BR112020002300A2

BR112020002300A2 - método de preparo de ácido cólico, método de preparo de ácido desoxicólico, método de preparo de um composto da fórmula i-10, composto, composição farmacêutica ou cosmética, método de preparo de um composto da fórmula iii-8a, método de preparo de ácido quenodesoxicólico, composição de ácido cólico de alta pureza, método para remoção não cirúrgica de um depósito de gordura

Info

Publication number: BR112020002300A2
Application number: BR112020002300-0A
Authority: BR
Inventors: Dejun Liu; Yingzhe Qian; JunHo Lee; Yoonseok Song
Original assignee: Medytox Inc.
Priority date: 2017-08-03
Filing date: 2018-08-03
Publication date: 2020-08-04
Also published as: EP3645548B1; KR20220035196A; JP2020528920A; JP6937893B2; CN111328332A; US20220009957A1; KR102388809B1; CA3070853C; CA3070853A1; US11161872B2; US20200369712A1; EP3645548C0; WO2019024920A1; EP3645548A4; CN111328332B; EP3645548A1; KR20200026273A

Abstract

A presente revelação fornece métodos de preparo de ácido cólico, ácido desoxicólico ou ácido quenodesoxicólico, um éster do mesmo, ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável do mesmo, e intermediários sintéticos úteis e inovadores, por exemplo, conforme descrito para os métodos 1, 1A, 1B, 2, 3, 3A e 4. O método pode começar com um esteroide derivado de planta como um material de partida, tal como desidroepiandrosterona (DHEA) ou Acetil-desidroepiandrosterona (Ac-DHEA). São fornecidas também composições farmacêuticas ou cosméticas e usos das mesmas, que compreendem um ou mais dentre ácido cólico, ácido desoxicólico ou ácido quenodesoxicólico, um éster do mesmo, ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável do mesmo, que seja de alta pureza, por exemplo, livre de impurezas derivadas de animais.

Description

MÉTODO DE PREPARO DE ÁCIDO CÓLICO, MÉTODO DE PREPARO DE ÁCIDO DESOXICÓLICO, MÉTODO DE PREPARO DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA I-10, COMPOSTO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA OU COSMÉTICA, MÉTODO DE PREPARO DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA III-8A, MÉTODO DE PREPARO DE ÁCIDO QUENODESOXICÓLICO, COMPOSIÇÃO DE ÁCIDO CÓLICO DE ALTA PUREZA, MÉTODO PARA REMOÇÃO NÃO CIRÚRGICA DE UM

DEPÓSITO DE GORDURA REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS

[0001] Este pedido reivindica prioridade ao Pedido Internacional Nº PCT/CN2017/095784, depositado em 3 de agosto de 2017, cujo conteúdo é incorporado ao presente documento a título de referência em sua totalidade.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO CAMPO DA INVENÇÃO

[0002] A presente revelação é relacionada, de modo geral, ao campo de síntese de esteroide, por exemplo, métodos de preparo de um ácido biliar (por exemplo, ácido cólico, ácido desoxicólico, ou ácido quenodesoxicólico) a partir de um esteroide de origem vegetal e intermediários sintéticos inovadores. A presente revelação é também relacionado a composições farmacêuticas ou cosméticas que compreendem um ácido biliar (por exemplo, ácido cólico, ácido desoxicólico, ou ácido quenodesoxicólico) ou seu éster (ou ésteres) ou sal (ou sais), e usos farmacêuticos ou cosméticos dos mesmos.

ANTECEDENTES DA TÉCNICA

[0003] Ácidos biliares tais como ácido desoxicólico, ácido cólico e similares são compostos farmacêutica ou cosmeticamente úteis. Consultar, por exemplo, Mukhopadhyay, S. e U. Maitra., Current Science 87:1666-1683 (2004) (“Chemistry and Biology of Bile Acids”). Recentemente, o uso de um ou mais dentre colato e quenodeoxicolato foi sugerido para remoção não cirúrgica de um depósito de gordura localizada em um indivíduo. Consultar, por exemplo, o documento nº WO 2015/198150. Ácidos biliares foram tipicamente obtidos a partir de fontes bovinas e ovinas. Patógenos tais como priões podem contaminar tais fontes. Desse modo, condições estritas para ácidos biliares de origem mamífera são exigidas por autoridades reguladoras. Consultar, por exemplo, o documento nº WO 2008/157635 e o documento nº WO 2011/075701. Por exemplo, ácido desoxicólico de animais na Nova Zelândia são uma fonte de ácidos biliares para uso humano sob regimes reguladores dos E.U.A, desde que os animais continuem a permanecer isolados e, de outro modo, livres de patógenos observáveis. Tais condições estritas impõem uma limitação na quantidade de ácidos biliares de origem mamífera adequados e não impede a possibilidade de que os ácidos biliares estarão livres tais patógenos.

[0004] Em luz das condições estritas para ácidos biliares de origem mamífera observadas acima, ácidos biliares sintéticos, tais como ácido cólico, ácido desoxicólico, ácido quenodesoxicólico, adequados para uso como medicamentos ou cosméticos em humanos estão em necessidade. Esses ácidos biliares sintéticos seriam sintetizados partindo de fontes não-animais, tais como de fontes vegetais ou materiais de partida sintéticos. Portanto, os ácidos biliares sintéticos podem ser vantajosos pelo menos no fato de que os mesmos são conhecidos a partir do momento inicial de ser livre de impurezas derivadas de animais, tais como patógenos que têm capacidade de produzir um efeito deletério em um humano, e outros agentes nocivos, tais como metabólitos animais ou microbiais, toxinas, incluindo toxinas bacterianas, tais como pirógenos.

BREVE SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0005] Em várias modalidades, a presente revelação é direcionada a um método de preparo de ácido cólico, ácido desoxicólico, ou ácido quenodesoxicólico, um éster do mesmo, ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades, o método pode compreender, consistir essencialmente em, ou consistir em qualquer uma das modalidades descritas abaixo para quaisquer dos métodos 1, 1A, 1B, 2, 3, 3A e 4. Em algumas modalidades, o método também pode compreender, consistir essencialmente em, ou consistir em qualquer uma das modalidades de acordo com qualquer um dos Esquemas 1 a 8. Em algumas modalidades, o método uses um esteroide de origem não animal (por exemplo, de origem vegetal ou sintético) como um material de partida. Em algumas modalidades, o método começa com um esteroide derivado de planta como um material de partida, tal como desidroepiandrosterona (DHEA) ou Acetil- desidroepiandrosterona (Ac-DHEA). Em algumas modalidades, o método começa com um material de partida de esteroide que é livre de quaisquer impurezas derivadas de animais. Em algumas modalidades, o método produz o ácido cólico, ácido desoxicólico, ou ácido quenodesoxicólico, éster dos mesmos, ou sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos que é livre de quaisquer impurezas derivadas de animais. Desse modo, determinadas modalidades da presente revelação são também direcionadas a ácido cólico, ácido desoxicólico, ou ácido quenodesoxicólico, um éster dos mesmos ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos, produzidos por qualquer um dos métodos descritos no presente documento.

[0006] Em algumas modalidades, a presente revelação também fornece intermediários sintéticos inovadores úteis para a preparação de ácido cólico, ácido desoxicólico, ou ácido quenodesoxicólico, um éster dos mesmos ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0007] Em algumas modalidades, a presente revelação também fornece uma composição de ácido cólico de alta pureza. Em algumas modalidades, a composição de ácido cólico de alta pureza compreende, consiste essencialmente em, ou consiste em ácido cólico ou um sal do mesmo, e um ou mais compostos selecionados dentre os Compostos 32 a 35 ou um sal dos mesmos. Em algumas modalidades, a quantidade total de Compostos 32 a 35 e sais dos mesmos, conforme aplicável, é menor que 5% (por exemplo, menor que 5%, menor que 4%, menor que 3%, menor que 2%, menor que 1%, menor que 0,5%, menor que 0,2%, menor que 0,1%) em peso e/ou por área de HPLC do ácido cólico e sal do mesmo. Em algumas modalidades, a quantidade de cada um dos Compostos 32 a 35 e seu respectivo sal, conforme aplicável, é menor que 5% (por exemplo, menor que 5%, menor que 4%, menor que 3%, menor que 2%, menor que 1%, menor que 0,5%, menor que 0,2%, menor que 0,1%) em peso e/ou por área de HPLC do ácido cólico e sal do mesmo. Em algumas modalidades, o ácido cólico ou sal do mesmo tem uma pureza de pelo menos 95% (por exemplo, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, ou pelo menos 99%) em peso e/ou em área de HPLC. Em algumas modalidades, a composição de ácido cólico de alta pureza é substancialmente livre ou livre de uma impureza de origem animal.

[0008] Em algumas modalidades, a presente revelação também fornece uma composição farmacêutica ou cosmética que compreende um ou mais dentre ácido cólico de alta pureza, ácido desoxicólico, ou ácido quenodesoxicólico, um éster dos mesmos ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica ou cosmética compreende uma quantidade eficaz de alta pureza (por exemplo, uma pureza de pelo menos 98%, pelo menos 99%, pelo menos 99,5%, ou pelo menos 99,9% em peso) ácido cólico ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos, ou uma composição de ácido cólico de alta pureza descrita no presente documento, e um excipiente farmacêutica ou cosmeticamente aceitável. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica ou cosmética compreende adicionalmente uma quantidade eficaz de ácido desoxicólico de alta pureza (por exemplo, uma pureza de pelo menos 98%, pelo menos 99%, pelo menos 99,5%, ou pelo menos 99,9% em peso) ou ácido quenodesoxicólico ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos. Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento, o ácido cólico de alta pureza, ácido desoxicólico ou ácido quenodesoxicólico, ou um éster ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos também podem ser caracterizados por serem livres de quaisquer impurezas derivadas de animais.

[0009] Algumas modalidades da presente revelação são direcionadas a um método de administração da composição farmacêutica ou cosmética descrita no presente documento. Em algumas modalidades, o método é para remoção não cirúrgica de um depósito de gordura localizada em um indivíduo. Em algumas modalidades, o método compreende administrar ao indivíduo uma composição farmacêutica ou cosmética que compreende uma quantidade eficaz de lise de gordura de ácido cólico de alta pureza (por exemplo, uma pureza de pelo menos 98%, pelo menos 99%, pelo menos 99,5%, ou pelo menos 99,9% em peso), ácido quenodesoxicólico, um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos, ou uma combinação dos mesmos, e um excipiente farmacêutica ou cosmeticamente aceitável.

[0010] Modalidades e vantagens adicionais da revelação serão apresentados, em parte, na descrição a seguir, e fluirá a partir da descrição, ou pode ser aprendida por prática da revelação. A modalidades e vantagens da revelação serão realizadas e obtidas por meio dos elementos e combinações particularmente apontadas nas reivindicações anexas.

[0011] Deve-se entender que tanto o sumário precedente quanto a descrição detalhada a seguir são exemplificadores e explicativos somente, e não são restritivos da invenção conforme reivindicado. DESCRIÇÃO DOS DESENHOS/FIGURAS

[0012] A Figura 1 mostra um desenho de estrutura de raio X para o Composto 35.

[0013] A Figura 2 apresenta um traço de HPLC exemplificador que mostra um perfil de impureza de ácido cólico sintetizado pelos métodos no presente documento (por exemplo, conforme mostrado nos Exemplos 1 e 2). No traço de HPLC, o Composto 32 é designado como impureza 1, que tem um tempo de retenção de 5,02 minutos, o Composto 33 é designado como impureza 2, que tem um tempo de retenção de 9,17 minutos, o Composto 34 é designado como impureza 3, que tem um tempo de retenção de 12,10 minutos, e o Composto 35 é designado como impureza 4, que tem um tempo de retenção de 15,73 minutos.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO DEFINIÇÕES

[0014] Deve-se entender que valências apropriadas são mantidas para todas as porções químicas e combinações das mesmas.

[0015] Também deve-se entender que uma modalidade específica de um porção química variável no presente documento pode ser igual ou diferente de outra modalidade específica que tem o mesmo identificador. Por exemplo, R1 em várias fórmulas é independentemente selecionado e pode ser igual ou diferente. Outras variáveis, tais como R30 em várias fórmulas são também independentemente selecionadas e podem ser iguais ou diferentes.

[0016] Conforme usado no presente documento, o termo “impurezas derivadas de animais” se refere a impurezas que têm uma “origem animal”, que se refere a se originar de um reino (Animalia) de coisas vivas incluindo organismos de múltiplas células e organismos de células únicas. Em algumas modalidades, o termo “impurezas derivadas de animais” pode ser patógenos, metabólitos animais ou microbiais, e toxinas, incluindo toxinas bacterianas, tais como pirógenos.

[0017] Conforme usado no presente documento, o termo “ácido cólico (CA)” se refere ao composto ácido 3α,7α,12α-tri-hidroxi-5β-colan-24-óico, que tem a seguinte estrutura: .

[0018] Conforme usado no presente documento, um “material de partida de esteroide” se refere a um composto que tem um esqueleto de anel de esteroide conforme a seguir: . Por toda a presente revelação, o átomo e numeração de anel em esqueletos de esteroide dos compostos no presente documento segue a convenção abaixo: .

[0019] Conforme usado no presente documento, o termo “ácido quenodesoxicólico (CDCA)” se refere ao composto ácido 3α,7α-di-hidroxi-5β-colan-24-óico, que tem a seguinte estrutura:

.

[0020] Conforme usado no presente documento, o termo “ácido desoxicólico (DCA)” se refere ao composto ácido 3α,12α-di-hidroxi-5β-colan-24-óico, que tem a seguinte estrutura: .

[0021] Conforme usado no presente documento, o termo “sal farmaceuticamente aceitável” se refere a um sal que é adequado para uso farmacêutico e é comensurado com uma razão de benefício/risco razoável. Sais farmaceuticamente aceitáveis são conhecidos na técnica. Por exemplo, os ácidos biliares (por exemplo, CA, DCA, ou CDCA) descritos no presente documento podem estar na forma de um sódio, potássio, lítio, cálcio, magnésio, amônio ou sal de tetralquilamônio. Sais adequados incluem aqueles descritos em P. Heinrich Stahl, Camille G. Wermuth (Eds.), Handbook and Pharmaceutical Salts Properties, Selection, and Use; 2002. Esses sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser preparados reagindo-se os ácidos biliares (por exemplo, CA, DCA, ou CDCA) com uma base adequada. Para fins ilustrativos, exemplos de tais bases incluem hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, ou hidróxido de lítio. Alternativamente, os sais podem ser preparados por hidrólise de ésteres dos ácidos biliares (por exemplo, CA, DCA, ou CDCA) com uma base e omitindo uma constituição ácida que causaria a forma de ácido dos ácidos biliares.

[0022] Conforme usado no presente documento, o termo “sal cosmeticamente aceitável” se refere a um sal que é adequado para uso cosmético e é comensurado com uma razão de benefício/risco razoável. Sais cosmeticamente aceitáveis são conhecidos na técnica e incluem, por exemplo, sais de adição de base com um cátion selecionado dentre o grupo que consiste em sódio (Na+), potássio (K+), lítio (Li+), magnésio (Mg2+), cálcio (Ca2+), bário (Ba2+), estrôncio (Sr2+) e amônio (NH4+).

[0023] O termo “indivíduo” conforme usado no presente documento se refere a qualquer animal, ou células das mesmas seja in vitro ou in vivo, suscetível aos métodos descritos no presente documento. Em modalidades preferenciais, o indivíduo é um humano.

[0024] Conforme usado no presente documento, o termo “alquila” se refere a um radical de um grupo hidrocarboneto saturado de cadeia linear ou ramificada que tem de 1 a 10 átomos de carbono (“C1-10 alquila”). Em algumas modalidades, um grupo alquila tem 1 a 9 átomos de carbono (“C1- 9 alquila”). Em algumas modalidades, um grupo alquila tem 1 a 8 átomos de carbono (“C1-8 alquila”). Em algumas modalidades, um grupo alquila tem 1 a 7 átomos de carbono (“C1-7 alquila”). Em algumas modalidades, um grupo alquila tem 1 a 6 átomos de carbono (“C1-6 alquila”). Em algumas modalidades, um grupo alquila tem 1 a 5 átomos de carbono (“C1-5 alquila”). Em algumas modalidades, um grupo alquila tem 1 a 4 átomos de carbono (“C1- 4 alquila”). Em algumas modalidades, um grupo alquila tem 1 a 3 átomos de carbono (“C1-3 alquila”). Em algumas modalidades, um grupo alquila tem 1 a 2 átomos de carbono (“C1-2 alquila”). Em algumas modalidades, um grupo alquila tem 1 átomo de carbono (“C1 alquila”). Em algumas modalidades, um grupo alquila tem 2 a 6 átomos de carbono (“C2-6 alquila”). Exemplos de grupos C1-6 alquila incluem metila (C1), etila (C2), propila (C3) (por exemplo, n-propila, isopropila), butila (C4) (por exemplo, n-

butila, terc-butila, sec-butila, iso-butila), pentila (C5) (por exemplo, n-pentila, 3-pentanila, amila, neopentila, 3- metil-2-butanila, amila terciária), e hexila (C6) (por exemplo, n-hexila). Exemplos adicionais de grupos alquila incluem n- heptila (C7), n-octila (C8) e similares.

[0025] Conforme usado no presente documento, o termo “alquila opcionalmente substituída” se refere a um grupo alquila que é não-substituída ou substituída (uma “alquila substituída”) com um ou mais substituintes (por exemplo, conforme descrito no presente documento, por exemplo, halogênio, tais como F).

[0026] Conforme usado no presente documento, o termo “agente protetor de hidroxila” se refere a um reagente que, sob condições de reação adequadas, reage com um grupo hidroxila para formar um grupo protetor hidroxila.

[0027] Conforme usado no presente documento, o termo “grupo protetor hidroxila” se refere a qualquer grupo que forma um derivado do grupo hidroxila que é estável às reação (ou reações) projetada, em que o dito grupo protetor hidroxila subsequente e opcionalmente pode ser relativamente removido. O derivado de hidroxila pode ser obtido por reação seletiva de um agente protetor de hidroxila com um grupo hidroxila. Um elemento de habilidade comum na técnica pode selecionar grupo (ou grupos) protetor hidroxila apropriados com base na natureza do grupo (ou grupos) de proteção e na reação (ou reações) projetada. Por exemplo, métodos para introduzir ou remover vários grupos protetores hidroxila podem ser encontrados em “Protective Groups in Organic Synthesis”, 4a ed. P. G. M. Wuts; T. W. Greene, John Wiley, 2007, e em P. J. Kocienski, “Protecting Groups”, 3a ed. G. Thieme, 2003, cujo conteúdo é incorporado a este documento a título de referência em sua totalidade.

[0028] Exemplos não limitadores de grupos protetores hidroxila adequados para a presente revelação incluem aqueles que formam um éter do grupo hidroxila, tal como éter metílico, éter alquílico, éter de prenila, éter p- metoxibenzílico, éter trifenilmetílico, éter 2- trimetilsililetílico, éter terc-butílico, éter de cinamila, éter de propargila, éter de p-methoxifenila, éter de benzila, éter de 3,4-dimetoxibenzila, éter de 2,6-dimetoxibenzila, éter de o-nitrobenzila, éter de p-nitrobenzila, éter de 4- (trimetilsililmetil)-benzila, éter de 2-naftilmetila, éter de difenilmetila, éter de (4-metoxifenila)-fenilmetila, éter de (4-fenil-fenil)-fenilmetila, éter de p,p′-dinitrobenzidrila, éter de 5-dibenzosuberila, éter tris(4-terc- butilfenil)metílico, éter de(α-naftil)-difenilmetila, éter de p-metoxifenildifenilmetila, éter de di(p- metoxifenila)fenilmetila, éter tri(p-metoxifenila)metílico e éter de 9-(9-fenil)xantenila.

[0029] Exemplos não limitadores de grupos protetores hidroxila adequados para a presente revelação também incluem aqueles que formam um alcoxialquiléter (por exemplo, acetais e cetais) do grupo hidroxila, tais como éter 1-etóxietílico, éter 1-metil-1-metóxietílico, éter [(3,4- dimetoxibenzil)oxi]metílico, éter guaiacolmetílico, éter 2- metóxietoximetílico, éter 2-(trimetilsilil)etoximetílico, éter de tetrahidropiranila, éter de tetrahidrofuranila, éter metoximetílico, éter benziloximetílico, éter p- metoxibenziloximetílico, éter p-nitrobenziloximetílico, éter o-nitrobenziloximetílico, éter (4-metoxifenoxi)metílico, éter terc-butoximetílico, éter 4-penteniloximetíla, éter siloximetílico, éter 1-metoxiciclohexílico, éter 4- metoxitetrahidropiranila, éter 1-[(2-cloro-4-metila)fenil]-4- metoxipiperidin-4-ílico, éter 1-(2-fluorofenil)-4- metoxipiperidin-4-ílico, éter 1-(4-clorofenil)-4- metoxipiperidin-4-ílico ou éter 1-metil-1-benziloxietílico.

[0030] Exemplos não limitadores de grupos protetores hidroxila adequados para a presente revelação também incluem aqueles que formam um tioacetal ou tiocetal do grupo hidroxila, tais como éter de tetrahidrotiopiranila, éter de 4-metóxitetrahidrotiopiranila, éter de tetrahidrothiofuranila ou éter de 1,3-benzoditiolan-2-ila.

[0031] Exemplos não limitadores de grupos protetores hidroxila adequados para a presente revelação também incluem aqueles que formam um éter de silila do grupo hidroxila, tais como éter de trimetilsilila, éter de trietilsilila, éter de triisopropilsilila, éter de terc- butildimetilsilila, éter de dimetilisopropilsilila, éter de dietilisopropilsilila, éter de difenilmetilsilila, éter de trifenilsilila, éter de dimetiltexilsilila, éter de 2- norbornildimetilsilila, éter de terc-butildifenilsilila, éter de (2-hidroxistiril)dimetilsilila, éter de (2- hidroxistiril)diisopropilsilila, éter de terc- butilmetoxifenilasilila ou éter de terc-butoxidifenilsilila.

[0032] Exemplos não limitadores de grupos protetores hidroxila adequados para a presente revelação também incluem aqueles que formam um éster do grupo hidroxila, tais como éster de acetato, éster de cloroacetato, éster de trifluoroacetato, éster de fenoxiacetato, éster de formato, éster de benzilformato, éster de dicloroacetato, éster de tricloroacetato, éster de metoxiacetato, éster de p- clorofenoxiacetato, éster de fenilacetato, éster de 3- fenilpropionato, éster de 4-pentenoato, éster de 4- oxopentanoato, éster de pivaloato, éster de crotonato, éster de 4-metóxicrotonato, éster de angelato, éster de benzoato ou éster de p-fenilbenzoato.

[0033] Exemplos não limitadores de grupos protetores hidroxila adequados para a presente revelação também incluem aqueles que formam um carbonato do grupo hidroxila, tais como carbonato de metoximetila, carbonato de 9-fluorenilmetila, carbonato de metila, carbonato de etila, carbonato de 2,2,2-tricloroetila, carbonato de 2- (trimetilsilil)etila, carbonato de vinila, carbonato de alquila ou carbonato de p-nitrofenila.

[0034] Exemplos não limitadores de grupos protetores hidroxila adequados para a presente revelação também incluem aqueles que formam um sulfenato do grupo hidroxila, tal como 2,4-dinitrofenilsulfenato.

[0035] Conforme usado no presente documento, o termo “reagente formador de olefina” se refere a um reagente que pode reagir com uma cetona ou aldeído para formar uma ligação de olefina sob condições adequadas. Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina pode ser um reagente de Wittig. Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina pode ser um ileto fosforoso, ou um precursor do mesmo, por exemplo, um sal de fosfônio que pode formar o ileto de fósforo sob determinadas condições (por exemplo, com uso de uma base). Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina compreende um reagente organometálico (por exemplo, um reagente de organozinco, tal como um reagente de Reformatsky), em que a cetona ou aldeído pode ser convertido em um olefina formando primeiro um intermediário alcóolico com o reagente organometálico, que é seguido por desidratação.

[0036] Conforme usado no presente documento, o termo “ileto” se refere a uma molécula dipolar neutra que contém um átomo formalmente negativamente carregado (geralmente um carbânion) diretamente anexado a um heteroátomo com uma carga positiva formal (geralmente nitrogênio, fosforo ou enxofre). Desse modo, quando o heteroátomo é fosfina, o ileto é um “ileto fosforoso”. Por exemplo, metilenotrifenifosforano (Ph3P=CH2) é um ileto fosforoso.

[0037] Conforme usado no presente documento, o termo “ácido de Lewis” se refere a um aceitador de par de elétrons. Ácidos de Lewis incluem reagente de bóron, tais como BF3 (por exemplo, BF3Et2O) e reagentes oraganometálicos, tais como haletos de alumínio de alquila (por exemplo, Et2AlCl e MeAlCl2). SÍNTESE DE ÁCIDO CÓLICO, ÁCIDO DESOXICÓLICO, E ÁCIDO

DESOXICÓLICO

[0038] Ácido Cólico inclui três grupos hidroxila nas posições 3, 7, e 12 do esqueleto de esteroide. Métodos para sintetizar ácido cólico podem começar de um esteroide 3,7,12-trioxigenado, um esteroide 3,7-dioxigenado ou esteroide 3,12-dioxigenado, ou um esteroide 3-oxigenado como um material de partida. Em algumas modalidades, ácido cólico pode ser sintetizado a partir de um material de partida de esteroide 3,12-dioxigenado. Em algumas modalidades, ácido cólico pode ser sintetizado a partir de um material de partida de esteroide 3,7,12-trioxigenado. Em algumas modalidades, ácido cólico pode ser sintetizado a partir de um material de partida de esteroide 3,7-dioxigenado. Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento, ácido cólico pode ser sintetizado a partir de DHEA ou Ac-DHEA, que contém um grupo 3-hidroxi ou 3-OAc. Além disso, métodos para preparar ácido cólico a partir de DHEA ou Ac-DHEA podem envolver, por exemplo, duas estratégias amplas: (1) introduzir o grupo 12-hidroxi ou versão protegida do mesmo, e seguido pela introdução do grupo 7-hidroxi ou versão protegida do mesmo; ou (2) introduzir o grupo 7-hidroxi ou versão protegida do mesmo, e seguido pela introdução do grupo 12-hidroxi ou versão protegida do mesmo.

[0039] O ácido desoxicólico tem dois grupos hidroxila nas posições 3 e 12 e pode ser sintetizado a partir de um esteroide 3,12-dioxigenado, ou um esteroide 3-oxigenado como um material de partida. Em algumas modalidades, a estratégia (1) para síntese de ácido cólico de DHEA ou Ac-DHEA também pode ser adaptada para a síntese de ácido desoxicólico.

[0040] O ácido quenodesoxicólico, por outro lado, tem dois grupos hidroxila nas posições 3 e 7 e pode ser sintetizado a partir de um esteroide 3,7-dioxigenado, ou um esteroide 3-oxigenado como um material de partida. Desse modo, estratégia (2) para síntese de ácido cólico de DHEA ou Ac-DHEA pode ser adaptada para a síntese de ácido quenodesoxicólico.

[0041] Em algumas modalidades, a presente revelação também fornece ácido cólico, ácido desoxicólico, ou ácido quenodesoxicólico, um éster dos mesmos ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos, produzidos por qualquer um dos métodos descritos no presente documento. MÉTODO 1: SÍNTESE DE ÁCIDO CÓLICO A PARTIR DE ESTEROIDES 3,12-DIOXIGENADOS

[0042] Algumas modalidades da presente revelação são direcionadas a um método de preparo de ácido cólico, um éster dos mesmos ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos a partir de um material de partida de esteroide 3,12-dioxigenado. Um material de partida de esteroide 3,12-dioxigenado se refere a um composto que tem um esqueleto de esteroide com cada uma dentre as posições 3 e 12, um grupo hidroxila ou versão protegida do mesmo ou um grupo cetona ou cetona protegida. Por exemplo, em algumas modalidades, o esteroide 3,12-dioxigenado pode ser um composto de 3,12-dicetona, um composto de 3,12-di-hidroxi, ou um composto de hidroxicetona, que tem a seguinte estrutura anelar (cadeias laterais e outros grupos funcionais omitidos): .

[0043] Em algumas modalidades, o esteroide 3,12-

dioxigenado é um composto de 3,12-dicetona. Por exemplo, o método pode compreender uma sequência de reação mostrada no Esquema 1: , em que R1 é um H ou uma alquila opcionalmente substituída.

[0044] Em algumas modalidades, o método compreende: a) converter um composto da Fórmula I-1 em um composto da Fórmula I-2,

Fórmula I-1 Fórmula I-2 em que R1 é H ou um grupo alquila opcionalmente substituído, b) oxidar o composto da Fórmula I-2 para formar um composto da Fórmula I-3,

Fórmula I-3 c) reagir o composto da Fórmula I-3 com um reagente formador de epóxido para formar um epóxido da Fórmula I-4

Fórmula I-4 d) reduzir um epóxido da Fórmula I-4 sob condições de hidrogenação para formar uma dicetona da Fórmula I-5

Fórmula I-5 e) colocar a dicetona da Fórmula I-5 em contato com um agente redutor de cetona para formar um composto da Fórmula I-6

Fórmula I-6; e f) opcionalmente, quando R1 não for H, hidrolisar o composto da Fórmula I-6 para fornecer ácido cólico.

[0045] Em algumas modalidades, R1 é hidrogênio. No entanto, para facilidade de purificação, em modalidades preferenciais, R1 é uma C1-6 alquila (por exemplo, metila ou etila). Em algumas modalidades, R1 também podem ser uma alquila opcionalmente substituída (por exemplo, uma C1-6 alquila opcionalmente substituída). Por exemplo, R1 pode ser uma alquila opcionalmente substituída por 1-3 (por exemplo, 1, 2, ou 3) substituintes, em que os 1-3 substituintes são, independentemente, uma C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-6 carboxiciclila, heterociclila de 3 a 6 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, fenila, um fenila substituída (por exemplo, para-metoxifenila), hidroxila, C1-6 alcóxi (por exemplo, um metóxi, etóxi, etc.), halogênio (por exemplo, F ou Cl), ou amino opcionalmente substituído por um ou dois grupos independentemente selecionados dentre C1-6 alquila. Em modalidades preferenciais, R1 é uma C1-6 alquila (por exemplo, metila ou etila). O grupo R1 nas Fórmulas I-1 a I-6 pode ser igual ou diferente. Em algumas modalidades, o grupo R1 nas Fórmulas I-1 a I-6 pode ser o mesmo, por exemplo, como uma C1- 6 alquila (por exemplo, metila ou etila).

[0046] Várias condições para efetuar as transformações de acordo com o Esquema 1 ou a), b), c), d), e), e f) descritos acima podem ser usados, que são exemplificados em modalidades abaixo e na seção de Exemplos. Outras condições e detalhes úteis incluem aqueles conhecidos na técnica para transformações análogas.

[0047] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a um método de conversão do composto da Fórmula I-1 no composto da Fórmula I-2. Compostos de Fórmula I-1 úteis para essa conversão podem ter um 5-alfa hidrogênio ou um 5-beta hidrogênio. Em algumas modalidades, um diastereômero substancialmente puro (por exemplo, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, ou pelo menos 98% em peso) de Fórmula I-1 pode ser usado, com um 5- alfa hidrogênio ou um 5-beta hidrogênio. Em algumas modalidades, uma mistura de diastereômeros de Fórmula I-1 podem ser usados, por exemplo, com uma razão de composto de 5-alfa hidrogênio para composto de 5-beta hidrogênio que varia de 50:1 a 1:50. Em algumas modalidades, a conversão compreende colocar o composto da Fórmula I-1 em contato com um agente de halogenação para formar um intermediário halogenado, e tratar subsequentemente o intermediário halogenado sob condição de eliminação para formar o composto da Fórmula I-2. Agentes de halogenação adequados para uso incluem aqueles conhecidos na técnica para introduzir um alfa-halogênio a uma cetona. Em algumas modalidades, o agente de halogenação é bromina. Em algumas modalidades, o agente de halogenação é N- bromosuccinimida (NBS). O intermediário halogenado formado pode ter tanto uma configuração alfa como uma configuração beta: A estereoquímica de 5 posições do intermediário halogenado depende da estereoquímica correspondente do material de partida, Fórmula I-1, e pode ter tanto um alfa como um beta hidrogênio. Em algumas modalidades, X é bromina e R1 é uma alquila opcionalmente substituída, por exemplo, uma C1-6 alquila (por exemplo, metila ou etila). O intermediário halogenado (por exemplo, intermediário brominado) pode ser então tratado sob condição de eliminação para formar o composto da Fórmula I-2, uma cetona alfa-beta-insaturada. Em algumas modalidades, o intermediário halogenado é purificado antes do tratamento sob condição de eliminação. No entanto, preferencialmente, o intermediário halogenado não é purificado antes do tratamento sob condição de eliminação. Condições de eliminação adequadas incluem aquelas conhecidas na técnica para a eliminação de HX (X é halogênio, por exemplo, Br) de um cetona alfa-halogenada. Por exemplo, em algumas modalidades, a condição de eliminação compreende aquecer o intermediário halogenado, por exemplo, a uma temperatura que varia de 120 °C a 180 °C (por exemplo, 120 °C, 130 °C, 140 °C, 150 °C, 160 °C, 170 °C, 180 °C, ou quaisquer faixas entre os valores citados), na presença de uma base (por exemplo, Li2CO3) e um agente que facilita a eliminação (por exemplo, LiBr) em um solvente adequado (por exemplo, DMF, DMSO). Outros métodos conhecidos na técnica para converter uma cetona em um cetona alfa-beta- insaturada também podem ser usados para efetuar a conversão do composto da Fórmula I-1 no composto da Fórmula I-2.

[0048] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a um método de conversão do composto da Fórmula I-2 no composto da Fórmula I-3, por exemplo, com uso de um agente de oxidação. Em algumas modalidades, o agente de oxidação é um agente de oxidação baseado em benzoquinona, tal como cloranil (tetracloro-1,4-benzoquinona) ou 2,3- dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (DDQ). Em algumas modalidades, o método compreende colocar o composto da Fórmula

I-2 em contato com cloranil ou DDQ para formar o composto da Fórmula I-3.

[0049] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a um método de conversão do composto da Fórmula I-3 no epóxido da Fórmula I-4. O composto da Fórmula I-3 inclui ligações duplas de olefina nas posições 6,7 e nas posições 4,5, que podem ser convertidos no epóxido da Fórmula I-4 com uso de um reagente formador de epóxido. Em algumas modalidades, o reagente formador de epóxido é um ácido peroxicarboxílico. Em algumas modalidades, o reagente formador de epóxido é ácido meta-cloroperoxibenzóico. Outros reagentes formadores de epóxido adequados incluem aqueles conhecidos na técnica que podem produzir seletivamente um epóxido nas 6,7 posições com a olefina nas posições 4,5 intacta.

[0050] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a um método de conversão do epóxido da Fórmula I-4 na dicetona da Fórmula I-5. Vários métodos para produzir o epóxido podem ser usados. Preferencialmente, o método compreende hidrogenar o epóxido da Fórmula I-4. Em algumas modalidades, a hidrogenação é catalisada por um catalisador heterogêneo, por exemplo, um catalisador de metal heterogêneo que compreende Pd, Ni, Pt, PtO2, Rh, ou Ru. Em algumas modalidades, o catalisador de metal heterogêneo é Pd/C. A hidrogenação pode ser conduzida em várias pressões de H2. Em algumas modalidades, a hidrogenação é conduzida em uma pressão de hidrogênio de 0,10 MPa (1 atm) ou próximo disso. Em algumas modalidades, a hidrogenação é conduzida em uma pressão de hidrogênio de mais do que 0,10 MPa (1 atm) (por exemplo, cerca de 0,20 MPa (2 atms), cerca de 0,30 MPa (3 atms), cerca de 0,50 MPa (5 atms), cerca de 1 MPa (10 atms), cerca de 1,5 MPa (15 atms), ou quaisquer faixas entre os valores citados). Em algumas modalidades, a hidrogenação é conduzida em uma pressão de hidrogênio de cerca de 0,10 MPa (15 psi) a cerca de 0,68

MPa (100 psi) (por exemplo, cerca de 0,34 MPa (50 psi)).

[0051] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a um método de conversão da dicetona da Fórmula I-5 no composto da Fórmula I-6, por exemplo, com uso de um agente de redução de cetona. Em algumas modalidades, o agente redutor de cetona é um borohidreto (tal como NaBH4, NaCNBH3, etc.) ou um hidreto de trialcoxialumíno (por exemplo, hidreto de tri-isopropoxialumíno, hidreto de tri-terc- butoxialumínio). Em modalidades preferenciais, o agente redutor de cetona é hidreto de tri-terc-butoxialumínio de lítio (LiAlH(O-tBu)3).

[0052] Quando R1 não é hidrogênio, por exemplo, quando R1 é uma C1-6 alquila, então para sintetizar ácido cólico, o método compreende adicionalmente hidrolisar o composto da Fórmula I-6. Desse modo, em algumas modalidades, quando R1 não é hidrogênio, o método compreende hidrolisar o composto da Fórmula I-6. Condições de hidrolização adequadas incluem aquelas conhecidas na técnica. Por exemplo, a hidrólise pode ser efetuada reagindo-se o composto da Fórmula I-6 sob condições de hidrólise mediada com ácido (por exemplo, mediada com BF3), mediada com base (por exemplo, com uso de um hidróxido de metal álcali (por exemplo, NaOH ou LiOH)), ou mediada com nucleófilo (por exemplo, mediada com I-). Em modalidades preferenciais, a hidrólise compreende colocar o composto da Fórmula I-6 em contato com um hidróxido de metal álcali (por exemplo, NaOH ou LiOH).

[0053] Em algumas modalidades, um éster de ácido cólico, por exemplo, o composto da Fórmula I-6 em que R1 é uma alquila opcionalmente substituída, é o produto desejado. Por exemplo, em algumas modalidades, o método é direcionado à síntese de um éster farmacêutica ou cosmeticamente aceitável de ácido cólico. Em tais modalidades, as condições de reação preferenciais para sequências a) a e) são aquelas em que nenhuma hidrólise ou hidrólise mínima do éster (por exemplo,- CO2R1) ocorre sob as respectivas condições de reação. No entanto, se for desejado, o éster de ácido cólico também pode ser preparado por esterificação de ácido cólico com um álcool desejado.

[0054] Em algumas modalidades, um sal de ácido cólico é o produto desejado. Por exemplo, em algumas modalidades, o método é direcionado à síntese de um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável de ácido cólico. Desse modo, em algumas modalidades, o método compreende formar um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável de ácido cólico, por exemplo, reagindo-se ácido cólico com uma base adequada, por exemplo, metal ou hidróxido de amônio (por exemplo, sódio, potássio, lítio, cálcio, magnésio, amônio, ou hidróxido de tetralquilamônio).

[0055] O composto da Fórmula I-1 usado nos métodos descritos acima no presente documento pode ser preparado por meio de diferentes métodos. Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento, o composto da Fórmula I-1 pode ser preparado pelos métodos descritos no presente documento, por exemplo, Método 1A abaixo. Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento, o composto da Fórmula I-1 também pode ser um material sintético livre de quaisquer impurezas derivadas de animais. MÉTODO 1A: SÍNTESE DE ESTEROIDE 3,12-DIOXIGENADO DA FÓRMULA I-1

[0056] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas à síntese do composto da Fórmula I- 1, em que R1 é H ou um grupo alquila opcionalmente substituído. Fórmula I-1 pode ter um 5-alfa hidrogênio ou um 5-beta hidrogênio. Em algumas modalidades, compostos da Fórmula I-1 existem como um diastereômero substancialmente puro (por exemplo, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, ou pelo menos 98% em peso), com um 5-alfa hidrogênio ou um 5-beta hidrogênio. Em algumas modalidades, compostos da Fórmula I-1 existem como uma mistura diastereomérica em várias razões, por exemplo, com uma razão de composto de 5-alfa hidrogênio para composto de 5-beta hidrogênio que varia de 50:1 a 1:50.

Fórmula I-1.

[0057] Em algumas modalidades, o composto da Fórmula I-1 pode ser sintetizado de acordo com Esquema 2, em que cada uma das variáveis e transformações são conforme descrito no presente documento:

.

[0058] Determinadas modalidades são direcionadas a um método de oxidação de um diol da Fórmula I-7 para fornecer o composto da Fórmula I-1 Fórmula I-7. Fórmula I-7 pode ter um 5-alfa hidrogênio ou um 5- beta hidrogênio. Em algumas modalidades, compostos da Fórmula I-7 existem como um diastereômero substancialmente puro (por exemplo, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, ou pelo menos 98% em peso), com um 5-alfa hidrogênio ou um 5-beta hidrogênio.

Em algumas modalidades, compostos da Fórmula I-7 existem como uma mistura diastereomérica em várias razões, por exemplo, com uma razão de composto de 5-alfa hidrogênio para composto de 5-beta hidrogênio que varia de 50:1 a 1:50. Em algumas modalidades, a oxidação compreende um trióxido de Crômio ou oxidação à base de cromato ou variações dos mesmos.

Em algumas modalidades, a oxidação compreende uma oxidação de Swern ou variações da mesma.

Em algumas modalidades, a oxidação compreende uma oxidação mediada com iodina hipervalente.

Em algumas modalidades, a oxidação compreende colocar o diol da Fórmula I-7 em contato com um agente de oxidação adequado.

Em algumas modalidades, o agente de oxidação é um agente de oxidação à base de Crômio, por exemplo, reagente de Jones (uma solução de trióxido de crômio em ácido sulfúrico diluído); PCC (cloromato de piridínio), etc.

Em uma modalidade preferencial, o agente de oxidação é reagente de Jones.

Em algumas modalidades, o agente de oxidação é um reagente de oxidação de Swern.

Conforme usado no presente documento, o termo “reagente de oxidação de Swern” abrange todas as formas ativadas de DMSO, tais como uma espécie ativa de clorosulfônio, que pode oxida um álcool em uma cetona ou aldeído na presença de uma base orgânica tal como amina de trietila ou diisopropiletilamina.

Vários sistemas de reagente de oxidação de Swern são conhecidos.

Por exemplo, uma oxidação de Swern típica pode incluir o uso de um sistema à base de DMSO/cloreto de oxalila, no qual DMSO primeiro reage com cloreto de oxalila para gerar um cloreto de cloro(dimetil)sulfônio, que então converte um álcool em um aldeído ou grupo cetona na presença de uma base orgânica (por exemplo, Et3N). Outros agentes de oxidação úteis exemplificadores incluem reagentes para oxidação de Swern ou variações dos mesmos que usam cloreto cianúrico, anidrido trifluoroacético, carbodiimidas, complexo de trióxido de piridina-enxofre para ativar DMSO, ou usar sulfeto de dimetila e N-clorosuccinimida para gerar a espécie ativa de clorosulfônio. Em algumas modalidades, o agente de oxidação pode ser ácido 2-iodoxibenzóico (IBX) ou periodinano de Dess- Martin (1,1,1-Triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol-3(1H)- ona).

[0059] Em algumas modalidades, o diol da Fórmula I-7 pode ser sintetizado hidrogenando-se um composto da Fórmula I-8 ou Fórmula I-8a, ou um isômero geométrico dos mesmos, Fórmula I-8 Fórmula I-8a em que Pg1 e Pg2 são, independentemente, um grupo protetor hidroxila; e opcionalmente removendo os grupos protetores hidroxila. Grupos protetores hidroxila adequados incluem qualquer um daqueles conhecidos na técnica, por exemplo, aqueles descritos no presente documento. Em algumas modalidades, Pg1 e Pg2 são os mesmos. Em algumas modalidades, Pg1 e Pg2 são diferentes. Em modalidades preferenciais, tanto Pg1 quanto Pg2 são grupo protetor hidroxila que forma um éster com o grupo hidroxila, por exemplo, tanto Pg1 quanto Pg2 são acetila. Em algumas modalidades, o diol da Fórmula I-7 é sintetizado hidrogenando-se o composto da Fórmula I-8a. Em algumas modalidades, o diol da Fórmula I-7 é sintetizado hidrogenando-se o composto da Fórmula I-8, que é seguido pela remoção dos grupos protetores hidroxila. Em algumas modalidades, o diol da Fórmula I-7 é sintetizado removendo-se os grupos protetores hidroxila do composto da Fórmula I-8 para produzir o composto da Fórmula I-8a, que é seguido pela hidrogenação do composto da Fórmula I-8a.

[0060] Visto que as ligações duplas de olefina na Fórmula I-8 ou Fórmula I-8a são hidrogenadas para formar o diol da Fórmula I-7, os isômeros geométricos dos compostos da Fórmula I-8 e Fórmula I-8a também podem ser usados. Em algumas modalidades, o método compreende hidrogenar um composto da Fórmula I-8 ou Fórmula I-8a. Em algumas modalidades, o método compreende hidrogenar um isômero geométrico do composto da Fórmula I-8 ou Fórmula I-8a. Em algumas modalidades, o método compreende hidrogenar uma mistura do composto da Fórmula I-8 ou Fórmula I-8a, e seus isômeros geométricos.

[0061] Vários métodos para hidrogenar o composto da Fórmula I-8 ou Fórmula I-8a podem ser usados. Preferencialmente, o método compreende hidrogenar o composto da Fórmula I-8 ou Fórmula I-8a com H2 na presença de um catalisador heterogêneo, por exemplo, um catalisador de metal heterogêneo que compreende Pd, Ni, Pt, PtO2, Rh, ou Ru. Em algumas modalidades, o catalisador de metal heterogêneo é Pd/C. A hidrogenação pode ser conduzida em várias pressões de H2. Em algumas modalidades, a hidrogenação é conduzida em uma pressão de hidrogênio de 0,10 MPa (1 atm) ou próximo disso. Em algumas modalidades, a hidrogenação é conduzida em uma pressão de hidrogênio de mais do que 0,10 MPa (1 atm) (por exemplo, cerca de 0,20 MPa (2 atms), cerca de 0,30 MPa (3 atms), cerca de 0,50 MPa (5 atms), cerca de 1 MPa (10 atms), cerca de 1,5 MPa (15 atms), ou quaisquer faixas entre os valores citados). Em algumas modalidades, a hidrogenação é conduzida em uma pressão de hidrogênio de cerca de 0,10 MPa (15 psi) a cerca de 0,68 MPa (100 psi) (por exemplo, cerca de 0,34 MPa (50 psi)).

[0062] O composto da Fórmula I-8 pode ser obtido, por exemplo, a partir da reação de um aldeído da Fórmula I-9 com um reagente formador de olefina:

Fórmula I-9, em que Pg1 e Pg2 são, independentemente, um grupo protetor hidroxila conforme descrito acima no presente documento.

Vários reagentes de formação de olefina são adequados para essa transformação.

Preferencialmente, as condições de reação e de constituição são controladas de modo que nenhuma epimerização ou epimerização mínima na posição C30 ocorra.

Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina compreende um acetato substituído por fosfonato:

, em que G1 em cada ocorrência e R1a são, cada um, independentemente, um grupo alquila opcionalmente substituído (por exemplo, uma C1-6 alquila opcionalmente substituída, por exemplo, etila). O acetato substituído por fosfonato pode ser desprotonado para formar um carbânion estabilizado com fosfonato, que reage com o grupo aldeído na Fórmula I-9 para formar um éster alfa-beta-insaturado.

Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina é 2-dietóxifosforilacetato de etila.

Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina é um ileto de fósforo (por exemplo, trifenilcarbetoximetilenofosforano) ou seu precursor.

Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina pode compreender um reagente organometálico, tal como um reagente de organozinco, que reage com o grupo aldeído na Fórmula I-9 para formar um álcool secundário, que mediante desidratação, forma um éster alfa-beta-insaturado.

Por exemplo, em algumas modalidades, o reagente formador de olefina compreende um reagente de Reformatsky de dois carbonos:

O Zn R1a X O , em que X é halo, tais como Cl, Br ou I, e R1a é um grupo alquila opcionalmente substituído (por exemplo, uma C1-6 alquila opcionalmente substituída, por exemplo, etila). Em modalidades preferenciais, o éster grupo do reagente formador de olefina (por exemplo, R1a tanto no fosfonato como no reagente de Reformatsky) é o mesmo que COOR1 e R1 não é H. No entanto, em algumas modalidades, R1a é diferente de R1, por exemplo, quando R1 é H. Em tais modalidades, o método pode opcionalmente incluir também converter o -CO2R1a na Fórmula I-8b em -CO2R1 na Fórmula I-8 Fórmula I-8b.

[0063] O aldeído da Fórmula I-9 pode ser formado a partir da oxidação do álcool correspondente da Fórmula I-11: Fórmula I-11 em que Pg1 e Pg2 são, independentemente, um grupo protetor hidroxila conforme descrito acima no presente documento. Em algumas modalidades, a oxidação compreende um trióxido de Crômio ou oxidação à base de cromato ou variações dos mesmos. Em algumas modalidades, a oxidação compreende uma oxidação de Swern ou variações da mesma. Em algumas modalidades, a oxidação compreende uma oxidação mediada com iodina hipervalente. Em algumas modalidades, a oxidação compreende colocar o composto da Fórmula I-11 em contato com um agente de oxidação adequado. Vários agentes de oxidação são adequados. Em algumas modalidades, o agente de oxidação é um agente de oxidação à base de Crômio, por exemplo, PCC (cloromato de piridínio). Em algumas modalidades, o agente de oxidação é um reagente de oxidação de Swern. Vários sistemas de reagente de oxidação de Swern são conhecidos. Por exemplo, uma oxidação de Swern típica pode incluir o uso de um sistema à base de DMSO/cloreto de oxalila, no qual DMSO primeiro reage com cloreto de oxalila para gerar um cloreto de cloro(dimetil)sulfônio, que então converte um álcool em um aldeído ou grupo cetona na presença de uma base orgânica (por exemplo, Et3N). Outros agentes de oxidação úteis exemplificadores incluem reagentes para oxidação de Swern ou variações dos mesmos que usam cloreto cianúrico, anidrido trifluoroacético, carbodiimidas, complexo de trióxido de piridina-enxofre para ativar DMSO, ou usar sulfeto de dimetila e N-clorosuccinimida para gerar a espécie ativa de clorosulfônio. Em algumas modalidades, o agente de oxidação pode ser ácido 2-iodoxibenzóico (IBX) ou periodinano de Dess- Martin (1,1,1-Triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol-3(1H)- ona). Preferencialmente, as condições de reação e de constituição são controladas de modo que nenhuma epimerização ou epimerização mínima na posição C30 ocorra.

[0064] Vários métodos podem ser empregados para a síntese do composto da Fórmula I-11. Em modalidades preferenciais, o composto da Fórmula I-11 pode ser sintetizado a partir do composto da Fórmula I-10 ou um isômero geométrico do mesmo:

Fórmula I-10

[0065] em que Pg1 e Pg2 são, independentemente, um grupo protetor hidroxila conforme descrito acima no presente documento. Em algumas modalidades, o método compreende reagir o composto da Fórmula I-10 com formaldeído ou paraformaldeído na presença de um ácido de Lewis. Vários ácidos de Lewis podem ser usados para essa transformação, por exemplo, ácidos de Lewis à base de bóron ou alumínio podem ser usados. Em algumas modalidades, o ácido de Lewis compreende BF3. Outros ácidos de Lewis adequados incluem aqueles conhecidos na técnica que pode facilitar uma reação análoga de um olefina com um aldeído para fornecer um álcool.

[0066] O composto da Fórmula I-10 usado nos métodos descritos acima no presente documento pode ser preparado por meio de diferentes métodos. Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento, o composto da Fórmula I-10 pode ser preparado pelos métodos descritos no presente documento, por exemplo, Método 1B abaixo. Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento, o composto da Fórmula I-10 também pode ser um material sintético livre de quaisquer impurezas derivadas de animais. MÉTODO 1B: SÍNTESE DE ESTERÓIDE 3,12-DIOXIGENADO DA FÓRMULA I-10

[0067] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a um método de preparo um composto da Fórmula I-10, ou um isômero geométrico do mesmo, em que Pg1 e Pg2 são, independentemente, um grupo protetor hidroxila. Em algumas modalidades, o método compreende obter o composto da

Fórmula I-10 a partir de DHEA ou um DHEA protegido (por exemplo, acetila-DHEA) conforme exemplificado no Esquema 3, em que R2, R3, Pg1 e Pg2 são definidos no presente documento: .

[0068] Em algumas modalidades, o método compreende: a) reagir um composto da Fórmula I-13 Fórmula I-13 em que R2 é H ou Pg1; e Pg1 é um grupo protetor hidroxila (por exemplo, conforme descrito no presente documento); com uma amina para formar uma imina da Fórmula I- 14 Fórmula I-14 em que m é 0, 1 ou 2, e R3 é C1-6 alquila (por exemplo, um grupo metila na posição 4’); b) oxidar a imina da Fórmula I-14 com O2 na presença de um sal de cobre para formar um composto da Fórmula I-15 Fórmula I-15; c) reagir o composto da Fórmula I-15 com um reagente formador de olefina para formar um composto da Fórmula I-16, ou um isômero geométrico do mesmo, Fórmula I-16; e d) proteger o grupo (ou grupos) hidroxila na Fórmula I-16 para fornecer o composto da Fórmula I-10, ou isômero geométrico do mesmo.

[0069] Em algumas modalidades, a proteção do grupo 12-hidroxi pode ocorrer antes da olefinação da função de 17-cetona na Fórmula I-15. Desse modo, em algumas modalidades, o método também pode compreender:

c’) proteger o grupo (ou grupos) hidroxila no composto da Fórmula I-15 para formar um composto da Fórmula I- 15a Fórmula I-15a; e d’) então reagir o composto da Fórmula I-15a com um reagente formador de olefina para fornecer o composto da Fórmula I-10, ou isômero geométrico do mesmo.

[0070] A formação de imina de a), a oxidação mediada com cobre de b), e a reação de olefinação de c) não exige que o grupo 3-hidroxi seja protegido. Desse modo, em algumas modalidades, o método pode iniciar com DHEA, i.e., R2 é H. Em algumas modalidades, o método pode iniciar com uma versão protegida de DHEA, em que R2 é Pg1, por exemplo, acetila.

[0071] Várias iminas da Fórmula I-14 são adequadas para os métodos para preparar o composto da Fórmula I-10. Em algumas modalidades, o anel de piridina na Fórmula I- 14 é não-substituído, isto é, m é 0. Em algumas modalidades, o anel de piridina na Fórmula I-14 é substituído por um ou dois grupos C1-6 alquila. Por exemplo, em algumas modalidades, o anel de piridina na Fórmula I-14 é substituído na posição 4’ por um grupo metila. A formação de imina de a) é geralmente catalisado por um ácido, por exemplo, ácido para- toluenesulfônico.

[0072] Sal de cobre adequado para b) inclui qualquer um daqueles conhecidos na técnica para transformações análogas. Em algumas modalidades, o sal de cobre é um sal de cobre (II), tal como Cu(OTf)2. Em algumas modalidades, o sal de cobre é um sal de cobre (I), tal como Cu(MeCN)4PF6.

[0073] Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina em c) ou d’) pode ser um ileto fosforoso. Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina em c) ou d’) pode ser etilenetrifenilfosforano ou seu sal de etiltrifenilfosfônio precursor. Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina compreende um reagente organometálico de dois carbonos (por exemplo, um reagente de organozinco), em que a 17-cetona da Fórmula I-15 ou Fórmula I- 15a pode ser convertida em um olefina formando-se primeiro um intermediário alcóolico com o reagente organometálico, que é então seguido por desidratação.

[0074] Vários grupos protetores podem ser usados para proteger qualquer um ou ambos os grupos 3- e 12-hidroxi. Os grupos protetores para os grupos 3- e 12-hidroxi não precisam ser os mesmos. No entanto, em modalidades preferenciais, Pg1 e Pg2 são os mesmos, por exemplo, tanto Pg1 quanto Pg2 são acetila. MÉTODO 2: SÍNTESE DE ÁCIDO DESOXICÓLICO A PARTIR DE ESTEROIDES 3,12-DIOXIGENADOS

[0075] Ácido desoxicólico (DCA) contém dois grupos hidroxila nas posições 3,12, que podem ser, portanto, preparadas por um intermediário, tal como um composto da Fórmula I-1 (na forma beta com um hidrogênio 5-beta, Fórmula I-1b) através de uma reação de redução. Em algumas modalidades, a presente revelação é direcionada a um método de preparo de ácido desoxicólico, um éster do mesmo ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável do mesmo a partir de um esteroide 3,12-dioxigenado. Em algumas modalidades, o método compreende uma sequência de reação de acordo com Esquema 4:

[0076] Em algumas modalidades, o método de preparo de ácido desoxicólico, um éster dos mesmos ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos compreende: a) reagir um composto da Fórmula I-10, ou um isômero geométrico do mesmo, com formaldeído ou paraformaldeído na presença de um ácido de Lewis

Fórmula I-10 para formar um composto da Fórmula I-11

Fórmula I-11; em que Pg1 e Pg2 são, independentemente, um grupo protetor hidroxila; b) oxidar o composto da Fórmula I-11 para fornecer um aldeído da Fórmula I-9

Fórmula I-9; c) reagir o aldeído da Fórmula I-9 com um reagente formador de olefina para formar um composto da Fórmula I-8, ou um isômero geométrico do mesmo,

Fórmula I-8 em que R1 é H ou um grupo alquila opcionalmente substituído (por exemplo, uma C1-6 alquila opcionalmente substituída); d) hidrogenar o composto da Fórmula I-8 e remover subsequentemente os grupos protetores hidroxila, ou desproteger o composto da Fórmula I-8 e hidrogenar subsequentemente o composto desprotegido, para fornecer um diol da Fórmula I-7b

Fórmula I-7b; e) oxidar o diol da Fórmula I-7b para fornecer um composto da Fórmula I-1b,

O CO2R1

H H H H O

H Fórmula I-1b; f) colocar o composto da Fórmula I-1b em contato com um agente redutor de cetona para formar um composto da Fórmula I-12 Fórmula I-12; e g) opcionalmente, quando R1 na Fórmula I-12 não for H, hidrolisar o composto da Fórmula I-12 para fornecer ácido desoxicólico.

[0077] O grupo R1 na Fórmula I-8, I-7b, I-1b, e I-12 pode ser o mesmo ou diferente. Em algumas modalidades, o grupo R1 nas Fórmulas I-8, I-7b, I-1b e I-12 pode ser o mesmo, por exemplo, como uma C1-6 alquila (por exemplo, metila ou etila).

[0078] Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento para Método 2, o composto da Fórmula I- 1 pode ser preparado a partir do composto da Fórmula I-10 por qualquer um dos métodos descritos no presente documento, por exemplo, Método 1A. Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento, o composto da Fórmula I-10 pode ser preparado por qualquer um dos métodos descritos no presente documento, por exemplo, Método 1B.

[0079] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a um método de conversão do composto da Fórmula I-1 no composto da Fórmula I-12, por exemplo, com uso de um agente de redução de cetona. Em algumas modalidades, o agente redutor de cetona é um borohidreto (tal como NaBH4, NaCNBH3, etc.) ou um hidreto de trialcoxialumíno (por exemplo, hidreto de tri-isopropoxialumíno, hidreto de tri-terc- butoxialumínio). Em modalidades preferenciais, o agente redutor de cetona é hidreto de tri-terc-butoxialumínio de lítio (LiAlH(O-tBu)3).

[0080] Quando R1 não é hidrogênio, por exemplo, quando R1 é um C1-6 alquila, então para sintetizar ácido desoxicólico, o método compreende adicionalmente hidrolisar o composto da Fórmula I-12. Desse modo, em algumas modalidades, quando R1 não é hidrogênio, o método compreende hidrolisar o composto da Fórmula I-12. Condições de hidrolização adequadas incluem aquelas conhecidas na técnica. Por exemplo, a hidrólise pode ser efetuada reagindo-se o composto da Fórmula I-12 sob condições de hidrólise mediada com ácido (por exemplo, mediada com BF3), mediada com base (por exemplo, com uso de um hidróxido de metal álcali (por exemplo, NaOH ou LiOH)), ou mediada com nucleófilo (por exemplo, mediada com I-). Em modalidades preferenciais, a hidrólise compreende colocar o composto da Fórmula I-12 em contato com um hidróxido de metal álcali (por exemplo, NaOH ou LiOH).

[0081] Em algumas modalidades, um éster de ácido desoxicólico, por exemplo, o composto da Fórmula I-12 em que R1 é uma alquila opcionalmente substituída, é o produto desejado. Por exemplo, em algumas modalidades, o método é direcionado à síntese de um éster farmacêutica ou cosmeticamente aceitável de ácido desoxicólico. Em tais modalidades, as condições de reação preferenciais para sequências a) a f) são aquelas em que nenhuma hidrólise ou hidrólise mínima do éster (por exemplo,-CO2R1) ocorre sob as respectivas condições de reação. No entanto, se for desejado, os ésteres de ácido desoxicólico também podem ser preparados por esterificação de ácido desoxicólico com um álcool desejado.

[0082] Em algumas modalidades, um sal de ácido desoxicólico é o produto desejado. Por exemplo, em algumas modalidades, o método é direcionado à síntese de um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável de ácido desoxicólico. Desse modo, em algumas modalidades, o método compreende formar um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável de ácido desoxicólico, por exemplo, reagindo-se ácido desoxicólico com uma base adequada, por exemplo, metal ou hidróxido de amônio (por exemplo, sódio, potássio, lítio, cálcio, magnésio, amônio, ou hidróxido de tetralquilamônio). INTERMEDIÁRIOS SINTÉTICOS INOVADORES DOS MÉTODOS 1, 1A, 1B E 2

[0083] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a intermediários sintéticos inovadores úteis para a preparação de ácido cólico e/ou ácido desoxicólico. Em algumas modalidades, o intermediário sintético é um composto da Fórmula II-1, Fórmula II-2, Fórmula II-3, ou Fórmula II-4, ou um isômero geométrico do mesmo, ou um sal do mesmo:

Fórmula II-1 Fórmula II-2 Fórmula II-3 Fórmula II-4 em que cada um dentre R10 e R11 em cada fórmula é independentemente H ou um grupo protetor hidroxila, e R12 é H ou uma alquila opcionalmente substituída.

[0084] Em algumas modalidades, R10 e R11 são os mesmos. Em algumas modalidades, R10 e R11 são diferentes. Em algumas modalidades, tanto R10 quanto R11 são H. Em algumas modalidades, um dentre R10 e R11 é H e o outro dentre R10 e R11 é um grupo protetor hidroxila (por exemplo, conforme descrito no presente documento, por exemplo, acetila). Em algumas modalidades, tanto R10 quanto R11 são grupos protetores hidroxila (por exemplo, conforme descrito no presente documento, por exemplo, acetila).

[0085] Em algumas modalidades, R12 é H. Em algumas modalidades, R12 é uma alquila opcionalmente substituída (por exemplo, C1-6 alquila opcionalmente substituída). Em algumas modalidades, R12 é metila. Em algumas modalidades, R12 é etila.

[0086] Em algumas modalidades, o composto da Fórmula II-1, Fórmula II-2, Fórmula II-3, ou Fórmula II-4 é isolado. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula II-1, Fórmula II-2, Fórmula II-3, ou Fórmula II-4 é substancialmente puro (por exemplo, pelo menos 80%, pelo menos

85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, ou pelo menos 98% puro em peso). Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula II-1, Fórmula II-2, Fórmula II-3, ou Fórmula II-4 é cerca de 80%, cerca de 85%, cerca de 90%, cerca de 95%, cerca de 98% puro em peso, ou quaisquer faixas entre os valores especificados. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula II-1, Fórmula II-2, Fórmula II-3, ou Fórmula II-4 é substancialmente livre (por exemplo, menor que 5%, menor do que 3%, menor do que 2%, menor do que 1%, menor do que 0,5%, ou menor do que 0,1% em peso) de outros diastereômeros e/ou isômero geométrico. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula II-1, Fórmula II-2, Fórmula II-3, ou Fórmula II-4 tem cerca de 5%, cerca de 3%, cerca de 2%, cerca de 1%, cerca de 0,5%, cerca de 0,1% em peso, ou quaisquer faixas entre os valores especificados, de outros diastereômeros e/ou isômero geométrico. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula II-1, Fórmula II-2, Fórmula II-3, ou Fórmula II-4 é livre de (por exemplo, não detectável com uso de ferramentas analíticas atuais) outros diastereômeros e/ou isômero geométrico.

[0087] Em algumas modalidades, a presente revelação também fornece um composto da Fórmula II-5, Fórmula II-6, Fórmula II-7, ou Fórmula II-8 que tem uma estrutura de:

O O CO2R20 CO2R21

H H H H

H H H H O , O , Fórmula II-5 Fórmula II-6

O CO2R22

H H H H

O O ou Fórmula II-7 Fórmula II-8 em que R20 e R23 são, cada um, independentemente uma alquila opcionalmente substituída, desde que R20 e R23 não sejam metila; e R21 e R22 são, cada um, independentemente H ou uma alquila opcionalmente substituída, ou um sal do mesmo.

[0088] Em algumas modalidades, R20 é uma C2-6 alquila opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, R20 é uma C2-4 alquila, por exemplo, etila, isopropila, etc.

[0089] Em algumas modalidades, R23 é uma C2-6 alquila opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, R23 é uma C2-4 alquila, por exemplo, etila, isopropila, etc.

[0090] Em algumas modalidades, R21 é H. Em algumas modalidades, R21 é uma alquila opcionalmente substituída, por exemplo, uma C1-6 alquila opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, R21 é uma C2-4 alquila, por exemplo, etila, isopropila, etc.

[0091] Em algumas modalidades, R22 é H. Em algumas modalidades, R22 é uma alquila opcionalmente substituída, por exemplo, uma C1-6 alquila opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, R22 é uma C2-4 alquila, por exemplo, etila, isopropila, etc.

[0092] Em algumas modalidades, o composto da Fórmula II-5, Fórmula II-6, Fórmula II-7, ou Fórmula II-8 é isolado. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula II-5, Fórmula II-6, Fórmula II-7, ou Fórmula II-8 é substancialmente puro (por exemplo, pelo menos 80%, pelo menos

85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, ou pelo menos 98% puro em peso). Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula II-5, Fórmula II-6, Fórmula II-7, ou Fórmula II-8 é cerca de 80%, cerca de 85%, cerca de 90%, cerca de 95%, cerca de 98% puro em peso, ou quaisquer faixas entre os valores especificados. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula II-5, Fórmula II-6, Fórmula II-7, ou Fórmula II-8 é substancialmente livre (por exemplo, menor que 5%, menor do que 3%, menor do que 2%, menor do que 1%, menor do que 0,5%, ou menor do que 0,1% em peso) de outros diastereômeros e/ou isômero geométrico. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula II-5, Fórmula II-6, Fórmula II-7, ou Fórmula II-8 tem cerca de 5%, cerca de 3%, cerca de 2%, cerca de 1%, cerca de 0,5%, cerca de 0,1% em peso, ou quaisquer faixas entre os valores especificados, de outros diastereômeros e/ou isômero geométrico. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula II-5, Fórmula II-6, Fórmula II-7, ou Fórmula II-8 é livre de (por exemplo, não detectável com uso de ferramentas analíticas atuais) outros diastereômeros e/ou isômero geométrico.

[0093] O composto de qualquer uma da Fórmula II- 1 à Fórmula II-8 pode ser preparado e purificado de acordo com os métodos descritos no presente documento, por exemplo, a seção de Exemplos. MÉTODO 3: SÍNTESE DE ÁCIDO CÓLICO DE ESTEROIDES 3,7- DIOXIGENADOS OU 3,7,12-TRIOXIGENADOS

[0094] Conforme descrito acima, a síntese de ácido cólico também pode começar com esteroides 3,7- dioxigenados ou 3,7,12-trioxigenados. Em algumas modalidades, os esteroides 3,7-dioxigenados ou 3,7,12-trioxigenados podem ser obtidos a partir de um material de partida de esteroide 3- hidroxi (por exemplo, DHEA) introduzindo-se primeiro um grupo 7-hidroxi seguido pela introdução de um grupo 12-hidroxi. Em várias modalidades, a presente revelação também fornece um método de preparo de ácido cólico, um éster dos mesmos ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos, que compreende converter um esteroide 3,7-dioxigenado ou 3,7,12- trioxigenado em ácido cólico, éster dos mesmos ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

Por exemplo, em algumas modalidades, o método compreende uma sequência de reação mostrada no Esquema 5, em que R30, Pg10, Pg11 e Pg12 são definidos no presente documento:

.

[0095] Em algumas modalidades, o método de preparo de ácido cólico, um éster dos mesmos ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos, compreende: a) reagir um composto da Fórmula III-1, ou um isômero geométrico do mesmo, com formaldeído ou paraformaldeído na presença de um ácido de Lewis, para formar um composto da fórmula III-2

Fórmula III-1 Fórmula III-2 em que Pg10, Pg11 e Pg12 são, cada um, independentemente um grupo protetor hidroxila; b) oxidar o composto da Fórmula III-2 para fornecer um aldeído da Fórmula III-3

Fórmula III-3; c) reagir o aldeído da Fórmula III-3 com um reagente formador de olefina para formar um composto da Fórmula III-4, ou um isômero geométrico do mesmo,

Fórmula III-4; em que R30 é H ou um grupo alquila opcionalmente substituído; d) hidrogenar o composto da Fórmula III-4 com gás H2 na presença de um catalisador metálico e remover subsequentemente os grupos protetores hidroxila, ou remover os grupos protetores hidroxila na Fórmula III-4 e hidrogenar subsequentemente o composto desprotegido com gás H2 na presença de um catalisador metálico, para fornecer um triol da Fórmula III-5 Fórmula III-5; e) oxidar o triol da Fórmula III-5 para fornecer um composto da Fórmula III-6, Fórmula III-6; f) colocar o composto da Fórmula III-6 em contato com um agente redutor de cetona para formar um composto da Fórmula III-7 Fórmula III-7; e g) opcionalmente, quando R30 não for H na Fórmula III-7, hidrolisar o composto da Fórmula III-7 para fornecer ácido cólico.

[0096] Em algumas modalidades, R30 é hidrogênio. No entanto, para facilidade de purificação, em modalidades preferenciais, R30 é uma alquila (por exemplo, metila ou etila). Em algumas modalidades, R30 também podem ser uma alquila opcionalmente substituída (por exemplo, uma C1-6 alquila opcionalmente substituída). Por exemplo, R30 pode ser uma alquila opcionalmente substituída por 1-3 (por exemplo, 1, 2, ou 3) substituintes, em que os 1-3 substituintes são, independentemente, uma C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-6 carboxiciclila, heterociclila de 3 a 6 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, fenila, um fenila substituída (por exemplo, para-metoxifenila), hidroxila, C1-6 alcóxi (por exemplo, um metóxi, etóxi, etc.), halogênio (por exemplo, F ou Cl), ou amino opcionalmente substituído por um ou dois grupos independentemente selecionados dentre C1-6 alquila. Em modalidades preferenciais, R30 é uma C1-6 alquila (por exemplo, metila ou etila). O grupo R30 nas Fórmulas III-4 a III-7 pode ser igual ou diferente. Em algumas modalidades, o grupo R30 nas Fórmulas III-4 a III-7 pode ser o mesmo, por exemplo, como uma C1-6 alquila (por exemplo, metila ou etila).

[0097] Pg10, Pg11 e Pg12 são, cada um, independentemente, um grupo protetor hidroxila (por exemplo, conforme descrito no presente documento). Em algumas modalidades, Pg10, Pg11 e Pg12 são, cada um, acetila.

[0098] Várias condições para efetuar as transformações de acordo com o Esquema 5 ou a), b), c), d), e), f) e g) descritos acima podem ser usados, que são exemplificados em modalidades abaixo e na seção de Exemplos. Outras condições e detalhes úteis incluem aqueles conhecidos na técnica para transformações análogas.

[0099] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas ao método de conversão do composto da Fórmula III-1 ou um isômero geométrico do mesmo, no composto da Fórmula III-2. Em algumas modalidades, o método compreende reagir um composto da Fórmula III-1 com formaldeído ou paraformaldeído na presença de um ácido de Lewis. Vários ácidos de Lewis podem ser usados para essa transformação, por exemplo, ácidos de Lewis à base de bóron ou alumínio podem ser usados. Em algumas modalidades, o ácido de Lewis compreende BF3. Outros ácidos de Lewis adequados incluem aqueles conhecidos na técnica que pode facilitar uma reação análoga de um olefina com um aldeído para fornecer um álcool.

[00100] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas ao método de oxidação do composto da Fórmula III-2 no composto da Fórmula III-3. Em algumas modalidades, a oxidação compreende um trióxido de Crômio ou oxidação à base de cromato ou variações dos mesmos. Em algumas modalidades, a oxidação compreende uma oxidação de Swern ou variações da mesma. Em algumas modalidades, a oxidação compreende uma oxidação mediada com iodina hipervalente. Em algumas modalidades, a oxidação compreende colocar o composto da Fórmula I-11 em contato com um agente de oxidação adequado. Vários agentes de oxidação são adequados. Em algumas modalidades, o agente de oxidação é um agente de oxidação à base de Crômio, por exemplo, PCC (cloromato de piridínio). Em algumas modalidades, o agente de oxidação é um reagente de oxidação de Swern. Vários sistemas de reagente de oxidação de Swern são conhecidos. Por exemplo, uma oxidação de Swern típica pode incluir o uso de um sistema à base de DMSO/cloreto de oxalila, no qual DMSO primeiro reage com cloreto de oxalila para gerar um cloreto de cloro(dimetil)sulfônio, que então converte um álcool em um aldeído ou grupo cetona na presença de uma base orgânica (por exemplo, Et3N). Outros agentes de oxidação úteis exemplificadores incluem reagentes para oxidação de Swern ou variações dos mesmos que usam cloreto cianúrico, anidrido trifluoroacético, carbodiimidas, complexo de trióxido de piridina-enxofre para ativar DMSO, ou usar sulfeto de dimetila e N-clorosuccinimida para gerar a espécie ativa de clorosulfônio. Em algumas modalidades, o agente de oxidação pode ser ácido 2-iodoxibenzóico (IBX) ou periodinano de Dess-Martin (1,1,1-Triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol- 3(1H)-ona). Preferencialmente, as condições de reação e de constituição são controladas de modo que nenhuma epimerização ou epimerização mínima na posição C30 ocorra.

[00101] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas ao método de conversão do composto da Fórmula III-3 no composto da Fórmula III-4, com uso de um reagente de formação de olefina. Preferencialmente, as condições de reação e de constituição são controladas de modo que nenhuma epimerização ou epimerização mínima na posição C30 ocorra. Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina compreende um acetato substituído por fosfonato: , em que G10 em cada ocorrência e R30a são, cada um, independentemente, um grupo alquila opcionalmente substituído (por exemplo, uma C1-6 alquila opcionalmente substituída, por exemplo, etila). O acetato substituído por fosfonato pode ser desprotonado para formar um carbânion estabilizado com fosfonato, que reage com o grupo aldeído na Fórmula III-3 para formar um éster alfa-beta-insaturado. Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina é 2-dietóxifosforilacetato de etila. Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina é um ileto de fósforo (por exemplo, trifenilcarbetoximetilenofosforano) ou seu precursor. Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina pode compreender um reagente organometálico, tal como um reagente de organozinco, que reage com o grupo aldeído na Fórmula III- 3 para formar um álcool secundário, que mediante desidratação, forma um éster alfa-beta-insaturado. Por exemplo, em algumas modalidades, o reagente formador de olefina compreende um reagente de Reformatsky de dois carbonos:

, em que X é halo, tais como Cl, Br ou I, e R30a é um grupo alquila opcionalmente substituído (por exemplo, uma C1-6 alquila opcionalmente substituída, por exemplo, etila). Em modalidades preferenciais, o éster grupo do reagente formador de olefina (por exemplo, R30a tanto no fosfonato como no reagente de Reformatsky) é o mesmo que COOR30 e R30 não é H. No entanto, em algumas modalidades, R30a é diferente de R30, por exemplo, quando R30 é H. Em tais modalidades, o método pode opcionalmente incluir também converter o -CO2R30a na Fórmula III-4a em -CO2R30 na Fórmula III- 4 Fórmula III-4a.

[00102] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a um método de oxidação do composto da Fórmula III-4 no composto da Fórmula III-5. Em algumas modalidades, o método compreende hidrogenar o composto da Fórmula III-4 com gás H2 na presença de um catalisador de metal e remover subsequentemente os grupos protetores hidroxila. Em algumas modalidades, o método compreende remover os grupos protetores hidroxila na Fórmula III-4 para fornecer um análogo de triol e subsequentemente hidrogenar o análogo de triol desprotegido com gás H2 na presença de um catalisador de metal.

[00103] Visto que as ligações duplas de olefina na Fórmula III-4 ou o análogo de triol da Fórmula III-4 são hidrogenadas durante a transformação acima para formar o triol da Fórmula III-5, os isômeros geométricos dos compostos da Fórmula III-4 ou o análogo de triol da Fórmula III-4 também podem ser usados. Em algumas modalidades, o método compreende hidrogenar um composto da Fórmula III-4 ou o análogo de triol da Fórmula III-4. Em algumas modalidades, o método compreende hidrogenar um isômero geométrico do composto da Fórmula III-4 ou o análogo de triol da Fórmula III-4. Em algumas modalidades, o método compreende hidrogenar uma mistura do composto da Fórmula III-4 ou o análogo de triol da Fórmula III-4, e seus isômeros geométricos.

[00104] Vários métodos para hidrogenar o composto da Fórmula III-4 ou o análogo de triol da Fórmula III-4 podem ser usados. Preferencialmente, o método compreende hidrogenar o composto da Fórmula III-4 ou o análogo de triol da Fórmula III-4 com H2 na presença de um catalisador heterogêneo, por exemplo, um catalisador de metal heterogêneo que compreende Pd, Ni, Pt, PtO2, Rh, ou Ru. Em algumas modalidades, o catalisador de metal heterogêneo é Pd/C. A hidrogenação pode ser conduzida em várias pressões de H2. Em algumas modalidades, a hidrogenação é conduzida em uma pressão de hidrogênio de 0,10 MPa (1 atm) ou próximo disso. Em algumas modalidades, a hidrogenação é conduzida em uma pressão de hidrogênio de mais do que 0,10 MPa (1 atm) (por exemplo, cerca de 0,20 MPa (2 atms), cerca de 0,30 MPa (3 atms), cerca de 0,50 MPa (5 atms), cerca de 1 MPa (10 atms), cerca de 1,5 MPa (15 atms), ou quaisquer faixas entre os valores citados). Em algumas modalidades, a hidrogenação é conduzida em uma pressão de hidrogênio de cerca de 0,10 MPa (15 psi) a cerca de 0,68 MPa (100 psi) (por exemplo, cerca de 0,34 MPa (50 psi)).

[00105] Em algumas modalidades, o composto da Fórmula III-4 é convertido na Fórmula III-5a por um processo que compreende hidrogenação, desproteção, e hidrólise de éster, independentemente da sequência:

Fórmula III-5a. Em tais modalidades, o método compreende converter Fórmula III-5a em ácido cólico, um éster do mesmo ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável do mesmo, por exemplo, de acordo com a sequência de reação no Esquema 5a: Condições adequadas para as transformações no Esquema 5a incluem aqueles descritos no presente documento, por exemplo, na seção de Exemplos.

[00106] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas ao método de oxidação do composto da Fórmula III-5 no composto da Fórmula III-6. Em algumas modalidades, a oxidação compreende um trióxido de Crômio ou oxidação à base de cromato ou variações dos mesmos. Em algumas modalidades, a oxidação compreende uma oxidação de Swern ou variações da mesma. Em algumas modalidades, a oxidação compreende uma oxidação mediada com iodina hipervalente. Em algumas modalidades, a oxidação compreende colocar o triol da Fórmula III-5 em contato com um agente de oxidação adequado. Em algumas modalidades, o agente de oxidação é um agente de oxidação à base de Crômio, por exemplo, reagente de Jones (uma solução de trióxido de crômio em ácido sulfúrico diluído); PCC (cloromato de piridínio), etc. Em uma modalidade preferencial, o agente de oxidação é reagente de Jones. Em algumas modalidades, o agente de oxidação é um reagente de oxidação de Swern. Vários sistemas de reagente de oxidação de Swern são conhecidos. Por exemplo, uma oxidação de Swern típica pode incluir o uso de um sistema à base de DMSO/cloreto de oxalila, no qual DMSO primeiro reage com cloreto de oxalila para gerar um cloreto de cloro(dimetil)sulfônio, que então converte um álcool em um aldeído ou grupo cetona na presença de uma base orgânica (por exemplo, Et3N). Outros agentes de oxidação úteis exemplificadores incluem reagentes para oxidação de Swern ou variações dos mesmos que usam cloreto cianúrico, anidrido trifluoroacético, carbodiimidas, complexo de trióxido de piridina-enxofre para ativar DMSO, ou usar sulfeto de dimetila e N-clorosuccinimida para gerar a espécie ativa de clorosulfônio. Em algumas modalidades, o agente de oxidação pode ser ácido 2-iodoxibenzóico (IBX) ou periodinano de Dess- Martin (1,1,1-Triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol-3(1H)- ona).

[00107] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas ao método de conversão do composto da Fórmula III-6 no composto da Fórmula III-7, por exemplo, com uso de um agente de redução de cetona. Em algumas modalidades, o agente redutor de cetona é um borohidreto (tal como NaBH4, NaCNBH3, etc.) ou um hidreto de trialcoxialumíno

(por exemplo, hidreto de tri-isopropoxialumíno, hidreto de tri-terc-butoxialumínio). Em modalidades preferenciais, o agente redutor de cetona é hidreto de tri-terc-butoxialumínio de lítio (LiAlH(O-tBu)3).

[00108] Quando R30 não é hidrogênio, por exemplo, quando R30 é uma C1-6 alquila, então para sintetizar ácido cólico, o método compreende adicionalmente hidrolisar o composto da Fórmula III-7. Desse modo, em algumas modalidades, quando R30 não é hidrogênio, o método compreende hidrolisar o composto da Fórmula III-7. Condições de hidrolização adequadas incluem aquelas conhecidas na técnica. Por exemplo, a hidrólise pode ser efetuada reagindo-se o composto da Fórmula III-7 sob condições de hidrólise mediada com ácido (por exemplo, mediada com BF3), mediada com base (por exemplo, com uso de um hidróxido de metal álcali (por exemplo, NaOH ou LiOH)), ou mediada com nucleófilo (por exemplo, mediada com I-). Em modalidades preferenciais, a hidrólise compreende colocar o composto da Fórmula III-7 em contato com um hidróxido de metal álcali (por exemplo, NaOH ou LiOH).

[00109] Em algumas modalidades, um éster de ácido cólico, por exemplo, o composto da Fórmula III-7 em que R30 é uma alquila opcionalmente substituída, é o produto desejado. Por exemplo, em algumas modalidades, o método é direcionado à síntese de um éster farmacêutica ou cosmeticamente aceitável de ácido cólico. Em tais modalidades, as condições de reação preferenciais para sequências a) a f) são aquelas em que nenhuma hidrólise ou hidrólise mínima do éster (por exemplo,- CO2R30) ocorre sob as respectivas condições de reação. No entanto, se for desejado, os ésteres de ácido cólico também podem ser preparados por esterificação de ácido cólico com um álcool desejado.

[00110] Em algumas modalidades, um sal de ácido cólico é o produto desejado. Por exemplo, em algumas modalidades, o método é direcionado à síntese de um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável de ácido cólico. Desse modo, em algumas modalidades, o método compreende formar um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável de ácido cólico, por exemplo, reagindo-se ácido cólico com uma base adequada, por exemplo, metal ou hidróxido de amônio (por exemplo, sódio, potássio, lítio, cálcio, magnésio, amônio, ou hidróxido de tetralquilamônio).

[00111] O composto da Fórmula III-1 ou isômero geométrico do mesmo usado nos métodos descritos acima no presente documento pode ser preparado por meio de diferentes métodos. Por exemplo, em algumas modalidades, o composto da Fórmula III-1 ou isômero geométrico do mesmo pode ser sintetizado a partir de reação de um composto da Fórmula III- 8 com um reagente formador de olefina: Fórmula III-8 em que R31 é H ou Pg10; R32 é H ou Pg11; e R33 é H ou Pg12; visto que quando um ou mais dentre R31, R32 e R33 são H, então uma etapa de proteção é realizada depois de reagir o composto da Fórmula III-8 com o reagente formador de olefina. No entanto, em algumas modalidades, quando um ou mais dentre R31, R32 e R33 são H, a etapa de proteção também pode ser realizada primeiro antes de reagir com o reagente formador de olefina. Vários reagentes de formação de olefina são adequados para a transformação. Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina pode ser um ileto fosforoso. Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina pode ser etilenetrifenilfosforano ou seu sal de etiltrifenilfosfônio precursor. Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina compreende um reagente organometálico de dois carbonos (por exemplo, um reagente de organozinco), em que a 17-cetona da Fórmula III-8 pode ser convertida em um olefina formando- se primeiro um intermediário alcóolico com o reagente organometálico, que é então seguido por desidratação.

[00112] Em algumas modalidades, R31, R32 e R33 são todos H (um composto da Fórmula III-8a) e a etapa de proteção pode ser realizada antes ou depois de reagir com o reagente formador de olefina: Fórmula III-8a.

[00113] O composto da Fórmula III-8a também pode ser servido como material de partida para a síntese do composto da Fórmula III-8, em que pelo menos um dentre R31, R32 e R33 não são H. Por exemplo, em algumas modalidades, R31, R32 e R33 são, cada um, acetila, o composto da Fórmula III-8 pode ser preparado reagindo-se o composto da Fórmula III-8a com um doador de acetila adequado (por exemplo, anidrido acético).

[00114] Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento, o composto da Fórmula III-8a pode ser preparado pelos métodos descritos no presente documento, por exemplo, Método 3A abaixo. Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento, o composto da Fórmula III-8a também pode ser um material sintético livre de quaisquer impurezas derivadas de animais. MÉTODO 3A: SÍNTESE DO COMPOSTO DA FÓRMULA III-8A A PARTIR DE DHEA POR MEIO DE ESTEROIDES 3,7-DIOXIGENADOS

[00115] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a um método de preparo um composto da Fórmula III-8a. Em algumas modalidades, o método compreende obter o composto da Fórmula III-8a a partir de DHEA conforme exemplificado no Esquema 6: em que n é 0, 1 ou 2, e R34 é C1-6 alquila.

[00116] Em algumas modalidades, o método compreende: a) oxidar desidroepiandrosterona (DHEA) em um composto da Fórmula III-9

DHEA Fórmula III-9: b) reagir o composto da Fórmula III-9 com um reagente formador de epóxido para formar um epóxido da Fórmula III-10

Fórmula III-10; c) reduzir um epóxido da Fórmula III-10 sob condições de hidrogenação para formar uma dicetona da Fórmula III-11

Fórmula III-11; d) colocar a dicetona da Fórmula III-11 em contato com um agente redutor de cetona para formar um composto da Fórmula III-12

Fórmula III-12; e) reagir o composto da Fórmula III-12 com uma amina para formar uma imina da Fórmula III-13

Fórmula III-13 em que n é 0, 1 ou 2, e R34 é C1-6 alquila; e f) oxidar a imina da Fórmula III-13 com O2 na presença de um sal de cobre para formar o composto da Fórmula III-8a.

[00117] Várias condições são adequadas para as transformações descritas no esquema 6 ou a) a f) acima, que são exemplificados nas modalidades abaixo e na seção de Exemplos. Outras condições e detalhes úteis incluem aqueles conhecidos na técnica para transformações análogas.

[00118] Por exemplo, DHEA pode ser convertido no composto da Fórmula III-9 através de oxidação. Em algumas modalidades, a oxidação pode ser realizada com um agente de oxidação baseado em benzoquinona (por exemplo, DDQ ou cloranil) e um óxido de amina (por exemplo, TEMPO (2,2,6,6- tetrametilpiperidin-1-il)oxidanila)).

[00119] O composto da Fórmula III-9 pode ser convertido no composto da Fórmula III-10 com uso de um reagente formador de epóxido. Em algumas modalidades, o reagente formador de epóxido é um ácido peroxicarboxílico. Em algumas modalidades, o reagente formador de epóxido é ácido meta- cloroperoxibenzóico. Outros reagentes formadores de epóxido adequados incluem aqueles conhecidos na técnica que podem produzir seletivamente um epóxido nas 6,7 posições com a olefina nas posições 4,5 intacta.

[00120] Em algumas modalidades, a conversão do composto da Fórmula III-10 no composto da Fórmula III-11 pode ser alcançada através de uma reação de hidrogenação. Por exemplo, em algumas modalidades, o método compreende hidrogenar o composto da Fórmula III-10 com H2 sob a catálise de um catalisador heterogêneo, por exemplo, um catalisador de metal heterogêneo que compreende Pd, Ni, Pt, PtO2, Rh ou Ru. Em algumas modalidades, o catalisador de metal heterogêneo é Pd/C. A hidrogenação pode ser conduzida em várias pressões de H2. Em algumas modalidades, a hidrogenação é conduzida em uma pressão de hidrogênio de 0,10 MPa (1 atm) ou próximo disso. Em algumas modalidades, a hidrogenação é conduzida em uma pressão de hidrogênio de mais do que 0,10 MPa (1 atm) (por exemplo, cerca de 0,20 MPa (2 atms), cerca de 0,30 MPa (3 atms), cerca de 0,50 MPa (5 atms), cerca de 1 MPa (10 atms), cerca de 1,5 MPa (15 atms), ou quaisquer faixas entre os valores citados). Em algumas modalidades, a hidrogenação é conduzida em uma pressão de hidrogênio de cerca de 0,10 MPa (15 psi) a cerca de 0,68 MPa (100 psi) (por exemplo, cerca de 0,34 MPa (50 psi)).

[00121] Em algumas modalidades, a conversão do composto da Fórmula III-11 no composto da Fórmula III-12 pode ser alcançada através de uma reação de redução. Vários agentes redutores de cetona podem ser usados para efetuar essa transformação. Em algumas modalidades, o agente redutor de cetona é um borohidreto (tal como NaBH4, NaCNBH3, etc.) ou um hidreto de trialcoxialumíno (por exemplo, hidreto de tri- isopropoxialumíno, hidreto de tri-terc-butoxialumínio). Em modalidades preferenciais, o agente redutor de cetona é hidreto de tri-terc-butoxialumínio de lítio (LiAlH(O-tBu)3).

[00122] Em algumas modalidades, o composto 3,7- dihidoxi da Fórmula III-12 pode ser convertido na imina da Fórmula III-13 com uma amina correspondente. Várias iminas da Fórmula III-13 são adequadas para os métodos descritos no presente documento. Em algumas modalidades, o anel de piridina na Fórmula III-13 é não-substituído, isto é, n é 0. Em algumas modalidades, o anel de piridina na Fórmula III-13 é substituído por um ou dois grupos C1-6 alquila. Por exemplo, em algumas modalidades, o anel de piridina na Fórmula III-13 é substituído na posição 4’ por um grupo metila. A formação de imina é geralmente catalisado por um ácido, por exemplo, ácido para- toluenesulfônico.

[00123] Sal de cobre adequado para a transformação do composto da Fórmula III-13 no composto da Fórmula III-8a inclui qualquer um daqueles conhecidos na técnica para transformações análogas. Em algumas modalidades, o sal de cobre é um sal de cobre (II), tal como Cu(OTf)2. Em algumas modalidades, o sal de cobre é um sal de cobre (I), tal como Cu(MeCN)4PF6.

[00124] A redução do composto da Fórmula III-11, a formação de imina do composto da Fórmula III-12, e a oxidação mediada com cobre da imina da Fórmula III-13 não exigem que o grupo hidroxila seja protegido ou seja um livre grupo hidroxila. Desse modo, em algumas modalidades, uma ou mais dentre a Fórmula III-11, Fórmula III-12, e Fórmula III-13 pode ser protegida e usada para a síntese tanto do composto da Fórmula III-8a como do Fórmula III-8, com proteção apropriada ou desproteção dependendo do produto alvo. Em algumas modalidades, a presente revelação fornece um método de preparo um composto da Fórmula III-8 de acordo com o esquema 7, em que R31, R32, R33, e R34 são conforme descrito acima no presente documento:

. As transformações descritas no esquema 7 são similares a aqueles descritos no Esquema 6, exceto que R33 na Fórmula III-11a, Fórmula III-12a, e Fórmula III-13a, e R31 na Fórmula III-12a, e Fórmula III-13a, podem ser hidrogênio ou um grupo protetor hidroxila conforme descrito no presente documento. MÉTODO 4: SÍNTESE DE ÁCIDO QUENODESOXICÓLICO A PARTIR DE ESTEROIDES 3,7-DIOXIGENADOS

[00125] Ácido quenodesoxicólico (CDCA) contém dois grupos hidroxila nas posições 3,7, que podem ser preparados por um intermediário, tal como um composto da Fórmula III-12 ou um derivado protegido por hidroxila do mesmo. Em algumas modalidades, a presente revelação é direcionada a um método de preparo de ácido quenodesoxicólico, um éster do mesmo ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável do mesmo a partir de um esteroide 3,7-dioxigenado. Em algumas modalidades, o método compreende uma sequência de reação de acordo com Esquema 8, em que Pg20 e Pg21 são, cada um, independentemente, um grupo protetor hidroxila e R40 é H ou um grupo alquila opcionalmente substituído: .

[00126] Em algumas modalidades, o método compreende: a) reagir um composto da Fórmula IV-1, ou um isômero geométrico do mesmo, com formaldeído ou paraformaldeído na presença de um ácido de Lewis, para formar um composto da fórmula IV-2

Fórmula IV-1 Fórmula IV-2 em que Pg20 e Pg21 são, cada um, independentemente a grupo protetor hidroxila; b) oxidar o composto da Fórmula IV-2 para fornecer um aldeído da Fórmula IV-3

Fórmula IV-3; c) reagir o aldeído da Fórmula IV-3 com um reagente formador de olefina para formar um composto da Fórmula IV-4, ou um isômero geométrico do mesmo,

Fórmula IV-4; em que R40 é H ou um grupo alquila opcionalmente substituído; d) hidrogenar o composto da Fórmula IV-4 com gás H2 na presença de um catalisador metálico e remover subsequentemente os grupos protetores hidroxila, ou remover os grupos protetores hidroxila da Fórmula IV-4 e hidrogenar subsequentemente o composto desprotegido com gás H2 na presença de um catalisador metálico, para fornecer um diol da Fórmula IV-5 Fórmula IV-5; e e) opcionalmente, quando R40 não for H na Fórmula IV- 5, hidrolisar o composto da Fórmula IV-5 em ácido quenodesoxicólico.

[00127] Grupos protetores hidroxila adequados para Pg20 e Pg21 incluem qualquer um daqueles conhecidos na técnica, por exemplo, aqueles descritos no presente documento. Em algumas modalidades, Pg20 e Pg21 são os mesmos. Em algumas modalidades, Pg20 e Pg21 são diferentes. Em modalidades preferenciais, tanto Pg20 quanto Pg21 são grupo protetor hidroxila que forma um éster com o grupo hidroxila, por exemplo, tanto Pg20 quanto Pg21 são acetila.

[00128] Em algumas modalidades, R40 é hidrogênio. No entanto, para facilidade de purificação, em modalidades preferenciais, R40 é uma C1-6 alquila (por exemplo, metila ou etila). Em algumas modalidades, R40 também podem ser uma alquila opcionalmente substituída (por exemplo, uma C1-6 alquila opcionalmente substituída). Por exemplo, R40 pode ser uma alquila opcionalmente substituída por 1-3 (por exemplo, 1, 2, ou 3) substituintes, em que os 1-3 substituintes são, independentemente, uma C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-6 carboxiciclila, heterociclila de 3 a 6 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, fenila, um fenila substituída (por exemplo, para-metoxifenila), hidroxila, C1-6 alcoxi (por exemplo, um metóxi, etóxi, etc.), halogênio (por exemplo, F ou

Cl), ou amino opcionalmente substituído por um ou dois grupos independentemente selecionados dentre C1-6 alquila. Em modalidades preferenciais, R40 é uma C1-6 alquila (por exemplo, metila ou etila). O grupo R40 nas Fórmulas IV-4 e IV-5 pode ser o mesmo ou diferente. Em algumas modalidades, o grupo R40 nas Fórmulas IV-4 e IV-5 pode ser o mesmo, por exemplo, como uma C1-6 alquila (por exemplo, metila ou etila).

[00129] Várias condições para efetuar as transformações no Esquema 8 e a), b), c), d) e e) no Método 4 podem ser usadas, que são exemplificadas nas modalidades abaixo e na seção de Exemplos. Outras condições e detalhes úteis incluem aqueles conhecidos na técnica para transformações análogas.

[00130] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a um método de conversão do composto da Fórmula IV-1 no composto da Fórmula IV-2. Em algumas modalidades, a conversão compreende reagir um composto da Fórmula IV-1 ou um isômero geométrico do mesmo, com formaldeído ou paraformaldeído na presença de um ácido de Lewis. Vários ácidos de Lewis podem ser usados para essa transformação, por exemplo, ácidos de Lewis à base de bóron ou alumínio podem ser usados. Em algumas modalidades, o ácido de Lewis compreende BF3. Outros ácidos de Lewis adequados incluem aqueles conhecidos na técnica que pode facilitar uma reação análoga de um olefina com um aldeído para fornecer um álcool.

[00131] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a um método de oxidação do composto da Fórmula IV-2 no composto da Fórmula IV-3, com uso de um agente de oxidação. Em algumas modalidades, a oxidação compreende um trióxido de Crômio ou oxidação à base de cromato ou variações dos mesmos. Em algumas modalidades, a oxidação compreende uma oxidação de Swern ou variações da mesma. Em algumas modalidades, a oxidação compreende uma oxidação mediada com iodina hipervalente. Em algumas modalidades, a oxidação compreende colocar o composto da Fórmula IV-2 em contato com um agente de oxidação adequado. Em algumas modalidades, o agente de oxidação é um agente de oxidação à base de Crômio, por exemplo, PCC (cloromato de piridínio). Em algumas modalidades, o agente de oxidação é um reagente de oxidação de Swern. Vários sistemas de reagente de oxidação de Swern são conhecidos. Por exemplo, uma oxidação de Swern típica pode incluir o uso de um sistema à base de DMSO/cloreto de oxalila, no qual DMSO primeiro reage com cloreto de oxalila para gerar um cloreto de cloro(dimetil)sulfônio, que então converte um álcool em um aldeído ou grupo cetona na presença de uma base orgânica (por exemplo, Et3N). Outros agentes de oxidação úteis exemplificadores incluem reagentes para oxidação de Swern ou variações dos mesmos que usam cloreto cianúrico, anidrido trifluoroacético, carbodiimidas, complexo de trióxido de piridina-enxofre para ativar DMSO, ou usar sulfeto de dimetila e N-clorosuccinimida para gerar a espécie ativa de clorosulfônio. Em algumas modalidades, o agente de oxidação pode ser ácido 2-iodoxibenzóico (IBX) ou periodinano de Dess-Martin (1,1,1-Triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol- 3(1H)-ona). Preferencialmente, as condições de reação e de constituição são controladas de modo que nenhuma epimerização ou epimerização mínima na posição C30 ocorra.

[00132] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a um método de conversão do composto da Fórmula IV-3 no composto da Fórmula IV-4, com uso de um reagente de formação de olefina. Vários reagentes de formação de olefina são adequados para essa transformação. Preferencialmente, as condições de reação e de constituição são controladas de modo que nenhuma epimerização ou epimerização mínima na posição C30 ocorra. Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina compreende um acetato substituído por fosfonato:

, em que G40 em cada ocorrência e R40a são, cada um, independentemente, um grupo alquila opcionalmente substituído (por exemplo, uma C1-6 alquila opcionalmente substituída, por exemplo, etila). O acetato substituído por fosfonato pode ser desprotonado para formar um carbânion estabilizado com fosfonato, que reage com o grupo aldeído na Fórmula IV-3 para formar um éster alfa-beta-insaturado.

Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina pode compreender um reagente organometálico, tal como um reagente de organozinco, que reage com o grupo aldeído na Fórmula IV-3 para formar um álcool secundário, que mediante desidratação, forma um éster alfa-beta-insaturado.

, em que X é halo, tais como Cl, Br ou I, e R40a é um grupo alquila opcionalmente substituído (por exemplo, uma C1-6 alquila opcionalmente substituída, por exemplo, etila). Em modalidades preferenciais, o éster grupo do reagente formador de olefina (por exemplo, R40a tanto no fosfonato como no reagente de Reformatsky) é o mesmo que COOR40 e R40 não é H.

No entanto, em algumas modalidades, R40a é diferente de R40, por exemplo, quando R40 é H.

Em tais modalidades, o método pode opcionalmente incluir também converter o -CO2R40a na Fórmula I-4a em -CO2R40 na Fórmula IV-4 Fórmula IV-4a.

[00133] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a um método de conversão do composto da Fórmula IV-4 no composto da Fórmula IV-5. Em algumas modalidades, o diol da Fórmula IV-5 é sintetizado hidrogenando- se o composto da Fórmula IV-4 seguido pela remoção dos grupos protetores hidroxila. Em algumas modalidades, o diol da Fórmula IV-5 é sintetizado removendo-se os grupos protetores hidroxila do composto da Fórmula IV-4 seguido por hidrogenação das ligações duplas. Como as ligações duplas de olefina na Fórmula IV-4 são hidrogenadas durante a transformação acima para formar o diol da Fórmula IV-5, os isômeros geométricos dos compostos da Fórmula IV-4 também podem ser usados. Em algumas modalidades, o método compreende hidrogenar o composto da Fórmula IV-4. Em algumas modalidades, o método compreende hidrogenar um isômero geométrico do composto da Fórmula IV-4. Em algumas modalidades, o método compreende hidrogenar uma mistura do composto da Fórmula IV-4, e seus isômeros geométricos.

[00134] Vários métodos para hidrogenar o composto da Fórmula IV-4 podem ser usados. Preferencialmente, o método compreende hidrogenar o composto da Fórmula IV-4 com H2 na presença de um catalisador heterogêneo, por exemplo, um catalisador de metal heterogêneo que compreende Pd, Ni, Pt, PtO2, Rh, ou Ru. Em algumas modalidades, o catalisador de metal heterogêneo é Pd/C. A hidrogenação pode ser conduzida em várias pressões de H2. Em algumas modalidades, a hidrogenação é conduzida em uma pressão de hidrogênio de 0,10 MPa (1 atm) ou próximo disso. Em algumas modalidades, a hidrogenação é conduzida em uma pressão de hidrogênio de mais do que 0,10 MPa (1 atm) (por exemplo, cerca de 0,20 MPa (2 atms), cerca de 0,30 MPa (3 atms), cerca de 0,50 MPa (5 atms), cerca de 1 MPa (10 atms), cerca de 1,5 MPa (15 atms), ou quaisquer faixas entre os valores citados). Em algumas modalidades, a hidrogenação é conduzida em uma pressão de hidrogênio de cerca de 0,10 MPa (15 psi) a cerca de 0,68 MPa (100 psi) (por exemplo, cerca de 0,34 MPa (50 psi)).

[00135] Vários métodos podem ser usados para a síntese do composto da Fórmula IV-1 ou um isômero geométrico do mesmo. Em algumas modalidades, o composto da Fórmula IV-1 ou um isômero geométrico do mesmo é obtido a partir da reação de um composto da Fórmula IV-6 com um reagente formador de olefina Formula IV-6 em que R41 é H ou Pg20; R42 é H ou Pg21; desde que, quando um ou ambos dentre R41 e R42 são H, então uma etapa de proteção seja seguida após a reação do composto da Fórmula IV-6 com o reagente formador de olefina. Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina pode ser um ileto fosforoso. Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina pode ser etilenetrifenilfosforano ou seu sal de etiltrifenilfosfônio precursor. Em algumas modalidades, o reagente formador de olefina compreende um reagente organometálico de dois carbonos (por exemplo, um reagente de organozinco), em que a 17-cetona da Fórmula IV-6 pode ser convertida em um olefina formando-se primeiro um intermediário alcóolico com o reagente organometálico, que é então seguido por desidratação.

[00136] Quando R40 não é hidrogênio, por exemplo, quando R40 é um C1-6 alquila, então para sintetizar ácido quenodesoxicólico, o método compreende adicionalmente hidrolisar o composto da Fórmula IV-5. Desse modo, em algumas modalidades, quando R40 não é hidrogênio, o método compreende hidrolisar o composto da Fórmula IV-5. Condições de hidrolização adequadas incluem aquelas conhecidas na técnica. Por exemplo, a hidrólise pode ser efetuada reagindo-se o composto da Fórmula IV-5 sob condições de hidrólise mediada com ácido (por exemplo, mediada com BF3), mediada com base (por exemplo, com uso de um hidróxido de metal álcali (por exemplo, NaOH ou LiOH)), ou mediada com nucleófilo (por exemplo, mediada com I-). Em modalidades preferenciais, a hidrólise compreende colocar o composto da Fórmula IV-5 em contato com um hidróxido de metal álcali (por exemplo, NaOH ou LiOH).

[00137] Em algumas modalidades, um éster de ácido quenodesoxicólico, por exemplo, o composto da Fórmula IV-5 em que R40 é uma alquila opcionalmente substituída, é o produto desejado. Por exemplo, em algumas modalidades, o método é direcionado à síntese de um éster farmacêutica ou cosmeticamente aceitável de ácido quenodesoxicólico. Em tais modalidades, as condições de reação preferenciais para sequências a) a d) são aquelas em que nenhuma hidrólise ou hidrólise mínima do éster (por exemplo,-CO2R40) ocorre sob as respectivas condições de reação. No entanto, se for desejado, os ésteres de ácido quenodesoxicólico também podem ser preparados por esterificação de ácido quenodesoxicólico com um álcool desejado.

[00138] Em algumas modalidades, um sal de ácido quenodesoxicólico é o produto desejado. Por exemplo, em algumas modalidades, o método é direcionado à síntese de um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável de ácido quenodesoxicólico. Desse modo, em algumas modalidades, o método compreende formar um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável de ácido quenodesoxicólico, por exemplo, reagindo- se ácido quenodesoxicólico com uma base adequada, por exemplo, metal ou hidróxido de amônio (por exemplo, sódio, potássio, lítio, cálcio, magnésio, amônio, ou hidróxido de tetralquilamônio).

[00139] Compostos de Fórmula IV-6 podem estar prontamente disponíveis a partir tanto da Fórmula III-11 como da Fórmula III-12. Por exemplo, quando tanto R41 quanto R42 são H, a Fórmula IV-6 é igual à Fórmula III-12. Quando tanto R41 quanto R42 são o mesmo grupo protetor hidroxila, uma proteção dupla da Fórmula III-12 com um grupo protetor apropriado pode fornecer o composto da Fórmula IV-6. Além disso, quando R41 e R42 são diferentes, o composto da Fórmula IV-6 pode ser fornecido através do composto da Fórmula III-11 com uso de uma combinação de etapas de proteção/desproteção e redução, de modo a diferenciar os dois grupos 3- e 7-hidroxila independentemente de sua reatividade intrínseca.

[00140] Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento para o Método 4, o composto da Fórmula IV-6 pode ser preparado a partir do composto da Fórmula III- 11 ou Fórmula III-12, que, por sua vez, pode ser preparada por qualquer um dos métodos descritos no presente documento, por exemplo, Método 3. Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento, o composto da Fórmula III-11 ou Fórmula III-12 também pode ser um material sintético livre de quaisquer impurezas derivadas de animais.

[00141] Adicionalmente, conforme será evidente aos elementos versados na técnica, grupos protetores convencionais podem ser necessários para evitar que determinados grupos funcionais sofram reações indesejadas. Grupos protetores adequados para vários grupos funcionais assim como condições adequadas para proteger e desproteger grupos funcionais particulares são conhecidos na técnica. Por exemplo, inúmeros grupos protetores são descritos em “Protective Groups in Organic Synthesis”, 4a ed. P. G. M. Wuts; T. W. Greene, John Wiley, 2007 e referências citadas no mesmo. Os reagentes para as reações descritas no presente documento são compostos geralmente conhecidos ou podem ser preparados por procedimentos conhecidos ou modificações óbvias dos mesmos. Por exemplo, muitos dos reagentes estão disponíveis a partir de fornecedores comerciais tais como Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, Wisconsin, E.U.A), Bachem (Torrance, California, E.U.A), Emka-Chem ou Sigma (St. Louis, Missouri, E.U.A). Outros podem ser preparados por procedimentos, ou modificações óbvias dos mesmos, descritos em textos de referência padrão, tais como Fieser e Fieser’s Reagents for Organic Synthesis, Volumes 1 a 15 (John Wiley e Sons, 1991), Rodd’s Chemistry of Carbon Compounds, Volumes 1 a 5 e Supplemental (Elsevier Science Publishers, 1989), Organic Reactions, Volumes 1 a 40 (John Wiley e Sons, 1991), March’s Advanced Organic Chemistry, (Wiley, 7a Edição), e Larock’s Comprehensive Organic Transformations (Wiley-VCH, 1999). INTERMEDIÁRIOS SINTÉTICOS INOVADORES DOS MÉTODOS 3 E 4

[00142] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a intermediários sintéticos inovadores úteis, por exemplo, para a preparação de ácido cólico e/ou ácido quenodesoxicólico. Em algumas modalidades, o intermediário sintético é um composto da Fórmula V-1, Fórmula V-2, Fórmula V-3, ou Fórmula V-4, ou um isômero geométrico do mesmo, ou um sal do mesmo:

Fórmula V-1 Fórmula V-2 Fórmula V-3 Fórmula V-4 em que cada um dentre R50, R51 e R52 é independentemente H ou um grupo protetor hidroxila, e R53 é H ou uma alquila opcionalmente substituída.

[00143] R50, R51, e R52 em cada uma dentre a Fórmula V-1, Fórmula V-2, Fórmula V-3, e Fórmula V-4 podem ser independentemente selecionados. Em algumas modalidades, R50, R51, e R52 são, cada um, H. Em algumas modalidades, R50, R51, e R52 são, cada um, independentemente um grupo protetor hidroxila (por exemplo, conforme descrito no presente documento). Em algumas modalidades, R50, R51, e R52 são o mesmo grupo protetor hidroxila. Em algumas modalidades, pelo menos dois dentre R50, R51, e R52 são o mesmo grupo protetor hidroxila. Em algumas modalidades, pelo menos dois dentre R50, R51, e R52 são diferentes. Por exemplo, um dentre R50, R51, e R52 pode ser hidrogênio e os outros dois dentre R50, R51, e R52 pode ser o mesmo grupo protetor hidroxila ou diferente. Grupos protetores hidroxila adequados incluem qualquer um daqueles descritos no presente documento. Em algumas modalidades, o grupo protetor hidroxila é acetila.

[00144] Algumas modalidades são direcionadas ao composto da Fórmula V-3, um isômero geométrico do mesmo ou um sal do mesmo. R50, R51, e R52 na Fórmula V-3 são descritos acima no presente documento. Em algumas modalidades, R53 é H. Em algumas modalidades, R53 é uma alquila opcionalmente substituída (por exemplo, C1-6 alquila opcionalmente substituída). Em algumas modalidades, R53 é metila. Em algumas modalidades, R53 é etila.

[00145] Em algumas modalidades, o composto da Fórmula V-1, Fórmula V-2, Fórmula V-3, ou Fórmula V-4 é isolado. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula V-1, Fórmula V-2, Fórmula V-3, ou Fórmula V-4 é substancialmente puro (por exemplo, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, ou pelo menos 98% puro em peso). Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula V-1, Fórmula V-2, Fórmula V-3, ou Fórmula V-4 é cerca de 80%, cerca de 85%, cerca de 90%, cerca de 95%, cerca de 98% puro em peso, ou quaisquer faixas entre os valores especificados. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula V-1, Fórmula V-2, Fórmula V-3, ou Fórmula V-4 é substancialmente livre (por exemplo, menor que 5%, menor do que 3%, menor do que 2%, menor do que 1%, menor do que 0,5%, ou menor do que 0,1% em peso) de outros diastereômeros e/ou isômero geométrico. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula V-1, Fórmula V-2, Fórmula V-3, ou Fórmula V-4 tem cerca de 5%, cerca de 3%, cerca de 2%, cerca de 1%, cerca de 0,5%, cerca de 0,1% em peso, ou quaisquer faixas entre os valores especificados, de outros diastereômeros e/ou isômero geométrico. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula V-1, Fórmula V-2, Fórmula V-3, ou Fórmula V-4 é livre de (por exemplo, não detectável com uso de ferramentas analíticas atuais) outros diastereômeros e/ou isômero geométrico.

[00146] Em algumas modalidades, o intermediário sintético é um composto da Fórmula V-5, Fórmula V-6, Fórmula V-7, ou um composto de Fórmula V-8, ou um isômero geométrico,

ou um sal do mesmo:

H

H H 54 R O OR55

H Fórmula V-5 Fórmula V-6 Fórmula V-7 Fórmula V-8; em que cada um dentre R54 e R55 é independentemente H ou um grupo protetor hidroxila, e R56 é H ou uma alquila opcionalmente substituída, desde que quando R54 e R55 forem acetila, então R56 não seja metila.

[00147] R54 e R55 em cada uma das Fórmula V-5, Fórmula V-6, Fórmula V-7, e Fórmula V-8 podem ser independentemente selecionados. Em algumas modalidades, R54 e R55 são, cada um, H. Em algumas modalidades, R54 e R55 são, cada um, independentemente um grupo protetor hidroxila (por exemplo, conforme descrito no presente documento). Em algumas modalidades, R54 e R55 são o mesmo grupo protetor hidroxila. Em algumas modalidades, R54 e R55 são diferentes. Por exemplo, um dentre R54 e R55 pode ser hidrogênio e o outro dentre R54 e R55 pode ser um grupo protetor hidroxila. Grupos protetores hidroxila adequados incluem qualquer um daqueles descritos no presente documento. Em algumas modalidades, o grupo protetor hidroxila é acetila.

[00148] Algumas modalidades são direcionadas ao composto da Fórmula V-8, um isômero geométrico do mesmo ou um sal do mesmo. R54, R55, e R56 na Fórmula V-8 são descritos acima no presente documento. Em algumas modalidades, R56 é H. Em algumas modalidades, R56 é uma alquila opcionalmente substituída (por exemplo, opcionalmente C1-6 alquila substituída), visto que, quando R54 e R55 são ambos acetila, então R56 não é metila. Em algumas modalidades, R56 é etila.

[00149] Em algumas modalidades, o composto da Fórmula V-5, Fórmula V-6, Fórmula V-7, ou Fórmula V-8 é isolado. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula V-5, Fórmula V-6, Fórmula V-7, ou Fórmula V-8 é substancialmente puro (por exemplo, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, ou pelo menos 98% puro em peso). Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula V-5, Fórmula V-6, Fórmula V-7, ou Fórmula V-8 é cerca de 80%, cerca de 85%, cerca de 90%, cerca de 95%, cerca de 98% puro em peso, ou quaisquer faixas entre os valores especificados. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula V-5, Fórmula V-6, Fórmula V-7, ou Fórmula V-8 é substancialmente livre (por exemplo, menor que 5%, menor do que 3%, menor do que 2%, menor do que 1%, menor do que 0,5%, ou menor do que 0,1% em peso) de outros diastereômeros e/ou isômero geométrico. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula V-5, Fórmula V-6, Fórmula V-7, ou Fórmula V-8 tem cerca de 5%, cerca de 3%, cerca de 2%, cerca de 1%, cerca de 0,5%, cerca de 0,1% em peso, ou quaisquer faixas entre os valores especificados, de outros diastereômeros e/ou isômero geométrico. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula V-5, Fórmula V-6, Fórmula V-7, ou Fórmula V-8 é livre de (por exemplo, não detectável com uso de ferramentas analíticas atuais) outros diastereômeros e/ou isômero geométrico.

[00150] Em algumas modalidades, o intermediário sintético é um composto que tem uma estrutura de

Fórmula III-8 em que R31, R32 e R33 são, cada um, independentemente H ou um grupo protetor hidroxila. Em algumas modalidades, R31, R32, e R33 são, cada um, H. Em algumas modalidades, R31, R32, e R33 são, cada um, independentemente um grupo protetor hidroxila (por exemplo, conforme descrito no presente documento). Em algumas modalidades, R31, R32, e R33 são o mesmo grupo protetor hidroxila. Em algumas modalidades, pelo menos dois dentre R31, R32, e R33 são o mesmo grupo protetor hidroxila. Em algumas modalidades, pelo menos dois dentre R31, R32, e R33 são diferentes. Por exemplo, um dentre R31, R32, e R33 pode ser hidrogênio e os outros dois dentre R31, R32, e R33 pode ser o mesmo grupo protetor hidroxila ou diferente. Grupos protetores hidroxila adequados para Fórmula III-8 incluem qualquer um daqueles descritos no presente documento. Em algumas modalidades, o grupo protetor hidroxila é acetila.

[00151] Em algumas modalidades, o composto da Fórmula III-8 é isolado. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula III-8 é substancialmente puro (por exemplo, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, ou pelo menos 98% puro em peso). Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula III-8 é cerca de 80%, cerca de 85%, cerca de 90%, cerca de 95%, cerca de 98% puro em peso, ou quaisquer faixas entre os valores especificados. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula III-8 é substancialmente livre (por exemplo, menor que 5%, menos do que 3%, menos do que 2%, menos do que 1%, menos do que 0,5%, ou menos do que 0,1% em peso) de outros diastereômeros. Em algumas modalidades, o composto isolado da Fórmula III-8 tem cerca de 5%, cerca de 3%, cerca de 2%, cerca de 1%, cerca de 0,5%, cerca de 0,1% em peso, ou quaisquer faixas entre os valores especificados, de outros diastereômeros. Em algumas modalidades, o composto da Fórmula III-8 isolado é livre de (por exemplo, não detectável com uso de ferramentas analíticas atuais) outros diastereômeros.

COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS OU COSMÉTICAS

[00152] Determinadas modalidades da presente revelação são direcionadas a composições farmacêuticas ou cosméticas que compreendem um ou mais dentre CA, DCA, CDCA e seus ésteres e sais, que são livres de impurezas derivadas de animais.

[00153] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica ou cosmética compreende uma quantidade eficaz de alta pureza (por exemplo, uma pureza de pelo menos 98%, pelo menos 99%, pelo menos 99,5%, ou pelo menos 99,9% em peso) ácido cólico ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos, ou uma composição de ácido cólico de alta pureza no presente documento e um excipiente farmacêutica ou cosmeticamente aceitável. Em algumas modalidades, o ácido cólico ou sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos tem pelo menos uma pureza de 99% em peso, por exemplo, 99,2%, 99,5%, 99,9%, ou maior do que 99,9% em peso. Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento, o ácido cólico ou sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos também pode ser caracterizado por ser livre de quaisquer impurezas derivadas de animais. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica ou cosmética compreende adicionalmente uma quantidade eficaz de ácido quenodesoxicólico de alta pureza (por exemplo, uma pureza de pelo menos 98%, pelo menos 99%, pelo menos 99,5%, ou pelo menos 99,9% em peso) ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos. Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento, o ácido quenodesoxicólico ou sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos também pode ser caracterizado por ser livre de quaisquer impurezas derivadas de animais. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica ou cosmética compreende adicionalmente uma quantidade eficaz de ácido desoxicólico de alta pureza (por exemplo, uma pureza de pelo menos 98%, pelo menos 99%, pelo menos 99,5%, ou pelo menos 99,9% em peso) ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos. Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento, o ácido desoxicólico ou sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos também pode ser caracterizado por ser livre de quaisquer impurezas derivadas de animais.

[00154] O ácido cólico de alta pureza pode ser obtido, por exemplo, pelos métodos sintéticos fornecidos no presente documento. Em algumas modalidades, a presente revelação também fornece uma composição de ácido cólico de alta pureza. Tipicamente, a composição de ácido cólico de alta pureza no presente documento compreende ácido cólico ou um sal do mesmo, junto com um ou mais impurezas de processo. Por exemplo, em algumas modalidades, a composição de ácido cólico de alta pureza compreende, consiste essencialmente em, ou consiste em, ácido cólico ou um sal do mesmo, e um ou mais (por exemplo, 1, 2, 3, ou todos) compostos selecionados dentre os Compostos 32 a 35 (consultar o Exemplo 6) ou um sal dos mesmos. Em algumas modalidades, a composição de ácido cólico de alta pureza pode compreender qualquer um dos Compostos 32 a 35, ou um sal do mesmo, quaisquer dois dos Compostos 32 a 35, ou um sal do mesmo, qualquer três dos Compostos 32 a 35, ou um sal do mesmo, ou todos os Compostos 32 a 35, ou um sal dos mesmos. Em algumas modalidades, a quantidade total dos Compostos 32 a 35 e sais dos mesmos, conforme aplicável, é menos do que 5% (por exemplo, menor que 5%, menos do que 4%, menos do que 3%, menos do que 2%, menos do que 1%, menos do que 0,5%, menos do que 0.2%, menos do que 0.1%), mais preferencialmente, menos do que 2%, ou menos do que 1% (por exemplo, menor que 0,5%, menos do que 0,2%, menos do que 0,1%), em peso e/ou por área de HPLC do ácido cólico e sal do mesmo. For evitar dúvidas, quando o nível de pureza é citado como porcentagem em peso, o respectivo composto e todas as suas formas de sal são considerados, e o peso equivalente da forma de ácido livre é então usada para o cálculo de porcentagem em peso. Por exemplo, quando é dito que a porcentagem em peso do Composto 32 e sal é menos do que 1% do ácido cólico e sal do mesmo, deve-se entender que o peso equivalente do Composto 32 como ácido livre, depois de considerar todas as formas de sal do Composto 32 que pode estar presente na composição, é menos do que 1% em peso de ácido cólico, também expresso como peso equivalente do ácido livre, depois de considerar todas as formas de sal de ácido cólico que pode estar presente na composição. Métodos para determinar a pureza de uma composição são conhecidos aos elementos versados na técnica. Por exemplo, a pureza do composição de ácido cólico no presente documento pode ser analisada com base no peso, área de HPLC ou ambos. Os elementos versados na técnica saberiam como validar um método analítico em determinar tal nível de pureza. Em qualquer uma das modalidades descritas no presente documento, a pureza do composição de ácido cólico no presente documento pode ser baseada em porcentagens em peso.

[00155] Cada um dos Compostos 32-35 ou um sal do mesmo, se presentes na composição de ácido cólico de alta pureza, deve ser preferencialmente menos do que 5% (por exemplo, menor que 5%, menos do que 4%, menos do que 3%, menos do que 2%, menos do que 1%, menos do que 0,5%, menos do que 0,2%, menos do que 0,1%), mais preferencialmente, menos do que

2%, ou menos do que 1% (por exemplo, menor que 0,5%, menos do que 0,2%, menos do que 0,1%), em peso e/ou por área de HPLC do ácido cólico e sal do mesmo.

Por exemplo, em algumas modalidades, a composição de ácido cólico de alta pureza compreende o Composto 32, ou um sal do mesmo, em uma quantidade de menos do que 1% (por exemplo, menor que 0,5%, menos do que 0,2%, menos do que 0,1%) em peso e/ou por área de HPLC do ácido cólico e sal do mesmo.

Em algumas modalidades, a composição de ácido cólico de alta pureza compreende o Composto 33, ou um sal do mesmo, em uma quantidade de menos do que 5% (por exemplo, menor que 5%, menos do que 4%, menos do que 3%, menos do que 2%, menos do que 1%, menos do que 0,5%, menos do que 0,2%, menos do que 0,1%), mais preferencialmente, menos do que 2%, ou menos do que 1% (por exemplo, menor que 0,5%, menos do que 0,2%, menos do que 0,1%), em peso e/ou por área de HPLC do ácido cólico e sal do mesmo.

Em algumas modalidades, a composição de ácido cólico de alta pureza compreende Composto 34, ou um sal do mesmo, em uma quantidade de menos do que 1% (por exemplo, menor que 0,5%, menos do que 0,2%, menos do que 0,1%) em peso e/ou por área de HPLC do ácido cólico e sal do mesmo.

Em algumas modalidades, a composição de ácido cólico de alta pureza compreende o Composto 35, ou um sal do mesmo, em uma quantidade de menos do que 5% (por exemplo, menor que 5%, menos do que 4%, menos do que 3%, menos do que 2%, menos do que 1%, menos do que 0,5%, menos do que 0,2%, menos do que 0,1%), mais preferencialmente, menos do que 2%, ou menos do que 1% (por exemplo, menor que 0,5%, menos do que 0,2%, menos do que 0,1%), em peso e/ou por área de HPLC do ácido cólico e sal do mesmo.

Em algumas modalidades, a composição de ácido cólico de alta pureza compreende ácido cólico ou sal do mesmo com uma pureza de pelo menos 95% (por exemplo, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, ou pelo menos 99%). Em algumas modalidades, a composição de ácido cólico de alta pureza compreende ácido cólico ou sal do mesmo com uma pureza de pelo menos 99% em peso e/ou área de HPLC, por exemplo, 99,2%, 99,5%, 99,9%, ou mais do que 99,9% em peso, por área de HPLC ou ambos.

[00156] Os níveis dos compostos 32 a 35 em uma composição de ácido cólico de alta pureza no presente documento podem ser controlados. Por exemplo, quando necessário, purificação adicional de uma composição de ácido cólico no presente documento pode ser realizada para reduzir o nível de (ou mesmo eliminar) um ou mais dos Compostos 32-35. Por exemplo, conforme mostrado na Figura 2, essas impurezas podem ser prontamente separada por HPLC, que tem separação de linha de base na Figura 2. Consultar também o Exemplo 6, em que cada um dos Compostos 32 a 35 foram isolados por HPLC de fase reversa e caracterizados e identificados. Embora tipicamente não desejado, o nível de um ou mais dos Compostos 32-35 também pode ser aumentado pela adição do respectivos Compostos 32 a 35 substancialmente puros (por exemplo, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, ou pelo menos 98% puro em peso) à composição de ácido cólico de alta pureza. Os compostos 32-35 são, por si só também úteis, por exemplo, os mesmos podem ser úteis em controle de qualidade para fabricação de ácido cólico, ao identificar fontes de ácido cólico, ou identificar vias sintéticas potenciais a tal ácido cólico.

[00157] A composição farmacêutica ou cosmética que compreende ácido cólico ou um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável do mesmo pode ser formulada de várias formas com excipiente (ou excipientes) adequados. Excipientes adequados pode ser qualquer excipiente sólido, líquido, semissólido ou, no caso de uma composição de aerossol, excipiente gasoso que é geralmente disponível a um elemento versado na técnica. Sólidos excipientes incluem amido, celulose, talco, glicose, lactose, sacarose, gelatina, malte, arroz, farinha, giz, gel de sílica, estearato de magnésio,

estearato de sódio, monoestearato de glicerol, cloreto de sódio, leite desnatado seco e similares. Exemplos de excipientes líquidos e semissólidos podem incluir glicerol, propileno glicol, água, etanol e vários óleos, incluindo aqueles de petróleo, origem vegetal ou sintética, por exemplo, óleo de amendoim, óleo de soja, óleo mineral, óleo de sésamo, etc. Exemplos de carreadores líquidos, particularmente para soluções injetáveis, incluem água, salina, dextrose aquosa, e glicóis.

[00158] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica ou cosmética é preferencialmente uma solução aquosa, por exemplo, adequada para injeção subcutânea. Em algumas modalidades, a solução aquosa compreende: (i) ácido cólico de alta pureza, ácido quenodesoxicólico, um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos, ou uma combinação dos mesmos; por exemplo, uma composição de ácido cólico de alta pureza descrita no presente documento; e (ii) um excipiente farmacêutico, veterinário ou cosmético. Em algumas modalidades, a solução pode compreender adicionalmente um segundo agente terapêutico selecionado dentre o grupo que consiste em: agentes antimicrobianos, vasoconstritores, agentes antitrombóticos, agentes anticoagulação, suds depressivos, agentes inflamatórios, analgésicos, agentes de dispersão, agentes de antidispersão, acentuadores de penetração, esteroides, tranquilizantes, relaxantes musculares, e agentes antidiarreia. Em algumas modalidades, uma solução é em um recipiente que contém até 500 ml de solução. Tal recipiente pode ser uma seringa ou recipiente carregável em seringa.

[00159] Métodos exemplificadores não limitadores para formar o ácido cólico ou sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos incluem aqueles descritos no documento nº WO 2015/198150, intitulado “Methods and

Compositions of Bile Acids and Salts for Reduction of Fat”, cujo conteúdo é incorporado a este documento a título de referência em sua totalidade.

MÉTODO DE USO

[00160] Ácido Cólico, ácido desoxicólico, e ácido quenodesoxicólico são conhecidos por ter usos médicos e/ou cosméticos. Por exemplo, o documento nº WO 2015/198150 descreve o uso de colato e/ou quenodeoxicolato para reduzir acúmulos de gordura subcutânea em um mamífero por administração local a um local alvo. O documento nº WO 2015/198150 também descreve que composições de colato e/ou quenodeoxicolato podem ser usadas para dissolver lipomas, gordura, mesoterapia, separar tecido, redução de tumor, redução de câncer, tratamento de câncer, e qualquer outra situação clínica em que pode ser desejado usar, soltar, remover, auxiliar o consumo corporal ou resolução de cera, lipídios, proteínas ou carboidratos de uma parte ou região do corpo. Por exemplo, no tratamento de lipomas, as composições de colato e/ou quenodeoxicolato podem ser injetadas de forma subcutânea em contato com os lipomas para lisar os lipomas. Métodos de uso de ácido desoxicólico são descritos, por exemplo, no Documento de Patente nº U.S. 7,622,130, e Publicação de Pedido nº U.S. 2005-0267080 Al e 2006-0127468 Al, etc.

[00161] O CA, DCA, CDCA, e seus ésteres e sais descritos no presente documento também podem ser usados para qualquer dos usos médicos e/ou cosméticos conhecidos. Em algumas modalidades, a presente revelação também fornece um método para remoção não cirúrgica de um depósito de gordura localizada em um indivíduo. Em algumas modalidades, o método compreende administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de qualquer uma das composições farmacêuticas ou cosméticas descritas acima no presente documento, por exemplo, uma composição farmacêutica ou cosmética que compreende um quantidade eficaz de lise de gordura de alta pureza (por exemplo, uma pureza de pelo menos 98%, pelo menos 99%, pelo menos 99,5%, ou pelo menos 99,9% em peso) ácido cólico, ácido quenodesoxicólico, um sal farmacêutica ou cosmeticamente aceitável dos mesmos, ou uma combinação dos mesmos, por exemplo, uma composição de ácido cólico de alta pureza descrita no presente documento, e um excipiente farmacêutica ou cosmeticamente aceitável.

EXEMPLOS

[00162] Os vários materiais de partida, intermediários, e compostos das modalidades preferenciais podem ser isolados e purificados onde for apropriado com uso de técnicas convencionais, tais como precipitação, filtração, cristalização, evaporação, destilação e cromatografia. A caracterização desses compostos pode ser realizada com uso de métodos convencionais, tais como por ponto de fusão, espectro de massa, ressonância magnética nuclear, e várias outras análises espectroscópicas. Modalidades exemplificativas de etapas para realizar a síntese de produtos descritos no presente documento são descritos em mais detalhes infra. A Tabela 1 descreve abreviações usadas para expressar vários compostos/porções químicas/aparelho/procedimento/propriedade nos esquemas de reação exemplificadores e rotas sintéticas descritas nos exemplos a seguir e por todo o relatório descritivo. TABELA 1. LISTA DE ABREVIAÇÕES Ac Acetila Ac-DHEA Acetil-dehidroepiandrosterona CA Ácido cólico CDCA Ácido quenodesoxicólico Cu(OTf)2 Triflato de cobre

DCA Ácido desoxicólico DCM Diclorometano Dicloro-5,6-diciano-1,4-

DDQ benzoquinona DHEA Dehidroepiandrosterona DMAP 4-dimetilaminopiridina DMF N,N-dimetilformamida DMSO Sulfoxido de dimetila Ácido

EDTA etilenodiaminatetracético Et Etila Et3N Trietilamina EtOAc/EA Acetato de etila EtOH Etanol Eq/equiv Equivalente g(s) grama(s) h/hr(s) hora(s) Cromatografia Líquida de alta

HPLC pressão Ressonância magnética nuclear RMN de 1H de Próton mCPBA/MCPBA Ácido 3-Cloroperoxibenzoico Me Metila MeOH Metanol ml Milímetro(s) mg Milligrama(s)

mol mole(s) mmol milimole(s) min(s) minuto(s) NaH Hidreto de sódio NCS N-clorosuccinimida NBS N-bromosuccinimida PE Éter de petróleo PTSA/p-TsOH Ácido Para-toluenosulfônico Py Piridina Cromatografia de camada fina pre-TLC/prep-TLC preparativa rt Temperatura ambiente TEA Trietilamina (2,2,6,6-tetrametilpiperidin-

TEMPO 1-il)oxidanila THF tetrahidrofurano TLC Cromatografia de camada fina μL/uL microlitro μmol/umol micromol(s) EXEMPLO 1 SÍNTESE DE ÁCIDO CÓLICO DE DHEA: ROTA 1

[00163] ETAPA 1

[00164] A um frasco, foi adicionada DHEA (50,00 g, 173,36 mmol, 1,00 eq) e DCM (1,00 L) a 15 °C. Então, o mesmo foi resfriado a 0 °C, TEMPO (2,73 g, 17,34 mmol, 0,10 eq) foi adicionado, e DDQ (86,58 g, 381,39 mmol, e 2,20 eq) foi adicionada em porções a 0 °C. A mistura de reação foi aquecida a 25 °C e agitada a 25 °C por 48 hrs, TLC mostrou que um novo ponto principal foi formado. A reação foi filtrada, e o filtrado foi lavado com Na2SO3 saturado (100 ml*2) e salmoura (200 ml*2). A fase orgânica combinada foi seca com Na2SO4 anidro e concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (PE/EA=50/1 a 10/1) para gerar o Composto 1 (39,0 g, 135,35 mmol, 78,08% de rendimento) como sólido branco. 1H RMN, (400 MHz, CDCl3); δ = 6,21 (s, 2H), 5,78 - 5,71 (m, 1H), 2,66 - 2,55 (m, 1H), 2,53 - 2,46 (m, 1H), 2,46 - 2,35 (m, 2H), 2,22 - 2,13 (m, 2H), 2,08 - 2,01 (m, 1H), 1,92 (td, J=3,1, 13,0 Hz, 1H), 1,80 - 1,69 (m, 3H), 1,56 - 1,50 (m, 1H), 1,48 - 1,42 (m, 1H), 1,39 - 1,32 (m, 1H), 1,32 - 1,24 (m, 1H), 1,16 (s, 3H), 0,99 (s, 3H).

[00165] Etapa 2

[00166] A uma solução de composto 1(39.00 g, 137.14 mmol, 1.00 eq) em DCM (400,00 ml) foi adicionado em gotas m- CPBA (61,25 g, 301,71 mmol, 87% de pureza, 2,20 eq) que se dissolveu em DCM (50,00 ml) à reação em 5 °C. A solução resultante foi agitada a 5 °C por 24h, TLC mostrou que o material de partida foi consumido completamente, e um novo ponto principal foi formado. Então, a reação foi filtrada e o filtrado foi lavado com solução Na2SO3 saturada (200 ml) a 25 °C por 0,5 h. A fase orgânica foi separada e concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (PE/EA=20/1 a 5/1) para gerar o Composto 2 (16,12 g, 51,79 mmol, 37,76% de rendimento) como sólido branco. 1H RMN, (400 MHz, CDCl3): δ = 6,16 (s, 1H), 3,55 (d, J=3,8 Hz, 1H), 3,48 (d, J=3,6 Hz, 1H), 2,63 - 2,50 (m, 3H), 2,30 - 2,22 (m, 2H), 2,21 - 2,14 (m, 1H), 1,98 (ddd, J=2,3, 5,3, 13,2 Hz, 2H), 1,91 - 1,85 (m, 2H), 1,80 - 1,72 (m, 4H), 1,43 - 1,33 (m, 3H), 1,30 - 1,25 (m, 2H), 1,15 (s, 3H), 0,97 (s, 3H).

[00167] Etapa 3

[00168] A uma solução de composto 2 (16,12 g, 53,66 mmol, 1,00 eq) em Py (160,00 ml) foi adicionado Pd/C (10%,

1.70 g) sob proteção de N2 a 25 °C. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 diversas vezes. A reação foi agitada (0,34 MPa (50 psi)) a 25 °C por 12 horas sob atmosfera de H2, TLC mostrou que o material de partida foi consumido completamente e um novo ponto principal foi formado. A mistura de reação foi filtrada com celite, o filtrado foi lavado com HCl a 5% (100 ml) e extraído com EA (150 ml). A fase orgânica foi separada e concentrada em vácuo para gerar 16,34 g de Composto Bruto 3 como sólido amarelo claro.

[00169] Etapa 4

[00170] A uma solução de composto 3 (16,34 g, 53,68 mmol, 1,00 eq) em THF (150,00 ml) foi adicionado em gotas LiAlH(t-BuO)3 (16,99 g, 67,10 mmol, 18,88 ml, 1,25 eq) que foi dissolvido em THF (30,00 ml) a 5 °C, A solução resultante foi agitada a 5 °C por 0,5 hr. TLC mostrou que um ponto principal foi formado. A mistura de reação foi arrefecida bruscamente em HCl a 5% (50 ml), extraído com EA (50 ml*2), a fase orgânica foi separada e concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica (PE/EA=5:1 a 2:1) para gerar o Composto 4 (6.20 g, 35.62% de rendimento) como óleo incolor.

[00171] Etapa 5

[00172] A uma mistura de composto 4 (6,00 g, 19,58 mmol, 1,00 eq) e 2-piridilmetanamina (10,59 g, 97,90 mmol, 9,99 ml, 5,00 eq) em tolueno (50,00 ml) foi adicionado PTSA (101,15 mg, 0,58 mmol, 0,03 eq) a 25 °C, a mistura foi agitada a 120 °C por 2 hrs com aparelho Dean-Stark. Então a mistura de reação foi diluída com EA (100 ml), lavada com NaHCO3 saturado (20 ml) e água (50 ml). A fase orgânica foi separada e concentrada em vácuo. O resíduo foi triturado por EA (10 ml) a 25 °C para gerar o Composto 5 (4,12 g, 10,13 mmol, 51,73% de rendimento, e 96,5% de pureza) como sólido branco. 1H RMN, (400 MHz, CDCl3): δ = 8,45 (d l, J=4,5 Hz, 1H), 7,63 - 7,56 (m, 1H),

7,34 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,10 - 7,04 (m, 1H), 4,61 - 4,47 (m, 2H), 3,91 (s l, 1H), 3,47 - 3,36 (m, 2H), 2,46 - 2,36 (m, 1H), 2,31 - 2,20 (m, 1H), 2,18 - 2,07 (m, 2H), 2,01 - 1,92 (m, 2H), 1,91 - 1,78 (m, 3H), 1,68 - 1,62 (m, 2H), 1,48 - 1,39 (m, 2H), 1,38 - 1,25 (m, 5H), 1,20 - 1,11 (m, 2H), 0,98 - 0,93 (m, 1H), 0,88 (s, 3H), 0,83 (s, 3H).

[00173] Etapa 6

[00174] A uma solução de composto 5 (2,00 g, 5,04 mmol, 1,00 eq) em acetona (10,00 ml) e MeOH (10,00 ml), foi adicionado ascorbato de sódio (2,00 g, 10,09 mmol, 2,0 eq) e Cu(MeCN)4PF6 (2,63 g, 7,06 mmol, 1,40 eq) em sequência a 25 °C. Depois de agitado a 25 °C por 5 mins, oxigênio (0,10 MPa (15 psi)) foi borbulhado através da mistura de reação por 10 mins. Então a reação foi aquecida para 50 °C e agitada a 50 °C por 2 hrs sob atmosfera de O2. TLC mostrou que um novo ponto principal foi formado. Depois de resfriado a 25 °C, EA (100 ml) e EDTA-Na4 saturado (50 ml) foi adicionado, a mistura foi agitada a 25 °C por 30 mins. A fase orgânica foi separada e concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (PE/EA=3/1 a 1/2) para gerar o Composto 6 (0,25 g, 0,75 mmol, 14,95% de rendimento) como sólido amarelo claro.

[00175] Etapa 7

[00176] EtPPh3Br (2,41 g, 6,50 mmol, 5,00 eq) em um frasco foi seco sob alto vácuo por 1 hr a 70 °C. THF seco (3,00 ml) foi adicionado, seguido pela adição de t-BuOK (0,73 g, 6,50 mmol, 5,00 eq) sob N2. A mistura de adição foi ainda agitada a 70 °C por 0,5 hr sob N2. A solução de Composto 6 (0,42 g, 1,30 mmol, 1,00 eq) em THF seco (2,00 ml) foi adicionado à reação em 70 °C, a reação foi agitada a 70 °C por mais 2 hrs. TLC mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e um novo ponto principal foi formado. Após resfriamento à temperatura ambiente, a solução foi diluída por EA (40 ml), arrefecida bruscamente por solução de NaCl saturada (10 ml). A solução aquosa foi extraída com EA (20 ml), seca em Na2SO4, concentrado em vácuo para gerar 0,48 g como óleo amarelo claro.

[00177] O óleo amarelo obtido (0,48 g, 1,45 mmol, 1,00 eq) foi dissolvido em DCM (5,00 ml) a 25 °C, seguido pela adição de Ac2O (621,97 mg, 6,05 mmol, 570,62 uL, 4,2 eq), Et3N (0,88 g, 8,70 mmol, 1,21 ml, 6,00 eq) e DMAP (35,44 mg, 290,11 umol, 0,20 eq) a 25 °C. A reação foi agitada a 25 °C por 7 hrs. TLC mostrou que o material de partida foi consumido completamente e um novo ponto principal foi formado. A reação foi diluída com EA (50 ml), lavada com H2O (10 ml), seca em Na2SO4 e filtrada, a camada orgânica foi concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (PE/EA=50/1 a 20/1) para gerar o Composto 7(0,18 g, 0,38 mmol, 26,28% de rendimento,) como óleo incolor.

[00178] Etapa 8

[00179] A um frasco de 50 ml, foi adicionado o composto 7 (50,00 mg, 108,55 umol, 1.00 eq) e DCM (5,00 ml). A reação foi resfriada para 0 °C; paraformaldeído (48,89 mg, 542,77 umol, 5,00 eq) foi adicionada à reação em 0 °C, seguido pela adição de BF3.Et2O (1,54 mg, 10,86 umol, 1,34 uL, 0,10 eq) à reação em 0 °C. A reação foi aquecida a 15 °C, e agitada a 15 °C por 2 hrs. TLC mostrou que um novo ponto principal foi formado. A reação foi diluída com DCM (50 ml), e arrefecida bruscamente por água (30 ml). A camada orgânica foi concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por pre-TLC (PE/EA=1/1) para gerar resíduo de óleo incolor (40 mg).

[00180] A um tubo de 10 ml, foi adicionado (COCl)2 (61,84 mg, 487,18 umol, 42,65 uL, 2.40 eq) e DCM (6,00 ml). A mistura foi resfriada a -78 °C. DMSO (63,44 mg, 811,96 umol, 63,44 uL, 4,00 eq) foi adicionada em gotas à mistura de reação a -78 °C. Após a adição, a reação foi agitada a -78 °C por 0,5 hr. O resíduo de óleo incolor que foi preparado anteriormente (dois lotes, 100 mg) foi adicionado à reação em -78 °C. O mesmo foi agitado a -78 por 0,5 hr. TEA (205,41 mg, 2,03 mmol, 281,38 uL, 10,00 eq) foi adicionada em gotas a -78 °C. Após a adição, a reação foi aquecida a 15 °C, e o mesmo foi agitado a 15 °C por 0,5 hr. TLC mostrou que um novo ponto principal foi formado. A reação foi diluído com DCM (50 ml), e arrefecido bruscamente por água (30 ml). A camada orgânica separada foi concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por pre-TLC para gerar o composto 8 (50 mg, 50% de rendimento).

[00181] Etapa 9

[00182] A um tubo de 10 ml, foi adicionado NaH (32,75 mg, 818,64 umol, 60% de pureza, 4,00 eq) e THF (2,00 ml), seguido pela adição de 2-dietóxifosforilacetato de etila (229,41 mg, 1,02 mmol, 203,02 uL, 5,00 eq) ao frasco a 15 °C. A mistura resultante foi agitada a 15 °C por 10 mins. O Composto 8 (100,00 mg, 204,66 umol, 1,00 eq) foi adicionado ao frasco a 15 °C, e o mesmo foi agitado a 15 °C por 0,5 hr, TLC mostrou que um novo ponto principal foi formado. A reação foi arrefecida bruscamente por água (5 ml), e extraída com DCM (2*30 ml). A camada orgânica foi concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por pre-TLC para gerar o composto 9 (100 mg, 87,46% de rendimento) como óleo incolor. Massa (m/z): 581,4 (M+ + 23).

[00183] Etapa 10

[00184] A um tubo de pressão de 35 ml, foi adicionado o composto 9 (100,00 mg, 178,99 umol, 1,00 eq), EtOH (4,00 ml) e Pd/C (10,00 mg) a 25 °C. A mistura foi purgada com gás H2 (0,34 MPa (50 psi)) e agitada a 25 °C por 4 hrs. TLC mostrou que um novo ponto principal foi formado. A mistura resultante foi filtrada, o filtrado foi concentrado em vácuo para gerar o composto 10 (60 mg, bruto) como óleo incolor. Massa (m/z): 585,4 (M+ + 23).

[00185] Etapa 11

[00186] A uma solução de composto 10 (60,00 mg, 106,62 umol, 1,00 eq) em MeOH (4,00 ml), foi adicionado NaOH (51,18 mg, 1,28 mmol, 12,00 eq) a 25 °C. Depois disso, a reação foi aquecida para 60 °C, e a mesma foi agitada a 60 °C por 2 hrs. TLC mostrou que um novo ponto principal foi formado. A reação foi resfriada para rt, concentrada em vácuo para remover solvente, o resíduo resultante foi dissolvido em água (5 ml), acidificado por HCl para PH=3. A camada aquosa resultante foi extraída com EA (3*15 ml). A camada orgânica foi concentrada em vácuo para gerar o composto 10 (70 mg, bruto) como sólido branco. Massa (m/z): 431,1 (M+ + 23), 839,1(2M+ + 23).

[00187] Etapa 12

[00188] A uma solução de composto 11 (70 mg, 160,32 umol, 1,00 eq) em acetona (3 ml), foi adicionado reagente de Jones (95,27 mg, 480,96 umol, 3 eq) em gotas a 20 °C. Após a adição, a reação foi agitada a 20 °C por 10 mins, TLC mostrou que um novo ponto principal foi formado. A reação foi arrefecido bruscamente por isopropanol (0,5 ml) e diluído com água (5 ml). A mistura aquosa resultante foi extraída com EA (3*15 ml). A camada orgânica foi concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por pre-TLC para gerar o composto 12 (20 mg, 48 umol, 29,9% de rendimento) como sólido branco. Massa

(m/z): 403,3 (M+ + 1).

[00189] ETAPA 13

[00190] A uma solução de composto 12 (10,00 mg, 24,84 umol, 1 eq) em THF (5 ml), foi adicionado LiAlH(t-BuO)3 (94,38 mg, 372,65 umol, 104,40 uL, 15 eq) a 20 °C. A mesma foi agitada a 20 °C por 1 hr e a 40 °C por 16 hrs, TLC mostrou que um novo ponto principal foi formado. A reação foi diluída por EA (50 ml), arrefecida bruscamente por HCl (10 ml, 1M). A camada orgânica separada foi concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por pre-TLC para gerar CA (3 mg, 29,6% de rendimento) como sólido branco. 1H RMN, (400 MHz, DMSO-d6): δ= 11,91 (s l, 1H), 4,30 (d, J=4,39, 1H), 4,10 (d, J=3,51, 1H), 3,99 (d, J=3,26, 1H), 3,79 (d l, J=2,64, 1H), 3,62 (s l, 1H), 3,23-3,14 (m, 1H), 2,27-2,06 (m, 5H), 1,82-1,63 (m, 6H), 1,41- 1,13 (m, 11H), 1,01-0,96 (m, 1H), 0,92 (d, J=6,4, 3H), 0,88- 0,84 (m, 1H), 0,81 (s, 3H), 0,59 (s, 3H). 13C RMN, (100 MHz, DMSO-d6): δ= 175,45, 71,45, 70,90, 66,71, 46,56, 46,22, 41,99, 41,84, 35,78, 35,52, 35,34, 34,86, 31,31, 31,27, 30,88, 29,01, 27,75, 26,68, 23,27, 23,10, 17,41, 12,81. EXEMPLO 2 SÍNTESE DE ÁCIDO CÓLICO DE DHEA: ROTA 2

[00161] ETAPA 1

[00191] A uma mistura de DHEA (20,00 g, 69,34 mmol, 1,00 eq) e 2-piridilmetanamina (37,49 g, 346,70 mmol, 35,37 ml, 5,00 eq) em tolueno (250,00 ml), foi adicionado PTSA (358,23 mg, 2,08 mmol, 0,03 eq) a 25 °C, a mistura foi agitada a 120 °C por 2 hrs com aparelho Dean-Stark. Então a mistura de reação foi diluída com EA (400 ml), lavada com NaHCO3 saturado (100 ml*2) e água (100 ml*2). A camada orgânica foi concentrada. O resíduo foi triturado por EA (30 ml) a 25 °C para gerar o Composto 13 (23,40 g, 57,80 mmol, 83,36% de rendimento, 93,5% de pureza) como sólido branco. 1H RMN, (400

MHz, CDCl3): δ = 8,54 (d, J=4,1 Hz, 1H), 7,67 (dt, J=1,7, 7,7 Hz, 1H), 7,45 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,19 - 7,11 (m, 1H), 5,40 (d l, J=4,9 Hz, 1H), 4,70 - 4,53 (m, 2H), 3,63 - 3,48 (m, 1H), 2,54 - 2,43 (m, 1H), 2,38 - 2,25 (m, 3H), 2,15 - 2,03 (m, 2H), 1,96 - 1,85 (m, 3H), 1,75 - 1,70 (m, 1H), 1,64 - 1,36 (m, 6H), 1,26 - 1,10 (m, 2H), 1,07 (s, 3H), 1,03 (d l, J=4,5 Hz, 1H), 0,94 (s, 3H).

[00192] Etapa 2

[00193] A uma solução de composto 13 (6,00 g, 15,85 mmol, 1,00 eq) em acetona (60,00 ml) e MeOH (60,00 ml), foi adicionado ascorbato de sódio (6,28 g, 31,70 mmol, 2,00 eq) e Cu(MeCN)4PF6 (8,27 g, 22,19 mmol, 1,40 eq) em sequência a 25 °C. Depois de agitado a 25 °C por 5 mins, oxigênio (0,10 MPa (15 psi)) foi borbulhado através da mistura de reação por 10 mins. Então a reação foi aquecida para 50 °C e agitada a 50 °C por 2 hrs sob atmosfera de O2. Depois de resfriado a 25 °C, EA (300 ml) e EDTA-Na4 saturado (100 ml) foi adicionado, a mistura foi agitada a 25 °C por 30 mins. A fase orgânica foi separada e concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (PE/EA=15/1 a 5/1) para gerar o Composto 14 (2,40 g, 7,88 mmol, 49,74% de rendimento) como sólido branco. 1H RMN, (400 MHz, CDCl3): δ= 5,43 - 5,38 (m, 1H), 3,88 - 3,79 (m, 1H), 3,59 - 3,51 (m, 1H), 3,09 (s, 1H), 2,51 (dd, J=8,4, 19,4 Hz, 1H), 2,40 - 2,33 (m, 1H), 2,31 - 2,22 (m, 1H), 2,20 - 2,09 (m, 2H), 2,08 - 1,97 (m, 1H), 1,93 - 1,86 (m, 2H), 1,76 - 1,63 (m, 3H), 1,56 - 1,45 (m, 3H), 1,33 - 1,24 (m, 1H), 1,20 - 1,09 (m, 2H), 1,07 (s, 3H), 0,99 (s,

3H).

[00194] Etapa 3

[00195] EtPPh3Br (12,18 g, 32,80 mmol, 10,00 eq) em um frasco foi seco sob alto vácuo por 1 hr a 70 °C. THF seco (100,00 ml) foi adicionado, seguido pela adição de t-BuOK (3,68 g, 32,80 mmol, 10,00 eq) sob N2. A mistura de adição foi ainda agitada a 70 °C por 0,5 hr sob N2. A solução de Composto 14 (1,00 g, 3,28 mmol, 1,00 eq) em THF seco (5,00 ml) foi adicionada à reação em 70 °C, a reação foi agitada a 70 °C por mais 2 hrs. TLC mostrou que todo o material de partida foi consumido e um novo ponto principal foi formado. Após resfriamento à temperatura ambiente, a solução foi diluída por EA (100 ml), arrefecida bruscamente por solução de NH4Cl saturada (30 ml). A solução aquosa foi extraída com EA (50 ml*2), as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (40 ml), seca em Na2SO4 e filtrada, concentrada em vácuo para gerar 1.04 g de óleo amarelo claro.

[00196] O óleo amarelo claro obtido (1,04 g, 3,29 mmol, 1,00 eq) foi dissolvido em DCM (20,00 ml) a 25 °C, seguido pela adição de Ac2O (752,36 mg, 7,37 mmol, 690,24 uL, 2,24 eq), Et3N (2,00 g, 19,74 mmol, 2,74 ml, 6,00 eq) e DMAP (80,39 mg, 658,00 umol, 0,20 eq) a 25 °C. A reação foi agitada a 25 °C por 3 hrs. TLC mostrou que o material de partida foi consumido completamente e um novo ponto principal foi formado. A reação foi diluída com EA (100 ml), lavada com H2O (50 ml), seca em Na2SO4 e filtrada, a camada orgânica foi concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado com cromatografia de coluna

(PE/EA=30/1 a 20/1) para gerar o Composto 15 (1,14 g, 2,62 mmol, 79,59% de rendimento, 92% de pureza) como óleo esbranquiçado. 1H RMN, (400 MHz, CDCl3): δ= 5,41 (d, J=5,0 Hz, 1H), 5,31 - 5,19 (m, 1H), 4,91 (dd, J=5,0, 10,9 Hz, 1H), 4,68 - 4,57 (m, 1H), 2,46 - 2,19 (m, 4H), 2,12 - 2,08 (m, 3H), 2,07 - 2,04 (m, 3H), 1,98 (td, J=4,9, 13,0 Hz, 1H), 1,91 - 1,81 (m, 2H), 1,72 - 1,65 (m, 1H), 1,65 - 1,61 (m, 3H), 1,60 - 1,41 (m, 5H), 1,37 - 1,12 (m, 4H), 1,05 (s, 3H), 1,02 (s, 3H). Massa (m/z): 423,2 (M+ + 23).

[00197] Etapa 4

[00198] A uma solução de composto 15 (1,12 g, 2,80 mmol, 1,00 eq) em DCM (100,00 ml), foi adicionado paraformaldeído (2,7 g, 29,96 mmol, 10,7 eq) em uma porção a 0 °C, seguido pela adição de BF3.Et2O (39,74 mg, 280,00 umol, 34,56 uL, 0,10 eq) a 0 °C. A mistura foi aquecida para 25 °C e agitada a 25 °C por 2 hrs. TLC mostrou que um novo ponto foi formado. A mistura de reação foi arrefecida bruscamente por H2O (15 ml), extraída com DCM (10 ml*3), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica (PE:EA=30:1 a 15:1) para gerar 860 mg de sólido branco.

[00199] A um frasco, foi adicionado cloreto de oxalila (278,87 mg, 2,20 mmol, 192,32 uL, 1,10 eq) e DCM (20,00 ml) a 15 °C. A reação foi resfriada a -78 °C e a mesma foi agitada a -78 °C por 15 mins. Então, DMSO (312.10 mg, 3,99 mmol, 312,10 uL, 2,00 eq) foi adicionada em gotas à reação em

-78 °C. A mistura foi agitada a -78 °C por 15 mins. A solução de sólido branco anteriormente obtido (860,00 mg, 2,00 mmol, 1,00 eq) em DCM (3,00 ml) foi adicionado no reator a -78 °C. A mistura foi agitada a -78 °C por mais 15 mins. Então TEA (1,01 g, 9,99 mmol, 1,38 ml, 5.00 eq) foi adicionada em gotas a -78 °C. A mistura resultante foi agitada a -78 °C por 15 mins e a 15 °C por 30 mins, TLC mostrou que um novo ponto principal foi formado, a reação foi arrefecida bruscamente com H2O (5 ml), extraída com DCM(15 ml). A fase orgânica foi lavada com salmoura (50 ml*2), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada em vácuo, que foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, PE:EA=60:1 a 30:1) para gerar o Composto 16 (510 mg, 59,5% de rendimento) como um sólido branco.

[00200] Etapa 5

[00201] A uma solução de NaH (476,00 mg, 11.90 mmol, 60% de pureza, 10,00 eq) em THF (10,00 ml) foi adicionado 2-dietóxifosforilacetato de etila (2,67 g, 11,90 mmol, 2,36 ml, 10.00 eq) a 25 °C, a mistura de reação foi agitada a 25 °C por 30 mins. Uma solução de Composto 16 (510,00 mg, 1,19 mmol, 1,00 eq) em THF (2,00 ml) foi adicionada à reação a 25 °C e a mesma foi agitada a 25 °C por 2 hrs. TLC mostrou que o material de partida foi todo consumido. NH4Cl saturado (15 ml) foi adicionado no reator para arrefecer bruscamente a reação. A mistura foi extraída com EA (50 ml*3), a camada orgânica foi lavada com salmoura (100 ml*2), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (PE:EA = 50/1 a 30:1) para gerar o composto 17 como óleo incolor (720,00 mg, 929,00 umol, 78,07% de rendimento, 64,34% de pureza por 1H RMN). 1H RMN, (400 MHz, CDCl3): δ = 7,01 (dd, J=6,9, 15,7 Hz, 1H), 5,80 (dd, J=1,3, 15,7 Hz, 1H), 5,45 (s l, 1H), 5,42 (d l, J=5,0 Hz, 1H), 4,93 (dd, J=5,1, 10,7 Hz, 1H), 4,67 - 4,58 (m, 1H), 4,21 (q, J=7,2, 14,7 Hz, 2H), 3,12 (q, J=6,7 Hz, 1H), 2,42 - 2,27 (m, 2H), 2,19 - 2,12 (m, 1H), 2,10 (s, 3H), 2,05 (s, 3H), 2,04 - 1,77 (m, 5H), 1,69 - 1,64 (m, 1H), 1,60 - 1,52 (m, 1H), 1,51 - 1,39 (m, 2H), 1,37 (t, J=7,1,3H), 1,29 - 1,27 (m, 1H), 1,26 - 1,17 (m, 2H), 1,14 (d, J=6,8 Hz, 3H), 1,07 (s, 3H), 0,95 (s, 3H). Massa (m/z): 521,2 (M+ + 23).

[00202] Etapa 6

[00203] A uma solução de composto 17 (660,00 g, 1,32 mmol, 1,00 eq) em MeOH (150,00 ml) foi adicionado Pd/C (10%, 70 mg) a 15 °C. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 diversas vezes. A reação foi aquecida para 25 °C e agitada a 25 °C por 12 horas sob H2(0,34 MPa (50 psi)). LCMS mostrou que o material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado para gerar 450,00 mg de sólido branco.

[00204] A uma mistura de sólido branco obtido (350,00 mg, 693,48 umol, 1,00 eq) em EtOH (10,00 ml) foi adicionado NaOH (332,87 mg, 8,32 mmol, 12,00 eq) em uma porção a 15 °C sob N2. A mistura foi aquecida para 30 °C e agitada a 30 °C por 2 hrs. LCMS mostrou que o material de partida foi totalmente consumido, mas uma massa-alvo foi encontrada. Outro lote de NaOH (221,92 mg, 5,55 mmol, 8,00 eq) foi adicionado a 15 °C, a mistura foi mantida agitada a 30 °C por mais 4 horas. LCMS mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e massa desejada foi encontrada. A mistura foi concentrada em pressão reduzida para remover solvente. HCl aquoso (1N, 10 ml) foi adicionado ao resíduo para ajustar para o PH=4, e então extraído com EA (50 ml*3). A camada orgânica foi lavada com salmoura (10 ml*2), seca com Na2SO4, anidro, filtrada e concentrada em vácuo para gerar sólido branco (260,00 mg, 662,30 umol, 95,50% de rendimento).

[00205] O sólido branco obtido (260,00 mg) foi dissolvido em EtOH (15,00 ml) a 15 °C, seguido pela adição de HCl (153,00 mg, 4.20 mmol, 150,00 uL, 6.34 eq) a 15 °C. A mistura de reação foi aquecida para 80 °C e agitada a 80 °C por 30 mins. TLC mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e dois novos pontos foram formados. A reação foi concentrada em vácuo, que foi purificada por cromatografia de coluna (SiO2, PE:EA=4:1 a 2:1) para gerar o composto 18 (176 mg) como sólido branco. 1H RMN, (400 MHz, CDCl3): δ= 4,14 (q, J=7,1 Hz, 2H), 3,66 - 3,54 (m, 1H), 3,41 (dd, J=4,7, 11,0 Hz, 1H), 2,44 - 2,33 (m, 1H), 2,31 - 2,18 (m, 1H), 1,99 - 1,89 (m, 1H), 1,88 - 1,79 (m, 2H), 1,76 - 1,67 (m, 4H), 1,64 - 1,59 (m, 2H), 1,54 - 1,42 (m, 4H), 1,33 - 1,30 (m, 3H), 1,30 - 1,27 (m, 5H), 1,26 - 1,16 (m, 3H), 1,15 - 1,09 (m, 1H), 1,03 (d, J=6,8 Hz, 3H), 0,98 - 0,86 (m, 2H), 0,83 (s, 3H), 0,74 (s, 3H). Massa (m/z): 443,3 (M+ + 23).

[00206] Etapa 7

[00207] O Composto 18 (50 mg, 118,87 umol, 1.0 eq)

foi dissolvido em acetona (2.50 ml) a 15 °C, e então reagente de Jones (150.00 uL) foi adicionado em gotas à solução até que uma cor amarela persistisse. A mistura foi agitada a 15 °C por mais 15 mins. TLC indicou que produto desejado foi formado. i- PrOH (10 ml) foi adicionado em gotas e agitado 10 mins para arrefecer bruscamente o reagente de Jones restante. Então, H2O (10 ml) foi adicionado à mistura de reação, e a mesma foi extraída com EA (50 ml*2). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (15 ml), seca com Na2SO4 anidro, filtrado e concentrado em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (PE/EA=50/1 a 10/1) para gerar o composto 19 (30,00 mg, 72,01 umol, 60,58% de rendimento) como sólido branco. = 4,05 (q, J=7,2 Hz, 2H), 2,55 (t, J=12,7 Hz, 1H), 2,36 - 2,23 (m, 3H), 2,22 - 2,10 (m, 3H), 2,10 - 2,03 (m, 1H), 2,00 - 1,85 (m, 2H), 1,85 - 1,63 (m, 5H), 1,50 - 1,42 (m, 1H), 1,38 - 1,25 (m, 7H), 1,21 - 1,16 (m, 4H), 1,15 - 1,09 (m, 1H), 1,03 (s, 3H), 0,99 (s, 3H), 0,92 - 0,84 (m, 1H), 0,79 (d, J=6,5 Hz, 3H). Massa (m/z): 417,3 (M+ + 1).

[00208] Etapa 8

[00209] A um frasco de 1.000 ml foi adicionado 19 (20,00 g, 48,01 mmol, 1,00 eq) e AcOH (300,00 ml). A reação foi resfriada a 0 °C, e então recém-preparada Br2 (7,67 g, 48,01 mmol, 2,47 ml, 1,00 eq) em AcOH (60,00 ml) foi adicionada à reação em gotas. Após a adição, a reação foi aquecida a 20 °C, e agitada a 20 °C por 0,5 hora. Então, a reação foi diluída com EA (200 ml), lavada com água (200 ml) e NaHCO3 saturado (3*200 ml). A camada orgânica foi concentrada em vácuo para gerar 20 g de resíduo de óleo bruto.

[00210] O resíduo de óleo (20.00 g) foi adicionado a um frasco de 1.000 ml, DMF (500,00 ml) foi adicionado ao frasco para preparar uma solução, seguido pela adição de Li2CO3 (12,61 g, 170,72 mmol, 4,23 eq) e LiBr (6,20 g, 71,44 mmol, 1,79 ml, 1,77 eq) à mistura de reação. Então a reação foi aquecida para 150 °C, e a mesma foi agitada a 150 °C por 2 hrs. Depois que TLC (PE/EA=2/1) mostrou que a reação foi completada, a reação foi concentrada em vácuo, diluída com EA (500 ml), lavada com água (500 ml), e a camada orgânica foi concentrada em vácuo para gerar resíduo de óleo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna para gerar o composto 20 (5,4 g, 32% de rendimento). 1H RMN, (400 MHz, MeOD): δ= 5,69 (s, 1H), 4,06 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,58 (t, 1H), 2,43-2,09 (m, 7H), 1,99-1,61 (m, 8H), 1,35-1,24 (m, 6H), 1,20 (s, 3H), 1,09 (t, J = 8,0 Hz, 3H), 1,02 (s, 3H), 1,06-0,93 (m, 1H), 0,80 (d, J = 6,4 Hz 3H). Massa (m/z): 415,1 (M+ + 1).

[00211] Etapa 9

[00212] A um frasco de 100 ml, foi adicionado composto 20 (1,00 g, 2,41 mmol, 1,00 eq), AcOH (10,00 ml) e tolueno (1,00 ml). 2,3,5,6-tetracloro-1,4-benzoquinona (889,62 mg, 3,62 mmol, 1,50 eq) foi adicionada à mistura de reação em rt. A reação foi aquecida para 120 °C, e a mesma foi agitada a 120 °C por 2 hrs. Depois que LCMS mostrou que a reação foi completada, a mesma foi diluída com EA (100 ml), lavada com água (100 ml) e NaHCO3 saturada (2*100 ml). A camada orgânica foi concentrada em vácuo para gerar resíduo de óleo amarelo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna para gerar o composto 21 (650 mg, 89% de pureza, 58% de rendimento) como sólido branco. 1H RMN, (400 MHz, CDCl3): δ= 6,20-6,12 (m, 2H), 5,74 (s, 1H), 5,41 (s, 1H), 4,16 (q, J=7,1, 2H), 2,73-1,32 (m, 19H), 1,28 (t, J=7,1, 3H), 1,22 (s, 3H), 1,15 (s, 3H), 0,90 (d, J=6,3, 3H). Massa (m/z): 413,1 (M+ + 1).

[00213] Etapa 10

[00214] A um frasco de 100 ml, foi adicionado o composto 21 (2,50 mg, 6,06 umol, 1,00 eq) e DCM (60,00 ml). A reação foi resfriada a 0 °C, m-CPBA (2,09 g, 8,48 mmol, 70% de pureza, 1,40 eq) foi adicionado ao frasco a 0 °C, e o mesmo foi agitado a 0 °C por 48 hrs. Depois que TLC (PE/EA=2/1) mostrou que a reação foi completada, a mesma foi diluída com DCM (100 ml), lavada com Na2SO3 saturado (2*60 ml), a camada orgânica foi concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (basificado por TEA) para gerar o composto 22 (1,0 g, 38% de rendimento) como sólido branco. 1H RMN, (400 MHz, CDCl3): δ= 6,08 (s, 1H), 4,06 (q, J=7,09, 2H), 3,43 (d, J=3,67, 1H), 3,36 (d, J=3,55, 1H), 2,53-1,25 (m, 19H), 1,19 (t, J=7,15, 3H), 1,11 (s, 3H), 1,03 (s, 3H), 0,81 (d, J=7,15, 3H). Massa (m/z): 429,2 (M+ + 1).

[00215] Etapa 11

[00216] A um tubo de pressão, foi adicionado o composto 22 (110,00 mg, 256,67 umol, 1.00 eq), Py (6,00 ml) e

Pd/C (50,00 mg, 256,67 umol, 1,00 eq). A reação foi purgada com gás H2 0,344 Mpa (50 psi) e agitada a 20 °C por 16 hrs. LCMS mostrou que a reação foi completada. A reação foi filtrada, o filtrado foi concentrado em vácuo para gerar o composto 23 (100 mg, bruto) como óleo amarelo. Massa (m/z): 433,3 (M+ + 1).

[00217] Etapa 12

O O O OH

H O LiAlH(t-OBu) 3 H O

H H H H H H O OH HO OH

H H 23 24

[00218] A um frasco de 35 ml foi adicionado o composto 23 (100 mg, bruto) e THF (10 ml). LiAlH(t-OBu)3 (117,09 mg, 462,33 umol, 130,10 uL, 2,00 eq) foi adicionado ao frasco a 20 °C, e o mesmo foi agitado a 20 °C por 5 horas. Após TLC (PE/EA=1/3) mostrou que a reação foi completada, a reação foi arrefecida bruscamente por NH4Cl saturado (20 ml), diluído com EA (100 ml), e lavado com água (50 ml). A camada orgânica foi concentrada em vácuo para gerar o composto 24 (100 mg, bruto) como óleo incolor. Massa (m/z): 459,3 (M+ + 23).

[00219] Etapa 13

[00220] A um tubo de 35 ml, foi adicionado o composto 24 (100 mg, bruto) e EtOH (2 ml), seguido pela adição de NaOH (36,64 mg, 916,12 umol, 4.00 eq) à reação em 30 °C. A mistura resultante foi agitada a 30 °C por 1 hora.

Após TLC (AcOH/EA=1/50) o produto desejado foi encontrado, a reação foi concentrada em vácuo para remover solvente, o resíduo foi diluído com água (5 ml), acidificado por conc. de HCl para pH=3, e então extraído com EA (3*20 ml). A camada orgânica foi concentrada em vácuo, o resíduo resultante foi purificado por pre-TLC (AcOH/EA=1/ 50) para gerar CA (15 mg) como sólido branco. 1H RMN, (400 MHz, CDCl3): δ= 11,94 (s l, 1H), 4,33 (d, J=4,27, 1H), 4,13 (d, J=3,51, 1H), 4,02 (d, J=3,39, 1H), 3,79 (d l, J=2,76, 1H), 3,62 (s l, 1H), 3,22-3,16 (m, 1H), 2,27- 2,02 (m, 5H), 1,78-1,44 (m, 6H), 1,47-1,13 (m, 11H), 1,01-0,96 (m, 1H), 0,93 (d, J=6,4, 3H), 0,88-0,84 (m, 1H), 0,81 (s, 3H), 0,59 (s, 3H). Massa (m/z): 817,6 (2M+ + 1). EXEMPLO 3 SÍNTESE DE ÁCIDO CÓLICO DE Ac-DHEA

[00221] Etapa 1

[00222] A um frasco, foi adicionada Ac-DHEA (50 g, 151,30 mmol, 1,0 eq) e tolueno (1 L), 2-piridilmetanamina (37,49 g, 346,72 mmol, 35,37 ml, 5,0 eq) foi adicionado à reação a 15 °C, seguido pela adição de PTSA (781,64 mg, 4,54 mmol, 0,03 eq) a 15 °C. A reação foi aquecida para 110 °C com aparelho Dean-Stark por 2 horas. A reação foi resfriada a 15

°C, EA (1 L) foi adicionada à reação. A mistura resultante foi lavada com NaHCO3 saturado (2*100 ml) e água (2*100 ml). A camada orgânica foi concentrada em vácuo. O resíduo foi recristalizado por EA (65 ml) para gerar o composto 25 (54,0 g, 84,86% de rendimento) como sólido amarelo claro.

[00223] Etapa 2

[00224] A um frasco de 100 ml, foi adicionado o composto 25 (10 g, 23,78 mmol, 1,00 eq) ascorbato de sódio (9,42 g, 47,55 mmol, 2,00 eq) e Cu(OTf)2 (19,78 g, 54,69 mmol,

2.30 eq) a 25 °C. Acetona (90 ml) e MeOH (90 ml) foi adicionada ao frasco para preparar uma solução. Depois de agitada a 25 °C por 5 mins, O2 (0,10 MPa (15 psi)) foi borbulhado através da mistura de reação por 5 mins. Então, a reação foi aquecida para 50 °C, e a mesma foi agitada a 50 °C por 1,5 hrs. TLC (PE/EA=2/1) mostrou que a maior parte do material de partida foi consumido, e um novo ponto principal foi encontrado. A reação foi resfriada para 25 °C. EA (100 ml) e EDTA-Na4 saturado (100 ml) foi adicionado à reação e agitada por 1 hora. A mistura resultante foi concentrada em vácuo para remover solvente orgânico. A camada aquosa foi extraída com EA (3*150 ml). A camada orgânica combinada concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por flash cromatografia de coluna (PE/EA=20/1 a 2/1) para gerar o composto 26 (6.2 g, 71.5% de rendimento) como sólido branco. 1H RMN, (400 MHz, CDCl3): δ= 5,43 (d, J=5,2, 1H), 4,66 - 4,59 (m, 1H), 3,87 - 3,79 (m, 1H), 3,08 (s, 1H), 2,50 (dd, J=8,8, 19,5 Hz, 1H), 2,46 - 2,37 (m, 2H), 2,15 - 2,05 (m, 2H), 2,05 (s, 3H), 2,03 - 2,01 (m, 1H),

1,91 - 1,85 (m, 3H), 1,71 - 1,60 (m, 3H), 1,52 - 1,30 (m, 1H), 1,29 - 1,13 (m, 3H), 1,08 (s, 3H), 0,98 (s, 3H).

[00225] Etapa 3

[00226] A um tubo de 250 ml, foi adicionado EtPPh3Br (26,63 g, 71,74 mmol, 5,00 eq) a 20 °C, e o mesmo foi purgado com gás N2. t-BuOK (8,05 g, 71,74 mmol, 5,00 eq) e THF (100 ml) foi adicionado ao frasco a 20 °C. A mistura foi aquecida para 70 °C, e a mesma foi agitada a 70 °C por 0,5 hr. O Composto 26 (5 g, 14.35 mmol, 1.00 eq) foi adicionado à reação em 70 °C, e o mesmo foi agitado a 70 °C por mais 2 hrs. TLC (PE/EA=2/1) mostrou que o material de partida foi totalmente consumido, e um novo ponto foi formado. A reação foi diluída com EA (250 ml), arrefecida bruscamente por água (100 ml) e separada. A camada aquosa foi extraída com EA (2*50 ml). A camada orgânica combinada foi concentrada em vácuo para gerar 9 g de produto bruto como óleo amarelo.

[00227] A um frasco de 250 ml, foi adicionado o óleo amarelo obtido anteriormente (9 g, bruto). DCM (75 ml) foi adicionado ao frasco para preparar uma solução. Ac2O (2,80 g, 27.46 mmol, 2,57 ml, 2 eq) foi adicionado ao frasco a 20 °C. DMAP (167,74 mg, 1,37 mmol, 0,1 eq) e Et3N (5,56 g, 54,92 mmol, 7,64 ml, 4 eq) foi adicionado ao frasco a 20 °C. A reação foi agitada a 20 °C por 16 hrs. TLC (PE/EA=5/1) mostrou que o material de partida foi totalmente consumido, e um novo ponto foi formado. A reação foi diluída com DCM (100 ml), lavada com água (50 ml) e separada. A camada orgânica foi concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por flash cromatografia de coluna (PE/EA=20/1 a 10/1) para gerar o composto 15 (3,7 g, 66,9% de rendimento), que pode ser convertida em ácido cólico seguindo a sequência descrita no Exemplo 2. EXEMPLO 4

SÍNTESE DE ÁCIDO DESOXICÓLICO

[00228] A um frasco de 35 ml, é adicionado o composto 19 e THF (10 ml). LiAlH(t-OBu)3 (2.00 eq) é adicionado ao frasco a 20 °C, e o mesmo é agitado a 20 °C por 5 horas. Depois que TLC (PE/EA=1/3) mostra que a reação é completada, a reação é arrefecida bruscamente por NH4Cl saturada (20 ml), diluída com EA (100 ml) e lavada com água (50 ml). A camada orgânica é então concentrada em vácuo para gerar o composto

27.

[00229] A um frasco de 35 ml, é adicionado o composto 27 e EtOH (2 ml), seguido pela adição de NaOH (4.00 eq) à reação em 30 °C. A mistura resultante é agitada a 30 °C por 1 hora. Depois que TLC (AcOH/EA=1/50) mostra o produto desejado, a reação é concentrada em vácuo para remover solvente, o resíduo é diluído com água (5 ml), pH é ajustado por conc. HCl para pH=3, e então é extraído com EA (3*20 ml). A camada orgânica é concentrada em vácuo, o resíduo resultante é purificado por pre-TLC (AcOH/EA=1/ 50) para gerar ácido desoxicólico. EXEMPLO 5

SÍNTESE DE ÁCIDO DESOXICÓLICO

[00230] Etapa 1

[00231] O Composto 4, que pode ser obtido a partir de DHEA seguindo os processos descritos no Exemplo 1, é primeiramente convertido em composto 28.

[00232] Especificamente, EtPPh3Br (5.00 eq) em um frasco é seca sob alto vácuo por 1 hr a 70 °C. THF seco (3,00 ml) é adicionado, seguido pela adição de t-BuOK (5.00 eq) sob N2. A mistura de adição é ainda agitada a 70 °C por 0,5 hr sob N2. A solução de Composto 4 (1.00 eq) em THF seco (2,00 ml) é adicionada à reação em 70 °C, a reação é agitada a 70 °C por mais 2 hrs. TLC mostra que o material de partida é totalmente consumido e um novo ponto é formado. Após resfriamento à temperatura ambiente, a solução é diluída por EA (40 ml), arrefecida bruscamente por solução de NaCl saturada (10 ml). A solução aquosa é extraída com EA (20 ml), seca em Na2SO4, concentrada em vácuo para gerar um produto intermediário. O produto intermediário (1,00 eq) é então dissolvido em DCM (5,00 ml) a 25 °C, seguido pela adição de Ac2O (4,2 eq), Et3N (6,00 eq) e DMAP (0,20 eq) a 25 °C. A reação é agitada a 25 °C por 7 hrs. A reação é diluída com EA (50 ml), lavada com H2O (10 ml), seca em Na2SO4 e filtrada, a camada orgânica é concentrada em vácuo. O resíduo é purificado por cromatografia de coluna para gerar o Composto 28.

[00233] Etapa 2

[00234] A um frasco de 50 ml, é adicionado o composto 28 (1,00 eq) e DCM (5,00 ml). A reação é resfriada a 0 °C; paraformaldeído (5.00 eq) é adicionado à reação em 0 °C, seguido pela adição de BF3.Et2O (0.10 eq) à reação em 0 °C. A reação é aquecida a 15 °C, e agitada a 15 °C por 2 hrs. A reação é diluída com DCM (50 ml), e arrefecida bruscamente por água (30 ml). A camada orgânica é concentrada em vácuo. O resíduo é purificada para gerar um produto intermediário. A um tubo de 10 ml, é adicionado (COCl)2 (2.40 eq) e DCM (6,00 ml). A mistura é resfriada para -78 °C. DMSO (4.00 eq) é adicionada em gotas à mistura de reação a -78 °C. Após a adição, a reação é agitada a -78 °C por 0,5 hr. O produto intermediário é então adicionado à reação em -78 °C. O mesmo é agitado a -78 por 0,5 hr. TEA (10.00 eq) é adicionada em gotas a -78 °C. Após a adição, a reação é aquecida para 15 °C, e agitada a 15 °C por 0,5 hr. A reação é diluída com DCM (50 ml) e arrefecida bruscamente por água (30 ml). A camada orgânica separada é concentrada em vácuo. O resíduo é purificado para gerar o composto 29.

[00235] Etapa 3

[00236] A um tubo de 10 ml é adicionado NaH (4.00 eq) e THF (2,00 ml), seguido pela adição de 2- dietóxifosforilacetato de etila (5.00 eq) ao frasco a 15 °C. A mistura resultante é agitada a 15 °C por 10 mins. O Composto 29 (1.00 eq) é adicionado ao frasco a 15 °C, e agitado a 15 °C por 0,5 hr. A reação é, quando arrefecida bruscamente por água (5 ml), e extraída com DCM (2*30 ml). A camada orgânica é concentrada em vácuo. O resíduo é purificado para gerar o composto 30.

[00237] Etapa 4

[00238] A um tubo de pressão de 35 ml, é adicionado o composto 30 (1,00 eq), EtOH (4,00 ml) e Pd/C (0,1 eq com base em Pd) a 25 °C. A mistura é purgada com gás H2 (0,34 MPa (0,34 MPa (50 psi))) e agitada a 25 °C por 4 hrs. A mistura resultante é filtrada, o filtrado é concentrado em vácuo para gerar o composto 31.

[00239] Etapa 5

[00240] A uma solução de composto 31 (1.00 eq) em MeOH (4,00 ml) é adicionado NaOH (12.00 eq) a 25 °C. Depois disso, a reação é aquecida para 60 °C, e agitada a 60 °C por 2 hrs. A reação é então permitida a resfriar à rt. Depois que a mesma é concentrada em vácuo, o resíduo resultante é dissolvido em água (5 ml), e o pH é ajustado por HCl a PH=3. A camada aquosa resultante é extraída com EA (3*15 ml). A camada orgânica é concentrada em vácuo para gerar Ácido quenodesoxicólico. EXEMPLO 6

CARACTERÍSTICAS DE ÁCIDO CÓLICO

[00241] Algumas impurezas de processo (consultar, por exemplo, impurezas 1-4 na Figura 2) no ácido cólico final produzido no Exemplo 1 ou 2 foram isolados com uso de HPLC preparativo (por exemplo, sistema Shimadzu LC-20AP prep HPLC), com H2O (0.1% TFA) e acetonitrila como eluentes, Coluna: Luna C18 300*50 mm，10u, ELSD como monitor e identificado como Compostos 32, 33, 34, e 35 conforme a seguir. Os elementos versados na técnica saberiam como ajustar a taxa de fluxo e gradientes para obter a separação ideal. A pureza do produto isolado pode ser analisada por HPLC analítico, por exemplo, também com uso de H2O (0.1% TFA) e acetonitrila como eluentes, Coluna: Luna C18 100*30 mm，5u.

[00242] Os espectros 1H-RMN abaixo foram obtidos com uso de Bruker AV 400 (400 MHz); e os espectros 13C RMN abaixo foram obtidos com uso de Bruker AV 400 (100 MHz). Ao relatar os espectros RMN, as convenções a seguir são usadas: s=singleto, d=dupleto, t=tripleto, m=multipleto, s l=largo singleto, ov=sobreposto; a e s mostram os dois prótons diferentes em metileno proquiral.

[00243] O Composto 32 é uma impureza de processo que tem a seguinte estrutura:

[00244] O Composto 32 pode ser derivado, por exemplo, a partir de hidrogenação de um produto formado na Etapa 8 (parte a) do Exemplo 1 seguido por desproteção. Análise espectral de massa mostra um pico em 733.5 (Varredura Positiva, 2M+1). As designações de variações químicas (em ppm) de próton e carbono são tabuladas na Tabela 2-A. TABELA 2A DESIGNAÇÕES DE VARIAÇÃO QUÍMICA PARA O COMPOSTO 32 EM DMSO-d6 (25°C) Posição RMN de 1H 13C (ppm)(nH, m) RMN de (ppm) 1a 0,84, 1H, ov 35,3 1b 1,64, 1H, ov 2a 1,42, 1H, ov 30,4 2b 1,27, 1H, ov 3 3,18, 1H, tt 70,4 4a 1,45,1H, ov 39,6 4b 2,23, 1H, ov 5 1,23, 1H, ov 41,5

6a 1,36, 1H, ov 34,9 6b 1,79, 1H, ov

7 3,60, 1H, s l 66,3

8 1,32, 1H, ov 39,3

9 2,15, 1H, ov 26,3

10 - 34,4

11 1,40, 2H, ov 28,6

12 3,79, 1H, s l 71,0

13 - 45,9

14 1,95, 1H, ov 41,1

15a 0,96, 1H, ov 23,0 15b 1,64, 1H, ov

16a 1,16, 1H, ov 27,0 16b 1,67, 1H, ov

17 1,78, 1H, ov 43,3

18 0,59, 3H, s 12,5

19 0,81, 3H, s 22,7

20 1,33, 1H, ov 39,4

21 0,98, 3H, d, 6,48Hz 15,7

22a 3,01, 1H, m 65,9 22b 3,40, 1H, m

3-OH 4,32, 1H, d, 4,40Hz -

7-OH 4,00, 1H, d, 3,30Hz -

12-OH 4,09, 1H, d, 3,55Hz -

22-OH 4,22, 1H, t, 5,26Hz -

[00245] O espectro de RMN de 1H do Composto 32 mostra a característica estrutural de derivado de ácido colestérico, que é um dos esteroides. Todos os prótons ressonam na área alifática do espectro e três sinais de metila podem ser observados no alto campo: 0,59 ppm (3H, s, H-18), 0,81 ppm (3H, s, H-19) e 0,98 ppm (3H, d, J = 6,48Hz, H-21). No campo inferior da área alifática, três metinas adjacentes ao átomo de oxigênio podem ser encontradas: 3,79 ppm (1H, m, H-12), 3,60 ppm (1H, br.s, H-7) e 3,18 ppm (1H, m, H-3). Entretanto, um metileno adjacente ao átomo de oxigênio, que é um grupo na cadeia lateral C17 de esqueleto de esteroides, ressonam em 3,01 ppm (1H, m) e 3,40 ppm (1H, m) na área de campo inferior.

[00246] No espectro COSY, o metileno em 3.01 ppm e

3.40 ppm se correlacionam com a metina em 1,33 ppm (H-20) e próton ativo em 4,22 ppm (1H, t, J = 5,26Hz). E essa metina em

1.33 ppm também se correlaciona com a metila em 0.98 ppm (H- 21) e metina em 1.78 ppm (H-17). Esses sinais provam que a cadeia lateral C17 é ‘1-hidroxipropan-2-ila’. No espectro HMBC, H-19 se correlaciona com C-1, C-10, C-5 e C-9; H-18 se correlaciona com C-12, C-13, C-14 e C-17; H-21 se correlaciona com C-20, C-22 e C-17.Aqueles sinais de correlação suportam a fixação correta de vários grupos. No espectro NOESY, a configuração relativa do anel A/B é ‘cis’ devido ao fato de que metila em 0,81 ppm (H-19) se correlaciona com metina em 1,23 ppm (H-5); o anel B/C é ‘trans’ visto que metila H-19 correlacionada com metina em 1,32 (H-8) e não se correlaciona com metina em 2,14 ppm (H-9);anel C/D é ‘trans’ visto que metila em 0,59 ppm (H-18) não se correlacionam com metina em

1.95 ppm (H-14) e se correlaciona com H-8; a configuração relativa de C-17 é ‘β’ devido ao fato de que metila em 0,59 ppm se correlaciona com metina em 1,33 ppm (H-20) e não se correlaciona com metina em 1,78 ppm (H-17); Os sinais de correlação entre metina em 3,18 ppm (H-3) e H-5, metina em 3,60 ppm (H-7) e H-8/H-6(1,36 ppm e 1,78 ppm), metina em 3,79 ppm e H-19 pode suportar a conclusão de 3α(OH),7α(OH)e 12α(OH). No entanto, a configuração de C-20 não pode ser garantida com base nos estudos de RMN devido ao fato de que o centro quiral está fora do anel. Em conclusão, pode-se determinar que a configuração do Composto 32 é 3α, 5β,7α,8β,9α,10β,12α,13β,14α,17β,20(R ou S).

[00247] O Composto 33 é uma impureza de processo que tem a seguinte estrutura: ,

[00248] O Composto 33 é um diastereômero de ácido cólico na posição C30, que pode ser derivado, por exemplo, de um isômero menor formado na Etapa 8 (ou epimerização) do Exemplo 1 que realizou a síntese até o ácido cólico. Análise espectral de massa mostra um pico em 817.6 (Varredura Positiva, 2M+1). As designações de variações químicas (em ppm) de próton e carbono são tabuladas na Tabela 2-B. TABELA 2B DESIGNAÇÕES DE VARIAÇÃO QUÍMICA PARA COMPOSTO 33 EM DMSO-d6 (25°C) Posição RMN de 1H 13C (ppm)(nH, m) RMN de (ppm) 1a 0,83, 1H, ov 35,3 1b 1,64, 1H, ov 2a 1,41, 1H, ov 30,3 2b 1,28, 1H, ov 3 3,18, 1H, tt 70,5

4a 1,45,1H, ov 39,6 4b 2,21, 1H, ov

5 1,23, 1H, ov 41,5

6a 1,36, 1H, ov 34,9 6b 1,79, 1H, ov

7 3,61, 1H, s l 68,3

8 1,33, 1H, ov 39,5

9 2,14, 1H, ov 26,2

10 - 34,6

11a 1,44, 1H, ov 28,5 11b 1,38, 1H, ov

12 3,80, 1H, s l 71,0

13 - 45,7

14 1,99, 1H, ov 41,3

15a 0,96, 1H, ov 22,7 15b 1,65, 1H, ov

16a 1,15, 1H, ov 27,4 16b 1,67, 1H, ov

17 1,78, 1H, ov 46,3

18 0,59, 3H, s 12,5

19 0,80, 3H, s 22,6

20 1,34, 1H, ov 34,4

21 0,78, 3H, d, 5,50Hz 18,3

22a 1,87, 1H, ov 29,3 22b 1,36, 1H, ov

23a 2,35,1H,ov 31,1 23b 2,09,1H,ov 24 - 175,2

[00249] O espectro de RMN de 1H do Composto 33 mostra a característica estrutural de derivado de ácido colestérico, que é um dos esteróides. Todos os prótons ressonam na área alifática do espectro e três sinais de metila podem ser observados no alto campo: 0,59 ppm (3H, s, H-18), 0,80 ppm (3H, s, H-19) e 0,78 ppm (3H, d, J = 5,50Hz, H-21). No campo inferior da área alifática, três metinas adjacentes ao átomo de oxigênio podem ser encontradas: 3,80 ppm (1H, br.s, H-12), 3,61 ppm (1H, br.s, H-7) e 3,18 ppm (1H, tt, J1=10,3Hz, J2=4,0Hz, H-3).

[00250] No espectro COSY, a metila em 0,78 ppm (H- 21) se correlacionam com a metina em 1.34 ppm (H-20) e H-20 se correlacionam com metina em 1,79 ppm (H-17). De acordo com o espectro HMBC, H-21 se correlaciona com carbono em 46,3 ppm (C-17), 39,3 ppm (C-22). Os dois metilenos H22 e H23 se correlacionam com carbonila em 175,2 ppm (C-24). Esses sinais provam que a cadeia lateral C17 é ‘ácido-4-ila 1-n-valérico’.

[00251] No espectro HMBC, H-19 se correlaciona com C-1, C-5, C-9 e C-10; H-18 se correlaciona com C-12,C-13,C-14 e C-17. Aqueles sinais de correlação suportam a anexação correta de vários grupos.

[00252] No espectro NOESY, a configuração relativa do anel A/B é ‘cis’ devido ao fato de que metila em 0,80 ppm (H-19) se correlaciona com metina em 1,23 ppm (H-5); o anel B/C é ‘trans’ visto que metila H-19 se correlaciona com metina em 1,33 (H-8) e não se correlaciona com metina em 2,14 ppm (H- 9);anel C/D é ‘trans’ visto que metila em 0,59 ppm (H-18) não se correlacionam com metina em 1.99 ppm (H-14) e se correlaciona com H-8; a configuração relativa de C-17 é ‘β’ devido ao fato de que metila em 0,59 ppm se correlaciona com metina em 1,34 ppm (H-20) e não se correlaciona com metina em 1,78 ppm (H-17); Os sinais de correlação entre metina em 3,18 ppm (H-3) e H-5, metina em 3,61 ppm (H-7) e H-8/H-6 (1,36 ppm e 1,79 ppm), metina em 3,80 ppm e H-18 pode suportar a conclusão de 3α(OH),7α(OH)e 12α(OH). No entanto, a configuração de C-20 não pode ser garantida com base em RMN devido ao fato de que o centro quiral está fora do anel. Em conclusão, pode-se determinar que a configuração é 3α, 5β,7α,8β,9α,10β,12β,13β,14α,17β,20(R ou S). As Composto 33 tem a mesma estereoquímica nas posições 3, 5, 7, 8, 9, 10, 12, 13, 14, e 17 que a de ácido cólico, a estereoquímica C20 do Composto 33 é designado como “S”, como ácido cólico tem uma configuração “R” em C20.

[00253] O Composto 34 é uma impureza de processo que tem a seguinte estrutura: ,

[00254] O Composto 34 é um diastereômero de ácido cólico na posição C17, que pode ser derivada, por exemplo, de um isômero menor formado na Etapa 10 do Exemplo 1 que realizou a síntese até o ácido cólico. A análise espectral de massa mostra um pico em 407,3 (Negative Scan, M-1). As designações de variações químicas (em ppm) de próton e carbono são tabuladas na Tabela 2-C. TABELA 2C DESIGNAÇÕES DE VARIAÇÃO QUÍMICA PARA COMPOSTO 34 EM CLOROFORME -d (25°C) Posição RMN de 1H 13C (ppm)(nH, m) RMN de (ppm)

1a 0,97, 1H, ov 35,4 1b 1,74, 1H, ov

2a 1,40, 1H, ov 29,9 2b 1,67, 1H, ov

3 3,47, 1H, m 71,9

4a 1,78,1H, ov 39,4 4b 2,22, 1H, ov

5 1,39, 1H, ov 41,4

6a 1,57, 1H, ov 34,4 6b 1,92, 1H, ov

7 3,94, 1H, s l 69,3

8 1,62, 1H, ov 39,2

9 2,27, 1H, ov 26,4

10 - 34,8

11 1,59, 2H, ov 29,7

12 4,27, 1H, s l 73,3

13 - 47,1

14 2,00, 1H, ov 40,0

15a 1,10, 1H, ov 25,2 15b 1,71, 1H, ov

16a 1,28, 1H, ov 29,4 16b 1,84, 1H, ov

17 1,40, 1H, ov 55,9

18 0,78, 3H, s 24,2

19 0,88, 3H, s 22,3

20 1,90, 1H, ov 34,7 21 0,80, 3H, d, 6,36Hz 18,1 22a 1,15, 1H, ov 31,9 22b 2,04, 1H, ov 23 2,43, 2H, m 32,1 24 - 178,5

[00255] O espectro de RMN de 1H do Composto 34 mostra a característica estrutural de derivado de ácido colestérico, que é um dos esteroides. Todos os prótons ressonam na área alifática do espectro e três sinais de metila podem ser observados no alto campo: 0,77 ppm (3H, s, H-18), 0,88 ppm (3H, s, H-19) e 0,80 ppm (3H, d, J = 6,48Hz, H-21). No campo inferior da área alifática, três metinas adjacentes ao átomo de oxigênio podem ser encontradas: 4,27 ppm (1H, br.s, H-12), 3,94 ppm (1H, br.s, H-7) e 3,47 ppm (1H, m, H-3).

[00256] No espectro COSY, a metila em 0,80 ppm (H- 21) se correlacionam com a metina em 1.90 ppm (H-20) e H-20 se correlacionam com metina em 1,40 ppm (H-17). De acordo com o espectro HMBC, H-21 se correlaciona com carbono em 55,9 ppm (C-17), 31,9 ppm (C-22). Os dois metilenos H22 e H23 se correlacionam com carbonila em 178,5 ppm (C-24). Esses sinais provam que a cadeia lateral C17 é ‘ácido-4-ila 1-n-valérico’.

[00257] No espectro HMBC, H-18 se correlaciona com C-1, C-10, C-5 e C-9; H-19 se correlaciona com C-12,C-13,C-14 e C-17; H-21 se correlaciona com C-20, C-22 e C-17. Aqueles sinais de correlação sustentam a anexação correta de vários grupos.

[00258] No espectro NOESY, a configuração relativa do anel A/B é ‘cis’ devido ao fato de que metila em 0,88 ppm (H-19) se correlaciona com metina em 1,39 ppm (H-5); o anel

B/C é ‘trans’ visto que metila H-19 se correlaciona com metina em 1,62 (H-8) e não se correlaciona com metina em 2,27 ppm (H- 9);anel C/D é ‘trans’ visto que metila em 0,78 ppm (H-18) não se correlacionam com metina em 2.00 ppm (H-14) e se correlaciona com H-8; a configuração relativa de C-17 é ‘α’ devido ao fato de que metila em 0,78 ppm se correlaciona com metina em 1,39 ppm (H-17) e não se correlaciona com metina em 1,90 ppm (H-20); Os sinais de correlação entre H-3 e H-5, H-7 e H-8/H-6 (1,57 ppm e 1,92 ppm), H-12 e H-18 pode suportar a conclusão de 3α(OH),7α(OH)e 12α(OH).

[00259] No entanto, a configuração de C-20 não pode ser garantida com base nos estudos de RMN devido ao fato de que o centro quiral está fora do anel. Em conclusão, pode-se determinar que a configuração é 3α, 5β,7α,8β,9α,10β,12α,13β,14α,17α,20(R ou S). Todavia, visto que o Composto 34 é um diastereômero do Composto 35 (consultar abaixo) com a única diferença sendo a estereoquímica C20, e estrutura de cristal de raio X do Composto 35 mostra que o mesmo tem uma configuração C20 S, a estereoquímica em C20 do Composto 34 é designado como configuração R.

[00260] O Composto 35 é uma impureza de processo que tem a seguinte estrutura: ,

[00261] O Composto 35 é um diastereômero do Composto 34 na posição C30, que pode ser derivado, por exemplo, de um isômero menor formado nas Etapas 8-10 do Exemplo 1 que realizou a síntese até o ácido cólico.

A análise espectral de massa mostra um pico em 407,2 (Negative Scan, M-1). As designações de variações químicas (em ppm) de próton e carbono são tabuladas na Tabela 2-D.

TABELA 2D DESIGNAÇÕES DE VARIAÇÃO QUÍMICA PARA COMPOSTO 35 EM CLOROFORME -d (25°C)

Posição RMN de 1H 13C (ppm)(nH, m) RMN de (ppm)

1a 0,97, 1H, ov 34,3 1b 1,75, 1H, ov

2a 1,37, 1H, ov 29,7 2b 1,66, 1H, ov

3 3,48, 1H, tt 71,9

4a 1,76,1H, ov 39,1 4b 2,13, 1H, ov

5 1,41, 1H, ov 41,3

6a 1,57, 1H, ov 34,3 6b 1,94, 1H, ov

7 3,94, 1H, s l 69,2

8 1,61, 1H, ov 39,8

9 2,25, 1H, ov 26,3

10 - 34,8

11a 1,56, 1H, ov 29,6 11b 1,65, 1H, ov

12 4,06, 1H, s l 73,1

13 - 48,0

14 2,01, 1H, ov 39,5

15a 1,16, 1H, ov 25,3 15b 1,80, 1H, ov 16a 1,43, 1H, ov 25,6 16b 1,82, 1H, ov 17 1,57, 1H, ov 55,7 18 0,75, 3H, s 23,8 19 0,89, 3H, s 22,2 20 1,99, 1H, ov 34,2 21 0,91, 3H, d, 6,48Hz 20,5 22a 1,08, 1H, ov 29,5 22b 1,98, 1H, ov 23 2,36, 2H, m 32,4 24 - 178,5

[00262] O espectro de RMN de 1H do Composto 35 mostra a característica estrutural de derivado de ácido colestérico, que é um dos esteroides. Todos os prótons ressonam na área alifática do espectro e três sinais de metila podem ser observados no alto campo: 0,75 ppm (3H, s, H-18), 0,89 ppm (3H, s, H-19) e 0,91 ppm (3H, d, J = 6,48Hz, H-21). No campo inferior da área alifática, três metinas adjacentes ao átomo de oxigênio podem ser encontradas: 4,06 ppm (1H, br.s, H-12), 3,94 ppm (1H, br.s, H-7) e 3,48 ppm (1H, m, H-3).

[00263] No espectro COSY, a metila em 0,91 ppm (H- 21) se correlacionam com a metina em 1.99 ppm (H-20) e H-20 se correlacionam com metina em 1,57 ppm (H-17). De acordo com o espectro HMBC, H-21 se correlaciona com carbono em 55,7 ppm (C-17), 29,5 ppm (C-22). Os dois metilenos H22 e H23 se correlacionam com carbonila em 178,5 ppm (C-24). Esses sinais provam que a cadeia lateral C17 é ‘ácido-4-ila 1-n-valérico’.

[00264] No espectro HMBC, H-18 se correlaciona com C-1, C-10, C-5 e C-9; H-19 se correlaciona com C-12, C-13, C- 14 e C-17; H-21 se correlaciona com C-20, C-22 e C-17. Aqueles sinais de correlação suportam a anexação correta de vários grupos.

[00265] No espectro NOESY, a configuração relativa do anel A/B é ‘cis’ devido ao fato de que metila em 0,89 ppm (H-19) se correlaciona com metina em 1,41 ppm (H-5); o anel B/C é ‘trans’ visto que metila H-19 se correlaciona com metina em 1,61 (H-8) e não se correlaciona com metina em 2,25 ppm (H- 9);anel C/D é ‘trans’ visto que metila em 0,75 ppm (H-18) não se correlacionam com metina em 2.01 ppm (H-14) e se correlaciona com H-8; a configuração relativa de C-17 é ‘α’ devido ao fato de que metila em 0,75 ppm se correlaciona com metina em 1,57 ppm (H-17) e não se correlaciona com metina em 1,99 ppm (H-20); Os sinais de correlação entre H-3 e H-5, H-7 e H-8/H-6 (1,57 ppm e 1,92 ppm), H-12 e H-18 pode suportar a conclusão de 3α(OH),7α(OH)e 12α(OH).

[00266] No entanto, a configuração de C-20 não pode ser garantida com base em estudos de RMN devido ao fato de que o centro quiral está fora do anel. Em conclusão, pode-se determinar que a configuração do Composto 35 é 3α,5β,7α,8β,9α,10β,12α,13β,14α,17α,20 (R ou S).

[00267] Todavia, um estrutura de raio X de um cristal do Composto 35 foi obtida, que conclui que a estereoquímica do Composto 35 na posição C20 está na configuração S. Consultar a Figura 1.

[00268] A análise estrutural de raio X: Uma amostra do Composto 35 foi dissolvida em acetona e mantida em um frasco vedado pela metade. O solvente evaporou lentamente em temperatura ambiente. Um cristal adequado em tamanho foi obtido no segundo dia. Sua transparência foi verificada por microscópio e então o cristal foi enviado para teste de raio X com uso de Difractômetro Saturn Rigaku com uso de radiação Mo Kα de gráfico monocromado (λ = 0,71073 Å). O parâmetro a seguir foi usado: O monocromador de radiação: espelho de foco de múltiplas membranas artificial; Diâmetro de tubo único: ф = 0,50 mm; Distância do cristal ao detector de CCD: d = 45 mm; Pressão de Tubo: 50 kV; Fluxo de tubo: 16 mA. Um total de

27.071 reflexões foram coletadas na theta variam de 2,303 a 31,246°. Os índices de limitação foram: -12 ≤ h ≤ 12, -12 ≤ k ≤ 12, -42 ≤ l ≤ 43; que rendeu 7.098 reflexões exclusivas (Rint = 0.0650). A estrutura foi solvida com uso de métodos diretos e foi refinadas por mínimos quadrados de matriz total em valores F2. Átomos diferentes de hidrogênio foram refinados de modo anistotrópico. Átomos de hidrogênio foram fixados em posições calculadas e refinadas com uso de um modo de condução. O número total de parâmetros refinados foi 310, em comparação com 7098 dados. Todas as reflexões foram incluídas no refinamento. A adequação de ajuste em F2 foi 1,031 com um valor R final para [I > 2σ (I)] R = 0,0668 e Rw = 0,1664. O maior pico diferencial e furo foram 0,391 e -0,413 e.Å-3, respectivamente.

[00269] O cristal foi um prisma incolor com as seguintes dimensões: 0,20×0,18×0,12 mm3. A simetria da estrutura de cristal foi designada ao espaço ortorômbico grupo P2(1)2(1)2(1) com os seguintes parâmetros: a = 8.4747(4) Å, b = 9.2565(4) Å, c = 29.9531(11) Å, α = β = γ = 90°, V =

2349.7(17) Å3, Z = 4, Dc =1.240 Mg/m3, F(000) = 968, μ(Mo Kα) = 0,088 mm–1, e T = 113(2) K. Consultar a Tabela 3 abaixo. TABELA 3 SUMÁRIO DE DADOS CRISTALOGRÁFICOS DE RAIO X DO COMPOSTO 35 Tamanho de Cristal 0,20 × 0,18 × 0,12 mm3

Tipo de Radiação Mo Kα (λ = 0,71073 Å) Ortorômbico Grupo de Espaço P2(1)2(1)2(1) a = 8,4747(4) Å b = 9,2565(4) Å c = 29,9531(11) Å Tamanho de Célula α = 90° β = 90° γ = 90° Volume Celular V= 2349,70(17) Å3 Unidades de Fórmula Celular Z =4 Densidade de Cristal Dc = 1.240 Mg/m3 Cristal F(000) 968 Coeficiente mu de absorção μ(Mo Kα) = 0,088 mm–1 -12≤ h ≤12 Índices de Limitação -12≤ k ≤12 -42≤ l ≤43 Temperatura de Medição Celular T = 113(2) K.

Faixa Theta para coleta de dados 2,303 a 31,246° Adequação de ajuste em F^2 1,031 Índices R finais [I>2sigma(I)] R1 = 0,0668, wR2 = 0,1664 Índices R (todos os dados) R1 = 0,0877, wR2 = 0,1841 Maior pico diff. e furo 0,391 e -0.413 e.Å-3 27071 / 7098 [R(int) = Reflexões coletadas / exclusivas

0.0650]

[00270] Em relação aos aspectos da invenção descritas como um gênero, todas as espécies individuais são individualmente consideradas aspectos separados da invenção. Se aspectos da invenção forem descritos como “compreendendo” um recurso, modalidades também são contempladas “consistindo em ou “consistindo essencialmente” no recurso.

[00271] A descrição precedente das modalidades específicas então revelarão totalmente a natureza geral da invenção que outros podem, aplicando-se conhecimento dentro da habilidade da invenção, prontamente modificam e/ou se adaptam a várias aplicações tais modalidades específicas, sem experimentação indevida, sem se afastar do conceito geral da presente revelação. Portanto, tais adaptações e modificações são destinados a estarem dentro do significado e faixa de equivalentes das modalidades reveladas, com base no ensinamento e orientação apresentados no presente documento. Deve-se entender que a fraseologia ou terminologia no presente documento é para o propósito de descrição e não limitação, de modo que a terminologia ou fraseologia do presente relatório descritivo deve ser interpretada pelo elemento versado em luz dos ensinamentos e orientação.

[00272] O amplitude e escopo da presente revelação não devem ser limitados por qualquer uma das modalidades exemplificadoras acima, mas deve ser definida somente de acordo com as reivindicações a seguir e seus equivalentes.

[00273] Todos os vários aspectos, modalidades, e opções descritas no presente documento podem ser combinadas em quaisquer e todas as variações.

[00274] Todas as publicações, patentes, e pedidos de patente mencionados neste relatório descritivo são incorporados ao presente documento a título de referência na mesma extensão que se cada publicação individual, patente, ou pedido de patente fosse específica e individualmente indicada como incorporada a título de referência.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. MÉTODO DE PREPARO DE ÁCIDO CÓLICO, UM ÉSTER DO MESMO, OU UM SAL FARMACÊUTICA OU COSMETICAMENTE ACEITÁVEL DO MESMO, Ácido cólico sendo que o método é caracterizado por compreender: a) converter um composto da Fórmula I-1 em um composto da Fórmula I-2, Fórmula I-1 Fórmula I-2 em que R1 é H ou um grupo alquila opcionalmente substituído; b) oxidar o composto da Fórmula I-2 para formar um composto da Fórmula I-3, Fórmula I-3; c) reagir o composto da Fórmula I-3 com um reagente formador de epóxido para formar um epóxido da Fórmula I-4,

Fórmula I-4; d) reduzir um epóxido da Fórmula I-4 sob condições de hidrogenação para formar uma dicetona da Fórmula I-5, Fórmula I-5; e) colocar a dicetona da Fórmula I-5 em contato com um agente redutor de cetona para formar um composto da Fórmula I-6, Fórmula I-6; e f) opcionalmente, quando R1 não for H na Fórmula I- 6, hidrolisar o composto da Fórmula I-6 para fornecer ácido cólico.

2. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo composto da Fórmula I-1 ser obtido a partir da oxidação de um diol da Fórmula I-7

Fórmula I-7.

3. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo diol da Fórmula I-7 ser obtido a partir da 1) hidrogenação de um composto da Fórmula I-8 ou Fórmula I-8a, ou um isômero geométrico do mesmo, Fórmula I-8 Fórmula I-8a em que Pg1 e Pg2 são, independentemente, um grupo protetor hidroxila; e 2) remoção opcional de um ou ambos os grupos protetores hidroxila.

4. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo composto da Fórmula I-8 ser obtido a partir da reação de um aldeído da Fórmula I-9 com um reagente formador de olefina Fórmula I-9.

5. MÉTODO, acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo aldeído da Fórmula I-9 ser obtido a partir da 1) reação de um composto da Fórmula I-10, ou um isômero geométrico do mesmo, com formaldeído ou paraformaldeído na presença de um ácido de Lewis Fórmula I-10 para formar um composto da Fórmula I-11 Fórmula I-11; e 2) oxidar o composto da Fórmula I-11 para fornecer o aldeído da Fórmula I-9.

6. MÉTODO DE PREPARO DE ÁCIDO DESOXICÓLICO, UM ÉSTER DO MESMO, OU UM SAL FARMACÊUTICA OU COSMETICAMENTE ACEITÁVEL DO MESMO, Ácido desoxicólico, sendo que o método é caracterizado compreender:

a) reação de um composto da Fórmula I-10, ou um isômero geométrico do mesmo, com formaldeído ou paraformaldeído na presença de um ácido de Lewis

Fórmula I-10 para formar um composto da Fórmula I-11

Fórmula I-11 em que Pg1 e Pg2 são, independentemente, um grupo protetor hidroxila; b) oxidar o composto da Fórmula I-11 para fornecer um aldeído da Fórmula I-9

Fórmula I-9; c) reagir o aldeído da Fórmula I-9 com um agente formador de olefina para formar um composto da Fórmula I-8, ou um isômero geométrico do mesmo,

Fórmula I-8 em que R1 é H ou um grupo alquila opcionalmente substituído; d) hidrogenar o composto da Fórmula I-8 e remover subsequentemente os grupos protetores hidroxila, ou desproteger o composto da Fórmula I-8 e hidrogenar subsequentemente o composto desprotegido, para fornecer um diol da Fórmula I-7b

Fórmula I-1b; f) colocar o composto da Fórmula I-1b em contato com um agente redutor de cetona para formar um composto da Fórmula I-12

Fórmula I-12; e g) opcionalmente, quando R1 na Fórmula I-12 não for H, hidrolisar o composto da Fórmula I-12 para fornecer ácido desoxicólico.

7. MÉTODO DE PREPARO DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA I- 10, OU UM ISÔMERO GEOMÉTRICO DO MESMO, Fórmula I-10 em que Pg1 e Pg2 são, independentemente, um grupo protetor hidroxila, sendo que o método é caracterizado compreender a) reagir um composto da Fórmula I-13 Fórmula I-13 em que R2 é H ou Pg1; com uma amina para formar uma imina da Fórmula I-14

Fórmula I-14 em que m é 0, 1 ou 2, e R3 é C1-6 alquila; b) oxidar a imina da Fórmula I-14 com O2 na presença de um sal de cobre para formar um composto da Fórmula I-15 Fórmula I-15; c) reagir o composto da Fórmula I-15 com um agente formador de olefina para formar um composto da Fórmula I-16, ou um isômero geométrico do mesmo, Fórmula I-16; e d) proteger o grupo (ou grupos) hidroxila na Fórmula I-16 para fornecer o composto da Fórmula I-10, ou isômero geométrico do mesmo.

8. COMPOSTO DA FÓRMULA II-1, FÓRMULA II-2, FÓRMULA II-3 OU FÓRMULA II-4, OU UM ISÔMERO GEOMÉTRICO DO MESMO, OU UM SAL DO MESMO:

Fórmula II-1 Fórmula II-2 Fórmula II-3 Fórmula II-4 caracterizado por cada um dentre R10 e R11 em cada fórmula ser independentemente H ou um grupo protetor hidroxila, e R12 é H ou uma alquila opcionalmente substituída.

9. COMPOSTO, que tem a estrutura de , , ou , caracterizado por R20 e R23 serem, cada um, independentemente uma alquila opcionalmente substituída, desde que R20 e R23 não sejam metila; e R21 e R22 são, cada um, independentemente H ou uma alquila opcionalmente substituída,

ou um sal do mesmo.

10. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA OU COSMÉTICA, caracterizada por compreender um ácido cólico sintético, ou um éster farmacêutica ou comesticamente aceitável ou sal do mesmo, e um excipiente farmacêutica ou cosmeticamente aceitável, em que o ácido cólico sintéticO é livre de impurezas derivadas de animais.

11. MÉTODO DE PREPARO DE ÁCIDO CÓLICO, UM ÉSTER DO MESMO, OU UM SAL FARMACÊUTICA OU COSMETICAMENTE ACEITÁVEL DO MESMO, Ácido cólico sendo que o método é caracterizado por compreender: a) reagir um composto da Fórmula III-1, ou um isômero geométrico do mesmo, com formaldeído ou paraformaldeído na presença de um ácido de Lewis Fórmula III-1 para formar um composto da Fórmula III-2

Fórmula III-2 em que Pg10, Pg11 e Pg12 são, cada um, independentemente um grupo protetor hidroxila; b) oxidar o composto da Fórmula III-2 para fornecer um aldeído da Fórmula III-3

Fórmula III-3; c) reagir o aldeído da Fórmula III-3 com um agente formador de olefina para formar um composto da Fórmula III-4, ou um isômero geométrico do mesmo,

Fórmula III-4; em que R30 é H ou um grupo alquila opcionalmente substituído; d) hidrogenar o composto da Fórmula III-4 com gás H2 na presença de um catalisador metálico e remover subsequentemente os grupos protetores hidroxila, ou remover os grupos protetores hidroxila na Fórmula III-4 e hidrogenar subsequentemente o composto desprotegido com gás H2 na presença de um catalisador metálico, para fornecer um triol da Fórmula III-5

Fórmula III-5; e) oxidar o triol da Fórmula III-5 para fornecer um composto da Fórmula III-6,

Fórmula III-6; f) colocar o composto da Fórmula III-6 em contato com um agente redutor de cetona para formar um composto da Fórmula III-7

Fórmula III-7; e g) opcionalmente, quando R30 não for H na Fórmula III-7, hidrolisar o composto da Fórmula III-7 para fornecer ácido cólico.

12. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo composto da Fórmula III-1, ou um isômero geométrico do mesmo, ser obtido a partir da reação de um composto da Fórmula III-8 com um agente formador de olefina Fórmula III-8 em que R31 é H ou Pg10; R32 é H ou Pg11; e R33 é H ou Pg12; desde que quando um ou mais dentre R31, R32 e R33 forem H, então um etapa de proteção seja seguida após a reação do composto da Fórmula III-8 com o agente formador de olefina.

13. MÉTODO DE PREPARO DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA III-8A, Fórmula III-8a; sendo que o método é caracterizado por compreender a) oxidar desidroepiandrosterona (DHEA) em um composto da Fórmula III-9

DHEA Fórmula III-9; b) reagir o composto da Fórmula III-9 com um reagente formador de epóxido para formar um epóxido da Fórmula III-10

14. MÉTODO DE PREPARO DE ÁCIDO QUENODESOXICÓLICO, UM ÉSTER DO MESMO, OU UM SAL FARMACÊUTICA OU COSMETICAMENTE ACEITÁVEL DO MESMO, ácido quenodesoxicólico, sendo que o método é caracterizado por compreender: a) reagir um composto da Fórmula IV-1, ou um isômero geométrico do mesmo, com formaldeído ou paraformaldeído na presença de um ácido de Lewis Fórmula IV-1 para formar um composto da Fórmula IV-2

Fórmula IV-2 em que Pg20 e Pg21 são, cada um, independentemente a grupo protetor hidroxila; b) oxidar o composto da Fórmula IV-2 para fornecer um aldeído da Fórmula IV-3

Fórmula IV-3; c) reagir o aldeído da Fórmula IV-3 com um agente formador de olefina para formar um composto da Fórmula IV-4, ou um isômero geométrico do mesmo,

Fórmula IV-4; em que R40 é H ou um grupo alquila opcionalmente substituído; d) hidrogenar o composto da Fórmula IV-4 com gás H2 na presença de um catalisador metálico e remover subsequentemente os grupos protetores hidroxila, ou remover os grupos protetores hidroxila da Fórmula IV-4 e hidrogenar subsequentemente o composto desprotegido com gás H2 na presença de um catalisador metálico, para fornecer um diol da Fórmula IV-5 Fórmula IV-5; e e) opcionalmente, quando R40 não for H na Fórmula IV-5, hidrolisar o composto da Fórmula IV-5 em ácido quenodesoxicólico.

15. COMPOSTO DA FÓRMULA V-1, FÓRMULA V-2, FÓRMULA V-3 OU FÓRMULA V-4, OU UM ISÔMERO GEOMÉTRICO DO MESMO, OU UM SAL DO MESMO: Fórmula V-1 Fórmula V-2 Fórmula V-3 Fórmula V-4 caracterizado por cada um dentre R50, R51 e R52 ser independentemente H ou um grupo protetor hidroxila, e R53 é H ou uma alquila opcionalmente substituída.

16. COMPOSTO, que tem a estrutura de

Fórmula III-8 caracterizado por R31, R32 e R33 serem, cada um, independentemente H ou um grupo protetor hidroxila.

17. COMPOSTO DA FÓRMULA V-5, FÓRMULA V-6 OU FÓRMULA V-7, OU UM COMPOSTO DA FÓRMULA V-8 OU UM ISÔMERO GEOMÉTRICO OU UM SAL DO MESMO: Fórmula V-5 Fórmula V-6 Fórmula V-7 Fórmula V-8; caracterizado por cada um dentre R54 e R55 ser independentemente H ou um grupo protetor hidroxila, e R56 é H ou uma alquila opcionalmente substituída, desde que quando R54 e R55 forem acetila, então R56 não seja metila.

18. COMPOSIÇÃO DE ÁCIDO CÓLICO DE ALTA PUREZA, caracterizada por compreender um ácido cólico, ou um sal do mesmo, e um ou mais compostos selecionados dentre os Compostos 32 a 35, ou um sal dos mesmos:

Composto 32 Composto 33 Composto 34 Composto 35.

19. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA OU COSMÉTICA, caracterizada por compreender a composição de ácido cólico de alta pureza, conforme definida na reivindicação 18.

20. MÉTODO PARA REMOÇÃO NÃO CIRÚRGICA DE UM

DEPÓSITO DE GORDURA LOCALIZADA EM UM INDIVÍDUO QUE QUE NECESSITE DO MESMO, sendo que o método é caracterizado por compreender administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de qualquer uma dentre a composição de ácido cólico de alta pureza, conforme definida na reivindicação 18, ou a composição farmacêutica ou cosmética, conforme definida na reivindicação 10 ou 19.