BRPI0707360A2

BRPI0707360A2 - composição sangüìnea condicionada e processo para sua produção

Info

Publication number: BRPI0707360A2
Application number: BRPI0707360-7A
Authority: BR
Inventors: Julio Reinecke; Peter Wehling
Original assignee: Orthogen Ag
Priority date: 2006-02-03
Filing date: 2007-02-02
Publication date: 2011-05-03
Also published as: MX2008009807A; EA014435B1; KR20080100425A; EP1984006A1; HRP20090684T1; RS51247B; DE102006005016A1; UA90048C2; EP2156841A1; PL1984006T3; ATE446100T1; DE502007001793D1; PT1984006E; EP1984006B1; ES2335446T3; CA2640002A1; AU2007213996A1; WO2007090569A1; US20090047242A1; EA200870222A1

Abstract

COMPOSIçãO SANGUìNEA CONDICIONADA E PROCESSO PARA, SUA PRODUçãO. A presente invenção refere-se a um processo para a produção de composições sanguíneas condicionadas que contêm fatores induzidos, e a composições sangUíneas condicionadas preparáveis através do processo, e seu uso para o tratamento ou a prevenção de uma doença do organismo humano ou animal.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para: "COMPOSIÇÃOSANGÜÍNEA CONDICIONADA E PROCESSO PARA SUA PRODUÇÃO".

Relatório descritivo

A presente invenção refere-se a um processo para aprodução de composições sangüíneas condicionadas que contêmfatores ou citocinas induzidos, e a composições sangüíneascondicionadas e seu uso para o tratamento e a prevenção de umadoença do organismo humano ou animal.·

O estado da técnica

É conhecido que componentes de sangue, sobretudoproteínas, fatores ou citocinas tais como eritropoetina,insulina ou interferon, os quais estão presentes no sangue ouno soro sangüíneo, possuem um efeito terapêutico ouprofilático. Fatores conhecidos como o antagonista ao receptorde interleucina-1 (IL-Ira) inibem o efeito de processoscausadores de inflamações. Sabe-se também que estescomponentes sangüíneos em parte são produzidos pelo própriotecido sangüíneo ou são secretados das células sangüíneas paraa fase de plasma do sangue.

A produção ou a liberação de determinados componentessangüíneos tais como fatores ou citocinas pode serincrementada, por exemplo, através da incubação de um sanguetotal retirado a partir de um organismo animal ou humano.Depois da incubação existe uma concentração geralmente maiorde determinados fatores no sangue incubado. Estes componentessangüíneos podem então ser separados quando apropriado. 0sangue contendo os fatores induzidos também pode ser liberadode constituintes celulares e ser (re)aplicado no organismoanimal ou humano como o chamado soro sangüíneo induzido.

O processo do aumento da produção ou liberação decomponentes sangüíneos tais como fatores ou citocinas édenominado de "indução". Um processo conhecido para a induçãode componentes sangüíneos em sangue total consisteessencialmente na retirada de sangue total de um organismoanimal ou humano e depois incubá-lo durante um determinadotempo sob condições de cultivo em uma seringa descartávelmodificada, onde há esferas de vidro especiais, tratadas comácido cromossulfúrico (Meijer et al. Inflamm. res. 52 (2003):1-4). Em seguida, os constituintes celulares são removidos, demodo que é obtida uma composição de soro sangüíneocondicionada onde são induzidos alguns fatores ou citocinas.

De acordo com isso, um soro é obtido a partir de sangue totalvenoso humano onde a fração de citocinas antiinflamatóriasantagonistas ao receptor de interleucina-1 (IL-Ira),interleucina-4 (IL-4) e interleucina-10 (IL-IO) é aumentada emcomparação com sangue total recentemente retirado. A duraçãode incubação do sangue total, neste caso, é de 24 horas, e atemperatura de incubação é de cerca de 37°C.

As composições de soro sangüíneo assim produzidas sãousadas para o tratamento de diversas doenças inflamatórias edoenças auto-imunes, por exemplo, artrite reumatóide. Ficaevidente que, por exemplo, a artrite reumatóide pode seraliviada ou curada através da administração local e/ousistêmica de tais composições de soro sangüíneo condicionadas.Porém, a eficiência da terapia ainda merece aprimoramentos.

Além disso, há outras doenças, por exemplo, lesõesmusculares, que, pelo menos no modelo animal, podem sertratadas através da administração local ou sistêmica decitocinas recombinantes, tais como IL-Ira e semelhantes. Ascomposições de soro sangüíneo que podem ser produzidas de ummodo conhecido, neste caso, não apresentam nenhum efeito ouapenas efeitos insuficientes. Além disso, lesões muscularessão freqüentes, sobretudo, na medicina esportiva; elassignificam uma fração de até 30 % nas doenças ou lesõesadquiridas através da atividade esportiva. Mais de 90 % dessaslesões musculares são causadas ou por contusão ou porsolicitação de dilatação extrema do músculo. Regularmente,essas lesões causam fortes dores e, como resultado,incapacidade de continuar com o treinamento ou de exercer aatividade esportiva a curto prazo ou permanentemente. Por estarazão, o estado da técnica merece aprimoramento.

Uma doença séria eqüina é a inflamação crônica ouperiódica dos olhos (URE - uveite recorrente eqüina). Deacordo com o estado da técnica em curso, a suposição relativaà essa doença crônica é que a alergia causada pelas chamadasleptospiras e a infecção aguda ou crônica por leptospiras éimportante para o surgimento da inflamação crônica dos olhos.Na Alemanha, o grau de contaminação com estes organismosparasitários é de até 80 %. Em uma parte dos animaisinfectados, são manifestados diversos quadros da doença,incluindo a inflamação crônica dos olhos. Isto mais uma vezparece ser decisivo para o surgimento da doença, se o sistemaimunológico do animal tolera ou não as leptospiras comoorganismos parasitários.

Cavalos podem desenvolver paralisia partindo de umainflamação maciça ou irritação do tendão. Outra causa daparalisia também podem ser alterações degenerativas dentro dotecido do tendão, as chamadas "lesões centrais" (corelesions). Estas, da mesma forma, são seguidas de reaçõesinflamatórias maciças. Os sintomas de inflamações e paralisiasão geralmente tratados com glicocorticóides (cortisona),macerados de células (ACell®) , concentrados de trombócitos(Osteokin®, Magellan®, etc.) ou então preparados celulares apartir da medula óssea ou tecido gorduroso (células-tronco).

O quadro clinico da neurodermatite é causado por umareação excessiva do sistema imunológico. Porém, uma terapiacom pomadas contendo cortisona a qual é aplicadafreqüentemente no presente, está associada com alguns efeitoscolaterais.

Além disso, freqüentemente ocorrem inflamações ouirritações do sistema nervoso na população, a maioria doscasos de gênese desconhecida. Sintomas freqüentementeassociados a este contexto são as dores nas costas. Em virtudede dores como causa de uma inflamação, freqüentemente, apenaspodem ser tratadas sintomaticamente pela administração deanalgésicos, ou de glicocorticóides (como Triancinolona).

A endometriose é uma doença onde células ou tecido damucosa uterina invadem a cavidade abdominal, causando, namaioria das vezes, tumores benignos. Este tumor muitas vezes ésensível a hormônios e causa fortes dores, dependendo daposição dos hormônios. A ressecção cirúrgica ou um tratamentocom hormônios podem aliviar os sintomas associados a estadoença. Porém, freqüentemente acontecem recaídas e recidivas.Tumores podem se tornar crônicos de modo que outros órgãosaderem e desenvolvem fortes dores crônicas. Muitas vezes asintomática somente pode ser suportável com fortesanalgésicos. Mais ou menos 10 % de todas as mulheresdesenvolvem endometriose entre a puberdade e a menopausa eexperimentam sintomas mais ou menos fortes. Em casos extremos,esta doença pode levar à infertilidade.

Portanto, há uma demanda para composições de substânciasativas alternativas as quais podem ser facilmente produzidas,e processos aprimorados para sua produção, para o tratamentoefetivo das doenças acima mencionadas e de outras enfermidadesque possam ser tratadas com a ajuda de fatores ou citocinaspresentes no sangue. A tarefa técnica da presente invençãoconsiste, sobretudo, em fornecer um processo aprimorado para aprodução de uma composição sangüínea condicionada que contenhadeterminados fatores ou citocinas induzidos e que possa serempregada efetivamente para tratamento e prevenção.

A tarefa técnica que é a base da presente invenção éessencialmente solucionada pelo fornecimento de um processopara a produção de uma composição sangüínea condicionada apartir do sangue, onde o processo pelo menos inclua asseguintes etapas:

Na etapa (a), o sangue, preferencialmente sangue totalvenoso, é retirado de modo em si conhecido de um organismohumano ou animal, de preferência, fresco, por meio de punçãode uma veia. Na etapa (b) que, de preferência, ocorreimediatamente depois, o sangue retirado é incubado em pelomenos um recipiente modificado a fim de induzir fatores oucitocinas na composição sangüínea, isto é, de estimular aprodução e a liberação de tais fatores ou citocinas no tecidosangüíneo. De acordo com a presente invenção, a temperatura deincubação do sangue no recipiente modificado é de 10 a 40°C,preferencialmente de 25 a 40°C, de preferência especial, ficaem torno de 37 °C. Na etapa (c) é obtida no recipientemodificado uma composição sangüínea condicionada que é rica emdeterminados fatores ou citocinas induzidos.

De acordo com a presente invenção, é usado pelo menos umrecipiente modificado para a incubação do sangue, o qual écaracterizado pelo fato de que possui uma superfície internapara cada 1 ml de sangue incubado de pelo menos cerca de 100a2/ml ou mais, especialmente 104 mm2/ml ou mais, 123 mm2/ml oumais, 131 mm2/ml ou mais, 224 mm2/ml ou mais ou 283 mm2/ml oumais. Em uma variação preferida, o recipiente possui umasuperfície interna de cerca de 200 até cerca de 750 mm2/ml, depreferência particular, de cerca de 250 até cerca de 650mm2/ml.

Preferencialmente, o recipiente possui capacidade de 5 mlou mais, 10 ml ou mais, 50 ml ou mais, 60 ml ou mais ou 100 mlou mais. Se for previsto, por exemplo, retirar e incubar umaquantidade de aproximadamente 50 ml de sangue, de acordo com apresente invenção, a superfície interna do recipientemodificado deve ser de no mínimo cerca de 6.600 mm2 (66 cm2),de preferência, de cerca de 10.000 mm2 até cerca de 37.500 mm2(100 até 375 cm2) . Se for previsto, por exemplo, retirar eincubar um volume de mais ou menos 10 ml de sangue, então asuperfície interna do recipiente modificado de acordo com apresente invenção deve ser de no mínimo cerca de 2.300 mm2 (23cm2), de preferência, cerca de 2.500 mm2 até cerca de 7.500 mm2(25 até 75 cm2) .

A "superfície interna" do recipiente é aquela superfícieno interior do recipiente que durante a incubação está emcontato com a composição sangüínea a ser condicionada, istosignifica que é essencialmente umectada por esta.Portanto, a presente invenção prevê a incubação do sangueque foi retirado de um organismo humano ou animal em umrecipiente especial modificado com um determinado índice desuperfície da superfície interna de 200 mm2 /ml ou mais.

Surpreendentemente os inventores constataram que, devido aoprocedimento de acordo com a presente invenção, já depois deum tempo comparavelmente curto, é possível obter no recipientemodificado uma composição sangüínea condicionada que contémuma alta fração de determinados fatores induzidos e onde, porexemplo, o fator IL-6 está presente em uma concentração alta.Além disso, o procedimento de acordo com a presente invençãosurpreendentemente produz uma composição sangüínea com umaalta atividade profilática e terapêutica. Dessa forma podemser efetivamente tratadas, por exemplo, doenças inflamatóriasde articulações, inflamações de olhos em cavalos, lesões detendões, lesões dos nervos, endometriose, neurodermatite elesões musculares, através da administração da composiçãosangüínea condicionada obtida de acordo com a presenteinvenção como composição de soro sangüíneo no organismo com adoença ou em ou sobre o órgão com a doença.

Em virtude do procedimento de acordo com a presenteinvenção, pode ser obtida, por exemplo, uma composiçãosangüínea condicionada produzida a partir de sangue totalrecentemente retirado de doadores humanos, onde está presentea IL-6 com uma fração de mais de 2.000 pg/ml no sangue recémretirado. Em comparação com isso, a fração de IL-β no sanguetotal não condicionado é de aproximadamente 0,5 atéaproximadamente 15 pg/ml. Portanto, ordinariamente, de acordocom a presente invenção, consegue-se um aumento deaproximadamente 200 vezes até aproximadamente 4.000 vezes doteor de IL-6.

Além do fator IL-6, particularmente notável, outroscomponentes de eficácia terapêutica e profilática são obtidosem alta percentagem na composição sangüínea condicionada, taiscomo fatores ou citocinas. Entre eles, ao lado dos fatoresconhecidos IL-4, il-10 e il-Iraf surpreendentemente tambémfatores como interleucina-13 (IL-13), interleucina-1 (IL-I) ,sobretudo IL-Ιβ, o fator de necrose tumoral (TNF), fator decrescimento tipo insulina (IGF), fator de crescimento detransformação (TGF), fator de crescimento derivado deplaquetas (PDGF), fator de crescimento de fibroblastos (FGF) efator de crescimento de hepatócitos (HGF). Portanto, nacomposição sangüínea condicionada produzível de acordo com apresente invenção, existe vantajosamente um "cocktail" dediversos fatores ou citocinas eficientemente induzidos. Semestar preso à teoria, justamente o "cocktail" de fatores ecitocinas que pode ser obtido de acordo com a presenteinvenção constitui a composição de substâncias ativasaltamente eficaz terapeuticamente e profilaticamente.

Neste contexto, as substâncias ativas acima mencionadastambém podem estar presentes dentro da composição sangüínea naforma de vesículas, microvesículas ou exosomas. Vesiculas oumicrovesículas são constituintes subcelulares que podem serseparados, entre outros, da superfície de membrana de célulasimunes. Exosomas são componentes subcelulares, ou seja,estruturas em forma de vesículas na faixa da nanometria e quesurgem através de invaginações dos chamados corposmultivesiculares e da secreção através das células imunes.

Uma "composição sangüínea", no contexto da presenteinvenção, é uma composição sangüínea, consistindo, sobretudo,de plasma, soro e células sangüíneas que contêm pelo menos umcomponente selecionado de proteínas como fatores e citocinas.Na presente invenção, uma composição sangüínea também é umacomposição de soro sangüíneo. Uma composição de soro sangüíneodistingue-se de uma composição sangüínea, sobretudo, pelo fatode que a composição de soro sangüíneo já não contém (mais)nenhum constituinte celular. Uma composição de soro sangüíneocondicionada é obtida a partir de uma composição sangüíneaobtida de acordo com a presente invenção, por exemplo, atravésda remoção dos constituintes celulares da composição sangüíneapor meio de centrifugação, filtração ou de outras providênciasapropriadas, de modo que é obtida uma solução livre decélulas, formada por plasma sangüíneo e por componentes desoro, que contém pelo menos os fatores e citocinas induzidos.

Em uma modalidade preferida, conseqüentemente, osconstituintes celulares são completamente ou substancialmenteseparados da composição sangüínea condicionada resultante emoutra etapa, de modo que é obtida uma composição de sorosangüíneo condicionada. O soro sangüíneo condicionado pode serusado do mesmo modo que a composição sangüínea obtida deacordo com a presente invenção e geralmente oferece as mesmasvantagens técnicas de acordo com a presente invenção. Otécnico no assunto usará a composição de soro sangüíneocondicionada ou a composição de sangue total condicionada emdependência da área de aplicação e da funcionalidade. Depreferência, ele usará a composição de soro sangüíneo.

De preferência, a incubação do sangue em pelo menos umrecipiente modificado é continuada até que a indução dosfatores ou das citocinas tenha progredido o suficiente. Osfatores ou as citocinas induzidos são produzidos e secretadospelo tecido sangüíneo substancialmente a partir do momento doinicio da incubação, de modo que uma quantidade eficaz dosfatores ou citocinas induzidos acumule na composição sangüíneacondicionada.

Em uma modalidade da presente invenção, a ocorrência deIL-6 na composição sangüínea indica a indução bem sucedida esuficientemente progredida. A fração de IL-6 neste contexto éde pelo menos 30 pg/ml. Preferencialmente, a incubação érealizada no recipiente modificado até que pelo menos 30 pg/mlde IL-6 estejam presentes na composição sangüínea. Em outrasvariações preferidas a incubação é continuada até que estejampresentes na composição sangüínea no mínimo 200 pg/ml, depreferência, 500 pg/ml, especialmente preferido, 1.000 pg/ml.

Em outra modalidade a incubação é realizada por umperíodo de 36 horas ou menos. Em outra modalidade a incubaçãoé realizada por um período de nove horas ou menos. Em outravariação a incubação é realizada por um período de duas horasou mais e até 36 ou menos, de preferência, até nove horas oumenos.

Em outra modalidade, a incubação do sangue ocorre sob umapressão parcial de oxigênio baixa (p02) . Em particular, apressão parcial de oxigênio durante a incubação é inferior a 5kPa, de preferência, inferior a 3 kPa. Em uma variaçãopreferida, a incubação do sangue ocorre em um recipientemodificado sob exclusão de oxigênio.

Em uma modalidade preferida, o recipiente modificadopossui no seu interior estruturas especiais com grandesuperfície, de modo que a superfície interna que resultaprimariamente da geometria (externa) do recipiente é aumentadaatravés das estruturas especiais. O aumento da superfície emvirtude das estruturas especiais é de preferencialmente 10 %até aproximadamente 200 %, em uma variação, de 10 % a 100 %.Isso preferencialmente inclui estruturas com uma granderelação de superfície/volume como esferas e fibras, mas tambémoutras partículas tais como farinha e granulado, oucombinações dessas estruturas. De preferência, a superfíciedessas estruturas é lisa. Como uma alternativa, em algunscasos é possível empregar estruturas com uma superfícieáspera.

O técnico escolherá o número e a forma das estruturasinternas em dependência da área de aplicação e funcionalidade.E lógico que a forma e o número das estruturas internas aserem adicionadas são selecionados neste contexto de tal modoque a soma da superfície das estruturas internas adicionadas eda superfície interna do recipiente a ser modificado são detal modo ajustadas uma à outra que a relação superfície/volume(índice de superfície) prevista de acordo com a presenteinvenção é obtida.

De preferência, o recipiente modificado possui umasuperfície interna apirogênica. De preferência, o recipientemodificado é feito de material livre de pirogênio.

Se forem usadas estruturas internas livres de partículas,tais como esferas, fibras, farinha, granulado ou misturasdestes, então estes contêm ou consistem preferencialmente demateriais selecionados entre metais, óxidos de metais oumateriais sintéticos e misturas destes. Exemplos preferidospara tal são vidro, corundo, quartzo, poliestireno, cloreto depolivinila, polietileno e polipropileno e misturas destes.Especialmente preferido é o vidro de borosilicato. Estesmateriais de preferência são livres de pirogênio.

De preferência, o pelo menos um recipiente modificadocontém em seu interior esferas de vidro, especialmentepreferido, de vidro de borosilicato livre de pirogênio, sendoque as esferas de vidro possuem um diâmetro (médio) de 0,5 a 5mm, de preferência, de 1,5 mm, 2,5 mm ou de 3,5 mm. Depreferência especial, dependendo da capacidade do recipiente,as esferas de vidro são adicionadas ao recipiente modificadoem um número de cerca de 10 até 500. Se, por exemplo, umrecipiente for previsto para receber cerca de 50 ml de sangue,então devem ser colocadas preferencialmente cerca de 30 até300 esferas, especialmente cerca de 50 até 250 esferas quepossuem um diâmetro de preferencialmente 3,5 mm.

Em uma modalidade particularmente preferida, é usado umrecipiente, preferencialmente já conhecido da medicina detransfusão, para a retirada ou para o armazenamento de sangue,tais como seringa, tubinho de sangue ou bolsa para sangue, oqual é modificado pela adição de uma determinada fração detais estruturas internas, de modo que é obtido um recipientemodificado com uma superfície interna aumentada. De acordo comisso, a presente invenção prevê, para a produção de umacomposição sangüínea condicionada, o uso de pelo menos umrecipiente modificado com grande superfície interna com umíndice de superfície de acordo com a presente invenção o qualcontém estruturas internas selecionadas entre esferas, fibras,farinha, granulado, partículas ou combinações destes.

É lógico que o técnico também pode tomar medidasadicionais ou diferentes a fim de obter um recipientemodificado com uma superfície interna aumentada que possa serusado de acordo com a presente invenção. Em outra modalidadepreferida, é previsto um recipiente cujas paredes internas derecipiente possuem convexidades, cavidades e/ouprotuberâncias, de modo que é alcançada a relação desuperfície/volume prevista de acordo com a presente invenção(índice de superfície).

Em uma modalidade preferida, o recipiente modificadopossui paredes de recipiente elásticas que preferencialmentepossibilitam retirar sangue livre de ar do organismo animal ouhumano quando o recipiente modificado o qual estáessencialmente ainda sem ar somente se expande com a entradado sangue, de modo que não possa surgir nenhum espaço de arindesejado no recipiente. É lógico que o número e a superfíciedas estruturas internas previstas no recipiente modificadopara aumentar sua superfície interna não se orientam nacapacidade máxima do recipiente elástico, e sim, pelocontrário, no volume da composição sangüínea a ser incubada.

De preferência, tal recipiente elástico é escolhido entrebolsas de sangue usadas na medicina de transfusão, as quaispreferencialmente são sistemas de bolsas simples, duplas,triplas ou múltiplas. Ao passo que um sistema de bolsa únicase destaca pelo fato de que geralmente possui pelo menos umaabertura para encher e esvaziar, as bolsas duplas, triplas emúltiplas representam disposições de várias bolsas as quais secomunicam entre si e que preferencialmente estão em contatoentre si por meio de conexões por tubos. De preferência, taisbolsas são construídas de uma forma simples, a partir de duasfolhas elásticas soldadas uma sobre a outra.

Em uma modalidade especialmente preferida, o pelo menosum recipiente usado de acordo com a presente invenção é umabolsa de sangue ou um sistema de bolsas de sangue que foimodificado através da introdução de um número e de um tipo departículas selecionados de acordo com a presente invenção, depreferência, esferas de vidro.

Preferencialmente, o recipiente é um sistema de bolsascomo é usado como sistema de bolsa de sangue de duas câmaraspara centrífugas, para a separação dos constituintessangüíneos em sangue recém retirado. Se o recipiente formodificado de acordo com a presente invenção,preferencialmente através da introdução de esferas de vidro, oprocesso de acordo com a presente invenção para a produção deuma composição sangüínea condicionada pode ser entãoexecutado. Em seguida, a partir do sangue condicionado, oscomponentes sangüíneos são fracionados no sistema de bolsas desangue, a partir do qual é obtida uma composição de sorosangüíneo livre de componentes sangüíneos "sólidos".

Um sistema de bolsa de sangue preferido de duas câmarascompreende pelo menos um recipiente primário e pelo menos umrecipiente secundário os quais formam um sistema derecipientes comunicantes. 0 recipiente primário e o recipientesecundário estão conectados através de pelo menos uma linha detransferência, especialmente uma linha de transferênciafechável. No contexto da presente invenção, um "recipienteprimário" preferencialmente é um recipiente, ou seja, umcontainer, onde a composição sangüínea deve ser condicionada esubseqüentemente fracionada em seus componentes individuais éintroduzida, incubada e eventualmente submetida a um primeirofracionamento. Especialmente preferido, o recipiente primário,o recipiente secundário e a linha de transferência estãofixados em uma placa de suporte. De preferência especial, alinha de transferência pode ser fechada por meio de pelo menosuma interrupção que pode ser executada como válvula, bica e/outampão, üm "recipiente secundário" é um recipiente, ou seja,um container, onde o líquido ou a suspensão que a qual tenhasido opcionalmente separado completamente ou parcialmente emseus componentes individuais no recipiente primário, éintroduzido completamente ou parcialmente e submetido a umsegundo fracionamento. Cada um desses recipientes é equipado,em cada caso, com pelo menos uma linha de saida e/ou entrada,particularmente fecháveis, especialmente para a entrada, istoé, a introdução ou reaplicação de componentes sangüíneos e/oua saída, isto é, a retirada de componentes sangüíneos.Preferencialmente, as estruturas internas adicionais de acordocom a presente invenção, como esferas de vidro, estãoprevistas no recipiente primário ou introduzidas nele.

Em uma modalidade preferida, a bolsa ou o sistema debolsa de sangue para a separação dos componentes sangüíneossólidos da composição de soro sangüíneo condicionada atravésde centrifugação é inserida em um copo de centrifugação. Estepreferencialmente tem uma configuração de tal forma que orecipiente, que é preferencialmente na forma de uma bolsaelástica, é de tal modo esticado na centrifugação que asparedes do recipiente encostam-se parcialmente e/oucompletamente à parede interna do copo de centrifugação. Depreferência é usado um copo esterilizado. Dessa forma, comvantagem especial, é reduzida a solicitação de dilatação dasparedes do recipiente e das células contidas durante acentrifugação. O uso preferido de um copo de centrifugapermite também o uso de um material de parede mecanicamentemais leve, mais fino e menos estável para a bolsa elásticapreferida.

Em uma modalidade preferida do processo, a composiçãosangüínea incubada é uma composição sangüínea alogênica,preferencialmente uma composição sangüínea que é retirada naforma de sangue total de um doador humano ou animal e que,depois da execução do processo de acordo com a presenteinvenção, pode ser administrada como composição sangüíneacondicionada, preferencialmente como composição de sorosangüínea condicionada, a um doador humano. Em uma variação, acomposição sangüínea é autóloga, isto significa, o organismodoador e o organismo de receptor são idênticos. Nesta variaçãoespecialmente preferida, todas as vantagens da doação autólogapodem ser aproveitadas. O técnico escolherá o tipo e aidentidade do doador em função do uso e da funcionalidade.Neste contexto, em geral podem ser levados em consideração oscritérios conhecidos e as vantagens relevantes para a escolhade uma doação autóloga.

Em uma variação alternativa, a composição sangüínea éxenogênica. Isto significa que ela é retirada de um organismode espécie diferente. Para este propósito, preferencialmenteuma composição sangüínea não condicionada na forma de sanguetotal é retirada de um organismo doador, por exemplo, de umporco, e depois da execução do processo de acordo com apresente invenção, a composição sangüínea condicionada éadministrada ao indivíduo a ser tratado, o qual pertence àoutra espécie, por exemplo, cavalo, homem ou atleta.

Outro aspecto da presente invenção é o fornecimento deuma composição sangüínea condicionada que pode ser produzida,ou preferencialmente é produzida, através do processo deacordo com a presente invenção. Esta pode ser usada, de acordocom a presente invenção, para o tratamento, alívio, cura ouprevenção de uma doença do organismo humano ou animal. Deacordo com a presente invenção, esta composição sangüíneacontém os fatores induzidos na execução do processo de acordocom a presente invenção, no mínimo 30, de preferência, mais doque 200, 1000, 5000 10000 pg/ml, de preferência, de 30 até20000 pg/ml de interleucina-6. É lógico que a composiçãosangüínea condicionada que pode ser produzida por meio doprocesso de acordo com a presente invenção, além deinterleucina-6 como um dos fatores induzidos, possui outrosfatores induzidos. Surpreendentemente, foi possível mostrarque justamente a composição dos fatores induzidos obtida deacordo com a presente invenção em um "cocktail", precisamenteexibe as vantagens e efeitos de acordo com a presenteinvenção.

A preferência vai para uma composição sangüíneacondicionada que, ao lado de interleucina-6 (IL-β), possuipelo menos outro componente, selecionado entre: antagonista aoreceptor de interleucina-1 (IL-Ira), interleucina-4 (IL-4),interleucina-13 (IL-13), interleucina-1 (IL-I), interleucina-10 (IL-10), fator de necrose tumoral (TNF), fator decrescimento tipo insulina (IGF), fator de crescimento detransformação (TGF), fator de crescimento derivado deplaquetas (PDGF), fator de crescimento de fibroblastos (FGF) efator de crescimento de hepatócitos (HGF).

Em uma variação, a composição sangüínea condicionadacontém o antagonista de receptor de interleucina-1 (IL-Ira)com uma fração de 30 até 50.000 pg/ml. Em outra variação, acomposição sangüínea condicionada contém a interleucina-4 (IL-4) com uma fração de 2 até 100 pg/ml. Em outra variação, acomposição sangüínea condicionada contém a interleucina-13(IL-13) com uma fração de 2 até 100 pg/ml. Em outra variação,a composição sangüínea condicionada contém a interleucina-1(IL-I) com uma fração de 5 até 1.000 pg/1. Em uma outravariação, a composição sangüínea condicionada contém ainterleucina-10 (IL-10) com uma fração de 5 até 1.000 pg/1. Emoutra variação, a composição de sangue condicionada contém ofator de necrose tumoral (TNF) com uma fração de 5 até 1.000pg/ml. Em outra variação, a composição sangüínea condicionadacontém o fator de crescimento tipo insulina (IGF) com umafração de 100 até 15.000 pg/ml. Em outra variação, acomposição sangüínea condicionada contém o fator decrescimento de transformação (TGF) com uma fração de 10 até20.000 pg/ml. Em outra variação, a composição sangüíneacondicionada contém o fator de crescimento derivado deplaquetas (PDGF) com uma fração de 100 até 10.000 pg/ml. Emoutra variação, a composição de sangue condicionada contém ofator de crescimento de fibroblastos (FGF) com uma fração de50 até 10.000 pg/ml. Em outra variação, a composição de sanguecondicionada contém o fator de crescimento de hepatócitos(HGF) com uma fração de 50 até 10.000 pg/ml.

Surpreendentemente, justamente o cocktail de fatores ecitocinas induzidos presente na composição sangüíneacondicionada que pode ser obtido de acordo com a presenteinvenção tem uma ação profilática e terapêutica especialmenteefetiva. De acordo com a presente invenção, através dacomposição sangüínea condicionada ou da composição de sorosangüíneo condicionada obtida dela, é particularmente efetivapara uma série de doenças ou de padecimentos do organismohumano ou animal, que são tratados, curados ou aliviados dessaforma ou com o que pode ser feita uma prevenção destas doençase padecimentos.

De acordo com a presente invenção, a composição sangüíneacondicionada ou a composição de soro sangüíneo condicionadaque pode ser obtida de acordo com a presente invenção, é usadaem caso de doenças musculares, de doenças do sistema músculo-esquelético, como também de inflamações ou irritações dosistema nervoso, sobretudo doenças dos tendões, tais comolesões de tendões, tendinites, lesões dos ligamentos,degeneração de tendões e degenerações de ligamentos, comotambém para a cura e o alivio rápidos ou a prevenção dealergias, intolerância a alimentos ou medicamentos, doençasenvolvendo o sistema imunológico, sobretudo doenças auto-imunes, especialmente doenças reumatóides, e doenças causadaspor neurodermatite, e para o tratamento e a cura de lesõescrônicas, especialmente úlceras diabéticas, o tratamento deendometriose, e o tratamento da inflamação crônica dos olhos ea regeneração ou melhoria da dor da irritação dos tendões nocavalo. Doenças musculares incluem doenças musculares causadaspor lesões musculares em cirurgias em músculos, no contexto derupturas de fibras musculares associadas com degeneraçõesmusculares, com defeitos musculares, com atrofia muscular, comrupturas musculares, com distrofias musculares, ou que sãogeradas por fadiga muscular ou dores musculares.

Portanto, a presente invenção refere-se ao uso dacomposição sangüínea de acordo com a presente invenção, dacomposição de soro sangüíneo condicionada obtida dela para otratamento ou a prevenção de uma doença do organismo humano ouanimal. A doença do organismo humano ou animal que épreferencialmente tratada, aliviada ou curada ou prevenida édo grupo das doenças reumatóides, doenças do sistema músculo-esquelético e doenças ligadas ao sistema imunológico e doençasque causam dores agudas ou crônicas.

É lógico que, para o tratamento adequado da respectivadoença, o técnico escolherá o respectivo modo de aplicaçãofuncional para a administração da composição sangüíneacondicionada de acordo com a presente invenção.Preferencialmente, a composição sangüínea condicionada ou acomposição de soro sangüíneo condicionada é injetada ouaplicada por infusão no organismo e/ou no respectivo órgãoafetado, tal como articulação, músculo, tendões, pele ounervo, de preferência, através de aplicação intravenosa,intra-arterial, subcutânea, intradermal, subconjuntival,tópica, intratecal, periespinal, dentro de ou sobre nervoscentrais, dentro de ou sobre nervos periféricos, intra-articular e/ou intramuscular.

Em outro aspecto da presente invenção, a composiçãosangüínea condicionada de acordo com a presente invenção éusada para a produção de um medicamento para o tratamento ouprevenção de uma doença do organismo humano ou animal. Estasdoenças são caracterizadas acima.

Além disso, o uso da composição sangüínea de acordo com apresente invenção também é previsto como um cosmético nãoterapêutico, como o chamado tratamento "antiidade". Ficouevidente que, através da administração sistemática e/outópica, as manifestações físicas associadas ao envelhecimento,sobretudo os sintomas acima mencionados, são amenizados oucurados, mas também a aparência externa de pele, cabelo, unhaspode ser melhorada. Em outro aspecto da presente invenção, acomposição sangüínea de acordo com a presente invenção é usadapara a produção de cosméticos.

Finalmente, a presente invenção também se refere a umprocesso para o tratamento ou a prevenção de uma doença,caracterizada acima, do organismo humano ou animal, contendopelo menos a seguinte etapa: administração da composiçãosangüínea condicionada de acordo com a presente invenção noorganismo humano ou animal, em uma dose terapeuticamente ouprofilaticamente eficaz. A dose e o tipo de aplicação serãoescolhidos pelo técnico de acordo com a área de aplicação efuncionalidade.

Modalidades exemplares

A presente invenção é explicada detalhadamente com aajuda dos exemplos seguintes e da figura, sendo que osexemplos não devem ser entendidos como sendo restritivos. 0técnico descobrirá dos exemplos o princípio básico da presenteinvenção e as vantagens técnicas a ele relacionadas. Ele serácapaz de aplicar os princípios básicos e as vantagens técnicaspara outros setores não mencionados expressamente aqui.

A Figura 1 mostra uma apresentação esquematizada de umamodalidade preferida do dispositivo de acordo com a presenteinvenção, consistindo de um recipiente (10) configurado comobolsa elástica e possuindo um segmento inferior (14) umapreferencialmente em forma de semicírculo, e um segmentosuperior (15) que preferencialmente vai adelgaçando-se, compelo menos uma linha de entrada e/ou de saida (11) quedesemboca no segmento superior (15) em forma de funil dorecipiente. Na sua extremidade inferior que desemboca no lúmendo recipiente (10) é previsto, de preferência, uma válvula delábios (13), isto é, uma válvula oscilante.

Exemplo 1:-Kit para a obtenção da composição ^παπίηο,condicionada a partir de sangue total.

Prepara-se um kit esterilizável para uso único, contendoo seguinte:

- Um sistema de bolsas para a incubação do sangue e paraa separação dos constituintes sangüíneos sólidos (Tabelas 1 e2, Figura 1), equipado com esferas de vidro de borosilicato(cerca de 200 unidades), com um diâmetro de 3,5 mm;

- uma cânula de gauge 20 para introduzir o anticoagulantena seringa de retirada do sangue;

- Seringa de 60 ml para a retirada do sangue;

- Cânula de borboleta para a retirada do sangue;

~ Seringa de 60 ml para receber a composição de sorosangüíneo condicionada.

Todos os componentes são descartáveis, embalados,esterilizados com raios gama, e no conjunto embalado em umaembalagem externa estéril.

As Tabelas 1 e 2 enumeram os materiais dos componentesusados.

Tabela 1:

<table>table see original document page 31</column></row><table>

Tabela 2: Kit para a produção de uma composição sangüíneacondicionada.

<table>table see original document page 31</column></row><table><table>table see original document page 32</column></row><table><table>table see original document page 33</column></row><table>

Exemplo 2: Obtenção de uma composição de soro sangüíneocondicionada a partir de sangue integral

a) Coleta de sangue

A coleta do sangue é feita com uma seringa de 60 mlLuerlock. A seringa é preenchida lentamente com sangue totalaté a marcação de 60 ml. É preciso atentar para um enchimentosem bolhas, para que realmente se encontrem na seringaexatamente 60 ml.

b) Enchimento do sistema de bolsas e incubacão.

O conteúdo da seringa é preenchido lenta e completamenteatravés da linha de entrada (11) para dentro do recipiente(10) o qual é configurado como bolsa elástica. No recipientejá existem cerca de 200 esferas de vidro de borosilicato(Duran®) com um diâmetro de 3,5 mm.

Depois do enchimento, a seringa é desparafusada e aconexão (12) da bolsa é fechada com uma tampa de fechamento.

O recipiente (10) é armazenado a cerca de 37°C durante 9a 36 horas, preferencialmente suspenso. Durante este tempo, osangue retirado é incubado no recipiente com as esferas queaumentam a superfície interna. A superfície interna aumentadaé de cerca de 350 mm2 por cada 1 ml de sangue incubado.

c) Separação dos constituintes sangüíneos sólidos.

O recipiente (10) é inserido em um copo de centrífuga emuma suspensão centrífuga estéril. Depois do controle dacorreta distribuição de peso, a centrifugação é executada acerca de 2500 r.p.m. durante cerca de três minutos. Depois dacentrifugação, quando ocorre uma separação dos componentescelulares dos líquidos, o copo de centrífuga é cuidadosamenteretirado junto com o recipiente (10) .

Em virtude da centrifugação, células sangüíneas,principalmente eritrócitos (EZ) acumularam-se na parteinferior do recipiente (10). A centrifugação separa o soro docoágulo de sangue. O soro é transferido para a segunda bolsa eentão centrifugado pela segunda vez quando apropriado. Atravésda conexão de retirada da entrada e/ou saída (11) é retirada acomposição de soro condicionada. A seringa preenchida édesparafusada em seguida.

Exemple Mâlise_da_composição de soro sanaínn.ncondicionada.

Foram feitos quatro lotes de teste A, B, C, D e E queforam todos usados do mesmo modo para a incubação do sanguetotal.

Em um lote A, uma bolsa de sangue comercialmentedisponível (OSTEOKIN, Orthogen, Düsseldorf) , descritaessencialmente nos Exemplos 1 e 2, foi preenchida com 210esferas de vidro de borosilicato (Duran®), com um diâmetro de3,5 mm. Em virtude da adição das estruturas internas, asuperfície interna do recipiente modificado é de cerca de18.125 mm2. Na incubação de 50 ml de sangue, a relação desuperfície/volume (índice de superfície) do recipientemodificado é de mais ou menos 360 mui2/ml.

Em outro lote Bf foi usado o mesmo sistema de bolsa desangue como no lote A, onde não foi introduzida nenhumaestrutura interna adicional. O sistema de bolsa de sangue nãopreenchido possui uma superfície interna de cerca de 10.000mm2. No caso de 50 ml de sangue, isso corresponde a um índicede superfície de cerca de 200 mm2/ml.

Em outro lote C, foi usado o mesmo sistema de bolsa desangue como no lote A, e preenchido com 780 esferas de vidrocom um diâmetro de 3,5 mm. A superfície interna é então nototal cerca de 40.000 mm2. No caso de uma quantidade deenchimento de 50 ml de sangue resulta um índice de superfíciede cerca de 800 mm2/ml.

Em outro lote D, outro sistema de retirada de sangue quepossui uma forma essencialmente cilíndrica, foi preenchido com36 esferas de vidro com um diâmetro de 1,5 mm. A superfícieinterna então totaliza 4.050 mm2. No caso de uma quantidade deenchimento com 10 ml de sangue resulta num índice desuperfície de cerca de 405 mm2/ml.

Em outro lote E, um sistema de retirada de sangue quepossui uma forma essencialmente cilíndrica, foi preenchido com62 esferas de vidro com um diâmetro de 3,5 mm. A superfícieinterna então totaliza cerca de 6200 mm2. Com uma quantidade deenchimento de 10 ml de sangue resulta num índice de superfíciede cerca de 620 mm2/ml.

Em todos os lotes de teste foi retirado, em cada caso,sangue total venoso fresco, e é, em cada caso, preenchidorespectivamente nos recipientes dos lotes A, B e C. Osrecipientes foram incubados a uma temperatura de cerca de 37°cdurante 24 horas (t = 24 h) . Adicionalmente, como controle,cada vez 10 ml de sangue total fresco dos mesmos doadores foiprocessado imediatamente após a retirada do sangue (t = 0 h).

Depois de ter passado o tempo de incubação, foramquantificados nas composições sangüíneas os componentes desangue IL-lra, IL-6, TNFa e IL-Ιβ.

Resultados: A Tabela 3 mostra os resultados.

Tabela 3:

<table>table see original document page 37</column></row><table><table>table see original document page 38</column></row><table>

*) Lise celular, nenhuma medição.

Ao passo que os lotes A e B mostraram uma indução clarados fatores analisados na composição de sangue, no lote Cocorreu hemólise durante a incubação. Fica evidente que aintensidade da indução depende do Índice de superfície: com umíndice de superfície maior (maior superfície interna) é obtidauma fração maior de citocinas induzidas. Ao mesmo tempo existeum limite superior do índice de superfície. Se um valorcrítico for excedido, ocorre a hemólise. Uma composiçãosangüínea hemolisada não pode mais ser usada. No caso degrandes índices de superfície perto do valor crítico, ahemólise pode ser suprimida até certo grau, sendo que o tempode incubação de 24 horas é abreviado para 6 até 9 horas (dadosnão mostrados).Exemplo 4: Perfil de citocina da composiçãocondicionada.

Em outro lote, 36 esferas de vidro de borosilicato(Duran®) com um diâmetro de 1,5 mm foram introduzidas em um

recipiente de retirada de sangue cilíndrico a fim de aumentara superfície interna. 50 ml de sangue total recém retiradoforam incubados. O índice de superfície era de aproximadamente405 mm2/ml.

O sangue foi incubado no recipiente de retirada de sanguea uma temperatura de cerca de 37°C durante três horas, novehoras e 24 horas. Em seguida foi determinado o teor dascitocinas FGF, IL-4, IL-10, IL-Ιβ, TNF, IL-6, IL-Ira e TGF β.Os resultados:

Após apenas três horas de incubação fica evidente umaumento claro do teor de citocinas na composição sangüíneacondicionada. Na Tabela 4 são comparados os valores medidosapós 24 horas (t = 24 h) com os valores medidos imediatamenteapós a retirada de sangue (t = 0 h) .

Tabela 4

<table>table see original document page 39</column></row><table><table>table see original document page 40</column></row><table>

Exemplo 5: Tratamento de neurodermatite

Para o tratamento de neurodermatite, a composiçãosangüínea condicionada produzida de acordo com a presenteinvenção foi aplicada em pacientes na forma de injeções,também como injeções intra-articulares. Foram injetados 2 mlda composição sangüínea condicionada durante um período detrês semanas em intervalos, em cada caso, de dois a trêsdias. Uma melhoria dos sintomas da neurodermatite pode serconstatada dentro de três dias. Uma recaída da doença depoisde cerca de 2,5 meses também foi tratada com sucesso com trêsinj eções.

Em outros pacientes, onde injeções intra-articularesforam usadas primariamente para o tratamento das suas doresno joelho (causadas por artrose e problemas no menisco), ossintomas de neurodermatite também melhoraram no decurso deseis injeções. Desde então não houve nenhuma recaida daneurodermatite.

Exemplo 6: Tratamento de inflamação ou irritações donervoso.

Nesta aplicação da composição sangüínea condicionadaproduzida de acordo com a presente invenção, pacientes comdores nas costas (n = 30) os quais sofrem há pelo menos seismeses de dores nas costas por dores radiculares, foramtratados com injeções locais na raiz do nervo (injeçãoepidural - peridural segundo Krãmer et. al.). As doresmelhoraram dentro de poucas semanas e o efeito, em média,ainda era manifestado depois de seis meses. O resultado nestecaso foi no mínimo equivalente ou levemente melhorado emcomparação com pacientes que foram tratados com a mesmatécnica de injeção com 5 mg ou 10 mg de glicocorticóide(Triancinolona) como substância de comparação.Exemplo 7: Tratamento de endometriose.

Pacientes (n = 4) que sofreram de endometriose dolorosaforam tratados com uma injeção intraperitoneal de 4 ml dosoro sangüíneo condicionado produzido de acordo com apresente invenção diretamente para dentro do tecidoneoplásico causado pela endometriose e/ou para dentro dacavidade abdominal. Essas aplicações foram inicialmenteacompanhadas por fortes dores, mas, dentro de poucas horas,foram seguidas de uma clara redução das dores. Este efeitopersistiu e a paciente ficou quase que sem dores no diaseguinte. A terapia foi continuada, em intervalos semanais,por tratamento adicional com injeções subcutâneas de 2 ml, emcada vez, do soro sangüíneo condicionado. Não foramobservadas recaídas ou novas ocorrências de dores até apresente data. O efeito inibidor de dores da composiçãosangüínea condicionada de acordo com a presente invençãosurpreendentemente ultrapassa em muito o efeito deanalgésicos normais.

Exemplo 8: Inflamação crônica de olhos em cava Ins.

Para o tratamento da inflamação crônica de olhos emcavalos (uveíte recorrente eqüina - URE), a composiçãosangüínea condicionada produzida de acordo com a presenteinvenção foi injetada nos olhos (subconjuntival) ou gotejadanos olhos (tópico) de seis cavalos, dos quais três cavalos, decada vez, foram tratados em duas clínicas veterináriasdiferentes. Dentro do período de exames posteriores de até dezmeses, em nenhum dos casos tratados foi constatada umarecaída.

Exemplo 9: Regeneração e melhoria das dores de irritará Hn,tendões em cavalos.

Em outra aplicação da composição sangüínea condicionada,cavalos com paralisia causada por uma inflamação maciça ouirritação do tendão junto com a formação de hemorragia notendão, foram tratados com injeções de 3 ml, de cada vez, dosoro sangüíneo condicionado de acordo com a presente invençãono tendão. Para este propósito, em uma primeira etapa, ahemorragia foi retirada por meio de punção a fim de reduzir apressão sobre o tecido e a fim de retirar substâncias pró-inflamatórias. Depois da primeira injeção regrediramclaramente, dentro de uma semana, tanto a paralisia comotambém a quantidade de hemorragia constatável na segundasemana. Depois de quatro semanas, isto é, uma semana depois dainjeção da terceira e da quarta dose no tendão, pode serconstatada uma remissão quase completa tanto da paralisia comotambém da hemorragia.

Injeções do mesmo tipo em chamadas lesões centrais (corelesions) e/ou lesões superficiais, isto é, alteraçõesdegenerativas dentro do tecido do tendão, também produziramuma remissão clara desses sintomas clínicos. Em alguns casos

foi observado um novo preenchimento do defeito com fibras decolágeno.

Exemplo 10: Tratamento de lesões em cavalos.

Um cavalo castrado de 14 anos, paralítico em diversasarticulações, estava sofrendo há muitas semanas de uma feridapersistente acima do casco dianteiro esquerdo. A composiçãosangüínea condicionada de acordo com a presente invenção foigotejada sobre esta ferida (três gotas em uma superfície decerca 1 χ 3 cm). Em seguida, a ferida recebeu uma bandagem. Naavaliação final (depois de três tratamentos em intervalossemanais), após um período de quatro semanas, ficou evidenteque a ferida aberta tinha regredido em cerca de um terço.

Claims

1. Processo para a produção de uma composição sangüíneacondicionada a partir de sangue caracterizado pelo fato decompreender as etapas:(a) Retirada de sangue de um organismo humano ou animal;(b) Incubação do sangue em um recipiente modificado comuma superfície interna a uma temperatura de 10 a 40°C para ocondicionamento do sangue, com indução de fatores, e onde orecipiente modificado possui uma área de superfície internade 200 mm2 a 750 mm2 para cada 1 ml de sangue incubado; e(c) Obtenção de uma composição sangüínea condicionadacom fatores induzidos no recipiente modificado.

2. Processo, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a ocorrência de interleucina-6(IL-6) na composição sangüínea, com uma fração de pelo menospg por 1 ml, indica a indução bem sucedida.

3. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que aincubação dura um período de 2 a 36 horas.

4. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que apressão parcial do oxigênio (p02) durante a incubação éinferior a 5 kPa.

5. Processo, de acordo com qualquer uma dasemreivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que,outra etapa, constituintes celulares são removidos dacomposição sangüínea condicionada, e é obtida uma composiçãode soro sangüíneo condicionada.

6. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que orecipiente modificado possui estruturas internas com grandeárea de superfície, as quais são selecionadas entre esferas,fibras, farinha, granulado, partículas e combinações destes.

7. Processo, de acordo com a reivindicação 6,caracterizado pelo fato de que as estruturas internasconsistem pelo menos de um material selecionado entre metal,óxido de metal e materiais sintéticos, tais como vidro,corundo, quartzo, poliestireno, cloreto de polivinilo,polietileno, polipropileno ou combinações destes.

8. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que orecipiente modificado possui no seu interior esferas de vidroque possuem um diâmetro de 0,5 até 5 mm.

9. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que orecipiente modificado possui paredes de recipiente elásticaspara a remoção de sangue livre de oxigênio a partir de umorganismo animal ou humano.

10. Processo, de acordo com a reivindicação 9,caracterizado pelo fato de que o recipiente é selecionadoentre bolsas de sangue para a medicina de transfusão.

11. Processo, de acordo com a reivindicação 10,caracterizado pelo fato de que o recipiente é selecionadoentre sistemas de bolsas simples, duplas, triplas oumúltiplas.

12. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 9 a 11, caracterizado pelo fato de que asparedes elásticas do recipiente possuem pouca permeabilidadepara oxigênio.

13. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que acomposição sangüínea é alogênica.

14. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que acomposição sangüínea é autóloga.

15. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que acomposição sangüínea é xenogênica.

16. Composição sangüínea preparável de acordo com oprocesso de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesanteriores caracterizada pelo fato de ser para o tratamento oua prevenção de uma doença do organismo humano ou animal,contendo de 30 a 20.000 pg/ml de interleucina-6 (IL-6).

17. Composição sangüínea, de acordo com a reivindicação-16, caracterizada pelo fato de conter pelo menos outrocomponente selecionado entre:- antagonista ao receptor de interleucina-1 (IL-Ira)- interleucina-4 (IL-4)- interleucina-13 (IL-13)- interleucina-1 (IL-I)- interleucina-10 (IL-10)- fator de necrose tumoral (TNF)- fator de crescimento tipo insulina (IGF)- fator de crescimento de transformação (TGF)- fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF)- fator de crescimento de fibroblastos (FGFG) e- fator de crescimento de hepatócitos (HGF).

18. Composição sangüínea, de acordo com a reivindicaçãoa-16 ou 17, caracterizada pelo fato de ainda conter pelo menosum componente selecionado entre vesícula, microvesícula,exosomas, iRNA e mistura destes.

19. Composição sangüínea, de acordo com qualquer uma das-reivindicações de 16 a 18, caracterizada pelo fato de que oantagonista ao receptor de interleucina-1 (IL-Ira) estápresente em uma fração de 30 a 50.000 pg/ml.

20. Composição sangüínea, de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 16 a 19, caracterizada pelo fato de queinterleucina-4 (IL-4) está presente em uma fração de 2 a 100pg/ml.

21. Composição sangüínea, de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 16 a 20, caracterizada pelo fato de que ainterleucina-13 (IL-13) está presente em uma fração de 2 a 100pg/ml.

22. Composição sangüínea, de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 16 a 21, caracterizada pelo fato de que ainterleucina-1 (IL-I) está presente em uma fração de 5 a 1.000pg/ml.

23 · Composição sangüínea, de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 16 a 22, caracterizada pelo fato de que ainterleucina-10 (IL-10) está presente em uma fração de 5 a-1.000 pg/ml.

24. Composição sangüínea, de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 16 a 23, caracterizada pelo fato de que ofator de necrose tumoral (TNF) está presente em uma fração de-5a 1.000 pg/ml.

25. Composição sangüínea, de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 16 a 24, caracterizada pelo fato de que ofator de crescimento tipo insulina (IGF) está presente em umafração de 100 a 15.000 pg/ml.

26. Composição sangüínea, de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 16 a 25, caracterizada pelo fato de que ofator de crescimento de transformação (TGF) está presente emuma fração de 10 a 20.000 pg/ml.

27. Composição sangüínea, de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 16 a 26, caracterizada pelo fato de que ofator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF) estápresente em uma fração de 100 a 10.000 pg/ml.

28. Composição sangüínea, de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 16 a 27, caracterizada pelo fato de que ofator de crescimento de fibroblastos (FGF) está presente emuma fração de 50 a 10.000 pg/ml.

29. Composição sangüínea, de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 16 a 28, caracterizada pelo fato de que ofator de crescimento de hepatócitos (FGF) está presente em umafração de 50 a 10.000 pg/ml.

30. Uso da composição sangüínea de acordo com qualqueruma das reivindicações 16 a 29 caracterizado pelo fato de serpara o tratamento ou a prevenção de uma doença do organismohumano ou animal, selecionada entre:- doenças de músculos,- doenças do sistema de tendões,- alergias,- intolerância a alimentos,- intolerância a medicamentos,- doenças com participação do sistema imunológico,- psoríase, e- feridas crônicas tais como ulceras diabéticas.

31. Uso, de acordo com a reivindicação 30, caracterizadopelo fato de que a doença muscular é uma lesão muscular, umacirurgia muscular, uma ruptura de fibras musculares, umadegeneração muscular, um defeito muscular, uma atrofiamuscular, uma fratura muscular, uma distrofia muscular, umafatiga muscular ou ferida muscular.

32. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 30ou 31, caracterizado pelo fato de que o tratamento da doençamuscular compreende regeneração do tecido muscular.

33. Uso da composição sangüínea de acordo com qualqueruma das reivindicações de 16 a 29 caracterizado pelo fato deser para o tratamento ou a prevenção de uma doença doorganismo humano ou animal, selecionada entre:- neurodermatite,- inflamações e irritações do sistema nervoso,- endometriose,- inflamação crônica de olhos em cavalos.

34. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de-30 a 33, caracterizado pelo fato de que a composiçãosangüínea, eventualmente junto com excipientes farmacêuticos,é injetada no organismo ou no órgão afetado.

35. üso da composição sangüínea de acordo com qualqueruma das reivindicações de 16 a 29 caracterizado pelo fato deser para a produção de um medicamento para o tratamento ou aprevenção de uma das doenças caracterizadas nas reivindicaçõesde 30 a 33 do organismo humano ou animal.

36. · Uso da composição sangüínea de acordo com qualqueruma das reivindicações de 16 a 29 caracterizado pelo fato deser como produto cosmético.