BR112018001002B1

BR112018001002B1 - Composição antimicrobiana com eficácia contra endósporos

Info

Publication number: BR112018001002B1
Application number: BR112018001002-2A
Authority: BR
Inventors: Matthew F. Myntti
Original assignee: Next Science IP Holdings Pty Ltd
Priority date: 2015-07-17
Filing date: 2016-07-18
Publication date: 2022-06-21
Also published as: US20190014777A1; JP2024023387A; EP3337325A4; AU2016342092A1; AU2016342092B2; EP3337325A2; EP4011210A1; CN107920532A; US20210176987A1; CA2992543C; US11723361B2; CA2992543A1; BR112018001002A2; WO2017069820A2; WO2017069820A3; HK1253401A1; JP2018521134A; US10827750B2

Abstract

Uma composição esporicida possui um pH moderadamente baixo e inclui pelo menos um ácido oxidante e o produto de dissociação de pelo menos um agente oxidante inorgânico. Concentrações de soluto efetivas muito altas podem melhorar a eficácia da composição. As formas de modalidade da composição podem ser aplicadas a uma superfície e seres absorvidas no endósporo, de forma final exterminando pelo menos algumas dessas bactérias na forma de endósporo maduro. A superfície sendo tratada pode ser uma superfície inanimada, especificamente uma superfície rígida ou de um utensílio médico.

Description

REFERÊNCIA CRUZADA AOS PEDIDOS RELACIONADOS

[001] Este pedido internacional reivindica o benefício dos Pedidos de Patente Provisórios US números 62/194.141 e 62/194.210, depositados em 17 de julho de 2015 e 18 de julho de 2015, respectivamente, cujas descrições são aqui incorporadas como referência.

ANTECEDENTES

[002] Ao contrário de um verdadeiro esporo, um endósporo não é uma progênie de outro organismo vivo. No entanto, os termos "esporo" e "endósporo" são usados indiferentemente no presente documento.

[003] Uma bactéria vegetativa é uma que pode crescer se alimentar e se reproduzir. Quando os nutrientes se tornam escassos, certas bactérias vegetativas iniciam um processo denominado "esporulação", onde assumem uma forma reduzida e latente que lhes permite sobreviver sem nutrientes e lhes dá resistência à radiação UV, dissecação, temperaturas elevadas, congelamento extremo e desinfetantes químicos. Logo após as condições ambientais voltarem a ser favoráveis ao crescimento vegetativo, tais bactérias podem sair do estado latente ("germinação de esporos") com a reidratação do núcleo de esporos, o hidrolisação do córtex, o revestimento sendo expelido e, em última instância, a replicação do DNA sendo iniciada. Para obter informações adicionais sobre esses processos complexos, o leitor interessado pode pesquisar qualquer um de uma variedade de textos, como, por exemplo, J.C. Pommerville, Fundamentals of Microbiology, 10a ed. (Jones & Bartlett Learning, Burlington, Massachusetts).

[004] No início da etapa de esporulação, uma bactéria vegetativa denominada "célula-mãe" faz uma cópia do seu DNA e, em seguida, forma uma membrana em torno da nova cópia do DNA, com a seção da célula com o DNA copiado completamente rodeado por uma membrana sendo referido como um "foresporo". O próximo estágio morfológico da esporulação é o "engolfamento" do foresporo por sua célula- mãe, um processo que é análogo à fagocitose, quando o engolfamento está completo, o foresporo está inteiramente rodeado por suas membranas internas e externas e livre no citoplasma da célula mãe. Em torno deste núcleo do esporo são montadas várias estruturas de proteção, cuja conclusão resulta em uma endósporo maduro, que é liberado depois que a célula mãe é rompida.

[005] Endósporos têm uma estrutura de várias camadas, todas as quais protegem o núcleo. O núcleo é protegido por uma série de camadas, apresentadas abaixo na Tabela 1, de dentro para fora:

O revestimento interno dos esporos é solúvel em soluções alcalinas, mas o revestimento externo dos esporos é resistente à hidrólise de álcalis, provavelmente devido significativamente em parte às suas várias ligações dissulfureto (-S-S-).

[006] Os esporos são extremamente difíceis de erradicar e estão envolvidos na disseminação de doenças como a infecção por Clostridium difficile (C. diff) e o antraz.

[007] C. difficile é uma bactéria Gram-positiva, formadora de esporos, encontrada frequentemente em instalações de saúde e é a causa de diarreia associada aos antibióticos. A infecção por C. difficile é um problema crescente, afetando centenas de milhares de pessoas a cada ano, matando uma parcela significativa dos afetados. Os esporos de C. difficile são resistentes à maioria dos métodos rotineiros de limpeza de superfícies, permanecendo viáveis no ambiente por longos períodos de tempo.

[008] O antraz é uma doença grave, geralmente letal, que afeta humanos e animais, causada pela bactéria Bacillus anthracis (B. anthracis), os quais esporos podem ser produzidos in vitro e utilizados como arma biológica. O Anthrax não se espalha diretamente de um animal infectado ou pessoa para outro, em vez disso, é espalhado por esporos.

[009] Os compostos esporostáticos não são esporicidas, ou seja, não matam esporos; em vez disso, eles inibem a germinação de esporos ou fazem com que os esporos germinados cresçam anormalmente. Os esporos podem sobreviver à exposição a estes compostos e depois crescem após os compostos esporostáticos já não estarem presentes. Os compostos esporostáticos incluem fenóis e cresóis, ácidos orgânicos e ésteres, alcoóis, compostos de amônia quaternária, biguanidas e compostos organomercúricos. Determinados desses compostos esporostáticos podem ser marginalmente esporicidas em altas concentrações; vide, por exemplo, A.D. Russell, “Bacterial Spores and Chemical Sporicidal Agents,” Clinical Microbiology Reviews, pp. 99119 (1990)) quanto as concentrações relativas de certos compostos esporostáticos necessárias para atingir qualquer eficácia esporicida.

[010] As opções de tratamento de esporos comumente empregadas incluem aldeídos, particularmente gluteraldeído e formaldeído; agentes de liberação de cloro incluindo Cl2, hipoclorito de sódio, hipoclorito de cálcio e agentes redutores de cloro tais como dicloroisocianurato; iodo e iodóforos; peroxigenados incluindo peróxido de hidrogênio e ácido peracético; gases como óxido de etileno, óxido de etil e ozônio; e β-propiolactona. Os mecanismos de suas atividades contra os esporos não são particularmente bem compreendidos, embora, em todos os casos, a atividade seja limitada pela permeabilidade da (s) molécula (s) ativa (s) através das camadas protetoras do esporo. Esta necessidade de penetrar nas várias camadas de proteção significa que os esporos devem ser expostos a esses produtos por longos períodos de tempo em altas concentrações.

[011] As Patentes US números 8 940 792 e 9 314 017, bem como Patentes US Publicadas números 2010/0086576, 2013/0272922, 2013/0079407 e 2016/0073628 descrevem composições antimicrobianas e suas várias utilizações. O núcleo e o córtex (incluindo a membrana cortical) de um esporo são suscetíveis à dissolução e lise pelos tipos de composições de alta osmolaridade descritas nestes documentos. No entanto, tais composições não foram consideradas particularmente eficazes contra os esporos, provavelmente devido a uma capacidade limitada de romper e depois penetrar nos revestimentos de esporos externos e internos.

[012] É necessária uma composição que seja capaz de penetrar nas várias defesas de endósporos e exterminar as bactérias nos mesmos. Tal composição preferencialmente seria eficaz contra endósporos de bactérias, como C. difficile e B. anthracis, enquanto não apresentaria preocupações de toxicidade aos seres humanos que manipulam ou contatam a mesma.

SUMÁRIO

[013] Em um aspecto é proporcionada uma composição que pode exterminar uma variedade de bactérias formadoras de endósporo, enquanto na forma endósporo maduro. As formas de realização da composição são eficazes contra as várias defesas das bactérias na forma de endósporo, especificamente, as ligações dissulfureto podem ser clivadas, a hidrofobicidade intrínseca pode ser superada, o peptidoglicano pode ser interrompido e a membrana central e cortical pode ser lisada.

[014] A composição é ácida, mas tem um pH > 1,5 e inclui componentes de solvente e soluto, sendo este último incluindo pelo menos um ácido oxidante e o produto de dissociação de pelo menos um agente oxidante eletrolítico. Em certas formas de realização, a composição também pode incluir um ou mais de um líquido orgânico, um agente umectante (particularmente um agente tensoativo iônico) e qualquer um de uma variedade de eletrólitos não oxidantes. Vantajosamente, a composição não precisa incluir um agente antimicrobiano ativo para ser esporicida.

[015] A composição possui uma concentração efetiva de soluto de pelo menos 1,0 Osm/L, tipicamente pelo menos 1,5 Osm/L e muitas vezes até maior, até o limite de solubilidade do componente de soluto no componente solvente.

[016] Também é fornecido um método de tratamento de uma superfície. O método envolve a aplicação de uma forma de realização da composição anterior à superfície e deixando que a composição seja absorvida no endósporo e extermine pelo menos algumas dessas bactérias na forma de endósporo maduro. A superfície a ser tratada pode ser uma superfície inanimada, particularmente uma superfície dura, e vantajosamente uma superfície dura em uma instalação de saúde.

[017] As formas de realização da composição, quando utilizadas em conjunto com testes como o padrão ASTM E2197-1 1 e Método Oficial AO AC 966.04, podem fornecer resultados positivos (passando) em prazos comercialmente relevantes. Por exemplo, o tratamento desinfetante que usa funcionários de limpeza das superfícies duras (inanimadas) pode ser efetuado em menos de 20 minutos, enquanto o tratamento de esterilização de instrumentos médicos pode ser efetuado em menos de 4 horas.

[018] Outros aspectos da invenção serão evidentes para o versado na técnica a partir da descrição detalhada que se segue. Para ajudar a entender essa descrição, certas definições são fornecidas imediatamente abaixo, e estas são destinadas a serem aplicadas, a menos que o texto circundante indique explicitamente uma intenção contrária; "compreendendo" significa incluindo, mas não sendo limitado aos ingredientes listados ou etapas. "consistindo em" significa incluindo apenas os ingredientes listados (ou etapas) e pequenas quantidades de aditivos ou adjuvantes inativos; "consistindo essencialmente em" significa que inclui apenas os ingredientes listados (ou etapas), quantidades menores (menos de 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,25% ou 0,1%) de outros ingredientes que complementam atividade esporicida e/ou proporcionam um efeito secundário (por exemplo, antienevoamento, remoção do sujidade, etc.) que é desejável tendo em vista o uso final pretendido e/ou aditivos ou adjuvantes inativos; "poliácido" significa um composto possuindo pelo menos dois grupos carboxila e especificamente inclui ácidos dicarboxílicos, ácidos tricarboxílicos, etc.; "pH" significa o valor negativo do logaritmo da base 10 de [H+], conforme determinado por um método de medição aceitavelmente confiável, tal como um medidor de pH adequadamente calibrado, uma curva de titulação contra um padrão conhecido ou semelhante; "pKa" significa o valor negativo do logaritmo da base 10 da constante de dissociação de ácido de um composto particular; "E0 vermelho" significa a tensão padrão para uma meia reação de redução na água a 25°C; "tampão" significa um composto ou mistura de compostos com capacidade para manter o pH de uma solução à qual é adicionado dentro de limites relativamente estreitos; "precursor de tampão" significa um composto que, quando adicionado a uma mistura contendo um ácido, resulta num tampão; "eletrólito" significa um composto que exibe alguma dissociação quando adicionado à água; "eletrólito não oxidante" significa um eletrólito diferente de um que pode atuar como agente oxidante; "cloreto de benzalcônio" se refere a qualquer composto definido pela seguinte fórmula geral:

em que R3 é um grupo alquila C8-C18, ou qualquer mistura de tais compostos; "concentração eficaz de soluto" é uma medida da propriedade coligativa resultante do número de mols de moléculas (de não eletrólito) ou íons (de eletrólitos) presentes em uma dada solução volumétrica, muitas vezes apresentados em unidades de osmols por litro; "δp" é a força intermolecular dipolar, parâmetro de solubilidade de Hansen (HSP), com o valor de uma solução ou mistura de solventes sendo calculada por:

onde δd é a energia da força intermolecular dipolar para o componente solvente i, Xdi é a porcentagem do componente solvente i em relação à quantidade total de componentes solventes e n é o número total de componentes solventes; "oxiácido" significa um ácido mineral que contém oxigênio; "substituído" significa contendo um heteroátomo ou funcionalidade (por exemplo, grupo hidrocarbila) que não interfere com a finalidade pretendida do grupo em questão; "micróbio" significa qualquer tipo de microrganismo incluindo, mas não limitado às bactérias, vírus, fungos, viroides, Príons e semelhantes; "agente antimicrobiano" significa uma substância que tem a capacidade de causar uma redução maior que 90% (1 log) no número de um ou mais micróbios; "agente antimicrobiano ativo" significa um agente antimicrobiano que é eficaz apenas ou principalmente durante as partes ativas do ciclo de vida, por exemplo, divisão celular, de um micróbio; "germicida" significa uma substância que é letal para um ou mais tipos de microrganismos nocivos; "desinfetante" significa uma substância que é letal para um ou mais tipos de bactérias; "desinfetante de alto nível", um desinfetante que é capaz de exterminar todas as bactérias, exceto pequenas quantidades de bactérias na forma de endósporo; "esterilizadora" significa uma substância capaz de eliminar pelo menos uma redução de 6 log (99,9999%) de todos os micróbios, independentemente da forma; "tempo de contato" significa a quantidade de tempo em que uma composição pode entrar em contato com uma superfície e/ou uma endósporo em tal superfície; "superfície dura" significa qualquer superfície que não seja porosa aos fluidos e, na maioria dos casos, não deformável; e "cuidados de saúde" significa envolvido ou ligado à manutenção ou restauração da saúde do corpo ou da mente.

[019] Ao longo deste documento, a menos que o texto circundante indique explicitamente uma intenção contrária, todos os valores fornecidos na forma de porcentagens são peso/volume, ou seja, gramas de soluto por litro de composição. A (s) porção (ões) relevante (s) de qualquer Patente especificamente mencionada e/ou Pedido de Patente publicado são incorporados ao presente documento como referência.

DESCRIÇÃO DETALHADA DE FORMAS DE REALIZAÇÃO ILUSTRATIVAS

[020] A composição esporicida é descrita primeiro em termos de suas propriedades e componentes, muitos dos quais estão amplamente disponíveis sendo relativamente baratos e, em seguida, em termos de determinados usos.

[021] O componente solvente da composição tipicamente inclui uma quantidade significativa de água. Em relação ao seu volume total, uma composição geralmente inclui até 20%, 25%, 30%, 33%, 35%, 40%, 45%, 50%, ou mesmo 55% (todos v/v). Em uma base por litro, uma composição geralmente inclui de -50 a -500 mL, geralmente de -75 a - 475 mL, mais comumente de -100 a -450 mL, geralmente de - 125 a -425 mL, tipicamente de -150 a -400 mL, e mais tipicamente 250 ± 50 mL de água. A água não precisa ser tratada especialmente (por exemplo, destilada e/ou deionizada), embora a preferência possa certamente ser dada a água que não interfira com o efeito antimicrobiano pretendido da composição.

[022] O componente solvente da composição geralmente inclui pelo menos um líquido orgânico e, em algumas formas de realização, é dada preferência aos líquidos orgânicos com valores δp inferiores aos da água (δp ~ 16,0 MPa1/2) . Quando pelo menos um líquido orgânico está presente no componente solvente, o valor δ do componente solvente global geralmente é inferior a 16,0, não superior a 15,6, não superior a 15,2, não superior a 15,0, não superior a 14,6 ou não superior a 14,0 MPa1/2. Em algumas formas de realização, o valor δp do componente solvente global pode variar de 13,1 a 15,7 MPa1/2, de 13,3 a 15,6 MPa1 /2, de 13,5 a 15,5 MPa1 /2, e mesmo de 13,7 para 15,4 MPa1 /2.

[023] O (s) líquido orgânico geralmente está presente em concentrações de até 60%, geralmente 5 a 50%, mais comumente 10 a 45%, ainda mais comumente 15 a 40%, e tipicamente 20 a 35% (todos w/v, com base no volume total do componente solvente).

[024] A quantidade de um determinado líquido orgânico (ou mistura de líquidos orgânicos) a ser adicionada à água pode ser calculada usando a fórmula (I) se um valor δp for conhecido. Da mesma forma, um valor δp projetado pode ser calculado usando a fórmula (I) se a quantidade de líquido(s) orgânico e seu valor δp individual forem conhecidos.

[025] O componente solvente pode consistir, ou consistir essencialmente, apenas em água ou apenas em um ou mais líquidos orgânicos, sendo dada preferência a misturas de espécies do mesmo gênero de líquidos orgânicos, por exemplo, dois éteres ou dois alcoóis em vez de um éter e um álcool. Em certas formas de realização preferidas, o componente solvente pode consistir, ou consistir essencialmente em água e um líquido orgânico, de preferência um com um valor δp inferior a 15,5 MPa1 /2. Ainda noutras formas de realização, o componente solvente pode consistir ou consistir essencialmente em água e dois ou mais líquidos orgânicos, com o componente solvente resultante com um valor δp que pode ser calculado utilizando a fórmula (I); novamente, é dada preferência a misturas de espécies do mesmo gênero de líquidos orgânicos, por exemplo, dois éteres ou dois alcoóis em vez de um éter e um álcool.

[026] Em relação aos líquidos orgânicos que podem ser utilizados no componente solvente, são preferidos aqueles que são miscíveis uns com os outros e/ou água. Exemplos não limitativos de líquidos orgânicos potencialmente úteis incluem cetonas tais como acetona, metilbutilcetona, metiletilcetona e cloroacetona; acetatos tais como acetato de amila, acetato de etila e acetato de metila; (met) acrilatos e derivados tais como acrilamida, metacrilato de laurila e acrilonitrila; compostos de arila tais como benzeno, clorobenzeno, fluorbenzeno, tolueno, xileno, anilina e fenol; alcanos alifáticos tais como pentano, isopentano, hexano, heptano e decano; alcanos halogenados tais como clorofórmio, dicloreto de metileno, cloroetano e tetracloroetileno; alcanos cíclicos tais como ciclopentano e cicloexano; e polióis tais como etilenoglicol, dietilenoglicol, etil glicol, hexilenoglicol e glicerol. Ao selecionar tais líquidos orgânicos para utilização no componente solvente da composição, considerações possíveis incluem evitar aqueles que contêm um grupo funcional que reagirá com o (s) ácido (s) e, opcionalmente, sal (s) empregados na composição e favorecendo aqueles que possuem limites mais elevados de pré-aprovação regulamentar.

[027] Líquidos orgânicos preferidos incluem éteres e alcoóis devido à sua baixa toxicidade tecidual e não agressão ao meio ambiente. Estes podem ser adicionados em concentrações até o limite de solubilidade dos outros ingredientes na composição.

[028] Os líquidos à base de éter que podem ser utilizados no componente solvente incluem aqueles definidos pela seguinte fórmula geral R1(CH2)xO-R2-[O(CH2)z]yZ (II) onde x é um número inteiro de 0 a 20 (opcionalmente incluindo, onde 2 < x < 20, um ou mais pontos de insaturação etilênica), y é 0 ou 1, z é um número inteiro de 1 a 4, R2 é um grupo alquileno C1-C6 linear ou ramificado, R1 é um grupo metila, isopropila ou fenila e Z é um grupo hidroxila ou metóxi. Exemplos não limitativos de éteres de glicol (compostos de fórmula (II) em que Z é OH) que podem ser utilizados no componente de solvente são apresentados abaixo na Tabela 2. Tabela 2: Éteres de glicol representativos, com variáveis de fórmula (II) e valores de δp

* inclui insaturação na posição 9

[029] Alcoóis cíclicos e acíclicos C1-C16 (ambos lineares e ramificados, ambos saturados e não saturados), incluindo opcionalmente um ou mais pontos de insaturação etilênica e/ou um ou mais heteroátomos que não o oxigênio alcoólico, tal como um átomo de halogênio, um nitrogênio de amina, e semelhantes, podem ser utilizados como um líquido orgânico no componente solvente da composição. Exemplos não limitativos de exemplos representativos são compilados na tabela a seguir. Tabela 3: Alcoóis representativos, com valores δp

[030] Para mais informações sobre componentes de solventes orgânicos contendo líquido, o leitor será direcionado à Patente US Publicada número 2016/0073628.

[031] A composição é ácida, mais particularmente tendo um pH não superior a 4, e certas formas de realização podem ter um pH não superior a 3,8, 3,7, 3,6, 3,5, 3,4, 3,3, 3,2, 3,1, 3,0, 2,9, 2,8, 2,7, 2,6, 2,5, 2,4, 2,3 ou mesmo 2,2. A composição tem um pH de pelo menos 1,5, geralmente pelo menos 1,75, e tipicamente pelo menos 2,0. São previstos intervalos de valores de pH empregando cada um dos limites inferiores em combinação com cada um dos limites superiores. As formas de realização da composição podem ter valores de pH de 2,75 ± 1,15, 2,70 ± 1,05, 2,65 ± 1,0, 2,60 ± 0,75, 2,55 ± 0,60, 2,50 ± 0,55 e 2,45 ± 0,45.

[032] A acidez pode ser obtida adicionando-se ao componente solvente (ou vice-versa) um ou mais ácidos. Podem ser utilizados ácidos fortes (minerais) tais como HC1, H2SO4, H3PO4, HNO3, H3BO3 e semelhantes ou ácidos orgânicos, particularmente poliácidos orgânicos. Exemplos de ácidos orgânicos incluem ácidos monoproticos tais como ácido fórmico, ácido acético e variantes substituídas (por exemplo, ácido hidroxiacético, ácido cloroacético, ácido dicloroacético, ácido fenilacético e semelhantes), ácido propanoico e variantes substituídas (por exemplo, ácido láctico, ácido pirúvico e outros), qualquer um de uma variedade de ácidos benzoicos (por exemplo, ácido mandélico, ácido cloromandélico, ácido salicílico e semelhantes), ácido glicurônico e semelhantes; ácidos dipróticos tais como ácido oxálico e variantes substituídas (por exemplo, ácido oxâmico), ácido butanodióico e variantes substituídas (por exemplo, ácido málico, ácido aspártico, ácido tartárico, ácido citramalico e semelhantes), ácido pentanodióico e variantes substituídas (por exemplo, ácido glutâmico, ácido 2-cetoglutárico e semelhantes), ácido hexanodióico e variantes substituídas (por exemplo, ácido múcico), ácido butenodióico (isômeros cis e trans), ácido iminodiacético, ácido ftálico e semelhantes; ácidos triproticos tais como ácido cítrico, ácido 2-metilpropano-l, 2,3-tricarboxílico, ácido benzenotricarboxílico, ácido nitrilotriacético e semelhantes; ácidos tetraproticos tais como ácido pré- amínico, ácido piromelítico e semelhantes; e até mesmo ácidos de grau mais elevado (por exemplo, penta-, hexa, hepta-prótico, etc.). Quando é utilizado um ácido tri, tetra ou mais, um ou mais dos prótons de carboxila podem ser substituídos por átomos ou grupos catiônicos (por exemplo, íons de metal alcalino), que podem ser iguais ou diferentes.

[033] Devido à natureza de algumas das defesas resultantes das várias camadas presentes nos endósporos, a composição deve incluir pelo menos um ácido oxidante. Muitos oxiácidos, como os ácidos perclórico, clorado, cloroso, hipocloroso, perssulfurico, sulfúrico, sulfuroso, hipossulfuroso, pirosulfúrico, dissulfuroso, tiossulfuroso, pernítrico, nítrico, nitroso, hiponitroso, percrômico, crômico, dicrômico, permangânico, mangânico, perfosfórico e fosfórico, fosforoso, hipofosforoso, periódico, i ódico, iodoso, etc., são considerados ácidos oxidantes. Os ácidos oxidantes orgânicos incluem, mas não estão limitados ao ácido peracético, ácido peroxálico e ácido diperoxálico.

[034] Os ácidos oxidantes preferidos são aqueles que têm valores de pKa relativamente elevados (isto é, não são considerados ácidos particularmente fortes) e potenciais padrão positivos (E0vermelho). O primeiro permite a produção de uma composição que tem um valor de pH que não é muito baixo, ou seja, abaixo de ~1,5, de preferência não inferior a ~1,75, mais preferencialmente não inferior a ~2, e o mais preferencialmente não inferior a ~2,2, de modo que a composição pode ser usada sem medidas de proteção extremas por aqueles encarregados do manuseio e aplicação às superfícies e/ou destruição dis componentes de artigos a serem tratados. Um potencial padrão positivo permite que o ácido tenha capacidade de oxidação suficiente para permitir a superação ou contenção de certas defesas de endósporos, como, por exemplo, oxidação de ligações dissulfureto e polímeros de proteínas no revestimento de endósporo, o que permite que o revestimento de esporos externo seja violado.

[035] Os valores preferidos de pKa são maiores do que ~ 1, maiores que ~1,5, maiores do que 2, maiores que 2,5, maiores que -3, maiores que -3,5, maiores que -4, maiores que -4,5, superiores a -5, e até superiores a ~5,5. Os ácidos com valores mais baixos de pKa podem ser utilizados se forem tomadas outras medidas para garantir a conformidade com as propriedades desejadas da composição, como a faixa de pH (discutida acima) e a concentração efetiva de soluto (discutida abaixo).

[036] Os valores de E0 vermelho preferidos são aqueles que são pelo menos +0,20 V, pelo menos +0,25 V, pelo menos +0,33 V, pelo menos +0,40 V, pelo menos +0,50 V, pelo menos +0,60 V, pelo menos +0,67 V , pelo menos +0,75 V, pelo menos +0,80 V, pelo menos +0,90 V, pelo menos +1,00 V, pelo menos +1,10 V, pelo menos +1,20 V, ou mesmo pelo menos +1,25 V.

[037] Alguns ácidos oxidantes não são particularmente estáveis em soluções aquosas. Consequentemente, a provisão de uma composição com um ácido oxidante preparado in vitro pode ser vantajosa. Por exemplo, numa forma de realização preferida, para um componente solvente de uma composição pode ser proporcionado ácido acético e peróxido de hidrogênio que, quando contatados, formam de forma reversível ácido peracético.

[038] A quantidade de qualquer dado ácido utilizado pode ser determinada a partir do pH alvo de uma determinada composição e o (s) valor (s) pKa dos ácidos escolhidos tendo em vista o tipo e as quantidades de composto (s), se houver, utilizadas para atingir a concentração de soluto desejada na composição. A seguir são fornecidas mais revelações sobre osmolaridade e os tipos de compostos de ajuste de osmolaridade.

[039] Também se encontra presente no componente de soluto da composição um agente oxidante eletrólito que não contém quaisquer átomos de hidrogênio ativo quando submetido a uma determinação Zerewitinoff. Exemplos não limitantes de eletrólitos potencialmente úteis, de preferência inorgânicos, agentes oxidantes incluem compostos que incluem ânions tais como manganato, permanganato, peroxoquromato, cromato, dicromato, peroximonossulfato e semelhantes. (Alguns desses eletrólitos podem afetar o pH, portanto, uma composição formulada para ter um determinado pH pode exigir ajuste após a adição do (s) agente (s) oxidante. São aqueles compostos com valores de E0vermelho de pelo menos +1,25 V, de preferência pelo menos +1,5 V, mais preferencialmente pelo menos +1,75 V, ainda mais preferencialmente pelo menos +2,0 V e mais preferencialmente pelo menos +2,25 V.

[040] Os agentes oxidantes de eletrólitos geralmente podem ser adicionados até seus limites individuais de solubilidade, embora a quantidade máxima seja geralmente da ordem de 30 g por litro de composição total. Os intervalos exemplificativos de agente (s) oxidante (s) eletrolítico são de ~2 a ~25 g/L, ~ 3 a ~21 g/L, ~ 4 a ~18 g/L, ~5 a ~16 g/L e ~6 a ~14 g/L. Quantidades exemplificativas de agente (s) oxidante eletrolítico são 17,5 ± 12 g/L, 15 ± 9 g/L, 12,5 ± 6 g/L e 10 ± 3 g/L.

[041] Uma vez que o (s) ácido e o (s) agente oxidante são adicionados a um componente solvente que contém água (ou vice-versa), cada um dissocia-se pelo menos parcialmente.

[042] Uma composição que inclui apenas um componente solvente e um componente de soluto que consiste, ou consiste essencialmente em um ou mais ácidos oxidantes e um ou mais agentes oxidantes eletrolíticos podem ter eficácia contra endósporos, ou seja, pode resultar em alguns ou todos os endósporos sendo tornados incapazes de retornar a um estado vegetativo. No entanto, uma composição que inclui um componente de soluto que inclui subcomponentes adicionais pode ter eficácia aprimorada em certas circunstâncias.

[043] Em certas formas de realização, a concentração efetiva de soluto da composição pode ser relativamente alta. Muitas vezes, a eficácia aumenta à medida que aumenta a concentração efetiva de soluto (osmolaridade). A presença de uma abundância de solutos garante que uma quantidade suficiente esteja presente para induzir uma alta pressão osmótica através da membrana cortical, levando a lise.

[044] Esta eficácia é independente da identidade ou natureza particular dos compostos individuais do componente de soluto, embora as moléculas menores sejam geralmente mais eficazes do que moléculas maiores devido à capacidade do solvente (isto é, a capacidade de incluir (tipicamente) moléculas menores numa determinada quantidade de componente solvente, do que uma quantidade equimolar de moléculas maiores) e facilidade de transporte através das membranas corticais.

[045] Qualquer um dos vários solutos pode ser usado para aumentar a osmolaridade da composição.

[046] Uma abordagem para alcançar uma osmolaridade aumentada da composição é adicionando grandes quantidades de eletrólitos não oxidantes, particularmente compostos iônicos (sais); vide, por exemplo, Patente US número 7.090.882. Como o ácido oxidante e o agente oxidante inorgânico, os eletrólitos não oxidantes se dissociam após serem introduzidos em um componente solvente que inclui água.

[047] Quando um ou mais ácidos orgânicos são utilizados na composição, outra abordagem para aumentar a osmolaridade sem aumentar o pH da composição após um alvo desejado envolve a inclusão de sal ou de um ou mais dos ácidos ou o (s) sal (s) de um ou mais outros ácidos orgânicos. Tais compostos, após a dissociação, aumentam a quantidade efetiva de solutos na composição sem afetar muito a concentração molar de íons hidrônio enquanto, simultaneamente, fornecem um sistema tampão na composição.

[048] Por exemplo, onde a composição inclui um ácido, uma fração até um excesso de muitas vezes (por exemplo, 3 x a 10x, pelo menos 5x ou mesmo pelo menos 8x) de um ou mais sais desse (ou outro) ácido também pode ser incluída. Não se acredita que a identidade da porção de contra-cátion do sal seja particularmente crítica, com exemplos comuns, incluindo íons de amônio e metais alcalinos. Quando se utiliza um poliácido, todos ou menos que todos os átomos de H dos grupos carboxila podem ser substituídos por átomos ou grupos catiônicos, que podem ser iguais ou diferentes. Por exemplo, o citrato de mono-, di e trissódio todos constituem precursores de tampão potencialmente úteis, utilizados em conjunto com ácido cítrico ou outro ácido orgânico. No entanto, como o citrato trissódico tem três locais básicos disponíveis, possui uma capacidade teórica de tampão até 50% maior que a do citrato dissódico (que tem dois desses locais) e até 200% maior que a citrato de sódio (que possui apenas um tal site).

[049] Independentemente de como alcançada, a concentração efetiva de soluto da composição é de pelo menos 1,0 Osm/L, geralmente pelo menos 1,25 Osm/L, freqüentemente pelo menos 1,5 Osm/L, geralmente pelo menos 1,75 Osm/L, mais comumente pelo menos 2,0 Osm/L, tipicamente pelo menos 2,25 Osm/L, mais tipicamente pelo menos 2,5 Osm/L. (Como pontos de comparação, em aplicações biológicas, uma solução salina de 0,9% (em peso), que é ~0,3 Osm/L, tipicamente é considerada ter tonicidade moderada, enquanto que uma solução salina a 3% (em peso) que é ~0,9 Osm/L, geralmente é considerado hipertônico. Em algumas formas de realização, a composição tem uma concentração eficaz de soluto de pelo menos ~3,0, pelo menos ~3,25, pelo menos ~3,5, pelo menos ~3,75, ou mesmo pelo menos ~4,0 Osm/L, sendo o limite superior definido por o limite de solubilidade dos solutos no componente solvente; em algumas formas de realização, o limite superior da concentração efetiva de soluto pode variar tão alto quanto 4,5, 4,75, 5,0, 5,25, 5,5, 5,75, 6,0, 6,25, 6,5, 6,75, 7,0, 7,2, 7,4, 7,6, 7,8, 8,0, 8,2, 8,4, 8,6, 8,8 ou mesmo -9 Osm/L. Os intervalos efetivos de concentração de soluto envolvendo combinações de qualquer um dos limites inferior e superior estabelecidos neste parágrafo também são imaginados. As concentrações eficazes de soluto de composições de acordo com a presente invenção, que se destinam a ser eficazes contra endósporos (isto é, letais), são geralmente superiores às descritas nas Patentes US números 8 940, 792 e 9 314 017, bem como Publicações de Patente US números 2010/0086576, 2013/0272922, 2013/0079407 e 2016/0073628, todos os quais são direcionados geralmente contra bactérias planctônicas e biofilmes.

[050] A concentração efetiva de soluto pode ser calculada usando técnicas conhecidas ou, se desejado, medida usando qualquer uma das várias medidas de propriedades coligativas, como elevação do ponto de ebulição, depressão do ponto de congelamento, pressão osmótica e redução da pressão de vapor.

[051] Ao contrário de muitas das composições descritas nos documentos listados no parágrafo anterior, a presente composição esporicida não requer a inclusão de agente tensoativo no componente de soluto, embora certas formas de realização preferidas incluem um ou mais agentes umectantes que incluem, mas não estão limitados aos agentes tensoativos.

[052] Essencialmente, qualquer material que possui propriedades tensoativas em água pode ser empregado, independentemente da água estar presente no componente solvente da composição, embora se espere que os agentes tensoativos que possuem algum tipo de carga iônica tenham uma eficácia antimicrobiana aprimorada porque tais cargas, quando colocadas em contato com uma bactéria, acredita-se que conduzam a uma interrupção da membrana bacteriana mais efetiva e, em última instância, ao vazamento e lise das células.

[053] Os agente tensoativos polares geralmente são mais eficazes do que os agente tensoativos apolares, sendo os agentes tensoativos iônicos mais eficazes. Para os agente tensoativos polares, os agentes tensoativos aniônicos geralmente são os mais eficazes, seguidos por agentes tensoativos zwiteriônicos e catiônicos, sendo geralmente preferidas moléculas menores em relação às maiores. O tamanho dos grupos laterais ligados à cabeça polar pode influenciar a eficácia dos agentes tensoativos iônicos, com grupos de tamanhos maiores e mais grupos laterais na cabeça polar, potencialmente diminuindo a eficácia dos agentes tensoativos.

[054] Os agentes tensoativos aniônicos potencialmente úteis incluem, mas não estão limitados ao laurilssulfato de amônio, sulfosucinato de dioctila e de sódio, ácido perfluorbutanossulfônico, ácido perfluornonanoico, ácido perfluoroctanossulfônico, ácido perfluorooctanoico, laurilsulfato de potássio, dodexibenzenossulfonato de sódio, sulfato de laureth de sódium, lauroil sarcosinato de sódio, sulfato de mireth de sódio, sulfato de pareth de sódio, estearato de sódio, chenodesoxicolato de sódio, sal de sódio de N- lauroilsarcosina, dodecilsulfato de lítio, sal de sódio do ácido 1-octanossulfônico, hidrato de colato de sódio, desoxicolato de sódio, dodecilssulfato de sódio (SDS), glicodesóxicolato de sódio, laurilssulfato de sódio (SLS) e os fosfatos de alquila apresentados na Patente Us número 6.610.314. SLS é um material particularmente preferido.

[055] Os agentes tensoativos catiônicos potencialmente úteis incluem, mas não estão limitados ao, cloreto de cetilpiridínio (CPC), cloreto de cetil trimetilamônio, cloreto de benzetônio, 5-bromo-5-nitro-l, 3-dioxano, cloreto de dimetildocicadicarbonila, brometo de cetrônio, brometo de diocta-decildimetilamônio, brometo de tretadeciltrimetil amônio, cloreto de benzalcônio (BK), cloreto de hexadecilpiridinio mono-hidratado e brometo de hexadeciltrimetilamônio.

[056] Os agentes tensoativos não iônicos potencialmente úteis incluem, mas não estão limitados ao polioxietileno glicol dodecil éter de sódio, N-decanoil-N- metil glucamina, digitonina, n-dodecil β-D-maltosideo, octil β-D-glicopiranosidio, etoxilato de octilfenol, polioxietileno (8) isooctil fenil éter, monolaurato de polioxietileno sorbitano e polioxietileno (20) sorbitano colamidopropila [dimetil-amônio]-2-hidróoxi-l- propanossulfonato, 3 - [(3-colamidopropil) dimetilamônio] - 1-propanossulfonato, 3- (decildimetilamônio) sal interno do propanossulfonato e N-dodecil-N,N-dimetil-3-amônio-1- propanossulfonato.

[057] Os agentes tensoativos zwitteriônicos potencialmente úteis incluem sulfonatos (por exemplo, 3 - [(3- colamidopropil) dimetilamônio]-1-propanossulfonato), sultaínas (por exemplo, cocamidopropil hidroxissulina), betaínas (por exemplo, cocamidopropil betaína) e fosfatos (por exemplo, lecitina).

[058] Para outros materiais potencialmente úteis, o leitor interessado encontrará uma variedade de outras fontes, incluindo, por exemplo, Patentes US números 4.107.328, 6.953.772, 7.959.943 e 8.940.792.

[059] A (s) quantidade (s) de agente umectante a ser adicionaao à composição está limitada, em certa medida, pela concentração efetiva alvo de soluto e compatibilidade com outros subcomponentes do componente soluto da composição. A quantidade total de agente umectante presente na composição pode variar de pelo menos 0,1%, de pelo menos 0,25%, de pelo menos 0,5%, de pelo menos 0,75% ou de pelo menos 1% até 5%, geralmente até 4%, mais comumente até 3%, e normalmente até 2,5%. Às vezes, as quantidades máximas de certos tipos de agentes umectantes, particularmente agentes tensoativos que podem estar presentes em uma composição para um uso final específico (sem testes específicos, revisão e aprovação) são estabelecidas por regulamentos governamentais.

[060] Se for utilizado mais de um tipo de agente tensoativo, a maior parte preferencialmente é composta de um agente tensoativo iônico, com a proporção de agente tensoativo iônico a aniônico geralmente variando de ~ 2: 1 a ~10: 1, geralmente de ~5: 2 a ~15 : 2, e tipicamente de ~3: 1 a ~7: 1. Adicionalmente, como é conhecido na arte, uma composição não deve incluir tipos de agentes tensoativos que são incompatíveis, por exemplo, aniônicos com catiônicos ou com zwiteriônicos, quer com ânions quer com catiônicos.

[061] A composição antimicrobiana pode incluir uma variedade de aditivos e adjuvantes para torná-la mais acessível para uso em uma aplicação de uso final particular, afetando negativamente sua eficácia de maneira substancial. Os exemplos incluem, mas não estão limitados aos emolientes, fungicidas, fragrâncias, pigmentos, corantes, antiespumantes, agentes espumantes, saborizantes, abrasivos, agentes branqueadores, conservantes (por exemplo, antioxidantes) e semelhantes. Uma lista abrangente de aditivos aprovada pela US Food and Drug Administration está disponível como um arquivo de texto zipado em http: // www.fda.gov/Drugs/InformationOnDrugs/ucml 13978.htm (link ativo a partir da data de depósito deste pedido).

[062] A eficácia da composição não requer a inclusão de um agente antimicrobiano ativo (definido acima) para a eficácia, porém tais materiais podem ser incluídos em certas formas de realização. Exemplos não limitativos de aditivos antimicrobianos ativos potencialmente úteis incluem alcoóis C2-C8 (diferentes ou em adição a qualquer usado como um líquido orgânico do componente solvente) tal como etanol, n-propanol e semelhantes; aldeídos tais como glutaraldeído, formaldeído e oftalaldeído; compostos geradores de formaldeído tais como noxitiol, taurolina, hexamina, ureia-formaldeídos, derivados de imidazolona e semelhantes; anilidas, particularmente triclocarbano; biguanidas tais como clorhexidina e alexidina, bem como formas poliméricas tais como poli (hexametileno biguanida); dicarboximidamidas (por exemplo, propamidina substituída ou não substituída) e os seus sais de isetionato; compostos que contêm ou que liberam átomos de halogênio, tais como, alvejantes, ClO2, sais de dicloroisocianurato, tosilcloramida, iodo (e iodóforos) e semelhantes; prata e compostos de prata, tais como acetato de prata, sulfadiazina de prata e nitrato de prata; fenóis, bisfenóis e halofenóis (incluindo hexaclorofeno e fenoxifenóis tais como triclosan); e compostos de amônio quaternário.

[063] As tabelas a seguir fornecem listas de ingredientes para composições exemplificativas de acordo com a presente invenção, sendo as quantidades proporcionadas em gramas e com água destilada sendo adicionada para levar os ingredientes a um volume de 1 L. Tabela 4: Formulações para composições exemplares

[064] Várias formas de realização da presente invenção foram fornecidas a título de exemplo e não como limitação. Como é evidente a partir das tabelas anteriores, as preferências gerais sobre características, intervalos, limitações numéricas e formas de realização são, na medida do possível, e desde que não sejam interferentes ou incompatíveis, imagináveis como sendo capazes de ser combinadas com outras características, intervalos, preferências gerais, limitações numéricas e formas de realização.

[065] Uma composição de acordo com a presente invenção pretende ser, e na prática é agressivamente antimicrobiana. Os usos previstos estão relacionados a objetos inanimados, como, em particular, superfícies duras, particularmente aquelas comumente encontradas em instalações de saúde.

[066] A composição pode ser aplicada aos objetos inanimados, particularmente a superfícies duras, de diversas maneiras, incluindo derramamento, pulverização ou névoa, através de um dispositivo de distribuição (por exemplo, esfregão, pano, escova, limpeza têxtil, etc.) e semelhantes.

[067] Alternativamente, certos objetos podem ser imersos em uma composição. Isto é particularmente verdadeiro para equipamentos médicos projetados para uso com múltiplos pacientes, como, por exemplo, equipamentos de diálise, qualquer tipo de endoscópios, duodenoscópios, etc., acessórios endoscópicos, como grampos, tesouras e similares, instrumentos manuais, como grampos e fórceps, acessórios cirúrgicos laparoscópicos, ferragens ortopédicas e de cirurgia da coluna vertebral, tais como grampos e gabaritos e similares. Uma vez que a composição da presente invenção tem um [H+] mais moderado do que tratamentos como ácido peracético e alvejante, pode conseguir desinfecção, desinfecção de alto nível ou mesmo esterilização sem efeitos negativos, tais como, por exemplo, degradação polimérica, corrosão metálica, gravura em vidro ou plástico, e similares.

[068] Uma vez aplicados a uma superfície ou objeto, os vários ingredientes da composição atuam em qualquer endósporo presente e evitam ou quebram suas várias defesas. O tempo de contato necessário para uma composição para tratar endósporos (isto é, garantir que não podem retornar a um estado vegetativo) pode variar amplamente, dependendo da composição específica e do uso final pretendido.

[069] Por exemplo, as formas de realização de uma composição destinada a ser aplicada em superfícies duras em um centro de saúde podem atingir pelo menos uma redução de log 3,0, 3,2, 3,4, 3,6, 3,8, 4,0, 4,2, 4,4, 4,6, 4,8, 5,0 ou 5,0 após um tempo de contato de mais de 1200 segundos, não mais de 1050 segundos, não mais do que 900 segundos, não mais de 840 segundos, não mais de 780 segundos, não mais de 720 segundos, não mais de 660 segundos ou mesmo não mais de 600 segundos. Quando testadas de acordo com ASTM E2197-1 1, certas formas de realização podem obter pelo menos uma redução de 4,5 log após um tempo de contato de 600 segundos.

[070] Estas e/ou outras formas de realização de uma composição destinada a ser utilizadas como um banho de imersão para dispositivos médicos podem atingir pelo menos uma redução de 5, 5,1, 5,2, 5,3, 5,4, 5,5, 5,6, 5,7, 5,8, 5,9, 5,5, 5,6, 5,7, 5,8, 5,9 ou 6,0 log após um tempo de contato de ~14,400 segundos, até ~10,800 segundos, até ~7.200 segundos, até ~5.400 segundos e na ordem de ~3.600 segundos. Quando testado de acordo com Método Oficial AOAO 966.04, certas formas de realização podem atingir uma pontuação de aprovação após tempos de contato tão baixos quanto 1.800 segundos.

[071] As formas de realização da composição esporicida podem ser classificadas como desinfetantes de alto nível ou mesmo como esterilizantes.

[072] Depois que a composição foi autorizada a entrar em contato com um determinado objeto ou superfície por um tempo apropriado (em vista de fatores como carga bacteriana esperada, tipo de bactéria potencialmente presente, importância do objeto/superfície, etc.), a mesma pode evaporar ou de preferência, pode ser enxaguada com água ou uma solução salina diluída.

[073] Os seguintes exemplos ilustrativos não limitativos fornecem condições detalhadas e materiais que podem ser úteis na prática da presente invenção. Ao longo desses exemplos, qualquer referência à temperatura ambiente refere-se a temperatura ambiente a ~ 22°C.

EXEMPLOS Exemplo 1 (Comparativo): ácido peracético

[074] Um tratamento de desinfecção amplamente reconhecido e recomendado, em que os endósporos são possíveis ou suspeitos é a aplicação à superfície alvo e 10 minutos de tempo de contato de 10% (p/v) de ácido peracético. Consequentemente, o ácido peracético constitui uma boa comparação para as composições da presente invenção.

[075] Prepararam-se duas soluções de ácido peracético por adição de água destilada a um balão contendo ácido peracético. A concentração de uma das soluções foi de 5% (p/v), enquanto a outra foi de 10% (p/v). As concentrações calculadas de soluto efetivo para essas soluções foram 1,97 e 3,95 Osm/L, respectivamente.

[076] Um copo de 50 mL recebeu adição de 20 mL de água destilada. Uma sonda limpa, enxaguada e seca de um medidor de pH calibrado e compensador de temperatura foi abaixada no copo. As alíquotas sequenciais da solução de ácido peracético foram então adicionadas ao copo, com leituras de pH após cada uma. As titulações foram realizadas à temperatura ambiente.

[077] Os resultados dessas titulações são mostrados abaixo na Tabela 5. Tabela 5: titulações de ácido peracético

[078] Os dados acima indicam, inter alia, que o pH da água é reduzido para abaixo de 3 após a adição de uma pequena alíquota, ou seja, menos de 1% em volume, de qualquer solução de ácido peracético e que a adição de apenas 1 mL (5 % em volume) de qualquer das soluções reduziu o pH para menos de 2. Além disso, o pH assintótico para qualquer solução ácida é da ordem de 1,1 ± 0,1.

[079] Além disso, as recomendações da US EPA são para soluções de ácido peracético de pelo menos 2,5% (p/v) que, de acordo com os dados tabulados, têm um pH não superior a 1,25.

[080] Assim, qualquer trabalhador que realize este procedimento de desinfecção recomendado (isto é, aplicação de uma solução de ácido peracético de 2,5 a 10%) deve empregar os tipos de precauções apropriados para o manejo de ácidos fortes como, por exemplo, luvas de proteção, óculos de proteção, máscaras de respiração, etc.

Exemplo 2 (Comparativo): alvejante

[081] Outro tratamento de desinfecção amplamente reconhecido e recomendado em que os endósporos são possíveis ou suspeitos de existirem é a aplicação à superfície alvo e o tempo de contato de 10 minutos de uma solução alvejante.

[082] A um copo de 50 mL foram adicionados 5 mL de uma solução alvejante, isto é, hipoclorito de sódio a 8,25% (p/v). Uma sonda limpa, enxaguada e seca de um medidor de pH de compensação de temperatura calibrado foi abaixada no copo. Alíquotas sequenciais de água destilada foram então adicionadas ao copo, com leituras de pH após cada uma.

[083] Os dados dessa titulação são mostrados abaixo na Tabela 6. Tabela 6: Titulação de água sanitária com água

[084] Os dados desta tabela indicam, inter alia, que uma solução alvejante não diluída a 8,25% tem um pH de quase 13 e que a redução da concentração de OCT em três quartos reduz a mesma para apenas para ~ 11,9. Por outro lado, a redução da concentração de 8,25% para 5% (ambos peso/volume) resulta na redução da concentração de soluto efetivamente calculada em quase metade, isto é, de 2,28 para 1,34 Osm/L.

[085] Assim, qualquer trabalhador que realize este procedimento de desinfecção recomendado (isto é, aplicação de uma solução de branqueamento) deve empregar os tipos de precauções apropriadas para manusear bases fortes, por exemplo, luvas de proteção, óculos de proteção, máscaras de respiração, etc.

Exemplos 3-10: Extermínio in vitro

[086] A eficácia de certas composições esporicidas foi obtida contra Clostridium difficile (ATCC # 43598). Neste teste, a redução das bactérias é determinada por comparação contra controles não tratados (empregando solução salina tamponada com fosfato como líquido) em vários pontos de teste de tempo, tipicamente incrementos iguais, como 15 minutos (900 segundos).

[087] Uma alíquota de 9,9 mL da solução a ser testada foi colocada em um tubo de ensaio de 20 mL. Um volume de 0,1 mL da cultura de teste (~106 unidades de formação de colônias (CFU) de C. Diff. por mL quando diluído) foi adicionado ao tubo de ensaio, o qual então foi submetido a vortexação. Após uma quantidade predeterminada de tempo de contato, foram transferidos 1,0 mL da amostra/suspensão de cultura de teste para tubos de ensaio estéril contendo 9,0 mL de uma solução de neutralização apropriada, seguindo-se vortexação adicional.

[088] Diluições de dez vezes em série foram então preparadas através da transferência de alíquotas de 0,5 mL da solução de teste para 4,5 mL de solução neutralizante, com mistura de vortexação entre as diluições. A partir destas diluições, as alíquotas duplicadas de 1,0 mL foram espalhadas em placas de agar cérebro-coração, as quais então foram incubadas anaerobicamente a 35° ± 2°C durante - 72 horas.

[089] Após a incubação, as colônias nas placas foram contadas, com contagens na faixa de 20 a 200 CFU usadas nos cálculos de dados. A redução de registro desse teste é realizada subtraindo o valor de tratamento recuperado CFU/mL da amostra de controle recuperada CFU/mL.

[090] Um determinado número de composições foi testado desta maneira, com o tempo para obter reduções de 6 log em esporos mostrados na última coluna da Tabela 7 abaixo. Cada uma das composições foi preparada com base em uma concentração de soluto eficaz de -2,3 Osm/L e um pH alvo de 4. (Na coluna do sistema de reserva, "A" representa ácido acético/acetato de sódio, enquanto "C" representa ácido cítrico/citrato trissódico. Na coluna de oxidante, "PPOMS" representa peroxissossulfato, tudo em 0,22% (p/v) e "PAA" representa ácido peracético na concentração observada). Aquelas composições designadas como empregando BK como um agente tensoativo incluíram 0,21% (p/v), enquanto as designadas como empregando SDS incluíram 0,175% (p/v). Para as composições que mostram a inclusão de um líquido orgânico, empregou-se uma solução de isopropanol (70% em água). Tabela 7

[091] Os tempos mostrados na tabela anterior são melhores do que aqueles que podem ser alcançados com a maioria dos produtos esporicidas comercialmente disponíveis, que geralmente requerem 240 a 2.160 minutos para a desinfecção C. Diff. Além disso, a exposição a cada uma dessas composições é muito menos perigosa do que a exposição a tais produtos comerciais.

Exemplos 11-22

[092] Os dados da Tabela 7 acima parecem indicar que as composições que empregam um agente tensoativo aniônico (SDS) podem proporcionar melhores resultados do que aqueles que empregam um agente tensoativo catiônico (BK).

[093] Para investigar ainda mais a eficácia, foram preparadas composições adicionais, cada uma das quais empregou a mesma quantidade de SDS que foi utilizada nos Exemplos 4 e 9-10 mais 0,02% (p/v) de um agente tensoativo não iônico do tipo polissorbato. Cada um também incluiu 250 g/L de uma solução de H2O2 a 30% e 300 g/L de um líquido orgânico. O agente oxidante eletrolítico (EOA) para cada composição foi PPOMS. As composições contendo ácido cítrico incluíram 140 g/L de ácido cítrico e 17,5 g/L de diidrato citrato trissódico (juntamente com as quantidades observadas de NaCl para aumentar a concentração efetiva de soluto para um alvo predeterminado), enquanto que as composições contendo ácido acético incluíam a quantidades notadas de ácido acético (AA) e acetato de sódio (SA).

[094] O teste de suporte quantitativo foi realizado substancialmente de acordo com o padrão ASTM E2197-11, com eficácia contra esporos sendo mostrada nas últimas colunas das tabelas a seguir. Tabela 8a: Composições de ácido cítrico

Tabela 8b: Composições de ácido acético

[095] A análise estatística dos dados dessas tabelas sugeriu que o tipo de ácido tem o maior impacto sobre a eficácia seguido por pH (menor sendo melhor), o tipo de solvente e a concentração efetiva de soluto. A quantidade de agente oxidante eletrolítico parece ter um menor efeito.

Exemplos 23-31

[096] Usando o Exemplo 22 como ponto central (mostrado novamente abaixo como Exemplo 23), testes de suporte quantitativos adicionais foram conduzidos em outra rodada de composições preparadas em que o pH alvo (2,5), a concentração efetiva de soluto (~6,4 Osm/L) e a quantidade de PPOMS (8 g/L) foram mantidos constantes. O agente tensoativo aniônico era SDS, enquanto o agente tensoativo não iônico era um polissorbato. O líquido orgânico para cada um era uma solução de IPA de 70% (v/v).

[097] A análise dos dados dos Exemplos 11-31 indicou que o pH e o tipo de ácido tiveram o maior impacto, seguidos da concentração efetiva de soluto e do tipo de solvente.

Exemplos 32-40

[098] O teste de suporte quantitativo adicional foi realizado em composições nas quais o pH (2,5) e a concentração efetiva de soluto (~6,4 Osm/L) foram mantidos constantes. Este conjunto variou a quantidade de agente oxidante eletrolítico (PPOMS), a quantidade e o tipo de solvente (com E representando o etanol absoluto), a quantidade de solução de peróxido de hidrogênio e as quantidades de agentes tensoativos aniônicos (SDS) e não iônicos (tipo polissorbato).

[099] A análise desses dados sugere que, quando o tipo e a quantidade de ácido são mantidos constantes, os fatores mais estatisticamente significativos podem ser tipos de combinações bidirecionais de solvente, concentração de solvente e quantidade de agente oxidante eletrolítico.

Claims

1. Composição esporicida caracterizada por apresentar um pH de 1,5 a 4, inclusive, uma concentração efetiva de soluto de 1,5 a 9 Osm/L, inclusive, e compreender, em uma base por litro: a) um componente solvente com um valor de δp inferior a 15,6 MPa1/2 que compreende: 1) 50 a 500 mL de água e 2) pelo menos um líquido orgânico; e b) um componente soluto que compreende: 1) produto de dissociação de um ácido oxidante com um valor de pKa superior a 3 e um potencial padrão de pelo menos +0,5 V, o dito ácido oxidante opcionalmente sendo o produto de reação de um ácido orgânico e um peróxido, 2) produto de dissociação de 4 a 20 g de um agente oxidante eletrólito com um potencial padrão de pelo menos +1,5 V, 3) produto de dissociação de pelo menos um eletrólito não oxidante.

2. Composição esporicida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo referido componente de soluto compreende adicionalmente um agente umectante.

3. Composição esporicida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 e 2, caracterizada por apresentar um pH não superior a 3 e uma concentração efetiva de soluto de pelo menos 2 Osm/L.

4. Método para tratar uma superfície inanimada susceptível à presença de um ou mais tipos de endósporos, o método caracterizado por compreender colocar a referida superfície em contato com uma composição esporicida ácida, conforme definida na reivindicação 1, o referido contato envolvendo: (a) aplicar a referida composição à referida superfície por um tempo de contato não superior a 1.200 segundos ou (b) mergulhar a referida superfície na referida composição por um tempo de contato não superior a 14.400 segundos.

5. Método, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo referido componente de soluto da referida composição compreender adicionalmente um agente tensoativo aniônico.

6. Método, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo referido componente de soluto da referida composição compreender adicionalmente um agente tensoativo não iônico.

7. Método, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo referido componente de soluto da referida composição compreender adicionalmente um produto de dissociação de um ou mais eletrólitos não oxidantes.

8. Método, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelos referidos um ou mais eletrólitos não oxidantes compreenderem pelo menos um sal de um ácido orgânico.

9. Método, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pela referida composição ter uma concentração efetiva de soluto de pelo menos 3 Osm/L.

10. Método, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo referido componente solvente da referida composição possuir um valor de δp de 13,5 a 15,5 MPa1/2.