BR112019022188A2 - Formulações de anticorpos anti-rankl humanos e métodos de uso das mesmas - Google Patents

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Fallon Jaymille
Michelle Goss Monica
Hua Gu Jian
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Abstract

são divulgadas aqui formulações farmacêuticas aquosas compreendendo denosumab ou outro anticorpo monoclonal anti-rankl humano ou sua porção e características de ph, sistemas tampão e inibidores da agregação de aminoácidos. são também divulgadas apresentação da formulação para uso, p.ex., em um frasco de uso único, seringa de uso único ou recipiente de vidro, métodos de uso das formulações e artigos para prevenção ou tratamento de doenças e estojos relacionados.

Description

FORMULAÇÕES DE ANTICORPOS ANTI-RANKL HUMANOS E MÉTODOS DE USO DAS MESMAS REFERENCIA CRUZADA COM PEDIDO RELACIONADO
[0001] O benefício sob 35 U.S.C. §119 (e) do Pedido de Patente Provisória dos E.U.A. No. 62/492,056, depositado a 28 de abril, 2017, é deste modo reivindicado, e a sua divulgação é deste modo incorporada por referência aqui.
INCORPORAÇÃO POR REFERENCIA DE MATERIAL SUBMETIDO ELETRONICAMENTE
[0002] É incorporada por referência na sua totalidade uma listagem de sequências de nucleotideos/aminoácidos legíveis por computador submetida simultaneamente aqui e identificada como se segue: Ficheiro ASCII (Texto) de 49 kilobytes chamado 51689A_Seqlisting.txt; criado em 20 de abril, 2018.
ANTECEDENTES
Área da Divulgação
[0003] A invenção se relaciona com anticorpos monoclonais anti-RANKL humanos, incluindo formulações aquosas de elevada concentração de denosumab e seus biossimilares.
Breve Descrição de Tecnologia Relacionada
[0004] O denosumab está comercialmente disponível em formas de solução às forças de 60 mg/mL e 70 mg/mL.
[0005] O aumento de concentrações de formulações de proteínas pode causar problemas com a estabilidade, por exemplo agregação resultando na formação de espécies de elevado peso molecular (HMWS). As HMWS, particularmente aquelas que conservam a maioria da configuração nativa da contraparte de
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2/151 monômeros, podem ser particularmente preocupantes em algumas formulações de proteínas. A agregação pode também afetar potencialmente a biodisponibilidade subcutânea e farmacocinética de uma proteína terapêutica.
[0006] As operaçoes de enchimento e acabamento, bem como administração, podem envolver passos de fluxo de soluções de proteínas através de bombas de pistão, bombas peristálticas ou agulhas para injeção. Tais processos podem conferir estresses de cisalhamento e mecânicos, o que pode causar desnaturação de
proteínas e resultar em agregaçao. Este fenômeno pode ser
exacerbado à medida que as soluções de prote ínas se tornam mais
concentradas •
SUMÁRIO
[0007] É proporc ionada de acordo com a presente invenção
divulgação pela primeira vez demonstrando que a adição de um inibidor da agregação de aminoácidos a uma solução aquosa compreendendo uma elevada concentração de um anticorpo antiRANKL leva a uma quantidade reduzida de agregados de anticorpo formados ao longo do tempo, bem como uma taxa de formação mais lenta de tais agregados. A presente divulgação proporciona também um efeito do pH na formação de agregados em soluções aquosas concentradas de anticorpo anti-RANKL, em que é observada formação diminuída de agregados quando o pH das soluções aquosas está na gama de cerca de 5,0 a menos do que 5,2. É adicionalmente sugerido pela divulgação apresentada aqui que a estabilização do anticorpo anti-RANKL ocorre através de interações entre o inibidor da agregação de aminoácidos e o
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3/151 anticorpo. Sem estar limitado por qualquer teoria particular é contemplado que interações hidrofóbicas, bem como outros tipos de interações intermoleculares, entre o inibidor da agregação de aminoácidos e o anticorpo anti-RANKL têm um efeito estabilizante nas soluções concentradas de anticorpo. Conformemente, a divulgação da presente invenção se relaciona com formulações farmacêuticas aquosas estáveis compreendendo uma elevada concentração de um anticorpo anti-RANKL, formulações essas que compreendem baixas quantidades (p.ex., menos do que cerca de 2%) de agregados.
[0008] Conformemente, um aspecto da divulgação é uma formulação farmacêutica aquosa compreendendo um anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno a uma concentração de mais do que 70 mg/mL e tendo um pH em uma gama de cerca de 5,0 a menos do que 5,2.
[0009] Outro aspecto da divulgação é uma formulação farmacêutica aquosa compreendendo uma mistura de um anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno e um inibidor da agregação de aminoácidos. Em aspectos exemplificativos, o inibidor da agregação de aminoácidos compreende um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral carregada, um aminoácido aromático ou um aminoácido hidrofóbico. Em casos exemplificativos, o aminoácido compreendendo uma cadeia lateral carregada é um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada, tal
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4/151 como, por exemplo, arginina e lisina. Em aspectos exemplificativos, o aminoácido aromático compreende uma fenila ou um indol. Opcionalmente, o aminoácido aromático compreende adicionalmente uma cadeia de alquila Ci-Ce entre o carbono alfa e a fenila ou indol. Aminoácidos, incluindo, por exemplo, fenilalanina e triptofano, são inibidores da agregação de aminoácidos exemplificativos. Em casos exemplificativos, o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido hidrofóbico tendo uma pontuação maior do que cerca de 2,5 na escala de hidrofobicidade de Kyte e Doolittle. Opcionalmente, o aminoácido hidrofóbico é valina, leucina ou isoleucina. Inibidores da agregação de aminoácidos adicionais são contemplados como descrito aqui.
[0010] Em casos exemplificativos, a formulação farmacêutica aquosa compreende adicionalmente um modificador da tonicidade, um tensoativo, um tampão ou qualquer sua combinação.
[0011] Outro aspecto da divulgação é uma apresentaçao da formulação para armazenamento ou uso, p.ex., em um frasco de uso único, seringa de uso único ou recipiente primário de vidro, bordejados por ou revestido por vidro. Um aspecto exemplificativo da divulgação é um recipiente, opcionalmente, um frasco, seringa pré-cheia (PFS) ou recipiente de vidro compreendendo qualquer uma das formulações farmacêuticas aquosas descritas aqui. 0 recipiente, em casos exemplificativos, compreende cerca de 1 mL ou menos (p.ex., cerca de 0,5 mL) da formulação farmacêutica aquosa.
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[0012] Outro aspecto da divulgação proporciona métodos de preparação de uma formulação farmacêutica aquosa, estável compreendendo um anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano, ou uma sua porção de ligação ao antígeno, compreendendo combinação do anticorpo monoclonal anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, a uma concentração maior do que 7 0 mg/mL com um inibidor da agregação de aminoácidos, um tampão, um tensoativo e, opcionalmente, um modificador da tonicidade. Aspectos da divulgação incluem a formulação farmacêutica aquosa, estável preparada de acordo com qualquer um dos métodos de preparação de uma formulação farmacêutica aquosa, estável descritos aqui.
[0013] Outro aspecto da divulgação proporciona métodos de uso de uma formulação como descrita aqui para prevenção ou tratamento de uma doença responsiva a um anticorpo monoclonal anti-RANKL humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno. Em aspectos exemplificaiivos, o uso engloba tratamento terapêutico de um sujeito englobando tratamento ou prevenção de um evento relacionado com o esqueleto (SRE), tratamento ou prevenção de um tumor de células gigantes do osso, tratamento ou prevenção de hipercalcemia de malignidade, tratamento ou prevenção de osteoporose ou aumento da massa óssea, em um sujeito. Por exemplo, o tratamento terapêutico engloba (a) tratamento ou prevenção de um SRE em um sujeito com metástases ósseas de tumores sólidos, (b) tratamento ou prevenção de um SRE em um sujeito que é um adulto ou um adolescente
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6/151 esqueleticamente maduro com tumor de células gigantes do osso que é irressecável ou onde é provável que a ressecção cirúrgica resulte em morbidade grave; (c) tratamento de hipercalcemia de malignidade refratária à terapia com bifosfonatos em um sujeito; (d) tratamento ou prevenção de um SRE em um sujeito com mieloma múltiplo ou com metástases ósseas de um tumor sólido, (e) tratamento de osteoporose de mulheres pósmenopáusicas com elevado risco de fratura, (f) tratamento para aumentar a massa óssea em mulheres com elevado risco de fratura recebendo terapia inibidora adjuvante de aromatase para o câncer de mama, (g) tratamento para aumentar a massa óssea em homens com elevado risco de fratura recebendo terapia de privação de andrógenos para o câncer da próstata não metastático, (h) tratamento para aumentar a massa óssea em homens com osteoporose com elevado risco de fratura, (i) terapia com cálcio ou vitamina D.
[0014] Aspectos adicionais da divulgação incluem um método de prevenção de um evento relacionado com o esqueleto (SRE) em um paciente com sua necessidade, um método de tratamento de tumor de células gigantes do osso em um paciente com sua necessidade, um método de tratamento de hipercalcemia de malignidade em um paciente com sua necessidade, um método de tratamento de osteoporose em um paciente com sua necessidade e um método de aumento da massa óssea em um paciente com sua necessidade. Os métodos compreendem administração ao paciente de uma quantidade eficaz de qualquer uma das formulações
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7/151 descritas aqui. Em casos exemplificativos, a formulação é subcutaneamente administrada ao paciente.
[0015] Outro aspecto da divulgação proporciona o uso de denosumab, ou outro anticorpo monoclonal anti-RANKL humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno, na preparação de um medicamento como descrito aqui para tratamento de um paciente com necessidade de um anticorpo monoclonal anti-RANKL humano.
[0016] Outro aspecto da divulgação é um estojo incluindo uma composição ou artigo descrito aqui em conjunto com um folheto informativo, rótulo da embalagem, instruções ou outra rotulagem direcionando ou divulgando qualquer um dos métodos ou modalidades divulgados aqui.
[0017] Outro aspecto da divulgação é um método para melhoria da estabilidade de uma formulação farmacêutica aquosa incluindo um anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno, a uma concentração de mais do que 70 mg/mL, incluindo o passo de preparação da formulação farmacêutica aquosa incluindo o anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno a um pH em uma gama de cerca de 5,0 a menos do que 5,2, em que a formulação farmacêutica aquosa demonstra estabilidade melhorada ao pH em uma gama de cerca de 5,0 a menos do que 5,2 em comparação com uma formulação farmacêutica aquosa equivalente que não está a um pH em uma gama de cerca de 5,0 a menos do que 5,2.
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[0018] Outro aspecto da divulgação é um método para melhoria da estabilidade de uma formulação farmacêutica aquosa incluindo um anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno, incluindo o passo de preparação da formulação farmacêutica aquosa compreendendo o anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno em mistura com adição com um inibidor da agregação de aminoácidos, em que a formulação farmacêutica aquosa demonstra estabilidade melhorada com o inibidor da agregação de aminoácidos em comparação com uma formulação farmacêutica aquosa equivalente sem o inibidor da agregação de aminoácidos.
[0019] Outro aspecto da divulgação é um método de redução do nível de agregados de HMWS em uma solução de denosumab ou outro anticorpo monoclonal anti-RANKL humano.
[0020] Aspectos e vantagens adicionais serão aparentes aos peritos na técnica a partir de uma revisão da seguinte descrição detalhada, considerada em conjunto com os desenhos. Embora as composições, artigos e métodos sejam suscetíveis de modalidades em várias formas, a descrição a seguir inclui modalidades específicas com o entendimento de que a divulgação é ilustrativa e não se destina a limitar a invenção às modalidades específicas descritas aqui. Para as composições, artigos e métodos descritos aqui, características opcionais, incluindo mas não se limitando a componentes, suas gamas
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9/151 composicionais, substituintes, condições e passos, são contemplados como sendo selecionados dos vários aspectos, modalidades e exemplos proporcionados aqui.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[0021] As Figuras 1, 2 e 8 mostram a percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C para várias formulações de denosumab de elevada concentração. A legenda da Figura 1 está de acordo com a formulação tendo a Abreviatura mostrada na Tabela 1. A legenda da Figura 8 está de acordo com a letra mostrada na Tabela 5.
[0022] A Figura 3 mostra cromatogramas de exclusão por
tamanho para várd .as formulações de denosumab de elevada
concentração após armazenamento a 37 °C durante 1 mês. A
legenda da Fi gura 3 está de acordo com a formulação tendo a
Abreviatura mostrada na Tabela 2.
[0023] A F igura 4 é um gráfico da % de HMWS monitorizada
por SE-UHPLC em função do tempo para cada formulação tendo o # da F correspondente mostrado na Tabela 3A.
[0024] A Figura 5 é um par de cromatogramas de exclusão por tamanho para formulações listadas na Tabela 3A. A legenda da Figura 5 está de acordo com o Nome da Formulação notado na Tabela 3B.
[0025] A Figura 6 é um gráfico da % de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função do tempo de armazenamento a 37 °C para cada formulação tendo o # da F correspondente mostrado na Tabela 4A.
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[0026] A Figura 7A mostra cromatogramas de exclusão por tamanho para formulações a pH 4,8 tendo a concentração de denosumab listada na Tabela 4A.
[0027] A Figura 7B mostra cromatogramas de exclusão por tamanho para formulações a pH 5,1 tendo a concentração de denosumab listada na Tabela 4A.
[0028] A Figura 9 é um gráfico da % de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função do tempo de armazenamento a 37 °C para cada formulação tendo o # da F correspondente mostrado na Tabela 6B.
[0029] A Figura 10 mostra cromatogramas de exclusão por tamanho em função da formulação após armazenamento a 37 °C durante 1 mês para as formulações tendo o nome indicado na Tabela 6B.
[0030] A Figura 11A é um gráfico da percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função do tempo a 37 °C para a formulação tendo a letra indicada na Tabela 7B.
[0031] A Figura 11B é um gráfico da percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função do tempo a 40 °C para a formulação tendo a letra indicada na Tabela 7C.
[0032] A Figura 12A mostra cromatogramas de exclusão por tamanho para formulações da Tabela 7B.
[0033] A Figura 12B mostra cromatogramas de exclusão por tamanho para formulações da Tabela 7C.
[0034] As Figura 13, 14 e 15 sao gráficos da percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função do tempo de armazenamento a 37 °C para cada formulação tendo a Letra da
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11/151 formulação correspondente mostrada na Tabela 8A. As Figuras 16, 17 e 18 são as sobreposições cromatográficas das formulações listadas na Tabela 8A após armazenamento a 37 °C durante 1 mês. As Figuras 13 e 16 se relacionam com formulações compreendendo aminoácidos aromáticos, as Figuras 14 e 17 se relacionam com formulações compreendendo aminoácidos polares/carregados e as Figuras 15 e 18 se relacionam com formulações compreendendo aminoácidos hidrofóbicos.
[0035] As Figuras 19-24 sao gráficos da % de incorporação de deutério a 4 ° C em função do tempo (log (seg) ) para os aminoácidos da Cadeia Leve 28-33 (Figura 19), aminoácidos da Cadeia Leve 108-116 (Figura 20), Aminoácidos da Cadeia Leve 125-132 (Figura 21), Aminoácidos da Cadeia Pesada 47-59 (Figura 22), aminoácidos da Cadeia Pesada 243-253 (Figura 23) e aminoácidos da Cadeia Pesada 392-399 (Figura 24) para cada uma das Formulações 35-38.
[0036] As Figuras 25-30 sao gráficos da % de incorporação de deutério a 37 ° C em função do tempo (log (seg)) para os aminoácidos da Cadeia Leve 28-33 (Figura 25), aminoácidos da Cadeia Leve 108-117 (Figura 26), Aminoácidos da Cadeia Leve 124-131 (Figura 27), Aminoácidos da Cadeia Pesada 47-59 (Figura 28), aminoácidos da Cadeia Pesada 242-253 (Figura 29) e aminoácidos da Cadeia Pesada 392-399 (Figura 30) para cada uma das Formulações 35-38.
[0037] A Figura 31 é um gráfico da percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C com o Nome da formulação indicado na Tabela 10.
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[0038] A Figura 32 é um gráfico da percentagem de LMWS como monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C com o Nome da formulação indicado na Tabela 11.
[0039] A Figura 33 é um gráfico da percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C com o Nome da formulação indicado na Tabela 12.
[0040] A Figura 34 é um gráfico da percentagem de LMWS como monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C com o Nome da formulação indicado na Tabela 13.
[0041] A Figura 35 é um gráfico da percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C com o Nome da formulação indicado na Tabela 14.
[0042] A Figura 36 é um gráfico da percentagem de LMWS como monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C com o Nome da formulação indicado na Tabela 15.
[0043] A Figura 37 sao sobreposiçoes de cromatogramas de exclusão por tamanho para cada formulação tendo o Nome da formulação indicado na Tabela 10.
[0044] A Figura 38 são sobreposições de cromatogramas de exclusão por tamanho para cada formulação tendo o Nome da formulação indicado na Tabela 12.
[0045] A Figura 39 são sobreposições de cromatogramas de exclusão por tamanho para cada formulação tendo o Nome da formulação indicado na Tabela 14.
[0046] As Figuras 40A e 40B sao gráficos contendo as curvas de desnaturaçao química isotérmica de denosumab na ausência de arginina, a pH 4,5,
4,8 e 5,0. A Figura 40A é um gráfico da
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Fração de denosumab desnaturado em função da concentração desnaturante. A Figura 40B é um gráfico representando dF/d[desnaturante] em função da concentração desnaturante.
[0047] As Figuras 41A e 41B sao gráficos contendo as curvas de desnaturação química isotérmica de denosumab na presença de arginina HC1 a 75 mM a pH 4,5, 4,8 e 5,2. A Figura 41A é um gráfico da Fração de denosumab desnaturado em função da concentração desnaturante. A Figura 41B é um gráfico representando dF/d[desnaturante] em função da concentração desnaturante.
[0048] As Figuras 42 e 43 sao gráficos da percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função do tempo a 25 °C durante 3 meses e 37 °C durante 2 meses, respectivamente, para a formulação tendo o Nome da formulação na Tabela 17.
DESCRIÇÃO DETALHADA
[0049] Seria desejável proporcionar uma solução aquosa mais concentrada de denosumab, e outros anticorpos anti-RANKL humanos, e suas porções de ligação ao antígeno, que sejam tão estáveis como, ou mais estáveis do que, soluções diluídas. A solução mais concentrada podería proporcionar conveniência ao paciente, por exemplo permitindo administração de um volume mais pequenos, tal como injeção de 1 mL, para administrar 120 mg de ativo, tal como denosumab, em vez de uma injeção de 1,7 mL ou 2 mL de uma formulação de ativo mais diluída. Ainda adicionalmente permitiría que um volume ainda mais baixo de solução de injeção administrasse uma dose mais baixa de ativo, p. ex. , 0,5 mL de denosumab à concentração de 120 mg/mL para
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14/151 administrar uma dose de 60 mg. Seria também desejável proporcionar solução aquosa de denosumab, e outros anticorpos anti-RANKL humanos, e suas porções de ligação ao antígeno, que sejam mais estáveis do que soluções previamente conhecidas. A formulação concentrada, estável terá também outros benefícios, tais como permitir manuseamento e envio de volumes mais baixos de produto e permitir vidas de prateleira mais longas de produtos.
[0050] Os agregados em produtos biológicos podem diferir na origem, tamanho e tipo. Os agregados que podem afetar a eficácia ou segurança de um produto biológico são particularmente preocupantes, p.ex., agregados que podem intensificar as respostas imunitárias e causar efeitos clínicos adversos. Os agregados de elevado peso molecular, também conhecidos como Espécies de Elevado Peso Molecular (HMWS), particularmente aqueles que conservam a maioria da configuração nativa da contraparte de monômeros, podem ser particularmente preocupantes. A agregação pode também afetar potencialmente a biodisponibilidade subcutânea e farmacocinética de uma proteína terapêutica.
[0051] A formação de agregados pode ter várias causas. Geralmente, a agregação de proteínas resulta da instabilidade conformacional, que é o resultado de mudanças estruturais de proteínas, e instabilidade coloidal, que é dominada por forças intermoleculares. No caso onde um evento de nucleação crítico é requerido para induzir precipitação, a cinética de agregação
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15/151 de proteínas pode ser caracterizada por inclusão de uma fase de tempo lag.
[0052] A agregaçao devido à instabilidade conformacional envolve passos de desdobramento e associação. O desdobramento da molécula de proteína expõe resíduos de aminoácidos hidrofóbicos. Os resíduos hidrofóbicos das moléculas desdobradas podem depois sofrer associação, o que leva à agregação (p.ex., como dímeros, trímeros, outros multímeros e agregados de ordem mais elevada). Tais associações são dependentes da concentração. Um aumento na concentração de proteína em um solvente aquoso aumenta geralmente a taxa e extensão de agregação, incluindo agregação termicamente induzida. Assim, aditivos que afetam a energia livre do desdobramento de proteínas em solução podem afetar a estabilidade conformacional.
[0053] A instabilidade coloidal resulta em agregados através de forças de associação intramolecular proteínaproteína. Tais forças podem ser afetadas por um ou mais fatores incluindo força iônica, pH da solução e tipos de tampões.
[0054] 0 denosumab está comercialmente disponível em formas de solução às forças de 60 mg/mL e 70 mg/mL. Tentativas de se formularem soluções de concentração mais elevada de denosumab usando os mesmos excipientes mostraram que a concentração mais elevada afetou a estabilidade do produto, através de um aumento concomitante e proporcional nas HMWS. Por exemplo, uma concentração de 120 mg/mL de denosumab tem uma concentração
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16/151 mais do que 70% mais elevada do que 70 mg/mL de denosumab e é duas vezes a concentração de 60 mg/mL.
[0055] Conformemente, uma formulação aquosa estabilizada de acordo com a presente divulgação resistirá à formação de agregados num grau maior do que formulações previamente conhecidas. Um aspecto da divulgação é uma formulação aquosa estabilizada caracterizada por um pH de 5,0 a menos do que 5,2. Outro aspecto não exclusivo da divulgação é uma formulação aquosa estabilizada incluindo um inibidor da agregação de aminoácidos. São também proporcionadas apresentações de dosagem relacionadas, p.ex., como frascos de uso único, seringas e recipientes de vidro, e métodos relacionados de tratamento. São adicionalmente proporcionados métodos de preparação de formulações farmacêuticas aquosas, estáveis.
[0056] Como descrito em baixo, o pH e inibidor da agregaçao de aminoácidos (p.ex., arginina, dipeptídeo arginina-arginina, dipeptídeo arginina-fenilalanina) são duas alavancas que se mostrou que reduzem o nível de HMWS e taxa de formação de HMWS de denosumab a 120 mg/mL. As HMWS podem ser descritas como interações de proteínas intermoleculares que são irreversíveis (p.ex., covalentes) ou reversíveis (p.ex., interações autoassociadas não covalentes). Existem quatro causas bem aceites para reações de autoassociação de proteínas que podem levar a aumentos na viscosidade e HMWS; interações hidrofóbicas, carregadas, polares e dipolares. Tanto o pH da formulação como a arginina (um aminoácido básico altamente carregado a valores de pH neutros a ácidos) podem interferir
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17/151 com forças intermoleculares de proteínas carregadas. Sem
desejar estar limitado a qualquer teoria parti .cular é
concebível que a formação das HMWS de denosumab a 120 mg/ mL de
seja baseada na carga de proteína e estas mudanças na
formulação estão perturbando as forças de carga envolvidas no mecanismo de formação das HMWS. Adicionalmente sem desejar estar limitado a qualquer teoria particular é concebível que poderíam também existir interações de autoassociação de proteínas hidrofóbicas na formação das HMWS, uma vez que a arginina contém uma cadeia alifática curta de hidrocarbonetos na cadeia lateral. Esta cadeia alifática pode perturbar interações hidrofóbicas entre proteínas. Esta ideia é adicionalmente apoiada pela inclusão de fenilalanina na formulação para ter uma redução adicional nos níveis de HMWS. Sem desejar estar limitado a qualquer teoria particular, a arginina estabiliza o anticorpo anti-RANKL de uma maneira diferente daquela da fenilalanina, tal que, se a arginina interagir com o anticorpo através de interações hidrofóbicas, a arginina pode interagir com o anticorpo de um ou mais outros modos.
[0057] Outros excipientes que podem ter um impacte potencialmente positivo na redução do nível e taxa de formação de HMWS podem ter um grupo positivamente carregado similar a valores de pH neutros a ácidos quando comparados com arginina e/ou podem ter natureza hidrofóbica similar à fenilalanina. Exemplos destes excipientes podem incluir lisina, arginina de N-acetila, lisina de N-acetila, tirosina, triptofano e leucina.
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[0058] As formulações, apresentações de dosagem e métodos são contemplados como incluindo modalidades incluindo qualquer combinação de um ou mais dos elementos, características e passos opcionais adicionais adicionalmente descritos em baixo (incluindo aqueles mostrados nas figuras), a não ser que apresentado de outro modo.
[0059] Em jurisdições que proíbem o patenteamento de métodos que são praticados no corpo humano, o significado de administração de uma composição a um sujeito humano deverá estar restrito à prescrição de uma substância controlada que um sujeito humano aut©administrará por qualquer técnica (p.ex., oralmente, inalação, aplicação tópica, injeção, inserção, etc.) . É pretendida a interpretação razoável mais ampla que seja consistente com as leis ou regulamentos definindo o assunto patenteável. Em jurisdições que não proíbem o patenteamento de métodos que são praticados no corpo humano, a administração de composições inclui ambos os métodos praticados no corpo humano e também as atividades anteriores.
[0060] Como usado aqui, o termo compreendendo indica a inclusão potencial de outros agentes, elementos, passos ou características, adicionalmente àqueles especificados.
[0061] Deve ser entendido que todas as limitações numéricas máximas dadas ao longo deste relatório descritivo incluem como aspectos alternativos gamas formadas com todas as limitações numéricas mais baixas correspondentes, como se tais gamas fossem expressamente escritas. Todas as limitações numéricas máximas dadas ao longo deste relatório descritivo incluirão
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19/151 como aspectos alternativos gamas formadas com todas as limitações numéricas mais elevadas, como se tais gamas fossem expressamente escritas. Todas as gamas numéricas dadas ao longo deste relatório descritivo incluirão todas as gamas numéricas mais estreitas que residam dentro de tal gama numérica mais ampla, como se tais gamas numéricas mais estreitas fossem todas expressamente escritas aqui. As dimensões e valores divulgados aqui devem ser entendidos como incluindo a divulgação tanto do valor recitado como do número exato correspondente, p.ex., um valor descrito como cerca de 10 mM deve ser entendido como incluindo, como uma divulgação alternativa, 10 mM.
[0062] Os termos quantidade terapeuticamente eficaz, como usados aqui, se referem a uma quantidade de um composto suficiente para tratar, melhorar ou prevenir a doença ou condição identificada ou para exibir um efeito terapêutico, profilático ou inibidor detectável. O efeito pode ser detectado por, por exemplo, uma melhoria na condição clínica ou redução nos sintomas. A quantidade eficaz precisa para um sujeito dependerá do peso corporal, tamanho e saúde do sujeito; da natureza e extensão da condição; e do terapêutico ou combinação de terapêuticos selecionado para administração. Onde um fármaco foi aprovado pela U.S. Food and Drug Administration (FDA), uma quantidade terapeuticamente eficaz se refere à dosagem aprovada pela FDA ou por sua agência estrangeira equivalente para tratamento da doença ou condição identificada.
[0063] A presente divulgação proporciona formulações farmacêuticas aquosas estabilizadas (ou estáveis) como
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20/151 demonstrado pelas quantidades reduzidas de agregados e/ou taxas reduzidas de formação de agregados após armazenamento. Como descrito aqui, a estabilidade de tais formulações é mostrada pelas quantidades reduzidas de HMWS e/ou taxas de formação reduzidas de HMWS após armazenamento durante períodos de tempo variados e a temperaturas variadas. Em geral, as formulações de estabilidade mais elevada estão associadas a quantidades mais baixas de HMWS, taxas de formação mais baixas de HMWS e/ou picos principais de anticorpos mais elevados a temperaturas de armazenamento mais elevadas, em relação a temperaturas mais baixas. Como usado aqui, o termo espécies de elevado peso molecular ou HMWS se refere a agregados de ordem mais elevada do anticorpo das formulações, bem como agregados de ordem mais baixa do anticorpo das formulações. Agregados de ordem mais baixas incluem, por exemplo, espécies de dímero. As quantidades e taxas de formação de agregados podem ser medidas ou monitorizadas por técnicas, tais como, p.ex., SE-UHPLC. Os cromatogramas de SE-UHPLC do anticorpo, em alguns casos, mostram um pico em torno de 5,8 minutos representando a quantidade de HMWS da formulação farmacêutica aquosa, um pico em torno de 6,7 minutos representando as espécies de dímero e um pico em torno de 8,0 minutos refletindo a quantidade de formas não agregadas, intatas do anticorpo. Em relação ao armazenamento a 4 °C, o armazenamento a 37 °C permite a aceleração de um ensaio de estabilidade tal que a estabilidade de uma formulação particular possa ser determinada em um período de tempo mais curto, em relação ao período de tempo de
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21/151 armazenamento a 4 °C. Por exemplo, o armazenamento a 37 °C durante 1, 2 ou 3 meses pode ser indicativo ou preditivo do armazenamento a 4 °C durante 36 meses.
[0064] Em um tipo de modalidade, uma formulação estabilizada como descrita aqui mostrará uma extensão e taxa de formação de HMWS reduzidas após 3 meses de armazenamento a 37 °C, em comparação com uma formulação de controle de concentração equivalente consistindo em acetato a 10 mM, sorbitol a 5% (p/v), polissorbato 20 a 0,01% (p/v) como excipientes e tendo um pH da solução de 5,2.
[0065] Em outro tipo de modalidade, uma formulação estabilizada como descrita aqui e incluindo um inibidor da agregação de aminoácidos mostrará uma extensão reduzida da formação de HWMS após 1 mês de armazenamento a 37 °C, em comparação com uma formulação de controle equivalente sem o inibidor da agregação de aminoácidos. Por exemplo, a extensão da formação pode ser reduzida tal que a % de quantidade de HMWS por SE-UPHLC seja mais baixa em pelo menos cerca de 0,1% ou cerca de 0,2% ou cerca de 0,3% ou cerca de 0,4% ou cerca de 0,5% ou cerca de 0,6% ou cerca de 0,7%, por exemplo em uma gama de cerca de 0,1% a cerca de 2%, ou cerca de 0,1% a cerca de 1%, em comparação com a formulação de controle após 1 mês de armazenamento a 37 °C.
[0066] Em outro tipo de modalidade, uma formulação estabilizada como descrita aqui terá uma baixa quantidade de HMWS após 1 mês de armazenamento a 37 °C, por SE-UHPLC. Por exemplo, a quantidade de HMWS pode ser não mais do que 2% ou
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22/151 menos do que 2% ou não mais do que 1, 9% ou menos do que 1, 9% ou não mais do que 1,8% ou menos do que 1,8% ou não mais do que 1,7% ou menos do que 1,7% ou não mais do que 1,6% ou menos do que 1,6% ou não mais do que 1,5% ou menos do que 1,5% ou não mais do que 1,4% ou menos do que 1,4% ou não mais do que 1,3% ou menos do que 1,3% ou não mais do que 1,2% ou menos do que 1,2%, por exemplo em uma gama de cerca de 0,01% a cerca de
2% ou cerca de 0, 01% a cerca de 1,9% ou cerca de 0,01% a cerca
de 1, 8% ou cerca de 0,01% a cerca de 1,7% ou cerca de 0,01% a
cerca de 1, 6% ou cerca de 0, 01% a cerca de 1,5% ou cerca de
0, 01% a cerca de 1,4% ou cerca de 0,01% a cerca de 1,3% ou
cerca de 0, 01% a cerca de 1 ,2%. Em outro tipo de concretização,
a quantidade de HMWS após 1 mês de armazenamento a 37 °C, por SE-UHPLC, pode ser maior do que 2%, p.ex., maior do que 2% e até 3%, enquanto a taxa reduzida de agregação proporcionada pelo inibidor da agregação de aminoácidos permitirá uma vida de prateleira do produto adequada, p.ex., até três anos ou até dois anos.
[0067] Em outro tipo de modalidade, uma formulação estabilizada como descrita aqui terá uma baixa quantidade de HMWS após 3 meses de armazenamento a 37 °C, por SE-UHPLC. Por exemplo, a quantidade de HMWS pode ser não mais do que 2% ou menos do que 2% ou não mais do que 1, 9% ou menos do que 1, 9% ou não mais do que 1,8% ou menos do que 1,8% ou não mais do que 1,7% ou menos do que 1,7% ou não mais do que 1,6% ou menos do que 1,6% ou não mais do que 1,5% ou menos do que 1,5% ou não mais do que 1,4% ou menos do que 1,4% ou não mais do que
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1,3% ou menos do que 1,3% ou não mais do que 1,2% ou menos do que 1,2%, por exemplo em uma gama de cerca de 0,01% a cerca de 2% ou cerca de 0, 01% a cerca de 1,9% ou cerca de 0,01% a cerca
de 1,8% ou cerca de 0,01% a cerca de 1,7% ou cerca de 0,01% a
cerca de 1,6% ou cerca de 0, 01% a cerca de 1,5% ou cerca de
0, 01% a cerca de 1,4% ou cerca de 0,01% a cerca de 1,3% ou
cerca de 0,01% a cerca de 1, 2%.
[0068] Em outro tipo de modalidade, uma formulação
estabi li zada como ’ descrita aqui terá uma baixa quant idade de
HMWS após 36 meses de armazenamento a 4 °C, por SE-UHPLC. Por exemplo, a quantidade de HMWS pode ser não mais do que 2% ou menos do que 2% ou não mais do que 1, 9% ou menos do que 1, 9% ou não mais do que 1,8% ou menos do que 1,8% ou não mais do que 1,7% ou menos do que 1,7% ou não mais do que 1,6% ou menos do que 1,6% ou não mais do que 1,5% ou menos do que 1,5% ou não mais do que 1,4% ou menos do que 1,4% ou não mais do que 1,3% ou menos do que 1,3% ou não mais do que 1,2% ou menos do que 1,2%, por exemplo em uma gama de cerca de 0,01% a cerca de 2% ou cerca de 0, 01% a cerca de 1,9% ou cerca de 0,01% a cerca
de 1,8% ou cerca de 0,01% a cerca de 1,7% ou cerca de 0,01% a
cerca de 1, 6% ou cerca de 0, 01% a cerca de 1,5% ou cerca de
0, 01% a cerca de 1,4% ou cerca de 0,01% a cerca de 1,3% ou
cerca de 0, 01% a cerca de 1, 2%.
[0069] Em outro tipo de modalidade, uma formulação
estabilizada como descrita aqui terá uma elevada quantidade do pico principal de denosumab ou outro anticorpo (ou sua porção de ligação ao antígeno) após 1 mês de armazenamento a 37 °C,
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24/151 por SE-UHPLC. Por exemplo, a quantidade do pico principal pode ser pelo menos 95% ou mais do que 95% ou pelo menos 96% ou mais do que 96% ou pelo menos 97% ou mais do que 97% ou pelo menos 97,5% ou mais do que 97,5% ou pelo menos 98% ou mais do que 98% ou pelo menos 98,1% ou mais do que 98,1% ou pelo menos 98,2% ou mais do que 98,2% ou pelo menos 98,3% ou mais do que 98,3% ou pelo menos 98,4% ou mais do que 98,4% ou pelo menos 98,5% ou mais do que 98,5% ou pelo menos 98,6% ou mais do que 98,6%, por exemplo em uma gama de cerca de 95% a cerca de 99, 9%
ou cerca de 96% c 1 cerca de 99, 9% ou cerca de 97% a cerca de
99, 9% ou cerca d« s 97,5% a cerca de 99,9% ou cerca de 98% a
cerca de 99,9% ou cerca de 98,1% a cerca de 99, 9% ou cerca de
98,2% a cerca de 99,9% ou cerca de 98,3% a cerca de 99, 9% ou
cerca de 98,4% a cerca de 99, 9% ou cerca d« 3 98,5% a cerca de
99,9% ou cerca de 98,6% a cerca de 99,9%.
[0070] Em out ro tipo de modalidade, uma formulação
estabilizada como descrita aqui terá uma elevada quantidade do pico principal de denosumab ou outro anticorpo (ou sua porção de ligação ao antígeno) após 3 meses de armazenamento a 37 °C, por SE-UHPLC. Por exemplo, a quantidade do pico principal pode ser pelo menos 95% ou mais do que 95% ou pelo menos 96% ou mais do que 96% ou pelo menos 97% ou mais do que 97% ou pelo menos 97,5% ou mais do que 97,5% ou pelo menos 98% ou mais do que 98% ou pelo menos 98,1% ou mais do que 98,1% ou pelo menos 98,2% ou mais do que 98,2% ou pelo menos 98,3% ou mais do que 98,3% ou pelo menos 98,4% ou mais do que 98,4% ou pelo menos 98,5% ou mais do que 98,5% ou pelo menos 98,6% ou mais do que
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98,6%, por exemplo em uma gama de cerca de 95% a cerca de 99, 9% ou cerca de 96% a cerca de 99, 9% ou cerca de 97% a cerca de 99,9% ou cerca de 97,5% a cerca de 99,9% ou cerca de 98% a
cerca de 99, 9% ou cerca de 98,1% a cerca de 99, 9% ou cerca de
98, 2% a cerca de 99, 9% ou cerca de 98,3% a cerca de 99, 9% ou
cerca de 98, 4% a cerca de 99,9% ou cerca de 98, 5% a cerca de
99, 9% ou cerca de 98, 6% a cerca de 99,9%.
[0071] Em outro tipo de modalidade, uma formulação estabilizada como descrita aqui terá uma elevada quantidade do pico principal de denosumab ou outro anticorpo (ou sua porção de ligação ao antígeno) após 36 meses de armazenamento a 4 °C, por SE-UHPLC. Por exemplo, a quantidade do pico principal pode ser pelo menos 95% ou mais do que 95% ou pelo menos 96% ou mais do que 96% ou pelo menos 97% ou mais do que 97% ou pelo menos 97,5% ou mais do que 97,5% ou pelo menos 98% ou mais do que 98% ou pelo menos 98,1% ou mais do que 98,1% ou pelo menos 98,2% ou mais do que 98,2% ou pelo menos 98,3% ou mais do que 98,3% ou pelo menos 98,4% ou mais do que 98,4% ou pelo menos 98,5% ou mais do que 98,5% ou pelo menos 98,6% ou mais do que 98,6%, por exemplo em uma gama de cerca de 95% a cerca de 99, 9% ou cerca de 96% a cerca de 99, 9% ou cerca de 97% a cerca de 99,9% ou cerca de 97,5% a cerca de 99,9% ou cerca de 98% a
cerca de 99, 9% ou cerca de 98,1% a cerca de 99, 9% ou cerca de
98, 2% a cerca de 99, 9% ou cerca de 98,3% a cerca de 99, 9% ou
cerca de 98, 4% a cerca de 99,9% ou cerca de 98, 5% a cerca de
99, 9% ou cerca de 98, 6% a cerca de 99,9%.
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[0072] Em modalidades adicionais é contemplado que a formulação estabilizada terá tanto uma baixa quantidade de HMWS e uma elevada quantidade de pico principal, de acordo com uma especificação descrita acima, após armazenamento.
[0073] Em aspectos exemplificativos, as formulações farmacêuticas aquosas compreendem não mais do que cerca de 4% de espécies de elevado peso molecular (HMWS) e/ou compreendem mais do que cerca de 96% do pico principal de anticorpo, como medido por SE-UHPLC, após armazenamento. Em aspectos exemplificativos, as formulações farmacêuticas aquosas compreendem não mais do que cerca de 3% de espécies de elevado peso molecular (HMWS) e/ou compreendem mais do que cerca de 97% do pico principal de anticorpo, como medido por SE-UHPLC, após armazenamento. Em aspectos exemplificativos, as formulações farmacêuticas aquosas compreendem menos do que cerca de 2% de HMWS e/ou mais do que cerca de 98% do pico principal de anticorpo, como medido por SE-UHPLC, após armazenamento. Em aspectos exemplificativos, o armazenamento é a uma temperatura de cerca de 2 °C até cerca de 8 °C (p.ex., cerca de 2 °C, cerca de 3 °C, cerca de 4 °C, cerca de 5 °C, cerca de 6 °C, cerca de 7 °C, cerca de 8 °C) durante pelo menos 12 meses, 24 meses ou 36 meses (p.ex., pelo menos ou cerca de 12 meses, pelo menos ou cerca de 16 meses, pelo menos ou cerca de 20 meses, pelo menos ou cerca de 24 meses, pelo menos ou cerca de 28 meses, pelo menos pelo menos ou cerca de 32 meses, pelo menos ou cerca de 36 meses, opcionalmente, mais tempo). Em aspectos exemplares, o armazenamento é de cerca de 20 °C a
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cerca de 30 °C (p.ex., cerca de 21 °C a cerca de 30 °C, cerca
de 22 °C a cerca de 30 °C, cerca de 23 °C a cerca de 30 °C,
cerca de 24 °C a cerca de 30 °C, cerca de 25 °C a cerca de 30
°C, cerca de 26 °C a cerca de 30 °C, cerca de 27 °C a cerca de
30 °C, cerca de 28 °C a cerca de 30 °C, cerca de 28 °C, cerca
de 30 °C, cerca de 20 °C a cerca de 29 °C, cerca de 20 °C a cerca de 28 °C, cerca de 20 °C a cerca de 27 °C, cerca de 20 °C a cerca de 26 °C, cerca de 20 °C a cerca de 25 °C, cerca de 20 °C a cerca de 24 °C, cerca de 20 °C a cerca de 23 °C, cerca de 20 °C a cerca de 22 °C) durante cerca de 1 mês (p.ex., cerca de 26 dias, cerca de 27 dias, cerca de 28 dias, cerca de 29 dias, cerca de 30 dias, cerca de 31 dias, cerca de 32 dias, cerca de 33 dias, cerca de 34 dias, cerca de 35 dias, cerca de 36 dias). Em aspectos exemplificativos, o armazenamento compreende um primeiro armazenamento seguido por um segundo armazenamento e o primeiro armazenamento é de cerca de 2 °C a cerca de 8 °C durante pelo menos 12 meses, 24 meses ou 36 meses e o segundo armazenamento é de cerca de 20 °C a cerca de 30 °C durante cerca de 1 mês. Em casos exemplificativos, as formulações farmacêuticas aquosas compreendem não mais do que 2% de HMWS ou menos do que 2% de HMWS ou não mais do que 1,9%
de HMWS ou menos do que 1, 9% de HMWS ou não mai s de 1,8% de
HMWS ou menos de 1,8 % de HMWS ou não mais do que 1,7% de HMWS
ou menos do que 1, 7% de HMWS ou não mais do que 1, 6% de HMWS
ou menos do que 1, 6% de HMWS ou não mais do que 1,5% de HMWS
ou menos do que 1, 5% de HMWS ou não mais de 1, 4 % de HMWS ou
menos de 1,4% de HMWS ou nao mais do que 1 , 3% de HMWS ou menos
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28/151 do que 1,3% de HMWS ou não mais do que 1,2% de HMWS ou menos do que 1,2% de HMWS, por exemplo em uma gama de cerca de 0,01% a cerca de 2% de HMWS ou cerca de 0,01% a cerca de 1,9% de HMWS ou cerca de 0,01% a cerca de 1,8% de HMWS ou cerca de 0,01% a cerca de 1,7% de HMWS ou cerca de 0,01% a cerca de 1,6% de HMWS ou cerca de 0,01% a cerca de 1,5% de HMWS ou cerca de 0,01% a cerca de 1,4% de HMWS ou cerca de 0,01% a cerca de 1,3% de HMWS ou cerca de 0,01% a cerca de 1,2% de HMWS, opcionalmente, como medido por SE-UHPLC. Em aspectos alternativos ou adicionais, as formulações farmacêuticas aquosas compreendem mais do que 98% do pico principal do anticorpo ou pelo menos 95% do pico principal do anticorpo ou mais do que 95% do pico principal do anticorpo ou pelo menos 96% do pico principal do anticorpo ou mais do que 96% do pico principal do anticorpo ou pelo menos 97% do pico principal do anticorpo ou mais do que 97% do pico principal do anticorpo ou pelo menos 97,5% do pico principal do anticorpo ou mais do que 97,5% do pico principal do anticorpo ou pelo menos 98% do anticorpo principal pico ou mais do que 98% do pico principal do anticorpo ou pelo menos 98,1% do pico principal do anticorpo ou mais do que 98,1% do pico principal do anticorpo ou pelo menos 98,2% do pico principal do anticorpo ou mais do que 98,2% do pico principal do anticorpo ou pelo menos 98,3% de pico principal de anticorpo ou mais do que 98,3% de pico principal de anticorpo ou pelo menos 98, 4% de pico principal de anticorpo ou mais do que 98,4% de pico principal de anticorpo ou pelo menos 98,5% de pico principal de anticorpo ou mais do que 98,5% de pico principal de anticorpo ou pelo
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29/151 menos 98,6% do pico principal de anticorpo ou mais do que 98,6% do pico principal de anticorpo, por exemplo em uma gama de cerca de 95% a cerca de 99, 9% do pico principal de anticorpo ou de cerca de 96% a cerca de 99, 9% de pico principal de anticorpo ou de cerca de 97% a cerca de 99,9% de pico principal de anticorpo ou de cerca de 97,5% a cerca de 99,9% de anticorpos principal pico ou cerca de 98% a cerca de 99, 9% do pico principal de anticorpo ou cerca de 98,1% a cerca de 99,9% de pico principal de anticorpo ou cerca de 98,2% a cerca de 99,9% de pico principal de anticorpo ou cerca de 98,3% a cerca de 99,9% de pico principal de anticorpo ou cerca de 98,4% a cerca de 99,9% do pico principal do anticorpo ou cerca de 98,5% a cerca de 99,9% do pico principal do anticorpo ou cerca de 98,6% a cerca de 99,9% do pico principal do anticorpo, opcionalmente, como medido por SE-UHPLC.
[0074] Como usado aqui, o termo anticorpo se refere a uma proteína tendo um formato de imunoglobulina convencional, compreendendo cadeias pesadas e leves e compreendendo regiões variáveis e constantes. Por exemplo, um anticorpo pode ser uma IgG que é uma estrutura em forma de Y de dois pares idênticos de cadeias de polipeptídeo, tendo cada par uma cadeia leve (tendo tipicamente um peso molecular de cerca de 25 kDa) e uma pesada (tendo tipicamente um peso molecular de cerca de 5070 kDa) . Um anticorpo tem uma região variável e uma região constante. Nos formatos de IgG, a região variável tem geralmente cerca de 100-110 ou mais aminoácidos, compreende três regiões determinantes da complementaridade (CDRs), é
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30/151 principalmente responsável pelo reconhecimento do antígeno e varia substancialmente entre outros anticorpos que se ligam a diferentes antígenos. Ver, p. ex., Janeway et al., Structure of the Antibody Molecule and the Immunoglobulin Genes, Immunobiology: The Immune System in Health and Disease, 4a ed. Elsevier Science Ltd./Garland Publishing, (1999).
[0075] Brevemente, em um molde de anticorpo, as CDRs estao embebidas dentro de um arcabouço na região variável de cadeia pesada e leve onde constituem as regiões largamente responsáveis pela ligação e reconhecimento do antígeno. Uma região variável compreende pelo menos três CDRs de cadeia pesada ou três CDRs de cadeia leve (Kabat et ai., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, Public Health Service N.I.H., Bethesda, Md.; ver também Chothia e Lesk, 1987, J. Mol. Biol. 196:901-917; Chothia et al., 1989, Nature 342: 877-883) , dentro de uma região de arcabouço (designadas regiões de arcabouço 1-4, FR1, FR2, FR3 e FR4, por Kabat et al., 1991; ver também Chothia e Lesk, 1987, supra).
[0076] As cadeias leves humanas sao tipicamente classificadas como cadeias leves kappa e lambda. As cadeias pesadas são classificadas como mu, delta, gama, alfa ou épsilon e definem o isótipo do anticorpo como IgM, IgD, IgG, IgA e IgE, respectivamente. A IgG tem várias subclasses, incluindo, mas não se limitando a, IgGl, IgG2, IgG3 e IgG4 . A IgM tem subclasses, incluindo, mas não se limitando a, IgMl e IgM2. As modalidades da divulgação incluem todas tais classes ou isótipos de anticorpos. A região constante de cadeia leve pode
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31/151 ser, por exemplo, uma região constante de cadeia leve tipo kappa ou lambda, p.ex., uma região constante de cadeia leve tipo kappa ou lambda humana. A região constante de cadeia pesada pode ser, por exemplo, uma região constante de cadeia pesada tipo alfa, delta, épsilon, gama ou mu, p.ex., uma região constante de cadeia pesada tipo alfa, delta, épsilon, gama ou mu humana. Conformemente, em modalidades exemplificativas, o anticorpo é um anticorpo do isótipo IgA, IgD, IgE, IgG ou IgM, incluindo qualquer um de IgGl, IgG2, IgG3 ou IgG4. Em aspectos exemplificativos, o anticorpo anti-RANKL é um anticorpo IgGl, IgG2 ou IgG4.
[0077] Em vários aspectos, o anticorpo pode ser um anticorpo monoclonal ou um anticorpo policlonal. Em alguns aspectos, o anticorpo compreende uma sequência que é substancialmente similar a um anticorpo ocorrendo naturalmente produzido por um mamífero, p.ex., camundongo, rato, coelho, cabra, cavalo, galinha, hamster, porco, humano e similares. A este respeito, o anticorpo pode ser considerado como um anticorpo de mamífero, p.ex., um anticorpo de camundongo, anticorpo de rato, anticorpo de coelho, anticorpo de cabra, anticorpo de cavalo, anticorpo de galinha, anticorpo de hamster, anticorpo de porco, anticorpo humano e similares. Em certos aspectos, o anticorpo anti-RANKL é um anticorpo humano monoclonal. Em certos aspectos, a proteína recombinante é um anticorpo quimérico ou um anticorpo humanizado. 0 termo anticorpo quimérico é usado aqui para se referir a um anticorpo contendo domínios constantes de uma espécie e os domínios variáveis de uma segunda ou, mais
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32/151 geralmente, contendo trechos da sequência de aminoácidos de pelo menos duas espécies. 0 termo humanizado quando usado em relação a anticorpos se refere a anticorpos tendo pelo menos regiões CDR de uma fonte não humana que são manipulados para terem uma estrutura e função imunológicas mais similares aos anticorpos humanos verdadeiros do que os anticorpos originais da fonte. Por exemplo, a humanização pode envolver enxerto de CDR de um anticorpo não humano, tal como um anticorpo de camundongo, em um anticorpo humano. A humanização pode também envolver selecionar substituições de aminoácidos para fazer
com que uma sequência nao humana se pareça ma is como uma
sequênci .a humana.
[0078] Um anticorpo, em vários aspectos, é clivado em
fragmentos por enzimas, tais como, p .ex., papaí .na e pepsina . A
papaina cliva um anticorpo para produzir dois fragmentos Fab e um único fragmento Fc. A pepsina cliva um anticorpo para produzir um fragmento F(ab’)2 e um fragmento pFc*. Em aspectos exemplificativos, a formulação farmacêutica aquosa compreende um fragmento de anticorpo, p.ex., um Fab, Fc, F(ab’)2 ou um pFc’, que retém pelo menos um local de ligação ao antígeno (RANKL). No que diz respeito às formulações farmacêuticas aquosas e métodos da presente divulgação, o anticorpo pode não ter certas porções de um anticorpo e pode ser um fragmento de anticorpo que se liga a RANKL. Em aspectos exemplificativos, o fragmento de anticorpo é uma porção de ligação ao antígeno de um anticorpo anti-RANKL.
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[0079] Os produtos de proteínas de anticorpos podem ser um formato de ligação ao antígeno baseado em fragmentos de anticorpos, p. ex., scFvs, Fabs e VHH/VH, que retêm a capacidade total de ligação ao antígeno. 0 fragmento de ligação ao antígeno mais pequeno que retém seu local de ligação ao antígeno completo é o fragmento Fv, que consiste inteiramente em regiões variáveis (V) . Um ligante de peptídeo de aminoácidos flexível, solúvel é usado para conectar as regiões V a um fragmento scFv (variável de fragmento de cadeia única) para estabilização da molécula, ou os domínios constantes (C) são adicionados às regiões V para gerar um fragmento Fab [fragmento, ligação ao antígeno]. Tanto scFv como Fab são fragmentos amplamente usados que podem ser facilmente produzidos em hospedeiros, p.ex., hospedeiros procarióticos. Outros produtos de proteínas de anticorpos incluem scFv estabilizado por ligação de dissulfeto (ds-scFv), Fab de cadeia única (scFab), bem como formatos de anticorpos di- e multiméricos como dia-, tria- e tetra-corpos, ou minicorpos (miniAbs) que compreendem diferentes formatos consistindo em scFvs ligados a domínios de oligomerização. Os fragmentos mais pequenos são VHH/VH de Abs de cadeia pesada de camelídeo, bem como Abs de domínio único (sdAb). O bloco de construção que é o mais frequentemente usado para criar novos formatos de anticorpos é o fragmento de anticorpo de domínio variável (V) de cadeia única (scFv), que compreende domínios V da cadeia pesada e leve (domínio VH e VL) ligados por um ligante de peptídeo de ~15 resíduos de aminoácidos. Um pepticorpo ou fusão
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34/151 peptídeo-Fc é ainda outro produto de proteína de anticorpo, A estrutura de um pepticorpo consiste em um peptídeo biologicamente ativo enxertado em um domínio Fc. Os pepticorpos são bem descritos na técnica. Ver, p.ex., Shimamoto et al., mAbs 4 (5) : 586-591 (2012) .
[0080] Outros produtos de proteínas de anticorpos incluem um anticorpo de cadeia única (SCA); um diacorpo; um triacorpo; um tetracorpo; anticorpos biespecíficos ou triespecíficos e similares. Os anticorpos biespecíficos podem ser divididos em cinco classes principais: BsIgG, IgG pendente, fragmentos de BsAb, proteínas de fusão biespecíficas e conjugados de BsAb. Ver, p.ex., Spiess et al., Molecular Immunology 67 (2) Parte A: 97-106 (2015).
[0081] Em aspectos exemplificaiivos, o anticorpo antiRANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende, consiste essencialmente em ou consiste em qualquer um destes produtos de proteínas de anticorpos (p.ex., scFv, Fab VHH/VH, fragmento Fv, ds-scFv, scFab, anticorpo dimérico, anticorpo multimérico (p.ex., um diacorpo, triacorpo, tetracorpo), miniAb, pepticorpo VHH/VH de anticorpo de cadeia pesada de camelídeo, sdAb, diacorpo; um triacorpo; um tetracorpo; um anticorpo biespecífico ou triespecífico, BsIgG, IgG pendente, fragmento BsAb, proteína de fusão biespecífica e conjugado de BsAb).
[0082] Em aspectos exemplificativos, o anticorpo antiRANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende, consiste essencialmente em ou consiste em um produto de
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35/151 proteína de anticorpo na forma monomérica ou polimérica, oligomérica ou multimérica. Em certas modalidades nas quais o anticorpo compreende dois ou mais fragmentos de regiões de ligação ao antígeno distintos, o anticorpo é considerado biespecífico, triespecífico ou multiespecífico, ou bivalente, trivalente ou multivalente, dependendo do número de epítopos distintos que são reconhecidos e ligados pelo anticorpo.
[0083] Um anticorpo antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anticorpo anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno para uso na formulação é um anticorpo ou uma sua porção de ligação ao antígeno que se liga especificamente à proteína RANKL humana ou proteína osteoprotegrina (OPGL) humana de um seu fragmento e inibe ou neutraliza a atividade da proteína RANKL ou OPGL e/ou inibe a via de sinalização de RANK/RANKL e é referido aqui como um anticorpo monoclonal anti-RANKL humano ou uma sua de ligação ao antígeno. Por exemplo, as formulações descritas aqui podem compreender um anticorpo monoclonal anti-RANKL humano que se liga especificamente à sequência de aminoácidos de RANKL humano (SEQ ID NO: 12) ou uma sua porção. A proteína RANKL humana é uma proteína transmembranar ou solúvel que é codificada pela sequência de polinucleotídeos de SEQ ID NO: 11, que é conhecida como sendo essencial para a formação, função e sobrevivência de osteoclastos. Por exemplo, os anticorpos anti-RANKL humanos inibem a interação de RANKL com seu receptor RANK.
[0084] Um exemplo de um anticorpo monoclonal anti-RANKL humano é denosumab, que é vendido em forma comercial como Xgeva®
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36/151 e Prolia®. Xgeva® é uma formulação de dose de 120 mg de denosumab em 1,7 mL de solução (70 mg/mL) em um frasco de uso único, contendo 120 mg de denosumab, acetato (18 mM), sorbitol (4,6%), Água Para Injeção (USP) e hidróxido de sódio até um pH de 5,2. Prolia® está disponível como formulações de dose de 60 mg de denosumab em 1 mL de solução (60 mg/mL). Cada seringa pré-cheia de uso único de 1 mL de Prolia® contém 60 mg de denosumab (solução a 60 mg/mL), sorbitol a 4,7, acetato a 17 mM, polissorbato 20 a 0,01%, Água Para Injeção (USP) e hidróxido de sódio até um pH de 5,2. Formulações como descritas aqui, e incluindo denosumab ou uma sua porção, são especificamente contempladas. O denosumab é um anticorpo monoclonal IgG2 totalmente humano que se liga a RANKL humano. O denosumab tem um peso molecular aproximado de 147 kDa e é expresso na linha de células do ovário do hamster chinês (CHO). As sequências de aminoácidos da cadeia leve (LC) variável e cadeia pesada (HC) variável de denosumab são apresentadas em SEQ ID NO: 1 e 2, respectivamente, e as LC e HC de comprimento total são apresentadas como SEQ ID NO: 3 e 4; respectivamente. Um ácido nucleico compreendendo uma sequência de nucleotídeos codificando a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 (a LC variável de denosumab) é, em alguns aspectos, um ácido nucleico de SEQ ID NO: 19. Um ácido nucleico compreendendo uma sequência de nucleotídeos codificando a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 2 (a HC variável de denosumab) é, em alguns aspectos, um ácido nucleico de SEQ ID NO: 20. Um ácido nucleico compreendendo uma sequência de nucleotídeos codificando a
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37/151 sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 3 (a LC de denosumab de comprimento total) é, em alguns aspectos, um ácido nucleico de SEQ ID NO: 21. Um ácido nucleico compreendendo uma sequência de nucleotídeos codificando a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 4 (a HC de denosumab de comprimento total) é, em alguns aspectos, um ácido nucleico de SEQ ID NO: 23. A forma madura da LC, que é representada como os aminoácidos 21-235 da LC de comprimento total, é apresentada como SEQ ID NO: 13, enquanto a forma madura da HC, que é representada como os aminoácidos 20-467 da HC de comprimento total, é apresentada como SEQ ID NO: 14. Um ácido nucleico compreendendo uma sequência de nucleotídeos codificando a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 13 (a forma madura da LC) é, em alguns aspectos, um ácido nucleico de SEQ ID NO: 22. Um ácido nucleico compreendendo uma sequência de nucleotídeos codificando a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 14 (a forma madura da HC) é, em alguns aspectos, um ácido nucleico de SEQ ID NO: 24. Adicionalmente, as CDRs de LC de denosumab são apresentadas como SEQ ID NO: 5 (CDR1 de LC), SEQ ID NO: 6 (CDR2 de LC) e SEQ ID NO: 7 (CDR3 de LC) . As CDRs de HC de denosumab são apresentadas como SEQ ID NO: 8 (CDR1 de HC) , SEQ ID No: 9 (CDR2 de HC) e SEQ ID NO: 10 (CDR3 de HC). 0 denosumab foi descrito e reivindicado no Pedido de Patente Internacional No. WO 03/002713 e Patente dos E.U.A. No. 7,364,736, as divulgações dos quais são deste modo incorporadas por referência nas suas totalidades.
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[0085] Como usado aqui, o termo denosumab inclui bios similares de denosumab. Como usado aqui, biossimilar (de um produto de referência/fármaco biológico aprovado, tal como um terapêutico de proteína, anticorpo, etc.) se refere a um produto biológico que é similar ao produto de referência com base em dados derivados de (a) estudos analíticos que demonstram que o produto biológico é altamente similar ao produto de referência, não obstante diferenças mínimas em componentes clinicamente inativos; b) estudos animais (incluindo a avaliação da toxicidade); e/ou (c) um estudo ou estudos clínico (incluindo a avaliação da imunogenicidade e farmacocinética ou farmacodinâmica) que são suficientes para demonstrar segurança, pureza e potência em uma ou mais condições de uso apropriadas para as quais o produto de referência está licenciado e destinado a ser usado e para o qual é solicitada licença para o produto biológico. Em uma modalidade, o produto biológico biossimilar e o produto de referência utilizam o mesmo mecanismo ou mecanismos de ação para a condição ou condições de uso prescritas, recomendadas ou sugeridas na rotulagem proposta, mas somente na medida em que os mecanismos ou mecanismos de ação sejam conhecidos para o produto de referência. Em uma modalidade, a condição ou condições de uso prescritas, recomendadas ou sugeridas na rotulagem proposta para o produto biológico foram previamente aprovadas para o produto de referência. Em uma modalidade, a via de administração, a forma de dosagem e/ou a força do produto biológico são as mesmas que aquelas do produto de referência.
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Em uma modalidade, a instalação na qual o produto biológico é fabricado, processado, embalado ou retido cumpre padrões concebidos para assegurar que o produto biológico continua a ser seguro, puro e potente. 0 produto de referência pode estar aprovado em pelo menos um de E.U.A., Europa ou Japão. Um biossimilar pode ser, por exemplo, um anticorpo tendo a mesma sequência de aminoácidos primária que um anticorpo comercializado, mas pode ser produzido em diferentes tipos de células ou por diferentes métodos de produção, purificação ou formulação.
[0086] As formulações podem compreender um anticorpo antiRANKL humano compreendendo pelo menos uma das sequências de aminoácidos de SEQ ID NOS: 1-4, 13, 14 ou uma sua porção. As formulações podem compreender um anticorpo anti-RANKL humano compreendendo pelo menos uma das sequências de aminoácidos de CDR apresentadas como SEQ ID NOS: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9 ou SEQ ID NO: 10 ou pelo menos duas das sequências de aminoácidos de CDR apresentadas como SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9 ou SEQ ID NO: 10 ou pelo menos três das sequências de aminoácidos de CDR apresentadas como SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9 ou SEQ ID NO: 10 ou pelo menos quatro das sequências de aminoácidos de CDR apresentadas como SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9 ou SEQ ID NO: 10 ou pelo menos cinco das sequências de aminoácidos de CDR apresentadas como SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9
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40/151 ou SEQ ID NO: 10 ou pelo menos seis das sequências de aminoácidos de CDR apresentadas como SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9 ou SEQ ID NO: 10.
[0087] As formulações podem compreender um anticorpo antiRANKL humano compreendendo pelo menos uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 80% idêntica a qualquer uma de SEQ ID NO: 1-4, 13 e 14 e inibe a interação entre RANKL e seu receptor, RANK, ou um anticorpo anti-RANKL humano compreendendo pelo menos uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 85% idêntica a qualquer uma de SEQ ID NO: 1-4, 13 e 14 e inibe a interação entre RANKL e seu receptor, RANK, ou um anticorpo anti-RANKL humano compreendendo pelo menos uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 90% idêntica a qualquer uma de SEQ ID NO: 1-4, 13 e 14 e inibe a interação entre RANKL e seu receptor, RANK, ou um anticorpo anti-RANKL humano compreendendo pelo menos uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 91% idêntica a qualquer uma de SEQ ID NO: 1-4, 13 e 14 e inibe a interação entre RANKL e seu receptor, RANK, ou um anticorpo anti-RANKL humano compreendendo pelo menos uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 92% idêntica a qualquer uma de SEQ ID NO: 1-4, 13 e 14 e inibe a interação entre RANKL e seu receptor, RANK, ou um anticorpo anti-RANKL humano compreendendo pelo menos uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 93% idêntica a qualquer uma de SEQ ID NO: 1-4, 13 e 14 e inibe a interação entre RANKL e seu receptor, RANK, ou um anticorpo anti-RANKL humano compreendendo pelo menos uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 94% idêntica a qualquer uma de
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SEQ ID NO: 1-4, 13 e 14 e inibe a interação entre RANKL e seu receptor, RANK, ou um anticorpo anti-RANKL humano compreendendo pelo menos uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 95% idêntica a qualquer uma de SEQ ID NO: 1-4, 13 e 14 e inibe a interação entre RANKL e seu receptor, RANK, ou um anticorpo anti-RANKL humano compreendendo pelo menos uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 96% idêntica a qualquer uma de SEQ ID NO: 1-4, 13 e 14 e inibe a interação entre RANKL e seu receptor, RANK, ou um anticorpo anti-RANKL humano compreendendo pelo menos uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 97% idêntica a qualquer uma de SEQ ID NO: 1-4, 13 e 14 e inibe a interação entre RANKL e seu receptor, RANK, ou um anticorpo anti-RANKL humano compreendendo pelo menos uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 98% idêntica a qualquer uma de SEQ ID NO: 1-4, 13 e 14 e inibe a interação entre RANKL e seu receptor, RANK, ou um anticorpo anti-RANKL humano compreendendo pelo menos uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 99% idêntica a qualquer uma de SEQ ID NO: 1-4, 13 e 14 e inibe a interação entre RANKL e seu receptor, RANK.
[0088] Em modalidades exemplificativas, a formulação farmacêutica aquosa compreende um anticorpo anti-RANKL, ou uma sua porção de ligação ao antígeno, incluindo um produto de proteína de anticorpo, como descrito aqui. Em aspectos exemplificativos, o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de CDR1 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID
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NO: 5. Em casos alternativos ou adicionais, o anticorpo antiRANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de CDR2 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 6. Em aspectos alternativos ou adicionais, o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de CDR3 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 10. Em alguns casos, o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende uma SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, e SEQ ID NO: 10. Em aspectos exemplif icat ivos, o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende (i) um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de CDR3 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 7; (ii) um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de CDR1 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 8, opcionalmente, SEQ ID NO: 27; (iii) um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de CDR2 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 9 ou (iv) qualquer sua combinação. Em alguns aspectos, o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende (A) um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma CDR1 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 5, um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma CDR2 de
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43/151 cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 6 e um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma CDR3 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 7; e (B) um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma CDR1 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 8 (opcionalmente, SEQ ID N: 27), um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma CDR2 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 9 e um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma CDR3 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 10. Em aspectos exemplificativos, o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende: (A) um domínio variável de cadeia leve selecionado do grupo consistindo em: (i) um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 80% (p.ex., pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, em pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%) idêntica a SEQ ID NO: 1; (ii) um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por uma sequência de polinucleotídeos compreendendo SEQ ID NO: 19; e (iii) um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por um polinucleotídeo que híbrida sob condições estringentes com o complemento de um polinucleotídeo consistindo em SEQ ID NO: 19; ou (B) o domínio variável de cadeia pesada selecionado do grupo consistindo em: (i) um
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44/151 domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 80% (p.ex., pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, em pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%) idêntica a SEQ ID NO: 2;
(ii) um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por uma sequência de polinucleotídeos compreendendo SEQ ID NO: 20 e (iii) um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por um polinucleotídeo que híbrida sob condições estringentes com o complemento de um polinucleotídeo consistindo em SEQ ID NO: 20; ou (C) um domínio variável de cadeia leve de (A) e um domínio variável de cadeia pesada de (B). Em aspectos exemplificativos, o anticorpo anti-RANKL é um anticorpo totalmente humano, um anticorpo humanizado ou um anticorpo quimérico. Em casos exemplificativos, a porção de ligação ao antígeno é um Fab, Fab', F(ab’)2 ou um Fv de cadeia única. Em aspectos exemplificativos, o anticorpo anti-RANKL é um anticorpo IgGi, IgG2 ou IgG4, opcionalmente em que o anticorpo anti-RANKL compreende uma sequência de SEQ ID NO:
15. Em alguns aspectos, o anticorpo anti-RANKL compreende uma sequência de SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17 ou SEQ ID NO: 18. Em aspectos exemplificativos, o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende: (A) uma cadeia leve selecionada do grupo consistindo em: (i) uma cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 80% (p.ex., pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%,
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45/151 pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, em pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%) idêntica a SEQ ID NO: 3 ou SEQ ID NO: 13; (ii) uma cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por uma sequência de polinucleotideos de SEQ ID NO: 21 ou 23; e (iii) uma cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por um polinucleotídeo que híbrida sob condições estringentes com o complemento de um polinucleotídeo consistindo em SEQ ID NO: 21 ou 23; ou (B) uma cadeia pesada selecionada do grupo consistindo em: (i) uma cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos que é pelo menos 80% (p.ex., pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, em pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%) idêntica a SEQ ID NO: 4 ou SEQ ID NO: 14; (ii) uma cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por uma sequência de polinucleotideos de SEQ ID NO: 22 ou 24 e (iii) uma cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por um polinucleotídeo que híbrida sob condições estringentes com o complemento de um polinucleotídeo consistindo em SEQ ID NO: 22 ou 24; ou (C) um domínio variável de cadeia leve de (A) e um domínio variável de cadeia pesada de (B) .
[0089] A concentração de denosumab ou outro anticorpo antiRANKL humano, ou sua porção de ligação ao antígeno, na formulação aquosa pode estar geralmente em qualquer gama útil, p.ex., cerca de 0,1 a cerca de 200 mg/mL. À medida que a
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46/151 concentração é aumentada existe um aumento na viscosidade, que pode dificultar o processamento da formulação em uma apresentação de dosagem estéril para uso farmacêutico.
[0090] Em um aspecto, a estabilidade melhorada da formulação por um inibidor da agregação de aminoácidos pode existir a qualquer concentração de denosumab ou outro anticorpo antiRANKL humano, ou sua porção de ligação ao antígeno, incluindo cerca de 10 mg/mL a cerca de 200 mg/mL ou cerca de 15 mg/mL a
cerca de 150 mg/mL ou , cerca de 30 mg/ mL a cerca < de 200 mg/mL
ou cerca de 60 mg/mL a cerca de 200 mg/mL ou cerca de 60 mg/mL
a cerca de 180 mg/mL ou cerca de 60 mg/mL a cerca de 160 mg/mL
ou cerca de 60 mg/mL a cerca de 150 mg/mL ou cerca de 60 mg/mL
a cerca de 140 mg/mL ou cerca de 60 mg/mL a cerca de 130 mg/mL
ou cerca de 60 mg/mL a cerca de 120 mg/mL ou cerca de 60 mg/mL
a cerca de 110 mg/mL ou cerca de 60 mg/mL a cerca de 100 mg/mL
ou cerca de 60 mg/mL a cerca de 90 mg/mL ou cerca de 60 mg/mL
a cerca de 80 mg/mL ou cerca de 60 mg/ mL a cerca de 70 mg/mL
ou cerca de 70 mg/mL a cerca de 200 mg/mL ou cerca de 70 mg/mL
a cerca de 180 mg/mL ou cerca de 70 mg/mL a cerca de 160 mg/mL
ou cerca de 70 mg/mL a cerca de 150 mg/mL ou cerca de 70 mg/mL
a cerca de 140 mg/mL ou cerca de 70 mg/mL a cerca de 130 mg/mL
ou cerca de 70 mg/mL a cerca de 120 mg/mL ou cerca de 70 mg/mL
a cerca de 110 mg/mL ou cerca de 70 mg/mL a cerca de 100 mg/mL
ou cerca de 70 mg/mL a cerca de 90 mg/mL ou cerca de 70 mg/mL
a cerca de 80 mg/mL, por exemplo 120 mg/mL.
[0091] Em outro aspecto, a concentração de denosumab ou outro anticorpo anti-RANKL humano, ou sua porção de ligação ao
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47/151 antígeno, para formulações tendo um pH de cerca de 5,0 a menos do que 5,2 é contemplada como incluindo gamas de mais do que
70 mg/mL ou pelo menos 71 mg/mL ou pelo menos cerca de 75 mg/ mL
ou pelo menos cerca de 80 mg/ mL ou pelo menos cerca de 85 mg/ mL
ou pelo menos cerca de 90 mg/mL ou pelo menos cerca de 95 mg/ mL
ou pelo menos cerca de 100 mg/mL ou pelo menos cerca de 105 mg/mL ou pelo menos cerca de 110 mg/mL ou pelo menos cerca de 115 mg/mL ou pelo menos cerca de 120 mg/mL e até cerca de 200 mg/mL. Por exemplo, as gamas contempladas incluem 71 mg/mL a
cerca de 200 mg/mL ou cerca de 75 mg/mL a cerca < de 200 mg/mL
ou cerca de 75 mg/mL a cerca de 180 mg/mL ou cerca de 75 mg/mL
a cerca de 160 mg/mL ou cerca . de 75 mg/mL a cerca de 150 mg/mL
ou cerca de 75 mg/mL a cerca de 140 mg/mL ou cerca de 75 mg/mL
a cerca de 130 mg/mL ou cerca . de 75 mg/mL a cerca de 120 mg/mL
ou cerca de 75 mg/mL a cerca de 110 mg/mL ou cerca de 75 mg/mL
a cerca de 100 mg/mL ou cerca dt s 75 mg/mL a cerca de 90 mg/mL
ou cerca de 120 mg/mL a cerca de 200 mg/mL ou cerca de 120 mg/mL a cerca de 180 mg/mL ou cerca de 120 mg/mL a cerca de 160 mg/mL ou cerca de 120 mg/mL a cerca de 140 mg/mL, por exemplo 120 mg/mL.
[0092] Em aspectos exemplificativos, a formulação farmacêutica aquosa compreende o anticorpo, ou sua porção de ligação ao antígeno, em uma concentração maior do que 70 mg/mL, p.ex., maior do que 80 mg/mL, maior do que 90 mg/mL, maior do que 100 mg/mL, maior do que 125 mg/mL, maior do que 150 mg/mL, maior do que 175 mg/mL, maior do que 200 mg/mL, maior do que 225 mg/mL, maior do que 250 mg/mL, maior do que 275 mg/mL. Em
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48/151 aspectos exemplificativos, a formulação farmacêutica aquosa compreende o anticorpo, ou sua porção de ligação ao antígeno, em uma concentração menor do que cerca de 300 mg/mL, p.ex., menor do que cerca de 275 mg/mL, menor do que cerca de 250 mg/mL, menor do que cerca de 225 mg/mL, menor do que cerca de 200 mg/mL, menor do que cerca de 175 mg/mL ou menor do que
cerca de 150 mg/mL. Em aspectos exemplif icativos, a
concentração do anticorpo, ou sua po rção de ligação ao
antígeno, na formulação está em uma gama de cerca i de 10 mg/mL
a cerca de 300 mg/mL, p.ex., cerca de 25 mg/mL a cerca de 300
mg/mL, cerca de 50 mg/mL a cerca de 300 mg/mL, cerca de 75
mg/mL a cerca de 300 mg/mL, cerca de 125 mg/mL a cerca de 300
mg/mL, cerca de 150 mg/mL a cerca de 300 i mg/mL, cerca de 175
mg/mL a cerca de 300 mg/mL, cerca de 200 mg/mL a cerca de 300
mg/mL, cerca de 225 mg/mL a cerca de 300 i mg/mL, cerca de 250
mg/mL a cerca de 300 mg/mL, cerca de 275 mg/mL a cerca de 300
mg/mL, cerca de 10 mg/mL a cerca de 275 mg/mL, cerca de 10
mg/mL a cerca de 250 mg/mL, cerca de 10 mg/mL a cerca de 225
mg/mL, cerca de 10 mg/mL a cerca de 200 mg/mL, cerca de 10
mg/mL a cerca de 175 mg/mL, cerca de 10 mg/mL a cerca de 150
mg/mL, cerca de 10 mg/mL a cerca de 125 mg/mL, cerca de 10
mg/mL a cerca de 100 mg/mL, cerca de 10 mg/mL a cerca de 75
mg/mL, cerca de 10 mg/mL a cerca de 50 mg/mL ou cerca de 10
mg/mL a cerca de 25 mg/mL. Em aspectos exempli ficativos t a
formulação farmacêutica aquosa compreende uma concentração do anticorpo, ou sua porção de ligação ao antígeno, na gama de mais do que 70 mg/mL a cerca de 300 mg/mL, p.ex., mais do que
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49/151 mg/mL a cerca de 300 mg/mL, mais do que 90 mg/mL a cerca de 300 mg/mL, mais do que 100 mg/mL a cerca de 300 mg/mL, mais do que 125 mg/mL a cerca de 300 mg/mL, mais do que 150 mg/mL a cerca de 300 mg/mL, mais do que 175 mg/mL a cerca de 300 mg/mL, mais do que 200 mg/mL a cerca de 300 mg/mL, mais do que 70 mg/mL a cerca de 275 mg/mL, mais do que cerca de 7 0 mg/mL a cerca de 250 mg/mL, mais do que cerca de 70 mg/mL a cerca de 225 mg/mL, mais do que cerca de 70 mg/mL a cerca de 200 mg/mL, mais do que cerca de 70 mg/mL a cerca de 175 mg/mL, mais do que cerca de 70 mg/mL a cerca de 150 mg/mL, mais do que cerca de 70 mg/mL a cerca de 125 mg/mL, mais do que cerca de 70 mg/mL a cerca de 100 mg/mL. Em aspectos exemplificativos, a formulação farmacêutica aquosa compreende uma concentração do anticorpo ou sua porção de ligação ao antígeno em uma gama de cerca de 100 a cerca de 140 mg/mL, p.ex., cerca de 110 mg/mL, cerca de 120 mg/mL, cerca de 130 mg/mL. A formulação farmacêutica aquosa, em alguns aspectos, compreende uma concentração do anticorpo ou sua porção de ligação ao antígeno que é cerca de 120 mg/mL ± 12 mg/mL, p.ex., cerca de 108 mg/mL
a cerca de 132 mg/mL, cerca de 115 mg/mL a cerca de 125 mg/mL,
cerca de 116 mg/mL, cerca de 117 mg/mL, cerca de 118 mg/mL,
cerca de 119 mg/mL, cerca de 120 mg/mL, cerca de 121 mg/mL,
cerca de 122 mg/mL, cerca de 123 mg/mL, cerca de 124 mg/mL.
[0093] O denosumab e outros anticorpos monoclonais antiRANKL humanos e suas porções de ligação ao antígeno podem ser preparados de acordo com a descrição proporcionada na publicação de patente internacional WO 2003002713 A2 .
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[0094] Estudos de formulação em soluções de denosumab de elevada concentração (p.ex., 120 mg/mL), descritos em baixo, mostraram um grande aumento na formação de HMWS (taxa e extensão) abaixo de pH 5 e especialmente a pH mais baixo (p.ex., pH 4,5). À medida que o pH aumentou foi mostrado que existia um aumento na formação das espécies de dímero. Equilibrando os dois efeitos é contemplado que uma formulação descrita aqui terá um pH em uma gama de cerca de 5,0 a menos do que 5,2 ou cerca de 5,0 a cerca de 5,19 ou cerca de 5,0 a cerca de 5,15 ou cerca de 5,0 a cerca de 5,10, por exemplo cerca de 5,0, cerca de 5,05, cerca de 5,1 ou cerca de 5,15.
[0095] Os estudos descritos aqui mostraram também um efeito estabilizante e redutor da agregação independente tornado possível por inclusão de um inibidor da agregação de aminoácidos. Conformemente é contemplado que, quando um inibidor da agregação de aminoácidos é incluído, o pH da
formulação pode estar em uma gama de cerca de 4, 9 a cerca de
5, 4 ou cerca de 5, 0 a cerca de 5,4 ou cerca de 5,0 a cerca de
5, 2 ou cerca de 5, 0 a menos do que 5, 2 ou cerca de 5, 0 a 5, 19
ou cerca de 5, 0 a cerca de 5, 15 < cerca de 5,0 a cerca de
5,10, por exemplo cerca de 5,0, cerca de 5,05, cerca de 5,1 ou cerca de 5,15 ou cerca de 5,2.
[0096] A formulação aquosa pode ser tamponada. Quando usado, o tampão pode ser um tampão orgânico. O sistema tampão pode estar centrado a 25 °C em torno de pH 4 a 5,5 ou 4,5 a 5,5 ou
4,5 a 5, por exemplo. Por exemplo, o sistema tampão pode ter um pKa dentro de uma unidade de pH de pH 5,0-5,2 a 25 °C. Um
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51/151 tal sistema tampão é ácido acético/acetato, tendo um pKa de cerca de 4,75 a 25 °C. Outro tal sistema tampão é ácido glutâmico/glutamato, tendo um pKa de cerca de 4,27 a 25 °C. Outros sistemas tampão alternativos contemplados incluem sistemas baseados em ions incluindo succinato (pKa de 4,21 a 25 °C), propionato (pKa de 4,87 a 25 °C), malato (pKa de 5,13 a 25 °C), piridina (pKa de 5,23 a 25 °C) e piperazina (pKa de 5,33 a 25 °C). É contemplado que o tampão possa ser proporcionado como o sal de sódio (ou sal dissódico, como apropriado) ou, alternativamente, como um sal de potássio, magnésio ou amônio. Os tampões podem ser baseados em acetato, citrato, succinato, fosfato e hidroximetilaminometano (Tris), por exemplo. Tampões baseados em acetato, glutamato e succinato são particularmente contemplados, p.ex., acetato ou glutamato. [0097] Uma comparaçao da formaçao de HMWS por Cromatografia Líquida de Elevado Desempenho com Exclusão por Tamanho (SEUHPLC) em formulações de denosumab de 120 mg/mL tendo tampões de acetato ou glutamato, mas de outro modo equivalentes, mostrou que não existiu diferença entre o tipo de tampão quando avaliado ao longo de quatro semanas de armazenamento a 37 °C.
[0098] Quando usado, o tampão será incluído em uma quantidade suficiente para manter o pH selecionado da formulação às condições de armazenamento durante a vida de prateleira do produto, p.ex., 3 anos a 4 °C ou 1 mês a 25 °C ou 2 semanas a 25 °C ou 7 dias a 25 °C. A concentração de tampão pode estar em uma gama de cerca de 2 mM a cerca de 40 mM ou cerca de 5 mM a cerca de 20 mM ou cerca de 10 mM a cerca
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52/151 de 25 mM ou cerca de 15 mM a cerca de 25 mM, por exemplo 10 mM ou 15 mM ou 18 mM ou 25 mM. Por exemplo, um tampão de acetato usado com o anticorpo monoclonal anti-RANKL (p.ex., denosumab) e fenilalanina pode estar em uma gama de cerca de 2 mM a cerca de 30 mM ou cerca de 16 mM a cerca de 41 mM ou cerca de 25 mM a cerca de 39 mM, ou cerca de 30 mM a cerca de 34 mM. Em outras palavras, um tampão de diafiltração usado para concentrar ο anticorpo até uma concentração maior do que 70 mg/mL (p.ex., 120 mg/mL) pode estar em uma gama de 5 mM a cerca de 30 mM ou cerca de 15 mM a cerca de 25 mM ou cerca de 20 mM. É também contemplado proporcionar uma formulação estabilizada por aminoácidos que seja autotamponada. Em aspectos exemplificativos, o tampão é incluído em uma quantidade suficiente para manter o pH selecionado da formulação às condições de armazenamento durante a vida de prateleira do produto, p.ex., 36 meses a cerca de 2 °C até cerca de 8 °C, opcionalmente, seguido por cerca de 1 mês de cerca de 20 °C a cerca de 30 °C.
[0099] A formulação farmacêutica aquosa, em alguns aspectos, compreende um tampão e, opcionalmente, o tampão está centrado, a 25 °C, em uma gama de cerca de pH 4,0 a cerca de pH 5,5. Em alguns aspectos, o tampão tem um pKa dentro de uma unidade de pH de pH 5,0-5,2 a 25 °C. A formulação farmacêutica aquosa, em certos aspectos, compreende cerca de 5 mM a cerca de 60 mM de tampão, cerca de 5 mM a cerca de 50 mM de tampão ou cerca de 9 mM a cerca de 45 mM de tampão (p.ex., cerca de 15 mM a cerca de 30 mM de tampão, p.ex., cerca de 20 mM, cerca
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53/151 de 25 mM de tampao). Em aspectos exemplificativos, o tampao é acetato ou glutamato.
[0100] A formulação pode também incluir um ou mais estabilizantes contra a agregação de proteínas e outros excipientes de formulação. Tais estabilizantes e excipientes são contemplados como incluindo, mas não estão limitados a, inibidores da agregação de aminoácidos, modificadores da tonicidade, tensoativos, agentes solubilizantes (p.ex., NMetil-2-pirrolidona), conjugação de PEG e ciclodextrinas (p.ex., Captisol®) .
[0101] 0 termo inibidor da agregaçao de aminoácidos se refere a um aminoácido ou uma combinação de aminoácidos (p.ex., misturas ou dipeptídeos ou oligopeptídeos tendo 2 a 10 resíduos), onde qualquer dado aminoácido está presente na sua forma de base livre ou na sua forma de sal (p.ex., arginina HC1) ou um análogo de aminoácido, e que reduz as HMWS ou inibe a formação de HMWS. Sais incluindo sais de sódio, sais de potássio e sais de hidrocloreto estão contemplados. Adicionalmente, sais de arginina com hidrocloreto, glutamato, butirato e glicolato são contemplados. Onde uma combinação de aminoácidos é usada, todos os aminoácidos podem estar presentes nas suas formas de base livre, todos podem estar presentes nas suas formas de sal ou alguns podem estar presentes nas suas formas de base livre enquanto outros estão presentes nas suas formas de sal. Adicionalmente a ou alternativamente a dipeptídeos e oligopeptídeos podem ser usadas misturas de um ou mais aminoácidos, p.ex., uma mistura de arginina e
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54/151 fenilalanina. Em modalidades alternativas, somente um tipo de inibidor da agregação de aminoácidos está presente na formulação farmacêutica aquosa. Em aspectos exemplificativos, somente um aminoácido está presente, p.ex., somente L-arginina ou somente L-fenilalanina está presente na formulação.
[0102] É contemplado usar um ou mais aminoácidos que transportem uma cadeia lateral carregada, por exemplo um ou mais de arginina, lisina, histidina, aspartato e glutamato. Os aminoácidos podem ser selecionados de aminoácidos básicos, p.ex., arginina, lisina, histidina ou uma sua combinação Arginina é particularmente contemplada. Qualquer estereoisômero (i.e., isômero L, D ou DL) de um aminoácido particular, ou combinações destes estereoisômeros, pode ser usado no presente método ou formulação desde que o aminoácido particular esteja presente na sua forma de base livre ou na sua forma de sal. Um estereoisômero L é particularmente contemplado, p.ex., L-arginina. Opcionalmente, o aminoácido é um tendo uma cadeia lateral positivamente carregada, p.ex., arginina.
[0103] Noutro aspecto é contemplado usar um ou mais aminoácidos que têm anéis aromáticos nas suas cadeias laterais, p.ex., fenilalanina, tirosina, triptofano ou uma sua combinação. Fenilalanina é particularmente contemplada.
[0104] Em outro aspecto é contemplado usar um ou mais aminoácidos hidrofóbicos, por exemplo alanina, isoleucina, leucina, fenilalanina, valina, prolina ou glicina.
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[0105] Em outro aspecto é contemplado usar um ou mais aminoácidos hidrofóbicos, alifáticos, por exemplo alanina, isoleucina, leucina ou valina. Leucina é particularmente contemplada.
[0106] Análogos de aminoácidos que mostram efeitos de redução ou inibição da agregação poderíam ser também usados no presente método ou formulação. 0 termo análogo de aminoácido se refere a um derivado do aminoácido ocorrendo naturalmente. Os análogos contemplados incluem, por exemplo, derivados de amino e N-monoetil- e n-acetil-. Outros análogos contemplados incluem dipeptídeos ou oligopeptídeos tendo 2 a 10 resíduos, p.ex., arginina-arginina e fenilalanina-arginina. Em um tipo de modalidade é contemplado que a arginina de n-acetila e a lisina de n-acetila não serão usadas sozinhas, mas podem ser usadas em combinação com outro inibidor da agregação de aminoácidos. Como com os aminoácidos, os análogos de aminoácidos são usados no presente método ou formulação na sua forma de base livre ou na sua forma de sal.
[0107] 0(s) inibidor(es) da agregação de aminoácidos usado(s) no presente método ou formulação protege(m) a proteína terapeuticamente ativa contra vários estresses, aumentando e/ou mantendo deste modo a estabilidade da proteína ou formulação contendo a proteína durante a vida útil da proteína (antes do e durante o armazenamento, antes do uso) . Aqui, o termo estresse inclui, mas não está limitado a calor, congelamento, pH, luz, agitação, oxidação, desidratação, superfícies, cisalhamento, congelamento/descongelamento,
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56/151 pressão, metais pesados, compostos fenólicos, desnaturantes, etc., de qualquer fonte, p.ex., transporte. 0 estresse pelo calor é particularmente contemplado. 0 termo estresse engloba qualquer fator que modula (i.e., reduz, mantém ou aumenta) a estabilidade de uma proteína ou uma formulação contendo a proteína. A estabilidade aumentada e/ou mantida com adição de um inibidor da agregação de aminoácidos ocorre de uma maneira dependente da concentração. Isto é, concentrações crescentes de inibidor da agregação de aminoácidos levam a estabilidade aumentada e/ou mantida de uma proteína ou formulação contendo uma proteína da presente invenção quando essa proteína ou formulação contendo essa proteína exibe normalmente formação de agregados na ausência do inibidor da agregação de aminoácidos. Como mostrado nos Exemplos em baixo, a inclusão de um inibidor da agregação de aminoácidos na formulação pode também reduzir a quantidade de HMWS já formadas. Por exemplo, tais inibidores da agregação de aminoácidos incluem arginina e dipeptídeo arginina-fenilalanina. A determinação da quantidade de um inibidor da agregação de aminoácido particular a ser usado no presente método ou formulação para diminuir a formação de agregados aumentando deste modo a estabilidade da proteína e, assim, aumentando a estabilidade da formulação durante a vida útil inteira da proteína, pode ser facilmente determinada para o denosumab ou qualquer anticorpo monoclonal anti-RANKL humano particular de interesse tendo em vista a divulgação aqui .
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[0108] Foi mostrado que a presença de um inibidor da agregação de aminoácidos na formulação reduz a quantidade de espécies de dímero e sua taxa cinética de formação. Por exemplo, a inclusão de arginina a uma concentração de 75 mM em uma formulação de denosumab tendo um pH de 5,2 resultou em uma redução de aproximadamente 0,3% e 25% nas quantidades das espécies de dímero e sua taxa cinética de formação, respectivamente, após 1 mês a 37 °C em comparação com uma formulação similar sem arginina a um pH de 5,2. Em contraste foi descoberto que um anticorpo monoclonal que não é um anticorpo monoclonal anti-RANKL humano não era estabilizado por inclusão de arginina e, em vez disso, resultava em HMWS aumentadas. Conformemente, outro método da divulgação é um método de redução de HMWS em uma formulação de denosumab ou outro anticorpo monoclonal anti-RANKL humano por adição de um inibidor da agregação de aminoácido, p.ex., arginina ou fenilalanina.
[0109] Conformemente, em modalidades exemplificativas, a formulação farmacêutica aquosa compreende um inibidor da agregação de aminoácidos, que é opcionalmente um aminoácido. Em aspectos exemplificativos, o aminoácido é um aminoácido estereoisômero L (aminoácido L) , embora sejam contemplados aminoácidos estereoisômeros D (aminoácidos D) . Em alguns aspectos, o inibidor da agregação de aminoácidos compreende um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral carregada, também referido aqui como um aminoácido carregado. 0 termo aminoácido carregado se refere a um aminoácido que compreende
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58/151 uma cadeia lateral que está negativamente carregada (i.e., desprotonada) ou positivamente carregada (i.e., protonada) em solução aquosa a pH fisiológico. Por exemplo, aminoácidos negativamente carregados incluem, por exemplo, ácido aspártico e ácido glutâmico, ao passo que aminoácidos negativamente carregados incluem, por exemplo, arginina, lisina e histidina. Os aminoácidos carregados incluem os aminoácidos carregados entre os 20 aminoácidos codificados, bem como aminoácidos atípicos ou não ocorrendo naturalmente ou não codificados. Conformemente, em aspectos exemplificativos, o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada. Em casos exemplificativos, o aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada compreende uma estrutura de cadeia lateral da Fórmula I ou Fórmula II:
JVW' (CH2)n /
Figure BR112019022188A2_D0001
[Fórmula I] em que n é 1 a 7, em que cada um de Ri e R2 é independentemente selecionado do grupo consistindo em H, alquila Ci-Cis, (alquila Ci-Cis)OH, (alquila Ci-Cis)NH2, NH,
NH2 (alquila Ci-Cis)SH, (alquila C0-C4) cicloalquila (C3-C6) , (alquila C0-C4) (heterocíclico C2-C5) , (alquila C0-C4) (arila
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C6-Cio)R-7 e (alquila C1-C4) (heteroarila C3-C9) , em que R7 é H ou OH, em que opcionalmente um de Ri e R2 é um grupo amino livre (-NH34·) , <ΛΛΛΤ (CH2)m
Figure BR112019022188A2_D0002
r3
[Fórmula II] em que m é 1 a 7, em que cada um de R3 e R4 é independentemente selecionado do Grupo A consistindo em:
H, alquila Ci-Cis, (alquila Ci-Cis) OH, (alquila Ci-Cis) NH2, (alquila Ci-Cis) SH, (alquila C0-C4) cicloalquila (C3-C6) , (alquila C0-C4) (heterociclico C2-C5) , (alquila C0-C4) (arila C6-Cio)Rs e (alquila C1-C4) (heteroarila C3-C9) , em que Rs é H ou OH, em que R5 está opcionalmente presente, e, quando presente, é selecionado do Grupo A, opcionalmente, em que cada um de R3 e R4 e R5 é H.
[0110] Em aspectos exemplificativos, o aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada compreende uma estrutura de cadeia lateral da Fórmula I e n está em uma gama de 2 a 4 . Em aspectos alternativos ou adicionais, Ri é NH ou NH2. Em aspectos exemplificativos, R2 é NH2 ou NH34·. 0 aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada em casos exemplificativos é arginina. Em aspectos exemplificativos, o aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada compreende uma estrutura de cadeia lateral da Fórmula II e m está em uma gama
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60/151 de 3 a 5. Em alguns aspectos, cada um de R3 e Rí é H. Em certos casos, Rs está presente e, opcionalmente, é H. Em alguns casos, o aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada é lisina. O aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada está presente na formulação como um sal, em alguns aspectos, opcionalmente, um sal de hidrocloreto (HC1). Conformemente, em aspectos exemplificativos, a composição farmacêutica aquosa compreende L-arginina HC1 ou L-lisina HC1.
[0111] Em aspectos exemplificativos, o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido aromático. Em alguns casos, o aminoácido aromático compreende uma fenila ou um indol. Em aspectos exemplificativos, o aminoácido aromático compreende uma cadeia de alquila Ci-Ce (p.ex., uma cadeia de alquila C1-C3) entre o carbono alfa e a fenila ou indol. Em casos exemplificativos, o aminoácido aromático é Lfenilalanina. Em outros casos, o aminoácido aromático é Ltriptofano.
[0112] Em aspectos exemplificativos, o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido hidrofóbico. A hidrofobicidade pode ser medida ou pontuada de acordo com qualquer uma das escalas de hidrofobicidade conhecidas na técnica. Em geral, quanto mais positiva a pontuação, mais hidrofóbico é o aminoácido. Em alguns casos, a hidrofobicidade é pontuada na escala de hidrofobicidade de Kyte e Doolittle (Kyte J, Doolittle RF (maio 1982) . A simple method for displaying the hydropathic character of a protein. J. Mol.
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Biol. 157 (1) : 105-32) . Em alguns aspectos, o aminoácido hidrofóbico tem uma pontuação maior do que cerca de 2,5 na escala de hidrofobicidade de Kyte e Doolittle. O aminoácido hidrofóbico em certos aspectos compreende uma cadeia lateral compreendendo uma alquila C2 a C12, ramificada ou de cadeia linear, ou uma cicloalquila C4 a Cs, um heterociclo C4 a Cs compreendendo um heteroátomo de nitrogênio, opcionalmente, em que o heterociclo é um imidazol, pirrol ou indol. Para propósitos aqui, o termo cicloalquila engloba qualquer ciclo de carbono, incluindo bi-ciclos ou tri-ciclos de carbono.
[0113] Em aspectos exemplificativos, o aminoácido hidrofóbico compreende uma alquila C3 a Cs, opcionalmente, o aminoácido hidrofóbico compreende uma alquila C3 ramificada ou alquila C4 ramificada. O aminoácido hidrofóbico é L-valina, Lleucina ou L-isoleucina, em certos aspectos.
[0114] 0 inibidor da agregaçao de aminoácidos é usado em uma quantidade eficaz para proporcionar estabilidade aumentada e pode ser usado a uma concentração em uma gama de cerca de 10 mM a cerca de 200 mM, por exemplo, uma gama de cerca de 30 mM a cerca de 120 mM ou cerca de 38 mM a cerca de 150 mM ou cerca
de 38 mM a cerca de 113 mM ou cerca de 38 mM a cerca de 75 mM,
por exemplo cerca de 10 mM, cerca de 38 mM, cerca de 75 mM,
cerca de 113 mM ou cerca de 150 mM Em aspectos
exemplificativos, a formulação farmacêutica aquosa compreende cerca de 5 mM a cerca de 300 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, opcionalmente, cerca de 25 mM a cerca de 90 mM de inibidor da agregação de aminoácidos. Em alguns aspectos, a
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62/151 formulação farmacêutica aquosa compreende cerca de 5 mM a cerca de 150 mM (p.ex., cerca de 10 mM a cerca de 150 mM, cerca de
15 mM a cerca de 150 mM, cerca de 2 0 mM a cerca de 150 mM,
cerca de 25 mM a cerca de 150 mM, cerca de 5 mM a cerca de 140
mM, cerca de 5 mM a cerca de 130 mM, cerca de 5 mM a i cerca de
120 mM, cerca de 5 mM a cerca de 110 mM, cerca de 5 mM a cerca
de 100 mM, cerca de 5 mM a cerca de 90 mM) de inibidor da agregação de aminoácidos, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada, opcionalmente, L-arginina. Em alguns aspectos, a formulação farmacêutica aquosa compreende cerca de 30 mM a cerca de 80 mM (p.ex., cerca de 35 mM, cerca de 40 mM, cerca de 45 mM, cerca de 50 mM, cerca de 55 mM, cerca de 60 mM, cerca de 65 mM, cerca de 70 mM, cerca de 75 mM) de inibidor da agregação de aminoácidos, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada, opcionalmente, L-arginina.
[0115] Em alguns aspectos, a formulação farmacêutica aquosa compreende cerca de 5 mM a cerca de 180 mM (p.ex., cerca de 10 mM a cerca de 180 mM, cerca de 15 mM a cerca de 180 mM, cerca de 20 mM a cerca de 180 mM, cerca de 25 mM a cerca de 180 mM, cerca de 5 mM a cerca de 170 mM, cerca de 5 mM a cerca de 170 mM, cerca de 5 mM a cerca de 160 mM, cerca de 5 mM a cerca de 150 mM, cerca de 5 mM a cerca de 140 mM, cerca de 5 mM a cerca de 130 mM, cerca de 5 mM a cerca de 120 mM, cerca de 5 mM a cerca de 110 mM) de inibidor da agregação de aminoácidos, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido
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63/151 aromático, opcionalmente, L-fenilalanina. Em casos exemplificativos, a formulação farmacêutica aquosa compreende
cerca de 5 mM a cerca de 100 mM (p.ex., cerca de 10 mM, cerca
de 15 mM, cerca de 2 0 mM, cerca de 25 mM, cerca de 30 mM, cerca
de 35 mM, cerca de 4 0 mM, cerca de 45 mM, cerca de 50 mM, cerca
de 55 mM, cerca de 60 mM, cerca de 65 mM, cerca de 70 mM, cerca
de 75 mM, cerca de 80 mM, cerca de 85 mM, cerca de 90 mM, cerca
de 95 mM) de inibidor da agregação de aminoácidos, opcionalmente, cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido aromático, opcionalmente, Lfenilalanina.
[0116] Opcionalmente, a formulação farmacêutica aquosa compreende cerca de 5 mM a cerca de 300 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido hidrofóbico, opcionalmente, Lvalina, L-isoleucina ou L-leucina. Opcionalmente, a formulação farmacêutica aquosa compreende cerca de 5 mM a cerca de 200 mM (p.ex., cerca de 10 mM a cerca de 200 mM, cerca de 20 mM a cerca de 200 mM, cerca de 30 mM a cerca de 200 mM, cerca de 40 mM a cerca de 200 mM, cerca de 50 mM a cerca de 200 mM, cerca de 60 mM a cerca de 200 mM, cerca de 70 mM a cerca de 200 mM, cerca de 80 mM a cerca de 200 mM, cerca de 90 mM a cerca de 200 mM, cerca de 100 mM a cerca de 200 mM, cerca de 5 mM a cerca de 290 mM, cerca de 5 mM a cerca de 280 mM, cerca de 5 mM a cerca de 270 mM, cerca de 5 mM a cerca de 260 mM, cerca de 5 mM a cerca de 250 mM, cerca de 5 mM a cerca de 240 mM,
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64/151 cerca de 5 mM a cerca de 230 mM, cerca de 5 mM a cerca de 220 mM, cerca de 5 mM a cerca de 210 mM) de inibidor da agregação de aminoácidos, opcionalmente, cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido hidrofóbico, opcionalmente, L-valina, L-isoleucina ou L-leucina. Em aspectos exemplificativos, a composição farmacêutica aquosa compreende: cerca de 30 mM a cerca de 80 mM de hidrocloreto de L-arginina; cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de Lfenilalanina; cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de L-triptofano; cerca de 30 mM a cerca de 80 mM de hidrocloreto de L-lisina; cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de L-leucina; cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de L-isoleucina; cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de L-valina; ou qualquer sua combinação.
[0117] Em aspectos exemplificativos, a concentração do inibidor da agregação de aminoácidos está em razão molar com o anticorpo. A razão molar entre o inibidor da agregação de aminoácidos e o anticorpo anti-RANKL é, em alguns aspectos, cerca de 10 a cerca de 200 (p.ex., cerca de 25 a cerca de 150, cerca de 50 a cerca de 100) , quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido aromático, opcionalmente, Lfenilalanina. Opcionalmente, a razão molar é cerca de 20 a cerca de 90. Em aspectos exemplificativos, a razão molar entre o inibidor da agregação de aminoácidos e o anticorpo anti-RANKL é cerca de 20 a 300, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral
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65/151 positivamente carregada, opcionalmente, L-arginina. Opcionalmente, a razão molar é cerca de 45 a cerca de 180.
[0118] Os tensoativos sao agentes ativos de superfície que são anfipáticos (tendo uma cabeça polar e cauda hidrofóbica). Os tensoativos se acumulam preferencialmente em interfaces, resultando em tensão interfacial reduzida. Um tensoativo pode ser opcionalmente incluído na formulação. O uso de um tensoativo pode também ajudar a mitigar a formação de grandes partículas proteináceas.
[0119] Em um tipo de modalidade, o tensoativo pode ser um tensoativo não iônico. Exemplos incluem ésteres de ácidos graxos de polioxietileno de sorbitana (p.ex., polissorbato 20, polissorbato 80), poliéteres de alquilarila, p.ex., fenol de alquila oxietilado (p.ex., Triton™ X-100) e poloxâmeros (p.ex., Pluronics®, p.ex., Pluronic® F68) e combinações de qualquer um dos anteriores, dentro de uma classe de tensoativos ou entre classes de tensoativos. Polissorbato 20 e polissorbato 80 são particularmente contemplados.
[0120] Uma concentração de tensoativo em uma gama de cerca de 0,004% (p/v) a cerca de 0,1% (p/v) (p.ex., para polissorbato 20 ou polissorbato 80) é adequada, por exemplo cerca de 0,004% a cerca de 0,05% ou cerca de 0,004 % a cerca de 0,02% ou cerca de 0,01%. Em aspectos exemplificativos, a formulação compreende pelo menos cerca de 0,004% (p/v) de tensoativo e, opcionalmente, menos do que cerca de 0,15% (p/v). Em aspectos exemplificativos, cerca de 0,005% (p/v) a cerca de 0,015% (p/v) de tensoativo estão presentes na formulação, opcionalmente,
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66/151 cerca de 0,005% (p/v), cerca de 0,006% (p/v), cerca de 0,007% (p/v), cerca de 0,008% (p/v), cerca de 0,009% (p/v), cerca de 0,010% (p/v), cerca de 0,011% (p/v), cerca de 0,012% (p/v), cerca de 0,013% (p/v) ou cerca de 0,014% (p/v).
[0121] A formulação aquosa estabilizada pode ser adequada para administração por qualquer via aceitável, incluindo parenteral e, especificamente, subcutânea. Por exemplo, a administração subcutânea pode ser na parte superior do braço, parte superior da coxa ou abdômen. Outras vias incluem intravenosa, intradérmica, intramuscular, intraperitoneal, intranodal e intrasplênica, por exemplo. A via subcutânea é preferencial.
[0122] Se a solução estiver em uma forma destinada à administração a um sujeito, ela pode ser isotônica com o local de administração pretendido. Por exemplo, a osmolalidade pode estar em uma gama de cerca de 27 0 a cerca de 350 mOsm/kG ou cerca de 285 a cerca de 345 mOsm/kG ou cerca de 300 a cerca de 315 mOsm/kG. Por exemplo, se a solução estiver em uma forma destinada à administração parenteral, ela pode ser isotônica com o sangue (cerca de 300 mOsm/kG de osmolalidade) . Em aspectos exemplares, a formulação farmacêutica aquosa tem uma osmolalidade em uma gama de cerca de 2 00 mOsm/kg a cerca de 500 mOsm/kg ou cerca de 225 mOsm/kg a cerca de 400 mOsm/kg ou cerca de 250 mOsm/kg a cerca de 350 mOsm/kg.
[0123] Em aspectos exemplificativos, a formulação farmacêutica aquosa tem uma condutividade em uma gama de cerca de 500 pS/cm a cerca de 5500 pS/cm, opcionalmente, em que a
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67/151 condutividade está em uma gama de cerca de 2500 pS/cm a cerca de 5500 pS/cm, quando a formulação compreende um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada, ou em uma gama de cerca de 500 pS/cm a cerca de 2000 pS/cm, quando a formulação compreende um aminoácido aromático ou não tem inibidor da agregação de aminoácidos. A formulação farmacêutica aquosa de qualquer uma das reivindicações precedentes, tendo uma viscosidade que é não mais do que cerca de 6 cP a 5 °C, opcionalmente, em que a viscosidade é cerca de 4,5 cP a cerca de 5,5 cP. A formulação farmacêutica aquosa em certos aspectos tem uma viscosidade que é mais baixa do que cerca de 13 cP a 25 °C, opcionalmente, cerca de 2,0 cP a cerca de 10 cP, opcionalmente, cerca de 2,5 cP a cerca de 4 cP.
[0124] Modificadores da tonicidade, ou agentes de ajuste da tonicidade, são conhecidos na técnica e incluem compostos tais como sais (p.ex., cloreto de sódio, cloreto de potássio, cloreto de cálcio, fosfato de sódio, fosfato de potássio, bicarbonate de sódio, carbonato de cálcio, lactato de sódio), açúcares (p.ex., dextrano, dextrose, lactose, tre-halose) e álcoois de açúcar (p.ex., manitol, sorbitol, xilitol, glicerol, propilenoglicol). Em certos aspectos, o modificador da tonicidade é selecionado do grupo consistindo em: sorbitol, manitol, sacarose, tre-halose, glicerol e suas combinações. Em casos exemplificativos, o modificador da tonicidade é sorbitol. O sorbitol pode ser usado, p.ex., a uma concentração em uma gama de 0,1% (p/v) a 5% (p/v) ou 1,2% (p/v) a 5% (p/v) , por exemplo 3,6% (p/v), 4,6% (p/v) ou 4,7% (p/v). Opcionalmente, a
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68/151 formulação compreende cerca de 1,0% (p/p) a cerca de 5,0% (p/p) de modificador da tonicidade. Por exemplo, a formulação compreende cerca de 2,0% (p/p) a cerca de 5,0% (p/p) de sorbitol ou cerca de 3,5% (p/p) a cerca de 5,0% (p/p) de sorbitol ou cerca de 4,0% (p/p) a cerca de 5,0% (p/p) de sorbitol. Em alguns aspectos, a formulação não compreende qualquer sorbitol ou está isento de sorbitol. Em aspectos exemplificativos, a formulação não compreende qualquer modificador da tonicidade.
[0125] Outros excipientes conhecidos na técnica podem ser usados na formulação, desde que não afetem negativamente a estabilidade. Açúcares e polióis podem ser usados para proteger as proteínas da agregação, incluindo proporcionar estabilidade de congelamento/descongelamento. Tais compostos incluem sorbitol, manitol, glicerol, eritritol, caprilato, triptofano, sarcosídeo e glicina. Estabilizantes para preparação de preparações liofilizadas podem ser também usados, por exemplo açúcares estabilizantes, p.ex., dissacarídeos tais como trehalose e sacarose. Uma preparação liofilizada pode também incluir um agente de volume, como é conhecido na técnica. Outros excipientes conhecidos na técnica para estabilização de proteínas incluem agentes solubilizantes (p.ex., N-metil-2pirrolidona), polietilenoglicol (PEG) e ciclodextrinas (p.ex., Captisol®) . Ácidos e bases farmaceuticamente aceitáveis podem ser usados para ajustar o pH da solução, p.ex., hidróxido de sódio.
[0126] Para administraçao parenteral, a formulação pode estar na forma de uma solução aquosa estéril, parenteralmente
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69/151 aceitável, isenta de pirogênios compreendendo denosumab ou outro anticorpo monoclonal anti-RANKL humano, com ou sem agentes terapêuticos adicionais, em um veículo farmaceuticamente aceitável. Em certas modalidades, um veículo para injeção parenteral é água destilada estéril na qual o denosumab ou outro anticorpo monoclonal anti-RANKL humano, com ou sem pelo menos um agente terapêutico adicional, é formulado como uma solução isotônica, estéril. A formulação conterá excipientes farmaceuticamente aceitáveis, p.ex., excipientes com grau USP (Farmacopeia dos Estados Unidos).
[0127] Um conservante é um composto que pode ser incluído em uma formulação farmacêutica para reduzir a ação bacteriana aí, por exemplo facilitando deste modo a produção de uma formulação multiusos. Exemplos de conservantes incluem cloreto de octadecildimetilbenzilamônio, cloreto de hexametônio, cloreto de benzalcônio (uma mistura de cloretos de alquilbenzildimetilamônio nos quais os grupos alquila são compostos de cadeia longa) e cloreto de benzetônio. Outros tipos de conservantes incluem álcoois aromáticos incluindo fenol, álcool de butila e benzila, parabenos de alquila incluindo parabeno de metila e propila, catecol, resorcinol, ciclo-hexanol, 3-pentanol e m-cresol. Alternativamente, a formulação pode estar isenta de conservantes. Por exemplo, a formulação quando apresentada em uma forma de dosagem de uso único pode estar isenta de conservantes.
[0128] Embora a formulação tenha sido descrita aqui na sua forma aquosa, a formulação estabilizada pode ser também
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70/151 subsequentemente liofilizada para preparar um liofilizado. Conformemente, a não ser que o contexto dite de outro modo, as referências à formulação e seu método de uso são contempladas como incluindo um liofilizado resultando da solução aquosa estabilizada
[0129] A formulação farmacêutica a ser usada para administração ín vivo é tipicamente estéril. Em certas modalidades, isto pode ser alcançado por filtração através de membranas de filtração estéreis. Em certas modalidades, as composições parenterais são geralmente colocadas em um recipiente tendo uma porta de acesso estéril, por exemplo, um saco ou frasco de solução intravenosa tendo um batente perfurável por uma agulha de injeção hipodérmica ou uma agulha pré-cheia. Em certas modalidades, a formulação pode ser armazenada em uma forma pronta para uso ou em uma forma (p.ex., liofilizada) que é reconstituída ou diluída antes da administração.
[0130] Em certas modalidades, a presente invenção está dirigida a estojos para produção de uma unidade de administração de dose única. Em certas modalidades, os estojos podem conter cada um um primeiro recipiente tendo uma preparação seca de denosumab ou outro anticorpo monoclonal anti-RANKL humano preparada a partir de uma formulação de solução descrita aqui e um segundo recipiente tendo água estéril ou uma solução aquosa. Em certas modalidades desta invenção são incluídos estojos contendo seringas pré-cheias de
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71/151 câmara única ou múltiplas câmaras (p.ex., seringas de liquido e liosseringas).
[0131] A formulação estabilizada descrita aqui pode ser usada em conjunto com um ou mais agentes terapêuticos adicionais, p.ex., cálcio e um composto de vitamina D. A formulação estabilizada descrita aqui pode ser administrada a um paciente recebendo terapia com um agente terapêutico adicional, ou a formulação estabilizada descrita aqui pode ser coadministrada com um agente terapêutico adicional.
[0132] A formulação estabilizada, em qualquer um dos seus aspectos e modalidades descritos aqui, pode ser usada para prevenir ou tratar qualquer doença responsiva ao denosumab ou outro anticorpo monoclonal anti-RANKL humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno. Tais usos e métodos relacionados incluem os, mas não estão limitados aos, aspectos e modalidades descritos em baixo.
[0133] Em um aspecto, a formulação pode ser usada para prevenir um evento relacionado com o esqueleto (SRE) em um paciente com sua necessidade, incluindo administração de uma quantidade eficaz de uma formulação estabilizada descrita aqui. 0 SRE pode ser selecionado do grupo consistindo em uma fratura patológica, radioterapia ao osso, cirurgia ao osso e compressão da medula espinhal, por exemplo. 0 paciente pode ser um tendo metástases ósseas de um tumor sólido. 0 tumor sólido pode ser um ou mais de câncer da mama, câncer da próstata, câncer do pulmão, câncer de células não pequenas do pulmão e carcinoma de células renais, por exemplo. A quantidade da formulação pode
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72/151 ser eficaz para reduzir o telopeptideo N-terminal urinário do marcador de renovação óssea corrigido quanto à creatinina (uNTx/Cr), opcionalmente em pelo menos 80%. O paciente pode ser um paciente com mieloma múltiplo.
[0134] Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para tratar um paciente com tumor de células gigantes do osso, incluindo administração de uma quantidade eficaz de uma formulação estabilizada descrita aqui. Em um tipo de modalidade, o paciente tem tumor de células gigantes do osso que é recorrente, irressecável ou para o qual é provável que a ressecção cirúrgica resulte em morbidade grave. O paciente pode ser um adulto ou um adolescente esqueleticamente maduro, por exemplo.
[0135] Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para tratar um paciente com hipercalcemia de ossos malignos, incluindo administração de uma quantidade eficaz de uma formulação estabilizada descrita aqui. Em um aspecto, a malignidade pode ser refratária à terapia com bifosfonatos. O método ou uso pode incluir administração de uma quantidade da formulação eficaz para reduzir ou manter o cálcio no soro do paciente a um nível menor do que ou igual a cerca de 11,5 mg/dL.
[0136] Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para tratar osteoporose em um paciente com sua necessidade, incluindo administração de uma quantidade eficaz de uma formulação estabilizada descrita aqui. Por exemplo, o paciente pode ser uma mulher pós-menopáusica com elevado risco de
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73/151 fratura. Em outro tipo de modalidade, o paciente pode ser um homem com elevado risco de fratura.
[0137] Em outro aspecto, a formulação é usada para aumentar a massa óssea em um paciente com sua necessidade, incluindo administração de uma quantidade eficaz de uma formulação estabilizada descrita aqui. Por exemplo, a quantidade da formulação administrada pode ser uma quantidade eficaz para diminuir a incidência de novas fraturas vertebrais e/ou fraturas não vertebrais. Em outro tipo de modalidade, a quantidade da formulação administrada pode ser uma quantidade eficaz para diminuir a reabsorção óssea. Em outro tipo de modalidade, a quantidade da formulação pode ser uma quantidade eficaz para aumentar a densidade óssea no paciente em pelo menos uma área selecionada de coluna lombar, quadril total e colo do fêmur. Em outro tipo de modalidade, a quantidade da formulação pode ser uma quantidade eficaz para aumentar a massa óssea no osso cortical e/ou osso trabecular do paciente. Em outro tipo de modalidade, a quantidade da formulação pode ser uma quantidade eficaz para reduzir o marcador da reabsorção óssea C-telopeptideo tipo 1 (CTX) no soro. 0 paciente com sua necessidade pode ter opcionalmente osteoporose. Em outro tipo de modalidade, o paciente com sua necessidade pode ser uma mulher com elevado risco de fratura recebendo terapia inibidora adjuvante de aromatase para o câncer da mama. Em outro tipo de modalidade, o paciente com sua necessidade pode ser um homem com elevado risco de fratura recebendo terapia de privação de andrógenos para o câncer de próstata não metastático. Em outro
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74/151 tipo de modalidade, o paciente com sua necessidade pode ser um homem com osteoporose com elevado risco de fratura.
[0138] Em outro aspecto, a formulação pode ser usada como tratamento adjuvante para mulheres pós-menopáusica com câncer da mama em estágio inicial com elevado risco de recorrência da doença recebendo terapia adjuvante/neoadjuvante de câncer.
[0139] Em outro aspecto, a formulação pode ser usada como tratamento de primeira linha de pacientes com câncer metastático de células não pequenas do pulmão em combinação com quimioterapia à base de platina.
[0140] Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para tratar estenose subglótica idiopática (ISS).
[0141] Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para prevenção de câncer da mama e câncer dos ovários em mulheres saudáveis com mutação em BRCA-1.
[0142] Opcionalmente, a formulação pode ser usada em combinação com um inibidor de ponto de verificação imunitária. Opcionalmente, o inibidor de ponto de verificação imunitária é específico de uma proteína que funciona em uma via de ponto de verificação imunitária, p.ex., por exemplo, CTLA4, LAG3, PD-1, PD-L1, PD-L2, B7-H3, B7H4, BTLA, SLAM, 2B4, CD160, KLRG-1 or TIM3. Opcionalmente, o inibidor de ponto de verificação imunitária é um anticorpo, seu fragmento de ligação ao antígeno ou um produto de proteína de anticorpo específico de CTLA4, LAG3, PD-1, PD-L1, PD-L2, B7-H3, B7H4, BTLA, SLAM, 2B4, CD160, KLRG-1 or TIM3. Tais inibidores de ponto de verificação imunitária incluem, mas não estão limitados a: atezolizumab,
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75/151 avelumab, ipilimumab, tremelimumab, BMS-936558, MK3475, CT011, AM-224, MDX-1105, IMP321, MGA271. Os inibidores de PD-1 incluem, por exemplo, pembrolizumab e nivolumab. Os inibidores de PD-L1 incluem, por exemplo, atezolizumab, avelumab e durvalumab. Os inibidores de CTLA4 incluem, p.ex., ipilimumab. Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para tratar pacientes com melanoma com metástases ósseas, opcionalmente em combinação com um anticorpo para PD-1 (p.ex., nivolumab, pembrolizumab). Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para tratar pacientes com câncer da mama, opcionalmente, em combinação com um inibidor de CTLA4, tal como ipilimumab.
[0143] Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para tratar tumores ricos em Células gigantes, p.ex., em hiperparatireoidismo ou com um cisto ósseo aneurismático secundário.
[0144] Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para tratar o Câncer da Próstata Resistente à Castração Metastático progressivo (mCRPC). Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para tratar o câncer da próstata sensível à castração. Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para tratar o câncer da próstata resistente aos hormônios.
[0145] Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para tratar o Câncer da Mama Metastático (mBC). Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para tratar o Câncer da Mama préoperativo. Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para tratar o Câncer da Mama inicial. Em outros aspectos, a formulação pode ser usada para tratar o câncer de mama primário
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76/151 negativo quanto ao receptor de hormônios, positivo quanto a RANK ou negativo quanto a RANK. Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para tratar o Câncer da Mama negativo quanto a HER2 pós-menopáusico.
[0146] Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para
tratar a síndrome mielodisplás: ica, p.ex., ( am um paci .ente i doso.
[0147] Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para
tratar a pe rda óssea induzí _da pelo tratamento do câncer
(CTIBL) •
[0148] Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para
tratar um tumor ute rino do colo do útero.
[0149] Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para
induzir ef ei .tos imunomoduladores em pacientes c :om ou sem
imunoterapia.
[0150] Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para
preveni r ou tratar a perda óssea assoe iada à osteoporose,
doença de Paget, osteomielite, hipercalcemia, osteopenia, osteonecrose e artrite reumatoide. Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para prevenir ou tratar condições inflamatórias com perda óssea. Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para prevenir ou tratar condições autoimunes com perda óssea. Em outro aspecto, a formulação pode ser usada para prevenir ou tratar a perda óssea associada a câncer, incluindo cânceres da mama, próstata, tireoide, rim, pulmão, esofágico, retal, bexiga, cervical, ovário, fígado e gastrointestinal, mieloma múltiplo, linfoma e Doença de Hodgkin.
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[0151] A formulação pode ser administrada em qualquer cronograma adequado. Em uma modalidade, a administração é programa é uma vez a cada quatro semanas. Opcionalmente, a administração pode incluir administração nos dias 8 e 15 do primeiro mês de terapia. Em outro tipo de modalidade, a administração pode ser em um programa de uma vez a cada seis meses. Um programa de uma vez a cada seis meses é contemplado para uso com osteoporose e massa óssea crescente, por exemplo. Outras doses de manutenção contempladas são a cada 3 semanas, a cada 3 meses e a cada 6 semanas.
[0152] Em alguns aspectos, a formulação farmacêutica aquosa é usada para tratar um paciente com Mieloma Múltiplo ou uma Metástase Óssea de um Tumor Sólido. Em certos aspectos, a formulação é administrada a uma dose de cerca de 120 mg a cada 4 semanas como uma injeção subcutânea na parte superior do braço, parte superior da coxa ou abdômen.
[0153] Em alguns aspectos, a formulação farmacêutica aquosa é usada para tratar um paciente com um Tumor de Células Gigantes do Osso. Em certos aspectos, a formulação é administrada a uma dose de cerca de 120 mg a cada 4 semanas com doses adicionais de 120 mg nos dias 8 e 15 do primeiro mês de terapia. Em alguns aspectos, a formulação é administrada subcutaneamente na parte superior do braço, parte superior da coxa ou abdômen do paciente. Em alguns casos, cálcio e vitamina D são administrados ao paciente para tratar ou prevenir a hipocalcemia.
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[0154] Em alguns aspectos, a formulação farmacêutica aquosa é usada para tratar um paciente com hipercalcemia de Malignidade. Em certos aspectos, a formulação é administrada a uma dose de cerca de 120 mg a cada 4 semanas com doses adicionais de 120 mg nos dias 8 e 15 do primeiro mês de terapia. Em alguns aspectos, a formulação é administrada subcutaneamente na parte superior do braço, parte superior da coxa ou abdômen. [0155] Em alguns aspectos, a formulação farmacêutica aquosa é usada para tratar mulheres pós-menopáusicas com osteoporose com elevado risco de fratura ou usada para aumentar a massa óssea em homens com elevado risco de fratura recebendo terapia de privação de andrógenos para o câncer da próstata não metastático ou em mulheres com elevado risco de fratura recebendo terapia inibidora adjuvante de aromatase para o câncer de mama. Em alguns aspectos, a formulação farmacêutica aquosa é administrada por um profissional de saúde e a uma dose de 60 mg a cada 6 meses como uma injeção subcutânea na parte superior do braço, parte superior da coxa ou abdômen. Em alguns aspectos, o paciente é também instruído para tomar 1000 mg de cálcio diariamente e pelo menos 400 IU de vitamina D diariamente.
[0156] Um tipo de formulação de acordo com a divulgação conterá denosumab, acetato e arginina. A arginina é opcionalmente L-arginina. A arginina é opcionalmente hidrocloreto de L-arginina. A formulação pode opcionalmente incluir sorbitol. A formulação pode opcionalmente incluir polissorbato. O polissorbato pode ser opcionalmente
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79/151 polissorbato 20 0 pH pode ser opcionalmente cerca de 5,0 a cerca de 5,2 ou menor do que 5,2.
[0157] Outro tipo de formulação de acordo com a divulgação conterá denosumab, acetato e fenilalanina. A formulação pode opcionalmente incluir sorbitol. A formulação pode opcionalmente incluir polissorbato. O polissorbato pode ser opcionalmente polissorbato 20 O pH pode ser opcionalmente cerca de 5,0 a cerca de 5,2 ou menor do que 5,2. Por exemplo, a formulação pode incluir denosumab a uma concentração de cerca de 108 mg/mL a cerca de 132 mg/mL, cerca de 28,8 mM a cerca de 35,2 mM de acetato, 33,3 mM a cerca de 40,7 mM de fenilalanina, 3,51% (p/v) a cerca de 4,29% (p/v) de sorbitol e cerca de 0,009% (p/v) a cerca de 0,011% (p/v) de polissorbato 20, a pH 5,1, e opcionalmente pode estar contido em um PFS, contendo opcionalmente cerca de 1 mL ou menos do que cerca de 1 mL (p.ex., cerca de 0,5 mL) da formulação. Por exemplo, a
formulação pode incluir denosumab a uma concentração de 120
mg/mL, acetato a 32 i mM, f eni .lalanina a 37 mM, sorbitol a 3 , 9%
(p/v) e poli .ssorbato 20 a 0,01% (p/ v) , a pH 5, 1, e
opcionalmente, pode estar contido em um PFS, contendo
opcionalmente cerca de 1 mL ou menos do que cerca de 1 mL
(p.ex., cerca de 0,5 mL) da formulação . A formulação pode ser
preparada por concentração do denosumab usando um tampão de diafiltração contendo acetato a 20 mM, sorbitol a 4,2% (p/v) e fenilalanina a 40 mM, a pH 4,7.
[0158] Outro tipo de formulação de acordo com a divulgação conterá denosumab, glutamato e arginina. A arginina é
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80/151 opcionalmente L-arginina. A arginina é opcionalmente hidrocloreto de L-arginina. A formulação pode opcionalmente incluir sorbitol. A formulação pode opcionalmente incluir polissorbato. O polissorbato pode ser opcionalmente polissorbato 20 O pH pode ser opcionalmente cerca de 5,0 a cerca de 5,2 ou menor do que 5,2.
[0159] Outro tipo de formulação de acordo com a divulgação conterá denosumab, acetato, arginina e fenilalanina. A formulação pode opcionalmente incluir sorbitol. A formulação pode opcionalmente incluir polissorbato. O polissorbato pode ser opcionalmente polissorbato 20 O pH pode ser opcionalmente cerca de 5,0 a cerca de 5,2 ou menor do que 5,2.
[0160] Outro tipo de formulação de acordo com a divulgação conterá denosumab, glutamato, arginina e fenilalanina. A arginina é opcionalmente L-arginina. A arginina é opcionalmente hidrocloreto de L-arginina. A formulação pode opcionalmente incluir sorbitol. A formulação pode opcionalmente incluir polissorbato. O polissorbato pode ser opcionalmente polissorbato 20 O pH pode ser opcionalmente cerca de 5,0 a cerca de 5,2 ou menor do que 5,2.
[0161] As formulações de acordo com a divulgação podem ser preparadas por qualquer método adequado. Em um tipo de método, uma solução contendo um anticorpo monoclonal anti-RANKL (p.ex., denosumab) pode ser preparada a uma concentração menor do que 70 mg/mL, uma quantidade adequada do inibidor da agregação de aminoácidos descrito aqui pode ser adicionada à solução e, depois, a solução pode ser concentrada até uma quantidade maior
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81/151 do que 70 mg/mL descrita aqui, p.ex., 120 mg/mL. Opcionalmente, a solução pode ser em primeiro lugar superconcentrada, i.e., até uma concentração de anticorpo monoclonal anti-RANKL (p.ex., denosumab) maior do que a concentração alvo final e, depois, a solução sobreconcentrada pode ser diluída, p.ex., com uma solução tampão com ajuste do pH, até à concentração e pH alvos finais. Por exemplo, a sobreconcentração pode resultar em uma quantidade de anticorpo monoclonal anti-RANKL (p.ex., denosumab) em uma gama de 130 mg/mL a 300 mg/mL ou 180 mg/mL a 300 mg/mL. A concentração inicial de denosumab antes da concentração não é particularmente limitada e pode ser, por
exemplo, cerca de 1 mg/mL ou cerca de 2 mg/ mL ou cerca de 5
mg/mL ou cerca de 8 mg/mL ou cerca de 10 mg/mL ou cerca de 20
mg/mL ou cerca de 30 mg/mL ou cerca de 40 mg/mL ou cerca de 50
mg/mL ou cerca de 60 mg/mL ou cerca de 70 mg/mL ou em uma . gama
delimitada por ta: LS concentrações, p.ex. , cerca de 1 mg/mL a
cerca de 70 mg/mL ou cerca de 1 mg/mL a cerca de 10 mg/mL.
[0162] A concentração da formulação pode ser levada a cabo por qualquer método adequado. Em um aspecto, o processo de concentração pode incluir centrifugação. Em outro aspecto, o processo de concentração pode incluir ultrafiltração.
[0163] A introdução do inibidor da agregaçao de aminoácidos na formulação pode ser feita por qualquer processo adequado. Por exemplo, o inibidor da agregação de aminoácidos pode ser introduzido na formulação através de simples adição (enriquecimento) na formulação, p.ex., como descrito nos Exemplos em baixo. Em outro método, o inibidor da agregação de
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82/151 aminoácidos pode ser introduzido na formulação através de diafiltração contra uma solução tampão contendo o inibidor da agregação de aminoácidos, p.ex., como descrito nos Exemplos em baixo. 0 inibidor da agregação de aminoácidos pode ser introduzido na formulação antes da ou após a concentração do anticorpo monoclonal anti-RANKL acima de 70 mg/mL. Como mostrado nos Exemplos em baixo existe um benefício em adicionar o inibidor da agregação de aminoácidos à solução antes da concentração, pois inibe a agregação durante o processo de concentração.
[0164] Conformemente, a divulgação proporciona métodos de preparação de uma formulação farmacêutica aquosa, estável compreendendo um anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno. Em casos exemplificativos, o método compreende combinação do anticorpo monoclonal anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, a uma concentração maior do que 7 0 mg/mL com um inibidor da agregação de aminoácidos, um tampão, um tensoativo e, opcionalmente, um modificador da tonicidade. O anticorpo, ou porção de ligação ao antígeno, pode ser qualquer um daqueles descritos aqui, e a concentração do anticorpo, ou sua porção de ligação ao antígeno, pode estar de acordo com os ensinamentos aqui. O inibidor da agregação de aminoácidos pode ser qualquer um daqueles descritos aqui. Por exemplo, o inibidor da agregação de aminoácidos pode ser um aminoácido positivamente carregado, um aminoácido aromático ou um
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83/151 aminoácido hidrofóbico. 0 inibidor da agregação de aminoácidos pode estar em razão molar com o anticorpo como descrito aqui. A quantidade e seleção de inibidor da agregação, tensoativo, modificador da tonicidade e tampão são como descritas acima. A divulgação proporciona também as formulações preparadas pelos métodos de preparação, descritos aqui.
[0165] Uma formulação de acordo com a divulgação descrita aqui pode incluir ajuste quanto ao pH de uma solução de elevada concentração de anticorpo monoclonal anti-RANKL (p.ex., denosumab) descrito aqui, p.ex., um tendo uma concentração maior do que 7 0 mg/mL ou 120 mg/mL. Em outro aspecto, a formulação pode ser preparada por ajuste quanto ao pH de uma solução de baixa concentração de anticorpo monoclonal antiRANKL (p.ex., denosumab) e depois concentração da solução até à concentração final mais elevada, desejada. Agentes de ajuste do pH adequados são conhecidos na técnica.
[0166] Modalidades
[0167] O que se segue é uma lista de modalidades contempladas específicas.
1. Uma formulação farmacêutica aquosa compreendendo um anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno, a uma concentração de mais do que 7 0 mg/mL e tendo um pH em uma gama de cerca de 5,0 a menos do que 5, 2 .
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2. A formulação da modalidade 1, tendo um pH em uma gama de cerca de 5,0 a 5,19 ou cerca de 5,0 a cerca de 5,15 ou cerca de 5,0 a cerca de 5,1.
3. A formulação da modalidade 2, tendo um pH de cerca de 5, 1.
4. A formulação de qualquer uma das modalidades 1 a 3, compreendendo adicionalmente um inibidor da agregação de aminoácidos.
5. Uma formulação farmacêutica aquosa compreendendo uma mistura de um anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno e um inibidor da agregação de aminoácidos.
6 . A formulação da modalidade 5, tendo um pH em uma gama
de 5, 0 a cerca de 5,4 ou cerca de 5,0 a cerca de 5 ou cerca
de 5, 0 a menos do que 5,2 ou cerca de 5,0 a 5, 19 ou cerca de
5, 0 a cerca de 5,15 ou cerca de 5,0 a cerca de 5, 1 •
7 . A formulação da modalidade 6, tendo um pH de cerca de
5, 1 •
8 A formulação de qualquer uma das modali da des
precedentes, compreendendo adicionalmente um tampão de pH.
9. A formulação de qualquer uma das modalidades 5 a 8, em que a concentração do anticorpo ou sua porção de ligação ao antígeno está em uma gama de cerca de 10 mg/mL a cerca de 200 mg/mL.
10. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, em que a concentração do anticorpo ou sua porção
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85/151 de ligação ao antígeno está em uma gama de mais do que 70 mg/mL a cerca de 200 mg/mL.
11. A formulação da modalidade 10, em que a concentração do anticorpo ou sua porção de ligação ao antígeno está em uma gama de cerca de 100 a cerca de 140 mg/mL.
12. A formulação da modalidade 11, em que a concentração do anticorpo ou sua porção de ligação ao antígeno é cerca de 120 mg/mL.
13. A formulação de qualquer uma das modalidades
precedentes, , em que o ant: Lcorpo é denosumab ou um seu
bios similar
14. A formulação da modalidade 13, em que o anticorpo é
denosumab.
15. A formulação de qualquer uma das modalidades
precedentes, em que o inibidor da agregação de aminoácidos é selecionado de um ou mais aminoácidos, seus dipeptídeos ou oligopeptídeos tendo 2 a 10 resíduos.
16. A formulação da modalidade 15, em que o inibidor da agregação de aminoácidos inclui uma mistura de, pelo menos, dois aminoácidos.
17. A formulação da modalidade 16, em que os aminoácidos incluem arginina e fenilalanina.
18. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o inibidor da agregação de aminoácidos é selecionado de um ou mais aminoácidos hidrofóbicos, seus dipeptídeos, ou oligopeptídeos tendo 2 a 10 resíduos e contendo um ou mais aminoácidos hidrofóbicos.
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19. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o inibidor da agregação de aminoácidos é selecionado de um ou mais aminoácidos transportando uma cadeia lateral carregada, seus dipeptideos, ou oligopeptideos tendo 2 a 10 resíduos e contendo um ou mais aminoácidos transportando uma cadeia lateral carregada.
20. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o inibidor da agregação de aminoácidos é selecionado de um ou mais aminoácidos básicos, seus dipeptideos, ou oligopeptideos tendo 2 a 10 resíduos e contendo um ou mais aminoácidos básicos.
21. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o inibidor da agregação de aminoácidos é selecionado de um ou mais dipeptideos.
22. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o inibidor da agregação de aminoácidos é selecionado de um ou mais oligopeptideos tendo 2 a 10 resíduos de aminoácidos.
23. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o inibidor da agregação de aminoácidos compreende um resíduo de arginina, ou o inibidor da agregação de aminoácidos compreende arginina.
24. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o inibidor da agregação de aminoácidos compreende um dipeptídeo de arginina-fenilalanina.
25. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o inibidor da agregação de aminoácidos está
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87/151 presente na formulação a uma concentração em uma gama de cerca de 10 mM a cerca de 200 mM.
26. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, compreendendo adicionalmente um tensoativo.
27. A formulação da modalidade 26, em que o tensoativo é selecionado de um ou mais ésteres de ácidos graxos de polioxietileno de sorbitana (p.ex., polissorbato 20, polissorbato 80) ou um ou mais poliéteres de alquilarila, p.ex., fenol de alquila oxietilado (p.ex., Triton® X-100) ou um ou mais poloxâmeros (p.ex., Pluronics®, p.ex., Pluronic® F68) e suas combinações.
28. A formulação da modalidade 2 6 ou 27, em que o tensoativo está presente a uma concentração em uma gama de cerca de 0,004% (p/v) a cerca de 0,1% (p/v).
29. A formulação da modalidade 28, em que o tensoativo está presente a uma concentração de cerca de 0,01% (p/v).
30. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, compreendendo adicionalmente um tampão.
31. A formulação da modalidade 30, em que o tampao está centrado, a 25 °C, em uma gama de cerca de pH 4 a cerca de pH 5, 5 .
32. A formulação da modalidade 30 ou 31, em que o tampao tem um pKa dentro de uma unidade de pH de pH 5,0-5,2 a 25 °C.
33. A formulação de qualquer uma das modalidades 30 a 32, em que o tampão compreende acetato.
34. A formulação de qualquer uma das modalidades 30 a 32, em que o tampão compreende glutamato.
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35. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, compreendendo adicionalmente um modificador da tonicidade.
36. A formulação da modalidade 35, em que o modificador da tonicidade é selecionado de um ou mais de sorbitol, manitol, sacarose, tre-halose, glicerol e suas combinações.
37. A formulação da modalidade 36, em que o modificador da tonicidade compreende sorbitol.
38. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, compreendendo adicionalmente um ou mais excipientes adicionais selecionados de açúcares, polióis, agentes solubilizantes (p.ex., N-Metil-2-pirrolidona), estabilizantes hidrofóbicos (p.ex., prolina), polietilenoglicol, ciclodextrinas e suas combinações.
39. A formulação de qualquer uma das modal. idades
precedentes, compreendendo menos do que 2% de espéci .es de
elevado peso molecular do anticorpo monoclonal anti -RANKL
humano por SE l-UHPLC após armazenament o a 37 °C durante três
meses.
40. A formulação de qualquer uma das modal. idades
precedentes, compreendendo menos do que 2% de espéci .es de
elevado peso molecular do anticorpo monoclonal anti -RANKL
humano por SE-UHPLC após armazenamento a 4 °C durante 36 meses.
41. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, compreendendo pelo menos 98% do pico principal do anticorpo por SE-UHPLC após armazenamento a 37 °C durante três meses .
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42. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, compreendendo pelo menos 98% do pico principal do anticorpo por SE-UHPLC após armazenamento a 4 °C durante 36 meses.
43. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, compreendendo denosumab; um inibidor da agregação de aminoácidos selecionado de um ou mais de arginina, um seu dipeptídeo ou um oligômero tendo 2-10 resíduos e compreendendo arginina; um tampão de acetato, sorbitol; e um tensoativo, e tendo um pH em uma gama de cerca de 5,0 a menos do que 5,2.
44. A formulação da modalidade 43, em que o inibidor da agregação de aminoácidos é selecionado de arginina, argininaarginina ou arginina-fenilalanina.
45. A formulação da modalidade 43, em que o inibidor da agregação de aminoácidos compreende uma mistura de arginina e fenilalanina.
46. A formulação de qualquer uma das modalidades 43 a 45, em que o tampão de acetato está presente a uma concentração em uma gama de cerca de 5 mM a cerca de 25 mM.
47. A formulação de qualquer uma das modalidades 43 a 46, em que o sorbitol está presente a uma concentração em uma gama de 0,1% (p/v) a 5% (p/v).
48. A formulação de qualquer uma das modalidades 43 a 47, em que o tensoativo é selecionado de um ou mais ou polissorbato 20 e polissorbato 80.
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49. A formulação de qualquer uma das modalidades 43 a
48, em que o pH está em uma gama de cerca de 5,0 a cerca de 5, 15 .
50. A formulação da modalidade 49, em que o pH é cerca de
5, 10 .
51. A formulação de qualquer uma das modal idades
precedentes, em que a formulação é adequada para i njeção
subcutânea.
52. A formulação de qualquer uma das modal idades
precedentes, em que a formulação é estéril e isenta de
conservantes.
53. A formulação de qualquer uma das modal idades
precedentes, em que o anticorpo monoclonal anti-RANKL humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno compreende (1) uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 2 e uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 1; ou (2) regiões CDR1, CDR2 e CDR3 de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 8, 9 e 10, respectivamente, e regiões CDR1, CDR2 e CDR3 de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 5, 6 e 7, respectivamente.
54. A formulação de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o anticorpo monoclonal anti-RANKL humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno é um anticorpo.
55. A formulação de qualquer uma das modalidades 1-53, em que o anticorpo monoclonal anti-RANKL humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno é uma porção de ligação ao antígeno.
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56. Um frasco, seringa pré-cheia ou recipiente de vidro contendo uma formulação de qualquer uma das modalidades 1 a 55 .
57. 0 frasco, seringa pré-cheia ou recipiente de vidro da modalidade 56, contendo cerca de 1 mL ou menos da formulação.
58. Um método de prevenção de um evento relacionado com o esqueleto (SRE) em um paciente com sua necessidade compreendendo administração de uma quantidade eficaz de uma formulação de acordo com qualquer uma das modalidades 1 a 55.
59. 0 método da modalidade 58, em que o SRE é selecionado do grupo consistindo em uma fratura patológica, radioterapia ao osso, cirurgia ao osso e compressão da medula espinhal.
60. 0 método da modalidade 58 ou 59, em que o paciente tem uma metástase óssea de um tumor sólido.
61. 0 método da modalidade 60, em que o tumor sólido é selecionado de câncer da mama, câncer da próstata, câncer do pulmão, câncer de células não pequenas do pulmão e carcinoma de células renais.
62. O método da modalidade 58 ou 59, em que o paciente tem mieloma múltiplo.
63. O método de qualquer uma das modalidades 58 a 62, compreendendo administração de uma quantidade da formulação eficaz para reduzir o telopeptídeo N-terminal urinário do marcador de renovação óssea corrigido quanto à creatinina (uNTx/Cr), opcionalmente em pelo menos 80%.
64. Um método de tratamento de tumor de células gigantes do osso em um paciente com sua necessidade compreendendo
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92/151 administração de uma quantidade eficaz de uma formulação de acordo com qualquer uma das modalidades 1 a 55.
65. 0 método da modalidade 64, em que o paciente tem tumor de células gigantes do osso que é recorrente, irressecável ou para o qual é provável que a ressecção cirúrgica resulte em morbidade grave.
66. Um método de tratamento de hipercalcemia de malignidade em um paciente com sua necessidade compreendendo administração de uma quantidade eficaz de uma formulação de acordo com qualquer uma das modalidades 1 a 55.
67. 0 método da modalidade 66, em que a malignidade é refratária à terapia com bifosfonato.
68. 0 método da modalidade 66 ou 67, compreendendo administração de uma quantidade da formulação eficaz para reduzir ou manter o cálcio no soro do paciente a um nível menor do que ou igual a cerca de 11,5 mg/dL.
69. 0 método de qualquer uma das modalidades 58-68, em que a formulação compreende o anticorpo anti-RANKL humano a uma concentração de cerca de 120 mg/mL.
70. O método de qualquer uma das modalidades 58-69, compreendendo administração da formulação em um programa de uma vez a cada quatro semanas.
71. O método de qualquer uma das modalidades 58-70, compreendendo administração da formulação nos dias 8 e 15 do primeiro mês de terapia.
72. Um método de tratamento de osteoporose em um paciente com sua necessidade, compreendendo administração de uma
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93/151 quantidade eficaz de uma formulação de acordo com qualquer uma das modalidades 1 a 55.
73. 0 método da modalidade 72, em que o paciente é uma mulher pós-menopáusica com elevado risco de fratura.
74. 0 método da modalidade 72, em que o paciente é um homem com elevado risco de fratura.
75. Um método de aumento da massa óssea em um paciente com sua necessidade, compreendendo administração de uma quantidade eficaz de uma formulação de acordo com qualquer uma das modalidades 1 a 55.
76. 0 método da modalidade 75, em que o paciente tem osteoporose.
77. 0 método da modalidade 75, em que o paciente é uma mulher com elevado risco de fratura recebendo terapia inibidora adjuvante de aromatase para o câncer da mama.
78. 0 método da modalidade 75, em que o paciente é um homem com elevado risco de fratura recebendo terapia de privação de andrógenos para o câncer de próstata não metastático.
79. 0 método de qualquer uma das modalidades 75-78, compreendendo administração de uma quantidade da formulação eficaz para diminuir a incidência de novas fraturas vertebrais e/ou fraturas não vertebrais.
80. 0 método de qualquer uma das modalidades 75-79, compreendendo administração de uma quantidade da formulação eficaz para diminuir a reabsorção óssea.
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81. 0 método de qualquer uma das modalidades 75-80, compreendendo administração de uma quantidade da formulação eficaz para aumentar a densidade óssea no paciente em pelo menos uma área selecionada de coluna lombar, quadril total e colo do fêmur.
82. O método de qualquer uma das modalidades 75 a 81, compreendendo administração de uma quantidade da formulação eficaz para aumentar a massa óssea no osso cortical e/ou osso trabecular do paciente.
83. O método de qualquer uma das modalidades 75 a 82, compreendendo administração de uma quantidade da formulação eficaz para reduzir o marcador da reabsorção óssea Ctelopeptídeo tipo 1 (CTX) no soro.
84. O método de qualquer uma das modalidades 75 a 83, compreendendo administração da formulação em um programa de uma vez a cada seis meses.
85. O método de qualquer uma das modalidades 58 a 84, compreendendo administração da formulação em um volume de 1 mL ou menos.
86. O método de qualquer uma das modalidades 58 a 85, compreendendo administração da formulação subcutaneamente.
87. O método da modalidade 86, compreendendo administração da formulação subcutaneamente à parte superior do braço, parte superior da coxa ou abdômen.
88. O método de qualquer uma das modalidades 58 a 87, em que o paciente está recebendo um ou ambos de cálcio e vitamina D .
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89. Um método de melhoria da estabilidade de uma formulação farmacêutica aquosa, compreendendo um anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno, a uma concentração de mais do que 70 mg/mL, compreendendo:
preparação da referida formulação farmacêutica aquosa compreendendo o referido anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (antiRANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno a um pH em uma gama de cerca de 5,0 a menos do que 5,2, em que a referida formulação farmacêutica aquosa demonstra estabilidade melhorada ao pH em uma gama de cerca de 5,0 a menos do que 5,2 em comparação com uma formulação farmacêutica aquosa equivalente que não está a um pH em uma gama de cerca de 5,0 a menos do que 5,2.
90. Um método de melhoria da estabilidade de uma formulação farmacêutica aquosa, compreendendo um anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno compreendendo:
preparação da referida formulação farmacêutica aquosa compreendendo o referido anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (antiRANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno em mistura com adição com um inibidor da agregação de aminoácidos,
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96/151 em que a referida formulação farmacêutica aquosa demonstra estabilidade melhorada com o inibidor da agregação de aminoácidos em comparação com uma formulação farmacêutica aquosa equivalente sem o inibidor da agregação de aminoácidos. EXEMPLOS
[0168] Os seguintes exemplos sao proporcionados para ilustração e não se destinam a limitar o escopo da invenção. Ao longo dos exemplos apresentados aqui, as seguintes abreviaturas são usadas: DF, diafiltração; PS20, polissorbato 20, HC1, hidrocloreto, UF/DF, ultrafiltração/diafiltração; # da F, número da formulação; HMWS, espécies de elevado peso molecular; SE-UHPLC, Cromatografia Líquida de Elevado Desempenho com Exclusão por Tamanho. Adicionalmente, ao longo destes exemplos, a composição do tampão DF ou tampão de diálise usado para preparar a formulação final compreendendo denosumab, bem como concentrações estimadas dos componentes da formulação final, são proporcionadas. As concentrações finais de certos componentes das formulações finais armazenadas e subsequentemente analisadas quanto à estabilidade podem diferir das concentrações do tampão DF ou diálise dependendo da presença ou ausência de um contraion (p.ex., HC1) . Sem um contraíon, as formulações têm baixa força iônica. Em tais casos, o acetato se coconcentra com denosumab, tal que as formulações finais compreendam uma concentração mais elevada de acetato, em relação à concentração do tampão DF ou diálise. Por exemplo, o uso de um tampão DF compreendendo acetato a 10 mM leva a acetato a ~23 mM na formulação final de denosumab
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97/151 (120 mg/mL) (pH 5,1), quando nem o tampão DF nem a formulação final compreendem um contraion (p.ex., HC1) e assim tem baixa força iônica. Similarmente, um tampão DF compreendendo acetato a 20 mM leva a acetato a ~32 mM na formulação final de denosumab (120 mg/mL), a pH 5,1, sem um contraion (p.ex., HC1). Quando um contraion (p.ex., HC1 de arginina HC1) está presente, o acetato não se coconcentra com denosumab e, portanto, a concentração de acetato do tampão DF e a concentração de acetato da composição final são geralmente equivalentes. Adicionalmente, os excipientes podem ser volumetricamente excluídos ou podem ser impactados por interações não específicas. Por exemplo, em uma formulação de denosumab de 120 mg/mL, as concentrações de fenilalanina e sorbitol são aproximadamente 7-10% mais baixas do que o que é indicada no tampão DF e a concentração de arginina é aproximadamente 1015% mais baixa. Tendo em vista o precedente, ao longo dos seguintes exemplos, concentrações dos componentes das formulações finais são proporcionadas, tomando em consideração os efeitos de exclusão de excipiente e coconcentração de acetato acima descritos.
EXEMPLO 1
[0169] Uma avaliaçao inicial de doze formulações foi feita quanto ao seu efeito em minimizar a quantidade (%) de HMWS em uma formulação de denosumab líquida de elevada concentração (120 mg/mL) e sua formação ao longo do tempo. As alternativas da formulação incluíram mudanças no tipo de tampão, estabilizantes e pH da solução. As formulações testadas, A-L,
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98/151 são descritas na Tabela 1 em baixo. Todos os valores de tampão citados são para a concentração de tampão contra o qual o anticorpo é diafiltrado. Cada excipiente e tensoativo foi adicionado à solução pós-troca de tampões até ao nível indicado na tabela. Embora as concentrações de acetato nas presentes formulações não tenham sido medidas, formulações de denosumab a 120 mg/mL com sorbitol diafiltradas contra acetato a 10 mM tinham valores finais de acetato aproximados entre 25 mM e 35 mM de acetato.
[0170] Denosumab a 70 mg/mL em acetato, pH 5,2 foi UF/DF contra acetato a 10 mM, pH 5,2 e concentrado até 160 mg/mL. Soluções de estoque foram preparadas em acetato a 10 mM a pH 5,2 consistindo em:
[0171] Sorbitol a 35%
[0172] Polissorbato 20 a 1%
[0173] Polissorbato 80 a 1%
[0174] Pluronic® F-68 a 30%
[0175] Triton™ X-100 a 3%
[0176] L-arginina HC1 a 250 mM
[0177] Arginina de N-acetila (NAR) a 250 mM
[0178] Lisina de N-acetila (NAK) a 250 mM
[0179] Prolina a 250 mM
[0180] Polietilenoglicol (PEG) 3350 a 250 mM
[0181] Ciclodextrina Captisol® a 250 mM
[0182] Para se alcançarem as formulações A a J, o material a 160 mg/mL preparado com acetato a 10 mM, pH 5,2 foi diluído até 120 mg/mL usando acetato a 10 mM a um pH de 5,2 seguido
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99/151 por uma adição das correspondentes soluções de estoque de sorbitol, excipiente e/ou tensoativo até uma concentração final alvo listada na Tabela 1. Para se alcançarem as formulações K e L, as formulações autotamponadas e de glutamato, respectivamente, dois alíquotas separadas a partir do material a 160 mg/mL sofreram troca de tampões adicional por centrifugação. O material para as formulações K e L foi depois diluído até 120 mg/mL usando o respectivo tampão seguido por uma adição das correspondentes soluções de estoque de sorbitol e polissorbato 20 até uma concentração final alvo listada na tabela de formulações na Tabela 1.
TABELA 1
Abreviatura Composição da Formulação
A Acetato/Sorbitol/PS20/pH 5,2 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 5% (p/v), Polissorbato 20 a 0,01 (p/v) , pH 5, 2
B Acetato/Sorbitol/PS80/pH 5,2 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 5% (p/v), Polissorbato 80 a 0,01 (p/v) , pH 5, 2
C Acetato/Sorbitol/Pluronic F68/pH 5,2 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 5% (p/v), Pluronic F68 a 0,01 (p/v) , pH 5, 2
D Acetato/Sorbitol/Triton X-100/pH 5,2 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 5% (p/v), Triton X-100 a 0,01 (p/v) , pH 5, 2
E Acetato/Arginina/Sorbitol/PS20/pH 5,2 Acetato a 10 mM, L-Arginina HC1 a 10 mM, Sorbitol a 2,4%
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(p/v), Polissorbato 20 a 0,01 (p/v) , pH 5, 2
F Acetato/NAR/Sorbitol/PS20/pH 5,2 Acetato a 10 mM, NAR a 10 mM, Sorbitol a 3,7% (p/v), Polissorbato 20 a 0,01 (p/v), pH 5, 2
G Acetato/NAK/Sorbitol/PS20/pH 5,2 Acetato a 10 mM, NAK a 10 mM, Sorbitol a 3,7% (p/v), Polissorbato 20 a 0,01 (p/v), pH 5, 2
H Acetato/Prolina/PS20/pH 5,2 Acetato a 10 mM, L-prolina a 10 mM, Polissorbato 20 a 0,01 (p/v) , pH 5, 2
I Acetato/PEG/Sorbitol/PS20/pH 5,2 Acetato a 10 mM, PEG3350 a 5 mM, Sorbitol a 5% (p/v), Polissorbato 20 a 0,01 (p/v), pH 5, 2
J Acetato/Captisol/Sorbitol/PS20/pH 5,2 Acetato a 10 mM, Captisol a 2,7 mM, Sorbitol a 5% (p/v), Polissorbato 20 a 0,01 (p/v), pH 5, 2
K Autotamponada/Sorbitol/PS20/pH 5,2 Sorbitol a 5% (p/v), Polissorbato 20 a 0,01 % (p/v) , pH 5, 2
L Glutamato/Arginina/Sorbitol/PS20/pH 5, 0 Glutamato a 10 mM, L-Arginina HC1 a 10 mM, Sorbitol a 2,4%
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(p/v), Polissorbato 20 a 0,01 (p/v) , pH 5, 0
[0183] A Figura 1 mostra a percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C. A formulação L, consistindo em aproximadamente tampão de glutamato a 10 mM, L-arginina HC1 a 10 mM, sorbitol a 2,4% (p/v) como modificador da tonicidade, polissorbato 20 a 0,01% (p/v) como tensoativo, e um valor de pH de 5,0 mostrou tanto quantidades iniciais diminuídas de HMWS, sugerindo alguma
redução de agregados já formados, como cinética diminuída para
a formaçao de HMWS a 37 °C.
EXEMPLO 2
[0184] A avaliação de formulações com excipientes de
acetato a 10 mM, L-arginina a 75 mM, sorbitol a 2,4% (p/v),
polissorbato 20 a 0,01% (p/v) e uma formulação com excipientes de acetato a 10 mM, sorbitol a 5% (p/v) , polissorbato 20 a 0,01% (p/v), cada uma com elevada concentração (120 mg/mL) de denosumab, a uma temperatura de 37 °C durante até 1 mês revelaram os efeitos do pH e inibidor da agregação de aminoácidos na taxa e extensão de formação de HMWS. As formulações testadas são descritas na Tabela 2 em baixo. Todos os valores de tampão e excipiente citados são para as concentrações de tampão e excipiente contra o qual o anticorpo é diafiltrado.
[0185] Para se prepararem as amostras de teste M-Q, uma alíquota de 3 mL de denosumab a 70 mg/mL em acetato, pH 5,2 foi dialisada contra 500 mL de tampão DF descrito em baixo,
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102/151 com um total de 3 trocas de tampões para se alcançar uma diluição de 1 milhão de vezes da formulação prévia para assegurar troca de tampões completa. O material foi depois sobreconcentrado usando centrifuga-concentrador, seguido por uma diluição até 120 mg/mL e a adição de polissorbato 20 até uma concentração final de 0,01%.
TABELA 2
Abreviatura Composição da Formulação DF
M Acetato/Arginina/Sorbitol/PS20/pH 4, 5 Acetato a 10 mM, L-Arginina HC1 a 75 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), pH 4,5
N Acetato/Arginina/Sorbitol/PS20/pH 4, 8 Acetato a 10 mM, L-Arginina HC1 a 75 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), pH 4, 8
0 Acetato/Arginina/Sorbitol/PS20/pH 5, 2 Acetato a 10 mM, L-Arginina HC1 a 75 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), pH 5, 2
P Acetato/Sorbitol/PS20/pH 5,2 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 5% (p/v) , pH 4,5
Q Acetato/Sorbitol/PS20/pH 5,3 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 5% (p/v) , pH 4, 8
[0186] A FIGURA 2 mostra a percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C. A FIGURA 3 mostra cromatogramas de exclusão por tamanho em função da formulação após armazenamento a 37 °C durante 1 mês.
[0187] À medida que o pH da solução diminuía existia um aumento na formação de agregados grandes. A pH abaixo de 4,8,
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103/151 e especialmente 4,5, agregados grandes eram as HMWS dominantes, com um aumento dramático para a formulação de teste a pH 4,5. Como mostrado na FIGURA 3, as formulações P e Q tiveram a quantidade mais baixa de HMWS de ordem mais elevada (tempo de retenção cerca de 6 minutos), seguidas pelas formulações comparativas O, N e M tendo valores de pH decrescentes.
[0188] No entanto, à medida que o pH era aumentado, existiu geralmente um aumento resultante nas espécies de dímero. Como mostrado nas FIGURAS 3, a formulação N teve a quantidade mais baixa de espécies de dímero (tempo de retenção cerca de 6, 8 minutos), seguida por formulações M, O, P e Q.
[0189] A presença de arginina na formulação O a uma concentração de 75 mM resultou em reduções de aproximadamente 0,3% e 25% nas quantidades das espécies de dímero e sua taxa cinética de formação, respectivamente, após 1 mês a 37 °C em comparação com a formulação P tendo o mesmo pH, mas sem arginina.
EXEMPLO 3
[0190] Este exemplo demonstra o efeito de pH em formulações de denosumab de elevada concentração.
[0191] Denosumab (a uma concentração de 120 mg/mL) foi formulado com acetato, sorbitol e polissorbato 20 (PS20) com ou sem um inibidor da agregação de aminoácidos a três valores de pH diferentes: 4,8, 5,1 e 5,4. Em este estudo, o inibidor da agregação de aminoácidos foi L-Arginina HC1. Todas as formulações foram feitas por troca do tampão de uma solução inicial contendo uma concentração mais baixa de denosumab,
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104/151 seguida por sobreconcentração do material de denosumab e depois uma diluição do material de denosumab com as quantidades desejadas de tampão, excipientes e tensoativos. Brevemente, uma alíquota de denosumab a 70 mg/mL em acetato, pH 5,2 (material inicial) foi dialisada contra um tampão DF, como descrito na TABELA 3A, com um total de 3 trocas de tampões para se alcançar uma diluição de 1 milhão de vezes do material inicial para assegurar troca de tampões completa. O material de denosumab com troca de tampões foi depois concentrado usando uma centrífuga-concentrador até uma concentração de denosumab de mais do que 120 mg/mL, e o material concentrado foi subsequentemente diluído para se alcançar uma concentração de denosumab de 120 mg/mL. PS20 foi adicionado até uma concentração final de 0,01%.
[0192] Se pensou que proteína a elevada concentração contribuída para o pH da solução com base no seu estado de carga. A concentração de acetato da Formulação 1 foi aumentada para se alcançar o pH final visado, e as concentrações de acetato das Formulações 2 e 3 foram correspondidas àquela da Formulação 1. As concentrações de acetato das Formulações 4-6 requereram uma quantidade ainda mais elevada de acetato de modo a corresponder às concentrações de acetato finais das Formulações 1-3, devido ao acetato não se coconcentrando na presença do sal de HC1. A Formulação 7 serviu como um controle para assegurar que a concentração de acetato aumentada nas Formulações 4-6 não prejudicava a estabilidade da proteína em formulações com hidrocloreto de arginina.
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[0193] As diferentes formulações de denosumab feitas e testadas em este estudo são descritas na TABELA 3A.
TABELA 3A
# da F Formulação Final Estimada* Composição do Tampão DF
1 Acetato a 40 mM/Sorbitol a 4,58% (p/v)/PS20/pH 4,8 Acetato a 30 mM, Sorbitol a 5% (p/v) , pH 4,35
2 Acetato a 40 mM/Sorbitol a 4,58% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 30 mM, Sorbitol a 5% (p/v), pH 4,9
3 Acetato a 40 mM/Sorbitol a 4,58% (p/v)/PS20/pH 5,4 Acetato a 30 mM, Sorbitol a 5% (p/v), pH 5,2
4 Acetato a 40 mM/Arginina a 65 mM/ Sorbitol a 3,3% (p/v)/PS20/pH 4, 8 Acetato a 40 mM, Sorbitol a 3, 6% (p/v), Arginina-HCl a 75 mM, pH 4, 8
5 Acetato a 40 mM/Arginina a 65 mM/ Sorbitol a 3,3% (p/v)/PS20/pH 5, 4 Acetato a 40 mM, Sorbitol a 3, 6% (p/v), Arginina-HCl a 75 mM, pH 5,4
6 Acetato a 40 mM/Arginina a 65 mM/ Sorbitol a 3,3% (p/v)/PS20/pH 5, 1 Acetato a 40 mM, Sorbitol a 3, 6% (p/v), Arginina-HCl a 75 mM, pH 5,1
7 Acetato a 10 mM/Arginina a 65 mM/ Sorbitol a 3,3% (p/v)/PS20/pH 5, 1 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 3, 6% (p/v), Arginina-HCl a 75 mM, pH 5,1
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106/151 *As formulações finais compreenderam denosumab a 120 mg/mL e PS20 a uma concentração final de 0,01% (p/v) e tinham o pH indicado. As concentrações de sorbitol são estimadas a 8,5% mais baixas do que a concentração de sorbitol do tampão DF. As concentrações de arginina são estimadas a 12,5% mais baixas do que a concentração de Arginina do tampão DF.
[0194] Uma amostra de cada formulação foi cheia em um recipiente a um volume de enchimento de 1 mL e armazenada a uma temperatura de 37 °C durante até 4 semanas. O inibidor da agregação, e estabilidade contra a inibição da agregação ao longo do tempo, como baseado na formação de HMWS e espécies de dímero, foi avaliado usando SW-UHPLC. Os perfis de inibição da agregação destas formulações foram comparados às condições iniciais e durante e após o período de armazenamento.
[0195] A percentagem de HMWS foi monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C. A FIGURA 4 representa um gráfico da percentagem de HMWS em função do tempo para as Formulações 1-7 e a TABELA 3B proporciona os pontos de dados do gráfico.
TABELA 3B
Tempo de Armazenamento a °C
Nome da Formulação
2 4 semanas semanas semanas
Acetato (40)/Sorbitol/PS20/pH
0,7 1,2 1,6
4, 8
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107/151
Acetato (40)/Sorbitol/PS20/pH
2 5, 1 Acetato (40)/Sorbitol/PS20/pH 0, 9 1,5
3 5, 4 Acetato 1, 5 2,1
4 (40)/Arginina/Sorbitol/PS20/pH 4, 8 Acetato 0, 6 1,2
5 (40)/Arginina/Sorbitol/PS20/pH 5, 4 Acetato 0, 9 1,3
6 (40)/Arginina/Sorbitol/PS20/pH 5, 1 Acetato 0, 7 1,1
7 (10)/Arginina/Sorbitol/PS20/pH 0, 8 1,1
5, 1
2,0
2,7
1, 9
1, 7
1, 4
1, 4
Ο # da F mostrado na coluna à esquerda está de acordo com o # da F da Tabela 3A.
[0196] A FIGURA 5 mostra cromatogramas de exclusão por tamanho para cada formulação após armazenamento a 37 °C durante mês. As formulações sem arginina são mostradas no painel à esquerda, enquanto as formulações com arginina são mostradas no painel à direita.
[0197] Como mostrado na FIGURA 4, as formulações contendo arginina se desempenharam melhor do que as formulações de controle com hidrocloreto de arginina, e as formulações a pH
5,1 se desempenharam melhor do que formulações comparáveis a
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108/151 pH 4,8 e pH 5,4. Para as Formulações 1-3 sem hidrocloreto de arginina, as espécies de dimero aumentaram à medida que o pH da solução aumentava até 5,4 (FIGURA 5A). Para as Formulações 4-6 contendo hidrocloreto de arginina, à medida que o pH da solução diminuía até 4,8, existiu um aumento na formação de agregados grandes, bem como um aumento nas espécies de dímero à medida que o pH da solução aumentava até 5,4 (FIGURA 5B) . Ao pH de solução de 5,1, a Formulação 6 com a presença de hidrocloreto de arginina, teve a quantidade mais baixa de HMWS totais em comparação com a Formulação 2 sem a presença de hidrocloreto de arginina. Adicionalmente, o compartimento da Formulação 7 demonstrou que um aumento na concentração de tampão de acetato de 10 mM até 40 mM teve um efeito relativamente pequeno na formação de HMWS.
EXEMPLO 4
[0198] Este exemplo demonstra uma relaçao entre pH e formação de HMWS para diferentes formulações de denosumab compreendendo concentrações variáveis de denosumab.
[0199] As concentrações de proteína denosumab de 15 mg/mL até 150 mg/mL foram avaliadas para se avaliar a sensibilidade ao pH da formação de HMWS a várias concentrações de proteína e a concentrações de hidrocloreto de arginina a 75 mM. Dois valores de pH, i.e., pH 4,8 e 5,1, foram avaliados a cada uma das concentrações de proteína testadas: 15, 60, 120 e 150 mg/mL.
[0200] Um total de 8 formulações (Formulações 8-15; descritas na TABELA 4A) foi avaliado em este estudo. Para se
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109/151 prepararem estas formulações, duas alíquotas de denosumab a 70 mg/mL em acetato a pH 5,2 foram dialisadas contra o respectivo tampão DF descrito na TABELA 4A. Ambos os cenários de diálise #1 e #2 sofreram um total de 3 mudanças de tampões para se alcançar uma diluição de 1 milhão de vezes da formulação prévia para assegurar troca de tampões completa. Pós-diálise, alíquotas de cada cenário de diálise #1 e #2 descrito na TABELA 4A foram removidas para se preparar o passo de diluição para as Formulações 8, 9, 12 e 13. O material restante foi depois sobreconcentrado usando centrífuga-concentrador, seguido por uma diluição até às concentrações de denosumab correspondentes listadas na TABELA 4A e a adição de PS20 até uma concentração final de 0,01%.
TABELA 4A
# da F Formulação Fina 1 Estimada* Composição do Tampão DF Cenário de Diá lise
8 Denosumab a 15 mg/mL/Acetato/A rginina/Sorbito l/PS20/pH 4,8 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), Arginina- HC1 a 75 mM, pH 4,8 1
9 Denosumab a 60 mg/mL/Acetato/A rginina/Sorbito l/PS20/pH 4,8 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), Arginina- HC1 a 75 mM, pH 4,8
10 Denosumab a 120 mg/mL/Acetato/ Acetato a 10 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), Arginina- HC1 a 75 mM, pH 4,8
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110/151
Arginina/Sorbit ol/PS20/pH 4,8
11 Denosumab a 150 mg/mL/Acetato/ Arginina/Sorbit ol/PS20/pH 4,8 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), Arginina- HC1 a 75 mM, pH 4,8
12 Denosumab a 15 mg/mL/Acetato/A rginina/Sorbito l/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), Arginina- HC1 a 75 mM, pH 5,1 2
13 Denosumab a 60 mg/mL/Acetato/A rginina/Sorbito l/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), Arginina- HC1 a 75 mM, pH 5,1
14 Denosumab a 120 mg/mL/Acetato/ Arginina/Sorbit ol/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), Arginina- HC1 a 75 mM, pH 5,1
15 Denosumab a 150 mg/mL/Acetato/ Arginina/Sorbit ol/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), Arginina- HC1 a 75 mM, pH 5,1
*As formulações finais compreenderam PS20 a uma concentração final de 0,01% (p/v) e tinham o pH indicado. A concentração estimada de acetato foi 10 mM, as Concentrações de sorbitol são estimadas a -8,5% mais baixas do que a concentração de sorbitol do tampão DF. As concentrações de arginina são
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111/151 estimadas a 65 mM. As concentrações de sorbitol estimadas a
2,2 % (p/v) .
[0201]
As formulações foram cheias em recipientes a um volume de enchimento de 1 mL e armazenada a uma temperatura de 37 °C durante até 1 mês. 0 inibidor da agregação, e estabilidade contra a inibição da agregação ao longo do tempo, como baseado na formação de HMWS e espécies de dímero, foi avaliado usando SE-UHPLC. Os perfis de inibição da agregação destas formulações foram comparados às condições iniciais e durante e após o período de armazenamento.
[0202] A FIGURA 6 representa um gráfico da percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função do tempo de armazenamento a 37 °C para cada formulação e a TABELA 4B proporciona os pontos de dados para o gráfico.
TABELA 4B
Percentagem de HMWS
Formulação mg/mL/Acetato/Arginina/Sorbitol/PS2
0, 4 semana semana
0, 4
0, 5
0/pH 4,8 mg/mL/Acetato/Arginina/Sorbitol/PS2
0, 4
0, 8
1, 1
0/pH 4,8
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112/151
120
10 mg/mL/Acetato/Arginina/Sorbitol/PS2 0/pH 4,8 150 0, 5 1, 4 1, 9
11 mg/mL/Acetato/Arginina/Sorbitol/PS2 0/pH 4,8 15 0, 6 1, 7 2,4
12 mg/mL/Acetato/Arginina/Sorbitol/PS2 0/pH 5,1 60 0, 4 0, 3 0, 4
13 mg/mL/Acetato/Arginina/Sorbitol/PS2 0/pH 5,1 120 0, 5 0, 7 0, 9
14 mg/mL/Acetato/Arginina/Sorbitol/PS2 0/pH 5,1 150 0, 6 1, 2 1, 5
15 mg/mL/Acetato/Arginina/Sorbitol/PS2 0, 7 1, 3 1, 7
Ο/pH 5,1
[0203] As Figuras 7A e 7B mostram cromatogramas de exclusão por tamanho em função da formulação após armazenamento a 37 °C durante 1 mês. Como mostrado na Figura 6, a % de HMWS aumentou à medida que a concentração de proteína diminuía. As Formulações 8-11 a pH 4,8 tiveram consistentemente níveis mais elevados de HMWS em comparação com as formulações correspondentes a pH 5,1 (Formulações 12-15) . O aumento na % de HMWS a pH 4,8 é devido a pico de agregados grandes mostrado na Figura 7A (topo) a cerca de 5,75 minutos. Embora a % de HMWS
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113/151 ao pH de solução 5,1 tivesse espécies de dímero crescentes à medida que a concentração de proteína aumentava, as HMWS totais eram mais baixas do que as concentrações de proteína correspondente ao pH de solução 4,8 (Figura 7B (fundo)).
[0204] A diferença nos níveis de HMWS a pH 5,1 vs. pH 4,8 se tornou maior à medida que a concentração de denosumab aumentava, com a diferença sendo maior a concentrações mais elevadas de denosumab.
EXEMPLO 5
[0205] As formulações com várias concentrações de arginina, NAR e dois dipeptídeos consistindo em arginina-arginina (ArgArg) e arginina-fenilalanina (Arg-Phe) foram avaliadas quanto aos efeitos estabilizantes em soluções tendo uma concentração de denosumab de 120 mg/mL.
[0206] As formulações testadas sao descritas na TABELA 5 em baixo. Todos os valores de acetato e excipiente (exceto dipeptídeos) citados são para as concentrações de tampão e excipiente contra o qual o anticorpo é diafiltrado. Cada dipeptídeo foi adicionado à solução pós-troca de tampões até ao nível indicado na tabela. As Formulações R a X foram alcançadas por UF/DF contra o tampão DF listado em baixo. As Formulações Y e Z foram alcançadas por UF/DF, em conjunto em um agrupamento único, contra tampão DF contendo acetato a 10 mM, sorbitol a 3,6%, pH 4,0. Pós-UF/DF, o agrupamento para as formulações Y e Z foi dividido em 2, e os dipeptídeos Arg-Arg ou Arg-Phe foram depois enriquecidos a partir de uma solução de estoque a 1 M contendo sorbitol a 3,6% a pH 5,1. Polissorbato
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114/151 foi adicionado a cada formulação a uma concentração alvo final de 0,01%. O acetato se coconcentra sem arginina, resultando em uma concentração de acetato final de cerca de 25 mM nas formulações S a X. O sorbitol é preferencialmente excluído no processo de concentração, resultando em uma redução de cerca de 7 a 8% (p/v) a partir da concentração inicial.
[0207] As formulações foram cheias em recipientes a um volume de enchimento de 1,0 mL. As formulações são armazenadas a temperaturas de 2 °C a 8 °C durante até 12 meses e 25 °C, 30 °C e 37 °C durante 3 meses. A estabilidade como baseada na formação de HMWS é avaliada usando SE-UHPLC. A estabilidade destas formulações de dipeptídeos após um mês a 37 °C foi comparada com formulações com hidrocloreto de arginina a 37 °C como mostrado na Figura 8.
TABELA 5
Formulação Final Estimada Composição da Formulação DF
R Acetato/Sorbitol a 5%/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 5% (p/v), pH 4,0
S Acetato/Sorbitol a 3,6%/Arg- HC1 a 38 mM/PS20/pH 5,2 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 3, 6% (p/v), L-Arginina HC1 a 38 mM, pH 5,1
T Acetato/Sorbitol a 2,4%/Arg- HC1 a 75 mM/PS20/pH 5,2 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 2, 4% (p/v), L-Arginina HC1 a 75 mM, pH 5,1
u Acetato a 18 mM/Sorbitol a 2,4%/Arg-HCl a 75 mM/PS20/pH 5, 2 Acetato a 18 mM, Sorbitol a 2, 4% (p/v), L-Arginina HC1 a 75 mM, pH 5,1
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115/151
V Acetato/Sorbitol a 1,2%/Arg- HC1 a 113 mM/PS20/pH 5,2 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 1, 2%, L-Arginina HC1 a 113 mM, pH 5,1
w Acetato/Sorbitol a 0%/Arg- HC1 a 150 mM/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, sorbitol a 0% (p/v), L-Arginina HC1 a 15 0 mM, pH 5,1
X Acetato/NAR a 150 mM/Arg-HCl a 75 mM/PS20/pH 5,2 Acetato a 10 mM, L-Arginina HC1 a 75 mM, NAR a 150 mM, pH 5,1
Y Acetato/Sorbitol a 3,6%/Arg- Arg a 38 mM/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 3, 6% (p/v), pH 4,0
z Acetato/Sorbitol a 3,6%/Arg- Phe a 38 mM/PS20/pH 5,2 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 3, 6% (p/v), pH 4,0
[0208] A Figura 8 mostra a percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C. Os resultados mostram que os inibidores da agregação de aminoácidos inibiram a formação de HMWS. O dipeptídeo argininafenilalanina, por exemplo, mostrou uma melhoria significativa, resultando em cerca de 0,3% menos HMWS em comparação com as outras formulações. A ordem de classificação de HMWS mais baixas para mais elevadas foi Z<<V<Y«T»W«X»U<S< R. Como pode ser visto na figura, ambas as formulações contendo dipeptídeos arginina-arginina (Arg-Arg) (formulação Y) e arginina-fenilalanina (Arg-Phe) (formulação Z) reduziram a formação de HMWS em comparação com a formulação de controle não tendo arginina e não tendo dipeptídeos contendo arginina
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116/151 (formulação R). A Formulação Z continha a menor quantidade de HMWS, superior à formulação Y.
EXEMPLO 6
[0209] Este exemplo demonstra a inibição da agregaçao e estabilidade de denosumab em função de diferentes concentrações de arginina e fenilalanina, e uma mistura comparativa de arginina e fenilalanina.
[0210] Como descrito acima foi identificado que os dipeptídeos hidrocloreto de arginina (HC1) e arginina HC1fenilalanina reduziram o nível de partida inicial e taxa de formação de HMWS de denosumab. Em este estudo, as formulações contendo concentrações de arginina HC1, concentrações de fenilalanina e uma combinação de arginina HC1 e fenilalanina foram avaliadas quanto aos efeitos estabilizantes em soluções contendo denosumab a 120 mg/mL.
[0211] As formulações testadas (Formulações 16-20) sao descritas na TABELA 6A em baixo. Para se prepararem estas formulações, uma alíquota de denosumab a 70 mg/mL em acetato, pH 5,2 foi dialisada contra o tampão DF descrito na TABELA 6A, com um total de 3 trocas de tampões para se alcançar uma diluição de 1 milhão de vezes da formulação prévia para assegurar troca de tampões completa. O material foi depois sobreconcentrado usando centrifuga-concentrador, seguido por uma diluição até 120 mg/mL e a adição de polissorbato 20 até uma concentração final de 0,01%. A Formulação 16 foi considerada a formulação de controle.
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117/151
TABELA 6A
Formulação Final Estimada* Composição do Tampão DF
16 Acetato a 23 mM/Sorbitol a 4,6% (p/v) /PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 5% (p/v) , pH 4,0
17 Acetato a 10 mM/Arginina a 65 mM/Sorbitol a 2,2% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, L-Arginina HC1 a 75 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), pH 5,1
18 Acetato a 23 mM/Fenilalanina a 35 mM/Sorbitol a 4% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Fenilalanina a 38 mM, Sorbitol a 4,4% (p/v), pH 4,0
19 Acetato a 23 mM/Fenilalanina a 68 mM/Sorbitol a 3,3% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Fenilalanina a 75 mM, Sorbitol a 3,6% (p/v), pH 4,0
20 Acetato a 10 mM/Arginina a 33 mM/Fenilalanina a 35 mM/Sorbitol a 2,2% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Arginina HC1 a 38 mM, Fenilalanina a 38 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), pH 5,1
*As formulações finais compreenderam denosumab a 120 mg/mL e
PS20 a uma concentração final de 0,01% (p/v) e tinham o pH indicado. As concentrações de sorbitol e fenilalanina são
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118/151 estimadas a 8,5% mais baixas do que a concentração do tampão DF. As concentrações de arginina são estimadas a ~12,5% mais baixas do que a concentração do tampão DF.
[0212] As formulações foram cheias em recipientes a um volume de enchimento de 1,0 mL. As formulações foram armazenadas a 37 °C durante até 1 mês. O inibidor da agregação, e estabilidade contra a inibição da agregação ao longo do tempo, como baseado na formação de HMWS e espécies de dímero, foi avaliado usando SE-UHPLC. Os perfis de inibição da agregação destas formulações foram comparados às condições iniciais e durante e após o período de armazenamento.
[0213] A Figura 9 mostra a percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C. A Figura 10 mostra cromatogramas de exclusão por tamanho em função da formulação após armazenamento a 37 °C durante 1 mês. A TABELA 6B em baixo mostra a percentagem de HMWS monitorizada por SEUHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C.
TABELA 6B
Formulação Percent 0 agem de t 2 semanas MWS 4 semanas
16 Acetato/Sorbitol/PS20/pH 5, 1 0, 9 1, 5 2,0
17 Acetato/Arginina a 75 mM/Sorbitol/PS20/pH 5,1 0, 7 1, 1 1, 5
18 Acetato/Fenilalanina a 38 mM/Sorbitol/PS20/pH 5,1 0, 5 0, 9 1, 3
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119/151
19 Acetato/Fenilalanine mM/Sorbitol/PS20/pH a 5, 1 75 0, 5 0, 8 1, 2
20 Acetato/Arginina a 38
mM/Fenilalanina a 38
mM/Sorbitol/PS20/pH 5, 1 0, 7 1, 0 1, 4
[0214] Todas as formulações compreendendo um inibidor da agregação de aminoácidos, arginina ou fenilalanina (Formulações 17-20), foram superiores à formulação de controle de sorbitol não tendo qualquer inibidor da agregação de aminoácidos (Formulação 16) . Todas as formulações contendo fenilalanina (Formulações 18, 19 e 20) continham similarmente baixos níveis de HMWS, em comparação com ambas as formulações de controle e arginina HC1 (Formulações 16 e 17, respectivamente) (Figura 9) . A taxa de formação de HMWS foi similar ao longo das formulações contendo arginina HC1 e fenilalanina (Formulações 17-19), como mostrado na Figura 9. A formulação de combinação compreendendo tanto arginina a 38 mM e fenilalanina a 38 mM (76 nM totais, Formulação 20) demonstrou uma estabilidade melhor do que a formulação de arginina a 75 mM (Formulação 17) (Figura 9), mas não melhor do que a formulação de fenilalanina a 75 mM (formulação 19) (Figura 9).
EXEMPLO 7
[0215] Este exemplo demonstra a inibição da agregaçao e estabilidade de denosumab em função de diferentes concentrações de fenilalanina.
[0216] Em estudos prévios foi identificado que os dipeptideos hidrocloreto de arginina e hidrocloreto de
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120/151 arginina-fenilalanina minimizaram o nível de partida inicial e taxa de formação de HMWS de denosumab. As formulações contendo hidrocloreto de arginina, várias concentrações de fenilalanina e uma combinação de hidrocloreto de arginina e fenilalanina foram avaliadas quanto aos efeitos estabilizantes em soluções contendo denosumab a 120 mg/mL.
[0217] As formulações testadas são descritas na Tabela 7A em baixo. Para se prepararem as amostras A-E, uma alíquota de denosumab a 70 mg/mL em acetato, pH 5,2 foi dialisada contra os tampões DF descritos em baixo, com um total de 3 trocas de tampões para se alcançar uma diluição de 1 milhão de vezes da formulação prévia para assegurar troca de tampões completa. O material foi depois sobreconcentrado até aproximadamente 130 mg/mL a 150 mg/mL usando centrifuga-concentrador, seguido por uma diluição até 120 mg/mL e a adição de polissorbato 20 até uma concentração final de 0,01%. A Formulação A foi considerada a formulação de controle.
[0218] As formulações foram cheias em recipientes a um volume de enchimento de 1,0 mL. As formulações foram armazenadas a 37 °C durante até 1 mês. A estabilidade como baseada na formação de HMWS foi avaliada usando SE-UHPLC. Os perfis de estabilidade destas formulações foram comparados após um mês a 37 °C com as formulações com sorbitol e hidrocloreto
de arginl Lna/sorbitol a 37 °C como mostrado na Figura 11A.
[0219] Para se prepararem as amostras de teste F - K, uma
alíquota de denosumab a 70 mg/mL em acetato, pH 5, 2 foi
ultrafiltrada/diafiltrada (UF/DF) contra os tampões DF
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121/151 descritos em baixo para um total de 12 diavolumes para assegurar troca de tampões completa. 0 material foi depois sobreconcentrado até aproximadamente 200 mg/mL usando ultrafiltração, seguido por uma diluição até 120 mg/mL e a adição de polissorbato 20 até uma concentração final de 0,01%. A concentração de acetato foi 20 mM em estas formulações. A Formulação F foi considerada a formulação de controle. Todos os valores de acetato e excipiente citados são para as concentrações de tampão e excipiente contra o qual o anticorpo é dialisado.
[0220] As formulações foram cheias em recipientes a um volume de enchimento de 1,0 mL. As formulações foram armazenadas a 40 °C durante até 1 mês. A estabilidade como baseada na formação de HMWS foi avaliada usando SE-UHPLC. Os perfis de estabilidade destas formulações foram comparados após um mês a 40 °C com as formulações com sorbitol e hidrocloreto de arginina/sorbitol a 40 °C como mostrado na Figura 11B.
TABELA 7A
# da F Formulação Final Estimada Composição do Tampão DF*
A Acetato a 23 mM/Sorbitol a 4,6% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 5% (p/v) , pH 4, 0
B Acetato a 10 mM/Arginina a 65 mM/Sorbitol a 2,2% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, L-Arginina HC1 a 75 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), pH 5,1
C Acetato a 23 mM/Fenilalanina a 35 mM/Sorbitol a 4,0% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Fenilalanina a 38 mM, Sorbitol a 4,4% (p/v), pH 4, 0
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122/151
D Acetato a 23 mM/Fenilalanina a 69 mM/Sorbitol a 3,3% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Fenilalanina a 75 mM, Sorbitol a 3,6% (p/v), pH 5,1
E Acetato a 10 mM/Arginina a 33 mM/Fenilalanina a 35 mM/Sorbitol a 2,2% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Arginina HC1 a 38 mM, Fenilalanina a 38 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), pH 5,1
F Acetato a 23 mM/Sorbitol a 4,3% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 20 mM, Sorbitol a 4,7% (p/v), pH 4,0
G Acetato a 23 mM/Fenilalanina a 4,6 mM/Sorbitol a 4,3% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 20 mM, Fenilalanina a 5 mM, Sorbitol a 4,7% (p/v), pH 4, 0
H Acetato a 23 mM/Fenilalanina a 9 mM/Sorbitol a 4,3% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 20 mM, Fenilalanina a 10 mM, Sorbitol a 4,7% (p/v), pH 4, 0
I Acetato a 23 mM/Fenilalanina a 18 mM/Sorbitol a 4,3% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 20 mM, Fenilalanina a 20 mM, Sorbitol a 4,7% (p/v), pH 4, 0
J Acetato a 32 mM/Fenilalanina a 37 mM/Sorbitol a 4,3% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 20 mM, Fenilalanina a 40 mM, Sorbitol a 4,7% (p/v), pH 4, 0
K Acetato a 32 mM/Fenilalanina a 55 mM/Sorbitol a 4,3% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 20 mM, Fenilalanina a 60 mM, Sorbitol a 4,7% (p/v), pH 4, 0
*As concentrações finais compreenderam denosumab a 120 mg/mL e
PS20 a uma concentração final de 0,01% (p/v) e tinham o pH indicado. As concentrações de sorbitol e fenilalanina são
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123/151 estimadas a 8,5% mais baixas do que a concentração do tampão DF. As concentrações de arginina são estimadas a ~12,5% mais baixas do que a concentração do tampão DF.
[0221] A Figura 11A e Tabela 7B mostram a percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C. A Figura 11B e Tabela 7C mostram a percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 40 °C. As Figuras 12A e 12B mostram cromatogramas de exclusão por tamanho em função da formulação após armazenamento a 37 °C e 40 °C durante 1 mês, respectivamente.
TABELA 7B
Percentagem de HMWS
Formulação 0 2 4
semana s semanas
A Acetato/Sorbitol/PS20/pH 5, 1 0, 9 1, 5 2,0
B Acetato/Arginina a 75
mM/Sorbitol/PS20/pH 5, 1 0,7 1, 1 1, 5
C Acetato/Fenilalanina a 38
mM/Sorbitol/PS20/pH 5, 1 0,5 0, 9 1, 3
D Acetato/Fenilalanina a 75
mM/Sorbitol/PS20/pH 5, 1 0,5 0, 8 1, 2
E Acetato/Arginina a 38
mM/Fenilalanina a 38
mM/Sorbitol/PS20/pH 5, 1 0,7 1, 0 1, 4
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124/151
TABELA 7C
Formulação Percentagem de HMWS 4 semana s
0 2 semana s
F Acetato a mM/Sorbitol/PS20/pH 5,1 20 0, 67 1, 44 1, 96
G Acetato a 20 mM/Fenilalanina 5 mM/Sorbitol/PS20/pH 5,1 a 0, 64 1, 34 1, 74
H Acetato a 20 mM/Fenilalanina 10 mM/Sorbitol/PS20/pH 5,1 a 0, 60 1,26 1, 68
I Acetato a 20 mM/Fenilalanina 20 mM/Sorbitol/PS20/pH 5,1 a 0, 53 1, 12 1, 51
J Acetato a 20 mM/Fenilalanina 40 mM/Sorbitol/PS20/pH 5,1 a 0, 48 1, 02 1, 37
K Acetato a 20 mM/Fenilalanina 60 mM/Sorbitol/PS20/pH 5,1 a 0, 44 0, 96 1, 28
[0222] Todas as formulações com fenilalanina (Formulações C, D, E, G - K) , continham níveis mais baixos de HMWS em comparação com ambas as formulações com sorbitol e hidrocloreto de arginina/sorbitol (Formulações A e B, respectivamente). A formação de combinação de hidrocloreto de arginina e fenilalanina teve estabilidade similar em comparação com a formulação de arginina/sorbitol (Formulação B) . Todas as formulações foram superiores à formulação de controle de sorbitol (Formulações A e F).
EXEMPLO 8
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125/151
[0223] Este exemplo demonstra uma avaliaçao de diferentes inibidores da agregação de aminoácidos.
[0224] Uma avaliaçao de diferentes inibidores da agregaçao de aminoácidos foi conduzida por preparação de oito formulações com um aminoácido hidrofóbico, aromático ou polar/carregado para se determinar o seu efeito na minimização da quantidade (%) de HMWS em uma formulação de denosumab líquida de elevada concentração (120 mg/mL) e formação de HMWS ao longo do tempo. A formulação incluiu um de outro L-aminoácidos e uma quantidade reduzida de sorbitol, em relação a uma formulação de controle não contendo qualquer inibidor da agregação de aminoácidos e uma quantidade mais elevada de sorbitol para a isotonicidade (Formulação 26) .
[0225] Os inibidores da agregação de aminoácidos testados foram agrupados em um de três grupos (Grupos I-III) e continham a quantidade do inibidor da agregação de aminoácidos, como se segue:
I. Aminoácidos aromáticos:
(a) Fenilalanina a 38 mM (Formulação 27);
(b) Triptofano a 38 mM (Formulação 28);
II. Aminoácidos polares/carregados:
(a) Arginina HC1 a 75 mM (Formulação 29);
(b) Lisina a 75 mM (Formulação 30);
(c) Histidina a 75 mM (Formulação 31);
III. Aminoácidos hidrofóbicos:
(a) Leucina a 38 mM (Formulação 32);
(b) Isoleucina a 38 mM (Formulação 33);
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126/151 (c) Valina a 38 mM (Formulação 34);
[0226] Para se prepararem as Formulações 26-34, uma alíquota de denosumab a 70 mg/mL em acetato, pH 5,2 foi dialisada contra tampão DF descrito na TABELA 8A, com um total de 3 trocas de tampões para se alcançar uma diluição de 1 milhão de vezes da formulação prévia para assegurar troca de tampões completa. A diálise da formulação com Histidina F usou um tampão com um pH inicial de 4,0 e foi previsto que o pH se mudaria para o pH alvo de 5,1 após concentração de proteína devido ao efeito de Donnan e à coconcentração de acetato. No entanto, o pH não se mudou para o pH alvo de 5,1 após a proteína ter sido concentrada até 120 mg/mL, mas permaneceu a pH 4,0. Para levar o pH da formulação com histidina até pH 5,1, a titulação com NaOH diluído (0,1 N) foi requerida. As formulações restantes foram sobreconcentradas usando unidades de centrífuga-concentrador, seguido por uma diluição até 124128 mg/mL e a adição de polissorbato 20 até uma concentração final de 0,01% (p/v).
TABELA 8A
# da F Formulação Final Estimada Composição do Tampão de Diálise*
26 (A) Acetato a 23 mM/Sorbitol a 4,6% (p/v)/PS20/pH 5,1 (controle) Acetato a 10 mM, Sorbitol a 5% (p/v), Polissorbato 20 a 0,01% (p/v), pH 4, 0
27 (B) Acetato a 23 mM/Fenilalanina a 35 mM/Sorbitol a 4% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Fenilalanina a 38 mM, Sorbitol a 4,4% (p/v), pH 4, 0
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127/151
# da F Formulação Final Estimada Composição do Tampão de Diálise*
28 (C) Acetato a 23 mM/Triptofano/Sorbitol a 4% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Triptofano a 38 mM, Sorbitol a 4,4% (p/v), pH 4,0
29 (D) Acetato a 10 mM/Arginina a 66 mM/Sorbitol a 2,2% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Arginina HC1 a 75 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), pH 5,1
30 (E) Acetato a 10 mM/Lisina a 66 mM/Sorbitol a 2,2% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Lisina HC1 a 75 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), pH 5,1
31 (F) Acetato a 10 mM/Histidina/Sorbitol a 2,2% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Histidina a 75 mM, Sorbitol a 2,4% (p/v), pH 4,0
32 (G) Acetato a 23 mM/Leucina/Sorbitol a 4% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Leucina a 38 mM, Sorbitol a 4,4% (p/v), pH 4,0
33 (H) Acetato a 23 mM/Isoleucina/Sorbitol a 4% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Isoleucina a 38 mM, Sorbitol a 4,4% (p/v), pH 4,0
34 (I) Acetato a 23 mM/Valina/Sorbitol a 4% (p/v)/PS20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Valina a 38 mM, Sorbitol a 4,4% (p/v), pH 4,0
*As formulações finais compreenderam denosumab a 120 mg/mL e PS20 a uma concentração final de 0,01% (p/v) e tinham o pH indicado. As concentrações de sorbitol e fenilalanina são estimadas a -8,5% mais baixas do que a concentração de sorbitol do tampão DF. As concentrações de arginina são estimadas a
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128/151 ~12,5% mais baixas do que a concentração de Arginina do tampão DF. As letras entre () aparecendo após # da F correspondem às Figuras 13-18.
[0227] As formulações foram cheias em recipientes a um volume de enchimento de 1,0 mL. As formulações foram armazenadas a 37 °C durante até 4 semanas. O inibidor da agregação, e estabilidade contra a inibição da agregação ao longo do tempo, como baseado na formação de HMWS e espécies de dimero, foi avaliado usando SE-UHPLC. Os perfis de inibição da agregação destas formulações foram comparados às condições iniciais e durante e após o período de armazenamento.
[0228] As Figuras 13-15 representam gráficos da percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função do tempo de armazenamento a 37 °C para cada formulação e a Tabela 8B proporciona os pontos de dados para os gráficos. As Figuras 16-18 mostram as sobreposições cromatográficas das formulações listadas na Tabela 8A após armazenamento a 37 °C durante 1 mês. As Figuras 13 e 16 se relacionam com formulações compreendendo aminoácidos aromáticos, as Figuras 14 e 17 se relacionam com formulações compreendendo aminoácidos polares/carregados e as Figuras 15 e 18 se relacionam com formulações compreendendo aminoácidos hidrofóbicos.
TABELA 8B
Percentagem de HMWS
Aumento
Formulação
024 0-4
Semanas semanas semanas semanas
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129/151
AMINOÁCIDOS AROMÁTICOS (Figura 13)
Acetato/Sorbitol/PS20/pH
0,9 1,9 2,31,4
5,1 (controle)
Acetato/Fenilalanina/Sorbi
0, 5 0, 9 1, 20,7 tol/PS20/pH 5,1 (controle)
Acetato/Triptofano/Sorbito
0, 5 0, 7 0, 90,4 l/PS20/pH 5,1
AMINOÁCIDOS
POLARES/CARREGADOS (Figura 14)
Acetato/Sorbitol/PS20/pH
0,9 1,9 2,31,4
5,1 (controle)
Acetato/Arginina/Sorbitol/
0,5 1,1 1,51,0
PS20/pH 5,1 (controle)
Acetato/Lisina/Sorbitol/PS
0,6 1,2 1,61,0
20/pH 5,1
Acetato/Histidina/Sorbitol
1,7 2,1 2,71,0 /PS20/pH 5,1
AMINOÁCIDOS HIDROFÓBICOS (Figura 15)
Acetato/Sorbitol/PS20/pH
0,9 1,9 2,3 1,4
5,1 (controle)
Acetato/Fenilalanina/Sorbi
0, 5 0, 9 1, 2 0,7 tol/PS20/pH 5,1 (controle)
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130/151
Acetato/Leucina/Sorbitol/P
0,5 1,1 1,40,9
S20/pH 5,1
Acetato/Isoleucina/Sorbito
0,5 1,1 1,30,8 l/PS20/pH 5,1
Acetato/Valina/Sorbitol/PS
0,5 1,0 1,30,8
20/pH 5,1 # da F é proporcionado na coluna à esquerda e corresponde ao # da F da Tabela 8A.
[0229] Como mostrado nas Figuras 13-15, todas as formulações contendo um inibidor da agregação de aminoácidos (Formulações 27-34) demonstraram alguma melhoria na estabilidade, em relação à formulação com acetato/sorbitol (Formulação 26) . As formulações contendo um aminoácido aromático (Formulações 27 e 28) mostraram a maior redução na % de HMWS. A formulação contendo fenilalanina (Formulação 27) demonstrou também uma grande redução nas HMWS, e a formulação contendo triptofano mostrou a maior redução, em relação ao controle (Formulação 26). Das formulações de denosumab contendo um aminoácidos polares/carregados (Formulações 29-31) mostraram geralmente maiores quantidades de agregados de ordem maiores (Figura 17) em comparação com outras formulações tendo estabilizantes de aminoácidos (Figuras 16 e 18), e esta formulação com histidina específica mostrou quantidades maiores de HWMS globalmente em comparação com a formulação com acetato/sorbitol (Formulação 26) (Figura 14). Os resultados da formulação com histidina poderíam estar enviesados a partir do processo de diálise, duração mais longa gasta a pH 4,0 e da
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131/151 titulação da formulação com NaOH diluído. As formulações contendo um aminoácido hidrofóbico (Formulações 32-34) demonstraram todas uma melhoria consistente na formação de HMWS .
EXEMPLO 9
[0230] Este exemplo demonstra um mecanismo de açao possível de arginina e fenilalanina na estabilização de denosumab. A espectrometria de massa com permuta de deutérios de hidrogênio (HDX-MS) é uma tecnologia sensível e robusta para caracterizar a interação proteína-proteína/ligando/excipiente. 0 método detecta mudanças na ligação de hidrogênio de amida do esqueleto devido à interação com o excipiente.
[0231] A espectrometria de massa com permuta de deutérios de hidrogênio (HDX-MS) foi levada a cabo com denosumab (à concentração de 3 mg/mL) em tampão de acetato a 10 mM (pH 5,2) (A52) na presença de L-arginina (Formulação 35), Lfenilalanina (Formulação 36) ou L-glicina (Formulação 37) e comparação com uma formulação de denosumab não tendo quaisquer inibidores da agregação de aminoácidos (Formulação 38) . As experiências foram levadas a cabo a 4 °C (com concentração a 75 mM de L-arginina, L-fenilalanina ou L-glicina) e 37 °C (com concentração a 150 mM de L-arginina, L-fenilalanina ou Lglicina) . Após análise de mais do que 530 peptídeos, um pequeno número de regiões com mudança conformacional significativa foi identificado. Alguns peptídeos representativos destas regiões são capturados nas Figuras 19-30.
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[0232] As Figuras 19-24 sao gráficos da % de incorporação de deutério a 4 ° C em função do tempo (log (seg) ) para os aminoácidos da Cadeia Leve 28-33 (Figura 19), aminoácidos da Cadeia Leve 108-116 (Figura 20), Aminoácidos da Cadeia Leve 125-132 (Figura 21), Aminoácidos da Cadeia Pesada 47-59 (Figura 22), aminoácidos da Cadeia Pesada 243-253 (Figura 23) e aminoácidos da Cadeia Pesada 392-399 (Figura 24) para cada uma das Formulações 35-38.
[0233] As Figuras 25-30 sao gráficos da % de incorporação de deutério a 37 ° C em função do tempo (log (seg)) para os aminoácidos da Cadeia Leve 28-33 (Figura 25), aminoácidos da Cadeia Leve 108-117 (Figura 26), Aminoácidos da Cadeia Leve 124-131 (Figura 27), Aminoácidos da Cadeia Pesada 47-59 (Figura 28), aminoácidos da Cadeia Pesada 242-253 (Figura 29) e aminoácidos da Cadeia Pesada 392-399 (Figura 30) para cada uma das Formulações 35-38.
[0234] Estes dados apoiam que Arg e Gly têm um efeito de interação similar em denosumab, embora Arg tenha tudo uma pega de HDX ligeiramente mais forte (mudanças conformacionais) em denosumab: forte estabilização na região 28-33 de LC de Fab; estabilização sutil em 108-132 de LC e 47-59 de HC de Fab, regiões 392-399 de HC de CH3 de Fc; e desestabilização sutil na região 243-253 de CH2 de Fc. Sem desejar estar limitado por qualquer teoria particular é concebido que o efeito de hidrocloreto de arginina é devido à exclusão preferencial da superfície de denosumab e interações superficiais fracas, enquanto a glicina funciona por exclusão preferencial.
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133/151
[0235] No entanto, a fenilalanina nao mostrou perturbação estrutural significativa em denosumab. Sem desejar estar limitado por qualquer teoria particular é concebido que o efeito estabilizante de fenilalanina podería ser através de um ou mais dos seguintes mecanismos: interações de cadeias laterais porque não existe efeito no esqueleto do peptídeo (nenhuma pegada de HDX); e/ou interação de cátions pi com cadeias laterais de arginina/lisina sem afetar a rede de ligações de hidrogênio do esqueleto.
EXEMPLO 10
[0236] Este exemplo demonstra um mecanismo de açao possível de fenilalanina estabilizando denosumab.
[0237] Para se estudar o efeito específico de Phe em denosumab, uma simulação de dinâmica molecular foi realizada. Especificamente, o domínio Fab de denosumab foi solvatado em uma caixa de simulação com Phe em excesso e duas simulações de 10 ns foram conduzidas. Coletivamente, os resíduos de Phe ligados ao Fab durante mais do que 90% do tempo foram selecionados para análise adicional. Nove tais casos foram identificados. Em 5 das 9 observações de residência com tempo longo, o resíduo de Phe foi ligado à interface das regiões VH/VL (pesada variável/leve variável) e CH/CL (pesada constante/leve constante). Em um exemplo se acreditou que a cadeia lateral de Phe interagiu com as cadeias laterais de resíduos hidrofóbicos (p.ex., V93, Y95 e W112 da cadeia pesada e A44 e P45 da cadeia leve), na interface de VH/VL. Em outro exemplo se acreditou que o anel de cadeia lateral de Phe
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134/151 interagiu com os grupos NHa+ e C00(_) de resíduos (p.ex., T165 da cadeia leve e G171, V172, e T174 da cadeia pesada) na interface de CHI e CL. Sem desejar estar limitado a qualquer teoria particular, esta observação levou à ideia de que o efeito específico de Phe na mitigação da agregação de denosumab é devido à interação do grupo fenila com resíduos hidrofóbicos (p.ex., R30, G31, R32 e Y33 de CDR1 da cadeia leve, A52 de CDR2 da cadeia leve e M106 de CDR3 da cadeia pesada) formando a interface das cadeias constante pesada 1 (Hc) e constante leve (Lc) . É colocada a hipótese de que esta interação substituiu uma superfície previamente hidrofóbica por uma superfície relativamente mais carregada (consequentemente hidrofílica) dos grupos NH3(+) e C00(_) do excipiente de Phe.
EXEMPLO 11
[0238] Foi conduzida uma avaliaçao de estabilidade de múltiplos construtos de anticorpos anti-RANKL (de isótipos IgGl, IgG2 e IgG4). Como descrito acima, tanto a arginina HC1 como fenilalanina minimizam as HMWS iniciais, e os níveis de HWMS ao longo do tempo, em comparação com a formulação de controle com acetato/sorbitol de denosumab (que é uma imunoglobulina IgG2) . Esta avaliação foi levada a cabo para comparar o potencial de Arg-HCl e Phe de reduzir as HMWS em formulações contendo diferentes construtos de anticorpos antiRANKL. Os construtos de IgGl e IgG4 testados em este estudo continham as mesmas regiões determinantes da complementaridade (CDR) em comparação com denosumab, mas continham molde de domínios constantes diferente. Os diferentes construtos de IgG2
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135/151 testados em este estudo tinham CDRs diferentes em relaçao a denosumab, mas continham o mesmo molde de domínios constantes. [0239] Cada construto de anticorpo testado foi purificado e concentrado de 8 mg/mL a 70 mg/mL usando concentração em centrífuga. Cada volume concentrado foi dividido em três alíquotas e depois dialisado contra um tampão de acetato formulado com sorbitol, sorbitol/fenilalanina e sorbitol/hidrocloreto de arginina para se prepararem as Formulações 39-47, como descrito na TABELA 9. As amostras pósdiálise foram sobreconcentradas até mais do que 120 mg/mL com concentração em centrífuga. A proteína de anticorpo foi diluída até 120 mg/mL com o respectivo tampão.
TABELA 9
# da F Formulação Final Estimada Composição do Tampão DF
39 Acetato a 23 mM/Sorbitol a 4,6% (p/v)/PS20/pH 5,1-IgGl Acetato a 10 mM, Sorbitol a 5% (p/v), pH 4,0
40 Acetato a 10 mM/Arginina a 66 mM/Sorbitol a 3,3% (p/v)/PS20/pH 5,1-IgGl Acetato a 10 mM, Sorbitol a 3,6% (p/v), Arginina HC1 a 75 mM, pH 5,1
41 Acetato a 23 mM/Fenilalanina a 35 mM/Sorbitol a 3% (p/v)/PS20/pH 5,1-IgGl Acetato a 10 mM, Sorbitol a 3,3% (p/v), Fenilalanina a 38 mM, pH 4,0
42 Acetato a 23 mM/Sorbitol a 4,6% (p/v)/PS20/pH 5,l-IgG2 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 5% (p/v), pH 4,0
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# da F Formulação Final Estimada Composição do Tampão DF
43 Acetato a 10 mM/Arginina a 66 mM/Sorbitol a 3,3% (p/v)/PS20/pH 5,l-IgG2 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 3,6% (p/v), Arginina HC1 a 75 mM, pH 5,1
44 Acetato a 23 mM/Fenilalanina a 35 mM/Sorbitol a 3% (p/v)/PS20/pH 5,l-IgG2 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 3,3% (p/v), Fenilalanina a 38 mM, pH 4,0
45 Acetato a 23 mM/Sorbitol a 4,6% (p/v)/PS20/pH 5,l-IgG4 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 5% (p/v), pH 4,0
46 Acetato a 10 mM/Arginina a 66 mM/Sorbitol a 3,3% (p/v)/PS20/pH 5,l-IgG4 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 3,6% (p/v), Arginina HC1 a 75 mM, pH 5,1
47 Acetato a 23 mM/Fenilalanina a 35 mM/Sorbitol a 3% (p/v)/PS20/pH 5,l-IgG4 Acetato a 10 mM, Sorbitol a 3,3% (p/v), Fenilalanina a 38 mM, pH 4,0
*As formulações finais compreenderam PS20 a uma concentração final de 0,01% (p/v) e tinham o pH indicado. As concentrações de sorbitol e fenilalanina são estimadas a ~8,5% mais baixas do que a concentração do tampão DF. As concentrações de arginina são estimadas a ~12,5% mais baixas do que a concentração do tampão DF.
[0240] As formulações foram cheias em recipientes de frasco de vidro a um volume de enchimento de 1,0 mL. As formulações foram armazenadas a 37 °C durante até 1 mês. O inibidor da agregação, e estabilidade contra a inibição da agregação ao longo do tempo, como baseado na formação de HMWS, foi avaliado usando SE-UHPLC. Os perfis de inibição da agregação destas
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137/151 formulações foram comparados às condições iniciais e após o período de armazenamento. A estabilidade destas formulações após armazenamento foi comparada dentro da classe de imunoglobulinas.
[0241] As Figuras 31, 33 e 35 (e TABELAS relacionadas 10, 12 e 14 em baixo) mostram a percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C com imunoglobulinas G (IgGl, IgG2 e IgG4, respectivamente). As Figuras 32, 34 e 36 (e TABELAS relacionadas 11, 13 e 15 em baixo) mostram a percentagem de Espécies de Baixo Peso Molecular (LMWS, p.ex., fragmentação de proteínas) como monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 37 °C com imunoglobulinas G (IgGl, IgG2 e IgG4, respectivamente). As Figuras 37, 38 e 39 mostram sobreposições de cromatogramas de exclusão por tamanho em função da formulação após armazenamento a 37 C durante t = 4 w.
TABELA 10: % de HMW, comparação de IgGl (A, B, C) a 37 C durante 4 semanas
Percentagem de HMWS
Formulação 2 4 semanas semanas
39 Acetato/Sorbitol/PS20/pH 5,1-IgGl 0,3 0, 7 0, 9
Acetato/Arginina/Sorbitol/PS20/pH 5,1- 0,3 0, 8 1, 0
40 IgGl
Acetato/Fenilalanina/Sorbitol/PS20/pH 0,3 0, 6 0, 7
41 5,1-IgGl
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TABELA 11: % de LMWS, comparação de IgGl (A, B, C) a 37 C durante 4 semanas
Percentagem de LMWS
Formulação 24 semanas semanas
Acetato/Sorbitol/PS20/pH 5,1-IgGl 1,2 2,43,1
Acetato/Arginina/Sorbitol/PS20/pH 5,1-IgGl 1,2 2,84,3
Acetato/Fenilalanina/Sorbitol/PS20/pH 5, 11,2 2,13,0
IgGl
TABELA 12: % de HMW, comparaçao de IgG2 (D, E, F) a 37 C durante semanas
Percentagem de HMWS
Formulação 24 semanas semanas
Acetato/Sorbitol/PS20/pH 5,l-IgG2 0,4 1,72,0
Acetato/Arginina/Sorbitol/PS20/pH
0, 4 2,83,1
5,l-IgG2
Acetato/Fenilalanina/Sorbitol/PS2
0,3 1,82,4
0/pH 5,l-IgG2
TABELA 13: % de LMWS, comparação de IgG2 (D, E, F) a 37 C durante 4 semanas
Percentagem de LMWS
Formulação
2 semanas 4 semanas
Acetato/Sorbitol/PS20/pH 5,l-IgG2 0,7 4,0 7,8
Acetato/Arginina/Sorbitol/PS20/pH
0,8 8,2 16,2
5,l-IgG2
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Acetato/Fenilalanina/Sorbitol/PS20/p
44 H 5,l-IgG2 0,7 3,1 6,2
TABELA 14: % de HMW, comparação de IgG4 (G, Η, I) a 37 C durante
4 semanas
Percentagem de HMWS
Formulação 2 4
0 semanas semanas
45 Acetato/Sorbitol/PS20/pH 5,l-IgG4 0,6 1,1 1, 3
Acetato/Arginina/Sorbitol/PS20/pH 0,7 1,1 1, 6
5,l-IgG4
Acetato/Fenilalanina/Sorbitol/PS20/pH
47 5,l-IgG4 0, 6 1, 0 1, 3
TABELA 15: % de LMWS, comparação de IgG4 (G, Η, I) a 37 C
durante 4 semanas***
Percentagem de LMWS
Formulação 2 4
0 semanas semanas
45 Acetato/Sorbitol/PS20/pH 5,l-IgG4 0, 7 1,6 1, 9
Acetato/Arginina/Sorbitol/PS20/pH 5, Ι- Ο, 8 1,6 2, 1
IgG4
Acetato/Fenilalanina/Sorbitol/PS20/pH
0,7 1,4 1, 8
47) 5,l-IgG4
[0242] Como mostrado nas Figuras 31 e 32, a molécula de IgGl, que tem uma região CDR similar a amostras de denosumab prévias, mostrou uma redução de aproximadamente 0,2% em HMWS com a adição de fenilalanina em comparação com a formulação de controle com acetato/sorbitol. As amostras de IgG2 que têm uma
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CDR diferente e são ilustradas nas Figuras 33 e 34 mostraram um aumento nas HMWS na formulação com acetato/fenilalanina/sorbitol em comparação com a formulação com acetato/sorbitol de controle. As formulações com acetato/sorbitol e acetato/fenilalanina/sorbitol tiveram estabilidade similar para o tipo de amostras IgG4 com a acetato/sorbitol/arginina tendo maior formação de HMWS como mostrado nas Figuras 35 e 36. Em todos os casos com os tipos de amostras IgGl, IgG2 e IgG4, a formulação contendo acetato/sorbitol/arginina mostraram degradação de HMWS aumentada em comparação com as formulações com acetato/sorbitol (controle) e acetato/fenilalanina/sorbitol.
[0243] Devido ao grande aumento na fragmentaçao de proteína na formulação com acetato/arginina/sorbitol como ilustrado nas Figuras 37 e 38, a relação fragmentação e isoforma de anticorpo foi mostrada nas Figuras 32, 34 e 36. Foi mostrado na literatura que a agregação mediada por fragmentação de anticorpos monoclonais pode resultar para anticorpos armazenados a 37 °C [Perico N. et al. , J. Pharm. Sei. (2009) 98, pgs. 3031 - 3042]. Este mecanismo é possível em esta avaliação pois a fragmentação é maior nas formulações com acetato/arginina/sorbitol. A fragmentação é minimizada na formulação com acetato/fenilalanina/sorbitol levando potencialmente a menos espécies de HMWS. O tipo de amostras IgG4 não tem fragmentação ou agregação acelerada.
[0244] A partir dos dados coletados em este estudo bem como dados prévios dados de modelação molecular coletados com
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141/151 denosumab pode ser estabelecida uma correlação forte entre a sequência de aminoácidos das CDRs e o efeito relativo de redução de HMWS com fenilalanina. Foi observada uma redução nas espécies HMW em denosumab (IgG2) e na variante de IgGl que tinham aminoácidos de CDR idênticos, mas não foi observada redução de HMWS na variante de IgG2 com domínios de CDR diferentes. Parecería que as sequências de aminoácidos contidas dentro dos domínios de CDR são suscetíveis à interação com fenilalanina e subsequente inibição da agregação. A molécula de IgG4 tinha também regiões CDR idênticas em comparação com denosumab, mas foi detectada mudança mínima na agregação ao longo do decurso do estudo. A molécula de IgG4 difere das versões IgGl e IgG2 principalmente pelo seu comprimento de aminoácidos da charneira e sua estrutura funcionalmente ativa. Como as isoformas de anticorpos IgGl e IgG2 têm uma estrutura prolongada que é tipicamente descrita como uma forma em Y, um domínio CHI de Fab de IgG4 interage com o domínio CH2 formando uma estrutura mais compacta [Aalberse R.C. et al., Immunology (2002), 105, pgs. 9-19]. Esta estrutura compacta podería inibir as reações de fragmentação e agregação tipicamente vistas com as modalidades IgGl e IgG2 .
EXEMPLO 12
[0245] Um estudo é conduzido para monitorizar a estabilidade de denosumab formulado como descrito em baixo e em conexão com a Tabela 16 (Formulações 51-55). Os tampões de diafiltração diferem na concentração de acetato e pH inicial para produzirem formulações finais com pH 5,1 à concentração
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142/151 de denosumab de 120 mg/mL. Adicionalmente, o nível de sorbitol é ajustado para se manter a isotonicidade do produto final (~300 mOsm/Kg). 0 denosumab a 70 mg/mL é diafiltrado contra cada tampão para mais do que 7 diavolumes, depois ultrafiltrado até cerca de 180 mg/mL e diluído com o tampão de diafiltração e polissorbato até à concentração de denosumab de 120 mg/mL e polissorbato 20 a 0,01%. A estabilidade é avaliada usando SEUHPLC após armazenamento a 37 °C e mostra que a estabilidade de denosumab em estas formulações é altamente similar. As espécies HMW iniciais diminuem ligeiramente à medida que a concentração inicial de acetato aumenta. Em contraste, as taxas de agregação melhoram ligeiramente em formulações com níveis mais baixos de acetato.
TABELA 16
# da F Tampão DF Formulação Final Estimada* Osmolalidade (mOSm/kG)
51 Acetato a 5 mM, Acetato a 16 mM, 304
Fenilalanina a 40 mM, Fenilalanina a 37
Sorbitol a 4,4%, pH 4, 0 mM, Sorbitol a 4, 1%
52 Acetato a 10 mM, Acetato a 23 mM, 300
Fenilalanina a 40 mM, Fenilalanina a 37
Sorbitol a 4,2%, pH 4, 4 mM, Sorbitol a 3, 9%
53 Acetato a 20 mM, Acetato a 32 mM, 304
Fenilalanina a 40 mM, Fenilalanina a 37
Sorbitol a 4,0%, pH 4, 7 mM, Sorbitol a 3, 7%
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54 Acetato a 20 mM, Acetato a 32 mM, 315
Fenilalanina a 40 mM, Fenilalanina a 37
Sorbitol a 4, 2%, pH 4, 7 mM, Sorbitol a 3 , 9%
55 Acetato a 30 mM, Acetato a 41 mM, 303
Fenilalanina a 40 mM, Fenilalanina a 37
Sorbitol a 3, 7%, pH 4, 8 mM, Sorbitol a 3 , 4%
*As formulações finais compreenderam denosumab a 120 mg/mL e PS20 a uma concentração final de 0,01% (p/v) e um pH 5,1.
EXEMPLO 13
[0246] O seguinte exemplo relata os resultados de estudos sobre o efeito de arginina na estabilidade de desnaturação química de denosumab a três valores de ph diferentes: 4,5, 4,8 e 5 (ou 5,2).
[0247] Todas as experiências de desnaturaçao química foram levadas a cabo usando instrumento da Unchained Labs - HUNK com detector da fluorescência. O comprimento de onda da excitação foi 280 nm e os rastreios de emissão foram registrados entre 300 e 500 nm. Para cada experiência de desnaturação, proteína, tampão e desnaturante (guanidínio HC1) foram distribuídos em 36 poços com um aumento linear na concentração de desnaturante, resultando em uma curva de 3 6 pontos para cada condição. O software de ajuste da curva proporcionado pelo fabricante do instrumento (Unchained Labs) foi usado para ajuste dos pontos de dados. Um modelo de dois estados foi usado uma vez que existiu evidência de somente uma transição única (native θ denatured) . As experiências foram levadas a cabo usando 0 - 6 M de ureia em acetato a 10 mM, sorbitol a 5,0% p/v e tituladas
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144/151 até ao pH requerido de 4,5, 4,8 ou 5 (5,2). A concentração da proteína denosumab foi 7 mg/dL em todas as experiências.
[0248] A Figura 40 mostra as curvas de desnaturaçao química isotérmica de denosumab na ausência de arginina, a pH 4,5, 4,8 e 5,0. Na ausência de arginina, a C1/2 de desnaturante químico requerida para 50% de desdobramento é similar nas três condições de pH testadas.
[0249] A Figura 41 mostra as curvas de desnaturaçao química isotérmica de denosumab na presença de arginina HC1 a 75 mM a pH 4,5, 4,8 e 5,2. Existiu um aumento marcado na estabilidade de desnaturação química a pH 5,2 em comparação com pH 4,8 e 4,5. A C1/2 aumenta por 1 M do desnaturante guanidínio HC1 a pH 5,2 vs. pH mais baixo. Assim, a natureza protetora de arginina é surpreendente e altamente dependente do pH.
EXEMPLO 14
[0250] O seguinte exemplo proporciona os resultados de estudos sobre o efeito de arginina e fenilalanina na estabilidade ao longo do tempo de formulações de denosumab de elevada concentração em seringas.
[0251] Em estudos prévios foi identificado que o hidrocloreto de arginina e fenilalanina reduziram o nível de partida inicial e taxa de formação de HMWS de denosumab. Em este estudo, as formulações contendo hidrocloreto de arginina, fenilalanina e uma combinação de hidrocloreto de arginina e fenilalanina foram avaliadas quanto aos efeitos estabilizantes em soluções contendo denosumab a 120 mg/mL e armazenadas em
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145/151 seringas durante até três meses e a duas temperaturas diferentes.
[0252] As formulações testadas sao descritas na TABELA 17 em baixo. Para se prepararem as formulações 56-59, denosumab a 70 mg/mL em acetato, pH 5,2 foi diafiltrado contra os tampões de diafiltração (DF) descritos em baixo para 8 diavolumes para assegurar troca de tampões completa. O material foi depois ultraf ilt rado até mais do que 180 mg/mL, seguido por uma diluição até 120 mg/mL e a adição de polissorbato 20 até uma concentração final de 0,01%. A Formulação 56 foi considerada a formulação de controle. Os valores de acetato, arginina HC1 e fenilalanina listados são para o tampão DF e os níveis estimados na composição final a 120 mg/mL de denosumab são proporcionados, tomando em consideração a exclusão de excipiente e coconcentração de acetato quando nenhum outro contraíon está presente. A viscosidade a 5 °C e 25 °C foram medidas usando um reômetro compacto modular de Paar a taxas de cisalhamento até 1000 s_1 (segundos inversos). As formulações foram cheias em seringas pré-cheias de vidro (PFS) a um volume de enchimento de 1,0 mL. Conjuntos paralelos de seringas foram armazenados a uma temperatura de 25 °C durante 3 meses e 37 °C durante 2 meses, respectivamente. A estabilidade como baseada na formação de HMWS foi avaliada usando SE-UHPLC.
TABELA 17
Nome Abreviado da Formulação Composição do Tampão DF* Formulação final estimada* Condutividade (pS/cm) Viscosidade a 5 C Viscosidade a 25 C
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56 Acetato/Sorbitol Acetato a Acetato a 600 5,2 3,1
/PS20/pH 5,0 20 mM, 32 mM,
Sorbitol a Sorbitol a
5% (p/v), 4,4%
pH 4,7
57 Acetato/Arginina Acetato a Acetato a 5250 4, 8 2,7
HCl/Sorbitol/PS2 10 mM, L- 10 mM,
0/pH 5,1 Arginina Arginina
HC1 a 75 HC1 a 66
mM, tM,
Sorbitol a sorbitol a
2,4% 2,2%
(p/v) , pH
5,1
58 Acetato/Arginina Acetato a Acetato a 3070 4, 8 2,8
HCl/Fenilalanina 10 mM, 10 mM,
/Sorbitol/PS20/p Arginina Arginina
H 5,1 HC1 a 38 HC1 a 33
mM, tM,
Fenilalani Fenilalani
na a 38 mM, na a 35 mM,
Sorbitol a sorbitol a
3,0% 2,8%
(p/v) , pH
5,1
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59 Acetato/Fenilala nina/Sorbitol/PS 20/pH 5,1 Acetato a 10 mM, Fenilalani na a 38 mM, Sorbitol a 4,4% (p/v), pH 4,0 Acetato a 23 mM, Fenilalani na a 35 mM, sorbitol a 4,2% 800 4, 9 2, 9
*Cada formulação final compreende denosumab a 120 mg/mL e PS20 a 0, 01% PS20 e o pH indicado no Nome Abreviado da Formulação [0253] As Figuras 42 e 43 mostram a percentagem de HMWS monitorizada por SE-UHPLC em função da formulação e tempo a 25 °C durante 3 meses e 37 °C durante 2 meses, respectivamente.
[0254] As TABELAS 18-21 mostram os mesmos dados em forma tabular e também o aumento nas HMWS em relação aos níveis iniciais de HMWS.
TABELA 18: % de nível de HMWS a 25 °C ao longo de 12 semanas
Percentagem de HMWS
Nome da Formulação
2 4 6 8 12
Acetato/Sorbitol/pH 5,0
0,81
0, 93
1,04
1,16
1,17
1,38
Acetato/Arginina HCl/Sorbitol/pH
5,1
Acetato/Arginina
HCl/Fenilalanina/Sorbitol/pH 5,1
0, 72
0,85
0, 93
1, 02
1,07
1,21
0,59
0, 75
0,85
0, 93
0,97
1,12
Acetato/Fenilalanina/Sorbitol/pH
5,1
0, 66
0,7
0,79
0,88
0,92
1,08
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TABELA 19: Aumento de HMWS a 25 °C ao longo de 12 semanas
Aumento de HMWS
Formulação
2 4 6 8 12
Acetato/Sorbitol/pH 5,0 0,12 0,23 0,35 0,36 0,57
Acetato/Arginina HCl/Sorbitol/pH
5,1 0,13 0,21 0,3 0,35 0,49
Acetato/Arginina
HCl/Fenilalanina/Sorbitol/pH 5,1 0,16 0,26 0,34 0,38 0,53
Acetato/Fenilalanina/Sorbitol/pH
5,1 0,04 0,13 0,22 0,26 0,42
TABELA 20: % de nível de HMWS a 37 °C ao longo de 8 semanas
Percentagem de HMWS
Formulação 0 2 4 6 8
56 Acetato/Sorbitol/pH 5,0 0,81 1,3 1, 66 1,94 2,49
57 Acetato/Arginina HCl/Sorbitol/pH 5,1 0, 72 1,2 1,5 1,94 2,23
58 Acetato/Arginina HCl/Fenilalanina/Sorbitol/pH 5,1 0,59 1,23 1, 66 2,06 2, 48
59 Acetato/Fenilalanina/Sorbitol/pH 5,1 0, 66 1,09 1,4 1,73 2,21
TABELA 21: Aumento de HMWS a 37 °C ao longo de 8 semanas
Aumento de HMWS
Formulação 2 4 6 8
56 Acetato/Sorbitol/pH 5,0 0,49 0,85 1,13 1, 68
57 Acetato/Arginina HCl/Sorbitol/pH 5,1 0,48 0,78 1,22 1,51
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149/151
Acetato/Arginina
HCl/Fenilalanina/Sorbitol/pH 5,1 0,64 1,07 1,47 1,89
Acetato/Fenilalanina/Sorbitol/pH
5,1 0, 43 0, 74 1,07 1,55
[0255] Este exemplo mostra que a adiçao de arginina, fenilalanina e uma sua combinação reduz cada uma o nível de HMWS iniciais (t = 0) em formulações de denosumab de elevada concentração. A 25 °C, o aumento nas HMWS é reduzido na Formulação com fenilalanina 59, em comparação com a Formulação de controle 56. A 37 °C, as Formulações 57 e 59 têm formação reduzida de HMWS em comparação com a Formulação com sorbitol de controle 56. A formulação contendo tanto arginina HC1 como fenilalanina formou HMWS a uma taxa mais elevada a 37 °C em relação às outras formulações, indicando que a combinação destes excipientes é desestabilizante para denosumab a tais temperaturas mais elevadas em esta formulação.
[0256] A descrição anterior é dada somente para facilidade de entendimento, e nenhumas limitações desnecessárias devem ser entendidas a partir dela, pois modificações dentro do escopo da invenção podem ser aparentes aos peritos na técnica. [0257] Ao longo deste relatório descritivo e das reivindicações que se seguem, a não ser que o contexto requeira de outro modo, a palavra compreendem e variações tais como compreende e compreendendo será entendida como implicando a inclusão de um número inteiro ou passo ou grupo de números inteiros ou passos apresentado, mas não a exclusão de qualquer
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150/151 outro número inteiro ou passo ou grupo de números inteiros ou passos.
[0258] Ao longo do relatório descritivo, onde as composições são descritas como incluindo componentes ou
materiais, é contemplado que as composiçoes podem também
consistir essencialmente em, ou consistir em, qualquer
combinação dos componentes ou mater iais recitados, a nao ser
que descrito de outro modo. Do mesmo modo, onde os métodos sao
descritos como incluindo passos particulares, é contemplado que os métodos podem também consistir essencialmente em, ou consistir em, qualquer combinação dos passos recitados, a não ser que descrito de outro modo. A invenção ilustrativamente
divulgada aqui pode ser adequadamente pratd .cada na ausência de
qualquer elemento ou passo que nao seja especificamente
divulgado aqui .
[0259] A prática de um método divulgado aqui ., e seus passos
individuais, pode ser realizada manualmente e/ou com o auxílio de ou automação proporcionada por equipamentos eletrônicos. Embora os processos tenham sido descritos com referência a modalidades particulares, um perito na técnica apreciará prontamente que outros modos de realizar os atos associados aos métodos podem ser usados. Por exemplo, a ordem de vários dos passos pode ser mudada sem se afastar do escopo ou espírito do método, a não ser que descrito de outro modo. Adicionalmente, alguns dos passos individuais podem ser combinados, omitidos ou adicionalmente subdivididos em passos adicionais.
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[0260] Todas as patentes, publicações e referências citadas aqui são deste modo totalmente incorporadas por referência. Em caso de conflito entre a presente divulgação e as patentes, publicações e referências incorporadas, a presente divulgação deve controlar.

Claims (50)

1. Formulação farmacêutica aquosa, caracterizada pelo fato de que compreende (i) um anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano, ou uma sua porção de ligação ao antígeno e (ii) um inibidor da agregação de aminoácidos.
2. Formulação farmacêutica aquosa, caracterizada pelo fato de que compreende (i) um anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano, ou uma sua porção de ligação ao antígeno, a uma concentração de mais do que 7 0 mg/mL, em que a formulação farmacêutica aquosa tem um pH em uma gama de cerca de 5,0 a menos do que 5,2.
3. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 e 2, caracterizada pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de CDR1 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 5.
4. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que o anticorpo antiRANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de CDR2 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 6.
5. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 4, caracterizada pelo fato de que o anticorpo antiRANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende um domínio
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2/50 variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de CDR3 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 10.
6. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 3, 4 e 5, caracterizada pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende (i) um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de CDR3 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 7; (ii) um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de CDR1 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 8; (iii) um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de CDR2 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 9 ou (iv) qualquer sua combinação.
7. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 3, 4, 5 e 6, caracterizada pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende (A) um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma CDR1 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 5, um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma CDR2 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 6 e um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma CDR3 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 7; e (B) um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma CDR1 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 8, um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma CDR2 de cadeia pesada compreendendo a
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3/50 sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 9 e um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma CDR3 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 10.
8. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6 e 7, caracterizada pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende:
(A) um domínio variável de cadeia leve selecionado do grupo consistindo em:
i. um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos que é, pelo menos, 80% idêntica a SEQ ID NO: 1;
ii. um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por uma sequência de polinucleotídeos compreendendo SEQ ID NO: 19;
iii. um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por um polinucleotídeo que híbrida sob condições estringentes com o complemento de um polinucleotídeo consistindo em SEQ ID NO: 19; ou (B) um domínio variável de cadeia pesada selecionado do grupo consistindo em:
i. um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos que é, pelo menos, 80% idêntica a SEQ ID NO: 2;
ii. um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por uma
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4/50 sequência de polinucleotídeos compreendendo SEQ ID NO: 20.
iii. um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por um polinucleotídeo que híbrida sob condições estringentes com o complemento de um polinucleotídeo consistindo em SEQ ID NO: 20; ou (C) um domínio variável de cadeia leve de (A) e um domínio variável de cadeia pesada de (B).
9. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 e 8, caracterizada pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL é um anticorpo totalmente humano, um anticorpo humanizado ou um anticorpo quimérico.
10. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 e 8, caracterizada pelo fato de que a porção de ligação ao antígeno é um Fab, Fab', F(ab')2 ou um Fv de cadeia única.
11. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 e 8, caracterizada pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL é um anticorpo de IgGi, IgG2 ou IgG4, opcionalmente, compreendendo cadeias leves kappa.
12. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 11, caracterizada pelo fato de que o anticorpo antiRANKL compreende uma sequência de SEQ ID NO: 15.
13. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 12, caracterizada pelo fato de que o anticorpo antiRANKL compreende uma sequência de SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17 ou SEQ ID NO: 18.
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5/50
14. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 e 13, caracterizada pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende:
(A) uma cadeia leve selecionada do grupo consistindo em:
uma cadeia leve compreendendo uma sequênc ia de aminoácidos que é, pelo menos, 80% : idêntica a SEQ ID NO: 3 ou SEQ ID NO: 13; uma cadeia leve compreendendo uma sequênc ia de aminoácidos codificada por uma sequênci a de
polinucleotídeos que é, pelo menos, 80% idêntica a SEQ ID NO: 21 ou 23;
iii. uma cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por um polinucleotídeo que híbrida sob condições estringentes com o complemento de um polinucleotídeo consistindo em SEQ ID NO: 21 ou 23; ou (B) uma cadeia pesada selecionada do grupo consistindo em:
uma cadeia pesada compreendendo uma sequência de
aminoácidos que é, pelo menos, 80% idêntica a SEQ
ID NO: 4 ou SEQ ID NO: 14;
uma cadeia pesada compreendendo uma sequência de
aminoácidos codificada por uma sequência de polinucleotídeos que é, pelo menos, 80% idêntica a SEQ ID NO: 22 ou 24, uma cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por um polinucleotídeo que
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6/50 híbrida sob condiçoes estringentes com o complemento de um polinucleotideo consistindo em SEQ ID NO: 22 ou 24; ou (C) um domínio variável de cadeia leve de (A) e um domínio variável de cadeia pesada de (B).
15. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 e 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 e 14, caracterizada pelo fato de que a concentração do anticorpo, ou sua porção de ligação ao antígeno, é maior do que 7 0 mg/mL, opcionalmente, em uma gama de cerca de 70 mg/mL a cerca de 300 mg/mL.
16. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 e 15, caracterizada pelo fato de que a concentração do anticorpo ou sua porção de ligação ao antígeno está em uma gama de mais do que 7 0 mg/mL a cerca de 300 mg/mL, opcionalmente em uma gama de mais do que cerca de 70 mg/mL a cerca de 200 mg/mL.
17. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 15 e 16, caracterizada pelo fato de que a concentração do anticorpo ou sua porção de ligação ao antígeno está em uma gama de cerca de 100 a cerca de 140 mg/mL.
18. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16 e 17, caracterizada pelo fato de que a concentração do anticorpo ou sua porção de ligação ao antígeno é cerca de 120 mg/mL ± 12 mg/mL.
19. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14,
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15, 16, 17 e 18, caracterizada pelo fato de que compreende adicionalmente um inibidor da agregação de aminoácidos.
20. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 e 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 e 19, caracterizada pelo fato de que o inibidor da agregação de aminoácidos compreende um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral carregada, um aminoácido aromático ou um aminoácido hidrofóbico.
21. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 20, caracterizada pelo fato de que o aminoácido compreendendo uma cadeia lateral carregada é um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada.
22. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 21, caracterizada pelo fato de que o aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada compreende uma estrutura de cadeia lateral da Fórmula I ou Fórmula II:
JVVV'
I (CH2)n
Figure BR112019022188A2_C0001
[Fórmula I] em que n é 1 a 7, em que cada um de Ri e R2 é independentemente selecionado do grupo consistindo em H, alquila Ci-Cis, (alquila Ci-Cis)OH, (alquila Ci-Cis)NH2, NH, NH2 (alquila Ci
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8/50
Cis)SH, (alquila C0-C4) cicloalquila (C3-C6) , (alquila CoC4) (heterociclico C2-C5) , (alquila C0-C4) (arila Ce-Cio)R7 e (alquila C1-C4) (heteroarila C3-C9) , em que R7 é H ou OH, em que opcionalmente um de Ri e R2 é um grupo amino livre (-NH34·) , v/VVV' (CH2)m
Figure BR112019022188A2_C0002
r3 [Fórmula II] em que m é 1 a 7, em que cada um de R3 e R4 é independentemente selecionado do Grupo A consistindo em: H, alquila Ci-Cis, (alquila Ci-Cis) OH, (alquila Ci-Cis) NH2, (alquila Ci-Cis) SH, (alquila C0-C4) cicloalquila (C3-C6) , (alquila Co04) (heterociclico C2-C5) , (alquila C0-C4) (arila Ce-CicJRs e (alquila C1-C4) (heteroarila C3-C9) , em que Rs é H ou OH, em que Rs está opcionalmente presente, e, quando presente, é selecionado do Grupo A, opcionalmente, em que cada um de R3 e R4 e R5 é H.
23. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 22, caracterizada pelo fato de que n está em uma gama de 2 a 4.
24. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 23, caracterizada pelo fato de que Ri é NH ou NH2.
25. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 24, caracterizada pelo fato de que R2 é NH2 ou NH34·.
26. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 25, caracterizada pelo fato de que o aminoácido
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9/50 compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada é arginina.
27. Formulação farmacêuti .ca aquosa, de acordo com a reivindicação 22, caracterizada pelo fato de que m está em uma gama de 3 a 5. 28. Formulação farmacêuti .ca aquosa, de acordo com a
reivindicação 27, caracterizada pelo fato de que cada um de R3 e R4 e R5 está opcionalmente presente, em que, quando presente, R5 é H.
29. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 28, caracterizada pelo fato de que o aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada é lisina.
30. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28 e 29, caracterizada pelo fato de que o aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada está presente na formulação como um sal.
31. Formulação farmacêuti .ca aquosa, de acordo com a reivindicação 30, caracterizada ] pelo fato de que o sal é um sal de hidrocloreto (HC1). 32. Formulação farmacêuti .ca aquosa, de acordo com a reivindicação 31, caracterizada pelo fato de que compreende L- arginina HC1 ou L-lisina HC1. 33. Formulação farmacêuti .ca aquosa, de acordo com a reivindicação 20, caracterizada pelo fato de que o aminoáci Ldo aromático compreende uma fenila ou um indol. 34. Formulação farmacêuti .ca aquosa, de acordo com a reivindicação 33, caracterizada pelo fato de que o aminoáci Ldo
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10/50 aromático compreende uma cadeia de alquila Ci-Ce entre o carbono alfa e a fenila ou indol.
35 . Formulação farmacêuti ca aquosa, de acordo com a reivindicação 34, caracterizada pelo fato de que a cadeia de alquila é uma cadeia de alquila C1-C3. 36. Formulação farmacêuti ca aquosa, de acordo com a reivindicação 35, caracterizada pelo fato de que 0 aminoácí Ldo aromático é L-fenilalanina. 37 . Formulação farmacêuti ca aquosa, de acordo com a reivindicação 35, caracterizada pelo fato de que 0 aminoácí Ldo aromático é L-triptofano. 38 . Formulação farmacêuti ca aquosa, de acordo com a
reivindicação 20, caracterizada pelo fato de que o aminoácido hidrofóbico tem uma pontuação maior do que cerca de 2,5 na escala de hidrofobicidade de Kyte e Doolittle.
39. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 20 e 38, caracterizada pelo fato de que o aminoácido hidrofóbico compreende uma cadeia lateral compreendendo uma alquila C2 a C12, ramificada ou de cadeia linear, ou uma cicloalquila C4 a Cs, um heterociclo C4 a Cs compreendendo um heteroátomo de nitrogênio, opcionalmente, em que o heterociclo é um imidazol, pirrol ou indol.
40. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 39, caracterizada pelo fato de que o aminoácido hidrofóbico compreende uma alquila C3 a Cs.
41. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 40, caracterizada pelo fato de que o aminoácido
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11/50 hidrofóbico compreende uma alquila C3 ramificada ou alquila C4 ramificada.
42. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 41, caracterizada pelo fato de que o aminoácido hidrofóbico é L-valina, L-leucina ou L-isoleucina.
43. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41 e 42, caracterizada pelo fato de que compreende cerca de 5 mM a cerca de 300 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, opcionalmente, compreendendo cerca de 25 mM a cerca de 90 mM de inibidor da agregação de aminoácidos .
44. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 43, caracterizada pelo fato de que compreende cerca de 5 mM a cerca de 150 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada, opcionalmente, L-arginina.
45. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 44, caracterizada pelo fato de que compreende cerca de 30 mM a cerca de 80 mM de inibidor da agregação de aminoácidos.
46. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 43, caracterizada pelo fato de que compreende cerca de 5 mM a cerca de 180 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido aromático, opcionalmente, L-fenilalanina.
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47. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 46, caracterizada pelo fato de que compreende cerca de 5 mM a cerca de 100 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, opcionalmente, cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido aromático, opcionalmente, Lfenilalanina.
48. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 43, caracterizada pelo fato de que compreende cerca de 5 mM a cerca de 300 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido hidrofóbico, opcionalmente, L-valina, L-isoleucina ou L-leucina.
49. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 48, caracterizada pelo fato de que compreende cerca de 5 mM a cerca de 200 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, opcionalmente, cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido hidrofóbico, opcionalmente, L-valina, L-isoleucina ou L-leucina.
50. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 43, 44, 45, 46, 47, 48 e 49, caracterizada pelo fato de que compreende:
a. cerca de 30 mM a cerca de 80 mM de hidrocloreto de L- arginina; b. cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de L-fenilalanina f c. cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de L-triptofano; d. cerca de 30 mM a cerca de 80 mM de hidrocloreto de L-
lisina;
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e. cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de L-leucina; f. cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de L-isoleucina; g. cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de L-valina; ou
h. qualquer sua combinação.
51. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer
uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5 , 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 , 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35 , 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 e 50, caracter! zada pelo fato de que compreende somente um inibidor da agregação de aminoácidos .
52. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer
uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50 e 51, caracterizada pelo fato de que a razão
molar entre o inibidor da agregação de aminoácidos e o anticorpo anti-RANKL é cerca de 10 a 200, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido aromático, opcionalmente, Lfenilalanina.
53. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 52, caracterizada pelo fato de que a razão molar é cerca de 20 a cerca de 90.
54. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer
uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 , 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, , 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, , 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52 e 53, caracter izada pelo fato de que a
razao molar entre o inibidor da agregaçao de aminoácidos e o
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14/50 anticorpo anti-RANKL é cerca de 20 a 300, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada, opcionalmente, L-arginina.
55. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 54, caracterizada pelo fato de que a razão molar é cerca de 45 a 180.
56. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54 e 55, caracterizada pelo fato de que compreende adicionalmente um modificador da tonicidade, opcionalmente, selecionado do grupo consistindo em: sorbitol, manitol, sacarose, tre-halose, glicerol e suas combinações.
57. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 56, caracterizada pelo fato de que o modificador da tonicidade compreende sorbitol.
58. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 56 ou 57, caracterizada pelo fato de que compreende cerca de 1,0% (p/p) a cerca de 5,0% (p/p) de modificador da tonicidade.
59. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 58, caracterizada pelo fato de que compreende cerca de 2,0% (p/p) a cerca de 5,0% (p/p) de sorbitol ou cerca de 3,5% (p/p) a cerca de 5,0% (p/p) de sorbitol ou cerca de 4,0% (p/p) a cerca de 5,0% (p/p) de sorbitol.
60. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13,
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15/50
14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45 46, 47, 48, 49, 50 , 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57 , 58 e 59
caracterizada pelo fato de que está isenta de sorbitol e, opcionalmente, isenta de qualquer modificador da tonicidade.
61. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13,
14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56 , 57, 58, 59 e 60, caracter izada pelo fato de que compreende adicionalmente um
tensoativo.
62. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 61, caracterizada pelo fato de que o tensoativo é selecionado do grupo consistindo em: ésteres de ácidos graxos de polioxietileno de sorbitana (p.ex., polissorbato 20, polissorbato 80) ou um ou mais poliéteres de alquilarila, p.ex., fenol de alquila oxietilado (p.ex., Triton® X-100) ou um ou mais poloxâmeros (p.ex., Pluronics®, p.ex., Pluronic® F68) e suas combinações.
63. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 62, caracterizada pelo fato de que o tensoativo é polissorbato 20.
64. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 61, 62 e 63, caracterizada pelo fato de que compreende, pelo menos, cerca de 0,004% (p/v) de tensoativo e, opcionalmente, compreendendo menos do que 0,15% (p/v) de tensoativo.
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65. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 64, caracterizada pelo fato de que compreende cerca de 0,005% (p/p) a cerca de 0,015% (p/p) de tensoativo.
66. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer
uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64 e 65, caracterizada pelo fato de que compreende adie ionalmente um tampao, opcionalmente , em que o tampao está centrado , a 25 °C, em uma gama de cerca de pH 4, 0 a cerca de pH
5, 5 .
67. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 66, caracterizada pelo fato de que o tampão tem um pKa dentro de uma unidade de pH de pH 5,0-5,2 a 25 °C.
68. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 66 e 67, caracterizada pelo fato de que compreende cerca de 5 mM a cerca de 60 mM de tampão.
69. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 68, caracterizada pelo fato de que compreende cerca de 5 mM a cerca de 50 mM de tampão.
70. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 69, caracterizada pelo fato de que compreende cerca de 9 mM a cerca de 45 mM de tampão.
71. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 66, 67, 68, 69 e 70, caracterizada pelo fato de que o tampão é acetato ou glutamato.
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72 Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 , 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70 e 71, caracterizada pelo fato de que ' tem um pH em i □ma gama de cerca de 5, 0 a 5,19. 73 Formulação farmacêut: lca aquosa, de acordo com a reivindicação 72, caracterizada pelo fato de que tem um pH em uma gama de cerca de 5,0 a cerca de 5, 15 . 74 Formulação farmacêuti lca aquosa, de acordo com a reivindicação 73, caracterizada pelo fato de que tem um pH em uma
gama de cerca de 5,0 a cerca de 5,1.
75. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 e 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73 e 74, caracterizada pelo fato de que tem um pH em uma gama de 5,0 a cerca de 5,4 ou cerca de 5,0 a cerca de 5,2 ou cerca de 5,0 a menos do que 5,2 ou cerca de 5,0 a 5,19 ou cerca de 5,0 a cerca de 5,15 ou cerca de 5,0 a cerca de 5,1.
76. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 75, caracterizada pelo fato de que tem um pH de cerca de 5,1.
77. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13,
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14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 , 27, 28, 29 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42 , 43, 44, 45 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58 , 59, 60, 61 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72 , 73, 74, 75 e 76
caracterizada pelo fato de que tem uma viscosidade que é não mais do que cerca de 6 cP a 5 °C, opcionalmente, em que a viscosidade é cerca de 4,5 cP a cerca de 5,5 cP.
78. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer
uma das reivindicações 1 , 3, 3, 4, 5 , 5, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76 e 77
caracterizada pelo fato de que tem uma viscosidade que é menor do que cerca de 13 cP a 25 °C.
79. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com a reivindicação 78, caracterizada pelo fato de que tem uma viscosidade em uma gama de cerca de 2,0 cP a cerca de 10 cP, opcionalmente, cerca de 2,5 cP a cerca de 4 cP.
80. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer
uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 , 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 , 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37 , 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53 , 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72 !, 73 , 74 , 75 , 76 , 77, 78
e 79, caracterizada pelo fato de que tem uma condutividade em uma gama de cerca de 500 pS/cm a cerca de 5500 pS/cm, opcionalmente, em que a condutividade está em uma gama de cerca de 2500 pS/cm a
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19/50 cerca de 5500 pS/cm, quando a formulação compreende um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada, ou em uma gama de cerca de 500 pS/cm a cerca de 2000 pS/cm, quando a formulação compreende um aminoácido aromático ou não tem um inibidor da agregação de aminoácidos.
81. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer
uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79 e 80, caracterizada pelo fato de que tem uma osmolalidade
em uma gama de cerca de 200 mOsm/kg a cerca de 500 mOsm/kg ou cerca de 225 mOsm/kg a cerca de 400 mOsm/kg ou cerca de 250 mOsm/kg a cerca de 350 mOsm/kg.
82. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer
uma das reivindicações 1 , 'i, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77
78, 79, 80 e 81, caracterizada pelo fato de que compreende menos do que 2% de espécies de elevado peso molecular (HMWS) e/ou mais do que 98% de pico principal do anticorpo, como medido por SEUHPLC, após armazenamento a cerca de 2 °C até cerca de 8 °C durante pelo menos 12 meses, 24 meses ou 36 meses.
83. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13,
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20/50
14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81 e 82, caracterizada pelo fato de que compreende menos do que 2% de espéc: les de elevado peso molecular (HMWS) e/ou mai s do que 98% de pico principal do anticorpo, como medido por
SE-UHPLC, após armazenamento a cerca de 20 °C até cerca de 30 °C durante cerca de 1 mês.
84. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer
uma das reivindicações 1 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77
78, 79, 80, 81, 82 e 83, caracterizada pelo fato de que compreende menos do que 2% de espécies de elevado peso molecular (HMWS) e/ou mais do que 98% de pico principal do anticorpo, como medido por SE-UHPLC, após um primeiro armazenamento a cerca de 2 °C até cerca de 8 °C durante pelo menos 12 meses, 24 meses ou 36 meses e um segundo armazenamento a cerca de 20 °C até cerca de 30 °C durante cerca de 1 mês.
85. Formulação farmacêutica aquosa, de acordo com qualquer
uma das reivindicações 1 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77
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78, 79, 80, 81, 82, 83 e 84, caracterizada pelo fato de que compreende menos do que 2% de espécies de elevado peso molecular (HMWS) e/ou mais do que 98% de pico principal do anticorpo, como medido por SE-UHPLC, após armazenamento durante cerca de um mês a 37 °C ou durante 3 meses a 30 °C.
86. Recipiente, opcionalmente, um frasco, seringa pré-cheia (PFS) ou recipiente de vidro, caracterizado pelo fato de que contém
uma formulação farmacêut ica aquosa, conforme def i nida em qualquer uma das reivindicações 1 , 2, 3, 4, 5 , 6, 7, 8 , 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84 e 85 .
87. Recipiente, de acordo com a reivindicação 86, caracterizado pelo fato de que contém cerca de 1 mL ou menos da formulação, opcionalmente, cerca de 0,5 mL.
88. Método de preparação de uma formulação farmacêutica aquosa, estável, caracterizado pelo fato de que compreende um anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano, ou uma sua porção de ligação ao antígeno, compreendendo combinação do anticorpo monoclonal anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, a uma concentração maior do que 70 mg/mL com um inibidor da agregação de aminoácidos, um tampão, um tensoativo e, opcionalmente, um modificador da tonicidade.
89. Método, de acordo com a reivindicação 88, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação
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22/50 ao antígeno, compreende um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de CDR1 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 5.
90. Método, de acordo com a reivindicação 89, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de CDR2 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 6.
91. Método, de acordo com a reivindicação 90, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de CDR3 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 10.
92. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 89, 90 e 91, caracterizado pelo fato de que o anticorpo antiRANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende (i) um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de CDR3 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 7; (ii) um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de CDR1 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 8; (iii) um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de CDR2 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada em SEQ ID NO: 9 ou (iv) uma sua combinação.
93. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 88, 89, 90, 91 e 92, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende (A) um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma CDR1 de cadeia
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23/50 leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 5, um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma CDR2 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 6 e um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma CDR3 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 7; e (B) um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma CDR1 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 8, um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma CDR2 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 9 e um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma CDR3 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 10.
94. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 88, 89, 90, 91, 92 e 93, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende:
(A) um domínio variável de cadeia leve selecionado do grupo consistindo em:
i. um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos que é, pelo menos, 80% idêntica a SEQ ID NO: 1;
ii. um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por uma sequência de polinucleotídeos compreendendo SEQ ID NO: 19;
iii. um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por um polinucleotídeo que híbrida sob condições
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24/50 estringentes com o complemento de um polinucleotídeo consistindo em SEQ ID NO: 19; ou (B) um domínio variável de cadeia pesada selecionado do grupo consistindo em:
i. um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos que é, pelo menos, 80% idêntica a SEQ ID NO: 2;
ii. um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por uma sequência de polinucleotídeos compreendendo SEQ ID NO: 20.
iii. um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por um polinucleotídeo que híbrida sob condições estringentes com o complemento de um polinucleotídeo consistindo em SEQ ID NO: 20; ou (C) um domínio variável de cadeia leve de (A) e um domínio variável de cadeia pesada de (B).
95. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91, 92, 93 e 94, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL é um anticorpo totalmente humano, um anticorpo humanizado ou um anticorpo quimérico.
96. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91, 92, 93, 94 e 95, caracterizado pelo fato de que a porção de ligação ao antígeno é um Fab, Fab', F(ab')2 ou um Fv de cadeia única.
97. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95 e 96, caracterizado pelo fato de
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25/50 que o anticorpo anti-RANKL é um anticorpo de IgGi, IgG2 ou IgG4, opcionalmente, em que o anticorpo compreende cadeias leves kappa.
98. Método, de acordo com a reivindicação 97, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL compreende uma sequência de SEQ ID NO: 15.
99. Método, de acordo com a reivindicação 98, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL compreende uma sequência de SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17 ou SEQ ID NO: 18.
100. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 e 99, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL, ou sua porção de ligação ao antígeno, compreende:
(A) uma cadeia leve selecionada do grupo consistindo em:
uma cadeia leve compreendendo uma sequênc ia de aminoácidos que é, pelo menos, 80% : idêntica a SEQ ID NO: 3 ou SEQ ID NO: 13; uma cadeia leve compreendendo uma sequênc ia de aminoácidos codificada por uma sequênci a de
polinucleotídeos que é, pelo menos, 80% idêntica a SEQ ID NO: 21 ou 23;
iii. uma cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por um polinucleotídeo que híbrida sob condições estringentes com o complemento de um polinucleotídeo consistindo em SEQ ID NO: 21 ou 23; ou (B) uma cadeia pesada selecionada do grupo consistindo em:
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uma cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos que é, pelo menos, 80% i .dêntica a SEQ ID NO: 4 ou SEQ ID NO: 14; uma cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos codif: içada por uma sequência de
polinucleotídeos que é pelo menos 80% idêntica a SEQ ID NO: 22 ou 24, iii. uma cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos codificada por um polinucleotídeo que híbrida sob condições estringentes com o complemento de um polinucleotídeo consistindo em SEQ ID NO: 22 ou 24; ou (C) um domínio variável de cadeia leve de (A) e um domínio variável de cadeia pesada de (B).
101. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 e 100, caracterizado pelo fato de que compreende combinação de cerca de 10 mg/mL a cerca de 300 mg/mL de anticorpo, ou sua porção de ligação ao antígeno, com o inibidor da agregação de aminoácidos, tampão, tensoativo e, opcionalmente, o modificador da tonicidade.
102. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100 e 101, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa, estável compreende mais do que 70 mg/mL a cerca de 200 mg/mL de anticorpo ou sua porção de ligação ao antígeno.
103. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
101 e 102, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica
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27/50 aquosa, estável compreende cerca de 100 a cerca de 140 mg/mL de anticorpo ou sua porção de ligação ao antígeno.
104. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102 e 103, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa, estável compreende cerca de 120 mg/mL ± 12 mg/mL de anticorpo ou porção de ligação ao antígeno.
105. Método, de acordo com a reivindicação 104, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa, estável compreende cerca de 120 mg/mL ± 5 mg/mL de anticorpo ou porção de ligação ao antígeno.
106. . Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104 e 105, caracterizado pelo fato de que o inibidor da
agregação de aminoácidos compreende um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral carregada, um aminoácido aromático ou um aminoácido hidrofóbico.
107. Método, de acordo com a reivindicação 106, caracterizado pelo fato de que o aminoácido compreendendo uma cadeia lateral carregada é um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada.
108. Método, de acordo com a reivindicação 107, caracterizado pelo fato de que o aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada compreende uma estrutura de cadeia lateral da Fórmula I ou Fórmula II:
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28/50 s/VW' (CH2)n /
Figure BR112019022188A2_C0003
[Fórmula I] em que n é 1 a 7, em que cada um de Ri e R2 é independentemente selecionado do grupo consistindo em H, alquila Ci-Cis, (alquila Ci-Cis)OH, (alquila Ci-Cis)NH2, NH, NH2 (alquila CiCis)SH, (alquila C0-C4) cicloalquila (C3-C6) , (alquila CoC4) (heterociclico C2-C5) , (alquila C0-C4) (arila Ce-Cio)R7 e (alquila C1-C4) (heteroarila C3-C9) , em que R7 é H ou OH, em que opcionalmente um de Ri e R2 é um grupo amino livre (-NH3 +) , yjyjxsxr (CH2)m
Figure BR112019022188A2_C0004
R3 [Fórmula II] em que m é 1 a 7, em que cada um de R3 e R4 é independentemente selecionado do Grupo A consistindo em: H, alquila Ci-Cis, (alquila Ci-Cis)OH, (alquila Ci-Cis)NH2, (alquila Ci-Cis) SH, (alquila C0-C4) cicloalquila (C3-Ce) , (alquila CoC4) (heterociclico C2-C5) , (alquila C0-C4) (arila Ce-CicQRs e (alquila C1-C4) (heteroarila C3-Cg) , em que Rs é H ou OH, em que Rs está opcionalmente presente, e, quando presente, é
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selecionado do Grupo A , opcionalmente, em que cada um de R3 e R4 e Rs é H. 109. Método, de acordo com a reivindicação 108, caracter! .zado pelo fato de que n está em uma gama de 2 a 4. 110 . Método, de acordo com a reivindicação 109, caracter! .zado pelo fato de que Ri é NH ou NH2 . 111. Método, de acordo com a reivindicação 110, caracter! .zado pelo fato de que R2 é NH2 ou nh3- · 112 . Método, de acordo com a reivindicação 111, caracter! .zado pelo fato de que 0 aminoácido compreendendo uma cadeia lateral
positivamente carregada é arginina.
113. Método, de acordo com a reivindicação 108, caracterizado pelo fato de que m está em uma gama de 3 a 5.
114. Método, de acordo com a reivindicação 113, caracterizado pelo fato de que cada um de Rs e Rí e Rs está opcionalmente presente, em que, quando presente, Rs é H.
115. Método, de acordo com a reivindicação 114, caracterizado pelo fato de que o aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada é lisina.
116. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114 e 115, caracterizado pelo fato de que o aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada está presente na formulação como um sal.
117 . Método, de acordo com a reivindicação 116, caracters Lzado pelo fato de que 0 sal é um sal de hidrocloreto (HC1). 118 . Método, de acordo com a reivindicação 117, caracter] Lzado pelo fato de que compreende L-arginina HC1 ou L -lisina HC1.
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119. Método, de acordo com a reivindicação 106, caracterizado pelo fato de que o aminoácido aromático compreende uma fenila ou um indol.
120. Método, de acordo com a reivindicação 119, caracterizado pelo fato de que o aminoácido aromático compreende uma cadeia de alquila Ci-Ce entre o carbono alfa e a fenila ou indol.
121. Método, de acordo com a reivindicação 120, caracterizado pelo fato de que a cadeia de alquila é uma cadeia de alquila CiC3.
122. Método, de acordo com a reivindicação 121, caracterizado pelo fato de que o aminoácido aromático é L-fenilalanina.
123. Método, de acordo com a reivindicação 121, caracterizado pelo fato de que o aminoácido aromático é L-triptofano.
124. Método, de acordo com a reivindicação 106, caracterizado pelo fato de que o aminoácido hidrofóbico tem uma pontuação maior do que cerca de 2,5 na escala de hidrof obicidade de Kyte e Doolittle.
125. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 106 ou 124, caracterizado pelo fato de que o aminoácido hidrofóbico compreende uma cadeia lateral compreendendo uma alquila C2 a C12, ramificada ou de cadeia linear, ou uma cicloalquila C4 a Cs, um heterociclo C4 a Cs compreendendo um heteroátomo de nitrogênio, opcionalmente, em que o heterociclo é um imidazol, pirrol ou indol.
126. Método, de acordo com a reivindicação 125, caracterizado pelo fato de que o aminoácido hidrofóbico compreende uma alquila C3 a Cs.
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127. Método, de acordo com a reivindicação 126, caracterizado pelo fato de que o aminoácido hidrofóbico compreende uma alquila C3 ramificada ou alquila C4 ramificada.
128. Método, de acordo com a reivindicação 127, caracterizado pelo fato de que o aminoácido hidrofóbico é L-valina, L-leucina ou L-isoleucina.
129. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127 e 128
caracterizado pelo fato de que compreende combinação de cerca de 5 mM a cerca de 300 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, opcionalmente, cerca de 15 mM a cerca de 200 mM ou cerca de 25 mM a cerca de 90 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, com o anticorpo ou porção de ligação ao antígeno.
130. Método, de acordo com a reivindicação 129, caracterizado pelo fato de que compreende combinação de cerca de 5 mM a cerca de 150 mM de inibidor da agregação de aminoácidos com o anticorpo ou porção de ligação ao antígeno, em que o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada, opcionalmente, L-arginina.
131. Método, de acordo com a reivindicação 130, caracterizado pelo fato de que compreende combinação de cerca de 30 mM a cerca de 80 mM de inibidor da agregação de aminoácidos com o anticorpo ou porção de ligação ao antígeno.
132. Método, de acordo com a reivindicação 129, caracterizado pelo fato de que compreende combinação de cerca de 5 mM a cerca de 180 mM de inibidor da agregação de aminoácidos com o anticorpo ou
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32/50 porção de ligação ao antígeno, em que o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido aromático, opcionalmente, Lfenilalanina.
133. Método, de acordo com a reivindicação 132, caracterizado pelo fato de que compreende combinação de cerca de 5 mM a cerca de 100 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, opcionalmente, cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, com o anticorpo ou porção de ligação ao antígeno.
134. Método, de acordo com a reivindicação 129, caracterizado pelo fato de que compreende cerca de 5 mM a cerca de 300 mM de inibidor da agregação de aminoácidos com o anticorpo ou porção de ligação ao antígeno, em que o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido hidrofóbico, opcionalmente, L-valina, L-isoleucina ou L-leucina.
135. Método, de acordo com a reivindicação 134, caracterizado pelo fato de que compreende combinação de cerca de 5 mM a cerca de 200 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, opcionalmente, cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de inibidor da agregação de aminoácidos, com o anticorpo ou porção de ligação ao antígeno.
136. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128,
129, 130, 131, 132, 133, 134 e 135, caracterizado pelo fato de que compreende combinação do anticorpo ou porção de ligação ao antígeno com:
a. cerca de 30 mM a cerca de 80 mM de hidrocloreto de Larginina;
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b. cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de L-fenilalanina; c. cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de L-triptofano; d. cerca de 30 mM a cerca de 8( ) mM de hidrocloreto de L- lisina f e. cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de L-leucina; f. cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de L-isoleucina; g. cerca de 20 mM a cerca de 50 mM de L-valina; ou h. qualquer sua combinação. 137. Método f de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109 , 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122 , 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135 e 136, caracter: Ízado pelo fato
de que compreende combinação do anticorpo ou porção de ligação ao antígeno com somente um inibidor da agregação de aminoácidos.
138. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136 e 137, caracter: Lzado pelo
fato de que a formulação farmacêutica aquosa compreende o anticorpo e inibidor da agregação de aminoácidos a uma razão molar entre o inibidor da agregação de aminoácidos e o anticorpo de cerca de 10 a 200, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido aromático, opcionalmente, L-fenilalanina.
139. Método, de acordo com a reivindicação 138, caracterizado pelo fato de que a razão molar é cerca de 20 a cerca de 90.
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34/50
140. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128
129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138 e 139, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa compreende o anticorpo e inibidor da agregação de aminoácidos a uma razão molar entre o inibidor da agregação de aminoácidos e o anticorpo anti-RANKL de cerca de 20 a 300, quando o inibidor da agregação de aminoácidos é um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada, opcionalmente, L-arginina.
141. Método, de acordo com a reivindicação 140, caracterizado pelo fato de que a razão molar é cerca de 45 a 180.
142. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97 , 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104 , 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117 , 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130 , 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140 e 141,
caracterizado pelo fato de que o anticorpo ou porção de ligação ao antígeno é combinado com um modificador da tonicidade selecionado do grupo consistindo em: sorbitol, manitol, sacarose, tre-halose, glicerol e suas combinações.
143. Método, de acordo com a reivindicação 142, caracterizado pelo fato de que o modificador da tonicidade compreende sorbitol.
144. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 142 e 143, caracterizado pelo fato de que compreende cerca de 1,0% (p/p) a cerca de 5,0% (p/p) de modificador da tonicidade.
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145. Método, de acordo com a reivindicação 144, caracterizado pelo fato de que compreende cerca de 2,0% (p/p) a cerca de 5,0% (p/p) de sorbitol ou cerca de 3,5% (p/p) a cerca de 5,0% (p/p) de sorbitol ou cerca de 4,0% (p/p) a cerca de 5,0% (p/p) de sorbitol.
146. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91 , 92, 93, 94, 95, 96, 97 , 98 , 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144 e 145, cara cterizado pelo fato de que está isento de
sorbitol e, opcionalmente, isento de qualquer modificador da tonicidade.
147. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90 l, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97 , 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145 e 146, caracterizado pelo fato de que o tensoativo é selecionado do grupo consist indo em: ésteres de ác idos graxos de polioxiet: ileno de sorbitana (p.ex., polissorbato 20,
polissorbato 80) ou um ou mais poliéteres de alquilarila, p.ex., fenol de alquila oxietilado (p.ex., Triton® X-100) ou um ou mais poloxâmeros (p.ex., Pluronics®, p.ex., Pluronic® F68) e suas combinações.
148. Método, de acordo com a reivindicação 147, caracterizado pelo fato de que o tensoativo é um éster de ácidos graxos de polioxietileno de sorbitana.
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36/50
149. Método, de acordo com a reivindicação 148, caracterizado pelo fato de que o tensoativo é polissorbato 20.
150. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 147, 148 e 149, caracterizado pelo fato de que compreende, pelo menos, cerca de 0,004% (p/v) de tensoativo e, opcionalmente, compreendendo menos do que 0,15% (p/v) de tensoativo.
151. Método, de acordo com a reivindicação 150, caracterizado pelo fato de que compreende cerca de 0,005% (p/p) a cerca de 0,015% (p/p) de tensoativo.
152. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97 , 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104 , 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117 , 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130 , 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143 , 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150 e 151 , caracter] Lzado
pelo fato de que compreende combinação do anticorpo ou porção de ligação ao antígeno com um tampão, em que o tampão está centrado, a 25 °C, em uma gama de cerca de pH 4,0 a cerca de pH 5,5.
153. Método, de acordo com a reivindicação 152, caracterizado pelo fato de que o tampão tem um pKa dentro de uma unidade de pH de pH 5,0-5,2 a 25 °C.
154. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 152 e 153, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa compreende cerca de 5 mM a cerca de 60 mM de tampão.
155. Método, de acordo com a reivindicação 154, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa compreende cerca de 5 mM a cerca de 50 mM de tampão.
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156. Método, de acordo com a reivindicação 155, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa compreende cerca de 9 mM a cerca de 45 mM de tampão.
157. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 152, 153, 154, 155 e 156, caracterizado pelo fato de que o tampão é acetato ou glutamato.
158 . Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 88, 89, 90, 91 , 92, 93, 94, 95, 96, 97 , 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104 , 105, 106, 107, 108 , 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117 , 118, 119, 120, 121 , 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130 , 131, 132, 133, 134 , 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143 , 144, 145, 146, 147 , 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154,
155, 156 e 157, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa tem um pH em uma gama de cerca de 5,0 a 5,19.
159. Método, de acordo com a reivindicação 158, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa tem um pH em uma gama de cerca de 5,0 a cerca de 5,15.
160. Método, de acordo com a reivindicação 159, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa tem um pH em uma gama de cerca de 5,0 a cerca de 5,1.
161. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 88, 89, 9C ), 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159 e 160, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêut: ica aquosa tem um pH em uma i gama de 5,0 a cerca
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38/50 de 5,4 ou cerca de 5,0 a cerca de 5,2 ou cerca de 5,0 a menos do que 5,2 ou cerca de 5,0 a 5,19 ou cerca de 5,0 a cerca de 5,15 ou cerca de 5,0 a cerca de 5,1.
162. Método, de acordo com a reivindicação 161, caracterizado
pelo fato de que a formulação farmacêut ica aquosa tem um ; pH de cerca de 5,1. 163. Método, de > acordo com qualquer uma das reivindicações 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161 e 162, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa tem uma viscosic lade que é nao mais do que cerca de 6 cP a 5 °C, opci .onalmente, em que a viscosidade é cerca de 4,5 cP a cerca de 5, 5 cP . 164. Método, de > acordo com qualquer uma das reivindicações 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162 e 163 , caracteri .zado pelo
fato de que a formulação farmacêutica aquosa tem uma viscosidade que é menor do que 13 cP a 25 °C.
165. Método, de acordo com a reivindicação 164, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa tem uma
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39/50 viscosidade em uma gama de cerca de 2,0 cP a cerca de 10 cP, opcionalmente, cerca de 2,5 cP a cerca de 4 cP.
166. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 9( ), 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97 , 98, 99, 100, 101, 102 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163 , 16 4 e 165
caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa tem uma condutividade em uma gama de cerca de 500 pS/cm a cerca de 5500 pS/cm, opcionalmente, em que a condutividade está em uma gama de cerca de 2500 pS/cm a cerca de 5500 pS/cm, quando a formulação compreende um aminoácido compreendendo uma cadeia lateral positivamente carregada, ou em uma gama de cerca de 500 pS/cm a cerca de 2000 pS/cm, quando a formulação compreende um aminoácido
aromático ou nao tem inibidor da agregaçao de aminoácidos. 167 . Método, de acordo c :orr. qualquer uma das reivindicações 88, 89, S )0, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159 , 160, 161, 162, 163, 1 64, 165 e 166, caracteri zado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa tem uma o smolalidade em i jma gama de cerca de 200 mOsm/kg a cerca
de 500 mOsm/kg ou cerca de 225 mOsm/kg a cerca de 400 mOsm/kg ou cerca de 250 mOsm/kg a cerca de 350 mOsm/kg.
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168. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91 , 92, 93, 94, 95, 96, 97 , 98, 99, 100, 101, 102 103, 104 , 105, 106, 107, 108, 109 , 110, 111, 112, 113, 114, 115 116, 117 , 118, 119, 120, 121, 122 , 123, 124, 125, 126, 127, 128 129, 130 , 131, 132, 133, 134, 135 , 136, 137, 138, 139, 140, 141 142, 143 , 144, 145, 146, 147, 148 , 149, 150, 151, 152, 153, 154 155, 156 , 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166 e 167
caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa tem menos do que 2% de espécies de elevado peso molecular (HMWS) e/ou mais do que 98% de pico principal do anticorpo, como medido por SE-UHPLC, após armazenamento a cerca de 2 °C até cerca de 8 °C durante pelo menos 12 meses, 24 meses ou 36 meses.
169. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91 , 92, 93, 94, 95, 96, 97 , 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104 , 105, 106, 107, 108, 109 , 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117 , 118, 119, 120, 121, 122 , 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130 , 131, 132, 133, 134, 135 , 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143 , 144, 145, 146, 147, 148 , 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156 , 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167 e
168, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa tem menos do que 2% de espécies de elevado peso molecular (HMWS) e/ou mais do que 98% de pico principal do anticorpo, como medido por SE-UHPLC, após armazenamento a cerca de 20 °C até cerca de 30 °C durante cerca de 1 mês.
170. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128
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129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167
168 e 169, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa tem menos do que 2% de espécies de elevado peso molecular (HMWS) e/ou mais do que 98% de pico principal do anticorpo, como medido por SE-UHPLC, após um primeiro armazenamento a cerca de 2 °C até cerca de 8 °C durante pelo menos 12 meses, 24 meses ou 36 meses e um segundo armazenamento a cerca de 20 °C até cerca de 30 °C durante cerca de 1 mês.
171. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
88, 89, 90, 91 , 92, 93, 94, 95, 9í i, 97 , 98, 99, 100, 101, 102 103, 104 , 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115 116, 117 , 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128 129, 130 , 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141 142, 143 , 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154 155, 156 , 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167
168, 169 e 170, caracterizado pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa tem menos do que 2% de espécies de elevado peso molecular (HMWS) e/ou mais do que 98% de pico principal do anticorpo, como medido por SE-UHPLC, após armazenamento durante cerca de um mês a 37 °C ou durante 3 meses a 30 °C.
172. Formulação farmacêutica aquosa, estável, caracterizada pelo fato de que é preparada de acordo com qualquer uma das
reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63
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64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102 , 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170 e 171 .
173. Uso da formulação farmacêutica aquosa, conforme definida
em qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4 , 5, 6, 7, 8 , 9, 10 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74
75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84 e 85 e 172, caracterizado pelo fato de que é para tratamento terapêutico de um sujeito.
174. Uso, de acordo com a reivindicação 173, caracterizado pelo fato de que o tratamento terapêutico engloba tratamento ou prevenção de um evento relacionado com o esqueleto (SRE) , tratamento ou prevenção de um tumor de células gigantes do osso, tratamento ou prevenção de hipercalcemia de malignidade, tratamento ou prevenção de osteoporose ou aumento da massa óssea, em um sujeito.
175. Uso, de acordo com a reivindicação 174, caracterizado pelo fato de que o tratamento terapêutico engloba (a) tratamento ou prevenção de um SRE em um sujeito com metástases ósseas de tumores sólidos, (b) tratamento ou prevenção de um SRE em um sujeito que é um adulto ou um adolescente esqueleticamente maduro
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43/50 com tumor de células gigantes do osso que é irressecável ou onde é provável que a ressecção cirúrgica resulte em morbidade grave;
(c) tratamento de hipercalcemia de malignidade refratária à terapia com bifosfonatos em um sujeito; (d) tratamento ou prevenção de um SRE em um sujeito com mieloma múltiplo ou com metástases ósseas de um tumor sólido, (e) tratamento de osteoporose de mulheres pós-menopáusicas com elevado risco de fratura, (f) tratamento para aumentar a massa óssea em mulheres com elevado risco de fratura recebendo terapia inibidora adjuvante de aromatase para o câncer de mama, (g) tratamento para aumentar a massa óssea em homens com elevado risco de fratura recebendo terapia de privação de andrógenos para o câncer da próstata não metastático, (h) tratamento para aumentar a massa óssea em homens
com osteoporose com elevado r isco de fratura, (i) terapia com cálcio ou vitamina D. 176. Método de prevenção de um evento relac ionado com o esqueleto (SRE) em um paciente com sua necessidade, caracteri zado
pelo fato de que compreende admin istraçao de uma quant: idade ef: Lcaz de uma formulação, conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79,
80, 81, 82, 83, 84 e 85 e 172.
177. Método, de acordo com a reivindicação 176, caracterizado pelo fato de que o SRE é selecionado do grupo consistindo em uma
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44/50 fratura patológica, radioterapia ao osso, cirurgia ao osso e compressão da medula espinhal.
178. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 176 e 177, caracterizado pelo fato de que o paciente tem uma metástase óssea de um tumor sólido.
179. Método, de acordo com a reivindicação 178, caracterizado pelo fato de que o tumor sólido é selecionado de câncer da mama, câncer da próstata, câncer do pulmão, câncer de células não pequenas do pulmão e carcinoma de células renais.
180. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 178 e 179, caracterizado pelo fato de que o paciente tem mieloma múltiplo.
181. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 176, 177, 178, 179 e 180, caracterizado pelo fato de que compreende administração de uma quantidade da formulação eficaz para reduzir o telopeptideo N-terminal urinário do marcador de renovação óssea
corrí gido quanto à creatinina (uNTx/Cr), opcionalmente em pelo menos 80% . 182 . Método de tratamento de tumor de células gí .gantes do osso em um paciente com sua necess: Idade, caracterizado pelo fato
de que compreende administraçao de uma quantidade eficaz de uma formulação, conforme definida em qualquer uma das reivindicações
1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78 , 79 , 80, 81 , 82 , 83, 84
e 85 e 172.
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45/50
183. Método, de acordo com a reivindicação 182, caracterizado pelo fato de que o paciente tem tumor de células gigantes do osso que é recorrente, irressecável ou para o qual é provável que a ressecção cirúrgica resulte em morbidade grave.
184. Método de tratamento de hipercalcemia de malignidade em um paciente com sua necessidade, caracterizado pelo fato de que compreende administração de uma quantidade eficaz de uma formulação, conforme definida em qualquer uma das reivindicações
1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78 , 79 , 80, 81 , 82 , 83, 84
e 85 e 172.
185. Método, de acordo com a reivindicação 184, caracterizado pelo fato de que a malignidade é refratária à terapia com bifosfonato.
186. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
184 e 185, caracterizado pelo fato de que compreende administração de uma quantidade da formulação eficaz para reduzir ou manter o cálcio no soro do paciente a um nível menor do que ou igual a cerca de 11,5 mg/dL.
187. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 184, 185 e 186, caracterizado pelo fato de que a formulação compreende o anticorpo anti-RANKL humano a uma concentração de cerca de 120 mg/mL.
188. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186 e 187,
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46/50 caracterizado pelo fato de que compreende administração da formulação em um programa de uma vez a cada quatro semanas.
189. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações
176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187 ou 188, caracterizado pelo fato de que compreende administração da formulação nos dias 8 e 15 do primeiro mês de terapia.
190. Método de tratamento de osteoporose em um paciente com sua necessidade, caracterizado pelo fato de que compreende administração de uma quantidade eficaz de uma formulação, conforme
def inida em qualquer uma l das reivindicações 1, 2 , 3, 4, 5 , 6, 7 8, 9, 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84 e 85 e 172 .
191. Método, de acordo com a reivindicação 190, caracterizado pelo fato de que o paciente é uma mulher pós-menopáusica com elevado risco de fratura.
192. Método, de acordo com a reivindicação 191, caracterizado pelo fato de que o paciente é um homem com elevado risco de fratura.
193. Método de aumento da massa óssea em um paciente com sua necessidade, caracterizado pelo fato de que compreende administração de uma quantidade eficaz de uma formulação, conforme
def inida em qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 8, 9, 10 , 11 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 , 20, 21, 22, 23, 24 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56
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57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72,
73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84 e 85 e 172.
194. Método, de acordo com a reivindicação 193, caracterizado pelo fato de que o paciente tem osteoporose, opcionalmente, em que o paciente é um homem com osteoporose com elevado risco de fratura.
195. Método, de acordo com a reivindicação 194, caracterizado pelo fato de que o paciente é uma mulher com elevado risco de fratura recebendo terapia inibidora adjuvante de aromatase para o câncer da mama.
196. Método, de acordo com a reivindicação 194, caracterizado pelo fato de que o paciente é um homem com elevado risco de fratura recebendo terapia de privação de andrógenos para o câncer de próstata não metastático.
197. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 193, 194, 195 e 196, caracterizado pelo fato de que compreende administração de uma quantidade da formulação eficaz para diminuir a incidência de novas fraturas vertebrais e/ou fraturas não vertebrais.
198. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 193, 194, 195, 196 e 197, caracterizado pelo fato de que compreende administração de uma quantidade da formulação eficaz para diminuir a reabsorção óssea.
199. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 193, 194, 195, 196, 197 e 198, caracterizado pelo fato de que compreende administração de uma quantidade da formulação eficaz para aumentar a densidade óssea no paciente em, pelo menos, uma área selecionada de coluna lombar, quadril total e colo do fêmur.
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48/50
200. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 193, 194, 195, 196, 197, 198 e 199, caracterizado pelo fato de que compreende administração de uma quantidade da formulação eficaz para aumentar a massa óssea no osso cortical e/ou osso trabecular do paciente.
201. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199 e 200, caracterizado pelo fato de que compreende administração de uma quantidade da formulação eficaz para reduzir o marcador da reabsorção óssea C-telopeptideo tipo 1 (CTX) no soro.
202. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200 e 201, caracterizado pelo fato de que compreende administração da formulação em um programa de uma vez a cada seis meses.
203. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201 e 202, caracterizado pelo fato de que compreende administração da formulação em um
volume de 1 mL ou menos. 204 . Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202 e 203, caracterizado pelo fato de que compreende administraçao
da formulação subcutaneamente.
205. Método, de acordo com a reivindicação 204, caracterizado pelo fato de que compreende administração da formulação subcutaneamente à parte superior do braço, parte superior da coxa ou abdômen.
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206. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204 e 205 , caracterizado pelo fato de que o paciente está recebendo um ou ambos de cálcio e vitamina D. 207 . Método de melhoria da estabilidade de uma formulação
farmacêutica aquosa, caracterizado pelo fato de que compreende um anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno, a uma concentração de mais do que 70 mg/mL, compreendendo:
preparação da referida formulação farmacêutica aquosa compreendendo o referido anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno a um pH em uma gama de cerca de 5,0 a menos do que 5,2, em que a referida formulação farmacêutica aquosa demonstra estabilidade melhorada ao pH em uma gama de cerca de 5,0 a menos do que 5,2 em comparação com uma formulação farmacêutica aquosa equivalente que não está a um pH em uma gama de cerca de 5,0 a menos do que 5,2.
208. Método de melhoria da estabilidade de uma formulação farmacêutica aquosa, caracterizado pelo fato de que compreende um anticorpo monoclonal antiativador do receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno compreendendo:
preparação da referida formulação farmacêutica aquosa compreendendo o referido anticorpo monoclonal antiativador do
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50/50 receptor humano do ligando kappa-B do fator nuclear (anti-RANKL) humano ou uma sua porção de ligação ao antígeno em mistura com adição com um inibidor da agregação de aminoácidos, em que a referida formulação farmacêutica aquosa demonstra estabilidade melhorada com o inibidor da agregação de aminoácidos em comparação com uma formulação farmacêutica aquosa equivalente sem o inibidor da agregação de aminoácidos.
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Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113365658A (zh) * 2018-11-16 2021-09-07 三星Bioepis股份有限公司 包含蛋白质的稳定的液体组合物
CN109374779A (zh) * 2018-12-17 2019-02-22 杭州奕安济世生物药业有限公司 一种蔗糖含量的快速检测方法
CA3129901A1 (en) 2019-02-18 2020-08-27 Eli Lilly And Company Therapeutic antibody formulation
CN111704670B (zh) * 2020-08-18 2020-11-03 迈威(上海)生物科技股份有限公司 重组抗RANKL抗体IgG2型的二硫键异构体及其纯化方法
EP4339207A1 (en) * 2021-05-12 2024-03-20 Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co., Ltd. Antigen binding molecule specifically binding to rankl and ngf, and medical use thereof
AU2022325870A1 (en) 2021-08-12 2024-02-08 Amgen Inc. Antibody formulations
WO2023092177A1 (en) * 2021-11-23 2023-06-01 Adalta Limited Rank-l binding molecules
WO2023179791A1 (en) * 2022-03-24 2023-09-28 Angitia Biomedicines Limited Treatment of musculoskeletal disorders
WO2024064878A1 (en) 2022-09-23 2024-03-28 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for the treatment of melanoma

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4212470B2 (ja) 2001-06-26 2009-01-21 アムジェン フレモント インク． Ｏｐｇｌへの抗体
PE20070684A1 (es) 2005-11-14 2007-08-06 Amgen Inc MOLECULAS QUIMERICAS DE ANTICUERPO RANKL-PTH/PTHrP
MX2009006594A (es) * 2006-12-21 2009-08-12 Amgen Inc Formulaciones de ph regulado y estables que contienen polipeptidos.
US7951368B2 (en) * 2007-06-25 2011-05-31 Amgen Inc. Compositions of specific binding agents to hepatocyte growth factor
BRPI0908361A2 (pt) 2008-02-07 2015-04-07 Amgen Inc Seringas previamente cheias contendo composição e métodos de preparação das mesmas e de estabilização de agente de ligação específico em composição.
AR073072A1 (es) 2008-08-19 2010-10-13 Regeneron Pharma Anticuerpos humanos para el ligando del activador del receptor de nf-kb (rankl) humano
US9265834B2 (en) 2009-03-05 2016-02-23 Ablynx N.V. Stable formulations of polypeptides and uses thereof
CN102946858B (zh) 2010-05-10 2015-09-30 英塔斯制药有限公司 含有免疫球蛋白Fc的多肽的液体制剂
EP2433644A1 (en) 2010-09-22 2012-03-28 IMBA-Institut für Molekulare Biotechnologie GmbH Breast cancer therapeutics
JP2014510152A (ja) * 2011-04-07 2014-04-24 グラクソスミスクライン・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー 粘度が低減された処方物
CA2951856A1 (en) 2011-10-28 2013-05-02 Integritybio Inc. Protein formulations containing amino acids
TWI679019B (zh) 2013-04-29 2019-12-11 法商賽諾菲公司 抗ｉｌ－４／抗ｉｌ－１３之雙特異性抗體調配物
CN103965357B (zh) 2013-12-31 2016-08-17 嘉和生物药业有限公司 一种抗人rankl抗体
US20150274819A1 (en) 2014-03-03 2015-10-01 La Jolla Biologics, Inc. Stable aqueous recombinant protein formulations
EP3139960B1 (en) 2014-05-07 2024-01-17 Takeda Pharmaceutical Company Limited Liquid formulation comprising gm-csf neutralizing compound

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