BRPI0612848B1

BRPI0612848B1 - Composição de nanopartículas de isoflavona, processo para a produção da mesma e seu uso, composição farmacêutica, composição cosmética, e produto nutricional

Info

Publication number: BRPI0612848B1
Application number: BRPI0612848-3A
Authority: BR
Inventors: Juergen H. Vollhardt; Raphael Beumer; Chyi-Cheng Chen; Heinz Gutzwiller; Ernst Zedi; Philippe Emmanuel Maillan
Original assignee: Dsm Ip Assets B.V
Priority date: 2005-06-29
Filing date: 2006-01-31
Publication date: 2020-03-31
Also published as: ATE520396T1; JP2008544963A; JP5134535B2; ES2369928T3; US20090035336A1; EP1904053B1; WO2007000193A1; EP1904053A1; CN101212964A; BRPI0612848B8; BRPI0612848A8; KR101242851B1; KR20080020643A; BRPI0612848A2; US8951560B2; WO2007000193A9

Abstract

composição de nanoparticulas de isoflavona, processo para a produção da mesma e seu uso, composição farmaceutica, composição cosmética, e produto nutricional. a presente invenção refere-se às composições de nanopartículas de isoflavona que compreendem isoflavona na forma de nanopartículas e, de preferência, um veículo. as composições de nanopartículas de isoflavona são particularmente úteis para a preparação de composições cosméticas, composições farmacêuticas, gêneros alimentícios, alimentos e aditivos alimentícios. nas composições que compreendem as composições de nanopartículas de isoflavona, a recristalização da isoflavona em partículas maiores é retardada.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para COMPOSIÇÃO DE NANOPARTÍCULAS DE ISOFLAVONA, PROCESSO PARA A PRODUÇÃO DA MESMA E SEU USO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, COMPOSIÇÃO COSMÉTICA, E PRODUTO NUTRICIONAL.

[001] A presente invenção refere-se às composições de nanopartículas de isoflavona que compreendem uma isoflavona na forma de nanopartículas e, de preferência, um veículo. As composições de nanopartículas de isoflavona são particularmente úteis para a preparação de composições cosméticas, composições farmacêuticas, gêneros alimentícios, aditivos alimentícios, rações animais e aditivos para rações animais. Nas composições que compreendem as composições de nanopartículas de isoflavona, a recristalização da isoflavona em partículas maiores é retardada. A isoflavona é, de preferência, genisteína.

[002] Isoflavonas constituem um grupo de corantes vegetais que pertencem aos flavonóides e são derivadas de isoflavonas. As seguintes isoflavonas são particularmente importantes:

'

1		5	7	3'	4'
2	Isoflavona	H	H	H	H
3	Daidzeína	H	OH	H	OH
4	Genisteína	OH	OH	H	OH
5	Prunetina	OH	och₃	H	OH
6	Biochanina A	OH	OH	H	och₃
7	Orobol	OH	OH	OH	OH
8	Santal	OH	och₃	OH	OH
	Pratenseína	OH	OH	OH	och₃

[003] Uma das isoflavonas mais importantes é genisteína.

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2/51 [004] Genisteína é um ingrediente ativo farmacêutica e cosmeticamente bem conhecido que possui atividade antibacteriana. Genisteína é um antagonista da calmodulina e é especialmente importante a atividade inibidora enzimática de genisteína, por exemplo, contra tirosina quinases, dopa-carboxilases etc. Genisteína também pode ser usada em inseticidas. O nome químico de genisteína é 4',5,7triidroxiisoflavona, e o composto pode ser obtido por purificação a partir de produtos naturais, tais como produtos de soja (por exemplo, Biochem. Biophys. Res. Commun. 179: 661-667, 1991), mas também pode ser sintetizado quimicamente por métodos conhecidos na técnica. Genisteína é disponível comercialmente por muitos fornecedores e em uma pureza elevada. A estrutura química de genisteína é a seguinte:

[005] Um número significativo de publicações é dirigido à genisteína e ao seu uso e, por exemplo, podemos citar US-A 5.824.702, WO 03/068218 ou US-A 5.948.814, para mencionar apenas os três mais recentes das várias patentes e pedidos de patente nesse campo.

[006] Genisteína é normalmente produzida em forma de pó cristalino, por exemplo, de acordo com um processo como apresentado em WO 2004/009576. Tal forma de pó tem uma fluxibilidade muito baixa. A baixa fluxibilidade do pó faz com que o pó cristalino seja de difícil utilização na fabricação de comprimidos e em outras formas de aplicação que exijam que o pó flua livremente. O mesmo problema ocorre caso se tente fazer formulações com outras isoflavonas.

[007] Além disso, é difícil incluir isoflavonas, em particular genisteína, por exemplo, em suplementos alimentícios em uma concentração razoavelmente elevada e em uma que forneça uma alta biodispoPetição 870190141033, de 30/12/2019, pág. 6/69

3/51 nibilidade da isoflavona (ou de genisteína).

[008] Esses problemas são particularmente abordados em WO

99/38509, que sugere a solução desses problemas por acoplamento, por exemplo, da genisteína com um veículo anfifílico para formar uma micela que possui um diâmetro médio de menos de cerca de 100 nm. Os veículos anfifílicos descritos neste documento são essencialmente glicerídeos de ácido graxo polietileno-glicolisados, tais como aqueles obtidos a partir de vários óleos vegetais completa ou parcialmente hidrogenados.

[009] No entanto, tais micelas são de difícil obtenção e seu campo de aplicação é bem limitado e apenas suplementos nutricionais são descritos em WO 99/38509.

[0010] Em relação às formas de aplicação tópica, apesar dos vários documentos que descrevem genisteína e suas aplicações, as composições tópicas com genisteína comercializadas atualmente ou contêm somente concentrações muito reduzidas de genisteína, por exemplo, 0,01% em peso ou menos, ou contêm um solubilizante ou solvente orgânico para genisteína, por exemplo, etanol. A presença de solventes orgânicos como etanol em composições tópicas deve, no entanto, ser evitada, se possível, uma vez que alguns solventes orgânicos como o etanol podem causar irritações da pele.

[0011] Caso se prepare uma composição tópica que se baseie exclusivamente em água como solvente e contenha concentrações maiores de genisteína disponível comercialmente como, por exemplo, mais de 0,1% em peso, em particular mais de 0,2% em peso ou 0,5% em peso ou mais de genisteína, essa composição tópica torna-se arenosa durante a estocagem. A aplicação de uma composição tópica arenosa desse tipo à pele pode produzir irritações, e a aceitação do consumidor é baixa, em particular se a composição for uma composição cosmética. Além disso, além de se tornar arenosa, a atividade da genistePetição 870190141033, de 30/12/2019, pág. 7/69

4/51 ína na formulação tópica aquosa pode diminuir com a estocagem. [0012] Nanossuspensões de compostos farmaceuticamente ativos insolúveis em água e métodos de preparação dessas nanossuspensões são conhecidos na técnica, e podemos citar, por exemplo, US-A 5.858.410 e US-A 5.145.684. Esses documentos apresentam muitos ingredientes ativos possíveis que podem ser fornecidos na forma de nanossuspensões, mas não se pronunciam sobre a genisteína. Ambos os documentos estão preocupados principalmente com um método para aumentar a biodisponibilidade de um fármaco, e não abordam composições tópicas e os problemas que ocorrem em composições tópicas.

[0013] Além disso, existem vários artigos de revisão sobre nanopartículas de fármacos ou partículas micronizadas de fármacos, por exemplo, “Advanced Drug Delivery Reviews” 47 (2001) 3-19. Esse documento descreve que o fornecimento de um fármaco na forma de nanopartículas pode aumentar a solubilidade de saturação e a velocidade de dissolução do fármaco. O documento aborda principalmente a biodisponibilidade de fármacos não solúveis em água destinados à administração oral ou parenteral. Formulações tópicas e problemas que possam ocorrer em formulações tópicas são discutidos. Genisteína não é descrita.

[0014] Outro artigo de revisão, “Pharmaceutical Development and

Technology”, Vol. 9, N° 1, páginas 1-13, 2004, compara os diferentes processos para a produção de partículas micronizadas de fármaco e suas vantagens e desvantagens. De acordo com o documento, a produção de pequenas partículas secas ainda é um desafio, e são discutidos alguns problemas que ocorrem, em particular, se as partículas pequenas são preparadas por trituração de partículas secas maiores, e não por associação de fármaco disperso molecularmente. Embora o documento mencione de forma geral que fármacos micronizados pos

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5/51 sam ser usados para composições intravenosas, tópicas, orais ou oftálmicas, o foco principal é na administração pulmonar seca e na melhora da biodisponibilidade de fármacos pouco hidrossolúveis. Exceto a informação geral acima, composições tópicas não são mencionadas e genisteína também não é mencionada.

[0015] Considerando a ampla aplicação de isoflavonas e, em particular, de genisteína, em composições tópicas e orais, em composições tópicas sólidas e líquidas, na indústria farmacêutica, cosmética e nutricional, há necessidade do fornecimento de isoflavonas e, em particular, de genisteína, em uma forma que possa ser facilmente manipulada e formulada em todos os tipos de formas de aplicação, não somente em uma alta concentração em composições orais, mas também em composições tópicas.

[0016] É, portanto, um objetivo da presente invenção fornecer isoflavonas e, em particular, genisteína, em uma forma que satisfaça a necessidade acima.

[0017] Em particular, as isoflavonas como, por exemplo, genisteína, devem ser fornecidas em uma forma que torne possível preparar composições tópicas aquosas, em particular composições tópicas aquosas cosméticas, que sejam, de preferência, livres de etanol e, de preferência, também livres de outros solventes orgânicos, e que contenham a isoflavona (particularmente a genisteína) em uma concentração elevada de mais de 0,01% em peso, mas, de preferência, em concentrações bem maiores, por exemplo, 0,3% em peso ou mais. As composições devem ser estáveis durante a estocagem por pelo menos três meses, de preferência, por pelo menos seis meses, mais preferivelmente, por pelo menos um ano, e não desenvolver arenosidade durante esse tempo.

[0018] As isoflavonas como, por exemplo, genisteína, também devem ser fornecidas em uma forma que seja particularmente adequada

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6/51 para alimentos e aditivos alimentícios ou bebidas ou alimento natural, tais como tofu, iogurte, suco de laranja etc., em que devem ser fornecidas biodisponibilidade, misturabilidade, uniformidade de conteúdo, estabilidade física etc. elevadas.

[0019] A presente invenção se baseia nos achados inesperados de que composições de isoflavonas, em particular de genisteína, em que a isoflavona não está na forma de micelas, são estáveis e, caso a isoflavona, opcionalmente juntamente com um veículo e água, seja micronizada por certos processos para se obter uma composição de nanopartículas na qual as partículas têm um tamanho médio de partícula de D[4.3] de 3 pm ou menos. Aquelas composições são aqui designadas como composições de nanopartículas de isoflavona ou genisteína.

[0020] Dessa forma, a presente invenção fornece as composições de nanopartículas de isoflavona e processos adequados para a produção das composições de nanopartículas de isoflavona.

[0021] As composições de nanopartículas de isoflavona contêm as nanopartículas de isoflavona e, opcionalmente, um veículo e, imediatamente após sua preparação, normalmente água. No entanto, é possível remover a água. De preferência, as composições consistem essencialmente em:

i) nanopartículas de isoflavona ou (ii) nanopartículas de isoflavona e água ou (iii) nanopartículas de isoflavona e um veículo ou (iv) nanopartículas de isoflavona e água e um veículo.

[0022] “Consiste essencialmente em” significa no máximo 10%, de preferência, no máximo 5%, mais preferivelmente no máximo 2%, de outros componentes diferentes dos componentes especificados presentes nas composições.

[0023] As isoflavonas não estão na forma de micelas, como des

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7/51 crito em WO 99/38509, e tais micelas não são formadas pelos processos da presente invenção, e o veículo usado de acordo com a invenção não é, de preferência, um veículo anfifílico do tipo descrito em WO 99/38509, ou seja, um glicerídeo de ácido graxo saturado ou insaturado polietileno-glicolisado.

[0024] Inesperadamente, as composições de nanopartículas de uma isoflavona e, opcionalmente, um veículo e, opcionalmente, água, de acordo com a invenção, podem ser incorporadas em composições tópicas aquosas, tais como composições cosméticas em concentrações elevadas de 0,3% em peso ou mais, e essas composições tópicas não se tornam arenosas com a estocagem. A atividade da isoflavona nessas composições tópicas não diminui nem durante estocagem.

[0025] As composições de nanopartículas de isoflavona são preparadas, de preferência, por um processo de homogeneização de alta pressão, no qual uma mistura de uma isoflavona, que seja, de preferência, cristalina, opcionalmente o veículo e a água, é submetida a um homogeneizador de alta pressão. É ainda mais particularmente preferido um processo no qual uma mistura de uma isoflavona, que seja, de preferência, cristalina, opcionalmente o veículo e a água, é submetida a um moinho de glóbulos agitados. Opcionalmente, a suspensão resultante é submetida a um processo de secagem.

[0026] As composições de nanopartículas de genisteína, opcionalmente um veículo e, opcionalmente, água, que são fornecidas pela presente invenção, nunca foram descritas na técnica estabelecida. A fim de evitar a confusão dessas composições com as composições farmacêuticas, composições cosméticas, composições nutricionais e outras composições que também são englobadas pela presente invenção, as composições de nanopartículas de isoflavonas, opcionalmente um veículo e, opcionalmente, água, definidas acima, serão denominaPetição 870190141033, de 30/12/2019, pág. 11/69

8/51 das composições de nanopartículas de isoflavona (ou genisteína). [0027] A presente invenção também fornece composições cosméticas, composições farmacêuticas, gêneros alimentícios, bebidas, rações animais, aditivos alimentícios, inseticidas e outras composições contendo isoflavona principalmente conhecidas. Exemplos de produtos nutricionais são tofu, iogurte, suco de laranja etc. São incluídas não somente composições tópicas, mas também composições orais ou parenterais que contêm as composições de nanopartículas de isoflavona da invenção. São preferidas as composições farmacêuticas e composições cosméticas, em particular composições tópicas aquosas, que sejam, de preferência, livres de etanol, que contêm as composições de nanopartículas de isoflavona.

[0028] Além disso, a invenção fornece processos para a produção das composições de nanopartículas de isoflavona definidas acima. Em um processo preferido, uma mistura de isoflavona, que seja, de preferência, cristalina, opcionalmente o veículo e a água, é submetida a um homogeneizador de alta pressão e, opcionalmente, a suspensão resultante é submetida a um processo de secagem. Em um processo ainda mais preferido, a isoflavona, opcionalmente o veículo e a água, é submetida a um moinho de glóbulos agitados, e a suspensão resultante é opcionalmente submetida a um processo de secagem.

[0029] A invenção será ainda descrita para genisteína, que é a isoflavona da presente invenção mais preferida. No entanto, a descrição adicional também é válida para as outras isoflavonas cobertas pela presente invenção. Evidentemente, também é possível usar uma mistura de mais de uma isoflavona, por exemplo, de genisteína e uma ou mais isoflavonas adicionais. O termo “isoflavona”, como aqui usado, visa a englobar todas essas possibilidades.

[0030] As composições de nanopartículas de genisteína da presente invenção contêm genisteína e, de preferência, um veículo. O ve

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9/51 ículo não é especificamente restrito, e geralmente é adicionado para facilitar a formação de um pó atomizado que pode ser manipulado mais facilmente. Sem o veículo, o pó atomizado seria muito fino, resultando em baixo rendimento e alta pulverização. Em uma modalidade preferida, o veículo também funciona como um estabilizante para minimizar a floculação de nanopartículas em suspensões aquosas, em particular, se estabilizante for, por exemplo, amido modificado, derivados de celulose, goma acácia e proteína do leite. Geralmente, o veículo é selecionado de um ou mais carboidratos, uma ou mais proteínas ou uma mistura de carboidratos e proteínas. Carboidratos preferidos são amido modificado, sorbitol, maltose, maltodextrina, goma acácia, pectina, alginato, goma guar, xantana, derivados de celulose, tais como carboximetilcelulose e hidroxipropilmetilcelulose e misturas destes. Os mais preferidos são amido modificado e misturas que compreendem amido modificado, e o amido modificado é, de preferência, um amido que é modificado hidrofobicamente, ou seja, ele pode atuar como um tensoativo. Um exemplo de um amido modificado hidrofobicamente como esse é amido octenil succinato de sódio, que é, por exemplo, disponível sob a designação “Capsul” da National Starch e Co., New Jersey, EUA.

[0031] Caso o veículo compreenda uma proteína, a proteína é selecionada, de preferência, de gelatina, proteína do leite, proteína de soja e misturas destas. Além disso, podem ser utilizadas misturas de um ou mais carboidratos como definidos acima com uma ou mais proteínas como definidas acima, caso seja apropriado.

[0032] Veículos preferidos que estão contidos nas composições de nanopartículas de genisteína da presente invenção são veículos que também possuem a capacidade de estabilizar uma suspensão aquosa da genisteína. Tais veículos geralmente contêm uma parte hidrofóbica e uma parte hidrofílica como, por exemplo, amido modificado hidrofo

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10/51 bicamente, derivados de celulose, tais como hidroxipropilmetilcelulose, goma acácia e proteínas do leite. Esses veículos/estabilizantes são componentes preferidos das composições de nanopartículas de genisteína da presente invenção.

[0033] No entanto, deve-se entender que não é essencial para a invenção que o veículo também tenha uma função estabilizante sobre as suspensões da genisteína. As composições de nanopartículas de genisteína da invenção são usadas, de preferência, em composições tópicas, farmacêuticas ou cosméticas que possam já conter estabilizantes da suspensão (ou que o processo da formulação isoladamente seja adequado para ressuspender as nanopartículas de genisteína) e, portanto, a presença de uma estabilizante da suspensão nas composições de nanopartículas de genisteína da invenção não é absolutamente necessária. No entanto, se as composições de nanopartículas de genisteína da invenção já contiverem um veículo que também tenha atividade estabilizante sobre a suspensão, pode ser possível reduzir a quantidade de estabilizante da suspensão na composição tópica cosmética ou farmacêutica que é preparada com as composições de nanopartículas de genisteína da invenção. As composições de nanopartículas de genisteína da invenção são normalmente preparadas como suspensões aquosas que contêm genisteína, um veículo e água. Em uma modalidade preferida, as suspensões aquosas são então submetidas a um método de secagem adequado, por exemplo, atomização ou liofilização para eliminar a maior parte ou toda a água e para obter um produto granulado ou pulverulento. De acordo com a presente invenção, ambas as composições são preferidas, as suspensões aquosas que contêm genisteína, água e, opcionalmente, um veículo, e as composições secas que contêm genisteína e, opcionalmente, um veículo. Dessa forma, em uma modalidade preferida, as composições da invenção consistem em genisteína, um veículo e, opcionalmente,

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11/51 água. Deve-se entender que o termo “veículo”, como aqui usado, inclui uma mistura de vários veículos diferentes, como definidos acima.

[0034] Caso as composições de nanopartículas de genisteína da presente invenção sejam composições em pó ou composições granuladas, elas compreendem, de preferência, pelo menos 1% em peso de genisteína, de preferência, 20% em peso ou, mais preferivelmente, 50% em peso de genisteína ou mais com 90% em peso de genisteína ou mais também sendo preferidas. O resto das composições de nanopartículas de genisteína é o veículo opcional e, dependendo do processo de secagem, água residual que não é removida da composição de nanopartículas de genisteína. Dessa forma, de preferência, a composição de nanopartículas de genisteína contém 99% em peso ou menos de veículo e, se aplicável, água residual, de preferência 80% em peso ou menos, mais preferivelmente 50% em peso ou menos de veículo e, se aplicável, água residual, e 10% em peso ou menos de veículo e, se aplicável, água residual também é preferida. De preferência, as composições de nanopartículas de genisteína da presente invenção contêm pelo menos 1% em peso de veículo e, se aplicável, água residual; de preferência, as composições de nanopartículas de genisteína da presente invenção contêm 5% em peso ou mais de veículo e, se aplicável, água residual. Composições de nanopartículas granuladas ou em pó de genisteína preferidas contêm genisteína em uma quantidade de 1 a 99% em peso, de 30 a 95% em peso, de 50 a 95% em peso, de 70 a 95% em peso, de 70 a 90% em peso, de 90 a 99% em peso, de 90 a 95% em peso, o resto sendo veículo e, se aplicável, água residual. Evidentemente, composições que não contêm um veículo, mas somente genisteína e, se aplicável, água residual, também são preferidas. As composições de nanopartículas de genisteína na forma de um pó podem ser preparadas a partir das suspensões aquosas descritas abaixo por um processo convencional de atomizaPetição 870190141033, de 30/12/2019, pág. 15/69

12/51 ção ou um processo de liofilização.

[0035] Caso a composição de nanopartículas de genisteína da presente invenção esteja na forma de uma suspensão aquosa que contenha genisteína, opcionalmente um veículo e água, a quantidade de água não é particularmente restrita, mas geralmente essas composições aquosas conterão 0,5% ou mais, de preferência 3% ou mais, de preferência 5% ou mais de genisteína e, opcionalmente, um veículo, mais preferivelmente 10% ou, mais preferivelmente, 20% ou mais, 30% ou mais, 40% ou mais ou 50% ou mais de genisteína e, opcionalmente, veículo, o resto sendo água, em que as quantidades relativas de genisteína e veículo são como definidas acima. A quantidade mínima de água que está presente nas suspensões aquosas é a quantidade necessária para formar uma suspensão. As suspensões aquosas da invenção podem ser obtidas diretamente pelo processo de produção e, nesse caso, a quantidade de partículas sólidas na suspensão e, dessa forma, também a quantidade de água na suspensão depende do equipamento usado para a preparação da suspensão. Caso deva ser fornecido um teor mais elevado de sólidos, é possível remover água da suspensão aquosa, como necessário, por exemplo, por evaporação, de preferência em temperatura constante. São preferidas as suspensões aquosas que são obtidas diretamente por homogeneização de alta pressão ou por moinho de bolas agitadas (trituração úmida) de genisteína e, opcionalmente, um veículo, e tais suspensões normalmente contêm 40% ou mais de água. Suspensões aquosas que contêm 50% ou mais de água, o resto sendo genisteína e, opcionalmente, um veículo, em quantidades relativas, como definidas acima, também são preferidas.

[0036] Composições preferidas também são composições que contêm genisteína em uma quantidade na faixa de 10 a 50% em peso, e veículo em uma quantidade de uma proporção de genisteína para

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13/51 veículo na faixa de 10:1 a 1:10, de preferência 10:1 a 1:1 ou 1:1 a 1:5, por exemplo, cerca de 1:2, o resto da composição sendo água, por exemplo, composições que contêm 25% de genisteína, 5% de veículo e 70% de água. Também são preferidas composições que contêm 10 a 30% de genisteína (de preferência 15 a 25% de genisteína, particularmente cerca de 20% de genisteína), 15 a 40% de veículo (de preferência 20 a 30% de veículo, particularmente cerca de 25% de veículo) e o resto sendo água.

[0037] Uma característica importante das composições de nanopartículas de genisteína da invenção é o tamanho de partícula da genisteína, que é de 3 pm ou menos, de preferência, 1 pm ou menos, por exemplo, cerca de 0,5 pm. Faixas preferidas do tamanho médio de partícula da genisteína nas composições de nanopartículas de genisteína da invenção são 0,05 a 3 pm, mais preferivelmente 0,05 a 1 pm, ainda mais preferivelmente 0,05 a 0,5 pm. Além disso, um tamanho de partícula de 0,3 a 1,0 pm é preferido. Também são preferidas as faixas acima com 0,1 em vez de 0,05 como limite inferior para o tamanho médio de partícula. Todos os tamanhos de partícula acima são tamanhos médios de partícula D[4.3], ou seja, diâmetros médios do volume ou diâmetros médios de De Brouckere. De preferência, o tamanho de partícula das partículas de genisteína de acordo com D[3.2] está dentro das faixas de 0,05 a 0,5, de preferência, de 0,1 a 0,2, em que D[3.2] é o diâmetro médio de superfície ou o diâmetro médio de Sauter. Todas as medidas de tamanho de partícula citadas nesta especificação são feitas por técnica de difração de laser usando um “Matersizer 2000” de Malvern Instruments Ltd., GB, e informações adicionais sobre os tamanhos de partícula D[4.3] e D[3.2] acima podem ser encontradas, por exemplo, em “Basic principles of particle size analytics”, Dr. Alan Rawle, Malvern Instruments Limited, Engima Business Part, Grovewood Road, Malvern, Worcéstereshire, WR14 1XZ, UK e no

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14/51 “Manual of Malvern particle size analyzer”.

[0038] As requerentes não querem se prender a uma teoria, e não se sabe se as partículas na composição de nanopartículas de genisteína que contêm veículo da presente invenção contêm uma mistura de genisteína e veículo, o que significa que a genisteína e o veículo estão presentes na mesma partícula, ou se as partículas de genisteína e as partículas de veículo estão presentes independentemente nas composições de nanopartículas de genisteína. Também é possível que a composição de nanopartículas de genisteína contenha partículas que consistem unicamente em genisteína, partículas que compreendam tanto genisteína quanto veículo, e partículas que consistem unicamente em veículo. Todas essas possibilidades estão incluídas dentro da presente invenção e, se as composições de nanopartículas de genisteína da presente invenção compreenderem partículas que contêm tanto genisteína quanto veículo, o tamanho de partícula acima irá se referir à partícula como essa que compreende tanto genisteína quanto veículo.

[0039] Neste pedido, caso não seja especificado de forma diferente, partes e percentagens são por peso e se baseiam no peso da composição.

[0040] As composições de nanopartículas de genisteína da invenção podem ser usadas para todas as finalidades para as quais genisteína foi usada na técnica estabelecida, mas, em particular, as composições de nanopartículas de genisteína da presente invenção são para uso em composições farmacêuticas, composições cosméticas, gêneros alimentícios, rações animais ou aditivos alimentícios, com aditivos alimentícios e composições cosméticas sendo os mais preferidos.

[0041] As composições da invenção que contêm as composições de nanopartículas de genisteína da invenção em seu sentido mais amplo são denominadas “composições gerais” a seguir.

[0042] De preferência, as composições gerais da presente inven

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15/51 ção são composições tópicas, tais como emulsões óleo-em-água líquidas ou sólidas, emulsões água-em-óleo, emulsões múltiplas, microemulsões, emulsões PET, emulsões bickering, hidrogéis, géis alcoólicos, lipogéis, uma ou soluções multifases, espumas, pomadas, emplastros, suspensões, pós, cremes, purificador, sabões e outras composições normais, que também podem ser aplicadas por canetas, como máscaras ou como sprays.

[0043] As composições gerais da invenção também podem conter adjuvantes e aditivos cosméticos normais, tais como conservantes/antioxidantes, substâncias gordurosas/óleos, água, solventes orgânicos, silicones, espessantes, amaciantes, emulsificantes, protetores solares, agentes antiespuma cosméticos ativos, hidratantes, fragrâncias, tensoativos, enchimentos, agentes seqüestrantes, polímeros aniônicos, catiônicos, não iônicos ou anfotéricos ou misturas destes, propelentes, agentes acidificantes ou alcalinizantes, tintas, corantes, pigmentos ou nanopigmentos, por exemplo, aqueles adequados para o fornecimento de um efeito fotoprotetor ao bloquear fisicamente radiação ultravioleta, ou quaisquer outros ingredientes normalmente formulados em cosméticos.

[0044] A composição geral da presente invenção também pode conter um ou mais ingredientes ativos farmacêutica ou cosmeticamente adicionais, em particular bisabolol, alquildióis, tais como 1,2pentanodiol, hexanodiol ou 1,2-octanodiol, vitaminas, pantenol, fitol, fitantriol, ceramidas e pseudoceramidas, aminoácidos e peptídeos bioativos, hidrolisados protéicos, ácidos AHA, ácidos graxos poliinsaturados, extratos de plantas, DNA ou RNA e seus produtos de fragmentação ou carboidratos.

[0045] Adicionalmente, a composição geral da presente invenção pode conter filtros UV-A e UV-B. Exemplos de agentes de proteção UV-B ou de amplo espectro, ou seja, substâncias que possuem máxi

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16/51 mos de absorção entre cerca de 290 e 340 nm, que são preferidas para combinação com os compostos da presente invenção, são os seguintes compostos orgânicos e inorgânicos:

- acrilatos, tais como 2-etilhexil 2-ciano-3,3-difenilacrilato (octocrylene, PARSOL® 340), etil 2-ciano-3,3-difenilacrilato e similares;

- derivados de cânfora, tais como as 4-metil benzilideno cânfora (PARSOL® 5000), 3- benzilideno cânfora, cânfora benzalcônio metossulfato, poliacrilamidometil benzilideno cânfora, sulfo benzilideno cânfora, sulfometil benzilideno cânfora, ácido tereftalideno dicanforsulfônico e similares;

- derivados de cinamato, tais como octil metoxicinamato (PARSOL® MCX), etoxietil metoxicinamato, dietanolamina metoxicinamato (PARSOL® Hydro), isoamil metoxicinamato e outros mais, além de derivados do ácido cinâmico ligados aos siloxanos;

- derivados do ácido p-aminobenzóico, tais como ácido paminobenzóico, 2-etilhexil p-dimetilaminobenzoato, etil paminobenzoato N-oxipropilenado, gliceril p-aminobenzoato,

- benzofenonas, tais como benzofenona-3, benzofenona-

4,2,2',4,4'-tetrahidróxi-benzofenona, 2,2'-diidróxi-4,4'dimetoxibenzofenona e similares;

- ésteres de ácido benzalmalônico, tais como di-(2-etilhexil) 4-metoxibenzalmalonato;

- ésteres de ácido 2-(4-etóxi-anilinometileno)propanodióico, tais como éster dietílico de ácido 2-(4-etóxianilinometileno)propanodióico, como descritos na Publicação de Patente Européia EP 0895 776;

- compostos de organossiloxano que contêm grupos benzmalonato, como descritos nas Publicações de Patente Européia EP 0358584 B1, EP 0538431 B1 e EP 0709080 A1, em particular Parsol

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SLX;

- drometrizol trissiloxano (Mexoryl XL);

- pigmentos, tais como TiO2 microparticulado, e similares mais. O termo “microparticulado” refere-se a um tamanho de partícula a partir de cerca de 5 nm a cerca de 200 nm, particularmente a partir de cerca de 15 nm a cerca de 100 nm. As partículas de TiO2 também podem ser revestidas por óxidos metálicos, tais como, por exemplo, óxidos de alumínio ou zircônio ou por revestimentos orgânicos, tais como, por exemplo, polióis, meticona, estearato de alumínio, alquil silano. Tais revestimentos são bem conhecidos na técnica;

- derivados de imidazol, tais como, por exemplo, ácido 2fenil benzimidazol sulfônico e seus sais (PARSOL®HS). Sais de ácido 2-fenil benzimidazol sulfônico são, por exemplo, sais alcalinos, como sais de sódio ou potássio, sais de amônio, sais de morfolino, sais de aminas primárias, secundárias e terciárias, como sais de monoetanolamina, sais de dietanolamina e similares;

- derivados de salicilato, tais como salicilato de isopropilbenzila, salicilato de benzila, salicilato de butila, salicilato de octila (NEO HELIOPAN OS), salicilato de isooctila ou salicilato de homomentila (homosalato, HELIOPAN) e similares;

- derivados de triazina, tais como octil triazona (UVINUL T150), dioctil butamido triazona (UVASORB HEB), bis etoxifenol metoxifenil triazina (Tinosorb S) e similares.

[0046] Exemplos de agentes de proteção de amplo espectro ou

UV-A, ou seja, substâncias que possuem máximos de absorção entre cerca de 320 e 400 nm, que são preferidos para combinação com os compostos da presente invenção são os seguintes compostos orgânicos e inorgânicos:

- derivados de dibenzoilmetano, tais como 4-terc-butil-4'metoxidibenzoil-metano (PARSOL® 1789), dimetoxidibenzoilmetano,

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18/51 isopropildibenzoilmetano e similares;

- derivados de benzotriazol, tais como 2,2'-metileno-bis-(6(2H-benzotriazol-2-il)-4-(1,1,3,3-tetrametilbutil))-fenol (TINOSORB M) e similares;

- ácidos fenileno-1,4-bis-benzimidazolsulfônicos ou sais, tais como ácido 2,2-(1,4-fenileno)bis-(1H-benzimidazol-4,6dissulfônico) (Neoheliopan AP);

- hidroxibenzofenonas amino-substituídas como, por exemplo, hexiléster de ácido 2-(4-dietilamino-2-hidroxibenzoil)-benzóico, como descrito na Publicação de Patente Européia EP 1046391.

[0047] Como os derivados de dibenzoilmetano possuem fotoestabilidade limitada, pode ser desejável fotoestabilizar esses agentes de proteção UV-A. Dessa forma, o termo “agente de proteção UV-A convencional” também se refere aos derivados de dibenzoilmetano, tais como, por exemplo, PARSOL® 1789 estabilizado, por exemplo, por derivados de 3,3-difenilacrilato, como descrito nas Publicações de Patente Européia EP-A0514491 e EP-A0780119;

- derivados de benzilideno cânfora, como descrito na Patente U.S. N° 5.605.680;

- organossiloxanos que contêm grupos benzmalonato, como descrito nas Publicações de Patente Européia EP-A 0358584, EPA 0538431 e EP-A 0709080, em particular Parsol SLX.

[0048] Uma boa visão geral de filtros UV-A e UV-B que podem ser adicionados às composições da presente invenção também podem ser encontrados em DE-A 103 27 432. Todos os compostos de filtro UV descritos neste documento também são úteis como componentes para as composições da presente invenção e são aqui incluídos por referência.

[0049] As composições gerais da presente invenção contêm de preferência um ou mais antioxidantes/conservantes. Com base na in

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19/51 venção, podem ser usados todos os antioxidantes conhecidos normalmente formulados em cosméticos. São especialmente preferidos os antioxidantes escolhidos do grupo que consiste em aminoácidos (por exemplo, glicina, histidina, tirosina, triptofano) e seus derivados, imidazol (por exemplo, ácido urocânico) e derivados, peptídeos, tais como D,L-carnosina, D-carnosina, L-carnosina e derivados (por exemplo, anserina), carotenóides, carotenos (por exemplo, α-caroteno, βcaroteno, licopeno) e derivados, ácido clorogênico e derivados, ácido lipóico e derivados (por exemplo, ácido diidrolipóico), aurotioglicose, propiltiouracil e outros tióis (por exemplo, tioredoxina, glutationa, cisteína, cistina, cistamina e seus glicosil-, N-acetil-, metil-, etil-, propil-, amil-, butil- e lauril-, palmitoil-; oleil-, γ-linoleil-, colesteril- e gliceriléster) e os sais destes, dilauriltiodipropionato, disteariltiodipropionato, ácido tiodipropiônico e seus derivados (éster, éter, peptídeos, lipídeos, nucleotídeos, nucleosídeos e sais), além de compostos de sulfoximina (tais como butioninsulfoximina, homocisteinsulfoximina, butioninsulfona, penta-, hexa-, heptationinsulfoximina) em doses compatíveis muito baixas (por exemplo, pmol a pmol/kg), adicionalmente (metal)quelantes (tais como ácidos α-hidroxigraxos, ácido pálmico, fitínico, lactoferrina), β-hidroxiácidos (tais como ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico), ácido humínico, ácido gálico, extratos gálicos, bilirrubina, biliverdina, EDTA, EGTA e seus derivados, ácidos graxos insaturados e seus derivados (tais como ácido γ-linoléico, ácido linólico, ácido oléico), ácido fólico e seus derivados, ubiqüinona e ubiqüinol e seus derivados, vitamina C e derivados (tais como ascorbilpalmitato e ascorbiltetra-isopalmitato, Mg-ascorbilfosfato, Na-ascorbilfosfato, ascorbilacetato), tocoferol e derivados (como, por exemplo, vitamina-E-acetato), misturas de vitamina E, vitamina A nat. e derivados (vitamina-Apalmitato e -acetato), além de coniferilbenzoato, ácido rutínico e derivados, α-glicosilrutin, ácido ferúlico, furfurilidenglucitol, carnosina, buti

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Ihidroxitolueno, butilhidroxianisol, triidroxibutirofenona, uréia e seus derivados, manose e derivados, zinco e derivados (por exemplo, ZnO, ZnSO4), selênio e derivados (por exemplo, selenometionina), estilbenos e derivados (tais como, estilbenóxido, trans-estilbenóxido) e derivados adequados (sais, ésteres, éteres, açúcares, nucleotídeos, nucleosídeos, peptídeos e lipídeos) dos ingredientes ativos especificados. Um ou mais conservantes/antioxidantes podem estar presentes em uma quantidade de cerca de 0,01% em peso a cerca de 10% em peso do peso total da composição da presente invenção. De preferência, um ou mais conservantes/antioxidantes estão presentes em uma quantidade de cerca de 0,1% em peso a cerca de 1% em peso.

[0050] Tipicamente, as formulações tópicas também contêm ingredientes tensoativos, como emulsificantes, solubilizantes e similares. Um emulsificante permite que dois ou mais componentes não miscíveis sejam combinados homogeneamente. Além disso, o emulsificante atua estabilizando a composição. Emulsificantes que podem ser usados na presente invenção a fim de formar emulsões/microemulsões O/A, A/O, O/A/O ou A/O/A incluem oleato de sorbitano, sesquioleato de sorbitano, isoestearato de sorbitano, trioleato de sorbitano, poligliceril-3-diisoestearato, poliglicerol ésteres de ácido oléico/isoesteárico, poligliceril-6 hexaricinolato, poligliceril-4-oleato, cocoato de poligliceril4 oleato/PEG-8 propileno glicol, oleamida DEA, miristato de TEA, estearato de TEA, estearato de magnésio, estearato de sódio, laurato de potássio, ricinoleato de potássio, cocoato de sódio, sodium tallowate, castorato de potássio, oleato de sódio, e misturas destes. Emulsificantes adequados adicionais são ésteres de fosfato e os sais destes, tais como cetil fosfato (Amphisol® A), dietanolamina cetil fosfato (Amphisol®), cetil fosfato de potássio (Amphisol® K), gliceril oleato fosfato de sódio, fosfoglicerídeos hidrogenados vegetais, e misturas destes. Além disso, um ou mais polímeros sintéticos podem ser usados como

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21/51 emulsificantes. Por exemplo, copolímero de PVP eicoseno, polímero entrecruzado de acrilatos/C10-30 acrilato de alquila, copolímero de acrilatos/steareth-20 metacrilato, copolímero de PEG-22/dodecil glicol, copolímero de PEG-45/dodecil glicol, e misturas destes. Os emulsificantes preferidos são cetil fosfato (Amphisol® A), dietanolamina cetil fosfato (Amphisol®), cetil fosfato de potássio (Amphisol® K), copolímero de PVP Eicoseno, polímero entrecruzado de acrilatos/C10-30acrilato de alquila, isoestearato de PEG-20 sorbitano, isoestearato de sorbitano, e misturas destes. Aqueles um ou mais emulsificantes estão presentes em uma quantidade total de cerca de 0,01% em peso a cerca em 20% do peso do peso total da composição da presente invenção. De preferência, são usados cerca de 0,1% do peso a cerca de 10% do peso de emulsificantes.

[0051] A fase lipídica das composições tópicas pode ser vantajosamente escolhida de:

- óleos minerais e ceras minerais;

- óleos, tais como triglicerídeos de ácido caprínico ou ácido caprílico, de preferência, óleo de rícino;

- óleos ou ceras e outros óleos naturais ou sintéticos, em uma modalidade preferida, ésteres de ácidos graxos com alcoóis, por exemplo, isopropanol, propileno glicol, glicerina ou ésteres de alcoóis graxos com ácidos carboxílicos ou ácidos graxos;

- alquilbenzoatos; e/ou

- óleos de silicone, tais como dimetilpolissiloxano, dietilpo- lissiloxano, difenilpolissiloxano, ciclometiconas e misturas destes. [0052] Substâncias gordurosas exemplares que podem ser incorporadas na fase oleosa da emulsão, microemulsão, gel oleoso, hidrodispersão ou lipodispersão da presente invenção são escolhidas vantajosamente de ésteres de ácidos alquil carboxílicos saturados e/ou insaturados, lineares ou ramificados, com 3 a 30 átomos de carbono, e

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22/51 alcoóis saturados e/ou insaturados, lineares e/ou ramificados, com 3 a 30 átomos de carbono, além de ésteres de ácidos carboxílicos aromáticos e de alcoóis saturados e/ou insaturados, lineares ou ramificados, de 3-30 átomos de carbono. Tais ésteres podem ser vantajosamente selecionados de octilpalmitato, octilcocoato, octilisoestearato, octildodecilmiristato, cete-arilisononanoato, isopropil-miristato, isopropilpalmitato, isopropileste-arato, isopropiloleato, n-butilestearato, nhexillaureato, n-deciloleato, isooctilestearato, isononilestearato, isononilisononanoato, 2-etilhexilpalmitato, 2-etilhexillaurato, 2hexildecilestearato, 2-octildodecilpal-mitato, estearilheptanoato, oleiloleato, oleilerucato, eruciloleato, erucilerucato, tridecilestearato, trideciltrimelitato, além de misturas sintéticas, semi-sintéticas ou naturais, tais como ésteres, por exemplo, óleo de jojoba.

[0053] Outros componentes gordurosos adequados para uso nas composições tópicas da presente invenção incluem óleos polares, tais como lecitina e triglicerídeos de ácido graxo, especificamente triglicerol ésteres de ácido carboxílico saturado e/ou insaturado, de cadeia linear ou ramificada, com 8 a 24 átomos de carbono, de preferência, de 12 a 18 átomos de carbono, enquanto os triglicerídeos de ácido graxo são, de preferência, escolhidos de óleos sintéticos, semi-sintéticos ou naturais (por exemplo, cocoglicerídeo, azeite de oliva, óleo de girassol, óleo de soja, óleo de amendoim, óleo de canola, óleo de amêndoas doces, azeite de dendê, óleo de coco, óleo de rícino, óleo de rícino hidrogenado, óleo de trigo, óleo de semente de uva, óleo de noz de macadâmia e outros); óleos apolares, tais como hidrocarbonetos e ceras lineares e/ou ramificados, por exemplo, óleos minerais, vaselina (petrolato); parafinas, esqualano e esqualeno, poliolefinas, poliisobutenos e isohexadecanos hidrogenados, poliolefinas preferidas são polidecenos; éteres de dialquila, tais como dicaprililéter; óleos de silicone lineares ou cíclicos, tais como, de preferência, ciclometicona (octametilci

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23/51 clotetrassiloxano; cetildimeticona, hexametilciclotri-siloxano, polidimetilsiloxano, poli(metilfenilssiloxano) e misturas destes.

[0054] Outros componentes gordurosos que pode ser vantajosamente incorporados em composições tópicas da presente invenção são isoeicosano; neopentilglicoldiheptanoato; propilenglicoldicaprilato/dicaprato; caprílico/cáprico/diglicerilsuccinato; butileneglicol caprilato/caprato; C12-13-alquillactato; di-C12-13 alquiltartarato; triisoestearina; dipentaeritritil hexacaprilato/hexacaprato; propilenoglicolmonoisoestearato; tricaprilina; dimetilisosorbid. É especialmente benéfico o uso de misturas de C12-15-alquilbenzoato e 2etilhexilisoestearato, misturas de C12-15-alquilbenzoato e isotridecilisononanoato, além de misturas de C12-15-alquilbenzoato, 2etilhexilisoestearato e isotridecilisononanoato.

[0055] A fase oleosa das composições da presente invenção também pode conter ceras naturais vegetais ou animais, tais como cera de abelha, cera de China, cera de zangão e outras ceras de insetos, além de manteiga de karité e manteiga de cacau.

[0056] Um agente hidratante pode ser incorporado em uma composição tópica da presente invenção para manter a hidratação ou reidratar a pele. Hidratantes que evitam a evaporação da água pela pele por geração de um revestimento protetor são chamados emolientes. Adicionalmente, um emoliente fornece um efeito amaciante ou suavizante sobre a superfície da pele e é geralmente considerado seguro para uso tópico. Emolientes preferidos incluem óleos minerais, lanolina, petrolato, trigliceraldeídos cáprico/caprílico, colesterol, silicones, tais como dimeticona, ciclometicona, óleo de amêndoas, óleo de jojoba, óleo de abacate, óleo de rícino, óleo de gergelim, óleo de girassol, óleo de coco e óleo de semente de uva, manteiga de cacau, azeite de oliva, extratos de aloe, ácidos graxos, tais como oléico e esteárico, alcoóis graxos, tais como cetila e hexadecila (ENJAY), diisopropil adi

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24/51 pato, ésteres de hidroxibenzoato, ésteres de ácido benzóico de C9-15alcoóis, isononil iso-nonanoato, éteres, tais como éteres de polioxipropileno butil e cetil éteres de polioxipropileno e C12-15-alquil benzoatos, e misturas destes. Os emolientes mais preferidos são ésteres de hidroxibenzoato, aloe vera, C12-15-alquil benzoatos, e misturas destes. Um emoliente está presente em uma quantidade de cerca de 1% em peso a cerca de 20% em peso do peso total da composição. A quantidade preferida de emoliente é de cerca de 2% em peso a cerca de 15% em peso e, principalmente, cerca de 4% em peso a cerca de 10% em peso.

[0057] Hidratantes que se ligam à água e, dessa forma, a retêm na superfície da pele são denominados umectantes. Umectantes adequados podem ser incorporados em uma composição tópica da presente invenção, tal como glicerina, polipropileno glicol, 1,2-pentandiol, polietileno glicol, ácido lático, ácido pirrolidona carboxílico, uréia, fosfolipídeos, colágeno, elastina, ceramidas, lecitina sorbitol, PEG-4, e misturas destes. Hidratantes adequados adicionais são hidratantes poliméricos da família de polissacarídeos gelificantes hidrossolúveis e/ou comestíveis e/ou com água, tais como ácido hialurônico, quitosana e/ou um polissacarídeo rico em fucose, por exemplo, disponível como Fucogel®1000 (CAS-N° 178463-23-5) por SOLABIA S. Um ou mais umectantes estão opcionalmente presentes a cerca de 0,5% em peso a cerca de 8% em peso em uma composição da presente invenção, de preferência, cerca de 1% em peso a cerca de 5% em peso.

[0058] A fase aquosa das composições tópicas preferidas da presente invenção pode conter os aditivos cosméticos ou farmacêuticos normais, tais como alcoóis, especialmente alcoóis inferiores, de preferência etanol e/ou isopropanol, dióis ou polióis inferiores e seus éteres, de preferência propilenoglicol, glicerina, etilenoglicol, monoetil- ou monobutil éter de etilenoglicol, monometil- ou -monoetil- ou -monobutil

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25/51 éter de propilenoglicol, monometil- ou -monoetiléter dietilenoglicol e produtos análogos, polímeros, estabilizantes de espuma; eletrólitos e especialmente um ou mais espessantes. Espessantes que podem ser usados nas formulações da presente invenção para ajudar na produção da consistência de um produto adequado incluem carbômero, dióxido de silício, silicatos de magnésio e/ou alumínio, cera de abelha, ácido esteárico, polissacarídeos de álcool estearílico e seus derivados, tais como goma xantana, hidroxipropil celulose, poliacrilamidas, polímeros entrecruzados de acrilato, de preferência um carbômero, por exemplo, Carbopole® do tipo 980, 981, 1382, 2984, 5984, isoladamente ou misturas destes. Agentes neutralizantes adequados que podem ser incluídos na composição da presente invenção para neutralizar componentes como, por exemplo, um emulsificante ou um formador/estabilizante de espuma incluem, sem limitação, hidróxidos alcalinos, por exemplo, hidróxido de sódio e potássio; bases orgânicas, tais como dietanolamina (DEA), trietanolamina (TEA), aminometil propanol, e misturas destes; aminoácidos, tais como, arginina e lisina e qualquer combinação dos citados anteriormente. O agente neutralizante pode estar presente em uma quantidade de cerca de 0,01% em peso a cerca de 8% em peso na composição da presente invenção, de preferência, 1% em peso a cerca de 5% em peso.

[0059] Além de eletrólitos, pode ser necessário na composição da presente invenção alterar o comportamento de um emulsificante hidrofóbico. Dessa forma, as emulsões/microemulsões desta invenção podem conter de preferência eletrólitos de um ou vários sais, incluindo ânions como cloreto, sulfatos, carbonato, borato e aluminato, sem se limitar a esses. Outros eletrólitos adequados podem ter como base ânions orgânicos, tais como, sem limitação, lactato, acetato, benzoato, propionato, tartarato e citrato. Como cátions, de preferência amônio, alquilamônio, metais alcalinos ou alcalinos terrosos, íons magnésio,

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26/51 ferro ou zinco são selecionados. Sais especialmente preferidos são cloreto de potássio e sódio, sulfato de magnésio, sulfato de zinco e misturas destes. Os eletrólitos podem estar presentes em uma quantidade de cerca de 0,01% em peso a cerca de 8% em peso na composição da presente invenção.

[0060] As composições tópicas da invenção podem ser fornecidas, de preferência, na forma de uma loção, uma loção espessada, um gel, um creme, um leite, uma pomada, um pó ou um bastonete sólido, e podem ser opcionalmente embaladas como um aerossol e podem ser fornecidas na forma de uma musse, espuma ou um spray. As composições de acordo com a invenção também podem estar na forma de uma suspensão ou dispersão em solventes ou substâncias gordurosas ou, alternativamente, na forma de uma emulsão ou microemulsão (em particular do tipo O/A ou A/O, O/A/O ou A/O/A), por exemplo, um creme ou um leite, uma dispersão vesicular, na forma de uma pomada, um gel, um bastonete sólido ou uma musse em aerossol. As emulsões também podem conter tensoativos aniônicos, aniônicos, catiônicos ou anfotéricos.

[0061] São particularmente preferidas composições cosméticas e farmacêuticas, e ainda mais preferidas são composições cosméticas.

[0062] O termo “preparação cosmética” ou “composição cosmética”, como usado no presente pedido, refere-se às composições cosméticas definidas sob o título “Kosmetika” em “Rompp Lexikon Chemie”, 10^a edição 1997, Georg Thieme Verlag Stuttgart, Nova York.

[0063] As composições cosméticas ou farmacêuticas da presente invenção contêm as composições de nanopartículas de genisteína da presente invenção, junto com excipientes ou diluentes cosmética ou farmaceuticamente aceitáveis. Caso não seja especificado de forma diferente, os excipientes, aditivos, diluentes etc. mencionados a seguir são adequados para composições tanto farmacêuticas quanto cosméPetição 870190141033, de 30/12/2019, pág. 30/69

27/51 ticas.

[0064] As composições tópicas cosméticas e farmacêuticas da presente invenção compreendem, de preferência, mais de 0,01%, de preferência 0,1% ou, mais preferivelmente, 0,2% ou mais das nanopartículas de genisteína e, opcionalmente, um veículo. No entanto, o efeito obtido pela incorporação das composições de nanopartículas de genisteína nas composições tópicas cosméticas e farmacêuticas é mais impressionante em composições farmacêuticas e cosméticas que contêm 0,3% ou mais de genisteína, pois, nessas concentrações elevadas, as composições tópicas farmacêuticas e cosméticas da presente invenção possuem um aumento particularmente baixo no tamanho de partícula das nanopartículas de genisteína durante estocagem (e, algumas vezes, há até mesmo uma diminuição). O efeito em concentrações como essas é bem mais pronunciado do que em concentrações mais baixas de menos de 0,3%, o que é particularmente surpreendente e vantajoso, pois permite a geração de composições cosméticas e farmacêuticas que possuem concentrações muito elevadas de genisteína, que não poderiam ser obtidas com a utilização das composições de genisteína da técnica anterior. Portanto, as composições cosméticas e farmacêuticas da invenção conterão as nanopartículas que contêm genisteína e, opcionalmente, um veículo, de preferência em uma concentração de 0,3% ou, mais preferivelmente, 0,5% ou mais. As faixas seguintes de nanopartículas de genisteína e, opcionalmente, veículo, também são preferidas: 0,3% a 3%, 0,3% a 2%, 0,3% a 1% e as faixas acima, em que o limite inferior é de 0,4 ou 0,5%, em vez de 0,3%.

[0065] Em relação ao tipo de composição tópica cosmética e farmacêutica e à preparação das preparações tópicas cosméticas e farmacêuticas, bem como aditivos adequados adicionais, deve-se consultar a literatura pertinente, por exemplo, Novak G.A., “Die kosmetischen

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Praparate - Band 2, Die kosmetischen Praparate - Rezeptur, Rohstoffe, wissenschaftliche Grundlagen” (Verlag für Chem. Industrie H. Ziolkowski KG, Augsburg).

[0066] É ainda possível incluir as composições de nanopartículas de genisteína da presente invenção em uma composição oral cosmética e farmacêutica, por exemplo, na forma de pílulas, comprimidos, cápsulas que podem conter grânulos ou péletes, como um líquido, formulação oral ou como um aditivo para gêneros alimentícios, como é geralmente conhecido por aqueles versados na técnica. Procedimentos e aditivos úteis para a preparação de composições orais são, por exemplo, descritos na literatura-padrão “Remington: The Science and Practice of Pharmacy”, Lippincot, Williams & Wilking (Editors) 2000, que é aqui incluída por referência. Prefere-se incorporar as composições da presente invenção em gêneros alimentícios e, em particular, em rações animais, mais particularmente em rações para animais de estimação. A preparação desses gêneros alimentícios é conhecida na técnica.

[0067] Como aditivos comuns para composições orais, em particular para comprimidos, excipientes comuns, como celulose microcristalina, citrato de sódio, carbonato de cálcio, fosfato dissódico ou dipotássico, fosfato de sódio ou potássio, glicina, agentes de desintegração, por exemplo, amido ou ácido algínico, ligantes, tais como polivinilpirrolidona, sacarose, gelatina e goma arábica, lubrificantes, como estearato de magnésio, lauril sulfato de sódio ou talco, podem ser usados. Caso as composições sejam preenchidas em cápsulas de gelatina, aditivos comuns para a preparação de grânulos são lactose ou lactato, além de polietileno glicóis com um peso molecular elevado. Aditivos e excipientes adicionais, além de aditivos e excipientes para outras formulações orais e para aditivos alimentícios, são conhecidos por aqueles versados na técnica, e podem ser consultados na literatura perti

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29/51 nente, por exemplo, “Grundzüge der Lebensmitteltechnik”, Horst Dieter Tscheuschner (Editor), 2^a Edição, Hamburg, Beers 1996.

[0068] A composição também pode conter um ou mais ingredientes ativos farmacêutica ou cosmeticamente adicionais, em particular para a prevenção ou redução de acne, rugas, linhas, atrofia, inflamação, além de anestésicos tópicos, agentes e aceleradores de bronzeamento artificial, agentes antimicrobianos, e agentes antifúngicos e aditivos de protetor solar.

[0069] Exemplos são peptídeos (por exemplo, Matrixyl® [derivado pentapeptídico]), glicerol, uréia, guanidina (por exemplo, amino guanidina); vitaminas e derivados destas, tais como ácido ascórbico, vitamina A (por exemplo, derivados de retinóide, tais como palmitato de retinila ou propionato de retinila), vitamina E (por exemplo, acetato de tocoferol), vitamina B3 (por exemplo, niacinamida) e vitamina B5 (por exemplo, pantenol) e outros mais e misturas destes, peptídeos sintéticos baseados em ceras (por exemplo, palmitato de octila e tribehenina e isoestearato de sorbitano e palmitoil-oligopeptídeo), medicamentos antiacne (resorcinol, ácido salicílico, e outros mais); antioxidantes (por exemplo, fitosteróis, ácido lipóico); flavonóides (por exemplo, isoflavonas, fitoestrogênios); suavizantes da pele e agentes de cicatrização, por exemplo, extrato de aloe vera, alantoína e outros mais; quelantes e seqüestrantes; e agentes adequados para fins estéticos, por exemplo, óleos essenciais, fragrâncias, sensibilizadores da pele, opacificantes, compostos aromáticos (por exemplo, óleo de cravo, mentol, cânfora, óleo de eucalipto, e eugenol), ativos descamatórios, ativos antiacne, compostos de vitamina B3, antioxidantes, peptídeos, ácidos hidróxi, sequestrantes de radicais, quelantes, farnesol, agentes antiinflamatórios, anestésicos tópicos, ativos em bronzeamento, agentes de branqueamento da pele, agentes anticelulite, flavonóides, ativos antimicrobianos, e ativos antifúngicos, em particular bisabolol, alquildióis, tais

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30/51 como 1,2-pentanodiol, hexanodiol ou 1,2-octanodiol, vitaminas, pantenol, fitol, fitanotriol, ceramidas e pseudoceramidas, aminoácidos e peptídeos bioativos, hidrolisados protéicos, ácidos AHA, ácidos graxos poliinsaturados, extratos de plantas, DNA ou RNA e seus produtos de fragmentação ou carboidratos, biotina, ácidos graxos conjugados, carnitina, vitamina E, A, C, B³, B6, B¹², oligopeptídeos, carnosina, biochinonen, fitoflueno, fitoeno, ácido fólico, e seus derivados correspondentes.

[0070] O teor da genisteína nas composições cosméticas e farmacêuticas orais da presente invenção é normalmente de cerca de 0,1% a 90%, de preferência cerca de 1% a 80%. Tipicamente, em composições farmacêuticas, por exemplo, um comprimido, a genisteína pode atingir até 50%, mas, de preferência, está na faixa de 1%-10%. A aplicação é feita de forma que ocorra o efeito desejado, e depende do paciente e do efeito desejado. Uma dosagem diária comum pode ser em uma faixa a partir de cerca de 1 mg/dia a 1 g/dia, por exemplo, cerca de 5 mg/dia a 100 mg/dia.

[0071] As composições cosméticas e farmacêuticas da presente invenção também podem estar na forma de composições injetáveis, em particular se as composições se destinarem ao crescimento capilar. A preparação de composições cosméticas e farmacêuticas injetáveis é conhecida por aqueles versados na técnica, e ela pode ser consultada na literatura pertinente, em particular Remington, já citado acima.

[0072] De acordo com a invenção, produtos nutricionais que contêm as composições de nanopartículas de genisteína da invenção também são preferidos, tais como iogurte, tofu, sucos de frutas como, por exemplo, suco de laranja etc. O teor das nanopartículas de genisteína não é particularmente restrito, mas normalmente o teor de genisteína nesses produtos é de 0,01% ou mais, de preferência 0,1% ou

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31/51 mais, mas geralmente não é maior do que 10% ou 5%. Os produtos orais farmacêuticos e nutricionais da presente invenção têm uma vantagem específica de que a genisteína tem uma biodisponibilidade elevada combinada com uma inesperada alta estabilidade física (as partículas de genisteína não crescem até um tamanho inaceitável).

[0073] As composições de nanopartículas de genisteína da presente invenção são obtidas, de preferência, por fragmentação de cristais de genisteína e, opcionalmente, do veículo, em um homogeneizador de alta pressão. As composições de nanopartículas de genisteína da presente invenção são obtidas mais preferivelmente por moagem da genisteína (em particular, dos cristais de genisteína) e, opcionalmente, do veículo, em um moinho de glóbulos agitados. A fragmentação e a moagem são normalmente realizadas com uma suspensão aquosa.

[0074] Homogeneizadores adequados são conhecidos na técnica estabelecida e disponíveis comercialmente e, por exemplo, podemos citar o homogeneizador de alta pressão DeBEE 2000 de B.E.E. International Ltd., Migdal Haemek, Israel. O homogeneizador é operado, de preferência, em uma pressão de 50 MPa a 400 MPa (500 bar a 4.000 bar), mais preferivelmente, em uma pressão de 50 MPa a 300 MPa (500 bar a 3000 bar) e, principalmente, em uma pressão de 50 MPa a 200 MPa (500 bar a 2.000 bar). De preferência, o homogeneizador é equipado com um sistema de bocal como descrito em EP-A 1 008 380. [0075] De preferência, a genisteína e o veículo são ciclados através do homogeneizador de alta pressão 1 a 200 vezes, mais preferivelmente, 5 a 100 vezes, por exemplo, 5 a 30 vezes. O número de ciclos necessários pode ser facilmente encontrado através de alguns experimentos de rotina.

[0076] Em uma modalidade particularmente preferida, inicialmente a genisteína sem o veículo é submetida a uma homogeneização em

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32/51 um homogeneizador de alta pressão, por exemplo, por 5 a 100 vezes como, por exemplo, 5 a 30 vezes, e depois uma solução do veículo é adicionada e a homogeneização prossegue, por exemplo, por mais 1 a 50, por exemplo, 1 a 10 ciclos. Se necessário, o número de ciclos pode ser aumentado.

[0077] Acredita-se que, durante a homogeneização, os cristais de genisteína sejam fragmentados principalmente por cavitação e cisalhamento criados pelo processo de alta pressão, e a nanossuspensão aquosa que é processada pode ter um teor de sólidos de até 50% ou até mais. A nanossuspensão aquosa pode ser assim usada para a preparação das composições farmacêuticas ou cosméticas da presente invenção, ou ela pode ser primeiro submetida a uma etapa de secagem a fim de se obter uma composição em pó ou granulada que consiste essencialmente em genisteína, opcionalmente com o veículo e eventualmente água residual que não foi removida pelo processo de secagem. A secagem pode ser feita por processos comuns, por exemplo, atomização ou liofilização.

[0078] As composições de nanopartículas de genisteína da presente invenção são obtidas, principalmente, por fragmentação em um moinho de glóbulos agitados por um processo de trituração úmida. Moinhos de trituração úmida adequados são conhecidos na técnica anterior e disponíveis comercialmente e, por exemplo, podemos citar o moinho de trituração úmida Netzsch LMZ 4 de NETZSCHFeinmahltechnik GmbH, Sedanstrape 70, 95100 Selb, Alemanha. De preferência, a genisteína e, opcionalmente, o veículo, são ciclados através do moinho de glóbulos agitados 1-50 vezes, mais preferivelmente 3-40 vezes, mais preferivelmente 5-30 vezes e, principalmente, 8-25 vezes.

[0079] O meio de trituração pode consistir, por exemplo, essencialmente em Al2O3, Si3N4, TiO2, WC (carboneto de tungstênio) ou em

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ZrÜ2 ou uma combinação desses compostos. São usados, principalmente, meios de trituração do tipo ZrÜ2, ZrÜ2 estabilizado com Y2O3.

[0080] A nanossuspensão aquosa que é processada pode ter um teor de sólidos de até 25% ou até mais.

[0081] Em uma modalidade preferida da invenção, a água é removida o máximo possível pela escolha de condições de secagem adequadas, e o teor de água é menor do que, por exemplo, 10%.

[0082] Todas as medidas do tamanho de partícula citadas nesta especificação são feitas por técnica de difração de laser usando um “Mastersizer 2000” da Malvern Instruments Ltd., GB.

[0083] Os exemplos seguintes são apenas ilustrativos, mas não visam a limitar o escopo da invenção.

Exemplo 1 [0084] Uma solução de amido octenil succinato de sódio (46%) foi preparada dissolvendo-se amido octenil succinato de sódio (490 g) disponível na “National Starch and Chemical Company”, New Jersey, EUA, sob o nome comercial Capsul, que tinha um teor de umidade de 8%, em água deionizada a 80°C (490 g).

[0085] O pó de genisteína (20 g) foi misturado com a solução de amido octenil succinato de sódio (391,4 g) e água deionizada (390 g), e passado através de um homogeneizador de alta pressão equipado com um bocal de 130 mícrons; DeBEE 2000, B.E.E. International Ltd., Israel, que tinha cerca de 200 g de água na tubulação, em uma pressão de homogeneização de 150 MPa (1.500 bar). A pressão retrógrada foi ajustada em 12 MPa (120 bar) durante a homogeneização. A suspensão de genisteína após o bocal foi resfriada até cerca de 20 a 30°C com um permutador de calor. A suspensão, com um teor de sólidos de cerca de 20%, foi ciclada através de homogeneizador 42 vezes, até que o tamanho de partícula desejado fosse alcançado. O tamanho da partícula de genisteína foi determinado por técnica de difra

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34/51 ção de laser (Mastersizer 2000, Malvern Instruments Ltd., GB), e os resultados, calculados com base no índice de refração de 1,469, são mostrados abaixo na Tabela I.

Tabela I: Medidas do tamanho de partícula de genisteína

	Tamanho da partícula de genisteína antes da homogeneização	Tamanho da partícula de genisteína após homogeneização (42 passagens)
D (v, 0,1)	17,1 mícrons	0,07 mícron
D (v, 0,5)	41,9 mícrons	0,17 mícron
D (v, 0,9)	91,0 mícrons	3,65 mícrons
Tamanho médio de partícula D[4.3]:	48,5 mícrons	0,97 mícron
Tamanho médio de partícula D[3.2]:	23,1 mícrons	0,15 mícron

[0086] A suspensão homogeneizada de genisteína foi seca com um secador de spray Niro (GEA Niro A/S, Dinamarca) com uma pressão no bocal de 0,4 MPa (4 bar). A temperatura da entrada foi de cerca de 200°C, e a temperatura da saída foi de cerca de 80°C. O pó atomizado continha aproximadamente 9,4% de genisteína, com um teor de umidade de 5,87%. O tamanho da partícula de genisteína foi determinado por redispersão do pó atomizado em água, e medido pela técnica de difração de laser, e os resultados são mostrados na Tabela

II.

Tabela II: Medidas do tamanho de partícula da forma atomizada de genisteína

	Tamanho da partícula de genisteína após homogeneização (42 passagens) e atomização
D (v, 0,1)	0,07 mícron
D (v, 0,5)	0,16 mícron
D (v, 0,9)	2,86 mícrons
Tamanho médio de partícula D[4.3]	0,83 mícron
Tamanho médio de partícula D[3.2]	0,14 mícron

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Exemplo 2 [0087] O pó de genisteína (30 g) foi misturado com água deionizada (370 g) e passado através de um homogeneizador de alta pressão (equipado com um bocal de 130 mícrons; DeBEE 2000, BEE International, Israel) que tinha cerca de 200 g de água na tubulação, em uma pressão de homogeneização de 150 MPa (1.500 bar). A pressão retrógrada foi ajustada em 12 MPa (120 bar) durante a homogeneização. A suspensão de genisteína após o bocal foi resfriada até cerca de 20 a 30°C com um permutador de calor. A suspensão, com um teor de sólidos de cerca de 5%, foi ciclada através do homogeneizador 40 vezes, até que o tamanho de partícula desejado fosse alcançado. O tamanho da partícula de genisteína foi determinado por técnica de difração de laser (Mastersizer 2000, Malvern Instruments Ltd., GB), e os resultados, calculados com base no índice de refração de 1,469, são mostrados abaixo na Tabela III.

Tabela III: Medidas do tamanho de partícula de genisteína

	Tamanho da partícula de genisteína antes da homogeneização	Tamanho da partícula de genisteína após homogeneização (40 passagens)
D (v, 0,1)	17,1 mícrons	0,07 mícron
D (v, 0,5)	41,9 mícrons	0,16 mícron
D (v, 0,9)	91,0 mícrons	2,42 mícrons
Tamanho médio de partícula D[4.3]	48,5 mícrons	0,76 mícron
Tamanho médio de partícula D[3.2]	23,1 mícrons	0,14 mícron

[0088] Uma solução de amido octenil succinato de sódio (46%) foi preparada dissolvendo-se amido octenil succinato de sódio (490 g), que tinha um teor de umidade de 8%, em água deionizada a 80°C (490

g). Uma porção da solução de amido octenil succinato de sódio (65 g) foi adicionada à suspensão homogeneizada de genisteína em um funil de alimentação ao final da 40^a passagem, sem interromper o processo

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36/51 de homogeneização, e a mistura (aproximadamente 9% de sólidos) foi passada através do homogeneizador de alta pressão duas vezes. O tamanho da partícula de genisteína foi determinado por técnica de difração de laser (Mastersizer 2000, Malvern Instruments Ltd., GB), e os resultados são mostrados abaixo na Tabela IV.

Tabela IV: Medidas do tamanho de partícula de genisteína

	Tamanho da partícula de genisteína após homogeneização (42 passagens)
D (v, 0,1)	0,07 mícron
D (v, 0,5)	0,16 mícron
D (v, 0,9)	0,93 mícron
Tamanho médio de partícula D[4.3]	0,41 mícron
Tamanho médio de partícula D[3.2]	0,14 mícron

[0089] A suspensão homogeneizada de genisteína foi seca com um secador de spray Niro (GEA Niro A/S, Dinamarca) com uma pressão no bocal de 0,4 MPa (4 bar). A temperatura da entrada foi de cerca de 200°C, e a temperatura da saída foi de cerca de 80°C. O pó atomizado continha aproximadamente 48,5% de genisteína, com um teor de umidade de 3,24%. O tamanho da partícula de genisteína foi determinado por redispersão do pó atomizado em água, e medido pela técnica de difração de laser. Os resultados são mostrados na Tabela V.

Tabela V: Medidas do tamanho de partícula da forma atomizada de genisteína

	Tamanho da partícula de genisteína após homogeneização (42 passagens) e atomização
D (v, 0,1)	0,07 mícron
D (v, 0,5)	0,15 mícron

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37/51

D (v, 0,9)	1,14 mícrons
Tamanho médio de partícula D[4.3]	0,55 mícron
Tamanho médio de partícula D[3.2]	0,14 mícron

Exemplo 3 [0090] O pó de genisteína (36 g) foi misturado com água deionizada (364 g) e passado através de um homogeneizador de alta pressão (equipado com um bocal de 130 mícrons; DeBEE 2000, BEE International, Israel) que tinha cerca de 200 g de água na tubulação, em uma pressão de homogeneização de 1.500 bar. A pressão retrógrada foi ajustada em 120 bar durante a homogeneização. A suspensão de genisteína após o bocal foi resfriada até cerca de 20 a 30°C com um permutador de calor. A suspensão, com um teor de sólidos de cerca de 6%, foi ciclada através do homogeneizador 40 vezes, até que o tamanho de partícula desejado fosse alcançado. O tamanho da partícula de genisteína foi determinado por técnica de difração de laser (Mastersizer 2000, Malvern Instruments Ltd., GB), e os resultados, calculados com base no índice de refração de 1,469, são mostrados abaixo na Tabela VI.

Tabela VI: Medidas do tamanho de partícula de genisteína

	Tamanho da partícula de genisteína antes da homogeneização	Tamanho da partícula de genisteína após homogeneização (40 passagens)
D (v, 0,1)	17,1 mícrons	0,07 mícron
D (v, 0,5)	41,9 mícrons	0,16 mícron
D (v, 0,9)	91,0 mícrons	2,00 mícrons
Tamanho médio de partícula D[4.3]	48,5 mícrons	0,76 mícron
Tamanho médio de partícula D[3.2]	23,1 mícrons	0,14 mícron

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38/51 [0091] Uma solução de amido octenil succinato de sódio (46%) foi preparada dissolvendo-se amido octenil succinato de sódio (490 g), que tinha um teor de umidade de 8%, em água deionizada a 80°C (490 g). Uma porção da solução de amido octenil succinato de sódio (19,5 g) foi adicionada à suspensão homogeneizada de genisteína em um funil de alimentação ao final da 40^a passagem, sem interromper o processo de homogeneização, e a mistura (aproximadamente 7,3% de sólidos) foi passada através do homogeneizador de alta pressão duas vezes. O tamanho da partícula de genisteína foi determinado por técnica de difração de laser (Mastersizer 2000, Malvern Instruments Ltd., GB), e os resultados são mostrados abaixo na Tabela VII.

Tabela VII: Medidas do tamanho de partícula de genisteína

	Tamanho da partícula de genisteína após homogeneização (42 passagens)
D (v, 0,1)	0,07 mícron
D (v, 0,5)	0,16 mícron
D (v, 0,9)	0,91 mícron
Tamanho médio de partícula D[4.3]	0,40 mícron
Tamanho médio de partícula D[3.2]	0,14 mícron

[0092] A suspensão homogeneizada de genisteína foi seca com um secador de spray Niro (GEA Niro A/S, Dinamarca) com uma pressão no bocal de 0,4 MPa (4 bar). A temperatura da entrada foi de cerca de 200°C, e a temperatura da saída foi de cerca de 80°C. O pó atomizado continha aproximadamente 78,2% de genisteína, com um teor de umidade de 2,31%. O tamanho da partícula de genisteína foi determinado por redispersão do pó atomizado em água, e medido pela técnica de difração de laser. Os resultados são mostrados abaixo na Tabela VIII.

Tabela VIII: Medidas do tamanho de partícula da forma atomizada de

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39/51 genisteína

	Tamanho da partícula de genisteína após homogeneização (42 passagens) e atomização
D (v, 0,1)	0,07 mícron
D (v, 0,5)	0,16 mícron
D (v, 0,9)	0,97 mícron
Tamanho médio de partícula D[4.3]	0,43 mícron
Tamanho médio de partícula D[2.3]	0,14 mícron

Exemplo 4 [0093] O pó de genisteína (120 g) foi misturado com água deionizada (280 g) e passado através de um homogeneizador de alta pressão (equipado com um bocal de 180 mícrons; DeBEE 2000, BEE International, Israel) que tinha cerca de 200 g de água na tubulação, em uma pressão de homogeneização de 70 MPa (700 bar). A pressão retrógrada foi ajustada em 12 MPa (120 bar) durante a homogeneização. A suspensão de genisteína após o bocal foi resfriada até cerca de 20 a 30°C com um permutador de calor. A suspensão, com um teor de sólidos de cerca de 20%, foi ciclada através do homogeneizador 20 vezes, até que o tamanho de partícula desejado fosse alcançado. O tamanho da partícula de genisteína foi determinado por técnica de difração de laser (Mastersizer 2000, Malvern Instruments Ltd., GB), e os resultados, calculados com base no índice de refração de 1,469, são mostrados abaixo na Tabela IX.

Tabela IX: Medidas do tamanho de partícula de genisteína

	Tamanho da partícula de genisteína antes da homogeneização	Tamanho da partícula de genisteína após homogeneização (20 passagens)
D (v, 0,1)	17,1 mícrons	0,07 mícron
D (v, 0,5)	41,9 mícrons	0,15 mícron

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	Tamanho da partícula de genisteína antes da homogeneização	Tamanho da partícula de genisteína após homogeneização (20 passagens)
D (v, 0,9)	91,0 mícrons	2,62 mícrons
Tamanho médio de partícula D[4.3]	48,5 mícrons	0,83 mícron
Tamanho médio de partícula D[3.2]	23,1 mícrons	0,13 mícron

Exemplo 5 [0094] O pó de genisteína (36 g) foi misturado com água deionizada (364 g) e passado através de um homogeneizador de alta pressão (equipado com um bocal de 130 mícrons; DeBEE 2000, BEE International, Israel) que tinha cerca de 200 g de água na tubulação, em uma pressão de homogeneização de 150 MPa (1.500 bar). A pressão retrógrada foi ajustada em 12 MPa (120 bar) durante a homogeneização. A suspensão de genisteína após o bocal foi resfriada até cerca de 20 a 30°C com um permutador de calor. A suspensão, com um teor de sólidos de cerca de 6%, foi ciclada através do homogeneizador 40 vezes, até que o tamanho de partícula desejado fosse alcançado. O tamanho da partícula de genisteína foi determinado por técnica de difração de laser (Mastersizer 2000, Malvern Instruments Ltd., GB), e os resultados, calculados com base no índice de refração de 1,469, são mostrados abaixo na Tabela X.

Tabela X: Medidas do tamanho de partícula de genisteína

	Tamanho da partícula de genisteína antes da homogeneização	Tamanho da partícula de genisteína após homogeneização (20 passagens)
D (v, 0,1)	17,8 mícrons	0,07 mícron
D (v, 0,5)	41,4 mícrons	0,16 mícron
D (v, 0,9)	90,2 mícrons	0,92 mícron
Tamanho médio de partícula D[4.3]	48,5 mícrons	0,42 mícron

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41/51

	Tamanho da partícula de genisteína antes da homogeneização	Tamanho da partícula de genisteína após homogeneização (20 passagens)
Tamanho médio de partícula D[2.3]	23,1 mícrons	0,14 mícron

[0095] Uma solução de maltodextrina (45%; 52 g) foi preparada dissolvendo-se maltodextrina (25 g), que tinha um teor de umidade de 6,18%, em água deionizada (27 g). Uma porção da solução de maltodextrina (19,5 g) foi adicionada à suspensão homogeneizada de genisteína em um funil de alimentação ao final da 40^a passagem, sem interromper o processo de homogeneização, e a mistura (aproximadamente 7,3% de sólidos) foi passada através do homogeneizador de alta pressão mais duas vezes. O tamanho da partícula de genisteína foi determinado por técnica de difração de laser (Mastersizer 2000, Malvern Instruments Ltd., GB), e os resultados são mostrados abaixo na Tabela XI.

Tabela XI: Medidas do tamanho de partícula da forma atomizada de genisteína

	Tamanho da partícula de genisteína após homogeneização (42 passagens) e atomização
D (v, 0,1)	0,07 mícron
D (v, 0,5)	0,16 mícron
D (v, 0,9)	0,93 mícron
Tamanho médio de partícula D[4.3]	0,41 mícron
Tamanho médio de partícula D[3.2]	0,14 mícron

[0096] A suspensão homogeneizada de genisteína foi seca com um secador de spray Niro (GEA Niro AIS, Dinamarca) com uma pressão no bocal de 0,4 MPa (4 bar). A temperatura da entrada foi de cerca de 200°C, e a temperatura da saída foi de cerca de 80°C. O pó atomizado continha aproximadamente 78,2% de genisteína. O tamaPetição 870190141033, de 30/12/2019, pág. 45/69

42/51 nho da partícula de genisteína foi determinado por redispersão do pó atomizado em água, e medido pela técnica de difração de laser. Os resultados são mostrados abaixo na Tabela XII.

Tabela XII: Medidas do tamanho de partícula da forma atomizada de genisteína

	Tamanho da partícula de genisteína após homogeneização (42 passagens) e atomização
D (v, 0,1)	0,07 mícron
D (v, 0,5)	0,15 mícron
D (v, 0,9)	0,93 mícron
Tamanho médio de partícula D[4.3]	0,41 mícron
Tamanho médio de partícula D(3,2]	0,13 mícron

Exemplo 6 [0097] Uma solução de amido octenil succinato de sódio (30%) foi preparada dissolvendo-se Capsul (2,8 kg; “National Starch and Chemical Company”, New Jersey, EUA), que tinha um teor de umidade de 8%, em água deionizada a 70°C (5,7 kg).

[0098] O pó de genisteína (3,0 kg) foi misturado com a solução de amido octenil succinato de sódio (8,5 kg) e água deionizada (9,0 kg), e passado através de um moinho de glóbulos agitados (do tipo Netzsch LMZ 4; Netzsch GmbH & Co. Holding KG, Selb, Alemanha) girando com 1.150 Upm, usando meio de trituração do tipo ZrO2 de 0,4 mm que consiste em ZrO2 estabilizado com Y2O3. A suspensão de genisteína após o moinho de glóbulos agitados foi resfriada até 40-45°C com um permutador de calor. A suspensão com um teor de sólidos de cerca de 27% foi ciclada através do moinho de glóbulos agitados por 2 horas (11 ciclos no moinho), até que o tamanho de partícula desejado fosse alcançado.

[0099] O tamanho da partícula de genisteína foi determinado por

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43/51 técnica de difração de laser (Mastersizer 2000, Malvern Instruments Ltd., GB) e os resultados, calculados com base no índice de refração de 1,469, são mostrados abaixo na Tabela XIII.

Tabela XIII: Medidas do tamanho de partícula de genisteína

	Tamanho da partícula de genisteína antes da homogeneização	Tamanho da partícula de genisteína após homogeneização (11 passagens)
D (v, 0,1)	17,8 mícrons	0,07 mícron
D (v, 0,5)	41,4 mícrons	0,16 mícron
D (v, 0,9)	90,2 mícrons	0,45 mícron
Tamanho médio de partícula D[4.3]:	48,5 mícrons	0,23 mícron

[00100] A suspensão homogeneizada de genisteína pode ser aplicada por spray para o campo de aplicação-alvo ou pode ser atomizada usando o procedimento descrito no exemplo 2.

Exemplo 7 [00101] O pó de genisteína (6 kg) é moído em um moinho Jet por um processo de trituração a seco. Moinho adequado: Alpine 100 AFG da empresa Hosokawa Alpine, usando uma pressão de jato de 0,5 MPa (5,0 bar) e velocidade da roda da peneira de 20.000 Upm. Essa genisteína é usada no teste “swing’ mostrado na figura 7 para fins comparativos.

[00102] Uma solução de amido octenil succinato de sódio (48%) foi preparada dissolvendo-se amido octenil succinato de sódio (6,0 kg; “National Starch and Chemical Company”, New Jersey, EUA), que tinha um teor de umidade de 8%, em água deionizada a 70°C (6,1 kg).

[00103] O pó triturado de genisteína (6,0 kg) foi misturado com a solução de amido octenil succinato de sódio (12,1 kg) e água deionizada (24 kg), e passado através de um homogeneizador de alta pressão equipado com um dispositivo de mistura, como descrito em EP 1 008 380 A2, em uma pressão de homogeneização de 70 MPa (700

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44/51 bar). A suspensão de genisteína após o bocal foi resfriada até cerca de 20 a 30°C com um permutador de calor. A suspensão, com um teor de sólidos de cerca de 20%, foi ciclada através do homogeneizador 12 vezes, até que o tamanho de partícula desejado fosse alcançado (genisteína final), como ilustrado pela figura 8. O tamanho da partícula de genisteína foi determinado por técnica de difração de laser (Mastersizer 2000, Malvern Instruments Ltd., GB) e os resultados, calculados com base no índice de refração de 1,469, são mostrados abaixo na Tabela XIV.

Tabela XIV: Medidas do tamanho de partícula de genisteína

	Tamanho da partícula de genisteína antes da moagem e homogeneização	Tamanho da partícula de genisteína após a moagem e homogeneização
D (v, 0,1)	17,8 mícrons	0,07 mícron
D (v, 0,5)	41,4 mícrons	0,18 mícron
D (v, 0,9)	90,2 mícrons	1,38 mícrons
Tamanho médio de partícula D[4.3]:	48,5 mícrons	0,53 mícrons

[00104] A genisteína após homogeneização também foi usada no teste “swing’, e o resultado é mostrado na figura 8.

[00105] A dispersão homogeneizada foi atomizada com um secador Multi Stage Spray, com uma pressão no bocal de cerca de 4MPa (40 bar). A temperatura da entrada foi de cerca de 160° C, e a temperatura da saída foi de cerca de 80°C, e a temperatura de saída do ar do leito interno de fluido foi de cerca de 50°C. O tamanho da partícula de genisteína foi determinado por técnica de difração de laser (Mastersizer 2000, Malvern Instruments Ltd., GB) e os resultados, calculados com base no índice de refração de 1,469, são mostrados abaixo na Tabela XV.

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Tabela XV: Medidas do tamanho de partícula de genisteína

	Tamanho da partícula de genisteína antes da moagem e homogeneização	Tamanho da partícula de genisteína após a moagem, homogeneização e atomização
D (v, 0,1)	17,8 mícrons	0,08 mícron
D (v, 0,5)	41,4 mícrons	0,19 mícron
ID (v, 0,9)	90,2 mícrons	1,84 mícron
Tamanho médio de partícula D[4.3]:	48,5 mícrons	0,65 mícron

Exemplo 8

Emulsões O/A com diferentes formas de genisteína

	n°1	n°2
Ingredientes	% (p/p)	% (p/p)
Miristato de glicerila	5,00	4,00
Álcool cetílico	2,00	2,00
Steareth-2	2,00	2,00
Steareth-21	2,00	2,00
Miristato de isopropila	10,00	5,00
Triglicerídeo caprílico/Cáprico		8,00
BHT	0,05	0,05
Dimeticona	-	2,00
Fenoxietanol & Metilparabeno & Etilparabeno & Butilparabeno & Propilparabeno & Isobutilparabeno	0,80	0,80
Suspensão aquosa de nanopartículas de genisteína (contém 5,5% de genisteína, aproximadamente 0,4 mícron)	5,00	-

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Continuação...

	n°1	n°2
Ingredientes	% (p/p)	% (p/p)
Genisteína (cristalina, aproximadamente 12 mícrons)	-	0,10
Água	Ad. 100	Ad. 100
Polissorbato 20	1,00
Propileno glicol	5,00	4,00
Etoxidiglicol	8,00	10,00
Poloacrolamida & Isoparafina C13-14 & Laureth-7	2,00	1,00
Trietanol amina (10%)	0,33	0,29
EDETA dissódico	0,10	0,10

[00106] A vantagem de utilizar a forma de genisteína que consiste em nanopartículas versus a forma cristalina convencional em formulações cosméticas típicas é ilustrada pela figura 1 e figura 2. Formulações cosméticas que contêm ingredientes ativos devem ser estáveis com a estocagem em diferentes temperaturas por pelo menos um ano em temperatura ambiente. Um parâmetro importante monitorado em uma observação de estabilidade é a aparência da formulação cosmética sob um microscópio. Formulações cosméticas que contêm ingredientes ativos de difícil solubilização desenvolvem freqüentemente cristais com a estocagem, algumas vezes em poucos dias. Esse fenômeno é ainda mais pronunciado observando-se formulações que foram estocadas a 5°C. Há muitas desvantagens em formulações que desenvolveram cristais grandes como esses, como ilustrado na figura 2, que mostra um exame microscópico da formulação n°2 com genisteína cristalina convencional após 6 meses de estocagem em temperatura ambiente, especificamente a biodisponibilidade reduzida do ingrediente ativo para a pele e o risco de que o consumidor do cosmético perceba sua presença após aplicação à pele. Como ilustrado na figura 1, que mostra um exame microscópico da formulação n°1 com nanopartículas estabilizadas de genisteína após 6 meses de estocagem em

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47/51 temperatura ambiente, a mesma preparação cosmética com nanopartículas estabilizadas de genisteína está perfeitamente estável, até mesmo após estocagem de 6 meses em temperatura ambiente. Exemplo 9

Emulsões O/A com diferentes formas de genisteína

	n°3	n°4
Ingredientes	% (p/p)	% (p/p)
Miristato de gliceril	4,00	4,00
Álcool cetílico	2,00	2,00
Steareth-2	2,00	2,00
Steareth-21	2,00	2,00
Miristato de isopropila	5,00	5,00
Triglicerídeo caprílico/Cáprico	8,00	8,00
BHT	0,05	0,05
Dimeticona	2,00	2,00
Fenoxietanol & Metilparabeno & Etilparabeno & Butilparabeno & Propilparabeno & Isobutilparabeno	0,80	0,80
Suspensão aquosa de nanopartículas de genisteína (contém 5,5% de genisteína, aproximadamente 0,4 mícron)	5,45	-
Genisteína (cristalina, aproximadamente 12 mícrons)	-	0,30
Água	Ad. 100	Ad. 100
Propileno glicol	4,00	4,00
Poliacrilamida & Isoparafina C13-14 & Laureth-7	1,00	1,00
Hidróxido de potássio (10%)	0,15	0,15
EDETA dissódico	0,10	0,10

[00107] Para ilustrar ainda mais os benefícios obtidos com nanopartículas de genisteína versus genisteína cristalina convencional, as formulações cosméticas descritas acima (n°3 e n°4) foram submetidas a

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48/51 um teste de estabilidade desafiador: as formulações foram estocadas em uma temperatura que varia de 5°C a 43°C a cada 24 horas, durante 3 semanas. A aparência das formulações foi observada sob um microscópio e é ilustrada pela figura 3, que mostra um exame microscópico da formulação n°3 com nanopartículas estabilizadas de genisteína após 19 dias de estocagem a 5°C/43°C (ciclos de 24 horas em cada temperatura), e na figura 4, que mostra um exame microscópico da formulação n°4 com genisteína cristalina convencional após 19 dias de estocagem a 5°C/43°C (ciclos de 24 horas em cada temperatura).

[00108] Como ilustrado pela figura 3, as nanopartículas de genisteína ainda estão finamente dispersas na preparação cosmética, ao contrário da figura 4, que ilustra que a genisteína cristalina convencional na mesma preparação formou grandes cristais.

Exemplo 10 [00109] Para forçar a cristalização em um sistema disperso, foi usado um teste no qual a temperatura é alterada ao longo de um intervalo de tempo autodefinido e em seqüências autodefinidas. O teste é denominado teste “swing’ (teste de mudança de temperatura). A finalidade desse teste é dissolver partículas pequenas na temperatura mais alta e forçar a recristalização em temperatura mais baixa. Mas ele também é um método de teste de estresse que mostra se uma formulação é estável. As formulações seguintes foram usadas para o teste “swing’:

Pos.	Ingrediente	Teor
o	Triglicerídeo caprílico/cáprico	8,00%
o	Miristato de isopropila	5,00%
o	Miristato de gliceril	4,00%
o	Álcool cetílico	2,00%
o	Dimeticona	2,00%
o	Steareth-2	2,00%

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Pos.	Ingrediente	Teor
o	Steareth-21	2,00%
o	Fenoxietanol & Metilparabeno & Etilparabeno & Butilparabeno	0,80%
o	BHT	0,05%
a	Água dem.	ad 100%
a	Propileno glicol	4,00%
a	EDETA BD	0,10%
t	Poliacrilamida & Isoparafina C13-14 & Laureth-7	1,00%
g	Genisteína	0,1%-1,0%
b	Solução 10% de hidróxido de potássio	0,15%

Especificações de fabricação:

[00110] As fases óleo-e-água (o + a) foram aquecidas separadamente até 70°C (± 5°C) e foram adicionadas juntas. O agente espessante (t) foi adicionado sob agitação moderada. A mistura foi homogeneizada por 30 segundos a 24.000 RPM através de um homogeneizador Ultra-Turrax T25. A emulsão foi resfriada lentamente até 45°C ± 5°C sob agitação moderada (misturador em ferradura, 120 RPM). Nessa temperatura, o valor do pH foi ajustado até o pH 6,5-7,0 por adição de base (b). Genisteína (g) foi adicionada à emulsão ainda fluida e foi incorporada por homogeneização novamente por 30 segundos a 24.000 RPM por meio de um homogeneizador Ultra-Turrax T25. A formulação foi resfriada até 25°C ± 5°C sob agitação moderada (misturador em ferradura, 120 RPM).

Avaliação da estabilidade-padrão:

[00111] Como teste da estabilidade-padrão, foram utilizadas as seguintes condições: as amostras cosméticas formuladas foram estocadas: 5°C ± 2°C, temperatura ambiente (por exemplo, 20-25°C) e 43°C ± 2°C com verificações após 2 semanas, 6 semanas, 3 meses, 6 meses e 12 meses. Poucas amostras mostram o crescimento de cristais em, no mínimo, 3 meses, o que significa que se passa um período

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50/51 longo antes que se possa fazer alguma afirmativa sobre a estabilidade morfológica futura.

Avaliação da estabilidade pelo teste “swing’:

[00112] Para forçar a cristalização, o teste “swing’ foi usado, e como temperaturas mínima e máxima, foram escolhidas 5°C e 43°C. Cada temperatura foi mantida por um período de 24 horas. A duração desse teste primeiro foi definida como 20 dias, o que significa que as amostras são processadas através de uma seqüência de resfriamento/aquecimento (= 1 seqüência) 10 vezes.

[00113] As figuras 5 a 7 mostram os resultados do teste “swing’. Foram preparadas emulsões contendo genisteína da forma descrita acima, usando as composições de nanopartículas de genisteína descritas abaixo. As seguintes amostras e concentrações de genisteína foram empregadas, e as emulsões foram medidas imediatamente após a preparação e após submeter as amostras a dez seqüências do teste “swing’:

[00114] Figura 5(a): composição do exemplo 3 em uma concentração de 0,3% [00115] Figura 5(b): composição do exemplo 3 em uma concentração de 0,5% [00116] Figura 5(c): composição do exemplo 3 em uma concentração de 1,0% [00117] Figura 6(a): composição do exemplo 6 em uma concentração de 0,3% [00118] Figura 6(b): composição do exemplo 6 em uma concentração de 0,5% [00119] Figura 6(c): composição do exemplo 6 em uma concentração de 1,0% [00120] Figura 7(a): composição do exemplo 7, após trituração a seco em um moinho Jet em uma concentração de 0,3%

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51/51 [00121] Figura 7(b): composição do exemplo 7, após trituração a seco em um moinho Jet em uma concentração de 0,5% [00122] Figura 7(c): composição do exemplo 7, após trituração a seco em um moinho Jet em uma concentração de 0,1% [00123] Figura 8(a): composição do produto final do exemplo 7 como descrita no exemplo 7 em uma concentração de 0,3% [00124] Figura 8(b): composição do produto final do exemplo 7 como descrita no exemplo 7 em uma concentração de 0,5% [00125] Figura 8(c): composição do produto final do exemplo 7 como descrita no exemplo 7 em uma concentração de 1,0%.

[00126] A ampliação foi a mesma em todas as figuras, e uma distância de 500 pm é indicada na figura 5(a).

[00127] Pode-se observar que, mesmo sob as condições severas do teste “swing’, as composições tópicas cosméticas da presente invenção não mostram nenhum aumento no tamanho de partícula, até mesmo em concentrações muito elevadas de 0,3 a 1,0%. O teste “swing’, na verdade, não teve nenhum efeito sobre o tamanho de partícula ou a distribuição de partículas.

[00128] Ao contrário, na figura 7, em que genisteína foi usada antes da moagem ou homogeneização, o tamanho de partícula se alterou significativamente durante o teste “swing’. São formados cristais enormes e agrupamentos de cristais podem ser observados após dez seqüências.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composição de nanopartículas de isoflavona que compreende uma isoflavona, um veículo e, opcionalmente, água, caracterizada pelo fato de que a isoflavona tem um tamanho médio de partícula D[4.3], como determinado por técnica de difração de laser, de menos de 3 pm, em que o veículo é selecionado de carboidratos, proteínas e misturas dos mesmos.
2. Composição de nanopartículas de isoflavona, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a isoflavona é genisteína.
3. Composição de nanopartículas de isoflavona, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que a isoflavona tem um tamanho médio de partícula D[4.3], como determinado por técnica de difração de laser, de 1 mícron ou menos.
4. Composição de nanopartículas de isoflavona, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que a isoflavona tem um tamanho médio de partícula D[4.3], como determinado por técnica de difração de laser, de 0,5 mícron ou menos.
5. Composição de nanopartículas de isoflavona, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que a isoflavona tem um tamanho médio de partícula D[4.3], como determinado por técnica de difração de laser, de 0,05 mícron ou mais.
6. Composição de nanopartículas de isoflavona, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o carboidrato é selecionado de amido modificado, sorbitol, maltose, maltodextrina, goma acácia, pectina, alginato, goma guar, xantana, derivados de celulose e misturas dos mesmos.
7. Composição de nanopartículas de isoflavona, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a proteína é selecionada de gelatina, proteína do leite, proteína de soja e misturas

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2/4 das mesmas.
8. Composição de nanopartículas de isoflavona, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que a composição é uma composição em pó ou granulada.
9. Composição de nanopartículas de isoflavona, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que a composição compreende pelo menos 1% em peso de isoflavona.
10. Composição de nanopartículas de isoflavona, de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que a composição compreende pelo menos 20% em peso de isoflavona.
11. Composição de nanopartículas de isoflavona, de acordo com a reivindicação 10, caracterizada pelo fato de que a composição compreende pelo menos 70% em peso de isoflavona.
12. Composição de nanopartículas de isoflavona, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que a composição é uma suspensão aquosa.
13. Composição de nanopartículas de isoflavona, de acordo com a reivindicação 12, caracterizada pelo fato de que consiste em 10 a 30% de isoflavona, 15 a 40% de veículo e o resto sendo água.
14. Processo para a produção de uma composição de nanopartículas de isoflavona que compreende uma isoflavona, um veículo e, opcionalmente, água, em que a isoflavona tem um tamanho médio de partícula D[4.3], como determinado por técnica de difração de laser, de menos de 3 gm, caracterizado pelo fato de que a mistura que compreende isoflavona cristalina e água e um veículo, é submetida a um homogeneizador de alta pressão até que o tamanho de partícula necessário seja alcançado e, opcionalmente, a suspensão resultante é submetida a um processo de secagem.
15. Processo, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que o processo de secagem é atomização ou liofili-

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3/4 zação.
16. Processo, de acordo com a reivindicação 14 ou 15, caracterizado pelo fato de que a isoflavona é pré-homogeneizada em água, antes de misturá-la e homogeneizá-la com o veículo.
17. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 14 a 16, caracterizado pelo fato de que a isoflavona é submetida à homogeneização de alta pressão na presença do veículo em uma pressão de 50 MPa a 400 MPa (500 bar a 4.000 bar).
18. Processo para a produção de uma composição de nanopartículas de isoflavona que compreende uma isoflavona, opcionalmente um veículo e, opcionalmente, água, em que a isoflavona tem um tamanho médio de partícula D[4.3], como determinado por técnica de difração de laser, de menos de 3 pm, caracterizado pelo fato de que a mistura que compreende isoflavona, água e, opcionalmente, um veículo, é submetida a um processo de trituração úmida em um moinho de glóbulos agitados, até que o tamanho de partícula necessário seja alcançado e, opcionalmente, a suspensão resultante é submetida a um processo de secagem.
19. Processo, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que o processo é para a produção da composição de nanopartículas de isoflavona, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 13.
20. Processo, de acordo com a reivindicação 18 ou 19, caracterizado pelo fato de que a isoflavona e, opcionalmente, o veículo, são ciclados 1 a 50 vezes através do moinho de glóbulos agitados.
21. Processo, de acordo com a reivindicação 18 ou 20, caracterizado pelo fato de que são usados meios de trituração do tipo ZrO2 no processo de trituração úmida.
22. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende uma composição de nanopartículas de isoflavona,

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4/4 como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 13.
23. Composição cosmética, caracterizada pelo fato de que compreende uma composição de nanopartículas de isoflavona, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 13.
24. Composição farmacêutica ou cosmética, de acordo com a reivindicação 22 ou 23, caracterizada pelo fato de que contém a isoflavona em uma concentração de 0,05 a 50% em peso.
25. Produto nutricional, caracterizado pelo fato de que compreende uma composição de nanopartículas de isoflavona, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 13.
26. Produto nutricional, de acordo com a reivindicação 25, caracterizado pelo fato de que é selecionado de tofu, iogurte e sucos de frutas.
27. Uso de uma composição de nanopartículas de isoflavona, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizado pelo fato de que é para a preparação de composições cosméticas, composições farmacêuticas, gêneros alimentícios, alimentos ou aditivos alimentícios.