BRPI0802233A2

BRPI0802233A2 - processo de produÇço de nanopartÍculas contendo substÂncias ativas e suas composiÇÕes farmacÊuticas

Info

Publication number: BRPI0802233A2
Application number: BRPI0802233-0A
Authority: BR
Inventors: Fabio Moyses Lins Dantas
Original assignee: Inst Nac De Tecnologia
Priority date: 2008-06-30
Filing date: 2008-06-30
Publication date: 2010-03-02
Also published as: WO2010000050A1; US20110118364A1

Abstract

PROCESSO DE PRODUÇçO DE NANOPARTÍCULAS CONTENDO SUBSTÂNCIAS ATIVAS E SUAS COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS. A presente invenção diz respeito a um processo de fabricação de nanopartículas compostas de polimeros biodegradáveis e ingredientes ativos de aplicação terapêutica, cosmética, veterinária e alimentícia e a uma composição que contenha as ditas nanopartículas que são utilizadas em produtos destinados a animais, inclusive o homem. O processo consiste em emulsificar as substâncias hidrossolúveis para formar uma emulsão a/o; dissolver as substâncias não emulsionáveis, polímero ou polímero/compostos lipossolúveis em solventes orgânicos; misturar a emulsão a/o e a solução orgânica dos hidrofóbicos para formar a mistura pré-emulsionada; adicionar a mistura pré-emulsionada, com o auxílio de um sistema injetor, a uma solução aquosa de emulsificante sob ultradispersão para formar a emulsão final; levar a emulsão final a evaporação, centrifugar, congelar e liofihizar. Uma variação do método ocorre quando os compostos hidrossolúveis emulsionados e a solução de polimero/composto lipossolúveis ou polimero são injetados separadamente sobre a solução aquosa emulsificante. O processo da invenção permite a obtenção de nanoparticulas de substâncias ativas com controle rigoroso do tamanho de partícula preservando as características ativas dos compostos encapsulados.

Description

PROCESSO DE PRODUÇÃO DE NANOPARTÍCULAS CONTENDOSUBSTÂNCIAS ATIVAS E SUAS COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS.

A presente invenção diz respeito a um processo de fabricação de nanopartículascompostas de polímeros biodegradáveis e ingredientes ativos de aplicação terapêutica,cosmética, veterinária e alimentícia e a uma composição que contenha as ditasnanopartículas que são utilizadas em produtos destinados a animais, inclusive ohomem.

Nos últimos anos, um esforço significante tem sido voltado para odesenvolvimento de nanotecnologia para liberação de substâncias ativas uma vez queesta técnica oferece meios adequados de liberação de pequenas partículas contendo asubstância ativa de interesse, assim como de macromoléculas (proteínas, peptídeos ougenes) para liberação vetorizada (PANYAM J.; LABHASETWAR V. BiodegradableAdvanced Drug Delivery Reviews, v. 55, p. 329-347, 2003).

Entende-se por substância ativa qualquer substância com atividadefarmacológica, cosmética, veterinária e alimentícia passível de ser incorporada nas/7 nanopartículas da presente invenção.

Os agentes de liberação focados em nanotecnologia são nanopartículas,nanocápsulas, nanogéis, sistemas micelares e conjugados formados por um polímero,/ natural ou sintético, biocompatível com o organismo. Estes sistemas propiciam aliberação direcionada da droga para tecidos ou células específicas, a fim de melhorar abiodisponibilidade oral, sustentar o efeito dos ativos liberados, tornarem solúveiscertas substâncias ativas para liberação intravascular, além de aumentar a estabilidadede agentes ativos contra degradação enzimática (por nucleases e/ou proteases)especialmente de proteínas, peptídeos e ácidos nucléicos (ALLÉMANN E.; LEROUXJ.; GURNY R. Advanced Drug Delivery Reviews, v. 34, p. 171-189, 1998).

As dimensões nanométricas desses novos sistemas oferecem grandes vantagenspara liberação de substâncias ativas. Devido aos tamanhos sub-celulares esubmicrométricos, as nanopartículas podem penetrar profundamente em tecidosatravés de finos capilares, podem atravessar imperfeições presentes no revestimentoepitelial e são eficientemente absorvidas pelas células. Além disso, modificando-se aspropriedades do polímero utilizado como matriz pode-se criar diferentes modulaçõesde liberação de substâncias ativas, bem como vetorizar as estruturas para sítios5 específicos de liberação (PANYAM I; LABHASETWAR V. BiodegradableAdvanced Drug Delivery Reviews, v. 55, p. 329-347, 2003)

A função de endocitose ou fagocitose dos macrófagos é responsável pelaeficiente liberação de agentes ativos por meio desses novos agentes coloidais paraestas células. Os macrófagos estão ampla e estrategicamente distribuídos em váriostecidos do corpo humano com a finalidade de reconhecer células alteradas,particulados invasores, assim como ligantes macromoleculares de membranasreceptoras especializadas (MOGHIMI S. M.; HUNTER A. C; MURRAY J. CPharmacological Reviews, v. 53, n. 2, p. 283-318, 2001.).

As nanopartículas possuem alta absorção celular quando comparadas àsmicropartículas (PANYAM J.; LABHASETWAR V. Biodegradable Advanced DrugDelivery Reviews, v. 55, p. 329-347, 2003). Estudos prévios mostraram quenanopartículas com dimensões de 100 nm apresentaram absorção, em células Caco-2,duas vezes e meio maior quando comparadas a micropartículas de um (1) um e de seisvezes maior quando comparadas a micropartículas de 10 um. Resultados similaresforam obtidos quando estas formulações foram testadas em um modelo intestinal deratos, apresentando absorção de 15 a 250 vezes maior que a apresentada pelasmicropartículas (PANYAM J.; LABHASETWAR V. Biodegradable Advanced DrugDelivery Reviews, v. 55, p. 329-347, 2003).

As nanopartículas possuem diferentes denominações conforme a técnicautilizada para a sua obtenção, podendo-se obter nanocápsulas ou nanoesferas.Nanocápsulas são carreadores nanoparticulados compostos de um núcleo oleoso, noqual a substância ativa está confinada, envolta por uma membrana poliméricacontendo um surfactante hidrofílico e/ou lipofílico na interface (NISHIOKA Y;YOSHINO H. Lymphatic target with nanoparticles system. Advanced Drug DeliveryReviews, v. 47, p. 55-64, 2001.). Por outro lado, as nanoesferas são matrizes nos quaisa substância ativa está fisicamente disperso, não necessariamente de forma uniforme,entretanto, sem a utilização de núcleo oleoso (QUINTANAR-GUERRERO D.;ALLÉMANN E.; DOELKER E.; FESSI H. Pharmaceutical Research, v. 15, n. 7, p.1056-1062, 1998). Nanopartículas é o nome genérico para nanoesferas e nanocápsulas.

Como já mencionado, é utilizado um grande número de diferentes polímeros naprodução das nanopartículas, que podem ser de origem natural ou sintética. Entre essespolímeros, pode-se citar: poli(ácido lático), poli(ácido glicólico), policaprolactana,alginato, quitosana, copolímeros e modificados estruturais desses polímeros.

O uso de polímeros sintéticos biodegradáveis para veiculação humana começounos anos 70, quando suturas a partir de polímeros sintetizados com ácido láctico eglicólico foram aprovadas pelo FDA (Food and Drug Administration) (SUN Y.;WATTS D. C; JOHNSON J. R. et al. American Pharmaceutical Review, 2001.Disponível em: http://www.americanpharmaceuticalreview.com/ past_articles.htm.Acessado em: 04/05/2002.). Atualmente, PLA (poli(ácido lático)), PGA (poli(ácidoglicólico)) e PLGA (poli(ácido láctico-co-glicólico)) possuem uma infinidade deaplicações, sendo utilizados em diversas áreas como alimentos (como filmes paraembalagens, espessantes, estabilizantes), na agricultura, em segurança (roupas deproteção), higiene pessoal (absorventes, fraldas, cremes), entre outros (VAN VAN DEVELDE K.; KIEKENS P. Polymer Testing, v. 21, p. 433-442, 2002.).

Na medicina, a utilização desses polímeros pode ser dividida em três principaiscategorias: implantes cirúrgicos, produtos de cicatrização e liberação de substânciasativas. Como cicatrizantes de ferimentos, são reabsorvidos pela pele após substituiçãodo tecido lesado assim como em suturas, clipes e pequenas peças que são inseridas porcirurgias (VAN VAN DE VELDE K.; KIEKENS P. Polymer Testing, v. 21, p. 433-442, 2002). Estudos recentes sobre o uso de suturas utilizando copolímeros derivadosdo ácido láctico e glicólico demonstraram que estes polímeros não são tóxicos e sãocompletamente biodegradáveis. Os polímeros biodegradáveis sintéticos sãopreferenciais em relação aos naturais porque são livres de imunogenicidade e suaspropriedades físico-químicas são previsíveis e reprodutíveis (MOGHIMI S. M.;HUNTER A. C; MURRAY J. C. Pharmacological Reviews, v. 53, n. 2, p. 283-318,2001).

O presente pedido de patente dá ênfase aos alfa-hidroxi-ácidos de dois e trêscarbonos, pois além de possuírem um amplo uso na área biomédica, os polímerosderivados vêm sendo bastante investigados para a liberação de substâncias ativas.Estes poliésteres, além de serem biodegradáveis, são também conhecidos comobioabsorvíveis, pois são hidrolisados quando implantados no organismo, formandogrupamentos compatíveis e "metabolizáveis". As nanopartículas desses polímeros sãorapidamente removidas do sangue e concentradas no fígado, baço e medula(BRANNON-PEPPAS L. International Journal of Pharmaceutics, v. 116, p. 1-9,1995.).

A cristalinidade do polímero e a composição de comonômero tambéminfluenciam na biodegradação. Os polímeros racêmicos DL por serem menoscristalinos que os homopolímeros D ou L-láctico, são facilmente degradados, já que asregiões amorfas são mais rapidamente hidrolisadas. Polímeros de PLGA 50:50 (50%de ácido láctico e 50% de ácido glicólico) são mais rapidamente degradados devido afácil hidrólise do ácido glicólico. Quanto menor a quantidade de ácido glicólico nopolímero, mais lenta é a biodegradação, pois a cadeia se torna menos hidrofílica.

As nanopartículas são preparadas por dois métodos principais: conformação depolímeros pré-formados ou pela polimerização in situ do monômero. O processo depolimerização in situ pode ser classificado em dois métodos: interfacial e emulsão.

A encapsulação ou incorporação a partir de polímeros pré-formados é a técnicamais difundida e pode ser realizada por vários métodos. Estas técnicas apresentamsimilaridade como a fase orgânica, que contém o polímero e a substância ativa,funcionando como uma fase interna durante o processo, e a solução aquosa contendoum estabilizante, constituindo o meio de dispersão das nanopartículas. Outrasemelhança entre as técnicas é a pobre eficiência na encapsulação de substâncias ativasde moderados a altamente solúveis em água, limitando os altos rendimentos asubstâncias ativas lipofílicas (QUINTANAR-GUERRERO D.; ALLÉMANN E.;DOELKER E.; FESSI H. Drug Development and Industrial Pharmacy, v. 24, n. 12, p.1113-1128, 1998). As técnicas mais utilizadas são: método de deslocamento dosolvente, salting-out, método de emulsificação/difusão e método deemulsificação/evaporação do solvente.

Método de deslocamento do solvente:

Este método é uma versão modificada do método de evaporação do solvente porutilizar solventes orgânicos solúveis em água como acetona, álcool ou metanol.Devido à difusão espontânea do solvente na fase aquosa, uma turbulência interfacial écriada entre as fases, levando a formação de pequenas partículas. O termonanoprecipitação é freqüentemente utilizado para definir o processo, já que a formaçãodas nanopartículas é devido à agregação do polímero após a mudança de fase.

Uma das maiores dificuldades desta técnica é a escolha do sistema substânciaativa/polímero/solvente/não-solvente. Cada elemento deste sistema possui influênciadireta nas propriedades finais da nanopartícula. A concentração do polímero, porexemplo, pode afetar o diâmetro médio assim como a quantidade de emulsificante nafase aquosa. O solvente também possui influência na eficiência de encapsulação dasubstância ativa; se a substância ativa não tiver afinidade pelo solvente, ele podemigrar para a fase aquosa, resultando em nanopartículas com baixo conteúdo desubstância ativa (BODMEIER R.; MCGINITY J. W. International Journal ofPharmaceutical, v. 43, p. 179-186, 1988.).

Salting-out

Este método é baseado na separação de um solvente miscível em água da faseaquosa pelo efeito de "salting-out". A acetona é o solvente miscível mais utilizado porse separar facilmente da fase aquosa pela adição de eletrólitos. O polímero e asubstância ativa são dissolvidos em acetona e esta solução é então emulsificada sobvigorosa agitação mecânica em um gel aquoso contendo um agente de salting-out e umestabilizador coloidal. Esta emulsão óleo em água é diluída com um volume adequadode água para aumentar a difusão da acetona na fase aquosa, formando asnanopartículas. O solvente e o agente de salting-out são eliminados por filtraçãocontracorrente. Desta forma, a difusão da acetona durante a diluição pode gerarturbulência interfacial e agregação de polímero em nanopartículas (QUINTANAR-GUERRERO D.; ALLÉMANN E.; DOELKER E.; FESSI H. Drug Development andIndustrial Pharmacy, v. 24, n. 12, p. 1113-1128, 1998).

A maior vantagem desta técnica é a possibilidade de incorporação de grandesquantidades de substância ativa no polímero, gerando altos rendimentos. Uma vezobtido o sistema solvente/agente de "salting-ouf/agente estabilizante não é maisnecessário a procura por proporções específicas para a obtenção das nanopartículas(QUINTANAR-GUERRERO D.; ALLÉMANN E.; DOELKER E.; FESSI H. Drug

Development and Industrial Pharmacy, v. 24, n. 12, p. 1113-1128, 1998).

Por outro lado, a técnica é limitada a substâncias ativas lipofílicos, agentes de"salting-out" que não precipitam antes da separação de fase e estabilizantes solúveis.Dentre os agentes de "salting-out" que podem ser utilizados em acetona estão asacarose e os eletrólitos cloreto de magnésio, cloreto de sódio, cloreto de cálcio eacetato de magnésio. Como agentes estabilizantes, o PVA, o PVP(polivinilpirrolidona) e a hidroxietilcelulose têm apresentado bons rendimentos(QUINTANAR-GUERRERO, 1998).

Método de emulsificação/difusão

Este método pode ser considerado com uma modificação do método anterior,sem o uso dos agentes de "salting-out" e purificação mais intensa. A técnica envolve autilização de um solvente parcialmente solúvel em água, o qual é previamente saturadoem água para garantir um equilíbrio termodinâmico inicial em ambos os líquidos. Opolímero é dissolvido na solução saturada em água e, a fase orgânica é emulsificadasob vigorosa agitação em uma fase aquosa contendo um estabilizante. A adiçãosubseqüente de água ao sistema causa a difusão do solvente na fase externa, resultandona formação das nanopartículas. Dependendo do ponto de ebulição do solvente, este éeliminado por destilação ou filtração contra-corrente (QUINTANAR-GUERRERO D.;ALLÉMANN E.; DOELKER E.; FESSI H. Drug Development and IndustrialPharmacy, v. 24, n. 12, p. 1113-1128, 1998).

Esta técnica apresenta algumas vantagens em relação às demais apresentadascomo o uso de solventes orgânicos menos tóxicos, altos rendimentos são obtidos, altareprodutibilidade lote a lote e fácil aumento de escala. Entretanto, há algunsinconvenientes como a grande quantidade de água a ser eliminada e a difusão desubstâncias ativas hidrofílicas para a fase externa durante a emulsificação, podendoresultar em uma eficiência de encapsulação reduzida.

Método emulsificação/evaporação do solvente

Esta técnica é um método bem estabelecido baseado no procedimento clássicopatenteado por Vanderhoff et al. Nesta técnica, o polímero é dissolvido em umsolvente orgânico como diclorometano, clorofórmio ou acetato de etila. A substânciaativa é então dissolvida ou dispersa na solução orgânica contendo o polímero. Estanova solução é então introduzida em uma solução aquosa contendo um agenteemulsificante (gelatina, albumina, poli(álcool vinílico) - PVA, polisorbato 80,polaxamer 188). Após a formação de uma emulsão estável, a fase orgânica éevaporada sob pressão reduzida ou agitação contínua. O controle de tamanho égeralmente realizado pelo uso de ultrassom.

Na patente US 4272398 é descrito um processo de microencapsulação depesticidas que consiste em dissolver o material ativo pela dissolução do composto emum polímero biodegradável, ácido polilático e copolímeros de ácido lático e glicólico,em um solvente suscetível, cloreto de metileno, dispersar a solução de material ativo epolímero em meio aquoso e agitar a dispersão até a evaporação do solvente de modo apermitir a formação de uma cápsula de uma fase. O meio aquoso consiste de água epequenas quantidades de surfactante aniônico para ajudar a manter a dispersão. Apósesta etapa, ainda é necessário uma filtragem, lavagem e secagem para obtenção dasmicrocápsulas. Contudo, o documento não traz nenhuma informação sobre a forma decontrole do tamanho da partícula.Emulsões água/óleo/água também têm sido usadas para preparar nanopartículasde substâncias ativas solúveis em água (QUINTANAR-GUERRERO D.;ALLÉMANN E.; DOELKER E.; FESSI H. Drug Development and IndustrialPharmacy, v. 24, n. 12, p. 1113-1128, 1998). Embora o processo pareça simples, atécnica possui muitas variáveis que podem influenciar no produto final como asolubilidade da substância ativa e do polímero no solvente, o tipo de solventeorgânico, taxa de difusão do solvente na fase aquosa, tipo e concentração doemulsificante além dos passos posteriores de purificação (retirada de emulsificanteresidual) e secagem.

A maioria dos solventes orgânicos utilizados no processo é clorada; devido àbaixa solubilidade em água, apresentam fácil emulsificação, solubilizam bem assubstâncias ativas lipofílicas, além de possuírem baixo ponto de ebulição. Entretanto,estes solventes são desvantajosos devido à sua toxicidade (a maioria está classificadana classe 2, pelo Guideline of Residual Solvents do International Conference on

Harmonization [ICH]) e devem ser limitados a fim de evitar efeitos adversos .O diclorometano é amplamente utilizado como solvente por possuir baixo pontode ebulição, o que facilita à sua posterior retirada do sistema, e baixa solubilidade nomeio aquoso, formando rapidamente uma emulsão. Devido à baixa solubilidade emágua, o diclorometano forma gotas resultando em nanopartículas altamente esféricas(JULIENNE M. C; ALONSO M. J.; AMOZA G.; BENOIT J.P. Drug Developmentand Industrial Pharmacy, v. 18, n. 10, p. 1063-1077, 1992). Solventes orgânicossolúveis em água, como acetona e DMSO (sulfoxido de dimetila), acabam formandoaglomerados poliméricos por se difundirem rapidamente no meio aquoso,prejudicando a formação das nanopartículas (BODMEIER R.; MCGINITY J. W.

International Journal of Pharmaceutical, v. 43, p. 179-186, 1988).Poli(álcool vinílico) e albumina têm sido usados como estabilizantes em meioaquoso. O PVA apresenta uma excelente estabilização no preparo das nanopartículas,não somente pelo método de emulsificação/evaporação como em todas as demaistécnicas. É um dos poucos estabilizantes que evita a agregação das nanopartículas apósa preparação (durante purificação e liofilização), otimizando o rendimento sem aadição de outros adjuvantes.

A albumina também é muito utilizada como surfactante, substituindo o PVA.Tanto a evaporação do solvente quanto a microfluidização, parecem não causar danosàs moléculas de albumina, e a imunogenicidade da albumina adsorvida nasnanopartículas é a mesma de uma solução natural. Entretanto, a fonte (natural oubovina) e o grau de pureza desta macromolécula são aspectos que podem limitar suautilização.

A patente WO 2006/109317 mostra um processo de preparação denanopartículas de poli-DL-co-glicólico (PLA) contendo drogas para o tratamento datuberculose. Nessa patente a emulsão e as nanopartículas são formadas por sonicação abaixa temperatura 4°C a 20°C. As nanopartículas formadas são centrifugadas, lavadase liofilizadas.

O tipo e a concentração do estabilizante são outros fatores limitantes que podemafetar o tamanho e a polidispersão das nanopartículas obtidas por esta técnica. Julienneet al. (JULIENNE M. C; ALONSO M. J.; AMOZA G.; BENOIT J.P. DrugDevelopment and Industrial Pharmacy, v. 18, n. 10, p. 1063-1077, 1992) reportaramque nanoesferas foram conseguidas com alta velocidade de agitação (10.000 rpm/10minutos), utilizando 0,5% p/v de PVA; enquanto que, ao utilizar metilcelulose namesma concentração, foram obtidas partículas maiores que 1 um. Os autoresacreditam que esta diferença é devido a maior redução interfacial de energia livreproduzida pelo PVA.

A fração residual de PVA que permanece nas nanopartículas após purificaçãoafeta as propriedades físicas e absorção celular do produto final. Sahoo et al.formularam nanopartículas utilizando PLGA 85:15, modificando apenas aconcentração do PVA e o tipo de solvente. Foi observado que a polaridade do solventeorgânico pode afetar a quantidade de PVA adsorvida nas nanopartículas. Quanto maispolar o solvente, maior a quantidade de PVA residual. Isto pode ser explicado pelainteração do PVA com a fase polimérica já que a fase orgânica está mais miscível coma aquosa (SAHOO S.; PANYAM J.; PRABHA S. et al. Journal of Controlled Release,v. 82, p. 105-114, 2002).

A homogeneização da emulsão é obtida por misturadores de alta velocidade(SOPPIMATH K. S.; AMINABHAVI T. M.; KULKARNI A. R.; RUDZINSKI W. E. Biodegradable polymeric nanoparticles as drug delivery devices. Journal of ControlledRelease, v. 70, p. 1-20, 2001). A agitação pode ser mecânica (rotações acima de 1.000rpm) ou por ultrassom. A etapa de homogeneização é mais um passo limitante naobtenção das nanopartículas. Nanoesferas de ciclosporina foram obtidas após aumentona velocidade de homogeneização. Em velocidades de 1.000 rpm (por 30 minutos),micropartículas de aproximadamente 29 um foram obtidas; utilizando-se 10.000 rpm(por 1 minuto), nanopartículas de aproximadamente 300 nm foram obtidas(SÁNCHEZ, 1993).

Na patente WO 03/099262 a técnica da emulsificação/evaporação do solvente édescrita. O documento estabelece um processo de produção de nanopartículas quecompreende dissolver um polímero biodegradável em um solvente orgânico,emulsificar fazendo ao mesmo tempo uma sonicação e uma agitação e, por último,isolar e secar a nanopartícula. A substância ativa deve ser emulsificada de modo a seobter uma dupla emulsão ao final do processo do tipo a/o/a. O método proposto limita-se, basicamente, a proteínas e peptídeos. O processo proposto nesta patente prevê umamodificação do processo de emulsificação onde uma alta homogeneidade dasnanopartículas é conseguida pelo uso simultâneo de uma agitação mecânica de altocisalhamento (entre 4.000 e 15.000) e sonicação (freqüência de 20 a 70 kHz).Contudo, este sistema não permite um controle rigoroso do tamanho de partícula que édefinido por diversas variáveis, como concentração de emulsificante, sistemaágua/solvente orgânico, temperatura e natureza das substâncias aprisionadas nasnanopartículas. O controle do tamanho das partículas é fundamental para definir opoder de penetração nos tecidos e sua depuração pelo sistema renal e imunológico. Porexemplo, partículas inferiores a 40 nm podem chegar ao sistema linfático e acumularnesta região.A patente US 6020004 revela um processo de obtenção de micropartículas deproteína que consiste em dissolver o polímero (PLGA) em um solvente orgânico paraobter uma solução polimérica; adicionar o ingrediente ativo que pode estar na formade uma solução aquosa, suspensão ou pó a solução polimérica para formar umaprimeira emulsão ou suspensão dentro de uma fase contínua para produzir umadispersão, adicionar um excipiente para produzir a dispersão final; congelar e liofilizardiretamente para remover os diferentes solventes (aquosos e orgânicos) e obter asmicropartículas de proteínas para liberação controlada.

O sistema aqui proposto trata-se de uma modificação na técnica deemulsificação/evaporação, e supera fatores limitantes e outras deficiências inerentesdo estado da técnica pela invenção de um processo de fabricação de nanopartículasno qual é possível controlar o tamanho das partículas. No trabalho escrito por Songet ali (Colloids and Surfaces A: physicochem. Eng. Aspects. 276, 2006, 162-167), oautor aponta as bases físico-químicas para operacionalizar o tamanho de partículas.

Sendo assim, verificamos agora que emulsificantes iônicos permitem partículasmenores por estabilizarem melhor as partículas dos solventes orgânicos dispersos.Por sua vez, o solvente orgânico utilizado precisa possuir baixa hidrofobicidadepara minimizar a agregação das gotículas. O controle desses parâmetros permitemodular o tamanho das partículas mais a energia inicial de um sistema mecânico de alto cisalhamento (ultradispersão) trabalhando acima de 14.000 rpm. A energiamecânica de alto cisalhamento é importante, porém não fundamental para aestabilização do tamanho de partícula. Contudo, tamanhos de partículassubmicromérricas são obtidas a partir de rotações entre 11.000 a 22.000 rpm.Rotações inferiores e/ou superiores tendem a formar partículas com distribuiçãogranulométrica de larga e/ou grosseira.

Portanto, os sistemas aqui reivindicados são modulados em cima destesconceitos, uma das principais diferenciações frentes as propostas do estado da técnica.Sumário da Invenção

E um objetivo da presente invenção prover um processo de preparação denanopartículas contendo uma ou mais substâncias ativas hidrossolúveis e lipossolúveispreservando as características ativas dos compostos encapsulados.

Outro objetivo da presente invenção é prover um método de fabricação denanopartículas capaz de ter um controle rigoroso do tamanho de partícula.

E ainda um objetivo da invenção prover uma composição farmacêutica,cosmética ou alimentícia contendo as nanopartículas obtidas pelo processo dainvenção e veículos biologicamente aceitáveis.

É objetivo da invenção prover o uso das nanopartículas obtidas segundo oprocesso da invenção para aplicação farmacêutica, cosmética ou alimentícia.

Este e outros objetivos similares, vantagens e características da invenção ficarãomais claras ao longo da descrição detalhada da invenção.

Breve descrição das figuras

Figura 1 - Micrografia eletrônica de varredura de nanopartículas obtidas pelo métodoproposto usando PVA como emulsificante.

Descrição detalhada da invenção

A presente invenção diz respeito a um processo de fabricação de nanopartículaspossuindo propriedades farmacêuticas melhoradas. De uma maneira geral, o métodoaqui revelado prove um processo de fabricação de nanopartículas de polímerosbioabsorvíveis capaz de incorporar substâncias hidrofílicas e lipofílicas e obternanopartículas de alta estabilidade.

As nanopartículas obtidas pelo referido processo podem conter uma ou maissubstâncias em uma mesma partícula, de acordo com a sua aplicação. Podem, ainda,conter substâncias hidrofílicas e lipofílicas em partículas diferenciadas.

O processo de fabricação das nanopartículas emprega o método deemulsificação/vaporização de solventes orgânicos e uso de polímeros bioabsorvíveispara incorporação de compostos. Pequenas variações no processo podem ocorrer deacordo com as características da substância a ser incorporada. Os compostoshidrossolúveis devem ser previamente emulsionados para formar uma emulsão água-em-óleo (a/o). A emulsão emprega emulsificantes usuais da técnica, preferivelmente,poli(álcool vinílico), polivinilpirrolidona, lecitina, gelatina, albumina, brometo dedidodecil dimetil amônio, entre outros. Mais preferivelmente, poli(álcool vinílico),lecitina e albumina.

As substâncias não emulsionáveis, polímero ou polímero/compostoslipossolúveis, são dissolvidas em solventes orgânicos classe 2 e 3 de baixa toxicidade.Solventes orgânicos apropriados incluem, mas não se limitam a diclorometano,acetona, etanol, acetato de etila, entre outros. Preferivelmente acetato de etila ediclorometano. A quantidade de solvente empregada depende da natureza química dassubstâncias que formam a nanopartícula podendo variar de 1 a 50% v/v. Esta soluçãode substâncias não emulsionadas é, então, colocada em ultrassom e, em seguida, sobagitação por período suficiente para sua solubilização.

Cabe ressaltar que para um efetivo aprisionamento de ativos, os polímeros e asubstância simples (hidrofílica emulsionada ou hidrofóbica) devem gerar um sistemafinal onde se observe a proporção de (1:1) a (1:10), preferivelmente, na proporção de(1:1). A composição exata do polímero/substância aprisionada é dependente danatureza química das substância e das características de liberação cinética desejável.

Os polímeros passíveis de serem empregados na presente invenção incluempolímeros bioabsorvíveis e naturais. Por exemplo, poli(ácido lático) e copolímeros,poli(ácido glicólico) e copolímeros, ácido poli-fi-hidroxibutirato, ácidopolihidróxivalérico, poliesteramidas, policianoacrilatos, poli(aminoácidos),polianidridos policaprolactanas, alginato, quitosana, amido, entre outros.Particularmente, o poli(ácido lático) e copolímeros são desejados.

O peso molecular numérico médio ou visco simétrico desses polímeros podevariar de 2.000 a 1.000.000. Preferencialmente, no caso do poli(ácido lático) ecopolímeros, de 10.000 a 200.000 e para o PVA, PVP de 1.000 a 20.000. Oscopolímeros de ácido lático e glicólicos e isômeros são importantes paia a formação das nanopartículas e conferi-lhes versatilidade no que se refere à velocidade debiodegradação e, conseqüentemente, de liberação das drogas. As composições molarespreferenciais de ácido lático e ácido glicólico são 5 a 95%.

Paralelamente, uma solução de emulsificante é preparada. Emulsificantes quepodem ser empregados na invenção incluem poli(álcool vinílico), polivinilpirrolidona,carboximetilcelulose, lecitina, gelatina, albumina, surfactantes não iônicos comopolioxietileno sorbitano de ésteres de ácido graxos (Tween 80, Tween 60 etc),surfactantes aniônicos (brometo de didodecil dimetil amônio, lauril sulfato de sódio,estearato de sódio, etc), entre outros. Estes emulsificantes podem ser usados tanto emconjunto quanto separadamente. A concentração de emulsificante pode variar de 0,01a 20% p/v. Preferencialmente entre 0,1 a 5% p/v.

Finalmente, ocorre o processamento da emulsificação utilizando-se umultradispersor. A solução polímero/compostos lipossolúveis ou polímero e compostoshidrossolúveis emulsionados são previamente misturadas depois são injetados pormeio de agulhas de calibre entre 0,5 a 2 mm sobre uma solução aquosa comemulsificante. A dispersão deve ser realizada a uma velocidade de 11.000 a 22.000rpm.

Uma variação do método ocorre quando os compostos hidiossolúveisemulsionados e a solução de polímero/composto lipossolúveis ou polímero sãoinjetados separadamente sobre a solução aquosa emulsificante.

Agentes anti-espumantes devem ser empregados de modo a facilitar a dispersãoe possibilitar o aprisionamento das nanopartículas, tais como alcoóis em geral, saisminerais e derivados do óleo de silicone.

Após a ultradispersão o sistema é levado à evaporação para a retirada dosolvente orgânico e centrifugado. A evaporação pode ser realizada em evaporadorrotatório a uma velocidade de evaporação do solvente orgânico de 0,1 a 40 g/lioras.

O material decantado é congelado e liofilizado obtendo-se a nanopartícula emuma forma que poderá ser incorporada as formulações farmacêuticas de administraçãooral, parenteral (subcutânea, intramuscular e intravenosa), sublingual, retal,transdérmica, inalação, oftálmica e otológica. As nanopartículas também podem serutilizadas em formulações cosméticas, veterinárias e alimentícias.Os agentes terapêuticos podem ser selecionados de uma variedade desubstâncias ativas conhecidas, tais como, mas não limitado a: analgésicos, anestésicos,analépticos, agentes adrenérgicos, agentes bloqueadores adrenérgicos, adrenolíticos,adrenocorticóides, adrenomiméticos, agentes anticolinérgicos, anticolinesterásicos,anticonvulsivantes, agentes alquilantes, alcalóides, inibidores alostéricos, anoréxicos,antiácidos, antidiarréicos, esteróides anabólicos, antídotos, antifólicos, antipiréticos,agentes antireumáticos, agentes pisicoterapêuticos, agentes bloqueadores neurais,antiinflamatórios, antihelmínticos, agentes antiarrítimicos, antibióticos,anticoagulantes, antidepressivos, agentes para diabetes, antiepléticos, antifúngicos,antihistamínicos, agentes antihipertensivos, agentes antimuscarínicos,antimicobacterianos, antibacterianos, antimaláricos, antisépticos, agentesantineoplásicos, agentes antiprotozoário, imunossupressores, imunoestimulantes,agentes antireóidais, agentes antivirais, ansiolíticos, sedativos, adstringentes, agentesfi-bloqueadores, meios de contraste, corticosteróides, supressores da tosse, agentes dediagnósticos, agentes diagnósticos de imagem, diuréticos, dopaminérgicos,hemostáticos, agentes hematológicos, modificadores de hemoglobina, hormônios,hipnóticos, antihiperlipêmicos e outros agentes reguladores de lipídios, muscarínicos,relaxantes musculares, parasimpátomiméticos, prostaglandinas, radiofarmacêuticos,sedativos, antialérgicos, estimulantes, simpatomiméticos, agentes tiroideanos,vasodilatadores, vacinas, vitaminas e xantinas, antineoplásicos e agentes anti câncer.Os agentes terapêuticos podem ser biológicos como: proteínas (p.ex. enzimas eanticorpos), polipeptídeos, carboidratos, polinucleotídeos e ácidos nucléicos. Osmedicamentos (composições farmacêuticas) podem ser produzidos por técnicasconhecidas na arte.

Agentes cosméticos podem ser considerados como: qualquer ingrediente ativocapaz de ter uma ação cosmética; também são passíveis de serem incorporados asnanopartículas da presente invenção. Exemplos destes ingredientes são, emolientes,umectantes, agentes inibidores de radicais livres, antiinflamatórios, vitaminas, agentesdespigmentadores, anti-acne, antiseborréicos, queratolíticos, agentes para coloração dapele, agentes redutores de gorduras, antioxidantes. Os cosméticos podem serpreparados por técnicas conhecidas na arte.

Exemplos de aplicação alimentícia incluem, mas não se limitam ao,encapsulamento de proteínas, carboidratos, vitaminas hidrossolúveis e lipossolúveis eoutros suplementos alimentares. Os suplementos alimentares podem ser produzidospor técnicas conhecidas na arte.

A dimensão das nanopartículas obtida pelo processo da invenção variam de 20 a500 irai e são medidas por análise de imagem microscópica, potencial zeta ou difraçãode luz.

Complementado, o sistema proposto é superior ao estado da técnica por usar osistema de ultradispersão e não o sistema de sonicação. Este último não permite umcontrole rigoroso do tamanho de partícula. Além disso, essas e outras patentes nãolevam em conta parâmetros importantes como: velocidade de evaporação do solventeorgânico, pré-emulsão de substâncias ativas hidrossolúveis, controle do tamanho departículas pela relação das concentrações água/solvente orgânico/emulsifícante ediâmetro da agulha de injeção. Somente através do controle desses parâmetros pode-secontrolar a capacidade de encapsulamento (ou aprisionamento), qualidade, tamanho,distribuição de tamanho e a morfologia das nanopartículas.

A seguir são mostrados exemplos meramente ilustrativos da invenção que deforma alguma são limitantes do escopo de proteção da presente invenção.

Exemplos:

Método 1:

Pré-emulsão e mistura: Devem ser pesadas as substâncias hidrossolúveis edissolvidas em 10 ml de solução 0,1% de PVP e deixar sob agitação por 12 horas. Emseguida, essa solução deve ser injetada em 90 ml de diclorometano sobre o vórtex doultradispersor a 14.000 rpm e o sistema deixado sob agitação por 5 minutos. Registrara temperatura da dispersão com um termômetro calibrado. Medir a condutância e o pHda dispersão (esperar estabilizar). Paralelamente devem ser pesadas as substânciashidrofóbicas e solubilizadas em 10 ml de diclorometano. A emulsão a/o doshidrofílicos e a solução orgânica dos hidrofóbicos devem ser misturadas ao final.Processamento da emulsificação. Foi utilizado ultradispersor para preparar aemulsão final girando a 14.000 rpm. Em béquer de 300 ml foram adicionados 150 mlda solução de PVP 5%. A mistura pré-emulsionada foi adicionada no vórtice daagitação com uma seringa com agulha com diâmetro interno de aproximadamente de 1mm. Simultaneamente deve-se adicionar a emulsão contendo as substâncias ativashidrossolúveis. Foi usado etanol absoluto com agente antiespumante para facilitar adispersão e possibilitar o aprisionamento das substâncias ativas nas nanopartículas. Emseguida, o sistema foi para um evaporador rotatório para a retirada do solventeorgânico a lOg/hora e centrifugado. O material decantado é congelado por 24 horas eliofilizado em seguida. Obtêm-se partículas com dimensões entre 200-500 nm.

Método 2:

Pré-emulsão e mistura: Devem ser pesados as substâncias hidrossolúveis e dissolverem 10 ml de solução 0,2% de didodecil dimetil amônio (BDDA) e deixar sob agitaçãopor 12 horas. Em seguida, essa solução deve ser injetada em 90 ml de acetato de etilasaturado com água sobre o vórtex do ultradispersor a 22.000 rpm e o sistema deixadosob agitação por 5 minutos. Registrar a temperatura da dispersão com um termômetrocalibrado. Medir a condutância e o pH da dispersão (esperar estabilizar).Paralelamente devem ser pesadas as substâncias hidrofóbicas e solubilizadas em 10 mlde acetato de etila saturado com água. A emulsão a/o dos hidrofílicos e a soluçãoorgânica dos hidrofóbicos devem ser misturadas mecanicamente no final.Processamento da emulsificação. Foi utilizado ultradispersor girando a 22.000 rpmpara preparar a emulsão. Em béquer de 300 ml foi adicionado 150 ml da solução 0,2%de BDDA. A mistura pré-emulsionada foi adicionados no vórtice da agitação com umaseringa com agulha com diâmetro interno de aproximadamente de 1 mm. Foi usadoetanol absoluto com agente antiespumante para facilitar a dispersão e possibilitar oaprisionamento dos substâncias ativas nas nanopartículas. Em seguida, o sistema foipara um evaporador rotatório paia a retirada do solvente orgânico a 40g/hora ecentrifugado. O material decantado é congelado e liofilizado. Obtêm-se partículas comdimensões entre 40-150 nm.

Método 3:

Pré-emulsão e mistura: Devem ser pesadas as substâncias hidrossolúveis edissolvidas em 10 ml de solução 0,5% de lecitina e deixadas sob agitação por 12 horas.Em seguida, essa solução deve ser injetada em 90 ml de diclorometano sobre o vórtexdo ultradispersor a 14.000 rpm e o sistema deixado sob agitação por 5 minutos.Registrar a temperatura da dispersão com um termômetro calibrado. Medir acondutância e o pH da dispersão (esperar estabilizar). Paralelamente devem serpesadas as substâncias hidrofóbicas e solubilizadas em 10 ml de diclorometano. Aemulsão a/o dos hidrofílicos e a solução orgânica dos hidrofóbicos devem sermisturadas mecanicamente no final.

Processamento da emulsificação: Foi utilizado ultradispersor girando a 14.000 rpm15 para preparar a emulsão. Em béquer de 300 ml foi adicionado 150 ml da solução 0,5%de lecitina. A mistura pré-emulsionada foi adicionada no vórtice da agitação com umaseringa com agulha com diâmetro interno de aproximadamente de 1 mm. Em seguida,o sistema foi para um evaporador rotatório para a retirada do solvente orgânico alOg/hora e centrifugado. O material decantado é congelado e liofilizado. Obtêm-separtículas com dimensões entre 50-200 nm.

Método 4:

Pré-emulsão e mistura: Devem ser pesadas as substâncias hidrossolúveis edissolvidas em 10 ml de solução 0,2% de didodecil dimetil amônio (BDDA) e deixarsob agitação por 12 horas. Em seguida, essa solução deve ser injetada em 90 ml deacetato de etila saturado com água sobre o vórtex do ultradispersor a 22.000 rpm e osistema deixado sob agitação por 5 minutos. Registrar a temperatura da dispersão comum termômetro calibrado. Medir a condutância e o pH da dispersão (esperarestabilizar). Paralelamente devem ser pesadas as substâncias hidrofóbicas esolubilizadas em 10 ml de diclorometano. A emulsão a/o dos hidrofílicos e a soluçãoorgânica dos hidrofóbicos devem ser misturadas mecanicamente ao final.Processamento da emulsificação: Foi utilizado ultradispersor girando a 22.000 rpmpara preparar a emulsão. Em béquer de 300 ml foram adicionadas 150 ml da solução0,2% de lecitina. A mistura pré-emulsionada foi adicionada no vórtice da agitação comuma seringa com agulha com diâmetro interno de aproximadamente de 1 mm. Foiusado etanol absoluto com agente antiespumante para facilitar a dispersão epossibilitar o aprisionamento das substâncias ativas nas nanopartícuias. Em seguida, osistema foi para um evaporador rotatório para a retirada do solvente orgânico a40g/hora e centrifugado. O material decantado é congelado e liofilizado. Obtêm-separtículas com dimensões entre 50-300 nm.

Método 5:

Pré-emulsão e mistura: Devem ser pesadas as substâncias hidrossolúveis edissolvidas em 10 ml de solução 5% PVA e deixadas sob agitação por 12 horas. Emseguida, essa solução deve ser injetada em 90 ml de diclorometano sobre o vórtex doultradispersor a 14.000 rpm e o sistema deixado sob agitação por 5 minutos. Registrara temperatura da dispersão com um termômetro calibrado. Medir a condutância e o pHda dispersão (esperar estabilizar). Paralelamente devem ser pesadas as substânciashidrofóbicas e solubilizadas em 10 ml de diclorometano. A emulsão a/o doshidrofílicos e a solução orgânica dos hidrofóbicos devem ser misturadasmecanicamente ao final.

Processamento da emulsificação: Foi utilizado ultradispersor girando a 14.000 rpmpara preparar a emulsão. Em béquer de 300 ml foi adicionado 150 ml da solução 5%de PVA. A mistura pré-emulsionada foi adicionados no vórtice da agitação com umaseringa com agulha com diâmetro interno de aproximadamente de 1 mm. Foi usadoetanol absoluto com agente antiespumante para facilitar a dispersão e possibilitar oaprisionamento das substâncias ativas nas nanopartículas. Em seguida, o sistema foipara um evaporador rotatório para a retirada do solvente orgânico a lOg/hora ecentrifugado. O material decantado é congelado e liofilizado. Obtêm-se partículasdimensões entre 50-300 nm.

Claims

1. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS caracterizadopor compreender as seguintes etapas:a) emulsificar os compostos hidrossolúveis para formar uma emulsão a/o;b) dissolver as substâncias não emulsionáveis, polímero oupolímero/compostos lipossolúveis em solventes orgânicos classe 2 e 3 debaixa toxicidade;c) misturar a emulsão a/o e a solução orgânica dos hidrofóbicos b) paraformar a mistura pré-emulsionada;d) Adicionar a mistura pré-emulsionada, com o auxílio de um sistemainjetor, a uma solução aquosa de emulsificante sob ultradispersão paraformar a emulsão final;e) Levar a emulsão final a evaporação, centrifugar, congelar e liofilizar.

2.PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 1 caracterizado pelo fato dos emulsificantes empregados paraformar a emulsão a/o serem selecionados de poli(álcool vinílico),polivinilpirrolidona, lecitina, gelatina, albumina, brometo de didodecil dimetilamônio.

3.PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 2 caracterizado pelo fato do emulsificante ser poli(álcoolvinílico), lecitina ou albumina.

4.PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo comas reivindicações 1 a 3 caracterizado pelo fato dos solventes orgânicos classe 2e 3 serem diclorometano, acetona, etanol ou acetato de etila.

5. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 1 caracterizado pelo fato de que a quantidade de solventesorgânicos classes 2 e 3 estar compreendida na faixa de 1 a 50% p/v.

6. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo comas reivindicações 1 a 5 caracterizado pelo fato que os polímeros sãoselecionados de poli(ácido lático) e copolímeros, poli(ácido glicólico) ecopolímeros, ácido poli-rj-hidroxibutirato, ácido polihidróxivalérico,poliesteramidas, policianoacrilatos, poli(aminoácidos), polianidridospolicaprolactanas, alginato, quitosana, amido.

7. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo comas reivindicações 1 a 6 caracterizado pelo fato que o peso molecular numéricomédio ou viscosimétrico desses polímeros pode variar de 2.000 a 1.000.000.

8. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 6 caracterizado pelo fato que o polímero é o poli(ácido lático) eseus copolímeros.

9. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 8 caracterizado pelo fato que o peso molecular numérico médioou viscosimétrico do poli(ácido lático) e seus copolímeros estão compreendidosna faixa de 10.000 a 200.000.

10. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo comas reivindicações 1 a 7 caracterizado pelo fato que os copolímeros de ácidolático e glicólico estão presentes em composições molares que variam de 5 a 95%.

11. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTICULAS de acordo comas reivindicações 1 a 10 caracterizado pelo fato que a relação entre polímero esubstância aprisionada, hidrofílica emulsionada ou hidrofóbica, é de 1:1 a 1:10.

12. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 11 caracterizado pelo fato que a relação entre polímero esubstância aprisionada, hidrofílica emulsionada ou hidrofóbica, é de .1:1.

13. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo comas reivindicações 1 a 12 caracterizado pelo fato da solução aquosa deemulsificante empregar os emulsificantes poli(álcool vinílico),polivinilpirrolidona, carboximetilcelulose, lecitina, gelatina, albumina,surfactantes não iônicos como polioxietileno sorbitano de ésteres de ácidograxos (Tween 80, Tween 60), surfactantes aniônicos (brometo de didodecildimetil amônio, lauril sulfato de sódio, estearato de sódio em conjunto ouseparadamente.

14. PROCESSO DE PREPARAÇÃO BE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 13 caracterizado pelo fato da concentração de emulsificanteestar compreendida na faixa de 0,01 a 20% p/v.

15. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 14 caracterizado pelo fato da concentração de emulsificanteestar compreendida na faixa de 0,1 a 5 p/v.

16. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo comas reivindicações 1 a 15 caracterizado pelo fato que o sistema injetor possuiagulhas de calibre entre 0,5 a 2 mm.

17. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo comas reivindicações 1 a 16 caracterizado pelo fato que a dispersão da emulsãofinal é realizada na velocidade de 11.000 a 22.000 rpm.

18. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo comas reivindicações 1 a 17 caracterizado pelo fato de adicionalmente seremempregados agentes antiespumantes na solução aquosa emulsificante.

19. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 18 caracterizado pelo fato dos agentes antiespumantes seremselecionados de alcoóis, sais minerais e derivados do óleo de silicone.

20. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 19 caracterizado pelo fato de que o agente antiespumante éetanol.

21. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 1 a 20 caracterizado pelo fato de que a evaporação pode serrealizada em evaporador rotatório a uma velocidade de evaporação do solventeorgânico de 0,1 a 40 g/hora.

22. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS caracterizadopor compreender as seguintes etapas:a) emulsificar os compostos hidrossolúveis para formar uma emulsão a/o;b) dissolver as substâncias não emulsionáveis, polímero oupolímero/compostos lipossolúveis em solventes orgânicos classe 2 e 3 debaixa toxicidade;c) Adicionai- simultaneamente a emulsão a/o e a solução orgânica doshidrofóbicos (b), com o auxílio de sistemas injetores, a uma soluçãoaquosa de emulsificante sob ultradispersão para formar a emulsão final;d) Levar a emulsão final a evaporação, congelar e liofilizar.

23. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 22 caracterizado pelo fato dos emulsificantes empregados paraformar a emulsão a/o serem selecionados de poli(álcool vinílico),polivinilpirrolidona, lecitina, gelatina, albumina, brometo de didodecil dimetilamônio.

24. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 23 caracterizado pelo fato do emulsificante ser poli(álcoolvinílico), lecitina ou albumina.

25. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo comas reivindicações 22 a 24 caracterizado pelo fato dos solventes orgânicos classe 2 ou 3 serem diclorometano, acetona, etanol ou acetato de etila.

26. PROCESSO DE PREPARAÇÃO BE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 25 caracterizado pelo fato de que a quantidade de solventesorgânicos classe 2 e 3 estai- compreendida na faixa de 1 a 50% p/v.

27. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo comas reivindicações 22 a 26 caracterizado pelo fato que os polímeros sãoselecionados de poli(ácido lático) e copolímeros, poli(ácido glicólico) ecopolímeros, ácido poli-B-hidroxibutirato, ácido polihidróxivalérico,poliesteramidas, policianoacrilatos, poli(aminoácidos), polianidridospolicaprolactanas, alginato, quitosana, amido.

28. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 27 caracterizado pelo fato que o polímero é o poli(ácido lático)e seus copolímeros.

29. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo comas reivindicações 22 a 28 caracterizado pelo fato que a relação entre polímero esubstância aprisionada, hidrofílica emulsionada ou hidrofóbica, é de 1:1 a 1:10.

30. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 29 caracterizado pelo fato que a relação entre polímero esubstância aprisionada, hidrofílica emulsionada ou hidrofóbica, é de 1:1.

31. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo comas reivindicações 22 a 30 caracterizado pelo fato da solução aquosa deemulsificante empregai- os emulsific antes poli(álcool vinílico),polivinilpirrolidona, carboximeiiicelulose, lecitina, gelatina, albumina,surfactantes não iônicos como polioxietileno sorbitano de ésteres de ácidograxos (Tween 80, Tween 60), surfactantes aniônicos (brometo de didodecildimetil amônio, lauril sulfato de sódio, estearato de sódio em conjunto ouseparadamente.

32. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 31 caracterizado pelo fato da concentração de emulsificanteestar compreendida na faixa de 0,01 a 20% p/v.

33. PROCESSO DE PREPARAÇÃO BE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 32 caracterizado pelo fato da concentração de emulsificanteestar compreendida na faixa de 0,1 a 5 p/v.

34. PROCESSO DE PREPARAÇÃO BE NANOPARTÍCULAS de acordo comas reivindicações 22 a 33 caracterizado pelo fato que o sistema injetor possuiagulhas de calibre entre 0,5 a 2 mm.

35. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTICULAS de acordo comas reivindicações 22 a 34 caracterizado pelo fato que a dispersão da emulsãofinal é realizada na velocidade de 11.000 a 22.000 rpm.

36. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo comas reivindicações 22 a 35 caracterizado pelo fato de adicionalmente seremempregados agentes antiespumantes na solução aquosa emulsificante.

37. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 36 caracterizado pelo fato dos agentes antiespumantes seremselecionados de alcoóis, sais minerais e derivados do óleo de silicone.

38. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo coma reivindicação 37 caracterizado pelo fato de que o agente antiespumante éetanol.

39. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS de acordo comas reivindicações 22 a 38 caracterizado pelo fato de que a evaporação pode serrealizada em evaporador rotatório a uma velocidade de evaporação do solventeorgânico de 0,1 a 40 g/hora.

40. NANOPARTÍCULAS caracterizadas por serem obtidas de acordo com osprocessos das reivindicações 1 a 21.

41. NANOPARTÍCULAS caracterizadas por serem obtidas de acordo com osprocessos das reivindicações 22 a 39.

42. NANOPARTÍCULAS de acordo com as reivindicações 40 e 41 caracterizadaspor terem tamanho de 20 a 500 nm.

43. USO DE NANOPARTÍCULAS caracterizadas por serem obtidas de acordocom os processos das reivindicações 1 a 21 e/ou 22 a 39 para aplicaçãofarmacêutica, cosmética e alimentícia.

44. FORMULAÇÃO FARMACÊUTICA caracterizada por conter asnanopartículas obtidas de acordo com os processos das reivindicações 1 a 21e/ou 22 a 39 e excipientes fannaceuticamente aceitáveis.

45. FORMULAÇÃO COSMÉTICA caracterizada por conter as nanopartículasobtidas de acordo com os processos das reivindicações 1 a 21 e/ou 22 a 39 eexcipientes aceitáveis.

46. FORMULAÇÃO ALIMENTÍCIA caracterizada por conter as nanopartículasobtidas de acordo com os processos das reivindicações 1 a 21 e/ou 22 a 39 eexcipientes biologicamente aceitáveis.

47. PRODUTO caracterizado por conter nanopartículas obtidas de acordo com osprocessos das reivindicações 1 a 21 e/ou 22 a 39.