis, óleo de lavanda, aloe vera, extrato de tília, extrato de Epilobium angustifolium, extrato de crisântelo índico, extrato de cola nitida e extrato de fermento de alteromonas. Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0070] Sem ser tão limitado, agentes antioxidantes incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem furfuriladenina, pantenol, ácido lipóico, ubiquinona, niacinamida, melatonina, catalase, glutationa, superóxido desmutase, polifenóis, cisteína, alantoína, cinetina, vitamina C e seus derivados (palmitato de ascorbila, fosfato de magnésio ascorbila, fosfato de ascorbila sódico), vitamina E e seus derivados (α-tocoferol, δ-tocoferol, y-tocoferol), extrato de semente de uva e extrato de Camellia sinensis. Ele também inclui qualquer combinação destes.

[0071] Sem ser tão limitado, agentes antipruríticos incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem trimeprazine, tenaldina e ciproeptadina. Ele também inclui qualquer combinação destes.

[0072] Sem ser tão limitado, agentes anti- rosácea/anti-telangiectasia incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem metronidazol, vasoconstritores, peróxido de benzoíla, ácido azeláico, enxofre, proteínas de soja e glicosaminoglicanos. Ele também inclui qualquer combinação destes.

[0073] Sem ser tão limitado, agentes anti-seborréia incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem os derivados de progesterona, isoleutrol e hinokitiol Ele também inclui qualquer combinação destes produtos.

[0074] Sem ser tão limitado, os agentes de pele sensível incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem óleo de rosa e óleo de jasmim. Eles também incluem uma combinação destes.

[0075] Sem ser tão limitado, agentes de limpeza incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem lauril sulfato de amônio, laureth sulfato de amônio, MEA cocamide, lauril sulfato de trietanolamina, estearato de sódio e extrato de folhas de urtiga. Eles também incluem uma combinação destes.

[0076] Sem ser tão limitado, os agentes da síntese de colágeno incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem o ácido retinóico e seus derivados (retinol, retinaldeído, palmitato de retinila, ácido trans-retinóico, ácido 13-cis- retinóico, ácido 9-cis-retinóico, retinoil glicuronóides, tretinoína, isotretinoína, etretinato, tazaroteno, acitretina, adapaleno , β-caroteno, éster retinpilico), vitamina C e seus derivados (palmitato de ascorbila, fosfato de ascorbila magnésio, fosfato de ascorbila sódico), fatores de crescimento e seus derivados. Eles também incluem qualquer combinação destes.

[0077] Sem ser tão limitado, agentes esfoliantes incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem alfa/beta- hidroxiácidos, ácido salicílico, ácido glicólico, ácido lático, ácido cítrico e pó de casca de noz. Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0078] Sem ser tão limitado, os agentes de peeling facial incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem ácido glicólico, ácido lático, ácido tricloroacético e fenol. Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0079] Sem ser tão limitado, agentes de fixação/esticamento incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem dimetilaminoetanol, ativos neurocosméticos (tipo Botox™), quitosana, extrato de arnica, óleo de funcho doce e extrato de papaya. Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0080] Sem ser tão limitado, agentes sequestradores de radicais livres/antipoluição/antiestresse incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem o extrato de semente de uva, alfa-tocoferol e os ésteres seus, superóxido dismutase, alguns agentes quelantes de metais, vitamina C e seus derivados (palmitato de ascorbila, ascorbilfosfato de magnésio, fosfato de ascorbila sódico). Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0081] Sem ser tão limitado, os agentes do cuidado de cabelo incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem poli- D-glicosamina, poli-N-acetil-D-glicosamina, cloreto de estearalcônio e laurilsulfato de trietanolamina. Isto também inclui uma combinação destes.

[0082] Sem ser tão limitado, agentes inibidores da matriz de metaloproteinase incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem extrato de Camellia sinensis, polifenóis, extrato de spatholobi caulis, extrato de euonymus alatus, extrato de rhizoma notopterygii, quercetina, glicosaminoglicanos, polimetoxiflavonóides, N- acetilcisteína, 2-furildioxima, isoflavona, vitamina C e seus derivados (palmitato de ascorbila, fosfato de ascorbil magnésio, fosfato de ascorbil sódico), ácido retinóico e seus derivados (retinol, retinaldeído, palmitato de retinol, ácido trans-retinóico, ácido 13-cis-retinóico, ácido 9-cis- retinóico, retinoil glicuronóides, tretinoína, isotretinoína, etretinato, acitretina, tazaroteno, adapaleno, β-caroteno, éster de retinila) e derivados de hidroxamato. Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0083] Sem ser tão limitado, agentes umidificantes incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem extrato de pepino, 2- pirrolidonacarboxilato de sódio, PCA sódico, hialuronato de sódio, quitina e seus derivados, alfa-hidroxiácidos, ácido hialurônico e proteína do trigo hidrolisada. Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0084] Sem ser tão limitado, agentes osmorreguladores incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, estes agentes incluem manitol, dulcitol e betaína.

[0085] Sem ser tão limitado, agentes de protecção incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem poli-N-acetil-D- glicosamina, poli-D-glicosamina, alquiloamidas, quitosana, extrato de crisantélio índico, extrato de camellia sinensis e extrato de fermento de alteromonas Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0086] Sem ser tão limitado, os agentes de rejuvenescimento incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem extrato de alecrim, extrato de pau-rosa, extrato de gerânio e vitamina E e seus derivados (α-tocoferol, δ-tocoferol, y- tocoferol). Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0087] Sem ser tão limitado, agentes de reparação da pele incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem o ácido retinóico e seus derivados (retinol, retinaldeído, palmitato de retinila, ácido trans-retinóico, ácido 13-cis- retinóico, ácido 9-cis-retinóico, retinoil glicuronóides, tretinoína, isotretinoína, etretinato, tazaroteno, acitretina, adapaleno , β-caroteno, éster retinílico), alantoína, extrato de eucalipto, óleo de lavanda, óleo de rosa e ativadores da síntese de colágeno e ativadores de componentes da matriz extracelular da pele. Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0088] Sem ser tão limitado, agents de emagrecimento/ anticelulite incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem Extrato de crisantélio índico, diidromiricetina, teobromina, teofilina, aminofilina, cafeína, cloridrato de isopropilarterenol, epinefrina, agonistas α-MSH, ativadores da adenilato ciclase e inibidores da fosfodiesterase. Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0089] Sem ser tão limitado, agentes de cuidados com o sol/fotoenvelhecimento incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem PABA (ácido p-aminobenzóico) e derivados, gliconolactona, salicilatos, cinamatos, benzofenonas, dibenzoilmetanos, oxibenzone, vitamina E e seus derivados (α-tocoferol, δ-tocoferol, y-tocopherol), cloreto de etilbisiminometilguaiacol manganês, glicosaminoglicanos, ácido retinóico e seus derivados (retinol, retinaldeído, palmitato de retinila, ácido trans-retinóico, ácido 13-cis- retinóico, ácido 9-cis-retinóico, retinoil glicuronóides, tretinoína, isotretinoína, etretinato, tazaroteno, acitretina, adapaleno , β-caroteno, éster retinila), dióxido de titânio, metoxicinamato de octila, benzofenona, salicilato de octila, extrato de epilobium angustifolium, extrato de Rumex occidentalis, extrato de crisantélio índico, extrato de camellia sinensis e extrato de fermento de alteromonas. Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0090] Sem ser tão limitado, agentes estimuladores de bronzeamento artificial/melanogênese incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem diidroxiacetona, agonistas α-MSH, ativadores da adenilato ciclase e inibidores da fosfodiesterase. Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0091] Sem ser tão limitado, agentes de tonificação incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem extrato de urtiga, extrato de flor de laranjeira, extrato de pau-rosa e extrato de hamamélis. Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0092] Sem ser tão limitado, agentes de branqueamento/pigmentação incluem extratos de plantas, extratos de algas, extratos de frutas, extratos vegetais, extratos de plantas leguminosas, fermentos, hidrolisados proteolíticos, peptídeos, extratos de levedura e seus derivados, extratos de microrganismos, extratos derivados de animais e compostos sintéticos. Mais particularmente, tais agentes incluem arbutina, ácido azealeico, vitamina C e seus derivados (palmitato de ascorbila, fosfato de ascorbil magnésio, fosfato de ascorbil sódico), hidroquinona, N- acetil-4-S-cisteanimilfenol, melanostat (melanostatina), ácido kojic, tretinoína, ácido retinóico e seus derivados (retinol, retinaldeído, palmitato de retinila, ácido trans- retinóico, ácido 13-cis-retinóico, ácido 9-cis-retinóico, retinoil glicuronóides, tretinoína, isotretinoína, etretinato, acitretina, tazaroteno, adapaleno, β-caroteno, éster retinílico), extrato de ruminex ocidentais, alcaçuz, amora, arctostaphylos uva-ursi (uva ursina), inibidores da tirosinase, inibidores da transferência de melanossomos e sequestradores de melanina. Isto também inclui qualquer combinação destes.

[0093] Em uma modalidade, a composição da presente invenção compreende ainda um carreador, veículo, excipiente ou aditivos farmaceuticamente aceitáveis (isto é, carreador, veículo, excipiente ou aditivos topicamente/cosmeticamente aceitáveis). Tal carreador, veículo, excipiente ou aditivos são bem conhecidos na técnica e podem ser usados, por exemplo, para melhorar a formulação final em termos de propriedades organolépticas, penetração na pele e acessibilidade do ingrediente ativo. Exemplos de carreadores, veículos ou excipientes incluem: agente tamponante, agente carreador, agente quelante, agente condicionador, agente corante, agente antiaderente, agente emoliente, agente emulsificante, agente formador de filme, agente espumante, agente umectante, agente de lactilato, agente lipofílico, agente lubrificante, agente neutralizador, agente oleoso, agente opacificador, agente conservante, agente solubilizante, agente solvente, agente estabilizante, agente tensoativo, agente espessante, agente de viscosidade, agente absorvente de água, agente umectante, perfume e água térmica. Isto também inclui uma combinação destes.

[0094] A composição da presente invenção pode ser formulada de modo a fonrecer um sistema de distribuição especificamente controlado. Exemplos não-limitativos de tais sistemas de distribuição incluem sistemas de distribuição lenta, sistemas de distribuição rápida, sistemas de distribuição imediata, sistema de distribuição prolongada, sistemas de distribuição de ordem zero e sistemas de distribuição de velocidade dupla ou múltipla. Tais sistemas de distribuição controlada podem ser obtidos com formulações específicas, incluindo sistemas de distribuição química, emulsões múltiplas, microemulsões, nanoemulsões, encapsulamentos como lipossomas, microesferas, nanoesferas, microesponjas, pérolas e ciclodextrinas, matrizes poliméricas, conjugados cosméticos poliméricos, corpo oleoso/oleosina, filme molecular solúvel em óleo, emplastros epidérmicos, dosagens unitárias.

[0095] Sem ser tão limitado, agentes tamponantes são sais de bases/ácidos, compatíveis com a natureza da pele e com seu pH. Acetato de sódio é um exemplo de um agente tampão frequentemente usado.

[0096] Sem ser tão limitado, agentes carreadores são os ingredientes capazes de auxiliar a aplicação do ingrediente ativo. Isoexadecano é um exemplo de um carreador freqüentemente usado.

[0097] Sem ser tão limitado, agentes quelantes são ingredientes capazes de se ligar a cátions mono e divalentes, tais como EDTA, EDTA trissódico, EDTA tetrassódico, EDTA dissódico ou uma combinação dos mesmos.

[0098] Sem ser tão limitado, agentes condicionadores são ingredientes com ação lubrificante e efeito hidratante, como o cloreto de cetrimônio, cloreto de dicetildimônio, trideceth-12, quatérnio-Z7, quatérnio-18, poliquatérnio-10, metossulfato de beentrimônio, álcool cetearílico, estearamidopropil trimetilsililamodimeticona dimetilamina, isolauret-6, octoxinol-4, dimeticona, dimeticonol, ciclopentassiloxano, paret-7, paret-9, ácido linoleico e glicerina, ou uma combinação destes.

[0099] Sem ser tão limitado, agentes anti-aderentes são ingredientes capazes de adsorver em materiais pegajosos e reduzir a sua tendência a aderir, como ciclopentassiloxano, dimeticona e vinil dimeticona, fenil trimeticona, ésteres isopropílicos, ésteres do isostearato, dimetil sebacato e dipropil sebacato, ou uma combinação destes.

[0100] Sem ser tão limitado, agentes emolientes são ingredientes com ação lubrificante e efeito hidratante, como palmitato de isopropila, óleo de semente de girassol, óleo mineral, estearato estearílico, miristato de isopropila, lanolina, triglicerídeo cáprico, caprílico, ciclopentassiloxano, dimeticona, vinil dimeticona, bis- fenilpropil dimeticona, alquildimeticona, estearato de sorbitano, diestearato de sacarose, álcool miristílico, lactato de miristila, acetato de cetila, éter dicaprilílico, floraester-20, óleo de soja maleado, ciclometicona, manteiga de karité, óleo de coco hidrogenado, palmitato de isopropila, diisoestearoil trimetilpropano silóxi silicato e benzoato de alquila, ou uma combinação dos mesmos.

[0101] Sem ser tão limitado, agentes emulsionantes são ingredientes capazes de prevenir a separação de substâncias imiscíveis em uma emulsão, de ajudar a distribuir uniformemente uma substância em outra, de melhorar a textura, homogeneidade, consistência e estabilidade, como o álcool cetearílico, estearato de glicerila, polímero reticulado de acrilato de alquila, ácido esteárico, cera emulsificante, oleato de sorbitano, estearato de sorbitano, polissorbato, polietileno glicopolissorbato, trietanolamina, ciclopentassiloxano, dimeticona copoliol, PEG-30 dipoliidroxiestearato, diestearato de sacarose, PEG-100 estearato, dioctilsulfossuccinato de sódio, poliacrilamida, isoparafina, lauret-7, fosfato cetílico, DEA cetil fosfato, estearato de glicol, álcool estearílico, álcool cetílico, metossulfato de beentrimônio e cetearet-2, ou uma combinação destes.

[0102] Sem ser tão limitado, agentes formadores de filmes são ingredientes capazes de formar um filme dimensionalmente estável e contínuo para minimizar a pegajosidade da fórmula, como proteína do trigo, copolímero eicoseno, éter perfluormetilisopropil, diisoestearoil trimetilolpropano silóxi silicato, trimetilsiloxissilicato, dimeticona, vinildimeticona e ciclopentassiloxano, ou uma combinação destes.

[0103] Sem ser tão limitado, agentes espumantes são ingredientes capazes de regular a quantidade de ar em um produto, como DEA lauramida e MEA cocamida, lauret sulfossuccinato dissódico, N-octadecil sulfossuccinamato dissódico, lauril sulfato de amônio, lauril sulfato de trietanolamina, lauril sulfato de sódio e 2-etilexilsulfato de sódio, ou uma combinação destes.

[0104] Sem ser tão limitado, agentes umectantes são ingredientes capazes de manter a umidade constante e de reter umidade, como glicerina, PEG-8, butileno glicol e propileno glicol, ou uma combinação destes.

[0105] Sem ser tão limitado, agentes lubrificantes são ingredientes capazes de acrescentar a propriedade de ser escorregadio e reduzir o atrito para melhorar a aplicação, tais como dimeticona e copoliol dimeticona, ou uma combinação dos mesmos.

[0106] Sem ser tão limitado, agentes neutralizantes são ingredientes capazes de alterar o equilíbrio ácido-base, como trietanolamina e hidróxido de sódio, ou uma combinação desses.

[0107] Sem ser tão limitado, agentes opacificantes são ingredientes capazes de mudar a aparência de um produto transparente ou translúcido para um mais cremoso ou perolado, tal como estearato de glicerila e estearato PEG-100, ou uma combinação dos mesmos.

[0108] Sem ser tão limitado, agentes conservantes são ingredientes capazes de retardar ou prevenir o estrago microbiológico ou químico e proteger contra a descoloração, como DMDM hidantoína, metilparabeno, propilparabeno, fenoxietanol, etilparabeno, butilparabeno, Imidazolinidil uréia, diazolidinyl uréia, quatérnio-8, quatérnio-14, quatérnio-15, propilenoglicol, ácido desidroacético, metilcloroisotiazolinona, metilisotiazolinona e germaben, ou uma combinação destes.

[0109] Sem ser tão limitado, agentes solubilizantes são ingredientes capazes de permitir que ingredientes incompatíveis se tornem parte de uma solução homogênea, como polissorbato cetearet, estearet e PEG, ou uma combinação destes.

[0110] Sem ser tão limitado, agentes estabilizantes são ingredientes capazes de manter as propriedades físicas e químicas durante e após o processamento, prevenir ou limitar as alterações nas propriedades físicas de uma substância durante a vida útil do produto, tais como polietileno, cloreto de sódio, álcool estearílico, goma xantana, EDTA tetrassódico e dimeticona copoliol, ou uma combinação destes.

[0111] Sem ser tão limitado, agentes tensoativos são ingredientes capazes de reduzir a tensão superficial quando dissolvidos em água ou em solução aquosa, reduzindo a tensão interfacial entre dois líquidos ou entre um líquido e um sólido, como dioctilsulfossuccinato sódico, octoxinol-40, isolauret-6, lauril sulfato de amônio, álcool laurílico, lauramida DEA e cocamidopropil betaína, ou uma combinação destes.

[0112] Sem ser tão limitado, agentes espessantes são ingredientes capazes de absorver água para encorpar, melhorar a consistência ou textura e estabilizar uma emulsão, como o ácido esteárico, silicato de alumínio e magnésio, carbômero (incluindo carbômero de sódio e carbômero de potássio), polímero reticulado de acrilato de alquila, poliacrilamida, isoparafina, lauret-7, álcool cetílico, goma xantana, alquil dimeticona, hidroxietilcelulose, estearato de glicerila, tetraestearato de pentaeritritila, álcool estearílico e poliquatérnio-10, ou uma combinação dos mesmos.

[0113] Sem ser tão limitado, agentes de viscosidade são ingredientes capazes de controlar o grau de fluidez e a resistência interna ao fluxo exibido por um fluido, como silicato de alumínio e magnésio, caprilil glicol e álcool miristílico, ou uma combinação destes.

[0114] Sem ser tão limitado, agentes absorventes de água são ingredientes capazes de absorver a água do produto para manter a umidade, tal como polímero carboxivinílico, poliacrilamida, polissacarídeos, gomas naturais, argila, argila modificada, sal metálico, ácido graxo, ou uma combinação destes.

[0115] Sem ser tão limitado, agentes umectantes são ingredientes capazes de reduzir a tensão superficial da água para melhorar a penetração ou espalhamento sobre a superfície, como caprilato, caprilil glicol, caprato de glicerila, caprato de poliglicerila 2, poligliceril-6, laurato de poliglicerila 3 e TEA-lauret sulfato, ou uma combinação dos mesmos.

[0116] Os exopolissacarídeos ou composições da presente invenção podem ser empacotados de qualquer forma adequada, incluindo mas sem se limitar, a uma jarra, uma garrafa, um tubo, um bastão, uma aplicador tipo roller-ball, um dispositivo de pulverização de aerossol, etc. de maneira convencional. Os exopolissacarídeos ou composições da presente invenção poderiam ser empacotados como um kit de dois ou mais compartimentos separados, incluindo um contendo os ingredientes ativos e um segundo contendo um veículo topicamente/dermatologicamente aceitável, que podem ser misturados entre si em algum ponto do tempo fixo antes da aplicação. Por exemplo, os ingredientes ativos, na forma de um creme, um pó, um comprimido, uma cápsula ou um líquido, podem estar contidos em pacotes fechados, de uso único, que podem ser abertos e misturados com o veículo topicamente aceitável, que também pode ser armazenado na forma pré-medida em pacotes fechados, de uso único. Alternativamente, os ingredientes ativos e o veículo topicamente aceitável pode ser fornecido em quantidades maiores a partir do que a quantidade necessária pode ser retirada utilizando vários dispositivos de medição, tais como copo ou colher medidora para sólidos, ou um frasco calibrado ou conta-gotas para os líquidos. Os exopolissacarídeos ou composições da presente invenção pode ser espalhado em um substrato e a seguir posteriormente embalados. Substratos adequados incluem curativos, incluindo curativos de filme e bandagens. Em uma modalidade, o kit ou pacote pode compreender instruções para uso/aplicação, por exemplo, instruções para prevenir ou reduzir uma doença de pele ou um sinal de envelhecimento da pele.

[0117] Em outro aspecto, a presente invenção fornece o uso (por exemplo, uso cosmético ou terapêutico) de exopolissacarídeos para prevenir ou reduzir um sinal de envelhecimento da pele ou outra condição da pele em um indivíduo.

[0118] Em outro aspecto, a presente invenção fornece o uso (por exemplo, uso cosmético ou terapêutico) de exopolissacarídeos para prevenir ou reduzir um sinal de envelhecimento da pele. Sem ser tão limitado, como aqui utilizado, os termos "sinal de envelhecimento da pele" refere-se a rugas, linhas finas, perda de firmeza e elasticidade da pele, perda de textura, desidratação, assim como o enfraquecimento do mecanismo de defesa da pele, inflamação, danos causados pelo sol (particularmente estresse oxidativo induzido poe radiação UV), vermelhidão, telangiectasia, flacidez da pele, o excesso de oleosidade, poros dilatados, círculos escuros, perda de firmeza da pele, manchas marrons, manchas da idade, pele hiperpigmentada, aumento da espessura da pele, manchas, perda de elasticidade da pele e do conteúdo de colágeno, pele seca, lentigos, melasmas, pele sem brilho, bolsas debaixo dos olhos, distúrbio da produção de sebo, perda de conforto da pele e desvitalização da pele (atividade metabólica reduzida), ou qualquer combinação destes.

[0119] Conforme aqui utilizados, os termos “redução” na expressão "redução dos sinais de envelhecimento da pele” ou “redução da condição ou distúrbio da pele”refere-se a uma redução de um sinal de envelhecimento da pele pré-existente, ou doença ou distúrbio da pele, respectivamente. Ele abrange a correção/tratamento completo ou parcial do sinal de envelhecimento ou doença ou distúrbio da pele, respectivamente. Conforme aqui utilizado, o termo “prevenção” na expressão “prevenção do sinal de envelhecimento da pele” ou "prevenção da doença ou distúrbio da pele” destina-se a se referir a um atraso na iniciação de, ou prevenção completa ou parcial de um sinal de envelhecimento da pele, ou doença ou distúrbio da pele, respectivamente.

[0120] Conforme aqui utilizados, os termos “originário de uma matriz microbiana”, como se relaciona a um EPS é tencionado a se referir à origem do microrganismo secretando o EPS. Um EPS secretado por uma linhagem de microrganismos cultivados in vitro de uma cepa isolada originalmente de uma matriz microbiana também é englobado pelos termos “originários de uma matriz microbiana”. Da mesma forma, os termos “microrganismo isolados de uma matriz microbiana” abrange uma cepa de microrganismos cultivados in vitro de uma cepa originalmente isolada de uma matriz microbiana. Isto também inclui microrganismos recombinantes que contêm o gene que codifica o EPS.

[0121] Em outro aspecto, a presente invenção refere- se ao uso de exopolissacarídeos para melhorar a consistência da pele por atrito de células, descamação e melhoria da estrutura das fibras de colágeno.

[0122] Em outro aspecto, a presente invenção refere- se ao uso de exopolissacarídeos para melhorar a morfologia do estrato córneo.

[0123] Em outro aspecto, a presente invenção refere- se ao uso de exopolissacarídeos para melhorar a descamação.

[0124] Em outro aspecto, a presente invenção refere- se ao uso de exopolissacarídeos para a redução da aderência de bactérias na superfície da pele.

[0125] Em outro aspecto, a presente invenção refere- se ao uso de exopolissacarídeos para melhorar a hidratação.

[0126] Em outro aspecto, a presente invenção refere- se ao uso de exopolissacarídeos para melhorar o microrrelevo da pele.

[0127] Em outro aspecto, a presente invenção refere- se ao uso de exopolissacarídeos para estimular a produção de ácido hialurônico pelos fibroblastos humanos senescentes.

[0128] Em outro aspecto, a presente invenção refere- se ao uso de exopolissacarídeos para estimular a síntese de lipídeos totais da epiderme.

[0129] Em outro aspecto, a presente invenção refere- se ao uso (por exemplo, o uso cosmético) de exopolissacarídeos para estimular a expressão de genes envolvidos na função de descamação. Em uma outra modalidade, os genes acima mencionados são codificados para KLK5 (calicreína, enzima do estrato córneo), KLK6 (neurosina) e KLK7 (enzima quimiotrípsica do estrato córneo).

[0130] Em outro aspecto, a presente invenção refere- se ao uso (por exemplo, o uso cosmético) de exopolissacarídeos para estimular a expressão de genes envolvidos na diferenciação dos queratinócitos. Em uma outra modalidade, os genes acima mencionados são codificantes para a filagrina e a involucrina.

[0131] Em outro aspecto, a presente invenção refere- se ao uso (por exemplo, o uso cosmético) de exopolissacarídeos por estimular a expressão da transglutaminase.

[0132] Em outro aspecto, a presente invenção refere- se ao uso de exopolissacarídeos para a preparação de um medicamento para prevenir ou reduzir uma condição de pele ou sinal de envelhecimento da pele.

[0133] Em outro aspecto, a presente invenção fornece o uso de exopolissacarídeos para a preparação de um medicamento para melhorar a consistência da pele por atrito das células, descamação e melhoria da estrutura de fibras colágenas.

[0134] A condição da pele relacionada ao envelhecimento pode, em mais modalidades específicas, envolver as rugas, linhas finas, manchas da idade, danos causados pelo sol (principalmente estresse oxidativo induzido por radiação UV), manchas, pele hiperpigmentada, manchas da idade, espessura da pele aumentada, perda de da elasticidade da pele e do conteúdo de colágeno, pele seca, lentigos e/ou melasmas ou qualquer combinação destes.

[0135] O método de distribuição dos exopolissacarídeos ou composições da presente invenção pode variar, mas geralmente envolve a aplicação a uma área de pele sujeita a, ou afetada por um sinal de envelhecimento da pele, por exemplo, qualquer sinal de pele associado com, causado por ou afetado pelo envelhecimento intrínseco e/ou envelhecimento extrínseco.

[0136] Um creme, loção, gel, unguento, pasta ou similares podem ser espalhados na superfície afetada e suavemente esfregado. Uma solução pode ser aplicada da mesma maneira, porém mais tipicamente será aplicada com um conta- gotas, swab ou semelhantes, e cuidadosamente aplicado nas áreas afetadas.

[0137] O regime de aplicação dependerá de uma série de fatores que podem ser facilmente determinadas, como a severidade da condição e da sua resposta ao tratamento inicial, mas normalmente envolve uma ou mais aplicações por dia em uma base contínua. Uma pessoa versada na técnica pode facilmente determinar a quantidade ótima da formulação a ser administrada, metodologias de administração e taxas de repetição. Em geral, é contemplado que as formulações da invenção serão aplicadas na faixa de uma ou duas vezes por semana até uma ou duas vezes por dia. Deste modo, assim como aqui utilizado, os termos “quantidade eficaz”, como se referem a uma composição da presente invenção é uma quantidade que efetivamente previne ou reduz um sinal de envelhecimento da pele ou uma doença ou distúrbio da pele do indivíduo. Ele tipicamente constitui uma quantidade suficiente para cobrir a pele que deve ser tratada. A quantidade efetiva pode variar dependendo da forma de composição (por exemplo, gel, creme, soro, etc.) e o tipo de pele do indivíduo.

[0138] Em uma modalidade, o indivíduo mencionado acima é um mamífero. Em uma outra modalidade, o mamífero mencionado acima é um ser humano.

[0139] A presente invenção é ilustrada em maiores detalhes pelos seguintes exemplos não-limitantes.

EXEMPLO 1 EFEITO DE EPS NOS QUERATINÓCITOS HUMANOS (VIABILIDADE IN VITRO)

[0140] A avaliação da citotoxicidade de cada EPS foi realizada utilizando o ensaio MTT, a fim de determinar as concentrações que não são prejudiciais para os queratinócitos humanos (NHEK, 3a passagem).

[0141] O ensaio de proliferação de células MTT mede a taxa de proliferação celular e vice-versa, quando os eventos metabólicos levam à apoptose ou necrose, a redução da viabilidade celular O ensaio baseia-se na capacidade da desidrogenase mitocondrial reduzir o amarelo tetrazólio MTT (3-(4,5-dimetiltiazolil-2)-2,5-brometo de difeniltetrazólio), para gerar equivalentes redutores tais como NADH e NADPH. O formazano intracelular resultante roxo pode ser solubilizado e quantificado por meios espectrofotométricos. Os resultados são apresentados na Tabela IV abaixo.

[0142] Nenhuma alteração de viabilidade foi observada nas concentrações de polissacarídeos testadas neste ensaio.

EXEMPLO 2 EFEITO DE EPS NOS FIBROBLASTOS HUMANOS SENESCENTES (VIABILIDADE IN VITRO)

[0143] A avaliação da citotoxicidade de cada composto foi realizada através do ensaio MTT como descrito no exemplo 1 acima, a fim de determinar as concentrações que não sejam prejudiciais para fibroblastos humanos senescentes. Estas células senescentes foram obtidas pela subcultura de fibroblastos dérmicos normais e um fenótipo senescente foi obtido a partir da 12a passagem. A Tabela V abaixo fornece os resultados de viabilidade.

[0144] Nenhuma alteração de viabilidade foi observada nas concentrações de polissacarídeos testadas neste ensaio.

EXEMPLO 3 EFEITO DE EPS NA SÍNTESE DO ÁCIDO HIALURÔNICO POR FIBROBLASTOS HUMANOS SENESCENTES

[0145] Este estudo foi efetuado para avaliar os efeitos das EPSs sobre a síntese de ácido hialurônico por fibroblastos humanos senescentes. A síntese de ácido hialurônico é um marcador da atividade dos fibroblastos e este composto é um umectante natural da pele, pois possui propriedades higroscópicas. Estas células senescentes são obtidas pelas subculturas dos fibroblastos dérmicos normais e um fenótipo de senescência é obtido a partir da 12a passagem.

[0146] Análise de expressão gênica dos EPSs testados demonstrou uma diminuição da síntese de proteínas da matriz extracelular, uma diminuição na sensibilidade aos fatores de crescimento e aumento da síntese de metaloproteinases da matriz. Alguns compostos sem efeito direto sobre o crescimento celular têm sido demonstrados como estimulantes da proliferação de fibroblastos senescentes na presença do fator de crescimento epidérmico (EGF). Este efeito foi atribuído a um aumento da sensibilidade das células ao EGF. Com base nessa observação para EGF, uma situação semelhante poderia existir para outros fatores como TGFβ. TGFβ tem a capacidade de desencadear a síntese de HA. Entretanto, tem- se observado que as células mais velhas tornam-se insensíveis à TGFβ. Dois tipos de efeitos da EPSS, foram deste modo testados: os seus efeitos diretos sobre a produção de HA e suas possibilidades de restaurar a sensibilidade das células ao TGFβ.

[0147] Fibroblastos senescentes foram pré-cultivados por 24 horas até a confluência. Em seguida, o meio de cultura foi removido e substituído pelo meio de ensaio contendo ou não (controle), o EPSS testado sozinho, TGFβ sozinho ou a mistura de EPSS testado com TGFβ. As células foram então cultivadas por 72 horas. No final da incubação, a concentração de ácido hialurônico foi avaliada no sobrenadante por um ensaio ELISA padrão de acordo com os procedimentos do fabricante (R&D Systems DY3614) e a viabilidade celular foi avaliada por meio de um ensaio de incorporação padrão de MTT. Os resultados são apresentados na Tabela Vl abaixo.

[0148] O TGFβ a 10 ng/mL claramente e significativamente aumentou a síntese de ácido hialurônico (4 vezes).

[0149] O composto Pol-3 sem TGFβ aumentou significativamente, com uma resposta de dose, a produção de ácido hialurônico (HA). O composto Pol-2 apresenta os mesmos efeitos que o produto Pol-3, mas com uma atividade mais fraca.

[0150] Os compostos Pol-5, Pol-7, Pol-8 e Pol-9 não têm qualquer efeito sobre a produção de HA basal, mas diminui significativamente o efeito estimulante do TGFβ na produção de HA.

[0151] Os resultados obtidos com os produtos Pol-5, Pol-7, Pol-8 e Pol-9 sugerem uma ligação com o receptor, mas com um efeito antagônico, porque eles diminuem a resposta ao TGFβ.

EXEMPLO 4 EFEITO DA EPSS NA PRODUÇÃO DE PERÓXIDOS LIPÍDICOS EM CULTURA DE CÉLULAS HUMANAS EXPOSTAS À RADIAÇÃO UV

[0152] Este estudo foi realizado para avaliar o efeito de EPSS da invenção na quantificação relativa da quantidade de peróxidos lipídicos (LP) (degradação de lipídeos da pele) em células humanas expostas ou não à radiação UVA + UVB. A avaliação foi obtida usando uma sonda fluorescente específica e análise de citometria de fluxo fluorescente. Este método oferece uma grande sensibilidade porque a fluorescência de cada célula é medida e várias células são avaliadas (10000 células por condição experimental).

[0153] Os queratinócitos foram pré-cultivados em meio SFM completo até 100% de confluência. O meio de cultura foi então substituído por meio de ensaio contendo ou não os EPSS testados ou a referência e as células foram incubadas a 37 °C e 5% de CO2 por 24 horas. Após a incubação, uma sonda específica, análogo fluorescente dos lipídeos (Flúor C11) e o EPS testado ou as referências foram incorporadas e as células foram incubadas a 37 ° C e 5% de CO2 por 45 minutos. A sonda foi então eliminada por rinsagem com meio de cultura. O meio de lavagem foi substituído com meio de cultura contendo os EPSs testados ou as referências. Os controles não-tratados foram realizados em paralelo. As células foram irradiadas a 210 mJ/cm2 de UVB. Os controles não-irradiados foram realizados em paralelo. Após a irradiação, as células foram incubadas por 1h a 37 °C e 5% de CO2, em seguida, lavadas com PBS e tripsinadas. Os parâmetros de fluorescência foram medidos por citometria de fluxo com um citômetro FACSArray™ direcionado pelo software do sistema FACSArray™ (Becton-Dickinson), em 10000 células individuais (sem seleção da população celular). Neste ensaio, a sonda fluorescente Flúor-C11 inserida em células de membrana, diminuiu na oxidação. Os resultados estão apresentados na Tabela VII abaixo.

[0154] A irradiação aumentou significativamente a quantidade de peróxidos lipídicos intracelulares (7 vezes) A referência BHA a 50 mM reduziu a quantidade de peróxidos lipídicos intracelulares das células irradiadas (76% de proteção) Este resultado foi esperado e validou o ensaio.

[0155] O composto Pol-5 tem uma tendência a reduzir a quantidade de peróxidos lipídicos intracelulares de células irradiadas.

EXEMPLO 5 EFEITOS DA EPSS NA EXPRESSÃO DE GENES QUE CODIFICAM PROTEASES ENVOLVIDAS NA DESCAMAÇÃO E MARCADORES DE DIFERENCIAÇÃO EM CULTURAS DE QUERATINÓCITOS HUMANOS

[0156] Este ensaio foi realizado a fim de medir os efeitos das EPSs na indução de RNAm que codifica proteínas de diferenciação (filagrina, loricrina, involucrina) e para a enzima tríptica do estrato córneo envolvida na descamação (calicreína 5, 6 e 7) A expressão relativa dos marcadores selecionados foi avaliada utilizando a tecnologia de “reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real” (RT- QPCR).

[0157] Os queratinócitos foram pré-cultivados em meio de cultura. Na confluência, o meio de cultura foi mudado no meio de ensaio (SFM sem EGF e extrato pituitário), contendo ou não (controle), o composto de teste e as células foram incubadas por 24 horas a 37 °C e 5% de CO2. No final do experimento, as células foram lavadas em tampão PBS e imediatamente congeladas a -80 °C, com 300 μL por poço de reagente Tri.

[0158] Duplas de iniciadores permitindo a amplificação de um produto das Reações em Cadeia da Polimerase (PCR) de cada marcador selecionados foram utilizadas: gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase do fígado (G3PDH) foi utilizado como um marcador de referência neste experimento. A extração de RNA total foi realizada pelo reagente Tri™ de acordo com o protocolo. A eliminação do DNA contaminante foi realizada pelo tratamento com DNAse usando o “DNA-livre” do sistema; A transcrição reversa do RNAm na presença de oligo (dT) e a transcriptase reversa Superscript Il foi então realizada.

[0159] Inicialmente, a modulação da expressão gênica foi avaliada em seis EPSs na primeira concentração (Tabela VIII). Numa segunda etapa, ela foi avaliada em quatro EPSs em três concentrações (Tabela IX).

[0160] O ácido retinóico apresentou um perfil de diferenciação reverso. . CaCl2 apresentou um perfil pró- diferenciação. Esses resultados eram esperados e validaram o ensaio.

[0161] Pol-6 mostrou um forte aumento dos genes que codificam a descamação e diferenciação. Este exopolissacarídeo induz a diferenciação dos queratinócitos das células em corneócitos (efeito pró-diferenciação).

[0162] A segunda série de testes mostrou que Pol-3 apresenta um perfil pró-diferenciação.

EXEMPLO 6 EFEITOS DA EPSS NA SÍNTESE LIPÍDICA EPIDERMICA

[0163] Avaliação da síntese de fosfolipídeos e lipídeos neutros na epiderme reconstruída

[0164] Este estudo foi realizado para avaliar o efeito de EPSS da invenção sobre a síntese lipídica. Fosfolipídeos (membranas celulares) e lipídeos neutros (incluindo lipídeos específicos da epiderme) foram medidos separadamente, utilizando cromatografia em camada delgada. Epiderme humana reconstruída SkinEthic™ foi utilizada para o modelo, sua composição sendo próxima ao epiderme humana normal.

[0165] Os tecidos epidérmicos foram colocados em placas de 24 poços, e cultivados por 12h em meio SkinEthic™. O meio foi então substituído por meio fresco e os EPSS testados foram aplicados na superfície da epiderme (tratamento tópico), nas concentrações indicadas. Três epidermes controle foram não-tratadas e três epidermes de referência foram tratadas com o ácido retinóico, um estimulante conhecido dos lipídeos da pele total, no meio de cultura (tratamento sistêmico). Todos os tratamentos foram realizados em triplicata e cultivados por 72 horas no total. Após 24h de tratamento, o meio de cultura foi substituído por meio de marcação (0,225 μCi/poços de acetato [14C]) e as epidermes foram tratadas A rotulagem foi realizada durante um período de incubação de 48 horas. O marcador radioativo utilizado foi sal de sódio de ácido acético [2-14C], Amersham CFA14 (2,04 GBq/mmol, 55 mCi/mmol). As epidermes foram lavados em solução PBS e foram dissociadas. A seguir, as células foram lisadas por tratamento com ácido perclórico a 0,5 M em gelo. Os lipídeos foram extraídos com metanol/clorofórmio (2:1) e a separação de fases foi realizada por adição de PBS e clorofórmio após a neutralização de acordo com o procedimento descrito por Bligh e Dyer. A radioatividade foi quantificada por incorporação nos (lipídeos) da fase orgânica com cintilação líquida (LKB 1210 Rackbeta) após a evaporação do clorofórmio. As fases orgânicas foram secas sob nitrogênio e cromatografia em camada delgada (CCD, placas Merck K60) foi realizada por meio de dois sistemas de solventes: clorofórmio/metanol/água para Fosfolipídeos (50:18:2,6) ou hexano/éter/ácido acético para lipídeos neutros (15:5,6:0,19). Os metabólitos foram quantificados através da realização de uma contagem direta da radioatividade dos vários pontos em placas de CCD com Phosphorlmager Cyclone™ e o software Multigauge (Fujifilm). Os resultados são apresentados na Tabela X abaixo.

Síntese de lipídeos: Lipídeos totais (TL) Colesterol (C) Ácidos graxos livres (FFA) Ácidos graxos esterificados (EFA) Esfingomielina (SM) Fosfolipídeos (PL) Sulfato de colesterol (CSO4) Ceramidas e cerebrosídeos (Cera/Cere)

[0166] A incorporação basal de acetato 14C em lipídeos epidérmicos era forte, revelando que o metabolismo dos queratinócitos da epiderme foi normal.

[0167] O ácido retinóico de referência aumentou significativamente a síntese de lipídeos totais (175% do controle) conforme esperado

[0168] Os EPSs Pol-3, Pol-4, Pol-5, Pol-6, Pol-7 e Pol-8 aumentaram significativamente a síntese de lipídeos totais (165%, 176%, 157%, 183%, 174% e 159% do controle, respectivamente). Os compostos Pol-1, Pol-2 e Pol-9, contudo, não modificaram significativamente a síntese de lipídeos totais.

EXEMPLO 7 EFEITO DE EPSS NA ADESÃO DE STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS E STAPHYLOCOCCUS AUREUS NA SUPERFÍCIE DA PELE HUMANA

[0169] Este estudo foi realizado para avaliar a atividade dos EPSs na adesão da bactéria marcada com biotina (Staphylococcus epidermidis e S. aureus) na superfície da pele humana.

[0170] Pedaços de pele humana (4 cm x 4 cm) foram preparados a partir de uma biópsia abdominal removida de um indivíduo saudável durante a cirurgia redutora cosmética.

[0171] S. epidermidis e S. aureus, as cepas de bactérias utilizadas neste experimento, têm as propriedades de aderir a qualquer tipo de suporte conforme foi demonstrado em biomateriais, cateteres e nas várias células. As bactérias foram semeadas em meio LB-ágar, em seguida, cultivadas a 37 °C em meio LB líquido até a fase semi-log (DO640 = 0,4). As bactérias foram então fixadas em etanol 70%, lavadas e marcadas com biotina. As bactérias purificadas parcialmente marcadas com biotina foram aliquotadas e congeladas a-80 °C antes de usar.

[0172] Uma placa de 96 poços foi preparada com a pele. EPSS testados foram aplicados por 1 hora. No final da incubação, os EPSS foram removidos e a pele foi colocada em contato com S. epidermidis ou com S. aureus. Após 2 horas de incubação em temperatura ambiente e 3 lavagens em PBS, guanidina 4 M foi adicionada em cada poço e deixada por 40 minutos em temperatura ambiente. O sobrenadante foi a seguir extraído e congelado a -80 °C.

[0173] Uma amostra de cada sobrenadante e cada bactéria foram transferidos em uma membrana de nitrocelulose (Hybond, ECL, Amersham), utilizando um dispositivo MilliBlot dotblot (Millipore). Todos os controles foram realizados para avaliar a especificidade da resposta final. Um controle de interferência com o sistema de detecção foi realizado através da transferência de meio de cultura ou compostos testados na membrana sem contato prévio com a bactéria ou a pele. Nenhuma interferência foi observada neste ensaio. Sítios não-específicos nas membranas foram saturados por 2 h a 37 °C, em um tampão de saturação PBS/0,05% de Tween 20/5% de leite desnatado (PBSTM). Depois de extensa lavagem em PBSTM, os sítios específicos antigênicos foram marcados com o conjugado estreptavidina-peroxidase de rábano silvestre diluído em PBSTM. Após extensiva lavagem em PBSTM, a atividade da peroxidase foi revelada utilizando o método de quimiluminescência ECL (quimiluminescência intensificada, Amersham) em filme Kodak™ MR. Os resultados são apresentados na Tabela Xl abaixo. TABELA Xl ADESÃO BACTERIANA DE S. EPIDERMIDIS

ADESÃO BACTERIANA DE S. AUREUS

[0174] A adesão bacteriana de S. epidermidis foi significativa e a amplitude do sinal foi satisfatória. Os compostos Pol-1 e Pol-5 diminuíram significativamente a adesão de S. epidermidis à pele (respectivamente 38% e 65% de inibição).

[0175] A adesão da bactéria S. aureus foi significativa e a amplitude do sinal foi satisfatória. Os compostos Pol-1 e Pol-5 diminuíram significativamente a adesão de S. aureus à pele (respectivamente 49% e 66% de inibição).

[0176] Em conclusão, os compostos Pol-1 e Pol-5 apresentam propriedades capazes de criar um filme ou máscara de proteção contra a adesão das bactérias S epidermidis e S. aureus na superfície da pele humana.

EXEMPLO 8 EFEITOS DE UMA FORMULAÇÃO DE CREME EPS NA ATIVIDADE ANTIPOLUIÇÃO

[0177] Este estudo foi realizado para avaliar a atividade antipoluição de um produto cosmético através de seu efeito contra os radicais livres na pele normal. Uma mistura de poluentes e metais pesados foi utilizada para simular os efeitos nocivos de uma poluição ambiental (como vapores, fumaça,...). Os explantes foram utilizados como um modelo de pele neste experimento como um bom modelo de pele humana.

[0178] Pedaços de pele humana (27 explantes) foram preparados a partir de uma biópsia abdominal removida de um indivíduo saudável (64 anos de idade) durante a cirurgia redutora cosmética. Eles foram colocados no meio BEM, a 37 ° C e 5% de CO2. O EPSs testados foram aplicados na superfície da epiderme (tratamento tópico) nas concentrações indicadas (2 mg por explante). Eles foram aplicados no primeiro dia (Dia 0) e após um, dois, três e quatro dias (dia 1, dia 2, dia 3 e dia 4).

[0179] No dia 4, 30 μL de uma mistura de metais pesados (Tabela XII) e de hidrocarbonetos foi aplicado em um disco de papel e imediatamente colocado em explantes identificados. TABELA XII

[0180] No Dia 0 e no Dia 5, 3 explantes de cada lote foram retirados e fixados em líquido de Bouin para observação morfológica. Após 48 horas em meio de Bouin, os explantes foram desidratados, embebidos em parafina e corados em Masson’s Trichrome O ensaio de MDA (malondialdeído, um produto estável a partir da alteração de radical) foi realizado em meio de cultura do Dia 3, 24h após a irradiação para quantificar a eficácia de produtos contra os radicais livres gerados pelos poluentes Os resultados são apresentados na Tabela XIII abaixo.

[0181] Explantes sem tratamento (T), Dia 5: o estrato córneo era espesso, ligeiramente laminado, claramente queratinizado na superfície e ligeiramente queratinizado em sua base. A paraqueratose foi moderada. A epiderme tinha de 4 a 5 camadas celulares com uma boa morfologia. O relevo da junção dermo-epidérmica estava claro. A derme papilar indicou fibras colágenas espessas formando uma malha mais ou menos compacta. Ver figura 1, painel superior esquerdo.

[0182] Explantes com poluentes (TP), dia 5: o estrato córneo era espesso, ligeiramente laminado, claramente queratinizado na superfície. A parequeratose foi moderada. A epiderme tinha 4-5 camadas de células com alterações profundas. Estas alterações foram caracterizadas pela presença de muitas células com núcleos picnóticos por toda a epiderme. O destacamento da junção dermo-epidérmica estava claro. Seu relevo era bastante claro. A derme papilar indicou fibras colágenas espessas formando uma malha não muito compacta. Ver a figura 1, painel inferior esquerdo.

[0183] Explantes com poluentes, tratados com Pol-5 (PP), Dia 5: o estrato córneo era espesso, ligeiramente laminado e claramente queratinizado na superfície. A paraqueratose foi moderada. A epiderme tinha 4 a 5 camadas celulares com algumas alterações. O destacamento da junção dermo-epidérmica foi leve. O relevo da junção dermo- epidérmica era bastante claro. A derme papilar indicou fibras colágenas espessas formando uma malha não muito compacta. Ver Figura 1, painel direito TABELA XIII

[0184] O controle de α-tocoferol reduziu a atividade dos poluentes validando o ensaio. Os resultados para Pol-5 indicaram atividade antipoluição potencial. EXEMPLO 9

EFEITO DE EPSS NA REESTRUTURAÇÃO DA BARREIRA DA PELE A PARTIR DE EXPLANTES DA PELE HUMANA

[0185] Este ensaio procurou demonstrar o efeito de reestruturação da barreira da pele dos EPSS testados. A atividade biológica foi avaliada pela perícia histológica da morfologia geral, e por imunomarcação da filagrina da membrana transglutaminase. Os níveis de expressão de filagrina e/ou transglutaminase superiores (por exemplo, em mais camadas celulares) são sinais de aumento da diferenciação de queratinócitos.

[0186] Explantes de pele humana foram obtidos de uma cirurgia plástica abdominal de uma mulher de 48 anos de idade A região foi desengordurada (deslipidadas) usando uma mistura de éter/acetona para aumentar a sensibilidade ao EPS testado e remover fatores externos potencialmente polarizando os resultados comparativo (por exemplo, espessura e conteúdo de gordura podem variar ao longo da amostra e introduzir os parâmetros polarizando os resultados entre os controles e o teste EPSS. Nesta região deslipidada, 24 explantes experimentais foram obtidos. Seis (6) explantes experimentais foram gerados a partir da seção não- desengordurada Todos os 30 explantes foram colocados em meio BEM e armazenados em um incubador a 37 °C e 5% de CO2. Este material foi dividido em 10 lotes de 3 explantes.

[0187] EPSs testados foram aplicados topicamente logo após a remoção de lipídeos em uma concentração de 4 mg por explante. O período de contato foi de 3 horas. No tempo T0 e 3 h, cada um dos 3 explantes do lote foi cortado em duas partes. A primeira parte foi fixada em meio Bouin regular para observação da morfologia geral. A segunda metade foi congelada e mantida em -8O °C para a imunomarcação específica de filagrina e membrana transglutaminase.

[0188] Após 48 horas de fixação em meio Bouin regular, as amostras foram dessecadas e impregnadas em parafina. Amostras congeladas foram fatiadas em fatias de 7 μm de espessura em criostato, e depois coladas em lâminas histológicas para rotulagem.

[0189] A observação da morfologia geral foi realizada com manchas de tricroma tipo Masson. A filagrina foi marcada em fatias congeladas no tempo T0 e 3h com o clone monoclonal anti-filagrina OKTB1, com um sistema de biotina/estreptavidina revelado em FITC com núcleo colorido com marcação com iodeto de propídio. Transglutaminase da membrana foi marcada em fatias congeladas no tempo T0 e t3h com a anti-transglutaminase, clone monoclonal BC1, com um sistema biotina / estreptavidina revelado em FITC com núcleo corado com marcação de iodeto de propídio. Filagrina Em T0, a filagrina foi ligeiramente expressa na base do estrato córneo com um número normal de camadas celulares em explantes não-deslipidados. A filagrina estava um pouco mais presente nos explantes deslipidados.

[0190] Como pode ser observado na Figura 2, às 3h, filagrina foi claramente expressa em explantes não-tratados e não-deslipidados. Como pode ser observado na Figura 3, filagrina foi ligeiramente expressa em explantes deslipidado e não-tratados. Um número moderado de camadas celulares pôde ser observado.

[0191] Após a aplicação de Pol-6 (Figura 4), Pol-3 e Pol-8 em explantes deslipidados, filagrina foi fortemente expressa em 11/12 (Pol-6) e 8/9 camadas celulares (pol-3 e 8), respectivamente.

[0192] Após a aplicação de uma mistura de Pol-6 e Pol-3 em explantes deslipidados, filagrina foi distintamente expressa em 8/9 camadas celulares (Figura 5).

[0193] Após a aplicação de uma mistura de Pol-6 e Pol-8 em explantes deslipidados, filagrina é distintamente expressa em 8/9 camadas celulares (figura 6).

Membrana transglutaminase

[0194] Em T0, transglutaminase foi muito pouco e erraticamente expressa em 3/4 camadas celulares na base do estrato córneo em explantes não-depilados e não-tratados e em explantes recém-deslipidados.

[0195] Em 3h, transglutaminase foi muito levemente expressa em explantes não-deslipidados e não-tratados (Figura 7) Transglutaminase não foi observada em explantes deslipidado e não-tratados. (Figura 8).

[0196] Para o tratamento com Pol-6 (Figura 9) e Pol- 3 em explantes deslipidados, a transglutaminase foi distintamente expressa em 5/6 camadas celulares.

[0197] Os resultados da imunomarcação da filagrina e da membrana transglutaminase (TGM) são apresentados na Tabela XIV abaixo. TABELA XIV

Ausente: - Baixo: + Moderado: ++ Límpido/Líquido: +++ Forte: ++++

[0198] Explantes deslipidados mostraram uma deterioração muito clara do estrato córneo, com uma morfologia semelhante em uma pele desidratada combinada com um prejuízo importante da aparência da derme (distúrbio das fibras de colágeno).

[0199] A observação da morfologia geral mostra que, após três horas de contato, EPS Pol-3 melhorou a morfologia do estrato córneo, o que resultaria em uma atividade umidificante superficial do estrato córneo. A mistura de Pol-3 e Pol-8 e a mistura de Pol-6 e Pol-8 melhorou a morfologia do estrato córneo (efeito umidificante).

[0200] EPS Pol-6 melhorou a estrutura da pele ao nível do estrato córneo e derme. Especificamente, a morfologia geral mostrou que, após três horas de contato com EPS Pol-6, o estrato córneo era fofo, indicando a renovação e descamação das células. As fibras de colágeno pareceram ser mais densas e organizadas.

[0201] A expressão de filagrina mostrou que todos os EPSs aplicados levaram a um aumento líquido (intensidade e número) de camadas celulares após 3 horas de contato.

[0202] A membrana de expressão da transglutaminase mostrou que o EPS Pol-6 e a mistura Pol-6 e Pol-8 induziram uma atividade de reestruturação da barreira cutânea. EXEMPLO 10

[0203] Teste Clínico de Hidratação e Propriedades de Reestruturação da Barreira Celular da Composição de Cuidados com a Pele Contendo Polissacarídeos

[0204] O objetivo deste ensaio foi avaliar objetivamente em um painel de 20 voluntários, a atividade de umidificação e a capacidade de reestruturação da barreira lipídica de um creme contendo EPSs, após 30 dias de uso. Esta atividade foi avaliada em comparação com um placebo. Ambas as formulações foram aplicadas usando um design de face dividida. Os voluntários foram recrutados na população de indivíduos com idades entre 30 e 50 anos com a pele propensa à secura. O efeito umidificante foi avaliado quantitativamente por marcação especial da descamação fisiológica, amostragem de superfície tipo D-squames®. O efeito de reestruturação foi avaliado através da análise do microrrelevo em amostras coladas de cianoacrilato e por fotografias.

[0205] Uma formulação de cuidados com a pele foi preparada contendo Pol-6 e Pol-3.

[0206] Avaliação quantitativa da hidratação por marcação especial (Diagnoskin™) com descamação fisiológica

[0207] A avaliação do nível de umidade cutânea pelo sistema DIAGNOSKIN™ foi feita através da quantificação de descamação fisiológica. 18 voluntários estiveram envolvidos na avaliação da formulação de ativo e 19 voluntários fizeram parte do grupo placebo.

[0208] Aplicação na pele de uma fita adesiva flexível, D-Squam™, amostraram as camadas superficiais dos corneócitos quando retirado. Avaliação desta descamação foi realizada utilizando um microscópio (objetiva de 25X, luz direta). Com base nestas observações, as amostras de pele foram classificadas de 1 a 12, 12 sendo o mais elevado nível possível de hidratação. A Figura 10 mostra três fotografias da morfologia da pele do mais hidratado ao menos hidratado.

[0209] Composição Ativa: Um aumento de 9,82% da qualidade de descamação após 30 dias da aplicação do creme ativo foi observado, como pode ser observado na Tabela XVI abaixo:

[0210] O aspecto morfológico das amostras revelou a textura da pele de uma pele muito mais hidratada, quando tratada com uma mistura de Pol-6 e Pol-3 por 30 dias. Na verdade, as placas de células e regiões espessas (indicando desidratação cutânea) observadas em T0, praticamente desapareceram após 30 dias de tratamento. Células individuais foram então observadas, sinônimo de uma pele mais hidratada. Ver Figura 11 para fotos antes e depois.

[0211] Placebo: uma redução de 7,14% da qualidade de descamação após 30 dias de aplicação do placebo foi observada como pode ser visto na tabela XVII abaixo.

[0212] O aspecto morfológico das amostras de voluntários com placebo aplicado mostrou uma deterioração importante da pele, com placas de células pequenas indicando um aumento da desidratação cutânea. Ver Figura 12 para fotos antes e depois.

[0213] O intervalo entre o placebo e o creme ativo (17%) mostra uma clara melhoria da descamação da pele, associada a uma maior taxa de diferenciação/descamação. Esta diferença é ilustrada na Figura 13. Uma renovação mais eficiente dos revestimentos superficiais da pele foi observada em conjunto com efeitos de enrijecimento e reestruturação responsáveis por uma pele mais bonita e uniforme. Avaliação quantitativa do efeito de reestruturação

[0214] A amostragem foi realizada em zigomas de 18 voluntários para o creme ativo e placebo. As amostras de superfície foram preparadas depositando uma gota de cola de cianoacrilato diretamente sobre a pele e aplicando-se imediatamente uma lâmina histológica limpa. A rápida polimerização (30 segundos) da cola de cianoacrilato permite tomar amostras de espessura homogênea da parte externa do estrato córneo (4 a 6 camadas de corneócitos) sem dor. A observação das amostras utilizando um microscópio (objetiva de 2,5X) com luz direta lateral permitiu uma avaliação levando-se em consideração os parâmetros do microrrelevo (linhas primárias, linhas secundárias, polígonos...).

[0215] Composição de ativos: uma melhora de microrrelevo de 9,09% foi observada após 30 dias da aplicação do creme ativo como pode ser observado na Tabela XVIII abaixo.

[0216] Observações microscópicas das peles não- tratadas e tratadas colocaram em contraste as diferenças nos parâmetros do microrrelevo. Voluntários tratados durante 30 dias com o creme ativo, apresentaram uma perfeita organização e estrutura da pele, com o cruzamento de linhas primárias e secundárias formando polígonos. Antes do tratamento, estes mesmos parâmetros não foram observados, traduzindo o estado de uma pele desidratada mostrando ao invés disso uma orientação de linhas primárias e secundárias ao longo de linhas de tensão da pele (linhas de tensão da pele). Ver Figura 14 para fotos antes e depois da pele de um voluntário tratado.

[0217] Composição do Placebo: uma redução de 6,49% da qualidade do microrrelevo foi observada após 30 dias de aplicação do placebo, como pode ser visto na Tabela XIX abaixo. TABELA XIX

[0218] Observações microscópicas da pele de voluntários tratados durante 30 dias com placebo mostram uma deterioração do microrrelevo com um alinhamento das linhas primárias e secundárias ao longo das linhas de tensão da pele, traduzindo uma significativa desidratação da pele. Ver Figura 15 para fotos antes e depois da pele de um voluntário tratado com placebo.

[0219] Este estudo mostrou um ganho de 16% na qualidade do microrrelevo da pele com um creme formulado com exopolissacarídeos. Esta diferença é ilustrada na Figura 16.

[0220] Este estudo evidenciou a atividade esfoliante dos exopolissacarídeos da invenção mostrando melhora da descamação da pele, melhorando também o seu microrrelevo. A textura da pele foi distintamente melhorada.

EXEMPLO 11 TESTE CLÍNICO DAS PROPRIEDADES ANTI-POLUIÇÃO DE COMPOSIÇÃO DE CUIDADOS COM A PELE CONTENDO EPSS

[0221] Um estudo clínico foi realizado para determinar a eficácia da composição de cuidado com a pele antipoluição com Pol-5 em condições normais de uso. Para aquele efeito, 63 voluntários do sexo feminino, de 30 a 50 anos de idade com uma pele sensível, que vivem em uma cidade grande se inscreveram e 50% delas eram fumantes. Os voluntários foram instruídos a usar a composição de cuidado com a pele antipoluição descrita no Exemplo 12 abaixo duas vezes por dia durante 4 semanas e a não alterar os seus hábitos cosméticos. Eles completaram dois questionários auto-administrados em D7 e D28. As logísticas de coleta de dados e material foram realizadas por e-mail.

[0222] Comentários específicos foram identificados nos questionários de 57 entrevistados: os entrevistados consideraram o creme de fácil aplicação, o creme tinha um cheiro agradável, o creme tinha textura agradável, o creme penetrou rapidamente, forneceu uma sensação de bem-estar, protegeu a pele da poluição, lutou contra os efeitos fatais devido à poluição, proporcionou um efeito de aparência saudável, deixou a pele mais bonita, deixou a pele menos fraca.

[0223] Após 4 semanas de uso padrão de um creme formulado com Pol-5, mais de 70% das opiniões expressas eram favoráveis. A grande maioria dos voluntários (74,5%) classificou o produto como um tanto bom (23,6%), bom (34,5%) ou muito bom (16,75%). A maioria dos voluntários restantes tiveram uma opinião neutra sobre o produto (21,8%).

EXEMPLO 12 FORMULAÇÕES DE CUIDADOS COM A PELE CONTENDO EPSS

[0224] Sem ser tão limitado, polissacarídeos da presente invenção podem ser incluídos em uma formulação compreendendo pelo menos os seguintes ingredientes:

Claims (18)

1. Composição para tratamento de pele caracterizada pelo fato de compreender (a) pelo menos um exopolissacarídeo (EPS) nativo selecionado a partir de Pol-3, Pol-5, Pol-6 e quaisquer combinações dos mesmos, o EPS estando em uma concentração de 0,001% p/p a 1,5% p/p, da composição, em que • o referido Pol-3: - possui uma razão molar de 6,8 galactose e 0,6 ramnose para uma referência de glicose de 10,0, conforme determinado por cromatografia gasosa; - possui uma razão molar de 7 ácido galacturônico para uma referência de ácido glucurônico de 10,0, conforme determinado por cromatografia gasosa; - não compreende xilose e fucose, conforme determinado por cromatografia gasosa; - possui uma estrutura ramificada; - é secretado por uma cepa bacteriana de Alteromonas macleodii originalmente isolada de uma esteira microbiana kopara; e - é capaz de aumentar a produção de ácido hialurônico por fibroblastos humanos senescentes; aumentar a expressão dos genes da filagrina, loricrina e involucrina; e aumentar a síntese de lipídios totais da epiderme; - o referido Pol-5: - possui uma razão molar de 3,2 D-glicose, 2,9 D- galactose, 0,5 D-manose, 2,0 D-ácido glucurônico - 1,0 D-ácido galacturônico, conforme determinado por cromatografia gasosa; - possui uma estrutura ramificada; e - é secretado por uma cepa bacteriana de Alteromonas macleodii originalmente isolada de uma esteira microbiana kopara; e - o referido Pol-6: - tem uma razão molar de 0,7 ramnose e 0,7 manose para uma referência de glicose de 10,0, conforme determinado por cromatografia gasosa; - não compreende galactose, xilose e ácido galacturônico, conforme determinado por cromatografia gasosa; e - é secretado por uma cepa bacteriana de Vibrio alginolyticus originalmente isolada de uma esteira microbiana kopara, e (b)(i) pelo menos um ingrediente ativo adicional; (ii) um excipiente ou aditivo selecionado a partir de agente tamponante, agente quelante, agente condicionador, agente corante, agente antiaderente, agente emoliente, agente emulsificante, agente formador de filme, agente espumante, agente umectante, agente de lactilato, agente lipofílico, agente lubrificante, agente neutralizador, agente oleoso, agente opacificador, agente conservante, agente solubilizante, agente solvente, agente estabilizante, agente tensoativo, agente espessante, agente de viscosidade, agente absorvente de água, agente umectante, perfume e quaisquer combinações das mesmas; ou (iii) uma combinação de (i) e (ii).

2. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a composição compreende um agente umectante e um agente conservante.

3. Composição, de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que o umectante é glicerina, PEG- 8, butileno glicol, propileno glicol ou quaisquer combinações das mesmas.

4. Composição, de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que o umectante ou agente conservante é propileno glicol.

5. Composição, de acordo com quaisquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que o pelo menos um EPS é gerado por fermentação do micro-organismo isolado a partir da esteira microbiana.

6. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que a composição compreende pelo menos dois EPS, cada um dos EPS selecionados dentre Pol-3, Pol-5 e Pol-6.

7. Composição, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a composição compreende Pol- 5 para reduzir adesão bacteriana na superfície da pele, em que a bactéria na pele é Staphylococcus epidermidis ou Staphylococcus aureus.

8. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que a composição compreende pelo menos dois EPS, cada um dos EPS originários de esteiras microbianas kopara diferentes.

9. Uso de pelo menos um exopolissacarídeo (EPS) selecionado dentre Pol-3, Pol-5, Pol-6 e quaisquer combinações dos mesmos caracterizado pelo fato de ser na fabricação de uma composição para tratamento de pele, em que • o referido Pol-3: - possui uma razão molar de 6,8 galactose e 0,6 ramnose para uma referência de glicose de 10,0, conforme determinado por cromatografia gasosa; - possui uma razão molar de 7 ácido galacturônico para uma referência de ácido glucurônico de 10,0, conforme determinado por cromatografia gasosa; - não compreende xilose e fucose, conforme determinado por cromatografia gasosa; - possui uma estrutura ramificada; - é secretado por uma cepa bacteriana de Alteromonas macleodii originalmente isolada de uma esteira microbiana kopara; e - é capaz de aumentar a produção de ácido hialurônico por fibroblastos humanos senescentes; aumentar a expressão dos genes da filagrina, loricrina e involucrina; e aumentar a síntese de lipídios totais da epiderme; - o referido Pol-5: - possui uma razão molar de 3,2 D-glicose, 2,9 D- galactose, 0,5 D-manose, 2,0 D-ácido glucurônico e 1,0 D-ácido galacturônico, conforme determinado por cromatografia gasosa; - possui uma estrutura ramificada; e - é secretado por uma cepa bacteriana de Alteromonas macleodii originalmente isolada de uma esteira microbiana kopara; e - o referido Pol-6: - tem uma razão molar de 0,7 ramnose e 0,7 manose para uma referência de glicose de 10,0, conforme determinado por cromatografia gasosa; - não compreende galactose, xilose e ácido galacturônico, conforme determinado por cromatografia gasosa; e - é secretado por uma cepa bacteriana de Vibrio alginolyticus originalmente isolada de uma esteira microbiana kopara.

10. Uso, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que a composição é uma composição de tratamento anti-envelhecimento, composição de tratamento pós sol ou uma composição de proteção solar.

11. Uso, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que o tratamento de pele é para prevenir ou reduzir pelo menos um sinal de envelhecimento de pele.

12. Uso, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que quando o exopolissacarídeo (EPS) é selecionado dentre Pol-3, Pol-6 ou uma combinação dos mesmos, o tratamento de pele é para melhorar a hidratação da pele, melhorar a morfologia do estrato córneo, melhorar o microrrelevo da pele ou melhorar a diferenciação de queratinócitos

13. Uso, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que quando o exopolissacarídeo (EPS) é Pol-6, o tratamento de pele é para aumentar a descamação da pele.

14. Uso, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que quando o exopolissacarídeo (EPS) é Pol-5, o tratamento de pele é para estimular a síntese de lipídeos totais da epiderme ou reduzir a adesão bacteriana na superfície da pele, em que a cepa bacteriana é Staphylococcus epidermidis or Staphyloccocus aureus.

15. Uso, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que quando o exopolissacarídeo (EPS) é Pol-3, o tratamento de pele é para estimular a produção de ácidos hialurônicos por fibroblastos humanos senescentes.

16. Uso, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a composição é para estimular a expressão de pelo menos um gene involvido na descamação da pele, em que o gene é kallikrein 5, neurosina ou enzima quimotripsica de extrato córneo ou estimular a expressão de transglutaminase.

17. Uso, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que a composição é para estimular a expressão de pelo menos um gene envolvido na diferenciação de queratinócitos, em que o gene é selecionado do grupo que consiste em filagrina, loricrina e involucrina.

18. Uso, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que a composição é para reduzir peróxidos de lipídeos intracelulares de células de pele irradiadas ou para usar como protetor solar da pele.

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