BR112016023890B1

BR112016023890B1 - métodos para reduzir sinais de envelhecimento da pele, para aumentar a adipogênese da face e do corpo e para aumentar a lipogênese da face e do corpo

Info

Publication number: BR112016023890B1
Application number: BR112016023890-7A
Authority: BR
Inventors: Scott W. Wenzel; David J. Tyrrell; Alencia Vanay Grice; Stephanie Vandeven Teat; Jeffery Richard Seidling
Original assignee: Kimberly-Clark Worldwide, Inc
Priority date: 2014-04-30
Filing date: 2014-04-30
Publication date: 2020-12-01
Also published as: GB2541317A; US20170042797A1; KR20200122411A; US10548835B2; KR102246477B1; AU2014392694A1; BR112016023890A2; AU2014392694B2; KR20160143838A; MX2016013409A; WO2015167547A1; GB2541317B

Abstract

MÉTODOS DE REDUÇÃO DE SINAIS DE ENVELHECIMENTO DA PELE Composições para reduzir o envelhecimento da pele são divulgadas aqui. As composições podem ser aplicadas topicamente a uma região da pele para reduzir ou prevenir rugas da pele, linhas finas, afinamento da pele, flacidez da pele, ressecamento da pele e coceira da pele.

Description

FUNDAMENTOS DA DIVULGAÇÃO

[1]A presente divulgação refere-se geralmente a composições e métodos para reduzir os sinais de envelhecimento da pele do rosto e do corpo. Mais particularmente, a presente divulgação refere-se a composições incluindo um extrato de UNDARIA e/ou BIDENS e métodos de aplicar topicamente as composições para estimular a adipogênese e lipogênese para reduzir os sinais de envelhecimento da pele.

[2]A pele humana muda drasticamente com a idade, tornando-se mais fina e mais seca devido ao afinamento da camada epitelial e degeneração da gordura subjacente e do tecido conjuntivo. Outros sinais de pele envelhecida incluem perda de elasticidade da pele, firmeza e resiliência.

[3]A pele das áreas da face e do pescoço é particularmente propensa a sinais de envelhecimento. Sinais de envelhecimento que afetam a pele do rosto e do pescoço incluem, por exemplo, rugas, linhas finas, afinamento da pele, flacidez da pele, ressecamento da pele e coceira na pele.

[4]Alterações no status hormonal (por exemplo, diminuição nos níveis de estrogênio, aumento nos níveis de hormônio folículo-estimulante (FSH)) durante a perimenopausa e menopausa podem causar alterações na pele ainda mais pronunciadas. Manifestações atróficas associadas com a menopausa, como afinamento da pele e diminuição funcional na "força" da pele são sistêmicas. Em particular, há uma diminuição acentuada no colágeno I e colágeno III e uma diminuição no tamanho e número de adipócitos na pele envelhecida. Estes efeitos resultam em áreas da pele, e em particular, a pele facial, pele do pescoço, pele do tórax, pele da mama, pele da mão, pele da perna e pele dos pés, mostrando sinais aumentados de envelhecimento (por exemplo, rugas, linhas finas, flacidez da pele, afinamento da pele, etc.).

[5]A pele vulvar e dos lábios são regiões da pele adicional específicas que mudam conforme uma mulher envelhece, principalmente como resultado das alterações nos níveis hormonais durante e após a menopausa. A pele vulvar e dos lábios pode perder a elasticidade devido à degeneração da gordura subjacente e tecidos conjuntivos, perda de colágeno e afinamento da camada epitelial da pele. A pele vulvar pode também tornar-se menos úmida. A perda de elasticidade e umidade da pele vulvar da mucosa pode diminuir a aparência jovial da anatomia vulvar. Uma mulher pode ficar envergonhada e mesmo deprimida com o efeito do envelhecimento na aparência de sua genitália externa, como resultado de alterações da pele vulvar e dos lábios.

[6]Uma grande variedade de cremes e loções existem que cosmeticamente podem melhorar a aparência e, às vezes, a estrutura da pele na face e no corpo. Estas composições muitas vezes empregam retinoides, ácidos hidroxi e/ou esfoliantes para incentivar o rejuvenescimento da pele, aumentar a firmeza, ou melhorar cosmeticamente a pele. Muitos produtos cosméticos fornecem umidade e podem melhorar a aparência da pele, baqueando a pele, usando irritantes que causam inflamação. Além disso, há ingredientes cosméticos ativos conhecidos que pretendem melhorar a adipogênese, no entanto, sua potência é variável e, portanto, não mostrou ser eficaz para este uso. Outros produtos cosméticos estão disponíveis que pretendem rejuvenescer e criar uma aparência mais jovem, direcionando proteínas de matriz extracelular, como a elastina e colágeno, que são produzidas pelos fibroblastos. Estas composições podem ser inadequadas para uso na delicada membrana mucosa da vulva e dos lábios. A incompatibilidade com a pele da mucosa necessita cremes e loções cosméticos alternativos projetados especificamente para aplicação para reduzir os efeitos do envelhecimento da pele vulvar e dos lábios.

[7]Procedimentos médicos, tais como injeções dérmicas e cirurgia reconstrutiva, também estão disponíveis para reduzir os sinais de envelhecimento. A cirurgia plástica recentemente tem crescido em popularidade para melhorar esteticamente a aparência da pele e até mesmo a aparência da pele da vulva e dos lábios. Esses procedimentos, no entanto, nem sempre são opções desejáveis, pois cirurgia pode ser cara, dolorosa e muito invasiva.

[8]Embora os produtos cosméticos e procedimentos médicos descritos acima sejam apropriados para tratamento da pele envelhecida do rosto e do corpo e envelhecimento da pele vulvar e dos lábios, composições alternativas e métodos para melhorar a pele são desejáveis. Por conseguinte, existe uma necessidade de desenvolver composições e métodos alternativos para melhorar a plenitude total e a aparência de envelhecimento da pele do rosto e do corpo e envelhecimento da pele vulvar e dos lábios. Seria altamente vantajoso se as composições e métodos pudessem ser topicamente aplicados, de modo que procedimentos médicos invasivos, dolorosos e caros poderiam ser evitados.

BREVE DESCRIÇÃO DA DIVULGAÇÃO

[9]A presente divulgação é geralmente direcionada para composições e métodos para reduzir os sinais de envelhecimento da pele. Geralmente, a presente divulgação é direcionada a métodos de usar uma composição tópica compreendendo um extrato de Undaria, um extrato de Bidens e um carreador hidrofílico.

[10]Em um aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para reduzir os sinais de envelhecimento da pele em um indivíduo em necessidade disso. O método compreendendo: aplicar topicamente uma composição que compreende um extrato de Undaria, um extrato de Bidens e um carreador hidrofílico a uma região de pele alvo do indivíduo.

[11]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada para um método para aumentar a adipogênese do rosto e do corpo em um indivíduo em necessidade disso. O método compreendendo: aplicar topicamente uma composição que compreende um extrato de Undaria, um extrato de Bidens e um carreador hidrofílico a uma região de pele alvo do indivíduo.

[12]Em ainda outro aspecto, a presente divulgação é direcionada para um método para aumentar a lipogênese no rosto e o corpo de um indivíduo em necessidade disso. O método compreendendo: aplicar topicamente uma composição que compreende um extrato de Undaria, um extrato de Bidens e um carreador hidrofílico a uma região de pele alvo do indivíduo.

[13]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para tratar a atrofia vulvar em um indivíduo em necessidade disso. O método compreendendo: aplicar topicamente uma composição que compreende um extrato de Undaria, um extrato de Bidens e um carreador hidrofílico a uma região da pele vulvar do indivíduo.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[14]A descrição será melhor compreendida, e as características, aspectos e vantagens que não sejam os referidos anteriormente tornar-se- ão aparentes quando se considera a seguinte descrição detalhada do mesmo. Tal descrição detalhada faz referência aos seguintes desenhos, em que:

[15]A FIG. 1 é uma ilustração gráfica mostrando a produção de ácidos graxos livres após o tratamento de células com diferentes ingredientes ativos, como discutido no Exemplo 1. *P<0,05 por teste T de Student para controle negativo, N=4. Os dados representam média com desvio-padrão.

[16]As FIGS. 2A-2F são fotomicrografias de células de camundongo 3T3-L1 mostrando marcação de Óleo Vermelho-O após o tratamento de células com diferentes ingredientes ativos, como discutido no Exemplo 2.

[17]As FIGS. 3A-3F são fotomicrografias de células estaminais humanas adiposas derivadas mostrando marcação de Óleo Vermelho-O após o tratamento de células com diferentes ingredientes ativos, como discutido no Exemplo 2.

[18]A FIG. 4 é uma ilustração gráfica mostrando a expressão do promotor da adipogênese de PPAR-gama após o tratamento de células com vários ingredientes ativos, como discutido no Exemplo 3. *P<0,05 por teste T de Student para controle negativo, N=3. Os dados representam média com desvio-padrão.

[19]A FIG. 5 é uma fotomicrografia de ADSC humana marcada de vermelho com Óleo Vermelho-O, demonstrando a produção de ácidos graxos em resposta ao tratamento com extrato de Undaria, conforme discutido no Exemplo 4.

[20]As FIGS. 6A-6F são fotomicrografias de células de camundongo 3T3-1L marcadas com Óleo Vermelho-O após o tratamento com vários extratos, conforme discutido no Exemplo 5.

[21]As FIGS. 7A-7G são fotomicrografias de células de camundongo 3T3-1L marcadas com Óleo Vermelho-O após o tratamento com ingredientes ativos adicionais, conforme discutido no Exemplo 6.

[22]As FIGS. 8A-8F são fotomicrografias de células de camundongo 3T3-1L marcadas de vermelho com Óleo Vermelho-O após o tratamento com vários extratos de Bidens, como discutido no Exemplo 7.

[23]A FIG. 9 é uma ilustração gráfica mostrando a porcentagem de proliferação celular de fibroblastos dérmicos humanos após o tratamento com vários ingredientes ativos, como discutido no Exemplo 8.

[24]A FIG. 10 é uma ilustração gráfica mostrando a sobrevida celular no tratamento de células com vários ingredientes ativos, como discutido no Exemplo 10.

[25]Enquanto a divulgação é susceptível a várias modificações e formas alternativas, formas de realização específicas da mesma foram demonstradas a título de exemplo nos desenhos e são descritas abaixo em mais detalhes. Deve-se entender, no entanto, que a descrição de formas de realização específicas não se destina a limitar a divulgação para cobrir todas as modificações, equivalentes e alternativas no âmbito da divulgação, como definido pelas reivindicações anexas.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA DIVULGAÇÃO

[26]A menos que definido o contrário, todos os termos técnicos e científicos aqui têm o mesmo significado que é comumente entendido por aquele versado na técnica a que pertence a divulgação. Embora quaisquer métodos e materiais semelhantes ou equivalentes aos descritos aqui possam ser usados na prática ou teste da presente divulgação, os métodos e materiais preferidos estão descritos abaixo.

[27]Em conformidade com a presente divulgação, composições e métodos foram descobertos que surpreendentemente permitem reduzir os sinais de envelhecimento da pele. Os métodos da presente divulgação têm um impacto amplo e significativo, pois eles aumentam o tamanho e o número dos adipócitos ("adipogênese") e produção de lipídeos ("lipogênese") para resultar em uma aparência mais jovem da pele envelhecida do rosto e do corpo. Mais particularmente, como usado aqui, o termo "adipogênese" refere-se à crescente proliferação de adipócitos e/ou aumento de diferenciação de células-tronco adiposo-derivadas. Aumentar o número de adipócitos e/ou a produção de lipídeos nos adipócitos pode reduzir os sinais do envelhecimento da pele, incluindo agir contra o afinamento da pele, aumentar a plenitude total, aumentar a firmeza da pele e aumentar a resiliência da pele.

[28]Como usado aqui, "corpo" refere-se a todo o corpo do indivíduo e, particularmente, inclui as regiões da face (incluindo testa, bochechas, queixo e pálpebras), pescoço, ombros, mama, tórax, pernas, mãos, pés e área vulvar, incluindo a pele vulvar, por exemplo, a vulva, lábios, grandes lábios, lábios menores, mons pubis, vestíbulo vulval e suas combinações.

COMPOSIÇÃO Ingredientes/Extratos Ativos

[29]A presente divulgação descobriu inesperadamente que extratos particulares podem ser topicamente aplicados, sozinhos ou em combinação, à pele do indivíduo como ingredientes ativos em composições para reduzir os sinais de envelhecimento da pele. Particularmente, embora os ingredientes ativos das composições tenham anteriormente mostrado estimular o colágeno e a elastina, agora inesperadamente descobriu-se que esses ingredientes ativos aumentam a adipogênese e/ou a lipogênese, aumentando o número e o tamanho dos adipócitos no tecido adiposo subcutâneo encontrado diretamente abaixo da pele. Isto fornece ao usuário uma pele mais grossa, completa e uma aparência da pele mais jovem, mais suave.

Extrato de Undaria

[30]Em um aspecto, a presente divulgação é direcionada para composições para reduzir os sinais de envelhecimento da pele do rosto e do corpo; as composições geralmente incluem um extrato de Undaria como o ingrediente ativo. Como usado aqui, "extrato" refere-se aos componentes sólidos ativos da planta Undaria.

[31]Um extrato de Undaria é um extrato obtido de Undaria, um gênero de alga marrom que inclui U. crenata, U. peterseniana, U. pinnatifida e U. undarioides. Como dito acima, extratos de Undaria são conhecidos por estimular o colágeno e a elastina e especificamente foram descritos na literatura do fornecedor para aumentar 14 genes relacionados com a produção de colágeno e elastina.

[32]Undaria spp. são plantas de algas marrons que contêm fucoidan nas paredes de células. Conforme usado aqui, o extrato de Undaria refere-se a um extrato líquido da planta Undaria, no entanto, não inclui um extrato que tenha sido complementado/padronizado para teor de fucoidan. Particularmente, extratos de Undaria para uso nas composições tópicas da presente divulgação incluem extratos obtidos por imersão ou passagem de plantas de alga Undaria em/sobre a água sem mais nenhum tratamento químico. A imersão/passagem acima pode ser feita com qualquer método conhecido nas técnicas de extração, tais como, por exemplo, lixiviação, infusão de molhagem, percolação, extração e semelhantes e suas combinações. Em algumas modalidades, a planta Undaria poderia ser macerada para obter o extrato. Além disso, a água utilizada nestes processos pode ser aquecida para obter o extrato de Undaria.

[33]Um método particularmente adequado para a obtenção do extrato de Undaria é a lixiviação de bases férteis de plantas de algas Undaria liofilizadas. Como usado aqui, "lixiviação" refere-se a uma técnica onde a água é lentamente passada sobre um sólido (aqui, Undaria) em uma camada de profundidade variada para extrair material solúvel. A técnica geral é descrita em FR 2693917, que é incorporada aqui na medida em que é consistente com isto e é realizada em temperatura ambiente. Após a remoção do extrato, em algumas modalidades, o extrato é ainda diluído com diluentes incluindo água, glicerina, propanediol, glicol butileno, propilenoglicol e suas combinações.

[34]Por outro lado, extratos de Undaria que são complementados/padronizados para teor de fucoidan normalmente são obtidos através de um procedimento de extração utilizando uma mistura de ácido/água tendo um pH entre 0 e 2, de preferência entre cerca de 0 e 1, a temperaturas entre cerca de 0 e 30°C, de preferência entre cerca de 15 e 25°C.

[35]Fucoidan tem mostrado na literatura, inibir a adipogênese (Kim, K.J. et al., “Fucoidan from the sporophyll of Undaria pinnatifida suppresses adipocyte differentiation by inhibition of inflammation-related cytokines in 3T3-L1 cells,” Nutr. Res. 32(6): 439-447). Além disso, conforme mostrado nos Exemplos abaixo, MARITECH® REVERSE (Cambridge, Austrália), que é padronizado a pelo menos 85% de fucoidan, não aumenta a adipogênese e a lipogênese. Conforme divulgado aqui, no entanto, os extratos de Undaria utilizados nas composições da presente divulgação, que são da mesma espécie conhecida por conter fucoidan, surpreendentemente e inesperadamente resultaram em um aumento da adipogênese e lipogênese.

[36]Extratos adequados de Undaria podem ser obtidos de fontes comercialmente disponíveis (por exemplo, Barnet Products Corp., Englewood Cliffs, NJ; Changsha orgânico erva Inc., Hunan, China). Uma formulação particularmente adequada comercialmente disponível incluindo extrato de Undaria pode ser, por exemplo, UNDARINE™, que é uma formulação incluindo glicerina, água e U. pinnatifid, um extrato (comercialmente disponível por Barnet Products Corp., Englewood Cliffs, NJ).

[37]Outro extrato de Undaria adequado comercialmente disponível pode ser, por exemplo, o extrato de U. pinnatifida WAKAMINE® (INCI: água (e) extrato de Undaria pinnatifida), comercialmente disponível por SOLIANCE (França), que anteriormente foi usado para clarear a pele e evitar manchas de idade.

[38]Quantidades adequadas de um extrato de Undaria para uso nas composições tópicas podem ser de cerca de 0,01% (p/p) a cerca de 10% (p/p), de cerca de 0,05% (p/p) a cerca de 7,5% (p/p), de cerca de 0,1% (p/p) a cerca de 5% (p/p) e de cerca de 1% (p/p) a cerca de 5% (p/p). Como usado aqui, "p/p" refere-se à quantidade de um componente "em peso da composição".

Extrato de Bidens

[39]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada para uma composição incluindo um extrato de Bidens como o ingrediente ativo. Como usado aqui, "extrato" refere-se aos componentes sólidos ativos da planta Bidens. Bidens é um gênero de plantas pertencente à família Asteraceae que inclui muitos membros de espécies.Bidens é conhecida por aumentar a produção de colágeno e elastina. Surpreendente e inesperadamente, conforme divulgado aqui, o extrato de Bidens mostrou aumentar a adipogênese e a lipogênese.

[40]Extratos adequados de Bidens incluem extratos de Bidens alba, Bidens amplectens, Bidens amplissima, Bidens aristosa, Bidens asymmetrica, Bidens aurea, Bidens beckii, Bidens bidentoides, Bidens bigelovii, Bidens bipinnata, Bidens biternata, Bidens campylotheca, Bidens cernua, Bidens cervicata, Bidens chippii, Bidens conjuncta, Bidens connata, Bidens coronata, Bidens cosmoides, Bidens cynapiifolia, Bidens discoidea, Bidens eatonii, Bidens ferulifolia, Bidens forbesii, Bidens frondosa, Bidens gardneri, Bidens hawaiensis, Bidens henryi, Bidens heterodoxa, Bidens heterosperma, Bidens hillebrandiana, Bidens hyperborean, Bidens laevis, Bidens lemmonii, Bidens leptocephala, Bidens leptophylla, Bidens macrocarpa, Bidens mannii, Bidens mauiensis, Bidens maximowicziana, Bidens menziesii, Bidens micrantha, Bidens mitis, Bidens molokaiensis, Bidens x multticeps, Bidens parviflora, Bidens pilosa, Bidens polylepis, Bidens populifolia, Bidens radiate, Bidens reptans, Bidens sandvicensis, Bidens schimperi, Bidens simplicifolia, Bidens socorrensis, Bidens squarrosa, Bidens subalternans, Bidens tenuisecta, Bidens torta, Bidens trichosperma, Bidens tripartita, Bidens triplinervia, Bidens valida, Bidens vulgata, Bidens wiebkei e suas combinações.

[41]Extratos de Bidens particularmente adequados podem ser, por exemplo, extrato de Bidens pilosa, extrato de Bidens bipinnata e extrato de Bidens tripartita. Extratos adequados de Bidens podem ser obtidos de fontes comercialmente disponíveis (por exemplo, Chemyunion Quimica Ltd., São Paulo, Brasil; e Carrubba Inc., Milford, CT). Extratos adequados de Bidens também podem incluir misturas de extrato de Bidens com carreadores hidrofílicos, como, por exemplo, água, glicerina, propanodiol, butileno glicol, propileno glicol e suas combinações e misturas de extrato de Bidens com carreadores hidrofóbicos, tais como, por exemplo óleos naturais, óleos sintéticos e suas combinações. Um extrato de Bidens particularmente adequado pode ser, por exemplo, ECOBIDENS™ (comercialmente disponível por Chemyunion Quimica Ltd., São Paulo, Brasil). ECOBIDENS™ é um extrato de glicerina de Bidens pilosa L. Outros extratos de Bidens disponíveis comercialmente incluem, por exemplo, Extrato Water Agrimony H.G., um extrato de B. tripartita de Provital Group (Espanha); extrato de Bidens M9983-WS, um extrato de B. pilosa e Extrato de Bidens bipinnata N0061-WS, um extrato de B. bipinnata, ambos disponíveis por Carrubba Inc. (Milford, Connecticut).

[42]Quantidades adequadas de extrato de Bidens nas composições tópicas podem ser de cerca de 0,01% (p/p) a cerca de 10% (p/p), de cerca de 0,05% (p/p) a cerca de 7,5% (p/p), de cerca de 0,1% (p/p) a cerca de 5% (p/p) e de cerca de 1% (p/p) a cerca de 5% (p/p).

Extrato de ündaria e extrato de Bidens

[43]Em alguns aspectos particularmente adequados, a presente divulgação é direcionada a uma composição incluindo uma combinação de ingredientes ativos de um extrato de Undaria e um extrato de Bidens.

[44]Quando usado em uma combinação, quantidades adequadas do extrato de Undaria nas composições tópicas podem ser de cerca de 0,01% (p/p) a cerca de 20% (p/p), de cerca de 0,05% (p/p) a cerca de 15% (p/p) e de cerca de 0,1% (p/p) a cerca de 10% (p/p). Quantidades adequadas de extrato de Bidens nas composições tópicas podem ser de cerca de 0,01% (p/p) a cerca de 20% (p/p), de cerca de 0,05% (p/p) a cerca de 15% (p/p), de cerca de 0,1% (p/p) a cerca de 10% (p/p), de cerca de 0,1% (p/p) a cerca de 5% (p/p) e de cerca de 1% (p/p) a cerca de 5% (p/p).

Ingredientes Opcionais Adicionais

[45]As composições aqui descritas podem incluir ainda ingredientes adicionais e ingredientes opcionais.

[46]Geralmente, as composições incluem um carreador com o(s) ingrediente(s) ativo(s).

[47]Em uma modalidade, por exemplo, quando a composição tópica deve ser aplicada à região vulvar de um indivíduo, a composição inclui ingrediente(s) ativo(s) e um carreador hidrofílico, um espessante hidrofílico e/ou um realçador de penetração. Carreadores hidrofílicos apropriados podem ser, por exemplo, água, álcoois, glicerina, derivados de glicerina, glicóis, emolientes solúveis em água e suas combinações.Exemplos adequados de álcoois podem incluir, mas não devem ser limitados a, álcool etílico e álcool isopropílico. Exemplos adequados de derivados de glicerina podem incluir, mas não devem ser limitados a, PEG- 7 gliceril cocoato. Glicóis adequados podem incluir, mas não devem ser limitados a, propilenoglicol, butileno glicol, pentileno glicol, etoxidiglicol, dipropileno glicol, propanediol e PEG-8. Exemplos adequados de emolientes solúveis em água podem incluir, mas não devem ser limitados a, Glicerídeos Cápricos Caprílicos PEG-6, Ésteres de Jojoba Hidrolisada e Glicerídeos de Girassol PEG-10.

[48]Em modalidades particularmente adequadas, as composições tópicas são composições líquidas, desejavelmente contendo água como carreador. Quantidades adequadas de água podem ser de cerca de 0,1% em peso da composição a cerca de 99,9% em peso da composição. Mais geralmente, a quantidade de água pode ser de cerca de 40% em peso da composição a cerca de 99,9% em peso da composição. De preferência, a quantidade de água pode ser de cerca de 60% em peso da composição a cerca de 99,9% em peso da composição.

[49]Em outra modalidade, a composição inclui ingrediente(s) ativo(s) e um carreador hidrofóbico. Carreadores hidrofóbicos adequados podem ser, por exemplo, óleos naturais, óleos sintéticos e suas combinações.

[50]As composições tópicas aqui descritas podem incluir ainda um realçador de penetração na pele, ou uma mistura de realçadores de penetração na pele. Uma realçador de penetração na pele permite que a composição atravesse a camada epidérmica e a camada dérmica da pele para atingir o tecido adiposo subjacente à pele, onde adipócitos aumentam em número e/ou tamanho. Isso pode ser realizado por um número de diferentes mecanismos, incluindo, por exemplo, extrair lipídeos do estrato córneo, aumentar o particionamento de Undaria e Bidens na pele e interromper a bicamada lipídica do estrato córneo, tornando assim a estrutura do estrato córneo mais fluida e aumentando a capacidade de Undaria e Bidens de se difundir através do estrato córneo.

[51]Exemplos de realçadores de penetração na pele adequados podem ser, por exemplo, sulfóxidos, álcoois, ácidos graxos, ésteres de ácido graxo, polióis, amidas, surfactantes, terpenos, alcanonas e ácidos orgânicos, entre outros. Exemplos específicos de sulfóxidos adequados incluem dimetilsulfóxido (DMSO) e decilmetilsulfóxido, entre outros. Álcoois adequados incluem alcanois, tais como etanol, propanol, butanol, pentanol, hexanol, octanol, n-octanol, nonanol, decanol, 2-butanol, 2-pentanol e álcool benzílico; álcoois graxos, tais como álcool caprílico, álcool decílico, álcool laurílico, 2-lauril álcool, álcool miristílico, álcool cetílico, álcool estearílico, álcool oleílico, álcool linoleico e álcool linolenílico; e álcool isopropílico. Exemplos de ácidos graxos adequados incluem ácidos graxos lineares, como o ácido valérico, ácido heptanoico, ácido pelagônico, ácido caproico, ácido cáprico, ácido láurico, ácido mirístico, ácido esteárico, ácido oleico e ácido caprílico; e ácidos graxos ramificados, tais como ácido isovalérico, ácido neopentanoico, ácido neoheptanoico, ácido neononanoico, ácido trimetil-hexanoico, ácido neodecanoico e ácido isoesteárico. Exemplos de ésteres de ácidos graxos adequados incluem ésteres de ácidos graxos alifáticos, como isopropil n-butirato, isopropil n- hexanoato, isopropil n-decanoato, isopropil miristato, isopropil palmitato e octildodecil miristato; ésteres de ácidos graxos alquílicos, tais como acetato de etil, acetato de butil, acetato de metil, metilvalerato, metilpropionato, dietil sebacato e etil oleato; e diisopropil adipato e dimetil isossorbida. Exemplos de poliois adequados incluem propileno glicol, butileno glicol, polietileno glicol, etileno glicol, dietileno glicol, trietileno glicol, dipropileno glicol, etoxidiglicol, pentileno glicol, glicerol, propanediol, butanodiol, pentanediol, hexanetriol e glicerina. Exemplos de amidas adequadas incluem ureia, dimetilacetamida, dietiltoluamida, dimetilformamida (DMF), dimetiloctamida, dimetildecamida, ureia cíclica biodegradável (por exemplo, 1-alquil-4-imidazoline-2-ona), derivados de pirrolidona, derivados de pirrolidona biodegradável (por exemplo, ésteres de ácido graxo de N-(2- hidroxietil)-2-pirrolidona), amidas cíclicas, hexametilenelauramida e seus derivados, dietanolamina e trietanolamina. Exemplos de derivados de pirrolidona incluem 1-metil-2-pirrolidona, 2-pirrolidona, 1-lauril-2-pirrolidona, 1-metil-4-carboxi-2-pirrolidona, 1-hexyl-4-carboxi-2-pirrolidona, 1-lauryl-4- carboxi-2-pirrolidona, 1-metil-4-metoxicarbonil-2-pirrolidona, 1-hexyl-4- metoxicarbonil-2-pirrolidona, 1-lauryl-4-metoxicarbonil-2-pirrolidona, N- ciclohexilpirrolidona,N-dimetilaminopropilpirrolidona,N- cocoalquipirrolidona, N-tallowalquilpirrolidona, e N-metilpirrolidona. Exemplos de amidas cíclicas incluem 1-dodecilazacicloheptan-2-ona (por exemplo, Azone®), 1-geranilazacicloheptan-2-ona, 1- farnesilazacicloheptan-2-ona, 1-geranilgeranilazacicloheptan-2-ona, 1-(3,7- dimetiloctil)azacicloheptan-2-ona, 1-(3,7,11-trimetildodecil)azaciclohaptan-2- ona, 1-geranilazaciclohexan-2-ona, 1-geranilazaciclopentan-2,5-diona e 1- farnesilazaciclopentan-2-ona.

[52]Normalmente, as composições da presente divulgação incluem de cerca de 0,01% (em peso da composição) a cerca de 25% (em peso da composição) de um realçador de penetração na pele, incluindo de cerca de 1% (em peso da composição) a cerca de 15% (em peso da composição) de um realçador de penetração na pele e incluindo de cerca de 2% (em peso da composição) a cerca de 10% (em peso da composição) de um realçador de penetração na pele.

[53]Opcionalmente, as composições tópicas contendo Undaria e/ou Bidens podem ser formuladas com um cossolvente polar para aumentar ainda mais a permeabilidade de Undaria e Bidens na pele. De preferência, o cossolvente polar é totalmente miscível na composição e tem uma elevada afinidade com os espaços intercelulares no estrato córneo. Sem querer ser vinculado por qualquer teoria particular, acredita-se que cossolventes polares com tais características são conduzidos por osmose para os espaços intercelulares no estrato córneo, fazendo com que o estrato córneo inche. Nesse estado inchado, os espaços intercelulares são mais líquidos e desordenados, o que permite que os extratos de Undaria e/ou Bidens se difundam mais facilmente através do estrato córneo.

[54]Exemplos de cossolventes polares adequados para inclusão nas composições da presente divulgação incluem glicerina, propanediol, etanol, propilenoglicol, butanol, isopropanol, propanol, dimetil isossorbida, butileno glicol, polietileno glicol, dipropileno glicol, etoxidiglicol, pentileno glicol e suas combinações.

[55]Normalmente, as composições da presente divulgação incluem de cerca de 1% (em peso da composição) a cerca de 99% (em peso da composição) de um cossolvente polar, incluindo de cerca de 1% (em peso da composição) a cerca de 75% (em peso da composição) de um cossolvente polar, incluindo de cerca de 1% (em peso da composição) a cerca de 50% (em peso da composição) de um cossolvente polar, incluindo de cerca de 1,5% (em peso da composição) a cerca de 25% (em peso da composição) de um cossolvente polar, incluindo de cerca de 2% (em peso da composição) a cerca de 15% (em peso da composição) de um cossolvente polar e incluindo de cerca de 2,5% (em peso da composição) a cerca de 10% (em peso da composição) de um cossolvente polar.

[56]Em algumas modalidades, as composições podem incluir ainda beta-sitosterol. Acredita-se que, em combinação com extrato de Undaria e Bidens, beta-sitosterol reduz ainda sinais de envelhecimento da pele do rosto e do corpo, estimulando a adipogênese e a lipogênese e estimulando ainda a produção de colágeno, elastina e matriz extracelular.

[57]Quantidades adequadas de beta-sitosterol podem ser de cerca de 0,001% em peso da composição a cerca de 10,0% em peso da composição. Mais geralmente, a quantidade de beta-sitosterol pode ser de cerca de 0,005% em peso da composição a cerca de 7,5% em peso da composição. Ainda mais adequada, a quantidade de beta-sitosterol pode ser de cerca de 0,01% em peso da composição a cerca de 5,0% em peso da composição.

[58]A composição pode incluir ainda outros ingredientes estimulantes de colágeno, elastina e matriz extracelular conhecidos. O colágeno é uma proteína encontrada no tecido conector da pele e outros tecidos do corpo. Realçadores de colágeno adequados podem ser, por exemplo, vitaminas, como ácido ascórbico e seus derivados, peptídeos, como palmitoil tripeptídeo-5, extratos botânicos, como romã ou cogumelo e minerais, como a hematita.

[59]A elastina é uma proteína encontrada no tecido conector da pele e outros tecidos do corpo. Realçadores de elastina adequados podem ser, por exemplo, vitaminas, como ácido ascórbico e seus derivados, peptídeos, como palmitoil hexapeptídeo-12, extratos botânicos, como kudzu, cavalinha, arroz, endro e alecrim e minerais, como zinco e cobre.

[60]As composições podem incluir ainda um vasodilatador. Os vasodilatadores podem aumentar o fluxo de sangue dentro da pele. Vasodilatadores adequados podem ser, por exemplo, trinitrato gliceril, resveratrol, cafeína, extrato de gengibre, ginseng e outros extratos botânicos como, por exemplo, espinheiro, hortelã, hera, café e chá.

[61]As composições podem incluir ainda um agente calmante da pele. Como usado aqui, o "agente calmante da pele" refere-se a compostos que reduzem ou evitam a irritação da pele. A irritação da pele pode resultar da perda de umidade, uma mudança no pH, suor, dermatite de contato com perfumes, pós, detergente de roupa e outros compostos. Agentes calmantes da pele podem reduzir a irritação neutralizando um irritante, regulando cascatas inflamatórias na pele e/ou fornecendo uma camada protetora sobre a pele. Agentes calmantes da pele podem ser, por exemplo, extratos botânicos, como calêndula, camomila, aloe, confrei, echinacea; materiais ativos, como alantoína, bisabolol, pantenol, beta-glucano, aveia coloidal e misturas de ingrediente, como SYMCALMIN (INCI: butileno glicol, pentileno glicol, hidroxifenil ácido propamidobenzoico; comercialmente disponíveis por Symrise (Holzmiden, Alemanha) e SEPICALM (INCI: prolina palmitoil de sódio, extrato da flor de nymphaea alba; comercialmente disponíveis por Seppic (Fairfield, NJ).

[62]As composições podem incluir ainda um umectante. Umectantes podem elevar a hidratação da pele, em particular, a epiderme e a derme. Umectantes adequados podem ser, por exemplo, glicerol, glicerina, ácido láctico, ureia, aloe vera, betaína, ácido hialurônico, propanediol, propileno glicol, butileno glicol e suas combinações.

[63]As composições podem incluir ainda um emulsificante e, em particular, um emulsificante que cria redes cristalinas líquidas ou redes de lipossomas. Emulsionantes exemplares não limitantes adequados incluem, por exemplo, OLIVEM® 1000 (INCI: Cetearil Olivato (e) Sorbitano Olivato; comercialmente disponível por HallStar Company (Chicago, IL)), Arlacel™ LC (INCI: Soorbitano Estearato (e) Sorbitil Laurato; comercialmente disponíveis por Croda (Edison, NJ), CRYSTALCAST® MM (INCI: Beta Sitosterol (e) Sacarose Estearato (e) Sacarose Diestearato (e) Álcool Cetílico (e) Álcool Estearílico; comercialmente disponíveis por MMP Inc. (South Plainfield, NJ), UNIOX CRISTAL (INCI: Álcool Cetearílico (e) Polisorbato 60 (e) Cetearil Glucosídeo; comercialmente disponíveis por Chemyunion (São Paulo, Brasil). Outros emulsificantes adequados incluem lecitina, lecitina hidrogenada, lisolecitina, fosfatidilcolina, fosfolipídeos e suas combinações.

[64]As composições podem ainda incluir um conservante para preservar a estabilidade. Conservantes também podem impedir o crescimento de organismos microbianos nas composições. Conservantes adequados são conhecidos na técnica e incluem, por exemplo, metilparabeno, fenoxietanol, capril glicol, caprilato de glicerina, ácido benzoico, ácido sórbico, ácido gálico, propilparabeno e suas combinações.

[65]As composições podem incluir ainda um regulador de pH para controlar/manter o pH da composição dentro da escala do pH da pele. Uma escala de pH adequada da composição pode ser de cerca de 3,5 a 6.

[66]As composições podem incluir ainda fragrâncias, aromas, corantes, surfactantes, modificadores de reologia, formadores de películas e outros componentes conhecidos por serem úteis em formulações de higiene pessoal.

MÉTODOS DE USO

[67]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada para métodos de usar as composições tópicas para reduzir o envelhecimento da pele do rosto e do corpo do indivíduo.

[68]Assim, em um aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para reduzir sinais de envelhecimento da pele do rosto e do corpo em um indivíduo em necessidade disso. Como usado aqui, "envelhecimento da pele" refere-se ao aumento de enrugamento da pele, aumentado da aparência de linhas finas, afinamento da pele, flacidez da pele, ressecamento da pele e coceira de pele. O método inclui aplicar topicamente uma composição incluindo um extrato de Undaria a uma região alvo da pele do indivíduo. A região alvo da pele pode ser, por exemplo, pele facial, pele do pescoço, pele da mama, pele do ombro, pele do tórax, pele da perna, pele da mão, pele dos pés e suas combinações.

[69]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para reduzir sinais de envelhecimento da pele vulvar em um indivíduo em necessidade disso. Como usado aqui, "envelhecimento da pele vulvar" refere-se a enrugamento da pele, aparência aumentada de linhas finas, afinamento da pele, flacidez da pele, ressecamento da pele e coceira da pele da pele na região vulvar, incluindo a vulva, lábios, grandes lábios, pequenos lábios, mons pubis, vestíbulo vulval e suas combinações. O método inclui aplicar topicamente uma composição incluindo um extrato de Undaria a uma região alvo da pele do indivíduo. A região alvo da pele também pode ser, por exemplo, pele vulvar, por exemplo, a vulva, lábios, grandes lábios, pequenos lábios, mons pubis, vestíbulo vulval e suas combinações.

[70]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para aumentar a adipogênese em um indivíduo em necessidade disso. O método inclui aplicar topicamente uma composição incluindo um extrato de Undaria a uma região alvo da pele do indivíduo. A região alvo da pele pode ser, por exemplo, pele facial, pele do pescoço, pele da mama, pele do ombro, pele do tórax, pele da perna, pele da mão, pele dos pés e suas combinações. A região alvo da pele também pode ser, por exemplo, pele vulvar, por exemplo, a vulva, lábios, grandes lábios, pequenos lábios, mons pubis, vestíbulo vulval e suas combinações.

[71]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para aumentar a lipogênese em um indivíduo em necessidade disso. O método inclui aplicar topicamente uma composição incluindo um extrato de Undaria a uma região alvo da pele do indivíduo. A região alvo da pele pode ser, por exemplo, pele facial, pele do pescoço, pele da mama, pele do ombro, pele do tórax, pele da perna, pele da mão, pele dos pés e suas combinações. A região alvo da pele também pode ser, por exemplo, pele vulvar, por exemplo, a vulva, lábios, grandes lábios, pequenos lábios, mons pubis, vestíbulo vulval e suas combinações.

[72]Em ainda outro aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para tratar a atrofia vulvar vaginal em um indivíduo em necessidade disso. Como usado aqui, a atrofia vulvar refere-se ao afinamento, secagem e inflamação do tecido e em torno da região vulvar. Normalmente, a atrofia vulvar ocorre após a menopausa, mas também pode se desenvolver durante a amamentação, ou em qualquer outro momento em que a produção de estrogênio do indivíduo diminui. O método compreende aplicar topicamente uma composição que compreende um extrato de Undaria e um carreador hidrofílico a uma região da pele vulvar do indivíduo.

[73]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para reduzir sinais de envelhecimento da pele do rosto e do corpo em um indivíduo em necessidade disso. O método inclui aplicar topicamente uma composição incluindo um extrato de Bidens a uma região alvo da pele do indivíduo. A região alvo da pele pode ser, por exemplo, pele facial, pele do pescoço, pele da mama, pele do ombro, pele do tórax, pele da perna, pele da mão, pele dos pés e suas combinações.

[74]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para reduzir sinais de envelhecimento da pele vulvar em um indivíduo em necessidade disso. O método inclui aplicar topicamente uma composição incluindo um extrato de Bidens a uma região alvo da pele do indivíduo. A região alvo da pele pode ser, por exemplo, pele vulvar, por exemplo, a vulva, lábios, grandes lábios, pequenos lábios, mons pubis, vestíbulo vulval e suas combinações.

[75]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para aumentar a adipogênese em um indivíduo em necessidade disso. O método inclui aplicar topicamente uma composição incluindo um extrato de Bidens a uma região alvo da pele do indivíduo. A região alvo da pele pode ser, por exemplo, pele facial, pele do pescoço, pele da mama, pele do ombro, pele do tórax, pele da perna, pele da mão, pele dos pés e suas combinações. A região alvo da pele também pode ser, por exemplo, pele vulvar, por exemplo, a vulva, lábios, grandes lábios, pequenos lábios, mons pubis, vestíbulo vulval e suas combinações.

[76]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para aumentar a lipogênese em um indivíduo em necessidade disso. O método inclui aplicar topicamente uma composição incluindo um extrato de Bidens a uma região alvo da pele do indivíduo. A região alvo da pele pode ser, por exemplo, pele facial, pele do pescoço, pele da mama, pele do ombro, pele do tórax, pele da perna, pele da mão, pele dos pés e suas combinações. A região alvo da pele também pode ser, por exemplo, pele vulvar, por exemplo, a vulva, lábios, grandes lábios, pequenos lábios, mons pubis, vestíbulo vulval e suas combinações.

[77]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para tratar a atrofia vulvar em um indivíduo em necessidade disso. O método compreende aplicar topicamente uma composição que compreende um extrato de Bidens e um carreador hidrofílico a uma região da pele vulvar do indivíduo.

[78]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para reduzir sinais de envelhecimento da pele do rosto e do corpo em um indivíduo em necessidade disso. O método inclui aplicar topicamente uma composição incluindo um extrato de Undaria e um extrato de Bidens a uma região alvo da pele do indivíduo. A região alvo da pele pode ser, por exemplo, pele facial, pele do pescoço, pele da mama, pele do ombro, pele do tórax, pele da perna, pele da mão, pele dos pés e suas combinações.

[79]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para reduzir sinais de envelhecimento da pele vulvar em um indivíduo em necessidade disso. O método inclui aplicar topicamente uma composição incluindo um extrato de Undaria e um extrato de Bidens a uma região alvo da pele do indivíduo. A região alvo da pele pode ser, por exemplo, pele vulvar, por exemplo, a vulva, lábios, grandes lábios, pequenos lábios, mons pubis, vestíbulo vulval e suas combinações.

[80]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para aumentar a adipogênese em um indivíduo em necessidade disso. O método inclui aplicar topicamente uma composição incluindo um extrato de Undaria e um extrato de Bidens a uma região alvo da pele do indivíduo. A região alvo da pele pode ser, por exemplo, pele facial, pele do pescoço, pele da mama, pele do ombro, pele do tórax, pele da perna, pele da mão, pele dos pés e suas combinações. A região alvo da pele também pode ser, por exemplo, pele vulvar, por exemplo, a vulva, lábios, grandes lábios, pequenos lábios, mons pubis, vestíbulo vulval e suas combinações.

[81]Em outro aspecto, a presente divulgação é direcionada a um método para aumentar a lipogênese em um indivíduo em necessidade disso. O método inclui aplicar topicamente uma composição incluindo um extrato de Undaria e um extrato de Bidens a uma região alvo da pele do indivíduo. A região alvo da pele pode ser, por exemplo, pele facial, pele do pescoço, pele da mama, pele do ombro, pele do tórax, pele da perna, pele da mão, pele dos pés e suas combinações. A região alvo da pele também pode ser, por exemplo, pele vulvar, por exemplo, a vulva, lábios, grandes lábios, pequenos lábios, mons pubis, vestíbulo vulval e suas combinações.

[82]Como usado aqui, um "indivíduo em necessidade" refere-se a um indivíduo que tem a pele mostrando sinais visíveis de envelhecimento, tais como, por exemplo, rugas, linhas finas, afinamento da pele, flacidez da pele, pele seca, coceira na pele, fragilidade da pele, perda de elasticidade da pele e suas combinações. Como tal, em algumas modalidades, os métodos divulgados aqui destinam-se a um subconjunto da população, de modo que, nessas modalidades, nem toda a população geral pode se beneficiar dos métodos. Com base no que precede, visto que algumas das modalidades do método da presente divulgação são direcionadas para subconjuntos específicos ou subclasses de indivíduos identificados (isto é, o subconjunto ou subclasse de indivíduos "em necessidade" de assistência em abordar uma ou mais condições específicas observadas aqui), nem todos os indivíduos estarão dentro do subconjunto ou subclasse dos indivíduos conforme descrito aqui.

[83]Como usado aqui, o termo "indivíduo" refere-se a um ser humano homem ou mulher. Em determinadas modalidades, o indivíduo é um ser humano mulher na pós-menopausa.

[84]As composições tópicas utilizadas nos métodos aqui descritos podem ainda incluir ingredientes adicionais, conforme descrito aqui, e outros componentes conhecidos por serem úteis em formulações de higiene pessoal.

[85]As composições tópicas podem ser aplicadas à região alvo da pele por qualquer veículo de entrega adequado. Por exemplo, a composição pode ser aplicada como uma loção, como uma lavagem, como um gel, como um bálsamo, como uma pomada, como um creme, como um bastão sólido e como uma espuma. Além disso, a composição pode ser aplicada com um lenço, com luvas, usando um dispensador de aerossol, usando um pulverizador de bomba, usando um spray de gatilho e usando uma garrafa de apertar.

[86]As composições podem ser aplicadas diariamente, dia sim, dia não, a cada dois dias, semanalmente, mensalmente e anualmente, conforme desejado. As composições podem ser aplicadas várias vezes por dia, várias vezes por semana e/ou várias vezes por mês.

[87]Em algumas modalidades, as composições da presente divulgação podem ser usadas com composições de cuidados de pele adicionais, como parte de um regime de cuidados da pele. Por exemplo, no tratamento facial, os usuários normalmente usam vários produtos para limpeza, tonificação e para tratar a pele do rosto. Nesse sentido, o primeiro produto compreende uma primeira composição tipicamente capaz de fornecer um primeiro benefício a um usuário, e o segundo produto compreende uma segunda composição tipicamente capaz de fornecer um segundo benefício a um usuário. Na presente divulgação, deve entender-se que pelo menos um dos produtos do regime inclui a composição tópica da presente divulgação, proporcionando a vantagem de reduzir os sinais de envelhecimento da pele. Em algumas modalidades, deve ser entendido por aquele versado na técnica que embora o primeiro produto e o segundo produto possam fornecer independentemente qualquer benefício conhecido na técnica do regime de cuidados específicos, em cada regime de cuidados especiais com vários produtos, o primeiro produto e o segundo produto podem incluir diferentes composições e assim, fornecer benefícios diferentes ao usuário.

[88]Além disso, tal como acontece com o primeiro produto e o segundo produto do regime de cuidados, se mais de dois produtos são usados no regime de cuidados com vários produtos, tais como terceiro, quarto e/ou quinto produtos (e mais produtos, caso mais de cinco produtos sejam desejados), deve-se reconhecer que os produtos adicionais devem incluir ingredientes ativos, cada um de forma independente, sendo capaz de fornecer benefícios adicionais a um usuário.

[89]Em uma modalidade alternativa, o regime de cuidados com vários produtos pode incluir mais de dois produtos e pode ser configurado de modo a fornecer um regime de múltiplos dias. Sem ser limitante, em um exemplo, o regime de cuidados com vários produtos fornece cuidados com a pele por vários dias e, como tal, um primeiro produto inclui, por exemplo, uma composição de limpeza, um segundo produto inclui a composição antienvelhecimento da pele da presente divulgação, um terceiro produto inclui a mesma composição de limpeza que o primeiro produto e um quarto produto inclui a mesma composição antienvelhecimento da pele que o segundo produto.

[90]Sem ser limitante, exemplos de composições adicionais proporcionando benefícios de cuidados com a pele além da composição antienvelhecimento da pele da presente divulgação podem incluir composições para limpeza, tonificação, tratamento, hidratação, proteção, acabamento e similares.

[91]Quando a composição adicional é uma composição de limpeza, a composição de limpeza pode ser em qualquer forma conhecida na técnica, como por exemplo, sabonetes, sabonetes de corpo, xampus corporais, xampus, limpadores de superfície, detergentes, produtos de limpeza facial, antissépticos de mão e similares. Estes tipos de composições de limpeza normalmente incluem pelo menos um agente formador de espuma, como um surfactante. Embora discutidas aqui principalmente em termos de um surfactante, deve ser entendido que as composições de limpeza podem incluir outros agentes de limpeza e não precisam incluir um surfactante. Por exemplo, em determinadas modalidades, as composições podem incluir um espessante, uma argila inchável, um agente formador de espuma (que pode ou não incluir um surfactante (por exemplo, agentes condicionadores de pele etoxilados, solubilizantes e polímeros de silicone derivados)) e, opcionalmente, um solvente ou outro carreador. Exemplos destas composições incluem, por exemplo, loções, cremes, composições antimicrobianas e similares.

[92]Surfactantes adequados para uso na composição de limpeza incluem surfactantes aniônicos, surfactantes anfotéricos, surfactantes catiônicos, surfactantes zwitteriônicos, surfactantes não iônicos e suas combinações.

[93]Surfactantes aniônicos apropriados incluem, por exemplo, alquil sulfatos, alquil éter sulfatos, alquil aril perfluorooctanossulfonatos, alfa-olefina perfluorooctanossulfonatos, metal alcalino ou sais de amônio de alquil sulfatos, metais alcalinos ou sais de amônio de alquil éter sulfatos, alquil fosfatos, fosfatos de silicone, alquil gliceril perfluoroctanossulfonatos, alquil sulfosuccinatos, alquil tauratos, acil tauratos, alquil sarcosinatos, acil sarcosinatos, sulfoacetatos, ésteres alquílicos de fosfato, monoalquil succinatos, monoalquil maleatos, sulfoacetatos, acil isetionatos, alquil carboxilatos, ésteres de fosfato, sulfosuccinatos (por exemplo, dioctilsulfosuccinato de sódio) e suas combinações. Exemplos específicos de surfactantes aniônicos incluem lauril sulfato de sódio, lauril éter sulfato de sódio, amônio lauril sulfosuccinato, lauril sulfato de amônio, lauril éter sulfato de amônio, sódio dodecil benzeno sulfonato de sódio, trietanolamina dodecilbenzeno sulfonato, cocoil isetionato de sódio, lauroil isetionato de sódio, sarcosinato N-laurilsulfato de sódio e suas combinações.

[94]Surfactantes catiônicos adequados incluem, por exemplo, sais de alquil amônio, sais de amônio poliméricos, sais de alquil-piridínio, sais de amônio arilo, sais de amônio alquil-aril, compostos de amônio quaternário de silicone e suas combinações. Exemplos específicos de surfactantes catiônicos incluem cloreto de beheniltrimônio, cloreto de estearlcônio, cloreto de distearalcônio, digluconato de clorohexidina, biguanida de polihexametileno (PHMB), cloreto de cetil piridínio, cloreto de benzetônio, cloreto de benzalcônio e suas combinações.

[95]Surfactantes anfotéricos apropriados incluem, por exemplo, betaínas, alquilamido betaínas, sulfobetaínas, N-alquil betaínas, sultaínas, anfoacetatos, amofodiacetatos, carboxilatos de imidazolina, sarcosinatos, acilanfoglicinatos, como cocanfocarboxiglicinatos e acilanfopropionatos e suas combinações. Exemplos específicos de surfactantes anfotéricos incluem cocamidopropil betaína, lauramidopropil betaína, meadowfoamamidopropil betaína, cocoil sarcosinato de sódio, cocanfoacetato de sódio, cocoanfodiacetato dissódico, cocoil sarcosinato de amônio, cocoanfopropionato de sódio e suas combinações.

[96]Surfactantes zwitteriônicos adequados incluem, por exemplo, óxidos de alquil amina, óxidos de aminas de silicone e suas combinações. Vários exemplos de surfactantes zwiteriônicos específicos incluem, por exemplo, 4-[N,N-di(2-hidroxietil)-N-octadecilamônio]-butano-1-carboxilato, S-[S-3-hidroxipropil-S-hexadecilsulfonio]-3-hidroxipentano-1-sulfato, 3-[P,P- dietil-P-3,6,9-trioxatetradexopsilfosfônio]-2-hidroxipropano-1-fosfato, 3-[N,N- dipropil-N-3-dodecoxi-2-hidroxipropilamônio]-propano-1-fosfonato, 3(N,N- dimetil-N-hexadecilamônio) propano-1-sulfonato, 3(N,N-dimetil-N- hexadecilamônio)-2-hidroxipropano-1-sulfonato, 4-[N,N-di(2-hidroxietil)-N- (2-hidroxidodecil)amônio]-butano-1-carboxilato, 3-[S-etil-S-(3-dodecoxi-2- hidroxipropil)sulfônio]-propano-1-fosfato, 3[P,P-dimetil-P-dodecilfosfônio]- propano-1-fosfonato, 5-[N,N-di(3-hidroxipropil)-N-hexadecilamônio]-2- hidroxi-pentano-1-sulfato e suas combinações.

[97]Surfactantes não iônicos apropriados incluem, por exemplo, mono e dialcanolamidas como, por exemplo, cocamida MEA e cocamida DEA, óxidos de amina, alquil poliglucosídeos, silicones etoxilados, álcoois etoxilados, ácidos carboxílicos etoxilados, aminas etoxiladas, amidas etoxiladas, alquilolamidas etoxilados, alquilfenóis etoxilados, ésteres de gliceril etoxilados, ésteres de sorbitano etoxilados, ésteres de fosfato etoxilados, estearato de glicol, estearato de glicerina e suas combinações. Será reconhecido por aquele versado na técnica que muitos dos surfactantes não iônicos aqui descritos podem agir para melhorar as propriedades de espuma da composição de limpeza do sistema de cuidados com vários produtos e podem fornecer um tamanho de bolha mais compacto, reduzido, ou espuma cremosa.

[98]A composição de limpeza também pode incluir um espessante, que atua para engrossar ou aumentar a viscosidade da formulação de limpeza. Pode ser usada uma variedade de espessantes nas composições de limpeza aqui descritas.Em uma modalidade, o espessante pode ser um espessante celulósico ou goma. Exemplos de espessantes celulósicos ou goma adequados incluem goma xantana, ágar, alginatos, carragenina, furcelaran, guar, guar catiônico, goma arábica, goma de tragacanto, goma karaya, goma do feijão de locustídeo, dextrano, amido, amidos modificados, gelano, carboximetilcelulose, hidroxipropilcelulose, hidroxietilcelulose, propileno glicol alginato, hidroxipropil guar, amilopectina, goma de celulose, quitosana, quitosana modificada, hidroxipropil metilcelulose, celulose microcristalina, sílica, sílica pirogênica, sílica coloidal, goma de desidroxantano, carbômeros baseados em não acrílico e suas combinações.

[99]Alternativamente, ou além disso, o espessante pode ser um polímero baseado em acrílico. Exemplos não limitantes de espessantes de polímero baseados em acrílico adequados incluem acrilatos/C10-C30 alquil acrilato polímeros cruzados, certos carbômeros, copolímeros acrilatos, copolímeros aminoacrilatos e suas combinações. Exemplos de espessantes de polímero baseados em acrílico comercialmente disponíveis incluem Structure® Plus (Akzo Nobel, Pasadena, CA), que é um copolímero itaconato acrilatos/aminoacrilatos/C10-30 alquil PEG-20, Carbopol® Aqua SF-1 polímero (Lubrizol Advanced Materials, Cleveland, OH), que é um copolímero de acrilatos, PEMULEN® TR-1 e TR-2 e Carbopol® ETD 2020 (disponível por Lubrizol Advanced Materials), que são polímeros cruzados de alquil acrilatos C10-30/acrilatos e a série de polímeros Carbopol® Ultrez (disponíveis por Lubrizol Advanced Materials), que são carbômeros.

[100]Agentes adicionais adequados para uso na composição de limpeza podem incluir umectantes, conservantes, fragrâncias, agentes quelantes e suas combinações.

[101]Um regime de cuidados de pele pode incluir ainda uma composição de tonificação. Composições de tonificação fornecem benefícios como fechar os poros da pele do usuário, restaurar o pH natural da pele (normalmente, um pH de cerca de 5,0 a cerca de 5,5), remover as impurezas da pele (por exemplo, sujeira, óleos, sebo, maquiagem, poluentes e similares), hidratar a pele e preparar em geral a pele para o tratamento utilizando uma composição de tratamento, tal como a composição antienvelhecimento da presente divulgação e/ou uma composição de tratamento adicional, conforme descrito abaixo.

[102]Geralmente, composições de tonificação para cuidar da pele incluem adstringentes, umectantes, carreadores e suas combinações. Adstringentes apropriados incluem, por exemplo, etanol, hamamelis, água de rosas, alume, aveia, milefólio, pimenta racemosa, água fria, álcool, preparações adstringentes, como nitrato de prata, óxido de zinco, sulfato de zinco, solução de Burow, tintura de benjoim e substâncias vegetais, tais como ácidos tânico e gálico e suas combinações. Como usado aqui, o termo "água fria" refere-se a água com uma temperatura abaixo da temperatura ambiente (aproximadamente 25°C (77°F)).

[103]Umectantes apropriados incluem, por exemplo, glicerina, derivados de glicerina, hialuronato de sódio, betaína, aminoácidos, glicosaminoglicanos, mel, sorbitol, glicóis, polióis, açúcares, hidrolisados de amido hidrogenado, sais de PCA, ácido láctico, lactatos e ureia. Um umectante particularmente preferencial é a glicerina.

[104]Carreadores para as composições de tonificação podem ser qualquer material carreador tipicamente conhecido nas técnicas médica e cosmética como base para unguentos, loções, cremes, pomadas, aerossóis, géis, suspensões, pulverizações, espumas e similares, e podem ser usados em seus níveis estabelecidos na técnica. Em uma determinada modalidade, o carreador é um carreador aquoso.Em outra modalidade, o carreador é um carreador de álcool. O carreador de álcool pode ser qualquer álcool apropriado. Um álcool particularmente preferido é o etanol.

[105]Outros carreadores adequados também podem ser usados nas composições de tonificação. Em determinadas modalidades, os carreadores por si só podem fornecer o benefício de cuidados da pele. Exemplos não limitantes de carreadores adequados incluam emolientes, esteróis ou derivados de esterois, gorduras naturais e sintéticas ou óleos, polióis, surfactantes, ésteres, silicones e outros materiais carreadores farmaceuticamente aceitáveis.

[106]Em algumas modalidades, o regime de cuidados com a pele inclui uma composição de tratamento para tratar a pele, além da composição antienvelhecimento da presente divulgação. Ativos exemplares para a composição de tratamento adicional podem incluir ativos que são conhecidos por ter um efeito de tratamento na pele, como melhorar a uniformidade do tônus da pele e reduzir a acne. Mais especificamente, o agente de tratamento pode ser selecionado a partir do grupo consistindo de agentes modificadores de aparência (por exemplo, agentes esfoliantes, agentes de endurecimento da pele, agentes anti-calo, agentes anti-acne, agentes de cuidados de feridas, agentes de enzima, agentes de reparação de cicatriz, agentes umectantes), agentes terapêuticos, produtos farmacêuticos (por exemplo, drogas, antioxidantes, agentes de entrega de droga transdérmicos, extratos botânicos, vitaminas, ímãs, metais magnéticos e alimentos), xenobióticos, agentes de coloração (por exemplo, agentes de bronzeamento, agentes de clareamento da pele e agentes de brilho, agentes de controle de brilho e drogas), agentes de controle de brilho, agentes corantes, agentes de condicionamento de superfície (por exemplo, agentes de ajuste de pH, hidratantes, condicionadores de pele, agentes de esfoliação, lubrificantes de barbear, agentes anti-calo, agentes anti-acne, agentes antienvelhecimento, agentes de cuidados de feridas, lipídeos da pele, enzimas, agentes para cuidados com cicatriz, umectantes, pós, extratos botânicos e drogas) analgésicos externos, anti-inflamatórios (por exemplo, agentes anti-irritantes, agentes antialérgicos, agentes de cuidados de feridas, liberação transdérmica e drogas), fragrâncias, agentes neutralizantes de odor, agentes tranquilizantes, agentes calmantes, extratos botânicos (por exemplo, óleo de hortelã-pimenta, eucaliptol, óleo de eucalipto, cânfora e óleo de árvore do chá), peptídeos, gorduras naturais e sintéticas ou óleos, absorventes de umidade e suas combinações.

[107]Em uma modalidade, além das composições descritas acima, o regime de cuidados da pele inclui uma composição de acabamento. Tal como acontece com as outras composições, deve ser entendido que os vários ingredientes ativos aqui descritos podem ser usados em qualquer um dos produtos do regime de cuidados com vários produtos sem se afastar do escopo da divulgação.

[108]Quando incluída, uma composição de acabamento é composta por um agente de acabamento que normalmente proporciona hidratação, proteção da pele, ou uma barreira de umidade para selar a umidade para o usuário. Especificamente, o agente de acabamento pode ser qualquer agente hidratante, protetor da pele e/ou agente de reforço da barreira de umidade conhecido na técnica.

[109]Além disso, o agente de acabamento pode ser capaz de fornecer benefícios estéticos, como suavização da pele, ou uma sensação de pó. Exemplos de agentes de acabamento adicionais incluem agentes condicionadores da pele (por exemplo, agentes de regulação do pH, hidratantes, condicionadores de pele, agentes de esfoliação, lubrificantes de barbear, agentes firmadores da pele, agentes anti-calo, agentes antiacne, agentes antienvelhecimento, agentes antirrugas, agentes anti-caspa, agentes para cuidados de feridas, lipídeos da pele, enzimas, agentes para cuidados com cicatriz, umectantes, pós, extratos botânicos e drogas), fragrâncias, extratos botânicos, pós e suas combinações.

[110]Deve ser entendido que os vários ingredientes ativos podem ser usados em qualquer um dos produtos do regime de cuidados com vários produtos sem se afastar do escopo da divulgação. Os ingredientes ativos específicos dos vários produtos dependerão do regime diário final desejado.

[111]Deve ser entendido por aquele versado na técnica que, embora sistemas de cuidados da pele sejam discutidos aqui, regimes usando as composições da presente divulgação podem ser usados para vários outros regimes diários compostos por etapas para limpar, tratar, hidratar e proteger a pele. Entende-se que regimes de cuidados da pele podem combinar todas estas etapas, algumas destas etapas, ou ter várias iterações das mesmas etapas, de modo a proporcionar benefícios desejados para a pele.

[112]Esta descrição escrita usa exemplos para divulgar a invenção, incluindo o melhor modo, e também para permitir a qualquer versado na técnica praticar a invenção, inclusive fazer e usar as composições e realizar quaisquer métodos incorporados. O escopo da invenção patenteável é definido pelas reivindicações e pode incluir outros exemplos concebidos pelos especialistas na técnica. Esses outros exemplos destinam-se a estar dentro do escopo das reivindicações, se tiverem elementos estruturais que não diferem da linguagem literal das reivindicações, ou se incluírem elementos estruturais equivalentes com diferenças não substanciais das linguagens literais das reivindicações.

[113]A divulgação será mais plenamente compreendida mediante a consideração dos Exemplos não limitantes a seguir.

EXEMPLO 1 Quantificação de Ácido Graxo Livre

[114]Neste Exemplo, a produção de ácidos graxos livres em células tratadas com vários ingredientes ativos foi quantificada pela medição de ácidos graxos livres em meios de culturas (meio MesenPro RSTM com 200 mM de L-glutamina e 10 mg/ml de gentamicina) seguindo a lise celular.

[115]Células tronco humanas derivadas de adipócitos (ADSC) foram tratadas com 1% (v/v) de ingredientes ativos por 24 horas, seguido de um período de crescimento de 2 semanas. Na sequência da lise de ADSC e antes da análise de expressão do gene (descrita abaixo), ácidos graxos livres foram medidos fluorometricamente usando um kit de quantificação de ácidos graxos livres, de acordo com as instruções do fabricante (Abcam; Cambridge, MA). Células de controle positivo foram diferenciadas com Kit de Diferenciação de Adipogênese STEMPRO® (Invitrogen, Carlsbad, CA).

[116]Como mostrado na FIG. 1, 1% ADIPOFILL'IN™ (incluindo propanodiol, ornitina, fosfolipídeos e glicolipídeos, comercialmente disponíveis por Lucas Meyer Cosmetics (Quebec, Canadá)), 1% ECOBIDENS™ e 1% UNDARINE™ teve um efeito significativo sobre a produção de ácidos graxos livres em comparação com o controle negativo. Mais particularmente, o tratamento das células com ECOBIDENS™ resultou na produção de 6,65 nMol/μl de ácidos graxos livres e o tratamento com UNDARINE™ resultou na produção de 5,48 nMol/μl de ácidos graxos livres. ECOSAMBA™ (comercialmente disponível como ECOSAMBA™ PRO de Chemyunion Quimica LTDA (Sorocaba, Brasil)) e KOMBUCHKA™ (comercialmente disponível por Sederma, França), no entanto, tiveram um efeito mínimo sobre a produção de ácidos graxos livres.

EXEMPLO 2 Adipogênese e Acúmulo de Ácidos Graxos de Lipídeos/Livres

[117]Neste Exemplo, as células foram expostas a ingredientes ativos para estudar a diferenciação ao longo da linhagem dos adipócitos, como evidenciado pelo acúmulo de ácidos graxos livres/de lipídeos em células detectadas por marcação com Óleo Vermelho-O.

[118]Especificamente, células de camundongo 3T3-L1 e estaminais humanas adiposo-derivadas humanas (ADSC) foram expostas a ingredientes ativos 1% (v/v) por 48 horas. Após 48 horas de exposição, meio de crescimento padrão (meio MesenPro RSTM com 200 mm de L- glutamina e 10 mg/ml de gentamicina) foi adicionado e realimentado a cada 2-3 dias para permitir a diferenciação ao longo da linhagem adiposa por 2 semanas, usando as diretrizes dos respectivos fabricantes. Para células de camundongo 3T3-L1, um controle positivo (FIG. 2B) foi estimulado com DMEM (meio Eagle modificado com Dulbecco) com 10% de soro fetal bovino (FBS) e 5% de penicilina/estreptomicina e ainda suplementado com dexametasona 1 μM, 0,5 mM de IBMX e 10 μg/mL de insulina. Células ADSC foram diferenciadas com Kit de Diferenciação de Adipogênese STEMPRO® (Invitrogen, Carlsbad, CA) para um controle positivo (FIG. 3B).

[119]Após 48 horas de exposição a ingredientes ativos e o período de crescimento de 2 semanas, as células foram fixadas com formol 10% por pelo menos 1 hora. Formalina foi removida e poços foram lavados com 60% de isopropanol.Poços foram então secados ao ar completamente. Solução de trabalho de Óleo Vermelho-O (filtrado 0,21%) foi adicionada a cada poço e incubada por 10 minutos. Os poços foram lavados em água corrente.As células foram fotografadas usando um microscópio Leica DMIRB com ampliação de 400x.

[120]Conforme demonstrado nas FIGS. 2C e 2D, células de camundongo 3T3-L1 diferenciadas expostas aos extratos ADIPOFILL'IN™ e ECOBIDENS™ foram manchadas de vermelho (como mostrado, tornaram-se de cor mais escura) e tornaram-se mais redondas na forma, indicando que o teor intracelular de ácidos graxos aumentou. Resultados semelhantes foram obtidos em células ADSC humanas (ver FIGS 3C e 3D).Coloração mínima foi observada em linhagem celular estimulada com ECOSAMBA PRO™ ou KOMBUCHKA™ (ver FIGS. 2E, 2F, 3E e 3F). Controles negativos (células não tratadas) foram imaculados e pareceram alongados em forma (ver FIG. 2A e FIG. 3A). Controles positivos também foram manchados e se tornaram redondos na forma (ver FIG. 2B e FIG. 3B).

EXEMPLO 3 Análise de Marcador Genético

[121]Neste Exemplo, qRT-PCR foi utilizado para medir a expressão de genes envolvidos na adipogênese.

[122]PPAR-gama está envolvido em cascatas de sinalização da adipogênese como um promotor de adipogênese conhecido. Para investigar a expressão de PPAR-gama na estimulação da adipogênese através de ingredientes ativos, o RNA foi isolado de ADSCs tratados para a análise qRT-PCR. A expressão relativa de PPAR-gama foi comparada com β-actina (um gene constitutivo) e todas as amostras foram normalizadas para um controle negativo (células não tratadas). Células de controle positivo foram diferenciadas com Kit de Diferenciação de Adipogênese STEMPRO® (Invitrogen, Carlsbad, CA).

[123]O RNA foi isolado a partir de células diferenciadas de acordo com as instruções do fabricante (kit QIAGEN RNeasy). O cDNA foi gerado usando o kit QIAGEN de Transcriptase Reversa de Primeiro Filamento, de acordo com as instruções do fabricante. TaqMan 2x Universal Master Mix com TaqMan GAPDH (VIC), β-actina (VIC) e sondas validadas PPAR-gama (FAM) foram usados para quantificar a expressão relativa ao controle negativo. O método de ciclo limiar Delta-Delta (ΔΔCT) foi usado para análise comparativa.

[124]Como mostrado na FIG. 4, observou-se uma significativa regulação de PPAR-gama em células tratadas com ADIPOFILL'IN™, ECOBIDENS™, ECOSAMBA™ e UNDARINE™.

EXEMPLO 4

[125]Neste exemplo, um extrato de Undaria foi testado por seu efeito na adipogênese.

[126]Especificamente, extrato de Undaria (UNDARINE™) foi aplicado a células estaminais humanas adiposo-derivadas (ADSC) a 1% (v/v).As células foram tratadas e cultivadas conforme descrito no Exemplo 1 acima.Após exposição a UNDARINE™, ADSC foram fixadas com formol a 10% por pelo menos 1 hora.Formalina foi removida e poços foram lavados com 60% de isopropanol.Poços foram então secados ao ar completamente. Solução de trabalho de Óleo Vermelho-O (filtrado 0,21%) foi adicionada a cada poço e incubada por 10 minutos. Os poços foram lavados em água corrente.As células foram fotografadas usando um microscópio Leica DMIRB com ampliação de 400x.

[127]Como mostrado na FIG. 5, ADSC humana marcada com vermelho (como mostrado, tornou-se de cor mais escura) com Óleo Vermelho-O, demonstrando a produção de ácidos graxos em resposta ao tratamento com extrato de Undaria.

EXEMPLO 5

[128]Neste Exemplo, extratos de Undaria com fucoidan padronizado foram testados para efeito sobre a adipogênese e comparados com os extratos de Undaria utilizados na presente divulgação.

[129]Especificamente, Undaria spp. são plantas de algas marrons que contêm fucoidan nas paredes das células. Fucoidan mostrou inibir a adipogênese. Conforme descrito nos Exemplos acima, no entanto, UNDARINE™ surpreendentemente e inesperadamente promoveu a produção de adipogênese e lipídeos (ver, FIGS. 1 e 5). Para continuar a analisar os benefícios inesperados de UNDARINE™, células de camundongo 3T3-1L foram tratadas com um extrato à base de Undaria, ou UNDARINE™ ou WAKAMINE® (um extrato de Undaria pinnatifida, obtido de SOLIANCE, França), ou um dos dois extratos de Undaria com fucoidan padronizado, MARITECH® REVERSE ou MARITECH® GLYCOMIX (ambos obtidos de Marinova PTY. Ltd. (Cambridge, Austrália)). Em particular, as células foram tratadas com 1% (v/v) de um dentre: WAKAMINE®, MARITECH® REVERSE, que pretendia incluir 85% de fucoidan, ou MARITECH® GLYCOMIX, que pretendia incluir 80% de fucoidan, conforme descrito no Exemplo 2.

[130]Um controle positivo (FIG. 6F) incluiu células diferenciadas com Kit de Diferenciação de Adipogênese STEMPRO® (Invitrogen, Carlsbad, CA) e um controle negativo (FIG. 6E) incluído células não tratadas. As células foram coradas usando a mancha de Óleo Vermelho-O como descrito acima.

[131]Como mostrado nas FIGS. 6A-6F, UNDARINE™ e WAKAMINE® promoveram a adipogênese (FIGS. 6A & 6B), considerando que MARITECH® REVERSE e MARITECH® GLYCOMIX (FIGS. 6C & 6D) não o fizeram. Este Exemplo confirma que fucoidans não têm um efeito de adipogênese ou lipogênese nas células. E, assim, ele inesperadamente demonstra que extratos de Undaria nas composições da presente divulgação, fornecem estes benefícios, apesar de serem do mesmo gênero, que é conhecido por não promover a adipogênese.

EXEMPLO 6

[132]Neste Exemplo, ingredientes ativos conhecidos por estimular a adipogênese e/ou a lipogênese foram testados para o efeito de adipogênese e/ou lipogênese em ADSC.

[133]Particularmente, as células de camundongo 3T3-1L foram tratadas com os seguintes ingredientes ativos conhecidos por estimular a adipogênese e/ou a lipogênese: 1% (p/v) SYM3D™ (comercialmente disponível por Symrise, Teterboro, NJ), 1% (p/v) VOLUFILINE™ (comercialmente disponível por Sederma, França), 1%(p/v) COMMIPHEROLINE™ (comercialmente disponível por Soliance, França), 1% (p/v) BIO-BUSTYL™ (comercialmente disponível por Sederma, França), 1% (p/v) CELLACTIVE® FORM (comercialmente disponível por Rahn, USA Corp., Aurora, IL), 1% (p/v) ADIFYLINE® (comercialmente disponível por Lipotec, Espanha) e 1% (p/v) VOLUFORM™ (comercialmente disponível por SEPPIC, França). Mais particularmente, esses ingredientes ativos têm sido anteriormente comercializados para aumentar o tamanho da mama e/ou afofar a área do pescoço/peito via adipogênese e/ou lipogênese. As células foram coradas usando a mancha de Óleo Vermelho-O como descrito acima.

[134]Como mostrado nas FIGS. 7A-7G, alguns desses ativos não mostraram atividade de adipogênese/lipogênese. E mais, em comparação com as FIGS. 5 e 8A-8D, UNDARINE™, bem como os vários extratos de Bidens, se saíram tão bem ou melhor em estimular a adipogênese e/ou a lipogênese em comparação com os ingredientes ativos conhecidos.

EXEMPLO 7

[135]Neste Exemplo, extratos à base de Bidens foram testados por seus efeitos na adipogênese.

[136]Especificamente, extrato de Bidens pilosa (ECOBIDENS™, obtido de Chemyunion), extrato de Bidens bipinnata (obtido de Carrubba), extrato de Bidens pilosa (obtido de Carrubba) e extrato de Bidens tripartita (Extrato Provital Water Agrimony H.G., obtido de Provital Group, Espanha) foram aplicados às células de camundongo 3T3-1L a 1% (v/v). As células foram tratadas e cultivadas conforme descrito acima e analisadas pela mancha de Óleo Vermelho O. Um controle positivo (FIG. 8F) incluiu células de camundongo 3T3-1L estimuladas com DMEM suplementado com 1 μM de dexametasona, 0,5 mM de IBMX e 10 μg/mL de insulina e um controle negativo (FIG. 8E) incluiu células não tratadas.

[137]Conforme mostrado nas FIGS. 8A-8D, células de camundongo 3T3-1L marcadas de vermelho com Óleo Vermelho-O, demonstrando a produção de ácidos graxos em resposta aos vários extratos de Bidens.

EXEMPLO 8

[138]Neste Exemplo, testaram-se ativos para efeito na proliferação celular.

[139]Especificamente, fibroblastos dérmicos humanos foram marcados com carboxifluoresceína succinimidil éster (CFSE) antes do tratamento com ADIPOFILL'IN™, ECOBIDENS™, ECOSAMBA PRO™, KOMBUCHKA™, UNDARINE™ ou a combinação de ADIPOFILL'IN™/ECOSAMBA PRO™. Para estabelecer um índice de proliferação, as células foram medidas a 0 hora, 24 horas, 48 horas e 96 horas.

[140]Como mostrado na FIG. 9, todos os ativos, exceto UNDARINE™, induziram proliferação celular significativamente maior em comparação com um controle (células não tratadas). Além disso, a combinação de ADIPOFILL'IN™/ECOSAMBA PRO™ resultou no maior aumento na proliferação de fibroblastos (ver FIG. 9), mostrando que esta combinação proporciona este benefício adicional.

[141]No que diz respeito à amostra tratada com UNDARINE™, acredita-se que a maior proliferação de fibroblastos envolve uma via celular separada da adipogênese e/ou lipogênese envolvendo adipócitos. Ou seja, este Exemplo demonstra que alguns desses ingredientes ativos podem afetar uma via baseada em fibroblasto, que é separada da via envolvendo adipócitos.

EXEMPLO 9

[142]Neste Exemplo, análise de microarranjo foi realizada em ADSCs humanas para comparar os efeitos de extratos de Undaria e Bidens na expressão gênica.

[143]Em particular, ADSCs humanas foram tratadas com 1% (v/v) de extrato de Undaria, UNDARINE™, ou extrato de Bidens, ECOBIDENS™, conforme descrito no Exemplo 1 acima por 48 horas e então deixadas diferenciar-se em meio padrão de crescimento por duas semanas. Depois de duas semanas, as amostras de RNA foram coletadas das células tratadas com extrato e das células controle não tratadas e enviadas para um provedor de serviço comercial para análise de microarranjo, usando chips de HEEBO humanos (Ocean Ridge Biosciences, Palm Beach Gardens, FL).

[144]As alterações em vezes na expressão foram calculadas para cada tratamento em relação a controles não tratados (ou seja, tratados/não tratados com Undaria e tratados/não tratados com Bidens). As alterações em vezes foram analisadas em Genesis (versão 1.7.5) usando clustering hierárquico 2D. Os dados de alteração em vezes (valor-p < 0,05, taxa de falsos positivos (FDR) <=0,1, alteração em vezes > 2) foi log2 transformado antes do clustering. O clustering hierárquico 2D foi realizado usando distância euclidiana e ligação média para os diferentes genes e tratamentos. Os resultados foram demonstrados usando um mapa de calor onde verde indicou diminuição da expressão e vermelho indicou aumento da expressão em relação a controles não tratados (não mostrado).

[145]A análise de cluster do microarranjo mostrou alterações na regulação do gene em ambas as células tratadas com Undaria e Bidens, em comparação com a amostra de controle sem tratamento (não mostrado). A Tabela 1 fornece uma lista de genes que responderam ao tratamento, no qual genes "sem limiar" representaram aqueles que foram regulados acima ou abaixo (mas, por menos de 2 vezes) e resultado diferente entre tratamentos com Undaria e Bidens. Os genes com "limiar" representaram aqueles que foram significativamente regulados acima ou abaixo (por um fator maior que 2 vezes) e resultado diferente entre tratamentos com Undaria e Bidens. A análise de microarranjo demonstrou que o tratamento com Undaria e Bidens induz mudanças na expressão gênica. Tabela 1

EXEMPLO 10 Sobrevida Celular

[146]Neste Exemplo, um teste de sobrevida celular foi realizado para testar a citotoxicidade dos ingredientes ativos.

[147]Especificamente, fibroblastos dérmicos humanos (HDFs) foram expostos por 24 horas a u meio de crescimento (DMEM + 10% FBS) contendo 0,5, 1, 2 e 5% p/p de ingredientes ativos. Após 24 horas de exposição, solução MTT (azul tiazolil azul tetrazólio) foi adicionada ao poços de cultura celular por 2-4 horas a 37°C. Solução MTT foi então removida e álcool isopropílico foi adicionado e incubado durante a noite à temperatura ambiente no escuro. Poços foram medidos em OD570 e comparados com células de controle não tratadas para determinar a sobrevida celular.

[148]Como demonstrado na FIG. 10, nenhum dos ingredientes ativos testados reduziu significativamente a sobrevida celular, nem produziu significativamente citocinas IL1-alfa, pro-inflamatórias.

EXEMPLO 11

[149]Nestes Exemplos, composições tópicas exemplares foram preparadas com os seguintes componentes:Tabela 2 - Formulacao de Gel

Tabela 3 - Formulacao de Soro Isento de Oleo

Tabela 4 - Oleo em Emulsao de Agua

Tabela 5 - Xampu Corporal de Espuma

[150]Estes resultados indicam ainda que composições tópicas incluindo um extrato de Undaria, composições tópicas incluindo um extrato de Bidens e composições tópicas incluindo um extrato de Undaria e um extrato de Bidens podem melhorar a total plenitude e aparência de envelhecimento da pele, aumentando o número dos adipócitos e a produção de ácidos graxos livres/de lipídeos dos adipócitos. As composições e métodos podem melhorar a aparência de envelhecimento da pele do rosto, pescoço e do corpo. As composições e métodos também podem melhorar a aparência da pele da vulva e dos lábios, particularmente em mulheres na pós-menopausa.

Claims

1.Método para reduzir os sinais de envelhecimento da pele em um indivíduo em necessidade disso, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende: aplicar topicamente uma composição que compreende de 0,1% (p/p) a 5% (p/p) de um extrato de Undaria, de 0,1% (p/p) a 5% (p/p) de um extrato de Bidens e um carreador hidrofílico a uma região da pele alvo do indivíduo.

2.Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a região da pele alvo é selecionada do grupo consistindo de pele facial, pele do pescoço, pele da mama, pele do ombro, pele do tórax, pele vulvar, pele da perna, pele da mão, pele dos pés e suas combinações.

3.Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o extrato de Undaria é selecionado do grupo consistindo de Undaria crenata, Undaria peterseniana, Undaria pinnatifida, Undaria undarioides e suas combinações.

4.Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o extrato de Bidens é selecionado do grupo consistindo de Bidens alba, Bidens amplectens, Bidens amplissima, Bidens aristosa, Bidens asymmetrica, Bidens aurea, Bidens beckii, Bidens bidentoides, Bidens bigelovii, Bidens bipinnata, Bidens biternata, Bidens campylotheca, Bidens cernua, Bidens cervicata, Bidens chippii, Bidens conjuncta, Bidens connata, Bidens coronata, Bidens cosmoides, Bidens cynapiifolia, Bidens discoidea, Bidens eatonii, Bidens ferulifolia, Bidens forbesii, Bidens frondosa, Bidens gardneri, Bidens hawaiensis, Bidens henryi, Bidens heterodoxa, Bidens heterosperma, Bidens hillebrandiana, Bidens hyperborean, Bidens laevis, Bidens lemmonii, Bidens leptocephala, Bidens leptophylla, Bidens macrocarpa, Bidens mannii, Bidens mauiensis, Bidens maximowicziana, Bidens menziesii, Bidens micrantha, Bidens mitis, Bidens molokaiensis, Bidens x multticeps, Bidens parviflora, Bidens pilosa, Bidens polylepis, Bidens populifolia, Bidens radiate, Bidens reptans, Bidens sandvicensis, Bidens schimperi, Bidens simplicifolia, Bidens socorrensis, Bidens squarrosa, Bidens subalternans, Bidens tenuisecta, Bidens torta, Bidens trichosperma, Bidens tripartita, Bidens triplinervia, Bidens valida, Bidens vulgata, Bidens wiebkei e suas combinações.

5.Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a composição compreende ainda beta-sitosterol.

6.Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o carreador hidrofílico é selecionado do grupo que consiste de glicerina, água, glicol e suas combinações, e que a composição compreende ainda um realçador de penetração na pele, em que o realçador de penetração na pele é um glicol.

7.Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a composição compreende de 1% (p/p) a 5% (p/p) de um extrato de Undaria e de 1% (p/p) a 5% (p/p) de um extrato de Bidens.

8.Método para aumentar a adipogênese da face e do corpo de um indivíduo em necessidade disso, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende: aplicar topicamente uma composição que compreende de 0,1% (p/p) a 5% (p/p) de um extrato de Undaria, de 0,1% (p/p) a 5% (p/p) de um extrato de Bidens e um carreador hidrofílico a uma região da pele alvo do indivíduo.

9.Método, de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADO pelo fato de que a região da pele alvo é selecionada do grupo consistindo de pele facial, pele do pescoço, pele da mama, pele do ombro, pele do tórax, pele vulvar, pele da perna, pele da mão, pele dos pés e suas combinações.

10.Método, de acordo com a reivindicação 6, CARACTERIZADO pelo fato de que o extrato de Undaria é selecionado do grupo consistindo de Undaria crenata, Undaria peterseniana, Undaria pinnatifida, Undaria undarioides e suas combinações

11.Método, de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADO pelo fato de que o extrato de Bidens é selecionado do grupo consistindo de Bidens alba, Bidens amplectens, Bidens amplissima, Bidens aristosa, Bidens asymmetrica, Bidens aurea, Bidens beckii, Bidens bidentoides, Bidens bigelovii, Bidens bipinnata, Bidens biternata, Bidens campylotheca, Bidens cernua, Bidens cervicata, Bidens chippii, Bidens conjuncta, Bidens connata, Bidens coronata, Bidens cosmoides, Bidens cynapiifolia, Bidens discoidea, Bidens eatonii, Bidens ferulifolia, Bidens forbesii, Bidens frondosa, Bidens gardneri, Bidens hawaiensis, Bidens henryi, Bidens heterodoxa, Bidens heterosperma, Bidens hillebrandiana, Bidens hyperborean, Bidens laevis, Bidens lemmonii, Bidens leptocephala, Bidens leptophylla, Bidens macrocarpa, Bidens mannii, Bidens mauiensis, Bidens maximowicziana, Bidens menziesii, Bidens micrantha, Bidens mitis, Bidens molokaiensis, Bidens x multticeps, Bidens parviflora, Bidens pilosa, Bidens polylepis, Bidens populifolia, Bidens radiate, Bidens reptans, Bidens sandvicensis, Bidens schimperi, Bidens simplicifolia, Bidens socorrensis, Bidens squarrosa, Bidens subalternans, Bidens tenuisecta, Bidens torta, Bidens trichosperma, Bidens tripartita, Bidens triplinervia, Bidens valida, Bidens vulgata, Bidens wiebkei e suas combinações.

12.Método, de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADO pelo fato de que a composição compreende ainda um realçador de penetração na pele.

13.Método, de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADO pelo fato de que o carreador hidrofílico é selecionado do grupo que consiste de glicerina, água, glicol e suas combinações, e que a composição compreende ainda um realçador de penetração na pele, em que o realçador de penetração na pele é um glicol.

14.Método, de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADO pelo fato de que a composição compreende de 1% (p/p) a 5% (p/p) de um extrato de Undaria e de 1% (p/p) a 5% (p/p) de um extrato de Bidens.

15.Método para aumentar a lipogênese da face e do corpo de um indivíduo na necessidade disso, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende: aplicar topicamente uma composição que compreende de 0,1% (p/p) a 5% (p/p) de um extrato de Undaria, de 0,1% (p/p) a 5% (p/p) de um extrato de Bidens e um carreador hidrofílico a uma região da pele alvo do indivíduo.

16.Método, de acordo com a reivindicação 15, CARACTERIZADO pelo fato de que a região da pele alvo é selecionada do grupo consistindo de pele facial, pele do pescoço, pele da mama, pele do ombro, pele do tórax, pele vulvar, pele da perna, pele da mão, pele dos pés e suas combinações.

17.Método, de acordo com a reivindicação 15, CARACTERIZADO pelo fato de que o extrato de Undaria é selecionado do grupo consistindo de Undaria crenata, Undaria peterseniana, Undaria pinnatifida, Undaria undarioides e suas combinações.

18.Método, de acordo com a reivindicação 15, CARACTERIZADO pelo fato de que o extrato de Bidens é selecionado do grupo consistindo de Bidens alba, Bidens amplectens, Bidens amplissima, Bidens aristosa, Bidens asymmetrica, Bidens aurea, Bidens beckii, Bidens bidentoides, Bidens bigelovii, Bidens bipinnata, Bidens biternata, Bidens campylotheca, Bidens cernua, Bidens cervicata, Bidens chippii, Bidens conjuncta, Bidens connata, Bidens coronata, Bidens cosmoides, Bidens cynapiifolia, Bidens discoidea, Bidens eatonii, Bidens ferulifolia, Bidens forbesii, Bidens frondosa, Bidens gardneri, Bidens hawaiensis, Bidens henryi, Bidens heterodoxa, Bidens heterosperma, Bidens hillebrandiana, Bidens hyperborean, Bidens laevis, Bidens lemmonii, Bidens leptocephala, Bidens leptophylla, Bidens macrocarpa, Bidens mannii, Bidens mauiensis, Bidens maximowicziana, Bidens menziesii, Bidens micrantha, Bidens mitis, Bidens molokaiensis, Bidens x multticeps, Bidens parviflora, Bidens pilosa, Bidens polylepis, Bidens populifolia, Bidens radiate, Bidens reptans, Bidens sandvicensis, Bidens schimperi, Bidens simplicifolia, Bidens socorrensis, Bidens squarrosa, Bidens subalternans, Bidens tenuisecta, Bidens torta, Bidens trichosperma, Bidens tripartita, Bidens triplinervia, Bidens valida, Bidens vulgata, Bidens wiebkei e suas combinações.

19.Método, de acordo com a reivindicação 15, CARACTERIZADO pelo fato de que o carreador hidrofílico é selecionado do grupo que consiste de glicerina, água, glicol e suas combinações, e que a composição compreende ainda um realçador de penetração na pele, em que o realçador de penetração na pele é um glicol.

20.Método, de acordo com a reivindicação 15, CARACTERIZADO pelo fato de que a composição compreende de 1% (p/p) a 5% (p/p) de um extrato de Undaria e de 1% (p/p) a 5% (p/p) de um extrato de Bidens.