BRPI0514711B1 - composição para inativar leveduras ou fungos em refrigerantes e uso da mesma - Google Patents
composição para inativar leveduras ou fungos em refrigerantes e uso da mesmaInfo
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Abstract
composição para inativar leveduras ou fungos em refrigerantes e uso da mesma a invenção refere-se a uma composição para inativar leveduras ou fungos num refrigerante compreendendo íons de cálcio, caracterizada pelo fato de que a composição compreende ainda um agente de inativação de levedura e/ou fungo selecionado de um monoéster de ácido grado de açúcar de ocorrência natural ou um monoéster de ácido graxo de glicerol, um ácido orgânico alifático ou aromático de ocorrência natural com pelo menos 8 átomos de carbono ou seu éster de lactilato, ou aldeído alifático ou aromático, quitosana, quitina, ácido adípico, ácido capróico, cloreto de benzetônio e compostos contendo cloreto de benzetônio, a referida composição com uma contagem de leveduras total de < 1 ufc/ml. a composição pode ainda conter um conservante.
Description
Relatório Descritivo da Patente de invenção para "COMPOSIÇÃO PARA INATIVAR LEVEDURAS OU FUNGOS EM REFRIGERANTES E USO DA MESMA". A invenção refere-se a uma composição para inativar leveduras e/ou fungos num refrigerante e ao uso da referida composição para inativar leveduras ou fungos em refrigerantes.
Muitos refrigerantes que são feitos são conservados pela adição de conservantes químicos tais como sorbato de potássio, benzoato de sódio, ácido cítrico, hexametafosfato de sódio em combinação com um baixo pH de 2,8 a 4,5. Além disso, há uma necessidade de adicionar cálcio aos refrigerantes, de forma que esses possam servir como uma fonte de cálcio alternativa para o leite. Entretanto, em tais refrigerantes contendo cálcio, foi sentido que depois da adição de cálcio aos refrigerantes, nenhuma deterioração ou inibição da inativação de leveduras e fungos ocorreu.
Foi descoberto que em refrigerantes simulados sem cálcio, a inativação de leveduras e fungos ocorre num pH < 4,0. Por outro lado, em refrigerantes simulados com cálcio adicionado, independentemente do nível de cálcio (400 ou 1.200 ppm), da fonte de cálcio (cloreto de cálcio ou lactato de cálcio) e pH (entre 3,1 e 4,2), cerca de 10% das leveduras ou fungos sobreviveram, com uma contagem média de 9,2 x 103 ufc/mL (unidades formadoras de colônia por mililitro) (média do log da contagem total 3,96 ± 0,5). Aparentemente, os conservantes são completamente ou parcialmente inati-vados pelo cálcio adicionado.
Foi, dessa forma, um objeto da invenção fornecer uma composição para inativar leveduras ou fungos num refrigerante compreendendo íons cálcio.
Até esse ponto foi descoberto que refrigerantes contendo cálcio compreendendo ainda um agente de inativação de levedura e/ou fungo selecionado de um monoéster de ácido graxo de açúcar de ocorrência natural ou monoéster de ácido graxo de glicerol, um ácido orgânico alifático ou aromático de ocorrência natural com pelo menos 8 átomos de carbono ou seu és-ter de lacíilato, ou aldeído alifático ou aromático, quitosana, quitina, ácido adípico, ácido capróico e cloreto de benzetônio ou compostos contendo cloreto de benzetônio, a referida composição com uma contagem de leveduras total de < 1 ufc/mL, efetivamente previne a deterioração ou inibição da inati-vação das leveduras e dos fungos. O termo "de ocorrência natural" significa que o composto respectivo ocorre na natureza, por exemplo em plantas ou animais. Tais compostos de ocorrência natural podem ser obtidos por isolamento a partir de produtos naturais, ou pela sua síntese química total ou parcial, por exemplo por métodos orgânicos, biorgânicos, biológicos ou microbiológicos (tal como fermentação). O termo "monoéster de ácido graxo de açúcar" significa um ácido graxo formado de um éster ligado com um dos grupos hidroxila de uma porção de açúcar (carboidrato). Ácidos graxos adequados são ácidos graxos saturados e insaturados de ocorrência natural com de 6 a 18, preferivelmente de 6 a 12 átomos de carbono, tais como o capróico, caprílico, cáprico, láu-rico, miristico, palmítico, esteárico, araquidéico, beênico, lignocérico, ceróti-co, decilênico, dodecilênico, palmoléico, oléico, ricinolênico, linoléico e lino-lênico. Os ácidos graxos saturados são preferidos.
Porções de açúcar adequadas podem ser qualquer açúcar de pentose ou hexose, e preferivelmente são dissacarideos tais como sacarose e maltose.
Os ácidos graxos saturados e insaturados de ocorrência natural acima mencionados podem também ser esterificados a um grupo hidroxila do glicerol. Ácidos orgânicos alifáticos ou aromáticos de ocorrência natural incluem ácido caprílico, ácido adípico, anisaldeído e aldeído de canela. Os ácidos orgânicos alifáticos ou aromáticos podem ser usados como seu éster de lactilato. Éster de lactilato preferido é o capril-lactilato de sódio.
Cloreto de benzetônio é o principal componente do extrato de semente de taranja. Extrato de semente de taranja é um exemplo de um composto contendo cloreto de benzetônio, o qual é comercialmente disponível sob o nome comercial CITRICIDAL®, e o qual é sintetizado a partir das sementes e da polpa da toranja.
Em geral, é preferido que todos os constituintes da composição satisfaçam ao GRAS (Geralmente Reconhecido como Seguro) sob o Code of Federal Regulations como 21 CFR 182.20.
Geraímente, a composição da invenção precisa da presença de um conservante para um desempenho ótimo. Conservantes comuns são sais de potássio, sódio e cálcio de sorbato, benzoato, sulfito, hidrogenossuífi-to, metabissulfito e hexametafosfato. Outros conservantes comumente usados são EDTA, BHA, BHT, TBHQ, ácido deidroacético, dimetildicarbonato, etoxiquin, heptilparabeno e suas combinações. Compostos que são adicionados para outros propósitos, tais como regulador de pH, antioxidante, in-tensificador de sabor e semelhantes, e os quais além disso têm uma fraca atividade conservante, não são considerados conservantes de acordo com essa invenção.
Entretanto, os agentes de inativação de levedura ou fungo mais ativos são igualmente suficientemente eficazes sem qualquer conservante, e conseqüentemente podem ser usados sem (ou substancialmente sem) qualquer conservante. A expressão ''substancialmente sem qualquer conservante" significa que a composição contém menos de 20 ppm, preferivelmente menos de 5 ppm de conservante. Aqueles agentes de inativação de levedura mais ativos incluem ácido caprílico, cinamonaldeído, cloreto de benzetônio e compostos contendo cloreto de benzetônio. O último é preferido, particularmente extrato de semente de taranja e, mais preferivelmente, ele é usado como um pó ou líquido. A composição pode conter outros aditivos comuns, tais como reguladores de pH, flavorizantes, corantes, seqüestrantes, etc. A invenção é ainda ilustrada pelos seguintes exemplos não- limitativos.
Materiais e método Cepa de teste: levedura isolada de abacaxi fresco esmagado (pH 3,4).
As leveduras foram cultivadas em caldo glicose de extrato de levedura pH 3,5 e padronizadas numa OD650nm 0,5. Para preparar a suspensão de inóculo, uma diluição de 100 vezes foi feita em solução salina fisiológica de peptona. Líquidos de teste: Líquido básico Xarope de milho rico em frutose (Raftisweet) 130 g Ácido cítrico 3,5 g Extrato de levedura 0,5 g Lactato de Ca1) 2,96 g Água desmineralizada 200 mL pH 3,5 1) 400 ppm de Ca em refrigerante simulado e líquido de controle = 10 mM. Líquido de controle sem cálcio Xarope de milho rico em frutose (Raftisweet) 325 g Ácido cítrico (Merck 1.00244.0500) 3,5 g Extrato de levedura (Oxcoid L 21) 0,5 g Água desmineralizada 500 mL pH 3,5 Solução estoque de lactato de Ca Lactato de Ca11 2,96 g Água desmineralizada 100 mL pH 3,5 1) 400 ppm de Ca em refrigerante simulado e líquido de controle = 10 mM.
Solução estoque de conservante Benzoato de Na 0,2 g Sorbato de K 0,2 g Hexametafosfato de Na (Fluka 71600)1) 0,9 g Água demi 200 mL pH 3,5 Substâncias iníbidoras naturais 1) Em água desmineralizada (solução a 5%) 2) em solução de etanol a 50% (solução a 5%) 3) 0,05 grama em 100 mL de líquido de teste 4) não na lista de GRAS dos EUA 5) Frey & Lau Gmbh, Henstedt-UIzburg, Alemanha 6) Cintamani Manufacturing AB, Eslõv, Suécia Esquema para a preparação de líquidos de teste com substâncias iníbidoras naturais com solução conservante. 1) Ο ρΗ dos líquidos foi checado depois da mistura. Não foi necessária correção.
Esquema para a preparação de líquidos de teste com substâncias inibidoras naturais sem solução conservante 1) O pH dos líquidos foi checado depois da mistura. Não foi necessária correção.
Projeto experimental Garrafas de infusão de 100 mL com tubos de Durham foram cheias com 100 mL de líquido teste ou controle. 0,1 mL de suspensão de inoculo foi adicionado a cada garrafa para obter um nível de inóculo de 102 -103 ufc/mL na garrafa. As garrafas foram incubadas a 25 ± 10C por 14 dias. Depois de 3, 7,10 e 14 dias, a contagem total do líquido foi avaliada por pla-queamento de superfície de 1 ou 0,1 mL em agar de glicose de extrato de levedura. No dia 15 dos líquidos com uma contagem total < 1/mL, 50 mL foram passados através de um filtro de membrana para avaliar a contagem total por 50 mL.
Resultados A inativação de leveduras e fungos em refrigerantes simulados com cálcio adicionado por substâncias antimicrobianas naturais. Os resultados estão apresentados na tabela 1 e na 2.
Tabela 1: aspecto visual de diferentes líquidos de teste Tabela 2: Contagem de leveduras total de substâncias antimicrobianas naturais usadas em combinação com a solução conservante. 1) Formação de gás do dia 7 em diante Tabela 3: Contagem de leveduras total de substâncias antimicrobianas naturais usadas sem solução conservante. 1) Formação de gás do dia 7 em diante 2) n. t. = não testado 3) 4 formadores de taco/50 mL
No líquido de contrple sem cálcio adicionado nenhuma ativação ocorreu durante 14 dias de incubação a 20 °C. Isso foi contrário à expectativa de que a levedura podería ser rapidamente inativada. Quatro substâncias antimicrobianas naturais: ácido caprílico, aldeído de canela, pó de extrato de semente de toranja e líquido de extrato de semente de toranja levaram à completa inativação das leveduras ou fungos. Na solução com aldeído de canela a 0,05% as leveduras ou fungos foram completamente inativados, enquanto que na solução com aldeído de canela a 0,025% + citral a 0,025% a inativação não foi completa. Isso indica que o aldeído de canela é um inibidor mais forte do que o citral.
Claims (12)
1. Composição para ínativar leveduras ou fungos num refrigerante, caracterizada pelo fato de que compreende ions de cálcio e um agente de inativaçâo de levedura e/ou fungo selecionado de um monoéster de ácido graxo de açúcar de ocorrência natural ou monoéster de ácido graxo de glice-rol, um ácido graxo de ocorrência natural com pelo menos 8 átomos de carbono ou seu éster de lactílato, ou aldeído de anis, aldeido de canela, quitina, ácido capróico, cloreto de benzetônio e componentes contendo cloreto de benzetônio, a referida composição com uma contagem de leveduras total de < 1 ufc/mL
2. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que compreende ainda um conservante,
3, Composição de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que o éster de lactílato é capril de lactílato de sódio,
4, Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que o ácido graxo de ocorrência natural é ácido caprilico.
5. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que o componente contendo cloreto de benzetônio é extrato de semente de toranja,
6, Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações t a 5, caracterizada pelo fato de que o agente de inativaçâo de levedura e/ou fungo é extrato de semente de toranja na forma líquida ou em pó,
7. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 6, caracterizada pelo fato de que é livre de conservante ou compreende menos de 20 ppm de conservante,
8, Uso de uma composição compreendendo um agente de inativaçâo de levedura selecionado de um monoéster de ácido graxo de açúcar de ocorrência natural ou um monoéster de ácido graxo de glicerol, um ácido graxo de ocorrência natural com pelo menos 8 átomos de carbono ou seu éster de lactílato, ou aldeído de anis, aldeido de canela, quitosana, quitina, ácido adípico, ácido capróico, cloreto de benzetônio e componentes conten- do cloreto de benzetônio caracterizado pelo fato de ser para inativar leveduras e/ou fungos num refrigerante compreendendo ions de cálcio.
9. Uso de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que o éster de lactilato é capríl lactílato de sódio.
10, Uso de acordo com a reivindicação 8 ou 9, caracterizado pelo fato de que o ácido graxo de ocorrência natural é ácido caprílico.
11. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 a 10, caracterizado pelo fato de que o componente contendo cloreto de benzetônio é extrato de semente de toranja.
12, Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 a 11, caracterizado pelo fato de que o agente de inativação de levedura e/ou fungo é extrato de semente de toranja na forma líquida ou em pó.
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