BRPI0606514A2 - composiÇço farmacÊutica para liberaÇço controlada, kit farmacÊutico, mÉtodo para a preparaÇço da composiÇço, e, uso da composiÇço - Google Patents

Abstract

COMPOSIÇçO FARMACÊUTICA PARA LIBERAÇçO CONTROLADA, KIT FARMACÊUTICO, MÉTODO PARA A PREPARAÇçO DA COMPOSIÇçO, E, USO DA COMPOSIÇçO. A invenção divulga uma composição farmacêutica para a liberação controlada de compostos ativos relativamente tóxicos, em particular para proteínas bioativas da classe de interferons. A composição compreende um copolímero em bloco biodegradável construído a partir de tereftalato de poli(etileno glicol) (PEGT) e poli(tereftalato de butileno) (PBT). Composição é fornecida na forma de micropartículas injetáveis, de um líquido injetável que pode ter propriedades formadoras de gel próprias ou de um implante sólido. A invenção ainda fornece um kit farmacêutico que compreende a composição, métodos para preparar a composição e os usos farmacêuticos com relação a esta.

Description

"COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA LIBERAÇÃO CONTROLADA, KIT FARMACÊUTICO, MÉTODO PARA A PREPARAÇÃO DA COMPOSIÇÃO, E, USO DA COMPOSIÇÃO"

Descrição

CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção diz respeito a composições farmacêuticas para a liberação controlada de compostos ativos. As composições estão na forma de micropartículas poliméricas, géis in-situ ou, implantes sólidos. Estes são fundamentados em polímeros biodegradáveis e são particularmente úteis para a liberação controlada de proteínas ou peptídeos terapêuticos. Além disso, a invenção diz respeito às micropartículas poliméricas compreendida nas composições e métodos de fabricação de tais micropartículas. Em aspectos adicionais, a invenção diz respeito aos conjuntos farmacêuticos que compreendem as composições e, e aos usos de tais conjuntos.

FUNDAMENTO DA INVENÇÃO

As formas de dosagem parenteral com propriedades de liberação lenta de medicamento foram desenvolvidas para atender a necessidade de melhorar o uso terapêutico de substâncias medicamentosas que não devem ser administradas oralmente devido a suas propriedades fisico-químicas e, que têm uma meia vida relativamente curta pela razão de que estes têm de ser freqüentemente injetados. As injeções freqüentes são desconfortáveis aos pacientes e, se as injeções devem ser dadas por médicos ou enfermeiras, estas também são um pouco mais caras. A experiência de desconforto e dor pode resultar na inadaptação do paciente e prejudicar o sucesso da terapia.

O número de substâncias medicamentosas que não podem ser administradas pela via oral é, convenientemente, aumentado presentemente, principalmente como uma conseqüência dos avanços recentes de pesquisa biotecnológica na área farmacêutica, que tem levado a um número aumentadode peptídeo altamente potente e medicamentos protéicos. Talvez com a exceção de alguns peptídeos menores, entretanto, estes compostos são relativamente instáveis nos fluidos gastrintestinais e, de modo mais importante, tão grandes e hidrofílicos quanto as moléculas a serem absorvidas através da mucosa intestinal a uma extensão substancial. Estão desenvolvendo algumas destas substâncias medicamentosas, injetáveis ou formulações de liberação controlada implantáveis, a fim de diminuir a freqüência de dosagem e reduzir, desse modo, o desconforto do paciente e, conseguir um nível mais alto de complacência e sucesso terapêutico.

As formas de dosagem de liberação controlada, parenteral estão usualmente na forma de implantes macroscópicos, de unidade única ou múltipla, sólida (tais como hastes e pastilhas poliméricas), suspensões de micropartícula e, mais recentemente também géis, incluindo in-situ formação de géis. Implantes sólidos carregados com medicamento estão disponíveis como dispositivos não degradáveis poliméricos, cerâmicos ou metálicos que devem ser cirurgicamente removidos depois do período designado de ação do medicamento ou, como formas poliméricas biodegradáveis que não requerem remoção. Um exemplo de um implante não degradável é Viadur® da Bayer, que libera o medicamento de peptídeo, leuprolida, durante um período de umano. Um exemplo de um implante biodegradável é Zoladex da Astrazeneca, que é uma haste polimérica capaz de liberar o medicamento de peptídeo, goserrelina, durante períodos de um e três meses, respectivamente.

Logo depois da introdução no mercado dos primeiros implantes biodegradáveis, as micropartículas de liberação controlada tornaram-se disponíveis, tais como, formulações de Depot da Takeda Lupron® que libera leuprolida durante períodos de um, três e quatro meses, respectivamente. A fim de injetar tais micropartículas, estas devem ser colocadas em suspensão em um carregador aquoso. Por razões de estabilidade, entretanto, micropartículas de depósito não podem serarmazenadas utilizavelmente como uma suspensão aquosa, mas devem ser reconstituídas a partir de um pó seco.

Vários projetos de micropartí cuias carregadas com medicamento e métodos para sua preparação são descritos em E. Mathiowitz et ai, Microencapsulation, in; Encyclopedia of Controlled Drug Delivery (ed. E. Mathiowitz), Vol. 2, p. 49-546, John Wiley & Sons (1999), que são incorporados aqui por referência.

Para permitir a injeção de sistemas de liberação de medicamento através de agulhas particularmente finas fornece conforto aumentado ao paciente, os pesquisadores científicos da liberação de medicamento, em anos recentes, começaram a desenvolver géis injetáveis que são capazes de formar depósitos subcutâneos ou intramusculares. Em um dos conceitos, as formulações de gel que são projetados tendo, altamente, diminuição de corte e tixotrópico. Aplicando-se a força de cisalhamento antes da administração, a viscosidade destes géis é substancialmente reduzida, levando em conta a injeção com uma agulha relativamente pequena, considerando que a resistência do gel é lentamente recuperada depois da administração. De acordo com um outro conceito, as composições líquidas são formuladas, o que, depois da administração, formam géis em resposta a mudanças do seu ambiente, tais como pH, temperatura, força iônica. De acordo com uma terceira abordagem, as formulações poliméricas líquidas que compreendem um solvente não aquoso são injetadas. Na administração, o solvente se dispersa fora do local da injeção, que leva à precipitação de partículas poliméricas ou à formação de um gel.

Os géis injetáveis biodegradáveis foram debatidos em detalhes por A. Hatefi et al, Journal of Controlled Release 80 (2002), 928, cujo documento é incorporado aqui por referência.

A utilidade terapêutica de vários carregadores poliméricos para liberação controlada, em particular, aquela de polímeros e copolímeros de ácido lático eácido glicólico, foi demonstrada por alguns compostos ativos, tais como, leuprolida, goserrelina, buserelina e, triptorelina, que são todos peptídeos com um índice terapêutico muito grande, isto é, que tem uma toxicidade muito baixa mesmo em níveis muito acima das concentrações terapeuticamente eficazes. Em contraste, compostos ativos menos toleráveis, tais como, eritropoietinas e interferons cuja liberação precisamente controlada é necessária para alcançar efeitos terapêuticos sem efeitos colaterais intoleráveis, não foram desenvolvidas com sucesso assim como as formas de dosagem de liberação controlada. Uma dificuldade maior é que os carregadores poliméricos biodegradáveis usados no produto anterior, bem sucedido, aparentemente não são capazes de fornecer perfis de liberação ordem zero ou aproximadamente ordem zero. Em vez disso, estes produzem liberação repentina inicial altamente indesejável na administração. Além disso, a degradação autocatalítica de polímeros e copolímeros de ácido lático e ácido glicólico também podem levar aos efeitos de descarga de dose em estágios posteriores de liberação de medicamento. Por outro lado, outros polímeros novos que foram questionados como carregadores de liberação controlada melhorados para compostos terapêuticos não têm o registro de segurança dos poli(lactídeos) e poli(glicolídeos).

Deste modo, há uma necessidade de novos sistemas de liberação polimérica que provam biocompatibilidade, mas que também são capazes de melhorar o controle da liberação de compostos terapêutico relativamente tóxicos do que os carregadores utilizados anteriormente.

Portanto, é um objetivo da invenção fornecer novas composições de liberação controlada que compreende um ou mais carregadores poliméricos que têm excelente biocompatibilidade e um composto terapêutico relativamente tóxico que não deve ser dado por intermédio de via oral, tal como, uma proteína.

Um outro objetivo da invenção é fornecer micropartícuias,implantes e, composições de gel que compreendem um composto ativo que é liberado em uma taxa controlada. Além disso, é um objetivo da invenção fornecer conjuntos que contenham tais composições e usos farmacêuticos destes. Os objetivos adicionais tornar-se-ão aparentes na base da seguinte descrição e reivindicações da patente.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

A invenção fornece uma composição farmacêutica para a liberação controlada de interferons. Mais especificamente, a composição fornecida pela invenção compreende um polímero biodegradável e um composto ativo selecionado do grupo de interferons. O polímero biodegradável é um copolímero de bloco construído a partir de tereftalato de poli(etileno glicol) (PEGT) e tereftalato de poli(butileno) (PBT). Um composto ativo preferido é um interferon selecionado da família de alfa-interferons.

Em uma forma de realização adicional, a composição da invenção é projetada para compreender micropartícuias que contêm o copolímero de bloco e pelo menos um pouco do interferon compreendido na composição. Tal composição é particularmente útil como uma formulação de liberação controlada, parenteral que pode ser injetada intramuscular ou subcutaneamente.

Em uma outra forma de realização, a invenção fornece um conjunto farmacêutico que compreende um primeiro e um segundo compartimentos selados, em que o primeiro compartimento compreende tal composição com base em micropartícula na forma substancialmente seca e, em que o segundo compartimento compreende um carregador líquido aquoso para a reconstituição da composição em uma suspensão de micropartícula injetável.

Em uma forma de realização adicional, a composição da invenção é modelada como um implante sólido.As formas de realização adicionais incluem métodos para a preparação da composição e dos usos farmacêuticos destas. BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

A Figura 1 representa a liberação de interferon das micropartícuias de copolímero in vitro e em hamsters.

A Figura 2 representa a liberação de interferon das micropartí cuias de copolímero in vitro e em macacos.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

No processo de descoberta que leva à presente invenção, foi observado que muitos dos polímeros que foram sugeridos como agentes de liberação controlada para compostos ativos, tais como, polímeros de ácido lático e/ou glicólico ou, não são muito adequados para a liberação de compostos ativos relativamente tóxicos, tais como, interferons. Em particular, o procedimento de liberação pareceu ser insuficientemente controlável, especialmente quando os polímeros são formados como micropartículas ou géis. Por exemplo, parece difícil evitar a, assim chamada, liberação repentina, isto é, uma liberação rápida de uma fração significante do composto ativo incorporado logo depois da administração, quando se usa os carregadores poliméricos convencionais. Dependendo do índice terapêutico do composto ativo respectivo, tal liberação repentina pode produzir efeitos um tanto tóxicos nos pacientes.

Em contraste, foi surpreendentemente observado que os copolímeros de bloco de PEGT e PBT são capazes de incorporar e liberar os interferons (compostos mencionados acima) de uma forma melhor controlada, com pouco ou substancialmente nenhuma interrupção de efeito, como será ainda debatido nesta descrição.

Conseqüentemente, a invenção fornece uma composição farmacêutica para a liberação controlada que compreende um polímero biodegradável e um composto ativo selecionado do grupo de interferons, emque o polímero biodegradável é um copolímero de bloco construído a partir de tereftalato de poli(etileno glicol) (PEGT) e poli(butileno tereftalato) (PBT).

Também foi observado pelos inventores que os polímeros de bloco descritos acima podem formar uma matriz surpreendentemente adequada para incorporar interferons para aplicações de liberação controlada. Em particular, estes podem incorporar grandes quantidades de interferons sem perda de bioatividade.

Uma outra razão por que os copolímeros especificados são particularmente adequados é que são capazes de controlar a liberação de interferons incorporados em uma ampla faixa de perfis de liberação que podem ser considerados desejáveis, dependendo da aplicação terapêutica específica. O carregador polimérico pode ser desenvolvido em vários projetos de forma de dosagem, tais como, micropartículas, película, géis e, implantes sólidos e, podem envolver uma faixa de pesos moleculares e graus de hidrofilicidade que podem - junto com a geometria da forma de dosagem ou uma unidade desta - obter várias durações de liberação de interferon e, vários tipos de perfis de liberação.

Uma composição farmacêutica é definida como uma composição que é tipicamente usada para propósitos terapêuticos ou diagnósticos ou para o bem-estar e prevenção de doença. Enquanto muitas composições farmacêuticas são projetadas e formuladas para a liberação imediata de compostos ativos incorporados, há também composições que possui características de liberação controlada a fim de fornecer uma duração prolongada de eficácia. Vários termos foram usados para descrever vários tipos de características de liberação controlada. Como usado aqui, a liberação controlada refere-se a qualquer liberação de composto ativo modificado, tal como, liberação demorada, liberação prolongada, liberação constante ou ordem zero, liberação prolongada, liberação sustentada, liberação lenta,liberação bifásica, etc.

A composição compreende um polímero biodegradável. De acordo com a tecnologia IUPAC, um polímero é definido como uma substância composta de macromoléculas. Por sua vez, uma macromolécula é uma molécula de massa molecular relativamente alta, a estrutura da qual compreende essencialmente a repetição múltipla de vários unidades constitucionais. Em linguagem comum, entretanto, a distinção entre um polímero e as macromoléculas que esta compreende nem sempre é feita. Isto também é verdade para a presente descrição, o que pode atribuir características ao polímero que deve ser - no sentido exato - atribuído às macromoléculas.

A biodegradabilidade pode ser definida como a capacidade de uma substância ser quimicamente degradada em condições fisiológicas, em ambientes fisiológicos ou, através de ação enzimática. No contexto da invenção, é preferido que o polímero biodegradável seja degradável em um ambiente fisiológico - tal como, em fluidos fisiológicos em temperatura corporal - mesmo na ausência de enzimas no sentido que ocorre degradação substancial dentro do curso de horas, dias, semanas, meses ou, anos. A degradação pode incluir vários mecanismos químicos incluindo hidrólise ou oxidação. Para evitar enganos, a biodegradabilidade não significa que o polímero biodegradável deve degradar nas unidades monoméricas respectivas. E suficiente que o processo de degradação leva à espécie molecular solúvel que pode ser eliminada de um organismo por processos, tais como, excreção renal ou hepática. Na presente invenção, o polímero serve tipicamente comocarregador para o composto ativo e como agente de controle de liberação.

Além disso, o polímero biodegradável é selecionado do grupo de copolímeros de bloco construídos a partir de tereftalato de poli(etileno glicol) (PEGT) e tereftalato de poli(butileno) (PBT). Um copolímero é definido como um polímero derivado de mais do que, uma espécie demonômero. Em um copolímero de bloco (ou polímero de bloco), as macromoléculas constituintes têm blocos adjacentes que são constitucionalmente diferentes, isto é, os blocos adjacentes compreendem unidades constitucionais derivadas de espécies diferentes de monômero ou da mesma espécie de monômero, mas com uma composição ou distribuição de seqüência diferentes das unidades constitucionais. Um bloco pode ser definido como uma porção de uma macromolécula que compreende um número múltiplo de unidades constitucionais que têm pelo menos uma característica que não está presente nas porções adjacentes.

Vários copolímeros de bloco que compreendem PEGT e PBT foram descritos na técnica anterior, por exemplo, por J. M. Bezermer et al. (J. Control Release 1999, 62 (3), 393-405; J. Biomed. Mater. Res. 2000, 52 (1), 8-17; J. Control Release 2400, 66 (2-3), 307-320; J. Control Release 2000, 67 (2-3), 249-260; J. Control Release 2000, 67 (2-3), 233-248; J Control Release 2000, 64 (1-3), 179-192), Dijkhuizen-Radersma et al, (Biomaterials 2002, 23 (24), 4719-4729; J. Biomed, Mater. Res. 2004; 71A (1), 118; Biomaterials 2002, 23 (6), 1527-1536; Pharm, Res. 2004, 21 (3), 484-491; Int. J. Pharm. 2002, 248 (1-2), 229-237; Eur. J. Pharm. Biopharm. 2002, 54 (1), 89-93), e J. Sohier et al (J, Control Release 2003.87 (1-3), 57-68; Bur. J. Pharm. Biopharm. 2003, 55 (2), 221-228) e, no WO 93/21858, EP 0 830 859 A2 e, EP J. 090 928 Al, todos os documentos são incorporados aqui em sua totalidade.

Estes copolímeros podem ser entendidos como sendo compostos de blocos de repetição de poli(etileno glicol) hidrofílico (PEG) e tereftalato de poli(butileno) hidrofóbico (PBT). Estes poli(éter ésteres) são tipicamente preparados pela policondensação de PEG, butanodiol e tereftalato de dimetila. Alternativamente, podem ser entendidos como sendo compostos de blocos de repetição de tereftalato de poli(etileno glicol) (PEGT) e PET. Estes copolímeros usualmente têm as propriedades de elastômerostermoplásticos. Em um ambiente aquoso, formam hidrogéis ou redes poliméricas semelhantes a hidrogéis, nas quais as cadeias poliméricas não são quimicamente mas fisicamente reticulada. Acredita-se que a reticulação é efetuada pela associação de segmentos de PBT "pesado" em domínios cristalinos, considerando que regiões amorfas que compreendem segmentos de PEG "macios" e certa quantidade de PBT são responsáveis pelo comportamento de inchaço na água. Em contraste às reticulações químicas, estas reticulações físicas são reversíveis em temperaturas elevadas ou em solventes apropriados.

De acordo com a invenção, o composto acima é selecionado do grupo de interferons. Interferons representam uma família de proteínas de ocorrência natural derivadas de células humanas envolvidas em várias funcionalidades do sistema imune, tais como em infecções virais combatentes. Vários interferons foram desenvolvidos em produtos farmacêuticos e são, hoje, disponíveis como produtos de engenharia genética para o uso no tratamento de leucemias, hepatite, esclerose múltipla e, outras doenças graves.

Em contraste a vários outros peptídeos e proteínas ativas que foram desenvolvidos com sucesso nas formulações de liberação controlada, os interferons tem um índice terapêutico relativamente pequeno. Em outras palavras, apresentam toxicidade substancial em níveis acima das concentrações terapeuticamente eficazes. Deste modo, sua liberação precisamente controlada é necessária para alcançar efeitos terapêuticos sem efeitos colaterais intoleráveis.

Uma das principais classes de interferons é aquela dos alfa-interferons (alfa IFN ou alpha IFN). Os interferons alfa compreendem várias proteínas naturais ou modificadas com peso molecular e funcionalidade similares (ver D. J. A. Crommellin et ai, Pharmaceutical Biotechnology, Harwood Academic Publishers (1997), 219-222). Os leucócitos representamuma das principais origens destas proteínas em seres humanos. Pelo menos 23 sub-tipos naturais diferentes e várias versões modificadas de alfa IFN são conhecidos, alguns dos quais estão disponíveis em produtos farmacêuticos. Por exemplo, uma mistura de vários subtipos de IFN alfa naturais derivam de leucócitos humanos infectados misturados que foram comercialmente desenvolvidos. Os membros presentemente mais importantes do grupo alfa IFN são as variantes recombinantes de alfa-2a IFN e, alfa-2b IFN. Um outro alfa IFN recombinante usado em terapia é alfacon-1 IFN.

A função básica destes interferons é a supra-regulação do sistema imune, tal como a estimulação de células imunológicas capazes de reconhecer e destruir direta ou indiretamente células ou vírus cancerígenos. Entre as indicações terapêuticas para alfa interferon estão hepatite B (crônica), hepatite C (crônica), leucemia de células pilosas, leucemia mielógena (crônica), mieloma múltiplo, linfoma folicular, tumor carcinóide, melanoma maligno, verrugas genitais; carcinoma de bexiga, carcinoma cervical, carcinoma de célula cervical, papilomatose laríngea, micose fungóide, condyloma acuminata, SARS e, sarcoma de Kaposi (relacionado à AIDS). De fato, presentemente, é mais preferido, de acordo com a invenção o composto ativo seja selecionado do grupo de alfa interferons.

Os membros naturais dos alfa-interferons tem massas moleculares entre 19-26 kDa e consiste de proteínas com comprimentos de 156-166 e 172 aminoácidos. Todos os subtipos de alfa IFN possuem uma região de seqüência conservada comum entre as posições de aminoácido 115-151 enquanto que as extremidades de amino-terminal são variáveis. Muitos subtipos de alfa IFN diferem em suas seqüências em apenas uma ou duas posições. As variantes de ocorrência natural também incluem proteínas truncadas por 10 aminoácidos na extremidade de carbóxi terminal.

Uma outra classe principal de interferons é aquela de beta-interferons (beta IFN), os representativos presentemente mais importantes emterapia sendo beta-la IFN e beta-lb IFN. Estes interferons são usados, por exemplo, no controle de certas formas de esclerose múltipla, em particular formas reincidentes de esclerose múltipla, para reduzir o acúmulo de incapacidade física e diminuir a freqüência de exacerbações clínicas. Os pacientes com esclerose múltipla nos quais a eficácia foi demonstrada, incluem pacientes que passaram pela experiência de um primeiro episódio clínico e têm aspectos de MRI compatíveis com esclerose múltipla.

Uma outra classe terapeuticamente usada de interferons é aquela de gama interferons (gama IFN). Estes interferons têm atividades antivirais, antiproliferativas e imunomoduladoras. Um membro dos interferons gama, gama lb IFN, é correntemente comercializado para o controle de infecções graves associadas com doença granulomatosa crônica.

Mais recentemente, várias classes adicionais de interferons foram descobertas e descritas, incluindo épsilon IFN, capa IFN e lambda IFN (ver P. Kontsek et ai, Acta Viral. 2003, 47(4):201-15).

Em particular, a composição de acordo com a invenção em que o interferon é selecionado do grupo de alfa-interferons e, preferivelmente do grupo que consiste de alfa IFN, alfa-2a IFN, alfa-2b IFN, alfacon-1 IFN, alfa-2a IFN peguilado, alfa 2b IFN peguilado, alfa-2a IFN truncado, alfa 2b IFN truncado, proteínas de fusão de alfa IFN e albumina, e um derivado funcional destes dá propriedades muito boas. Neste contexto, um alfa-interferon também pode representar uma mistura de várias variantes de alfa-interferon, tal como uma mistura de alfa-interferons naturais que são difíceis de, ou desnecessários para separar e purificar. O interferon pode ser extraído de organismos vivos ou células isoladas ou culturas celulares. As células e/ou organismos dos quais o interferon é obtido pode ser modificado, tal como, por interferon, a fim de produzir o interferon desejado.

Uma composição de acordo com a invenção em que o interferon é um interferon recombinante produzido a partir de células ouorganismos produzidos mediante engenharia genética, em que as células ou organismos são preferivelmente selecionados de mamífero, inseto, bactérias, leveduras, fungos e células ou organismos de planta superior, dá especialmente boas propriedades.

Um dos interferons particularmente adequados para realizar a invenção é uma versão truncada de alfa-2b IFN ou, opcionalmente, uma mistura de mais do que uma versão truncada de alfa-2b IFN. Por exemplo, as moléculas que compreendem a seqüência de aminoácido de alfa-2b IFN em que os últimos 5 a 10 aminoácidos do terminal N foram anulados podem ser preparadas pelos métodos correntemente disponíveis de engenharia genética. Em uma forma de realização adicional, variantes de alfa-2b IFN que são trancadas por 7 ou 8 aminoácidos do terminal N são preferidas.

É preferido que a composição da invenção mostre uma liberação do composto ativo durante um período de pelo menos cerca de 7 dias. Mais preferivelmente, o interferon é liberado em pelo menos cerca de 10 dias ou, pelo menos cerca de 14 dias. Em formas de realização adicionais, a liberação ocorre em pelo menos cerca de 3 semanas, 4 semanas, 6 semanas e, 2 meses, respectivamente. Presentemente, muito preferida é uma liberação durante um período de cerca de 10 dias a 1 mês. O qual o grau de polímero deve ser selecionado e os quais os aspectos específicos adicionais são úteis para alcançar tal duração de liberação depende pelo menos parcialmente da intenção da forma de dosagem selecionada e é descrito abaixo em mais detalhes.

A invenção também diz respeito a uma composição farmacêutica para a liberação controlada que compreende um polímero biodegradável e um ou mais compostos ativos selecionados do grupo de interferons, em que pelo menos cerca de 80% em peso do composto ativo, com base no peso total do composto ativo, é liberado na forma monomérica, não agregada. De acordo com esta forma de realização da invenção, obiodegradável é preferivelmente, mas não limitado a, um copolímero de bloco como definido aqui, construído a partir de tereftalato de (polietileno glicol) (PEGT) e tereftalato de poli(butilenos) (PBT). Foi observado pelos inventores que os polímeros de bloco descritos acima podem formar uma matriz surpreendentemente adequada para incorporar interferons para aplicações de liberação controlada. Em particular, podem incorporar grandes quantidades de interferons sem perda de bioatividade e, aparecem para preservar o estado monomérico, não agregado do interferon incorporado. Isto é notável assim como os interferons são conhecidos ser sensíveis a vários polímeros e condições de processo e, particularmente sujeitos a agregação que é freqüentemente associada com desativação. Em contraste, usando-se os polímeros de bloco especificados aqui como carregadores para interferons, é possível concluir que a maior parte do interferon incorporado é liberado na forma monomérica.

Preferivelmente, o grau polimérico e as condições de processamento devem ser selecionados para garantir que pelo menos cerca de 80% do ingrediente ativo incorporado, isto é, interferon, seja liberado na forma monomérica, não agregada. Ainda mais preferivelmente, pelo menos cerca de 90% do interferon é liberado como monômeros ou, de acordo com formas de realização adicionais, pelo menos cerca de 95%, 97% e, 9%, respectivamente. Estas porcentagens são em peso, com base no peso total do ingrediente ativo incorporado.

As formas preferidas adicionais das composições de acordo com a invenção são descritas abaixo.

Uma dose única da composição, que é aquela quantidade da composição que é administrada de uma vez, preferivelmente compreende uma quantidade de composto ativo que é equivalente a 1 milhão de unidades internacionais (MIU) do interferon respectivo. A quantidade exata que é incorporada depende, naturalmente, do perfil de liberação da composição e dadose diária e semanal que um paciente particular deve receber.

Em uma das formas de realização, a composição é adaptada para liberar pelo menos cerca de 5 MIU de interferon em 14 dias, isto é, nos primeiros 14 dias depois da administração. Em uma outra forma de realização, compreende uma dose de cerca de 10 a cerca de 150 MIU, cuja dose é liberada durante um período de cerca de 10 dias a cerca de 1 mês, em particular durante um período de cerca de 14 dias. Também preferida é uma composição que compreende e libera, no mesmo período de tempo, uma dose de cerca de 20 a cerca de 100 MIU. Tais composições são particularmente preferidas se o ingrediente ativo é um alfa-interferon, tal como, alfa-2b IFN ou um derivado deste.

Calculado por uma média diária dentro do período de liberação de interferon depois da administração, a composição é preferivelmente adaptada para a liberação de uma quantidade de cerca de 0,5 a 20 MIU do interferon respectivo ou, de cerca de 1 a 10 MIU. Dependendo da forma do perfil de liberação, é possível que a quantidade de ingrediente ativo liberado no primeiro dia depois da administração seja maior do que 10 ou 20 MIU, mas a média de liberação diária ainda pode estar nas faixas preferidas.

A composição da invenção pode ser designada, formulada e processada de modo que seja adequada para uma variedade de usos e modos terapêuticos de administração, tais como, administração tópica, oral, retal, vaginal ou, oftálmica; entretanto, preferivelmente, é adaptada para administração parenteral. Como usado aqui, a administração parenteral inclui qualquer via invasiva de administração, tal como, subdérmica, intradérmica, subcutânea, intramuscular, loco-regional, intratumoral, intraperitoneal, intersticial, intralesional, com alguma preferência menor, no contexto desta invenção, também intravenosa, intraarterial etc. As vias altamente preferidas de administração da composição são subcutânea e injeção ou implantação intramuscular.Sendo adequado para administração parenteral significa, em particular, que a composição preferivelmente é estéril e está de acordo com os requerimentos das farmacopéias correntes com referências ao conteúdo de endotoxinas, osmolalidade, etc. Os excipientes são preferivelmente selecionados por serem seguros e toleráveis quanto a administração parenteral. Em um aspecto adicional, a composição é formulada para ser relativamente isotônica (ou isoosmótica), tal como, na região de cerca de 150 a 500 mOsmol/kg e, preferivelmente na região de cerca de 250 a 400 mOsmol/kg. Além disso, o pH deve estar aproximadamente na faixa fisiológica a fim de evitar dor e intolerância local na injeção. Preferivelmente, o pH da composição está na região de cerca de 4 a 8,5 e, mais preferivelmente na região de cerca de 5,0 a 7,5.

A composição da invenção pode ser designada e formulada a fim de compreender micropartículas que, por sua vez, compreendem o copolímero de bloco biodegradável e o composto ativo ou, pelo menos uma fração substancial do composto ativo presente na composição. Neste caso, a forma de dosagem da composição que é administrada é tipicamente uma suspensão injetável que compreende as micropartículas e um carregador coerente líquido.

No contexto da invenção, as micropartículas devem ser entendidas como partículas sólidas ou semi-sólidas que tem um diâmetro na região de cerca de 0,1 a cerca de 500 um, indiferente de sua forma ou estrutura interna. Por exemplo, as partículas também abrangeriam microesferas e microcápsulas. Em uma forma de realização mais preferida, as micropartículas tem um diâmetro de cerca de 1 a cerca de 300 um. Além disso, foi observado que as propriedades de liberação desejáveis são melhores alcançadas por interferons que são incorporados nas micropartículas com base em copolímeros de bloco PEGT/PBT que têm um diâmetro médio de volume de cerca de 25 a cerca de 200 um, como medido pela espectroscopia deI correlação de fóton. A seleção de tal tamanho de partícula também garantirá / que uma suspensão destas micropartículas é bem injetável e pode ser fácil e convenientemente administrada por intermédio de injeção intramuscular ousubcutânea.

Dentro desta faixa de tamanho, o diâmetro pode ser ainda otimizado por aplicações de produto específico ou para acomodar interferons específicos. Por exemplo, no caso de - alfa-2a interferon e alfa-2b interferon -otimamente truncados, presentemente, é mais preferido selecionar os diâmetros de partícula média de volume de cerca de 30 a cerca de 175 um.

Em formas de realização adicionais, preferidas, o diâmetro médio está na faixa de cerca de 50 a cerca de 150 um.

Preferivelmente, as micropartículas devem ter uma porosidade relativamente baixa. Em particular, foi observado que os perfis de liberação desejados para aplicações de liberação controlada de interferons alfa podem ser melhor realizados quando a presença de poros maiores é basicamente evitados. Neste contexto, os poros maiores podem ser definidos como poros que tem um diâmetro de cerca de 5 um ou mais. Deste modo, em uma das formas de realização preferidas a maioria das micropartículas são substancialmente isentas de poros que têm um diâmetro de cerca de 5 um ou mais. Em uma outra forma de realização, a maioria das micropartículas são substancialmente isentas de poros que têm um diâmetro de cerca de 2 um ou mais.

Opcionalmente, as micropartículas podem ser revestidas com uma camada de polímero isenta de medicamento. Tal forma de realização pode se-r útil para prevenir uma liberação repentina inicial do composto ativo incorporado ou, ainda conseguir um tempo de retardo predeterminado até a liberação começar, se assim desejado.

As micropartículas são fundamentadas no copolímero de bloco de PEGT e PBT, que é usado como carregador e agente de liberaçãocontrolada. Foi observado, entretanto, que nem todos os co-polímeros de PEGT e PBT são igualmente úteis para fabricar micropartículas para a liberação controlada de todos os interferons. Além disso, o tempo ou duração da liberação pretendida de efeito é importante para a seleção do copolímero de bloco. No caso dos alfa-interferons, foi observado que o copolímero, preferivelmente, deve compreender de cerca de 50 a cerca de 95% em peso de PEGT e, conseqüentemente de cerca de 5 a cerca de 50% em peso de PBT. Em uma outra forma de realização, o copolímero compreende de cerca de 70 a cerca de 95% em peso de PEGT. Ainda, de acordo com uma forma de realização adicional, preferida, o copolímero contém de cerca de 70 a cerca de 85% em peso de PEGT.

Para especificar adicionalmente a composição química do copolímero, o peso molecular dos segmentos de PEG do componente de PEGT é um parâmetro importante. Foi observado que os alfa interferons são muito facilmente incorporados em micropartículas de copolímero cujo perfil de liberação pode ser ajustado dentro de faixas úteis quando o peso molecular médio do PEG é de cerca de 500 a cerca de 3.000. Ainda mais preferivelmente, o peso molecular médio do PEG é de cerca de 1000 a cerca de 2000.

A seleção do peso molecular médio do PEG também pode levar em consideração o tamanho de partícula médio. Se, por exemplo, um tamanho de partícula relativamente pequeno é selecionado, por exemplo, por razões de processamento, tais como, abaixo de cerca de 100 um ou, ainda abaixo de cerca de 75 um, é preferido selecionar um polímero de bloco com um grau relativamente baixo de hidrofilicidade, isto é, que tem um peso molecular médio relativamente baixo do PEG, tal como, cerca de 1.500 ou menos ou, cerca de 1.000 ou menos, especialmente se uma duração de liberação de duas semanas ou mais é desejada. Alternativa ou, adicionalmente, um baixo grau de hidrofilicidade também pode serconseguido pela seleção de um teor relativamente baixo de segmentos de PEGT, tais como, não mais do que cerca de 75% em peso.

De modo inverso, pode haver razões para selecionar um tamanho médio de partículas relativamente grandes, tais como, acima cerca de 100 |im, por exemplo, com base na consideração do processamento ou para conseguir um comportamento in vivo desejado: neste caso, presentemente é preferido selecionar um peso molecular médio do PEG de cerca de 1.000 a cerca de 3.000 ou, de pelo menos cerca de 1.500, e/ou um teor relativamente alto de PEGT, tal como, pelo menos cerca de 75% em peso.

Além disso, pode ser útil combinar dois ou mais copolímeros de bloco PEGT7PBT diferentes para preparar micropartículas que têm um comportamento de liberação otimizado. Os dois ou mais copolímeros de bloco podem diferir, por exemplo, em seu teor de PEGT relativo ou, podem diferir no peso molecular médio do PEG ou, podem diferir em ambos os parâmetros. Por exemplo, as combinações poliméricas úteis para fabricar as micropartículas com alfa interferon como agentes ativos podem compreender dois polímeros ambos tendo um teor de PEGT de cerca de 80% em peso, mas com pesos moleculares de PEG médios de cerca de 1.000 e cerca de 2.000, respectivamente. Uma outra combinação útil compreende dois polímeros que têm um teor de PEGT de cerca de 80% em peso e um peso molecular de PEG médio de cerca de 1.000 e cerca de 1.500, respectivamente. Os dois ou mais polímeros diferentes podem ser combinados em várias razões, tais como 50: 50, 75: 35 ou, 75: 25. Foi observado que as composições da invenção são adequadas por incorporar alfa-interferons e alcançar tempos de liberação decerca de 1 a cerca de 8 semanas. Por exemplo, escolhendo-se os copolímeros de bloco apropriados, o perfil de liberação pode ser ajustado para fornecer efeitos medicamentosos durante períodos de cerca de 10 dias ou 2 semanas a cerca de 4 semanas, que é, presentemente, o tempo de liberação mais preferido. O tempo de liberação ou duração de liberação, deve ser entendidocomo o tempo em que pelo menos cerca de 80% em peso e, mais preferivelmente pelo menos 90 ou 95% em peso do composto ativo incorporado são liberados. Os perfis de liberação não mostram qualquer interrupção de efeito pronunciada, isto é a liberação inicial (dentro de 4 horas) não é mais do que cerca de 10% da dose incorporada e, mais preferivelmente não mais do que cerca de 7% da dose incorporada.

Usando-se os copolímeros de bloco como descrito acima, é possível fabricar micropartículas que incorporam quantidades terapeuticamente úteis de interferons. Por exemplo, foi observado que os polímeros selecionados de acordo com as formas de realização preferidas podem incorporar alfa-interferon em um teor de cerca de 0,1 a cerca de 20% em peso em relação ao peso total das micropartículas. Mais preferivelmente, o teor de interferon das micropartículas é de cerca de 0,2 a cerca de 10% em peso ou, de 0,5 a cerca de 5% em peso, respectivamente. Dentro destas faixas, o interferon é compatível com a matriz polimérica, com pouco ou nenhuma tendência para agregar. Ao mesmo tempo, a concentração da substância ativa é alta o suficiente para levar em consideração uma administração conveniente de um volume relativamente pequeno de suspensão de micropartícula que deve ser injetada.

Tipicamente, a dose de alfa-interferon por injeção estará na faixa de cerca de 3 a 2.400 milhões de unidades internacionais (MIU), dependendo de fatores, tais como, o estado do paciente, o tipo e a gravidade da doença e, em particular a duração de liberação das micropartículas. Se as micropartículas são designadas para a liberação do interferon dentro de cerca de 2 ou 4 semanas, respectivamente, a dose normalmente estará na faixa de cerca de 10 a cerca de 150 MIU. De fato, em uma das formas de realização preferidas, a composição da invenção compreende alfa-2a interferon, alfa-2b interferon ou, um fragmento deste, em uma resistência de cerca de 10 a cerca de 150 MIU por volume a ser injetado. De acordo com uma preferênciaadicional, a composição tem uma resistência na faixa de cerca de 20 a cerca de 100 MIU por injeção.

Por causa do conforto do paciente, o volume de injeção não deve ser muito alto, tal como, não mais do que cerca de 3 ml em vista da via de administração preferida, que é injeção intramuscular ou subcutânea. No caso de administração subcutânea, é mais preferido que o volume de injeção não seja mais do que cerca de 2 ml. Por outro lado, as injeções altamente concentradas em volumes muito pequenos são difíceis de dosar precisamente, razão pela qual é preferido que o volume por injeção seja pelo menos de cerca de 0,1 ml e, mais preferivelmente pelo menos cerca de 0,3 ml. Presentemente a faixa mais preferida é de cerca de 0,5 ml a cerca de 2 ml.

Apesar da injeção intramuscular ou subcutânea das composições de micropartículas serem as vias preferidas de administração, naturalmente pode ser possível e útil no caso de certos pacientes ou doenças para administrar as composições através de outras vias. Estas vias são mais tipicamente vias parenterais, mas também podem ser as vias pulmonar, nasal, oromucósica - tais como, sublingual ou bucal - ou, outras vias. Entre as vias parenterais úteis além da injeção intramuscular e subcutânea, estão, em particular, intratumoral, intralesional, loco-regional, arterial, intersticial e, injeções intraperitoneais.

As micropartículas e sua suspensão para injeção são adaptadas para administração parenteral, que significa que são formuladas e processadas para reunir os requerimentos de formas de dosagem parenteral. Tais requerimentos são, por exemplo, resumidos nas farmacopéias principais. Em um aspecto, a composição ou, suas pré-misturas ou os conjuntos dos quais a composição é fabricada antes da administração, devem ser estéreis. Em um outro aspecto, os excipientes devem ser selecionados para ser seguro e tolerável para a administração parenteral. Em um aspecto adicional, as composições são formuladas para ser relativamente isotônica, (ouisoosmótica), tais como, na região de cerca de 150 a 500 mOsmol/kg e,preferivelmente na região de cerca de 250 a 400 mOsmol/kg. Além disso, opH deve estar aproximadamente na faixa fisiológica a fim de evitar dor eintolerância local na injeção. Preferivelmente, o pH da composição está naregião de cerca de 4 a 8,5 e, mais preferivelmente na região de cerca de 5,0 a7,5.

As micropartí cuias são usualmente tornadas injetáveissuspendendo-as em um veículo carregador líquido apropriado,fisiologicamente aceitável que é preferivelmente fundamentada em água,apesar de outros solventes biocompatíveis, tais como, etanol, glicerol,propileno glicol, polietileno glicol ou, outros solventes orgânicos podem estarpresentes. Em uma forma de realização mais preferida, o constituinte líquidodo carregador líquido é aquoso e substancialmente livre de solventesorgânicos. Por outro lado, a incorporação de outros excipientes farmacêuticospode ser útil ou necessária para otimizar as propriedades da formulação, taiscomo, a tolerância, a realização, em termos, de liberação de medicamento e, aestabilidade. Isto pode ser certo tanto para as próprias micropartí cuias quantopara o carregador líquido. Cada fase pode conter um ou mais aditivos que sãofisiologicamente toleráveis.

Tipicamente, as micropartículas são recolocadas em suspensãono carregador líquido para formar uma suspensão com um teor de partículasólida de aprox. 1 a 20% em peso e, mais preferivelmente de cerca de 3 a 10%em peso. O tamanho de partícula e a viscosidade do veículo líquido sãopreferivelmente selecionados para permitir a injeção com uma agulharelativamente fina, tal como, com uma agulha de 20 a 22 G. Em uma outraforma de realização preferida, o tamanho de partícula e a viscosidade doveículo líquido são adaptadas para permitir a injeção subcutânea ouintramuscular usando-se uma agulha de 20 a 25 G.

Opcionalmente, as micropartículas são designadas parareconstituição usando-se solução de cloreto de sódio isotônica estéril parainjeção.

Isto pode ser útil para estabilizar o interferon com umexcipiente de estabilização ou combinação de excipientes, tais como, um oumais sais, açúcares, álcoois de açúcar, aminoácidos, peptídeos, proteínas,polímeros, tensoativos, protetores criogênicos, agentes osmóticos, sais detampão, ácidos ou, bases. Alguns destes excipientes também podem ser úteispor outras razões farmacêuticas, tais como, melhorar a tolerância dasmicropartículas ou a suspensão destas. Para modular as propriedades docarregador polimérico ou melhorar sua estabilidade, estes podem ser usadospara incorporar ainda um ou mais plastificantes, agentes formadores de poro,agentes modificadores de liberação ou, antioxidante.

Para evitar a aglomeração das micropartículas quandocolocadas em suspensão em um carregador aquoso, o carregador aquosotambém pode conter um ou mais tensoativos fisiologicamente aceitáveis. Defato, dependendo da apresentação real da forma de dosagem, um excipientenecessário, tal como, um tensoativo pode ser incorporado no carregadoraquoso ou em uma composição seca que compreende as micropartículas.Selecionar um tensoativo apropriado também pode ajudar a garantir que asmicropartículas sejam rápida e facilmente reconstituída, tais como, em nãomais do que cerca de 3 minutos ou, preferivelmente dentro cerca de 60segundos e, mais preferivelmente, em não mais do que cerca de 30 segundos.Os exemplos de tensoativos potencialmente usados incluem poloxâmeros,polissorbatos, fosfolipídeos e, vitamina E-TGS.

Em uma forma de realização adicional, a invenção fornece umconjunto farmacêutico que compreende as micropartículas descritas acima.Neste contexto, um conjunto farmacêutico pode ser definido como umconjunto de pelo menos duas composições que devem ser combinadas eusadas para um propósito terapêutico, preventivo ou, diagnóstico específico.No presente caso, o conjunto compreende um primeiro e um segundocompartimento selado que pode ser membros do mesmo ou de duasembalagens primárias diferentes. O primeiro compartimento compreende acomposição de acordo com a reivindicação 1, na forma substancialmenteseca, considerando que o segundo compartimento compreende um carregadorlíquido aquoso para a reconstituição desta composição seca em umasuspensão de micropartícula, injetável. Opcionalmente, o conjunto contémdois ou mais grupos de cada um do primeiro e do segundo compartimento.

Tipicamente, a composição substancialmente secacompreendida no primeiro compartimento assemelha-se a uma dose única aser injetada e, também, usualmente, o segundo compartimento manterá ovolume de carregador líquido necessário para reconstituir o teor do primeirocompartimento. Presentemente, os menos preferidos são os compartimentosque contém mais do que uma dose a ser injetada de uma vez. Deste modo, épreferido que o contexto de interferon no primeiro compartimento seja decerca de 10 a cerca de 150 MIU e, que o volume de carregador líquido aquosono segundo compartimento que pode ser removido com uma agulha é de cercade 0,3 ml a cerca de 3 ml, em particular de cerca de 0,5 ml a cerca de 2 ml.

O conjunto fornece ainda uma embalagem secundária que éadequada para acomodar o grupo ou os grupos do primeiro e segundocompartimentos.

O primeiro e o segundo compartimentos podem representardiferentes câmaras de um dispositivo único ou uma embalagem primáriaúnica. Por exemplo, podem ser as duas câmaras de uma seringa de câmaradual. A vantagem de seringas de câmara dual preenchidas é que a preparaçãoe a administração são seguras e convenientes assim como não requerem amanipulação de muitos recipientes sob condições assépticas. Uma dasdesvantagens de tais seringas é que são caras para o fornecimento e, nemsempre pode permitir a reconstituição completa e confiável.Alternativamente, os dois compartimentos de um grupo podemser membros de dois recipientes ou embalagens primários, diferentes. Porexemplo, o primeiro compartimento que compreende a composição demicropartícula substancialmente seca pode ser fornecida na forma de umagarrafa ou frasco selados de vidro ou plástico adequados e, o carregadorlíquido aquoso pode ser fornecido em uma garrafa, frasco ou, ampola. Emuma forma de realização adicional, o primeiro compartimento é a câmara deuma seringa e o segundo compartimento é fornecido como uma garrafa,frasco ou, ampola.

Opcionalmente, um dos recipientes é designado como umcartucho par um dispositivo de auto-injeção. Na combinação da composiçãoseca e do carregador líquido aquoso, a suspensão líquida pronta para o uso émantida no cartucho e pode ser carregada no auto-injetor.

Mais uma vez, deve ser enfatizado que cada composiçãosubstancialmente seca no primeiro compartimento ou no carregador líquidoaquoso ou, ambos, pode compreender um ou mais excipientes adicionais, taiscomo, cargas, agentes encorpantes, tensoativos, conservantes, ácidos, bases,sais, açúcares, álcoois de açúcar, aminoácidos, estabilizadores, antioxidantes,polímeros, tampões, polióis, proteínas, tais como albumina sérica humana e,plastificantes.

A composição seca que compreende as micropartículas e ocarregador líquido aquoso é adaptada para produzir uma suspensãoreconstituída que é adequada para injeção, isto é, que é estéril, relativamenteisotônica e isoosmótica e, substancialmente livre de ingredientes que sãotóxicos quando parenteralmente administrados. A viscosidade deve ser baixao suficiente para permitir a injeção com uma agulha de calibre 17 ou superiore, mais preferivelmente com uma agulha de calibre 20 ou superior ou, aindacom uma agulha de calibre 22. Como usado aqui, a capacidade de seradministrado refere-se a propriedades reológicas que permite a injeção com otipo de agulha especificado sem requerer uma força de injeção de mais do quecerca de 25 N. Mais preferivelmente, as propriedades reológicas sãoadaptadas e, um tamanho de agulha selecionado, para possibilitar a injeçãocom uma força de não mais do que cerca de 20 N e, ainda maispreferivelmente com uma força de injeção de não mais do que cerca de 15 N,para permitir a administração também a ser realizada por médicos,enfermeiras ou, pacientes que não são particularmente fortes. Naturalmente,um outro pré-requisito para tais tamanhos de agulha é que o diâmetro dasmicropartículas é suficientemente pequeno e, as micropartículas não seagregam depois da reconstituição. Como mencionado acima, o diâmetromédio ponderado da maioria das micropartículas não deve ser maior do quecerca de 200 um, e mais preferivelmente estar na faixa de cerca de 30 a cercade 175 fim.

As micropartículas da invenção podem ser preparadas porqualquer método conhecido para produzir micropartículas a partir de polímeroanfifílico, tal como, pela secagem por pulverização, coacervação, formação degotícula acústica seguida por dessolvatação, dessecamento a frio porpulverização etc, mais preferivelmente, entretanto, as micropartículas sãoproduzidas por um método com base em emulsão que inclui as etapas de (a)preparar uma emulsão que compreende uma fase aquosa interna quecompreende o ingrediente ativo e, uma fase externa orgânica que compreendeo polímero biodegradável e pelo menos um solvente orgânico; (b) solidificaro polímero biodegradável em micropartículas removendo-se pelo menos umafração do solvente orgânico da emulsão preparada na etapa (a) e, (c) coletar esecar as micropartículas formadas na etapa (b). O projeto do processo básico édescrito, por exemplo, por J.M. Bezemer et al, in J. Control Release 2000, 67(24), 233-248 e 249-260 e, J. Control Release 2000, 66 (2,3), 307-320, adivulgação da qual é incorporada aqui por referência.

Em geral, as micropartículas são formadas de uma soluçãopolimérica orgânica que é dispersa como gotículas em uma fase aquosa ouhidrofilica. A fim de solidificar em partículas, o solvente orgânico deve serpelo menos parcialmente removido da fase dispersa. Isto pode ser realizadopor uma etapa de extração de solvente ou evaporação de solvente ou, umacombinação de ambos. A extração de solvente significa que a fase aquosacontínua é modificada a tal ponto que é capaz de dissolver ou extrair umaparte substancial do solvente orgânico da fase dispersa. Por exemplo, se osolvente orgânico tem alguma miscibilidade moderada em água, uma diluiçãoou aumento de volume da fase aquosa já pode produzir alguma extraçãosubstancial da fase orgânica. Alternativamente, a composição da fase externapode ser modificada pela adição de um ou mais solventes orgânicos que sãomiscíveis com água, mas que podem agir como co-solventes para dissolver eextrair o solvente orgânico da fase dispersa. PorO exemplo, etanol, metanol,acetona, álcool isopropílico podem ser usados como tais co-solventes.

A evaporação do solvente, por um lado não requer a adição dequaisquer componentes para influenciar diretamente a composição e aspropriedades da fase orgânica, mas faz uso da pressão de vapor tipicamentemuito alta do solvente orgânico da fase dispersa em comparação àquela dafase aquosa: pela aplicação de um vácuo e/ou de calor; o solvente orgânicopode ser evaporado. Na obtenção de uma certa concentração polimérica nafase orgânica, o polímero solidifica e as micropartículas são formadas. Éimportante observar que qualquer evaporação de solvente da fase dispersaincluirá, usualmente, a presença do mecanismo de extração de solventetambém.

A fim de incorporar os compostos hidrofílicos ativos nasmicropartículas, pode não ser aconselhável carregar a fase orgânica com oingrediente ativo diretamente. Em primeiro lugar, isto pode levar a eficiênciade incorporação insatisfatória assim como os compostos hidrofílicos sedividirão na fase aquosa quando a emulsão é formada. Em segundo lugar,muitos compostos de interesse, especialmente peptídeos e proteínas, taiscomo, os interferons que devem ser incorporados de acordo com a presenteinvenção, são mais sensíveis aos solventes orgânicos e podem tornar-seinativos. Portanto, é preferido que o interferon seja incorporado na forma deuma solução aquosa que é emulsificada em uma solução orgânica docopolímero de bloco para formar uma emulsão "água em óleo", que ésubseqüentemente emulsificada em uma outra fase aquosa para formar umaemulsão dupla "água-em-óleo-em-água" (a/o/a). Quando se realizar a etapa deextração de solvente ou de evaporação de solvente como descrito acima, afase aquosa interna que compreende o interferon torna-se encapsulada nasmicropartículas poliméricas.

Um dos solventes orgânicos preferidos presentemente paradissolver o copolímero de bloco e para fornecer a fase orgânica da emulsãoo/a ou da emulsão dupla a/o/a é o diclorometano. O teor de polímero da faseorgânica pode variar de acordo com a composição polimérica específica e o(s)solvente(s) orgânico(s) que são realmente usados e, podem variar de cerca de1 a cerca de 300 mg/ml. Mais preferivelmente, o teor de polímero deve estarna faixa de cerca de 50 a cerca de 250 mg/ml ou ainda de cerca de 100 a cercade 150 mg/ml no caso que o diclorometano é usado como solvente.

O ingrediente ativo, isto é, o interferon, é preferivelmenteincorporado na forma de uma solução aquosa que é emulsificada na soluçãopolimérica orgânica. A solução de interferon, aquosa pode ser estabilizada porexcipientes, tais como, por ácidos, bases, ou sais de tampão para conseguir emanter um certo valor de pH ou, por agentes osmóticos, tais como, um oumais sais, açúcares, álcoois de açúcar, aminoácidos etc. Alguns destesexcipientes também podem ser valiosos para estabilizar os efeitos, exceto osrelacionados com osmolalidade, entretanto, foi observado que o interferon e,em particular os alfa-interferons, podem ser facilmente incorporados usando-se a técnica de emulsão dupla a/o/a usando-se uma solução de interferonaquosa, simples como a fase de emulsão recôndita que não contém nenhumexcipiente adicional.

O teor de interferon da fase aquosa interna obviamenteinfluenciará o teor de interferon das micropartículas e, portanto pode serselecionado de acordo com as propriedades de micropartículas desejadas. Nocaso dos alfa-interferons, por exemplo, o teor pode variar de cerca de 1 acerca de 100 mg/ml e, mais preferivelmente de cerca de 10 a cerca de 50mg/ml.

A razão do volume da fase aquosa interna para aquela da faseorgânica também terá um impacto no teor do ingrediente ativo dasmicropartículas. Além disso, pode influenciar outras propriedades importantesdas partículas, tais como, sua porosidade e perfil de liberação.Conseqüentemente, a razão deve ser cuidadosamente ajustada àscaracterísticas do produto desejado em cada caso individual. Se os aspectosdas fases aquosa interna e orgânica são selecionados de acordo com aspreferências debatidas acima, uma razão de volume de cerca de 1: 3 a cercade 1: 15 (fase aquosa interna: fase orgânica) foi observada ser útil. De acordocom uma das formas de realização preferidas, a razão de volume éselecionada de cerca de 1: 5 a cerca de 1: 10.

Para estabilizar a emulsão dupla a/o/a, pode ser útil incorporarum ou mais estabilizadores que tenham propriedades de tensoativo na faseaquosa externa. Os estabilizadores úteis podem ser moléculas anfifílicaspequenas, tais como, tensoativos iônicos ou não iônicos ou detergentes ou,polímeros tensoativos. Por exemplo, foi observado que álcool polivinílico éum aditivo útil capaz de estabilizar a emulsão sem ter quaisquer efeitosprejudiciais substanciais no método de preparação ou no produto final. Osálcoois polivinílicos úteis podem ter um peso molecular médio que varia decerca de 10.000 a cerca de 1 milhão e, tem um grau de hidrólise de cerca de80 a cerca de 99% e, mais preferivelmente de cerca de 85 a cerca de 90%.Alternativamente, polivinil pirrolidona ou polissacarídeos de tensoativopodem ser usados. O teor do estabilizador na fase externa depende de suanatureza química, bem como na natureza e volume relativo da fase orgânicadispersa. No caso de álcoois polivinílicos, por exemplo, pode variar de cercade 0,1 a cerca de 10% em peso e, mais preferivelmente de cerca 0,5 a cerca de5% em peso, no caso de polivinil pirrolidona, as faixas úteis são de cerca de 1a cerca de 30% em peso e, mais preferivelmente de cerca de 5 a cerca de 25%em peso.

A fase aquosa externa também pode conter excipientesadicionais, tais como, agentes tamponantes, agentes osmóticos ou, co-solventes. Os co-solventes, tais como, etanol ou metanol podem ser usadospara modular a hidrofilicidade da fase aquosa e melhorar qualquer etapa deextração de solvente do processo de preparação. Os agentes osmóticos, porexemplo, podem ser selecionados do grupo de sais, açúcares, álcoois deaçúcar, oligossacarídeos, glicóis, outros álcoois e, aminoácidos. Em uma dasformas de realização preferidas, o cloreto de sódio é usado como um agenteosmótico. Também deve ser observado que qualquer sistema de tampãopresente na fase externa induzirá alguma pressão osmótica.

Pode ser útil ajustar a osmolalidade da fase externa a um valorque é igual a ou, mais alto do que aquele da fase aquosa recôndita da emulsãodupla. Deste modo, a difusão osmoticamente conduzida de água da faseaquosa externa à fase aquosa interna pode ser largamente evitada, foiobservado que tal processo de difusão pode aumentar a porosidade dasmicropartículas formadas pela extração de solvente e/ou evaporação desolvente em uma etapa subseqüente. Mais preferivelmente, a osmolalidade dafase aquosa externa é ajustada para exceder substancialmente aquela da faseaquosa recôndita, tais como, pela incorporação de cloreto de sódio em umnível de cerca de 3 a cerca de 6% em peso.

O volume relativo da fase externa deve ser selecionado acimado volume mínimo necessário para a incorporação das duas outras fases, e,deste modo, depende também da natureza e composição de todas as fases, emparticular, da fase orgânica e a fase aquosa externa. Acima do volumemínimo, o volume real da fase aquosa externa é importante principalmente emvista da extração de solvente subseqüente e/ou processo de evaporação desolvente. Usualmente, o volume da fase aquosa externa é maior do que aqueleda emulsão a/o para ser incorporado neste, por exemplo, pode ser pelo menosduas vezes tão grande quanto o volume da emulsão a/o. Mais preferivelmente,é de cerca de 5 a cerca de 40 ou 50 vezes maior.

A preparação da emulsão a/o interna pode ser realizadausando-se equipamento convencional de elevada taxa de cisalhamento, talcomo, dispositivos de rotor-estator de alta velocidade, por exemplo, do tipoUltra Turrax, se o ingrediente ativo for relativamente estável para a força decisalhamento. Para emulsificar tal emulsão em uma fase aquosa quecompreende um composto tensoativo, pode ser necessário aplicar corte altoou agitação: equipamento de agitação convencional pode ser suficiente. Apreparação das emulsões a/o e a/o/a é preferivelmente conduzida emtemperatura ambiente ou, em temperaturas abaixo da temperatura ambiente,tais como, entre cerca de 0o C e cerca de 25° C e, em pressão normal.

Obviamente, o método de emulsificação usado com influência do diâmetromédio resultante e distribuição da fase dispersa e, o tamanho e a distribuiçãode tamanho das micropartícuias. Outros fatores que influenciam estesparâmetros são as composições das fases respectivas, em particular, anatureza do solvente orgânico e o tipo e teor do estabilizador tensoativo nafase externa.

A solidificação do polímero dissolvido na fase orgânica paraformar micropartículas pode ser induzido pela evaporação de solvente comoum mecanismo primário. Isto pode ser realizado aumentando-se a temperaturada emulsão dupla a/o/a sob agitação e/ou, pela aplicação de um vácuo.Mais preferivelmente, entretanto, a formação demicropartícuias é induzida por uma etapa que inclui a extração de solvente.Para fazer isto, a fase externa da emulsão dupla a/o/a é diluída com soluçãoaquosa adicional que, opcionalmente, pode ser similar ou mesmo idêntica emsua composição àquela da fase aquosa externa. Se o teor do estabilizador dafase de emulsão aquosa externa é suficientemente alta, a solução aquosa que éadicionada para induzir o processo de extração de solvente pode não precisarconter qualquer outro estabilizador. Por outro lado, é recomendado que asolução aquosa que é adicionada contenha um ingrediente osmoticamenteativo, tal como, um ou mais sais, açúcares, álcoois de açúcar,oligossacarídeos, glicóis, outros álcoois e, aminoácidos, a fim de manterqualquer gradiente osmótico entre as fases aquosas internas e externas daemulsão dupla e, evitar a difusão de água na fase interna. Opcionalmente, asolução aquosa a ser adicionada também pode conter um co-solvente, taiscomo, metanol ou etanol ou, um agente tamponante.

O volume da solução aquosa que é adicionado à emulsão duplaé tipicamente pelo menos tão grande quanto aquele da emulsão antes deconduzir a etapa de extração de solvente. Mais preferivelmente, o volume é decerca de 1 a 5 vezes aquele da emulsão dupla. Pode ser aconselhável adicionarlentamente a solução sob agitação constante para evitar homogeneidade localdentro do recipiente. Opcionalmente, a temperatura pode ser elevada e/oualgum vácuo aplicado para remover um pouco do solvente orgânico extraído.Depois da adição da solução aquosa, a agitação pode ser continuada poralgum tempo levando em consideração uma extração de solvente maisextensiva da fase orgânica e, talvez também para permitir a difusão de água apartir da fase aquosa interna da emulsão até a fase externa.

Depois que as micropartículas são solidificadas, podem sercoletadas, tais como, por centrifugação, filtração ou, peneiração. Acentrifugação repetida, filtração ou, peneiração depois de recolocar emsuspensão as micropartículas em um pouco de solução aquosa fresca, talcomo, tampão, devem ser conduzidas para remover substancialmente todos ossolventes orgânicos remanescentes e todos os compostos solúveis cujapresença nas micropartículas não é desejada. Opcionalmente, asmicropartículas podem ser avaliadas para separar uma fração de tamanho departícula desejada.

Depois da lavagem, as micropartículas podem ser secadas parao armazenamento. Um método de secagem preferido é o dessecamento a frio,por exemplo, as micropartículas podem ser congeladas em nitrogênio líquidoe subseqüentemente secadas sob vácuo para sublimar a água residual.Usualmente, o processo de secagem compreende uma primeira fase desecagem que é conduzida, sob temperaturas abaixo de 0o C seguida por umafase de secagem secundária em temperaturas ambiente ou mesmo mais altas.

As micropartículas secadas podem ser misturadas com outrosexcipientes opcionais como descrito acima para chegar à composição dainvenção. Por exemplo, uma mistura em pó que compreende asmicropartículas e um ou mais excipientes em estado sólido selecionados dogrupo de tensoativos, agentes de recolocação em suspensão, agentesosmóticos e, agentes tamponantes podem representar a composição de acordocom reivindicação 1. Preferivelmente, as micropartículas e os excipientes sãofornecidos na forma estéril e, a mistura é conduzida assepticamente. Talmistura em pó pode ser assepticamente enchidas em garrafas ou frascos.Como mencionado acima, as garrafas ou frascos podem ser combinados comum carregador líquido aquoso para reconstituir o pó com conjuntosfarmacêuticos.

Em uma forma de realização adicional, a composição dainvenção é fornecida na forma de uma formulação líquida injetável. Nestaforma de realização, o interferon e o copolímero de bloco são dissolvidos oudispersos em um carregador líquido que deve ser fisiologicamente aceitável.Na administração parenteral, a solução ou dispersão polimérica formará umdepósito no músculo ou tecido subcutâneo a partir do qual o interferon serálentamente liberado. Esta forma de realização é fundamentada na descobertaque os copolímeros de bloco da composição da invenção são, de fato, capazesde formar géis macroscópicos em um meio fisiológico.

Preferivelmente, a formulação líquida é composta e adaptadapara ser capaz de formar um gel depois da injeção. Um gel pode ser definidoem virtude de suas propriedades reológicas. Como usado aqui, um gel é ummaterial semi-sólido que se comporta como um sólido no esforço da força decorte baixa e como um fluido viscoso quando a força de corte excede umlimiar que é definido como o ponto de rendimento. Em outras palavras, umgel é um sistema com uma tensão de rendimento limitado, usualmente muitopequeno.

Os géis injetáveis e géis de modelação in situ como formas dedosagem de liberação controlada foram descritos por A. Hatefi et al, J.Control. Rei. 80 (2002), 9-28, cujo documento é incorporado aqui porreferência. Há várias abordagens gerais para a formulação de um gel injetável,a maior parte dos quais são fundamentados no uso de carregadorespoliméricos formadores de gel. Por exemplo, certos polímeros podem formargéis que são responsivos a certas condições do ambiente, tais como, pH outemperatura. Por exemplo, os sistemas de sol-gel foram descritos os quaisestão presentes como sois (soluções líquidas, coloidais, viscosas) em um pHrelativamente baixo ou em temperatura ambiente. Quando injetado, o pH élentamente tamponado pelos fluidos fisiológicos a um valor mais neutro,resultando na solidificação e na formação de gel. Em um sistema temperatura-responsivo, a temperatura eleva-se depois da injeção a um nível fisiológicoconduzindo à geleificação do sistema.

Entretanto, mais preferivelmente, a solução injetávelcompreende um solvente orgânico não aquoso, biocompatível, ou co-solventeque fornece, in vitro, uma solução ou suspensão líquida, mas que, depois dainjeção, difunde-se lenta e continuadamente do copolímero de bloco, que éinsolúvel, mas capaz de formar gel em um ambiente aquoso.

O solvente ou co-solvente orgânico pode ser selecionadodaqueles solventes orgânicos que são capazes de dissolver o(s) copolímero(s)de bloco e que podem ser considerados biocompatíveis em vista do volume efreqüência da administração pretendida. Os exemplos de tais solventesincluem álcool de benzila, benzoato de benzila, diacetina, tributirina, citratode trietila, citrato de tributila, citrato de acetil trietila, citrato de acetil tributila,trietilglicerídeos, fosfato de trietila, ftalato de dietila, tartarato de dietila,polibuteno, glicerina, etileno glicol, polietileno glicol, octanol, lactato de etila,propileno glicol, carbonato de propileno, carbonato de etileno, butirolactona,oxido de etileno, oxido de propileno, N-metil-2-pirrolidona, 2-pirrolidona,glicerol, formal, acetato de metila, acetato de etila, metil etil cetona,dimetilformamida, sulfóxido de dimetila, tetraidrofurano, caprolactama,decilmetilsulfóxido, ácido oléico, l-dodecilazaciclo-heptan-2-ona e misturasdestes.

Em uma das formas de realização preferidas, o solvente nãoaquoso representa um ou mais membros do grupo que consiste de DMSO,NMP, álcool benzílico, tetraidrofurano, acetato de etila e benzoato de benzila.

O teor de copolímero de bloco da composição injetável líquidaé tipicamente de cerca de 5% em peso a cerca de 60% em peso, dependendoprincipalmente do polímero ou polímeros precisos que são realmente usados.Mais preferivelmente, o teor de polímero é de cerca de 15 a cerca de 45% empeso.

Os copolímeros de bloco particularmente adequados pararealizar este aspecto da invenção compreende um teor médio de PEGTrelativamente alto, tal como de cerca de 70 a cerca de 98% em peso e maispreferivelmente de cerca de 75 a cerca de 95% em peso. Presentemente osmais preferidos são os copolímeros de bloco que têm um teor de PEGT médiode cerca de 80 a cerca de 90% em peso.

O peso molecular médio dos segmentos de PEG dos blocos dePEGT é tipicamente de cerca de 300 a cerca de 6.000 e mais preferivelmentede cerca de 600 a cerca de 2.000.

Opcionalmente, a composição pode compreender mais dois oumais um copolímero de bloco que diferem em seu teor de PEGT, no pesomolecular dos segmentos de PEG ou, em ambos destes parâmetros. Em umaforma de realização preferida, a composição compreende um ou doiscopolímeros de bloco.

Novamente, a composição pode compreender um ou maisexcipientes adicionais, tais como, um ou mais co-solventes, tensoativos,conservantes, ácidos, bases, sais, açúcares, álcoois de açúcar, aminoácidos,estabilizadores, antioxidantes, agentes osmóticos e polímeros. O fundamentológico para a incorporação de quaisquer destes excipientes pode ser o mesmodaquele debatido mais acima no contexto de composições com base emmicropartícuias. Alternativamente, um excipiente pode servir para qualquerfunção tipicamente associada com formulações injetáveis líquidas.

Tipicamente, o volume da formulação líquida é de cerca de 0,3a cerca de 3 ml por dose a ser injetada e, mais preferivelmente de cerca de 0,5a cerca de 2 ml.

A formulação injetável da invenção é tipicamente designadapara injeção intramuscular ou subcutânea. Estas vias de administraçãonecessitam de certas propriedades relacionadas com qualidade que,geralmente, são requeridas para produtos parenterais, tais como, esterilidade.Desse modo, é preferido que a formulação líquida injetável seja estéril e reúnatodos os requerimentos de formas de dosagem parenteral como especificadonas farmacopéias principais, tal como a United States Pharmacopoeia (USP)corrente.A formulação líquida injetável pode ser preparadadissolvendo-se o(s) copolímero(s) de bloco no solvente biocompatível, nãoaquoso, opcionalmente, em um temperatura elevada. O composto ativo, isto é,o interferon, pode ser adicionado a esta solução polimérica como um pó seco,tal como um pó liofilizado, sob agitação. Preferivelmente, o interferon não éincorporado na forma de uma solução aquosa, a fim de evitar a presença deágua na formulação.

Como uma forma de realização adicional, a invenção fornece acomposição de acordo com a reivindicação 1, na forma de um implante sólidomacroscópico. Um implante pode ser definido como um sólido, forma dedosagem substancialmente seca que é diferente das micropartículas em queum implante contém tipicamente uma dose única do ingrediente ativo dentrode uma unidade dosagem única ou, apenas dentro de algumas unidades.Usualmente a dimensão maior de um implante está na faixa de alguns milhõesou mais, considerando que as micropartículas são administradas comounidades múltiplas e têm dimensões abaixo da escala milimétrica.

Em uma das formas de realização preferidas, o implante éformado como um bastão. Isto é particularmente vantajoso em termos de umaadministração "menos invasiva" que evita amplamente o dano tecidual. Alémdisso, os artigos na forma de bastão polimérico podem ser eficientementepreparados pela extrusão de fusão seguido pelo corte do extrusado embastões. Para realizar tal extrusão, o(s) copolímero(s) de bloco, o interferon eos excipientes adicionais devem ser fornecidos na forma de pó ou grânuloseco e homogeneamente misturados. Subseqüentemente, a mistura éalimentada em uma extrusora de parafuso único ou duplo e, extrusada em umfilamento sólido aderente que é então cortado em bastões individuais.

A composição do copolímero de bloco pode ser selecionadacomo debatido no contexto das micropartículas mais acima. Um tipo deexcipiente que pode ser particularmente útil em implantes é um plastificante,que pode diminuir a faixa de fusão ou o ponto de transição vítrea do(s)polímero(s) até a temperatura que não tem nenhum impacto negativo naestabilidade do interferon incorporado. Os plastificantes potencialmente úteisincluem glicerol, propileno glicol e, polietileno glicol.

Sem restrição se a composição é fornecida na forma de umaformulação com base em micropartícuias um líquido injetável ou gel ou, umimplante sólido, o uso farmacêutico na preparação de um produtomedicamentoso para o controle de doenças e condições que podem sertratadas ou, cuja progressão pode ser prevenida ou desacelerada, pode serprevenida ou desacelerada pela administração de um interferon e, maispreferivelmente, pela administração de um alfa interferon. Os exemplosdestas doenças e condições hepatite B aguda e crônica e hepatite C aguda ecrônica, leucemia de célula pilosa, leucemia mielógena aguda e crônica,mieloma múltiplo, linfoma folicular, tumor carcinóide, melanoma maligno,condyloma cuminata, SARS e sarcoma de Kaposi, tal como sarcoma deKaposi relacionado a AIDS.

A composição da invenção fornece vantagem sobre asformulações de interferon convencionais para a injeção de modo que afreqüência de injeção pode ser amplamente reduzida em virtude de suascaracterísticas de liberação controlada, tal como para uma injeção a cada 2 ou4 semanas em vez de várias injeções por semana. Como uma conseqüência, oconforto e a complacência do paciente são aumentados e, os custos associadoscom injeções freqüentes potencialmente reduzidos. Com referência a outrossistemas de liberação controlada poliméricos para injeção ou implantação, apresente invenção fornece excelente compatibilidade com interferons,controle de liberação melhorado sem interrupção do efeito, descarga de doseou, degradação e erosão polimérica auto-catalítica. Além disso, os sistemas deliberação da invenção são fisiologicamente bem tolerados, sem produzirqualquer efeito colateral relacionado com carregador, significante.Sem desejar estar ligado a uma teoria particular, o bomcomportamento de liberação dos sistemas de liberação da invenção pareceestar relacionado com o fato que o composto ativo é liberado principalmenteatravés de difusão e, não através de erosão como no caso de muitos dossistemas de liberação com base em poli(lactídeo) e/ou -(glicolídeo)presentemente conhecidos. Usando-se copolímeros de bloco anfifílicos, nãoexiste nenhuma degradação polimérica auto-catalítica envolvida no processode liberação. Em contraste aos sistemas de liberação conhecidos, os co-polímeros de bloco não produzem um microambiente ácido que é hostil acompostos biológicos sensíveis. Por outro lado, os blocos hidrofílicos doscopolímeros de bloco provavelmente fornecem um microambiente hidrofílicoque realça a estabilidade in situ de tais compostos biológicos sensíveis. Emparticular, parece que os interferons - especialmente os interferons da famíliaalfa - são estabilizados em um estado não agregado no microambientefornecido pelos copolímeros de bloco anfifílicos nos sistemas carregadores dainvenção.

Especialmente no caso de micropartículas, também acredita-seque a porosidade relativamente baixa das partículas formadas a partir doscopolímeros de bloco é uma das causas da interrupção do efeito baixoobservado nas composições da invenção.

As formas de realização adicionais, aplicações e vantagens dainvenção tornar-se-ão óbvias a partir dos seguintes exemplos não limitantesou, podem ser facilmente deduzido pelas pessoas habilitadas no campo daliberação de medicamento na base desta descrição.

Exemplo 1: Preparação de uma emulsão dupla a/o/a contendo alfa-2binterferon

Alfa-2b interferon (a-2b IFN) não glicosilado, recombinante,uma proteína composta de 165 aminoácidos, que tem um peso molecular deaprox. 19.000 Da e um ponto isoelétrico de cerca de 6,0, foi obtido na formade uma solução aquosa com uma concentração de proteína de aprox. 10mg/ml. O copolímero de bloco de 80% em peso de PEGT e 20% em peso dePBT com segmentos de PBG que têm um peso molecular médio de 1.500 foiobtido de IsoTis, Bilthoven, The Netherlands. Uma solução de 1 g depolímero em 7 ml de diclorometano foi preparada. Para preparar uma emulsãoa/o, 1 ml da solução alfa-2b IFN foi adicionada à solução polimérica sobagitação, seguida por homogeneização ultra turrax a 19.000 rpm por aprox. 34segundos.

Duas emulsões duplas a/o/a diferentes foram preparadas peladecantação de duas emulsões a/o - preparadas como descrito acima -separadamente em 50 ml de (a) um tampão de PBS aquoso contendo 4% dePVA (p/v) (aprox. 130.000, grau de hidrólise aprox. 87%) ou, (b) umasolução aquosa de cloreto de sódio (5% p/v) também contendo 4% de PVA(p/v) sob agitação a 700 rpm.

Exemplo 2: Preparação de micropartículas pela extração e evaporação dosolvente

As emulsões duplas preparadas de acordo com o Exemplo 1foram ainda processadas para preparar micropartículas. Para cada uma dasduas emulsões duplas, 100 ml de tampão de PBS aquoso foi lentamenteadicionada sob agitação contínua a 700 rpm. A solução de PBS adicionadaconduziu a uma expansão da fase aquosa externa das emulsões duplas.Subseqüentemente, a agitação foi continuada por aprox. 1 hora para extrair amaior parte do diclorometano na fase aquosa externa e, para a solidificação dopolímero na fase orgânica. Subseqüentemente, as micropartículassolidificadas foram centrifugadas a 2.500 rpm e em temperatura ambiente. Osobrenadante foi rejeitado e, o grânulo foi recolocado em suspensão emtampão de PBS fresco para ser centrifugado novamente. O procedimento foirepetido três vezes. Finalmente, as micropartículas foram congeladas emnitrogênio líquido e secadas por congelamento durante aprox. 12-24 horas. Aeficiência da encapsulação foi determinada ser de cerca de 85% para asmicropartícuias da emulsão dupla a/o/a; cuja fase externa continha 5% decloreto de sódio e, aprox. 25% para as outras séries. As micropartículas foramexaminadas pela microscopia de elétron (SEM) e observada ser asperamenteesférica e predominantemente na faixa de tamanho de cerca de 50 a cerca de120 um.

Exemplo 3: Liberação de alfa-2 interferon das micropartículas in vitro

Para testar seu comportamento de liberação, aprox. 15 mg decada série das micropartículas preparadas de acordo com o Exemplo 2 forampesados em frascos de 1,5 ml em triplicata. Para cada frasco, 1 ml de tampãode PBS foi adicionado. Os frascos foram mantidos em um banho de água a37° C. Em tempos de amostragem, as micropartículas foram centrifugadas a1.000 rpm por 2 minutos em temperatura ambiente. As amostras de 700 ulforam retiradas e recolocadas por tampão de PBS fresco. A quantidade dealfa-2b TFN em cada amostra foi determinada com um ensaio de proteínatotal de ácido bichinchônico Micro.

Foi observado que ambas as séries demonstraram claramentecaracterísticas de liberação sustentada. A série obtida da emulsão dupla a/o/acuja fase externa continha 5% de cloreto de sódio mostrou uma interrupção deefeito inicial menor do que cerca de 10%, enquanto que as outras séries têmuma interrupção de efeito de cerca de 20%. Ambas as séries liberaram 50% deseu teor de interferon dentro de cerca de 3 - 4 dias e, 75% dentro de cerca de 7- 8 dias. Depois de 14 dias, aprox. 85 - 90% da dose incorporada foi liberado.

Exemplo 4: Preparação de uma composição que compreende micropartículasque incorporam alfa-2b IFN truncado

Uma composição que compreende micropartículas foipreparada como segue, usando-se condições assépticas. Uma quantidade de 6g de um copolímero de bloco estéril de 77% em peso de PEGT e 23% empeso de PBT com segmentos de PEG que tem um peso molecular médio de1.500 foi pesada e dissolvida em 54 g de diclorometano estéril. A soluçãopolimérica orgânica foi combinada com 5,5 ml de uma solução aquosa estérilque compreende uma mistura de moléculas de alfa-2b INF truncado determinal N que tem, em média, um comprimento de cerca de 158 resíduos deaminoácido, uma atividade específica de cerca de 0,25 a 0,35 MIU por g e,uma concentração de interferon de cerca de 10 mg/ml. Um dispositivoultraturrax foi usado para obter uma emulsão homogênea de água em óleo.

Subseqüentemente, a emulsão foi combinada sob agitação com445 g de uma solução aquosa estéril de álcool polivinílico (4% p/v) quetambém continha cloreto de sódio (5% p/v). Por meio disso, uma emulsãodupla a/o/a foi obtida em que a solução de álcool polivinílico formou a faseaquosa externa.

Na etapa seguinte, as micropartículas foram formadas eendurecidas pela remoção de solvente da fase orgânica, que foi concluída poruma combinação de extração de solvente e evaporação de solvente. Certaquantidade da extração de solvente foi conduzida pela adição de tampão dePBS estéril à fase contínua da emulsão dupla e, uma outra porção dediclorometano foi evaporada soprando-se nitrogênio estéril em uma taxa defluxo de cerca de 5-10 L/minuto sobre a superfície da emulsão dupla porcerca de 24 horas.

As micropartículas foram coletadas e lavadas com solução demanitol estéril (26,7 g/L) e recolocadas em suspensão em um volumeapropriado de solução de manitol para ajustar a osmolalidade a um valorfisiologicamente tolerável e para permitir formação de torta, adequada naliofilização. As alíquotas da suspensão foram enchidas em frascos de vidroestéreis e secadas por congelamento, resultando em liofilisato branco. Osfrascos foram fechados com tampas plásticas e tampas de alumínio.

O teste analítico mostrou que o diâmetro médio numérico daspartículas foi de cerca de 83 um e, do teor de interferon foi concluído que aeficiência da encapsulação foi mais alta do que cerca de 90%. Odiclorometano residual foi substancialmente abaixo de 600 ppm. Osmicrógrafos eletrônicos das micropartículas revelaram pouca porosidade; emparticular, a maior parte das partículas não têm nenhum poro que tem umdiâmetro de mais do que cerca de 2-5 um.

Exemplo 5: Teste in vivo de micropartículas que compreendem um alfa-2bIFN truncado

As composições que compreendem micropartículas preparadasem analogia ao Exemplo 4 foram testadas quanto ao seu desempenho in vivoem hamsters e macacos. As composições liofilizadas sólidas foram colocadasem suspensão em uma solução aquosa estéril de carboximetil celulose desódio (0,1% p/v), opcionalmente contendo ainda manitol para ajustar aosmolalidade da fase líquida. As quantidades de solução aquosa foramcalculadas, com base no teor de ingrediente ativo e na dose a seradministrada, para produzir volumes de injeção de 0,5 a 1,0 ml poradministração única. Cada um dos dez hamsters recebeu uma dose de 0,99mg/kg do composto ativo administrado por injeção s.c. a cada 7 dias e, umoutro grupo de dez hamsters recebeu 3,46 mg/kg a cada 7 dias. As amostrasde soro foram obtidas dos animais em intervalos selecionados, nos quais asamostras foram armazenadas na forma congelada e mais tarde analisadasquanto ao seu teor de interferon. Todos os animais pareceram tolerar otratamento satisfatoriamente.

Com base nos perfis de soro, os perfis de liberação in vivo docomposto ativo foram calculados. Em um experimento separado, os perfis deliberação in vitro foram determinados como descrito no Exemplo 3. Umacomparação dos perfis de liberação in vivo e in vitro mostrou que há uma boacorrelação entre os respectivos perfis, tanto na forma quanto na duração deliberação e, que o comportamento de liberação in vitro parece ser umexcelente prognosticador do desempenho in vivo das composições. Não hánenhuma interrupção de efeito significante in vivo ou in vitro.

A Figura 1 mostra a média calculada em perfis de liberação invivo do grupo de hamster de dose baixa, o grupo de dose alta e, o respectivoperfil de liberação in vitro, normalizado a 100% da liberação total.

Em uma outra série de experimentos, as amostras da mesmacomposição foram administradas subcutaneamente aos macacos machos efêmeas. A dose de ingrediente ativo foi de 180 ug por animal e, o mesmolíquido de reconstituição foi usado para dispersar a composição a um volumede 0,5 a 1,0 ml por injeção. Começando do tempo de injeção, as amostras desoro foram obtidas em intervalos de tempo selecionados durante um períodode 14 dias. Novamente, as concentrações de soro foram usadas para calcularos perfis de liberação in vivo, que foram então comparados aos perfis deliberação in vitro determinados a partir de outras amostras da mesma série dacomposição de acordo com o método descrito no Exemplo 3.

Em resultado, a correlação entre os perfis de liberaçãorespectivos foi notável. Tanto a composição in vitro quanto in vivo pareceuliberar seu teor de interferon constantemente durante um período de 14 dias,sem qualquer interrupção de liberação substancial.

A Figura 2 mostra a média calculada no perfil de liberação invivo e o respectivo perfil de liberação in vitro, normalizado a 100% daliberação total.

Exemplo 6: Pureza do interferon liberado

As amostras do interferon liberado obtido da liberação in vitroremanescente como descrito nos Exemplos 4 e 5 foram analisadas pelacromatografia de exclusão de tamanho de alto desempenho para determinar afração de interferon que foi liberada na forma monomérica. Notavelmente, foiobservado que menos do que 1% do composto ativo de liberação estava naforma de dímeros ou agregados maiores, apesar de interferons alfa seremconhecidos para aglomerar facilmente. Deste modo, a composição demicropartícula aparentemente contribuiu para a estabilização substancial dointerferon.

Exemplo 7: Preparação de composição de película que incorpora copolímerode bloco e beta interferon

Uma quantidade de 0,5 g de um copolímero de bloco de 80%em peso de PEGT e 20% em peso de PBT com segmentos de PEG que temum peso molecular médio de 2.000 foi pesada e dissolvida em 3,5 ml dediclorometano. 1,94 mg de beta interferon liofilizado foi disperso na soluçãousando-se um ultraturrax. A dispersão foi fundida em placas de vidro, usando-se um aplicador de película ajustável. Depois da evaporação dodiclorometano, as películas foram obtidas e extraídas da placa de vidro. Aspelículas foram secadas ainda na coifa por algumas horas.

As amostras de cerca de 1,7.7 cm2 foram cortadas das películase incubadas em uma solução aquosa de tampão de acetato de pH 3,5 (1 ml) a37° C em um banho de água de agitação. Depois de cada 24 horas deincubação, o volume total do meio de liberação foi refrigerado e as amostrasforam ainda incubadas. As alíquotas do tampão retirado foram usadas para aanálise HP-SEC, que revelou que cerca de 83% dos beta-interferonsincorporados foi liberado na forma monomérica, não agregada. A duração deliberação depende da espessura das películas.

Exemplo 8: Preparação e propriedades de liberação de solução de copolímerode bloco de auto-geleificação que contém alfa-2a IFN

O alfa-2a interferon e um copolímero de bloco a PEGT/PBTcontendo 85% em peso de PEGT com segmentos de PEG que têm uma massamolecular média de cerca de 1.000 foram obtidos na forma seca. O polímerofoi dissolvido em uma mistura de benzoato de benzila e benzil álcool (98:2)em uma concentração de 20% em peso. O interferon foi adicionado na formade pó em uma concentração de 4% em peso e completamente misturado coma solução polimérica. A mistura resultante foi enchida em uma seringa comuma agulha e injetada na solução de tampão de PBS a 37° C. Na injeção, umgel irregular precipitou-se lentamente. O gel foi mantido a 37° C sob agitaçãocontínua. As amostras foram retiradas em intervalos de tempo apropriados erecolocadas pela solução de tampão de PBS fresco. As amostras foramanalisadas quanto ao seu teor de alfa-2b IFN e confirmou um tempo deliberação de mais do que cerca de 14 dias (90% de liberação).

Claims (38)

1. Composição farmacêutica para liberação controlada,caracterizada pelo fato de que compreende um polímero biodegradável e umou mais compostos ativos selecionados do grupo de interferons, em que opolímero biodegradável é um copolímero em bloco construído a partir detereftalato de poli(etileno glicol) (PEGT) e poli(tereftalato de butileno) (PBT).

2. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizadapelo fato de que o interferon é selecionado do grupo de alfa-interferons,preferivelmente do grupo que consiste de IFN-alfa, IFN-alfa-2a IFN-alfa-2b,IFN-alfacon-1, IFN-alfa-2a peguilado, IFN-alfa-2b peguilado, IFN-alfa-2atrancado, IFN-alfa-2b trancado, proteínas de fusão de IFN-alfa e albumina eseus derivados funcionais.

3. Composição de acordo com a reivindicação 1 ou 2,caracterizado pelo fato de que o interferon é um interferon recombinanteproduzido a partir de células ou organismos geneticamente projetados, em queas células ou organismos são preferivelmente selecionados de mamífero,inseto, bactérias, leveduras, fungos e células vegetais e organismossuperiores.

4. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que é adaptada paraliberar o composto ativo por um período de pelo menos 7 dias epreferivelmente, por pelo menos 10 dias.

5. Composição farmacêutica para a liberação controlada,caracterizada pelo fato de que compreende um polímero biodegradável e umou mais compostos ativos selecionados do grupo de interferons, em que pelomenos cerca de 80% do composto ativo são liberados na forma não agregadamonomérica.

6. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que uma dose única dacomposição é adaptada para liberar pelo menos cerca de 5 MIU (unidadesinternacionais de milhão) do composto ativo por 14 dias, o dito períodocomeçando com o tempo de administração da dose única.

7. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que é estéril eformulada para ser adequada à administração parenteral, em particular para ainjeção subcutânea ou intramuscular ou implante.

8. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações, caracterizada pelo fato de que compreende micropartículasque compreende o composto ativo e o polímero em bloco.

9. Composição de acordo com a reivindicação 8, caracterizadapelo fato de que a maioria das microcápsulas são substancialmente isentas deporos tendo um diâmetro maio do que cerca de 5 um.

10. Composição de acordo com a reivindicação 8 ou 9,caracterizado pelo fato de que o copolímero em bloco compreende de cercade50 a cerca de 95% em peso de PEGT e preferivelmente de cerca de 70 acerca de 85% em peso de PEGT.

11. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 8 a 10, caracterizada pelo fato de que o peso molecular médio do segmento de PEG dos blocos de PEGT é de cerca de 600 a cerca de-3.000 e preferivelmente de cerca de 1.000 a cerca de 2.000.

12. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 8 a 11, caracterizado pelo fato de que compreende pelomenos dois copolímeros em bloco construídos a partir de tereftalato depolietileno glicol (PEGT) e tereftalato de polibutila (PBT), em que pelomenos dois copolímeros em bloco diferem um do outro em seu teor relativode PEGT e PBT e/ou no peso molecular do segmento PEG dos blocos dePEGT.

13. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 8 a 12, caracterizado pelo fato de que o diâmetro médioponderai das micropartículas e de cerca de 25 a cerca de 200 um epreferivelmente de cerca de 50 a cerca de 150 um.

14. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 8 a 13, caracterizado pelo fato de que o teor de interferonnas micropartículas é de cerca de 0,1 a cerca de 20% em peso e maispreferivelmente de cerca de 0,2 a cerca de 10% em peso.

15. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 8 a 14, caracterizado pelo fato de que ainda compreende um ou maisexcipientes selecionados do grupo que consiste de cargas, agentes decarregamento, tensoativos, conservantes, ácidos, bases, sais, açúcares, álcoois deaçúcar, aminoácidos, estabilizantes, antioxidantes, polímeros, tampões, polióis,proteínas, tais como albumina de soro humano e plastificantes.

16. Kit farmacêutico, caracterizado pelo fato de quecompreende um primeiro e um segundo compartimento selado ou umapluralidade destes, em que o primeiro compartimento compreende acomposição como definida em qualquer uma das reivindicações precedentesna forma substancialmente seca e em que o segundo compartimentocompreende um veículo líquido aquoso para reconstituir a composição emuma suspensão de micropartícula injetável.

17. Kit de acordo com a reivindicação 16, caracterizado pelofato de que o teor do composto ativo no primeiro compartimento é de cerca de-10 a cerca de 150 unidades internacionais de milhão (MIU).

18. Kit de acordo com a reivindicação 16 ou 17, caracterizadopelo fato de que o volume do veículo líquido aquoso é de cerca de 0,5 a cercade 3 ml e preferivelmente de cerca de 1 a cerca de 2 ml.

19. Kit de acordo com qualquer uma das reivindicações de 16a 18, caracterizado pelo fato de que o veículo líquido aquoso compreende umou mais excipientes selecionados do grupo que consiste de tensoativos,conservantes, ácidos, bases, sais, açúcares, álcoois de açúcar, aminoácidos, eagentes osmóticos, antioxidantes e polímeros.

20. Kit de acordo com qualquer uma das reivindicações de 16a 19, caracterizado pelo fato de que o primeiro e o segundo compartimentosselados são fornecidos na forma de dois recipientes de embalagem primários.

21. Kit de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelofato de que o primeiro compartimento é fornecido na forma de uma garrafa oufrasco e em que o segundo compartimento é fornecido na forma de uma seringa.

22. Kit de acordo com a reivindicação 16 a 19, caracterizadopelo fato de que o primeiro e o segundo compartimentos selados sãofornecidos na forma de duas câmaras de uma seringa de câmara dupla.

23. Método para a preparação da composição como definidaem qualquer uma das reivindicações de 8 a 15, caracterizado pelo fato de queas etapas de:(a) preparar uma emulsão compreendem(aa) uma fase interna aquosa que compreende o composto ativo e(ab) uma fase orgânica externa que compreende o polímerobiodegradável e pelo menos um solvente orgânico;(b) solidificar o polímero biodegradável em micropartículasremovendo-se pelo menos uma fração do solvente orgânico a partir daemulsão preparada na etapa (a);(c) coletar e secar as micropartículas formadas na etapa (b).

24. Método de acordo com a reivindicação 23, caracterizadopelo fato de que a etapa (b) é realizada emulsificando-se as emulsõespreparadas na etapa (a) em uma fase aquosa coerente para obter uma emulsãodupla w/o/w.

25. Método de acordo com a reivindicação 24, caracterizadopelo fato de que a fase aquosa coerente da emulsão dupla w/o/w compreendeum estabilizados selecionado do grupo que consiste de tensoativos e depolímeros solúveis em água.

26. Método de acordo com a reivindicação 24 ou 25,caracterizado pelo fato de que a osmolaridade da fase aquosa coerente é pelomenos tão alta quanto aquela da fase aquosa interna da emulsão dupla w/o/w.

27. Composição de acordo com as reivindicações de 1 a 7,caracterizada pelo fato de que o composto ativo e o copolímero em bloco sãodissolvidos ou dispersados em um veículo líquido está na forma de umaformulação líquida injetável.

28. Composição de acordo com a reivindicação 27,caracterizada pelo fato de que o volume da formulação líquida injetável é decerca de 0,5 a cerca de 3 ml e preferivelmente de cerca de 1 a cerca de 2 ml.

29. Composição de acordo com a reivindicação 27 ou 28,caracterizada pelo fato de que o copolímero em bloco compreende de cerca de-75 a cerca de 95% em peso de PEGT preferivelmente de cerca de 80 a cercade 90% em peso de PEGT.

30. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 27 a 29, caracterizada pelo fato de que o peso molecularmédio do segmento PEG dos blocos PEGT é de cerca de 600 a cerca de 2.000.

31. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 27 a 30, caracterizada pelo fato de que o veículo líquidocompreende um solvente biocompatível não aquoso.

32. Composição de acordo com a reivindicação 31,caracterizada pelo fato de que o solvente biocompatível não aquoso éselecionado do grupo que consiste de sulfóxido de dimetila, N-metilpirrolidona, benzoato de benzila, tetraidrofurano, acetato de etila, álcoolbenzílico e mistura de qualquer um destes.

33. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 27 a 32, caracterizada pelo fato de que ainda compreendeum ou mais excipientes selecionados do grupo que consiste de tensoativos,conservantes, ácidos, bases, sais, açúcares, álcoois de açúcar, aminoácidos,estabilizantes, antioxidantes e polímeros.

34. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações de 27 a 33, caracterizada pelo fato de que é adaptada para sercapaz de formar gel quando injetada intramuscular ou subcutaneamente emum mamífero.

35. Composição de acordo com a reivindicações de 1 a 7,caracterizada pelo fato de que é conformada como um implante sólidomacroscópico.

36. Composição de acordo com a reivindicação 35,caracterizada pelo fato de que o implante sólido é conformado como umbastão.

37. Método para a preparação da composição como definidana reivindicação 35 ou 36, caracterizado pelo fato de que compreende asetapas de(a) misturar o copolímero em bloco, o composto ativo eopcionalmente excipientes adicionais e a seguir(b) formar um filamento sólido coerente pela extrusão porfusão, seguido por(c) separação do dito artigo sólido coerente em implantes sólidos.

38. Uso da composição como definida em qualquer uma dasreivindicações de 1 a 15 e reivindicações de 27 a 36, caracterizado pelo fatode ser para a fabricação de um produto farmacêutico para o tratamento dehepatite B aguda ou crônica, hepatite C aguda ou crônica, leucemia de célulacapilar, leucemia mielogenosa aguda ou crônica, mieloma múltiplo, linfomafolicular, tumor carcinóide, melanoma maligno, condyloma scuminata, SARS,ou sarcoma de Kaposi, tais como sarcoma de Kaposi relacionado com aAIDS.