BRPI0821514B1 - Nanodispersão - Google Patents

Abstract

nanodispersão a presente invenção fornece uma nanodispersão compreendendo nanopartículas com um tamanho médio inferior a 300nm dispersadas em um veículo compreendendo um solvente miscível em água e água, as referidas nanopartículas compreendendo um ou mais derivados de taxano, um polímero e um tensoativo compreendendo uma mistura de ácidos graxos ou seus sais e esterol ou seus derivados ou seus sais.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "NANODISPERSÃO" A presente invenção refere-se a uma ' nanodi sper são' de um derivado de taxano e a um processo para sua preparação.

Antecedentes da Invenção Existem várias drogas farmacêuticas que são pobremente solúveis ou insolúveis em soluções aquosas. Tais drogas constituem desafios no sentido de terem pobre biodisponibilidade oral ou em termos de sua formulação para distribuição medicamentosa especialmente através da via intravenosa. Se a droga for administrada por via intravenosa, as partículas devem ser suficientemente pequenas para passarem com segurança pelos capilares sem causar êmbolos. Para administração intravenosa, sabemos que é seguro administrar drogas na forma de soluções, emulsões, lipossomas, nanodispersões, entre outras. Uma outra exigência que deve ser satisfeita durante a formulação de um sistema de distribuição de droga especialmente para drogas hidrófobas é que a formulação deve ser fisicamente estável sem qualquer agregação ou cristalização da droga ou alteração no aspecto da formulação quando armazenada à tensoativo pelo período de tempo desej ado.

Um exemplo de uma droga pobremente solúvel inclui derivados de taxano que são bastante conhecidos por sua atividade anticâncer. Um derivado de taxano ou um taxoide é um produto natural diterpenoide complexo derivado principalmente casca do teixo ocidental, Taxus brevifolia e possui essencialmente um esqueleto taxano. Os taxanos vêm sendo usados para a produção de várias drogas quimioterapêuticas . Atualmente dois derivados de taxano, paclitaxel e docetaxel, encontram-se comercialmente disponíveis como agentes antitumorais potentes.

Os derivados de taxano apresentam solubilidade muito pobre em água e na maioria dos solventes farmaceuticamente aceitáveis limitando assim sua administração aos pacientes. Devido a esta propriedade intrínseca desfavorável, o TAXOL injeção, a injeção comercializada de paclitaxel é formulada como uma solução não aquosa em Cremophor TM EL (um óleo de rícino polietoxilado) e álcool desidratado. No entanto, o uso de um solubi1izante como Cremophor TM EL em grandes quantidades leva a vários efeitos colaterais tais como reações de hipersensibilidade e hipertensão sérias ou fatais, bradiarritmia, anemia, neutropenia e/ou neuropatia periférica. Por isso todos os pacientes que recebem paclitaxel são pré-medicados com esteroides, anti-histaminas e antagonistas do receptor de H2 e só então o paclitaxel é infundido muito devagar durante um período de pelo menos 3 horas ou mais.

Tendo em vista esses problemas associados às formulações de Taxol, os pesquisadores tentaram preparar formulações de taxol sem usar Cremophor EL. A Patente US N° 6537579 descreve composições de agentes farmacologicamente ativos substancialmente insolúveis em água tais como paclitaxel, nas quais o agente farmacologicamente ativo existe na forma de partículas suspensas revestidas com proteína (que age como agente estabilizante). Em particular, a proteína e o agente farmacologicamente ativo em um meio dispersante biocompativel são submetidos a alto cisalhamento, na ausência de quaisquer tensoativos convencionais, e também na ausência de qualquer material de núcleo polimérico para as partículas. 0 procedimento resulta em partículas com um diâmetro inferior a cerca de 1 mícron. 0 sistema particulado produzido de acordo com a invenção pode ser convertido em um pó seco redispersível compreendendo nanopartícuias de droga insolúvel em água revestidas com uma proteína, e proteína livre à qual as moléculas do agente farmacológica são ligadas. A Patente US N° 6017948 refere-se a uma composição compreendendo paclitaxel na forma de uma solução de paclitaxel em um solvente não aquoso, miscível em água, e farmaceuticamente aceitável (como N-metilpirrolidona) e compreendendo ainda um solubilizante farmaceuticamente aceitável (tal como triacetina), com a medida de que o óleo de rícino polietoxilado (Cremophor) é excluído da composição. Nas modalidades preferidas, uma grande quantidade de solvente, i.e., 4000 mg de NMP (exemplo 1) ou combinação de 2000 mg de NMP e 2000 mg de etanol (exemplo 2), foi usada para solubilizar 10 mg de paclitaxel com agitação moderada. Se a quantidade terapeuticamente eficaz de droga for distribuída através de tais composições, ela será associada à entrada de quantidades excessivas de etanol, solventes não aquosos ou solubilizantes no corpo. A Patente US N° 6046230 refere-se a uma formulação injetável estável contendo paclitaxel e dois solubilizantes - oleato de oxietileno sorbitol e monoéster de ácido graxo de (oxietileno glicol) 15-20 junto com componentes adicionais tais como povidona e polietileno glicol. 0 solubilizante principal usado na formulação, poliéster oleico de sorbitol polietoxilado, que é um produto da adição de óxido de etileno de ácido oleico derivado de oleína de palma, tem a propriedade inerente de solidificar a temperaturas abaixo de 10°C, o que o torna inadequado para solubilizar o paclitaxel quando usado sozinho. No entanto quando combinados com um solubilizante auxiliar éster de monoácido graxo de polietileno glicol, os dois solubilizantes juntos apresentam boa solubilidade em água e em álcool anidro e eles continuam na fase fluida mesmo a temperaturas baixas. Assim, o uso dos dois solubilizantes juntos é obrigatório. Também constitui um critério essencial que o valor HLB dos solubilizantes que atendem às características desejadas seja tão alto quanto 15 porém não inferior a 13. A formulação resultante é uma solução. 0 Pedido PCT N° WO 2006/133510 apresenta uma formulação farmacêutica líquida para administração parenteral compreendendo docetaxel ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; um ou mais glicóis e um sistema solvente não aquoso farmaceuticamente aceitável, onde a formulação tem uma leitura no medidor de pH na faixa 2,5 a 7,0. As modalidades da invenção envolvem o uso de uma quantidade muito alta de tensoativos (cerca de 25%v/v de polissorbato 80 ou 30 % v/v de Cremophor) que, por sua vez, pode levar a efeitos colaterais tóxicos. O pedido não descreve a eficácia nem o perfil de toxicidade das formulações. Além disso a formulação descrita pelo pedido '510 é uma solução da droga em um sistema solvente não aquoso que, misturado com um diluente de infusão (solução de NaCl a 0,9% ou de dextrose a 5%), produz uma solução para infusão. Um novo sistema de distribuição de droga ou uma nanodispersão não é formado durante o processo. Também, a estabilidade das soluções de formulação depois de diluição com um diluente de infusão tem uma duração muito curta de cerca de 4 a 6 horas, o que pode limitar sua eficiência de administração. 0 documento US2002/0058060 (doravante denominado pedido de patente '060) descreve i lipossomas contendo substâncias hidrófobas e dois fosfolipídios com temperaturas de transição de fase diferentes e materiais formadores de lipossoma como colesterol e lipídios modificados com polímero hidrófilo. A proporção da droga para os i fosfolipídios e para os materiais formadores de lipossoma é variável para obter formulações lipossômicas diferentes. 0 pedido de patente '060 indica diversas tentativas de formular lipossomas de taxanos que têm uma proporção droga:1ipídio ) elevada, usando duas classes específicas de fosfolipídios, de modo que a quantidade total de lipídio usada é reduzida, uma vez que a injeção de uma quantidade excessiva de lipídios no corpo leva a um certo grau de toxicidade, j Portanto, é evidente pela técnica anterior que o principal problema associado à formulação de uma composição de taxano é a hidrofobicidade dos taxanos, que (a) dificulta a formulação de uma composição ) que contenha uma forma solubilizada da droga e que seja estável, sem qualquer agregação ou cristalização significativa da droga ou alteração no aspecto da formulação por um período de tempo desejado (b) necessita do uso de uma grande quantidade de solubilizantes, fosfolipídios e tensoativos.

Também, estudos da toxicidade do TAXOL (solução comercial de paclitaxel em Cremophor e álcool) mostram um valor de LD5o de 7,5-12,0 mg/kg como apresentado na Patente US N° 6753006 que é baixo, indicando que a droga administrada na forma de solução tem um índice terapêutico muito baixo e que mesmo uma dose moderado pode apresentar sérios efeitos colaterais e reações tóxicas.

Faz-se portanto necessária uma formulação injetável de um derivado de taxano que (a) evite o uso de uma grande quantidade de excipientes, (b) evite o uso de Cremophor, (c) distribua a droga através de um novo sistema de distribuição, que apresente um valor de LD5o aumentado, minimizando os efeitos colaterais tóxicos associados à administração da droga na forma de solução e (e) supere as limitações da droga associadas a sua natureza hidrófova e que seja estável sem qualquer agregação ou cristalização significativa ou droga ou alteração no aspecto da formulação, pelo período de tempo 1 desejado durante a administração e durante o armazenamento.

Desenvolvemos uma nanodispersão compreendendo nanopartículas com um tamanho médio inferior a 300 nm dispersadas em um veículo compreendendo um solvente 1 miscível em água e água, as referidas nanopartículas compreendendo um derivado de taxano, um polímero e uma quantidade muito baixa de tensoativos. A presente invenção fornece uma formulação que evita o uso de Cremophor, envolve o uso de quantidades bastante reduzidas de aditivos (fosfolipídios) e distribui a droga na forma de nanopartículas, minimizando assim as reações tóxicas e os efeitos colaterais associados à administração da droga. 0 valor de LD50 observado para as formulações da presente invenção é de is 342,5 mg/kg, que é muito maior que o valor de LD50 de 7,5-12,0 mg/kg da solução comercial de TAXOL® descrita na Patente US N° 6753006. Também, a formulação da presente invenção é estável, sem agregação ou cristalização significativa da droga ou alteração no aspecto da formulação, pelo período de tempo desejado durante a administração e durante o armazenamento.

Objetivos da Invenção Constitui um objetivo da presente invenção fornecer uma nanodispersão de um derivado de taxano que é estável pelo período de tempo desejado antes e durante administração por via parenteral.

Constitui um outro objetivo da presente invenção fornecer uma nanodispersão que não apresenta sinais de agregação ou alteração no aspecto durante armazenamento por mais de 4 horas à temperatura ambiente.

Constitui um outro objetivo da presente invenção fornecer um pré-concentrado de derivado de taxano que é quimicamente estável e não apresenta sinais de agregação ou alteração no aspecto durante armazenamento por pelo menos 3 meses à temperatura ambiente e mediante diluição com um veículo líquido aquoso dá uma nanodispersão estável.

Constitui ainda um outro objetivo da presente invenção fornecer um kit com dois recipientes, o primeiro recipiente compreendendo o pré-concentrado do derivado de taxano em um solvente miscível em água e um segundo recipiente compreendendo um veículo líquido aquoso, para que com a adição do conteúdo do segundo recipiente ao conteúdo do primeiro recipiente ou vice-versa, seja formada uma nanodispersão estável que é adequada para administração intravenosa apenas com a aplicação de uma leve agitação.

Constitui ainda um outro objetivo da presente invenção fornecer um kit com mais de dois recipientes, por exemplo, dois recipientes, o primeiro recipiente compreendendo uma forma liofilizada da nanodispersão e um segundo recipiente compreendendo um veículo líquido aquoso, para que com a adição do conteúdo do segundo recipiente ao conteúdo do primeiro recipiente ou vice-versa, seja formada uma nanodispersão estável que é adequada para administração intravenosa apenas com a aplicação de uma leve agitação.

Constitui um outro objetivo da presente invenção fornecer um método de tratamento de cânceres, o referido método compreendendo administrar as composições de nanodispersão a pacientes como necessidade das mesmas.

Sumário da Invenção A presente invenção fornece uma nanodispersão compreendendo nanopartículas com um tamanho de partícula médio inferior a 300 nm dispersadas em um veículo compreendendo um solvente miscível em água e água, as referidas nanopartículas compreendendo um ou mais derivados de taxano, um polímero e um tensoativo compreendendo uma mistura de ácidos graxos ou seus sais e um esterol ou seus derivados ou seus sais. A presente invenção também fornece uma solução compreendendo um ou mais derivados de taxano, um polímero e um tensoativo compreendendo uma mistura de ácidos graxos ou seus sais e esterol ou seus derivados ou seus sais em um solvente miscível em água, que mediante diluição com um veículo líquido aquoso dá uma nanodispersão. A presente invenção também fornece nanopartículas com um tamanho de partícula médio inferior a 300 nm compreendendo um ou mais derivados de taxano, um tensoativo compreendendo uma mistura de esterol ou seus derivados ou seus sais e um ácido graxo ou seus sais e um polímero.

Breve Descrição das Figuras FIGURA 1: Esta representa uma avaliação comparativa da alteração no volume do tumor com o tempo (em dias) de um xenoenxerto de tumor de mama humano (MX-1) implantado em camundongos nus fêmeas Balb/c para amostra de controle, amostra de referência (ABRAXANE®) e amostra de teste (composição do exemplo 12a da presente invenção) segundo o estudo detalhado no Exemplo 27. FIGURA 2: Esta representa uma avaliação comparativa da alteração no volume do tumor com o tempo (em dias) de um xenoenxerto de tumor de mama humano (MX-1) implantado em camundongos nus fêmeas atímicos para amostra de controle, amostra de referência (ABRAXANE®) e amostra de teste (composição do exemplo 9 da presente invenção) segundo o estudo detalhado no Exemplo 28. FIGURA 3: Esta representa uma avaliação comparativa da alteração no volume do tumor com o tempo (em dias) de um xenoenxerto de tumor de cólon humano (HT-29) implantado em camundongos nus machos atímicos para amostra de controle, amostra de teste (composição do exemplo 9 da presente invenção) e duas amostras de referência (ABRAXANE® e ONCOTAXEL®) segundo o estudo detalhado no Exemplo 29. FIGURA 4: A figura 4 (a) indica um histograma mostrando a distribuição de tamanhos de partícula da nanodispersão do Exemplo 9 no momento inicial e a figura 4 (b) indica um histograma mostrando a distribuição de tamanhos de partícula da nanodispersão de paclitaxel exemplo 9 quando armazenada à temperatura ambiente por 24 horas. FIGURA 5: A figura 5 (a) indica um histograma mostrando a distribuição de tamanhos de partícula da nanodispersão do Exemplo 24D no momento inicial e a figura 5 (b) indica um histograma mostrando a distribuição de tamanhos de partícula da nanodispersão de docetaxel do exemplo 24D quando armazenada à temperatura ambiente por 8 horas.

Descrição Detalhada da Invenção A presente invenção fornece uma nanodispersão compreendendo nanopartículas com um tamanho de partícula médio inferior a 300 nm dispersadas em um veículo aquoso compreendendo um solvente miscível em água e água, as referidas nanopartículas compreendendo um derivado de taxano, um polímero e um tensoativo compreendendo uma mistura de ácidos graxos ou seus sais e esterol ou seus derivados ou seus sais. A presente invenção também fornece uma solução compreendendo um derivado de taxano, um polímero e um tensoativo compreendendo uma mistura de ácidos graxos ou seus sais e esterol ou seus derivados ou seus sais em um solvente miscível em água, que mediante diluição com um veículo aquoso dá uma nanodispersão. A presente invenção também se refere a nanopartículas com um tamanho de partícula médio inferior a 300 nm compreendendo um derivado de taxano, um tensoativo compreendendo uma mistura de esterol ou seus derivados ou seus sais e um ácido graxo ou seus sais e um polímero. A nanodispersão da presente invenção não contém excipientes tóxicos como o Cremophor e envolve o uso de quantidades muito reduzidas de aditivos (como tensoativos e fosfolipidios) necessários para a formulação de uma e nanodispersão estável de um derivado de taxano, minimizando assim as reações tóxicas associadas.

Nanopartículas ou partículas nanodimensionadas por si sós já oferecem muitas vantagens em termos de distribuição eficiente de droga. Foi descoberto que a incorporação de uma droga em um veículo de distribuição ou a ligação da droga ao veículo pode oferecer muitas vantagens em relação à administração da droga na sua forma livre. A incorporação de uma droga em um veículo pode afetar a distribuição específica para tecido, em particular o acúmulo preferencial em um determinado tecido de interesse ou em um local doente, a vetorização da droga para um tipo particular de célula, a redução de interação com componentes sanguíneos, a proteção melhorada da droga contra degradação prematura e o aumento no tempo de circulação. A nanopartícuia é um importante veículo de distribuição de drogas. As nanopartículas possuem especificidade engendrada, o que permite que as mesmas distribuam uma concentração mais alta de agente farmacêutico para um local desejado ou sítio de ação alvo (Kayser et al., Current Pharmaceutical Biotechnology, 2005, 6, página número 3-5) . A distribuição vetorizada de uma droga é importante em muitas aplicações, especialmente quando a toxicidade da droga, se distruíba sistêmica, constitui um problema. A distribuição vetorizada de uma droga pode ajudar a eliminar ou pelo menos minimizar os efeitos colaterais tóxicos e diminuir as quantidades de dosagem necessárias, entre outros aspectos vantajosos. Existem diferentes abordagens para vetorizar drogas para o sítio de ação alvo. Uma abordagem muito simples, mas de aplicabilidade limitada, é a injeção direta no sítio alvo, por exemplo, injeção em tecido tumoral. Uma outra abordagem é o uso de sistemas carreadores específicos para vias de administração diferentes (por exemplo transferossomas para distribuição tópica), microesferas ou nanopartículas para administração oral e parenteral. Das vias de administração parenteral, a injeção intravenosa é a usada com mais frequência. Com a administração i.v., as partículas são reconhecidas por macrófagos do fígado e do baço e de preferência são capturadas pelos macrófagos do fígado. Este efeito pode ser explorado para vetorizar carreadores carregados de droga para o fígado e para o baço ou geralmente para macrófagos para tratar infecções do MPS (sistema fagocítico mononuclear) ou RES (sistema reticuloendotelial) e este fenômeno de vetorização normalmente é chamado de "vetorização passiva") . É possível escapar do reconhecimento do MPS/RES por modificação da superfície dos carreadores com porções polietileno glicol (PEG) ou com um polímero contendo uma cadeia PEG tal como Poloxamina 908. Isto aumenta o período de circulação do carreador na corrente sanguíneo por meio de injeção intravenosa. Os carreadores de ciculação normal e longa podem ser equipados com uma porção vetorizadora (lectinas ou anticorpos monoclonais ou açúcares como manose/galactose etc.) geralmente chamada de ligando. Esses ligandos direcionam os carreadores contendo a droga para as células alvo desejadas contendo os receptores apropriados para os ligandos. Esta distribuição específica para o sítio obtida pelo uso de um ligando vetorizador envolve um processo ativo; portanto ela também é chamada de "vetorização ativa". Nanopartículas de tamanho específico podem passivamente atacar tumores sólidos através de um fenômeno que explora os aspectos características da biologia do tumor. Os tecidos tumorosos possuem vasos sanguíneos vazantes, permeabilidade aumentada e drenagem linfática pobre. Em contraste, as células endoteliais vasculares no tecido normal têm uma permeabilidade menor para nanopartículas em relação aos tecidos tumorosos. Isto permite que os nanocarreadores se acumulem no tumor. 0 efeito é conhecido como Efeito de Permeabilidade e Retenção Aumentadas ou Efeito EPR (Nanoparticle Technology for drug delivery, editado por Ram B. Gupta & Uday B. Kompella, publicado por Taylor & Francis, 2005, página 539) . Também, nanopartículas inferiores a 200 nm evitam de forma mais eficaz o sistema reticuloendotelial e ficam em circulação por mais tempo (Naoparticle Technology for drug delivery, editado por Ram B. Gupta & Uday B. Kompella, publicado por Taylor & Francis, 2005, página 540). O termo nanopartícula conforme usado neste relatório significa qualquer partícula com dimensões controladas da ordem de nanômetros. As nanopartículas reivindicadas na presente invenção podem ser uma nanopartícula polimérica (matriz de polímero atraindo a droga) e/ou uma nanovesícula polimérica (vesícula nanodimensionada estabilizada por polímero encapsulando a droga) e/ou uma nanocápsula polimérica (membrana polimérica envolvendo a droga em núcleo) e/ou partículas nanodimensionadas da droga estabilizada por tensoativos, entre outros, com tamanho de partícula inferior a 300 nm. 0 tamanho de partícula das nanopartículas é determinado usando-se métodos convencionais para medir e expressar o tamanho de partícula tais como análise do tamanho de partícula de Malvern, peneiração, microscopia ótica por espalhamento de luz, análise de espelho, sedimentação e outros métodos conhecidos pelo especialista na técnica. As informações de distribuição de tamanhos de partícula podem ser obtidas a partir dos valores Di0, D50, e D90, que podem ser gerados a partir da determinação do tamanho de partícula de Malvern. Sem querer se ater a qualquer teoria, as requerentes acreditam que a distribuição de droga através de uma nanodispersão compreendendo nanopartículas com tamanho médio inferior a 300 nm leva a uma maior internalização e acúmulo da droga dos tecidos e células tumorosos alvo. Esses níveis de internalização aumentados oferecem uma estratégia de tratamento potente para a cura de tumores associados a câncer.

De acordo com uma modalidade da presente invenção, o tamanho de partícula das nanopartículas varia na faixa de 10 nm a 275 nm. Nas modalidades preferidas da presente invenção, o tamanho de partícula é inferior a 200 nm. Nas modalidades mais preferidas da presente invenção, o the tamanho de partícula varia na faixa de 10 nm a 200 nm. A presente invenção fornece uma nanodispersão compreendendo nanopartículas com um tamanho médio inferior a 300 nm dispersadas em um veículo compreendendo um solvente miscível em água e água, as referidas nanopartículas compreendendo um ou mais derivados de taxano, um polímero e um tensoativo compreendendo uma mistura de ácidos graxos ou seus sais e esterol ou seus derivados ou seus sais. A presente invenção também fornece uma solução compreendendo um ou mais derivados de taxano, um polímero e um tensoativo compreendendo uma mistura de ácidos graxos ou seus sais e esterol ou seus derivados ou seus sais em um solvente miscível em água, que mediante diluição com um veículo líquida aquosa dá uma nanodispersão.

As nanopartículas da presente invenção têm um tamanho de partícula médio inferior a 300 nm, onde as referidas partículas compreendem um ou mais derivados de taxano, um tensoativo compreendendo uma mistura de esterol ou seus derivados ou seus sais e um ácido graxo ou seus sais e um polímero.

Os derivados de taxano, mencionados nas modalidades da presente invenção, são compostos que possuem essencialmente um esqueleto taxano e são produtos naturais diterpenoides complexos derivados principalmente de fontes naturais tais como a casca do teixo ocidental, taxus brevifolia, ou uma cultura de células, ou moléculas sintetizadas quimicamente, o principal mecanismo de ação da classe taxano de drogas é a inibição da função dos microtúbulos. Ele faz isso estabilizando a tubulina ligada a GDP no microtúbulo. Os microtúbulos são essenciais para a divisão celular, e os taxanos interrompem portanto esse processo chamado "mitose congelada".

Os representantes de maior destaque desse grupo que são usados nas composições da presente invenção incluem paclitaxel e docetaxel e seus sais, derivados, análogos e isômeros farmaceuticamente aceitáveis tais como 7-epipaclitaxel, t-acetil paclitaxel, 10-desacetil-paclitaxel, 10-desacetil-7-epipaclitaxel, 7- xilosilpaclitaxel, 10-desacetil-7- glutarilpaclitaxel, 7-N , N-dimet ilglicilpaclitaxel, 7-L-alanilpaclitaxel, entre outros, e misturas dos mesmos.

Paclitaxel é um produto natural com atividade antitumoral. 0 Paclitaxel é obtido por um processo semissintético a partir de taxus brevifolia e/ou taxus baccata. 0 nome químico do paclitaxel é 13-éster de 2-benzoato de 4, 10-diacetato de 5a,20-Epoxi-1,2a,4,7 β,10 β,13a-hexahidroxitax-ll-en-9-ona com ( 2R, 3S)-N-benzoil-3-fenilisoserina. O

Paclitaxel encontra-se disponível nos Estados Unidos da América como TAXOL Injeção. O Paclitaxel é indicado como terapia de primeira linha e como terapia subsequente para o tratamento de carcinoma avançado do ovário. Como terapia de primeira linha, o paclitaxel é indicado em combinação com cisplatina. O Paclitaxel também é indicado para o tratamento adjuvante de câncer de mama nodo-positivo administrado sequencialmente a uma quimioterapia combinada padrão contendo doxorubicina. O Paclitaxel também é indicado para o tratamento de câncer de mama depois de quimioterapia combinada sem sucesso para doença metastática ou recidiva nos 6 meses subsequentes à quimioterapia adjuvante. O Paclitaxel, em combinação com cisplatina, também é indicado para o tratamento de primeiro linha de câncer de pulmão não-pequenas células em pacientes que não são candidatos à cirurgia e/ou radioterapia potencialmente curativa. O Paclitaxel também e indicado para o tratamento de segunda linha do sarcoma de Kaposi relacionado à AIDS.

Docetaxel é um outro agente antineoplásico pertencente à família dos taxoides. Ele é preparado por um método semissintético partindo de um precursor extraído da biomassa de agulhas renovável de plantas de teixo. O nome químico do docetaxel é (2R,3S )-N-carboxi-3-feni1isoserina,N- ter-butil éster, 13-éster com 2-benzoato de 4-acetato de 5β-20-epoxi-1,2a,4,7β,10β,13a-hexahidroxitax-ll-en-9-ona, trihidratado. 0 Docetaxel também se encontra disponível nos Estados Unidos da América como TAXOTERE® Injeção concentrado. 0 Docetaxel como único agente é indicado para o tratamento de pacientes com câncer de pulmão não-pequenas células local avançado ou metastático depois de quimioterapia à base de platina prévia e sem sucesso. 0 Docetaxel em combinação com cisplatina é indicado para o tratamento de pacientes com câncer de pulmão não-pequenas células local avançado ou metastático não ressecável que já receberam quimioterapia para esta condição. 0 Docetaxel em combinação com prednisona é indicado para o tratamento de pacientes com câncer de próstata metastático androgênio-independente (refratário ao hormôni). 0 Docetaxel em combinação com cisplatina e fluoruracil é indicado para o tratamento de pacientes com adenocarcinoma gástrico avançado, incluindo adenocarcinoma da junção gastroesofágica, que ainda não receberam quimioterapia para a doença avançada. 0 Docetaxel em combinação com cisplatina e fluoruracil é indicado o tratamento de indução de pacientes com carcinoma de células escamosas local avançado e inoperável da cabeça e pescoço. As modalidades da presente invenção compreendem paclitaxel em uma quantidade variando de cerca de 0,001 mg/ml a cerca de 15,0 mg/ml, mais preferivelmente de cerca de 0,1 mg/ml a cerca de 10,0 mg/ml e ainda mais preferivelmente de cerca de 1,5 mg/ml a cerca de 5,0 mg/ml. O Docetaxel é usado nas modalidades da presente invenção em uma quantidade variando de cerca de 0,001 mg/ml a cerca de 10,0 mg/ml, mais preferivelmente de cerca de 0,1 mg/ml a cerca de 1,0 mg/ml e ainda mais preferivelmente de cerca de 0,3 mg/ml a cerca de 0,7 mg/ml. A nanodispersão compreendendo nanopartículas pode compreender um agente terapeuticamente ativo adicional selecionado do grupo que consiste em um agente anti-inflamatório, um agente anti-histamínico, um antagonista de 5-HT3, um antagonista do receptor de H2, uma vitamina e misturas dos mesmos. Agentes anti-inflamatórios que podem ser usados nas composições da presente invenção podem ser selecionados de drogas anti-inflamatórias esteroides e drogas anti-inflamatórias não-esteroides. As modalidades da presente invenção de preferência compreendem drogas anti-inflamatórias esterois tais como glicocorticoides. Exemplos de glicocorticoides que podem ser usados nas composições da presente invenção podem ser selecionados de cortisol ou hidrocortisona, prednisona, prednisolona, dexametasona, betametasona, budesonida, triancinolona, entre outros, e misturas dos mesmos. Em uma modalidade preferida da presente invenção, a dexametasona é usada como o agente anti-inflamatório. O agente anti-histamínico ou antagonistas da histamina que podem ser usados nas composições da presente invenção podem ser selecionados de agentes anti-histamínicos de primeira geração tais como etilenodiaminas (mepiramina, antazolina), etanolaminas (difenidramina, carbinoxamina, clemastine, dimenidrinato), alquilaminas (feniramina, clorfeneramina, dexclorfeniramina, triprolidina), piperazinas (ciclizina, clorciclizina, hidroxizina, meclizina), tricíclicos e tetracíclicos (prometazina, alimemazina, cipro-heptadina, azatadina, cetotifeno), entre outros; agentes anti-histamínicos de segunda geração tais como acrivastina, astemizol, cetirizina, loratidina, mizolastina, terfenadina, azelastina, levocabastina, olapatidina, entre outros; agentes anti-histamínicos de terceira geração tais como levocetrizina, desloratidina, fexofenadina, entre outros, e misturas dos mesmos. 0 antagonista de 5-HT3 que pode ser usado nas composições da presente invenção podem ser selecionados de ondansetrona, granisetrona, dolasetrona, tropisetrona, palonosetrona, alosetrona, cilansetrona, entre outros, e misturas dos mesmos. 0 antagonista do de receptor H2 ou antagonista de H2 que pode ser usado nas composições da presente invenção pode ser selecionado de cimetidina, ranitidina, nizatidina, famotidina, roxatidina, burimamida, metiamida, entre outros, e misturas dos mesmos. As vitaminas que podem ser usadas nas composições da presente invenção podem ser selecionadas de vitaminas solúveis em gordura tais como vitamina A, vitamina D, vitamina E e vitamina K e vitaminas solúveis em água tais como vitamina C e vitamina B incluindo vitamina (Bl: tiamina; B2: riboflavina; B3: niacina; B5: ácido pantotênico; B7: biotina; B9: ácido fólico; B12: cianocobalamina) e misturas das mesmas. Em uma modalidade da presente invenção a vitamina usada é a Vitamina D.

As nanopartículas presentes na nanodispersão da presente invenção compreendem um ou mais polímeros. Os polímeros que são adequados para as nanopartículas da presente invenção são de preferência solúveis em água. Exemplos de polímeros solúveis em água incluem, porém sem limitação, polivinilpirrolidona, poloxâmero, polietileno glicol, álcool polivinílico, alginato de sódio, hialuronato de sódio, goma gelana, carragenano, goma xantana, sulfato de dextrana, sulfato de condroitina, pectinatos, heparinas, copolímeros de ácido metacrílico, sulfato de dermatana, polímeros celulósicos tais como carboximetil celulose sódica, hidroxietil celulose, hidroxipropil metil celulose, entre outras, e misturas dos mesmos.

Polivinilpirrolidona é um polímero de amida terciária com unidades monoméricas de l-vinil-2-pirrolidona dispostas linearmente, doravante denominada PVP, e também conhecida como Povidona. Ela se encontra comercialmente disponível como uma série de produtos com pesos moleculares médios variando de cerca de 10.000 a cerca de 700.000. Os vários produtos são comercializados de acordo com os pesos moleculares médios designados valores K; por exemplo a GAF Corporation fornece PVP com os seguintes valores K: valor K Peso molecular médio 15 cerca de 10.000 30 cerca de 40.000 60 cerca de 160.000 90 cerca de 360.000 Um outro fornecedor, a BASF, fornece polivinilpirrolidona de diferentes graus de solubilidade em água como Kollidon com graus tendo um peso molecular de, por exemplo, 2000 a 3000 (Kollidon 12 PF), 7000-11.000 (Kollidon 17 PF) , 28.000-34.000 (Kollidon 25), 1.000.000- 1.000.000 (Kollidon 90 F) . Nas modalidades, a polivinilpirrolidona é usada como um polímero solúvel em água. Os graus de polivinilpirrolidona adequados para a presente invenção incluem graus tendo um peso molecular na faixa de cerca de 1.000 a cerca de 45.000, de preferência, de cerca de 4.000 a cerca de 30.000. De acordo com uma modalidade da presente invenção, a quantidade de polímero usada na nanodispersão varia de cerca de 0,001% p/v a cerca de 20% p/v. O polímero é de preferência usado em uma quantidade variando de cerca de 0,01% p/v a cerca de 5,0% p/v. Mais preferivelmente, ele é usado em uma quantidade variando de cerca de 0,01% p/v a cerca de 1,0 % p/v. A nanodispersão da presente invenção compreende um ou mais tensoativos. O termo tensoativo é uma mistura de "agentes tensoativos". Tensoativos são moléculas que compreendem uma parte solúvel em água (hidrofílica) e uma parte solúvel em lipídios (lipofilica). Os tensoativos que são usados na nanodispersão da presente invenção compreendem uma mistura de ácidos graxos ou seus sais e esterol ou seus derivados ou seus sais. O termo ácidos graxos inclui ácidos monocarboxílicos alifáticos (saturados ou insaturados) derivados de uma gordura, óleo ou cera animal ou vegetal, ou contidos em uma forma esterificada em qualquer uma dessas fontes. Exemplos de ácidos graxos ou seus sais que podem ser usados nas composições da presente invenção incluem, porém sem limitação, ácidos graxos ou seus sais com um número 'n' de átomos de carbono onde 'n' varia de cerca de 4 a cerca de 28. 0 ácido graxo pode ser um ácido graxo saturado ou um ácido graxo insaturado, e seus sais e combinações dos mesmos. 0 ácido graxo saturado e seus sais podem ser selecionados de ácido butírico, ácido caproico, ácido caprílico, ácido cáprico, ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido araquídico, ácido beênico, caprilato de sódio, laurato de sódio, miristato de sódio, palmitato de sódio, entre outros, e/ou misturas dos mesmos. 0 ácido graxo insaturado e seus sais podem ser selecionados de ácido miristoleico, ácido palmitoleico ácido oleico, ácido linoleico, ácido alfa-linolênico, ácido araquidônico, ácido eicosapentaenoico, ácido erúcico, ácido docosahexaenoico, oleato de sódio, araquidonato de sódio, entre outros, e/ou misturas dos mesmos.

Exemplos de esterol ou seus derivados ou seus sais que podem ser usados na nanodispersão ou nanopartículas da presente invenção podem ser ésteres de ácido de esterois. Os esterois que podem ser adequados de acordo com a presente invenção incluem, porém sem limitação, colesterol, fitosterois, ergosterol, sais de ácidos biliares e misturas dos mesmos. Sais de ácido de colesterol que podem ser usados incluem, porém sem limitação, sulfato de colesteril, acetato de colesterol, cloroacetato· de colesterol, benzoato de colesterol, miristato de colesterol, hemissuccinato de colesterol, fosfato de colesterol, fosfato, fosfonato, borato, nitrato de colesterol, cinamato de colesterol, crotanoato de colesterol, butirato de colesterol, heptanoato de colesterol, hexanoato de colesterol, octanoato de colesterol, nonanoato de colesterol, decanoato de colesterol, oleato de colesterol, propionato de colesterol, valerato de colesterol, carbonato de dicolesteril, entre outros, e misturas dos mesmos. Os fitosterois que podem ser usados nas composições da presente invenção incluem sitosterol, campesterol, estigmasterol, brassicasterol e seus derivados, sais e misturas dos mesmos. Por exemplo, Fitosterois* comercializados pela Sigma, EUA, contendo bsitosterol, campesterol e dihidrobrassicasterol. Ácidos biliares incluem ácido cólico, ácido chenodesoxicólico, ácido desoxicólico, ácido glicocólico, ácido taurocólico, ácido ursodesoxicólico e seus derivados, sais e misturas dos mesmos. Os esterois também podem ser ésteres de colesterol incluindo hemissuccinato de colesterol, sais de colesterol incluindo sulfato ácido de colesterol e sulfato de colesterol, ergosterol, ésteres de ergosterol incluindo hemissuccinato de ergosterol, sais de ergosterol incluindo sulfato ácido de ergosterol e sulfato de ergosterol, lanosterol, ésteres de lanosterol incluindo hemissuccinato de lanosterol, sais de lanosterol incluindo sulfato ácido de lanosterol e sulfato de lanosterol.

De acordo com uma modalidade da presente invenção, as nanopartículas compreendem um tensoativo que é uma mistura de esterol ou seus derivados ou seus sais e ácidos graxos ou seus sais. Em uma outra modalidade preferida, as nanopartículas compreendem éster de colesterol de ácidos polares. Em uma outra modalidade preferida, o tensoativo usado na nanodispersão é uma mistura de ácido caprílico e sulfato de colesteril. Ácido caprílico, também conhecido como ácido octanoico, pode ser usado nas modalidades em uma quantidade variando de cerca de 0,001% p/v a cerca de 5,0% p/v, mais preferivelmente de cerca de 0,01%p/v a cerca de l,0%p/v e ainda mais preferivelmente de cerca de 0,01%p/v a cerca de 0,5 % w /v. Sulfato de colesteril é usado nas modalidades da presente invenção em uma quantidade variando de cerca de 0,001% p/v a cerca de 5,0% p/v, mais preferivelmente de cerca de 0,01%p/v a cerca de l,0%p/v e ainda mais preferivelmente de cerca de 0,01%p/v a cerca de 0,5 %p/v.

Foi surpreendentemente descoberto que esta mistura particular de tensoativos fornece uma nanodispersão de derivados de taxano que permanece estável por mais de 6 horas mesmo em proporções baixas de tensoativo para derivados de taxano. Na nanodispersão da presente invenção, a proporção de tensoativo para derivados de taxano varia de cerca de 1: 5 a cerca de 1: 10. A nanodispersão da presente invenção permanece estável por mais de ' 6 horas particularmente, a nanodispersão compreendendo paclitaxel tendo se mostrado estável por 24 horas enquanto que a nanodispersão compreendendo docetaxel mostrou-se estável por 8 horas.

De acordo com uma outra modalidade preferida, o tensoativo usado é selecionado de ácido oleico e sulfato de colesteril e/ou misturas dos mesmos.

De acordo com uma outra modalidade da presente invenção, o tensoativo usado é selecionado de ácidos graxos saturados e ácidos biliares ou sais biliares e/ou misturas dos mesmos. De acordo com uma modalidade preferida, o tensoativo usado é selecionado do grupo que consiste em ácido caprílico e glicocolato de sódio ou ácido ursodesoxicólico e/ou misturas dos mesmos.

Os sais biliares, quando usados, são empregados em uma quantidade variando de cerca de 0,001% p/v a cerca de 5,0% p/v, mais preferivelmente de cerca de 0,01%p/v a cerca de l,0%p/v e ainda mais preferivelmente de cerca de 0,01%p/v a cerca de 0,75 %p/v.

As composições da presente invenção podem ainda compreender pequenas quantidades de lecitinas/fosfolipídios e/ou seus derivados. Pelo termo "pequenas quantidades", conforme usado neste relatório, entende-se que a proporção de fosfolipídios para o derivado de taxano varia de cerca de 1 : 4 a cerca de 1:10, que mesmo que fosfolipídios sejam usados eles serão usados em uma quantidade muito pequena, i.e., comparada à quantidade de derivado de taxano a quantidade de fosfolipídios é muito pequena. Geralmente, as composições da técnica anterior que são lipossômicas requerem grandes quantidades de fosfolipídios em relação à quantidade da droga.

Em algumas modalidades, quando fosfolipídios são usados em quantidades pequenas, exemplos desses fosfolipídios incluem, porém sem limitação, lecitinas naturais, lecitinas parcialmente hidrogenadas ou lecitinas hidrogenadas ou esfingolipídios. Lecitinas naturais por sua vez são misturas de diferentes fosfolipídios. Os fosfolipídios que podem ser usados nas composições da presente invenção são selecionados de fosfatidil colina, (dimiristoi 1fosfatidi1 colina, dipalmitoti1fosfatidi1 colina, diesteari1oi1fosfatidi1 colina, dioleoilfosfatidil colina, dilauriloilfosfatidil colina, 1-palmitoil-fosfatidil colina, l-miristoil-2-palmitoil fosfatidil colina, l-palmitoil-2-miristoil fosfatidil colina, l-estearoil-2-palmitoil fosfatidil colina); fosfatidil etanolamina (dimiristoil fosfatidil etanolamina, dipalmitoil fosfatidil etanolamina, diestearoil fosfatidil etanolamina, lisofatidiletanolamina); esfingomielinas (brain esfingomielina, dipalmitoil esfingomielina); lisolecitina; cerebrosideos, entre outros, e misturas dos mesmos. Outros derivados de polietileno glicol de lipidios tais como polietileno glicol-diestearoil fosfatidiletanolamina (PEG-DSPE), metoxipolietileno glicol-diestearoil fosfatidilcolina m-PEG-DSPC, entre outros, e misturas dos mesmos também podem ser usados nas composições da presente invenção. De preferência, o but ilenosideo que pode ser usado nas composições da presente invenção é m-PEG-DSPE (metoxi polietileno glicol-diesteroil fosfatidil etanolamina).

Em uma modalidade da presente invenção, o fosfolipidio usado é - mPEG-DSPE. Ele é usado em uma quantidade variando de cerca de 0,001%p/v a cerca de 10,0% p/v, mais preferivelmente de cerca de 0,01%p/v a cerca de 5,0%p/v e ainda mais preferivelmente de cerca de 0,03%p/v a cerca de 0,5 %p/v. 0 solvente não aquoso usado nas composições da presente invenção é um solvente no qual o derivado de taxano é relativamente solúvel. O solvente não aquoso é miscível em água ou em solventes aquosos. Exemplos de tais solventes miscíveis em água usados na presente invenção incluem, porém sem limitação, álcoois tais como etanol, n-propanol, isopropanol; glicóis tais como etileno glicol, propileno glicol, butileno glicol e seus derivados; polietileno glicóis como PEG 400 ou PEG 3350; polipropileno glicol e seus derivados tais como PPG-10 butanodiol, PPG-10 metil glicose éter, PPG-20, PPG- 15 esteril éter; glicerol; glicofurol, entre outros, e misturas dos mesmos.

Em uma modalidade da presente invenção, o solvente não aquoso pode ser selecionado do grupo que consiste em álcoois, polietileno glicóis e/ou misturas dos mesmos. Em uma modalidade preferida da presente invenção, uma mistura de etanol e PEG (polietileno glicol) é usada como o solvente miscível em água. Etanol é usado na composição de nanodispersão da presente invenção em uma quantidade variando de cerca de 0,001% p/v a cerca de 5% p/v, mais preferivelmente de cerca de 0,05% p/v a cerca de 0,5% p/v e ainda mais preferivelmente de cerca de 0,1% p/v a cerca de 0,25% p/v. Polietileno glicóis que são de preferência usados incluem PEG-400 e PEG-3350. O PEG-400 é usado nas modalidades da presente invenção em uma quantidade variando de cerca de 0,01% p/v a cerca de 20,0% p/v, mais preferivelmente de cerca de 0,05% p/v a cerca de 5,0% p/v e ainda mais preferivelmente de cerca de 1,0% p/v a cerca de 2,5% p/v. O PEG-3350 é usado nas modalidades da presente invenção em uma quantidade variando de cerca de 0,001% p/v a cerca de 10,0% p/v, mais preferivelmente de cerca de 0,05% p/v a cerca de 5,0% p/v e ainda mais preferivelmente de cerca de 0,1% p/v a cerca de 3% p/v.

Geralmente, é desejável um pré-concentrado de taxano, i.e., a solução depois de diluição com o veículo aquoso dá uma nanodispersão que permanece estável por pelo menos cerca de 4 horas. Este tempo é o tempo durante o qual a nanodispersão pode ser administrada ao paciente na forma de infusão. Portanto, sempre é desejável obter um mínimo de 4 horas de estabilidade da nanodispersão da presente invenção. 0 veículo pode ainda compreender uma solução de dextrose a cerca de 5% a cerca de 10,0 % p/v para injeção ou qualquer outro veículo líquido aquoso farmaceuticamente aceitável para administração intravenosa e misturas dos mesmos. Em uma das modalidades da presente invenção onde o derivado de taxano é paclitaxel, o veículo aquoso compreende ainda uma solução de dextrose a 5 % para melhorar esta estabilidade mas estabilizantes adicionais também podem estar presentes na fase aquosa. Exemplos de tais estabilizantes são hetamido, dextrana, hialuronato de sódio, glutationa, ornitina-L-aspartato, entre outros, e misturas dos mesmos. Em uma outra modalidade, verificamos que o uso de 0,01 % de arginina em uma solução de dextrose a 5 % deu uma nanodispersão de docetaxel que foi estável por 8 horas, ao passo que o uso de 1 % de histidina em uma solução de dextrose a resultou em uma nanodispersão de docetaxel que foi estável por 5 horas. Nas modalidades em que docetaxel é usado como o derivado de taxano, o veículo aquoso pode compreender ainda hetamido, dextrana, hialuronato de sódio, glutationa, ornitina-aspartato, aminoácidos tais como histidina, arginina, entre outros, e misturas dos mesmos. Esses estabilizantes adicionais podem estar presentes em quantidades variando de cerca de 0,02 % a cerca de 5 % do veículo aquoso. Em uma modalidade preferida, verificamos que o uso de 0,5 % de hetamido em uma solução de dextrose a 5 % para uma nanodispersão de docetaxel foi estável em termos de tamanho de partícula por mais de 5 horas. A nanodispersão de derivados de taxano da presente invenção podem ser tipicamente preparados por qualquer um dos processos apresentados abaixo: 1) 0 componente terapeuticamente ativo (derivado de taxano e/ou outros agentes), polímeros e tensoativos selecionados de ácidos graxos ou seus sais, esterol ou seus derivados ou seus sais e misturas dos mesmos são dissolvidos em um solvente miscível em água tal como etanol e/ou PEG, com agitação e aquecimento para obter uma solução concentrada da droga. A solução assim obtida é filtrada através de um filtro de membrana. A esta solução, um veículo líquido aquoso (solução de dextrose a 5%) é lentamente adicionado e a mistura é agitada, levando assim à formação da nanodispersão da presente invenção. A nanodispersão assim formada é opcionalmente homogeneizada e/ou sonicada, filtrada e liofoilizada. O pó liofilizado do medicamento pode ser reconstituído com um meio aquoso, voltando a formar a nanodispersão da presente invenção, antes de sua administração aos pacientes. 2) 0 derivado de taxano, polímeros e tensoativos selecionados de ácidos graxos ou seus sais, esterol ou seus derivados ou seus sais e misturas dos mesmos são dissolvidos em um solvente miscível em água tal como etanol e/ou PEG com agitação e aquecimento para obter uma solução concentrada da droga. A solução assim obtida é filtrada através de um filtro de membrana e é adicionada a um meio aquoso (solução de dextrose a 5%) e a mistura é agitada, levando assim à formação da nanodispersão da presente invenção. A nanodispersão assim formada é opcionalmente homogeneizada e/ou sonicada, filtrada e liofoilizada. 0 pó liofilizado do medicamento pode ser reconstituído com o meio aquoso, voltando a formar a nanodispersão da presente invenção, antes de sua administração aos pacientes. 3) 0 derivado de taxano e tensoativos compreendendo uma mistura de ácidos graxos ou seus sais e esterol ou seus derivados ou seus sais são dissolvidos em um solvente miscível em água tal como etanol e/ou PEG com um leve aquecimento a 4 0°C em um balão de fundo redondo, e o solvente é evaporado para formar um filme fino da droga. Os polímeros são dissolvidos na quantidade necessária de um meio aquoso e esta solução é adicionada ao filme com agitação suave por 3-4 horas, levando assim à formação da nanodispersão da presente invenção. A nanodispersão assim formada é opcionalmente homogeneizada e/ou sonicada, filtrada e liofoilizada. 0 pó liofilizado do medicamento pode ser reconstituído com o meio aquoso, voltando a formar a nanodispersão da presente invenção, antes de sua administração aos pacientes.

Como a nanodispersão da presente invenção é uma nanodispersão coloidal de um derivado de taxano compreendendo nanopartículas com um tamanho médio inferior a 300 nm, ela pode ser analisada quanto a sua estabilidade física e química. Foi observado que as partículas não degradam quando armazenadas à temperatura ambiente por cerca de 8 horas a cerca de 24 horas e a nanodispersão não apresenta sinais de alteração no aspecto, indicando que a nanodispersão é estável pelo período de tempo desejado antes e durante sua administração.

Também, quando uma solução de um derivado de taxano e/ou outros agentes em um solvente miscível em água foi testada, foi observado que a solução permanece física e quimicamente estável por um período de pelo menos 3 meses, sem qualquer alteração significativa no ensaio da droga e sem agregação ou alteração significativa no aspecto da formulação. As observações estão ilustradas nos exemplos que se seguem. A nanodispersão da presente invenção pode ser apresentada como um kit com dois ou mais recipientes, por exemplo dois recipientes, onde o primeiro recipiente compreendendo uma solução de um derivado de taxano, um polímero e um tensoativo compreendendo uma mistura de ácidos graxos ou seus sais e esterol ou seus derivados ou seus sais em um solvente miscível em água, e um segundo recipiente compreendendo um veículo líquido aquoso, de modo que a adição do conteúdo do segundo recipiente ao conteúdo do primeiro recipiente ou vice-versa, com agitação suave, resulta na formação da nanodispersão da presente invenção e é adequada para administração intravenosa. Um recipiente adicional pode conter um terceiro componente a ser misturado antes da formação da nanodispersão de taxano ou depois que a nanodispersão do referido taxano é formada. A presente invenção também fornece um kit com dois recipientes, o primeiro recipiente compreendendo uma forma liofilizada da nanodispersão e um segundo recipiente compreendendo um veículo líquido aquoso para que, antes de sua administração aos pacientes, o conteúdo do segundo recipiente seja adicionado ao conteúdo do primeiro recipiente ou vice-versa com agitação, resultando na formação de uma nanodispersão da presente invenção. A administração da nanodispersão da presente invenção a pacientes com necessidade dá mesma oferece um método eficiente de tratamento de vários tipos de câncer conhecidos na literatura. A eficácia e a toxicidade da nanodispersão da presente invenção foram comparadas com aquelas de produtos do tipo taxei comercialmente disponíveis tais como Abraxane®, Oncotaxel®, entre outros. A eficácia foi avaliada com base nos seguintes parâmetros: 1. Avaliação do tumor: Os tumores foram avaliados quanto à redução no volume do tumor (mm3) em relação ao tempo em dias. Os tumores foram avaliados por um período de 42 dias. 2. Percentagem T/C= (volume médio do tumor do grupo tratado com droga no dia X volume médio do tumor do grupo tratado com droga no dia X) x 100 3. Regressão do tumor: A regressão do tumor em um modelo de animal experimental com tumor caracteriza pontos de interesse importantes de relevância clínica. A regressão do tumor foi registrada como parcial (PR) quando o volume do tumor diminuiu menos de 50% do volume do tumor no início do tratamento sem atingir uma redução abaixo de um valor mensurável, ou como completo (CR) quando a massa tumoral deixou de ser palpável. 4. Atraso de crescimento específico do tumor (SGD) é definido como a razão da diferença no tempo para tumores tratados com a droga e tumores de controle para atingir um dado volume (v) e o tempo para tumores de controle atingirem o mesmo volume (V) onde V é o volume de um tumor depois de duas duplicações do volume em relação ao volume inicial do tumor no início do tratamento e Tv é o tempo para os grupos tratados com a droga e ou os grupos de controle atingirem um dado volume. Se o valor V não foi atingido no animal do grupo de teste ou do grupo de referência até o dia 45, o mesmo valor *dia 45) foi considerado em Tv para aquele animal. 0 teste é considerado eficaz se o parâmetro SGD for maior que 1. 5. As alterações no peso corporal foram calculados como (peso do animal no dia X - peso do animal no dia 0 para o peso do animal no dia 0) X 100. 6. A análise da sobrevivência foi feita pelo método de Kaplan Meier. Valores de P <0,05 foram considerados significativos.

Apesar de a eficácia da nanodispersão da presente invenção ter sido avaliada pelos parâmetros mencionados acima, qualquer outro método de teste adequado ou similar pode ser aplicado para determinar a eficácia da nanodispersão. Verificamos que a nanodispersão testada da presente invenção era eficácia como exemplificados nos exemplos 27, 28 e 29. A toxicidade da nanodispersão da presente invenção foi determinada por administração do teste a camundongos CD-I por via intravenosa. Depois da última injeção, os animais foram observados por 1 hora e entre 4 e 6 horas após a administração. Em seguida, os camundongos foram observados duas vezes ao dia em relação aos sintomas clínicas e à mortalidade por 15 dias. 0 peso corporal de todos os animais sobreviventes foi registrado nos dias 1, 7 e 14 após administração da medicação. No dia 15, foi feita a necrópsia dos animais sobreviventes e a patologia grosseira, quando ocorreu, foi registrada. Os resultados dos estudos de toxicidade foram descritos detalhadamente no exemplo 25 e 26 para a nanodispersão de paclitaxel e para a nanodispersão de docetaxel, respectivamente.

Embora a presente invenção tenha sido descrito de modo geral acima, aspectos adicionados estão ainda discutidos e ilustrados com referência aos exemplos abaixo. Entretanto, os exemplos são meramente ilustrativos da invenção e não devem ser considerados limitativos da mesma. EXEMPLO 1-5 Nanodispersões da presente invenção estão descritas na Tabela 1 abaixo.

Tabela 1 Procedimento: • A droga, sulfato de colesteril, ácido caprílico e PVP K-30 foram pesados com exatidão e introduzidos em um frasco. • Seu conteúdo foi dissolvido na quantidade necessária de etanol absoluto e PEG-400 com agitação e com aquecimento a 45°C para obter uma solução. • A solução foi filtrada através de um filtro de membrana de PVDF de 0,2μ PVDF. • A solução de dextrose (5%) foi então adicionada lentamente ao frasco contendo a solução de droga e o frasco foi sacudido suavemente para obter uma nanodispersão transparente a translúcida. • 0 pH da nanodispersão é verificado por um medidor de pH (Mettler Toledo-seven easy). • 0 tamanho de partícula da nanodispersão é medido pelo analisador de tamanho de partícula (Nano-ZS, Malvern) 0 visual aspecto, o pH e o tamanho de partícula das composições observados estão resumidos na tabela 2 abaixo.

Tabela 2 Pode-se observar que as nanodispersões da presente invenção são fisicamente estáveis, sem qualquer agregação ou alteração significativa no aspecto da formulação depois de armazenada for 24 horas à temperatura ambiente. A composição de nanodispersão destes exemplos contém 150 mg/100 ml de paclitaxel. Para a dose humana de aproximadamente 300 mg de paclitaxel para uma pessoa de 70 kg, podem ser administrados ao paciente 200 ml de cada composição de nanodispersão. Dessa forma 20 a 80 mg de sulfato de colesteril, 25 a 100 mg ácido caprílico, 65 a 250 mg de PVP e cerca de 300mg de etanol seriam administrados com uma única dose de adulto da composição de paclitaxel dos exemplos 1 a 5. Assim sendo a composição da presente invenção fornece partículas nanodimensionadas com quantidades muito baixas de excipientes coadministradas com o agente ativo.

As composições farmacêuticas descritas nos exemplos 6-7 abaixo são soluções concentradas que precisam ser diluídas várias vezes com um diluente (solução de dextrose a 5% p/v) para obter a nanodispersão da presente invenção antes da administração ao paciente.

Embora a invenção tenha sido descrita em termos de modalidades e aplicações particulares, o especialista na técnica, à luz deste ensinamento, pode gerar modalidades adicionais e modificações sem se afastar do espírito ou sem ultrapassar o escopo da invenção reivindicada. Devemos enfatizar que as modalidades da presente invenção acima descritas, particularmente quaisquer modalidades "preferidas", são meros exemplos possíveis de implementações da invenção, meramente apresentados com a finalidade de oferecer uma compreensão clara dos princípios da invenção.

Por conseguinte, deve ficar entendido que os desenhos e descrições contidos neste relatório são preferidos a título de exemplo para facilitar a compreensão da invenção e não devem ser interpretados como limitativos do escopo da mesma. EXEMPLO 6-7 Composições farmacêuticas da presente invenção como solução concentrada do derivado de taxano estão descritas na Tabela 3 abaixo.

Tabela 3 Procedimento: • A droga, sulfato de colesteril, ácido caprílico e PVP K-30 foram pesados com exatidão e introduzidos em um recipiente de vidro. • Seu conteúdo foi dissolvido na quantidade necessária de etanol absoluto e PEG-400 com agitação e com aquecimento a 45°C para obter uma solução concentrada da droga. • A solução foi filtrada através de um filtro de membrana de PVDF de 0,2μ PVDF. • A solução do exemplo 6 foi introduzida em frascos (1 g por frasco contendo 60 mg da droga) e carregada para obter estabilidade.

Amostras da estabilidade foram analisadas na forma de nanodispersão. Uma solução de dextrose (5%p/v) (40 ml) foi lentamente adicionada ao frasco contendo o concentrado de droga (60 mg de droga) com agitação suave para obter uma nanodispersão transparente a translúcida da droga com diluição de 1,5 mg/ml. A nanodispersão foi analisada quanto aos seguintes testes: aspecto, ensaio da droga, pH (Mettler Toledo-seven easy, medidor de pH) e tamanho de partícula (Nano-ZS, analisador de tamanho de partícula Malvern), descritos na tabela 4 abaixo.

Tabela 4: Dados de estabilidade do exemplo 6 Não houve alteração no ensaio de paclitaxel durante três meses sugerindo que a formulação é quimicamente estável. Também, pode-se observar que as composições da presente invenção são fisicamente estáveis, sem qualquer agregação ou alteração significativa no aspecto da formulação depois de armazenada. EXEMPLO 8 Composições farmacêuticas da invenção· usando PVP K-12 estão descritas na Tabela 5 abaixo. 0 procedimento para a preparação da nanodispersão é o mesmo que aquele descrito no exemplo 1-7.

Tabela 5 0 aspecto visual, pH e o tamanho de partícula das composições foram observados e estão resumidos na tabela 6 abaixo.

Tabela 6 RT: temperatura ambiente Pode-se observar que as composições da presente invenção são fisicamente estáveis, sem qualquer agregação ou alteração significativa no aspecto da formulação depois de armazenada por 24 horas à temperatura ambiente. EXEMPLO 9 As composições da presente invenção como solução concentrado de derivado de taxano estão descritas na tabela 7 abaixo.

Tabela 7 Amostras de estabilidade foram analisadas da maneira descrita abaixo e os dados de estabilidade estão apresentados na Tabela 8. 0 ensaio da droga foi feita na solução concentrada de droga. Ao passo que para outras observações, uma solução de dextrose (5%p/v) (40 ml) foi lentamente adicionada ao frasco contendo o concentrado de droga (60 mg de droga) com agitação suave para obter uma nanodispersão transparente a translúcida da droga com diluição de 1,5 mg/ml. A nanodispersão foi então analisada quanto aos seguintes testes: aspecto, pH (Mettler Toledo-seven easy, medidor de pH) e tamanho de partícula (Nano-ZS, analisador de tamanho de partícula Malvern) Tabela 8: Dados de estabilidade do exemplo 9 RH: umidade relativa. Não houve alteração no ensaio de paclitaxel durante 3 meses sugerindo que a formulação é quimicamente estável depois de armazenada. Também, pode-se observar que as composições da presente invenção são fisicamente estáveis, sem qualquer agregação ou alteração significativa no aspecto da formulação depois de armazenada em várias condições de armazenamento. A figura 4 (a) indica um histograma mostrando a distribuição de tamanhos das partículas da nanodispersão no momento inicial e a figura 4 (b) indica um histograma mostrando a distribuição de tamanhos das partículas da nanodispersão de paclitaxel do exemplo 9 quando armazenada à temperatura ambiente por 24 horas. Os histogramas indicam que depois de armazenamento à temperatura ambiente por cerca de 24 horas, o tamanho de partícula médio era quase constante mostrando a natureza estável da nanodispersão. EXEMPLO 10 Uma composição farmacêutica da presente invenção contendo PEG-3350 está descrita na Tabela 9.

Tabela 9 Preparação: • A droga, sulfato de colesteril, ácido caprílico, PVP K-30 e PEG 3350 foram pesados e introduzidos em um frasco. • O conteúdo do frasco foi dissolvido na quantidade necessária de etanol absoluto com agitação e aquecimento a 45°C até ser obtida uma solução límpida. • A solução etanólica foi lentamente adicionada à solução de dextrose (5%) com agitação para formar uma nanodispersão. • 0 pH da nanodispersão é verificado por um medidor de pH (Mettler Toledo-seven easy). • O tamanho de partícula da nanodispersão foi verificado pelo analisador de tamanho de partícula (Nano-ZS, analisador de tamanho de partícula Malvern.) • A nanodispersão é filtrada através de um filtro de membrana de 0,2μ. • 20 ml da nanodispersão acima foram introduzidos no frasco e liofilizados (Virtis). O visual aspecto e the tamanho de partícula da nanodispersão antes da liofilização foi observado imediatamente depois de a nanodispersão ser preparada e em 24 e 48 horas depois de armazenamento à temperatura ambiente (RT). Os dados estão resumidos na Tabela 10 abaixo: Tabela 10 RT: temperatura ambiente Pode-se observar que a composição da presente invenção é fisicamente estável sem qualquer agregação ou alteração significativa no aspecto da formulação depois de armazenada for 24 to 48 horas à temperatura ambiente.

Reconstituição da torta liofilizada: Depois da liofilização, a torta obtida no frasco é dispersada sendo injetada em água para injeção (20 ml) com agitação suave para obter uma nanodispersão de paclitaxel com uma concentração de 1,5 mg/ml. O conteúdo por frasco e as características da nanodispersão reconstituída estão dados, respectivamente, nas Tabelas 11 e 12 abaixo: Tabela 11 Cada frasco continha 30 mg de paclitaxel na composição. Para a dose humana de aproximadamente 300 mg de paclitaxel para uma pessoa de 70 kg, 10 frascos da composição acima podem ser usados e reconstituídos em 60 a 600 ml de diluente tal como WFI para obter 0,5 a 5,0 mg/ml de infusão de paclitaxel. Esta composição diluída, se administrada ao paciente, vai conter 20 mg de sulfato de colesteril, 25 mg de ácido caprílico e 125 mg de PVP.

Tabela 12 Pode-se observar que a composição da presente invenção é fisicamente estável sem qualquer agregação ou alteração significativo no aspecto da formulação, depois de armazenada por 24 horas à temperatura ambiente.

EXEMPLO 11 E EXEMPLOS COMPARATIVOS I -III

Tabela 13 Tabela 14: OBSERVAÇÕES ’ EXEMPLO 12 Composições farmacêuticas da invenção estão descritas ainda na Tabela 15 e as observações para vários parâmetros estão descritas na tabela 16. EXEMPLO 13-14 Composições de nanodispersão da presente invenção preparadas usando ácido oleico e ácido esteárico estão descritas na Tabela 17 abaixo: Tabela 17 0 procedimento para a preparação destas composições é o mesmo que aquele descrito no exemplo 1-5. As nanodispersões assim obtidas eram quase transparentes a translúcidas tinham um tamanho de partícula médio de 134 nm e 155 nm. Respectivamente. EXEMPLO 15 Uma composição farmacêutica da presente invenção, preparada usando colesterol está descrita na tabela 18 abaixo.

Tabela 18 Procedimento: • A droga, colesterol, ácido caprílico e PVP K-30 foram pesados com exatidão e introduzidos em um recipiente de vidro. • Seu conteúdo foi dissolvido na quantidade necessária de etanol absoluto e PEG-400 com agitação e com aquecimento a 45 °C para obter uma solução concentrada. • A solução concentrada foi filtrada através de um filtro de membrana de PVDF de 0,2μ. • A solução de dextrose (5% p/v) foi lentamente adicionada ao frasco contendo a solução concentrada (100 mg de droga) com agitação suave para obter uma nanodispersão transparente a translúcida a uma diluição de 1,5mg/ml. • O pH da nanodispersão é verificado por um medidor de pH (Mettler Toledo-seven easy). • O tamanho de partícula da nanodispersão foi verificado pelo analisador de tamanho de partícula (Nano-ZS, Malvern). A composição de nanodispersão deste exemplo era quase transparente a translúcida e tinha um tamanho de partícula médio de 217 nm. EXEMPLO 16 Composições farmacêuticas da invenção preparadas usando ácidos/sais biliares (glicocolato de sódio e ácido ursodesoxicólico) estão descritas na tabela 19 abaixo.

Tabela 19 Procedimento: • A droga, ácido/sal biliar, ácido caprílico, PVP K-30 foram pesados com exatidão e introduzidos em um recipiente de vidro. • Seu conteúdo foi dissolvido na quantidade necessária de etanol absoluto e PEG-400 com agitação e com aquecimento a 45°C para obter uma solução concentrada. • A solução concentrada foi filtrada através de um filtro de membrana de PVDF de 0,2μ. • A solução de dextrose (5% p/v) foi lentamente adicionada ao frasco contendo a solução concentrada (100 mg de droga) com agitação suave para obter uma nanodispersão translúcida a uma diluição de l,5mg/ml. • O pH da nanodispersão é verificado por um medidor de pH (Mettler Toledo-seven easy). • O tamanho de partícula da nanodispersão foi verificado pelo analisador de tamanho de partícula (Nano-ZS, Malvern).

As composições de nanodispersão produzidas desta maneira tinham um aspecto quase translúcido e um tamanho de partícula médio de 197 nm e 180 nm, respectivamente. EXEMPLO 17 Composições farmacêuticas da presente invenção contendo PVP K-90 estão descritas na Tabela 20.

Tabela 20 O procedimento para preparação é o mesmo que aquele descrito no exemplo 1-5. A composição de nanodispersão produzida desta maneira tinha um aspecto transparente a translúcido e tinha um tamanho de partícula médio de 2 0 7 nm. EXEMPLO 18 Uma composição farmacêutica da presente invenção contendo sal de ácido hialurônico está descrita na Tabela 21.

Tabela 21 Procedimento: • A droga, sulfato de colesteril e ácido caprílico foram pesados com exatidão e introduzidos em um recipiente de vidro. • Seu conteúdo foi dissolvido na quantidade necessária de etanol absoluto e PEG-400 com agitação e com aquecimento a 45°C para obter uma solução concentrada da droga. • A solução foi filtrada através de um filtro de membrana de PVDF de um filtro de membrana de PVDF de 0,2μ. • Hialuronato de sódio foi dissolvido na solução de dextrose (5%p/v) e a solução foi lentamente adicionada ao frasco contendo a solução concentrada de droga (30mg), seguida da adição do restante da solução de dextrose a 5% p/v com agitação suave para obter uma nanodispersão translúcida a uma diluição de l,5mg/ml. • 0 pH da nanodispersão foi verificado usando um medidor de pH (Mettler Toledo-seven easy). • 0 tamanho de partícula da nanodispersão foi verificado pelo analisador de tamanho de partícula (Nano-ZS, Malvern). A composição de nanodispersão produzida desta maneira tinha um aspecto quase translúcido e tinha um tamanho de partícula médio de 263 nm. EXEMPLO 19 Uma composição farmacêutica da presente invenção contendo sal de ácido poliglutâmico está descrita na Tabela 22.

Tabela 22 0 procedimento para preparação da nanodispersão é o mesmo que aqueles descrito no exemplo 18. A composição de nanodispersão produzida desta maneira tinha um aspecto quase translúcido e tinha um tamanho de partícula médio de 295 nm. EXEMPLO 20 Uma composição farmacêutica da presente invenção contendo o agente terapêutico adicional dexametasona está descrita na Tabela 23 abaixo.

Tabela 23 A composição de nanodispersão produzida desta maneira tinha um aspecto quase translúcido e tinha um tamanho de partícula médio de 185 nm. EXEMPLO 21 Composições farmacêuticas da presente invenção contendo docetaxel estão descritas na Tabela 2 4 .

Tabela 24 A nanodispersão deste exemplo foi preparada pelo procedimento dado nos exemplos 1-5. A nanodispersão era branca com uma coloração azulada e tinha um tamanho de partícula médio de 172 nm. A composição contém 1,50 mg/ ml de docetaxel. Para a dose humana de aproximadamente 18 0 mg de docetaxel para uma pessoa de 70 kg, podem ser usados 120 ml da composição de nanodispersão para administração ao paciente, de modo que a composição contém 180 mg de docetaxel. O paciente ao qual a composição deste exemplo é administrada recebe 12 mg de sulfato de colesteril, 15 mg de ácido caprílico, 150 mg de PVP e cerca de 180 mg de etanol. Assim sendo, a composição da presente invenção fornece partículas nanodimensionadas com uma quantidade mínima de excipientes coadministrados com o agente ativo. Etanol, se houver, está presente em quantidades não adictivas. EXEMPLO 22 Uma composição farmacêutica da presente invenção contendo docetaxel está dada abaixo.

Tabela 25 0 pré-concentrado de docetaxel de acordo com a fórmula dada na Tabela 25 foi preparado usando polivinilpirrolidona de diferentes pesos moleculares.

Descobrimos que o peso molecular aumentado da polivinilpirrolidona melhorou a estabilidade da nanodispersão em termos de agregação e o tempo durante o qual a nanodispersão permanece estável.

EXEMPLO 23 E EXEMPLOS COMPARATIVOS IV, V e VI

Tabela 26 • As quantidades especificadas de droga, sulfato de colesteril e ácido caprílico foram pesadas com exatidão e introduzidas em um recipiente de vidro. • Seu conteúdo foi dissolvido na quantidade necessária de etanol absoluto e PEG-400 com agitação e com aquecimento a 45°C para obter uma solução concentrada da droga. • A solução foi filtrada através de um filtro de membrana de PVDF de um filtro de membrana de PVDF de 0,2μ. • Uma solução de dextrose (5%p/v) foi preparada e foi lentamente adicionada ao frasco contendo a solução concentrada da droga (30mg), seguida da adição do restante da solução de dextrose a 5% p/v com agitação suave para obter uma nanodispersão translúcida a uma diluição de 1,5mg/ml. • 0 pH da nanodispersão foi verificado pelo usando um medidor de pH (Mettler Toledo-seven easy). • 0 tamanho de partícula da nanodispersão foi verificado pelo analisador de tamanho de partícula (Nano-ZS, Malvern.

Tabela 27 -Observações EXEMPLO 24 ’ Tabela 28 As quantidades especificadas de docetaxel, sulfato de sódio de colesteril, ácido caprílico e polivinilpirrolidona foram pesadas e introduzidas em um frasco. A quantidade desidratada de álcool e polietileno glicol foram misturadas e dissolvidas em um banho sonicador com ligeiro aquecimento a 40°C, até ser obtido um pré-concentrado transparente e límpido. 0 pré-concentrado foi diluído com um veículo aquoso contendo diferentes aditivos, como mostrado na tabela 29. A nanodispersão assim formada foi submetida à medição do tamanho de partícula médio usando um analisador de tamanho de partícula Malvern.

Tabela 29: Efeito de aditivos no veículo aquoso sobre a estabilidade da nanodispersão Resultados da distribuição de tamanhos de partícula do exemplo no qual 0,5 % de histidina, 0,001% de edetato dissódico em injeção de dextrose a 5% estão representados na figura 5 (a) e na figura 5 (b) . A figura 5 (a) mostra um histograma mostrando a distribuição de tamanhos de partícula da nanodispersão no momento inicial (tamanho de partícula médio = 98 nm e a figura 5 (b) ) em 8 horas com um tamanho de partícula médio = 96,4 nm indicando a natureza estável da nanodispersão. EXEMPLO 25 Toxicidade aguda da nanodispersão de Paclitaxel da presente invenção em camundongos CD-I

Itens em teste: 1. A composição do exemplo 12a foi usada depois de diluída em dextrose 5% p/v a lOmg/ml junto com placebo 2. A composição do exemplo 9 foi usada depois de diluída em dextrose 5% p/v to 8 mg/ml junto com placebo e 3. ABRAXANE ® diluído com cloreto de sódio a 0,9% para obter lOmg/ml.

Camundongos CD-I foram aclimatados às condições de um sistema de gaiolas ventiladas individualmente (IVC) em um número de quartil de animais igual a 2, por 5 dias. Depois de ter saúde verificada por um veterinário, 5 camundongos machos e 5 camundongos fêmeas foram colocados em cada grupo de dose. Os camundongos tiveram livre acesso à água e comida durante todo o período experimental. Os itens em teste e placebo nas doses abaixo foram administrados por via intravenosa, como tais sem qualquer diluição em qualquer veículo, através da veia terminal do rabo dos camundongos usando uma agulha calibre 26 presa a uma seringa graduada. Antes da injeção, o rabo foi esfregado com água quente para dilatar os vasos sanguíneos. Doses totais de 150, 200, 250, 300, 350 e 400mg/kg foram testadas para a nanodispersão de Paclitaxel (Exemplo 12), doses de 250, 300 e 400mg/kg foram testadas para o placebo (placebo do exemplo 12), doses de 200 e 250mg/kg foram testadas para a nanodispersão de Paclitaxel (Exemplo 9) , uma dose de 250mg/kg foi testada para o placebo (Placebo do exemplo 9) , e uma dose de 300mg/kg foi testada para o ABRAXANE®. Todas estas formulações foram administradaos aos camundongos CD-I por via intravenosa. 3 doses fracionadas com um intervalo de uma hora entre duas doses/injeções. Depois da última injeção, os animais foram observados duas vezes ao dia 1 hora e entre 4-6 horas após a medicação. Em seguida, os camundongos foram observados duas vezes ao dia para registro de sintomas tóxicos e mortalidade, quando houvesse, até o 45° dia.

Tabela 30 Os resultados indicaram que a nanodispersão de Paclitaxel do exemplo 12 apresentou 90% de mortalidade a 400mg/kg e zero por cento de mortalidade a uma dose de 300mg/kg. Não foi observada qualquer mortalidade com o placebo do exemplo 12 na dose mais alta testada (400mg/kg). Na extrapolação linear da nanodispersão de Paclitaxel, os valores de LD50 e LDio obtidos foram 342,5mg/kg e 310mg/kg, respectivamente. Da mesma forma, a nanodispersão de Paclitaxel do exemplo 9 mostrou 20% de mortalidade a 250mg/kg e o LD50 da nanodispersão de Paclitaxel foi >250mg/kg. Não foi observada qualquer mortalidade com o placebo do exemplo 9 na dose mais alta testada (250mg/kg). A formulação de nanopartículas comercializada, ABRAXANE® apresentou toxicidade de 90% a 300mg/kg. Estes dados mostram nitidamente que a composição de nanodispersão da presente invenção pode ser menos tóxica que o produto comercializado ABRAXANE®. Também, comparando o valor de LD50 da composição de nanodispersão da presente invenção (342,5 mg/kg) com o valor de LD50 da formulação comercializada de TAXOL (7,5-12,0 mg/Kg; Patente US N° 6753006) , é evidente que o valor de LD50 observado para a nanodispersão de Paclitaxel da presente invenção é muito mais alto que o valor de LD50 da solução comercializada de TAXOL.

Toxicidade aguda da nanodispersão de Paclitaxel da presente invenção em ratos SD

Itens em teste: 1. A composição do exemplo 9 foi usada depois de diluída em dextrose 5% p/v a 10 mg/ml junto com placebo, e 2. ABRAXANE® foi diluído com cloreto de sódio a 0,9 % para obter 5mg/ml.

Os ratos foram aclimatados às condições de um sistema de gaiolas ventiladas individualmente (IVC) em um número de quartil de animais igual a 3, por 5 dias. Depois de ter saúde verificada por um veterinário, 5 ratos machos e 5 ratos fêmeas foram colocados em cada grupo de dose. Os ratos tiveram livre acesso à água e comida durante todo o período experimental. Os itens em teste e placebo nas doses abaixo foram administrados por via intravenosa, como tais sem qualquer diluição em qualquer veículo, através da veia terminal do rabo dos ratos usando uma agulha calibre 26 presa a uma seringa graduada. Antes da injeção, o rabo foi esfregado com água quente para dilatar os vasos sanguíneos. Depois da injeção, os animais foram observados duas vezes ao dia 1 hora e entre 4-6 horas após a medicação. Em seguida, os ratos foram observados duas vezes ao dia para registro de sintomas tóxicos e mortalidade, quando houvesse, até o 14° dia.

Tabela 31 Os resultados indicam que a nanodispersão de Paclitaxel da presente invenção do exemplo 9 apresentaram 40% de mortalidade a 90mg/kg. Não foi observada qualquer mortalidade com o placebo do exemplo 9 na dose mais alta testada (90mg/kg). O LD5o para a nanodispersão de Paclitaxel da presente invenção foi >90mg/kg. A formulação de nanopartículas comercializada, ABRAXANE® apresentou toxicidade de 100% a 70mg/kg.

Os resultados indicam nitidamente que a composição de nanodispersão da presente invenção minimiza a toxicidade associada à droga e amplia a faixa terapêutica administrável eficaz da droga e é menos tóxica que as formulações existentes no mercado tais como ABRAXANE®. EXEMPLO 26 A composição do exemplo 24B foi usada depois de diluída em dextrose 5% p/v para obter lOmg/ml junto com placebo e a formulação comercializada Taxotere® diluída até lOmg/ml foram submetidas ao estudo de toxicidade aguda da nanodispersão de Docetaxel e Placebo em camundongos CD-I por via intravenosa. Os camundongos foram aclimatados às condições do recinto experimental em um número de quartil de animais igual a 2, por 6 dias. Depois de ter saúde verificada por um veterinário, 5 camundongos machos e 5 camundongos fêmeas foram colocados aleatoriamente em cada grupo de dose. Os camundongos tiveram livre acesso à água e comida durante todo o período de estudo. Os itens em teste e placebo foram administrados por via intravenosa, como tais sem qualquer diluição em qualquer veículo, através da veia terminal do rabo dos camundongos usando uma agulha calibre 26 presa a uma seringa graduada. Antes da injeção, o rabo foi esfregado com água quente para dilatar os vasos sanguíneos. Doses totais de 200, 250 e 300 mg/kg foram testadas para a nanodispersão de Docetaxel (Exemplo 24B), placebo na dose mais alta (Placebo do exemplo 24B). Estas formulações foram administradas aos camundongos CD-I por via intravenosa. 3 doses fracionadas com um intervalo de uma hora entre duas doses/inj eções. Depois da última injeção, os animais foram observados duas vezes ao dia 1 hora e entre 4-6 horas após a medicação. Em seguida, os camundongos foram observados duas vezes ao dia para registro de sintomas tóxicos e mortalidade durante 15 dias. O peso corporal de todos os animais sobreviventes foi registrado nos 1°, 7° e 14° dias após administração da medicação. No 15° dia, foi feita a necrópsia dos animais sobreviventes, e patologia grosseira, quando ocorreu, foi registrada.

Tabela 32: Resultados do estudo de toxicidade aguda Os resultados indicaram que a nanodispersão de Docetaxel da presente invenção do exemplo -24B apresentou 10% de mortalidade a 300mg/kg e LDo a uma dose de 250mg/kg. Não foi observada qualquer mortalidade com o placebo na dose mais alta testada (300mg/kg) . A formulação comercializada, Taxotere® apresentou toxicidade de 10% a 120mg/kg. É evidente que o valor de LDi0 observado para a nanodispersão de Docetaxel da presente invenção é muito mais alto que o valor de LDi0 da formulação de Taxotere®solução. O valor de LDi0 reportado do Taxotere®é 95mg/kg (Ref.: SBA-NDA-2044 9) . EXEMPLO 27 Eficácia antitumoral (regressão do tumor) da nanodispersão de Paclitaxel (da composição do exemplo 12a) em camundongos nus que receberam implantes de xenoenxertos de tumor MX-1.

Animais: Espécie: Camundongos, Cepa: Balb/c nu, Sexo: Fêmea, Idade: 6-8 semanas (18,9 g ± 1,8 g) Xenoenxertos de tumor humano: MX-1 (mama) Amostra de teste: Composição do exemplo 12a, diluída com dextrose a 5% a 2mg/ml.

Referência: Formulação comercializada, ABRAXANE®, reconstituída para obter 2 mg/ml com cloreto de sódio a 0,9%.

Placebo: amostra de teste sem o derivado de taxano.

Dose: 20 mg/kg, uma vez ao dia por 5 dias consecutivos, via intravenosa de administração, 10 ml/kg de peso corporal.

Plano de estudo: 1. O tumor foi implantado por via subcutânea no flanco direito do animal como fragmentos de 30 mg a 40 mg. 2. O tumor foi deixado crescer até um tamanho médio de 125 mm3 a 132 mm3 antes de dar início ao tratamento. 3. Os animais com tumor foram divididos em grupos consistindo em dez animais. 4. Os animais receberam as doses descritas acima e o tumor foi avaliado da maneira descrita abaixo.

Resultados: Uma redução significativa no volume do tumor foi observada no teste a partir do 8° dia comparado com o grupo de controle. Os tumores foram avaliados quanto ao volume do tumor (mm3) contra o tempo em dias. Os dados para 42 dias estão graficamente representados na fig. 1.

Atividade antitumoral moderada foi vista na referência a 20 mg/kg (%T/C ideal <20), ao passo que uma atividade antitumoral bastante significativa foi observada no teste a 20 mg/kg de peso corporal (%T/C ideal <10) . O valor ideal de %T/C para o teste e a referência foi igual a 0 e 13,34, respectivamente. Uma atividade antitumoral bastante significativa foi demonstrada pelo teste (concentrado de nanodispersão de Paclitaxel para injeção a 20mg/kg em xenoenxertos de carcinoma de mama humano MX-1 em camundongos nus. EXEMPLO 28 Eficácia antitumoral (regressão do tumor) da nanodispersão de Paclitaxel (da composição do exemplo 9) em camundongos nus que receberam implantes de xenoenxertos de tumor MX-1 Animais: Espécie: Camundongos, Cepa: Athymic nu, Sexo: Fêmea, Idade: 6-8 semanas (20-25g) Xenoenxertos de tumor humano: MX-1 (mama) Amostra de teste: Composição do exemplo 9, diluída com dextrose 5% para obter 2 mg/ml.

Referência: Formulação comercializada, ABRAXANE ® diluído com cloreto de sódio a 0,9% p/v para obter 2 mg/ ml.

Dose: 20 mg/kg, uma vez ao dia por 5 dias consecutivos, i.v., 10 ml/kg de peso corporal.

Plano de estudo: 1. O tumor foi implantado por via subcutânea no flanco direito do animal como fragmentos de aproximadamente 2x2 mm. 2. O tumor foi deixado aumentar até um tamanho de 200 mm3 a 220 mm3 antes de dar início ao tratamento. 3. Os animais com tumor foram divididos em grupos consistindo em dez animais. 4. Os animais receberam as doses descritas acima e o tumor foi avaliado da maneira descrita abaixo.

Avaliação do tumor: Os tumores foram avaliados quanto ao volume do tumor (mm3) contra o tempo em dias. Os dados para 42 dias estão graficamente representados na fig. 2.

Resultados: Uma atividade antitumoral bastante significativa é observada no grupo de teste e no grupo de Abraxane® (%T/C ideal <10). O valor ideal de %T/C para o teste e para Abraxane® a uma dose de 20mg/kg foi 0,25 e 0,00, respectivamente. Não foi observada qualquer redução significativa no peso corporal no grupo de Placebo/Controle comparado ao dia 0. Uma atividade antitumoral bastante significativa foi demonstrada pelo teste (concentrado de nanodispersão de Paclitaxel para injeção) a 20mg/kg em xenoenxertos de carcinoma de mama humano MX-1 em camundongos nus. EXEMPLO 29 Eficácia antitumoral (regressão do tumor) da nanodispersão de Paclitaxel (da composição do exemplo 9) em camundongos nus que receberam implantes de xenoenxertos de tumor de cólon humano HT-29 Animais: Espécie: Camundongos, Cepa: Athymic nu, Sexo: macho, Idade: 6-8 semanas (20-25g) Xenoenxertos de tumor humano: tumor de cólon humano HT-29.

Amostra de teste: Composição do exemplo 9, diluída com dextrose 5% para obter 2mg/ml.

Dose: 20 mg/kg, uma vez ao dia por 5 dias consecutivos, i.v., 10 ml/kg de peso corporal.

Referência: (a) Formulação comercializada, ABRAXANE® diluída para obter 2mg/ml reconstituída para obter 2 mg/ml com cloreto de sódio a 0,9%.

Dose: 20 mg/kg, uma vez ao dia por 5 dias consecutivos, i.v., 10 ml/kg de peso corporal. (b) Formulação comercializada, ONCOTAXEL®.

Dose: 13,4 mg/kg uma vez ao dia por 5 dias consecutivos, i.v.

Plano de estudo: 1. O tumor foi implantado por via subcutânea no flanco direito do animal como fragmentos de aproximadamente 2x2x2 mm. 2. O tumor foi deixado aumentar até um tamanho de 130 mm3 a 160mm3 antes de dar início ao tratamento. 3. Os animais com tumor foram divididos em grupos consistindo em dez animais. 4. Os animais receberam as doses descritas acima e o tumor foi avaliado da maneira descrita abaixo.

Avaliação do tumor: Os tumores foram avaliados quanto à redução do volume do tumor (mm3) contra o tempo em dias. Os dados para 49 dias estão graficamente representados na figura 3.

Resultados: Uma atividade antitumoral bastante significativa é observada no grupo de teste e no grupo de Oncotaxel® 100 (%T/C ideal <10) . O valor ideal’ de %T/C para o teste a 20mg/kg e para Oncotaxel® 100 a uma dose de 13,4 mg/kg foi 5,92 e 8,79, respectivamente, ao passo uma atividade antitumoral moderada é observada para Abraxane® com um valor ideal de %T/C de 20,33. Uma atividade antitumoral bastante significativa foi demonstrada pelo teste (concentrado de nanodispersão de Paclitaxel para injeção) a 20mg/kg em xenoenxertos de carcinoma de cólon humano HT-29 em camundongos nus.

REIVINDICAÇÕES

Claims (13)

1. Nanodispersão caracterizada por compreender nanopartículas com um tamanho médio inferior a 300nm dispersadas em um veículo compreendendo um solvente miscível em água e água, as referidas nanopartículas compreendendo um derivado de taxano selecionado do paclitaxel ou docetaxel, um polímero solúvel em água, e um tensoativo compreendendo uma mistura de ácido caprílico e sulfato de colesteril.

2. Nanodispersão de acordo com a reivindicação 1 caracterizada por a proporção do tensoativo para o derivado de taxano variar de cerca de 1:5 a 1:10.

3. Nanodispersão de acordo com a reivindicação 1 caracterizada por a proporção do tensoativo para o paclitaxel variar de cerca de 1:5 a 1:10.

4. Nanodispersão de acordo com a reivindicação 2 caracterizada por a proporção de tensoativo para paclitaxel ser cerca de 1:10.

5. Nanodispersão de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o tamanho médio das nanopartículas variar na faixa de cerca de 10 nm a cerca de 200nm.

6. Nanodispersão de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o solvente miscível em água ser selecionado de álcoois, glicóis e seus derivados, polialquileno glicóis e seus derivados, glicerol, glicofurol e combinações dos mesmos.

7. Nanodispersão de acordo com a reivindicação 6, caracterizada por o solvente miscível em água ser selecionado do grupo que consiste em álcool e polietileno glicol (PEG).

8. Nanodispersão de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o polímero solúvel em água ser polivinilpirrolidona com peso molecular na faixa de 1000 a cerca de 50,000 e ser usada em uma quantidade que varia de 0,001% p/v a 10% p/v.

9. Nanodispersão de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o tensoativo ser usado em uma quantidade que varia de cerca de 0, 001% p/v a cerca de 5,0% p/v.

10. Nanodispersão caracterizada por uma solução compreendendo um derivado de taxano selecionado do paclitaxel ou docetaxel, um polímero solúvel em água e um tensoativo compreendendo uma mistura de ácido caprílico e sulfato de colesteril em um solvente miscível em águal que por diluição com um veículo líquido aquoso fornece uma nanodispersão compreendendo nanopartículas com um tamanho médio inferior a 300nm.

11. Nanodispersão caracterizada por nanopartículas com tamanho médio de partícula inferior a 300 nm, compreendendo um derivado de taxano selecionado de paclitaxel ou docetaxel, um polímero solúvel em água e um tensoativo compreendendo uma mistura de ácido caprílico e sulfato de colesteril.

12. Nanodispersão de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por uma solução como reivindicado na reivindicação 10 ou nanopartículas como reivindicado na reivindicação 11, em que o polímero solúvel em água é selecionado de polivinilpirrolidona, poloxâmero, polietileno glicol, álcool polivinílico, alginato de sódio, hialuronato de sódio, goma gelana, carragenano, goma xantana, sulfato de dextrana, sulfato de condroitina, pectinatos, heparinas, copolímeros de ácido metacrílico, sulfato de dermatana, polímeros celulósicos tais como carboximetil celulose sódica, hidroxietil celulose, hidroxipropil metil celulose, entre outras, e misturas dos mesmos.

13. Nanodispersão de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por uma solução como reivindicado na reivindicação 10 ou nanopartículas como reivindicado na reivindicação 11, em que o polímero solúvel em água é selecionado do grupo que consiste em polivinilpirrolidona e polietilenoglicol.