BR112019028078A2

BR112019028078A2 - derivados de 2-oxo-1,3-oxazolidinil imidazotiadiazol

Info

Publication number: BR112019028078A2
Application number: BR112019028078-2A
Authority: BR
Inventors: Laurent Provins; Hugues Chanteux; Yannick Quesnel
Original assignee: UCB Biopharma SRL
Priority date: 2017-07-10
Filing date: 2018-07-05
Publication date: 2020-07-28
Also published as: JP7126545B2; EP3652183A1; ES2896331T3; RU2020104753A; CN110869374B; WO2019011770A1; CN110869374A; JP2020526532A; US11155565B2; CA3069040A1; MA49559A; US20200231599A1; EP3652183B1

Abstract

A presente invenção refere-se a derivados de 2-oxo-1,3-oxazolidinil imidazotiadiazol, processos para preparar os mesmos, composições farmacêuticas que contêm os mesmos e seu uso como produtos farmacêuticos.

Description

“DERIVADOS DE 2-OXO-1,3-OXAZOLIDINIL IMIDAZOTIADIAZOL”

INTRODUÇÃO

[0001] A presente invenção se refere a derivados de 2-oxo-1,3-oxazolidinil imidazotiadiazol, processos para preparar os mesmos, composições farmacêuticas que os contêm e seu uso como produtos farmacêuticos.

[0002] Um problema persistente no controle de convulsões surge com aqueles pacientes que não respondem de maneira suficiente ou apenas insuficientemente aos tratamentos atualmente disponíveis. Esses pacientes são vistos como refratários ao tratamento e representam um desafio considerável para a comunidade médica. Estima-se que cerca de 30% dos pacientes com epilepsia sejam classificados como refratários. Portanto, existe a necessidade de desenvolver novos medicamentos direcionados especificamente a essa população de pacientes.

[0003] Os compostos antiepiléticos de Fórmula (A) são revelados no documento WO2008/132139:

Z (A)

[0004] em que

[0005] Y é O ou S;

[0006] R1 hidrogênio ou C1-6 alquila;

[0007] R2 hidrogênio;

[0008] R3 é-CONR5 R6,-COR 7, uma imidazolila, uma imidazopiridinila, uma imidazopiridazinila;

[0009] R5, R6 são iguais ou diferentes e são selecionados independentemente dentre hidrogênio e C1-6 alquila;

[0010] R 7 representa C1-6 alquila;

[0011] Z é uma porção heterocíclica monocíclica ou bicíclica selecionada do grupo que consiste em imidazolidin-1-ila, 1,3-oxazolidin-3-ila, 2,5-di-hidro-1H-pirrol-1-ila,

1,3-tiazol- 3 (2H)-ila, 1,3-tiazolidin-3-ila, piperidin-1-ila, azepan-1-ila, 5,6-di-hidro-4H- tieno [3,2-b] pirrol-4-ila, hexa-hidro-4H-tieno [3,2-b] pirrol-4-ila, 2,3-di-hidro-1H- tieno[3,4-b]pirrol-1-ila, 1,3-benzotiazol-3(2H)-ila, 1,3-benzoxazol-3 (2H)-ila, pirazolo[1,5-a]piridin-1 (2H)-ila, 3,4-di-hidroisoquinolin-2 (1H)-ila, 3,4-di-hidroquinolin- 1 (2H)-ila, 1,3,4,5-tetra-hidro-2H-2-benzazepin-2-ila, 1,2,4,5-tetra-hidro-3H-3- benzazepin-3-ila.

[0012] Em uma modalidade específica do documento WO2008/132139, a porção Z = Y na Fórmula (A) pode ser: 4a 4a

R R N X O O N N

[0013] em que X é O ou S.

[0014] Os compostos antiepiléticos de Fórmula (I) são revelados no documento WO2011/047860: derivados de 2-oxo-1-pirrolidinil imidazotiadiazol de acordo com a Fórmula (I) 1

R O N (I)

N 3 N 2

R R S N

[0015] em que

[0016] R1 é uma C1-4 alquila contendo pelo menos um substituinte de halogênio;

[0017] R2 é quer um halogênio (cloro, bromo, iodo) ou um C1-4 alquila contendo pelo menos um substituinte de halogênio;

[0018] R3 é uma C1-4 alquila (por exemplo, uma metila ou etila), contendo pelo menos um hidroxi (OH) ou um substituinte de alcóxi (por exemplo, metóxi ou etóxi ou propóxi).

[0019] Os compostos antiepiléticos da Fórmula (I) são revelados no documento WO2012/143116: derivados de 4-oxo-1-imidazolidinil imidazotiadiazol de acordo com a Fórmula (I),

R N O N (I)

N 3 N 2

R R S N

[0020] em que

[0021] R1 é uma C1-4 alquila opcionalmente substituída por um ou mais (1 a 6, preferencialmente 2, 3 ou 5) halogênios, por uma fenila substituída ou não substituída ou por uma C1-4 cicloalquila substituída ou não substituída;

[0022] R2 é um halogênio (cloro, bromo, iodo) ou um C1-4 alquila contendo um ou mais (por exemplo, 1, 2 ou 3) substituintes de halogênio;

[0023] R3 é uma C1-4 alquila (por exemplo, uma metila ou etila), contendo pelo menos um substituinte de hidróxi (OH) ou um alcóxi (por exemplo, metóxi ou etóxi ou propóxi).

[0024] A invenção fornece novos derivados de 2-oxo-1,3-oxazolidinil imidazotiadiazol com a Fórmula (I), seus isômeros geométricos, enantiômeros, diastereoisômeros e misturas, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, 1

R O O N (I)

N 3 N 2

R R S N

[0025] Outros aspectos da invenção serão evidentes a partir da descrição detalhada.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0026] A presente invenção se refere a derivados de 2-oxo-1,3-oxazolidinil imidazotiadiazol de acordo com a Fórmula (I),

R O O N (I)

N 3 N 2

R R S N

[0027] em que

[0028] R1 é uma C1-4 alquila opcionalmente substituída por um ou mais substituintes de halogênio;

[0029] R2 é um halogênio ou uma C1-4 alquila opcionalmente substituída por um ou mais halogênios;

[0030] R3 é uma C1-4 alquila substituída por um substituinte de alcóxi.

[0031] Também estão incluídos tautômeros, isômeros geométricos, enantiômeros, diastereômeros, isótopos e misturas, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos compostos de Fórmula (I), bem como qualquer variante deuterada.

[0032] Na modalidade específica, R1 é um i-butila, um n-propila, uma 2,2- difluoropropila, uma 2-cloro-2,2-difluoroetila, uma 2,2-difluoroetila, uma 2,2,2- trifluoroetila ou uma porção de 2-fluoroetila.

[0033] Em uma modalidade mais específica, R1 é um n-propila, uma 2-cloro-2,2- difluoroetila, uma 2,2-difluoropropila um ou uma porção de 2,2,2-trifluoroetila.

[0034] Preferencialmente, R1 é uma 2,2-difluoropropila, uma 2,2,2-trifluoroetila ou uma porção de n-propila.

[0035] Em uma outra modalidade específica, R2 é um átomo de cloro, uma porção de difluorometila, ou uma porção de trifluorometila.

[0036] Em uma modalidade preferencial, R2 representa uma porção de difluorometila ou uma porção de trifluorometila.

[0037] Em uma outra modalidade específica, R3 é metoximetila, um grupo [(2H3)metiloxi]metila, uma metóxi(2H2)metila ou uma porção de [(2H3)metiloxi](2H2)metila.

[0038] Em uma modalidade preferencial, R3 é uma porção de metoximetila.

[0039] Em uma modalidade específica adicional, compostos de Fórmula (I) são aqueles em que: • R1 é uma porção de n-propila, uma 2-cloro-2,2-difluoroetila, uma 2,2- difluoropropila ou uma porção de 2,2,2-trifluoroetila; • R2 representa um átomo de cloro, uma difluorometila, ou uma porção de trifluorometila; • R3 é uma porção de metoximetila, uma porção de [(2H3)metiloxi]metila, uma metóxi(2H2)metila, ou uma porção de [(2H3)metiloxi](2H2)metila.

[0040] Em uma modalidade específica adicional, compostos de Fórmula (I) são aqueles em que: • R1 é uma porção de n-propila; uma porção 2,2-difluoropropila ou 2,2,2- trifluoroetila • R2 é um difluorometila ou uma porção de trifluorometila; • R3 é uma porção de metoximetila, uma [(2H3)metiloxi]metila, uma metóxi(2H2)metila ou uma porção de [(2H3)metiloxi](2H2)metila.

[0041] Em uma modalidade preferencial, compostos de Fórmula (I) são aqueles em que: • R1 é uma porção de n-propila; uma 2,2-difluoropropila ou uma porção de 2,2,2-trifluoroetil; • R2 é uma difluorometila ou uma porção de trifluorometila; • R3 é uma porção de metoximetila.

[0042] Os compostos específicos da presente invenção são aqueles selecionados do grupo que consiste em: • (+)-3-[[2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona; • (-)-3-[[2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona; • (+)-3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona; • (-)-3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona;

• (+)-3-[[2-[dideuterio(metóxi)metil]-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona; • (-)-3-[[2-[dideuterio(metóxi)metil]-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona; • (+)-3-[[2-[dideuterio(trideuteriometoxi)metil]-6- (trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil- oxazolidin-2-ona; • (-)-3-[[2-[dideuterio(trideuteriometoxi)metil]-6- (trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil- oxazolidin-2-ona; • (+)-3-[[2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-(2,2,2-trifluoroetil)oxazolidin-2-ona; • (-)-3-[[2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-(2,2,2-trifluoroetil)oxazolidin-2-ona; • (+)-3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-(2,2,2-trifluoroetil)oxazolidin-2-ona; • (-)-3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-(2,2,2-trifluoroetil)oxazolidin-2-ona; • (-)-5-(2,2-difluoropropil)-3-[[2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil] oxazolidin-2-ona; • (+)-5-(2,2-difluoropropil)-3-[[2-(metoximetil)-6- (trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil] oxazolidin-2-ona; • 3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-(2,2-difluoropropil)oxazolidina-2-ona, enantiômero 1; • 3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-(2,2-difluoropropil)oxazolidina-2-ona, enantiômero 2.

[0043] Os compostos da presente invenção são para uso como medicamento, no tratamento de epilepsia, epileptogênese, distúrbios convulsivos, convulsões, em particular para convulsões refratárias.

[0044] Os parágrafos a seguir fornecem definições das várias porções químicas que compõem os compostos de acordo com a invenção e devem ser aplicadas de maneira uniforme em toda o relatório descritivo e reivindicações, a menos que uma definição expressa de outra forma forneça uma definição mais ampla.

[0045] “C1-4 alquila” se refere a grupos alquila com 1 a 4 átomos de carbono. Esse termo é exemplificado por grupos como metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, isobutila, terc-butila. Grupos “C1-4 alquila” podem ser substituídos por um ou mais substituintes selecionados de halogênio, ou alcóxi.

[0046] Qualquer porção “H” na Fórmula (I) pode ser o isótopo hidrogênio, deutério ou trítio.

[0047] “Alcóxi” se refere ao grupo -OR em que R inclui “C1-4 alquila”.

[0048] “Halogênio” se refere a átomos de flúor, cloro, bromo e iodo, de preferência flúor e cloro.

[0049] Os “sais farmaceuticamente aceitáveis” de acordo com a invenção incluem formas de ácido ou sal de base não tóxicas, terapêuticas, ativas, que os compostos de Fórmula (I) têm a capacidade de formar.

[0050] A forma de sal de adição de ácido de um composto de Fórmula (I) que ocorre em sua forma livre como base pode ser obtida tratando a base livre com um ácido apropriado como um ácido inorgânico, por exemplo, um hidro-hálico como clorídrico ou bromídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico e similares; ou um ácido orgânico, como, por exemplo, acético, trifluoroacético, hidroxiacético, propanoico, lático, pirúvico, malônico, succínico, maleico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, metanossulfônico, etanossulfônico, benzenossulfônico, p-toluenossulfônico, ciclâmico, salicílico, p-aminosalicílico, pamoico e similares.

[0051] Os compostos de Fórmula (I) contendo prótons ácidos podem ser convertidos em suas formas de sal de adição de base não tóxicas terapeuticamente ativas, por exemplo, sais de metal ou amina, por tratamento com bases orgânicas e inorgânicas apropriadas. As formas de sal de base apropriadas incluem, por exemplo, sais de amônio, sais de metais alcalinos e alcalino-terrosos, por exemplo, lítio, sódio, potássio, magnésio, sais de cálcio e similares, sais com bases orgânicas, por exemplo, N-metil-D-glucamina, sais de hidrabamina e sais com aminoácidos como, por exemplo, arginina, lisina e similares.

[0052] Em contrapartida, as ditas formas de sal podem ser convertidas nas formas livres por tratamento com uma base ou ácido apropriado.

[0053] Os compostos da Fórmula (I) e seus sais podem estar na forma de um solvato, que está incluído no escopo da presente invenção. Tais solvatos incluem, por exemplo, hidratos, alcoolatos e similares.

[0054] Os compostos de Fórmula (I) e/ou seus intermediários podem ter pelo menos um centro estereogênico em sua estrutura. Esse centro estereogênico pode estar presente em uma configuração R ou S, em que a dita notação R e S é usada em correspondência com as regras descritas em Pure Appl. Chem., 45 (1976) 11 a 30. A invenção também se refere a todas as formas estereoisoméricas, como formas enantioméricas e diastereoisoméricas dos compostos de Fórmula (I) ou misturas dos mesmos (incluindo todas as possíveis misturas de estereoisômeros). No que diz respeito à presente invenção, a referência a um composto ou compostos pretende abranger esse composto em cada uma de suas possíveis formas isoméricas e misturas dos mesmos, a menos que a forma isomérica específica seja referida especificamente. A expressão “enantiomericamente puro”, como usado aqui, se refere a compostos que têm excesso enantiomérico (ee) superior a 95%.

[0055] Os compostos de acordo com a presente invenção podem existir em diferentes formas polimórficas. Embora não explicitamente indicado na Fórmula acima, essas formas devem ser incluídas no escopo da presente invenção.

[0056] Os compostos de Fórmula (I) de acordo com a invenção podem ser preparados analogamente aos métodos convencionais, como entendido pelo versado na técnica de química orgânica sintética.

[0057] De acordo com uma modalidade, compostos com a Fórmula geral (I) podem ser preparados por reação de um composto da Fórmula (II) com uma ureia da Fórmula (III) de acordo com a equação:

(III) (I) (II)

[0058] em que R1 e R2 têm os mesmos significados como definidos acima para compostos de Fórmula (I).

[0059] Essa reação pode ser realizada com o uso de um ácido como o ácido p- toluenossulfônico em um solvente aprótico como sulfolano à alta temperatura.

[0060] Os compostos de Fórmula (II) podem ser preparados por hidroximetilação de um composto de Fórmula (IV) de acordo com a equação: (IV) (II)

[0061] em que R2 tem a mesma definição como definido acima para os compostos de Fórmula (I).

[0062] Essa reação pode ser realizada com o uso de um agente de formilação como paraformaldeído sob condições ácidas em um solvente polar como dioxano a 100 °C, ou de acordo com qualquer outro método conhecido pelo versado na técnica.

[0063] Os compostos de Fórmula (IV) podem ser sintetizados por reação de um composto de Fórmula (V) com um derivado de bromo da Fórmula (VI) de acordo com a equação: (VI) (IV) (V)

[0064] em que R2 tem a mesma definição como descrita acima para os compostos de Fórmula (I).

[0065] Essa reação pode ser realizada com o uso de procedimentos descritos na literatura ou conhecidos pelo versado na técnica.

[0066] Os compostos de Fórmula (V) e os compostos de Fórmula (VI) estão disponíveis comercialmente ou podem ser sintetizados de acordo com qualquer método conhecido pelo versado na técnica.

[0067] De acordo com uma modalidade, os compostos de Fórmula (III) podem ser preparados por ciclização de um composto de Fórmula (VII) de acordo com a equação: (III) (VII)

[0068] Essa reação pode ser realizada com 1,1’-carbonildiimidazol em um solvente polar como tetra-hidrofurano na presença de uma base como hidreto de sódio à temperatura ambiente ou com o uso de procedimentos conhecidos pelo versado na técnica.

[0069] Os compostos de Fórmula (VII) podem ser preparados por redução de um composto de Fórmula (VIII) de acordo com a equação (VIII) (VII)

[0070] em que R1 tem a mesma definição como definido acima.

[0071] Essa reação pode ser realizada usando um agente redutor, como, sem limitação, hidrogênio na presença de um catalisador como paládio sobre carvão vegetal em um solvente polar como etanol ou por outros procedimentos conhecidos pelo versado na técnica.

[0072] Os compostos de Fórmula (VIII) podem ser preparados a partir de aldeídos comercialmente disponíveis ou álcoois, em que R1 tem a mesma definição como acima definido de acordo com qualquer sequência de reação conhecida pelo versado na técnica.

[0073] Os compostos da presente invenção são para uso como medicamento, no tratamento de epilepsia, epileptogênese, distúrbios convulsivos, convulsões, em particular para convulsões refratárias.

[0074] As convulsões podem ser classificadas como refratárias quando um paciente falha em obter liberdade de convulsão por 12 meses ou mais do tratamento de ponta com dois ou mais medicamentos antiepiléticos em doses máximas toleradas. A Liga Internacional Contra a Epilepsia (ILAE) definiu epilepsia resistente a medicamentos como “falha em ensaios adequados de dois esquemas de DAE tolerados e escolhidos e usados apropriadamente e usados (seja como monoterapias ou em combinação) para obter liberdade de convulsão sustentada”.

[0075] Os métodos da invenção compreendem a administração a um mamífero (de preferência um humano) sofrendo das condições ou distúrbios mencionados acima, de um composto de acordo com a invenção em uma quantidade suficiente para aliviar ou prevenir o distúrbio ou condição.

[0076] O composto é convenientemente administrado em qualquer forma de dosagem unitária adequada, sem limitação, uma contendo 1 a 2.000 mg, preferencialmente 1 a 1.000 mg, com mais preferência 1 a 500 mg de ingrediente ativo por forma de dosagem unitária.

[0077] O termo “tratamento”, conforme usado aqui, inclui tratamento curativo e tratamento profilático.

[0078] Por “curativo” significa eficácia no tratamento de um episódio sintomático atual de um distúrbio ou condição.

[0079] Por “profilático” entende-se a prevenção da ocorrência ou recorrência de um distúrbio ou condição.

[0080] O termo “epilepsia”, conforme usado aqui, se refere a uma condição neurológica crônica caracterizada por convulsões epilépticas recorrentes e não provocadas. Uma convulsão epiléptica é a manifestação de uma descarga sincronizada excessiva e anormal de um conjunto de neurônios cerebrais; suas manifestações clínicas são repentinas e transitórias. O termo “epilepsia”, conforme usado aqui, também pode se referir a um distúrbio da função cerebral caracterizado pela ocorrência periódica de convulsões. As convulsões podem ser “não-epilépticas” quando evocadas em um cérebro normal por condições como febre alta ou exposição a toxinas ou “epilépticas” quando evocadas sem provocação evidente.

[0081] O termo “convulsão”, conforme usado aqui, se refere a uma alteração transitória do comportamento devido ao disparo desordenado, síncrono e rítmico de populações de neurônios cerebrais.

[0082] Um outro aspecto da presente invenção se refere a uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula (I) em combinação com um diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável.

[0083] É claro que a atividade em qualquer uma das indicações acima mencionadas pode ser determinada pela realização de ensaios clínicos adequados de uma maneira conhecida por um versado na técnica relevante para a indicação específica e/ou na concepção de ensaios clínicos em geral.

[0084] Para o tratamento de doenças, os compostos de Fórmula (I) ou os seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico podem ser usados em uma dosagem diária eficaz e administrados na forma de uma composição farmacêutica.

[0085] Portanto, outra modalidade da presente invenção se refere a uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo em combinação com um diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável.

[0086] Para preparar uma composição farmacêutica de acordo com a invenção, um ou mais dos compostos de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo são intimamente misturados com um diluente ou carreador farmacêutico de acordo com técnicas convencionais de composição farmacêutica conhecidas pelo versado na técnica.

[0087] Os diluentes e veículos adequados podem assumir uma ampla variedade de formas, dependendo da via de administração desejada, por exemplo, oral, retal, parentérica ou intranasal.

[0088] As composições farmacêuticas que compreendem compostos de acordo com a invenção podem, por exemplo, ser administradas por via oral, parentérica, isto é, por via intravenosa, intramuscular ou subcutânea, intratecal, transdérmica (adesivo), por inalação ou intranasalmente.

[0089] As composições farmacêuticas adequadas para administração oral podem ser sólidas ou líquidas e podem, por exemplo, estar na forma de comprimidos, pílulas, drágeas, cápsulas de gelatina, soluções, xaropes, pastilhas elásticas e similares.

[0090] Para este fim, o ingrediente ativo pode ser misturado com um diluente inerte ou um carreador não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, como amido ou lactose. Opcionalmente, essas composições farmacêuticas também podem conter um aglutinante como celulose microcristalina, goma tragacanto ou gelatina, um desintegrante como ácido algínico, um lubrificante como estearato de magnésio, um deslizante como dióxido de silício coloidal, um adoçante como sacarose ou sacarina, ou agentes corantes ou um agente aromatizante, como hortelã-pimenta ou salicilato de metila.

[0091] A invenção também contempla composições que podem liberar a substância ativa de maneira controlada.

[0092] As composições farmacêuticas que podem ser usadas para administração parentérica estão na forma convencional, como soluções ou suspensões aquosas ou oleosas, geralmente contidas em ampolas, seringas descartáveis, frascos de vidro ou plástico ou recipientes para infusão.

[0093] Além do ingrediente ativo, essas soluções ou suspensões também podem opcionalmente conter um diluente estéril, como água para injeção, uma solução salina fisiológica, óleos, polietileno glicóis, glicerina, propileno glicol ou outros solventes sintéticos, agentes antibacterianos como álcool benzílico, antioxidantes como ácido ascórbico ou bissulfito de sódio, agentes quelantes como ácido etileno diamina-tetra- acético, tampões como acetatos, citratos ou fosfatos e agentes para ajustar a osmolaridade, como cloreto de sódio ou dextrose.

[0094] Estas formas farmacêuticas são preparadas com o uso de métodos que são rotineiramente usados pelos farmacêuticos.

[0095] A quantidade de ingrediente ativo nas composições farmacêuticas pode encontrar-se dentro de uma ampla faixa de concentrações e depende de uma variedade de fatores como o sexo, idade, peso e condição médica do paciente, bem como o método de administração. Assim, a quantidade de composto de Fórmula (I)

nas composições para administração oral é de pelo menos 0,5% em peso e pode ser de até 80% em peso em relação ao peso total da composição.

[0096] De acordo com a invenção, também foi verificado que os compostos de Fórmula (I) ou os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem ser administrados sozinhos ou em combinação com outros ingredientes farmaceuticamente ativos. Exemplos não limitativos de tais compostos adicionais que podem ser citados para uso em combinação com os compostos de acordo com a invenção são antivirais, anti-espásticos (por exemplo, baclofeno), antieméticos, agentes antimaníacos para estabilizar o humor, analgésicos (por exemplo, aspirina, ibuprofeno, paracetamol), narcóticos analgésicos, anestésicos tópicos, analgésicos opioides, sais de lítio, antidepressivos (por exemplo, mianserina, fluoxetina, trazodona), antidepressivos tricíclicos (por exemplo, imipramina, desipramina), anticonvulsivantes (por exemplo, ácido valpróico, carbamazepina, fenitoína), antipsicóticos (por exemplo, risperidídeos) benzodiazepínicos (por exemplo, diazepam, clonazepam), fenotiazinas (por exemplo, clorpromazina), bloqueadores dos canais de cálcio, anfetamina, clonidina, lidocaína, mexocaína, mexiletina, capsaicina, cafeína, quetiapina, antagonistas da serotonina, β- bloqueadores, antiarrítmicos, triptanos e derivados do triptano.

[0097] Para composições orais, a dosagem diária está na faixa de 1 mg a 2.000 mg de compostos de Fórmula (I). Preferencialmente na faixa de 1 mg a 1.000 mg de compostos de Fórmula (I), com mais preferência de 1 mg a 500 mg.

[0098] Nas composições para administração parentérica, a quantidade de composto de Fórmula (I) presente é de pelo menos 0,5% em peso e pode ser de até 33% em peso em relação ao peso total da composição. Para as composições parentéricas preferenciais, a unidade de dosagem está na faixa de 1 mg a 2.000 mg de compostos de Fórmula (I).

[0099] A dose diária pode cair dentro de uma ampla faixa de unidades de dosagem do composto de Fórmula (I) e está geralmente na faixa de 1 a 2.000 mg, preferencialmente 1 a 1.000 mg. No entanto, deve ser entendido que as doses específicas podem ser adaptadas para casos particulares, dependendo das necessidades individuais, a critério do médico.

[0100] Os compostos de ligação às proteínas SV2 fornecidos por esta invenção e seus derivados marcados podem ser úteis como padrões e reagentes na determinação da capacidade dos compostos testados (por exemplo, um potencial farmacêutico) para se ligar às proteínas SV2.

[0101] Os derivados marcados dos ligantes das proteínas SV2 fornecidos por esta invenção também podem ser úteis como radiotraçadores para imagiologia por tomografia de emissão de pósitrons (PET) ou para tomografia computadorizada de emissão de fóton único (SPECT).

[0102] A presente invenção, portanto, fornece ainda ligantes marcados como ferramentas para rastrear bibliotecas químicas para a descoberta de potenciais agentes farmacêuticos, em particular para tratamento e prevenção das condições aqui estabelecidas, com base em uma ligação mais potente às proteínas SV2, para localizar proteínas SV2 nos tecidos e para caracterizar proteínas SV2 purificadas. As proteínas SV2 incluem SV2A, SV2B e SV2C, em que SV2A é o local de ligação do medicamento anti-convulsivo levetiracetam e seus análogos. As isoformas SV2 SV2A, SV2B ou SV2C podem ser derivadas de tecidos, especialmente do cérebro, de qualquer espécie de mamífero, incluindo humanos, ratos ou camundongos. Alternativamente, as isoformas podem ser versões clonadas de qualquer espécie de mamífero, incluindo humanos, ratos e camundongos, expressos heterologicamente e usados para ensaios. O método de triagem compreende expor membranas cerebrais, como membranas cerebrais de mamíferos ou humanos, ou linhas de células que expressam proteínas SV2 ou fragmentos das mesmas, especialmente SV2A e SV2C, mas incluindo SV2B, a um agente putativo e incubar as membranas ou proteínas ou fragmentos e o agente com composto marcado de Fórmula (I). O método compreende ainda determinar se a ligação do composto de Fórmula (I) à proteína é inibida pelo agente putativo, identificando assim parceiros de ligação para a proteína. Assim, os ensaios de triagem permitem a identificação de novos medicamentos ou compostos que interagem com as proteínas SV2. A presente invenção também fornece ligantes fotoativáveis de proteínas SV2.

[0103] Os ligantes marcados também podem ser usados como ferramentas para avaliar o estado de conformação das proteínas SV2 após solubilização, purificação e cromatografia. Os ligantes marcados podem ser marcados direta ou indiretamente. Exemplos de marcadores adequados incluem um marcador radioativo, como 3H, um marcador fluorescente, uma enzima, európio, biotina e outras etiquetas convencionais para ensaios deste tipo.

[0104] Os compostos marcados com a Fórmula (I) são úteis nos métodos como sondas em ensaios para rastrear novos compostos ou agentes que se ligam às proteínas SV2 (SV2A, SV2B e SV2C). Em tais modalidades de ensaio, os ligantes podem ser usados sem modificação ou podem ser modificados de várias maneiras; por exemplo, marcando, como unir covalentemente ou não covalentemente uma porção que direta ou indiretamente fornece um sinal detectável. Em qualquer um desses ensaios, os materiais podem ser rotulados direta ou indiretamente. As possibilidades para marcação direta incluem grupos marcadores, como: marcadores radioativos incluindo, sem limitação, [3H], [14C], [32P], [35S] ou [125I], enzimas como peroxidase e fosfatase alcalina, e marcadores fluorescentes com a capacidade de monitorar a alteração na intensidade da fluorescência, no deslocamento do comprimento de onda ou na polarização da fluorescência, incluindo, entre outros, fluorescência ou rodamina. As possibilidades de marcação indireta incluem biotinilação de um constituinte seguido pela ligação à avidina acoplada a um dos grupos marcadores acima ou o uso de anticorpos anti-ligantes. Os compostos também podem incluir espaçadores ou ligantes nos casos em que os compostos devem ser ligados a um suporte sólido. Para identificar agentes ou compostos que competem ou interagem com ligantes marcados de acordo com a invenção para a ligação às proteínas SV2 (especialmente SV2A e SV2C), células intactas, fragmentos celulares ou de membrana contendo SV2A ou SV2C ou toda a proteína SV2 ou um fragmento da mesma podem ser usados. O agente ou composto pode ser incubado com as células, membranas, proteína ou fragmento SV2 antes, ao mesmo tempo ou após a incubação com levetiracetam marcado ou um análogo ou derivado do mesmo. Os ensaios podem ser modificados ou preparados em qualquer formato disponível,

incluindo ensaios de triagem de alto rendimento (HTS) que monitoram a ligação do levetiracetam ou a ligação de seus derivados ou análogos às proteínas SV2 ou seus fragmentos. Em muitos programas de triagem de medicamentos que testam bibliotecas de compostos, são desejáveis ensaios de alto rendimento para maximizar o número de compostos pesquisados em um determinado período de tempo. Tais ensaios de rastreamento podem usar células intactas, fragmentos celulares ou membranas contendo SV2, bem como de células- sistemas livres ou livres de membrana, como pode ser derivado com purificadas ou proteínas semi-purificadas. A vantagem do ensaio com fragmento de membrana contendo proteínas e peptídeos SV2 ou SV2 purificados é que os efeitos da toxicidade celular e/ou biodisponibilidade do composto de teste podem ser geralmente ignorados, sendo o ensaio focado principalmente no efeito do fármaco no alvo molecular como pode se manifestar em uma inibição, por exemplo, da ligação entre duas moléculas. O ensaio pode ser formulado para detectar a capacidade de um agente ou composto de teste para inibir a ligação do ligante marcado de acordo com a invenção ao SV2 ou a um fragmento de SV2 ou a levetiracetam marcado ou seus derivados ou análogos a SV2 ou a um fragmento de SV2. proteína. A inibição da formação de complexos pode ser detectada por uma variedade de técnicas, como ensaios de filtração, Flashplates (Perkin Elmer), ensaios de proximidade de cintilação (SPA, GE). Para rastreamentos de alto rendimento (HTS), o ensaio de proximidade de cintilação que utiliza microesferas revestidas com membranas biológicas ou placas de flash revestidas com membranas biológicas são métodos poderosos que não requerem etapas de separação ou lavagem.

[0105] Um problema que pode ser enfrentado ao desenvolver compostos para uso em terapia é a capacidade de certos compostos (medicamentos perpetradores), que podem ser coadministrados em conjunto com os compostos da presente invenção (medicamentos vítimas), para induzir enzimas CYP450, em particular CYP3A4/5. A indução de tais enzimas pelos medicamentos agressores pode impactar a exposição do medicamento vítima, quando metabolizado principalmente pelas enzimas CYP450 e CYP3A4/5 em particular, alterando potencialmente seu perfil de eficácia. Por conseguinte, é desejável desenvolver compostos com potencial limitado de metabolização pelas enzimas CYP3A4/5.

[0106] A contribuição do CYP3A4/5 para o metabolismo total dos compostos de acordo com a presente invenção foi avaliada calculando a razão entre as depurações de hepatócitos humanos na ausência e presença de um inibidor seletivo do CYP3A4/5, como a azamulina.

[0107] Quando testados neste ensaio de acordo com o protocolo descrito no presente pedido de patente, os compostos de acordo com a presente invenção exibem uma fração metabolizada pelo CYP3A4/5 (Fm, CYP3A4/5) tipicamente menor que 40%, minimizando o risco de uso de drogas interações medicamentosas quando coadministradas com indutores do CYP450.

SEÇÃO EXPERIMENTAL ABREVIAÇÕES/REAGENTES RECORRENTES

[0108] Ac: acetila

[0109] ACN: Acetonitrila

[0110] Salmoura: solução aquosa saturada de cloreto de sódio

[0111] nBu: n-butila

[0112] tBu: terc-butila

[0113] Bz: benzoíla

[0114] CV: volumes ea coluna

[0115] DCM: Diclorometano

[0116] DMF: N,N-dimetilformamida

[0117] DMSO: Dimetilsulfóxido

[0118] Et: etila

[0119] EtOH: Etanol

[0120] Et2O: éter dietílico

[0121] EtOAc: acetato de etila

[0122] h: hora

[0123] HPLC: Cromatografia líquida de alta pressão

[0124] LC: Cromatografia Líquida

[0125] LCMS: Espectrometria de Massa Cromatografia Líquida

[0126] MeOH: Metanol

[0127] min.: minutos

[0128] RMN: ressonância magnética nuclear

[0129] iPrOH: isopropanol

[0130] PTSA: ácido p-toluenossulfônico

[0131] RT: temperatura ambiente

[0132] SFC: Cromatografia de Fluido Supercrítico

[0133] THF: Tetra-hidrofurano

[0134] TLC: Cromatografia em Camada Fina

[0135] No presente pedido, é mencionado o nome IUPAC (ou o nome gerado junto a Accelerys Draw 4.0) dos compostos.

MÉTODOS ANALÍTICOS

[0136] Todas as reações envolvendo reagentes sensíveis ao ar ou à umidade foram realizadas sob atmosfera de nitrogênio ou argônio com o uso de solventes secos e material de vidro. Os experimentos que requerem irradiação de micro-ondas são realizados em um forno de micro-ondas Biotage Initiator Sixty atualizado com a versão 2.0 do software operacional. Experimentos são realizados para atingir a temperatura necessária o mais rápido possível (potência máxima de irradiação: 400 W, sem refrigeração externa). Solventes e reagentes comerciais foram geralmente usados sem purificação adicional, incluindo solventes anidros quando apropriado (geralmente produtos Sure-Seal™ da Aldrich Chemical Company ou AcroSeal™ da ACROS Organics). Em geral, as reações foram seguidas por cromatografia em camada fina, HPLC ou análises por espectrometria de massa.

[0137] As análises de HPLC são realizadas com o uso de um sistema de HPLC Agilent série 1100 montado com uma coluna Waters XBridge MS C18, 17h, 150x4,6 mm. O gradiente varia de 100% de solvente A (solução de água/ACN/formato de amônio 85/5/10 (em v/v/v)) a 100% de solvente B (solução de água/ACN/formato de amônio 5/85/10 (em v/v/v) em 6 minutos, com uma retenção a 100% de B de 5 minutos, a taxa de fluxo é ajustada em 8 ml/min por 6 minutos e depois aumentada em 3 ml/min, durante 2 minutos, com uma retenção em 3 ml/min durante 3 minutos. Uma fração de 1/25 é usada imediatamente antes da fonte de API. A cromatografia é realizada a 45 °C. A solução de formato de amônio (pH~8,5) é preparada por dissolução de formato de amônio (630 mg) em água (1 l) e adição de hidróxido de amônio a 30% (500 µl).

[0138] Será evidente para os versados na técnica que diferentes tempos de retenção podem ser obtidos para dados de LC se diferentes condições analíticas forem usadas.

[0139] As medições espectrométricas de massa no modo LCMS são realizadas da seguinte forma: - Para eluição básica, as análises são realizadas com o uso de:

[0140] um espectrômetro de massa quadrupolo simples QDA Waters é usado para análise LCMS. Esse espectrômetro é equipado com uma fonte ESI e um UPLC Acquity Hclass com detector de matriz de diodos (200 a 400 nm). Os dados são adquiridos em uma varredura completa do MS de m/z 70 a 800 no modo positivo com uma eluição básica. A separação da fase reversa é realizada a 45 °C em uma coluna Waters Acquity UPLC BEHC18 de 1,7 µm (2,1 x 50 mm) para eluição básica. A eluição em gradiente é realizada com água/ACN/formato de amônio (95/5/63 mg/l) (solvente A) e ACN/água/formato de amônio (95/5/63 mg/l) (solvente B). Volume de injeção: 1 µl. Fluxo total em MS. PROGRAMA BÁSICO “4 MIN” Tempo (min) A (%) B (%) Fluxo (ml/min) 0 99 1 0,4 0,3 99 1 0,4

3.2. 00 100 0,4 3,25 00 100 0,5 4 00 100 0,5 PROGRAMA BÁSICO “10 MIN” Tempo (min) A (%) B (%) Fluxo (ml/min)

0 99 1 0,4 0,8 99 1 0,4

5.3 00 100 0,4 5,35 00 100 0,5 7,30 00 100 0,5 - Para eluição ácida, as análises são realizadas usando:

[0141] um espectrômetro de massa quadrupolo simples QDA Waters é usado para análise LCMS. Esse espectrômetro é equipado com uma fonte ESI e um UPLC Acquity Hclass com detector de matriz de diodos (200 a 400 nm). Os dados são adquiridos em uma varredura completa de MS de m/z 70 a 800 no modo positivo com uma eluição ácida. A separação da fase reversa é realizada a 45 °C em uma coluna Waters Acquity UPLC HSS T3 de 1,8 µm (2,1 x 50 mm) para eluição ácida. A eluição em gradiente é feita com água/ACN/TFA (95/5/0,5 ml/l) (solvente A) e ACN (solvente B). Volume de injeção: 1 µl. Fluxo total em MS. PROGRAMA ÁCIDO “4 MIN” Tempo (min) A (%) B (%) Fluxo (ml/min) 0 99 1 0,4 0,3 99 1 0,4

3.2. 5 95 0,4 3,25 5 95 0,5 4 5 95 0,5 PROGRAMA ÁCIDO “10 MIN” Tempo (min) A (%) B (%) Fluxo (ml/min) 0 99 1 0,4 0,8 99 1 0,4

5.3 5 95 0,4 5,35 5 95 0,5 7,30 5 95 0,5

[0142] Os materiais em bruto podem ser purificados por cromatografia de fase normal, cromatografia de fase reversa (ácida ou básica), separação quiral ou recristalização.

[0143] A cromatografia de fase reversa normal é realizada com o uso de colunas de gel de sílica (gel de sílica de malha 100:200 ou colunas Puriflash ® -50SIHC-JP da Interchim).

CROMATOGRAFIA PREPARATIVA EM FASE REVERSA É REALIZADA DA SEGUINTE FORMA: - A purificação de LCMS (modo Básico, LCMS prep) como uso de um espectrômetro de massa com triplo quadrupolo SQD ou QM Waters é usada para purificação de LCMS. Esse espectrômetro está equipado com uma fonte ESI e uma bomba quaternária Waters com controlador Prep LC com detector de diodos (210 a 400 nm).

[0144] Parâmetros de MS: tensão capilar ESI 3 kV. Tensão de Cone e Extrator 10. Temperatura de bloco de fonte 120 °C. Temperatura de dessolvatação 300 °C. Os dados são adquiridos em uma varredura completa de MS de m/z 100 a 700 em modo positivo com uma eluição ácida ou básica.

[0145] Parâmetros de LC: a separação de fase reversa é realizada à temperatura ambiente em uma coluna XBridge prep OBD C18 (5 µm, 30 x 50 mm) (eluição básica). A eluição em gradiente é realizada com água (solvente A), ACN (solvente B), bicarbonato de amônio em água 8 g/l + 500 ml/l de NH 4OH a 30% (solvente C) (pH~8,5). Taxa de fluxo de HPLC: 35 ml/min a 60 ml/min, volume de injeção: 1 ml. A taxa de divisão é definida em +/- 1/6000 para MS.

Tempo (min) A (%) B (%) C (%) Fluxo (ml/min) 0 85 5 10 35 1 85 5 10 35 7 5 85 10 35 9 5 95 00 60 12 5 95 00 60 12,5 85 5 10 35 16 85 5 10 35

[0146] Separações Cromatográficas Preparativas Quirais são realizadas com o uso de cromatografia de fase líquida ou de cromatografia de fluido supercrítico (SFC) com várias misturas de álcoois inferiores e alcanos cíclicos ramificados lineares C 5 a C8, ou em 360 ml/min. As misturas de solventes, bem como as colunas, são descritas em procedimentos individuais.

[0147] Os produtos foram geralmente secos sob vácuo antes das análises finais e submetidos a testes biológicos.

[0148] Os espectros de RMN são registrados em um espectrômetro de RMN Ultrashield BRUKER AVANCEIII 400 MHz equipado com uma estação de trabalho Windows 7 Professional executando o software Topspin 3.2 e uma sonda de banda larga de ressonância dupla de 5 mm (PABBI 1H/19F-BB Z-GRD Z82021/0075) ou 1 sonda de ressonância tripla de 3 mm (PATXI 1H/D-13C/15N Z-GRD Z868301/004). Os compostos foram estudados em solução de DMSO-d6, ou CDCl3 a uma temperatura de sonda de 26,8 °C (300 K) e a uma concentração de 10 mg/ml. O instrumento está travado no sinal de deutério de DMSO-d6, ou CDCl3. Os desvios químicos são dados em ppm no campo inferior do TMS (tetrametilsilano), tomado como padrão interno.

[0149] As rotações ópticas ([α]D) foram medidas em um polarímetro PERKIN- ELMER 341 em uma cubeta (l=1 dm) na concentração de 10 mg/ml, a uma temperatura mencionada nos exemplos específicos, a 589 nm (lâmpada de sódio).

[0150] Os exemplos a seguir ilustram como os compostos cobertos pela Fórmula (I) podem ser sintetizados. Os mesmos são fornecidos apenas para fins ilustrativos e não se destinam, nem devem ser interpretados, como limitando a invenção de qualquer maneira. Os versados na técnica compreenderão que variações e modificações de rotina dos exemplos a seguir podem ser realizadas sem exceder o espírito ou o escopo da invenção. EXEMPLO 1. SÍNTESE DE (+)-3-[[2-(METOXIMETIL)-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-PROPIL- OXAZOLIDIN-2-ONA 1 E (-)-3-[[2-(METOXIMETIL)-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-PROPIL-

OXAZOLIDIN-2-ONA 2

1.1 SÍNTESE DE 1-NITROPENTAN-2-OL I

[0151] Uma mistura de butiraldeído (CAS: 123-72-8, 1 eq., 5,0 g, 69,3 mmoles) e carbonato de potássio (1 eq., 9,68 g, 69,3 mmoles) em nitrometano (95 ml) foi agitada a 50 °C por 5 h. A mistura foi resfriada até à temperatura ambiente e foi adicionado acetato de etila (100 ml). A camada orgânica foi lavada com água (duas vezes), seca sobre MgSO4, filtrada e evaporada até à secura para render um óleo castanho. A mistura crua foi purificada por cromatografia flash Biotage Isolera Four (coluna de sílica gel de 100 g KP-SNAP com diclorometano a 100% sobre 12 CV) e as frações puras foram evaporadas até a secura para render 1-nitropentan-2-ol I (4,7 g, 35,0 mmoles) como um óleo incolor.

[0152] Rendimento: 51%

[0153] RMN a 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 5,26 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 4,64 (dd, J = 12,2, 3,2 Hz, 1H), 4,31 (dd, J = 12,1, 9,3 Hz, 1H), 4,09 (ddt, J = 8,9, 5,9, 3,2 Hz, 1H), 1,47- 1,23 (m, 4H), 0,95- 0,77 (m, 3H).

1.2 SÍNTESE DE 1-AMINOPENTAN-2-OL II

[0154] Uma solução de 1-nitropentan-2-ol, I (1 eq., 200 mg, 1,5 mmol) em etanol (8 ml) foi hidrogenada sobre um cartucho de Pd/C 10%, a 50 °C, sob pressão de H2 de (50 bar) em um reator H-Cube durante 1 h (fluxo: 1 ml/min, 7,5 ciclos). A mistura crua foi evaporada até à secura e seca sob alto vácuo para render 1-aminopentan-2- ol II (140 mg, 1,22 mmols) como um óleo incolor. O composto cru obtido foi usado diretamente na próxima etapa sem qualquer purificação adicional.

[0155] Rendimento: 81%

[0156] RMN a 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,37-3,25 (m, 1H), 2,52 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 2,37 (dd, J = 12,6, 7,3 Hz, 1H), 1,45- 1,20 (m, 4H), 0,93- 0,79 (m, 3H).

1.3 SÍNTESE DE 5-PROPILOXAZOLIDIN-2-ONA III

[0157] A uma solução de 1-aminopentan-2-ol II (1 eq., 1,0 g, 9,2 mmoles) e 1,1’- carbildildiimidazol (1 eq., 1,6 g, 9,7 mmoles) em THF (20 ml) foi adicionado hidreto de sódio (0,1 eq., 23 mg, 0,92 mmol) e a mistura foi agitada a 25 °C durante 24 h. Acetato de etila e água foram adicionados à mistura de reação e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (duas vezes), lavada com água e salmoura, seca sobre MgSO4, filtrada e evaporada até à secura para render um óleo amarelo. O produto cru foi purificado por cromatografia flash Biotage Isolera Four (coluna de sílica gel de 50 g KP-SNAP em um gradiente de metanol a 0% a 10% em diclorometano acima de 10 CV) e as frações puras foram evaporadas até a secura para render 5- propilaxazolidina-2-ona III (990 mg, 7,59 mmoles) como um sólido branco.

[0158] Rendimento: 82%

[0159] LC/MS: [M+H]+ = 130,1

[0160] RMN a 1H (400 MHz, CDCl3): δ 5,98 (s, 1H), 4,73-4,55 (m, 1H), 3,65 (td, J = 8,4, 0,8 Hz, 1H), 3,22 (ddd, J = 8,2, 7,2, 0,9 Hz, 1H), 1,87- 1,70 (m, 1H), 1,69- 1,32 (m, 3H), 0,96 (t, J = 7,3 Hz, 3H).

1.4 SÍNTESE DE [2-(METOXIMETIL)-6-(TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1- B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL] METANOL V

[0161] Em um tubo vedado, 2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol IV (CAS: 1294001-16-3, pedido de patente WO2012/143117, 1 eq., 2,0 g, 8,4 mmoles), paraformaldeído (6,0 eq., 1,52 g, 50,6 mmoles) e uma solução aquosa de ácido clorídrico (2N) (1,0 equiv., 4,2 ml, 8,4 mmoles) foram misturados em 1,4-dioxano (4 ml). A mistura foi agitada a 100 °C por 18 h e a reação foi verificada por LC/MS. A mistura crua foi resfriada até à temperatura ambiente e uma solução aquosa saturada de NaHCO3 foi adicionado até pH = 6 a 7. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila (três vezes) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre MgSO4, filtradas e evaporadas até à secura. O produto cru foi purificado por cromatografia flash Biotage Isolera Four (coluna de sílica gel de 100 g KP-SNAP em um gradiente de metanol a 0% a 10% em diclorometano acima de 15 CV) para render [2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il] metanol (1,06 g, 3,5 mmoles) V como um sólido bege. O composto foi usado diretamente na próxima etapa sem qualquer purificação adicional.

[0162] Rendimento: 41%

[0163] LC/MS: [M+H]+ = 268,2

[0164] RMN a 1H (400 MHz, CDCl3): δ 5,04 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 4,77 (s, 2H), 3,53 (s, 3H), 2,32 (t, J = 6,3 Hz, 1H).

1.5 SÍNTESE DE (+)-3-[[2-(METOXIMETIL)-6-(TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1- B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-PROPIL-OXAZOLIDIN-2-ONA 1 E (-)-3-[[2- (METOXIMETIL)-6-(TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5- IL]METIL]-5-PROPIL-OXAZOLIDIN-2-ONA 2

[0165] A uma mistura de [2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metanol V (1 eq., 200 mg, 0,74 mmol) e 5-propilaxazolidin-2-ona III (2 eq., 190 mg, 1,48 mmol) em sulfolano (3 ml), foi adicionado ácido p- toluenossulfônico mono-hidratado (1 eq., 152 mg, 0,74 mmol) e a mistura foi agitada a 110 °C por 16 h. A mistura crua foi purificada diretamente por HPLC preparativa de fase reversa (condições básicas) para render um sólido bege (155 mg do racemato) que foi purificado por SFC quiral (Fase WhelkO1 (R, R), 50 x 227 mm/CO2/Cossolvente EtOH 20%/30 °C/360 ml/min). As frações mais puras foram evaporadas até a secura para render (+)-3-[[2-(metoximetil)-6- (trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona 1 (primeiro eluído, 56 mg, 0,15 mmol) e (-)-3-[[2-(metoximetil)-6- (trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona 2 (segundo eluído, 56 mg, 0,15 mmol) como óleos incolores.

[0166] Rendimentos: 20%

[0167] LC/MS: [M+H]+ = 379,4

[0168] RMN a 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 4,84 (s, 2H), 4,74 (qd, J = 15,8, 1,2 Hz, 2H), 4,44 (dtd, J = 8,3, 7,0, 5,4 Hz, 1H), 3,54 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 3,43 (s, 3H), 3,08 (dd, J = 8,4, 6,9 Hz, 1H), 1,62- 1,45 (m, 2H), 1,28 (dddd, J = 16,1, 13,6, 8,4, 4,0 Hz, 1H), 0,85 (t, J = 7,4 Hz, 3H).

[0169] Alfa-D (1, MeOH, 10 mg/ml, 26,5 °C) = +27,0

[0170] Alfa-D (2, MeOH, 10 mg/ml, 26,5 °C) =-26,2 EXEMPLO 2. (+)-3-[[6-(DIFLUOROMETIL)-2-(METOXIMETIL)IMIDAZO[2,1- B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-PROPIL-OXAZOLIDIN-2-ONA 3 E (-)-3-[[6- (DIFLUOROMETIL)-2-(METOXIMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5- IL]METIL]-5-PROPIL-OXAZOLIDIN-2-ONA 4

2.1 SÍNTESE DE 6-(DIFLUOROMETIL)-2- (METOXIMETIL)IMIDAZO[2,1B][1,3,4]TIADIAZOL VII

[0171] A uma solução de 5-(metoximetil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina VI (CAS: 15884- 86-3, 1,0 eq., 6,5 g, 45 mmoles) em DMF (100 ml), a 100 °C, adicionou-se por gotejamento uma solução de 3-bromo-1,1-difluoro-propan-2-ona (CAS: 883233-85-0, 1,05 eq, 8,1 g, 47 mmoles) em DMF (5 ml). A mistura de reação foi aquecida a 100 °C durante 3 h e a conclusão foi verificada por LC/MS. Uma solução aquosa saturada de NaHCO3 foi adicionada e a camada orgânica foi extraída com acetato de etila (três vezes). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (cinco vezes), secas sobre MgSO4, filtradas e evaporadas até à secura para render um sólido castanho (7,6 g). O produto cru foi purificado por cromatografia flash Biotage Isolera Four (coluna de sílica gel de 100 g KP-SNAP em um gradiente de metanol a 0% a 5% em diclorometano acima de 12 CV) e as frações puras foram evaporadas sob alto vácuo para render 6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol VII (3,95 g, 17,8 mmoles) como um sólido laranja.

[0172] Rendimento: 40%

[0173] LC/MS: [M+H]+ = 220,2

[0174] RMN a 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,53 (t, J = 2,2 Hz, 1H), 7,01 (t, J = 54,6 Hz, 1H), 4,83 (s, 2H), 3,43 (s, 3H)

2.2 SÍNTESE DE [6-(DIFLUOROMETIL)-2-(METOXIMETIL)IMIDAZO[2,1- B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL] METANOL VIII

[0175] Em um tubo vedado, 6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol VII (1,0 eq., 3,95 g, 18,0 mmoles), paraformaldeído (6,0 eq., 3,24 g, 108 mmoles) e uma solução aquosa de ácido clorídrico (2N) (0,9 equiv., 8,1 ml, 16,2 mmoles) foram misturadas em 1,4-dioxano (8 ml). A mistura foi agitada a 100 °C durante 3,5 h e a reação foi verificada por LC/MS. A mistura crua foi resfriada até à temperatura ambiente e uma solução aquosa saturada de NaHCO3 foi adicionada até pH = 6 a 7. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila (três vezes) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre MgSO4, filtradas e evaporadas até à secura. O produto cru foi purificado por cromatografia flash Biotage Isolera Four (coluna de sílica gel de 100 g KP-SNAP em um gradiente de metanol a 0% a 10% em diclorometano acima de 15 CV) para render um óleo amarelo (3 g) que foi purificado uma segunda vez por fase reversa HPLC (Kromasil- eternidade XT C18 10 µm/ gradiente de ACN/H2O/NH4OH de 20/80/0,1 a 50/50/0,1). As frações mais puras foram evaporadas até a secura para render [6-(difluorometil)- 2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il] metanol VIII (2 g, 8,02 mmoles) como um sólido branco.

[0176] Rendimento: 45%

[0177] LC/MS: [M+H]+ = 250,2

[0178] RMN a 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,11 (t, J = 53,6 Hz, 1H), 5,47 (t, J = 5,4

Hz, 1H), 4,84 (s, 2H), 4,79 (d, J = 5,5, Hz, 2H), 3,44 (d, J = 0,9 Hz, 3H).

2.3 SÍNTESE DE (+)-3-[[6-(DIFLUOROMETIL)-2-(METOXIMETIL)IMIDAZO[2,1- B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-PROPIL-OXAZOLIDINA-2-ONA 3 E (-)-3-[[6- (DIFLUOROMETIL)-2-(METOXIMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5- IL]METIL]-5-PROPIL-OXAZOLIDIN-2-ONA 4

[0179] A uma mistura de [6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il] metanol VIII (1 eq., 200 mg, 0,8 mmol) e 5-propilaxazolidin-2- ona III (2 eq., 206 mg, 1,6 mmol) em sulfolano (3 ml), foi adicionado ácido p- toluenossulfônico mono-hidratado (1 eq., 152 mg, 0,8 mmol) e a mistura foi agitada a 110 °C por 3,5 h. A mistura crua foi purificada diretamente por HPLC preparativa de fase reversa (condições básicas) para render um sólido bege (216 mg do racemato) que foi purificado por SFC quiral (Fase WhelkO1 (R, R), 50 x 227 mm/CO2/Cossolvente EtOH 20%/30 °C/360 ml/min). As frações mais puras foram evaporadas até a secura para render (+)-3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona 3 (primeiro eluído, 54 mg, 0,15 mmol, 19% de rendimento) e (-)-3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona 4 (segundo eluído, 52 mg, 0,14 mmol, 18% de rendimento) como óleos incolores.

[0180] Rendimentos: 19% (3) e 18% (4)

[0181] LC/MS: [M+H]+ = 361,4

[0182] RMN a 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,12 (t, J = 53,5 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 0,9 Hz, 2H), 4,81-4,66 (m, 2H), 4,46 (dtd, J = 8,4, 7,0, 5,5 Hz, 1H), 3,56 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,44 (s, 3H), 3,09 (dd, J = 8,4, 7,0 Hz, 1H), 1,65- 1,42 (m, 2H), 1,39-1,17 (m, 2H), 0,86 (t, J = 7,3 Hz, 3H).

[0183] Alfa-D (3, MeOH, 10 mg/ml, 27,7 °C) = +17,2 EXEMPLO 3. SÍNTESE DE (+)-3-[[2-[DIDEUTERIO(METOXI) METIL]-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-PROPIL- OXAZOLIDIN-2-ONA 5 E (-)-3-[[2-[DIDEUTERIO(METOXI)METIL]]-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-PROPIL- OXAZOLIDIN-2-ONA 6

3.1 SÍNTESE DE [2-[DIDIDEUTERIO(METOXI)METIL]-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL] METANOL X

[0184] Uma solução de 2-[dideuterio(metóxi)metil]-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol IX (WO2011047860, 1,0 eq., 1,25 g, 5,24 mmoles), paraformaldeído (6,0 equiv., 943 mg, 31,45 mmoles) e ácido clorídrico (1,0 eq., 2,6 ml, 5,24 mmoles) em 1,4-dioxano (2,6 ml) foi agitada a 100 °C durante 18 h. Uma solução aquosa saturada de NaHCO3 foi adicionada e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (3 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre MgSO4, filtradas e evaporadas até à secura para render um óleo amarelo. O produto cru obtido foi purificado por cromatografia flash Biotage Isolera Four (coluna de sílica gel de 50 g KP-SNAP de 100% de diclorometano a 10% de metanol em diclorometano acima de 15CV) para render um sólido marrom que foi purificado por cromatografia de fase reversa no modo básico. A fração mais pura foi evaporada até a secura para render [2-[didideuterio(metóxi)metil]-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metanol X (475 mg, 1,73 mmol) como um sólido branco.

[0185] Rendimento: 33%

[0186] LC/MS: [M+H]+ = 270,01

[0187] RMN a 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 5,56 (s, 1H), 4,77 (s, 2H), 3,44 (s, 3H).

3.2 SÍNTESE DE (+)-3-[[2-[DIDEUTERIO(METOXI)METIL]-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-PROPIL-

OXAZOLIDIN-2-ONA 5 E (-)-3-[[2-[DIDEUTERIO(METOXI)METIL]-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-PROPIL- OXAZOLIDIN-2-ONA 6

[0188] A uma mistura de [2-[didideuterio(metóxi)metil]-6- (trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il] metanol X (1,0 eq., 200 mg 0,74 mmol) e 5-propilaxazolidin-2-ona III (2,0 eq., 190 mg, 1,47 mmoles) em sulfolano (0,2 M, 3,5 ml), foi adicionado ácido p-toluenossulfônico mono-hidratado (1,0 eq., 140 mg, 0,73 mmol) e a mistura foi agitada a 110 °C durante 16 h. O produto cru foi purificado diretamente por cromatografia de fase reversa em condições básicas para render um óleo amarelo (172 mg). A mistura de enantiômeros foi purificada via SFC quiral (W (3 μm) * EtOH 50%- heptano 50%- DEA 0,1%) para render (+)-3-[[2- [dideuterio(metóxi)metil]-6-(trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5- propil-oxazolidin-2-ona 5 (75 mg, 0,20 mmol) e (-)-3-[[2-[didideuterio(metóxi)metil]-6- (trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona 6 (72 mg, 0,19 mmol) como óleos incolores.

[0189] Rendimento global: 52% (26,5% + 25,5%)

[0190] LC/MS: [M+H]+ = 381,11

[0191] RMN a 1H (400 MHz, CDCl3): δ 5,00-4,75 (m, 2H), 4,51-4,40 (m, 1H), 3,51 (s, 4H), 3,04 (dd, J = 8,4, 7,4 Hz, 1H), 1,76- 1,66 (m, 1H), 1,60- 1,50 (m, 1H), 1,48- 1,29 (m, 2H), 0,92 (t, J = 7,3 Hz, 3H).

[0192] Alfa-D (5, MeOH, 10 mg/ml, 25 °C) = +17,6 EXEMPLO 4. SINTESE DE (+)-3-[[2-[DIDEUTERIO (TRIDEUTERIOMETOXI)METIL]- 6-(TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL ]METIL]-5-PROPIL- OXAZOLIDIN-2-ONA 7 E (-)-3-[[2-[DIDEUTERIO(TRIDEUTERIOMETOXI)METIL]-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-PROPIL- OXAZOLIDIN-2-ONA 8

4.1 SÍNTESE DE-[DIDEUTERIO(TRIDEUTERIOMETOXI)METIL]-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL XII

[0193] A uma solução de dideuterio-[6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-2-il] metanol XI (WO2011047860, 1,0 eq., 3,25 g, 13,0 mmoles) em metanol (100 ml), em temperatura ambiente, foi adicionado óxido de prata (1,3 eq., 3,9 g, 16,9 mmoles) e iodometano-d3 (4,0 eq., 3,23 ml, 52,0 mmoles). A mistura de reação foi agitada a 40 °C durante 20 h. A mistura foi então filtrada através de uma almofada de Celite e evaporada até à secura. Uma solução aquosa saturada de NaHCO3 foi adicionada e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (3 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4, filtradas e evaporadas até à secura para render um óleo amarelo que foi purificado por flash de cromatografia de Biotage Isolera Quatro (coluna de gel de sílica de 100 g KP-SNAP de 100% de diclorometano a 5% metanol em diclorometano acima de 15CV) para render 2- [didideuterio(trideuteriometoxi)metil]-6-(trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol XII (2,11 g, 7,4 mmoles) como um sólido branco.

[0194] Rendimento: 57%

[0195] LC/MS: [M+H]+ = 243,08

[0196] RMN a 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,90 (s, 1H).

4.2 SÍNTESE DE [2-[DIDEUTERIO(TRIDEUTERIOMETOXI)METIL]-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL] METANOL XIII

[0197] Uma solução de 2-[dideuterio(trideuteriometoxi)metil]-6- (trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol XII (1,0 eq., 1,0 g, 4,1 mmoles), paraformaldeído (6,0 eq., 743 mg, 24,7 mmoles) e ácido clorídrico (1,0 eq., 4,1 mmol,

2,0 ml) em 1,4-dioxano (2 ml) foi agitada a 100 °C durante 18 h. Uma solução aquosa saturada de NaHCO3 foi adicionada e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (3 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre MgSO4, filtradas e evaporadas até à secura para render um óleo amarelo que foi purificado por meio de cromatografia de fase inversa em modo básico. A fração mais pura foi evaporada até a secura para render [2- [dideuterio(trideuteriometoxi)metil]-6-(trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il] metanol XIII (560 mg, 1,97 mmol) como um sólido branco.

[0198] Rendimento: 48%

[0199] LC/MS: [M+H]+ = 270,01

[0200] RMN a 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 5,30-6,30 (s largo, 1H) 4,77 (d, J = 1,3 Hz, 2H).

4.3 SÍNTESE DE (+)-3-[[2-[DIDEUTERIO(TRIDEUTERIOMETOXI)METIL]-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-PROPIL- OXAZOLIDIN-2-ONA 7 E (-)-3-[[2-[DIDEUTERIO(TRIDEUTERIOMETOXI)METIL]-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-PROPIL- OXAZOLIDIN-2-ONA 8

[0201] A uma mistura de [2-[didideuterio(trideuteriometoxi)metil]-6- (trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il] metanol XIII (1,0 eq., 200 mg 0,73 mmol) e 5-propilaxazolidin-2-ona III (2,0 eq., 190 mg, 1,47 mmol) em sulfolano (0,2 M, 3,5 ml), foi adicionado ácido p-toluenossulfônico mono-hidratado (1,0 eq., 101 mg, 0,53 mmol) e a mistura foi agitada a 110 °C durante 16 h. O produto cru foi purificado por cromatografia de fase reversa em condições básicas para render um óleo amarelo (175 mg). A mistura de enantiômeros foi purificada por SFC quiral (W (3μm) * EtOH 50%- heptano 50%- DEA 0,1%) para render (+)-3-[[2- [dideuterio(trideuteriometoxi)metil]-6-(trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona 7 (47 mg, 0,12 mmol) e (-)-3-[[2- [dideuterio(trideuteriometoxi)metil]-6-(trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona 8 (51 mg, 0,13 mmol) como óleos claros.

[0202] Rendimento global: 35% (17% + 18%)

[0203] LC/MS: [M+H]+ = 384,14

[0204] RMN a 1H (400 MHz, CDCl3): δ 4,95 (dd, J = 15,7, 1,2 Hz, 1H), 4,79 (dd, J = 15,6, 1,2 Hz, 1H), 4,47 (qd, J = 7,7, 5,2 Hz, 1H), 3,49 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,13- 2,95 (m, 1H), 1,70 (dddd, J = 12,8, 9,6, 7,5, 5,2 Hz, 1H), 1,57- 1,49 (m, 1H)), 1,48- 1,28 (m, 2H), 0,93 (t, J = 7,3 Hz, 3H).

[0205] Alfa-D (7, MeOH, 10 mg/ml, 25 °C) = +26,9 EXEMPLO 5. SÍNTESE DE (+)-3-[[2-(METOXIMETIL)-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-(2,2,2- TRIFLUOROETIL)OXAZOLIDIN-2-ONA 9 E (-)-3-[[2-(METOXIMETIL)-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-(2,2,2- TRIFLUOROETIL) OXAZOLIDIN-2-ONA 10

5.1 SÍNTESE DE 4,4,4-TRIFLUORO-1-NITRO-BUTAN-2-OL XIV

[0206] Uma mistura de 3,3,3-trifluoropropanal (1,0 eq., 5,0 g, 44,62 mmoles), carbonato de potássio (1,0 eq., 6,2 g, 44 mmoles) e nitrometano (30 eq., 60,2 ml, 1340 mmoles) foi agitada a 50 °C por 5 h. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente e diluída com água e acetato de etila. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila (3 vezes) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2 vezes), secas sobre MgSO4, filtradas e evaporadas até à secura. O produto cru foi purificado por cromatografia flash Biotage Isolera Four (gradiente de coluna de sílica gel de 100 g KP-SNAP: diclorometano a 100% sobre 10 CV). As frações mais puras foram evaporadas até a secura para render 4,4,4-trifluoro-1-nitro-butan-2-ol XIV (3,8 g, 22 mmoles) como um óleo incolor.

[0207] Rendimento: 49%

[0208] RMN a 1H (400 MHz, CDCl3): δ 4,73 (dddd, J = 12,7, 7,6, 5,0, 3,8 Hz, 1H), 4,58-4,43 (m, 2H), 3,01 (d, J = 5,1 Hz, 1H) 2,60-2,28 (m, 2H).

5.2 SÍNTESE DE 1-AMINO-4,4,4-TRIFLUORO-BUTAN-2-OL XV

[0209] Uma mistura de 4,4,4-trifluoro-1-nitro-butan-2-ol XIV (1,0 eq., 4,8 g, 28 mmoles) em etanol (140 ml) foi hidrogenada com o uso de um reator H-cube equipado com um Cartucho de Ni Raney (vazão 1 ml/min, 50 °C, 50 bar). A mistura foi evaporada até à secura para render 1-amino-4,4,4-trifluoro-butan-2-ol XV (2,5 g, 17 mmoles) como um óleo incolor.

[0210] Rendimento: 63%

[0211] RMN a 1H (400 MHz, CDCl3): δ 3,89 (tt, J = 8,0, 3,9 Hz, 1H), 2,86 (dd, J = 12,8, 3,5 Hz, 1H), 2,62 (dd, J = 12,8, 8,3 Hz, 1H), 2,35- 2,07 (m, 2H).

5.3 SÍNTESE DE 5-(2,2,2-TRIFLUOROETIL) OXAZOLIDIN-2-ONA XVI

[0212] A uma mistura de 1-amino-4,4,4-trifluoro-butan-2-ol XV (1,0 eq., 2,5 g, 17 mmoles) e 1,1’-carbildildiimidazol (1,0 eq., 2,9 g, 18 mmoles) em THF (35 ml) foi adicionado hidreto de sódio (0,1 eq., 42 mg, 1,75 mmoles) e a mistura foi agitada a 25 °C por 16 h. Foram adicionadas algumas gotas de água (neutralização de NaH) e a mistura foi evaporada diretamente até a secura e purificada por cromatografia de fase reversa no modo básico para render 5-(2,2,2-trifluoroetil)oxazolidin-2-ona XVI (2,25 g 13,2 mmoles) como um sólido branco

[0213] Rendimento: 75%

[0214] LC/MS: [M+H]+ = 170,11

[0215] RMN a 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,61 (s, 1H), 4,81 (qd, J = 7,6, 4,9 Hz, 1H), 3,62 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 3,20 (dd, J = 8,9, 7,2 Hz, 1H), 2,89- 2,68 (m, 2H).

5.4 SÍNTESE DE (+)-3-[[2-(METOXIMETIL)-6-(TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1- B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-(2,2,2-TRIFLUOROETIL)OXAZOLIDIN-2-ONA 9 E (-)-3-[[2-(METOXIMETIL)-6-(TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1- B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-(2,2,2-TRIFLUOROETIL) OXAZOLIDIN-2-ONA 10

[0216] A uma mistura de [2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il] metanol V (1,0 eq., 200 mg, 0,75 mmol) e 5-(2,2,2- trifluoroetil)oxazolidin-2-ona XVI (1,8 eq., 227 mg, 1,34 mmol) em sulfolano (0,5 M, 3,7 ml), foi adicionado ácido p-toluenossulfônico mono-hidratado (1,0 eq., 142 mg, 0,75 mmol) e a mistura foi agitada a 110 °C por 3h30. A mistura foi purificada diretamente por cromatografia de fase reversa em condições básicas para render um óleo amarelo (250 mg). A mistura obtida de enantiômeros foi purificada por HPLC preparativa quiral (AS * EtOH 50%- heptano 50%- DEA 0,1%) para render (+)-3-[[2-(metoximetil)-6- (trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-(2,2,2-trifluoroetil)oxazolidin- 2-ona 9 (29 mg, 0,07 mmol) e (-)-3-[[2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-(2,2,2-trifluoroetil)oxazolidin-2-ona 10 (30 mg, 0,07 mmol).

[0217] Rendimento global: 19% (9,3% + 9,6%)

[0218] LC/MS: [M+H]+ = 419,05

[0219] RMN a 1H (400 MHz, CDCl3): δ 5,02-4,66 (m, 5H), 3,66 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 3,52 (s, 3H), 3,33-3,17 (m, 1H), 2,76- 2,58 (m, 1H), 2,51- 2,35 (m, 1H).

[0220] Alfa-D (9, MeOH, 10 mg/ml, 25 °C) = + 13,0

[0221] (+)-3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-(2,2,2-trifluoroetil)oxazolidin-2-ona 11 e (-)-3-[[6-(difluorometil)-2- (metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-(2,2,2-trifluoroetil)oxazolidin-2- ona 12 são sintetizados de acordo com o mesmo procedimento a partir de 5-(2,2,2- trifluoroetil)oxazolidin-2-ona XVI e [6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il] metanol VIII.

[0222] Rendimento global: 14% (7,8% + 6,2%)

[0223] LC/MS: [M+H]+ = 401,06

[0224] RMN a 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,14 (t, J = 53,5 Hz, 1H), 4,90-4,60 (m, 5H), 3,67 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 3,43 (s, 3H), 3,25 (dd, J = 8,6, 7,0 Hz, 1H), 2,91- 2,63 (m, 2H).

[0225] Alfa-D (11, MeOH, 10 mg/ml, 25 °C) = +3,6 EXEMPLO 6. SÍNTESE DE DAR (-)-3-[[2-(METOXIMETIL)-6-

(TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-(2,2,2- TRIFLUOROETIL) OXAZOLIDIN-2-ONA 13 E (+)-3-[[2-(METOXIMETIL)-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4 ]TIADIAZOL-5-IL]METIL]-5-(2,2,2- TRIFLUOROETIL) OXAZOLIDIN-2-ONA 14

6.1 SÍNTESE DE 4,4-DIFLUORO-1-NITRO-PENTAN-2-OL XVII

[0226] A uma solução de 3,3-difluorobutan-1-ol (1,0 eq., 1,5 g, 9,8 mmoles) em diclorometano (50 ml) a 0 °C foi adicionado periodinano de Dess-Martin (1,2 eq., 5,1 g, 12 mmoles)) e a mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 2 h. A mistura crua foi então resfriada a-78 °C, filtrada e o sólido obtido foi lavado com diclorometano frio (- 78 °C). Ao filtrado obtido aquecido à temperatura ambiente foi adicionado carbonato de potássio (15,0 eq., 21 g, 150 mmoles) e nitrometano (30,0 eq., 18 g, 290 mmoles) e a mistura foi agitada a 45 °C durante 2 h. A mistura crua foi filtrada em Celite e o filtrado obtido foi concentrado sob vácuo a 30 °C para render uma goma amarela. A goma obtida foi purificada por cromatografia flash Biotage Isolera Four (coluna de sílica gel de 100 g KP-SNAP em um gradiente de diclorometano a 100% em 6CV que metanol a 0% a 10% em diclorometano em 10 CV) para render 4,4-difluoro-1-nitro- pentan-2-ol XVII (678 mg, 4,0 mmoles) como um óleo amarelo.

[0227] Rendimento: 41%

[0228] RMN a 1H (400 MHz, CDCl3): δ 4,71 (tt, J = 7,9, 4,0 Hz, 1H), 4,61-4,36 (m, 2H), 2,79 (dd, J = 4,6, 1,7 Hz, 1H), 2,32- 2,03 (m, 2H), 1,71 (t, J = 18,9 Hz, 3H).

6.2 SÍNTESE DE 1-AMINO-4,4-DIFLUORO-PENTAN-2-OL XVIII

[0229] Uma solução de 4,4-difluoro-1-nitro-pentan-2-ol XVII (1,0 eq., 1 g, 5,91 mmoles) em etanol (40 ml) foi hidrogenada em um reator H-Cube equipado com 10%/Pd (mistura 1 ml/min, 50 °C, 50 bar). A mistura crua foi evaporada até à secura para render 1-amino-4,4-difluoro-pentan-2-ol XVIII (760 mg, 4,9 mmoles) como um incolor óleo.

[0230] Rendimento: 83%

[0231] RMN a 1H (400 MHz, CDCl3): δ 3,95-3,76 (m, 1H), 2,88 (dd, J = 12,7, 3,6 Hz, 1H), 2,58 (dd, J = 12,7, 8,2 Hz, 1H), 2,16- 1,88 (m, 2H), 1,69 (t, J = 18,9 Hz, 3H).

6.3 SÍNTESE DE 5-(2,2-DIFLUOROPROPIL)OXAZOLIDIN-2-ONA XIX

[0232] A uma solução de 1-amino-4,4-difluoro-pentan-2-ol XVIII (1,0 eq., 760 mg, 5,46 mmoles) em THF (18 ml) à temperatura ambiente foram adicionados 1,1’- carbildildiimidazol (1,0 eq., 876 mg, 5,30 mmoles) e hidreto de sódio (0,1 eq., 21 mg, 0,53 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h. Foram adicionadas algumas gotas de água à solução (neutralização com NaH) e a mistura foi evaporada até à secura. O produto cru foi purificado diretamente por cromatografia flash Biotage Isolera Four (coluna de sílica gel de 100 g KP-SNAP em um gradiente de metanol a 0% a 10% em diclorometano acima de 10CV, que 10% de metanol acima de 4CV) para render 5-(2,2-difluoropropil)oxazolidin-2-ona XIX (675 mg, 4,08 mmoles) como um sólido bege.

[0233] Rendimento: 75%

[0234] RMN a 1H (400 MHz, CDCl3): δ 5,34 (d, J = 37,0 Hz, 1H), 4,96-4,85 (m, 1H), 3,78 (td, J = 8,5, 8,0, 0,9 Hz, 1H), 3,37 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 2,56- 2,18 (m, 2H), 1,71 (t, J = 18,9 Hz, 3H).

6.4 SÍNTESE DE (-)-5-(2,2-DIFLUOROPROPIL)-3-[[2-(METOXIMETIL)-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL] OXAZOLIDIN-2- ONA 13 E (+)-5-(2,2-DIFLUOROPROPIL)-3-[[2-(METOXIMETIL)-6- (TRIFLUOROMETIL)IMIDAZO[2,1-B][1,3,4]TIADIAZOL-5-IL]METIL] OXAZOLIDIN-2- ONA 14

[0235] A uma mistura de [2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1-

b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metanol V (1,0 eq., 150 mg, 0,56 mmol) e 5-(2,2- difluoropropil)oxazolidin-2-ona XIX (1,5 eq., 139 mg, 0,84 mmol) em sulfolano (3 ml), foi adicionado ácido p-toluenossulfônico mono-hidratado (1,0 eq., 106 mg, 0,56 mmol). A mistura foi agitada durante 16 h a 100 °C. A mistura foi purificada diretamente por cromatografia de fase reversa no modo básico para render um óleo amarelo. A mistura de enantiômeros foi purificada por SFC quiral (AS * EtOH 50%- heptano 50%- DEA 0,1%) para render (-)-5-(2,2-difluoropropil)-3-[[2-(metoximetil)- 6- (trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil] oxazolidin-2-ona 13 (19,1 mg, 0,05 mmol) e (+)-5-(2, 2-difluoropropil)-3-[[2-(metoximetil)-6- (trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]oxazolidin-2-ona 14 (19,9 mg, 0,05 mmol) como sólidos brancos.

[0236] Rendimento global: 16,7% (8,2% + 8,5%)

[0237] LC/MS: [M+H]+ = 415,02

[0238] RMN a 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 4,90-4,55 (m, 5H), 3,63 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,45 (s, 3H), 3,22 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 2,42- 2,26 (m, 2H), 1,63 (t, J = 19,3 Hz, 3H).

[0239] Alfa-D (13, MeOH, 10 mg/ml, 28,6 °C) =-13,3

[0240] 3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]- 5-(2,2-difluoropropil)oxazolidin-2-um 15 e 3-[[6-(difluorometil)-2- (metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-(2,2-difluoropropil)oxazolidin-2- ona 16 são sintetizados de acordo com o mesmo procedimento a partir de 5-(2,2- difluoropropil)oxazolidin-2-ona XIX e [6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il] metanol VIII.

[0241] Rendimento global: 8% (4% + 4%)

[0242] LC/MS: [M+H]+ = 397,04

[0243] RMN a 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,13 (t, J = 53,5 Hz, 1H), 4,89-4,60 (m, 5H), 3,64 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 3,43 (s, 3H), 3,21 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 2,41- 2,17 (m, 2H), 1,62 (t, J = 19,3 Hz, 3H).

[0244] Cromatografia quiral (SFC, fase W, CO2-MeOH 15%, 3 ml/min): pico 1 (15): 6,64 min e pico 2 (16): 7,72 min.

[0245] A Tabela (I) indica o nome IUPAC (ou o nome gerado a partir Accelerys

Draw 4.0) do composto, o pico de íon observado em espectroscopia de massa e a descrição de RMN a 1H. Tabela I: Caracterização Física de Compostos Exemplificadores. no Nome do Composto Estrutura MH + RMN a 1H δ (DMSO-d6) 4,84 (s, 2H), 4,74 (qd, J = 15,8, 1,2 Hz, 2H), 4,44 (dtd, J = 8,3, (+)-3-[[2-(metoximetil)-6- 7,0, 5,4 Hz, 1H), 3,54 (t, J = 8,3 (trifluorometil)imidazo[2,1- Hz, 1H), 3,43 (s, 3H), 3,08 (dd, J 1 379,4 b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil- = 8,4, 6,9 Hz, 1H), 1,62-1,45 (m, oxazolidin-2-1 2H), 1,28 (dddd, J = 16,1, 13,6, 8,4, 4,0 Hz, 1H), 0,85 (t, J = 7,4 Hz, 3H). 4,84 (s, 2H), 4,74 (qd, J = 15,8, 1,2 Hz, 2H), 4,44 (dtd, J = 8,3, (-)-3-[[2-(metoximetil)-6- 7,0, 5,4 Hz, 1H), 3,54 (t, J = 8,3 (trifluorometil)imidazo[2,1- Hz, 1H), 3,43 (s, 3H), 3,08 (dd, J 2 379,4 b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil- = 8,4, 6,9 Hz, 1H), 1,62-1,45 (m, oxazolidin-2-1 2H), 1,28 (dddd, J = 16,1, 13,6, 8,4, 4,0 Hz, 1H), 0,85 (t, J = 7,4 Hz, 3H).

5,00-4,75 (m, 2H), 4,51-4,40 (m, (+)-3-[[6-(difluorometil)-2- 1H), 3,51 (s, 4H), 3,04 (dd, J = 3 (metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol- 361,4 8,4, 7,4 Hz, 1H), 1,76-1,66 (m, 5-il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-1 1H), 1,60-1,50 (m, 1H), 1,48-1,29 (m, 2H), 0,92 (t, J = 7,3 Hz, 3H).

5,00-4,75 (m, 2H), 4,51-4,40 (m, (-)-3-[[6-(difluorometil)-2- 1H), 3,51 (s, 4H), 3,04 (dd, J = 4 (metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol- 361,4 8,4, 7,4 Hz, 1H), 1,76-1,66 (m, 5-il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-1 1H), 1,60-1,50 (m, 1H), 1,48-1,29 (m, 2H), 0,92 (t, J = 7,3 Hz, 3H).

5,00-4,75 (m, 2H), 4,51-4,40 (m, (+)-3-[[2-[dideuterio(metóxi)metil]-6- 1H), 3,51 (s, 4H), 3,04 (dd, J = (trifluorometil)imidazo[2,1- 5 381,1 8,4, 7,4 Hz, 1H), 1,76-1,66 (m, b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil- 1H), 1,60-1,50 (m, 1H), 1,48-1,29 oxazolidin-2-ona (m, 2H), 0,92 (t, J = 7,3 Hz, 3H).

5,00-4,75 (m, 2H), 4,51-4,40 (m, (-)-3-[[2-[dideuterio(metóxi)metil]-6- 1H), 3,51 (s, 4H), 3,04 (dd, J = (trifluorometil)imidazo[2,1- 6 381,1 8,4, 7,4 Hz, 1H), 1,76-1,66 (m, b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil- 1H), 1,60-1,50 (m, 1H), 1,48-1,29 oxazolidin-2-ona (m, 2H), 0,92 (t, J = 7,3 Hz, 3H).

no Nome do Composto Estrutura MH + RMN a 1H δ (DMSO-d6) 4,95 (dd, J = 15,7, 1,2 Hz, 1H), 4,79 (dd, J = 15,6, 1,2 Hz, 1H), (+)-3-[[2- 4,47 (qd, J = 7,7, 5,2 Hz, 1H), [dideuterio(trideuteriometoxi)metil]-6- 3,49 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,13-2,95 7 (trifluorometil)imidazo[2,1- 384,1 (m, 1H), 1,70 (dddd, J = 12,8, 9,6, b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil- 7,5, 5,2 Hz, 1H), 1,57-1,49 (m, oxazolidin-2-ona 1H), 1,48-1,28 (m, 2H), 0,93 (t, J = 7,3 Hz, 3H). 4,95 (dd, J = 15,7, 1,2 Hz, 1H), 4,79 (dd, J = 15,6, 1,2 Hz, 1H), (-)-3-[[2- 4,47 (qd, J = 7,7, 5,2 Hz, 1H), [dideuterio(trideuteriometoxi)metil]-6- 3,49 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,13-2,95 8 (trifluorometil)imidazo[2,1- 384,1 (m, 1H), 1,70 (dddd, J = 12,8, 9,6, b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil- 7,5, 5,2 Hz, 1H), 1,57-1,49 (m, oxazolidin-2-ona 1H), 1,48-1,28 (m, 2H), 0,93 (t, J = 7,3 Hz, 3H).

5,02-4,66 (m, 5H), 3,66 (t, J = 8,7 (+)-3-[[2-(metoximetil)-6- Hz, 1H), 3,52 (s, 3H), 3,33-3,17 (trifluorometil)imidazo[2,1- 9 419,0 (m, 1H), 2,76-2,58 (m, 1H), 2,51- b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-(2,2,2- 2,35 (m, 1H). trifluoroetil)oxazolidin-2-ona 5,02-4,66 (m, 5H), 3,66 (t, J = 8,7 (-)-3-[[2-(metoximetil)-6- Hz, 1H), 3,52 (s, 3H), 3,33-3,17 (trifluorometil)imidazo[2,1- 10 419,0 (m, 1H), 2,76-2,58 (m, 1H), 2,51- b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-(2,2,2- 2,35 (m, 1H). trifluoroetil)oxazolidin-2-ona 7,14 (t, J = 53,5 Hz, 1H), 4,90- (+)-3-[[6-(difluorometil)-2- 4,60 (m, 5H), 3,67 (t, J = 8,6 Hz, (metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol- 11 401,0 1H), 3,43 (s, 3H), 3,25 (dd, J = 5-il]metil]-5-(2,2,2-trifluoroetil)oxazolidin-2- 8,6, 7,0 Hz, 1H), 2,91-2,63 (m, ona 2H).

7,14 (t, J = 53,5 Hz, 1H), 4,90- (-)-3-[[6-(difluorometil)-2- 4,60 (m, 5H), 3,67 (t, J = 8,6 Hz, (metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol- 12 401,0 1H), 3,43 (s, 3H), 3,25 (dd, J = 5-il]metil]-5-(2,2,2-trifluoroetil)oxazolidin-2- 8,6, 7,0 Hz, 1H), 2,91-2,63 (m, ona 2H).

(-)-5-(2,2-difluoropropil)-3-[[2- 4,90-4,55 (m, 5H), 3,63 (t, J = 8,4 (metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- Hz, 1H), 3,45 (s, 3H), 3,22 (t, J = 13 415,0 b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil] oxazolidin-2- 8,0 Hz, 1H), 2,42-2,26 (m, 2H), ona 1,63 (t, J = 19,3 Hz, 3H).

no Nome do Composto Estrutura MH + RMN a 1H δ (DMSO-d6) (+)-5-(2,2-difluoropropil)-3-[[2- 4,90-4,55 (m, 5H), 3,63 (t, J = 8,4 (metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- Hz, 1H), 3,45 (s, 3H), 3,22 (t, J = 14 415,0 b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil] oxazolidin-2- 8,0 Hz, 1H), 2,42-2,26 (m, 2H), ona 1,63 (t, J = 19,3 Hz, 3H).

7,13 (t, J = 53,5 Hz, 1H), 4,89- 3-[[6-(difluorometil)-2- 4,60 (m, 5H), 3,64 (t, J = 8,5 Hz, (metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol- 15 397,0 1H), 3,43 (s, 3H), 3,21 (t, J = 8,0 5-il]metil]-5-(2,2-difluoropropil)oxazolidin- Hz, 1H)), 2,41-2,17 (m, 2H), 1,62 2-ona (enantiômero 1) (t, J = 19,3 Hz, 3H).

7,13 (t, J = 53,5 Hz, 1H), 4,89- 3-[[6-(difluorometil)-2- 4,60 (m, 5H), 3,64 (t, J = 8,5 Hz, (metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol- 16 397,0 1H), 3,43 (s, 3H), 3,21 (t, J = 8,0 5-il]metil]-5-(2,2-difluoropropil)oxazolidin- Hz, 1H)), 2,41-2,17 (m, 2H), 1,62 2-ona (enantiômero 2) (t, J = 19,3 Hz, 3H).

EXEMPLO 7. ENSAIOS DE LIGAÇÃO A SV2A E SV2C.

[0246] As proteínas SV2A e SV2C humanas foram expressas em células de rim embrionário humano (HEK). As preparações de membrana HEK SV2A e HEK SV2C foram preparadas como descrito em Gillard et al. (Eur. J. Pharmacol. 2006, 536, 102 a 108). Para medir a afinidade de compostos não marcados, as experimentos de competição foram realizadas da seguinte forma: Membranas que expressam proteínas SV2 (5 a 15 µg de proteínas por ensaio) foram incubadas por 60 minutos a 37 °C com [³H]-2-[4-(3-azidofenil)-2-oxo-1-pirrolidinil] butanamida (5 nM) e/ou [³H]-4R- (2-cloro-2,2-difluoroetil)-1-{[2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil} pirrolidin-2-ona (25 nM) em 0,2 ml de um tampão Tris-HCl 50 mM (pH 7,4) contendo MgCl2 2 mM, dimetilsulfóxido a 0,1% e dez concentrações crescentes de composto de teste não marcado (0,1 nM a 10 uM). No final do período de incubação, o radioligante ligado à membrana foi recuperado por filtração rápida através de filtros de fibra de vidro GF/C pré-embebidos em polietilenoimina a 0,1%. As membranas foram lavadas com pelo menos 4 vezes o volume de ensaio de tampão Tris HCl 50 mM gelado (pH 7,4). Os filtros foram secos e a radioatividade determinada por cintilação líquida. Toda a etapa de filtração não excedeu 10 segundos. Os valores pIC50 de afinidade medida foram corrigidos para pKi de acordo com Cheng e Prusoff (Biochem. Pharmacol. 1973, 22 (23), 3.099 a 3.108).

[0247] Os compostos de Fórmula (I) de acordo com a invenção mostram tipicamente valores de pKi SV2A de pelo menos 6,5. e valores de pKi SV2C de pelo menos 6,0. EXEMPLO 8. MODELOS DE CONVULSÃO.

[0248] Os ratos NMRI machos (Charles River, Alemanha) pesando 22 a 32 g são usados em todos os experimentos. Os animais são mantidos em um ciclo de 12/12 h de claridade/escuridão com luzes acesas às 6:00 da manhã e são alojados a uma temperatura mantida a 20 a 21 °C e a uma umidade de cerca de 40%. Os camundongos são alojados em grupos de 10 por gaiola (Tipo III). Todos os animais têm acesso livre a comida e água padrão de péletes antes da atribuição aleatória a grupos experimentais constituídos por 10 camundongos cada. Todos os experimentos com animais são realizados de acordo com as Regras Nacionais sobre Experimentos com Animais e conduzidas de acordo com as diretrizes da diretiva do Conselho da Comunidade Europeia 2010/63/UE. Um comitê de ética local aprovou os protocolos experimentais.

8.1 MODELO DE CONVULSÃO DE 6 HZ

[0249] O modelo de 6 Hz é realizado de acordo com um protocolo previamente descrito (Kaminski et al., Epilepsia (2004), 45, 864 a 867). Resumidamente, a estimulação da córnea (pulsos retangulares monopolares de 44 mA, 0,2 ms de duração a 6 Hz por 3 s) é fornecida por um dispositivo de corrente constante (ECT Unit 57800; Ugo Basile, Comerio, Itália). Uma gota de cloridrato de oxibuprocaína a 0,4% (Unicaine, Thea, França) é colocada nos olhos antes da estimulação elétrica. Durante a estimulação, os camundongos são contidos manualmente e liberados na gaiola de observação (38 x 26 x 14 cm) imediatamente após a aplicação atual. As convulsões são geralmente precedidas por um breve período (~ 2 a 3 s) de intensa agitação locomotora (corrida e salto selvagens). Os animais então exibem uma postura “atordoada” associada à criação, movimentos automáticos do membro anterior e clônus, espasmos das vibrissas e cauda de Strub. No final da convulsão, os animais retomam seu comportamento exploratório normal. O ponto final experimental é a proteção contra as convulsões. O animal é considerado protegido se retomar seu comportamento exploratório normal dentro de 7 s após a estimulação.

[0250] As atividades in vivo determinadas para os compostos de teste estão tipicamente compreendidas entre 0,05 mg/kg e 20 mg/kg após dosagem única de IP.

8.2 MODELO DE CONVULSÃO DE PENTILENOTETRAZOL (PTZ)

[0251] O pentilenotetrazol é usado na dose de CD97 previamente estabelecida de 89 mg/kg; uma dose convulsiva induzindo convulsões clônicas de todas as quatro extremidades em 97% dos camundongos (Klitgaard et al., Eur. J. Pharmacol. (1998), 353, 191 a 206). Imediatamente após a injeção de pentilenotetrazol, os camundongos são colocados individualmente em gaiolas de Perspex e observados quanto à presença de convulsões clônicas nas quatro extremidades e extensão tônica dos membros posteriores durante um período de 60 min.

[0252] As atividades in vivo determinadas para os compostos de teste estão tipicamente compreendidas entre 0,5 mg/kg e 30 mg/kg após dosagem única de IP. EXEMPLO 9. ENSAIO DE AZAMULINA

[0253] Hepatócitos humanos criopreservados (grupo de 20 doadores, lote BSU de Celsis/IVT/Bioreclamation) foram descongelados em conformidade com as informações do fornecedor. A viabilidade (exclusão do azul de tripano) foi superior a 75%. Pré-incubação (250 ul de suspensão de hepatócitos no 2x106 hepatócitos/ml) foi realizada com meio William, contendo glutamina 2 mM e Hepes15 mM, em placas de 48 poços a 37 °C, em uma incubadora (CO2 a 5%) (agitador vibratório, Titramax 100, CA 300 rpm), sob agitação suave durante 30 min. Após a pré-incubação, a incubação foi iniciada adicionando aos hepatócitos 250 µl de meio de cultura (vide composição acima) contendo composto UCB (1 µM) ou midazolam (controle positivo) com ou sem azamulina (6 µM - inibidor específico de CYP3A4/5). As concentrações finais de composto UCB e azamulina nos incubados são de 0,5 µM e 3 µM, respectivamente. As suspensões celulares foram rapidamente re-homogeneizadas por 2 pipetas de entrada e saída. Após 0, 30, 60, 120, 180 e 240 minutos de incubação, as reações foram interrompidas pela transferência de 50 µl de incubações para o poço apropriado da placa de 96 poços contendo 50 µl de acetonitrila gelado com cetoconazol 1 µM como padrão interno. Antes de cada amostragem, as incubações celulares são re- homogeneizadas por pipetagem 2 para dentro e para fora.

[0254] Uma vez terminada a incubação, as placas de 96 poços são centrifugadas a cerca de 3.700 rpm, +4 °C, por 15 minutos. 50 ul dos sobrenadantes são transferidos para os poços de outras placas de poços profundos em que 150 ml de H2O Millipore foram adicionados. Essas amostras foram analisadas por micro UPLC/HR-MS para o desaparecimento e monitoramento parental da formação de metabólitos.

[0255] A contribuição do CYP3A4/5 conhecida como fração metabolizada pelo CYP3A4/5 (fm, CYP3A4/5) foi calculada para cada composto a partir da razão entre CLint (com base no desaparecimento de fármaco parental) na ausência e na presença de azamulina, usando a seguinte equação:

[0256] A fração metabolizada por CYP3A4/5 (fm, CYP3A4/5) dos compostos de teste está tipicamente compreendida entre 0 e 40%.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Derivados de 2-oxo-1,3-oxazolidinil imidazotiadiazol de acordo com a Fórmula (I), seus isômeros geométricos, enantiômeros, diastereômeros, isótopos e misturas, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, 1

R O

O

N (I)

N 3 N 2

R R

S N caracterizado pelo fato de que R1 é uma C1-4 alquila opcionalmente substituída por um ou mais substituintes de halogênio; R2 é um halogênio, ou uma C1-4 alquila opcionalmente substituída por um ou mais halogênios; R3 é um C1-4 alquila substituída por um substituinte de alcóxi.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 é uma i-butila, uma n-propila, uma 2,2-difluoropropila, uma 2-cloro-2,2- difluoroetila, uma 2,2-difluoroetila, uma 2,2,2-trifluoroetila ou uma porção de 2- fluoroetila.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 é n-propila, uma 2,2-difluoropropila, ou uma porção de 2,2,2-trifluoroetila.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R2 é um átomo de cloro, uma porção de difluorometila, ou uma porção de trifluorometila.

5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R2 é uma porção de difluorometila ou uma porção de trifluorometila.

6. Composto, de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que R3 é uma metoximetila, uma [(2H3)metiloxi]metila, uma metóxi(2H2)metila, ou uma porção de [(2H3)metiloxi](2H2)metila.

7. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores,

caracterizado pelo fato de que R1 é uma n-propila, uma 2,2-difluoropropila ou uma porção de 2,2,2- trifluoroetila; R2 é uma difluorometila ou uma porção de trifluorometila; R3 é uma porção de metoximetila, uma [(2H3)metóxi]metila, uma [(2H3) metóxi](2H2)metila ou uma porção de metóxi(2H2)metila.

8. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que é selecionado do grupo que compreende: •(+)-3-[[2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona; •(-)-3-[[2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona; •(+)-3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona; •(-)-3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-um. •(+)-3-[[2-[dideuterio(metóxi)metil]-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona •(-)-3-[[2-[dideuterio(metóxi)metil]-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona •(+)-3-[[2-[dideuterio(trideuteriometoxi)metil]-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona •(-)-3-[[2-[dideuterio(trideuteriometoxi)metil]-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil]-5-propil-oxazolidin-2-ona •(+)-3-[[2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-(2,2,2-trifluoroetil)oxazolidin-2-ona •(-)-3-[[2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-(2,2,2-trifluoroetil)oxazolidin-2-ona •(+)-3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-(2,2,2-trifluoroetil)oxazolidin-2-ona

•(-)-3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-(2,2,2-trifluoroetil)oxazolidin-2-ona •(-)-5-(2,2-difluoropropil)-3-[[2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil] oxazolidin-2-ona •(+)-5-(2,2-difluoropropil)-3-[[2-(metoximetil)-6-(trifluorometil)imidazo[2,1- b][1,3,4]tiadiazol-5-il]metil] oxazolidin-2-ona •3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-(2,2-difluoropropil)oxazolidina-2-ona, enantiômero 1 •3-[[6-(difluorometil)-2-(metoximetil)imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazol-5- il]metil]-5-(2,2-difluoropropil)oxazolidina-2-ona, enantiômero 2

9. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que é para uso como medicamento.

10. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade eficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, em combinação com um diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável.

11. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que é para uso no tratamento de epilepsia, epileptogênese, distúrbios convulsivos, convulsões, em particular para convulsões refratárias.