BRPI0711808A2 - compostos e composições como inibidores de proteìna cinase - Google Patents

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Guobao Zhang
Yongping Xie
Barun Okram
Victor Nikulin
Xia Wang
Ha-Soon Choi
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Abstract

COMPOSTOS E COMPOSIçõES COMO INIBIDORES DE PROTEìNA CINASE. A presente invenção refere-se a uma nova classe de compostos, composições farmacêuticas compreendendo tais compostos e métodos de uso de tais compostos para tratar ou prevenir doenças ou distúrbios associados à atividade anormal ou desregulada da cinase, especificamente doenças ou distúrbios que envolvam ativação anormal de cinases AbI, Bcr-Abl, Bcr-Abl(T315l), ALK5BLK, BMX, BRK, C-kit, c-RAF, CSK, c-SRC, EGFR, Fes, FGFR3, Flt3, Fms, Fyn, IGF-1R, IR, JAK(2), JAK(3), KDR, Lck, NLK, p70S6K, PDGFR<244>, Ros, SAPK2<244>, SGK, SIK, Syk, Tie2 e TrkB.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOSTOS E COMPOSIÇÕES COMO INIBIDORES DE PROTEÍNA CINASE".
REFERÊNCIA CRUZADA AOS PEDIDOS CORRELATOS
Esse pedido reivindica o benefício de prioridade junto ao Pedido de Patente Provisório US número de série 60/799.779, depositado em 11 de maio de 2006. A descrição completa desse pedido sendo incorporada em sua totalidade e para todos os fins.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
Campo da Invenção
A presente invenção refere-se a uma nova classe de compostos e composições farmacêuticas compreendendo tais compostos além de mé- todos de uso de tais compostos no tratamento ou prevenção de doenças ou distúrbios associados à atividade anormal ou desregulada na cinase, especial- mente doenças ou distúrbios que envolvam ativação anormal de Abi, Bcr-Abl, Bcr-Abl (T315I), ALK1BLK, BMX, BRK, C-kit, c-RAF, CSK1 c-SRC, EGFR, Fes, FGFR3, Flt3, Fms, Fyn, IGF-1R, IR, JAK (2), JAK (3), KDR, Lck, NLK, p70S6K, PDGFRa, Ros, SAPK2a, SGK, SIK, Syk, Tie2 e TrkB cinases.
ANTECEDENTES
As proteína cinases representam uma grande família de proteí- nas que desempenham um papel central na regulação de uma grande varie- dade de processos celulares e mantêm o controle sobre a função celular. Uma lista parcial, não-específica dessas cinases inclui: receptor de tirosina cinase, tais como: receptor de cinase do fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF-R), receptor do fator do crescimento do nervo, trkB, Met, e o receptor do fator do crescimento do fibroblasto, FGFR3; tirosina cinases não-receptoras, tais como, Abl e a cinase de fusão BCR-Abl, Lck, Csk, Fes, Bmx e c-src; e serina/treonina cinases, tais como, ab-RAF, c-RAF, sgk, MAP cinases (por exemplo, MKK4, MKK6, etc.) e SAPK2a, SAPK2a além de SAPK3. A atividade de cinase aberrante foi observada em muitos estados de doença incluindo distúrbios benignos e malignos, bem como doenças resul- tantes da ativação inapropriada dos sistemas imune e nervoso.
Os novos compostos dessa invenção exibem a atividade de uma ou mais das proteína cinases e, portanto, espera-se que sejam úteis no tra- tamento das doenças associadas à cinase.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
Em um aspecto, a presente invenção fornece os compostos da fórmula I:
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em que:
A é selecionado de C1-5a e N; em que R5a é selecionado de hi- drogênio, C1-Balquila e C3-8heterocicloalquila-C1-4alquila; em que a dita hete- rocicloalquila de R5a é opcionalmente substituída com C1-6alquila;
B é selecionado de C1-5b e N; em que R5b é selecionado de hi- drogênio e C1-6alquila;
η é selecionado de 1, 2, 3 e 4;
m é selecionado de 0 e 1;
R1 é selecionado de hidrogênio e -XiC (O)OR6; em que Xi é selecionado de uma ligação e Ci-6alquileno; e R6 é selecionado de hidrogê- nio e Ci-6alquila;
R2 é selecionado de C1-6alquila, C3-8heterocicloalquil-C0-4alquila, C3-12Cicloalquil-C0-4alquila e -X2NR7aRyb; em que X2 é selecionado de uma ligação e C1-Salquileno; e R7a e R7b são selecionados independente de hidro- gênio e C1-Balquila; onde qualquer heterocicloalquila de R2 é opcionalmente substituída com C1-6ealquila;
R3 é selecionado de halo, C1-6alquila e C1-6alcóxi;
R4 é selecionado de -OR9, -NR8aC (O)NR8bR9, -C (O)NR8bR9,
-NR8aC (O)R9, -C(O)OR8a e -C (O)NR8aX3OR9; em que X3 é selecionado de uma ligação e C1-6alquileno; R8a e R8b são selecionados independente de hidrogênio e C1-6alquila; e R9 é selecionado de C1-6alquila, C6-10aril-C0-4alqui- la, C3-12Cicloalquila e C1-10heteroarila; onde qualquer arila, heteroarila ou ci- cloalquila de R9 é opcionalmente substituída com 1 a 3 radicais independen- temente selecionados de C1-6alquila substituída com halo e C3-8heterocicloal- quila opcionalmente substituída com C1-6alquila;
ou R8b e R9 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual R8 e R9 estão anexados formam C-Moheterocicloalquila opcionalmente substituída com C1-6alquila; e os derivados de N-óxido, derivados de pró-fármaco e deri- vados protegidos, isômeros individuais e mistura de isômeros dos mesmos; além de sais farmaceuticamente aceitáveis e solvatos (por exemplo, hidra- tos) de tais compostos.
Em um segundo aspecto, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica que contém um composto da fórmula I ou um deri- vado de N-óxido, isômeros individuais e mistura dos mesmos ou um sal far- maceuticamente aceitável dos mesmos, em mistura com um ou mais excipi- entes apropriados.
Em um terceiro aspecto, a presente invenção fornece um méto- do de tratamento de uma doença em um animal, no qual a inibição da ativi- dade da cinase, especificamente de Abi, Bcr-Abl, Bcr-Abl (T315I), ALK,BLK, BMX, BRK, C-kit, c-RAF, CSK, c-SRC, EGFR, Fes1 FGFR3, Flt3, Fms, Fyn, IGF-1R, IR, JAK (2), JAK (3), KDR, Lck, NLK, p70S6K, PDGFRa, Ros1 SAPK2a, SGK, SIK, Syk, Tie2 e/ou atividade TrkB pode prevenir ou ameni- zar a patologia e/ou sintopatologia das doenças, o método compreendendo administração ao animal de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula I ou um derivado de N-óxido, isômeros individuais e mistura de isômeros dos mesmos ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.
Em um quarto aspecto, a presente invenção fornece o uso de um composto da fórmula I na fabricação de um medicamento para o trata- mento de uma doença em um animal no qual a atividade da cinase, especifi- camente de Abi, Bcr-Abl, Bcr-Abl (T315I), ALK.BLK, BMX, BRK, C-kit, c- RAF, CSK, c-SRC, EGFR, Fes, FGFR3, Flt3, Fms, Fyn, IGF-1R, IR1 JAK (2), JAK (3), KDR, Lck, NLK, p70S6K, PDGFRa, Ros1 SAPK2 a, SGK, SIK, Syk, Tie2 e/ou atividade TrkB contribui para a patologia e/ou sintomatologia da doença.
Em um quinto aspecto, a presente invenção fornece um proces- so para preparação dos compostos da fórmula I e dos derivados de N-óxido, derivados de pró-fármacos, derivados protegidos, isômeros individuais e misturas de isômeros dos mesmos e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
Definições
"Alquila" como um grupo e como um elemento estrutural de ou- tros grupos, por exemplo alquila substituída com halo e alcóxi podem ser tanto de cadeia linear quanto ramificada. C1-4-alcóxi inclui, metóxi, etóxi e similares. Alquila substituída com halo inclui trifluormetila, pentafluoretila e similares.
"Arila" significa um anel aromático monocíclico ou bicíclico fundi- do contendo de seis a dez átomos de carbono. Por exemplo, arila pode ser fenila ou naftila, preferivelmente fenila. "Arileno" significa um radical divalen- te derivado de um grupo arila.
"Heteroarila" é conforme definido para arila acima, onde um ou mais dos elementos do anel é um heteroátomo. Por exemplo, heteroarila inclui piridila, indolila, indazolila, quinoxalinila, quinolinila, benzofuranila, ben- zopiranila, benzotiopiranila, benzo[1,3]dioxol, imidazolila, benzo-imidazolila, pirimidinila, furanila, oxazolila, isoxazolila, triazolila, tetrazolila, pirazolila, tie- nila, etc.
"Cicloalquila" significa um conjunto de anéis saturado ou parci- almente insaturado, monocíclico, bicíclico fundido ou policíclico em ponte contendo o número de átomos de anel indicado. Por exemplo, C3-10cicloal- quila inclui ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclohexila, etc.
"Heterocicloalquila" significa cicloalquila, conforme definido nesse pedido, contanto que um ou mais dos carbonos dos anéis indicados sejam substituídos por uma fração selecionada dentre -O-, -N=, -NR-, -C (O)-, -S-, -S (O) - ou -S (O)2-, em que R é hidrogênio, C1-4alquila ou um grupo de pro- teção de nitrogênio. Por exemplo, C3-8heterocicloalquila conforme usada nesse pedido para descrever os compostos da invenção inclui morfolino, pirrolidinila, pirrolidinil-2-ona, piperazinila, piperidinila, piperidinilona, 1,4-dioxa- 8-aza-espiro[4,5]dec-8-ila, etc.
"Halogênio" (ou halo) representa, preferivelmente, cloro ou flúor, porém pode também ser bromo ou iodo.
"Painel de cinase" é uma lista de cinases compreendendo Abl (humana), Abl (T315I), JAK2, JAK3, ALK, JNK1α1, ALK4, KDR, Aurora-A, Lck, Blk, MAPK1, Bmx, MAPKAP-K2, BRK, MEK1, CaMKII (rat), Met, CDK1/cyclinB, p70S6K, CHK2, PAK2, CK1, PDGFRa, CK2, PDK1, c-kit, Pim-2, c-RAF, PKA (h), CSK, PKBa, cSrc, PKCa, DYRK2, Plk3, EGFR, ROCK-I, Fes, Ron, FGFR3, Ros, Flt3, SAPK2a, Fms, SGK, Fyn, SIK, GSK3P, Syk, IGF-1R, Tie-2, IKKB, TrKB, IR, WNK3, IRAK4, ZAP-70, ITK, AMPK (rat), LIMK1, Rsk2, Axl, LKB1, SAPK2a, BrSK2, Lyn (h), SAPK3, BTK, MAPKAP-K3, SAPK4, CaMKIV, MARK1, Snk, CDK2/ciclinA, MINK, SRPK1, CDK3/ciclinE, MKK4 (m), TAK1, CDK5/p25, MKK6 (h), TBK1, CDK6/ciclinD3, MLCK, TrkA, CDK7/ciclinH/MAT1, MRCKp, TSSK1, CHK1, MSK1, Yes, CK1d, MST2, ZIPK, c-Kit (D816V), MuSK, DAPK2, NEK2, DDR2, NEK6, DMPK, PAK4, DRAK1, PAR-ΙΒα, EphAI, PDGFRp, EphA2, Pim-1, EphA5, ΡΚΒβ, EphB2, ΡΚΟβΙ, EphB4, PKCδ, FGFR1, PKCn1 FGFR2, PKC0, FG- FR4, PKD2, Fgr, PKG1β, Flt1, PRK2, Hck, PYK2, HIPK2, Ret, IKKα, RIPK2, IRR, ROCK-II (humana), JNK2α2, Rse, JNK3, Rsk1 (h), Pl3 Κγ, Pl3 Κδ e Ρl3-Κβ. Os compostos da invenção são classificados contra o painel de ci- nase (tipo selvagem e/ou mutação do mesmo) e inibe a atividade de pelo menos um dos elementos de painel.
"Formas mutantes de BCR-Abl" significam mudanças de amino- ácido simples ou múltiplas da seqüência do tipo selvagem. Mutações em BCR-ABL atuam por interrupção crítica dos pontos de contato entre a proteí- na e o inibidor (por exemplo, Gleevec e similares), mais freqüentemente por indução de uma transição do estado inativo para o ativo, isto é, para uma conformação na qual BCR-ABL e Gleevec são inapropriados à ligação. A partir das análises das amostras clínicas, os repertórios de mutações encon- tradas em associação com o fenótipo resistente encontrado aumentaram ligeiramente, porém inexoravelmente com o passar do tempo. As mutações se apresentam em cacho em quatro regiões principais. Um grupo de muta- ções (G250E, Q252R, Y253F/H, E255K/V) inclui aminoácidos que formam a alça de ligação fosfato para ATP (também conhecida como alça P). Um se- gundo grupo (V289A, F311L, T315I, F317L) pode ser encontrado no sítio de ligação Gleevec e interagindo diretamente com o inibidor através das liga- ções de hidrogênio ou interações de Van der Waals. O terceiro grupo de mu- tações (M351T, E355G) forma cachos em proximidade com o domínio catalí- tico. O quarto grupo de mutações (H396R/P) está localizado na alça de ati- vação, cuja conformação é a ativação/inativação da cinase de controle de comutação molecular. As mutações do ponto BCR-ABL associadas à resis- tência de Gleevec detectadas nos pacientes incluem: M224V, L248V, G250E, G250R, Q252R, Q252H, Y253H, Y253F, E255K, E255V, D276G, T277A, V289A, F311L, T315I, T315N, F317L, M343T, M315T, E355G, F359V, F359A, V379I, F382L, L387M, L387F, H396P, H396R, A397P, S417Y, E459K e F486S (posições dos aminoácidos indicadas pelo código de letra única, são aquelas para a seqüência de GenBank, número de acesso à seqüência AAB60394, e correspondendo a todo tipo 1a ABL; Martinelli e ou- tros, Haematologica/The Hematology Journal, 2005, Abril; 90-4). A menos que de outra forma indicado para essa invenção Bcr-Abl refere-se a todo tipo de formas do tipo selvagem e mutante da enzima.
"Tratar", "tratamento" referem-se a um método para alívio ou melhorando uma doença e/ou seus sintomas presentes.
Descrição das Concretizações Preferidas
A proteína de fusão BCR-AbI é o resultado de uma translocação recíproca que funde o proto-oncogene Abl com o gene Bcr. BCR-AbI é então capaz de transformar as células B através do aumento da atividade mitogê- nica. Esse aumento resulta em uma redução da sensibilidade à apoptose, bem como uma alteração na adesão e residência das células progenitoras CML. A presente invenção fornece compostos, composições e métodos para o tratamento de doença relacionada à cinase, especificamente Abi, Bcr-Abl1 Bcr-Abl (Τ315Ι), ALK, BLK, BMX, BRK, C-kit, c-RAF, CSK, c-SRC, EGFR, Fes, FGFR3, Flt3, Fms, Fyn, IGF-1R, IR, JAK (2), JAK (3), KDR, Lck, NLK, p70S6K, PDGFRa, Ros, SAPK2a, SGK, SIK, Syk, Tie2 e doenças relaciona- das à TrkB. Por exemplo, a leucemia e outros distúrbios de proliferação re- acionados à BCR-Abl podem ser tratados através da inibição das formas mutantes e do tipo selvagem de Bcr-Abl.
Em uma concretização, com referência aos compostos da fórmu- la I1 A é selecionado de CR5a e N; em que R5a é selecionado de hidrogênio, metila, morfolino-butila e metil-piperazinil-propila; e B é selecionado de CR5b e N; em que Rsb é selecionado de hidrogênio e metila.
Em outra concretização, Ri é selecionado de hidrogênio e -X1C (O)ORe; em que Xi é metileno; e R6 é selecionado de hidrogênio e etila; e R2 é selecionado de metila, etila, morfolino-etila, dimetilamino-etila, pirrolidinil-etila, ciclopropila, metil-piperidinila, ciclopropil-metila, dimetilamino-butila, dietilami- no-etila, dimetilamino-propila, etil-piperazinil-etila e dietilamino-propila.
Em outra concretização, R4 é selecionado dentre -NHC (O)Rg, -OR9, -C (O)NHR9, -C (O)NHOR9, -C (O)OH, -C (O)N (CH3)2 e pirrolidinila- carbonila; em que Rg é benzila, fenila, ciclopropila, etila, metoxipropila e benzotiazolila; em que qualquer fenila de R9 é opcionalmente substituída com 1 a 3 radicais independentemente selecionados dentre trifluormetila, etil-piperazinila e metil-piperazinila.
São preferidos os compostos da invenção selecionados dentre N-etil-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-meto- xibenzamida, N-etóxi-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta [a]nafta- len-7-il)-5-metoxibenzamida, N-ciclopropil-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9- triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro -3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metóxi-N-(3-metoxipropil)-ben- zamida, N-benzotiazol-2-il-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopen- ta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-tri- aza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metóxi-N-(3-trifluorometil-fenil)-benzamida, 7-(2,6-dicloro-fenil)-9-metil-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] naftalen-8-ona, ácido 3-metóxi-5-[9-(2-morfolin-4-il-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclo- penta[a]naftalen-7-il]-benzóico, N-etil-3-metóxi-5-[9-(2-morfolin-4-il-etil)-8-oxo- 8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-benzamida, 3-metóxi-N,N- dimetil-5-[9-(2-morfolin-4-il-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4, 9-triaza-ciclopenta [a]naftalen-7-il]-benzamida, N-etóxi-3-metóxi-5-[9-(2-morfolin-4-il-etil)-8-oxo- 8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-benzamida, 7-[3-metóxi-5- (pirrolidina-1 -carbonil)-fenil]-9-(2-morfolin-4-il-etil)-3,9-diidro-314,9-triaza- ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-9-(2-morfolin-4- il-etiO-S.g-diidro-S^.g-triaza-ciclopentatalnaftalen-e-ona, N-[4-metil-3-(9-metil -8-0X0-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-fenil]-3-(4-metil- piperazin-1 -il)-5-trifluorometil-benzamida, 3-(4-etil-piperazin-1 -il)-N-[4-metil-3- (9-metil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] naftalen-7-il)-fenil]-5- trifluorometil-benzamida, 4-(4-etil-piperazin-1-ilmetil)-N-[4-metil-3-(9-metil-8- oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-fenil]-3-trifluorometil- benzamida, 7-(3,5-dimetoxifenil)-9-etil-3,9-diidro-3,4,9-tNaza-ciclopenta[a] naftalen-8-ona, 7-(2-cloro-3,5-dimetoxifenil)-9-etil-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclo- penta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-9-etil-3,9-diidro-3,4,9 -triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(3,5-dimetoxifenil)-9-(2-morfolin-4-il-etil) -3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2-cloro-3,5-dimetoxi- fenil)-9-(2-morfolin-4-il-etil)-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8- ona, 2-cloro-N-etóxi-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-ciclopropil-3-(9-etil-8-oxo-8,9- diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 2-cloro- 3-[9-(2-dimetilamino-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] nafta- len-7-il]-N-etil-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-5-metóxi3-[8-oxo-9-(2-pirro- lidin-1-il-etil)-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-^
2-cloro-3-(9-ciclopropil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] naftalen -7-il)-N-etil-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-5-metóxi-3-[9-(1-metil-piperi- din-4-il)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-benzami- da, 2-cloro-3-(9-ciclopropilmetil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] naftalen-7-il)-N-etil-5-metoxibenzamida, 2-cloro-3-[9-(4-dimetilamino-butil)-8- oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-N-etil-5-metoxiben- zamida, 2-cloro-3-[9-(2-dietilamino-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza- ciclopenta[a]naftalen-7-il]-N-etil-5-metoxibenzamida, 2-cloro-3-[9-(3-dimetila- mino-propil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-N-etil- 5-metoxibenzamida, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-2-metil-9-(2-morfolin-4- il-etil)-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5- dimetoxifenil)-9-etil-2-metil-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 9-ciclopropil-7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-2-metil-3)9-diidro-3,4,9-triaza- ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-9-[2-(4-etil-pipe- razin-1-il)-etil]-2-metil-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 2- cloro-N-etil-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7- il)-5-metoxibenzamida, 4-cloro-N-etil-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza -ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-3-[9-etil-2-(4- morfolin-4-il-butil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]- 5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-ciclopropil-3-(9-ciclopropil-2-metil-8-oxo-8,9- diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 2-cloro- N-etil-3-{9-etil-2-[3-(4-metil-piperazin-1 -il)-propil]-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9- triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il}-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-3-(9-etil-2- metil-8-oxo-8,9-dMdro-3H-3,4,9-tnaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxiben- zamida, 2-cloro-3-[9-(3-dietilamino-propil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza- ciclopenta[a]naftalen-7-il]-N-etil-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-5-metóxi- 3-[9-(2-morfolin-4-il-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] nafta- len-7-il]-benzamida, N-etil-3-(1-etil-2-oxo-2,7-diidro-1H-pirazol[3,4-h][1,6] naf- tiridin-3-il)-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-3-(9-etil-1-metil-8-oxo-8,9-diidro -3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, éster etílico do ácido [7-(2-cloro-3-etilcarbamoil-5-metoxifenil)-9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3,4, 9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-3-il]-acético, ácido [7-(2-cloro-3-etilcarbamoil-5- metoxifenil)-9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-3-il]- acético, N-etil-3-(9-etil-metil-e-oxo-8,9-diidro-3H-1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta [a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, N-etil-3-metóxi5-[2-metil-9-(2-morfolin-4- il-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-benza- mida, 7-(2,6-dicloro-3)5-dimetoxifenil)-2-metil-9-(2-morfolin-4-il-etil)-3,9-diidro -1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxife- nil)-9-etil-2-metil-3,9-diidro-1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 9-ciclo- propil-7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-2-metil-3,9-diidro-1,3,4,9-tetraaza- ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-9-[2-(4-etil-pipe- razin-1 -il)-etil]-2-metil-3,9-diidro-1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-9-[2-(4-etil-piperazin-1-il)-etil]-3,9-diidro-1,3, 4,9-tetraaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-9- [2-(4-etil-piperazin-1-il)-etil]-3,9-diidro-1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta[a]naftalen- 8-ona, 2,4-dicloro-N-etil-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta [a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 2,4-dicloro-N-etil-3-(9-etil-8-imino-8,9- diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 2,4-diclo- ro-N-etil-3-(9-etil-2-metil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] nafta- len-7-il)-5-metoxibenzamida, 7-(2,6-Dicloro-3-hidróxi-5-metoxifenil)-9-etil-2- metil-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-oria, 7-(3-benzilóxi-2,6- dicloro-5-metoxifenil)-9-etil-2-metil-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] nafta- len-8-ona.
Compostos preferidos adicionais da invenção são detalhados nos exemplos e tabela I a seguir.
Farmacologia e utilidade
Os compostos da invenção modulam a atividade das cinases e, como tal, são úteis para o tratamento de doenças ou distúrbios em que as cinases contribuem para a patologia e/ou simpatomologia da doença, exem- plos de cinases que são inibidas pelos compostos e composições descritos aqui e contra os métodos descritos aqui são úteis incluem, porém não estão limitadas a Abi, Bcr-Abl, Bcr-Abl (T315I), ALK,BLK, BMX, BRK, C-kit, c-RAF, CSK, c-SRC, EGFR, Fes, FGFR3, Flt3, Fms, Fyn, IGF-1R, IR, JAK (2), JAK (3), KDR, Lck, NLK, p70S6K, PDGFRa, Ros, SAPK2a, SGK, SIK, Syk, Tie2 e TrkB.
Tirosina cinase de Abelson (isto é Abi, c-Abl) está envolvida na regulação do ciclo celular, na resposta ao ciclo celular à tensão genotóxica e na transmissão de informações com relação ao ambiente celular através da sinalização da integrina. No total, parece que a proteína de Abl se presta a um papel complexo como um módulo celular que integra sinais de várias fontes extracelulares e intracelulares e que influencia as decisões com rela- ção ao ciclo celular e apoptose. A tirosina cinase de Abelson inclui derivados de subtipos, tais como, a fusão quimérica (oncoproteína) BCR-AbI com ativi- dade de tirosina cinase desregulada ou v-Abl com v-aBI. BCR-AbI é crítica na patogênese de 95% da leucemia mielógena crônica (CML) e 10% de Ieu- cemia linfocítica aguda. STI-571 (GIeevec) é um inibidor da tirosina cinase BCR-AbI e é um inibidor da tirosina cinase BCR-AbI sendo também usado para o tratamento da leucemia mielógena crônica (CML). Contudo, alguns pacientes no estágio de crise de blasto de CML são resistentes ao STI-571 devido às mutações na BCR-ABI cinase. Mais de 22 mutações têm sido re- portadas para atualizar as mais comuns como sendo G250E, E255V, T315I, F317L e M351T.
Os compostos da presente invenção inibem cinase Abi, especi- almente a cinase v-Abl. Os compostos da presente invenção também inibem CBR-AbI cinase do tipo selvagem e mutações de cinase BCR-ABI e são as- sim apropriados para o tratamento do câncer Bcr-abl positivo e doenças tu- morais, tais como, Ieucemias (especialmente a leucemia mielógena crônica e leucemia linfoblástica aguda, onde são encontrados mecanismos especi- almente apoptóticos de ação) e também efeitos conhecidos no subgrupo de células tronco leucêmicas, bem como potencial para purificação dessas célu- Ias in vitro após remoção das ditas células (por exemplo, remoção da medu- la óssea) e reimplante das células uma vez que elas tiverem sido limpas de células cancerígenas (por exemplo, reimplante de células de medula óssea purificada).
As vias de sinalização Ras-Raf-MEK-ERK mediam a resposta celular aos sinais do crescimento. A Ras é mutada a uma forma oncogênica em -15% do câncer humano. A família Raf pertence à proteína cinase seri- na/treonina e inclui três elementos, A-Raf1 B-Raf e c-Raf (ou Raf-1). O foco em Raf sendo um foco medicamentoso centrado na relação de Raf como um efetor de Ras a jusante. Contudo, dados recentes sugerem que B-Raf pode ter um papel proeminente na formação de determinadores tumores sem de- senvolvimento para o alelo Ras ativado (Nature 417, 949 - 954 (12 julho de 2002). Especificamente, as mutações de B-Raf foram detectadas em uma grande porcentagem de melanomas malignas.
Os tratamentos médicos existentes para melanoma são limita- dos à sua eficácia, especialmente para melanoma em estágio tardio. Os compostos da presente invenção também inibem processos celulares envol- vendo b-Raf cinase, provendo uma nova oportunidade para o tratamento dos cânceres humanos, especialmente para melanoma.
Os compostos da presente invenção também inibem processos celulares envolvendo a c-Raf cinase. A c-Raf cinase é ativada pela ras do oncogene, que é mutada em uma ampla variedade de cânceres humanos. Portanto, a inibição da atividade da cinase de c-Raf pode prover um modo de prevenir o crescimento tumoral mediado pela ras [Campbell, S. L., Onco- gene, 17, 1395 (1998)].
O PDGF (Fator do Crescimento Derivado de Plaquetas) é um fator de crescimento que ocorre muito freqüentemente, ilustrando um papel importante tanto no crescimento normal e também na proliferação celular patológica, tal como é visto na carcinogênese e nas doenças das células musculares lisas dos vasos sangüíneos, doenças das células musculares lisas na carcinogênese e doenças das células musculares lisas dos vasos sangüíneos, por exemplo, ateroesclerose e trombose. Os compostos da in- venção podem inibir a atividade (PDGFR) do receptor PDGF e são, portanto, apropriadas ao tratamento das doenças tumorais, tais como, gliomas, sar- comas, tumores da próstata e tumores de cólon, mama e ovário.
Os compostos da presente invenção podem ser usados não a- penas como substância inibidora do tumor, por exemplo, em câncer de pul- mão de célula pequena, porém também como um agente para tratar distúr- bios proliferativos não malignos, tais como, ateroesclerose, trombose, psorí- ase, esclerodermia e fibrose, bem como para proteção das células tronco, por exemplo, para combater o feito hemotóxico dos agentes quimioterapêuti- cos, tais como, 5-fluoroacila e na asma. Os compostos da invenção podem ser especialmente usados para o tratamento das doenças, os quais respon- dem a uma inibição do PDGF receptor de cinase.
Os compostos da presente invenção demonstraram efeitos úteis no tratamento dos distúrbios que surgem como resultado de transplante, por exemplo, transplante alogênico, especialmente rejeição ao tecido, tal como bronquiolite obliterativa (OB), isto é, uma rejeição crônica de transplante alo- gênico de pulmão. Em contraste com os pacientes sem OB1 aqueles com OB freqüentemente mostram uma concentração de PDGF elevada nos fluidos de lavagem broncoalveolares.
Os compostos da presente invenção são também eficazes nas doenças associadas à migração e proliferação de células musculares lisas (onde PDGF e PDGF-R freqüentemente também apresentam um papel), tal como restenose e ateroesclerose. Esses efeitos e as conseqüências dos mesmos para a proliferação ou migração das células musculares lisas vas- culares in vitro e in vivo podem ser demonstrados por administração dos compostos da presente invenção e também por investigação de seu efeito no espessamento da túnica vascular seguindo-se lesão mecânica in vivo.
A família trk dos receptores da neurotrofina (trkA, trkB, trkC) promove a sobrevivência da neurotrofina, crescimento e diferenciação dos tecidos neuronais e não-neuronais. A proteína TrkB é expressa nas células tipo neuroendócrinas nas células do intestino delgado e cólon, nas células- alfa do pâncreas, nos monócitos e macrófagos dos nodos linfáticos e do bra- ço e nas camadas granulares dos nodos linfáticos e do braço e nas camadas granulares da epiderme (Shibayama and Koizumi, 1996). A expressão da proteína TrkB foi associada à progressão desfavorável do tumor de Wilms e dos neuroblastomas. TkrB contudo, é mais expresso nas células canceríge- nas da próstata, porém não nas células normais. A via de sinalização a ju- sante dos receptores trk envolve a cascata de ativação de MAPK através de Shc, Ras ativada, genes ERK-1 e ERK-2 genes e a via de transdução gama- PCL (Sugimoto e outros 2001).
A cinase, transmite sinais c-Src oncogênicos de muitos recepto- res. Por exemplo, a superexpressão de EGFR ou HER2/neu nos tumores conduz à ativação constitutiva de c-src, que é característica da célula malig- na, porém está ausente na célula normal. Por outro lado, camundongos defi- cientes na expressão de c-src exibem um fenótipo osteopetrótico, indicando uma divisão chave de s-src, na função do osteoclasto e um possível envol- vimento dos distúrbios correlatos.
A cinase da família Tec, Bmx, uma proteína cinase não- receptora, controla a proliferação das células cancerígenas epiteliais de mamífero.
O receptor do fator de crescimento do fibroblasto 3 mostrou e- xercer um efeito regulador negativo e no crescimento ósseo e uma inibição da proliferação do condrócito. A displasia tanatofórica é causada por muta- ções diferentes no receptor 3 do fator do crescimento do fibroblasto e uma mutação, TDII, FGFR3, possui uma atividade de tirosina cinase constitutiva que ativa o fator de transcrição Statl, conduzindo à expressão de um inibi- dor do ciclo celular, parada do crescimento e desenvolvimento ósseo anor- mal (Su e outros, Nature, 1997, 386, 288-292). FGFR3 é também expresso nos cânceres do tipo de mieloma múltiplo. Os inibidores da atividade de FG- FR3 são úteis no tratamento das doenças auto-imunes ou inflamatórias me- didas pela célula T, porém não-limitados à artrite reumatóide (RA), artrite de colágeno II, esclerose múltipla (MS), Iupo eritematoso sistêmico (SLE), pso- ríase, diabetes com início na juventude, doença de Sjogren, doença de tire- óide, sarcoidose, uveíte auto-imune, doença dos intestinos inflamados (Crohn e colite ulcerativa), doença celíaca e miastenia grave.
A atividade do soro e cinase regulada por glicocorticóide (SGK) está relacionada às atividades de canal de íon perturbadas, especificamente, aquelas dos canais de sódio e/ou potássio e os compostos da invenção po- dem ser úteis para tratamento da hipertensão.
Lin et al. (1997) J. Clin. Invest. 100, 8:2072-2078 e P. Lin (1998) PNAS 95, 8829-8834, tem sido mostrada uma inibição do crescimento do tumor e vascularização e também uma diminuição nas metástases no pul- mão durante infecções por adenovírus ou durante injeções de domínio ex- tracelular de Tie-2 (Tek) no tumor do seio e modelos de xenoenxerto de me- lanoma. Os inibidores de Tie2 podem ser usados em situações onde a neo- vascularização acontece inapropriadamente (isto é, na retinopatia diabética, inflamação crônica, psoríase, sarcoma de Kaposi, neovascularização crônica devido à degeneração macular, artrite reumatóide, hemangioma infantil e cânceres).
Lck desempenha um papel na sinalização da célula T. Os ca- mundongos que não possuem o gene Lck possuem uma fraca capacidade de desenvolver timócitos. A função de Lck como um ativador positivo da si- nalização da célula T sugere que os inibidores de Lck possam ser úteis no tratamento de doença auto-imune, tal como, artrite reumatóide.
JNKs1 juntamente com outros MAPKs está implicado em possuir um papel na mediação da resposta celular ao câncer, agregação de plaque- ta induzida por trombina, distúrbios da imunodeficiência, doenças auto- imunes, morte celular, alergias, osteoporose e doenças cardíacas. Os alvos terapêuticos relacionados à ativação da via JNK incluem leucemia mielógena crônica (CML), artrite reumatóide, asma, osteoartrite, isquemia, câncer e do- enças neurodegenerativas. Como um resultado da importância da ativação de JNK associada à doença do fígado ou episódios de isquemia hepática, os compostos da invenção podem também ser úteis no tratamento de vários distúrbios hepáticos. Um papel de JKN para doença cardiovascular, tal co- mo, infarto do miocárdio ou falência cardíaca congestiva foi também reporta- do como sendo mostrado que JNK media respostas hipertróficas em relação às várias formas de tensão cardíaca. Foi demonstrado que a cascata de JNK também desempenha um papel na ativação da célula T, incluindo ativação do promotor IL-2. Assim, os inibidores de JNK podem ter valor terapêutico na alteração das respostas imunes patológicas. Um papel para ativação de JNK nos vários tipos de cânceres também foi estabelecido, sugerindo o uso em potencial de inibidores de JNK no câncer. Por exemplo, JNK ativado consti- tutivamente está associado à tumorigênese mediada por HTLV-1 [Oncogene 13:135-42 (1996)]. JNK pode desempenhar um papel no sarcoma de Kaposi (KS). Outros efeitos proliferativos de outras citosinas implicadas na prolifera- ção de KS, tais como, fator do crescimento endotelial (VEGF), IL-6 e TNFa, podem também ser mediados por JNK. Além disso, a regulação do gene c- jun nas células transformadas com p210 BCR-ABL corresponde à atividade de JNK, sugerindo um papel para os inibidores de JNK no tratamento para leucemia mielógena crônica (CML) [Blood 92:2450-60 (1998)].
Acredita-se que determinadas condições proliferativas anormais estejam associadas à expressão de raf e portanto, acredita-se que sejam responsáveis pela inibição da expressão de raf. Níveis anormalmente altos da expressão da proteína raf também estão implicados na transformação e proliferação celular anormal. Também acredita-se que essas condições proli- ferativas anormais sejam responsáveis pela inibição da expressão de raf. Por exemplo, acredita-se que a expressão da proteína c-raf desempenhe um papel na proliferação celular anormal, uma vez que foi reportado que 60% de todas as linhagens celulares do carcinoma de pulmão expressem de modo incomum níveis altos de RNAm de c-raf e proteína. Exemplos adicionais de condições proliferativas anormais são distúrbios hiperproliferativos, tais co- mo, cânceres, tumores, hiperplasia, fibrose pulmonar, angiogênese, psoría- se, ateroesclerose e proliferação celular muscular lisa nos vasos sanguí- neos, tais como, estenose ou restenose seguida de angioplastia. A via de sinalização celular da qual raf faz parte também está implicada nos distúr- bios inflamatórios caracterizados por proliferação da célula T (ativação e crescimento da célula T), tais como, rejeição ao enxerto de tecido, choque de endotoxina e nefrite glomerular, por exemplo.
As proteína cinases ativadas por tensão (SAPKs) são uma famí- lia de proteína cinases que representa a penúltima etapa nas vias de trans- dução de sinal que resultam na ativação do fator de transcrição c-jun e ex- pressão dos genes regulados por c-jun. Especificamente, c-jun está envolvi- do na transcrição dos genes que codificam proteínas envolvidas no reparo 25 do DNA que se encontra danificado devido às cargas genotóxicas. Portanto, os agentes que inibem a atividade SAPK em uma célula previnem o reparo do DNA e sensibilizam a célula em relação aqueles agentes que induzem dano ao DNA ou inibem a síntese do DNA e induzem a apoptose de uma célula ou que inibem a proliferação celular.
As proteína cinases ativadas por mitógeno (MAPKs) são ele- mentos das vias de transdução de sinal conservados que ativam fatores de transcrição, fatores de tradução e outras moléculas-alvo em resposta a uma variedade de sinais extracelulares. MAPKS são ativadas por fosforilação em um motivo de fosforilação dupla possuindo a seqüência Thr-X-Tyr pelas pro- teína cinases cinases ativadas por mitógeno (MKKs). Nos eucariotos mais altos, o papel fisiológico da sinalização de MAPK está relacionado aos even- tos celulares, tais como, proliferação, oncogênese, desenvolvimento e dife- renciação. Conseqüentemente, a capacidade de regular a transdução do sinal através dessas vias (especificamente as vias MKK4 e MKK6) conduzi- ria ao desenvolvimento de tratamentos e terapias preventivas para doenças humanas associadas à sinalização de MAPK, tais como, doenças inflamató- rias, doenças auto-imunes e câncer.
A família das proteína cinases S6 ribossômicas humanas consis- te em pelo menos 8 elementos (RSK1, RSK2, RSK3, RSK4, MSK1, MSK2, p70S6K e p70S6 Kb). As proteína cinases ribossômicas S6 desempenham funções pleotrópicas importantes, entre elas está um papel importante na regulação da tradução do RNAm durante a biossíntese de produção da pro- teína (Eur. J. Biochem novembro de 2000; 267 (21): 6321-30, Exp Cell Res. 25 de novembro de 1999; 253 (1): 100-9, Mol Cell Endocrinol. 25 de maio de 1999; 151 (1-2):65-77). A fosforilação da proteína ribossômica S6 por p70S6 vem sendo implicada na regulação da mobilidade celular (Immunol. Cell Biol. Agosto de 2000; 78 (4):447-51) e crescimento celular (Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol., 2000; 65:101-27), e conseqüentemente pode ser importante na metástase tumoral, na resposta imune e reparo de tecido, bem como ou- tras condições de doença.
As SAPK's (também conhecidas como "cinases de jun terminal N" ou "JNK's") são uma família de proteína cinases que representam a pe- núltima etapa nas vias de transdução de sinal que resultam na ativação do fator de transcrição de c-jun e expressão dos genes regulados por c-jun. Es- pecificamente c-jun está envolvido na transcrição dos genes que codificam as proteínas envolvidas no reparo do DNA que está danificado devido às cargas genotóxicas. Os agentes que inibem a atividade SAPK em uma célu- la previnem o reparo do DNA e sensibilizam a célula àquelas modalidades terapêuticas cancerígenas que atuam por indução do dano ao DNA. BTK desempenha um papel na doença auto-imune e/ou inflama- tória tal como Iupo eritematoso sistêmico (SLE)1 artrite reumatóide, vasculite múltipla, púrpura trombocitopênica idiopática (ITP), miastenia grave e asma. Em razão do papel de BTK na ativação da célula B, os inibidores de BTK são úteis como inibidores da atividade patogênica mediada pela célula B, tal como, produção de auto-anticorpos e são úteis para o tratamento do Iinfoma da célula B e leucemia.
CHK2 é um elemento da família das cinases de ponto de verifi- cação das proteína cinases serina/treonina e está envolvida em um meca- nismo usado para sobrevivência de dano ao DNA, tal como, dano causado por mutagenos ambientais e espécies de oxigênio reativas endógenas. Co- mo resultado, está implicada como um supressor de tumor e alvo para tera- pia cancerígena.
CSK influencia o potencial metastático das células cancerígenas, especificamente o câncer de cólon.
Fes é uma proteína tirosina cinase não-receptora que está impli- cada em uma variedade de vias de transdução de sinal de citocina, bem co- mo diferenciação das células mielóides. Fes também é um componente- chave da máquina de diferenciação de granulócito.
A atividade da tirosina cinase receptora Flt3 está implicada nas Ieucemias e síndrome mielodisplástica. Em aproximadamente 25% da AML, as células da leucemia expressam uma forma constitutivamente ativa de ti- rosina cinase autofosforilada FLT3 (p) na superfície celular. A atividade de p- FLT3 confere crescimento e vantagem de sobrevivência às células leucêmi- cas. Os pacientes com leucemia aguda, cujas células leucêmicas expressam atividade de p-FLT3 cinase possuem um resultado clínico total fraco. A inibi- ção da atividade de p-FLT3 cinase induz apoptose (morte programada da célula) das células leucêmicas.
Os inibidores de IKKa e ΙΚΚβ (1 e 2) são terapêuticos para do- enças que incluem artrite reumatóide, rejeição de transplante, doença dos intestinos inflamados, osteoartrite, asma, doença pulmonar obstrutiva crôni- ca, ateroesclerose, psoríase, esclerose múltipla, AVC, Iupo eritematoso sis- têmico, mal de Alzheimer, isquemia cerebral, lesão cerebral traumática, mal de Parkinson, esclerose lateral amiotrófica, hemorragia subaraquinóide ou- tras doenças ou distúrbios associados com a produção excessiva de media- dores inflamatórios no cérebro e sistema nervoso central).
Met está associado à maioria dos tipos de cânceres humanos principais e sua expressão está freqüentemente associada aos prognósticos fracos e metástase. Os inibidores de Met são terapêuticos para doenças que incluem cânceres, tais como, câncer de pulmão, NSCLC (câncer de pulmão de célula não pequena), câncer ósseo, câncer pancreático, câncer de pele, câncer de cabeça e pescoço, melanoma cutâneo e intra-ocular, câncer uteri- no, câncer ovariano, câncer retal, câncer da região anal, câncer do estôma- go, câncer do cólon, câncer de mama, tumores ginecológicos (por exemplo, sarcomas uterinos, carcinoma das trompas falopianas, carcinoma do endo- métrio, carcinoma do cólon do útero, carcinoma da vagina ou da vulva), do- ença de Hodgkin's, câncer do esôfago, câncer do intestino delgado, câncer do sistema endócrino (por exemplo, câncer da tireóide, paratireóide ou glân- dulas adrenais), sarcomas dos tecidos moles, câncer de uretra, câncer de pênis, câncer de próstata, leucemia crônica ou aguda, tumores sólidos da infância, Iinfomas linfócitos, câncer de bexiga, câncer dos rins ou uretra (por exemplo, carcinoma de célula renal, carcinoma da pélvis renal), malignidade pediátrica, neoplasmas do sistema nervoso central (por exemplo, Iinfoma primário do CNS, tumores do eixo espinal, glioma tronco encefálico ou ade- nomas pituitários), cânceres sanquíneos tais como, leucemia mielógena a- guda, leucemia mielógena crônica, doença cutânea neoplástica (síndrome pré-maligna) de Barrett, psoríase, micoses fungóides e hipertrofia prostática benigna, doenças relacionadas ao diabetes, tais como, retinopatia diabética, isquemia retinal e neovascularização retinal, cirrose hepática, doença cardi- ovascular, tal como, ateroesclerose, doença imunológica, tal como, doença auto-imune e doença renal. Preferivelmente, a doença é câncer, tal como, leucemia mielógena aguda e câncer de colorretal.
A cinase 2 relacionada à Nima (Nek2) é uma proteína cinase regulada pelo ciclo celular com atividade máxima no início da mitose que localiza no centrossoma. Os estudos funcionais implicaram Nek2 na regula- ção da separação do centrossoma e formação do eixo. A proteína Nek2 é elevada 2 a 5 vezes nas linhagens celulares derivadas de uma faixa de tu- mores humanos incluindo aqueles cervical, ovariano, da próstata e especifi- camente da mama.
Doenças mediadas por p70S6K ou condições incluem, porém não estão limitadas aos distúrbios proliferativos, tais como, câncer e esclero- se tuberosa.
De acordo com o precedente, a presente invenção fornece, adi- cionalmente, um método para prevenção ou tratamento de quaisquer doen- ças ou distúrbios descritos acima em um indivíduo que necessite de tal tra- tamento, o método compreendendo administração ao indivíduo de uma quantidade terapeuticamente eficaz (vide, "Administration and Pharmaceuti- cal Compositions" a seguir) de um composto da fórmula I ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo. Para qualquer um dos usos acima, a do- sagem necessária requer dependência de variação no modo de administra- ção, a condição específica a ser tratada e o efeito desejado. Administração e Composições Farmacêuticas
Em geral, os compostos da invenção serão administrados em quantidades terapeuticamente eficazes, através das quais qualquer um dos modos usuais e aceitáveis conhecidos na técnica tanto simplesmente ou em combinação com um ou mais dos agentes terapêuticos. Uma quantidade terapeuticamente eficaz pode variar amplamente dependendo da gravidade da doença, da idade e saúde relativa do indivíduo, da potência do composto usado e de outros fatores. Em geral, resultados satisfatórios são indicados como sendo obtidos sistemicamente em dosagens diárias de cerca de 0,03 a 2,5 mg/kg por peso corpóreo. Uma dosagem diária indicada no mamífero maior, por exemplo, nos seres humanos, está na faixa de cerca de 0,5 mg a cerca de 100 mg, convencionalmente administrada, por exemplo, em doses divididas de até quatro vezes ao dia ou na forma de retardo. As formas de dosagem unitária apropriadas para administração oral compreendem cerca de 1 a 50 mg de ingrediente ativo. Os compostos da presente invenção podem ser administrados como composições farmacêuticas por qualquer via convencional, especifi- camente enteralmente, por exemplo, oralmente, por exemplo, na forma de comprimidos ou cápsulas ou parenteralmente, por exemplo, na forma de so- luções injetáveis ou suspensões, topicamente, por exemplo, na forma de loções, géis, ungüentos ou cremes, ou em uma forma nasal ou de supositó- rio. As composições farmacêuticas compreendendo um composto da pre- sente invenção na forma livre ou em uma forma de sal farmaceuticamente aceitável em associação com pelo menos um veículo farmaceuticamente ativo ou diluente pode ser fabricado de modo convencional por mistura, gra- nulação ou métodos de revestimento. Por exemplo, as composições orais podem ser comprimidos ou cápsulas de gelatina compreendendo o ingredi- ente ativo em conjunto com: a) diluentes, por exemplo, lactose, dextrose, sacarose, manitol, sorbitol, celulose e/ou glicina; b) lubrificantes, por exem- pio, sílica, talco, ácido esteárico, seus sais de magnésio ou cálcio e/ou polie- tilenoglicol; para comprimidos também c) ligantes, por exemplo, silicato de magnésio alumínio, pasta de amido, gelatina, tragacanto, metilcelulose, car- boximetilcelulose de sódio e ou polivinilpirrolidona; caso desejado d) desin- tegrantes, por exemplo, amidos, Agar, ácido algínico ou seu sal de sódio ou misturas efervescentes; e/ou e) absorventes, corantes, aromatizantes e ado- çantes. Composições injetáveis podem ser soluções isotônicas aquosas ou suspensões e supositórios podem ser preparados de emulsões aquosas ou suspensões. As composições podem ser esterilizadas e/ou conter adjuvan- tes, promotores de solução, sais para regular a pressão osmótica e/ou tam- pões. Além disso, eles podem conter também outras substâncias terapeuti- camente valiosas. As formulações apropriadas para aplicações transdérmi- cas incluem uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção com um veículo. Um veículo pode incluir solventes absorventes farmacologi- camente aceitáveis de modo a ajudar na passagem através da pele do hos- pedeiro. Por exemplo, dispositivos transdérmicos estão na forma de uma bandagem compreendendo um elemento de forro, um reservatório contendo o composto opcionalmente com veículos, opcionalmente em uma barreira de controle de modo a distribuir o composto para a pele do hospedeiro em uma razão controlada e predeterminada por um período de tempo prolongado e significa prender o dispositivo à pele. Formulações transdérmicas de matriz também podem ser usadas. Formulações apropriadas para aplicação tópica, por exemplo, à pele e olhos, são preferivelmente soluções aquosas, ungüen- tos ou géis bem conhecidos na técnica. Tais podem conter solubilizantes, estabilizantes, agentes de melhora de tonicidade, tampões e conservantes.
Os compostos da invenção podem ser administrados em quanti- dades terapeuticamente eficazes em combinação com um ou mais agentes terapêuticos (combinações terapêuticas). Por exemplo, os efeitos sinergísti- cos podem ocorrer com outros imunomoduladores ou substâncias antiinfla- matórias, por exemplo, quando usadas em combinação com ciclosporina, rapamicina ou ascomicina ou análogos imunossupressores dos mesmos, por exemplo, ciclosporina A (CsA), ciclosporina G1 FK-506, rapamicina ou com- postos comparáveis, corticosteróides, ciclofosfamida, azatioprina, metotrexa- to, brequinar, leflunomida, mizoribina, ácido micofenólico, micofenolato de mofetila, 15-desoxipergualina, anticorpos imunossupressores, especialmente anticorpos monoclonais para receptores de leucócito, por exemplo, MHC1 CD2, CD3, CD4, CD7, CD25, CD28, B7, CD45, CD58 ou seus Iigantes ou outros compostos imunorreguladores, tais como, CTLA41g. Quando os compostos da invenção forem administrados em conjunto com outras terapi- as, as dosagens dos compostos co-administrados naturalmente variarão de- pendendo do tipo de co-fármaco empregado, do fármaco específico empre- gado, da condição sendo tratada e assim por diante.
A invenção também fornece combinações terapêuticas por e- xemplo, um kit compreendendo a) um primeiro agente que é um composto da invenção conforme descrito aqui, na forma livre ou na forma de sal far- maceuticamente aceitável e b) pelo menos um co-agente. O kit pode com- preender instruções para sua administração.
Os termos "co-administração" ou "administração combinada" ou similares conforme utilizados aqui significam o englobamento da administra- ção de agentes terapêuticos selecionados a um único paciente e se desti- mida, 2-cloro-3-[9-(2-dietilamino-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclo- penta[a]naftalen-7-il]-N-etil-5-metoxibenzamida, 2-cloro-3-[9-(3-dimetiIamino- propil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-N-etil-5- metoxibenzamida, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-2-metil-9-(2-morfolin-4-il- etil)-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-di- metoxifenil0-9-etil-2-metil-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 9-ciclopropil-7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-2-metil-3,9-diidro-3,4,9-triaza- ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-9-[2-(4-etil-pipe- razin-1-il)-etil]-2-metil-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 2- cloro-N-etil-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7- il)-5-metoxibenzamida, 4-cloro-N-etil-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-tria- za-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-3-[9-etil-2-(4- morfolin-4-il-butil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]- 5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-ciclopropil-3-(9-ciclopropil-2-metil-8-oxo-8,9- diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 2-cloro- N-etii-3-{9-etil-2-[3-(4-metil-piperazin-1-il)-propil]-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-tri- aza-ciclopenta[a]naftalen-7-il}-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-3-(9-etil-2- metil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxiben- zamida, 2-cloro-3-[9-(3-dietilamino-propil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza- ciclopenta[a]naftalen-7-il]-N-etil-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-5-metóxi- 3-[9-(2-morfolin-4-il-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] nafta- len-7-il]-benzamida, N-etil-3-(1-etil-2-oxo-2,7-diidro-1 H-pirazol[3,4-h][1,6] naf- tiridin-3-il)-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-3-(9-etil-1-metil-8-oxo-8,9-diidro -3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, éster etílico do ácido [7-(2-cloro-3-etilcarbamoil-5-metoxifenil)-9-etil-8-oxo-8,9-diidro -3,4, 9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-3-il]-acético, ácido [7-(2-cloro-3-etilcarbamoil-5- metoxifenil)-9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-3-íl]- acético, N-etil-3-(9-etil-2-metil-8-oxo-8,9-diidro-3H-1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta [a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, N-etil-3-metóxi-5-[2-metil-9-(2-morfolin- 4-il-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-ben- zamida, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-2-metil-9-(2-morfolin-4-il-etil)-3,9- diidro-1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dime- Esquema de Reação I
<formula>formula see original document page 25</formula>
em que n, m, A, B, R1, R2, R3 e R4 são conforme definidos no sumário da invenção. Um composto da fórmula I pode ser sintetizado por reação de um composto da fórmula 2 com um composto da fórmula 3, na presença de um solvente apropriado (por exemplo, dioxano, etanol, CH3CN, DMF, 2-butanol e similares, além de uma base apropriada (por exemplo, NaOEt, K1OBu1 CS2CO3, piperidina e similares). A reação prossegue em uma faixa de tem- peratura de cerca de 100°C a cerca de 160°C e pode levar até cerca de 24 horas para ser completada. O produto bruto é adicionalmente reagido na presença de anidrido acético, prosseguindo a uma faixa de temperatura de cerca de 100°C a cerca de 130°C, e seguido por tratamento de 6N HCI, prosseguindo a uma faixa de temperatura de cerca de 90°C a cerca de 130°C e pode levar até 24 horas para completar.
Os compostos da fórmula I podem ser preparados prosseguindo como no esquema e reação II:
Esquema de Reação II
<formula>formula see original document page 25</formula> em que n, m, A, B, R1, R2, R3 e R4 são conforme definidos no sumário da invenção. Um composto da fórmula I pode ser sintetizado por reação de um composto da fórmula 2 com um composto da fórmula 4 na presença de um solvente apropriado (por exemplo, dioxano, etanol, CH3CN, DMF, 2-butanol e similares), e uma base apropriada (por exemplo, NaOEt, KtOBu, Cs2CO3, piperidina, e similares). A reação prossegue em uma faixa de temperatura de cerca de 100°C a cerca de 160°C e pode levar até cerca de 24 horas para completar.
Exemplos detalhados da síntese de um composto da fórmula I podem ser encontrados nos exemplos a seguir.
Processos Adicionais para Fabricação dos Compostos da Invenção
Um composto da invenção pode ser preparado como um sal de adição farmaceuticamente aceitável, por reação da forma de base livre do composto com um ácido inorgânico ou orgânico farmaceuticamente aceitá- vel. Alternativamente, um sal de adição de base farmaceuticamente aceitá- vel pode ser preparado por reação da forma do ácido livre do composto com uma base orgânica ou inorgânica farmaceuticamente aceitável.
Alternativamente, as formas de sal dos compostos da invenção podem ser preparadas usando sais dos materiais de partida ou intermediá- rios.
As formas de base livre ou ácido livre dos compostos da inven- ção podem ser preparadas a partir do sal de adição de base correspondente ou sal de adição de ácido correspondente, respectivamente. Por exemplo, um composto da invenção em uma forma de sal de adição de ácido pode ser convertido na base livre correspondente por tratamento com uma base apro- priada (por exemplo, solução de hidróxido de amônio, hidróxido de sódio e similares). Um composto da invenção em uma forma de sal de adição pode ser convertido no ácido livre correspondente por tratamento com um ácido apropriado (por exemplo, ácido clorídrico).
Os compostos da invenção na forma não-oxidada podem ser preparados por N-óxidos dos compostos da invenção por tratamento com um agente de redução (por exemplo, enxofre, dióxido de enxofre, trifenil fos- fina, boroidreto de lítio, boroidreto de sódio, tricloreto de fósforo, tribrometo ou similares) em um solvente orgânico inerte apropriado (por exemplo, ace- tonitrila, etanol, dioxano aquoso ou similares) a O a 80°C.
Os derivados de pró-fármaco dos compostos da invenção po- dem ser preparados por métodos conhecidos dos versados na técnica co- mum (por exemplo, para detalhes adicionais vide Saulnier e outros (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985). Por exemplo, os pró-fármacos apropriados podem ser preparados por reação de um com- posto não derivado da invenção com um agente de carbamilação apropriado (por exemplo, cloridrato de 1,1-aciloxialquilcarbano para carbonato de nitro- fenila ou similar).
Os derivados protegidos dos compostos da invenção podem ser fabricados por meios conhecidos dos versados na técnica. Uma descrição detalhada das técnicas aplicáveis para criação de grupos de proteção e sua remoção pode ser encontrada em T. W. Greene, "Protecting Groups in Or- ganic Chemistry", 39edição, John Wiley e Sons, Inc., 1999.
Os compostos da presente invenção podem ser preparados convenientemente, ou formados durante o processo da invenção, como sol- vatos (por exemplo, hidratos). Os hidratos dos compostos da presente in- venção podem ser convenientemente preparados por recristalização de uma mistura de solvente aquosa/orgânica usando solventes orgânicos, tais como, dioxina, tetraidrofurano ou metanol.
Os compostos da invenção podem ser preparados como seus estereoisômeros individuais por reação de uma mistura racêmica do com- posto com um agente de resolução opcionalmente ativo, para formar um par de compostos diastereoisoméricos, separando os diastereoisômeros e recu- perando os enantiômeros opticamente puros. Embora a resolução dos enan- tiômeros possa ser realizada usando derivados diastereoméricos covalentes dos compostos da invenção, complexos dissociáveis são preferidos (por e- xemplo, sais diastereoméricos cristalinos). Os diasterômeros possuem pro- priedades físicas distintas (por exemplo, pontos de fusão, pontos de ebuli- ção, solubilidades, reatividade, etc.), e podem ser prontamente separados tirando-se vantagem dessas não-similaridades. Os diastereômeros podem ser separados por cromatografia, ou preferivelmente, por técnicas de sepa- ração/resolução com base nas diferenças de solubilidade. O enantiômero opticamente puro é então recuperado, juntamente com o agente de decom- posição, por qualquer prática significativa que não resulte na racemização. Uma descrição mais detalhada das técnicas aplicáveis à resolução dos este- reoisômeros dos compostos a partir de sua mistura racêmica pode ser en- contrada em Jean Jacques1 Andre Collet, Samuel H. Wilen, "Enantiomers, Racemates and Resolutions", John Wiley And Sons, Inc., 1981.
Em resumo, os compostos da fórmula I podem ser fabricados por um processo que envolve:
(a) aquele dos esquemas de reação I & II; e
(b) conversão opcional de um composto da invenção em um sal farmaceuticamente aceitável;
(c) conversão opcional de uma forma de sal de um composto da invenção em uma forma de não-sal;
(d) conversão opcional de uma forma não-oxidada de um com- posto da invenção em um N-óxido farmaceuticamente aceitável;
(e) conversão opcional de uma forma N-óxido de um composto da invenção em sua forma não-oxidada;
(f) decomposição opcional de um isômero individual de um composto da invenção a partir de uma mistura de isômeros;
(g) conversão opcional de um composto não-derivatizado da invenção em um derivado de pró-fármaco farmaceuticamente aceitável; e
(h) conversão opcional de um derivado de pró-fármaco de um composto da invenção em sua forma não-derivatizada.
À medida que a produção dos materiais de partida não foi espe- cificamente descrita, os compostos são conhecidos ou podem ser prepara- dos analogamente aos métodos conhecidos na técnica ou conforme descri- tos nos exemplos a seguir.
Um versado na técnica apreciará que as transformações acima são apenas representativas dos métodos para preparação dos compostos da presente invenção e que outros métodos bem conhecidos podem ser u- sados de modo similar.
Exemplos
A presente invenção é adicionalmente exemplificada, porém não-limitada, pelos exemplos que se seguem que ilustram a preparação dos compostos da fórmula I de acordo com a invenção.
Esquema 1
<formula>formula see original document page 29</formula>
Exemplo 1 N-Etil-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopentafalnaftalen-7-il)-5- metoxibenzamida
<formula>formula see original document page 29</formula> 1. 4-Cloro-1-triisopropilssilanil-1H-pirrol[2,3-£>] piridina
<formula>formula see original document page 30</formula>
A uma solução de 4-cloro-1H-pirrol[2,3-b]piridina (3,21 g, 21 mmols) em THF (60 ml_), resfriada a -78°C, é adicionado lentamente n-BuLi (1,6 M em hexano, 13,8 mL, 22 mmols). Após agitação por 30 minutos, o TIPSOTf (5,77 mL, 21,4 mmols) é adicionado. A mistura é deixada elevar para temperatura ambiente e saturada com água. A mistura é dividida entre hexanos (200 mL) e salmoura. Os extratos orgânicos são lavados com sal- moura, secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados. O resíduo é purificado por cromatografia de coluna (sílica-gel, eluindo com hexanos) para fornecer
O composto do título. 1H RMN 600 MHz (Acetona-Qi6) δ 8,19 (d, 1H, J = 5,4 Hz), 7,57 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 7,18 (d, 1H, J = 5,4 Hz), 6,69 (d, 1H, J= 3,0 Hz), 1,92 (sept, 3H, J= 7,2 Hz ), 1,12 (d, 18H, J= 7,2 Hz); MS m/z 309,2 (M + 1).
2. 4-Cloro-1H-pirrol[2,3-í?]piridina-5-carbaldeído e 4-cloro-1 -triisopropilssilanil- 1H-pirrol[2,3-£>]piridina-5-carbaldeído
<formula>formula see original document page 30</formula>
A uma solução de 4-cloro-1-triisopropilssilanil-1H-pirrol[2,3-t>] piridina (0,90 g, 2,91 mmols) em THF (8 mL), resfriada a -78°C, é adicionado lentamente sec-BuLi (em hexano a 1,4 M, 4,16 mL, 5,82 mmols). Após agi- tação por 45 minutos, o DMF (0,68 mL, 8,74 mmols) é adicionado a -78°C. A mistura é agitada por 1 hora e saturada com HCI na solução de éter (8,73 mL a 1M, 8,73 mmols). A mistura é deixada aquecer parà temperatura ambi- ente. A mistura de reação é basificada com solução de bicarbonato de sódio saturada a um pH de 8 e extraída com acetato de etila. Os extratos orgâni- cos são lavados com salmoura, secos sobre Na2SO4, filtrados e concentra- dos para fornecer a mistura dos compostos do título, que é empregada para a próxima reação sem qualquer purificação adicional: MS m/z 337,2 (M + 1). 3. 4-Etilamino-1 H-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbaldeído
<formula>formula see original document page 31</formula>
Uma mistura de 4-cloro-1-triisopropilssilanil-1H-pirrol[2,3-ò] piri- dina-5-carbaldeído (1 g, 2,97 mmols), etil amina (70 % em peso da solução em água, 8 mL, 100 mmols) em metoxietanol (4 mL) é aquecida a 120°C em um tubo vedado. Após toda a noite, a mistura de reação é resfriada à tempe- ratura ambiente e concentrada. O resíduo é dissolvido em solução de HCI (20 mL a 1N) e aquecida a 50°C. Após agitação por uma hora e meia, a mis- tura de reação é basificada com solução de bicarbonato de sódio saturada para pH = 8. O sólido é coletado por filtração e lavado com água, então he- xanos, seco para fornecer o composto do título como um sólido. 1H RMN 600 MHz (DMSO-cfe) δ 11,82 (s, 1H), 9,75 (s, 1H), 9,30 (t, 1 H, J= 4,8 Hz), 8,19 (s, 1 H), 7,19 (f,1 H, J = 3,6 Hz), 6,72 (m, 1H), 3,73-3,69 (m, 2H), 1,30 (t, 3H, J = 7,2 Hz); MS m/z 190,2 (M + 1).
4. Éster etílico do ácido 3-(9-Etil-8-imino-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta [a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzóico
<formula>formula see original document page 31</formula>
4-Etilamino-1H-pirrol[2,3-ò]piridina-5-carbaldeído (1 g, 5,3 mmols) e éster etílico do ácido 3-cianometil-5-metoxibenzóico (1,3 g, 5,8 mmols) são dissol- vidos em etanol (4 mL) e piperidino (2 mL, 21,2 mmols) é adicionado à tem- peratura ambiente. A mistura de reação é aquecida 120°C e agitada por 24 horas. A mistura de reação é então concentrada e seca para render o produ- to bruto. O produto bruto é usado para a próxima etapa sem qualquer purifi- cação adicional. MS m/z 391,1 (M + 1).
5. Ácido 3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)- 5-metoxibenzóico
<formula>formula see original document page 32</formula>
Anidrido acético (0,123 mL, 1,3 mmol) é adicionado ao éster etí- lico do ácido (3-(9-etil-8-imino-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] nafta- len-7-il)-5- metoxibenzóico (100 mg, 0,26 mmol) em um tubo vedado e aque- cido a 120°C por duas horas e meia. O anidrido acético é evaporado e HCI a 6N (3 mL) é adicionado e a mistura é novamente aquecida a 105°C por 1 hora. A mistura de reação é trazida à temperatura ambiente e derramada em água gelada. O ácido é cristalizado e filtrado. O mesmo é lavado com água e seco para fornecer o produto desejado. MS m/z 364,2 (M + 1).
6. N-Etil-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)- 5-metoxibenzamida
<formula>formula see original document page 32</formula>
Ácido 3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] naf- talen-7-il)-5-metoxibenzóico (31 mg, 0,085 mmol) é misturado com DIEA (444 μL, 0,255 mmol) e HATU (48,4 mg, 0,126 mmol) em 3 mL de DMF à temperatura ambiente. A mistura de reação é agitada à temperatura ambien- te por 30 minutos. Etilamina (THF a 2M, 637 μί, 0,127 mmol) é adicionada à mistura de reação. Após agitação à temperatura ambiente por 2 horas, a mistura de reação é concentrada e purificada por Prep-HPLC para fornecer um sólido marrom como sal de TFA. <formula>formula see original document page 33</formula>
Exemplo 2
3-(4-Etil-DÍDerazin-1-il)^44-metil-3-í9-metil-8-oxo-8.9-diidro-3H-3A,9-tnaza- ciclopenta[alnaftalen-7-il)-fenill-5-trifluorometil-benzam
<formula>formula see original document page 33</formula>
1. 4-Metilamino-1 H-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbaldeído
<formula>formula see original document page 33</formula>
Uma mistura de 4-cloro-1-triisopropilssilanil-1/-/-pirrol[2,3-£>] piri- dina-5-carbaldeído (5,9 g, 17,5 mmols), metil amina (40% em peso da solu- ção em água, 40 mL) em metoxietanol (10 ml_) é aquecida a 120°C em um tubo vedado. Após toda a noite, a mistura de reação é resfriada à temperatu- ra ambiente e concentrada. O resíduo é dissolvido em solução de HCl (20 mL a 1N) e aquecido a 50°C. Após agitação por uma hora e meia, a mistura de reação é basificada com solução de bicarbonato de sódio saturada para pH = 8. O sólido é coletado por filtração e lavado com água, então hexanos, seco para fornecer o composto do título como um sólido. MS m/z 176,2 (M + 1). 2. 7-Benzil-4-metilamino-7H-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbaldeído
<formula>formula see original document page 34</formula>
A uma solução de 4-metilamino-1H-pirrol[2,3-b]piridina-5- carbaldeído (0,5 g, 2,86 mmols) em DMF é adicionado Na2CO3 (900 mg, 8,6 mmols) e brometo de benzila (0,5 mL, 4,3 mmols). A reação é agitada à temperatura ambiente por 12 horas. A mistura de reação é dividida em 100 mL de água e 100 mL de acetato de etila, extraída três vezes com acetato de etila. A fase orgânica é combinada e lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4. O produto bruto é purificado por cromatografia instantânea de síli- ca-gel, eluído com metanol a 5% em acetato de etila para fornecer o com- posto do título como um sólido amarelo. 1H RMN 400 MHz (DMSO-dδ ) δ 9,70 (s, 1H), 9,20 (q, 1H, J = 5,2 Hz), 8,59 (s, 1H), 7,46 (m, 2H), 7,35 (m, 3H), 7,28 (d, 1H, J = 2,8 Hz), 7,22 (d, 1H, J = 2,4 Hz), 5,65 (s, 2H), 3,31 (d, 2H, J = 2,4 Hz). MS m/z 266,2 (M + 1). 3. 4-Benzil-9-metil-7-(2-metil-5-nitro-fenil)-4,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] naftalen-8-ona
<formula>formula see original document page 34</formula>
Uma mistura do éster metílico do ácido 7-benzil-4-metilamino- 7H-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbaldeído (400 mg, 1,5 mmol), (2-metil-5-nitro- fenil)-acético (350 mg, 1,67 mmol) e carbonato de césio (1,1 g, 3 mmols) em 5 mL de DMF anidro é aquecida a 120°C por 30 minutos. A mistura de rea- ção é resfriada à temperatura ambiente. A mistura de reação é dividida em água e acetato de etila, extraída três vezes com acetato de etila. A fase or- gânica é combinada e lavada com salmoura, seca sobre Na2S04. O produto bruto é purificado por cromatografia instantânea de sílica-gel, eluído com acetato de etila 40% a 100% em hexano para fornecer o composto do título como um sólido amarelo claro. MS m/z 426,2 (M + 1).
4. 7-(5-Amino-2-metil-fenil)-9-metίl·3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] nafta- len-8-ona
<formula>formula see original document page 35</formula>
4-Benzil-9-metil-7-(2-metil-5-nitro-fenil)-4,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] naftalen-8-ona (590 mg, 1,4 mmol) e 200 mg de Pd (OH)2 em 20 mL de eta- nol são agitados sob atmosfera de hidrogênio à temperatura ambiente por 12 horas. A mistura de reação é passada através de uma almofada de celite. O filtrado é concentrado e seco sob vácuo para fornecer o composto do título como um sólido. MS m/z 305,2 (M + 1).
5. 3-(4-Etil-piperazin-1 -il)-N-[4-metil-3-(9-metil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza - ciclopenta[a]naftalen-7-il)-fenil]-5-trifluorometil-benzamida
<formula>formula see original document page 35</formula>
Uma mistura de 7-(5-amino-2-metil-fenil)-9-metil-3,9-diidro-3,4,9- triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona (22 mg, 0,07 mmol), ácido 3-(4-Etil-pipera- zin-1-il)-5-trifluorometil-benzóico (24 mg, 0,08 mmol), HATU (30 mg, 0,08 mmol) e DIEA (27 mg, 0,21 mmol) em 0,5 mmol DMF é agitada à temperatu- ra ambiente por 2 horas. O solvente é removido por evaporação giratória. O produto bruto é purificado por HPLC de fase reversa para fornecer o com- posto do título como um sólido branco. 1H RMN 400 MHz (DMSO-cfe) δ 12,19 (s, 1H), 10,32 (s, 1H), 9,71 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,66 (m, 2H), 7,58 (s, 1H), 7,50 (t, 1H, J=2,8 Hz),7,45 (s, 1H), 7,23 (d, 1H, J=8,4), 7,04 (s, 1H), 4,06 (m, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,55 (b, 2H), 3,15 (m, 2H), 3,06 (m, 4H), 2,09 (s, 3H), 1,20 (t, 3H, J=7,2). MS m/z 589,2 (M + 1).
Esquema 3
<formula>formula see original document page 36</formula>
Exemplo 3
N-Etil-3-(1-etil-2-oxo-2,7-diidro-1H-pirazol[3,4-h][1,6]naftiridin-3-il)-5- metoxibenzamida
<formula>formula see original document page 36</formula>
1. Éster dietílico do ácido 2-{[1-(4-metoxibenzil)-1H-pirrol-2-ilamino]-metileno}- malônico
<formula>formula see original document page 36</formula>
Acrilonitrila (7,5 g, 141 mmols) é dissolvida em THF (75 mL) e resfriada a 0°C e monoidrato de hidrazina (7,41 g, 148 mmols) é adicionado na mesma temperatura. A mistura de reação é trazida à temperatura ambi- ente e agitada por 2 horas. P-anisaldeído (20,1 g, 148 mmols) é adicionado gota a gota e agitado em temperatura ambiente por 10 horas. A mistura de reação acima é então concentrada para resultar em óleo vermelho. Ao óleo acima n-BuONa em 80 mL é adicionado n-BuOH gota a gota a 0°C e trazido parà temperatura ambiente. A mistura de reação é aquecida 120°C por 3 horas e meia. Após resfriamento é derramada 300 mL de água fria e extraí- da com 2 X 200 mL de Et2O. A camada de éter é coletada e lavada com 3 X 100 mL de HCl a 1N. A camada ácida combinada é coletada e neutralizada com 50% NaOH. A mistura é novamente extraída com 200 mL de Et2O e lavada com água. Ela é seca (Na2SO4) e concentrada para render 1-(4- Metoxibenzil)-1 H-pirazol-2-ilamina como um óleo vermelho. MS m/z 204,1 (M + 1). A mistura de 1-(4-metoxibenzil)-1H-pirazol-2-ilamina (1 g, 5,0 mmols) e etoximetileno malonato de dietila (1 mL, 5,0 mmols) é aquecida 120°C por 5 horas. Ela é resfriada e, então, o composto desejado é isolado por cromatografia de coluna de sílica-gel. MS m/z 374,2 (M + 1). 2. Éster etílico do ácido 4-Cloro-1-(4-metoxibenzil)-1H-pirazol[3,4-b]piridina- 5-carboxílico
<formula>formula see original document page 37</formula>
Éster dietílico do ácido 2-{[1-(4-metoxibenzil)-1H-pirrol-2-ilamino] -metileno}-malônico (1,5 g, 4,0 mmols) é irradiado por MW a 200°C por 45 minutos. Quando 20 mL de Et2O são adicionados o composto ciclizado de éster etílico do ácido 4-hidróxi-1-(4-metoxibenzil)-1H-pirazol[3,4-b]piridina-5- carboxílico é cristalizado como um cristal branco. 1H RMN 400 MHz (DMSO- d6) δ 12,10 (s, 1H), 10,32 (s, 1H), 8,81 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 7,21 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 6,86 (d, 1H, J = 8,8), 4,39 (m, 2H), 4,26 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 1,35 (t, 3H, J = 7,2 Hz). MS m/z 328,2 (M + 1). O composto acima é aquecido com POCl3 (2 mL) em um tubo vedado a 80°C por 10 horas. A mistura de reação é resfriada e derramada em 10 mL de gelo. O sólido pareceu então ser coletado por filtração e lavado com 2 X 5 mL de água para fornecer o composto do título como sólido branco. MS m/z 346,2 (M + 1). 3. 4-Etilamino-1-(4-metoxibenzil)-1 H-pirazol[3,4-b] piridina-5-carbaldeído
<formula>formula see original document page 38</formula>
Éster etilico do ácido 4-cloro-1-(4-metoxibenzil)-1H-pirazol[3,4-b] piridina-5-carboxílico (500 mg, 1,45 mmol) é dissolvido em 15 mL de THF anidro e resfriado a -78°C. Solução de LAH THF (3,6 mL, solução de THF a 1M, 3,6 mmols) é adicionada lentamente a mesma temperatura. Após agita- ção por 3 horas a mistura de reação é trazida à temperatura ambiente e a agitação continuou por mais 4 horas. A mistura de reação é resfriada a O0C e 1 mL de MeOH:EtOAc (1:1) é adicionado para destruir LAH. Ela é filtrada através de um tampão de celite e é lavada por acetato de etila (2 X 50 mL). Após remoção do solvente sob vácuo, o produto bruto é purificado por cro- matografia de coluna de sílica-gel para render um sólido branco. MS m/z 304,1 (M + 1).
O álcool acima é então dissolvido em 20 mL de DCM e Mn02 (1,2, 13,2 mmols) é adicionado. A mistura de reação é agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura de reação é passada através de um tampão celite e lavada com acetato de etila. O filtrado combinado é concentrado e o produto é purificado por cromatografia de coluna. MS m/z 302,1 (M + 1).
Uma mistura de 4-cloro-1-(4-metoxibenzil)-1H-pirazol[3,4-b]piri- dina-5-carbaldeído (350 mg, 1,16 mmol), etil amina (70% em peso da solu- ção em água, 2 mL, 25 mmols) é aquecida a 120°C em um tubo vedado. Após toda a noite, a mistura de reação é resfriada à temperatura ambiente e concentrada. O resíduo é dissolvido em solução de HCI (1N, 4 mL) e aque- cida a 50°C. Após agitação por uma hora e meia, a mistura de reação é basi- ficada com solução de bicarbonato de sódio saturada para pH = 8. O sólido é coletado por filtração e lavado com água, então hexanos, seco para forne- cer o composto do título como um sólido. MS m/z 311,2 (M + 1). 4. N-Etil-3-(1-etil-2-oxo-2,7-diidro-1 H-pirazol[3,4-h] [1,6]naftiridin-3-il)-5-meto- xibenzamida
<formula>formula see original document page 39</formula>
O composto do título é sintetizado de 4-etilamino-1-(4-metoxi- benzil)-1H-pirazol[3,4-£>]piridina-5-carbaldeído empregando o mesmo proce- dimento conforme descrito no Esquema 1. 1H RMN 400 MHz (DMSOd6) δ 8,89 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,37 (s, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,41 (s, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,02 (s, 1H), 6,92 (s, 1H), 4,63 (d, 2H, J= 6,8 Hz), 4,25 (d, 1H, J= 4,0 Hz), 3,86 (s, 3H), 3,82-3,72 (m, 1H), 1,45 (f, 3H, J= 6,8 Hz), 1,12 (f, 3H, J = 6,8 Hz); MS m/z 392,2 (M + 1).
Esquema 4
<formula>formula see original document page 39</formula> Exemplo 4
7-(2,6-Dicloro-3,5-dimetoxifenil)-2-metil-9-(2-morfolin-4-il-etil)-3,9-diidro- 3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona
<formula>formula see original document page 40</formula>
1. 1-Benzenossulfonil-4-cloro-lH-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbaldeído
<formula>formula see original document page 40</formula>
A uma pasta fluida de Cs2CO3 (36,1 g, 110,8 mmols) em DMF (100 mL) são adicionados 10,00 g (55,4 mmols) do aldeído de partida e agi- tados por 15 minutos. Cloreto de benzenossulfonila (14,1 mL, 111 mmols) é adicionado, gota a gota e agitado por 2 horas à temperatura ambiente. A mistura de reação é diluída com água (800 mL), o precipitado esbranquiçado é filtrado, lavado com água e seco em forno a vácuo a 60°C para fornecer o produto desejado.
2. 1-Benzenossulfonil-4-cloro-5-[1,3]dioxolan-2-il-1H-pirrol[2,3-b]piridina.
<formula>formula see original document page 40</formula>
Uma mistura de aldeído (8,88 g, 27,7 mmols), etileno glicol (2,00 mL, 35,8 mmols) e TsOH H2O (200 mg) em tolueno (250 mL) é refluxada com um sifão Dean-Stark por toda a noite. A mistura de reação é lavada com uma solução de NaHCO3, concentrada e purificada através de um plugue de sílica-gel, eluente hexanos-EtOAc 2:1.
3. 1-Benzenossulfonil-4-cloro-5-[1,3]dioxolan-2-il-2-metil-1H-pirrol[2,3-b]piridina. <formula>formula see original document page 41</formula>
n-Butil lítio (2,5 M em hexano) (48,8 mL, 122 mmols) é adicionado, gota a gota, a uma solução de diisopropilamina (18,97 mL, 134 mmols) em THF anidro (200 mL) sob nitrogênio a -78°C e agitado por 30 minutos. Então, uma solução de dioxolano (8,90 g 24,4 mmols) em 100 mL de THF anidro é len- tamente adicionada e agitada por 30 minutos a -25°C. À solução marrom resultante é adicionado iodometano (10,66 mL, 171 mmols) e a mesma agi- tada por 2 horas a -25°C. Solução concentrada de NaHCO3 (10 mL) é adi- cionada e a mistura de reação é aquecida parà temperatura ambiente. Água adicionada concentrada é extraída com CH2CI2 e seca (Na2SOzi). Purificada por coluna de sílica-gel (20-30% EtOAc em hexanos).
4. 4-Cloro-5-[1,3]dioxolan-2-il-2-metil-1 H-pirrol[2,3-b]piridina.
<formula>formula see original document page 41</formula>
Uma solução de dioxolano (5,26 g, 13,9 mmols) em metanol (450 mL) e K2CO3 em água (150 mL) é aquecida ao refluxo por 2 horas. A mistura de reação é concentrada, o precipitado filtrado e lavado com água, seco em um forno a vácuo a 50°C.
5. 4-Cloro-2-metil-1 H-pirrol[2,3-jb]piridina-5-carbaldeído.
<formula>formula see original document page 41</formula>
A uma solução de dioxolano (4,36 g, 18,3 mmols) em THF (240 mL) é adicionado HCI concentrado (15 mL) em água (85 mL) e agitada em 50°C por 2 horas. THF é evaporado e solução concentrada de NaHCO3 é adicionada para pH 9-10. Cristais brancos são coletados por filtração e se- cos em um forno a vácuo a 50°C para fornecer o produto desejado.
6. 4-Cloro-1 -metoximetil-2-metil-1 H-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbaldeído. <formula>formula see original document page 42</formula>
Aldeido (3,53 g, 18,1 mmols) é adicionado a uma pasta fluida de Cs2CO3 moído recentemente (12,06 g, 36,3 mmols) em DMF (60 mL) e agi- tado por 15 minutos à temperatura ambiente. MOMCI (2,75 mL, 36,3 mmols) é adicionado lentamente e agitado em temperatura ambiente por 3 horas. Água é adicionada (600 mL), resfriada em gelo e cristais esbranquiçados são filtrados e lavados com água e secos em vácuo a 50°C. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ: 10,53 (s, 1H, CHO), 8,75 (s, 1H, H-6), 6,51 (s, 1H, H-3), 5,67 (s, 2H, CH2), 3,29 (s, 3H, OMe), 2,55 (s, 3H, Me).
7. 1 -Metoximetil-2-metil-4-(2-morfolin-4-il-etilamino)-1 H-pirrol[2,3-b]piridina-5- carbaldeído
<formula>formula see original document page 42</formula>
Aldeído (476 mg, 2 mmols) é adicionado a um frasco e mistura- do com 1 mL de 2-morfolin-4-il-etilamina. A mistura é aquecida a 1100C por 12 horas e resfriada à temperatura ambiente. Excesso de amina é destilado sob vácuo alto. O resíduo é tratado com solução 10 mL de HCI a 1N e a- quecido a 50°C por 2 horas. A mistura de reação é neutralizada para pH 11 com K2CO3 e extraída com clorofórmio e metanol (20:1) duas vezes (2x 20 mL). Os extratos orgânicos são lavados com salmoura e secos sobre Na2SO4. O sílica-gel é concentrado e purificado (clorofórmio/Metanol= 20:1) para fornecer o produto desejado. MS m/z 333,2 (M + 1).
8. 7-(2,6-Dicloro-3,5-dimetoxifenil)-2-metil-9-(2-morfolin-4-il-etil)-3,9-diidro- 3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona <formula>formula see original document page 43</formula>
Uma mistura de aldeído (330 mg, 1 mmol), (2,6-dicloro-3,5-dime- toxifenil)-acetonitrila (750 mg, ~3 mmols), KtOBu (500 mg) e 3 mL de dioxa- no é colocada em uma ampola de reação de microondas. Ela é desgaseifi- cada por 3 vezes e reenchida com nitrogênio. A mistura é aquecida no mi- croondas a 170°C por 3.000 segundos. A mesma é resfriada à temperatura ambiente e extraída com clorofórmio/metanol (20:1) duas vezes (2x15 mL). Os extratos são lavados com água e secos sobre Na2SO4.
Após remoção do solvente, o resíduo é tratado com anidrido a- cético a 110°C por 2 horas. O solvente é removido e o resíduo é tratado com 6 HCI (3 mL) e aquecido a 100°C por 5 horas. A mistura de reação é resfria- da à temperatura ambiente e neutralizada com K2CO3 sólido para pH 11 e agitada em temperatura ambiente por 30 minutos. A mesma é extraída com clorofórmio e metanol (20:1) e os extratos são combinados e secos sobre Na2SO4. Após remoção do solvente, o resíduo é purificado sobre coluna de sílica-gel (clorofórmio/metanol/trietilamina = 50:1:0,2) para fornecer o produ- to desejado. MS m/z 517,1 (M + 1). Esquema 5
<formula>formula see original document page 44</formula>
Exemplo 5
2-Cloro-N-etil-3-(9-etil-1-metil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3.4.9-triaza-ciclopent^ naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida
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1. 4-Cloro-3-metil-1 H-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbaldeído
<formula>formula see original document page 44</formula>
Seguindo-se o procedimento do exemplo 1, etapas 1-2, exceto pela substitui- ção de 3-metil-1 H-pirrol[2,3-b]piridina (Synthesis, 1996, 877) por 1H-pirrol[2,3- b]piridina, 4-cloro-3-metil-1H-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbaldeído é obtido como um sólido branco: 1H RMN 400 MHz (CD3OD) δ 10,40 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,18 (s, 1 H); MS m/z 195,0 (M + 1). 2. 4-Cloro-1 -metoximetil-3-metil-1 H-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbaldeído
<formula>formula see original document page 45</formula>
Seguindo-se o procedimento do exemplo 4, etapa 6, exceto pela substituição de 4-cloro-3-metil-1 H-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbaldeído por 4-cloro- 2-metil-1 H-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbaldeído, 4-cloro-1 -metoximetil-3-metil- 1H-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbaldeído é obtido como um sólido branco: 1H RMN 400 MHz (CD3OD) δ 10,49 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 7,10 (s, 1 H), 5,52 (s, 2H), 3,22 (s, 3H), 2,49 (s, 3H); MS m/z 239,0 (M + 1). 3. 4-Etilamino-1 -metoximetil-3-metil-1 H-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbaldeído
<formula>formula see original document page 45</formula>
Seguindo-se o procedimento do exemplo 1, etapa 3, exceto pela substituição de 4-cloro-1 -metoximetil-3-metil-1 H-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbal- deído por 4-cloro-1 -triisopropilssilanil-1 H-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbaldeído, 4-etilamino-1 -metoximetil-3-metil-1 H-pirrol[2,3-b]piridina-5-carbaldeído é ob- tido como um sólido branco: MS m/z 248,1 (M + 1).
4. 2-Cloro-N-etil-3-(9-etil-1-metil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta [a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida
<formula>formula see original document page 45</formula>
Uma mistura de 4-etilamino-1-metoximetil-3-metil-1H-pirrol[2,3-b] piridina-5-carbaldeído (10,9 mg, 0,044 mmol), 2-cloro-3-cianometil-N-etil-5- metoxibenzamida, EtOH anidro (0,2 mL) e etóxido de sódio (21% em EtOH, 0,4 mL) é aquecida a 120°C em um banho de óleo por 4 horas. A solução de reação é resfriada à temperatura ambiente e saturada com K2CO3 saturado. A mistura é extraída com clorofórmio/metanol (20:1) duas vezes (2x15 mL).
Os extratos são lavadas com salmoura e secos sobre MgSO4. Após remo- ção do solvente, o resíduo é tratado com anidrido acético a 120°C por 1 ho- ra. O solvente é removido e o resíduo é tratado com HCI (6N, 1 mL) e aque- cido a 100°C por 2 horas. A mistura de reação é resfriada à temperatura ambiente e neutralizada com K2CO3 sólido para pH 11 e agitada em tempe- ratura ambiente por 30 minutos. Ela é extraída com clorofórmio e metanol (20:1) e os extratos são combinados e secos sobre MgSO4. Após remoção do solvente, o resíduo é purificado sobre coluna de sílica-gel (Acetato de etila: hexano = 4:1) para fornecer o produto desejado. MS m/z 439,1 (M + 1).
Exemplo 6
Éster etílico do ácido [7-(2-Cloro-3-etilcarbamoil-5-metoxifenil)-9-etil-8-oxo- 8,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-3-il]-acético
<formula>formula see original document page 46</formula>
Uma mistura de 2-cloro-N-etil-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9- triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida (7,6 mg, 0,018 mmol), éster etílico de cloro-ácido acético (2,2 mg, 0,018 mmol), carbonato de po- tássio (0,89 mg, 0,0064 mmol) e acetona (0,5 mL) é aquecida até 60°C por 2 horas. O solvente é removido e água é adicionada. A mistura é extraída com clorofórmio e metanol (20:1) e os extratos combinados e secos com MgSO4. Após remoção do solvente, o resíduo é purificado sobre coluna de sílica-gel (acetato de etila: hexano = 4:1) para fornecer o produto desejado. MS m/z 511,1 (M + 1). 2,5 mg do produto são hidrolisados com LiOH H2O em THF, MeOH e H2O à temperatura ambiente por 1 hora para fornecer o produto ácido desejado. MS m/z483,1 (M + 1). Repetindo-se os procedimentos descritos nos exemplos acima, e empregando os materiais de partida apropriados, os compostos da fórmula I que se seguem são obtidos, conforme identificado na Tabela 1.
Tabela 1
<table>table see original document page 47</column></row><table> Tabela 1 -continuação-
<table>table see original document page 48</column></row><table> Tabela 1 -continuação-
<table>table see original document page 49</column></row><table> Tabela 1 -continuação-
<table>table see original document page 50</column></row><table> Tabela 1 -continuação-
<table>table see original document page 51</column></row><table> Tabela 1 -continuação-
<table>table see original document page 52</column></row><table> Tabela 1 -continuação-
<table>table see original document page 53</column></row><table> Tabela 1 -continuação-
<table>table see original document page 54</column></row><table> Tabela 1 -continuação-
<table>table see original document page 55</column></row><table> Tabela 1 -continuação-
<table>table see original document page 56</column></row><table> Tabela 1 -continuação-
<table>table see original document page 57</column></row><table> Tabela 1 -continuação-
<table>table see original document page 58</column></row><table> Tabela 1 -continuação-
<table>table see original document page 59</column></row><table> Tabela 1 -continuação-
<table>table see original document page 60</column></row><table> Tabela 1 -continuação-
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Ensaios
Os compostos da presente invenção são ensaiados de modo a medir sua capacidade de inibir seletivamente a proliferação celular das célu- las 32D expressando BCR-AbI (32D-p210) em comparação às células 32D parenterais. Os compostos inibindo seletivamente a proliferação dessas cé- lulas transformadas com BCR-AbI são testados quanto à atividade antiproli- ferativa nas células Ba/F3 expressando tanto formas do tipo selvagem quan- to mutante de Bcr-abl. Além disso, os compostos são ensaiados pra medir sua capacidade de inibir cinases Abi, Bcr-Abl, Bcr-Abl (T315I), ALK1 BLK, BMX, BRK, C-kit, c-RAF, CSK, c-SRC, EGFR, Fes, FGFR3, Flt3, Fms1 Fyn, IGF-1R, IR, JAK (2), JAK (3), KDR, Lck, NLK, p70S6K, PDGFRa, Ros, SAPK2a, SGK, SIK, Syk, Tie2 e TrkB.
Inibicão da proliferação celular dependente de BCR-AbI (método de Alto Rendimento)
A linhagem de célula de murino usada é a linhagem de célula progenitora hemopoiética 32D transformada com DNAc de BCR-AbI (32D- p210). Essas células são mantidas em RPMI/soro bovino fetal a 10% (RP- MI/FCS) suplementada com penicilina 50 pg/mL, estreptomicina 50 Mg/mL e L-glutamina 200 mM. Células 32D não transformadas são mantidas de modo similar com adição de meio condicionado WEHI a 15% como uma fonte de IL3.
50 μL de uma suspensão de células 32D ou 32D-p210 são colo- cados em microplacas (pretas) de 384 poços Greiner a uma densidade de 5.000 células por poço. 50 nL do composto de teste (1 mM em solução de estoque de DMSO) são adicionados a cada poço (STI571 é incluído como um controle positivo). As células são incubadas por 72 horas a 37°C, CO2 a 5%. 10 μL de uma solução Azul Alamar a 60% (diagnósticos Tek) são adi- cionados a cada poço e as células são incubadas por um adicional de 24 horas. A intensidade da fluorescência (excitação a 530 nm, emissão a 580 nm) é quantificada usando o sistema Acquest0 (Molecular Devices).
Inibicão da proliferação celular dependente de BCR-AbI
Células 32D-p210 são colocadas em placas em placas TC de 96 poços a uma densidade de 15.000 células por poço. 50 μL de duas diluições em série do composto de teste (Cmax é de 40 μΜ) são adicionados a cada poço (STI571 é incluído como um controle positivo). Após incubação das células por 48 horas a 37°C, CO2 a 5%, 15 μL de MTT (Promega) são adi- cionados a cada poço e as células são incubadas por mais 5 horas. A densi- dade óptica a 570 nm é quantificada espectrofotometricamente e valores IC5O, a concentração do composto necessário para inibição a 50% sendo determinada de uma curva de resposta de dose.
Efeito da distribuição do ciclo celular
Células 32D e 32D-p210 são colocadas em placas em placas TC de 6 poços a 2,5x106 células por poço em 5 mL de meio e o composto de teste em 1 ou 10 μΜ é adicionado (STI571 é incluído como um controle). As células são então incubadas por 24 ou 48 horas a 37°C, CO2 a 5%. 2 mL de suspensão celular são lavados com PBS, fixados em EtOH a 70% por 1 hora e tratados com PBS/EDTA/RNase A por 30 minutos. Iodeto de propídio (Cf= 10 pg/mL) é adicionado e a intensidade fluoresceínica é quantificada por ci- tometria de fluxo no sistema FACScaIiburc3 (BD Biosciences). Os compostos de teste da presente invenção demonstram um efeito apoptótico nas células 32D-p210 porém não induzem apoptose nas células parentais 32D.
Efeito na autofosforilação celular de BCR-AbI
A autofosforilação de BCR-AbI é quantificada com captura de elisa empregando anticorpo de captura específico para c-abl e anticorpo de antifosfotirosina. Células 32D-p210 são colocadas em placas TC de 96 po- ços em células 2x105 por placa em 50 pL de meio. 50 pL de duas diluições em série dos compostos de teste (Cmax é 10 μΜ) são adicionados a cada po- ço (STI571 é incluído como um controle positivo). As células são incubadas por 90 minutos a 37°C, CO2 a 5%. As células são então tratadas por 1 hora em gelo com 150 µL de tampão de Iise (Tris-HCI a 50 mM, pH 7,4, NaCl A 150 mM, EDTA a 5 mM, EGTA A 1 mM e NP-40 a 1%) contendo inibidores de protease e fosfatase. 50 pL de Iisado de célula são adicionados às placas ópticas de 96 poços previamente revestidas com anticorpo específico anti- abl e bloqueadas. As placas são incubadas por 4 horas a 4°C. Após lava- gem com tampão TBS-Tween 20, 50 µL de anticorpo antifosfotirosina conju- gado com fosfatase alcalina são adicionados e a placa é adicionalmente in- cubada por toda a noite a 4°C. Após lavagem com tampão TBS-Tween 20, 90 µL de um substrato Iuminescente são adicionados e a luminescência é quantificada usando o sistema Acquest0 (Molecular Devices). Os compostos de teste da invenção que inibem a proliferação das células expressando BCR-AbI inibem a autofosforilação celular de BCR-AbI em um modo depen- dente de dose.
Efeito na proliferação das células expressando células mutantes de Bcr-abl Os compostos da invenção são testados quanto ao seu efeito antiproliferativo nas células Ba/F3 expressando formas do tipo selvagem ou mutante de BCR-AbI (G250E, E255V, T315I, F317L, M351T) que confere resistência ou sensibilidade diminuída à STI571. O efeito antiproliferativo desses compostos nas células expressando mutante-BCR-Abl e nas células não transformadas foram testados em 10, 3,3, 1,1 e 0,37 μΜ conforme des- crito acima (nos meios onde falta IL3). Os valores de IC50 dos compostos não apresentando toxicidade nas células transformada foram determinados das curvas de resposta de dose obtidas conforme descrito acima. FGFR3 (Ensaio Enzimático)
O ensaio da atividade de cinase com FGFR3 purificado (Upsta- te) é realizado em um volume final de 10 μί contendo 0,25 /vg/mL de enzima no tampão de cinase (Tris-HCI a 30 mM, pH 7,5, MgCI2 a 15 mM, MnCI2 a 4,5 mM, Na3VO4 a 15 μΜ e 50 pg/mL BSA) e substratos (5 μg/mL biotina- poli-EY (Glu, Tyr) (CIS-US, Inc.) e 3 μΜ ATP). Duas soluções são realizadas: a primeira solução de 5 μΙ_ contém a enzima FGFR3 no tampão de cinase sendo primeiro dispensada no formato 384 ProxiPlate® (Perkin-EImer) se- guido por adição de 50 nL de compostos dissolvidos em DMSO, então 5 μΙ_ da segunda solução contendo o substrato (poli-EY) e ATP no tampão foi adi- cionada a cada um dos poços. As reações são incubadas à temperatura ambiente por uma hora, paradas por adição de 10 μΙ_ de mistura de detec- ção de HTRF, que contém Tris-HCI a 30 mM pH7,5, KF a 0,5 M, ETDA a 50 mM, 0,2 mg/mL BSA, 15 pg/mL de estreptavidina-XL665 (CIS-US, Inc.) e 150 ng/mL de anticorpo de antifosfotirosina conjugado com criptato (CIS-US, Inc.). Após uma hora de incubação à temperatura ambiente para permitir interação da estreptavidina-biotina, os sinais fluorescentes decompostos com o tempo são lidos no Analisador GT (Molecular Devices Corp.). Os valo- res de IC50 são calculados por análise de regressão linear de inibição da porcentagem de cada composto em 12 concentrações (1:3 diluição a partir de 50 μΜ a 0,28 nM). Nesse ensaio, os compostos da invenção possuem um IC5O na faixa de 10 nM a 2 μΜ.
FGFR3 (Ensaio Celular)
Os compostos da invenção são testados quanto a sua capacida- de de inibição da proliferação de células Ba/F3-TEL-FGFR3 transformadas, o que depende da atividade de cinase celular. Ba/F3-TEL-FGFR3 são culti- vadas até 800.000 células/mL na suspensão, com RPMI 1640 suplementado com soro bovino fetal a 10% como o meio de cultivo. As células são dispen- sadas na placa em formado de poço 384 a 5.000 células/poço em meio de cultivo de 50 μL. Os compostos da invenção são dissolvidos e diluídos em dimetilsulfóxido (DMSO). Diluições em série de doze pontos 1:3 são realiza- das em DMSO para criar gradiente de concentrações variando tipicamente de 10 mM a 0,05 μΜ. As células são adicionadas com 50 nL de compostos diluídos e incubadas por 48 horas no incubador de cultura celular. Alamar- Blue® (TREK Diagnostic Systems), que pode ser usado para monitorar o ambiente de redução criado pelas células de proliferação, é adicionado às células em concentração final de 10%. Após quatro horas adicionais de in- cubação em um incubador de cultura de 37°C, os sinais de fluorescência de AlamarBIue® reduzidos (Excitação a 530 nm, Emissão a 580 nm) são quan- tificados no Analisador GT (Molecular Devices Corp.). Os valores de IC5o são calculados por análise de regressão linear de inibição da porcentagem de cada composto em 12 concentrações.
FLT3 e PDGFR3 (Ensaio Celular)
Os efeitos dos compostos da invenção na atividade celular de FLT3 e PDGFRp são conduzidos empregando métodos idênticos conforme descritos para atividade celular de FGFR3, exceto que ao invés de utilizar Ba/F3-TEL-FGFR3, são empregados Ba/F3-FLT3-ITD e Ba/F3-Tel-PDGFRp respectivamente.
Ensaio Enzimático b-Raf
Os compostos da invenção são testados quanto a sua capacida- de de inibir a atividade de b-Raf. O ensaio é realizado em placas MaxiSorp de 384 poços (NUNC) com paredes pretas e fundo claro. O substrato ΙκΒα é diluído em DPBS (1:750) e 15 μL. são adicionados a cada poço. As placas são incubadas à 4°C por toda a noite e lavadas 3 vezes com TBST (Tris a 25 mM, pH 8,0, NaCl a 150 mM e 0,05% Tween-20) empregando o lavador de placa EMBLA. As placas são bloqueadas por Superblock (15 pUpoço) por 3 horas à temperatura ambiente, lavadas 3 vezes com TBST e secas ("pat dri- ed") Tampão de ensaio contendo ATP a 20 μΜ (10 μL) é adicionado a cada poço seguido por 100 nL ou 500 nL do composto. B-Raf é diluído no tampão de ensaio (1 μL em 25 μL) e 10 μL de b-Raf diluído são adicionados a cada poço (0,4 μg/poço). As placas são incubadas à temperatura ambiente por duas horas e meia. A reação de cinase é parada por lavagem das placas 6 vezes com TBST. Anticorpo Phosph-ΙκΒα (Ser32/36) é diluído em Super- block (1:10.000) e 15 μL são adicionados a cada poço. As placas são incu- badas a 4°C por toda a noite e lavadas 6 vezes com TBST. IgG de antica- mundongo-cabra conjugado com AP é diluído em Superblock (1:1.500) e 15 μL são adicionados a cada poço. As placas são incubadas à temperatura ambiente por 1 hora e lavadas 6 vezes com TBST. 15 μL de substrato fluo- rescente Attophos AP (Promega) são adicionados a cada poço e as placas são incubadas à temperatura ambiente por 15 minutos. As placas são lidas no Acquest ou Analisador GT empregando um Programa de Intensidade de Fluorescência (Excitação de 455 nm, Emissão de 580 nm).
Ensaio Celular b-Raf
Os compostos da invenção são testados nas células A375 quan- to a sua capacidade de inibir fosforilação de MEK. A linhagem de célula A375 (ATCC) é derivada de um paciente humano com melanoma e possui uma mutação V599E no gene B-Raf. Os níveis de MEK fosforilado são ele- vados devido à mutação de B-Raf. Células A375 subconfluentes a confluen- tes são incubadas com os compostos por 2 horas a 37°C no meio isento de soro. As células são então lavadas uma vez com PBS frio e lisadas com o tampão de lise contendo Triton X100 a 1%. Após centrifugação, os sobrena- dantes são conjugados em SDS-PAGE e então transferidos para as mem- branas de nitrocelulose. As membranas são então submetidas ao Western blotting com anticorpo antifosfo-MEK (ser217/221) (Cell Signaling). A quanti- dade de MEK fosforilado é monitorada pela densidade das faixas fosfo— MEK nas membranas de nitrocelulose.
Ensaio de ligação de filtro rádio-enzimático Upstate KinaseProfilera
Os compostos da invenção são analisados quanto à sua capaci- dade de inibir elementos individuais do painel de cinase. Os compostos são testados em duplicatas a uma concentração final de 10 μΜ seguindo esse protocolo geral. Observa-se que a composição de tampão de cinase e os substratos variam de diferentes cinases incluídas no painel "Upstate Kina- seProfiler□". O tampão de cinase (2,5 μL, 10x - contendo MnCI2 quando ne- cessário), cinase ativa (0,001-0,01 Unidades; 2,5 pL), específica ou Poli (Glu4-Tyr) peptídeo (5-500 μΜ ou 0,01 mg/mL) no tampão de cinase e tam- pão de cinase (50 μΜ; 5 μL) são misturados em um eppendorf em gelo. Uma mistura de Mg/ATP (10 μL; MgCI2 a 67,5 (ou 33,75) mM, 450 (ou 225) μΜ ATP e 1 μCi/μΙ [γ-32Ρ]-ΑΤΡ (3000Ci/mmol)) é adicionada e a reação é incu- bada a cerca de 30°C por cerca de 10 minutos. A mistura de reação é man- chada (20 μL) em P81 2cm χ 2cm (fosfocelulose para substratos de peptídeo carregados positivamente) ou quadrado de papel Whatman número 1 (para substrato de peptídeo Poli (Glu4-Tyr). Os quadrados ensaiados são lavados 4 vezes, por 5 minutos cada, com ácido fosfórico a 0,75% e lavados uma vez com acetona por 5 minutos. Os quadrados de ensaio são transferidos para uma ampola de cintilação, 5 mL de coquetel de cintilação são adicionados e incorporação de 32P (cpm) ao substrato de peptídeo é quantificada com um contador de cintilação Beckman. A porcentagem de inibição é calculada para cada reação.
Os compostos da fórmula I, na forma livre ou na forma de sal farmaceuticamente aceitável, exibem propriedades farmacológicas valiosas, por exemplo, conforme indicado pelos testes in vitro descritos nesse pedido. Por exemplo, os compostos da fórmula I mostram, preferivelmente, um IC5o na faixa de 1 χ 10"10 a 1 χ 10'5 Μ, preferivelmente inferior a 500 nM, 250 nM, 100 nM e 50 nM para BCR-AbI do tipo selvagem e mutantes G250E, E255V, Τ315Ι, F317L e Μ351Τ BCR-Abl. Os compostos da fórmula I preferivelmen- te, a uma concentração de 10 μΜ, preferivelmente mostram uma inibição de porcentagem superior a 50%, preferivelmente superior a cerca de 70%, con- tra as cinases Abl, Bcr-Abl, Bcr-Abl (T315I), ALK, BLK, BMX, BRK, C-kit, c- RAF, CSK, c-SRC, EGFR, Fes, FGFR3, Flt3, Fms, Fyn, IGF-1R, IR, JAK (2), JAK (3), KDR, Lck, NLK, p70S6K, PDGFRα, Ros, SAPK2α, SGK, SIK, Syk, Tie2 e/ou TrkB.
Fica claro que os exemplos e concretizações descritos aqui são apenas para fins ilustrativos e que inúmeras modificações ou alterações se- rão sugeridas aos versados na técnica e devem estar incluídas no espírito e alcance desse pedido e escopo das reivindicações apensas. Todas as publi- cações, patentes e pedidos de patente citados aqui são incorporados como referência, para todos os fins.

Claims (9)

1. Composto da fórmula I: <formula>formula see original document page 69</formula> em que: A é selecionado de CR5a e N; em que R5a é selecionado de hi- drogênio, C1-6alquila e C3-8heterocicloalquil-C0-4alquila; em que a dita hetero- cicloalquila de Rsa é opcionalmente substituída com C1-6alquila; B é selecionado de CR5b e N; em que R5b é selecionado de hi- drogênio e C1-6 alquila; η é selecionado de 1, 2, 3 e 4; m é selecionado de 0 e 1; R1 é selecionado de hidrogênio e -X1C (O)OR6; em que Xi é selecionado de uma ligação e C1-6alquileno; e R6 é selecionado de hidrogê- nio e C1-6alquila; R2 é selecionado de C1-6alquila, C3-8heterocicloalquil-C0-4alquila, C3-12cicloalquil-C0-4alquila e -X2NR7aRrb; onde X2 é selecionado de uma liga- ção e C1-6alquileno; e R7a e R7b são selecionados independente de hidrogê- nio e C1-6alquila; em que qualquer heterocicloalquila de R2 é opcionalmente substituída com C1-6alquila; R3 é selecionado de halo, C1-6alquila e C1-6alcóxi; R4 é selecionado de -OR9, -NR8aC (O)NR8bR9, -C (O)NR8bR9, -NR8aC (O)R9, -C (O)OR8a e -C (O)NR8aX3OR9; em que X3 é selecionado de uma ligação e C1-6alquileno; R8a e R8b são selecionados independente de hidrogênio e C1-6alquila; e R9 é selecionado de C1-6alquila, C6-10aril-C0-4alqui- la, C3-12cicloalquila e C1-10heteroarila; em que qualquer arila, heteroarila ou cicloalquila de R9 é opcionalmente substituída com 1 a 3 radicais indepen- dentemente selecionados de C1-6alquila substituída com halo e C3-8hetero cicloalquila opcionalmente substituída com C1-6alquila; ou R8b θ R9 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual R8 e Rg estão anexados formam Cl-10heterocicloalquila opcionalmente substituída com C1-6alquila; e os sais farmacêuticos dos mesmos.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1 em que: A é selecionado de CR5a e N; em que R5a é selecionado de hi- drogênio, metila, morfolino-butila e metil-piperazinil-propila; e B é selecionado de CR5b e N; em que Rsb é selecionado de hi- drogênio e metila.
3. Composto de acordo com a reivindicação 2, no qual: R1 é selecionado de hidrogênio e -X1C (O)OR6; em que X1 é metileno; e R6 é selecionado de hidrogênio e etila; e R2 é selecionado de metila, etila, morfolino-etila, dimetilamino- etila, pirrolidinil-etila, ciclopropila, metil-piperidinila, ciclopropil-metila, dimeti- lamino-butila, dietilamino-etila, dimetilamino-propila, etil-piperazinil-etila e dietilamino-propila.
4. Composto de acordo com a reivindicação 3, na qual R4 é se- lecionado de -NHC (O)R9, -OR9, -C (O)NHR9, -C (O)NHOR9, -C (O)OH, -C (O)N (CH3)2 e pirrolidinil-carbonila; em que R9 é benzila, fenila, ciclopropila, etila, metoxipropila e benzotiazolila; em que qualquer fenila de R9 é opcio- nalmente substituída com 1 a 3 radicais independentemente selecionados de trifluorometila, etil-piperazinila e metil-piperazinila.
5. Composto de acordo com a reivindicação 4, selecionado de: N-etil-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-me- toxibenzamida, N-etóxi-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta [a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, N-ciclopropil-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro- -3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 3-(9-etil-8-oxo -8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metóxi-N-(3-metoxipro- pil)-benzamida, N-benzotiazol-2-il-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza- ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H- -3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metóxi-N-(3-trifluorometil-fenil)-ben- zamida, 7-(2,6-dicloro-fenil)-9-metil-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] nafta- len-8-ona, ácido 3-metóxi-5-[9-(2-morfolin-4-il-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9- triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-benzóico, N-etil-3-metóxi-5-[9-(2-morfolin-4- il-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-benzamida, -3-metóxi-N,N-dimetil-5-[9-(2-morfolin-4-^ za-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-benzamida, N-etóxi-3-metóxi-5-[9-(2-morfolin-4- il-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-benzamida, -7-[3-metóxi-5-(pirrolidίna-1-carbonil)-fenil]-9-(2-morfolίn-4HΊ-etιΊ)-3,9-dιΊ' 3A9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-9-(2- morfolin-4-il-etil)-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, N-[4-me- til-3-(9-metil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-fenil]- -3-(4-metil-piperazin-1 -il)-5-trifluorometil-benzamida, 3-(4-etil-piperazin-1 -il)-N- [4-metil-3-(9-metil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] naftalen-7-il)- fenil]-5-trifluorometil-benzamida, 4-(4-etil-piperazin-1-ilmetil)-N-[4-metil-3-(9- metil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-fenil]-3-trifluoro metil-benzamida, 7-(3,5-dimetoxifenil)-9-etil-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta [a]naftalen-8-ona, 7-(2-cloro-3,5-dimetoxifenil)-9-etil-3,9-diidro-3,4(9-triaza-ci- clopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-9-etil-3,9-diidro- -3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(3,5-dimetoxifenil)-9-(2-morfolin-4- il-etil)-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2-cloro-3,5-dime- toxifenil)-9-(2-morfolin-4-il-etil)-3,9-diidro-3>4,9-triaza-ciclopenta[a] naftalen-8- ona, 2-cloro-N-etóxi-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-ciclopropil-3-(9-etil-8-oxo -8,9- diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 2-cloro- -3-[9-(2-dimetilamino-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta [a] nafta- len-7-il]-N-etil-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-5-metóxi-3-[8-oxo-9-(2-pir- rolidin-1-il-etil)-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-benzami^ -2-cloro-3-(9-ciclopropil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] nafta- len-7-il)-N-etil-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-5-metóxi-3-[9-(1-metil-pipe- ridin-4-il)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-benzami- da, 2-cloro-3-(9-ciclopropilmetil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] naftalen-7-il)-N-etil-5-metoxibenzamida, 2-cloro-3-[9-(4-dimetilamino-butil)-8- oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-N-etil-5-metoxibenza- mida, 2-cloro-3-[9-(2-dietilamino-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclo- penta[a]naftalen-7-il]-N-etil-5-metoxibenzamida, 2-cloro-3-[9-(3-dimetiIamino- propil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-N-etil-5- metoxibenzamida, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-2-metil-9-(2-morfolin-4-il- etil)-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-di- metoxifeni)-9-etil-2-metil-3.9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 9-ciclopropil-7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-2-metil-3,9-diidro-3,4,9-triaza- ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-9-[2-(4-etil-pipe- razin-1-il)-etil]-2-metil-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 2- cloro-N-etil-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7- il)-5-metoxibenzamida, 4-cloro-N-etil-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-tria- za-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-3-[9-etil-2-(4- morfolin-4-il-butil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]- 5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-ciclopropil-3-(9-ciclopropil-2-metil-8-oxo-8,9- diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 2-cloro- N-etii-3-{9-etil-2-[3-(4-metil-piperazin-1-il)-propil]-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-tri- aza-ciclopenta[a]naftalen-7-il}-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-3-(9-etil-2- metil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxiben- zamida, 2-cloro-3-[9-(3-dietilamino-propil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza- ciclopenta[a]naftalen-7-il]-N-etil-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-5-metóxi- 3-[9-(2-morfolin-4-il-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] nafta- len-7-il]-benzamida, N-etil-3-(1-etil-2-oxo-2,7-diidro-1 H-pirazol[3,4-h][1,6] naf- tiridin-3-il)-5-metoxibenzamida, 2-cloro-N-etil-3-(9-etil-1-metil-8-oxo-8,9-diidro -3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, éster etílico do ácido [7-(2-cloro-3-etilcarbamoil-5-metoxifenil)-9-etil-8-oxo-8,9-diidro -3,4, 9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-3-il]-acético, ácido [7-(2-cloro-3-etilcarbamoil-5- metoxifenil)-9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-3-íl]- acético, N-etil-3-(9-etil-2-metil-8-oxo-8,9-diidro-3H-1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta [a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, N-etil-3-metóxi-5-[2-metil-9-(2-morfolin- 4-il-etil)-8-oxo-8,9-diidro-3H-1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il]-ben- zamida, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-2-metil-9-(2-morfolin-4-il-etil)-3,9- diidro-1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dime- toxifenil)-9-etil-2-metil-3,9-diidro-1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, -9-ciclopropil-7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-2-metil-3,9-diidro-1,3,4,9-tetra- aza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-9-[2-(4-etil- piperazin-1-il)-etil]-2-metil-3,9-diidro-1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta[a]naftalen-8- ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-9-[2-(4-etil-piperazin-1-il)-etil]-3,9-diidro- -1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)- -9-[2-(4-etil-piperazin-1-il)-etil]-3,9-diidro-1,3,4,9-tetraaza-ciclopenta[a]naftalen -8-ona, 2!4-dicloro-N-etil-3-(9-etil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3)4,9-triaza-ciclopenta [a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 2,4-dicloro-N-etil-3-(9-etil-8-imino-8,9- diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-7-il)-5-metoxibenzamida, 2,4-dicloro -N-etil-3-(9-etil-2-metil-8-oxo-8,9-diidro-3H-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen- -7-il)-5-metoxibenzamida, 7-(2,6-Dicloro-3-hidróxi-5-metoxifenil)-9-etil-2-metil- -3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naftalen-8-ona, 7-(2,6-dicloro-3,5-dime- toxifenil)-9-etil-3H-imidazo[4,5-h][1,6]naftiridin-8 (9H)-ona e 7-(3-Benzilóxi- -2,6-dicloro-5-metoxifenil)-9-etil-2-metil-3,9-diidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a] naftalen-8-ona.
6. Composição farmacêutica compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto como definido na reivindicação 1, em combinação com um excipiente farmaceuticamente aceitável.
7. Método para tratamento de uma doença em um mamífero, na qual a inibição da atividade da cinase pode ser prevenida, inibição ou melho- ra da patologia e/ou sintomatologia da doença, o método compreendendo administração ao animal de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto como definido na reivindicação 1.
8. Método de acordo com a reivindicação 7, no qual a cinase é selecionada de Abi, Bcr-Abl, Bcr-Abl (T315I), ALK, BLK, BMX, BRK, C-kit, c- RAF, CSK, c-SRC, EGFR, Fes, FGFR3, Flt3, Fms, Fyn, IGF-1R, IR, JAK (2), JAK (3), KDR, Lck, NLK, p70S6K, PDGFRa, Ros, SAPK2a, SGK, SIK, Syk, Tie2 e TrkB.
9. Uso de um composto como definido na reivindicação 1, na fabricação de um medicamento para tratamento de uma doença em um ani- mal no qual a atividade da cinase Abi, Bcr-Abl, Bcr-Abl (T315l), ALK, BLK, BMX, BRK1 C-kit, c-RAF, CSK, c-SRC, EGFR, Fes, FGFR3, Flt3, Fms, Fyn, IGF-1R, IR, JAK (2), JAK (3), KDR, Lck, NLK, p70S6K, PDGFRa, Ros, SAPK2a, SGK, SIK, Syk, Tie2 e TrkB contribui para a patologia e/ou sinto- matologia da doença.
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