BR112016027078B1 - Composto e composição farmacêutica - Google Patents

Abstract

COMPOSTO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, E, MÉTODO DE TRATAMENTO DE UMA CONDIÇÃO ASSOCIADA A CÉLULAS CONTENDO FOSFATIDILSERINA INVERSA São aqui definidos compostos de dipicolilamina da Fórmula (I). São também reveladas composições farmacêuticas contendo íons metálicos e estes compostos. Além disso, é revelado um método para o tratamento de uma condição associada a células contendo fosfatidilserina inversa, com estes compostos.

Description

REFERÊNCIA CRUZADA COM PEDIDOS RELACIONADOS

[001] Este pedido reivindica o benefício do Pedido Provisório Norte-Americano No 62/001,725, depositado em 22 de maio de 2014, cujo teor é aqui incorporado por referência na íntegra.

HISTÓRICO DA INVENÇÃO

[002] A fosfatidilserina (PS), um fosfolipídeo de membrana, está tipicamente localizada na superfície interna da membrana de uma célula saudável. Sob determinadas circunstâncias, a PS é também encontrada na superfície externa. Vide Leventis et al., Annu. Rev. Biophys. 2010, 39, 407-27.

[003] Mais especificamente, a PS fica exposta na superfície externa de células cancerosas. Vide Thorpe et al., Breast Cancer Res Treat 1995, 36(2), 237-51; Ran et al., Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 2002, 54(5), 1479-84; e Thorpe, Thromb. Res. 2010, 125 Suppl 2, S134-137. Ainda, estudos recentes descobriram que a PS existe em vasculaturas de tumores e microvasos derivados de tumor. Vide Stafford et al., Neoplasia. 2011, 13, 299-308; e Yin et al., Cancer Immunology Research 2013, 1, 1-13. Além disso, em várias partículas patogênicas, tais como bactérias e vírus, a PS é exposta em altos níveis sobre a superfície externa. Vide Huang et al., Cancer Res. 2005, 65(10), 4408-16; e White et al., Bioconjug. Chem. 2010, 21(7), 1297-1304. Por fim, a PS foi encontrada na superfície externa de células nas quais as vias de morte celular foram desreguladas. Por exemplo, além do câncer, condições tais como distúrbios neurodegenerativos, doença cardiovascular, doenças autoimunes e distúrbios metabólicos, demonstram localização na superfície da PS. Vide Smith et al., Mol. Pharm. 2011, 8(2), 583-90. Assim, a PS provê um alvo valioso para a distribuição de agentes terapêuticos para o tratamento das condições mencionadas acima.

[004] A proteína Anexina V é atualmente utilizada para distribuir agentes terapêuticos por meio da ligação à PS. Entretanto, essa ligação exige altos níveis de Ca2+, os quais podem ativar “scramblases” que poderiam externalizar a PS em células normais ao redor, resultando no targeting indesejado das células normais.

[005] Há uma necessidade de desenvolver um agente de distribuição que seletivamente se associe com PS relevante para doenças a fim de realizar a distribuição de um agente terapêutico específica ao sítio.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[006] A presente invenção é baseada em uma descoberta inesperada que determinados derivados de dipicolilamina são eficazes na distribuição de um agente terapêutico a um sítio de doença alvo que tenha fosfatidilserina nas superfícies externas das membranas celulares.

[007] Em um aspecto, a presente invenção se refere a compostos da fórmula (I) mostrados abaixo:

[008] Nesta fórmula, cada um entre Ai, A2, A3, A4, A5, A6, e B1, independentemente, é um radical alifático bivalente Ci-C6, um radical heteroalifático bivalente Ci-C6, um radical arila bivalente, ou um radical heteroarila bivalente; B2 é uma ligação, um radical alifático bivalente Ci-C6, um radical heteroalifático bivalente Ci-C6, um radical arila bivalente, um radical heteroarila bivalente, Di-NRi-C(O)-D2, Di-C(O)NRi-D2-NRi’-C(O)-D3, Di-D2-C(O)-NRi-C(O)-D3, ou Di-D2-D3, cada um entre Dl, D2, D3 é independentemente um radical alifático bivalente Ci-C6, um radical heteroalifático bivalente Ci-C6, um radical arila bivalente, um radical heteroarila bivalente, um radical aralquila bivalente Ci-Ci0, ou um radical heteroaralquila bivalente Ci-Ci0, e cada um entre Ri e Ri’ é independentemente H, um radical heteroalifático bivalente Ci- C6, um radical arila bivalente, um radical heteroarila bivalente, ou um radical aralquila bivalente Ci-Ci0; cada um entre Li e L2 é independentemente uma ligação, NR2, NR2C(O), NR2C(S), NR2CR3R4, NR2SO2, NR2C(O)NR3 ou NR2C(S)NR3, cada um entre R2, R3, e R4 é independentemente H, um radical alifático monovalente Ci-C6, um radical heteroalifático monovalente Ci- C6, um radical arila monovalente, um radical heteroarila monovalente, um radical aralquila monovalente C1-C14, um radical heteroaralquila monovalente C1-C14, C(S)R’ ou C(O)R’, em que R’ é um radical alifático monovalente C1-C6, um radical heteroalifático monovalente C1-C6, um radical arila monovalente, um radical heteroarila monovalente, um radical aralquila monovalente C1-C14, ou um radical heteroaralquila monovalente C1-C14, contanto que pelo menos um entre L1 e L2 não seja uma ligação; cada um entre W1, W2, W3, W4, W5, W6, W7, e W8 é independentemente N ou CR5, R5 sendo H, halo, ciano, amino, hidroxila, nitro, sulfhidrila, um radical alifático C1-C6, um radical heteroalifático C1-C6, ou um radical haloalifático; X é uma ligação, O, S, ou NR6, R6 sendo H, um radical alifático monovalente C1-C6, um radical heteroalifático monovalente C1C6, um radical arila monovalente, um radical heteroarila monovalente, um radical aralquila monovalente C1-C14, ou um radical heteroaralquila monovalente C1-C14; Y é um anel arila ou um anel heteroarila; e Z é uma parcela terapêutica.

[009] Cada um entre o radical alifático, o radical heteroalifático, o radical aralquila e o radical heteroaralquila é não substituído ou substituído por halo, ciano, amino, hidroxila, nitro, sulfhidrila, alcoxi C1-C6, alquilamino C1-C6, dialquilamino C1-C12, e haloalquila C1-C6; e cada um entre o radical arila e o radical heteroarila é não substituído ou substituído por halo, ciano, amino, hidroxila, nitro, sulfhidrila, um radical alifático C1-C6, um radical heteroalifático C1-C6, ou um radical haloalifático.

[0010] Um subconjunto dos compostos descritos acima é da fórmula (I), em que Y é

[0011] Com referência à fórmula (I) outro subconjunto é aquele em que cada um entre W1, W2, W3, e W4 é N, e cada um entre W5, W6, W7, e W8 é CH; ou em que cada um entre W1, W2, W3, e W8 é N, e cada um entre W4, W5, W6, e W7 é CH.

[0012] Ainda outro subconjunto é aquele da fórmula (I), em que cada um entre A1, A2, A3, A5, A5, e A6 é metileno.

[0013] Ainda, nos compostos da fórmula (I), B1 pode ser etileno, propileno, butileno, ou hexileno; X pode ser O ou NH; L2 pode ser C(O).

[0014] Também, nos compostos acima descritos, L1 pode ser uma ligação, NH, NHCH2, NHC(O), NHSO2, NHC(O)NH,

[0015] Além disso, nos compostos da fórmula (I), B2 pode ser uma ligação, etileno, fenileno,

[0016] Nos compostos da fórmula (I), Z, uma parcela terapêutica, é formado a partir de uma droga terapêutica. Está conectado a L2 por uma ligação, por exemplo, uma ligação amídica ou uma ligação éster ou tioéster. Mediante a liberação da fórmula (I) por hidrólise enzimática, Z é convertido em uma droga terapêutica que exerce um efeito citotóxico, por exemplo, antiproliferação.

[0017] Preferivelmente, Z é uma parcela terapêutica contra o câncer, uma parcela terapêutica antiviral, uma parcela terapêutica de antibiótico, uma parcela terapêutica imunoestimulante, uma parcela terapêutica

[0018] O termo “alifático” aqui utilizado se refere a uma parcela de hidrocarboneto acíclica, cíclica ou policíclica saturada ou insaturada, linear ou ramificada. Exemplos incluem, entre outros, parcelas alquila, alquileno, alquenila, alquenileno, alquinila, alquinileno, cicloalquila, cicloalquileno, cicloalquenila, cicloalquenileno, cicloalquinila e cicloalquinileno. O termo “heteroalifático” aqui utilizado se refere a uma parcela alifática contendo pelo menos um heteroátomo selecionado entre N, O, P, B, S, Si, Sb, Al, Sn, As, Se, e Ge. O termo “haloalifático” aqui utilizado se refere a uma parcela alifática substituída por um ou mais átomos de halogênio. O termo “alquila” aqui utilizado se refere a um grupo hidrocarboneto linear ou ramificado, contendo de 1 a 20 (por exemplo, de 1 a 10 e de 1 a 6) átomos de carbono. Exemplos incluem metila, etila, n-propila, i-propila, n- butila, i-butila, e t-butila. O termo “alquileno” se refere a alquila bivalente. Exemplos incluem -CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2- , -CH2(CH3)CH2-, e -CH2CH2CH2CH2-. O termo “haloalquila” se refere a alquila substituída por um ou mais átomos de halogênios (cloro, flúor, bromo ou iodo).

[0019] Exemplos incluem trifluormetila, bromometila e 4,4,4-trifluorbutila. O termo “haloalquileno” se refere a haloalquila bivalente. O termo “heteroalquileno” se refere a um grupo alquila bivalente, em que um ou mais átomos de carbono são substituídos por um heteroátomo (por exemplo, O, N, P e S). O termo “alcoxi” se refere a um grupo -O-alquila. Exemplos incluem metoxi, etoxi, propoxi, e isopropoxi. O termo “haloalcoxi” se refere a alcoxi substituído por um ou mais átomos de halogênio.

[0020] O termo “alquenila” se refere a um grupo hidrocarboneto linear ou ramificado, contendo de 2 a 20 (por exemplo, de 2 a 10 e de 2 a 6) átomos de carbono e uma ou mais ligações duplas.

[0021] O termo “cicloalquila” se refere a um grupo hidrocarboneto monocíclico, bicíclico, tricíclico ou tetracíclico saturado e parcialmente insaturado tendo de 3 a 12 carbonos. Exemplos de grupos cicloalquila incluem, entre outros, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclopentenila, ciclohexila, ciclohexenila, cicloheptila e ciclooctila. O termo “cicloalquileno” se refere a uma cicloalquila bivalente.

[0022] O termo “heterocicloalquila” se refere a um sistema de anel não aromático monocíclico de 5 a 8 membros, bicíclico de 8 a 12 membros ou tricíclico de 11 a 14 membros tendo um ou mais heteroátomos (por exemplo, O, N, P e S). Exemplos de grupos heterocicloalquila incluem, entre outros, piperazinila, imidazolidinila, azepanila, pirrolidinila, di- hidrotiadiazolila, dioxanila, morfolinila, tetrahidropuranila e tetrahidrofuranila. O termo “heterocicloalquileno” se refere a heterocicloalquila bivalente.

[0023] O termo “arila” se refere a um sistema de anel aromático monocíclico de 6 carbonos, bicíclicos 10 carbonos, tricíclicos de 14 carbonos, em que cada anel pode ter de 1 a 5 substituintes. Exemplos de grupos arila incluem fenila, naftila e antracenila. O termo “arileno” se refere a arila bivalente. O termo “aralquila” se refere a alquila substituída por um grupo arila. O termo “aralquenila” se refere a alquenila substituída por um grupo arila.

[0024] O termo “heteroarila” se refere a um sistema de anel aromático monocíclico de 5 a 8 membros, bicíclico de 8 a 12 membros ou tricíclico de 11 a 14 membros, tendo um ou mais heteroátomos (por exemplo, O, N, P e S). Exemplos incluem triazolila, oxazolila, tiadiazolila, tetrazolila, pirazolila, piridila, furila, imidazolila, benzimidazolila, pirimidinila, tienila, quinolinila, indolila, tiazolila, e benzotiazolila. O termo “heteroaralquila” se refere a um grupo alquila substituído por um grupo heteroarila. O termo “heteroaralquenila” se refere a um grupo alquenila substituído por um grupo heteroarila. O termo “heteroarileno” se refere a heteroarila bivalente.

[0025] O termo “halo” se refere a um radical flúor, cloro, bromo ou iodo. O termo “amino” se refere a um radical derivado de amina, que é não substituída ou mono-/di- substituída por alquila, arila, cicloalquila, heterocicloalquila ou heteroarila. O termo “alquilamino” se refere a alquila-NH-. O termo “dialquilamino” se refere a alquila-N(alquila)-.

[0026] O termo “acila” se refere a -C(O)-alquila, -C(O)-arila, -C(O)-cicloalquila, -C(O)-heterocicloalquila, ou -C(O)-heteroarila.

[0027] Alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila, aralquila, heteroaralquila, alcoxi, e ariloxi aqui mencionadas incluem parcelas tanto substituídas quanto não substituídas. Exemplos de substituintes incluem, entre outros, halo, hidroxila, amino, ciano, nitro, mercapto, alcoxicarbonila, amido, carboxi, alcanosulfonila, alquilcarbonila, carbamido, carbamila, carboxila, tioureído, tiocianato, sulfonamido, alquila, alquenila, alquinila, alquiloxi, arila, heteroarila, cicloalquila, e heterocicloalquila, em que alquila, alquenila, alquinila, alquiloxi, arila, heteroarila cicloalquila, e heterocicloalquila podem ser ainda substituídas.

[0028] Aqui, o termo “composto” se refere aos compostos descritos acima, bem como seus sais, solvatos e complexos metálicos. Um sal pode ser formado entre um ânion e um grupo carregado positivamente (por exemplo, amino) em um composto; exemplos de um ânion adequado incluem cloreto, brometo, iodeto, sulfato, nitrato, fosfato, citrato, metanosulfonato, trifluoracetato, acetato, malato, tosilato, tartarato, fumurato, glutamato, glucuronato, lactato, glutarato, e maleato. Um sal também pode ser formado entre um cátion e um grupo carregado negativamente; exemplos de um cátion adequado incluem íon sódio, íon potássio, íon magnésio, íon cálcio e um cátion amônio, por exemplo, íon tetrametilamônio. Um sal ainda inclui aqueles contendo átomos de quaternário de nitrogênio. Um solvato se refere a um complexo formado entre um composto ativo e um solvente farmaceuticamente aceitável. Exemplos de um solvente farmaceuticamente aceitável incluem água, etanol, isopropanol, acetato de etila, ácido acético e etanolamina. Um complexo metálico pode ser formado por um composto e um íon metálico. O íon metálico é um cátion tendo duas ou mais cargas. O complexo metálico é tipicamente formado por quelação de um íon metálico e um composto da fórmula (I). Exemplos do íon metálico incluem Zn2+, Cu2+, Ca2+, Mg2+, Mn2+, Ni2+, Co2+, Fe2+, Cd2+, e uma combinação destes.

[0029] A presente invenção também caracteriza o uso de um dos compostos acima descritos para a fabricação de um medicamento para o tratamento de condições relacionadas à PS. Assim, a presente invenção também se refere ao uso deste composto para o tratamento de uma condição relacionada à OS por meio da administração, a um indivíduo que necessita do tratamento, de uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção e uma quantidade eficaz de um ou mais outros agentes ativos.

[0030] Também, dentro do escopo da presente invenção, é uma composição farmacêutica contendo um veículo farmaceuticamente aceitável e um complexo de um íon metálico e um dos compostos da fórmula (I) descrita acima.

[0031] A composição farmacêutica pode ainda conter outro agente terapêutico para o tratamento de condições relacionadas à PS. Agentes ativos incluem, entre outros, agentes imunomoduladores, por exemplo, interferons a, ß, e y; agentes antivirais, por exemplo, ribavirina e amantadina; agentes terapêuticos alvo em quaisquer condições relacionadas à PS. Este agente ativo e um composto da presente invenção podem ser aplicados a um indivíduo em dois horários separados ou simultaneamente, porém em duas formas farmacêuticas. Alternativamente, podem ser combinados em uma composição conforme descrito acima para uso como uma forma farmacêutica simples.

[0032] Uma composição para administração oral pode ser qualquer forma farmacêutica oralmente aceitável, incluindo cápsulas, comprimidos, emulsões e suspensões aquosas, dispersões e soluções. No caso de comprimidos, os veículos comumente utilizados incluem lactose e amido de milho. Agentes lubrificantes, tais como estearato de magnésio, também são tipicamente adicionados. Para administração oral em uma forma de cápsula, diluentes úteis incluem lactose e amido de milho anidro. Quando suspensões aquosas ou emulsões são administradas por via oral, o princípio ativo pode ser suspenso ou dissolvido em uma fase oleosa combinada com agentes emulsificantes ou de suspensão. Se desejados, certos agentes edulcorantes, aromatizantes ou corantes podem ser adicionados. Formas farmacêuticas orais sólidas podem ser preparadas por técnicas de liofilização; estratégia de extrusão por fusão térmica, micronização e tecnologias de nanotrituração.

[0033] Uma composição nasal em aerossol ou inalatória pode ser preparada de acordo com técnicas bem conhecidas na técnica de formulação farmacêutica. Por exemplo, essa composição pode ser preparada como uma solução em solução fisiológica, empregando álcool benzílico ou outros preservantes adequados, promotores de absorção para aumentar a biodisponibilidade, fluorcarbonos e/ou outros agentes solubilizantes ou dispersantes conhecidos na técnica. Uma composição tendo um composto ativo também pode ser administrada na forma de supositórios para administração retal.

[0034] O veículo na composição farmacêutica deve ser “aceitável” no sentido em que é compatível com o princípio ativo da composição (e, preferivelmente, capaz de estabilizar o princípio ativo) e não prejudicial ao indivíduo a ser tratado. Um ou mais agentes solubilizantes pode ser utilizado como excipientes farmacêuticos para distribuição de um composto ativo. Exemplos de outros veículos incluem óxido de silício coloidal, estearato de magnésio, celulose, lauril sulfato de sódio, e amarelo D&C #10.

[0035] Ainda dentro do escopo da presente invenção, há um método de tratamento de uma condição associada a células contendo fosfatidilserina inversa. Nesta condição, a fosfatidilserina normalmente intracelular é exposta na superfície externa das células. O método inclui a administração de uma quantidade eficaz de um dos compostos descritos acima a um indivíduo que necessita dele. O composto da fórmula (I) pode ser administrado como um complexo formado do composto e um íon metálico tendo duas ou mais cargas positivas (por exemplo, Zn2+). A condição ocorre em casos de infecção viral, infecção bacteriana, doença inflamatória, câncer, regulação incorreta de morte celular em transplante de órgãos, regulação incorreta de morte celular em doença neurodegenerativa, e regulação incorreta de morte celular em doença cardiovascular.

[0036] O termo “tratamento” se refere a uma aplicação ou administração do composto a um indivíduo com a finalidade de curar, aliviar, abrandar, alterar, remediar, melhorar ou afetar a doença, o sintoma, ou a predisposição. O termo “uma quantidade eficaz” se refere à quantidade do composto que é necessária para conferir o efeito desejado a um indivíduo. As quantidades eficazes variam, conforme reconhecido pelos técnicos no assunto, dependendo da via de administração, do uso de excipiente e da possibilidade de uso conjunto com outros tratamentos terapêuticos, por exemplo, o uso de outros agentes ativos.

[0037] Os detalhes de uma ou mais realizações da invenção são definidos na descrição abaixo. Outras características, objetivos e vantagens da invenção ficarão evidentes a partir da descrição e das reivindicações.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0038] São mostrados abaixo 51 compostos exemplares sintetizados de acordo com os procedimentos descritos nos Exemplos 1 a 51 e testados de acordo com os procedimentos descritos em seguida.

[0039] Todos os compostos listados abaixo incluem seus racemados (ou seja, quantidades iguais de enantiômeros do lado esquerdo e direito de uma molécula quiral), salvo se especificado em contrário.

[0040] Os compostos da presente invenção podem ser preparados por métodos sintéticos bem conhecidos na técnica. Vide R. Larock, Comprehensive Organic Transformations (2nd Ed., VCH Publishers 1999); P. G. M. Wuts and T. W. Greene, Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis (4th Ed., John Wiley and Sons 2007); L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis (John Wiley and Sons 1994); e L. Paquette, ed., Enciclopedia of Reagents for Organic Synthesis (2nd ed., John Wiley and Sons 2009) e edições subsequentes destes.

[0041] As sínteses dos Compostos 1 a 51 e seus dados analíticos são mostrados abaixo. SÍNTESE DE INTERMEDIÁRIO DE DIPICOLILAMINA (DPA, ESTRUTURA MOSTRADA ABAIXO)

[0042] Um intermediário de dipicolilamina DPA foi preparado de acordo com as seguintes etapas:

[0043] A uma solução agitada de ácido 5- hidroxiisoftálico (25 g, 137 mmol, 1 eq.) em 200 mL de metanol em temperatura ambiente, 2,2-dimetoxipropano (1,2 eq.) e ácido p-toluenosulfônico (TsOH, 0,2 eq.) foram adicionados. Após agitação a 60 °C, o metanol foi removido por evaporação. A mistura bruta resultante foi dividida em acetato de etila (EtOAc)/água. A camada orgânica foi seca com sulfato de magnésio (MgSO4) e concentrada para proporcionar um produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna de sílica para resultar em 2,2-dimetoxipropano (23 g, 79%).

[0044] 1H NMR (300 MHz, CDCl3) d 3,96 (s, 6H), 7,77 (s, 2H), 8,26 (s, 1H). ETAPA 2

[0045] A uma solução de 5-hidroxiisoftalato de dimetila (28 g, 133 mmol, 1 eq.) em 1400 mL de tetrahidrofurano seco (THF) em temperatura de banho de gelo, hidreto de lítio e alumínio (LiAlH4 ou LAH, 4 eq.) foi lentamente adicionado sob agitação. A mistura resultante foi deixada aquecer até 40 °C, agitada nesta temperatura por 16 horas, e então foi adicionada uma solução aquosa de cloreto de amônio (NH4Cl) para resfriar a reação. Após a agitação por 1,5 hora, a mistura foi filtrada com celite, lavada com THF. Os voláteis orgânicos foram evaporados e o resíduo foi dividido entre água e EtOAc. A fase aquosa foi extraída com EtOAc três vezes. As camadas de EtOAc combinadas foram secas em MgSO4 para proporcionar o produto (5-hidroxi-1,3-fenileno)dimetanol (17 g, 82%).

[0046] 1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 4,57 (s, 6H), 6,71 (s, 2H), 6,80 (s, 1H).

[0047] A mistura resultante foi então aquecida até o refluxo por 8 horas, depois do que os voláteis foram removidos, e o resíduo foi dividido entre EtOAc e água. A camada de EtOAc foi lavada com salmoura e seca em MgSO4. A evaporação do EtOAc proporcionou 2-(4-(3,5- bis (hidroximetil)fenoxi)butil)isoindolina-1,3-diona (13 g, 78% de rendimento).

[0048] 1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 1,67-1,65 (m, 2H), 1,86-1,81 (m, 2H), 3,75 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 4,00 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 4,63 (s, 2H), 4,64 (s, 2H), 6,81 (s, 2H), 6,91 (s, 1H), 7,71-7,69 (m, 2H), 7,84-7,82 (m, 2H). ETAPA 4

[0049] A uma solução agitada de 2-(4-(3,5-bis (hidroximetil)fenoxi)butil)isoindolina-1,3-diona (7,44 g, 21 mmol, 1 eq.) em 420 mL de diclorometano anidro (CH2Cl2) em um banho de gelo, trifenilfosfina (PPh3, 2,3 eq.) e tetrabrometo de carbono (CBr4, 4,5 eq.) foram lentamente adicionados. A mistura de reação resultante foi deixada aquecer até a temperatura ambiente, agitada por 16, e metanol (MeOH) foi adicionado para resfriar a reação. Depois que o CH2Cl2 e o MeOH foram evaporados, o resíduo foi dividido em CH2Cl2/água. A camada de CH2Cl2 foi seca em MgSO4 e concentrada por evaporação para proporcionar um produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna de sílica para resultar em produto (5,2 g, 51).

[0050] 1H NMR (300 MHz, CDCl3) d 1,90-1,81 (m, 4H), 3,77 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 4,00 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 4,41 (s, 4H), 6,82 (s, 2H), 6,98 (s, 1H), 7,74-7,70 (m, 2H), 7,867,84 (m, 2H). ETAPA 5

[0051] A uma solução agitada de 2-(4-(3,5- bis(bromometil)fenoxi)butil)isoindolina-1,3-diona (3,86 g, 8,06 mmol, 1 eq.) em 25 mL de dimetilformamida seca (DMF) em temperatura ambiente, bis(piridin-2-ilmetil)amina (2 eq.) e K2CO3 (5 eq.) foram lentamente adicionados. Após a agitação por 16 horas, a DMF foi evaporada. A mistura bruta resultante foi dividida em CH2Cl2/água. A camada de CH2Cl2 foi seca em MgSO4 e concentrada para proporcionar um produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna de sílica para resultar no produto A (4,8 g, 83%).

[0052] 1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 1,89-1,82 (m, 4H), 3,61 (s, 4H), 3,78-3,74 (m, 10H), 3,96 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 6,82 (s, 2H), 7,03 (s, 1H), 7,12-7,08 (m, 4H), 7,63-7,53 (m, 8H), 7,69-7,67 (m, 2H), 7,82-7,80 (m, 2H), 8,48 (d, J = 4,8 Hz, 4H). ETAPA 6

[0053] A uma solução agitada do composto A (5,9 g, 8,23 mmol, 1 eq.) em 200 mL de etanol (EtOH) em temperatura ambiente, hidrazina (H2N-NH2, 10 eq.) foi lentamente adicionada. A mistura de reação resultante foi agitada por 16 horas, aquecida até o refluxo por 2 horas e então resfriada até a temperatura ambiente. A remoção de EtOH proporcionou uma mistura bruta que foi extraída por CH2Cl2 duas vezes. As soluções de CH2Cl2 foram combinadas, secas em MgSO4 e concentradas para proporcionar DPA (4,1 g, 85%).

[0054] 1H NMR (300 MHz, CDCl3) d 1,65-1,55 (m, 2H), 1,84-1,75 (m, 2H), 2,75 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 3,56 (s, 4H), 3,78 (s, 8H), 3,94 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 6,84 (s, 2H), 7,04 (s, 1H), 7,13-7,08 (m, 4H), 7,63-7,55 (m, 8H), 8,48 (d, J = 4,5 Hz, 4H). SÍNTESE DE NOVE LIGANTES DE DPA, DL-1 A DL—9

[0055] DPA (400 mg, 0,681 mmol, 1 eq.) e trietilamina (1 mL) foram dissolvidas em CH2Cl2 (40 mL), seguida pela adição de 4-cloro-4-oxobutanoato de etila a 0 °C. A solução resultante, após agitação a 0 °C por 2 horas, foi lavada com uma solução aquosa saturada de cloreto de amônio três vezes (3 x 40 ml). As camadas de CH2Cl2 foram secas em MgSO4 e concentradas sob pressão reduzida para resultar em DL- 1.

[0056] 1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 1,27-1,19 (m, 3H), 1,70-1,67 (m, 2H), 1,84-1,78 (m, 2H), 2,44 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 2,77 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,43-3,29 (m, 2H), 3,64 (s, 4H), 3,79 (s, 8H), 3,96 (t, J = 6 Hz, 2H), 4,16-4,09 (m, 2H), 6,83 (s, 2H), 7,05 (s, 1H), 7,14-7,11 (m, 4H), 7,64-7,57 (m, 8H), 8,50 (d, J = 4,4 Hz, 4H). DL-2

[0057] DL-1 (487 mg, 0,68 mmol, 1 eq.) foi dissolvido em MeOH (4 mL) e em uma solução aquosa de LiOH (4 mL, 0,5 N), e então agitada em temperatura ambiente por 15 horas. Após a remoção do MeOH, o resíduo resultante foi extraído com CH2Cl2 (100 mL). A solução de CH2Cl2 foi então lavada com uma solução aquosa saturada de cloreto de amônio duas vezes (2 x 100 mL), seca em MgSO4 e concentrada sob pressão reduzida para resultar em DL-2 (380 mg).

[0058] 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1,71-1,67 (m, 2H), 1,82-1,79 (m, 2H), 2,48 (m, 2H), 2,68 (m, 2H), 3,34 (m, 2H), 3,63 (s, 4H), 3,80 (s, 8H), 3,96 (t, J = 8 Hz, 2H), 6,83 (s, 2H), 6,90 (s, 1H), 7,15-7,11 (m, 4H), 7,66-7,54 (m, 8H), 8,51 (d, J = 4,8 Hz, 4H). DL-3

[0059] A uma solução de DPA (400 mg, 0,68 mmol, 1 eq.) em CH2Cl2 (40 mL) foram adicionadas trietilamina (2 mL) e 3-(clorocarbonil)benzoato de metila a 0 °C. A mistura de reação resultante, após agitação a 0 °C por 2 horas, foi diluída com CH2Cl2 (100 mL). A solução de CH2Cl2 foi lavada com uma solução aquosa saturada de NH4C1 duas vezes (2 x 100 mL), seca em MgSO4 e concentrada sob pressão reduzida para proporcionar um produto bruto que é purificado por cromatografia em coluna (sílica gel; MeOH : CH2Cl2 = 1 : 13) para resultar em DL-3 (280 mg, 55%).

[0060] 1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 1,91-1,84 (m, 4H), 3,58-3,54 (m, 2H), 3,63 (s, 4H), 3,78 (s, 8H), 3,91 (s, 3H), 4,02 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 6,85 (s, 2H), 7,05 (s, 1H), 7,13-7,10 (m, 4H), 7,50-7,46 (m, 1H), 7,63-7,56 (m, 8H), 8,00 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 8 Hz, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,49 (d, J = 4,4 Hz, 4H). DL-4

[0061] DPA (1 g, 1,7 mmol, 1 eq.) e 4- formilbenzoato de metila (840 mg, 5,12 mmol, 3 eq) foram dissolvidos em MeOH (20 mL) e agitados a 65 °C por 15 horas. Depois que a solução foi resfriada até 0 °C, borohidreto de sódio (1 g, 26 mmol, 15 eq) foi adicionado. A mistura foi agitada a 0 °C por mais uma hora. A remoção de MeOH sob pressão reduzida proporcionou um resíduo que foi extraído com CH2Cl2 (100 mL). A solução de CH2Cl2 foi lavada com uma solução aquosa saturada de NH4Cl duas vezes (2 x 100 mL), seca em MgSO4 e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (sílica gel; MeOH : CH2Cl2 = 1 : 9) para resultar em DL-4 (700 mg, 56%).

[0062] 1H NMR (300 MHz, CDCl3) d 1,90-1,68 (m, 4H), 2,71 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,63 (s, 4H), 3,79 (s, 8H), 3,82 (s, 2H), 3,86 (s, 3H), 3,95 (t, J = 6 Hz, 2H), 6,83 (s, 2H), 7,04 (s, 1H), 7,14-7,09 (m, 4H), 7,40 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,63-7,55 (m, 8H), 7,98 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 8,48 (d, J = 4,2 Hz, 4H). DL-5

[0063] DL-4 (600 mg, 0,82 mmol, dicarbonato de di-terc-butila (360 mg, 1,65 mmol, 2 eq) foram dissolvidos em CH2Cl2 (60 mL) e agitados em temperatura ambiente por 15 horas. Depois que CH2Cl2 foi removido, um resíduo foi obtido e purificado por cromatografia em coluna (sílica gel; MeOH : CH2Cl2 = 1 : 13) para resultar em DL-5 (550 mg, 81).

[0064] 1H NMR (300 MHz, CDCl3) d 1,45-1,40 (m, 9H), 1,72 (m, 2H), 1,89 (m, 2H), 3,31-3,21 (m, 2H), 3,64 (s, 4H), 3,79 (s, 8H), 3,89 (s, 3H), 3,92 (m, 2H), 4,47 (m, 2H), 6,82 (s, 2H), 7,07 (s, 1H), 7,14-7,09 (m, 4H), 7,27 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,63-7,56 (m, 8H), 7,98 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 8,50 (d, J = 4,8 Hz, 4H). DL-6

[0065] DL-4 (300 mg, 0,41 mmol) foi dissolvido em MeOH (3 mL) e uma solução aquosa de LiOH (3 mL, 0,5 N). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 15 horas. A remoção de MeOH proporcionou um resíduo que foi extraído com CH2Cl2 (100 mL). A solução de CH2Cl2 foi então lavada com uma solução aquosa saturada de NH4Cl duas vezes (2 x 100 mL), seca em MgSO4 e concentrada sob pressão reduzida para resultar em DL-6 (260 mg, 88%). DL-7

[0066] DL-5 (550 mg, 0,66 mmol) foi dissolvido em MeOH (6 mL) e uma solução aquosa de LiOH (6 mL, 0,5 N). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 15 horas. MeOH foi removido para proporcionar um resíduo que foi extraído com CH2Cl2 (100 mL). A solução de CH2Cl2 foi lavada com uma solução aquosa saturada de NH4Cl duas vezes (2 x 100 ml), seca em MgSO4 e concentrada sob pressão reduzida para resultar em DL-7 (480 mg, 89%).

[0067] 1H NMR (300 MHz, CDCl3) d 1,50-1,26 (m, 13H), 3,29-3,23 (m, 2H), 3,65 (s, 4H), 3,81 (m, 10H), 4,53 (s, 2H), 6,77 (s, 2H), 6,93 (s, 1H), 7,15-7,11 (m, 4H), 7,38 (m, 2H), 7,63-7,53 (m, 8H), 8,10 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 8,54 (d, J = 4,2 Hz, 2H) DL-8

[0068] DL-6 (260 mg, 0,36 mmol, 1 eq), K2CO3 (745 mg, 5,40 mmol, 15 eq), 4-cloro-7-nitrobenzo [c] [l,2,5]oxadiazol (100 mg, 0,50 mmol) e CH2Cl2 (30 mL) foram misturados e agitados a 40 °C por 15 horas. A mistura de reação resultante foi então extraída com CH2Cl2 (100 mL). Subsequentemente, a solução de CH2Cl2 foi lavada com água duas vezes (2 x 100 mL), seca em MgSO4 e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (sílica gel; MeOH : CH2Cl2 = 1 : 1) para resultar em DL-8 (200 mg, 63%).

[0069] 1H NMR (400 MHz, DMSO) d 1,36 (m, 1H), 1,69-1,51 (m, 3H), 3,13 (m, 2H), 3,54 (s, 4H), 3,66 (m, 10H), 3,98 (m, 2H), 6,68 (m, 1H), 6,79 (d, J = 4,4 Hz, 2H), 7,04 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,21-7,17 (m, 4H), 7,35-7,25 (m, 2H), 7,547,51 (m, 4H), 7,71-7,63 (m, 4H), 7,86 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 8,38 (m, 1H), 8,44 (d, J = 5,2 Hz, 4H). DL-9

[0070] Uma solução de DL-3 (0,37 mmol) em MeOH (3 mL) e uma solução aquosa de LiOH (3 mL, 0,5 N) foi agitada em temperatura ambiente por 15 horas. MeOH foi removido sob pressão reduzida para proporcionar um resíduo que foi extraído com CH2Cl2 (100 mL). A solução de CH2Cl2 foi então lavada com uma solução aquosa saturada de NH4C1 duas vezes (2 x 100 mL), seca em MgSO4 e concentrada sob pressão reduzida para resultar em DL-9 (240 mg, 88%).

[0071] 1H NMR (300 MHz, CDCl3) d 1,97-1,86 (m, 4H), 3,64 (m, 6H), 3,80 (s, 8H), 4,14 (m, 2H), 7,08 (s, 2H), 7,20-7,12 (m, 5H), 7,62-7,51 (m, 8H), 8,21 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 8,47 (s, 1H), 8,56 (d, J = 4,8 Hz, 4H).

EXEMPLO 1 PREPARAÇÃO DO COMPOSTO 1

[0072] O Composto 1 da presente invenção foi preparado seguindo-se o procedimento descrito abaixo.

[0073] A uma solução de DL-2 (200 mg, 0,29 mmol, 1 eq) em DMF (20 mL), foram adicionados 4,11-dietil-4,9-di- hidroxi-1H-pirano [3’,4’:6,7]indolizino [1,2-b]quinolina-3,14- (4H,12H)-diona (170 mg, 0,44 mmol, 1,5 eq), hidroxibenzotriazol (117 mg, 0,87 mmol, 3 eq), cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N’-etilcarbodiimide (170 mg, 0,87 mmol, 3 eq) e N-metilmorfolina (175 mg, 1,74 mmol, 6 eq). Após agitação em temperatura ambiente por 15 horas, a mistura de reação resultante foi extraída com CH2Cl2 (300 mL). Subsequentemente, a solução de CH2Cl2 foi lavada com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 (300 mL) e água (5 x 300 mL), seca em MgSO4 e então concentrada sob pressão reduzida para proporcionar um resíduo. O Composto 1 (130 mg, 42%) foi obtido pela purificação do resíduo por cromatografia em coluna (sílica gel; MeOH : CH2Cl2 = 1 : 13).

[0074] 1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 1,01 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,34 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 1,74-1,67 (m, 2H), 1,94-1,77 (m, 4H), 2,62 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,00 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,11-3,06 (m, 2H), 3,39-3,34 (m, 2H), 3,61 (s, 4H), 3,76 (s, 8H), 3,92 (t, J = j = 6,0 Hz, 2H), 5,20 (s, 2H), 5,28 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,71 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 6,77 (s, 2H), 7,04 (s, 1H), 7,12-7,09 (m, 4H), 7,63-7,50 (m, 10H), 7,77 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,47 (d, J = 4,8 Hz, 4H), Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 532,27.

EXEMPLOS 2-51 PREPARAÇÃO DOS COMPOSTOS 2—51

[0075] A síntese do Composto 42 é descrita imediatamente abaixo. Com relação aos compostos 2-41 e 43-51, estes foram obtidos seguindo-se um procedimento similar ou um procedimento similar àquele descrito no Exemplo 1 acima.

[0076] O Esquema 1 abaixo ilustra uma sequência sintética de preparação de um ligante, por exemplo, Ligante 42, a partir de B comercialmente disponível por meio dos intermediários C e D. SÍNTESE DE LIGANTE 42, UM LIGANTE PARA USO NA PREPARAÇÃO DO COMPOSTO 42:

[0077] Esquema 1. Síntese de um ligante: (a) I. Boc2O, DCM, 3 horas; e II. 4-formilbenzoato de metila, NaBH4, MeOH, temperatura ambiente, 1 hora; (b) cloreto de 1-(4- clorofenil)ciclo-hexanecarbonila, DCM, temperatura ambiente, 1 hora; (c) HCl 4 M em 1,4-dioxano, MeOH, temperatura ambiente, 12 horas.

[0078] Síntese do composto C: A uma solução do B comercialmente disponível (15 g, 101,21 mmol) em CH2Cl2 (300 mL), foi adicionada trimetilamina (TEA, 1 eq.), seguida por dicarbonato de di-terc-butila (Boc2O, 0,5 eq). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas e após esse tempo o solvente foi removido sob vácuo. O bruto foi dividido entre H2O e DCM. As camadas foram separadas e os orgânicos foram secos em sulfato de sódio (Na2SO4) e concentrados até a obtenção de um óleo transparente. Ao óleo transparente em 200 mL de MeOH, foi adicionado 4-formilbenzoato de metila (15 g, 91,35 mmol, 0,9 eq.). O borohidreto de sódio (3,7 g, 97,80 mmol, 0,9 eq.) foi adicionado após agitação em temperatura ambiente por 3 horas. O MeOH foi removido e o resíduo foi dissolvido em 200 ml de CH2Cl2. O produto protonado foi extraído do CH2Cl2 com 200 ml de NH4Cl (aq). As camadas orgânicas foram combinadas, secas com Na2SO4, filtradas e o solvente foi evaporado. A purificação do resíduo bruto por cromatografia flash em sílica gel eluindo com EtOAc/Hexano (2:1) para proporcionar 12,03 g de produto C na forma de um óleo transparente (30,36 mmol, 30%).

[0079] Síntese do composto D: Ao composto C (12,03 g, 30,36 mmol) em 200 ml de CH2Cl2, foi adicionado cloreto de 1-(4-clorofenil)ciclo-hexanecarbonila (11,57 g, 45,54 mmol, 1,5 eq.) e trietilamina (10 ml, 43,08 mmol). A reação foi agitada por 2 horas em temperatura ambiente. O produto protonado foi extraído de 200 ml de CH2Cl2 com 200 ml de NH4Cl (aq). A camada orgânica foi seca com Na2SO4, filtrada e o solvente foi evaporado. A purificação do resíduo bruto por cromatografia flash em sílica gel eluindo com EA/Hexano (2:1) proporcionou 13,11 g de composto D na forma de um óleo transparente (21,25 mmol, 70%).

[0080] Síntese do composto Ligante 42: Ao composto D (13,11 g, 21,25 mmol) em MeOH (200 mL), foi adicionado ácido clorídrico (HCl) 4 M em dioxano (10 mL). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas e após esse tempo foi concentrada sob vácuo. O bruto foi dividido entre NaH4Cl (aq) e DCM. As camadas foram separadas e os orgânicos foram secos (Na2SO4) e concentrados para obter o composto do Ligante 46 na forma de um óleo transparente (7,68 g, 14,87 mmol, 70%).

[0081] O Esquema 2 abaixo ilustra uma sequência sintética de preparação do Composto 42 a partir do intermediário DPA por meios dos intermediários E, F, G, H e I. SÍNTESE DO COMPOSTO 42:

[0082] Esquema 2. Síntese do Composto 42. (a) 4- formilbenzoato de metila, NaBH4, MeOH, temperatura ambiente, 1 hora (90%); (b) cloreto de 1-(4-clorofenil)ciclo- hexanocarbonila, CH2Cl2, temperatura ambiente, 1 hora (90%); (c) LiOH (aq) 0,5 M, MeOH, temperatura ambiente, 15 horas (90%); (d) Ligante 42, HOBt, EDCI, NMM, temperatura ambiente, 15 horas (40%); (e) LiOH (aq) 0,5 M, MeOH, temperatura ambiente, 15 horas (82%); (f) HOBt, EDCI, NMM, 4,11-dietil-4,9-di-hidroxi-1H- pirano [3’,4’:6,7]indolizino [1,2-b]quinolina-3,14-(4H,12H)- diona, temperatura ambiente, 15 horas (30%).

[0083] Síntese do composto E: Ao DPA acima mencionado (10 g, 17,01 mmol) em 200 mL de MeOH, foi adicionado 4-formilbenzoato de metila (5 g, 30,45 mmol, 1,8 eq.). Borohidreto de sódio (3,7 g, 97,80 mmol, 5,7 eq.) foi adicionado após agitação em temperatura ambiente por 3 horas. O MeOH foi removido e o resíduo foi dissolvido em 200 mL de CH2Cl2. O produto protonado foi extraído do CH2Cl2 com 200 mL de HCl (aq) 1 M. A camada aquosa foi neutralizada e o produto foi extraído em 200 mL de CH2Cl2. As camadas orgânicas foram combinadas, secas com Na2SO4 e filtradas, e o solvente foi evaporado para proporcionar 11,26 g do produto E na forma de um óleo amarelo (15,30 mmol, 90%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3): d 1,70-1,78 (m, 2H), 1,80-1,86 (m, 2H), 2,71 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,62 (s, 4H), 3,78 (s, 8H), 3,87 (s, 2H), 3,89 (s, 3H), 3,95 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 6,82 (s, 2H), 7,03 (s, 1H), 7,03-7,13 (m, 4H), 7,40 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,55-7,62 (m, 8H), 7,98 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 8,48 (d, J = 8,0 Hz, 2H).

[0084] Síntese do composto F: Ao composto E (11,26 g, 15,30 mmol) em 200 mL de CH2Cl2, foi adicionado cloreto de 1-(4-clorofenil)ciclo-hexanecarbonila (7,71 g, 30,00 mmol, 2 eq.) e trimetilamina (5 ml, 21,54 mmol). A reação foi agitada por 2 horas em temperatura ambiente. O produto protonado foi extraído de 200 mL de CH2Cl2 com 200 mL de HCl (aq) 1 M. A camada aquosa foi neutralizada e o produto foi extraído em 200 mL de CH2Cl2. A camada orgânica foi seca com Na2SO4, filtrada e o solvente foi evaporado para proporcionar 13,17 g do produto F na forma de um óleo amarelo (13,77 mmol, 90%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3): d 1,62 (brs, 12H), 2,24 (brs, 2H), 2,90 (brs, 1H), 3,23 (brs, 1H), 3,63 (s, 4H), 3,78 (s, 8H), 3,88 (s, 3H), ,3,92 (m, 2H), 4,02-4,14 (m, 2H), 6,78 (s, 2H), 6,95-7,39 (m, 11H), 7,557,63 (m, 8H), 7,93 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 8,48 (d, J = 6,4 Hz, 4H).

[0085] Síntese do composto G: Ao composto F (13,17 g, 13,77 mmol) em 300 mL de MeOH, foram adicionados 50 mL de LiOH (aq) 0,5 M. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 15 horas. O solvente foi removido e o resíduo foi redissolvido em CH2Cl2. O resíduo insolúvel foi filtrado. O filtrado foi lavado com água, seco em MgSO4(s) e o solvente foi removido sob vácuo. O produto G foi obtido na forma de um pó amarelado (11,68 g, 12,39 mmol, 90%) que foi diretamente utilizado para a próxima etapa.

[0086] Síntese do composto H: Uma solução contendo G (11,68 g, 12,39 mmol) em 40 mL de DMF foi aquecida até 40 °C. EDCI (2 g, 12,8 mmol) e HOBt (2 g, 14,8 mmol) foram adicionados e a reação resultante foi agitada em temperatura ambiente por 30 minutos, adicionou-se o composto Ligante 42, éster metílico do ácido 4-({{2- [2-(2-amino-etoxi)-etoxi]- etil}- [1-(4-cloro-fenil)-ciclohexanecarbonil]-amino}-metil)- benzóico (9,6 g, 18,58 mmol), seguido pela adição de N- metilmorfolina (NMM, 5 ml, 45,5 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 15 horas e após esse tempo foi diluída com H2O. A solução aquosa foi separada e extraída com 200 mL de CH2Cl2. Os extratos combinados foram lavados com salmoura (4 x 100 mL), secos em Na2SO4(S), filtrados e evaporados. A purificação do resíduo bruto por cromatografia flash em sílica gel, pH=7, eluindo com MeOH/CH2Cl2 (l:9), resultou no composto de éster H (7,14 g, 4,95 mmol, 40%).

[0087] Síntese do composto I: Ao composto H (7,14 g, 4,95 mmol) em 200 mL de MeOH, foram adicionados 30 ml de LiOH (aq) 0,5 M. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 15 horas. O solvente foi removido e o resíduo foi redissolvido em 100 ml de CH2Cl2. O resíduo insolúvel foi filtrado. O filtrado foi lavado com água, seco em MgSO4(S) e o solvente foi removido sob vácuo. O produto composto I foi obtido na forma de um pó branco (5,83 g, 4,08 mmol, 82%), o qual foi diretamente utilizado para a próxima etapa.

[0088] Síntese do composto 42: Uma solução de I (5,83 g, 4,08 mmol) em 20 mL de DMF foi aquecida até 40 °C. 1- Etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDCI, 1 g, 6,4 mmol, 1,5 eq.) e hidroxibenzotriazol (HOBt, 1 g, 7,2 mmol, 1,7 eq.) foram adicionados e a reação foi agitada. Após a agitação em temperatura ambiente por 30 minutos, 4,1l-dietil-4,9-di- hidroxi-1H-pirano [3’,4’:6,7]indolizino [1,2-b]quinolina-3,14- (4H,12H)-diona (3 g, 7,64 mmol, 1,87 eq.) foi adicionado, seguido por N-metilmorfolina (NMM, 5 ml, 45,5 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 15 horas e após esse tempo foi diluída com H2O. A solução aquosa foi separada e extraída com 100 mL de CH2Cl2. Os extratos combinados foram lavados com salmoura (4 x 100 mL), secos em Na2SO4(s), filtrados e evaporados. A purificação do resíduo bruto por cromatografia flash em sílica gel, pH=7, eluindo com MeOH/CH2Cl2 (0,5:9,5) resultou em um éster na forma de pó branco, Composto 42 (2,21 g, 1,22 mmol, 30%).

[0089] O Composto 2foi preparado a partir de DL- 9 em um rendimento de 40%. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) d 1,02 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 1,39 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 1,93-1,98 (m, 6H), 3,21-3,23 (m, 2H), 3,57 (m, 2H), 3,78 (s, 4H), 3,96 (d, J = 16 Hz, 4H), 4,11 (m, 2H), 4,34 (d, J = 16 Hz, 4H), 5,32 (s, 2H), 5,38 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,58 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 6,72 (s, 1H), 6,81 (s, 2H), 7,60 (d, J = 7,6 Hz, 4H), 7,65 (s, 1H), 7,67-7,76 (m, 4H), 8,11-8,22 (m, 6H), 8,39 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 8,69 (d, J = 4 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 555,27.

[0090] Composto 3: 1H NMR (400 MHz, DMSO) d 0,86 (t, J = 6,8 Hz, 3 H), 1,24 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 1,45 (m, 4H), 1,71 (m, 4H), 1,85 (m, 2H), 2,67 (m, 2H), 3,14-3,16 (m, 2H), 3,55 (s, 4H), 3,67 (s, 8H), 3,94 (m, 2H), 5,30 (s, 2H), 5,42 (s, 2H), 6,80 (s, 2H), 7,04 (s, 1H), 7,20-7,23 (m, 4H), 7,31 (s, 1H), 7,54 (d, J = 7,6 Hz, 4H), 7,61 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,68-7,72 (m, 4H), 7,95 (s, 1H), 8,16 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,45 (d, J = 5,6 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 510.

[0091] Composto 4: 1H NMR (300 MHz, CDCla) d 1,05 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,39 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,97-1,83 (m, 6H), 3,13 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 3,50 (s, 4H), 3,54 (s, 8H), 3,60-3,64 (m, 2H), 4,04 (m, 2H), 5,28 (d, J = 11,7 Hz, 2H), 5,30 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 5,74 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,80 (s, 2H), 7,12 (s, 1H), 7,31-7,18 (m, 12H), 738-7,41 (m, 8H), 7,557,60 (m, 1H), 7,66-7,68 (m, 2H), 7,93 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,27 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,34 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,63 (s, 1H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 553,74.

[0092] Composto 5: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) d 1,05 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,41 (t, J = 7,8 Hz, 3H), 1,83-1,97 (m, 6H), 2,78 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,13-3,21 (m, 2H), 3,65 (s, 4H), 3,80 (s, 8H), 3,96-4,00 (m, 4H), 5,27 (s, 2H), 5,31 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 5,76 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,84 (s, 2H), 7,07 (s, 1H), 7,10-7,15 (m, 4H), 7,52-7,66 (m, 11H), 7,69 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 8,28 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,50 (d, J = 4,8 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 549.

[0093] Composto 6: 1H NMR (300 MHz, CDCl3): d = 8,61 (t, J = 1,5 Hz, 1H), 8,49 (dt, J = 4,8, 1,2 Hz, 4H), 8,34 (dt, J = 7,8, 1,5 Hz, 1H), 8,25 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,07 (dt, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,67-7,63 (m, 3H), 7,62-7,56 (m, 9H), 7,41 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,30-7,27 (m, 5H), 7,25-7,18 (m, 1H), 7,14-7,10 (m, 4H), 7,07 (s, 1H), 6,80 (s, 2H), 6,15-6,11 (m, 1H), 5,73 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 5,31-5,25 (m, 3H), 4,84 (dd, J = 14,0, 8,0 Hz, 1H), 3,89 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,79 (s, 8H), 3,64 (s, 4H), 3,36-3,10 (m, 6H), 1,97-1,83 (m, 2H), 1,66-1,57 (m, 4H), 1,40 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 1,04 (t, J = 7,4 Hz, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 629.

[0094] Composto 7: 1H NMR (300 MHz, CDCI3): d = 8,46 (d, J = 4,5 Hz, 4H), 8,28 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 8,24 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,87 (s, 1H), 7,667,55 (m, 10H), 7,11-7,07 (m, 4H), 7,04 (s, 1H), 6,79 (s, 2H), 5,68 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 5,27-5,22 (m, 3H), 3,95-3,89 (m, 2H), 3,77 (s, 8H), 3,62 (s, 4H), 3,10-3,08 (m, 4H), 1,90-1,72 (m, 6H), 1,35 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 0,98 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 574.

[0095] Composto 8: 1H NMR (400 MHz, CDCI3): d = 8,48 (d, J = 4,4 Hz, 4H), 8,38 (s, 1H), 8,04-8,00 (m, 2H), 7,76-7,71 (m, 3H), 7,60-7,57 (m, 4H), 7,54-7,51 (m, 5H), 7,48 (dd, J = 9,2, 1,6 Hz, 1H), 7,30 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,11-7,08 (m, 4H), 6,96 (s, 1H), 6,83 (s, 2H), 6,06 (m, 1H), 5,68 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,22 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,19 (d, J = 27,2 Hz, 1H), 5,14 (d, J = 27,2 Hz, 1H), 3,99 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,76 (s, 8H), 3,60 (s, 4H), 3,39-3,36 (m, 2H), 3,00 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,92-1,81 (m, 4H), 1,74 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 1,32 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 0,99 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 563,25.

[0096] Composto 9: 1H NMR (400 MHz, CDCl3): d = 8,65 (s, 1H), 8,49 (d, J = 4,4 Hz, 4H), 8,41 (s, 1H), 8,26 (d, J = 8 Hz, 1H), 8,16-8,08 (m, 3H), 8,01 (d, J = 8Hz, 1H), 7,87 (d, J = 2,4 Hz, 2H), 7,64-7,51 (m, 8H), 7,14 (t, J = 6 Hz, 4H), 7,00 (s, 1H), 6,79 (d, J = 4,4 Hz, 2H), 5,45 (dd, J = 172, 16,4, 2H), 5,21 (s, 1H), 5,08 (s, 2H), 5,03 (s, 1H), 3,88-3,82 (m, 10H), 3,66 (s, 4H), 3,58-3,46 (m, 4H), 3,25-3,22 (m, 2H), 3,10-2,95 (m, 4H), 2,58-2,51 (m, 2H), 1,94-1,83 (m, 2H), 1,70-1,57 (m, 4H), 1,36 (t, J = 8 Hz, 3H), 1,02 (t, J = 8 Hz, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 667,29.

[0097] Composto 11:1H NMR (300 MHz, CDCI3): d = 8,47 (dd, J = 5,1, 0,9 Hz, 4H), 8,22-8,19 (m, 2H), 7,85-7,82 (m, 2H), 7,64-7,52 (m, 16H), 7,43-7,30 (m, 6H), 7,11-7,04 (m, 5H), 6,85 (s, 2H), 5,71 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 5,27 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 5,22 (s, 2H), 4,68 (s, 2H), 4,05 (m, 2H), 3,76 (s, 8H), 3,61 (4H), 3,57 (m, 2H), 3,09 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 1,93-1,83 (m, 6H), 1,35 (t, J = 7,8 Hz, 3H), 1,02 (t, J = 7,5 Hz, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 646,29.

[0098] Composto 12: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) d 1,03 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,39 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,85 (m, 6H), 2,58-2,51 (m, 1H), 3,24-3,03 (m, 6H), 3,38-3,29 (m, 1H), 3,523,48 (m, 2H), 3,67 (s, 4H), 3,82 (s, 8H), 3,91-3,87 (m, 1H), 4,00 (t, J = 4,8 Hz, 2H), 4,69 (d, J = 3,0 Hz, 2H), 5,27 (d, J = 12,0 Hz, 2H), 5,30 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 5,74 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,86 (s, 2H), 7,04 (s, 1H), 7,15-7,11 (m, 4H), 7,407,36 (m, 2H), 7,71-7,55 (m, 12H), 7,83 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 8,23 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 8,49 (d, J = 4,8 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 641,26.

[0099] Composto 13:1H NMR (300 MHz, CDCl3) d 1,06-0,88 (m, 6H), 1,40 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,83-1,65 (m, 4H), 1,97-1,85 (m, 2H), 2,26 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 2,41 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 3,16 (m, 2H), 3,35 (m, 1H), 3,49 (m, 1H), 3,65 (s, 2H), 3,67 (s, 2H), 3,80 (s, 8H), 3,96 (m, 2H), 4,68 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,31 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 5,75 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,84 (s, 2H), 7,15-7,07 (m, 5H), 7,41- 7,34 (m, 2H), 7,69-7,56 (m, 10H), 7,96-7,94 (m, 1H), 8,18 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,31-8,24 (m, 2H), 8,50 (d, J = 4,5 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 583,27.

[00100] Composto 14: 1H NMR (300 MHz, CDCla) d 1,04 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,40 (t, J = 8,1 Hz, 3H), 1,97-1,81 (m, 6H), 3,21-3,13 (m, 2H), 3,60 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,67 (s, 4H), 3,82 (s, 8H), 3,97 (m, 2H), 4,92 (s, 2H), 5,28 (d, J = 3,9 Hz, 2H), 5,32 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 5,76 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,85 (s, 2H), 6,95-6,92 (m, 1H), 7,15-7,10 (m, 5H), 7,41 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,69-7,56 (m, 11H), 7,96 (m, 1H), 8,31-8,24 (m, 3H), 8,50 (d, J = 4,5 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 603,74.

[00101] Composto 15: 1H NMR (300 MHz, CDCI3): d = 8,51 (d, J = 4,2 Hz, 4H), 8,31-8,16 (m, 3H), 7,98-7,95 (m, 1H), 7,72-7,53 (m, 10H), 7,37 (d, J = 8,1Hz, 2H), 7,18-7,11 (m, 4H), 7,08 (s, 1H), 6,84 (s, 2H), 5,57 (dd, J = 133, 16,5Hz, 2H), 5,28 (s, 2H), 4,69 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 3,97 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 3,86-3,72 (m, 10H), 3,70-3,56 (m, 4H), 3,52-3,29 (m, 2H), 3,22-3,13 (m, 2H), 1,96-1,84 (m, 2H), 1,82-1,54 (m, 12H), 1,41 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,30-1,14 (m, 3H), 1,05 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 603,78.

[00102] Composto 16: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 1,05 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,41 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 1,96-1,85 (m, 4H), 3,17 (q, J = 8,0 Hz, 2H), 3,29 (s, 1H), 3,57 (s, 1H), 3,69 (s, 4H), 3,83 (s, 9H), 4,00 (s, 1H), 4,64 (s, 1H), 4,87 (s, 1H), 5,29 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 5,32 (d, J = 17,2 Hz, 1H), 5,76 (d, J = 16 Hz, 1H), 6,81 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 7,15-7,12 (m, 5H), 7,31-7,29 (m, 2H), 7,49 (m, 3H), 7,63-7,57 (m, 9H), 7,69-7,66 (m, 2H), 7,96 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,25 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 8,30 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,50 (d, J = 4,8 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 639,72.

[00103] Composto 17:1H NMR (400 MHz, CDCla) d 1,00 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,38 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 1,63 (m, 1H), 1,81-1,94 (m, 5H), 3,13 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,37 (m, 1H), 3,61 (m, 5H), 3,78 (m, 9H), 4,00 (m, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,90 (s, 1H), 5,24 (d, J = 8 Hz, 2H), 5,27 (d, J = 16 Hz, 1H), 5,70 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 6,77 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 7,07-7,11 (m, 5H), 7,32-7,38 (m, 4H), 7,50-7,56 (m, 15H), 7,65 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,93 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,23 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 8,27 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,47 (d, J = 4,4 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 638,83.

[00104] Composto 18: 1H NMR (300 MHz, CDCla) d 1,04 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,37 (t, J = 7,8 Hz, 3H), 1,50-1,46 (m, 2H), 1,77 (m, 2H), 1,93-1,83 (m, 2H), 3,16 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 3,66 (s, 4H), 3,74-3,72 (m, 2H), 3,81 (s, 8H), 4,09-3,96 (m, 4H), 4,82 (d, J = 9,3 Hz, 2H), 5,28 (d, J = 4,2 Hz, 2H), 5,31 (d, J = 14,7 Hz, 1H), 5,75 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,75 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 7,26-7,10 (m, 15H), 7,50 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,68-7,55 (m, 10H), 7,95 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,21-8,17 (m, 2H), 8,29 (d, J = 9,0Hz, 1H), 8,49 (d, J = 4,5 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 645,79.

[00105] Composto 19:1H NMR (300 MHz, CDCla) d 1,01 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,38 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,74 (m, 2H), 1,93-1,84 (m, 6H), 3,18-3,10 (m, 2H), 3,39-3,44 (m, 2H), 3,64 (s, 4H), 3,78 (s, 8H), 3,94 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 4,62 (s, 2H), 5,31-5,25 (m, 3H), 5,71 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,81 (s, 2H), 7,13-7,08 (m, 6H), 7,43 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,62-7,54 (m, 8H), 7,65 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,92 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,15 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,20 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 8,27 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 8,48 (d, J = 4,8 Hz, 4H), 8,64 (d, J = 2,7 Hz, 1H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 632.

[00106] Composto 20:1H NMR (300 MHz, CDCla) d 1,04 (t, J = 7,8 Hz, 3H), 1,40 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,77 (m, 2H), 1,95-1,85 (m, 4H), 3,17-3,12 (m, 2H), 3,56 (m, 2H), 3,69 (s, 4H), 3,82 (s, 8H), 3,96 (m, 2H), 4,92 (s, 2H), 5,28 (s, 2H), 5,30 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 5,74 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,82 (s, 2H), 7,08 (s, 1H), 7,16-7,12 (m, 4H), 7,42 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,67-7,56 (m, 10H), 7,95 (s, 1H), 8,23 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 8,28 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,52 (m, 4H), 8,68 (s, 1H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 627.

[00107] Composto 21:1H NMR (300 MHz, CDCla) d 1,03 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,39 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,96-1,85 (m, 4H), 2,09 (m, 2H), 3,16-3,11 (m, 2H), 3,64 (m, 2H), 3,67 (s, 4H), 3,80 (s, 8H), 4,06 (t, J = 6 Hz, 2H), 4,13 (m, 2H), 5,335,27 (m, 3H), 5,74 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 6,17 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,84 (s, 2H), 7,15-7,10 (m, 5H), 7,39 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,66-7,54 (m, 10H), 7,94 (s, 1H), 8,28-8,23 (m, 3H), 8,35 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 8,48 (d, J = 5,1 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 630.

[00108] Composto 22: 1H NMR (400 MHz, CDCla): d = 8,51 (s, 4H), 8,31-8,18 (m, 3H), 7,97-7,94 (m, 1H), 7,72-7,60 (m, 10H), 7,44-7,30 (m, 2H), 7,19-7,07 (m, 5H), 6,86 (s, 2H), 5,54 (dd, J = 172, 16,4Hz, 2H), 5,28 (s, 2H), 4,73 (d, J = 16,4 Hz, 2H), 3,99 (s, 2H), 3,83-3,74 (m, 10H), 3,70-3,67 (m, 4H), 3,50 (s, 1H), 3,38 (s, 1H), 3,18 (s, 2H), 2,50-2,42 (m, 2H), 1,97-1,86 (m, 2H), 1,81 (s, 4H), 1,73-1,67 (m, 2H), 1,451,39 (m, 3H), 1,32-1,30 (m, 6H), 1,08-1,02 (m, 3H), 0,89-0,87 (m, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 604,79.

[00109] Composto 23: 1H NMR (400 MHz, CDCla) d 1,04 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,41 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 1,59 (m, 1H), 1,76 (m, 1H), 1,96-1,83 (m, 4H), 3,20-3,14 (m, 2H), 3,30 (m, 1H), 3,59 (m, 1H), 3,67 (s, 4H), 3,81 (s, 8H), 3,89-4,02 (m, 2H), 4,66 (s, 1H), 4,90 (s, 1H), 5,28 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 5,31 (d, J = 17,2 Hz, 1H), 5,75 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 6,78 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 7,14-7,10 (m, 5H), 7,42-7,35 (m, 5H), 7,637,57 (m, 10H), 7,69-7,66 (m, 2H), 7,96 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,24 (d, J = 8 Hz, 2H), 8,29 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,50 (d, J = 4,8 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 600,76.

[00110] Composto 24: 1H NMR (300 MHz, CDCla) d 1,04 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,44-1,37 (m, 4H), 1,70-1,65 (m, 1H), 1,99-1,86 (m, 4H), 3,19-3,15 (m, 2H), 3,68-3,65 (m, 6H), 3,823,80 (m, 10H), 4,09-3,94 (m, 2H), 5,29 (s, 2H), 5,31 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 5,75 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,68 (s, 1H), 6,90 (s, 1H), 7,14-7,12 (m, 5H), 7,28 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 7,647,39 (m, 12H), 7,72-7,67 (m, 2H), 7,99-7,80 (m, 4H), 8,17 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,32-8,27 (m, 2H), 8,50 (d, J = 4,5 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 625,77.

[00111] Composto 25:1H NMR (300 MHz, CDCla) d 1,00 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,38 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,60-1,49 (m, 4H), 1,93-1,81 (m, 2H), 2,46 (s, 1H), 2,54 (s, 2H), 3,03 (m, 1H), 3,17-3,10 (m, 2H), 3,44 (m, 1H), 3,64 (s, 4H), 3,78 (s, 8H), 3,86 (m, 2H), 4,50 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 5,25 (d, J = 4,2 Hz, 2H), 5,27 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 5,70 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,80-6,77 (m, 2H), 7,12-7,08 (m, 5H), 7,19-7,17 (m, 1H), 7,35-7,33 (m, 1H), 7,50-7,42 (m, 3H), 7,65-7,54 (m, 11H), 7,68 (s, 1H), 7,92 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,12-8,06 (m, 2H), 8,28 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,47 (d, J = 4,8 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 658,26.

[00112] Composto 26:1H NMR (300 MHz, CDCI3) d 1,04 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,29 (m, 2H), 1,40 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,68 (m, 8H), 1,95-1,86 (m, 4H), 2,28 (m, 2H), 2,95 (m, 1H), 3,16 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 3,30 (m, 1H), 3,67 (s, 4H), 3,81 (s, 8H), 3,91 (m, 2H), 4,22 (s, 1H), 4,65 (s, 1H), 5,28 (d, J = 3,6 Hz, 2H), 5,31 (d, J = 15,3 Hz, 1H), 5,76 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,81 (s, 2H), 7,15-7,10 (m, 5H), 7,38-7,20 (m, 6H), 7,617,56 (m, 8H), 7,69-7,64 (m, 2H), 7,95 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 8,29 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 8,50 (d, J = 4,2 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 658,28.

[00113] Composto 27:1H NMR (300 MHz, CDCla) d 1,04 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,41 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,77-1,60 (m, 2H), 1,93-1,84 (m, 4H), 3,17 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,27 (m, 1H), 3,61 (m, 1H), 3,66 (s, 4H), 3,81 (s, 8H), 4,01-3,94 (m, 2H), 4,61 (s, 1H), 4,90 (s, 1H), 5,28 (s, 2H), 5,31 (d, J = 15,3 Hz, 1H), 5,75 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,79 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 7,14-7,10 (m, 5H), 7,69-7,55 (m, 16H), 7,96 (s, 1H), 8,25 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 8,30 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,50 (d, J = 4,8 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 634,76.

[00114] Composto 28: 1H NMR (300 MHz, CDCla): d = 8,49 (dd, J = 4,5, 0,9 Hz, 4H), 8,16 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,63-7,50 (m, 10H), 7,13-7,09 (m, 4H), 7,06 (s, 1H), 6,85 (s, 2H), 5,85 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 5,72 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 5,17 (s, 2H), 4,01 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 3,80 (s, 8H), 3,65 (s, 4H), 3,40 (q, J = 6,0 Hz, 2H), 3,07 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 1,95-1,82 (m, 6H), 1,34 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,01 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 504.

[00115] Composto 29: 1H NMR (300 MHz, CDCI3): d = 8,48 (d, J = 4,8 Hz, 4H), 8,19 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,85-7,55 (m, 12H), 7,12-7,08 (m, 5H), 6,79 (s, 2H), 5,71 (dd, J = 16,5, 7,2 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 5,21 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 3,92 (m, 1H), 3,78-3,74 (m, 11H), 3,63-3,59 (m, 5H), 3,363,34 (m, 2H), 3,11-3,08 (m, 2H), 2,40-1,72 (m, 10H), 1,37-1,32 (m, 3H), 1,04 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 552.

[00116] Composto 31:1H NMR (400 MHz, CDCla): d = 8,49 (d, J = 4,4 Hz, 4H), 8,23 (dd, J = 9,2, 5,2 Hz, 1H), 7,887,56 (m, 15H), 7,45-7,41 (m, 4H), 7,35 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 7,11-7,08 (m, 5H), 6,84 (s, 1H), 6,79 (s, 1H), 5,73 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,24 (s, 2H), 4,79 (s, 1H), 4,68 (s, 1H), 3,99 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,80-3,77 (m, 8H), 3,64-3,61 (m, 4H), 3,58-3,54 (m, 2H), 3,12-3,10 (m, 2H), 1,89-1,88 (m, 6H), 1,38-1,33 (m, 3H), 1,04-1,01 (m, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 586,77.

[00117] Composto 32: 1H NMR (400 MHz, CDCla): d = 8,48 (d, J = 4,8 Hz, 4H), 8,15 (t, J =8,0 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,62-7,54 (m, 10H), 7,11 (t, J = 6,0 Hz, 4H), 7,05 (s, 1H), 6,82 (s, 2H), 6,13-6,09 (m, 1H), 5,69 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,26 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,20 (s, 2H), 4,36 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,25 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,96 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,78 (s, 8H), 3,63 (s, 4H), 3,34 (q, J = 6,4 Hz, 2H), 3,13-3,04 (m, 3H), 2,87 (t, J = 11,2 Hz, 1H), 2,33-2,28 (m, 1H), 1,93-1,79 (m, 8H), 1,71 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 1,37 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 0,99 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 559,26.

[00118] Composto 33: 1H NMR (300 MHz, CDCla): d = 8,47 (d, J = 4,8 Hz, 4H), 8,20 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,80-7,78 (m, 1H), 7,64-7,49 (m, 10H), 7,47-7,41 (m, 1H), 7,10 (t, J = 6,0 Hz, 4H), 7,04 (s, 1H), 6,78 (s, 2H), 5,69 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 5,27 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 5,22 (s, 2H), 3,91 (m, 2H), 3,82 (m, 2H), 3,76 (s, 8H), 3,72-3,68 (m, 4H), 3,61 (s, 6H), 3,31-3,27 (m, 2H), 3,11 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,47-2,44 (m, 2H), 2,35-2,33 (m, 2H), 2,05-1,95 (m, 2H), 1,92-1,83 (m, 2H), 1,81-1,76 (m, 2H), 1,66 (m, 2H), 1,36 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,12-1,09 (m, 6H), 0,99 (t, J = 7,5 Hz, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 615,80.

[00119] Composto 34: 1H NMR (400 MHz, CDCla): d = 8,38 (d, J = 4,0 Hz, 4H), 7,74-7,71 (m, 4H), 7,62-7,58 (m, 7H), 7,35 (dd, J = 7,2, 2,4 Hz, 1H), 7,24-7,21 (m, 4H), 6,89 (s, 1H), 6,58 (s, 2H), 5,35 (m, 1H), 4,97 (m, 1H), 4,73 (s, 2H), 4,25-4,24 (m, 1H), 4,13-4,10 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,76 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,68 (s, 8H), 3,61 (m, 1H), 3,49 (s, 4H), 3,20-3,17 (m, 1H), 3,08-3,03 (m, 1H), 2,94 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 2,80 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 2,49-2,30 (m, 6H), 2,10-1,93 (m, 2H), 1,71-1,53 (m, 4H), 1,25 (d, J = 6,8 Hz, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 605.

[00120] Composto 35: 1H NMR (400 MHz, CDCla): d = 8,49 (d, J = 4 Hz, 4H), 8,18 (d, J = 9,2Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,68-7,41 (m, 11H), 7,15-7,06 (m, 6H), 5,52 (dd, J = 175,6, 16,4Hz, 2H), 5,22 (s, 2H), 4,14 (s, 2H), 3,96 (s, 4H), 3,833,73 (m, 8H), 3,48 (s, 2H), 3,09-3,07 (m, 2H), 1,94-1,86 (m, 2H), 1,34 (t, J = 7,6Hz, 3H), 1,019 (t, J = 7,6Hz, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 510.

[00121] Composto 36: 1H NMR (400 MHz, CDCla): d = 8,68 (s, 1H), 8,49 (d, J = 4,4 Hz, 4H), 8,24 (t, J = 8Hz, 2H), 8,09 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 2Hz, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,58-7,43 (m, 10H), 7,11-7,04 (m, 6H), 5,54 (dd, J = 178,6, 16Hz, 2H), 5,27 (s, 2H), 3,83-3,76 (m, 11H), 3,49 (s, 3H), 3,15 (q, J = 7,6Hz, 2H), 2,90 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 1,95-1,84 (m, 2H), 1,38 (t, J = 7,6Hz, 3H), 1,06 (t, J = 7,6Hz, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 542.

[00122] Composto 37: 1H NMR (300 MHz, CDCI3): d = 8,50-8,48 (m, 4H), 8,31-8,24 (m, 3H), 7,97 (s, 1H), 7,70-7,52 (m, 12H), 7,16-7,10 (m, 6H), 7,06 (s, 1H), 7,04 (s, 1H), 6,78 (s, 2H), 6,05 (s, 1H), 5,76 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 5,34-5,28 (m, 3H), 4,74 (s, 2H), 4,04 (m, 2H), 3,77 (s, 8H), 3,59 (s, 4H), 3,55 (m, 2H), 3,17 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 2,54 (q, J = 7,5 Hz, 4H), 1,97-1,84 (m, 6H), 1,41 (t, J = 7,8 Hz, 3H), 1,12 (t, J = 7,5 Hz, 6H), 1,04 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 636.

[00123] Composto 38: 1H NMR (300 MHz, CDCla) d 1,04 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,32-1,25 (m, 2H), 1,40 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,63 (m, 6H), 1,93-1,85 (m, 6H), 2,22-2,17 (m, 2H), 2,90 (m, 1H), 3,20-3,15 (m, 3H), 3,88-3,67 (m, 26H), 4,09 (s, 1H), 4,54 (s, 1H), 5,28 (d, J = 10,5 Hz, 2H), 5,31 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 5,75 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,77 (s, 2H), 6,97 (m, 1H), 7,26-7,11 (m, 10H), 7,72-7,55 (m, 12H), 7,99-7,96 (m, 3H), 8,29-8,26 (m, 3H), 8,49 (d, J = 4,8 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 798.

[00124] Composto 39: 1H NMR (400 MHz, CDCI3): d = 1,03 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,25 (m, 1H), 1,39 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 1,65-1,96 (m, 11H), 2,01 (m, 2H), 2,24 (m, 2H), 3,13-3,19 (m, 3H), 3,44-3,54 (m, 5H), 3,59-3,64 (m, 12H), 3,77 (s, 8H), 3,97 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 4,30 (s, 1H), 4,67 (s, 1H), 5,27 (d, J =12,4 Hz, 2H), 5,30 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,74 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 6,80 (s, 2H), 7,05 (s, 1H), 7,09-7,12 (m, 5H), 7,207,30 (m, 5H), 7,54-7,62 (m, 8H), 7,65-7,68 (m, 2H), 7,76 (m, 4H), 7,94 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,13 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 8,28 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,48 (d, J = 4,8 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 798.

[00125] Composto 40:1H NMR (300 MHz, CDCla): d = 1,04 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,25-1,29 (m, 1H), 1,39 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,66-1,97 (m, 9H), 2,17-2,26 (m, 3H), 2,75 (m, 1H), 3,12-3,20 (m, 3H), 3,39 (m, 1H), 3,74-3,86 (m, 12H), 4,10 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 5,27-5,34 (m, 3H), 5,75 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,99 (s, 2H), 7,12-7,14 (m, 4H), 7,20-7,31 (m, 6H), 7,447,46 (m, 4H), 7,55-7,60 (m, 4H), 7,64-7,67 (m, 3H), 7,93 (s, 1H), 8,10-8,18 (m, 2H), 8,28 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 8,51 (m, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 645.

[00126] Composto 41:1H NMR (CDCla, 400 MHz): d = 1,12 (s, 3H), 1,21 (s, 3H), 1,68 (s, 3H), 1,91 (s, 3H), 1,632,33 (m, 4H), 2,26 (s, 3H), 2,41 (s, 3H), 2,38-2,58 (m, 8H), 2,72 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,18-3,27 (m, 2H), 3,64 (s, 4H), 3,78 (s, 8H), 3,94 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 4,19 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,30 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,43 (dd, J = 10,8, 6,8 Hz, 1H), 4,96 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 5,67 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,885,93 (m, 2H), 6,20 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 6,29 (s, 1H), 6,81 (s, 2H), 7,06 (s, 1H), 7,06-7,12 (m, 4H), 7,27-7,63 (m, 24H), 7,79 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 8,13 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 8,48 (d, J = 4,8 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 762.

[00127] Composto 42: 1H NMR (CDCla, 400 MHz): d = 0,98 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,22 (m,8H), 1,38 (t, J = 7,6 Hz, aH), 1,88 (m, 2H), 2,01 (s, 5H), 2,10-2,41 (m, 8H), 2,85 (s, 1H), 2,92 (s, 1H), a,15 (m, aH), a,44 (s, 2H), a,50-a,71 (m, 1aH), a,76 (s, 8H), a,86 (s, 2H), 4,10 (dd, J = 7,2 Hz, 4H), 4,a2 (s, 2H), 4,5a (s, 1H), 5,24 (s, 2H), 5,a0 (d, J = 16 Hz, 1H), 5,7a (d, J = 16 Hz, 1H), 6,75 (s, aH), 6,95 (br, 2H), 7,1-7,25 (m, 1aH), 7,29 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,52-7,64 (m, 8H), 7,64-7,72 (m, 3H), 7,93 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 8,27 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,47 (d, J = 8,8 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 901,6.

[00128] Composto 43:1H NMR (CDCI3, 400 MHz): d = 1,12 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,67 (s, 3H), 1,93 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 2,21-2,76 (m, 8H), 2,97 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 3,36-3,41 (m, 1H), 3,54-3,62 (m, 1H), 3,71 (t, J = 4,4 Hz, 4H), 3,78 (s, 4H), 3,84 (s, 8H), 4,16-4,20 (m, 3H), 4,414,57 (m, 3H), 4,70 (s, 1H), 4,94 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 5,66 (dd, J = 6,8, 3,6 Hz, 1H), 5,86-5,90 (m, 1H), 6,17 (q, J = 9,2 Hz, 1H), 6,31 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 7,03-7,09 (m, 4H), 7,19-7,63 (m, 34H), 7,80 (dd, J = 17,6, 7,2 Hz, 2H), 8,12 (m, 2H), 8,47 (d, J = 4,8 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 831.

[00129] Composto 44:1H NMR (400 MHz, CDCl3) : d = 1,05 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,40 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 1,85-1,96 (m, 6H), 3,14-3,54 (m, 2H), 3,52-3,57 (m, 2H), 3,65 (s, 4H), 3,80 (s, 8H), 4,057-4,10 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 5,29 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,73 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 6,88 (s, 2H), 6,99 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,07-7,12 (m, 6H), 7,28-7,66 (m, 18H), 7,93 (d ,/ = 2,8 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 8,26 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,48 (d, J = 4,8 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 661,4.

[00130] Composto 45: 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): d = 1,11 (s, 3H), 1,18 (s, 3H), 1,66 (s, 3H), 1,89 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,02-2,57 (m, 7H), 2,68 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 2,79 (t, 7 = 5,7 Hz, 2H), 3,25 (q, J = 4,8 Hz, 2H), 3,40 (t, 7 = 5,1 Hz, 2H), 3,54-3,63 (m, 10H), 3,70 (t, J = 4,5 Hz, 4H), 3,77 (s, 4H), 3,81 (s, 8H), 4,18 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 4,28 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 4,39-4,47 (m, 3H), 4,94 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 5,43 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 5,66 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 5,90 (dd, 7 = 8,4, 3,6 Hz, 1H), 6,16 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 6,28 (s, 1H), 7,06-7,09 (m, 8H), 7,22-7,61 (m, 33H), 7,79 (dd, J = 7,5 Hz, 2H), 8,11 (dd, J = 7,5 Hz, 2H), 8,46 (d, J = 4,5 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 978.

[00131] Composto 46: 1H NMR (400 MHz, CDCla) : d = 1,12 (s, 3H), 1,19 (s, 3H), 1,68 (s, 3H), 1,87-1,88 (m, 1H), 1,90 (s, 3H), 2,07-2,13 (m, 1H), 2,20 (s, 3H), 2,28-2,35 (m, 1H), 2,42 (s, 3H), 2,56 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,66-2,67 (m, 1H), 2,80 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,25-3,31 (m, 2H), 3,79-3,96 (m, 18H), 4,11 (s, 2H), 4,20 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 4,22-4,28 (m, 2H), 4,31 (d, J = 8 Hz, 1H), 4,40-4,45 (m, 1H), 4,95 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,48 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 5,68 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 5,94 (dd, J = 8,4, 3,6 Hz, 1H), 6,22 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 6,27 (s, 1H), 6,89 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,08-7,13 (m, 4H), 7,20 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,27-7,66 (m, 21H), 7,77 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 8,14 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 8,41 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 8,49 (d, 7 = 4,8 Hz, 2H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 857,8.

[00132] Composto 47:1H NMR (400 MHz, CDCla): d = 1,04 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,30 (s, 9H), 1,44 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 1,86-1,97 (m, 4H), 2,03-2,08 (m, 2H), 3,18-3,24 (m, 2H), 3,36-3,40 (m, 2H), 3,85 (s, 4H), 3,95 (s, 6H), 4,26 (s, 2H), 5,30-5,34 (m, 3H), 5,78 (d, 1,04, J = 3,6 Hz, 3H), 7,09-7,13 (m, 2H), 7,17-7,21 (m, 2H), 7,5 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,60-7,76 (m, 9H), 7,84 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 8,0 (d, J = 2,4Hz, 1H), 8,28-8,32 (m, 4H), 8,48 (d J = 7,6 Hz, 2H), 8,55 (d ,/ = 6,8 Hz, 2H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 626,8.

[00133] Composto 48: 1H NMR (CDCla, 400 MHz): d = 0,88 (m, 6H), 1,03 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 1,39 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,90 (m, 2H), 2,23 (br, 5H), 2,93 (br, 2H), 3,13 (m, 3H), 3,25 (s, 2H), 3,41-3,78 (m, 21H), 3,91 (m, 2H), 4,11 (s, 2H), 4,33 (s, 2H), 4,56 (s, 2H), 5,25 (s, 2H), 5,32 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 5,76 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 6,74 (s, 2H), 6,98 (s, 2H), 7,04-7,51 (m, 30H), 7,69 (m, 4H), 7,95 (s, 2H), 8,17 (d, J = 6 Hz, 2H), 8,30 (d, J = 8,8 Hz, 1H).

[00134] Composto 49: 1H NMR (300 MHz, CDCla): d = 1,05 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,25 (m, 3H), 1,41 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,69 (m, 11H), 1,83-2,02 (m, 4H), 2,27 (m, 2H), 2,84 (m, 1H), 3,00 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 3,14-3,21 (m, 3H), 3,64 (s, 3H), 3,76 (s, 4H), 3,84 (s, 8H), 4,15 (s, 1H), 4,57 (s, 1H), 4,74-4,80 (m, 1H), 5,29 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 5,32 (d, J = 14,7 Hz, 1H), 5,76 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,95 (s, 2H), 7,10-7,14 (m, 4H), 7,18-7,33 (m, 6H), 7,43-7,46 (m, 4H), 7,57-7,62 (m, 4H), 7,67-7,70 (m, 2H), 7,96 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 8,29 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,52 (d, J = 5,1 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 730.

[00135] Composto 50:1H NMR (CDCla, 400 MHz): d = 0,88 (m, 2H), 1,13 (s, 3H), 1,21 (s, 3H), 1,22-1,30 (m, 4H), 1,68 (s, 3H), 1,69-1,91 (m, 6H), 1,91 (s, 3H), 2,05-2,32 (m, 2H), 2,21 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 2,55-2,97 (m, 6H), 2,76 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,14-3,54 (m, 8H), 3,64 (s, 4H), 3,67 (s, 8H), 3,86 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,95 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 4,104,12 (m, 2H), 4,09 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 4,19 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 4,29-4,45 (m, 3H), 4,95-4,97 (m, 2H), 5,45 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 5,67 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,92 (dd, J = 8,4, 4,0 Hz, 1H), 6,19 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 6,29 (s, 1H), 6,43-6,45 (m, 1H), 6,82 (s, 2H), 6,82-7,14 (m, 5H), 7,27-7,63 (m, 26H), 7,80 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 8,13 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 8,50 (d, J = 4,8 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 937.

[00136] Composto 51:1H NMR (300 MHz, CDCla): d = 1,05 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,25-1,40 (m, 12H), 1,83-1,91 (m, 6H), 3,16-3,23 (m, 2H), 3,47-4,05 (m, 28H), 4,55 (s, 2H), 4,77 (s, 2H), 5,28-5,34 (m, 3H), 5,76 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,86 (s, 2H), 7,01-7,13 (m, 5H), 7,60-7,66 (m, 16H), 7,96 (d ,J = 2,4 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 8,28 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 8,48 (d, J = 4,2 Hz, 4H). Massa: (EM+2H+)/2: encontrada 760,4.

[00137] Conjugados de Zn-DPA de cada um entre os compostos descritos acima, denotados como Zn-DPA-(Número do composto), foram preparados após o procedimento descrito abaixo. Mais especificamente, cada um entre os Compostos 1 a 51 foi misturado com 2 equivalentes molares de nitrato de zinco em uma solução contendo uma mistura de solvente de diclorometano e metanol (1:1) em temperatura ambiente e agitado por uma hora. A remoção do solvente sob vácuo resultou no conjugado de Zn-DPA correspondente.

[00138] Os dados analíticos de vários conjugados de Zn-DPA são mostrados abaixo como exemplos representativos:

[00139] Zn-DPA- (8): 1H NMR (7 00 MHz, DMSO-d6): d = 0,86 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,25 (t, J = 7,7 Hz, 3H), 1,66 (p, J = 7,7 Hz, 2H), 1,79-1,89 (m, 4H), 3,16 (q, J = 7,7 Hz, 2H), 3,20 (q, J = 7,7 Hz, 2H), 3,75 (d, J = 16,1 Hz, 4H), 3,84 (s, 4H), 4,11 (br, 2H), 4,33 (d, J = 16,1 Hz, 4H), 5,31 (s, 2H), 5,41 (s, 2H), 6,48 (br, 1H), 6,51 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,99 (s, 2H), 7,02 (s, 1H), 7,44 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,7 Hz, 4H), 7,60 (t, J = 7,0 Hz, 4H), 7,65 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,65 (dd, J = 9,1, 2,1 Hz, 2H), 8,05 (t, J = 7,7 Hz, 4H), 8,14 (s, 1H), 8,21 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,63 (d, J = 5,6 Hz, 3H), 8,95 (s, 1H). Massa: (EM+Zn+2H+)/2: encontrada 595, (EM+2Zn+2H+)/2: encontrada 627.

[00140] Zn-DPA- (11):1H NMR (700 MHz, DMSO-d6): d = 0,86 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,25 (t, J = 7,7 Hz, 3H), 1,791,88 (m, 6H), 3,16 (q, J = 7,7 Hz, 2H), 3,48 (s, 2H), 3,73 (d, J = 16,1 Hz, 4H), 3,81 (br, 4H), 4,10 (br, 1H), 4,32 (d, J = 16,1 Hz, 4H), 4,73 (s, 2H), 5,32 (s, 2H), 5,41 (s, 2H), 6,52 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,98 (s, 2H), 7,29 - 7,31 (m, 1H), 7,37 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,40 (t, J = 7,7 Hz, 4H), 7,47 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 7,52 (d, J = 7,7 Hz, 4H), 7,58 - 7,62 (m, 6H), 7,61 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,76 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 7,93 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 8,03 (t, J = 7,7 Hz, 4H), 8,20 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,63 (d, J = 5,6 Hz, 4H), 8,84 (br, 1H). Massa: (EM+Zn+2H+)/2: encontrada 678, (EM+2Zn+2H+)/2: encontrada 710.

[00141] Zn-DPA- (17): 1H NMR (700 MHz, DMSO-d6) : d = 0,85 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,25 (t, J = 7,7 Hz, 3H), 1,741,88 (m, 6H), 3,15 (q, 7 = 7,7 Hz, 3H), 3,53 (s, 1H), 3,69 - 3,83 (m, 8H), 3,94 (br, 1H), 4,16 (br, 1H), 4,30 - 4,38 (m, 4H), 4,73 (s, 1H), 4,88 (s, 1H), 5,30 (s, 2H), 5,40 (s, 2H), 6,51 (s, 1H), 6,54 - 6,88 (m, 2H), 6,93 (s, 1H), 7,02 (s, 1H), 7,30 - 7,64 (m, 17H), 7,68 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,75 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 8,05 (t, J = 7,7 Hz, 4H), 8,15 (s, 1H), 8,18 - 8,21 (m, 3H), 8,64 (d, J = 5,6 Hz, 4H). Massa: (EM+Zn+2H+)/2: encontrada 670, (EM+2Zn+2H+)/2: encontrada 702.

[00142] Zn-DPA- (31):1H NMR (700 MHz, DMSO-d6): d = 0,85 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,19 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,24 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 1,82-1,84 (m, 6H), 3,07 - 3,15 (m, 2H), 3,50 (br, 1H), 3,60 (br, 1H), 3,71 (t, J = 17,5 Hz, 4H), 3,81 (s, 4H), 4,12 - 4,14 (m, 2H), 4,31 (t, J = 14,7 Hz, 4H), 4,65 (s, 1H), 4,82 (s, 1H), 5,29 (s, 2H), 5,41 (s, 2H), 6,51 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,99 (s, 2H), 7,26 - 7,72 (m, 20H), 7,72 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 8,03 (t, J = 7,7 Hz, 3H), 8,13 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 8,63 (d, J = 4,9 Hz, 4H). Massa: (EM+Zn+2H+)/2: encontrada 618, (EM+2Zn+2H+)/2: encontrada 650.

ESTABILIDADE PLASMÁTICA DE CONJUGADOS DE ZN-DPA

[00143] Conjugados de Zn-DPA, a saber, Zn-DPA-(8), Zn-DPA-(12), Zn-DPA-(25), Zn-DPA-(26) e Zn-DPA-(42), preparados a partir dos compostos correspondentes 8, 12, 25, 26 e 42, respectivamente, foram incubados em um plasma de camundongo a 37 °C por até 24 horas para avaliar a estabilidade destes conjugados.

[00144] Uma amostra foi analisada com um sistema de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência para determinar a concentração de um conjugado de teste em um dos quatro pontos avaliáveis (a saber, 0, 3 horas, 6 horas e 24 horas). Foram determinados os percentuais do conjugado de teste remanescentes em 3, 6 e 24 horas após a incubação no plasma. Os resultados são mostrados na Tabela 1 abaixo. Um percentual maior indica maior estabilidade. Entre os cinco conjugados de teste, Zn-DPA-(26) e Zn-DPA-(42), preparados a partir dos Compostos 26 e 42, respectivamente, foram os mais estáveis. Após 24 horas de incubação, foi descoberto que 95% ou mais destes conjugados permaneceram no plasma. TABELA 1. ESTABILIDADE (PERCENTUAL REMANESCENTE) DE CONJUGADOS ZN-DPA, ZN-DPA-(8), ZN-DPA-(12), ZN-DPA-(25), ZN- DPA-(26) E ZN-DPA-(42)

INIBIÇÃO DE CRESCIMENTO DE CÉLULAS CANCEROSAS CULTURA CELULAR

[00145] Células SCM-1, MiaPaca2 e Colo205 foram cultivadas em meio RPMI 1640 (Roswell Park Memorial Institute) (RPMI; Gibco), suplementadas com soro fetal bovino a 10% (FBS; Gibco). Células Detroit551 foram cultivadas em meio Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) suplementado com FBS 10% 50 U/mL de penicilina e estreptomicina, e aminoácidos não essenciais a 1% (NEAA; Gibco).

[00146] Conjugados de Zn-DPA, a saber, Zn-DPA-(8), Zn-DPA-(12), Zn-DPA-(25), Zn-DPA-(26) e Zn-DPA-(42), preparados a partir dos compostos correspondentes 8, 12, 25, 26 e 42, respectivamente, foram utilizados para inibir o crescimento de células cancerosas humanas (SCM-1, Colo205, MiaPaca2) e de células de fibroblasto de pele embrionária humana Detroit551 seguindo-se o procedimento descrito abaixo.

ENSAIO DE VIABILIDADE CELULAR

[00147] A viabilidade celular foi analisada pelo ensaio MTS (Promega, Madison, WI, EUA). Mais especificamente, as células foram cultivadas (2500-3000 células/poço) em uma placa de 96 poços com fundo chato por 24 horas. Um meio foi adicionado com um composto de teste a uma concentração pré- determinada. As células foram ainda incubadas por 72 horas. Ao final da incubação, o meio foi removido e diluído com 100 µl de uma mistura de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3- carboximetoxifenil)-2-(4-sulfofenil)-2H- tetrazólio/metossulfato de fenazina. As células foram novamente incubadas por 1,5 hora a 37 °C em um incubador umidificado com CO2 a 5% para permitir que as células viáveis convertessem o sal de tetrazólio em formazana. A conversão foi determinada medindo-se a absorbância a 490 nm utilizando uma Leitora de Microplaca de Absorbância BioTek PowerWave-X.

[00148] Os dados obtidos foram normalizados utilizando um controle de veículo tratado com dimetilsulfóxido (DMSO) (viabilidade de 100%) e um controle de fundo (viabilidade de 0%) para verificar a inibição do crescimento. O valor de IC50 é definido como a concentração de um composto que induz uma redução de 50% na viabilidade celular em comparação a um controle tratado com veículo. Esses valores foram calculados utilizando o software GraphPad Prism versão 4 (San Diego, CA, EUA).

[00149] Os valores de IC50 para cinco conjugados de Zn-DPA, a saber, Zn-DPA-(8), Zn-DPA-(12), Zn-DPA-(25), Zn-DPA- (26) e Zn-DPA-(42), foram mostrados na Tabela 2 abaixo. São também mostrados nesta tabela os valores de IC50 para dois compostos anticâncer, a saber, SN-38 e CPT-11, para fins de comparação. Vide abaixo as estruturas destes dois compostos. Observar que Zn-DPA-(8), Zn-DPA-(12), Zn-DPA-(25), Zn-DPA-(26) e Zn-DPA-(42), bem como CPT-11, são pró-drogas do composto anticâncer SN-38. Zn-DPA-(26), Zn-DPA-(42) e CPT-11 continham SN-38 em cerca de 24%, 18% e 58%, respectivamente.

[00150] Tabela 2. Valores de IC50 dos conjugados de Zn-DPA, a saber, Zn-DPA-(8), Zn-DPA-(12), Zn-DPA-(25), Zn-DPA- (26), Zn-DPA-(42), e dois compostos anticâncer (SN-38 e CPT- 11) contra células cancerosas humanas (Colo205, SCM-1, MiaPaca2) e fibroblasto de pele embrionária humana Detroit 551.

ENSAIO ANTITUMOR IN VIVO

[00151] Dois conjugados de Zn-DPA, a saber, Zn- DPA-(26) e Zn-DPA-(42), foram submetidos a um ensaio antitumor in vivo contra tumores Colo205 ou MiaPaca2 crescendo em camundongos nus seguindo-se o procedimento descrito abaixo.

[00152] Mais especificamente, as células Colo205 ou MiaPaca2 foram cultivadas e mantidas em um balão com um meio RPMI-1640 que foi suplementado com FBS 10%. As células foram coletadas e inoculadas (lxl06 células) subcutaneamente no flano esquerdo de um camundongo nu macho adulto. Os camundongos com tumor foram agrupados de acordo com o volume tumoral médio de aproximadamente 200 mm3. As dimensões do tumor foram medidas com um paquímetro digital e o volume do tumor em mm3 foi calculado pela fórmula: Volume = (comprimento x largura A2)/2.

[00153] Os camundongos foram mantidos em gaiolas esterilizadas equipadas com um filtro de ar e materiais de forragem estéreis no Laboratory Animal Center of National Health Research Institutes. Todos os camundongos foram alimentados com água esterilizada e ração at libitum seguindo um ciclo de 12 horas de claridade/12 horas de escuro durante todo o estudo.

[00154] Várias dosagens de Zn-DPA-(26) e Zn-DPA- (42) foram utilizadas neste ensaio, a saber, 40 mg/kg, 20 mg/kg e 10 mg/kg, p< 0,05 vs. controle de veículo por análise ANOVA de uma via e pelo teste de comparação múltipla de Newman-Keuls. Tanto Zn-DPA-(26) quanto Zn-DPA-(42) na mistura de DMSO 10%/Cremophor EL 20%/dextrose 70% foram administrados por via intravenosa em um regime de uma vez ao dia por cinco dias consecutivos quando dosados em 20 mg/kg ou 10 mg/kg, ou de duas vezes por semana durante duas semanas quando dosados a 40 mg/kg; CPT-11 (40 mg/kg) foi administrado por via intravenosa duas vezes por semana durante duas semanas; e SN-38 (10 mg/kg) na mistura de DMSO 10%/Cremophor EL 20%/Na2CO3 10%/dextrose 60% foi administrado por via intravenosa uma vez ao dia por cinco dias consecutivos durante duas semanas.

[00155] Embora as quantidades de SN-38 contidas em Zn-DPA-(26) e Zn-DPA-(42) sejam se apenas 24% e 18%, respectivamente (em comparação com 58% no CPT-11), foi inesperadamente descoberto que estes dois conjugados de Zn-DPA demonstram atividades antitumor muito maiores do que aquelas de SN-38 e de CPT-11 testados no modelo de xenotransplante de tumor Colo205 em camundongos. Mais especificamente, foi descoberto que o Zn-DPA-(26) demonstrou inesperadamente atividades antitumor muito maiores nas dosagens de 10 mg/kg e 40 mg/kg, em comparação com aquelas de SN-38 na dosagem de 10 mg/kg e CPT-11 na dosagem de 40 mg/kg; e Zn-DPA-(42) também demonstrou inesperadamente atividades antitumor dose- dependentes e atividades antitumor muito maiores nas três dosagens, em comparação com aquelas de SN-38 na dosagem de 10 mg/kg e de CPT-11 na dosagem de 40 mg/kg.

[00156] Além disso, no modelo de xenotransplante de tumor MiaPaca2 em camundongos, Zn-DPA-(42) demonstrou inesperadamente atividades antitumor dose-dependente e atividades antitumor muito maiores nas dosagens de 40 mg/kg, 20 mg/kg e 10 mg/kg, em comparação com aquelas de SN-38 na dosagem de 10 mg/kg e de CPT-11 na dosagem de 40 mg/kg.

OUTRAS REALIZAÇÕES

[00157] Todas as características reveladas na presente especificação podem ser combinadas de qualquer maneira. Cada característica revelada na presente especificação pode ser substituída por uma característica alternativa para fins iguais, equivalentes ou similares. Assim, salvo se expressamente declarado em contrário, cada característica revelada é somente um exemplo de uma série genérica de características equivalentes ou similares.

[00158] A partir da descrição acima, os técnicos no assunto podem facilmente determinar as características essenciais da presente invenção e, sem sair do seu espírito e escopo, podem fazer diversas alterações e modificações da invenção para adaptá-la a vários usos e condições. Por exemplo, compostos estruturalmente análogos aos compostos da presente invenção também podem ser produzidos, triados quanto à sua eficácia no tratamento de uma condição relacionada a células contendo fosfatidilserina inversa. Assim, outras realizações também estão dentro do escopo das reivindicações.

Claims (15)

1. COMPOSTO, caracterizado por ser de fórmula (I): em que cada um entre A1, A2, A3, A4, A5 e A6 é metileno; B1 é etileno, butileno ou hexileno; B2 é uma ligação, etileno, fenileno L1 é uma ligação, NH, NHCH2, NHC(O), NHSO2, NHC(O)NH, cada um entre W1, W2, W3, W4, W5, W6, W7, e W8 é CH ou cada um de W1, W2, W3 e W4 é N e cada um de W5, W6, W7 e W8 é CH; X é uma ligação, O ou NH; Z é uma fração terapêutica anticâncer conectado a L2 por meio de uma ligação clivável, a fração selecionada a partir do grupo que consiste em:

2. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por Y ser

3. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por cada um de W1, W2, W3, e W4 ser N, e cada um entre W5, W6, W7, e W8 ser CH.

4. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por B1 ser butileno ou hexileno.

5. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por X ser O.

6. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por B2 ser uma ligação, etileno, fenileno,

7. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por Z ser

8. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por Z ser .

9. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por Y se

10. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por X ser O e Z ser

11. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por X ser O, Y ser

12. COMPOSTO, caracterizado por ser qualquer um dos seguintes compostos:

13. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo composto ser qualquer um dos seguintes compostos:

14. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, caracterizada por compreender um veículo farmaceuticamente aceitável e um complexo de um íon metálico e um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 13, em que o íon metálico é um cátion tendo duas ou mais cargas.

15. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, de acordo com a reivindicação 14, caracterizada pelo íon metálico ser Zn2+, Cu2+, Ca2+, Mg2+, Mn2+, Ni2+, Co2+, Fe2+, Cd2+ ou uma combinação destes.