BR112020009020A2 - regime de dosagem de edasalonexente para tratamento de distrofia muscular - Google Patents

Abstract

  A invenção provê métodos e composições para tratamento de uma distrofia muscular, por exemplo, distrofia muscular de Duchenne (DMD), em um indivíduo, com um salicilato acetilado de ácido graxo, por exemplo, edasalonexente, eficaz para alcançar uma concentração plasmática limiar do salicilato acetilado de ácido graxo no indivíduo, por exemplo, uma concentração plasmática limiar de pelo menos cerca de 20 ng/ml por pelo menos 12 horas em um período de 24 horas.

Description

REGIME DE DOSAGEM DE EDASALONEXENTE PARA TRATAMENTO DE DISTROFIA MUSCULAR REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS

[001] Este pedido reivindica prioridade e o benefício do Pedido de Patente Provisório US No. 62/581.981, depositado em 6 de novembro de 2017, cujo conteúdo é incorporado aqui por referência em sua totalidade.

CAMPO DA INVENÇÃO

[002]A invenção refere-se ao campo de distrofia muscular, em particular, métodos para tratamento de distrofia muscular de Duchenne (DMD), em particular, regimes de dosagem para tratamento de DMD com edasalonexente, um conjugado de salicilato de ácido graxo.

FUNDAMENTOS

[003] Distrofia muscular de Duchenne (DMD) é uma doença neuromuscular degenerativa rara e séria, com risco de vida, com uma herança ligada ao X recessivo. Causada por mutações no gene da distrofina, DMD é caracterizada pela ausência, ou quase ausência, de proteína de distrofina funcional, levando à deterioração progressiva da função do músculo esquelético desde a primeira infância. Apesar de melhoramentos no padrão de cuidados, tal como o uso de glicocorticoides, DMD permanece uma doença por fim fatal, com pacientes geralmente morrendo de insuficiência respiratória ou cardíaca aos trinta anos de idade.

[004] A ausência de distrofina funcional na DMD resulta em fibras musculares suscetíveis ao estresse mecânico, dano muscular, inflamação de células do músculo, e capacidade reduzida para regenerar o tecido muscular. NF-xB é uma família de fatores transcricionais que é ativada na DMD. A família NF-xB de fatores transcricionais inclui p50 (NF- KBl), p52 (NF-xB2), p65 (RelA), c-Rel e RelB. Estes fatores nucleares são mantidos em um estado inativo no citoplasma como um complexo por um fator inibitório NF-xB de IxKB, tal como IxBa, IKBB, e IKB. O complexo NF-xB inativo é liberado do citoplasma por fosforilação da proteína IKB através de quinases tais como IKKEB. As quinases que regulam atividade NF-xB são ativadas por respostas imunes ou estresse celular. Assim, no complexo NF-xB citoplásmico, tal como IKB/p65/p50, IKB se torna fosforilada através de quinases tais como IKKB e libera pares diméricos de NF-xB para os núcleos como p65/p50. No núcleo, NF-KxB regula a expressão genética de fatores pró-inflamatórios tais como citocinas como TNFa, IL-6, e IL-16, além de enzimas como ciclooxigenase-2 (COX-2), uma das enzimas que converte ácido araquidônico em prostaglandina H2 (PGH2). Estes fatores induzem inflamação em vários tecidos. Além disso, dependendo do contexto celular dos fatores nucleares NF-xB liberados, NF-KxB pode causar a expressão de genes anti- inflamatórios. Embora estas vias sejam essenciais para adaptação e sobrevivência do organismo, ativação crônica do sistema NF-xB resulta em patologia anti-inflamatória descontrolada. Este é o caso no músculo deficiente em distrofina, onde ativação crônica de NF-XKB ocorre no músculo de camundongos distróficos e pacientes com DMD.

[005]EM pacientes com DMD, a ativação de NF-xB é observada tipicamente no tecido muscular antes do início de outras manifestações clínicas. Além disso, as células imunes e fibras musculares degeneradas de pacientes com DMD mostram níveis elevados de NF-xB ativado. As evidências também sugerem que estresse mecânico ativa NF-xB no músculo e conduz à inflamação mediada por NF-xB. Uma deterioração mais rápida do músculo é observada nos músculos com estresse mecânico e inflamação aumentados, por exemplo, quadríceps e isquiotibiais.

[006] Edasalonexente é um inibidor de NF-KB oralmente biodisponível que compreende um ácido graxo poliinsaturado (PUFA) e ácido salicílico, que inibem individualmente a ativação de NF-xB, conjugados juntos por um ligante que é apenas suscetível à hidrólise por hidrolase de ácido graxo intracelular. Estes compostos foram demonstrados como inibindo a ativação de NF-KB in vitro, e que o tratamento a longo prazo melhora o fenótipo de modelos de DMD tanto de camundongo mdx como de cachorro golden retriever com distrofia muscular (GRMD) (Hammers et al. (2016) JCI INSIGHT 1(21) :e90341).

[007] Apesar dos avanços até o momento, permanece uma necessidade de métodos aperfeiçoados para tratamento de distrofia muscular, tal como DMD, em pacientes, incluindo métodos para tratamento de DMD com inibidores de NF-xB.

SUMÁRIO

[008]A invenção provê métodos e composições para tratamento de uma distrofia muscular, por exemplo, distrofia muscular de Duchenne (DMD). A invenção é baseada, em parte, na descoberta de que, quando do tratamento de DMD em um indivíduo com um salicilato acetilado de ácido graxo, por exemplo, edasalonexente, a eficácia é dirigida pela quantidade de tempo que o salicilato acetilado de ácido graxo está em ou acima de uma concentração plasmática limiar no indivíduo, em vez da concentração máxima do salicilato acetilado de ácido graxo no plasma ou exposição total ao salicilato acetilado de ácido graxo.

[009] Consequentemente, em um aspecto, a invenção provê um método de tratamento de distrofia muscular, por exemplo, distrofia muscular de Duchenne (DMD), em um indivíduo em nes o " ao ind COAÇONNNVNTNV a est H O

OH (Fórmula TI), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, eficaz para alcançar uma concentração plasmática limiar do composto no indivíduo de pelo menos cerca de 20 ng/ml por pelo menos 12 horas em um período de 24 horas. Em certas modalidades, a concentração plasmática limiar é de cerca de 20 ng/ml a cerca de 200 ng/ml. Em certas modalidades, o composto está na ou acima da concentração limiar por pelo menos cerca de 13 horas, cerca de 14 horas, cerca de 15 horas, cerca de 16 horas, cerca de 17 horas, cerca de 18 horas, cerca de 19 horas, cerca de 20 horas, cerca de 21 horas, cerca de 22 horas, cerca de 23 horas, ou cerca de 24 horas em um período de 24 horas.

[0010]EM certas modalidades, o regime de dosagem compreende uma, duas ou três doses do composto por dia. Em certas modalidades, cada dose compreende de cerca de 25 mg/kg a cerca de 100 mg/kg do composto. Em certas modalidades, cada dose compreende de cerca de 25 mg/kg a cerca de 50 mg/kg do composto. Em certas modalidades, cada dose compreende de cerca de 20 mg/kg a cerca de 40 mg/kg do composto. Em certas modalidades, a dosagem diária total compreende de cerca de 100 mg/kg a cerca de 200 ma/kg, ou de cerca de 100 mg/kg a cerca de 150 mg/kg, por exemplo, 100 mg/kg ou 133 mg/kg. Em certas modalidades, a dosagem diária total compreende cerca de 100 mg/kg. Em certas modalidades, a dosagem diária total compreende de cerca de 90 mg/kg a cerca de 110 mg/kg. Em certas modalidades, a dosagem diária total compreende 100 mg/kg + 5%, 100 mg/kg t+ 10%, 100 mg/kg + 15%, ou 100 mg/kg t 20% do composto.

[0011] EM certas modalidades, o regime de dosagem compreende três doses por dia. Em certas modalidades, as três doses compreendem quantidades iguais do composto, por exemplo, cada dose compreende de cerca de 25 mg/kg a cerca de 50 mg/kg do composto, ou, por exemplo, cada dose compreende cerca de 33 mg/kg do composto.

[0012]EM certas modalidades, a primeira dose e a segunda dose compreendem uma quantidade menor do composto do que a terceira dose, por exemplo, a primeira dose e a segunda dose compreendem cerca de metade da quantidade do composto como a terceira dose. Por exemplo, em certas modalidades, a primeira dose e a segunda dose compreendem de cerca de 25 mg/kg a cerca de 50 mg/kg do composto, e a terceira dose compreende de cerca de 50 mg/kg a cerca de 100 mg/kg do composto, por exemplo, a primeira dose e a segunda dose compreendem cerca de 33 mg/kg do composto e a terceira dose compreende cerca de 67 mg/kg do composto.

[0013] EM certas modalidades, pelo menos uma das três doses é uma quantidade diferente das outras duas doses, por exemplo, cada dose compreende de cerca de 25 mg/kg a cerca de 50 mg/kg do composto, ou, por exemplo, cada dose compreende de cerca de 20 mg/kg a cerca de 40 mg/kg do composto. Em uma modalidade, as duas doses são a mesma e uma é diferente. Em uma modalidade, todas as três doses são diferentes.

[0014] EM certas modalidades, as três doses são iguais e são administradas em formas de dosagem que contêm 250 mg ou 100 mg do composto de Fórmula I. Em outras determinadas modalidades, as três dosagens não são iguais e são administradas em formas de dosagem que contêm 250 mg ou 100 mg do composto de Fórmula I, por exemplo, duas são iguais e uma é diferente ou, por exemplo, cada dose é diferente. Em certas modalidades, as três doses equivalem a uma dose diária total de 100 mg/kg + 5%, 100 mg/kg + 10%, 100 mg/kg + 15% ou 100 mg/kg + 20% do composto. Em certas modalidades, duas doses são 750 mg e uma dose é 500 mg. Em certas modalidades, a dose diária total não excede 6.000 mg.

[0015]EM certas modalidades, a primeira dose é administrada pela manhã, a segunda dose é administrada no meio do dia, e a terceira dose é administrada à noite. Em certas modalidades, cada dose é administrada com alimento, por exemplo, na hora de uma refeição. Por exemplo, em certas modalidades, a primeira dose é administrada na hora do café da manhã, a segunda dose é administrada na hora do almoço, e a terceira dose é administrada na hora do jantar. Em certas modalidades, as duas doses que são administradas no café da manhã e jantar são maiores do que a dose administrada no almoço. Em certas modalidades, a dose é administrada com alimento ou uma refeição contendo pelo menos 8 gq de gordura.

[0016] EM certas modalidades, o composto é administrado em uma composição farmacêutica, por exemplo, uma composição compreendendo 50-70% em peso do composto. A composição pode compreender adicionalmente, por exemplo, um ou mais de monooleato de glicerila (tipo 40), polissorbato 80, polietilenoglicol 400, ou DL- a-tocoferol. Em certas modalidades, a composição é formulada como uma cápsula. Em certas modalidades, o composto é administrado oralmente.

[0017] EM certas modalidades, o método reduz inflamação no músculo quadríceps em pelo menos 20%, e/ou reduz fibrose no músculo quadríceps em pelo menos 20%.

[0018] EM outro aspecto, a invenção provê uma composição farmacêutica compreendendo 50-70% em peso de um composto tendo a estrutura de Fórmula [, ? H

COAÇONNNVNTNV

H OH 2 (Fórmula 1); ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e opcionalmente um, dois, três, ou quatro de: um solvente ou diluente (por exemplo, monooleato de glicerila (tipo 40)); um tensoativo (por exemplo, um tensoativo não iônico, por exemplo, polissorbato 80); um cossolvente (por exemplo, polietilenoglicol 400); e um antioxidante (por exemplo, DL- a-tocoferol). Em certas modalidades, o solvente ou diluente é monooleato de glicerila (tipo 40). Em certas modalidades, o tensoativo é um tensoativo não iônico, por exemplo, polissorbato 80. Em certas modalidades, o cossolvente é polietilenoglicol. Em certas modalidades, o antioxidante é DL-a-tocoferol.

[0019] Vários aspectos e modalidades da invenção são descritos em maiores detalhes abaixo. Embora métodos e materiais similares ou equivalentes aos descritos aqui possam ser usados na prática ou teste da presente invenção, métodos e materiais ilustrativos são agora descritos. Outras características, objetivos e vantagens da invenção serão evidentes a partir da descrição e das reivindicações. No relatório e reivindicações abaixo, as formas singulares também incluem o plural salvo se o contexto ditar claramente o contrário.

BREVE DESCRIÇÃO DAS Figuras

[0020]A Figura 1 mostra gráficos em linha do nível de concentração edasalonexente no plasma e no músculo esquelético de camundongos C57BL/6 que receberam uma dose de 1,5% de edasalonexente em sua dieta.

[0021]A Figura 2 é um gráfico em linha mostrando o nível de concentração de plasma de edasalonexente em camundongos C57BL/6 que receberam uma única dose diária oral de 450 mg/kg de edasalonexente, três doses diárias orais de 150 mg/kg de edasalonexente (para uma dose diária total de 450 mg/kg), ou duas doses diárias orais de 150 mg/kg de edasalonexente e uma dose diária oral de 300 mg/kg de edasalonexente (para uma dose diária total de 600 mg/kg).

[0022]A Figura 3 mostra gráficos de barra descrevendo inflamação do músculo quadríceps (esquerda) e fibrose (direita) em camundongos mdx que receberam uma dose de 1% de edasalonexente em sua dieta.

[0023] A Figura 4 mostra gráficos de barra descrevendo inflamação do músculo quadríceps (esquerda) e fibrose

(direita) em camundongos mdx que receberam uma única dose diária oral de 450 mg/kg de edasalonexente e/ou a dose de 1% de edasalonexente em sua dieta.

[0024] A Figura 5 mostra gráficos de barra descrevendo inflamação do músculo quadríceps (esquerda) e fibrose (direita) em camundongos mdx que receberam uma única dose diária oral de 450 mg/kg de edasalonexente, três doses diárias orais de 150 mg/kg de edasalonexente (para uma dose diária total de 450 mg/kg), ou duas doses diárias orais de 150 mg/kg de edasalonexente e uma dose diária oral de 300 mg/kg de edasalonexente (para uma dose diária total de 600 mg/kg).

[0025]A Figura 6 mostra a concentração plasmática de edasalonexente para indivíduos do ensaio de fase 2 MoveDMDO recebendo duas doses de 33 mg/kg por dia (para uma dose diária total de 67 mg/kg/dia).

[0026]A Figura 7 mostra a concentração plasmática de edasalonexente para indivíduos do ensaio de fase 2 MoveDMDO recebendo três doses de 33 mg/kg por dia (para uma dose diária total de 100 mg/kg/dia).

[0027]A Figura 8 mostra níveis de concentração plasmática de edasalonexente modelados para regimes de dosagem incluindo três doses de 33 mg/kg por dia (para uma dose diária total de 100 mg/kg/dia), ou duas doses de 33 mg/kg e uma dose de 67 mg/kg por dia (para uma dose diária total de 133 mg/kg/dia) com base no modelo PK de população desenvolvido usando dados dos experimentos clínicos de fase 1 e fase 2 de edasalonexente.

[0028] A Figura 9 mostra níveis de concentração plasmática de edasalonexente modelados para regimes de dosagem incluindo três doses de 33 mg/kg por dia (para uma dose diária total de 100 mg/kg/dia), ou duas doses de 33 mg/kg (para uma dose diária total de 67 mg/kg/dia) com base no modelo PK de população desenvolvido usando dados dos experimentos clínicos de fase 1 e fase 2 de edasalonexente.

[0029] A Figura 10 é uma representação esquemática do projeto de experimento clínico de Fase 1 e Fase 2 com MoveDMD.

[0030]A Figura 11 é um gráfico de barras mostrando a exposição diária de indivíduos ao edasalonexente em ng/mL*h, quando expostos a dosagens de 33 mg/kg, 67 mg/kg, ou 100 mg/kg.

[0031]A Figura 12 é um gráfico de barra mostrando a mudança nos níveis de expressão entre Dia 1 (antes do tratamento com edasalonexente) e Dia 7 (de tratamento com edasalonexente) para 24 transcritos de gene diferentes regulados por NF-xB e regulados por inflamação quando os indivíduos foram expostos a dosagens de 33 mg/kg, 67 mg/kg, ou 100 mg/kg. Cada coluna representa dados para um transcrito de gene individual.

[0032]A Figura 13 é um gráfico mostrando a mudança média nos níveis de expressão entre Dia 1 (antes do tratamento com edasalonexente) e Dia 7 (de tratamento com edasalonexente) para 24 transcritos diferentes regulados por NF-xB e regulados por inflamação versus a Cnínima média (ng/ml) para três grupos de doses (33 mg/kg/dia, 67 mg/kg/dia, e 100 mg/kg/dia).

[0033]A Figura 14 é um gráfico em linha mostrando a taxa média de mudança de escores de avaliação do North Star Ambulatory para indivíduos do estudo no grupo de dosagem de

100 mg/kg/dia de edasalonexente ao longo de um período de controle de 36 semanas, seguido pelo período de tratamento de 60 semanas.

[0034]A Figura 15 é um gráfico em linha mostrando a taxa média de mudança nos tempos de caminhada/corrida 10 metros para indivíduos do estudo no grupo de dosagem de 100 mg/kg/dia de edasalonexente ao longo de um período de 36 semanas, seguido pelo período de tratamento de 60 semanas.

[0035]A Figura 16 é um gráfico em linha mostrando a taxa média de mudança nos tempos de subir escada de 4 degraus para indivíduos do estudo no grupo de dosagem de 100 mg/kg/dia de edasalonexente, ao longo de um período de controle de 36 semanas, seguido pelo período de tratamento de 60 semanas.

[0036]A Figura 17 é um gráfico em linha mostrando a taxa média de mudança em Tempo para tempos de permanência em pé para indivíduos do estudo no grupo de dosagem de 100 mg/kg/dia de edasalonexente ao longo de um período de controle de 36 semanas, seguido pelo período de tratamento de 60 semanas.

[0037]A Figura 18 é um gráfico de barras mostrando a taxa anual de mudança nos valores MRI-T2 para indivíduos do estudo no grupo de dosagem de 100 mg/kg/dia de edasalonexente ao longo de um período de controle de 36 semanas, seguido por um período de tratamento de 48 semanas.

[0038] A Figura 19 é uma tabela mostrando a mudança nos valores de fração de gordura para indivíduos do estudo no grupo de dosagem de 100 mg/kg/dia de edasalonexente ao longo de um período de controle de 36 semanas, seguido por um período de tratamento de 48 semanas.

[0039] As Figuras 20A-D são gráficos em linha mostrando a mudança de frequência cardíaca da linha de base em batimentos por minuto (Figura 20A), mudança no percentil de altura (Figura 20B), mudança no percentil de índice de massa corporal (BMI) (Figura 20C), e mudança no percentil de peso (Figura 20D) para indivíduos do estudo ao longo de um período de estudos de 60 semanas.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[0040]A invenção provê métodos e composições para tratamento de uma distrofia muscular, por exemplo, distrofia muscular de Duchenne (DMD). A invenção é baseada, em parte, na descoberta que quando do tratamento de um indivíduo com DMD com um salicilato acetilado de ácido graxo, por exemplo, edasalonexente, a eficácia é dirigida pela quantidade de tempo que o salicilato acetilado de ácido graxo está no ou acima de uma concentração plasmática limiar no indivíduo, em vez da concentração máxima do salicilato acetilado de ácido graxo no plasma ou exposição total ao salicilato acetilado de ácido graxo. Consequentemente, em um aspecto, a invenção provê um método de tratamento distrofia muscular, por exemplo, distrofia muscular de Duchenne (DMD), em um indivíduo em necessidade do mesmo. O método compreende administrar ao indivíduo um regime de dosagem de um composto tendo a estrutura de Fórmula 1, o H

COOAÇOONNNINTV

H OH o (Fórmula 1),

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, eficaz para alcançar uma concentração plasmática limiar do composto no indivíduo de pelo menos cerca de 20 ng/ml por pelo menos 12 horas em um período de 24 horas.

[0041] EM certas modalidades, a concentração plasmática limiar é de cerca de 20 ng/ml a cerca de 200 ng/ml. Por exemplo, em certas modalidades, a concentração plasmática limiar é de cerca de 20 ng/ml a cerca de 200 ng/ml, de cerca de 20 ng/ml a cerca de 175 ng/ml, de cerca de 20 ng/ml a cerca de 150 ng/ml, de cerca de 20 ng/ml a cerca de 125 ng/ml, de cerca de 20 ng/ml a cerca de 100 ng/ml, de cerca de 20 ng/ml a cerca de 75 ng/ml, de cerca de 20 ng/ml a cerca de 50 ng/ml, de cerca de 20 ng/ml a cerca de 25 ng/ml, de cerca de 25 ng/ml a cerca de 200 ng/ml, de cerca de 25 ng/ml a cerca de 175 ng/ml, de cerca de 25 ng/ml a cerca de 150 ng/ml, de cerca de 25 ng/ml a cerca de 125 ng/ml, de cerca de 25 ng/ml a cerca de 100 ng/ml, de cerca de 25 ng/ml a cerca de 75 ng/ml, de cerca de 25 ng/ml a cerca de 50 ng/ml, de cerca de 50 ng/ml a cerca de 200 ng/ml, de cerca de 50 ng/ml a cerca de 175 ng/ml, de cerca de 50 ng/ml a cerca de 150 ng/ml, de cerca de 50 ng/ml a cerca de 125 ng/ml, de cerca de 50 ng/ml a cerca de 100 ng/ml, de cerca de 50 ng/ml a cerca de 75 ng/ml, de cerca de 75 ng/ml a cerca de 200 ng/ml, de cerca de 75 ng/ml a cerca de 175 ng/ml, de cerca de 75 ng/ml a cerca de 150 ng/ml, de cerca de 75 ng/ml a cerca de 125 ng/ml, de cerca de 75 ng/ml a cerca de 100 ng/ml, de cerca de 100 ng/ml a cerca de 200 ng/ml, de cerca de 100 ng/ml a cerca de 175 ng/ml, de cerca de 100 ng/ml a cerca de 150 ng/ml, de cerca de 100 ng/ml a cerca de 125 ng/ml, de cerca de 125 ng/ml a cerca de 200 ng/ml, de cerca de 125 ng/ml a cerca de 175 ng/ml, de cerca de 125 ng/ml a cerca de 150 ng/ml, de cerca de 150 ng/ml a cerca de 200 ng/ml, de cerca de 150 ng/ml a cerca de 175 ng/ml, ou de cerca de 175 ng/ml a cerca de 200 ng/ml. Em certas modalidades, a concentração plasmática limiar é cerca de 200 ng/ml, cerca de 175 ng/ml, cerca de 150 ng/ml, cerca de 125 ng/ml, cerca de 100 ng/ml, cerca de 75 ng/ml, cerca de 50 ng/ml, cerca de 25 ng/ml, ou cerca de ng/ml. A concentração plasmática de um agente ativo descrito aqui, por exemplo, edasalonexente, pode ser medida por métodos conhecidos na técnica, incluindo por LC/MS/MS (cromatografia líquida/espectrometria de massa/espectrometria de massa).

[0042] EM certas modalidades, o composto está na ou acima da concentração limiar para pelo menos de cerca de 12 horas a cerca de 24 horas, de cerca de 14 horas a cerca de 24 horas, de cerca de 16 horas a cerca de 24 horas, de cerca de 18 horas a cerca de 24 horas, de cerca de 20 horas a cerca de 24 horas, de cerca de 22 horas a cerca de 24 horas, de cerca de 12 horas a cerca de 22 horas, de cerca de 14 horas a cerca de 22 horas, de cerca de 16 horas a cerca de 22 horas, de cerca de 18 horas a cerca de 22 horas, de cerca de 20 horas a cerca de 22 horas, de cerca de 12 horas a cerca de 20 horas, de cerca de 14 horas a cerca de 20 horas, de cerca de 16 horas a cerca de 20 horas, de cerca de 18 horas a cerca de 20 horas, de cerca de 12 horas a cerca de 18 horas, de cerca de 14 horas a cerca de 18 horas, de cerca de 16 horas a cerca de 18 horas, de cerca de 12 horas a cerca de 16 horas, de cerca de 14 horas a cerca de 16 horas, ou de cerca de 12 horas a cerca de 14 horas em um período de 24 horas.

[0043] EM certas modalidades, o composto está na ou acima da concentração limiar por pelo menos cerca de 13 horas, cerca de 14 horas, cerca de 15 horas, cerca de 16 horas, cerca de 17 horas, cerca de 18 horas, cerca de 19 horas, cerca de 20 horas, cerca de 21 horas, cerca de 22 horas, cerca de 23 horas, ou cerca de 24 horas em um período de 24 horas.

[0044] Várias características e aspectos da invenção são discutidos em maiores detalhes abaixo.

I. DEFINIÇÕES

[0045] Para facilitar o entendimento da presente invenção, diversos termos e frases são definidos abaixo.

[0046]Como — usado aqui, os termos “indivíduo” e “paciente” são usados de modo intercambiável e referem-se a um organismo a ser tratado pelos métodos e composições da presente invenção. Tais organismos são preferivelmente um mamífero (por exemplo, humano, camundongo, rato, porquinho da índia, cachorro, gato, cavalo, vaca, porco, ou primata não humano, tal como um macaco, chimpanzé, babuíno, e macaco Rhesus), e mais preferivelmente, um humano.

[0047] Como usado aqui, as frases “quantidade eficaz” e “quantidade terapeuticamente eficaz” referem-se a quantidade de um composto (por exemplo, um composto descrito aqui) suficiente para efetuar benefícios ou resultados desejados. Uma quantidade eficaz pode ser administrada em uma ou mais administrações, aplicações ou dosagens e não é destinada a ser limitada a uma formulação particular ou via de administração.

[0048] Como usado aqui, o termo “composição farmacêutica” refere-se à combinação de um agente ativo com um carreador, inerte ou ativo, tornando a composição especialmente apropriada para diagnóstico ou uso terapêutico in vivo ou ex vivo.

[0049] Como usado aqui, o termo “carreador farmaceuticamente aceitável” refere-se a qualquer um dos carreadores farmacêuticos padrão, tal como uma solução salina tamponada com fosfato, água, emulsões (por exemplo, tal como emulsões de óleo/água ou água/óleo), e vários tipos de agentes de umedecimento. As composições também podem incluir estabilizadores e conservantes. Para exemplos de carreadores, estabilizadores e adjuvantes, ver Martin, Remington's Pharmaceutical Sciences, 15º. ed., Mack Publ. Co., Easton, PA (1975).

[0050] Como usado aqui, o termo “sal farmaceuticamente aceitável” refere-se a qualquer sal de um grupo ácido ou básico que pode estar presente em um composto divulgado, sal que é compatível com administração farmacêutica. Como é sabido pelos técnicos no assunto, “sais” dos compostos divulgados podem ser derivados de ácidos ou bases orgânicas ou inorgânicas. Exemplos de ácido incluem, mas não estão limitados a, ácido clorídrico, bromídrico, sulfúrico nítrico, perclórico, fumárico, maleico, fosfórico, glicólico, lático, salicílico, succínico, pr toluenossulfônico, tartárico, acético, cítrico, metanossulfônico, etanossulfônico, fórmico, benzoico, malônico, naftaleno-2-sulfônico e benzenossulfônico. Outros ácidos, tais como oxálico, embora eles mesmos não sejam farmaceuticamente aceitáveis, podem ser empregados na preparação de sais utilizáveis como intermediários na obtenção dos compostos descritos aqui e seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis.

[0051] Exemplos de bases incluem, mas não estão limitados a, hidróxidos de metal alcalino (por exemplo, sódio), hidróxidos de metal alcalino-terroso (por exemplo magnésio), amônia, e compostos de fórmula NW'*, em que W é C1i-1, alquila, e similares.

[0052] Exemplos de sais incluem, mas não estão limitados a: acetato, adipato, alginato, aspartato, benzoato, benzenossulfonato, bissulfato, butirato, citrato, canforato, canforsulfonato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanossulfonato, fumarato, fluco-heptanoato, glicerofosfato, hemissulfato, heptanoato, hexanoato, cloridrato, bromidrato, iodrato, 2- hidroxietanosulfonato, lactato, maleato, metanosulfonato, 2-naftalenosulfonato, nicotinato, oxalato, palmoateo, pectinato, perssulfato, fenilpropionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, tartarato, tiocianato, tosilato, undecanoato, e similares. Outros exemplos de sais incluem ânions dos compostos da presente invenção, constituídos com um cátion apropriado, tal como Na', NH's!, e NW'* (em que W pode ser um grupo C1i-º alquila), e similares. Para uso terapêutico, sais dos compostos divulgados aqui são contemplados como sendo farmaceuticamente aceitáveis.

[0053]0O termo “carreador” refere-se a excipientes e diluentes, e significa um material, composição ou veículo, tal como um enchimento líquido ou sólido, diluente, excipiente, solvente ou material encapsulado, envolvido no carreamento ou transporte de um agente farmacêutico de um órgão, ou porção do corpo, para outro órgão, ou porção do corpo.

[0054] Como usado aqui, o termo “tratamento” inclui qualquer efeito, por exemplo, diminuição, redução, modulação, melhoria ou eliminação, que resulta na recuperação da condição, doença, distúrbio, e similares, ou melhora de um sintoma do mesmo. Tratamento pode ser cura, recuperação, ou melhora, pelo menos parcial, do distúrbio. Em certas modalidades, tratamento é cura da doença.

[0055]O termo “distúrbio” refere-se e é usado de modo intercambiável com os termos “doença,” “condição,” ou “enfermidade,” salvo indicado em contrário.

[0056]Os métodos e composições descritos aqui podem ser usados sozinhos ou em combinação com outros agentes terapêuticos e/ou modalidades. O termo administrado “em combinação,” como usado aqui, é entendido como significando que dois (ou mais) tratamentos diferentes são entregues ao indivíduo durante o decorrer da aflição do indivíduo com o distúrbio, de modo que os efeitos dos tratamentos no paciente se sobrepõem em um ponto no tempo. Em certas modalidades, a entrega de um tratamento ainda está ocorrendo quando a entrega do segundo começa, de modo que existe uma sobreposição em termos de administração. Isto é referido algumas vezes aqui como “entrega simultânea” ou “concomitante.” Em outras modalidades, a entrega de um tratamento termina antes da entrega do outro tratamento começar. Em certas modalidades de ambos os casos, O tratamento é mais eficaz devido à administração combinada. Por exemplo, o segundo tratamento é mais eficaz, por exemplo, um efeito equivalente é visto com menos do segundo tratamento, ou o segundo tratamento reduz os sintomas em uma extensão maior, do que seria visto se o segundo ou a situação análoga é vista com o primeiro tratamento. Em certas modalidades, a entrega é tal que a redução em um sintoma, ou outro parâmetro relacionado ao distúrbio é maior do que seria observado com um tratamento entregue na ausência do outro. O efeito dos dois tratamentos pode ser parcialmente aditivo, totalmente aditivo, ou maior do que aditivo. A entrega pode ser de modo que um efeito do primeiro tratamento entregue ainda é detectável quando o segundo é entregue.

[0057] “Administração crônica,” como usado aqui, refere- se à administração contínua, regular, em longo prazo, isto é, administração periódica sem interrupção substancial. Por exemplo, diariamente, por um período de tempo de pelo menos várias semanas ou meses ou anos, para os fins de tratamento de distrofia muscular em um paciente. Por exemplo, semanalmente, por um período de tempo de pelo menos vários meses ou anos, para fins de tratamento de distrofia muscular em um paciente (por exemplo, semanalmente por pelo menos seis semanas, semanalmente por pelo menos 12 semanas, semanalmente por pelo menos 24 semanas, semanalmente por pelo menos 48 semanas, semanalmente por pelo menos 72 semanas, semanalmente por pelo menos 96 semanas, semanalmente por pelo menos 120 semanas, semanalmente por pelo menos 144 semanas, semanalmente por pelo menos 168 semanas, semanalmente por pelo menos 180 semanas, semanalmente por pelo menos 192 semanas, semanalmente por pelo menos 216 semanas, ou semanalmente por pelo menos 240 semanas).

[0058] “Administração periódica,” como usado aqui,

refere-se à administração com um intervalo entre doses. Por exemplo, administração periódica inclui administração em intervalos fixos (por exemplo, semanalmente, mensalmente) que pode ser recorrente.

[0059] Salvo definido em contrário, todos os termos técnicos e científicos usados aqui têm o mesmo significado como comumente entendido pelos técnicos no assunto a qual esta invenção pertence.

[0060] EmM toda a descrição, onde composições e kits são descritos como tendo, incluindo, ou compreendendo componentes específicos, ou onde processos e métodos são descritos como tendo, incluindo, ou compreendendo etapas específicas, é contemplado que, adicionalmente, existem composições e kits da presente invenção que consistem essencialmente de, ou consistem, dos componentes citados, e que existem processos e métodos de acordo com a presente invenção que consistem essencialmente de, ou consistem, das etapas de processamento citadas.

[0061]No pedido, onde um elemento ou componente é dito como estando incluído em e/ou selecionado dentre uma lista dos elementos ou componentes, deve ser entendido que o elemento ou componente pode ser qualquer um dos elementos ou componentes, ou o elemento ou componente pode ser selecionado dentre um grupo consistindo de dois ou mais dos elementos ou componentes citados.

[0062] Adicionalmente, deve ser entendido que elementos e/ou características de uma composição ou um método descrito aqui podem ser combinados de modos variados sem se desviar do espírito e escopo da presente invenção, se explícitos ou implícitos aqui. Por exemplo, se referência é feita a um composto particular, este composto pode ser usado em várias modalidades de composições da presente invenção e/ou em métodos da presente invenção, a menos que entendido em contrário a partir do contexto. Em outras palavras, neste pedido, modalidades foram descritas e representadas de uma maneira que permite que uma aplicação clara e concisa seja descrita e desenhada, mas é planejado e será reconhecido que modalidades podem ser combinadas de modo variado ou separado sem se desviar dos presentes ensinamentos e invenção(s). Por exemplo, será reconhecido que todas as características descritas e representadas aqui podem ser aplicáveis em todos os aspectos da(s) invenção(s) descrita(s) e representada(s) aqui.

[0063]Os artigos “um” e “um”/” são usados nesta divulgação para se referir a um ou mais do que um (isto é, a pelo menos um) do objeto gramatical do artigo, a menos que o contexto seja inapropriado. Como forma de exemplo, “um elemento” significa um elemento ou mais do que um elemento.

[0064]0 termo “e/ou” é usado nesta divulgação para significar tanto “e” ou “ou” a menos que indicado em contrário.

[0065] Deve ser entendido que a expressão “pelo menos um de” inclui individualmente cada dos objetos citados após a expressão e as várias combinações de dois ou mais dos objetos citados a menos que entendido em contrário a partir do contexto e uso. A expressão “e/ou” em conexão com três ou mais objetos citados deve ser entendida como tendo o mesmo significado a menos que entendido em contrário a partir do contexto.

[0066]O uso do termo “incluir,” “inclui,” “incluindo,” “ter,” “tem,” “tendo,” “conter,” “contém,” ou “contendo,” incluindo equivalentes gramaticais dos mesmos, deve ser entendido geralmente como abrangente e não limitativo, por exemplo, não excluindo elementos ou etapas adicionais não citados, salvo especificamente definido ou entendido a partir do contexto.

[0067] Onde o uso do termo “cerca de” está antes de um valor quantitativo, a presente invenção inclui também o próprio valor quantitativo específico, a menos que especificamente definido em contrário. Como usado aqui, o termo “cerca de” refere-se à uma variação +10% do valor nominal a menos que indicado ou inferido em contrário.

[0068]Onde um peso molecular é provido e não um valor absoluto, por exemplo, de um polímero, então o peso molecular deve ser entendido como sendo um peso molecular médio, a menos que definido ou entendido em contrário a partir do contexto.

[0069] Deve ser entendido que a ordem de etapas ou ordem para realizar certas ações é imaterial contanto que a presente invenção permaneça operável. Além do mais, duas ou mais etapas ou ações podem ser conduzidas simultaneamente.

[0070]O uso de qualquer um e todos os exemplos, ou linguagem exemplar aqui, por exemplo, “tal como” ou “incluindo,” é destinado apenas a ilustrar melhor a presente invenção e não constitui uma limitação no escopo da invenção a menos que reivindicado. Nenhuma linguagem no relatório deve ser interpretada como indicando qualquer elemento não reivindicado como essencial para a prática da presente invenção.

[0071] De um modo geral, composições que especificam uma porcentagem são em peso a menos que especificado em contrário. Adicionalmente, se uma variável não for acompanhada por uma definição, então será de controle a definição prévia da variável.

II. EDASALONEXENTE E OUTROS INIBIDORES DE NF-xB

[0072]UM exemplo de um salicilato acetilado de ácido graxo que pode inibir a atividade de NF-xB e reduzir inflamação é edasalonexente, também referido como CAT-1004 (Milne et al. (2014) Neuromuscular Disorders 24(9):825). Edasalonexente, [N-(2-[ (47,77,102,132,1672,192Z2)- docosa- 4,7,10,13,16,19-hexaenamido]etil)-2-hidroxibenzamida], é uma molécula pequena na qual ácido salicílico e ácido docosahexaenoico (DHA) são conjugados covalentemente através de um ligante etilenodiamina e que é projetado para influenciar sinergicamente a capacidade de ambos destes compostos para inibir NF-xB. Edasalonexente é designada pelo Registro CAS No. 1204317-86-1 e tem a estrutura de Fórmula 1: ? H

COAÇONNNVNTNV

H OH 2 (Fórmula 1).

[0073] Edasalonexente foi demonstrado como intensificando a regeneração muscular, reduzindo a degeneração e inflamação muscular, e preservando a função muscular em camundongos mdx (Milne, J. et al., (2014) supra). Em estudos de longo prazo em camundongos mdx, o tratamento com edasalonexente resulta em função melhorada do diafragma e distâncias de corrida cumulativas aumentadas (Milne, J. et al., (2014) supra). Em um modelo canino de DMD, edasalonexente diminui a atividade de NF-xB como evidenciado pela ligação reduzida da subunidade p65 ao DNA e reduz secreção do mediador inflamatório TNF-a. Em humanos, a administração de edasalonexente resulta em uma diminuição de biomarcadores de inflamação no sangue total. Em humanos adultos saudáveis, o tratamento com edasalonexente também diminui os níveis da subunidade p65 de NF-xB em comparação ao tratamento com placebo ou com salicilato e omega-3 DHA como moléculas separadas

[0074] É contemplado que edasalonexente pode ser substituído por um homólogo estrutural conhecido como CAT- 1041, que é estruturalmente similar ao edasalonexente, mas DHA é substituído com ácido eicosapentaenoico (EPA). Em estudos de longo prazo em camundongos mdx, o tratamento com CAT-1041 preserva a função muscular, aumenta o peso do músculo esquelético, e reduz fibrose muscular. CAT-1041 também pode reduzir cardiomiopatia em camundongos mdx.

[0075] Uma síntese exemplar de edasalonexente é descrita na Publicação de Patente Internacional No. WO2010/006085A1l, e representada como a seguir:

E Han NHz =. E OH

DCC g H Ho x NH OT — Cs HATU OH Pd/C OH DHA

OH Ot

NH TANIA AANAA

[0076] Brevemente, etilenodiamina é dissolvida em água contendo verde de bromocresal como um indicador. Ácido metano sulfônico em água é adicionado até que uma transição de cor azul para amarelo pálido é alcançada. A solução é diluída com etanol e agitada vigorosamente. À mistura é adicionada a solução de Cbz-CI em dimetoxi etano e AcCOK aquoso a 50% peso/volume a 20ºC simultaneamente para manter a cor verde-amarelo pálido do indicador. Após as adições estarem completas a mistura é agitada e concentrada a baixa temperatura sob vácuo para remover os voláteis. O resíduo é agitado com água e filtrado. O filtrado é então lavado com tolueno, basificado com excesso de NaOH aquoso a 40% e extraído com tolueno. A camada orgânica é lavada com salmoura, seca com Na;SOs e evaporada para dar benzil 2- aminoetilcarbamato como um óleo.

[0077]A uma mistura de 2-aminoetilcarbamato de benzila, imidazol, ácido salicílico em acetato de etila é adicionada uma solução de DCC em acetato de etila. A mistura é agitada e filtrada. A solução é concentrada sob pressão reduzida e o produto bruto é purificado por cromatografia em sílica para produzir 2- (2-hidroxibenzamido) etilcarbamato de benzila como um sólido branco.

[0078] Uma mistura de 2- (2-hidroxibenzamido) etilcarbamato de benzila e Pd/C em MeOH é agitada sob uma atmosfera de Ho. A mistura é filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O produto bruto é purificado por cromatografia em sílica para produzir N-2-(aminoetil)2- hidroxibenzamida como um pó branco.

[0079] A uma mistura de N-2- (aminoetil)2-hidroxi benzamida, DHA e Et;N em CH3CN é adicionado HATU. A mistura é agitada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo é tratado com salmoura e extraído com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas são lavadas com HCl 1M, salmoura, NaHCO; a 5% e salmoura. A solução orgânica é seca com MgSO.s e concentrada sob pressão reduzida. O produto bruto é purificado por cromatografia em sílica para produzir N-(2- docosa-4, 7, 10, 13, 16, 19-hexaenamidoetil)-2- hidroxibenzamida como óleo amarelo claro. CAT-1041 pode ser produzido por uma abordagem similar exceto que o DHA é substituído com EPA.

III. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS [0080 ] Edasalonexente, e/ou CAT-1041, podem ser formulados com um ou mais carreadores farmaceuticamente aceitáveis para facilitar a entrega, por exemplo, entrega oral ou entrega subcutânea.

[0081]AS composições farmacêuticas de edasalonexente e/ou CAT-1041 podem ser formuladas para administração na forma sólida ou líquida, incluindo as adaptadas para o seguinte: (1) administração oral, por exemplo, cápsulas (soluções ou suspensões aquosas e não aquosas), comprimidos, bolus, pós, grânulos, e pastas; (2) administração parenteral, por exemplo, por injeção subcutânea, intramuscular, intravenosa ou epidural como, por exemplo, uma solução ou suspensão estéril, ou formulação de liberação sustentada; (3) aplicação tópica, por exemplo, como um creme, pomada, ou um curativo adesivo de liberação controlada ou pulverização aplicada à pele; (4) sublingualmente; (5) transdermicamente; ou (6) nasalmente.

[0082] As composições podem ser convenientemente apresentadas em forma de dosagem unitária e podem ser preparadas por qualquer um dos métodos bem conhecidos na técnica de farmácia. A quantidade de ingrediente ativo que pode ser combinada com material carreador para produzir uma forma de dosagem única irá variar dependendo do hospedeiro sendo tratado, e o modo particular de administração. Composições podem ser preparadas de acordo com métodos convencionas de mistura, granulação ou revestimento.

[0083] As cápsulas, comprimidos, ou outras formas de dosagens sólidas do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, podem ser preparados com revestimentos e/ou envoltórios, tais como revestimentos entéricos e outros revestimentos bem conhecidos na técnica de formulação farmacêutica. Eles também podem ser formulados a fim de proporcionar liberação controlada ou lenta do ingrediente ativo ali usando, por exemplo, hidroxipropilmetil celulose em proporções variadas para dar o perfil de liberação desejado, outras matrizes de polímeros, lipossomas e/ou microesferas. Eles podem ser esterilizados, por exemplo, por filtração através de um filtro que retém bactérias, ou por incorporação de agentes esterilizantes na forma de composições sólidas estéreis que podem ser dissolvidas em água estéril, ou algum outro meio injetável estéril antes do uso. Estas composições também podem conter opcionalmente agentes opacificantes e podem ser de uma composição de modo que liberem apenas o(s) ingrediente (s) ativo(s), ou preferivelmente, em uma determinada porção do trato gastrointestinal, opcionalmente, de modo prolongado. Formas de dosagens líquidas para administração oral do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, podem incluir emulsões,

microemulsões, soluções, suspensões, xaropes e elixires farmaceuticamente aceitáveis.

[0084] Composições farmacêuticas ilustrativas são cápsulas, por exemplo, cápsulas de gelatina, ou comprimidos incluindo edasalonexente, descrito aqui, e um carreador farmaceuticamente aceitável, tal como: a) um solvente ou diluente; b) um tensoativo; c) um cossolvente; ou d) um antioxidante. Solventes ou diluentes exemplares incluem água purificada, óleos de triglicerídeo, tais como óleo vegetal “hidrogenado ou parcialmente hidrogenado, ou misturas dos mesmos, óleo de milho, azeite de oliva, óleo de girassol, óleo de cártamo, óleos de peixe tais como EPA ou DHA, seus ésteres ou triglicerídeos ou misturas dos mesmos, ou monooleato de glicerila (tipo 40). Tensoativos exemplares incluem laurilsulfato de sódio, dioctil sulfosuccinato de sódio, polissorbato 80, polissorbato 20, brometo de cetil trietil amônio, copolímeros de óxido de polietileno-óxido de polipropileno, Cremofor EL, Span 80, Span 20, Tween 20, Tween 40, Tween 60, Tween 80, Brij L23, Brij 35, Labrasol, Plurol isoesteárico, dioctil sulfosuccinato de sódio, óleo de rícino PEG-35 (ricinoleato de Macrogolglicerol), óleo de rícino hidrogenado PEG-40 (hidroxiestearato de Macrogolglicerol). Dietilenoglicol, éter monoetílico, 1,2-octanodiol, Epikuron, 1,2- propanodiol, álcool benzílico, Aerosol oT, dodecilglucosídeo, cocoamida propilbetaína, fosfatidilcolina, 2-etil-l1,3-hexaneodiol, mono-/di- glicerídeos caprílicos/cápricos, polissorbato, Brij, Tagat, álcool isopropílico, propanol, glicolipídeo, Lipoide, mono- hexilfosfato de sódio, propilenoglicol, n-butanol,

gliceriloleato, derivados de ácido graxo polioxil 40, tetraglicol, O-alquilglicerol, dodecilglicerol, tetradecilglicerol, taurodeoxicolato, monolaurato de sacarose, dilaurato de sacarose, isooctanol, Epikuron, Oramix, 1,2-hexanodiol, bis-2- (etilhexil)sulfosuccinato, n- propanol, 1,2-propilenoglicol, monooleato de glicerol, hexanol, laurato de sacarose, Plurololeat, brometo de hexadeciltrimetilamônio, ou decanol.

Cossolventes exemplares incluem polietilenoglicol 400, polietilenoglicol 3350, polietilenoglicol 300, álcool etílico, álcool isopropílico, propilenoglicol, butanodiol, pentanodiol, hexanodiol, trietilenoglicol, tetraetilenoglicol, dipropilenoglicol, dibutilenoglicol, glicerina, dimetil isosorbida, polietilenoglicol éter de álcool tetrahidrofurfurílico, N-metil-2-pirrolidona, l-metil-2- pirrolidinona, sulfóxido de dimetila, dimetil acetamida, ácido lático, ácido glicólico, cloreto de, metileno, metil- etil-cetona, acetato de etila, ou metileno dimetil éter.

Antioxidantes exemplares incluem DL-a-tocoferol, galato de propila, butilhidroquinona terciária (tBHQ), hidroxianisol butilado (BHA) ou hidroxitolueno butilado (BHT), sulfeto de sódio, N-acetilcisteína, ácido ascórbico, ácido edético, edetato de sódio, L-cisteína, metabissulfito de sódio, glutationa, cisteína, captoprila, N-acetil cisteína, glutationa, Na-ascorbato, L-cisteína, Na; EDTA, Na;-EDTA- Ca, metimazol, quercetina, arbutina, aloesina, Nº acetilglucoseamina, ferulato de a-tocoferila, MAP (fosfato de ascorbila Mg), benzoato de sódio, L-fenilalanina, DMSA (succímero), DPA (D-penicilamina), trientina-HCl, dimercaprol, clioquinol, tiossulfato de sódio, TETA, TEPA,

curcumina, neocuproína, tanino, cuprizona, hidrogenossulfito de sódio, ácido lipoico, CB4, CB3, ADA4, AD6, AD7, Vitamina E, di-tert-butil metil fenóis, tert- butil-metoxifenóis, polifenóis, tocoferóis, ubiquinonas, ou ácido cafeico.

[0085] Edasalonexente, também pode ser administrado na forma de sistemas de entrega de lipossomas, tais como vesículas unilamelares pequenas, vesículas unilamelares e vesículas multilamelares. Lipossomas podem ser formados a partir de uma variedade de fosfolipídeos, contendo colesterol, estearilamina ou fosfatidilcolinas. Em algumas modalidades uma película de componentes lipídicos é hidratada com uma solução aquosa de um análogo descrito aqui para formar uma camada lipíca encapsulando o análogo, Como descrito na Patente US No. 5.262.564.

[0086] Administração parenteral injetável é usada geralmente para injeções subcutâneas, intramusculares ou intravenosas e infusões. Injetáveis podem ser preparados nas formas convencionais, ou como soluções ou suspensões líquidas ou como formas sólidas apropriadas para dissolução em um líquido antes da injeção.

[0087] AS “composições farmacêuticas presentes podem conter de cerca de 0,1% a cerca de 80%, de cerca de 5% a cerca de 60%, ou de cerca de 1% a cerca de 20% do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, em peso ou volume. Em certas modalidades, uma composição farmacêutica da invenção contém de cerca de 50% a cerca de 70% em peso do ingrediente ativo. Por exemplo, uma composição farmacêutica pode conter de cerca de 50% a cerca de 65%, cerca de 50% a cerca de 60%, cerca de 50% a cerca de 55%,

cerca de 55% a cerca de 70%, cerca de 55% a cerca de 65%, cerca de 55% a cerca de 60%, cerca de 60% a cerca de 70%, cerca de 60% a cerca de 65%, ou cerca de 65% a cerca de 70% em peso do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente.

[0088] Em certas modalidades, uma composição farmacêutica da invenção pode compreender, um, dois, três ou mais de: um solvente ou diluente (por exemplo, monooleato de glicerila (tipo 40)); um tensoativo (por exemplo, um tensoativo não iônico, por exemplo, polissorbato 80); um cossolvente (por exemplo, polietilenoglicol 400); e um antioxidante (por exemplo, DL- a-tocoferol).

[0089]EM certas formas de dosagem exemplares, a composição compreende, por kg, 500-700 gq do ingrediente ativo, 150-250 gq de monooleato de glicerila (tipo 40), 100- 200 g de polissorbato 80, 10-70 g de polietilenoglicol 400, e 0,5-5g de DL-ua-tocoferol.

[0090] EM certas formas de dosagem exemplares, a composição compreende, por kg, 550-650 g do ingrediente ativo, 175-230 q de monooleato de glicerila (tipo 40), 130- 180 g de polissorbato 80, 20-60 g de polietilenoglicol 400, e 1-4 q de DL-a-tocoferol.

[0091] EM certas formas de dosagem exemplares, a composição compreende, por kg, 550-625 g do ingrediente ativo, 1700-220 gq de monooleato de glicerila (tipo 40), 130- 170 g de polissorbato 80, 20-60 g de polietilenoglicol 400, e 1-4 q de DL-a-tocoferol.

[0092] EM certas formas de dosagem exemplares, a composição compreende, por kg, 585-615 q do ingrediente ativo, 180-220 gq de monooleato de glicerila (tipo 40), 140-

180 g de polissorbato 80, 20-60 g de polietilenoglicol 400, e 1-4 q de DL-a-tocoferol.

[0093] EM certas formas de dosagem exemplares, a composição compreende, por kg, 590-610 g do ingrediente ativo, 1800-220 g de monooleato de glicerila (tipo 40), 140- 180 g de polissorbato 80, 20-60 g de polietilenoglicol 400, e 1-4 q de DL-Ua-tocoferol.

[0094] EM certas formas de dosagem exemplares, a composição compreende, por kg, 585-650 g do ingrediente ativo, 180-250 gq de monooleato de glicerila (tipo 40), 140- 200 g de polissorbato 80, 20-60 g de polietilenoglicol 400, e 1-4 q de DL-a-tocoferol.

III. APLICAÇÕES TERAPÊUTICAS

[0095]A invenção provê métodos e composições para tratamento de distrofia muscular, por exemplo, distrofia muscular de Duchenne (DMD), em um indivíduo em necessidade do mesmo.

[0096]EM certas modalidades, o tratamento retarda a progressão da doença, torna lenta ou reduz a perda de capacidade de locomoção, reduz inflamação muscular, reduz dano muscular, melhora a função muscular, reduz a perda de função pulmonar, e/ou intensifica a regeneração muscular, ou qualquer combinação dos mesmos. Em certas modalidades, o tratamento mantém, retarda, ou torna lenta a progressão da doença. Em certas modalidades, o tratamento mantém a capacidade de locomoção ou reduz a perda de movimento. Em certas modalidades, o tratamento mantém a função pulmonar ou reduz a perda de função pulmonar. Em certas modalidades, o tratamento mantém ou aumenta uma distância de caminhada estável em um paciente, como medido, por exemplo, pelo teste de caminhada de 6 minutos (6MWT) . Em certas modalidades, o tratamento mantém ou reduz o tempo de caminhada/corrida de 10 metros (isto é, o teste de caminhada/corrida de 10 metros). Em certas modalidades, o tratamento mantém ou reduz o tempo de permanência em decúbito dorsal (isto é, teste de tempo para ficar em pé). Em certas modalidades, o tratamento mantém ou reduz o tempo padrão para subida de escada de quatro degraus (isto é, o teste de subida de escada de quatro degraus). Em certas modalidades, o tratamento mantém ou reduz inflamação muscular no paciente, como medido, por exemplo, por MRI (por exemplo, MRI dos músculos das pernas). Em certas modalidades, MRI mede T2 e/ou fração de gordura para identificar degeneração muscular. MRI pode identificar mudanças na estrutura e composição muscular causada por inflamação, edema, dano muscular e infiltração de gordura. Em certas modalidades, resistência muscular é medida pela avaliação do North Star Ambulatory.

[0097] Em certas modalidades, o tratamento reduz inflamação muscular, reduz dano muscular, melhora a função muscular, e/ou intensifica a regeneração muscular. Por exemplo, o tratamento pode estabilizar, manter, melhorar, ou reduzir inflamação no indivíduo. O tratamento também pode, por exemplo, estabilizar, manter, melhorar, ou reduzir dano muscular no indivíduo. O tratamento pode, por exemplo, estabilizar, manter, ou melhorar a função muscular no indivíduo. Além disso, por exemplo, o tratamento pode estabilizar, manter, melhorar, ou intensificar a regeneração muscular no indivíduo. Em certas modalidades, o tratamento mantém ou reduz inflamação muscular no paciente,

como medido, por exemplo, por imagem por ressonância magnética (MRI) (por exemplo, MRI dos músculos da perna).

[0098] Em certas modalidades, o tratamento é medido pelo teste de caminhada de 6 minutos (6MWT) . Em certas modalidades, o tratamento é medido pelo teste de caminhada/corrida de 10 metros. Em certas modalidades, o tratamento resulta em uma redução ou diminuição na inflamação muscular no paciente. Em certas modalidades, inflamação muscular no paciente é medida por imagem por MRI. Em certas modalidades, o tratamento é medido pelo teste de subida de escada de 4 degraus. Em certas modalidades, o tratamento é medido pelo teste de tempo para permanecer em pé. Em certas modalidades, o tratamento é medido por Avaliação do North Start Ambulatory.

[0099]EM certas modalidades, o paciente perdeu a capacidade de elevar-se independentemente de supino. Em certas modalidades, o paciente perdeu a capacidade de elevar-se independentemente de supino, pelo menos um ano antes do tratamento com um método ou composição da invenção. Em certas modalidades, o paciente perdeu a capacidade de elevar-se independentemente de supino dentro de um ano de início com um método ou composição da invenção. Em certas modalidades, o paciente perdeu a capacidade de elevar-se independentemente do supino dentro de dois anos de início do tratamento com um método ou composição da invenção.

[00100] Em certas modalidades, o paciente mantém capacidade de locomoção por pelo menos 24 semanas após o início do tratamento. Em certas modalidades, o paciente tem uma redução na perda de capacidade de locomoção por pelo menos 24 semanas imediatamente após o início do tratamento em comparação com um controle placebo.

[00101] EM certas modalidades, o tratamento é medido por teste do soro do paciente por biomarcadores de inflamação. Em certas modalidades, o tratamento resulta em uma redução nos níveis de um ou mais, ou uma combinação de biomarcadores de inflamação. Por exemplo, em certas modalidades, os biomarcadores de inflamação são um ou mais ou uma combinação dos seguintes: citocinas (tais como IL-1, IL-6, TNF-a), proteína C-reativa (CRP), leptina, adiponectina, e creatina quinase (CK) . Em certas modalidades, o tratamento diminui os níveis da subunidade p65 de NF-xB em comparação com o tratamento com um placebo. Biomarcadores de inflamação podem ser testados por métodos conhecidos na técnica, por exemplo, como descrito em Cruz- Guzman et al. (2015) BioMed Research International 891972.

[00102] EM certas modalidades, o tratamento mantém ou aumenta uma distância de caminhada estável em um paciente, como medido, por exemplo, pelo teste de Caminhada de 6 Minutos (6MWT), descrito, por exemplo, em McDonald et al. (2010) Muscle Nerve 42:966-74. Uma mudança na Distância de Caminhada de 6 Minutos (6MWD) pode ser expressa como um valor absoluto, uma mudança percentual ou uma mudança no valor de % previsto. Em certas modalidades, o tratamento mantém ou melhorar uma distância de caminha estável em um eMWT de um déficit de 20% no indivíduo em relação a uma pessoa semelhante saudável. O desempenho de um paciente com DMD no 6MWT em relação ao desempenho típico de um similar saudável pode ser determinado calculando um valor de % previsto. Por exemplo, a % prevista no 6MWD pode ser calculada usando a equação seguinte para machos: 196,2 + (39,81 x idade) - (1,36 x idade?) + (132,28 x altura em metros). Para fêmeas, a % prevista 6MWD pode ser calculada usando a equação seguinte: 188,61 + (51,50 x idade) - (1,86 x idade?) + (86,10 x altura em metros) (Henricson et al. (2013) PLoS Curr 5). Em certas modalidades, o tratamento com um oligonucleotídeo antissenso aumenta a distância de caminhada estável no paciente da linha de base para mais do que 3, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30 ou 50 metros (incluindo todos os números inteiros entre).

[00103] A perda de função muscular em pacientes com DMD pode ocorrer contra o contexto de crescimento e desenvolvimento normais na infância. De fato, crianças mais jovens com DMD podem mostrar um aumento na distância caminhada durante 6MWT no decorrer de cerca de 1 ano apesar do dano muscular progressivo. Em certas modalidades, o 6MWD de pacientes com DMD é comparado tipicamente a indivíduos de controle em desenvolvimento e a dados normativos existentes de indivíduos com idade e sexo correspondentes. Em certas modalidades, crescimento e desenvolvimento normais podem ser considerados para uso em uma equação com base na idade e na altura adaptadas a dados normativos. Tal equação pode ser usada para converter 6MWD em um valor percentual previsto (% prevista) em indivíduos com DMD. Em certas modalidades, a análise de dados de 6MWD com % prevista representa um método de considerar o crescimento e desenvolvimento normais, e podem mostrar que ganhos em função em idades mais precoces (por exemplo, menores do que ou iguais a 7 anos de idade) representam habilidades estáveis em vez de melhoradas em pacientes com DMD

(Henricson et al. (2013) supra).

[00104] Distrofias musculares exemplares adicionais incluem distrofia muscular de Becker (BMD), distrofia muscular congenital, distrofia muscular distal, distrofia muscular de Emery-Dreifuss, distrofia muscular facioescapuloumeral, distrofia muscular de membros-cintura, distrofia muscular miotônica e distrofia muscular oculofaríngea.

[00105] EM certas modalidades, o método reduz inflamação no músculo quadríceps em pelo menos 20%, e/ou reduz fibrose no músculo quadríceps em pelo menos 20%.

[00106]0s métodos e composições da invenção também podem ser usados para tratar uma doença inflamatória em um indivíduo. A inflamação pode estar associada com uma doença inflamatória ou uma doença em que a inflamação contribui para a doença. Doenças inflamatórias podem surgir onde existe uma inflamação do tecido do corpo. Estas incluem respostas inflamatórias locais e inflamação sistêmica. Exemplos de tais doenças incluem, mas não estão limitados a: rejeição ao transplante de órgão; lesão de reoxigenação resultante de transplante de órgão (Grupp et al. (1999) JU. Mol. Cell. Cardiol. 31: 297-303) incluindo, mas não limitado a, transplante dos seguintes órgão: coração, pulmão, fígado e rim; doenças inflamatórias crônicas das articulações, incluindo artrite, artrite reumatoide, osteoartrite e doenças ósseas associadas com reabsorção óssea aumentada; doenças inflamatórias intestinais tais como ileíte, colite ulcerativa, síndrome de Barrett, e doença de Crohn; doenças inflamatórias pulmonares tais como asma, síndrome do desconforto respiratório do adulto,

doença obstrutiva crônica das vias aéreas, e fibrose cística; doenças inflamatórias dos olhos incluindo distrofia da córnea, tracoma, ONcocercose, uveíte, oftalmite simpática e endoftalmite; doenças inflamatórias crônicas da gengiva, incluindo gengivite e periodontite; doenças inflamatórias dos rins incluindo complicações urêmicas, glomerulonefrite e nefrose; doenças inflamatórias da pele incluindo esclerodermatite, psoríase e eczema; doenças inflamatórias do sistema nervoso central, incluindo doenças desmielinizantes do sistema nervoso, esclerose múltipla, neurodegeneração associada à AIDS e mal de Alzheimer, meningite infecciosa, encefalomielite, mal de Parkinson, doença de Huntington, esclerose lateral amiotrófica e encefalite viral ou autoimune.

Doença metabólica tal como diabetes mellitus tipo II; a prevenção de diabetes tipo TI; dislipedemia; hipertrigliceridemia; complicações diabéticas, incluindo, mas não limitadas a glaucoma, retinopatia, edema de macula, nefropatia, tal como microalbuminúria e nefropatia diabética progressiva polineuropatia, neuropatia diabética, doença arterial coronariana aterosclerótica, doença arterial periférica, coma hiperglicêmico hiperosmolar não cetótico, mononeuropatias, neuropatia autonômica, problemas “nas articulações, e uma complicação da pele ou membrana mucosa, tal como uma infecção, uma dermopatia diabética, uma infecção por cândida ou necrobiose lipoidica diabeticorum; vasculite do complexo imune, lupus eritematoso sistêmico; doenças inflamatórias do coração tais como cardiomiopatia, doença cardíaca isquêmica, hipercolesterolemia, e aterosclerose; assim como várias outras doenças que podem ter componentes inflamatórios significativos, incluindo pré-eclâmpsia; insuficiência hepática crônica, trauma cerebral e medula espinhal, e câncer. A doença inflamatória também pode ser uma inflamação sistêmica do corpo, exemplificada por choque gram-positivo ou gram-negativo, choque hemorrágico ou anafilático, ou choque induzido por quimioterapia de câncer em resposta a citocinas inflamatórias, por exemplo, choque associado com citocinas pró-inflamatórias. Tal choque pode ser induzido, por exemplo, por um agente quimioterápico que é administrado como um tratamento para câncer. Outros distúrbios incluem depressão, obesidade, doenças alérgicas, eventos cardiovasculares agudos, arritmia, prevenção de morte súbita, miopatias inflamatórias tal como dermatomosite, miosite por corpos de inclusão, e polimiosite, caquexia do câncer, e inflamação resultante de cirurgia e trauma.

[00107] EM certas modalidades, um método ou composição da invenção é administrado em combinação com corticosteroide. Corticosteroides são uma classe de produtos químicos que inclui hormônios esteroides produzidos naturalmente no córtex adrenal de vertebrados e análogos destes hormônios que são sintetizados em laboratório. Corticosteroides estão envolvidos em uma ampla faixa de processos fisiológicos, incluindo resposta ao estresse, resposta imune, e regulação de inflamação, metabolismo de carboidrato, catabolismo de proteínas, níveis de eletrólito no sanque, e comportamento. Corticosteroides exemplares incluem betametasona, budesonida, cortisona, dexametasona, hidrocortisona, metilprednisolona, prednisolona, prednisona, ou deflazacorte. Em certas modalidades, o corticosteroide é administrado antes de, em conjunto com, ou subsequente a um método ou composição da invenção.

[00108]EmM certas modalidades, um método ou composição da invenção é administrado em combinação com um agente de omissão de éxons, por exemplo, Exondys 51º (eteplirsen; ver Patentes Us Nos. 7.807.816, 7.960.541, 8.486.907

9.416.361, e 9.506.058), que foi aprovado pela agência Food and Drug Administration dos Estados Unidos para tratamento de DMD em pacientes que tiveram uma mutação confirmada do gene DMD que pode conduzir à omissão (skipping) do exon 51. É contemplado que outros agentes, por exemplo, agentes de omissão de éxons 45, tais como SRP-4045 (ver, Patentes US Nos. 8.524.880, 9.447.415 e 9228.187), outros agentes de omissão de éxons tais como drisaperseno, e agentes de omissão de éxon 53, tais como SRP-4053 (ver, Patente US Nos. 8.455.636, 9.024.007, e 9.416.361) podem ser administrados em combinação com um ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, descrito aqui.

[00109] Em certas modalidades, o indivíduo é um humano. Em certas modalidades, o indivíduo tem sete anos de idade ou mais. Em certas modalidades, o indivíduo tem entre cerca de 6 meses e cerca de 4 anos de idade. Em certas modalidades, o indivíduo está entre cerca de 4 anos de idade e 7 anos de idade.

IV. DOSAGEM/ADMINISTRAÇÃO

[00110]0 regime de dosagem utilizando o ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, é selecionado de acordo com uma variedade de fatores incluindo tipo, espécies, idade, peso, sexo e condição médica do paciente; a severidade da condição a ser tratada; a via de administração; a função renal ou hepática do paciente; e o composto particular empregado.

[00111] EM certas modalidades, uma dose do salicilato acetilado de ácido graxo, por exemplo, edasalonexente, administrada ao paciente compreende entre cerca de 10 mg/kg e cerca de 500 mg/kg (por exemplo, cerca de 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 250, 300, 350, 400, 450, ou 500 mg/kg). Em certas modalidades, uma dose do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, administrada ao paciente compreende de cerca de 10 mg/kg a cerca de 100 mg/kg, de cerca de 10 mg/kg a cerca de 75 mg/kg, de cerca de 10 mg/kg a cerca de 50 mg/kg, de cerca de 10 mg/kg a cerca de 25 mg/kg, de cerca de 25 mg/kg a cerca de 100 mg/kg, de cerca de 25 mg/kg a cerca de 75 mg/kg, de cerca de 25 mg/kg a cerca de 50 mg/kg, de cerca de 50 mg/kg a cerca de 100 mg/kg, de cerca de 50 mg/kg a cerca de 75 mg/kg, de cerca de 75 mg/kg a cerca de 100 mg/kg, ou de cerca de 90 mg/kg a cerca de 110 mg/kg. Em certas modalidades, uma dose do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, administrada ao paciente compreende entre cerca de 25 mg/kg e 50 mg/kg, por exemplo, cerca de 33 mg/kg ou entre cerca de 50 mg e cerca de 100 mg/kg, por exemplo, cerca de 67 mg/kg. Alternativamente, dosagens podem ser dadas em termos absolutos, por exemplo, mg, 20 mg, 30 mag, 40 ma, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg, 100 mg, 110 ma, 120 mg, 130 mg, 140 mg, 150 mg, 160 mg, 170 ma, 180 mg, 190 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg, 350mg, 400 mg, 450 mg, 500 mg, 550 mg, 600 mg, 650 mg, 700 mg, 750 mg,

800 mg, 850 mg, 900 mg, 950 mg, 1000 mg, 1500 mg, 2000 mg, 2500 mg, 3000 mg, 3500 mg, 4000 mg, 4500 mg, 5000 mg, 5500 mg, 6000 mg, 6500 mg, 7000 mg, 7500 mg, 8000 mg, 8500 mg, 9000 mg, 9500 mg, ou 10.000 mg. Em certas modalidades, a dose é administrada como uma ou mais formas de dosagem contendo 100 mg, 250 mg, 500 mg ou 1000 mg do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente. Por exemplo, em uma modalidade, a forma de dosagem contém 100 mg de edasalonexente. Em outra modalidade, a forma de dosagem contém 250 mg de edasalonexente. Em certas modalidades, a dose diária total é cerca de 1500 mg a cerca de 3000 mg ou cerca de 2000 mg a cerca de 3000 mg. Em certas modalidades, a dose diária total é distribuída em três doses divididas na faixa de cerca de 500 mg a cerca de 1000 mg ou de cerca de 670 mg a cerca de 1000 ma.

[00112] EM certas modalidades, uma dose do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, é administrada ao paciente uma vez por dia. Em certas modalidades, uma dose do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, é administrada ao paciente mais do que uma vez por dia. Por exemplo, em certas modalidades, uma dose do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, é administrada ao paciente, por exemplo, duas vezes por dia, três vezes por dia, ou quatro vezes por dia.

[00113] EM certas modalidades em que mais do que uma dose do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, é administrada ao paciente por dia, cada dose compreende uma quantidade igual do salicilato acetilado de ácido graxo. Em outras modalidades, uma ou mais doses podem compreender uma quantidade diferente do ingrediente ativo, por exemplo,

edasalonexente, da outra dose.

[00114] EM certas modalidades, um regime de dosagem compreende três doses por dia. Em certas modalidades, as três doses compreendem quantidades iguais do composto, por exemplo, cada dose compreende de cerca de 25 mg/kg a cerca de 50 mg/kg do composto, por exemplo, cada dose compreende cerca de 33 mg/kg do composto. Em certas modalidades, a primeira dose e a segunda dose compreendem uma quantidade menor do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, do que a terceira dose, por exemplo, a primeira dose e a segunda dose compreendem cerca de metade da quantidade do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, como uma terceira dose. Por exemplo, em certas modalidades, a primeira dose e a segunda dose compreendem de cerca de 25 mg/kg a cerca de 50 mg/kg do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, e a terceira dose compreende de cerca de 50 mg/kg a cerca de 100 mg/kg do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, por exemplo, a primeira dose e a segunda dose compreendem cerca de 33 mg/kg de ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, e a terceira dose compreende cerca de 67 mg/kg do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente. Em certas modalidades, das três doses diárias, pelo menos uma dose é diferente em quantidade da outra dose. Em certas modalidades, das três doses diárias, duas são a mesma e uma é diferente. Por exemplo, em certas modalidades, cada dose compreende de cerca de 20 mg/kg a cerca de 40 mg/kg. Por exemplo, duas doses compreendem cerca de 37,5 mg/kg, enquanto a dose restante compreende cerca de 25 mg/kg. Em certas modalidades, todas as três doses são diferentes. Por exemplo, em certas modalidades, cada dose compreende de cerca de 20 mg/kg a cerca de 40 mg/kg.

[00115]EM certas modalidades, a primeira dose é administrada pela manhã, a segunda dose é administrada no meio do dia, e a terceira dose é administrada à noite. Em certas modalidades, cada dose é administrada com alimento, por exemplo, na hora de uma refeição. Por exemplo, em certas modalidades, a primeira dose é administrada na hora do café da manhã, a segunda dose é administrada na hora do almoço, e a terceira dose é administrada na hora do jantar. Quando a dose é tomada com alimento, o conteúdo do alimento pode ser ajustado para facilitar a absorção do composto ativo. Por exemplo, a dose pode ser tomada com refeições com alto teor de gordura. Por exemplo, em uma modalidade, a dose é tomada com uma refeição contendo pelo menos 1 g, pelo menos 2 g, pelo menos 3 g, pelo menos 49, pelo menos 5 gq, pelo menos 6 g, pelo menos 7 g, pelo menos 8 g, pelo menos 9 q, pelo menos 10 g, pelo menos 11 g, pelo menos 12 g, pelo menos 13 g, pelo menos 14 g, pelo menos 15 g, pelo menos 16 g, pelo menos 17 g, pelo menos 18 g, pelo menos 19 g, ou pelo menos 20 g de gordura. Em uma modalidade particular, a dose é tomada com uma refeição contendo pelo menos 8 g de gordura. Sob certas circunstâncias, as mesmas doses são administradas com o café da manhã e jantar, enquanto uma dose menor é administrada com o almoço. Sob certas circunstâncias, em que três doses diárias são administradas e as doses não são iguais, a menor dose é tomada na hora do almoço. Em certas modalidades, em que três doses diárias são administradas e as doses não são iguais, a dose maior é tomada na hora do jantar.

[00116] EM certas modalidades, a dosagem diária total do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, administrada ao paciente compreende entre cerca de 20 mg/kg e cerca de 1000 mg/kg (por exemplo, cerca de 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, ou 1000 mg/kg). Em certas modalidades, a dosagem diária total do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, administrada ao paciente compreende de cerca de 100 mg/kg a cerca de 200 mg/kg, cerca de 100 mg/kg a cerca de 175 mg/kg, cerca de 100 mg/kg a cerca de 150 mg/kg, cerca de 100 mg/kg a cerca de 125 mg/kg, cerca de 125 mg/kg a cerca de 200 mg/kg, cerca de 125 mg/kg a cerca de 175 mg/kg, cerca de 125 mg/kg a cerca de 150 mg/kg, cerca de 150 mg/kg a cerca de 200 mg/kg, cerca de 150 mg/kg a cerca de 175 mg/kg, ou cerca de 175 mg/kg a cerca de 200 mg/kg. Em certas modalidades, a dosagem diária total do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, compreende entre cerca de 100 mg/kg e 200 mg/kg, por exemplo, cerca de 100 mg/kg ou cerca de 133 mg/kg.

[00117] EM certas modalidades, a dosagem diária total do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, administrada ao paciente compreende de cerca de 90 mg/kg a cerca de 110 mg/kg. Em certas modalidades, a dosagem diária total do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, administrada ao paciente compreende 100 mg/kg. Em certas modalidades, a dosagem diária total do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, administrada ao paciente compreende 100 mg/kg t+ 5% de uma dose diária total. Em certas modalidades, a dosagem diária total do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, administrada ao paciente compreende 100 mg/kg + 10% de uma dose diária total. Em certas modalidades, a dosagem diária total do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, administrada ao paciente compreende 100 mg/kg + 15% de uma dose diária total. Em certas modalidades, a dosagem diária total do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, administrada ao paciente compreende 100 mg/kg + 20% de uma dose diária total.

[00118] EM certas modalidades, a dosagem diária total do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, é administrada ao paciente em três doses divididas em que cada das três doses é ou um múltiplo de 250 mg (por exemplo, 250 mg, 500 mg, 750 mg, 1000 mg, 1250 mg, 1500 mg, 1750 mg, ou 2000 mg, etc.) ou um múltiplo de 100 mg (por exemplo, 100 mg, 200 mg, 300 ma, 400 ma, 500 mag, 600 mg, 700 mg, 800 mg, 900 ma, 1000 mg, 1100 ma, 1200 mg, 1300 mg, 1400 mg, 1500 mg, 1600 mg, 1700 mag, 1800 mg, 1900 mg, ou 2000 mg, etc.). Em certas modalidades, a dose é administrada como uma ou mais formas de dosagem contendo 100 mg ou 250 mg do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente. Em certas modalidades, as três doses divididas são a mesma e são múltiplas de 250 mg ou 100 mg. Em certas modalidades, das três doses divididas, duas doses são iguais e uma é diferente e as doses são múltiplas de 250 mg ou 100 mg. Em certas modalidades, as três doses divididas são cada diferentes, e as doses são múltiplas de 250 mg ou 100 mg. Em certas modalidades, as três doses divididas são a mesma, são múltiplas de 250 mg ou 100 mg e fornecem uma dose diária total de 100 mg/kg + 10%. Em certas modalidades, das três doses divididas, duas doses são iguais e uma é diferente, as doses são múltiplas de 250 mg ou 100 mg, e fornecem uma dose diária total de 100 mg/kg + 10%. Em certas modalidades, as três doses divididas são cada diferentes, mas as doses são múltiplas de 250 mg ou 100 mg e fornecem uma dose diária total de 100 mg/kg + 10%. Em certas modalidades, as três doses divididas são a mesma, são múltiplas de 250 mg ou 100 mg e fornecem uma dose diária total de 100 mg/kg + 15%. Em certas modalidades, das três doses divididas, duas doses são iguais e uma é diferente, as doses são múltiplas de 250 mg ou 100 mg, e fornecem uma dose diária total de 100 mg/kg + 15%. Em certas modalidades, as três doses divididas são cada diferentes, mas as doses são múltiplas de 250 mg ou 100 mg e fornecem uma dose diária total de 100 mg/kg + 15%. Em certas modalidades, as três doses divididas são as mesmas, são múltiplas de 250 mg ou 100 mg e fornecem uma dose diária total de 100 mg/kg t+ 20%. Em certas modalidades, das três doses divididas, duas doses são iguais e uma é diferente, as doses são múltiplas de 250 mg ou 100 mg, e fornecem uma dose diária total de 100 mg/kg + 20%. Em certas modalidades, as três doses divididas são, cada uma, diferentes, mas as doses são múltiplas de 250 mg ou 100 mg e fornecem uma dose diária total de 100 mg/kg + 20%. Em certas modalidades, a dosagem diária total do ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, não excede 6000 mg.

[00119] Os métodos e composições farmacêuticas descritos aqui podem ser administrados cronicamente ao paciente para o tratamento de distrofia muscular. Por exemplo, os métodos ou composições farmacêuticas podem ser administrados por um período de tempo de pelo menos várias semanas ou meses ou anos (por exemplo, por pelo menos 2 semanas, 4 semanas, 6 semanas, 8 semanas, 10 semanas, 12 semanas, 24 semanas, 36 semanas, 48 semanas, 72 semanas, 96 semanas, 120 semanas 144 semanas, 168 semanas, 180 semanas, 192 semanas, 216 semanas, ou pelo menos 240 semanas).

[00120] Como observado acima, as formulações ou preparações divulgadas aqui podem ser dadas por administração oral, parenteral, sistêmica, tópica, retal ou intramuscular. Elas são dadas tipicamente em formas apropriadas para cada via de administração. Por exemplo, elas são administradas na forma de comprimidos ou cápsula, por injeção, inalação, loção para os olhos, pomada, supositórios, etc., administração por injeção, infusão ou inalação; tópica por loção ou pomada; e retal por supositórios. Em certas modalidades, o ingrediente ativo, por exemplo, edasalonexente, pode ser administrado na forma intranasal através de uso tópico de veículos intranasais apropriados, ou através de vias transdérmicas, usando aquelas formas de adesivos transdérmicos na pele bem conhecidos pelos técnicos no assunto. Em outras determinadas modalidades, a forma de dosagem é administrada oralmente. Em certas modalidades, a forma de dosagem é administrada oralmente como uma cápsula ou comprimido.

[00121] En certas modalidades e como mostrado no Exemplo 4, O tratamento de crianças que sofrem de Distrofia Muscular de Duchenne com 100 mg/kg/dia de edasalonexente em três doses iguais (cerca de 33 mg/kg) proporciona um retardo clinicamente significativo da progressão de doença,

por exemplo, como demonstrado por tempos de caminhada/corrida de 10 metros, subida de escada de 4 degraus, e tempo de permanência em pé, e estabiliza o escore de avaliação do North Star Ambulatory (NSAA) durante pelo menos um período de tratamento de 60 semanas, em comparação com um período de controle sem tratamento.

EXEMPLOS

[00122]A descrição é ilustrada adicionalmente pelos exemplos seguintes, que não devem ser interpretados como limitando esta divulgação ao escopo ou espírito dos procedimentos específicos descritos aqui. Deve ser entendido que os exemplos são dados para ilustrar certas modalidades e que nenhuma limitação ao escopo da divulgação é assim visada. EXEMPLO 1: Avaliação farmacocinética de regime de dosagem de Edasalonexente em camundongos C57BL/6

[00123] Camundongos —.“C57BL/6 foram administrados com edasalonexente em sua dieta e/ou por sonda oral. Modelagem farmacocinética (PK) foi usada para identificar quantidades apropriadas de dosagem e tempos em relação as doses de 67 mg/kg/dia e 100 mg/kg/dia que foram testadas em ensaios clínicos em humanos com edasalonexente. Especificamente, camundongos foram administrados com edasalonexente a 1,5% em sua dieta, 450 mg/kg/dia distribuídos oralmente como dose diária única, 450 mg/kg/dia distribuídos oralmente como três doses divididas igualmente, ou 600 mg/kg/dia distribuídos oralmente como duas doses de 150 mg/kg/e uma dose de 300 mg/kg. Para regimes de dosagem com três doses diárias, as doses foram administradas as 7:00 da manhã, meio-dia e 5:00 da tarde.

[00124]0s regimes de dosagem para cada grupo são mostrados na TABELA 1. Cada grupo incluiu 12 camundongos. TABELA 1 Grupo 1 Dieta com Edasalonexente (1,5% peso/peso) " Edasalonexente QD | 2 Dieta de Controle | (450 mg/kg/dose Edasalonexente TID 3 Dieta de Controle (150 mg/kg/dose = 450 mg/kg/dia) Edasalonexente TID 4 Dieta de Controle (150/150/300 mg/kg/dose = 600 mg/kg/dia)

[00125] Para animais administrados com edasalonexente em sua dieta, a concentração de edasalonexente foi medida por LC/MS/MS a cada 4 horas por 24 horas, começando no sétimo dia de dosagem. Para animais administrados com edasalonexente oralmente, a concentração de edasalonexente foi medida por LC/MS/MS a 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 6 e 24 horas após dosagem, começando no terceiro dia de dosagem.

[00126]A concentração de edasalonexente no tecido indicado para o grupo 1, recebendo uma dose de edasalonexente a 1,5% na dieta, é mostrada na Figura 1, e parâmetros PK para este grupo são mostrados na TABELA 2. TABELA 2 ; AUC Cc mL c mL Cc mL Plasma 22,4 44,6 10,7

[00127] Concentrações “plasmáticas edasalonexente para grupo de tratamento 2 (recebendo 450 mg/kg/dia distribuídos oralmente como dose diária única), grupo 3 (recebendo 450 mg/kg/dia distribuídos oralmente como três doses divididas igualmente), e grupo 4 (recebendo 600 mg/kg/dia distribuídos oralmente como duas doses de 150 mg/kg e uma dose de 300 mg/kg) são descritas na Figura 2, e parâmetros

PK para estes grupos são mostradas na TABELA 3. Grupo 2 exibiu alta exposição intermitente ao edasalonexente e um AUC de 1316 h*ng/mL, -2,5 vezes mais alto que o observado para grupo 1. TABELA 3 EXEMPLO 2: Avaliação de regimes de dosagem de Edasalonexente em camundongos mdx

[00128] Camundongos —mdx jovens foram tratados por semanas com regimes de dosagem variados de edasalonexente. O camundongo mdx é um modelo animal utilizável e geralmente aceito para estudo de distrofia muscular de Duchenne (DMD) (Mann et al. (2001) Proc. Natl. Acad. Sci. 98(1):42-7). Camundongos mdx são deficientes em expressão de distrofia de comprimento completo devido a uma mutação genética no gene da distrofina.

[00129] Camundongos foram administrados com edasalonexente em sua dieta, e/ou por sonda oral. Especificamente, os camundongos foram administrados com edasalonexente a 1% em sua dieta, 450 mg/kg/dia distribuídos oralmente como dose diária única, 450 mg/kg/dia distribuídos oralmente como três doses divididas igualmente, e/ou 600 mg/kg/dia distribuídos oralmente como duas doses de 150 mg/kg e uma dose de 300 mg/kg. Para regimes de dosagem com três doses diárias, as doses foram distribuídas as 7:00 da manhã, meio-dia e 5:00 da tarde.

[00130]0s regimes de dosagem para cada grupo de tratamento são mostrados na TABELA 4. Cada grupo de tratamento incluiu 10-11 camundongos.

TABELA 4 Tratamento Oral [1 [| pie d comme | A 2 Dieta com Edasalonexente (1% peso/peso) ; r Edasalonexente QD Dieta com Edasalonexente Edasalonexente QD (1% peso/peso) (450 mg/kg/dose) ; " Edasalonexente TID Edasalonexente TID 7 Dieta de Controle (150/150/300 mg/kg/dose = 600 mg/kg/dia)

[00131] Animais foram tratados por quatro semanas, sacrificados, e tecidos foram coletados para análise histológica. Para avaliação de inflamação e fibrose, músculos “quadríceps foram processados para coloração histoquímica de hematoxilina e eosina (H&E) e vermelho picrosirius (colágeno). De cada animal, 2-4 seções transversais completas foram analisadas digitalmente usando Imagel, com a área nuclear manchada por hematoxilina determinada como uma medida de infiltração inflamatória, e a área manchada por vermelho picrosirius determinada como uma medição de fibrose.

[00132] Inflamação e fibrose no grupo de tratamento 2, como medidas por coloração histoquímica, são descritas na Figura 3. Estudos prévios prolongados em camundongos mais velhos, edasalonexente a 1% na dieta reduziu inflamação e fibrose em camundongos mdx jovens. Combinados com dados PK de Exemplo 1, estes resultados mostram que a administração de edasalonexente na dieta resultou em baixa exposição, constante e inflamação e fibrose reduzidas.

[00133] Inflamação e fibrose para grupos de tratamento 3, 4, e 5 são descritas na Figura 4. Estes resultados mostram que o grupo de tratamento 4 não causou uma redução significativa de inflamação ou fibrose. Portanto, a administração de edasalonexente na dieta (grupo 2; Figura 3) foi eficaz, enquanto a administração de edasalonexente com uma única dose diária de 450 mg/kg (grupo 4; Figura 4) não foi eficaz, apesar de um AUC -2,5 vezes mais alto para a dose diária única de 450 mg/kg, como observado em camundongos C57BL/6 no Exemplo 1. Estes resultados mostram que a alta exposição intermitente ao edasalonexente por sonda oral não é eficaz.

[00134] Inflamação e fibrose para grupos de tratamento 6 e 7 são mostradas na Figura 5. Os resultados mostram que a frequência de dosagem leva a eficácia, e cobertura temporal aumentada por dosagem três vezes ao dia melhorou os resultados terapêuticos. A administração de edasalonexente com uma dose diária única de 450 mg/kg (grupo 4; Figura 4) não foi eficaz, mas a administração de três doses diárias de 150 mg/kg, para o mesmo total de dose diária (grupo 6; Figura 5), foi eficaz, apesar do fato de que os dois tratamentos resultam em concentrações máximas (Cmax) e mínimas similares, e exposição total ao fármaco (AUC) em estudos PK em camundongosC57BL/6. Dobrando a última dose diária (grupo 7) levou a uma eficácia adicional. Acredita- se que a última dose proporcionou exposição adicional durante o longo período noturno.

[00135] Juntos, estes resultados sugerem que o tempo máximo acima de uma determinada concentração limiar de fármaco, em vez de Cmax OU Exposição total ao fármaco, primariamente aciona eficácia de edasalonexente.

EXEMPLO 3: Modelagem de regimes de dosagem de Edasalonexente em humanos

[00136] Edasalonexente mostrou ser seguro e bem tolerado, e inibiu as vias NF-KB ativadas em um programa clínico de fase 1 que incluiu três estudos controlados por placebo em adultos (Donovan et al. (2017) J. Clin. Pharmacol. 57(5): 627-639). Edasalonexente também mostrou efeitos positivos no tratamento em meninos afetados por DMD inscritos na idade de 4-7 no experimento de fase 2 MoveDMDO (NCT02439216) e extensão em aberto (open-label).

[00137] As Figura 6 e Figura 7 mostram concentração plasmática de edasalonexente para indivíduos do ensaio de fase 2 MoveDMD8. Os indivíduos receberam ou duas doses de 33 mg/kg por dia (para uma dose diária total de 67 mg/kg/dia) ou três doses de 33 mg/kg por dia (para uma dose diária total de 100 mg/kg/dia). Medições de concentração foram tomadas após a primeira dose diária de 33 mg/kg para ambos os grupos.

[00138]UM modelo PK de população foi desenvolvido usando dados dos experimentos clínicos de edasalonexente de fase 1 e fase 2. A concentração plasmática e parâmetros PK foram modelados para três regimes de dosagem: duas doses de 33 mg/kg por dia (para uma dose diária total de 87 mg/kg), três doses de 33 mg/kg por dia (para uma dose diária total de 100 mg/kg/dia), ou duas doses de 33 mg/kg e uma dose de 67 mg/kg por dia (para uma dose diária total de 133 mg/kg/dia). Os resultados são mostrados nas Figuras 8 e 9 e TABELA 5.

TABELA 5 [66 | 50 [58 | 22 | 6 6 | sa ses [ana Ts an Sd so

Es a Test es so sm

[00139] Os resultados mostram que à Crin para o regime de dosagem de 100 mg/kg/dia (33 mg/kg, TID) está na faixa de níveis eficazes no modelo de camundongo mdx, e dobrando a dose noturna para dar o regime de dosagem de 133 mg/kg/dia aumenta o tempo acima do limiar. Adicionalmente, como mostrado na Figura 9, a dose de 100 mg/kg (33 mg/kg TID) resulta em um aumento substancial no tempo acima do limiar em comparação com a dose de 67 mg/kg (33 mg/kg BID).

[00140] Estes resultados, combinados com os dos Exemplos 1 e 2 aqui, proveem suporte pré-clínico para avaliar uma dose clínica igualmente dividida de 100 mg/kg/dia (três doses de 33 mg/kg), assim como uma dose clínica desigualmente dividida de 133 mg/kg/dia (duas doses de 33 mg/kg e uma dose de 67 mg/kg por dia), como os dados sugerem estas doses podem prover tempo suficiente acima do limiar para levar a eficácia no tratamento de distrofia muscular, por exemplo, DMD, em humanos. EXEMPLO 4: Avaliação de Edasalonexente em pacientes humanos com DMD

[00141]O experimento com MoveDMD (ver Figura 10) foi projetado para avaliar eficácia, segurança/tolerabilidade, farmacocinética (PK), farmacodinâmica (PD), e resposta de dose de edasalonexente. A primeira porção da fase do experimento com MoveDMD era um estudo de 1 semana para avaliar a segurança, PK, e PD a 33 e 67 mg/kg/dia, dados em 2 doses divididas, e 100 mg/kg/dia dados em 3 doses divididas.

[00142] Nas partes de segunda fase e extensão em aberto (OLE) do experimento com MoveDMD foram inscritos meninos com idades de 4 a 7 com DMD. Fase 2 era um estudo controlado por placebo de 12 semanas com dois coortes recebendo 33 mg/kg duas vezes diariamente (BID; 67 mg/kg/dia; n=10) ou 33 mg/kg três vezes diariamente (TID; 100 mg/kg/dia; n=10), e um coorte de placebo (n=10). Pacientes no OLE continuaram com um dos regimes de dose de edasalonexente.

[00143]O programa de doses para a segunda fase do experimento com MoveDMD foi selecionado com base em dados clínicos e não clínicos incluindo (1) a relação de exposição/eficácia observada em modelos animais; (2) segurança, tolerabilidade, e PD da fase 1 em pacientes pediátricos com DMD; (3) PK humano.

[00144] Edasalonexente administrado 33 mg/kg três vezes diariamente (TID) (100 mg/kg/dia) demonstrou uma preservação de função muscular e retardo de progressão da doença DMD por 60 semanas em comparação com as taxas de mudança durante o período de controle antes do tratamento com edasalonexente. Também foi observado que este regime de dosagem de 100 mg/kg/dia foi igualmente eficaz ao regime de dosagem contendo 133 mg/kg/dia (33 mg/kg no café da manhã, 33 mg/kg no almoço, e 67 mg/kg no jantar) com menos efeitos colaterais.

4.A Exposição sistêmica em pacientes com DMD alcança níveis em que inibição de NF-KB foi observada em adultos

[00145] EM um estudo em adultos, mudanças na expressão de genes dirigidos por NF-xB foram observadas em sangue total a uma dose de aproximadamente 100 mg/kg/dia. No estudo com MoveDMD, quando doses de 33 mg/kg foram dadas duas vezes diariamente (dose total de 67 mg/kg) ou três vezes diariamente (dose total de 100 mg/kg), exposições sistêmicas alcançaram níveis nos quais NF-KB foi observado no estudo com adultos. A Figura 11 mostra os níveis de exposição diários (ng/ml*h) para meninos inscritos no estudo de fase II em comparação com a exposição média diária em adultos mostrando inibição de NF-xB. Como mostrado, as doses de 67 mg/kg/dia e 100 mg/kg/dia fornecem níveis de exposição diária comparáveis aos níveis mostrados no estudo com adultos como sendo eficazes na inibição de NF-xKx B.

4.B Exposição sustentada de Edasalonexente em pacientes com DMD correlacionado com inibição de NF-KB

[00146] Para determinar os efeitos de um dado regime de dosagem de edasalonexente na inibição de NF-xB, os níveis de expressão de diversos transcritos de gene relacionados à inflamação e regulados por NEF-xB foram medidos em todas as amostras de sangue de pacientes com DMD.

[00147] Genes relacionados à inflamação e regulados por NF-KkB foram escolhidos dentre o conjunto de genes HALLMARK TNF/NF-kB de Broad Institute (Liberzon, et. al., (2015), Cell Systems, 1(6) :417-425). Sangue foi coletado de meninos com DMD antes e uma semana após tratamento com edasalonexente e coletado em tubos de RNA PAXgene (Qiagen). RNA foi extraído e sequenciado para medir diretamente a abundância de transcritos em sangue total em ambos os pontos no tempo em cada paciente, e a abundância de transcritos uma semana após tratamento foi comparada a valores de pré-tratamento para determinar a mudança relativa em cada um dos transcritos selecionados. Esta razão para cada gene através de todos os pacientes dentro de um coorte de doses foi calculada em média e é mostrada na Figura 12 por colunas como média +/- SEM. Um valor menor do que indica uma diminuição nos transcritos após uma semana de tratamento com edasalonexente.

[00148] Como mostrado na Figura 12, houve uma diminuição estatisticamente significativa em todos os 24 transcritos medidos no grupo recebendo a dose de 100 mg/kg/dia, enquanto a diminuição na dose de 67 mg/kg/dia não foi tão pronunciada. Na dose de 33 mag/kg/dia dose, diminuições não foram geralmente observadas.

[00149]As razões de todos os 24 transcritos em um paciente também foram calculadas em média, e são mostradas na Figura 13 usando símbolos que representam esta média para cada paciente individual. Esta média foi traçada em gráficos contra os valores Cnrnínin de edasalonexente médios dentro de cada coorte de dose (mostrada no eixo x em ng/ml).

[00150]A Figura 13 mostra a mudança de vezes média nos transcritos de genes versus os níveis médios Cnhnínimo (Nng/mL) para cada uma das doses de 33mg/kg/dia, 67 mg/kg/dia, e 100 mg/kg/dia de edasalonexente. Como mostrado na Figura 13, um nível médio Crínino mais alto se correlaciona com a diminuição mais alta em NF-xB e transcrições de genes relacionadas à inflamação. Em particular, a dose de 100 mg/kg/dia tinha o nível Crínino mais alto e diminuição mais alta em transcritos de genes relevantes em comparação com as doses de 33 mg/kg/dia e 67 mg/kg/dia, mostrando uma correlação inversa na abundância de transcritos com os valores Crínin médios após uma semana de tratamento com edasalonexente. Por conseguinte, os resultados mostram que,

destes três regimes de dosagem, 100 mg/kg/dia (33 mg/kg três vezes diariamente) foi o mais eficaz na redução de transcritos de genes relacionados à inflamação e regulados por NF-xB em pacientes com DMD, e sugere que Cnínimo É UM motor da eficácia de edasalonexente.

4.C Tratamento com Edasalonexente estabiliza NSAA e outras medidas funcionais em meninos com DMD

[00151] A avaliação do North Star Ambulatory(NSAA) é uma escala funcional validada projetada especificamente para meninos com capacidade de locomoção com DMD e mede a função global em meninos jovens. Como mostrado na Figura 14, a progressão da doença foi retardada em indivíduos do estudo durante o período de tratamento com 100 mg/kg/dia (60 semanas), como medido por escores do NSAA que se estabilizaram em comparação com a taxa de mudança de escores do NSAA durante o período de controle sem tratamento (36 semanas antes do período de dosagem de edasalonexente).

[00152]A caminhada/corrida de 10 metros, subida de escada de 4 degraus, e permanência em pé são todos os testes cronometrados usados como uma medição de função em meninos com DMD. Em cada um destes testes, como mostrado nas Figuras 15-17, a taxa média de mudança de velocidade dos indivíduos do estudo para completar estas tarefas físicas se estabilizaram durante o período de tratamento de 60 semanas com 100 mg/kg/dia de edasalonexente em comparação com a taxa de mudança durante o período de controle sem tratamento (36 semanas precedentes ao período de tratamento). Todos os valores cronometrados do teste de função se estabilizaram durante o período de tratamento.

[00153] Consequentemente, estes resultados sugerem que o tratamento de pacientes com DMD com 100 mg/kg/dia em três doses de 33 mg/kg fornecem um retardo clinicamente significativo de progressão da doença durante o período de tratamento de 60 semanas, em comparação com o período de controle sem tratamento.

4.D Edasalonexente melhorou de modo significativo a taxa de mudança de níveis de MRI T2 em indivíduos em estudo com DMD

[00154] A constante de tempo de relaxamento transversal MR avaliada por MRI (MRI-T;; também referida como T7; em bruto) é sensível a várias características patofisiológicas de patologia de doença na DMD, incluindo dano muscular, inflamação, e infiltração de gordura, e fornece um método para monitorar a patologia da doença ao longo de uma ampla faixa de idades. Além disso, a proporção de infiltração de gordura no músculo (fração de gordura), medida usando o padrão ouro, MRS de prótons(*H-MRS), ou uma técnica de imagem Dixon de 3 pontos, está associada com progressão da doença e se correlaciona com o desempenho nos testes funcionais. (MWillcocks et al., (2016), Ann. Neurol.,79(4):535-47; Barnard et al., (2018), PLoS One, 13(3) :=0194283). Estas são medições não invasivas de progressão da doença na DMD que são elevadas e aumentam com a idade; mudanças nestas se relacionam fortemente com mudanças na função e preveem perda futura de marcos funcionais.

[00155] Como mostrada na Figura 18, a taxa anualizada de mudança (msegundo/ano) de valores MRI-T2 em indivíduos do estudo durante o período de tratamento com edasalonexente de 100 mg/kg/dia (60 semanas) foi melhorada significativamente em relação à taxa de mudança durante o período fora de tratamento (36 semanas antes do período de tratamento com edasalonexente). O valor de MRI-T2 era um compósito de 5 músculos inferiores da perna. A estabilização de valores de MRI-T2 é consistente com o retardo concomitante de progressão da doença DMD observado através de avaliações funcionais discutidas previamente.

[00156] Adicionalmente, como mostrado na Figura 19, a mudança na fração de gordura em indivíduos do estudo como avaliada através de espectroscopia MR após 48 semanas recebendo 100 mg/kg/dia era 0,85% para o sóleo (músculo da panturrilha), e 5,9% para o vastus lateralis (um músculo do quadríceps), enquanto durante as 26 semanas de período de controle sem tratamento, antes da administração de edasalonexente, a mudança na fração de gordura era 2,6% para o sóleo e 10,4% para o vastus lateralis. Consequentemente, edasalonexente a 100 mg/kg/dia foi eficaz na diminuição da taxa de aumento na fração de gordura nestes músculos em comparação com o período sem tratamento. Isto também é uma melhora em relação às mudanças observadas na fração de gordura no estudo de história natural ImagingDMD em que a mudança em 1 ano foi de 3% para o sóleo e 7% para o vastus lateralis (apesar de mais do que 75% dos indivíduos do estudo estarem usando esteroides crônicos).

[00157] Consequentemente, estas medições MRI apoiam efeitos positivos do tratamento com edasalonexente durante 48 semanas a 100 mg/kg/dia (3 doses de 33 mg/kg/dia) em meninos que sofrem de DMD.

4.E Edasalonexente foi bem tolerado sem sinais de segurança [O00158]Não foram observadas descobertas adversas com relação à segurança de edasalonexente administrado a 100 mg/kg nos indivíduos do estudo. O fármaco foi bem tolerado com a maioria de eventos adversos sendo de natureza suave e principalmente gastrointestinais. Nenhuma tendência adversa na hematologia, química, função renal ou adrenal, ou níveis de cálcio ou fosfato foi observada. Como mostrado na Figura 20, as frequências cardíacas de indivíduos do estudo diminuíram em relação a valores normativos e aumentos apropriados para a idade no peso e altura foram observados como mostrado pelos percentis constantes para altura, peso, e índice de massa corporal (BMI) ao longo do período de tratamento com base nos percentis pelo Gráfico de Crescimento CDC para meninos de idade similar.

4.F Conclusões

[00159] Estes dados demonstram que a exposição sustentada e tempo acima do limiar são motores para sinalização e eficácia farmacodinâmicas, em que a exposição sustentada acima de um nível limiar pode ser alcançada com 100 mg/kg/dia em três doses de 33mg/kg doses, e que esta dosagem mostra retardo clinicamente significativo de progressão da doença ao longo de 1 ano em comparação com o período de controle sem tratamento em indivíduos do estudo. EXEMPLO 5: Regime de dosagem de Edasalonexente para criança com DMD

[00160] Uma criança pesando 20 kg e sofrendo de DMD pode ser prescrita com uma dose diária de 100 mg/kg de edasalonexente, resultando em uma dose total de 2.000 mg. Esta dose total é dividida em três doses. A primeira dose é tomada oralmente com o café da manhã, a segunda com o almoço, e a terceira com o jantar. Todas as doses são tomadas com alimentos contendo pelo menos 8 g de gordura para auxiliar a absorção. Embora seja desejável dividir a dose em três doses iguais, porque edasalonexente está disponível em cápsulas de 250 mg, isto não é possível. A fim de minimizar o número de cápsulas, pode ser desejável administrar a dose de 2.000 mg como 750 mg no café da manhã (3 cápsulas de 250 mg), 500 mg no almoço (2 cápsulas de 250 mg), e 750 mg (3 cápsulas de 250 mg) no jantar. Se as 3 doses forem desiguais, então a dose ou doses maiores podem ser administradas preferivelmente no café da manhã ou jantar e a dose menor pode ser dada na hora do almoço.

[00161] Uma criança pesando 28 kg e sofrendo de DMD pode ser prescrita com uma dose diária de 100 mg/kg de edasalonexente, resultando em uma dose total de 2,800 mg. Esta dose total é dividida em três doses. A primeira dose é tomada oralmente com o café da manhã, a segunda com o almoço, e a terceira com o jantar. Todas as doses são tomadas oralmente com alimentos contendo pelo menos 8 g de gordura para auxiliar a absorção. Embora seja desejável dividir a dose em três doses iguais, porque edasalonexente está disponível em cápsulas de 250 mg, isto não é possível. Assim, a dose de 2,800 mg pode ser aumentada para 3000 mg e administrada como 1.000 mg no café da manhã (4 cápsulas de 250 mg), 1.000 mg no almoço (4 cápsulas de 250 mg), e 1.000 mg (4 cápsulas de 250 mg) no jantar. A dose total é, portanto, 3.000 mg devido à quantidade de edasalonexente fornecido nas cápsulas. No entanto, a dose real total (3.000 mg/dia) não excede mais do que 10% da dose recomendada, isto é, 2800 mg/dia. Neste caso, a dose real é 7,1% maior que a dose recomendada. Em abordagem alternativa, a quarta cápsula de 250 mg no almoço pode ser substituída com uma cápsula de 100 mg de modo que a criança recebeu 1.000 mg com o café da manhã, 850 mg com o almoço, e 1.000 mg com o jantar para dar uma dose diária total de 2850 mg, caso em que a dose real é 1,8% maior do que a dose de 2800 mg recomendada.

INCORPORAÇÃO POR REFERÊNCIA

[00162] A divulgação total de cada uma das patentes e documentos científicos mencionados aqui é incorporada por referência para todos os fins.

EQUIVALENTES

[00163] A invenção pode ser realizada em outras formas específicas sem se sair do espírito ou características essenciais da mesma. As modalidades acima, portanto, devem ser consideradas em todos os aspectos ilustrativas em vez de limitantes da invenção descrita aqui. O escopo da invenção é, assim, indicado pelas reivindicações em anexo em vez de pela descrição acima, e todas as mudanças dentro do significado e faixa de equivalência das reivindicações são destinadas a serem aqui englobadas.

Claims (40)

REIVINDICAÇÕES

1. Método de tratamento de distrofia muscular em um indivíduo em necessidade do mesmo, o método caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao indivíduo um regime de dosagem de um composto tendo a estrutura de Fórmula 1, ? H

COAÇONNNVNTNV

H OH o (Fórmula TI), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, eficaz para alcançar uma concentração plasmática limiar do composto no indivíduo de pelo menos cerca de 20 ng/ml por pelo menos 12 horas em um período de 24 horas.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a concentração plasmática limiar é de cerca de 20 ng/ml a cerca de 200 ng/ml.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o composto está na ou acima da concentração limiar por pelo menos cerca de 13 horas, cerca de 14 horas, cerca de 15 horas, cerca de 16 horas, cerca de 17 horas, cerca de 18 horas, cerca de 19 horas, cerca de 20 horas, cerca de 21 horas, cerca de 22 horas, cerca de 23 horas, ou cerca de 24 horas em um período de 24 horas.

4, Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-3, caracterizado pelo fato de que o regime de dosagem compreende uma, duas ou três doses do composto por dia.

5. Método, de acordo com a reivindicação 4,

caracterizado pelo fato de que cada dose compreende de cerca de 25 mg/kg a cerca de 100 mg/kg do composto.

6. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-5, caracterizado pelo fato de que a dosagem diária total compreende de cerca de 100 mg/kg a cerca de 200 mg/kg, ou de cerca de 100 mg/kg a cerca de 150 mg/kg.

7. Método, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que a dosagem diária total compreende cerca de 133 mg/kg.

8. Método, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que a dosagem diária total compreende cerca de 100 mg/kg.

9. Método, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que a dosagem diária total compreende de cerca de 90 mg/kg a cerca de 110 mg/kg.

10. Método, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que a dosagem diária total compreende 100 mg/kg + 5%, 100 mg/kg + 10%, 100 mg/kg + 15%, ou 100 mg/kg + 20%.

11. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-10, caracterizado pelo fato de que o regime de dosagem compreende três doses por dia.

12. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que as três doses compreendem quantidades iguais do composto.

13. Método, de acordo com a reivindicação 11 ou 12, caracterizado pelo fato de que cada dose compreende de cerca de 25 mg/kg a cerca de 50 mg/kg do composto.

14. Método, de acordo com a reivindicação 11 ou 12,

caracterizado pelo fato de que cada dose compreende de cerca de 20 mg/kg a cerca de 40 mg/kg.

15. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 12-14, caracterizado pelo fato de que cada dose compreende cerca de 33 mg/kg do composto.

16. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 11, 13 ou 14, caracterizado pelo fato de que a primeira dose e a segunda dose compreendem uma quantidade menor do composto do que a terceira dose.

17. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 11-15, caracterizado pelo fato de que as três doses são iguais e são administradas em formas de dosagem que contêm 250 mg ou 100 mg do composto de Fórmula TI.

18. Método, de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que as três doses equivalem a uma dose diária total de 100 mg/kg + 5%, 100 ma/kg + 10%, 100 mg/kg + 15%, ou 100 mg/kg + 20%.

19. Método, de acordo com a reivindicação 17 ou 18, caracterizado pelo fato de que a dose diária total não excede 6.000 mg.

20. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 11-19, caracterizado pelo fato de que a primeira dose é administrada pela manhã, a segunda dose é administrada no meio do dia, e a terceira dose é administrada à noite.

21. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 4-20, caracterizado pelo fato de que cada dose é administrada com alimento.

22. Método, de acordo com a reivindicação 20,

caracterizado pelo fato de que cada dose é administrada na hora de uma refeição.

23. Método, de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que a primeira dose é administrada na hora do café da manhã, a segunda dose é administrada na hora do almoço, e a terceira dose é administrada na hora do jantar.

24. Método, de acordo com a reivindicação 23, caracterizado pelo fato de que as duas doses que são administradas no café da manhã e jantar são maiores do que a dose administrada no almoço.

25. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 4-24, caracterizado pelo fato de que a dose é tomada com alimento contendo pelo menos 8 g de gordura.

26. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-25, caracterizado pelo fato de que o composto é administrado em uma composição farmacêutica.

27. Método, de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que a composição compreende um ou mais dentre monooleato de glicerila (tipo 40), polissorbato 80, polietilenoglicol 400, ou DL-a-tocoferol.

28. Método, de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que a composição compreende 50- 70% em peso do composto.

29. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 26-28, caracterizado pelo fato de que a composição é formulada como uma cápsula.

30. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-29, caracterizado pelo fato de que o composto é administrado oralmente.

31. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-30, caracterizado pelo fato de que o método reduz inflamação no músculo quadríceps em pelo menos 20%.

32. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-31, caracterizado pelo fato de que o método reduz fibrose no músculo quadríceps em pelo menos 20%.

33. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-32, caracterizado pelo fato de que a distrofia muscular é distrofia muscular de Duchenne (DMD).

34. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-33, caracterizado pelo fato de que o indivíduo é humano.

35. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende 50-70% em peso de um composto tendo a estrutura de Fórmula TI, ? H Cê OALAIAVANAVEVNEV

H OH o (Fórmula 1), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e opcionalmente um, dois, três, ou quatro dentre: um solvente ou diluente; um tensoativo; um cossolvente; e um antioxidante.

36. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 35, caracterizada pelo fato de que o solvente ou diluente é monooleato de glicerila (tipo 40).

37. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 35 ou 36, caracterizada pelo fato de que o tensoativo é um tensoativo não iônico.

38. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 37, caracterizada pelo fato de que o tensoativo não iônico é polissorbato 80.

39. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 35-38, caracterizada pelo fato de que o cossolvente é polietilenoglicol 400.

40. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 35-39, caracterizada pelo fato de que o antioxidante é DL-a-tocoferol.

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