BRPI0707068A2

BRPI0707068A2 - arilsulfonamidas substituìdas como agentes antivirais

Info

Publication number: BRPI0707068A2
Application number: BRPI0707068-3A
Authority: BR
Inventors: Niels Svenstrup; Holger Zimmermann; Dagmar Karthaus; Andreas Goeller; Dirk Heimbach; Kerstin Henninger; Dieter Lang; Daniela Paulsen; Bernd Riedl; Rudolf Schohe-Loop; Joachim Schuhmacher; Tobias Wunberg
Original assignee: Aicuris Gmbh & Co Kg
Priority date: 2006-03-03
Filing date: 2007-02-26
Publication date: 2011-04-19
Also published as: UY30178A1; JP5255455B2; JO2581B1; ES2335316T3; CA2642602A1; DK1991529T3; PL1991529T3; US8318761B2; IL193449A0; DE102006009928A1; AU2007222689A1; RU2423352C2; EP1991529A1; UA95103C2; AR059710A1; KR20080107456A; ATE451356T1; JP2009529016A; ZA200807189B; PE20080136A1

Abstract

Arilsulfonamidas substituídas como agentes antivirais. O presente invento se refere a arilsulfonamidas substituídas de fórmula (I), e métodos para a sua preparação, bem como seu uso para a produção de medicamentos para o tratamento e/ou profilaxia de doenças, especialmente para uso como agentes antivirais, particularmente contra citomegalovírus.

Description

Arilsulfonamidas substituídas como agentes antivirais.

Refere-se o presente invento a arilsulfonamidas substituídase métodos para sua preparação, bem como ao seu uso para a produção \demedicamentos para o tratamento e/ou profilaxia de doenças, especialmente para usocomo agentes antivirais, particularmente contra citomegalovírus.

O pedido de patente internacional WO 02/085869 descrevearilsulfonamidas substituídas como agentes antivirais, especialmente contracitomegalovírus.

Um objetivo do presente invento é o de prover novoscompostos com atividade antiviral igual ou melhorada, farmacocinética melhorada,especialmente uma meia-vida mais longa e/ou biodisponibilidade oral melhorada, cujasrotas de degradação metabólica não diferem substancialmente entre humanos e espéciesde teste usuais, tais como ratos e cães, para o tratamento de doenças infecciosas viraisem humanos e animais.

Surpreendentemente, foi descoberto que as arilsulfonamidassubstituídas descritas no presente invento têm atividade antiviral, exibem propriedadesfarmacocinéticas melhoradas e que suas rotas de degradação metabólica não diferemsignificativamente em humanos, ratos e cães.

O presente invento se refere a compostos de fórmula:

<formula>formula see original document page 2</formula>

em que:

A representa um grupo de fórmula

<formula>formula see original document page 2</formula>

em que

* é o local de ligação ao átomo de carbono do anel piridinila, e# é o local de ligação ao átomo de carbono do anel fenila,R1 representa hidrogênio, amino ou metilcarbonilamino,R2 representa hidrogênio ou halogênio,R3 representa hidrogênio, halogênio ou ciano,R4 representa hidrogênio, halogênio ou ciano,R5 representa hidrogênio ou halogênio,R6 representa hidrogênio ou halogênio,R7 representa hidrogênio, halogênio ou alquila CrC3,R8 representa hidrogênio, halogênio ou alquila CrC3,e seus sais, solvatos, e os solvatos de seus sais.

Os compostos do presente invento são os compostos defórmula (I) e seus sais, solvatos e os solvatos de seus sais, bem como os compostosabrangidos pela fórmula (I) e especificados abaixo como formas de realização deexemplo e seus sais, solvatos, e os solvatos de seus sais, enquanto os compostosabrangidos pela fórmula (I) e mencionados abaixo não sejam sais, solvatos e solvatosdos sais.

Os compostos do presente invento podem, dependendo desua estrutura, existir nas formas estereoisoméricas (enantiômeros, diastereômeros). Opresente invento, conseqüentemente, refere-se aos enantiômeros ou diastereômeros eàs suas respectivas misturas. A partir de tais misturas de enantiômeros e/oudiastereômeros é possível isolar os constituintes estereoisomericamente uniformes, deforma conhecida.

Nos casos em que os compostos do presente inventopodem ocorrer nas formas tautoméricas, o presente invento inclui todas as formastautoméricas.

Os sais preferidos para os fins do presente invento são ossais fisiologicamente aceitáveis dos compostos do presente invento. Também se incluem,entretanto, os sais que eles próprios não são adequados para aplicações farmacêuticasmas que podem ser usados, por exemplo, para o isolamento ou purificação doscompostos do presente invento.

Os sais fisiologicamente aceitáveis dos compostos dopresente invento incluem os sais de adição de ácidos minerais, ácidos carboxílicos eácidos sulfônicos, p.ex., sais de ácido hidroclórico, ácido hidrobrômico, ácido sulfúrico,ácido fosfórico, ácido metanosulfônico, ácido etanosulfônico, ácido toluenosulfônico,ácido benzenosulfônico, ácido naftalenodisulfônico, ácido acético, ácido trifluoroacético,ácido propiônico, ácido láctico, ácido tartárico, ácido málico, ácido cítrico, ácido fumárico,ácido malêico, ácido benzóico.

Os sais fisiologicamente aceitáveis dos compostos dopresente invento também incluem sais de bases usuais, tais como, por meio de exemploe preferencialmente, sais de metais alcalinos (p.ex. sais de sódio e de potássio), sais demetais alcalino-terrosos (p.ex. sais de cálcio e magnésio) e sais de amônio derivados deamônia ou de aminas orgânicas tendo de 1 a 16 átomos de carbono, tais como, por meiode exemplo e preferencialmente, etilamina, dietilamina, trietilamina, etildiisopropilamina,monoetanolamina, dietanolamina, trietanolamina, diciclohexilamina, dimetilaminoetanol,procaína, dibenzilamina, N-metilmorfolina, arginina, lisina, etilenodiamina e N-metilpiperidina.

Os solvatos para os fins do presente invento se referemàquelas formas dos compostos do presente invento que no estado sólido ou líquidoformam um complexo por coordenação com moléculas de solvente. Os hidratos são umaforma específica de solvatos em que a coordenação ocorre com a água.

Além disso, o presente invento também se abrange asprodrogas dos compostos do presente invento. O termo "prodrogas" abrange compostosque por si podem ser biologicamente ativos ou inativos mas durante seu tempo deresidência no corpo são convertidos nos compostos do presente invento (por exemplo,pelo metabolicamente ou hidroliticamente).

Para os fins do presente invento, os substituintes têm oseguinte significado, a menos que seja especificado de outra forma:

Alquil representa um radical alquila de cadeia linear ouramificada geralmente tendo de 1 a 3, particularmente preferencialmente de 1 a 2 átomosde carbono, por exemplo e preferencialmente metila, etila, n-propila e isopropila.

Halogênio representa flúor, cloro, bromo e iodo,preferencialmente flúor e cloro.

Na fórmula do grupo que pode significar A, o ponto final dalinha adjacente à qual há um * ou # não representa um átomo de carbono ou um grupoCH2, mas é um componente da ligação ao átomo ao qual A está ligado.

Dá-se preferência a compostos de fórmula (I) em que

A representa um grupo de fórmula

<formula>formula see original document page 4</formula>

em que

* é o local de ligação ao átomo de carbono do anel piridinila, e

# é o local de ligação ao átomo de carbono do anel fenila,R1 representa hidrogênio, amino ou metilcarbonilamino,R2, R3 e R4 representam hidrogênio,R5 representa hidrogênio ou halogênio,

R6 representa hidrogênio ou halogênio,

R7 e R8 representam hidrogênio,e seus sais, solvatos, e os solvatos de seus sais.

Dá-se preferência também a compostos de fórmula (I) emque

A representa um grupo de fórmula

<formula>formula see original document page 5</formula>

em que

* é o local de ligação ao átomo de carbono do anel piridinila, e

# é o local de ligação ao átomo de carbono do anel fenila,

R1 representa hidrogênio, amino ou metilcarbonilamino,

R2, R3 e R4 representam hidrogênio,

R5 representa hidrogênio,

R6 representa hidrogênio ou halogênio,

R7 e R8 representam hidrogênio,

e seus sais, solvatos, e os solvatos de seus sais.

Dá-se preferência também a compostos de fórmula (I) emque

A representa um grupo de fórmula

<formula>formula see original document page 5</formula>

em que

* é o local de ligação ao átomo de carbono do anel piridinila, e

# é o local de ligação ao átomo de carbono do anel fenila,

Dá-se preferência também aos compostos de fórmula (I) emque R1 representa amino.

Dá-se preferência também aos compostos de fórmula (I) emque R2 representa hidrogênio.

Dá-se preferência também aos compostos de fórmula (I) emque R3 representa hidrogênio.

Dá-se preferência também aos compostos de fórmula (I) emque R4 representa hidrogênio.

Dá-se preferência também aos compostos de fórmula (I) emque R5 representa hidrogênio.

Dá-se preferência também aos compostos de fórmula (I) emque R6 representa flúor.

Dá-se preferência também aos compostos de fórmula (I) emque R5 representa hidrogênio e R6 representa flúor.

Dá-se preferência também aos compostos de fórmula (I) emque R7 representa hidrogênio.

Dá-se preferência também aos compostos de fórmula (I) emque R8 representa hidrogênio.

As definições de radical dadas especificamente nasrespectivas combinações e combinações preferidas de radicais também são substituídascomo desejado por definições de radicais de uma outra combinação, sem relação com ascombinações particulares dos radicais dados.

Dá-se preferência muito particular às combinações de duasou mais das faixas de preferência mencionadas acima.

O presente invento adicionalmente se refere a um métodopara preparar os compostos de fórmula (I), em que os compostos de fórmula

<formula>formula see original document page 6</formula>

em que

A, R11 R21 R31 R41 R5 e R6 têm o significado indicado acima,são reagidos com compostos de fórmula

<formula>formula see original document page 6</formula>

em que

R7 e R8 têm o significado indicado acima, e

X1 representa halogênio, preferencialmente cloro ou bromo, ou hidróxi.

Desde que X1 represente halogênio, a reação em geralocorre em solventes inertes, na presença de uma base, preferencialmente numa faixa detemperatura de 0 a 40°C sob pressão atmosférica.Exemplos de solventes inertes incluem hidrocarbonetoshalogenados tais como cloreto de metileno, triclorometano ou 1,2-diclorometano, éterestais como dioxano, tetrahidrofurano ou 1,2-dimetoxietano, ou outros solventes tais comoacetona, dimetilformamida, dimetilacetamida, 2-butanona ou acetonitrila, dandopreferência ao tetrahidrofurano ou cloreto de metileno.

Exemplos de bases incluem carbonatos de metais alcalinos,tais como carbonato de césio, de sódio ou de potássio, ou bases orgânicas tais comotrialquilaminas, p.ex. trietilamina ou diisopropiletilamina, ou N-metilmorfolina, N-metilpiperidina, 4-dimetilaminopiridina ou piridina, dando-se preferência adiisopropiletilamina.

Desde que X1 represente hidróxi, a reação em geral ocorreem solventes inertes, na presença de agentes desidratantes, onde apropriado napresença de uma base, preferencialmente numa faixa de temperatura de O0C até atemperatura ambiente sob pressão atmosférica.

Exemplos de reagentes desidratantes adequados incluemcarbodiimidas tais como Ν,Ν'-dietil-, N,N'-dipropil-, Ν,Ν'-diisopropil-, N1N'-diciclohexilcarbodiimida, hidrocloreto de N-(3-dimetilaminoisopropil)-N'-etilcarbodiimida(EDC) (onde apropriado na presença de pentafluorofenol (PFP)), N-ciclohexilcarbodiimida-N'-propiloximetil-poliestireno (PS-carbodiimida) ou compostos decarbonila, tais como carbonildiimidazol ou compostos 1,2-oxazolium, tais como sulfato de2-etil-5-fenil-1,2-oxazolium ou perclorato de 2-t-butil-5-metilisoxazolium, ou compostosacilamino, tais como 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina, ou anidridopropanofosfônico, ou cloroformato de isobutila, ou cloreto de bis(2-oxo-3-oxazolidinil)fosforila, ou hexafluorofosfato de benzotriazoliloxi-tri(dimetilamino)fosfônio, ouhexafluorofosfato de 0-(benzotriazol-1-il)-N,N,N\N'-tetrametilurônio (HBTU),tetrafluoroborato de 2-(2-oxo-1-(2H)-piridil)-1,1,3,3-tetrametilurônio (TPTU) ouhexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametilurônio (HATU), ou 1-hidroxibenzotriazol (HOBt), ou hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)fosfônio (BOP), ou misturas destes com bases. Preferencialmente, acondensação é executada com HATU.

Exemplos de bases incluem carbonatos de metais alcalinos,tais como por exemplo carbonato de sódio ou de potássio, ou carbonato de hidrogênio,ou bases orgânicas tais como trialquilaminas, p.ex. trietilamina ou diisopropiletilamina, ouN-metilmorfolina, N-metilpiperidina ou 4-dimetilaminopiridina, dando-se preferência adiisopropiletilamina.

Exemplos de solventes inertes incluem hidrocarbonetoshalogenados tais como diclorometano ou triclorometano, hidrocarbonetos tais como, porexemplo, benzeno ou nitrometano, dioxano, dimetilsulfóxido, dimetilformamida,acetonitrila, tetrahidrofurano ou ácido hexametilfosfórico triamida, ou misturas dossolventes, dando-se preferência particular a diclorometano, tetrahidrofurano oudimetilformamida.

Os compostos de fórmula (III) são conhecidos ou podem sersintetizados por métodos conhecidos a partir dos materiais de partida correspondentes.

Os compostos de fórmula (II) são conhecidos ou podem serpreparados pela reação de compostos de fórmula

<formula>formula see original document page 8</formula>

em que

A, R11 R21 R31 R41 R5 e R6 têm o significado indicado acima,com um ácido.

A reação em geral ocorre em solventes polares,preferencialmente numa faixa de temperatura a partir da temperatura ambiente até atemperatura de refluxo do solvente sob pressão atmosférica.

Exemplos de ácidos incluem o ácido hidroclórico, ácidohidrobrômico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido metanosulfônico, ácidoetanosulfônico, ácido toluenosulfônico, ácido benzenosulfônico, ácidonaftalenodisulfônico, ou ácido trifluoroacético, dando-se preferência particular ao ácidohidroclórico.

Exemplos de solventes polares incluem álcoois tais comometanol, etanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol ou t-butanol, ou tetrahidrofurano,dioxano ou ácido acético, ou misturas dos solventes ou uma mistura do solvente e água,dando-se preferência particular ao etanol.

Os compostos de fórmula (IV) são conhecidos ou podem serpreparados, de acordo com o método [A], pela reação de compostos de fórmula

<formula>formula see original document page 8</formula>em que

R31 R41 R5 e R6 têm o significado indicado acima,com compostos de fórmula

<formula>formula see original document page 9</formula>

em que

R1 e R2 têm o significado indicado acima,para formar compostos de fórmula

<formula>formula see original document page 9</formula>

em que

R1, R21 R3, R4, R5 e R6 têm o significado indicado acima,

ou

[B] reagir compostos de fórmula

<formula>formula see original document page 9</formula>

em que

R3, R41 R5 e R6 têm o significado indicado acima,com compostos de fórmula<formula>formula see original document page 10</formula>

em que

R1 e R2 têm o significado indicado acima,para formar compostos de fórmula

<formula>formula see original document page 10</formula>

em que

R11 R21 R31 R4, R5 e R6 têm o significado indicado acima,ou

[C] no primeiro estágio reagir compostos de fórmula (Vb) com compostos de fórmula

<formula>formula see original document page 10</formula>

em que

R1 e R2 têm o significado indicado acima,

e no segundo estágio com oxicloreto de fósforo, para formar compostos de fórmula

<formula>formula see original document page 10</formula>

em que

R1, R2, R3, R4, R5 e R6 têm o significado indicado acima,ou

[D] reagir compostos de fórmula

<formula>formula see original document page 11</formula>

em que

R31 R4, R5 e R6 têm o significado indicado acima, eX2 representa halogênio, preferencialmente iodo ou bromo,com compostos de fórmula

<formula>formula see original document page 11</formula>

em que

R1 e R2 têm o significado indicado acima,para formar compostos de fórmula

<formula>formula see original document page 11</formula>

em que

R11 R21 R31 R41 R5 e R6 têm o significado indicado acima.

Durante a síntese, onde apropriado, o grupo amino de R1 éprotegido com um grupo protetor conhecido dos técnicos da área, tal como p.ex. acila,que é removido após a síntese sob condições conhecidas dos técnicos da área.

Os compostos de fórmula (IVa)1 (IVb)1 (IVc) e (IVd) juntosformam os compostos de fórmula (IV).A reação de acordo com os métodos [A], [B] e o primeiroestágio do método [C] em geral ocorre em solventes inertes na presença de agentesdesidratantes, preferencialmente numa faixa de temperatura desde a temperaturaambiente até IOO0C sob pressão atmosférica.

Exemplos de solventes inertes incluem hidrocarbonetos taiscomo benzeno ou tolueno, ou outros solventes tais como dioxano, dimetilformamida,dimetilsulfóxido ou acetonitrila, ou misturas dos solventes, dando-se preferência particulara dimetilformamida.

Exemplos de reagentes desidratantes adequados incluemcarbodiimidas tais como Ν,Ν'-dietil-, Ν,Ν'-dipropil-, Ν,Ν'-diisopropil-, N1N'-diciclohexilcarbodiimida, hidrocloreto de N-(3-dimetilaminoisopropil)-N'-etilcarbodiimida(EDC) (onde apropriado na presença de pentafluorofenol (PFP)), N-ciclohexilcarbodiimida-N'-propiloximetil-poliestireno (PS-carbodiimida) ou compostos decarbonila, tais como carbonildiimidazol ou compostos 1,2-oxazolíum, tais como sulfato de2-etil-5-fenil-1,2-oxazolium ou perclorato de 2-t-butil-5-metilisoxazolium, ou compostosacilamino, tais como 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina, ou anidridopropanofosfônico, ou cloroformato de isobutila, ou cloreto de bis(2-oxo-3-oxazolidinil)fosforila, ou hexafluorofosfato de benzotriazoliloxi-tri(dimetilamino)fosfônio, ouhexafluorofosfato de 0-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametilurônio (HBTU)1tetrafluoroborato de 2-(2-oxo-1-(2H)-piridíl)-1,1,3,3-tetrametilurônio (TPTU) ouhexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N\N'-tetrametilurônio (HATU)1 ou 1-hidroxibenzotriazol (HOBt), ou hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)fosfônio (BOP)1 ou misturas destes com bases. Dá-se preferênciaparticular ao carbonildiimidazol.

A reação do segundo estágio de acordo com o método [C]em geral ocorre em solventes inertes, preferencialmente numa faixa de temperatura de50 a 100°C sob pressão atmosférica. Também é possível usar misturas dos solventes,uma mistura de solvente e POCI3 ou POCI3 puro.

Exemplos de solventes inertes incluem hidrocarbonetos taiscomo benzeno ou tolueno, ou outros solventes tais como dioxano, dimetilsulfóxido,dimetilformamida ou acetonitrila, ou misturas dos solventes, dando-se preferênciaparticular ao dioxano e/ou à dimetilformamida.

A reação de acordo com o método [D] em geral ocorre sobas condições de reação Sonogashira sob argônio em solventes inertes edesgaseificados, na presença de um catalisador, onde apropriado na presença de umreagente aditivo, na presença de uma base, e onde apropriado trifenilfosfina,preferencialmente numa faixa de temperatura desde a temperatura ambiente até atemperatura de refluxo do solvente sob pressão atmosférica (R. R. Tykwinski1 Angew.Chem. Int. Ed. 2003, 42, 1566-1568, Κ. Sonogashira em Handbook of organopalladiumchemistry for organic synthesis (Ed. E.-l. Negishi), 1133-1178 Wiley-Interscience1 NewYork (2002)).

Exemplos de catalisadores incluem catalisadores de paládiousuais para as condições de reação de Sonogashira, dando-se preferência acatalisadores tais como por exemplo tri(dibenzilidenoacetona)paládio, dicloro-bis(trifenilfosfina)paládio, tetraquis-trifenilfosfina-paládio(O), acetato de paládio (II),complexo de cloreto 1,1'-bis[(bifenilfosfino)ferroceno]paládio(ll) (1:1) com diclorometano.

Exemplos de reagentes aditivos incluem iodeto de cobre (I)e trifenilfosfina.

Exemplos de bases incluem bases amina tais comotrietilamina.

Exemplos de solventes inertes incluem éteres tais comodioxano, tetrahidrofurano ou 1,2-dimetoxietano, hidrocarbonetos tais como benzeno,xileno ou tolueno, ou outros solventes tais como nitrobenzeno, dimetilformamida,dimetilacetamida, dimetilsulfóxido ou N-metilpirrolidona, dando-se preferência a solventestais como, p.ex., dimetilformamida, dimetilacetamida, dimetilsulfóxido ou 1,2-dimetoxietano.

Os compostos de fórmulas (Via), (Vlb), (VIc) e (VId) sãoconhecidos ou podem ser sintetizados por métodos conhecidos a partir dos materiais departida correspondentes.

Os compostos de fórmulas (Va)1 (Vb) e (Vc) são conhecidosou podem ser preparados pela reação de compostos de fórmula

<formula>formula see original document page 13</formula>

em que

R3 e R4 têm o significado indicado acima, e

X3 representa halogênio, preferencialmente iodo ou bromo, hidroxicarbonila ou ciano,com compostos de fórmula

<formula>formula see original document page 13</formula>

em queR5 e R6 têm o significado indicado acima.

A reação em geral ocorre em solventes inertes, na presençade uma base, preferencialmente numa faixa de temperatura de 0 a 40°C sob pressãoatmosférica.

Exemplos de solventes inertes incluem álcoois tais comometanol, etanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol ou t-butanol, ou tetrahidrofurano,acetona, dioxano ou piridina, ou misturas dos solventes ou uma mistura de solvente eágua, dando-se preferência particular para tetrahidrofurano ou isopropanol com um poucode água.

Exemplos de bases incluem acetato de sódio, acetato depotássio, carbonato de sódio, carbonato de potássio ou bases amina tais comotrietilamina ou diisopropiletilamina, dando-se particular preferência ao acetato de sódio.

Os compostos de fórmulas (VII) e (VIII) são conhecidos oupodem ser sintetizados por métodos conhecidos a partir dos materiais de partidacorrespondentes.

Num método alternativo, os compostos de fórmula (IV)podem ser preparados numa ordem diferente de acoplamento dos blocos de construçãosintéticos.

A preparação dos compostos do presente invento pode serilustrada com os seguintes esquemas de síntese.Esquema de síntese 1:

<formula>formula see original document page 14</formula>

Esquema de síntese 2:Esquema de síntese 4:

<formula>formula see original document page 15</formula>

Os compostos do presente invento exibem uma faixasurpreendente de efeitos que não poderia ser prevista. Eles exibem atividade antiviralcontra representantes do grupo Herpesviridae (vírus herpes), em particular contracitomegalovírus (CMV) e especialmente contra o citomegalovírus humano (HCMV).

As áreas de indicação que podem ser mencionadas pormeio de exemplo são:

1) Tratamento e profilaxia de infecções de HCMV em pacientes de AIDS (retinite,pneumonite, infecções gastrintestinais).

2) Tratamento e profilaxia de infecções de citomegalovírus em pacientes de transplantede medula óssea e órgãos que desenvolvem freqüentemente pneumonite ouencefalite por HCMV1 com risco de vida, bem como infecções gastrintestinais esistêmicas por HCMV.

3) Tratamento e profilaxia de infecções por HCMV em recém-nascidos e bebês.

4) Tratamento de uma infecção aguda por HCMV em mulheres grávidas.

5) Tratamento de pacientes de câncer positivos para HCMV com auxílio de redução deprogressão de tumor mediada por HCMV (cf. J. Cinatl , et al„ FEMS MicrobiologyReviews 2004, 28, 59-77).

O presente invento adicionalmente se refere ao uso doscompostos do presente invento para o tratamento e/ou profilaxia de doenças, emparticular de infecções com vírus, especialmente os vírus mencionados acima, e dasdoenças infecciosas causadas por eles. Uma infecção viral significa daqui em diantetanto uma infecção com um vírus como uma doença causada por uma infecção com umvírus.

O presente invento adicionalmente se refere ao uso doscompostos do presente invento para o tratamento e/ou profilaxia de doenças,especialmente das doenças mencionadas acima.

O presente invento adicionalmente se refere ao uso doscompostos do presente invento para a produção de um medicamento para o tratamentoe/ou profilaxia de doenças, especialmente das doenças mencionadas acima.

Os compostos do presente invento são preferencialmenteusados para a produção de medicamentos que são adequados para a profilaxia e/ou otratamento de infecções com um representante do grupo Herpesviridae, particularmenteum citomegalovírus, em particular o citomegalovírus humano.

O presente invento adicionalmente se refere a um métodopara o tratamento e/ou profilaxia de doenças, especialmente as doenças mencionadasacima, usando uma quantidade antiviral efetiva dos compostos do presente invento.

O presente invento adicionalmente se refere amedicamentos compreendendo pelo menos um composto do presente invento e pelomenos um ou mais ingredientes ativos adicionais, em particular para o tratamento e/ouprofilaxia das doenças mencionadas acima. Os ingredientes ativos adequados emcombinação que podem ser mencionados por meio de exemplo, e preferencialmente,são: ingredientes ativos antivirais tais como valganciclovir, ganciclovir ou aciclovir.

Os compostos do presente invento podem atuarsistemicamente ou localmente. Para este fim, eles podem ser administrados de umaforma adequada, tal como, por exemplo, oral, parenteral, pulmonária, nasal, sublingual,lingual, bucal, retal, dermal, transdermal, conjuntiva, ótica ou tópica, ou como umimplante ou endoprótese expansível (stent).

Para estas rotas de administração, os compostos dopresente invento podem ser administrados em formas de administração adequadas.

Adequadas para a administração oral são as formas deadministração que funcionam de acordo com o estado da técnica e entregam oscompostos do presente invento rapidamente e/ou de forma modificada, quecompreendem os compostos do presente invento na forma cristalina e/ou amorfa e/oudissolvida, tais como por exemplo, tabletes (revestidos ou não, por exemplo tendorevestimentos que são resistentes ao suco gástrico ou que se dissolvem com um retardoou que são insolúveis e controlam a liberação do composto do presente invento), tabletesou filmes/wafers que desintegram rapidamente na cavidade oral, filmes/liofilisados,cápsulas (por exemplo cápsulas de gelatina dura ou mole), tabletes revestidos comaçúcar, grânulos, péletes, pós, emulsões, suspensões, aerossóis ou soluções.

A administração parenteral pode ocorrer evitando-se umaetapa de absorção (por exemplo administração intravenosa, intra-arterial, intra-cardíaca,intra-espinal ou intralombar) ou com a inclusão de uma absorção (por exemploadministração intramuscular, subcutânea, intracutânea, percutânea ou intraperitoneal). Asformas de administração adequadas para a administração parenteral são, entre outras,preparações para injeção e infusão na forma de soluções, suspensões, emulsões,liofilisados ou pós esterilizados.

Exemplos adequados para outras rotas de administraçãoincluem as formas farmacêuticas para inalação (entre outras, inaladores em pó,nebulizadores), gotas nasais, soluções, sprays; tabletes, filmes/wafers ou cápsulas quepodem ser administrados lingualmente, sublingualmente, ou bucalmente, supositórios,preparados para ouvidos e olhos, cápsulas vaginais, suspensões aquosas (loções,misturas para agitar), suspensões lipofílicas, ungüentos, cremes, sistemas terapêuticostransdérmicos, leite, pastas, espumas, pós, implantes ou endopróteses expansíveis(stents).

Os compostos do presente invento podem ser convertidosnas formas de administração mencionadas. Isto pode ocorrer de uma forma conhecidaper se misturando com excipientes inertes, não tóxicos, farmaceuticamente aceitáveis.Estes excipientes incluem, entre outros, suportes (por exemplo celulose microcristalina,lactose, manitol), solventes (por exemplo, poli(etilenoglicol) líquido), emulsificantes edispersantes ou agentes umectantes (por exemplo dodecilsulfato de sódio, oleato depolisorbitana), Iigantes (por exemplo polivinilpirrolidona), polímeros sintéticos e naturais(por exemplo albumina), estabilizantes (por exemplo antioxidantes tais como, porexemplo, ácido ascórbico), corantes (por exemplo pigmentos inorgânicos tais como, porexemplo, óxidos de ferro) e modificadores de sabor e de odor.

O presente invento adicionalmente se refere amedicamentos compreendendo pelo menos um componente de acordo com o presenteinvento, usualmente junto com um ou mais excipientes inertes, não tóxicos,farmaceuticamente aceitáveis, e seu uso para os fins mencionados acima.

Em geral, provou-se ser vantajoso administrar emadministração intravenosa quantidades de cerca de 0,001 a 10 mg/kg, preferencialmentede cerca de 0,01 a 5 mg/kg de peso corporal para alcançar resultados efetivos, e adosagem em administração oral é de cerca de 0,01 a 25 mg/kg, preferencialmente de 0,1a 10 mg/kg de peso corporal.

Pode no entanto ser necessário, onde apropriado, desviardas quantidades mencionadas, especificamente dependendo do peso corporal, da rotade administração, da resposta individual ao composto ativo, tipo de preparação e tempoou intervalo em que ocorre a administração. Assim, pode ser suficiente em alguns casosfazer com menos que a quantidade mínima mencionada acima, enquanto que em outroscasos, o limite superior mencionado deve ser excedido. No evento da administração degrandes quantidades, pode ser conveniente dividir a quantidade numa pluralidade dedoses individuais ao longo do dia.

Os dados percentuais nos testes e exemplos a seguir são

percentagens em peso a menos que esteja indicado de outra forma. Partes são partesem peso. Razões de solventes, razões de diluição e dados de concentração de soluçõeslíquido/líquido são em cada caso baseados em volume.

A. Exemplos

Abreviações:

Boc terí-butoxicarbonila

CDCI3 deuteroclorofórmio

conc. concentrado

DCI ionização química direta (em MS)

DCM diclorometano

DIEA /V,/\/-diisopropiletilamina

DMSO dimetilsulfóxido

DMF /V,/V-dimetilformamida

EDC hidrocloreto de /\Z-(3-dimetilaminoisopropil)-A/'-etilcarbodiimida

EE acetato de etila (éster etila do ácido acético)

El ionização por impacto de elétron (em MS)

ESI ionização por eletrospray (em MS)

Fmoc 9-fluorenilmetoxicarbonila

h hora

HPLC cromatografia líquida de alto desempenho, alta pressão

HV alto vácuo

LC-MS cromatografia líquida acoplada a espectroscopia de massaLDA diisopropilamida de lítio

min. minutos

MS espectroscopia de massa

MTBE metil ferí-butil éter

NMR espectroscopia de ressonância magnética nuclear

Pd-C paládio sobre carbono

PyBOP hexafluorofosfato de 1-benzotriazoliloxitripirrolidinofosfônio

RP-HPLC HPLC de fase reversa

Rt tempo de retenção (em HPLC)

sat. saturado

THF tetrahidrofurano

Métodos gerais LC-MS e HPLC:

Método 1 (LC-MS): tipo de instrumento MS: Micromass ZQ1 tipo de instrumento HPLC:HP 1100 series; UV DAD; coluna: Fenomenex Synergi 2μ Hidro-RP Mercury 20 mm χ 4mm; eluente A: 1 L de água + 0.5 mL de 50% ácido fórmico, eluente B: 1 L de acetonitrila+ 0.5 mL de 50% ácido fórmico; gradiente: 0.0 min 90%A 2.5 min 30%A 3.0 min5%A 4.5 min 5%A; taxa de fluxo: 0.0 min 1 mL/min, 2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 mL/min;forno: 50°C; detecção UV: 210 nm.

Método 2 (LC-MS): Instrumento: Micromass Quattro LCZ com HPLC Agilent series 1100;coluna: Fenomenex Synergi 2μ Hidro-RP Mercury 20 mm χ 4 mm; eluente A: 1 L de água+0.5 mL de 50% ácido fórmico, eluente B: 1 L de acetonitrila + 0.5 mL de 50% ácidofórmico; gradiente: 0.0 min 90%A 2.5 min 30%A 3.0 min 5%A -» 4.5 min 5%A; taxade fluxo: 0.0 min 1 mL/min, 2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 mL/min; forno: 50°C; Detecção UV:208-400 nm.

Método 3 (LC-MS): tipo de instrumento MS: Micromass ZQ; tipo de instrumento HPLC:Waters Alliance 2795; coluna: Fenomenex Synergi 2μ Hidro-RP Mercury 20 mm χ 4 mm;eluente A: 1 L de água + 0.5 mL de 50% ácido fórmico, eluente B: 1 L de acetonitrila + 0.5mL de 50% ácido fórmico; gradiente: 0.0 min 90%A 2.5 min 30%A 3.0 min 5%A -»4.5 min 5%A; taxa de fluxo: 0.0 min 1 mL/min, 2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 mL/min; forno:

50°C; Detecção UV: 210 nm.Método 4 (LC-MS): Instrumento: Micromass Platform LCZ com HPLC Agilent series1100; coluna: Thermo Hypersil GOLD 3μ 20 mm χ 4 mm; eluente A: 1 Lde água + 0.5 mLde 50% ácido fórmico, eluente B: 1 L de acetonitrila + 0.5 mL de 50% ácido fórmico;gradiente: 0.0 min 100%A 0.2 min 100%A 2.9 min 30%A 3.1 min 10%A 5.5 min10%A; forno: 50°C; taxa de fluxo: 0.8 mL/min; Detecção UV: 210 nm.

Método 5 (HPLC): Instrumento: HP 1100 com detecção DAD; coluna: Kromasil RP-18, 60mm χ 2 mm, 3.5 μιη; eluente A: 5 mL de ácido perelórico/L de água, eluente B: aceto-nitrila; gradiente: 0 min 2%B, 0.5 min 2%B, 4.5 min 90%B, 9 min 90%B, 9.2 min 2%B,10 min 2%Β; taxa de fluxo: 0.75 mL/min; forno 30°C; Detecção UV: 210 nm.

Método 6 (HPLC): Instrumento: HP 1100 com detecção DAD; coluna: Kromasil RP-18, 60mm χ 2 mm, 3.5 pm; eluente A: 5 mL de ácido percIórico/L de água, eluente B: aceto-nitrila; gradiente: 0 min 2%B, 0.5 min 2%B, 4.5 min 90%B, 6.5 min 90%B, 6.7 min 2%B,7.5min 2%B; taxa de fluxo: 0.75 mL/min; forno 30°C; Detecção UV: 210 nm.

Método 7 (LC/MS): tipo de instrumento MS: Micromass ZQ; tipo de instrumento HPLC:HP 1100 series; UV DAD; coluna: Fenomenex Gemini 3μ 30 mm χ 3.00 mm; eluente A:1 L de água + 0.5 mL de 50% ácido fórmico, eluente B: 1 L de acetonitrila + 0.5 mL de50% ácido fórmico; gradiente: 0.0 min 90%A 2.5 min 30%A 3.0 min 5%A 4.5 min5%A; taxa de fluxo: 0.0 min 1 mL/min, 2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 mL/min; forno: 50°C;

Detecção UV: 210 nm.

Compostos de partida

Exemplo 1A

4-(benziltio)benzonitríla

<formula>formula see original document page 20</formula>

Hidreto de sódio (5 g de uma dispersão 60% em óleo) élavado com hexano e secado sob vácuo. O resíduo forma lama em DMF seco (100 mL) a0°C e benzil mercaptana (14.82 g) é adicionada gota a gota por 30 min. A mistura dereação subseqüentemente é agitada por 30 min a temperatura ambiente. 4-fluorobenzonitrila (14.45 g) é adicionada cuidadosamente e a mistura de reação é agitadaaté que o material de partida tenha reagido completamente (monitorando por HPLC,cerca de 3 h). A mistura de reação é vertida sobre gelo e água (400 mL) e agitada por 5min. O produto é coletado por filtração, lavado com água (três vezes) e secado no filtro. Oproduto bruto é recristalizado a partir de ciclohexano, coletado por filtração e lavado cométer de petróleo e secado. São obtidos 23.04 g (86% da teoria) de produto.

LC-MS (Método 1): R, = 2.85 min

MS (ESI): m/z = 226 [M+H]+

Exemplo 2A

4-(benziltio)-N'-hidroxibenzocarboximidamida4-(benziltio)benzonitrila (23.00 g) e hidrocloreto dehidroxilamina (10.66 g) são providos em etanol seco (10 mL) e trietilamina (17 mL) éadicionada. A mistura de reação é primeiro agitada por 30 min a 50°C e então aquecidasob refluxo por 2 h. Subseqüentemente, água é adicionada até a solução se tornar turva.

A mistura de reação é resfriada até temperatura ambiente e o sólido resultante é coletadopor filtração. O sólido é lavado com água e subseqüentemente secado a 85°C em umforno de secagem. O produto bruto é recristalizado a partir de n-butanol, o produtocristalino é coletado por filtração, lavado com dietileter e secado a 65°C em um forno desecagem. 23.40 g (88% da teoria) de produto são obtidos como um sólido.

LC-MS (Método 1): R, = 1.79 minMS (ESI): m/z = 229 [M+H]+

Exemplo 3 A

N-(6-{3-[4-(benziltio)fenil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}piridin-2-il)acetamida

1,1 -carbonildiimidazol (15.16 g) é adicionado lentamente empequenas porções a ácido 6-acetamidopiridin-2-carboxílico (16.84 g) em DMF seco (75mL) (evolução de gás). A solução resultante é agitada a temperatura ambiente por 1.5 h.Então 4-(benziltio)-N'-hidroxibenzocarboximidamida (23.00 g) é adicionada e a mistura dereação é agitada a temperatura ambiente até que o material de partida tenha reagidocompletamente (cerca de 3 h). A mistura de reação é aquecida a 100°C e agitada por 2 h.

Água subseqüentemente é adicionada até a solução se tornar levemente turva e amistura de reação é resfriada até a temperatura ambiente. O produto bruto é coletado porfiltração, lavado três vezes com água e secado em um forno de secagem a 65°C. 24.42 g(67% da teoria) de produto são obtidos como um sólido.

LC-MS (Método 1): R, = 2.98 min

MS (ESI): m/z = 403 [M+H]+1H-NMR (400 MHz1 DMSO-d6): δ = 10.96 (s, 1H), 8.38 (d,1 Η), 8.08 (t, 1H), 8.02-7.95 (m, 3H), 7.53 (d, 2H), 7.43 (d, 2H), 7.35-7.21 (m, 3H), 4.36 (s,2H), 2.15 (s, 3H).

Exemplo 4A

Hidrocloreto de 6-{3-[4-(benziltio)fenil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}piridin-2-amina

<formula>formula see original document page 22</formula>

Água (50 mL) e ácido hidroclórico concentrado (50 ml_) sãoadicionados a N-(6-{3-[4-(benziltio)fenil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}piridin-2-il)acetamida (40.55g) em etanol (150 mL). A mistura de reação é aquecida sob refluxo até que o material departida tenha reagido completamente (cerca de 3 h) e subseqüentemente resfriada até atemperatura ambiente. O sólido é coletado por filtração, lavado três vezes com etanol esecado em um forno a vácuo a 80°C. 36.60 g (92% da teoria) de produto são obtidoscomo um sólido.

LC-MS (Método 2): R, = 2.76 min

MS (ESI): m/z = 361 [M+H]+

1H-NMR (400 MHz1 DMSO-d6): δ = 7.95 (d, 2H), 7.73 (t, 1H),7.53 (d, 2H), 7.51 (m, 1H), 7.42 (d, 2H), 7.30 (t, 2H), 7.25 (m, 1H), 6.85 (d, 1H), 4.38 (s, 2H).

Exemplo 5A

Cloreto de 4-[5-(6-aminopiridin-2-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]benzosulfonil

<formula>formula see original document page 22</formula>

6-{3-[4-(benziltio)fenil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}piridin-2-amina(35.95 g) é resfriada até 5°C numa mistura de ácido acético (200 mL) e água (100 mL)em um banho de gelo. Cloro é introduzido gradualmente até que o material de partidatenha reagido completamente (monitorando por HPLC) pelo quê a temperatura não deveexceder 10°C. A mistura de reação é agitada a 5°C por 15 min e então diluída com gelo eágua (200 mL). O produto bruto é coletado por filtração, lavado com gelo e água (trêsvezes) e dietileter (três vezes) e subseqüentemente secado sob vácuo. 26.00 g (85% dateoria) de produto são obtidos como um sólido.

LC-MS (Método 3): R, = 2.22 minMS (ESI): m/z = 337 [M+H]+

Exemplo 6A

2-cloro-5-fluoro-1,3-dinitrobenzeno

<formula>formula see original document page 23</formula>

DMF (10 mL) e cloreto de tionila (14 mL) são adicionadossucessivamente a 4-fluoro-2,6-dinitrofenol (26.00 g) em benzeno (50 mL). A soluçãoresultante é agitada a temperatura ambiente por 5 min (um intermediário precipita) eentão aquecida sob refluxo por 1.5 h (ou até que o material de partida tenha reagidocompletamente). A mistura de reação é resfriada até a temperatura ambiente,concentrada e o resíduo é vertido sobre gelo/água. O precipitado é coletado por filtração,lavado três vezes com água e secado. Após a recristalização a partir de etanol 23.50 g(83% da teoria) de produto são obtidos na forma cristalina.

1H-NMR (400 MHz1 DMSO-d6): δ = 8.56 (d, 2H).

Exemplo 7 A

5-Fluoro-1,3-aminobenzeno

<formula>formula see original document page 23</formula>

Trietilamina (12.6 mL) e paládio (10% sobre carbono) (6.0 g)são adicionados a 2-cloro-5-fluoro-1,3-dínitrobenzeno (10.00 g) em metanol (450 mL). Amistura de reação é hidrogenada a temperatura ambiente sob uma pressão de hidrogêniode 3 bar até que o material de partida tenha reagido completamente (2 h). O lote é filtradoatravés de celite e concentrado. O resíduo é recolhido em DCM (150 mL) e tratado comuma solução 10% de ácido cítríco. A fase aquosa subseqüentemente é ajustada a um pHbásico com uma solução de hidróxido de sódio 2N e extraída com DCM (três vezes com100 mL cada uma). A fase orgânica é secada por sulfato de sódio e concentrada. 5.0 g(88% da teoria) de produto são obtidos como um óleo.

LC-MS (Método 4): Rt = 0.58 min

MS (ESI): m/z = 127 [M+H]+Exemplo 8A

N-(3-amino-5-fluorofenil)-1-cianociclopropanocarboxamida

<formula>formula see original document page 24</formula>

1,1-Carbonildiimidazol (3.29 g) é adicionado a ácido 1-cianociclopropanocarboxílico (2.05 g) em THF e a solução resultante é agitada atemperatura ambiente por 45 min. 5-Fluoro-1,3-aminobenzeno (3.00 g) é adicionado e amistura é agitada por mais 2.5 h. Subseqüentemente, a solução de reação éconcentrada, o resíduo é recolhido em DCM (150 mL) e lavado com água. A fase aquosaé extraída duas vezes com DCM. Os extratos orgânicos são unidos, secados por sulfatode sódio e concentrados. O resíduo é cromatografado em sílica gel (eluente DCM aDCM-metanol 50:1). Depois de concentrar a fração relevante, são isolados 2.35 g (58%da teoria) de produto.

(200 mL) e uma solução de acetato de sódio (8.51 g) em água (100 mL) é adicionada atemperatura ambiente. Cloreto de 4-cianobenzosulfonila (20.0 g) é adicionado, a misturade reação é aquecida a 30°C e agitada a temperatura ambiente por 3 h. O lote é vertidosobre gelo (250 mL), o sólido resultante é coletado por filtração, lavado com água (trêsvezes) e então secado em um forno de secagem. 27.8 g (98% da teoria) de produto sãoobtidos como um sólido.

LC-MS (Método 1): Rt= 1.31 min

MS (ESI): m/z = 220 [M+H]+

Exemplo 9A

N-(3-{[(4-cianofenil)sulfonil]amino}fenil)acetamida

<formula>formula see original document page 24</formula>

3'-aminoacetanilida (13.54 g) é dissolvida em 2-propanol

LC-MS (Método 1): Rt = 1.79 min

MS (ESI): m/z = 316 [M+H]+

1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.52 (s, 1H), 9.94 (s1H), 8.05 (d, 2H), 7.90 (d, 2H), 7.46 (s, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.13 (t, 1H), 6.72 (d, 1H), 2.00(s, 3H).Exemplo 10A

N43-[({4-[(Z)-amino(hidroxiimíno)metil]fenil}sulfonil)amino]fenil}acetamida

<formula>formula see original document page 25</formula>

N-(3-{[(4-cianofenil)sulfonil]amino}fenil)acetamida (27.00 g) éprovida em etanol (190 mL), e hidrocloreto de hidroxilamina (7.14 g) e trietilamina(14.0 mL) são adicionados sucessivamente. A mistura de reação é agitada a 50°C por 2 he subseqüentemente vertida sobre gelo, coletada por filtração e secada em uma cabineem vácuo. 25.78 g (86% da teoria) de produto são obtidos como um sólido.

LC-MS (Método 1): R, = 1.14 min

MS (ESI): m/z = 349 [M+H]+

Exemplo 11A

N-(6-{3-[4-({[3-(acetilamino)fenil]amino}sulfonil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}piridin-2-il)acetamida

<formula>formula see original document page 25</formula>

1,1-CarboniIdiimidazoI (9.78 g) dissolvido em dioxano (100mL) é adicionado gota a gota a ácido 6-acetilaminopiridin-2-carboxílico (10.86 g) numamistura de dioxano (100 mL) e DMF (60 mL) e a mistura é agitada a temperaturaambiente por 3 h. N-{3-[({4-[(Z)-amino(hidroxiimino)metil]fenil}sulfonil)amino]fenil}acetamidaé então adicionada como um sólido e a mistura de reação é agitada a temperaturaambiente por 16 h. Subseqüentemente, a mistura de reação é agitada a 100°C por 4 h eentão vertida sobre gelo/água. O produto é deixado a descansar por 10 min, coletado porfiltração, lavado com água (três vezes) e secado em um forno a vácuo. 25.55 g (90% dateoria) de produto são obtidos como um sólido.

HPLC (Método 5): Rt = 4.03 min

MS (ESI): m/z = 493 [M+H]+

Exemplo 12AN-(3-aminofenil)-4-[5-(6-aminopiridin-2-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]benzosulfonamida

Ácido hidroclórico 15% (150 mL) é adicionado a N-(6-{3-[4-({[3-(acetilamino)fenil]amino}sulfonil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}piridin-2-il)aceta (20.00g) em etanol (200 mL). A mistura de reação é agitada sob refluxo por 6 h e o pHsubseqüentemente é ajustado no calor a um pH 4 usando uma solução de hidróxido desódio 10%. A mistura de reação é resfriada até 5°C e agitada por 16 h. O produto bruto écoletado por filtração por sucção, lavado com água (duas vezes) e subseqüentementesecado. 12.73 g (77% da teoria) de produto são obtidos como um sólido.

HPLC (Método 5): Rt= 3.53 minMS (ESI): m/z = 409 [M+H]+

1H-NMR (300 MHz1 DMSO-d6): δ = 10.16 (br s, 1H), 8.23 (d,2H), 7.97 (d, 2H), 7.63 (t, 1H), 7.45 (d, 1H), 6.85 (t, 1H), 6.74 (d, 1H), 6.58 (br s, 2H), 6.42(s, 1H), 6.28 (t, 1H), 5.44 (br s, 2H).

Exemplo 13A

N-(6-bromopiridin-2-il)acetamida

<formula>formula see original document page 26</formula>

2-amino-6-bromopiridina (5.40 g) e cloreto de acetila (2.66mL) são providos em cloreto de metileno (80 mL) e resfriados até 0°C. Trietilamina (6.53mL) é então adicionada gota a gota e a mistura subseqüentemente é aquecida atemperatura ambiente sob agitação. Uma solução de hidrogenocarbonato de sódio 10% éadicionada ao lote e o lote é extraído com cloreto de metileno. A fase orgânica é lavadacom água e uma solução saturada de cloreto de sódio, secada por sulfato de sódio econcentrada. Após cromatografia rápida (eluente cloreto de metileno/metanol 1:0, 500:1)5.84 g (86% da teoria) de produto são obtidos.

HPLC (Método 6): R, = 3.66 min

MS (DCI/NH3): m/z = 215 e 217 [M+H]\ 232 e 234 [M+NH4]+,

249 e 251 [M+NH4+NH3]+1H-NMR (400 MHz1 DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H, NH), 8.08(d, 1H), 7.71 (t, 1H), 7.31 (d, 1H), 2.09 (s, 3H).

Exemplo 14A

N-[6-(3-hidroxi-3-metilbut-1-in-1-il)piridin-2-il]acetamida

<formula>formula see original document page 27</formula>

N-(6-bromopiridin-2-il)acetamida (5.84 g) é provida em

<formula>formula see original document page 27</formula>

dietilamina (50 mL). Depois da adição de 2-metil-3-butin-2-ol (2.51 g), cloreto debis(trifenilfosfina)paládio(ll) (381 mg) e iodeto de cobre(l) (52 mg), a mistura é agitada atemperatura ambiente por 2 h. O lote é então concentrado e passado em cromatografiarápida (eluente cloreto de metileno/metanol 200:1, 100:1, 50:1). 5.20 g (88% da teoria) deproduto são obtidos.

g) é provida em tolueno (50 mL), hidreto de sódio (95 mg) é adicionado e a mistura éagitada a 120°C por 1.5 h. O lote é concentrado, o resíduo diluído com água e extraídocom acetato de etila. A fase orgânica é secada por sulfato de sódio, concentrada epassada em cromatografia rápida (eluente cloreto de metileno/metanol 1:0, 500:1, 200:1,100:1). 1.75 g (43% da teoria) de produto são obtidos.

HPLC (Método 6): R, = 3.30 min

MS (Método M-40, DCI/NH3): m/z = 219 [M+H]+

1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.68 (s, 1H, NH), 8.05(d, 1H), 7.75 (t, 1H), 7.14 (d, 1H), 5.55 (s, 1H, OH), 2.07 (s, 3H), 1.46 (s, 6H).

Exemplo 15A

N-(6-etinilpiridin-2-il)acetamida

N-[6-(3-hidroxi-3-metilbut-1-in-1-il)piridin-2-il]acetamida (5.20

HPLC (Método 6): R, = 3.18 min

MS (Método M-40, DCI/NH3): m/z = 161 [M+H]+, 178[M+NH4]+,

H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.68 (s, 1H, NH), 8.10(d, 1H), 7.78 (t, 1H), 7.26 (d, 1H), 4.31 (s, 1H), 2.08 (s, 3H).Exemplo 16A

N-(3-{[(4-iodofenil)sulfonil]amino}fenil)acetamida

<formula>formula see original document page 28</formula>

Cloreto de 4-iodobenzilsulfonil (10.0 g) é provido emisopropanol (100 ml), acetato de sódio (3.12 g), que é dissolvido em um pouco de água,é adicionado e a mistura é agitada a temperatura ambiente por 30 min. N-(3-aminofenil)acetamida (4.96 g) é então adicionada e a mistura é adicionalmente agitadapela noite. O lote é diluído com água e uma solução saturada de cloreto de sódio eextraída com acetato de etila. A fase orgânica é secada por sulfato de sódio, concentradae passada em cromatografia rápida (eluente cloreto de metileno/metanol 1:0, 100:1,80:1). 9.62 g (70% da teoria) de produto são obtidos.

HPLC (Método 6): Rt = 4.14 min

MS (ES+, ES"): m/z = 417 [M+H]+, 415 [M-H]",

1H-NMR (400 MHz1 DMSO-d6): δ = 10.31 (s, 1H, NH), 9.91(s, 1H, NH), 7.93 (d, 2H), 7.51 (d, 2H), 7.45 (s, 1H), 7.26 (d, 1H), 7.12 (t, 1H), 6.73 (d,1H), 2.00 (s, 3H).

Exemplo 17A

N-(6-{[4-({[3-(acetilamino)fenil]amino}sulfonil)fenil]etinil}piridin-2-il)acetamida

<formula>formula see original document page 28</formula>

N-(3-{[(4-iodofenil)sulfonil]amino}fenil)acetamida (4.60 g),tetraquis(trifenilfosfina)paládio(0) (1.28 g) e iodeto de cobre(l) (421 mg) são providos emDMF sob uma atmosfera de argônio, N-(6-etinilpiridin-2-il)acetamida (2.66 g) e trietilamina(15.4 mL) são adicionados e a mistura é agitada a temperatura ambiente por 2 h. Amistura é então diluída com água, extraída em cloreto de metileno e a fase orgânica ésecada e passada em cromatografia rápida (eluente cloreto de metileno/metanol 1:0,200:1, 100:1, 50:1, 30:1). 3.56 g (48% da teoria) de produto são obtidos.HPLC (Método 6): R, = 3.86 min

MS (ES+, ES"): m/z = 449 [M+H]+, 447 [M-H]',

1H-NMR (400 MHz1 DMSO-d6): δ = 10.76 (s, 1H, NH), 10.38(s, 1H1 NH), 9.93 (s, 1H, NH), 8.13 (d, 1H), 7.88-7.78 (m, 3H), 7.73 (d, 2H), 7.48 (s, 1H),7.37 (d, 1H), 7.26 (d, 1H), 7.12 (t, 1H), 6.76 (d, 1H), 2.09 (s, 3H), 2.00 (s, 3H).

Exemplo 18A

Dihidrocloreto de N-(3-aminofenil)-4-[(6-aminopiridin-2-il)etinil]benzosulfonamidaH2N N

<formula>formula see original document page 29</formula>

N-(6-{[4-({[3-(acetilamino) fenil] amino} sulfonil) fenil] etinil}piridin-2-il)acetamida (3.12 g) é provida em etanol (45 mL), ácido hidroclórico 20% (45mL) é adicionado e a mistura é agitada a 60°C por 3 h. O lote é concentrado e o resíduoé agitado com acetonitrila. Depois da coleta por filtração por sucção, lavagem adicionalcom acetonitrila e secagem sob alto vácuo, 3.45 g (quantitativo) de produto são obtidos.

HPLC (Método 6): R, = 3.65 min

MS (ES+, ES"): m/z = 365 [M+H]+, 363 [M-H]",

1H-NMR (400 MHz1 DMSO-d6): δ = 10.70 (s, 1H, NH), 7.91-7.78 (m, 5H), 7.24 (t, 1H), 7.09 (d, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.96-6.83 (m, 3H).

Exemplo 19A

Cloreto de 4-[5-(6-acetilaminopiridin-2-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]benzosulfonila

<formula>formula see original document page 29</formula>

N-(6-{3-[4-(benziltio) fenil ]-1,2,4-oxadiazol-5-il } piridin-2-il)acetamida (11.55 g) é agitada numa mistura de acético ácido (80 mL) e água (50 mL) emum banho de gelo e resfriada até 5°C. Cloro é introduzido gradualmente até que omaterial de partida tenha reagido completamente (monitorando por HPLC), pelo quê atemperatura não deve exceder 10°C. A mistura de reação é agitada a 5°C por 15 min eentão diluída com gelo e água (100 mL). O produto bruto é coletado por filtração, lavadocom gelo e água (três vezes) e dietiléter (três vezes) e subseqüentemente secado sobvácuo. 9.60 g (88% da teoria) de produto são obtidos como um sólido.

LC-MS (Método 3): R, = 2.31 minMS (ESI): m/z = 379 [M+H]+

Exemplos de formas de realização

EXEMPLO 1

N-{3-[({4-[5-(6-aminopiridin-2-íl)-1,2,4-oxacianociclopropanocarboxamida

<formula>formula see original document page 30</formula>

N-(3-amino-5-fluorofenil)-1-cianociclopropanocarboxamida(2.46 g) é adicionada a cloreto de 4-[5-(6-aminopiridin-2-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]benzosulfonila (3.78 g) em piridina seca (120 mL). A solução resultante é agitada atemperatura ambiente por 18 h e subseqüentemente vertida sobre gelo/água. O produtobruto é coletado por filtração, lavado com água e secado. Depois da cromatografia emsílica gel (cloreto de metileno a cloreto de metileno/metanol 50:1) e de concentrar asfração relevantes, 2.28 g (40% da teoria) de produto são isolados.

LC-MS (Método 3): R, = 2.07 min

MS (ESI): m/z = 520 [M+H]+

1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.37 (d, 2H), 8.01 (d, 2H),7.64 (t, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.21 (br d, 1H), 6.73 (d, 1H), 6.68 (br d, 1H), 6.56(br s, 2H), 1.65 (s, 4H).

Exemplo 2

N-{3-[({4-[5-(6-aminopiridin-2-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]fenil}sulfonil)amino]fenil}-1-cianociclopropanocarboxamida

N-(3-aminofenil)-4-[5-(6-aminopiridin-2-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]benzosulfonamida (4.50 g) é provida em DMF seco (110 mL), HATU (6.28 g), ácido 1-cianociclopropano carboxílico (2.45 g) e N,N-diisopropiletilamina (2.90 mL) sãoadicionados e a mistura de reação é agitada sob argônio a temperatura ambiente por 1 he subseqüentemente concentrado. O resíduo é cromatografado em sílica gel (eluentecloreto de metileno/metanol 100:1 a 20:1). Depois de concentrar as frações relevantes,4.99 g (90% da teoria) de produto podem ser isolados.

LC-MS (Método 2): R, = 2.13 minMS (ESI): m/z = 502 [M+H]+

1H-NMR (400 MHz1 DMSO-d6): δ = 10.47 (s, 1H), 10.06 (s,1H), 8.23 (d, 2H), 7.97 (d, 2H), 7.64 (t, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.17(t, 1H), 6.84 (d, 1H), 6.73 (d, 1H), 1.65 (s, 4H).

Exemplo 3

N-{3-[({4-[5-(6-aminopiridin-2-il)-1,2,4-oxadiazol·-3-il]fenil}sulfonil)amino]-2-metilfenil}1cianociclopropanocarboxamída

<formula>formula see original document page 31</formula>

A preparação ocorre em analogia ao Exemplo 2 partindo de3'-amino-2'-metilfenilacetamida.

LC-MS (Método 3): Rt= 1.91 minMS (ESI): m/z = 516 [M+H]+

1H-NMR (400 MHz1 DMSO-d6): δ = 9.91 (s, 1H), 9.67 (s, 1H),8.26 (d, 2H), 7.87 (d, 2H), 7.65 (t, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.10 (m, 2H), 6.84 (dd, 1H), 6.76 (d,1H), 1.91 (s, 3H), 1.63 (m, 4H).

Exemplo 4

Hidrocloreto de N-{3-[({4-[(6-Aminopiridin-2-il)etinil]fenil}sulfonil)amino]fenil}-1-cianociclopropanocarboxamida

<formula>formula see original document page 31</formula>

Dihidrocloreto de N-(3-aminofenil)-4-[(6-aminopiridin-2-il)etinil]benzosulfonamida (750 mg), ácido 1-cianociclopropiônico (229 mg), HATU (783mg) e N,N-diisopropiletilamina (1.04 mL) são agitados durante a noite à temperaturaambiente em DMF seco (7 mL). O lote é purificado diretamente por HPLC preparativa(eluente água (com ácido hidroclórico 1%)/acetonitrila, taxa de fluxo 50 mL/min) e 400 mg(47% da teoria) de produto são obtidos.HPLC (Método 6): Rt = 3.87 minMS (ES+, ES ): m/z = 458 [M-HCI+H]+, 456 [M-HCI-H]",1H-NMR (400 MHz1 DMSO-d6): δ = 10.45 (s, 1H, NH), 10.07(s, 1 Η, NH), 7.83 (d, 2H), 7.79-7.66 (m, 3H), 7.51 (s, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.17 (t, 1H), 7.01(d, 1H). 6.82 (d, 2H), 1.65 (s, 4H).

<formula>formula see original document page 32</formula>

N-(3-amino-5-fluorofenil)-1-cianociclopropanocarboxamida(100 mg) é adicionada a cloreto de 4-[5-(6-acetilaminopiridin-2-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]benzosulfonila (148 mg) em piridina seca (2 mL). A solução resultante é agitada atemperatura ambiente por 18 h e subseqüentemente vertida sobre gelo/água. O produtobruto é coletado por filtração, lavado com água e secado. Depois da RP-HPLCpreparativa (eluente gradiente de acetonitrila:água) e de concentrar as fraçõesrelevantes, 53 mg (24% da teoria) de produto são isolados.

1H), 10.26 (s, 1H), 8.40 (d, 1H), 8.17 (d, 2H), 8.06 (m, 4H), 7.37 (s, 1H), 7.21 (d, 1H), 6.68(d, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.66 (s, 4H).

B. Avaliação da atividade fisiológica

A atividade in vitro dos compostos do presente invento podeser mostrada nos seguintes ensaios:

Testes de citopatogenicidade anti-HCMV (anti-citomegalovírus humano)

Os compostos de teste foram empregados como soluções50 milimolar (mM) em dimetilsulfóxido (DMSO). Ganciclovir® serve como composto dereferência. Após a adição de 2 μί das soluções 50, 5, 0,5 e 0,05 mM de DMSOrespectivamente a porções de 98 μΐ de meio de cultura celular na linha 2A-H paradeterminações duplicadas, diluições de 1:2 foram realizadas com porções de 50 μΐ demeio até a linha 11 da placa de 96 cavidades. As cavidades nas linhas de 1 a 12continham cada uma 50 μί de meio. 150 μΐ de uma suspensão de 1 χ 104 células(fibroblastos do prepúcio humano [NHDF]) foram então pipetados em cada cavidade

Exemplo 5

N-{3-[({4-[5-(6-acetilaminopiridin-2-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]fenil}sulfonil)amino]-5-fluorofenil}-1-cianociclopropanocarboxamida

<formula>formula see original document page 32</formula>

LC-MS (Método 7): R, = 2.46 minMS (ESI): m/z = 562 [M+H]+

1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.99 (s, 1H), 10.78 (s,(linha 1 = controle celular) e, nas linhas de 2 a 12, uma mistura de células NHDFinfectadas com HCMV e não infectadas (M.O.I. = 0,001 - 0,003), i.e., de 1 a 3 célulasinfectadas por 1000 células não infectadas. A linha 12 (sem substância) serve comocontrole de vírus. As concentrações de teste finais são de 250 a 0,0005 μΜ. As placasforam incubadas a 37°C/5% CO2 por 6 dias, i.e., até que todas as células nos controlesde vírus estivessem infectadas (100% de efeito citopatogênico [CPE]). As cavidadesforam então fixadas e manchadas pela adição de uma mistura de formalina e de corantede Giemsa (30 minutos), lavadas com água duplamente destilada e secadas num fornode secagem a 50°C. As placas foram então avaliadas visualmente usando ummicroscópio ("plaque multiplier", de Technomara).

Os seguintes dados podem ser obtidos a partir das placasde teste:

CC50 (NHDF) = concentração de substância em μΜ em que nenhum efeito citostáticovisível nas células está evidente, em comparação com o controle celular não tratado.EC50 (HCMV) = concentração de substância em μΜ que inibe o CPE (efeito citopático)em 50% comparado com o controle de vírus não tratado.

Sl (índice de seletividade) = CC50 (NHDF) / EC50 (HCMV).

Dados representativos de atividade in vitro para oscompostos do presente invento são mostrados na Tabela A.

Tabela A

<table>table see original document page 33</column></row><table>

A adequabilidade dos compostos do presente invento para otratamento de infecções HCMV pode ser mostrada no seguinte modelo animal:

Modelo HCMV Xenoaraft Gelfoam®

Animais

Camundongos fêmeas imunodeficientes, de 5 a 6 semanasde idade (16 a 20 g), Fox Chase SCID.NOD ou NOD.CB17-Prkdc/J, foram obtidos decriadores comerciais (Taconic M&B, Denmark; Jackson, USA). Os animais forammantidos sob condições estéreis (incluindo acomodações e alimentação) em isoladores.

Crescimento do vírus

O citomegalovírus humano (HCMV), cepa Davis ou AD169,cresceu in vitro em fibroblastos do prepúcio embriônico humano (células NHDF). Após ascélulas NHDF terem sido infectadas com uma multiplicidade de infecção (M.O.I.) de 0,01a 0,03, as células infectadas com vírus são colhidas de 5 a 10 dias mais tarde earmazenadas na presença de um meio essencial mínimo (MEM), 20% de soro fetal debezerro (FCS) (v/v), 1% de glutamina (v/v), 1% Pen/Strep (v/v), com 10% de DMSO a-80°C. Após uma série de dez diluições das células infectadas com vírus, a concentraçãoé determinada em 24 cavidades da placa de células NHDF confluentes após fixação emanchamento com uma solução de Giemsa e formaldeído.

Preparação de esponjas, transplante, tratamento e avaliação

Esponjas de colágeno de 1 χ 1 χ 1 cm (Gelfoam®; Peasel &Lorey, order No. 407534; K.T. Chong et al., Abstracts of 39th Interscience Conference onAntimicrobiaIAgents and Chemotherapy, 1999, p. 439) são inicialmente umedecidas comtampão salino de fosfato (PBS), as bolhas de ar internas são removidas pordesgaseificação, e então são armazenadas em MEM, 10% FCS (v/v), 1% glutamina (v/v),1% Pen/Strep (v/v). 1 χ 106 células NHDF infectadas por vírus (infecções com HCMVDavis ou HCMV AD169 M.O.I. = 0,03) são descoladas 3 horas após a infecção eadicionadas gota a gota em 20 μΙ_ de MEM, 10% FCS (v/v), 1% glutamina (v/v), 1%Pen/Strep (v/v), sobre uma esponja umedecida. As esponjas são incubadas por 3 a 4horas para permitir a aderência das células. Subseqüentemente, após a adição do meio(MEM, 10% FCS (v/v), 1% glutamina (v/v), 1% Pen/Strep (v/v)), as esponjas sãoincubadas de um dia para o outro. Para o transplante, os camundongos imunodeficientessão anestesiados com avertin ou uma mistura de cetamina/xilazina/azepromazina, ospelos das costas são removidos usando um barbeador, a epiderme é aberta de 1 a 2 cm,destensionada, e as esponjas úmidas são transplantadas sob a pele dorsal. O ferimentocirúrgico é fechado com cola de tecido ou clipes. De 4 a 6 horas após o transplante, oscamundongos podem ser tratados pela primeira vez (um tratamento é dado no dia daoperação). Nos dias seguintes, o tratamento com a substância é executado oralmentetrês vezes ao dia (7:00h, 14:00h e 19:00h), duas vezes ao dia (8:00h e 18:00h) ou umavez ao dia (9:00h) por um período de 8 dias. A dose diária é de, por exemplo, 1, ou 3, ou10, ou 30 ou 100 mg/kg de peso corporal, o volume administrado é de 10 mL/kg de pesocorporal. As substâncias são formuladas na forma de uma suspensão 0,5% deTylose/PBS com 2% DMSO, ou uma outra mistura adequada para a solubilidade dassubstâncias, p.ex. 2% etanol, 2,5% solutol, 95,5% PBS. 10 dias após o transplante ecerca de 16 horas após a última administração da substância, os animais sãosacrificados sem dor e a esponja é removida. As células infectadas por vírus sãoliberadas da esponja por digestão de colagenase (330 U/1,5 mL) e armazenadas napresença de MEM, 10% FCS (v/v), 1% glutamina (v/v), 1% Pen/Strep (v/v), 10% DMSO a-140°C. A avaliação ocorre após uma série de dez diluições das células infectadas comvírus para determinar a concentração nas placas de 24 cavidades das células NHDFconfluentes após fixação e marcação com a solução de Giemsa e formaldeído. Edeterminado o número de partículas infecciosas de vírus após o tratamento com asubstância em comparação com um grupo tratado com placebo. A avaliação estatísticaocorre por meio de programas adequados de computador, tais como GraphPad Prism.

Investigações farmacocinéticas

A farmacocinética das substâncias ativas é investigada apósadministração intravenosa ou oral de doses na faixa de 1 mg/kg intravenosamente e 3mg/kg oralmente em três ratos Wistar machos por via de administração. A fim depossibilitar uma remoção repetida de sangue, é implantado um cateter na veia jugular dosanimais no dia anterior ao experimento. As substâncias são administradasintravenosamente bem como oralmente como uma solução. Com isso, na maioria doscasos uma formulação de plasma (plasma de rato com de 1 a 2% de etanol ou DMSO1 2mL/kg) é usada para a administração intravenosa e uma formulação de PEG (10% deetanol, 40% PEG 400, 50% de água, 5 mL/kg) é usada para a administração oral.

Após a administração da substância ativa, amostras desangue são coletadas por 24 h via o cateter em tubos de amostra contendo heparina.

Subseqüentemente à remoção do sangue, as amostras de sangue são centrifugadas e osobrenadante do plasma é pipetado em tubos Eppendorf. As amostras de plasma sãoarmazenadas em pelo menos -15°C até a análise.

Para o desenvolvimento, as amostras são descongeladas.As proteínas do plasma são subseqüentemente precipitadas pela adição de acetonitrilaque compreende um padrão interno. Como padrão interno, é escolhida uma substânciada mesma classe estrutural que seja estruturalmente o mais similar possível ao compostoativo. Para a preparação de amostras de calibração, concentrações diferentes dasubstância ativa são adicionadas em alíquotas de plasma vazio e estas sãodesenvolvidas juntamente com as amostras desconhecidas. Adicionalmente, sãopreparadas amostras de controle de qualidade com três concentrações diferentes queservem para validar o procedimento analítico.

A determinação da substância ativa nas amostras ocorre porcromatografia líquida de alto desempenho com detecção espectrométrica de massa(LC/MS-MS). As concentrações da substância ativa nas amostras desconhecidas sãodeterminadas com base nas suas alturas relativas de picos ou áreas comparadas com acurva de calibração usando o programa Concalc para Windows (CCW, IntegrierteLabordatensysteme, versão 2.5 ou superior, Bayer AG). Subseqüentemente, osparâmetros farmacocinéticos são calculados a partir do desenvolvimento da concentraçãodo plasma pelo tempo individualizado em um animal usando análise não compartimentalcom o auxílio do programa KINCALC, versão 2.50.02 (Bayer AG, 2001).

Os compostos que exibem o perfil farmacocinéticomelhorado desejado nos ratos são subseqüentemente submetidos a uma investigaçãofarmacocinética em camundongos e cães. Com base em todos estes dados, é realizadauma primeira estimativa da farmacocinética humana por uma adaptação entre espéciesde acordo com Boxenbaum.

Os seguintes dados podem ser obtidos a partir destestestes:

Vss = volume de distribuição;CL = velocidade de eliminação;ti/2 = meia-vida;

AUC = área total sob a curva de concentração de droga pelo tempo;Cmax = concentração máxima;F = biodisponibilidade;

Os dados farmacocinéticos para o composto do exemplo 1após uma única administração intravenosa e oral em ratos Wistar machos (n = 3 porponto no tempo ou η = 3, resp.) são mostrados na Tabela B. Os compostos do presenteratos Wistar

<formula>formula see original document page 36</formula>

1: solução em plasma de rato com 1% DMSO, 2 mL/kg

2: solução em 10% de etanol, 40% de PEG 400, 50% de atua, 5 mL/kg

Identificação de metabólitos

As diferenças de espécies no metabolismo de um compostoativo podem ter uma grande influência sobre sua capacidade de desenvolvimento. É umobjetivo encontrar substâncias que não difiram significativamente nas rotas dedegradação metabólica entre humanos e espécies de teste usuais tais como por exemploratos e cães. Para tanto, novas substâncias ativas são primeiro incubadas in vitro commicrossomas de fígado de rato, cachorro e humano a fim de comparar o metabolismo defase I. Subseqüentemente, os compostos ainda interessantes são adicionalmenteincubados em hepatócitos de ratos e humanos a fim de obter um metabolismo hepáticocompleto de fases Ielle para compara-los.

Todos os novos compostos ativos são incubados em umaconcentração de 20 μΜ. Para isto, são preparadas soluções estoque com umaconcentração de 2 mM em acetonitrila que são então pipetadas no lote de incubação comuma diluição de 1:100 a fim de ter um máximo de 1% de acetonitrila no lote. Osmicrossomas de fígado são incubados a 37°C em 50 mM de tampão salino de fosfato depotássio pH 7.4 com e sem sistema gerador de NADPH, consistindo de 1 mM NADP+, 10mM de glicose-6-fosfato e 1 unidade de glicose-6-fosfato dehidrogenase. Os hepatócitosprimários também são incubados a 37°C em suspensão em meio Williams E. Após otempo de incubação de 0 a 4 h, os lotes de incubação são parados com acetonitrila(concentração final de cerca de 30%) e a proteína é centrifugada a cerca de 15000 χ g.As amostras paradas desta forma são analisadas diretamente ou armazenadas a -20°Caté a análise.

A análise ocorre usando cromatografia líquida de altodesempenho com ultravioleta e detecção espectrométrica de massa (HPLC-UV-MS).Para tanto, os sobrenadantes das amostras da incubação são cromatografados usandocolunas C18 de fase reversa e misturas variáveis de acetonitrila e 10 mM de formato deamônio. Os cromatogramas UV em conexão com os dados espectrométricos de massaservem para identificar os metabólitos. Os perfis metabólicos das respectivas espéciesinvestigadas geradas desta forma são comparados e servem para identificar espéciesdiferentes.

C. Formas de realização de exemplos de composições farmacêuticas

Os compostos do presente invento podem ser convertidosem preparações farmacêuticas das seguintes maneiras:

Tablete

Composição:

100 mg do composto do Exemplo 1, 50 mg de Iactose(monohidratada), 50 mg de amido de milho (nativo), 10 mg de polivinilpirrolidona (PVP25) (BASF, Ludwigshafen, Alemanha) e 2 mg de estearato de magnésio.

Peso do tablete 212 mg. Diâmetro 8mm, raio de curvatura12 mm.

Produção:

A mistura do componente ativo, Iactose e amido é granuladacom uma solução 5% (m/m) do PVP em água. Os grânulos são então secados emisturados com estearato de magnésio por 5 min. Esta mistura é comprimida usandouma prensa convencional de tabletes (vide acima o formato do tablete). Uma linha deguia para a força compressiva usada para a compressão é de 15 kN.

Suspensão que pode ser administrada oralmente

Composição:

1000 mg do composto do Exemplo 1, 1000 mg de etanol(96%), 400 mg de Rhodigel (goma xantana de FMC, Pennsylvania, USA) e 99 g de água.

10 mL de suspensão oral são equivalentes a uma únicadose de 100 mg do composto do presente invento.Produção:

O Rhodigel é suspenso em etanol, e o composto ativo éadicionado à suspensão. A água é adicionada sob agitação. A mistura é agitada por cercade 6 h até que o inchaço do Rhodigel esteja completo.

Solução que pode ser administrada intravenosamente

Composição:

De 10 a 500 mg do composto do Exemplo 1, 15 g depolietilenoglicol 400 e 250 g de água para injeção.

Produção:

O composto do presente invento é dissolvido juntamentecom polietilenoglicol 400 na água com agitação. A solução é esterilizada por filtração(diâmetro de poro de 0,22 μτη) e dispensada sob condições assépticas em garrafas deinfusão termo-esterilizadas. Estas últimas são fechadas com rolhas de infusão e tampasdobradas.

Claims

1. "Composto", caracterizado pelo fato de ter fórmula:<formula>formula see original document page 39</formula>em que:A representa um grupo de fórmula<formula>formula see original document page 39</formula>em que* é o local de ligação ao átomo de carbono do anel piridinila, e# é o local de ligação ao átomo de carbono do anel fenila,R1 representa hidrogênio, amino ou metilcarbonilamino,R2 representa hidrogênio ou halogênio,R3 representa hidrogênio, halogênio ou ciano,R4 representa hidrogênio, halogênio ou ciano,R5 representa hidrogênio ou halogênio,R6 representa hidrogênio ou halogênio,R7 representa hidrogênio, halogênio ou alquila C1-C3,R8 representa hidrogênio, halogênio ou alquila C1-C3,ou um de seus sais, solvatos, ou os solvatos de seus sais.

2. "Composto", de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato queA representa um grupo de fórmula<formula>formula see original document page 40</formula> em queé o local de ligação ao átomo de carbono do anel piridinila, e# é o local de ligação ao átomo de carbono do anel fenila,R1 representa hidrogênio, amino ou metilcarbonilamino,R21 R3 e R4 representam hidrogênio,R5 representa hidrogênio ou halogênio,R6 representa hidrogênio ou halogênio,R7 e R8 representam hidrogênio,ou um de seus sais, solvatos, ou os solvatos de seus sais.

3. "Composto", de acordo com as reivindicações 1 ou 2,caracterizado pelo fato queA representa um grupo de fórmula <formula>formula see original document page 40</formula> em que# é o local de ligação ao átomo de carbono do anel piridinila, e# é o local de ligação ao átomo de carbono do anel fenila,R1 representa hidrogênio, amino ou metilcarbonilamino,R2, R3 e R4 representam hidrogênio,R5 representa hidrogênio,R6 representa hidrogênio ou halogênio,R7 e R8 representam hidrogênio,ou um de seus sais, solvatos, ou os solvatos de seus sais.

4. "Método", para a preparação de um composto de fórmula(I) de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato que um composto defórmulaem queA1 R11 R21 R31 R4, R5 e R6 têm ο significado indicado acima,é reagido com um composto de fórmula <formula>formula see original document page 41</formula> em queR7 e R8 têm o significado indicado acima, eX1 representa halogênio, preferencialmente cloro ou bromo, ou hidróxi.

5. "Composto", de acordo com as reivindicações de 1 a 3,caracterizado pelo fato de ser para o tratamento e/ou profilaxia de doenças.

6. "Medicamento", caracterizado pelo fato de compreenderum composto de acordo com as reivindicações de 1 a 3 em combinação com umexcipiente inerte, não tóxico, farmaceuticamente aceitável.

7. "Uso de composto", o composto de acordo com asreivindicações de 1 a 3, caracterizado pelo fato de ser para a produção de ummedicamento para o tratamento e/ou profilaxia de infecções virais.

8. "Uso", de acordo com a reivindicação 7, caracterizadopelo fato que a infecção viral é uma infecção com o citomegalovírus humano (HCMV) ouum outro representante do grupo Herpesviridae.

9. "Medicamento", de acordo com a reivindicação 6,caracterizado pelo fato de ser para o tratamento e/ou profilaxia de infecções virais.

10. "Método de controle de infecções virais em humanos eanimais", caracterizado pelo fato de ser pela administração de uma quantidade antiviralefetiva de pelo menos um composto de acordo com as reivindicações de 1 a 3, de ummedicamento de acordo com a reivindicação 6 ou de um medicamento obtido de acordocom as reivindicações 7 ou 8.