BR112015002931B1 - compostos antibacterianos, seu uso, composição farmacêutica que os compreende e processo de preparação destes - Google Patents

Abstract

compostos antibacterianos. a presente invenção refere-se a novos compostos de fór- mula (i) que podem inibir a atividade da enzima fabl, e que são úteis no trata- mento de infecções bacterianas. a invenção refere-se ainda a compo- sições farmacêuticas compreendendo esses compostos, e a proces- sos químicos para preparar esses compostos.

Description

COMPOSTOS ANTIBACTERIANOS, SEU USO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA QUE OS COMPREENDE E PROCESSO DE PREPARAÇÃO DESTES.

[001] A presente invenção refere-se a novos compostos de fórmula (I) que inibem a atividade da enzima FabI, que são, por conseguinte, úteis no tratamento de infeções bacterianas. A invenção referese ainda a composições farmacêuticas compreendendo esses compostos, e a processos químicos para preparar esses compostos.

[002] Os compostos da presente invenção são compostos antibacterianos que inibem a proteína FabI, uma enzima redutase enoil-proteína de transporte de acila (ACP) NADH dependente na via de biossíntese de ácidos graxos. A ácido graxos sintase (FAS) está envolvida na via biossintética global de ácidos graxos saturados em todos os organismos, mas a organização estrutural da FAS varia consideravelmente entre eles. As características distintas da FAS dos vertebrados e leveduras são que todas as atividades enzimáticas são codificadas em uma ou duas cadeias polipeptídicas, e que a proteína de transporte de acila (ACP) existe na forma de um complexo. Em contraste, na FAS bacteriana, cada uma das etapas sintéticas é catalizada por uma enzima monofuncional distinta e a ACP é uma proteína discreta. Por conseguinte, é possível inibir seletivamente a FAS bacteriana bloqueando uma das etapas sintéticas usando um agente inibidor. A redutase enoil-ACP NADH dependente (Fab I) está envolvida na última etapa das quatro etapas reacionais envolvidas em cada ciclo da biossíntese bacteriana de ácidos graxos. Assim, a enzima FabI é a enzima biossintética na via sintética global da biossíntese bacteriana de ácidos graxos.

[003] Foi demonstrado que a enzima FabI constitui um alvo essencial nos principais patógenos tais como E. Coli (Heath et al. J. Biol. Chem. 1995, 270, 26538; Bergler et al. Eur. J. Biochem. 2000, 275, 4654). Assim, os compostos que inibem a FabI podem ser úteis como

Petição 870190028675, de 26/03/2019, pág. 5/24

2/118 antibacterianos.

[004] Os compostos com atividade inibitória da enzima Fabl foram divulgados nos WO-01/26652, WO-01/26654, e WO-01/27103. Compostos naftiridinona substituídos com atividade inibidora da Fabl foram divulgados nos WO-03/088897, WO-2007/043835 e WO2008/098374. O pedido de patente internacional WO 2007/053131 divulga vários compostos para uso potencial como inibidores da Fabl. O pedido de patente internacional WO 2011/061214 divulga também vários compostos para uso potencial como inibidores da Fabl. No entanto, nenhum desses documentos divulga um grupo heterociclicoalquilo à base de nitrogênio contendo uma ligação dupla que esteja diretamente ligado a uma unidade carbonila em posição α relativamente a um alceno.

[005] A presente invenção refere-se a um composto de fórmula (I):

[006] em que [007] cada Z^x representa independentemente -[C(R^z8)(R^z9)]_n-, em que n é 1 ou 2;

[008] R^z8 e R^z9 representam independentemente hidrogênio ou um substituinte selecionado de entre R³ ou R⁴;

[009] R1 é hidrogênio, uma alquila C1-4 ou um halogênio;

[0010] R2 é hidrogênio, uma alquila C1-4 ou um halogênio;

[0011] R^x representa:

3/118

[0012] em que [0013] X^x representa C(H), C(R^y1) ou N;

[0014] R^y1 representa um a três substituintes opcionais, cada um deles independentemente selecionado de entre hidrogênio, halogênio, -CN, -O-alquilaCfoe ou alquila Ci_₆ (em que as duas últimas unidades alquila são opcionalmente substituídas com um ou mais átomos de flúor);

[0015] cada R^y2 e R^y3 representa independentemente hidrogênio ou -Q¹-R⁵;

[0016] cada Q¹ representa independentemente uma ligação direta ou -C(O)-;

[0017] R⁵ representa hidrogênio, uma alquila C^, heterocicloalquila (em que cada um dos dois últimos grupos é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes independentemente selecionados de entre =0 e Q ²), arila ou heteroarila (em que os últimos dois grupos são opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes selecionados de Q³);

[0018] Q² representa um halogênio, -CN, -O-alquilaC^ (opcionalmente substituído com um ou mais átomos de flúor),uma arila ou heteroarila (em que os últimos dois grupos são opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes selecionados de entre halogênios, -CN, alquilas C-^ ou [0019] -O-alquilaCi_3, as duas últimas unidades alquila, elas próprias, opcionalmente substituídas com flúores);

[0020] Q³ representa um halogênio, -CN, -O-alquilaC^e ou uma alquila C^e (em que as duas últimas unidades alquila são opcional4/118 mente substituídas com um ou mais substituintes flúor);

[0021] em que [0022] X^x representa C(H) ou N;

[0023] Z¹ representa -X¹-O-X^1a-, -X²-N(R^z3)-X^2a- ou -X³-S-X^3a-;

[0024] X¹, X² e X³ representam independentemente uma ligação direta, -C(O)- ou -C(R^z4)(R^z5)-;

[0025] X^1a, X^2a e X^3a representam independentemente uma ligação direta ou -V¹-C(R^z1)(R^z2)-;

[0026] V¹ representa uma ligação direta ou -C(O)-;

[0027] R^z1, R^z2, R^z3, R^z4 e R^z5 representam independentemente hidrogênios, alquilas Ci.₆ (opcionalmente substituídas com um ou mais substituintes selecionados de entre =0 e halogênios) ou heterocicloalquilas (opcionalmente substituídas com um ou mais substituintes selecionados de entre =0, halogênios e alquilas C1-3);

[0028] em que [0029] X^x representa C(H) ou N;

[0030] Z² representa -C(R^z6)(R^z7)- ou -C(O)-;

[0031] Z³ representa uma ligação direta (formando, por conseguinte, um anel de 7 membros) ou -CH₂- (formando, por conseguinte, um anel de 8 membros);

[0032] 0 anel A representa um anel de 5 ou 6 membros contendo opcionalmente uma, duas ou três ligações duplas (e sendo, por conseguinte, aromático ou não aromático) e contendo opcionalmente um a três (por exemplo um ou dois) heteroátomos (por exemplo seleciona5/118 dos de entre N e O) adicionais (para além do N necessário), e anel esse que é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes, cada um independentemente selecionado de entre =0 e R^z8;

[0033] cada R^z6, R^z7 e R^z8 representa independentemente um hidrogênio ou uma alquila C-|.₆ opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados de entre =0, -O-alquilaCb.4 θ halogênios;

[0034] cada R3 representa independentemente um hidrogênio, halogênio, -OR¹⁰, ou uma alquila (opcionalmente substituída com um ou mais átomos de halogênio (por exemplo flúor);

[0035] cada R4 representa independentemente um hidrogênio, halogênio ou -T¹-R²⁰;

[0036] cada -T¹ representa independentemente uma ligação direta, -O-, -C(O)-, -C(O)-O-, -O-C(O)-, -C(O)-N(R²¹)- ou -S(O)_n1-;

[0037] n1 representa 0, 1 ou 2;

[0038] cada R¹⁰ e cada R²⁰ representa independentemente uma alquila C-i_₆ (opcionalmente substituída com um ou mais substituintes independentemente selecionados de entre =0 e Y¹), arila ou heteroarila (em que os últimos dois grupos são opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes independentemente selecionados de Y²);

[0039] R²¹ representa um hidrogênio ou uma alquila Ci_₆;

[0040] cada Y¹ representa independentemente um halogênio, -OR³⁰, -CN, arila ou heteroarila (em que os últimos dois grupos são opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes selecionados de entre halogênios, [0041] -O-alquilaCí.3 e alquilas Ci_₃);

[0042] cada Y² representa independentemente um halogênio, -OalquilaC^e ou uma alquila C^e (em que as duas últimas unidades alquila são opcionalmente substituídas com um ou mais átomos de flúor);

[0043] cada R³⁰ representa independentemente um hidrogênio,

6/118 uma alquila Ci_₆ (opcionalmente substituída com um ou mais átomos de flúor), arila ou heteroarila (em que os últimos dois grupos são opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes selecionados de entre halogênios, -O-alquilaCi_₃ e alquilas C-1.3);

[0044] ou um seu sal de adição farmaceuticamente aceitável (por exemplo sal de adição de ácido).

[0045] Os compostos de fórmula I acima mencionados (ou sais dos mesmos) podem ser denominados no presente documento como compostos da invenção.

[0046] Sais farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de adição ácidos e sais de adição de bases. Tais sais podem ser formados por meios convencionais, por exemplo, mediante reação de uma forma de ácido livre ou base livre de um composto de fórmula I com um ou mais equivalentes de um ácido ou base apropriada, opcionalmente em um solvente, ou em um meio onde o sal é insolúvel, seguido de remoção do referido solvente, ou referido meio, usando técnicas-padrão (p.ex., in vacuo, mediante liofilização ou mediante filtração). Os sais também podem ser preparados trocando um contraíon de um composto da invenção na forma de um sal por outro contraíon, por exemplo, usando uma resina de troca iônica adequada.

[0047] Os sais de adição ácidos farmaceuticamente aceitáveis tais como mencionados acima no presente documento, destinam-se a compreender as formas de sais de adição ácidos não tóxicas terapeuticamente ativas que os compostos da Fórmula (I) são capazes de formar. Esses sais de adição ácidos farmaceuticamente aceitáveis podem ser convenientemente obtidos tratando a forma de base com tal ácido apropriado. Ácidos apropriados compreendem, por exemplo, ácidos inorgânicos tais como ácidos hidrohálicos, p.ex., ácido clorídrico ou bromídrico, ácido sulfúrico, nítrico, fosfórico e similares; ou ácidos orgânicos tais como, por exemplo, ácido acético, propanoico, hi

7/118 droxiacético, láctico, pirúvico, oxálico (isto é, etanodioico), malônico, succínico (isto é, ácido butanodioico), maleico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, metanossulfônico, etanossulfônico, benzenossulfônico, ptoluenossulfônico, ciclâmico, salicílico, p-aminossalicílico, pamoico e similares.

[0048] Para os propósitos dessa invenção, solvatos, profármacos, N-óxidos e estereoisômeros de compostos da invenção também estão incluídos no escopo da invenção.

[0049] O termo profármaco de um composto relevante da invenção inclui qualquer composto que, após administração oral ou parentérica, é metabolizado in vivo para formar tal composto em uma quantidade experimentalmente detectável, e em um período de tempo predeterminado (p.ex., em um intervalo de dosagem entre 6 e 24 horas (isto é, uma até quatro vezes diariamente)). Para evitar dúvidas, o termo administração parentérica inclui todas as formas de administração diferentes de administração oral.

[0050] Os profármacos de compostos da invenção podem ser preparados modificando grupos funcionais presentes no composto de um modo tal que as modificações são clivadas in vivo quando tal profármaco é administrado a um indivíduo mamífero. As modificações são tipicamente obtidas sintetizando o composto de origem com um substituinte de profármaco. Os profármacos incluem compostos da invenção em que um grupo hidroxila, amino, sulfidrila, carbóxi ou carbonila em um composto da invenção é ligado a qualquer grupo que possa ser clivado in vivo para regenerar o grupo hidroxila, amino, sulfidrila, carbóxi ou carbonila livre, respectivamente.

[0051] Exemplos de profármacos incluem, mas não estão limitados a, ésteres e carbamatos de grupos funcionais hidróxi, grupos éster de grupos funcionais carboxila, derivados N-acila e bases de N-Mannich. Informações gerais sobre profármacos podem ser encontradas, por

8/118 exemplo, em Bundegaard, H. Design of Prodrugs página I-92, Elsevier, Nova lorque-Oxford (1985).

[0052] Os compostos da invenção podem conter ligações duplas e, assim, podem existir como isômeros geométricos E (entgegen} e Z (zusammeiT) em redor de cada ligação dupla individual. Os isômeros de posição também podem ser abrangidos pelos compostos da invenção. Todos esses isômeros (p.ex., se um composto da invenção incorporar uma ligação dupla ou um anel fundido, as formas cis e trans estão abrangidas) e suas misturas estão incluídos no escopo da invenção (p.ex., isômeros de posição isolados e misturas de isômeros de posição podem estar incluídos no escopo da invenção).

[0053] Os compostos da invenção também podem exibir tautomerismo. Todas as formas tautoméricas (ou tautômeros) e suas misturas estão incluídas no escopo da invenção. O termo tautômero ou forma tautomérica refere-se a isômeros estruturais de diferentes energias que são interconversíveis via uma barreira de baixa energia. Por exemplo, tautômeros protônicos (também chamados de tautômeros prototrópicos) incluem interconversões via migração de um próton, como as isomerizações ceto-enólica e imina-enamina. Tautômeros de valência incluem interconversões mediante reorganização de alguns dos elétrons de ligação.

[0054] Os compostos da invenção também podem conter um ou mais átomos de carbono assimétricos e, consequentemente, podem exibir isomerismo óptico e/ou diastereoisomeria. Os diastereoisômeros podem ser separados usando técnicas convencionais, p.ex., cromatografia ou cristalização fracionada. Os vários estereoisômeros podem ser isolados por separação de uma mistura racêmica ou outra dos compostos usando técnicas convencionais, p.ex., cristalização fracionada ou HPLC. Em alternativa, os isômeros ópticos desejados podem ser preparados mediante reação dos materiais de partida oticamente

9/118 ativos apropriados, sob condições que não irão causar racemização ou epimerização (isto é, um método de ‘reunião quiral’), por reação do material de partida apropriado com um ‘auxiliar quiral’ que pode ser posteriormente removido em um estágio adequado, por derivatização (isto é, uma resolução, incluindo uma resolução dinâmica), por exemplo, com um ácido homoquiral seguida de separação dos derivados diastereoméricos por meios convencionais, como cromatografia, ou por reação com um reagente quiral ou catalisador quiral apropriado, todas sob condições conhecidas do perito na técnica.

[0055] Todos os estereoisômeros (incluindo, mas não se limitando a diastereoisômeros, enantiômeros e atropisômeros) e suas misturas (p.ex., misturas racêmicas) estão incluídos no escopo da invenção.

[0056] Nas estruturas apresentadas no presente documento, quando a estereoquímica de qualquer átomo quiral particular não for especificada, então todos os estereoisômeros são contemplados e incluídos como compostos da invenção. Quando a estereoquímica for especificada por uma cunha a cheio ou linha tracejada representando uma configuração particular, então esse estereoisômero é desse modo especificado e definido.

[0057] Os compostos da presente invenção podem existir em formas não solvatadas bem como em formas solvatadas com solventes farmaceuticamente aceitáveis como água, etanol, e similares, e é pretendido que a invenção abranja formas solvatadas e não solvatadas.

[0058] A presente invenção também abrange compostos da presente invenção marcados isotopicamente que são idênticos aos apresentados no presente documento, excetuando o fato de um ou mais átomos serem substituídos por um átomo com uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa habitualmente presente na natureza (ou da/do mais abundante encontrada/encontrado na natureza). Todos os isótopos de qualquer átomo

10/118 ou elemento particular, como especificado no presente documento, estão contemplados no escopo dos compostos da invenção. Isótopos exemplificativos que podem ser incorporados em compostos da invenção incluem isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogênio, oxigênio, fósforo, enxofre, flúor, cloro e iodo, como ²H, ³H, ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C , ¹³N, ¹⁵O, ¹⁷O, ¹⁸O, ³²P, ³³P, ³⁵S, ¹⁸F, ³⁶CI, ¹²³l, e ¹²⁵l. Certos compostos da presente invenção marcados isotopicamente (p.ex., os marcados com ³H e ¹⁴C) são úteis em ensaios de compostos e de distribuição de substrato em tecidos. Isótopos tritiados (³H) e de carbono-14 (¹⁴C) são úteis devido à sua facilidade de preparação e capacidade de detecção. Além disso, a substituição com isótopos mais pesados, como deutério (isto é, ²H), pode conferir certas vantagens terapêuticas resultantes de maior estabilidade metabólica (p.ex., aumento do tempo de meia-vida in vivo ou redução dos requisitos de dosagem) e, assim, pode ser preferencial em algumas circunstâncias. Isótopos que emitem pósitrons, como ¹⁵O, ¹³N, ¹¹C e ¹⁸F, são úteis para estudos de tomografia por emissão de pósitrons (PET) para avaliar a ocupação de receptores do substrato. Os compostos da presente invenção marcados isotopicamente podem ser geralmente preparados seguindo procedimentos análogos aos revelados no Esquema 1 e/ou nos Exemplos aqui apresentados abaixo, substituindo um reagente não marcado isotopicamente por um reagente marcado isotopicamente, [0059] A menos que especificado em contrário, grupos alquila C-|._q (em que q é o limite superior do intervalo) definidos aqui podem ter cadeia linear ou, quando houver um número suficiente (isto é, um mínimo de dois ou três, consoante o apropriado) de átomos de carbono, ter cadeia ramificada, e/ou cíclica (formando desse modo um grupo cicloalquila C₃._q). Tais grupos cicloalquila podem ser monocíclicos ou bicíclicos, e podem adicionalmente ter uma configuração em ponte. Além disso, quando houver um número suficiente (isto é, um mínimo de qua

11/118 tro) de átomos de carbono, tais grupos também podem ser, em parte, cíclicos. Tais grupos alquila também podem ser saturados ou, quando houver um número suficiente (isto é, um mínimo de dois) de átomos de carbono, ser insaturados (formando, por exemplo, um grupo alcenila C₂-_q ou alcinila C₂._q).

[0060] Os grupos cicloalquila C₃._q (em que q é o limite superior do intervalo) que podem ser especificamente mencionados podem ser grupos alquila monocíclicos ou bicíclicos, grupos cicloalquila esses que podem adicionalmente ter uma configuração em ponte (formando, desse modo, por exemplo, sistemas de anéis fundidos, como três grupos cicloalquila fundidos). Tais grupos cicloalquila podem ser saturados ou insaturados, contendo uma ou mais ligações duplas (formando, por exemplo, um grupo cicloalcenila). Os substituintes podem ser ligados em qualquer ponto do grupo cicloalquila. Além disso, quando houver um número suficiente (isto é, um mínimo de quatro), tais grupos cicloalquila também podem ser, em parte, cíclicos.

[0061] O termo halogênio, quando usado aqui, preferencialmente inclui flúor, cloro, bromo e iodo.

[0062] Grupos heterocicloalquila que podem ser mencionados incluem grupos heterocicloalquila monocíclicos e bicíclicos não aromáticos em que pelo menos um (por exemplo, um até quatro) dos átomos do sistema em anel é diferente de carbono (isto é, um heteroátomo), e em que o número total de átomos no sistema em anel está situado entre 3 e 20 (p.ex., entre três e dez, p.ex., entre 3 e 8, como 5 até 8). Tais grupos heterocicloalquila também podem ter uma configuração em ponte. Adicionalmente, tais grupos heterocicloalquila podem ser saturados ou insaturados, contendo uma ou mais ligações duplas e/ou triplas, formando, por exemplo, um grupo heterocicloalcenila C₂._q (em que q é o limite superior do intervalo). Grupos heterocicloalquila C₂._q que podem ser mencionados incluem 7-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 6

12/118 azabiciclo[3.1.1 ] heptan i Ia, 6-azabiciclo[3.2.1 ]-octanila, 8-azabiciclo[3.2.1 ]octanila, aziridinila, azetidinila, di-hidropiranila, di-hidropiridila, dihidropirrolila (incluindo 2,5-di-hidropirrolila), dioxolanila (incluindo 1,3dioxolanila), dioxanila (incluindo 1,3-dioxanila e 1,4-dioxanila), ditianila (incluindo 1,4-ditianila), ditiolanila (incluindo 1,3-ditiolanila), imidazolidinila, imidazolinila, morfolinila, 7-oxabiciclo[2.2.1]heptanila, 6oxabiciclo-[3.2.1]octanila, oxetanila, oxiranila, piperazinila, piperidinila, piranila não aromática, pirazolidinila, pirrolidinonila, pirrolidinila, pirrolinila, quinuclídinila, sulfolanila, 3-sulfolenila, tetra-hidropiranila, tetrahidrofuranila, tetra-hidropiridila (como 1,2,3,4-tetra-hidropiridila e

1,2,3,6-tetra-hidropiridila), tietanila, tiiranila, tiolanila, tiomorfolinila, tritianila (incluindo 1,3,5-tritianila), tropanila e similares. Os substituintes em grupos heterocicloalquila podem, quando apropriado, estar localizados em qualquer átomo do sistema em anel, incluindo um heteroátomo. O ponto de ligação de grupos heterocicloalquila pode ser via qualquer átomo do sistema em anel, incluindo (quando apropriado) um heteroátomo (como um átomo de nitrogênio), ou um átomo em qualquer anel carbocíclico fundido que possa estar presente como parte do sistema em anel. Grupos heterocicloalquila também podem estar na forma N- ou S-oxidada. Pode ser afirmado que a heterocicloalquila mencionada aqui é especificamente monocíclica ou bicíclica.

[0063] Os grupos arila que podem ser mencionados incluem grupos C₆_₂₀, como arilas C₆.₁₂ (por exemplo, C₆.₁₀). Tais grupos podem ser monocíclicos, bicíclicos ou tricíclicos e ter entre 6 e 12 (p.ex., 6 e 10) átomos de carbono de anel, em que pelo menos um anel é aromático. Os grupos C₆.i₀ arila incluem fenila, naftila e similares, como 1,2,3,4-tetra-hidronaftila. O ponto de ligação de grupos arila pode ser via qualquer átomo do sistema em anel. Por exemplo, quando o grupo arila é policíclico, o ponto de ligação pode ser via um átomo incluindo um átomo de um anel não aromático. No entanto, quando os grupos

13/118 arila são policíclicos (p.ex., bicíclicos ou tricíclicos), são preferencialmente ligados ao restante da molécula via um anel aromático. Os grupos arila mais preferidos que podem ser mencionados nesse documento são os fenila.

[0064] A menos que especificado em contrário, o termo heteroarila, quando usado aqui, refere-se a um grupo aromático contendo um ou mais heteroátomo(s) (p.ex., um até quatro heteroátomos) preferencialmente selecionados de N, O e S. Os grupos heteroarila incluem aqueles que têm entre 5 e 20 membros (por exemplo, entre 5 e 10) e podem ser monocíclicos, bicíclicos ou tricíclicos, desde que pelo menos um dos anéis seja aromático (formando, desse modo, por exemplo, um grupo heteroaromático mono-, bi-, ou tricíclico). Quando o grupo heteroarila é policíclico, o ponto de ligação pode ser via qualquer átomo, incluindo um átomo de um anel não aromático. No entanto, quando os grupos heteroarila são policíclicos (por exemplo, bicíclicos ou tricíclicos), eles são preferencialmente ligados ao restante da molécula via um anel aromático. Os grupos heteroarila que podem ser mencionados incluem a 3,4-di-hidro-1 /-/-isoquinolinila, 1,3-di-hidroisoindolila, 1,3-di-hidroisoindolila (p.ex., 3,4-di-hidro-1 H-isoquinolin-2-ila, 1,3-di-hidroisoindol-2-ila, 1,3-di-hidroisoindol-2-ila; isto é, grupos heteroarila que são ligados via um anel não aromático), ou, preferencialmente, acridinila, benzimidazolila, benzodioxanila, benzodioxepinila, benzodioxolila (incluindo 1,3-benzodioxolila), benzofuranila, benzofurazanila, benzotiadiazolila (incluindo 2,1,3-benzotiadiazolila), benzotiazolila, benzoxadiazolila (incluindo 2,1,3-benzoxadiazolila), benzoxazinila (incluindo 3,4-di-hidro-2H-1,4-benzoxazinila), benzoxazolila, benzomorfolinila, benzosselenadiazolila (incluindo 2,1,3-benzosselenadiazolila), benzotienila, carbazolila, cromanila, cinolinila, furanila, imidazolila, imidazo[1,2-a]piridila, indazolila, indolinila, indolila, isobenzofuranila, isocromanila, isoindolinila, isoindolila, isoquinolinila, isotia

14/118 ziolila, isotiocromanila, isoxazolila, naftiridinila (incluindo 1,6-naftiridinila ou, preferencialmente, 1,5-naftiridinila e 1,8-naftiridinila), oxadiazolila (incluindo 1,2,3-oxadiazolila, 1,2,4-oxadÍazolila e 1,3,4-oxadiazolila), oxazolila, fenazinila, fenotiazinila, ftalazinila, pteridinila, purinila, piranila, pirazinila, pirazolila, piridazinila, piridila, pirimidinila, pirrolila, quinazolinila, quinolinila, quinolizinila, quinoxalinila, tetra-hidroisoquinolinila (incluindo 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolinila e 5,6,7,8-tetra-hidroisoquinolinila), tetra-hidroquinolinila (incluindo 1,2,3,4-tetra-hidroquinolinila e 5,6,7,8-tetra-hidroquinolinila), tetrazolila, tiadiazolila (incluindo 1,2,3tiadiazolila, 1,2,4-tiadiazolila e 1,3,4-tiadiazolila), tiazolila, tiocromanila, tiofenetila, tienila, triazolila (incluindo 1,2,3-triazolila, 1,2,4-triazolila e 1,3,4-triazolila) e similares. Os substituintes nos grupos heteroarila podem, quando apropriado, estar localizados em qualquer átomo do sistema em anel, incluindo um heteroátomo. O ponto de ligação de grupos heteroarila pode ser via qualquer átomo do sistema em anel, incluindo (quando apropriado) um heteroátomo (como um átomo de nitrogênio), ou um átomo em qualquer anel carbocíclico fundido que possa estar presente como parte do sistema em anel. Os grupos heteroarila também podem estar na forma N- ou S-oxidada. Pode ser afirmado que os grupos heteroarila mencionados aqui são especificamente monocíclicos ou bicíclicos. Quando os grupos heteroarila são policíclicos, em que está presente um anel não aromático, então esse anel não aromático pode estar substituído com um ou mais grupos =0. Os grupos heteroarila mais preferidos que podem ser mencionados nesse documento são grupos aromáticos de 5 ou 6 membros contendo 1, 2 ou 3 heteroátomos (p.e. preferencialmente selecionados de entre nitrogênio, oxigênio e enxofre).

[0065] Pode ser especificamente afirmado que o grupo heteroarila é monocíclico ou bicíclico. No caso em que é especificado que o grupo heteroarila é bicíclico, então ele pode consistir em um anel monocíclico

15/118 com cinco, seis ou sete membros (p.ex., um anel heteroarila monocíclico) fundido a outro anel de cinco, seis ou sete membros (p.ex., um anel arila ou heteroarila monocíclico).

[0066] Os heteroátomos que podem ser mencionados incluem fósforo, silício, boro e, preferencialmente, oxigênio, nitrogênio e enxofre.

[0067] Para evitar dúvidas, quando é afirmado no presente documento que um grupo (p.ex., um grupo alquila Cfog) pode ser substituído com um ou mais substituintes (p.ex., selecionados de Y¹), então esses substituintes (p.ex., definidos por Y¹) são independentes uns dos outros. Isto é, tais grupos podem estar substituídos com o mesmo substituinte (p.ex., definido por Y¹) ou com substituintes diferentes (definidos por Y¹).

[0068] Todas as características individuais (p.ex., características preferenciais) mencionadas no presente documento podem ser tomadas isoladamente ou em combinação com qualquer outra característica (incluindo uma característica preferencial) mencionada no presente documento (assim, características preferenciais podem ser tomadas em conjunção com outras características preferenciais, ou independentemente delas).

[0069] O perito na técnica apreciará que compostos da invenção que são o assunto dessa invenção incluem aqueles que são estáveis. Isso é, os compostos da invenção incluem aqueles que são suficientemente robustos para sobreviver ao isolamento, p.ex., de uma mistura reacional em um grau útil de pureza.

[0070] O termo Fabl é reconhecido na técnica e refere-se à enzima bacteriana que se acredita funcionar como redutase enoilproteína de transporte de acila (ACP) na etapa final das quatro reações envolvidas em cada ciclo da biossíntese bacteriana de ácidos graxos. Acredita-se que essa enzima esteja amplamente distribuída em bactérias.

16/118 [0071] Para evitar dúvidas, os seguintes compostos de fórmula (I) (dadas as definições (Ia), (Ib) e (lc)) encontram-se dentro do escopo da invenção:

[0072] em que os inteiros são tais como definidos anteriormente nesse documento. Para evitar dúvidas, os substituintes R³ e R⁴ são opcionais (uma vez que são apresentados como flutuantes e que cada um pode representar um hidrogênio). Quando os grupos R³ e R⁴ representam um substituinte diferente do hidrogênio, então cada um pode ser colocado em qualquer posição do anel contendo Z^x, incluindo no próprio Z^x, embora preferencialmente o grupo R³/R⁴ (por exemplo R⁴) esteja ligado à dupla ligação necessária.

[0073] Compostos preferenciais da invenção incluem aqueles em que:

[0074] quando R¹ ou R² representa um halogênio, então eles são preferencialmente F ou Cl;

[0075] mais preferencialmente, R1 representa um hidrogênio ou uma alquila C1-4;

[0076] mais preferencialmente, R2 representa um hidrogênio ou uma alquila C1-4;

[0077] Os compostos da invenção que podem ser mencionados incluem aqueles em que, quando R^x representa o anel (i), (ii) ou (iii), então esses anéis representam:

(i)

17/118 (ii)

(iii)

[0078] isto é, todos são anéis em que o monociclo ou o primeiro anel (aromático) do biciclo ou triciclo (que está ligado ao restante do composto de fórmula I) contém dois átomos de nitrogênio (em uma relação 1,4) e em que o restante dos inteiros são tais como definidos nesse documento. No entanto, em uma modalidade da invenção (por exemplo, uma modalidade preferida), os compostos da invenção que podem ser mencionados incluem aqueles em que:

[0079] quando R^x representa o anel (i), (II) ou (iii), então esses anéis representam

(ii)

(iü)

18/118 [0080] em que (em cada caso), os inteiros são tais como definidos nesse documento. Assim, prefere-se que os anéis sejam aqueles em que X^x representa C.

[0081] Compostos preferenciais da invenção incluem aqueles em que:

[0082] cada Z^x representa independentemente -[C(R^z8)(R^z9)]_n-, em que n é 1 ou 2, mas prefere-se que não existam dois grupos Z^x em que n é 2 (isto é, prefere-se que o anel contendo Z^x tenha 6 ou 7 membros);

[0083] cada Z^x representa -C(R^z8)(R^z9)- (formando assim um anel de 6 membros) ou uma unidade Z^x representa -C(R^z8)(R^z9)-C(R^z8)(R^z9)e a outra representa -C(R^zB)(R^z9)- (formando assim um anel de 7 membros);

[0084] cada Z^x representa -CH₂- (formando assim um anel de 6 membros) ou um Z^x representa [0085] -CH₂CH₂- e o outro representa -CH₂- (formando assim um anel de 7 membros);

[0086] R³ representa um hidrogênio, halogênio, -OCH₃, -OCF₃ ou uma alquila Cv₂ (mais preferencialmente R³ representa um hidrogênio, isto é, não está presente);

[0087] cada R¹⁰ representa uma alquila C).₆ (por exemplo uma alquila Cvs), que pode ser substituída com um ou mais átomos de halogênio, mas que é preferencialmente não substituída;

[0088] existem 0 ou 1 (preferencialmente 0) substituintes R³ presentes no anel contendo Z^x (isto é, R³ representa preferencialmente hidrogênio);

[0089] há 1 ou 2 (preferencialmente 1) substituinte(s) R⁴ presente(s) no anel contendo Z^x, por exemplo ligado(s) a qualquer uma das extremidades da ligação dupla necessária.

[0090] Assim, os anéis preferidos contendo Z^x são:

19/118

[0092] A presença de dupla ligação no anel contendo Z^x pode ajudar a orientar o grupo R⁴ (se presente) de tal modo que o composto global (por exemplo tendo em conta a orientação do substituinte R⁴) apresente propriedades melhores/melhoradas de ligação à enzima bacteriana Fabl. Assim, esses compostos da invenção podem ser vantajosos no sentido de que a presença da dupla ligação pode conduzir a ligação melhorada à/inibição da enzima Fabl. Consequentemente, os compostos da invenção podem ser compostos vantajosos (por exemplo comparativamente a compostos conhecidos) em virtude dessas propriedades que podem conduzir consequentemente a melhor potência, eficácia, etc.

[0093] Os compostos preferenciais da invenção incluem assim aqueles em que:

[0094] quando R⁴ representa um substituinte ligado a qualquer das extremidades da dupla ligação necessária, então R⁴ representa preferencialmente um outro substituinte que não hidrogênio (isto é, um halogênio ou -T¹-R²⁰), por exemplo, nesse contexto R⁴ representa preferencialmente -T¹-R⁴;

[0095] é preferível que exista pelo menos um substituinte R⁴ presente que represente -T¹-R⁴ (que está ligado a qualquer das extremidades da dupla ligação necessária) em que R⁴ representa -T¹-R⁴. [0096] Os compostos preferidos da invenção incluem aqueles em que existe um substituinte R⁴ presente ligado a qualquer das extremi

20/118 dades da dupla ligação, nesse contexto, R⁴ representa [0097] -T¹-R²⁰. Nesse contexto, é preferível que:

[0098] cada Y¹ represente independentemente um halogênio ou um -O-alquilaC^g (opcionalmente substituído com flúor);

[0099] cada Y² represente independentemente um halogênio, um O-alquilaCvs ou uma alquila (em que os dois últimos grupos são opcionalmente substituídos com flúor);

[00100] cada R³⁰ represente independentemente um hidrogênio ou uma alquila (por exemplo C^);

[00101] quando Y¹ representa uma arila ou uma heteroarila, então esses grupos representam preferencialmente os anteriormente definidos nesse documento (por exemplo fenila ou um grupo aromático de 5 ou 6 membros contendo 1,2 ou 3 heteroátomos), arila ou heteroarila essas que são opcionalmente substituídas com um ou mais substituintes selecionados de entre halogênios, -OCH₃ e CH₃ (mas que são preferencialmente não substituídas);

[00102] T¹ representa -O-, -C(O)- ou, preferencialmente, uma ligação direta;

[00103] R²⁰ representa mais preferencialmente uma arila ou uma heteroarila, ambas as quais são opcionalmente substituídas por um ou mais substituintes selecionados de Y²;

[00104] quando R²⁰ representa uma arila, ele representa preferencialmente uma fenila opcionalmente substituída (por exemplo não substituída ou substituída, em que os substituintes opcionais são selecionados de entre halogênios (por exemplo flúor), -O-alquilaC^ (por exemplo -OCH₃));

[00105] quando R²⁰ representa uma heteroarila, ele representa preferencialmente um grupo aromático monocíclico de 5 ou 6 membros opcionalmente substituído contendo 1, 2 ou 3 (por exemplo um) heteroátomo(s) (p.e. preferencialmente selecionado(s) de entre nitrogênio,

21/118 oxigênio e enxofre).

[00106] Os grupos R²⁰ preferidos incluem o grupo fenila e grupos heteroarila monocíclicos de 5 ou 6 membros contendo de um a quatro heteroátomos (e contendo preferencialmente um ou dois heteroátomos), formando assim, por exemplo, grupos tienila, piridila, tiazolila, oxazolila, isoxazolila, pirazolila ou similares. Os grupos R²⁰ particularmente preferidos incluem grupos fenila, tienila, tiazolila, piridila e pirazolila, todos eles opcionalmente substituídos tal como definido nesse documento. Os grupos R²⁰ especialmente preferidos inciuem grupos fenila (por exemplo fenila não substituída, 2-metóxi-5-fluoro-fenila) e tienila (por exemplo 2-tienila).

[00107] R⁴ pode representar o seguinte:

[00108] Compostos adicionalmente preferidos da invenção incluem aqueles em que, para os compostos da invenção em que R^x representa a opção (i):

[00109] não estão presentes quaisquer grupos R^y1 (ou está presente um grupo R^y1 que representa hidrogênio) ou está presente um substituinte R^y1 que representa -CN, um -O-alquilaCi_₆ (p.ex.

[00110] um -O-alquilaC^ tal como -OCH₃) ou uma alquila C_v6 (por exemplo uma alquila C^s tal como metila);

[00111] tanto R^y2 como R^y3 representam -Q¹-R⁵ ou, mais preferencialmente, um dos grupos R^y2 e R^y3 representa hidrogênio e o outro representa -Q¹-R⁵;

[00112] Q¹ representa uma ligação direta ou preferencialmente C(O)-;

[00113] R⁵ representa um hidrogênio, uma alquila (opcionalmente substituída com um ou dois (por exemplo um) substituinte(s) selecionado(s) de entre =0 e Q²), um grupo heterocicloalquila de 5 ou

22/118 membros (contendo um ou dois heteroátomos; opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados de entre =O e Q²) ou uma arila ou heteroarila (cujos últimos dois grupos são opcionalmente substituídos com um ou dois (por exemplo um) substituinte(s) selecionado^) de Q³);

[00114] quando R⁵ representa uma alquila C-|.6l ele é preferencialmente não substituído (por exemplo -CH3, isopropila, terc-butila ou isobutila) ou substituído por um ou mais substituintes Q² (formando assim por exemplo -CF3) ou é um grupo cicloalquila opcionalmente ramificado (por exemplo uma ciclopropila substituída com uma metila, ou, uma ciclopentila, ciclo-hexila não substituídas);

[00115] quando R⁵ representa opcionalmente uma heterocicloalquila substituída, então ele é preferencialmente um grupo heterocicloalquila de 5 ou 6 membros opcionalmente substituído contendo um ou dois (por exemplo um) heteroátomo(s) (preferencialmente selecionado(s) de entre oxigênio, nitrogênio e enxofre), formando assim por exemplo um grupo tetra-hidrofuranila (por exemplo um grupo 2- ou 3tetra-hidrofuranila);

[00116] quando R⁵ representa opcionalmente uma arila substituída, então ele é preferencialmente uma fenila não substituída;

[00117] quando R⁵ representa opcionalmente uma heteroarila substituída,então ele é preferencialmente um grupo aromático de 5 ou 6 membros contendo 1, 2 ou 3 (por exemplo um) heteroátomo(s) (preferencialmente selecionado de entre oxigênio, nitrogênio e enxofre), formando assim por exemplo uma piridila (tal como 3-piridila, 4-pirídila ou 2-piridila), furanila (por exemplo 3-furanila), pirazolila (por exemplo 4pirazolila, 5-pirazolila), imidazolila (por exemplo 4-imidazolila), oxazolila (por exemplo 3-oxazolila) ou pirazinila (por exemplo 2-pirazinila);

[00118] Q² representa um halogênio (por exemplo flúor), -OalquilaCi_₃ ou uma arila opcionalmente substituída ou uma heteroarila

23/118 opcionalmente substituída (por exemplo uma piridila, tal como a 4piridila);

[00119] Q³ representa um halogênio (por exemplo cloro, flúor, bromo ou iodo), uma alquila (por exemplo Ci_₃) (por exemplo metila) ou uma -O-alquilaCve (por exemplo uma -O-alquilaCvs tal como OCH₃).

[00120] Em um aspeto particularmente preferido da invenção, um dos grupos R^y2 e R^y3 representa um hidrogênio e o outro representa Q¹-R⁵, em que:

[00121] R⁵ pode representar um hidrogênio, uma alquila tal como definido nesse documento. Nesse aspeto da invenção é particularmente preferível que o grupo alquila C-,.6 seja substituído com um grupo Q², em que Q² representa uma arila ou heteroarila opcionalmente substituída, tal como definidas nesse documento;

[00122] R⁵ representa uma arila ou heteroarila opcionalmente substituída, tal como definida nesse documento.

[00123] A unidade -Q¹-R⁵ pode representar um hidrogênio (e assim -N(R^y2(R^y3) pode representar -NH₂). No entanto, as unidades -Q¹- preferidas incluem -C(O)-, e os grupos R⁵ preferidos [00124] incluem hidrogênio, -CH₃, -CF₃, -isopropila, terc-butila, isobutila (-CH₂-C(H)(CH₃)₂), ciclopentila, -(ciclopropil)(metila), ciclohexila e os seguintes grupos:

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[00125] em que o substituinte Q² ou Q³ flutuante representa um ou mais substituintes no anel, tal como definido nesse documento por Q² ou Q³ (tal como apropriado).

[00126] Em particular, os grupos -Q¹-R⁵ preferidos são aqueles que contêm um anel aromático.

[00127] Compostos adicionalmente preferidos da invenção incluem aqueles em que, para os compostos da invenção em que R^x representa a opção (ii):

[00128] Z¹ representa -X³-S-X^3a- ou, mais preferencialmente, -X¹-OX^1a- ou -X²-N(R^z3)-X^2a-;

[00129] X¹ representa -C(R^z4)(R^z5)- ou uma ligação direta;

[00130] X^1a representa uma ligação direta ou -C(R^z1)(R^z2)[00131] X² representa uma ligação direta, -C(O) ou -C(R^z4)(R^z5)[00132] X^2a representa -C(R^z1)(R^z2)- ou -C(O)-C(R^z1)(R^z2)-;

[00133] Z¹ representa:

[00134] -X¹-O-X^1a-, em que um X¹ representa -C(R^z4)(R^z5)- e X^1a representa uma ligação direta, ou, X¹ representa uma ligação direta e X^1a representa -C(R^z1 )(R^z2)-;

[00135] -X¹-O-X^1a- ou -X²-N(R^z3)-X^2a-, em que cada X¹ e X² repre senta

25/118 [00136] -C(R^z4)(R^z5)- e cada X^1a e X^2a representa -C(R^z1)(R^z2)-;

[00137] (iii) -X²-N(R^z3)-X^2a-, em que X² representa-C(O)-e X^2a representa [00138] -C(R^z1)(R^z2)-; ou [00139] (iii) -X²-N(R^z3)-X^2a-, em que X² representa uma ligação direta e X^2a representa [00140] -C(O)-C(R^z1)(R^z2)-;

[00141] R^z3 representa um hidrogênio, uma alquila C1.4 (por exemplo metila), -SíO^-alquilaC^ (por exemplo -S(O)₂CH₃), [00142] -CÍOj-alquilaC^ (por exemplo -C(O)CH₃);

[00143] cada R^z1, R^z2, R^z4 e R^z5 representa independentemente um hidrogênio, uma alquila (por exemplo metila ou isopropila) ou heterocicloalquila (por exemplo um grupo heterocicloalquila de 5 ou 6 membros contendo um ou dois (por exemplo um) heteroátomo(s) (preferencialmente selecionado(s) de entre nitrogênio, oxigênio e enxofre), e que está preferencialmente ligado por meio de um átomo de carbono, por exemplo uma 4-piperidinila não substituída);

[00144] Z¹ representa preferencialmente -CH₂-O-, -O-CH₂-, -OC(CH₃)₂-, -CH₂-N(H)-CH₂, -CH₂-O-CH₂-, -CH₂-N(CH₃)-CH₂, -OC(H)(isopropil)-, -C(O)-N(H)-CH₂, -N(H)-C(O)-C(CH₃)₂- ou -O-C(H)(4piperidinila).

[00145] Quando R^x representa a opção (ii), os grupos preferidos são

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em que os biciclos podem ser opcionalmente substituídos tal como de finido nesse documento. Em algumas estruturas, são apresentados substituintes opcionais (por exemplo metila, isopropila, piperidinila), e assim os grupos R^x apresentados acima são preferencialmente dessa estrutura exata (isto é, não substituídos se representados como tal ou substituídos com os substituintes específicos tal como indicado), [00146] Os grupos particularmente preferidos quando R^x representa a opção (ii) incluem:

[00147] Os compostos adicionalmente preferidos da invenção incluem aqueles em que, para os compostos da invenção em que R^x representa a opção (iii):

[00148] Z² representa -C(R^z6)(R^z7)- ou -C(O)-;

[00149] Z³ representa uma ligação direta ou -CH₂-;

[00150] o anel contendo Z² e Z³ é um em que:

[00151] Z² representa -C(R^z6)(R^z7)- e Z³ representa uma ligação direta;

27/118 [00152] Z² representa -C(R^z6)(R^z7)- e Z³ representa -CH₂-;

[00153] Z² representa -C(O)- e Z³ representa uma ligação direta; [00154] R^z6 e R^z7 representam independentemente hidrogênios;

[00155] R^ze representa um hidrogênio (isto é, o anel A é adicionalmente não substituído) ou Ci.₆ (por exemplo alquila C-1.4) (por exemplo etila) opcionalmente substituída com =0 e um -O-alquilaC^, formando assim por exemplo um [00156] grupo -C(O)-CH₃, um grupo -C(O)-OCH₂CH₃ ou um grupo -C(O)O-terc-butila;

[00157] o anel A é um que representa preferencialmente:

[00158] um grupo heterocicloalquila de 5 ou 6 membros contendo opcionalmente mais um heteroátomo (por exemplo nitrogênio, oxigênio ou enxofre), formando assim por exemplo uma morfolinila, tiomorfolinila, piperidinila ou piperazinila;

[00159] um anel heteroarila de 5 ou 6 membros contendo opcionalmente um ou dois heteroátomos adicionais (por exemplo selecionado(s) de entre nitrogênio, oxigênio e enxofre), formando assim por exemplo uma imidazolila, triazolila (por exemplo 1,2,4-triazolila) ou pirazolila.

[00160] Quando R^x representa a opção (iii), os grupos preferidos são

28/118 [00161] em que os triciclos podem ser opcionalmente substituídos tal como definido no presente documento. No entanto, preferencialmente os grupos R^x são exatamente como os representados acima, isto é, adicionalmente não substituídos ou com substituintes específicos tal como representado (por exemplo com R^z8).

[00162] Os grupos particularmente preferidos quando R^x representa a opção (ii) incluem:

[00163] [00164]

Os compostos de fórmula (I) podem ser preparados por: reação de um composto de fórmula (II),

[00165] em que Z^x, R³ e R⁴ são como definidos anteriormente no presente documento, com um composto de fórmula (III), O R¹

HO^X^Y^R^X (III)

R² [00166] em que R¹, R² e R^x são tais como definidos acima no presente documento, por exemplo sob condições de reações de acoplamento, por exemplo na presença de um reagente de acoplamento apropriado (por exemplo 1,1 ’-carbonildiimidazol, Λ/,Λ/’-diciclo-hexilcarbodiimida, 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (ou o cloridrato da mesma), carbonato de Λ/,Λ/’-disuccinimidila, hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)fosfónio, hexafluorofosfato de 2(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilurónio (isto é, hexafluorofosfato

29/118 de 0-1 Η-όβηζοίη3ζοΙ-1-ίΙ)-Λ/,Λ/,Λ/' Λ/'-tetrametilurónio), hexafluorofosfato de benzotriazol-1 -iloxitris-pirrolidinofosfónio, hexafluorofosfato de bromo-tris-pirrolidinofosfónio, tetrafluorocarbonato de 2-(1/-/-benzotriazol-1 -il)-1,1,3,3-tetrametilurónio, 1-ciclo-hexilcarbodiimido-3-propiloximetilpoliestireno, hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)Ν,Ν,Ν', Λ/'-tetrametilurónio, terafluoroborato de O-benzotriazol-1-ilΝ,Ν,Ν’,Λ/’-tetrametilurônio), opcionalmente na presença de uma base apropriada (por exemplo hidreto de sódio, bicarbonato de sódio, carbonato de potássio, piridina, trietilamina, dimetilaminopiridina, diisopropilamina, hidróxido de sódio, terc-butóxido de potássio e/ou diisopropilamida de lítio (ou variantes da mesma) e um solvente apropriado (por exemplo tetra-hidrofurano, piridina, tolueno, diclorometano, clorofórmio, acetonitrilo, dimetilformamida, trifluorometilbenzeno, dioxano ou trietilamina). Tais reações podem ser efetuadas na presença de um aditivo adicional tal como o hidrato de 1-hidroxibenzotriazol. Alternativamente, um grupo ácido carboxílico pode ser convertido sob condições-padrão no correspondente cloreto de acila (por exemplo na presença de SOCh ou cloreto de oxalila), cloreto de acila esse que é depois reagido com um composto de fórmula (II), por exemplo sob condições similares às mencionadas acima. Alternativamente ainda, quando um grupo éster de um ácido carboxílico é convertido em uma amida de um ácido carboxílico, a reação pode ser efetuada na presença de um reagente apropriado tal como 0 trimetilalumínio (e do composto relevante de fórmula (II));

[00167] (ii) reação de um composto de fórmula (IV),

R³ [00168] em que Z^x, R³, R⁴, R¹ e R² são como definidos anteriormen

30/118 te no presente documento, com um composto de fórmula (V),

X^a1 -R^x (V) [00169] em que X^a1 representa um grupo de saída apropriado, tal como um grupo halogênio apropriado (por exemplo cloro, iodo e, especialmente, bromo), sob condições reacionais adequadas, por exemplo sob condições de reações de acoplamento com um catalisador metálico (por exemplo condições de reações de acoplamento com um metal precioso, em que o metal precioso é por exemplo à base de paládio), em particular sob condições de reação de Heck usando preferencialmente um catalisador à base de paládio tal como acetato de paládio, tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0), dicloreto de bis(trifenilfosfina) paládio (II), dicloreto de [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) ou similares (preferencialmente, o catalisador é acetato de paládio), por exemplo opcionalmente na presença de um solvente apropriado (por exemplo acetonitrilo ou similares), base (por exemplo uma base de amina tal como a Λ/,/V-di-isopropilamina ou similares), e um ligando (por exemplo trifenilfosfina, tri-O-tolilfosfina ou similares). A reação pode ser efetuada em um tubo selado e/ou em um micro-ondas;

[00170] (iii) modificação de compostos existentes de fórmula (I), por exemplo por conversões de/em grupos funcionais padrão (por exemplo conversão de uma unidade -N(H)- em uma unidade -N(-C(O)alquil)- por acilação, etc).

[00171] Os compostos de fórmula (II) em que existe um substituinte aromático R⁴ ligado a qualquer das extremidades da dupla ligação necessária, podem ser preparados por reação de um composto de fórmula (VI),

A

31/118 [00172] ou de um derivado protegido do mesmo (por exemplo um derivado protegido com um grupo amino, por exemplo um derivado -NBoc), em que X^a2 está ligado a qualquer das extremidades da dupla ligação necessária e representa um grupo de saída apropriado tal como um grupo iodo, bromo, cloro ou sulfonato (por exemplo OS(O)₂CF₃, um nonaflato ou similares), e Z^x, R³ e R⁴ são tais como definidos anteriormente no presente documento, com um composto de fórmula (VII),

Ar-X^a3 (VII) [00173] em que Ar representa um grupo aromático (arila ou heteroarila) que R⁴ pode representar, e X^a3 representa um grupo apropriado, tal como -B(OH)21 -B(OR^WX)2 ou -Sn(R^wx)3, em que cada R^wx representa independentemente um grupo alquila C-|.6, ou, no caso de -B(OR^WX)2, os respectivos grupos R^wx podem estar ligados entre si para formar um grupo cíclico de 4 a 6 membros (tal como um grupo 4,4,5,5-tetrametil1,3,2-dioxaborolan-2-ila), formando assim por exemplo um grupo éster boronato pinacolato. A reação pode ser efetuada na presença de um sistema catalítico adequado, por exemplo um metal (ou um sal ou complexo do mesmo) tal como Pd, Cul, Pd/C, PdCI21 Pd(OAc)₂, Pd(Ph₃P)₂Cl2, Pd(Ph₃P)₄ (isto é, tetraquistrifenilfosfina)paládio, Pd₂(dba)₃ e/ou NiCI₂ (os catalisadores preferidos incluem o paládio) e opcionalmente um ligando tal como PdCI₂(dppf).DCM, t-Bu₃P, (CeHu^P, Ph₃P, AsPh₃, P(o-Tol)₃, 1,2-bis(difenilfosfino)etano, 2,2'bis(di-terc-butilfosfino)-1,1 '-bifenila, 2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1 '-bi-naftila, 1,1 -bis(difenil-fosfino-ferroceno), 1,3-bis(difenilfosfino)propano, xantfos, ou uma mistura dos mesmos, conjuntamente com uma base adequada tal como, Na₂CO₃, K₃PO₄, Cs₂CO₃, NaOH, KOH, K₂CO₃, CsF, Et₃N, (/-Pr)₂NEt, t-BuONa ou t-BuOK (ou misturas das mesma; as bases preferidas incluem Na₂CO₃ e K₂CO₃) em um solvente apropriado tal como o dioxano, tolueno, etanol, dimetilformamida, dimetoxietano,

32/118 etilenoglicoldimetiléter, água, dimetilsulfóxido, acetonitrila, dimetilacetamida, /V-metilpirrolidinona, tetra-hidrofurano ou misturas dos mesmos (os solventes preferidos incluem a dimetilformamida e o dimetoxietano). A reação pode ser efetuada por exemplo, à temperatura ambiente ou a temperatura superior (por exemplo a uma temperatura elevada tal como a cerca da temperatura do refluxo do sistema de solventes). A reação pode ser efetuada a temperatura elevada em um reator fechado ou em um micro-ondas.

[00174] O composto de fórmula (II) (por exemplo em que existe um grupo aromático R⁴ ligado a qualquer das extremidades da dupla ligação necessária) pode também ser preparado por eliminação de um composto de fórmula (VIIA),

(VI IA) [00175] em que as linhas a tracejado indicam que o substituinte OH está ligado a qualquer das duas posições no grupo heterocicloalquila contendo nitrogênio, e Z^x, R³ e R⁴ são tais como definidos anteriormente no presente documento (e preferencialmente, existe um R⁴ aromático ligado ao mesmo átomo de carbono que o grupo OH), por exemplo sob condições-padrão, por exemplo sob condições de reações de eliminação de base (por exemplo usando K₂CO₃ ou similares como base).

[00176] Os compostos de fórmula (III) podem ser preparados mediante reação de um composto de fórmula (VIII),

O R¹

ΗΟ'^γ^Η (VIII)

R²

33/118 [00177] ou de um derivado do mesmo (por exemplo um éster do mesmo tal como -C(O)O-terc-butila), em que R¹ e R² são tais como definidos anteriormente no presente documento, com um composto de fórmula (V) tal como definido anteriormente no presente documento, por exemplo sob condições reacionais tais como descritas anteriormente no presente documento (preparação de compostos de fórmula (I), etapa processual (ii)), por exemplo DIPEA, Pd(OAc)₂, tri-Otolilfosfina.

[00178] Os compostos de fórmula (IV) podem ser preparados mediante reação de um composto de fórmula (II) tal como definido anteriormente no presente documento, com um composto de fórmula (iX),

O R¹

X^a4x>y^H (IX)

R² [00179] em que X^a4 representa um grupo de saída adequado, por exemplo um sulfonato, cloro, iodo ou bromo (especialmente cloro), sob condições reacionais padrão, tal como na presença de uma base apropriada (por exemplo uma base de amina tal como a trietilamina) e um solvente adequado (por exemplo diclorometano).

[00180] Os compostos de fórmula V em que R^x representa o anel (i) e X^x representa N podem ser preparados por reação de um composto de fórmula (IXA),

R^y1

R^y3 [00181] em que R^y2 e R^y3 são tais como definidos anteriormente no presente documento (por exemplo ambos representam hidrogênio), e R^y1 é tal como definido anteriormente no presente documento (por

34/118 exemplo há um substituinte R^y1 α em relação ao grupo -N(R^y2)(R^y3), por exemplo em que R^y1 representa -COO-etila), por halogenação, por exemplo por reação na presença de uma fonte de haleto apropriada, por exemplo uma fonte de íons brometo inclui a A/-bromossuccinimida (NBS) e bromo, uma fonte de íons iodeto inclui iodo, di-iodoetano, diiodotetracloroetano ou, preferencialmente, /V-iodosuccinimida, e uma fonte de íons cloreto inclui /V-clorosuccinimida, cloro e monocloreto de iodo, por exemplo na presença de um solvente adequado tal como acetonitrila (por exemplo NBS na presença de um solvente apropriado tal como acetonitrila).

[00182] Os compostos de fórmula (V) em que R^x representa a opção (ii), isto é, o biciclo tal como definido anteriormente no presente documento, podem ser preparados por ciclização intramolecular de um composto de fórmula (X),

(X) [00183] em que Alq representa um grupo alquila (por exemplo uma alquila tal como a etila), X representa -O- ou -N(R^z3)-, e os restantes inteiros (X^x, X^a1, R^z1, R^z2, R^z3, R^z4 e R^z5 são tais como definidos anteriormente no presente documento), por exemplo sob condições reacionais por exemplo na presença de uma base apropriada (por exemplo NaH) e um solvente adequado (por exemplo DMF).

[00184] Os compostos de fórmula (V) em que R^x representa a opção (ii), isto é, um biciclo, em que X¹ e X² representam uma ligação direta, podem ser preparados por reação de um composto de fórmula (XI),

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(XI) [00185] em que os inteiros são tais como definidos anteriormente no presente documento, com um composto de fórmula (XII),

O [00186] em que X^a5 representa um grupo de saída apropriado tal como o cloro, iodo ou bromo (especialmente bromo) e os outros inteiros (R^z1, R^z2 e Alq) são tais como definidos anteriormente no presente documento, por exemplo sob condições reacionais por exemplo na presença de uma base adequada (por exemplo NaH) e um solvente adequado (por exemplo DMF). Os compostos correspondentes de fórmula (V) em que X^a1 não está presente (isto é, representa hidrogênio) podem também ser preparados conformemente (a partir dos correspondentes compostos de formula (XI) em que X^a1 não está presente, isto é, representa hidrogênio).

[00187] Os compostos de fórmula (V) em que X^a1 representa um halogênio (por exemplo bromo) podem ser preparados por reação de um composto correspondente para dar um composto de fórmula (V), mas em que X^a1 representa hidrogênio, sob condições reacionais apropriadas, por exemplo aquelas que contêm uma fonte de íons de haleto (por exemplo brometo), por exemplo um eletrófilo que proporciona uma fonte de íons iodeto inclui iodo, diiodoetano, di-iodotetracloroetano ou, preferencialmente, /V-iodosuccinimida, uma fonte de íons brometo inclui /V-bromossuccinimida e bromo, e uma fonte de íons cloreto inclui /V-clorossuccinimida, cloro e monocloreto de iodo, por exemplo na presença de um solvente apropriado.

[00188] Os compostos de fórmula (V) em que R^x corresponde à op36/118 ção (iii), isto é, um triciclo (p.ex em que Z³ é uma ligação direta), podem ser preparados por ciclização intramolecular de um composto de fórmula (XII),

(XII) [00189] em que os inteiros são tais como definidos anteriormente no presente documento, por exemplo sob condições reacionais por exemplo na presença de uma base apropriada (por exemplo NaH) e um solvente adequado (por exemplo DMF).

[00190] Os compostos de fórmula (VI), em que X^a2 representa -OS(O)₂CF₃ podem ser preparados por reação de um composto de fórmula (XIII),

(XIII) [00191] ou de um derivado protegido do mesmo, por exemplo por reação na presença de uma base adequada (por exemplo uma base de amina, tal como a LDA, ou similares), que pode ser preparada em primeiro lugar e o composto de fórmula (XIII) pode ser adicionado à mesma, por exemplo na presença de um solvente inerte (por exemplo um solvente polar aprótico seco, tal como THF seco) a baixa temperatura (por exemplo a cerca de -78°C), seguido da adição de /V-feniltrifluorometanossulfonimida ou similares.

[00192] Os compostos de fórmula (X) podem ser preparados mediante reação de um composto de fórmula (XIV),

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(XIV) [00193] em que X^a5 representa um grupo de saída adequado, tal como bromo, cloro ou iodo (especialmente bromo), e os outros inteiros são tais como definidos anteriormente no presente documento, com um composto de fórmula (XV),

O [00194] em que os inteiros são tais como definidos anteriormente no presente documento, sob condições por exemplo de presença de uma base apropriada (por exemplo uma base de amina, tal como a trietilamina) e um solvente apropriado (por exemplo DMF), reação essa que pode ser efetuada a temperatura elevada, por exemplo em um tubo selado e/ou em um micro-ondas.

[00195] Os compostos de fórmula (XII) podem ser preparados por exemplo sob condições semelhantes às descritas a respeito da preparação de compostos de fórmula (X) (isto é, reação de um composto de fórmula (XIV) com um composto de fórmula (XV)), mas em que a [00196] unidade -X-H (por exemplo uma unidade amino) do composto de fórmula (XV) corresponde à unidade -N(H)- do anel A para a preparação de compostos de fórmula (XII).

[00197] Os compostos de fórmula (XIII) podem ser preparados por redução da ligação dupla da enona correspondente.

[00198] Certos compostos intermediários podem estar comercialmente disponíveis, podem ser conhecidos na literatura, ou podem ser obtidos quer por analogia com os processos descritos no presente documento, quer por procedimentos sintéticos convencionais, de acordo

38/118 com técnicas-padrão, a partir de materiais de partida disponíveis, usando reagentes e condições reacionais apropriados.

[00199] Certos substituintes em compostos finais da invenção ou intermediários relevantes podem ser modificados uma ou mais vezes, durante ou após os processos descritos acima por meio de métodos que são bem conhecidos dos peritos na técnica. Exemplos de tais métodos incluem substituições, reduções, oxidações, alquilações, acilações, hidrólises, esterificações, eterificações, halogenações ou nitrações.

[00200] Os compostos da invenção podem ser isolados a partir das suas misturas reacionais usando técnicas convencionais (por exemplo recristalizações, quando possível sob condições-padrão).

[00201] Será apreciado pelos peritos na técnica que, nos processos descritos acima e doravante, os grupos funcionais de compostos intermediários possam necessitar de ser protegidos por grupos protetores.

[00202] A necessidade de tal proteção variará dependendo da natureza da funcionalidade remota e das condições dos métodos de preparação (e a necessidade pode ser prontamente determinada por um perito na técnica). Grupos amino protetores apropriados incluem grupos acetila, trifluoroacetila, t-butoxicarbonila (BOC), benziloxicarbonila (CBz), 9-fluorenilmetilenoxicarbonila (Fmoc) e 2,4,4-trimetilpentan-2-ila (que podem ser desprotegidos por reação na presença de um ácido, por exemplo HCl em água/álcool (por exemplo MeOH)) ou similares. A necessidade de tal proteção é prontamente determinada por um perito na técnica. Por exemplo, a unidade -C(O)O-terc-butiléster pode servir como grupo protetor para uma unidade -C(O)OH, e assim a primeira pode ser convertida na última por exemplo por reação na presença de um ácido moderado (por exemplo TFA, ou similares).

[00203] A proteção e desproteção de grupos funcionais pode ter

39/118 lugar antes ou depois de uma reação nos esquemas acima mencionados.

[00204] Os grupos protetores podem ser removidos de acordo com técnicas que são bem conhecidas dos peritos na técnica e tal como descritas doravante. Por exemplo, os compostos/intermediários protegidos descritos no presente documento podem ser convertidos quimicamente em compostos desprotegidos usando técnicas de desproteção padrão.

[00205] O tipo de química envolvida ditará a necessidade, e tipo, de grupos protetores bem como a sequência para realizar a síntese.

[00206] O uso de grupos protetores é descrita na sua totalidade em Protective Groups in Organic Synthesis, 3^a edição, T.W. Greene & P.G.M. Wutz, Wiley-lnterscience (1999).

[00207] Os compostos de Fórmula (I) tal como preparados nos processos descritos acima no presente documento podem ser sintetizados na forma de misturas racêmicas de enantiômeros que podem ser separados uns dos outros seguindo procedimentos de resolução conhecidos na técnica. Esses compostos de Fórmula (I) que são obtidos na forma racêmica podem ser convertidos nas correspondentes formas de sal diastereomêrico através da reação com um ácido quiral adequado. As referidas formas de sais diastereomêricos são posteriormente separadas, por exemplo, através da cristalização seletiva ou fracionada e os enantiômeros são liberados por álcali. Um modo alternativo de separação das formas enantioméricas dos compostos da Fórmula (I) envolve cromatografia líquida utilizando uma fase estacionária quiral. Tais formas estereoquimicamente isoméricas puras também podem ser derivadas das correspondentes formas estereoquimicamente isoméricas puras dos materiais de partida apropriados, desde que a reação ocorra de modo estereoespecífico. De preferência, se for desejado um estereoisômero específico, esse composto será sinteti

40/118 zado por métodos de preparação estereoespecíficos. Esses métodos empregarão vantajosamente materiais de partida enantiomericamente puros.

[00208] Os compostos descritos no presente documento são inibidores da enzima Fabl, tal como demonstrado pelos exemplos no presente documento. Tendo em conta essas propriedades inibidoras da enzima Fabl, os compostos descritos nesse documento podem por conseguinte ser úteis para tratar infeções bacterianas. Por exemplo, esses compostos são úteis no tratamento de infeções bacterianas, tais como, por exemplo, infeções do trato respiratório superior (por exemplo otite média, traqueíte bacteriana, epiglotite aguda, tiroidite), trato respiratório inferior (por exemplo empiema, abscesso pulmonar), cardíacas (por exemplo endocardite infeciosa), gastrointestinais (por exemplo diarréia secretora, abscesso esplênico, abscesso retroperitoneal), do CNS (por exemplo abscesso cerebral), oculares (por exemplo blefarite, conjuntivite, queratite, endoftalmite, celulite pré-septal e orbital, dacriocistite), dos rins e do trato urinário (por exemplo epididimite, abscesso intrarrenal e perinéfrico, síndrome de choque tóxico), da pele (por exemplo impetigo, foliculite, abscessos cutâneos, celulite, infeção de feridas, miosite bacteriana), e dos ossos e das articulações (por exemplo artrite séptica, osteomielite). Adicionalmente, os compostos podem ser úteis em combinação com antibióticos conhecidos.

[00209] Por conseguinte, a presente invenção refere-se também a compostos da invenção para uso como medicamento, especialmente para uso no tratamento de infeções bacterianas, em particular de infeções bacterianas causadas por uma bactéria que expressa a enzima Fabl. Posteriormente, os presentes compostos podem ser usados para o fabrico de um medicamento para o tratamento de infeções bacterianas, em particular de infeções bacterianas causadas por uma bactéria que expressa uma enzima Fabl.

41/118 [00210] Adicionalmente, a presente invenção proporciona um método de tratar infeções bacterianas que compreende a administração a um indivíduo com necessidade do mesmo, de um composto da invenção inibidor da enzima Fabl.

[00211] Um indivíduo com necessidade de tratamento tem uma infeção bacteriana ou foi exposto a uma bactéria infeciosa, cujos sintomas podem ser aliviados por administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz dos compostos da presente invenção, Por exemplo, um indivíduo com necessidade de tratamento pode ter uma infeção para a qual os compostos da invenção podem ser administrados como tratamento. Em um outro exemplo, um indivíduo com necessidade de tratamento pode ter uma ferida aberta ou uma lesão por queimadura, para a qual os compostos da invenção podem ser administrados como profilaxia. Tipicamente, um indivíduo será tratado quanto a uma infeção bacteriana existente.

[00212] Um indivíduo pode ter uma infeção bacteriana causada por Bacillus anthracis, Citrobacter sp., Escherichia coli, Francisella tularensis, Haemophi/us inf/uenza, Listaria mono-cytogenes, Moraxella catarrhalis, Mycobacterium tuberculosis, Neisseria meningitidis, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Salmonella sp., Serratia sp., Shigella sp., Stenotrophomonas maltophilia, Staphylococcus aureus, ou Staphylococcus epidermidis. Preferencialmente, o indivíduo é tratado (profilática ou terapeuticamente) quanto a uma infeção bacteriana causada por uma bactéria que expressa uma enzima Fabl.

[00213] Os termos tratar” e tratamento, tal como usados no presente documento, referem-se ao tratamento curativo, paliativo e profilático, incluindo a inversão, alívio, inibição do progresso ou prevenção da doença, transtorno ou condição ao qual esses termos se aplicam, ou a um ou mais sintomas de tais doenças, transtornos ou condições patológicas.

42/118 [00214] Uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção é a quantidade que, quando administrada a um indivíduo com necessidade de tratamento, melhora o prognóstico do indivíduo, por exemplo atrasa o início e/ou reduz a gravidade de um ou mais sintomas do indivíduo associado(s) a uma infeção bacteriana. A quantidade do composto divulgado a ser administrada a um indivíduo dependerá da doença particular, do modo de administração, e das características do indivíduo, tal como da saúde em geral, ouras doenças, idade, sexo, genótipo, peso corporal e tolerância a medicamentos. O perito na técnica será capaz de determinar as dosagens apropriadas dependendo desses e de outros fatores.

[00215] Os compostos podem ser testados em um ou vários ensaios biológicos para determinar a concentração de composto que é necessária para se ter um determinado efeito farmacológico.

[00216] Adicionalmente, a presente invenção proporciona composições farmacêuticas que compreendem pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção.

[00217] Para se preparar as composições farmacêuticas dessa invenção, uma quantidade eficaz do composto particular, na forma de um sal de adição de ácido ou de base, como princípio ativo é combinada em mistura íntima com pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável, que pode tomar uma ampla variedade de formas dependendo da forma de preparação desejada para administração. Essas composições farmacêuticas estão desejavelmentena forma de dosagem unitária adequada, preferencialmente, para administração por via oral, administração retal, administração percutânea, ou injeção parentérica.

[00218] Por exemplo, na preparação das composições na forma de dosagem oral, pode ser empregado qualquer um dos veículos farma

43/118 cêuticos líquidos usuais, tal como, por exemplo, água, glicóis, óleos, álcoois e similares no caso de preparações líquidas orais tais como suspensões, xaropes, elixires e soluções; ou veículos farmacêuticos sólidos tais como amidos, açúcares, caulim, lubrificantes, ligantes, agentes desintegrantes e similares no caso de pós, pílulas, cápsulas e comprimidos. Devido à sua facilidade de administração, os comprimidos e as cápsulas representam a mais vantajosa forma unitária de dosagem oral, caso em que são obviamente empregados veículos farmacêuticos sólidos. Para composições de injeções parentéricas, o veículo farmacêutico compreenderá principalmente água esterilizada, embora possam ser incluídos outros ingredientes com o objetivo de melhorar a solubilidade do princípio ativo. Podem ser preparadas soluções injetáveis usando por exemplo um veículo farmacêutico que compreende uma solução salina, uma solução de glicose ou uma mistura de ambas. Também podem ser preparadas suspensões injetáveis usando veículos líquidos apropriados, agentes de suspensão e semelhantes. Nas composições adequadas para administração percutânea, o veículo farmacêutico pode compreender opcionalmente um agente potencializador da penetração e/ou um agente molhante adequado, opcionalmente combinado com pequenas proporções de aditivos adequados que não causam efeitos prejudiciais significativos na pele. Os referidos aditivos podem ser selecionados de modo a facilitar a administração do princípio ativo à pele e/ou podem ser úteis para preparação das composições desejadas. Essas composições tópicas podem ser administradas de várias maneiras, p.ex., como um curativo transdérmico, como um adesivo ou como uma pomada. Os sais de adição dos compostos de fórmula (I), devido à sua solubilidade aumentada em água relativamente à correspondente forma de base, são obviamente mais adequados na preparação de composições aquosas.

[00219] É especialmente vantajoso formular as composições farma

44/118 cêuticas da invenção na forma de dosagem unitária para facilidade de administração e uniformidade da dosagem. A forma de dosagem unitária, tal como usada nesse documento, refere-se a unidades fisicamente discretas adequadas como dosagens unitárias, contendo cada unidade uma quantidade predeterminada de princípio ativo calculada de forma a produzir o efeito terapêutico desejado em combinação com o veiculo farmacêutico requerido. Exemplos de tais formas de dosagem unitárias são comprimidos (incluindo comprimidos sulcados ou revestidos), cápsulas, pílulas, pacotes de pós, bolachas, soluções ou suspensões injetáveis, colheres de chá, colheres de sopa e similares, e seus múltiplos segregados.

[00220] Para administração oral, as composições farmacêuticas da presente invenção podem tomar a forma de formas de dosagem sólidas, por exemplo, comprimidos (tanto na forma deglutível como mastigável), cápsulas ou cápsulas de gel, preparadas por meios convencionais com excipientes e veículos farmaceuticamente aceitáveis tais como agentes ligantes (por exemplo amido de milho pré-gelatinizado, polivinilpirrolidona, hidroxipropilmetilcelulose e similares), agentes de enchimento (por exemplo lactose, celulose microcristalina, fosfato de cálcio e semelhantes), lubrificantes (por exemplo estearato de magnésio, talco, sílica e similares), agentes desintegrantes (por exemplo amido de batata, glicolato de amido sódico e similares), agentes moIhantes (por exemplo laurilsulfato de sódio) e similares. Tais comprimidos podem também ser revestidos por métodos bem conhecidos na técnica.

[00221] As preparações líquidas para administração oral podem tomar a forma por exemplo de soluções, xaropes ou suspensões, ou podem ser formuladas como produto seco para mistura com água e/ou um outro veículo líquido apropriado antes do uso. Tais preparações líquidas podem ser preparadas por meios convencionais, opcional

45/118 mente com outros aditivos farmaceuticamente aceitáveis tais como agentes de suspensão (por exemplo xarope de sorbitol, metilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose ou gorduras hidrogenadas comestíveis), agentes emulsionantes (por exemplo lecitina ou acácia), veículos não aquosos (por exemplo óleo de amêndoa, ésteres oleosos ou álcool etílico), adoçantes, aromatizantes, agentes mascarantes e conservantes (por exemplo p-hidroxibenzoatos de metila ou propila ou ácido sórbico).

[00222] Adoçantes farmaceuticamente aceitáveis úteis nas composições farmacêuticas da invenção compreendem preferencialmente pelo menos um adoçante intenso tal como o aspartame, acessulfame de potássio, ciclamato de sódio, alitame, um adoçante de di-hidrochalcona, monelina, esteviosídeo, sucralose (4,1 ’,6'-tricloro-4,1 ’,6'-tridesoxigalactosacarose) ou, preferencialmente, sacarina, sacarina de sódio ou cálcio, e opcionalmente pelo menos um adoçante volumoso tal como o sorbitol, manitol, frutose, sacarose, maltose, isomalte, glicose, xarope de glicose hidrogenada, xilitol, caramelo ou mel. Adoçantes intensos são convenientemente usados em baixas concentrações. Por exemplo, no caso da sacarina de sódio, a referida concentração pode variar de cerca de 0,04% a 0,1% (peso/volume) da formulação final, O adoçante volumoso pode ser usado eficazmente em concentrações maiores variando de cerca de 10% a cerca de 35%, preferencialmente de cerca de 10% a 15% (peso/volume).

[00223] Os aromatizantes farmaceuticamente aceitáveis que podem mascarar os ingredientes de sabor amargo nas formulações de baixa dosagem são preferencialmente aromas frutados tais como cereja, framboesa, groselha negra ou morango. Uma combinação de dois aromas pode originar resultados muito bons. Nas formulações de alta dosagem, podem ser necessários aromatizantes mais fortes farmaceuticamente aceitáveis tais como Caramelo Chocolate, Hortelã Fresca,

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Fantasy e similares. Cada aroma pode estar presente na composição final em uma concentração que varia de cerca de 0,05% a 1% (peso/volume). São usadas vantajosamente combinações dos referidos aromas fortes. Preferencialmente, é usado um aroma que não sofre qualquer mudança ou perda de sabor e/ou cor sob as circunstâncias da formulação.

[00224] Os compostos da invenção podem ser formulados para administração parentérica por injeção, convenientemente injeção intravenosa, intramuscular ou subcutãnea, por exemplo, por injeção em bólus ou infusão intravenosa contínua. As formulações para injeção podem ser apresentadas na forma de dosagem unitária, por exemplo em ampolas ou recipientes multi-dose, incluindo um conservante adicionado. Elas podem tomar formas tais como suspensões, soluções ou emulsões em veículos oleosos ou aquosos, e podem conter agentes de formulação tais como agentes de isotonização, suspensão, estabilização e/ou dispersão. Alternativamente, o princípio ativo pode estar presente na forma de pó para mistura com um veículo adequado, por exemplo água esterilizada apirógena, antes do uso.

[00225] Os compostos da invenção podem também ser formulados em composições retais tais como supositórios ou enemas de retenção, contendo por exemplo bases convencionais para supositórios tais como manteiga de cacau e/ou outros glicéridos.

[00226] Os peritos no tratamento de doenças antibacterianas ligadas à inibição da enzima Fabl determinarão facilmente a quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção a partir dos resultados dos testes apresentados doravante. Em geral é contemplado que uma dose terapeuticamente eficaz variará de cerca de 0,001 mg/kg a cerca de 50 mg/kg de peso corporal, mais preferencialmente de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 10 mg/kg de peso corporal do paciente a ser tratado. Pode ser apropriado administrar a dose terapeuti

47/118 camente eficaz na forma de duas ou mais subdoses em intervalos apropriados durante o dia. Tais sub-doses podem ser formuladas como formas de dosagem unitária, por exemplo, contendo cada uma de cerca de 0,1 mg a cerca de 1000 mg, mais em particular de cerca de 1 a cerca de 500 mg do princípio ativo por forma de dosagem unitária.

[00227] A dosagem e frequência de administração exatas dependem do composto particular da invenção usado, da condição patológica particular a ser tratada, da gravidade da condição patológica a ser tratada, da idade, do peso e da condição física geral do paciente particular bem como de outra medicação que o indivíduo possa estar a tomar, como é bem conhecido dos especialistas na técnica. Adicionalmente, a referida quantidade terapeuticamente eficaz pode ser reduzida ou aumentada dependendo da resposta do paciente tratado e/ou dependendo da avaliação do médico que prescreve os compostos da presente invenção. Os intervalos das quantidades diárias eficazes mencionadas acima nesse documento são, por conseguinte, apenas orientativos.

[00228] Os compostos da invenção/fórmula (I) podem ter a vantagem de poder ser mais eficazes, ser menos tóxicos, ter uma ação mais prolongada, ser mais potentes, produzir menos efeitos secundários, ser mais facilmente absorvidos, e/ou ter um melhor perfil farmacocinético (por exemplo uma biodisponibilidade oral mais elevada e/ou uma eliminação mais baixa), e/ou terem outras propriedades farmacológicas, físicas ou químicas úteis em relação a compostos conhecidos no estado da técnica, para utilização nas indicações acima citadas ou em outras indicações. Os compostos podem também exibir tais vantagens, tendo em consideração a dupla ligação necessária no anel contendo Z^x.

[00229] Por exemplo, os compostos da invenção/fórmula (I) podem ter a vantagem de ter uma solubilidade termodinâmica boa ou melho

48/118 rada (por exemplo comparativamente a compostos conhecidos no estado da técnica; e por exemplo tal como determinada por um método conhecido e/ou por um método descrito nesse documento). Por exemplo, os compostos da invenção/fórmula (I) podem ter a vantagem de ter uma solubilidade termodinâmica boa ou melhorada (por exemplo comparativamente a compostos conhecidos no estado da técnica; e por exemplo tal como determinada por um método conhecido e/ou por um método descrito nesse documento). Os compostos da invenção/fórmula (I) podem também ter a vantagem de ter uma biodisponibilidade oral e uma farmacocinética in vivo boas ou melhoradas. Podem também ter a vantagem de ter uma eficácia in vivo boa ou melhorada. Por exemplo, os compostos da invenção podem ser adaptáveis para formulação/dosagem intravenosa e podem assim exibir uma eficácia in vivo melhorada quando administrados intravenosamente. Os compostos podem também exibir tais vantagens, tendo em consideração a dupla ligação necessária no anel contendo Z^x,

Parte experimental

Abreviaturas [00230] DMF define-se como Λ/,/V-dimetilformamida, DOM ou CH₂CI₂ define-se como diclorometano, MeOH define-se como metanol, EtOH define-se como etanol, [00231] ’'MgSO₄ define-se como sulfato de magnésio, e THF define-se como tetra-hidrofurano, [00232] AcOEt ou EtOAc define-se como acetato de etila, DlPEA define-se como di-isopropiletilamina, EDCI define-se como monocloridrato de /V-(etilcarbonimidoil)-A/,AZ-dimetil-1,3-propanodiamina, ΉΟΒΤ define-se como 1 -hidróxi-1 /-/-benzotriazol, DIPA define-se como di-isopropilamina, K₂CO₃ define-se como carbonato de potássio, TFA define-se como ácido trifluoroacético, NH4OH define-se como hidróxido de amônio, NaHCO₃ define-se como sal monossódi

49/118 co do ácido carbônico, Et₂O define-se como éter dietílico, Na₂SO₄ define-se como sal dissódico do ácido sulfúrico, CH₃CN define-se como acetonitrila, NaOH define-se como hidróxido de sódio, n-BuLi define-se como n-Butil-lítio, i-PrOH define-se como isopropanol, Pd(OAc)₂ define-se como acetato de paládio, DMA define-se como dimetilacetamida, Et₃N” define-se como trietilamina, SFC define-se como Cromatografia de Fluído Supercrítico.

Representação estereoquímica [00233] Os compostos de fórmula (I) podem ter pelo menos dois átomos de carbono assimétricos, por exemplo, os anéis fundidos que R^x podem representar. Os sistemas de anéis fundidos podem existir apenas como formas ‘cis’, uma vez que as formas ‘trans’ podem não poder ser preparadas devido à tensão de anel.

Síntese de Exemplos

Síntese de compostos finais em que R^x representa o anel (i): SÍNTESE DOS COMPOSTOS FINAIS C

Exemplo A - Preparação do Intermediário A

Preparação de CAS [324784-95-4]

CAS[12O6-75-9] CAS(138S75-38-4J

Intermediário A2

CAS[324784-53-2] intermediário A3b

Intermediário A1

CAS[324784*95-4]

Intermediário A3a [00234] Pd((OH)₂)₂, NEt₃, EtOAc, RT (do inglês Room Temperature = temperatura ambiente), 3 bars; b) fenilmagnésio, THF, 5°C, 3h; c) HCI, refluxo, 30 minutos

Preparação da 4-Boc-hexa-hidroazepinona CAS [1889-75-88-4] (In

50/118 termediário A1) [00235] Uma mistura de 1-Benzil-hexa-hidro-4H-azepin-4-ona CAS[1208-75-9] (34,0 g, 141,8 mmol), di-terc-butil-dicarbonato (34,1 g, 156 mmol) e catalisador de Pearlman CAS[12135-22-7] (6,1 g, 42,5 mmol) em EtOAc (750 mL) e trietilamina (23,7 mL, 170,2 mmol) foi hidrogenada a 3 bars e à temperatura ambiente durante a noite em um agitador de Parr.

[00236] A mistura reacional foi filtrada através de uma pequena camada de Celite®, o bolo foi lavado com EtOAc, o filtrado lavado com água e de seguida solução saturada de cloreto de sódio, seco (MgSO₄) e evaporado à secura para dar 28,8 g (95%) de 4-Boc-hexahidroazepinona CAS [1889-75-88-4], Preparação do álcool intermediário Α2 [00237] Sob fluxo de N₂₁ adicionou-se cloreto de fenilmagnésio (1,8M, 91,5 mL, 165 mmol) gota a gota a uma solução de 4-Boc-hexahidroazepinona CAS [1889-75-88-4] (29,3 g, 137 mmol; Intermediário A1) em THF (300 mL) a 0°C, depois a mistura foi agitada 3 horas a 5°C. Adicionaram-se NH₄CI aq. a 10% e EtOAc, a fase orgânica foi separada, lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio, seca (MgSO₄) e evaporada até à secura para dar 37,8 g (95%) do álcool intermediário.

Intermediário A3 - 2_l3,6,7-tetra-hidro-4-fenil-1H-azepina CAS [32478475-95-4] [00238] Agitou-se à temperatura ambiente durante 1 hora uma solução do álcool intermediário (37,8 g, 129,7 mmol; Intermediário A2) em uma solução aquosa de HCI a 35% em água (190 mL). Verteu-se a mistura reacional para dentro de água gelada e adicionou-se K₂CO₃ sólido em pequenas porções (até pH=9-10), e extraiu-se depois duas vezes com DCM, Juntaram-se as fases orgânicas, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se. O resíduo (15,2 g) foi purificado por

51/118 cromatografia em coluna em sílica-gel (eluente: gradiente de 1% de NH₄OH, 93% de DCM, 7% de MeOH a 1% de NH₄OH, 90% de DCM, 10% de MeOH). As frações puras foram recolhidas e 0 solvente evaporado. Rendimento: 7,1g, (32%) de 2,3,6,7-tetra-hidro-4-fenil-1 Hazepina CAS [324784-75-95-4] (Intermediário A3a) e 2,3g (10%) de

2,3,4,7-tetra-hÍdro-5-fenil-1 H-azepina CAS [324784-75-93-2] (Intermediário A3b).

Ouros Intermediários do Exemplo A

a) Preparação do intermediário (A4) [00239] Reação sob N₂. Adicionou-se BuLi (1,6 M em hexano) (8,28 mL, 13,2 mmol) gota a gota a -20°C a uma solução de DIPA (1,86 mL,

13,2 mmol) em THF (20 mL) e a mistura foi de seguida misturada a [00240] -20°C durante 20 minutos. Adicionou-se então uma solução de 1-terc-butiloxicarbonil-4-piperidona (2,2 g, 11,0 mmol) em THF (20mL) a -78°C e agitou-se a mistura resultante durante 30 minutos a -78°C. Adicionou-se uma solução de 2-[A/,A/-bis(trifluorometilsulfonil)amino]-5-cloropiridina (4,97 g, 12,1 mmol) em THF (10mL) a -78°C e deixou-se depois a mistura atingir a temperatura ambiente e agitou-se durante a noite. Concentrou-se a mistura e purificou-se o resíduo por cromatografia rápida em sílica-gel (sílica-gel 30pm, 80g, heptano/EtOAc 75/25). Recolheu-se 0 produto desejado e evaporou-se 0 solvente, dando origem a 2,9 g do intermediário (A4).

[00241] Reação sob N₂. Purgou-se com N₂ uma solução do intermediário (4) (0,3 g, 0,905 mmol) e ácido 3,4-(metilenodióxi) fenilborônico (0,18 g, 1,09 mmol) em K₂CO₃ (2 M, 0,905 mL) e etilenoglicoldi

52/118 metiléter (3mL) durante 10 minutos e adicionou-se depois tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0) (0,105 g, 0,0905 mmol). A mistura foi aquecida a 80°C usando um micro-ondas monomodal (iniciador60 da Biotage®) com uma potência que varia de 0 a 400 W durante 20min, arrefecida à temperatura ambiente, adicionaram-se água e EtOAc, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água e depois solução saturada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. A purificação do resíduo foi efetuada por cromatografia rápida em sílicagel (sílica-gel 10g, 15-40pm, heptano 100 a heptano/EtOAc 90/10) As frações puras foram recolhidas e evaporadas à secura, dando origem a 0,17 g do intermediário (A5).

intermediário (A6)

c) Preparação do [00242] Agitou-se uma solução do intermediário (A5) (0,17 g, 0,56 mmol) em TFA (0,5 mL) e DCM (3 mL) à temperatura ambiente durante 30 minutos, adicionaram-se K₂CO₃ (solução aquosa a 10%) e DCM, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura, rendimento de 0,11 g do intermediário (A6).

a) Preparação do intermediário (A7) [00243] Reação sob N₂. Purgou-se com N₂ uma solução do intermediário (A4) (0,3 g, 0,905 mmol) e ácido furano-2-borónico (0,122 g, 1,09 mmol) em K₂CO₃ (0,905 mL) e etilenoglicoldimetiléter (3mL) durante 10 minutos e adicionou-se depois tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0) (0,105 g, 0,0905 mmol). A mistura foi aquecida a 80°C usando um micro-ondas monomodal (iniciador60 da Biotage®) com uma potência que varia de 0 a 400 W durante 20min, arrefecida à temperatura ambiente, adicionaram-se água e EtOAc, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água e depois solução saturada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. A purificação do resíduo foi

53/118 efetuada por cromatografia rápida em sílica-gel §(10g, 15-40pm, de heptano 100 a heptano/EtOAc 90/10). As frações puras foram recolhidas e evaporadas à secura, dando origem a 0,1 g do intermediário (A7).

b) Preparação do

intermediário (A8) [00244] Agitou-se uma solução do intermediário (A7) (0,1 g, 0,401 mmol) em TFA (0,3 mL) e DCM (2 mL) à temperatura ambiente durante 30 minutos, adicionaram-se K₂CO₃ (solução aquosa a 10%) e DCM, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura, rendimento de 0,046 g do intermediário (A8).

a) Preparação do intermediário (A9) [00245] Reação sob N₂. Purgou-se com N₂ uma solução do intermediário (A4) (0,28 g, 0,845 mmol) e ácido furano-3-borónico (0,104 g, 0,93 mmol) em K₂CO₃ (2 M, 0,845 mL) e etilenoglicoldimetiléter (3mL) durante 10 minutos e adicionou-se depois tetraquis(trifenilfosfina) paládio (0) (0,0977 g, 0,0845 mmol). A mistura foi aquecida a 80°C usando um micro-ondas monomodal (iniciador60 da Biotage®) com uma potência que varia de 0 a 400 W durante 20min, arrefecida à temperatura ambiente, adicionaram-se água e EtOAc, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água e depois solução saturada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. A purificação do resíduo foi efetuada por cromatografia rápida em sílica-gel (1 Og, 15-40pm, de heptano 100 a heptano/EtOAc 90/10). As frações puras foram recolhidas e evaporadas à secura, dando origem a 0,146 g do intermediário (9).

b) Preparação do

Intermediário (10) [00246] Agitou-se uma solução do intermediário (A9) (0,146 g,

54/118

0,586 mmol) em TFA (0,5 mL) e DCM (3 mL) à temperatura ambiente durante 30 minutos, adicionaram-se K₂CO₃ (solução aquosa a 10%) e DCM, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura, dando origem a 0,085 g do intermediário (A10).

a) Preparação do intermediário (A11) [00247] Reação sob N₂. Desgaseificou-se uma solução do intermediário (A4) (0,1 g, 0,302 mmol) e cloreto de 2-metoxibenzilzinco (0,724 ml, 0,93 mmol) em THF (0,5 mL) borbulhando N₂ durante 10 minutos, e depois adicionou-se 1,T-bis(difenilfosfino)ferrocenodicloropaládio(ll) (0,022 g, 0,03 mmol). A mistura foi aquecida a 80°C usando um microondas monomodal (iniciador60 da Biotage®) com uma potência variando de 0 a 400 W durante 20min, arrefecida à temperatura ambiente, adicionaram-se água e EtOAc, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água e depois solução saturada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura, dando origem ao intermediário (A11).

b) Preparação do

NH intermediário (A12) [00248] Agitou-se uma solução do intermediário (A11) (0,232 g, 0,765 mmol) em TFA (0,6 mL) e DCM (5 mL) à temperatura ambiente durante 45 minutos, adicionaram-se K₂CO₃ (solução aquosa a 10%) e DCM, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura, dando origem a 0,145 g do intermediário (A12).

a) Preparação do intermediário (A13)

55/118 [00249] Reação sob N₂. Purgou-se com N₂ uma solução do intermediário (A4) (0,3 g, 0,905 mmol) e ácido benzo[b]furano-2-borónico (0,176 g, 1,09 mmol) em K₂CO₃ (2 M, 0,905 mL) e etilenoglicoldimetiléter (3 mL) durante 10 minutos e adicionou-se depois tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0) (0,105 g, 0,0905 mmol). A mistura foi aquecida a 80°Ç usando um micro-ondas monomodal (iniciador60 da Biotage®) com uma potência que varia de 0 a 400 W durante 20min, arrefecida à temperatura ambiente, adicionaram-se água e EtOAc, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água e depois solução saturada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. A purificação do resíduo foi efetuada por cromatografia rápida em sílica-gel (1 Og, 1540pm, de heptano 100 a heptano/EtOAc 90/10). As frações puras foram recolhidas e evaporadas à secura, dando origem a 0,217 g do intermediário (A13).

b) Preparação do

intermediário (A14) [00250] Agitou-se uma solução do intermediário (A13) (0,217 g,

0,725 mmol) em TFA (0,6 mL) e DCM (4 mL) à temperatura ambiente durante 30 minutos, adicionaram-se K₂CO₃ (solução aquosa a 10%) e DCM, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura.

[00251] Reação sob N₂. Desgaseificou-se com N₂ uma solução do intermediário (A4) (0,752 g, 1,36 mmol) e ácido 4-metóxi-3-piridinilborônico (0,25 g, 1,64 mmol) em K₂CO₃ (2 M, 1,36 mL) e etilenoglicoldimetiléter (8 mL) durante 10 minutos e adicionou-se depois tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0,157 g, 0,0136 mmol). A mistura foi aquecida a 80°C usando um micro-ondas monomodal (iniciadorôO da Bio56/118 tage®) com uma potência que varia de 0 a 400 W durante 30min, arrefecida à temperatura ambiente, adicionaram-se água e EtOAc, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água e depois solução saturada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. A purificação do resíduo foi efetuada por cromatografia rápida em sílica-gel (30 g, 15-40pm, gradiente de eluição de CH₂CI₂ a CH₂CI₂/MeOH/ NH₄OH: 97/3/0.1) As frações puras foram recolhidas e evaporadas à secura, dando origem a 0,19 g do intermediário (A15).

b) Preparação do [00252] Agitou-se uma mistura do intermediário (A15) (0,2 g, 0,689 mmol) e TFA (0,218 mL) em DCM (2 mL) à temperatura ambiente durante 30 minutos, adicionaram-se K₂CO₃ (solução aquosa a 10%) e DCM, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura, dando origem a 0,11 g do intermediário (A16).

intermediário (A16)

a) Preparação do

F3CTV n

intermediário (A17)

[00253] Reação sob N₂. Adicionou-se BuLi (1,6 M em hexano) (3,76 mL, 6,02 mmol) gota a gota a -20°C a uma solução de DIPA (0,846 mL, 6,02 mmol) em THF (10 mL) e a mistura foi de seguida agitada a 20°C durante 20 minutos. Adicionou-se então uma solução de 1-NBoc-3-piperidona (1,0 g, 5,02 mmol) em THF (10mL) a -78°C e agitouse a mistura resultante durante 30 minutos a -78°C. Adicionou-se uma solução de 2-[A/,A/-bis(trifluorometilsulfonil)-amino]-5-cloropiridina (2,26 g, 5,52 mmol) em THF (5 mL) a -78°C e deixou-se depois a mistura atingir a temperatura ambiente e agitou-se durante a noite, A mistura reacional foi evaporada à secura. O resíduo obtido foi purificado por

57/118 fase normal (sílica-gel, 450 g, 20-45pm, fase móvel (90% de heptano, 10% de AcOEt)). Recolheram-se as frações desejadas e evaporou-se o solvente, dando origem a 0,32 g do intermediário (A17).

mediário (A17) (0,32 g, 0,966 mmol) e ácido 2-metoxifenilborônico (0,176 g, 1,16 mmol) em K₂CO₃ (2 M, 0,97 mL) e etilenoglicoldimetiléter (3 mL) durante 10 minutos e adicionou-se depois tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0) (0,112 g, 0,097 mmol). A mistura foi aquecida a 80°C usando um micro-ondas monomodal (iniciador60 da Biotage®) com uma potência que varia de 0 a 400 W durante 20min, arrefecida à temperatura ambiente, adicionaram-se água e EtOAc, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água e depois solução saturada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. A purificação do resíduo foi efetuada por cromatografia rápida em sílicagel (1 Og, 15-40pm, heptano 100 a heptano/EtOAc 80/20). As frações puras foram recolhidas e evaporadas à secura, dando origem a 0,22 g do intermediário (A18).

c) Preparação do

intermediário (A19) [00255] Agitou-se uma mistura do intermediário (18) (0,2 g, 0,76 mmol) em TFA (0,6 mL) e DCM (4 mL) à temperatura ambiente duran te 30 minutos, adicionaram-se K₂CO₃ (solução aquosa a 10%) e DCM, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura, dando origem a 0,13 g do intermediário (A19).

58/118

[00256] Hidrogenou-se (3 bar, temperatura ambiente) durante a noite em um agitador de Parr, uma mistura de 1-benzil-3-metil-4piperidona (2,0 g, 9,84 mmol), dicarbonato de di-ferc-butila (2,36 g,

10,8 mmol) e catalisador de Pearlman (hidróxido de paládio (II)) (0,35 g, 2,46 mmol) em EtOAc (50 mL). A mistura reacional foi filtrada através de uma pequena camada de celite, o bolo foi lavado com EtOAc, o filtrado lavado com água e de seguida solução saturada de cloreto de sódio, seco (MgSO₄) e evaporado à secura para dar 2,2 g do intermediário (A20).

b) Preparação do

intermediário (A21) [00257] Reação sob N₂. Adicionou-se BuLi (1,6 M em hexano) (3,52 mL, 5,63 mmol) gota a gota a -20°C a uma solução de DIPA (0,791 mL, 5,63 mmol) em THF (8 mL) e a mistura foi de seguida agitada a 20°C durante 20 minutos. Adicionou-se então uma solução do intermediário (A20) (1,0 g, 4,70 mmol) em THF (10mL) a -78°C e agitou-se a mistura resultante durante 30 minutos a -78°C. Adicionou-se uma solução de AZ-feniltrifluorometanossulfonimida (1,92 g, 5,16 mmol) em THF (6 mL) a -78°C e deixou-se depois a mistura atingir a temperatura ambiente e agitou-se durante a noite. A mistura foi concentrada e purificada por fase normal (sílica-gel, 20-45pm, 450 g, fase móvel (80% de heptano, 20% de AcOEt)). Recolheram-se as frações desejadas e evaporou-se o solvente, dando origem a 1,7 g do intermediário (A21).

c) Preparação do

intermediário (A22) [00258] Reação sob N₂. Purgou-se com N₂ uma solução do inter mediário (A21) (1,0 g, 1,45 mmol) e ácido fenilborônico (0,194 g, 1,59

59/118 mmol) em K₂CO₃ (2 M, 1,45 mL) e etilenoglicoldimetiléter (10 mL) durante 10 minutos, e adicionou-se depois tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0) (0,167 g, 0,145 mmol). A mistura foi aquecida a 80°C usando um micro-ondas monomodal (iniciador60 da Biotage®) com uma potência variando de 0 a 400 W durante 20min, arrefecida à temperatura ambiente, adicionaram-se água e EtOAc, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água e depois solução saturada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura, dando origem a 0,23 g do intermediário (A22).

d) Preparação de

NH intermediário (A23) [00259] Agitou-se uma mistura do intermediário (A22) (0,23 g, 0,841 mmol) e TFA (0,8 mL) em DCM (5 mL) à temperatura ambiente duran te 30 minutos, e de seguida verteu-se a mistura reacional para dentro de K₂CO₃ (solução aquosa a 10%) e extraiu-se com DCM. A fase orgânica foi separada, lavada com água, seca (MgSO₄) e evaporada à secura, dando origem a 0,143 g do intermediário (A23).

a) Preparação do

„ / 0 \ ZN-C-O—

intermediário (A24); também referido como intermediário (A1)

[00260] Uma mistura de cloridrato de /V-benzil-hexa-hidroazepin-4ona (25,0 g, 104,3 mmol), dicarbonato de di-terc-butila (25,0 g, 114,7 mmol) e catalisador de Pearlman (4,46 g, 31,3 mmol) em EtOAc (550 mL) e trietilamina (17,4 mL, 125,13 mmol) foi hidrogenada (3 bar, temperatura ambiente) durante a noite em um agitador de Parr. A mistura reacional foi filtrada através de uma pequena camada de Celite®, o bolo foi lavado com EtOAc, o filtrado lavado com água e de seguida solução saturada de cloreto de sódio, seco (MgSO₄) e evaporado à secura para dar 23,4 g do intermediário (A24).

60/118

b) Preparação do	hq r	ZN-C-O—	intermediário (A25)

[00261] Reação sob N₂. Adicionou-se cloreto de fenilmagnésio (1,8M, 93,8 mL, 169 mmol) gota a gota a uma solução do intermediário (A24) (30 g, 141 mmol) em THF (300 mL) a 0°C, depois a mistura foi agitada 3 horas a 5°C. Adicionaram-se NH₄CI aq a10% e EtOAc, a fase orgânica foi separada, lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio, seca (MgSO₄) e evaporada à secura para dar 39,2 g do intermediário (A25).

c) Preparação do	ΐΓ'''\ intermediário (A26); também referido λ—7 como intermediário (A3a)
e	do intermediário (A27); também \=/V^NH referido como intermediário (A3b)

[00262] Agitou-se uma solução do intermediário (A25) (38,85 g, 133,3 mmol) em HCI (35% em água, 200 mL) à temperatura ambiente durante 1 hora. Verteu-se a mistura reacional para cima de gelo moído e adicionou-se K₂CO₃ sólido em pequenas porções (até pH=9 - 10), e extraiu-se depois duas vezes com DCM. Juntaram-se as fases orgânicas, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida preparativa em sílica-gel (2045pm, 1000 g, fase móvel (1% de NH₄OH, 93% de DCM, 7% de MeOH)). Recolheram-se as frações puras e evaporou-se o solvente, dando origem ao intermediário (A26) e ao intermediário (A27).

a) Preparação do

intermediário (A28) [00263] Reação sob N₂. Adicionou-se n-Butil-lítio 1,6 M em hexano (6,35 mL, 9,31 mmol) gota a gota a -20°C a uma solução de diisopropilamina (1,43 mL, 10,2 mmol) em THF (15 mL), e a mistura foi de seguida agitada a -20°C durante 20 minutos. Adicionou-se então uma solução do intermediário (A24) (1,9 g, 8,46 mmol) em THF (20mL)

61/118 a -78°C e agitou-se a mistura resultante durante 30 minutos a -78°C, Adicionou-se uma solução de 2-[/V,/V-bis(trifluorometilsulfonil)-amino]-

5-cloropiridina (3,8 g, 9,31 mmol) em THF (10 mL) a -78°C e deixou-se depois a mistura atingir a temperatura ambiente, agitou-se durante a noite e concentrou-se. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em fase normal (sílica-gel, 20-45pm, 450 g, fase móvel (80% de heptano, 20% de acetato de etilo)). Recolheram-se as frações puras e evaporou-se o solvente para dar origem a 1,34 g do intermediário (A28).

b) Preparação do

intermediário (A29) [00264] Reação sob N₂. Desgaseificou-se com nitrogênio uma solu ção do intermediário (A28) (0,24 g, 0,695 mmol) em THF (2 mL) e brometo de benzilzinco em THF (0,5 M, 3,34 mL, 1,67 mmol) borbuIhando durante 10 minutos, e depois adicionou-se 1,1'-bis(difenilfosfino)ferrocenodicloro-paládio(ll) (0,102 g, 0,139 mmol). A mistura foi aquecida a 80°C usando um micro-ondas monomodal (iniciador60 da

Biotage®) com uma potência que varia de 0 a 400 W durante 20min, arrefecida à temperatura ambiente, adicionaram-se água e EtOAc, filtrou-se a mistura través de uma pequena camada de celite®, separouse a fase orgânica, lavou-se com água e depois solução saturada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida em um pequeno cartucho com sílica-gel (com uma mistura de heptano a heptano/EtOAc 90/10). As frações puras foram recolhidas e evaporadas à secura para dar origem a 0,11 g do intermediário (A29).

c) Preparação do ^xintermediário (A30) '—Ç _yNH [00265] Agitou-se uma mistura do intermediário (A29) (0,11 g, 0,383

62/118 mmol) e TFA (0,3 mL) em DCM (2 mL) à temperatura ambiente durante 30 minutos, e de seguida verteu-se a mistura reacional para dentro de K₂CO₃ (solução aquosa a 10%) e extraiu-se com DCM. A fase orgânica foi separada, lavada com água, seca (MgSO₄) e evaporada à secura para dar origem a 0,058 g do intermediário (A30).

	hq r	rJ.
a) Preparação do		N-c-o—e-	intermediário (A31)

[00266] Reação sob N₂. Adicionou-se brometo de 3-clorofenilmagnésio (0,5M, 100 mL, 50,0 mmol) gota a gota a uma solução do intermediário (4) (8,9 g, 41,7 mmol) em THF (90 mL) a 0°C, depois a mistura foi agitada 3 horas a 5°C. Adicionaram-se NH₄CI (solução aquosa a 10%) e EtOAc, a fase orgânica foi separada, lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio, seca (MgSO₄) e evaporada à secura. A purificação do resíduo foi efetuada por cromatografia rápida com um cartucho de sílica-gel [15-40pm, de heptano/EtOAc 80/20 a heptano/EtOAc 60/40], As frações puras foram recolhidas e evaporadas à secura para dar origem a 4,4 g do intermediário (A31).

[00267] Agitou-se uma solução do intermediário (A31) (4,4 g, 13,5 mmol) em HCI em água (35%, 22 mL) à temperatura ambiente durante 1 hora. Verteu-se a mistura reacional para cima de gelo moído e adicionou-se K₂CO₃ sólido em pequenas porções (até pH=9 - 10), e extraiuse depois duas vezes com DCM. Juntaram-se as fases orgânicas, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se. A fase aquosa foi evaporada, extraída em DCM e filtrada. Juntou-se esta fase com o primeiro extrato e evaporou-se à secura. A purificação do resíduo foi

63/118 efetuada por cromatografia rápida em sílica-gel (15-40pm, 90g, de DCM a DCM/MeOH/NH₄OH: 90/10/0,5). As frações puras foram recolhidas e evaporadas à secura. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida preparativa em sílica-gel (15-40pm, 300 g, fase móvel (0,5% de NH₄OH, 90% de DCM, 10% de MeOH)). Recolheram-se as frações puras e evaporou-se o solvente para dar origem a 1 g do intermediário (12) e a 0,4 g do intermediário (A33).

	Η0\Λ	O , ^,Ν-ê-O—
a) Preparação do		intermediário (A34)

[00268] Reação sob N₂. Adicionou-se n-Butil-lítio em hexano (1,6 M, 3,52 mL, 5,63 mmol) gota a gota a -78°C a uma solução de tiazol (0,366 mL, 5,16 mmol) em éter dietílico (5 mL) e a mistura foi agitada durante 30 minutos. Adicionou-se uma solução do intermediário (A24) (1,0 g, 4,69 mmol) em éter dietílico (5 mL), a mistura foi então agitada e deixou-se atingir a temperatura ambiente durante 2 horas. Adicionaram-se água e EtOAc, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água e depois solução saturada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida preparativa (sílica-gel 15-40pm, 25 g, fase móvel (70% de heptano, 30% de EtOAc) para dar 1,05 g do intermediário (A34).

b) Preparação do		intermediário (A35)
e		do intermediário (A36)

[00269] Agitaram-se o intermediário (A34) (710 mg, 2,38 mmol) e HCI concentrado (2 mL) em acetonitrila (6 mL) ao refluxo durante 2 dias. O solvente foi evaporado. Adicionaram-se água e DCM. Adicionou-se K₂C0₃sob a forma de pó para basificar a fase aquosa e removeu-se a fase orgânica. A fase aquosa foi novamente extraída com

64/118

DCM após saturação da fase aquosa com K₂CO₃. As fases orgânicas combinadas foram concentradas e o resíduo purificado e separado por cromatografia em coluna em sílica-gel (15-40 pm, 25g), dando origem a 137 mg do intermediário (A35) e a 65 mg do intermediário (A36).

a) Preparação do

do intermediário (A37) [00270] Reação sob N₂. Adicionou-se brometo de 3-(trifluoro metil)fenilmagnésio (0,5M em Et₂O, 5,6 mmol, 10 mL) gota a gota a uma solução do intermediário (4) (1 g, 4,69 mmol) em THF (15 mL) a

0°C, depois a mistura foi agitada 3 horas a 5°C. Adicionaram-se NH₄CI (solução aquosa a 10%) e EtOAc, a fase orgânica foi separada, lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio, seca (MgSO₄) e evaporada à secura. A purificação foi efetuada por cromatografia rápida em sílica-gel (40g, heptano/EtOAc de 85/15). As frações puras foram recolhidas e concentradas, dando origem a 520 mg do intermediário (A37).

b) Preparação do	p3<v_ Q-O	intermediário (A38)
e	\__y—xnh	do intermediário (A39)

[00271] Agitou-se uma solução do intermediário (A37) (400 mg, 1,13 mmol) em HCI (37% em água, 15 mL) durante 30 minutos ao refluxo e arrefeceu-se à temperatura ambiente. Verteu-se a mistura reacional para cima de gelo moído e adicionou-se K₂CO₃ sólido em pequenas porções (até pH=9 - 10), e extraiu-se depois duas vezes com DCM. Juntaram-se as fases orgânicas, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida preparativa (sílica-gel 5pm, 150x30,Omm, fase móvel (gradiente de 0,2% de NH₄OH, 98% de DCM, 2% de MeOH a 1,2% de NH₄OH,

65/118

88% de DCM, 12% de MeOH)). Recolheram-se as frações puras e evaporou-se o solvente para dar origem a 140 mg do intermediário (A38) e a 42 mg do intermediário (A39).

[00272] Reação sob N₂. Adicionou-se brometo de 3-cloro-5fluorofenilmagnésio (5M em THF) (14,1 mL, 7 mmol) gota a gota a uma solução do intermediário (A24) (1 g, 4,7 mmol) em THF (20 mL) a 0°C, depois a mistura foi agitada 3 horas a 5°C. Adicionaram-se NH₄CI (solução aquosa a 10%) e EtOAc, a fase orgânica foi separada, lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio, seca (MgSO₄) e evaporada à secura. A purificação foi efetuada por cromatografia rápida em sílica-gel (40g, heptano /EtOAc de 85/15). As frações puras foram recolhidas e concentradas para dar origem a 900 mg do intermediário (A40).

[00273] Agitou-se uma solução do intermediário (A40) (900 mg, 2,5 mmol) em HCI (37% em água, 30 mL) durante 30 minutos ao refluxo e arrefeceu-se depois à temperatura ambiente. Verteu-se a mistura reacional para cima de gelo moído e adicionou-se K₂CO₃ sólido em pequenas porções (até pH=9 - 10), e extraiu-se depois duas vezes com DCM. Juntaram-se as fases orgânicas, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida preparativa em sílica-gel (5pm, 150x30,Omm, fase móvel (gradiente de 0,2% de NH₄OH, 98% de DCM, 2% de MeOH a 1%

66/118 de NH₄OH, 90% de DCM, 10% de MeOH). Recolheram-se duas frações e evaporou-se 0 solvente para dar origem a 290 mg do intermediário (A41) e a 80 mg do intermediário (A42).

	HQ A /V. λ	tf / ,N-C-O—(—
a) Preparação do	Cl		do intermediário (A43)

[00274] Reação sob N₂. Adicionou-se brometo de 3-cloro-5fluorofenilmagnésio (0,5M em THF, 18,7 mL, 9,37 mmol) gota a gota a uma solução do intermediário (A4) (1 g, 4,7 mmol) em THF (20 mL) a 0°C, depois a mistura foi agitada 3 horas a 5°C. Adicionaram-se NH₄CI (solução aquosa a 10%) e EtOAc. Separou-se a fase orgânica, lavouse com água e solução saturada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. A purificação foi efetuada por cromatografia rápida em sílica-gel (40g, heptano/EtOAc de 85/15). Recolheram-se as frações puras e evaporou-se o solvente para dar origem a 650 mg do intermediário (A43).

b) Preparação do	F. p-O Cl	do intermediário (A44)
	R
e	Cl	do intermediário (A45)

[00275] Agitou-se uma solução do intermediário (A43) (800 mg, 2,33 mmol) em HCI (37% em água, 25 mL) durante 30 minutos ao refluxo e arrefeceu-se depois à temperatura ambiente. Verteu-se a mistura reacional para cima de gelo moído e adicionou-se K₂CO₃ sólido em pequenas porções (até pH=9 - 10), e extraiu-se depois duas vezes com DCM. Juntaram-se as fases orgânicas, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida preparativa em sílica-gel (5pm, 150x30,Omm, fa67/118 se móvel (gradiente de 0,2% de NH₄OH, 98% de DCM, 2% de MeOH a 1% de NH₄OH, 90% de DCM, 10% de MeOH). Recolheram-se duas frações e evaporou-se o solvente para dar origem a 325 mg do intermediário (A44) e a 90 mg do intermediário (A45).

a) Preparação do [00276] Reação sob N₂. Adicionou-se n-Butil-lítio (1,6 M em hexano, 10,55 mL, 16,88 mmol) gota a gota a -78°C a uma solução de 2bromotiofeno (1,5 mL, 15,47 mmol) em éter dietílico (7,5 mL) e agitouse então a mistura durante 30 minutos. Adicionou-se uma solução do intermediário (A24) (3 g, 14,07 mmol) em éter dietílico (7,5 mL). A mistura foi agitada e deixada vir à temperatura ambiente durante 2 horas. Adicionaram-se água e EtOAc, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água e depois solução saturada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida preparativa em sílica-gel (15-40pm, 90 g, fase móvel (80% de heptano, 20% de EtOAc)). Recolheram-se as frações puras e evaporou-se o solvente para dar origem a 2,65 g do intermediário (A46).

b) Preparação do (TVa nh intermediário (A47) i <_s \—/ i ___ ______ _L___________i [00277] Agitaram-se o intermediário (A46) (6,3 g, 21,18 mmol) e HCI concentrado (15 mL) em ácido acético (45 mL) ao refluxo durante 45 minutos. Evaporaram-se os solventes. Adicionaram-se água e DCM. Adicionou-se K₂CO₃ sob a forma de pó para basificar e removeu-se a fase orgânica. A fase aquosa foi saturada com K₂CO₃ sob a forma de pó e extraída com uma mistura de solventes de DCM com metanol (95/5). Combinaram-se ambas as fases orgânicas, evaporouse à secura e purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna em

68/118 sílica-gel (15-40pm, 100 g) com uma mistura de solventes de DCM/metanol/NH4OH (92/7/1), dando origem ao intermediário (A47).

[00278] Reação sob N₂. Adicionou-se bromo(2,3-diclorofenil) magnésio (0,75M em Et₂O, 15 mmol, 20 mL) gota a gota a uma solução do intermediário (A24) (2,1 g, 10 mmol) em THF (20 mL) a 0°C, depois a mistura foi agitada 3 horas a 5°C. Adicionaram-se NH₄CI (solução aquosa a 10%) e EtOAc, a fase orgânica foi separada, lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio, seca (MgSO₄) e evaporada à secura. O produto impuro foi cristalizado de heptano/EtOAc 80/20 e seco ao ar, dando origem a 700 mg do intermediário (A49).

b) Preparação do	Q-O Cl Cl	intermediário (A50)
e	NH cr ci	do intermediário (A51)

[00279] Agitou-se uma solução do intermediário (A49) (700 mg, 1,694 mmol) em HCI (37% em água, 20 mL) durante 30 minutos ao refluxo e arrefeceu-se depois à temperatura ambiente. Verteu-se a mistura reacional para cima de gelo moldo e adicionou-se K₂CO₃ sólido em pequenas porções (até pH=9 - 10), e extraiu-se depois duas vezes com DCM. Juntaram-se as fases orgânicas, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida preparativa em sílica-gel (5pm, 150x30,0mm, fase móvel (gradiente de 0,2% de NH₄OH, 98% de DCM, 2% de MeOH a 1,1% de NH₄OH, 89% de DCM, 11% de MeOH). Recolheram-se as frações puras e evaporou-se 0 solvente, dando origem ao intermediário (A50) e a uma segunda fração. A segunda fração foi purificada por

69/118 cromatografia líquida preparativa (sílica-ge! 5pm, 150x30,Omm, fase móvel (gradiente de 0,2% de NH₄OH, 98% de DCM, 2% de MeOH a 1,1% de NH₄OH, 89% de DCM, 11% de MeOH)). Recolheram-se as frações puras e evaporou-se o solvente, dando origem ao intermediário (A51).

[00280] Reação sob N₂. Adicionou-se bromo[3-(trifluorometoxi)fenil]magnésio (0,5M em Et₂O, 4,15 mmol) gota a gota a uma solução do intermediário (A24) (0,6 g, 2,77 mmol) em THF (10 mL) a 0°C e de se guida a mistura foi agitada 3 horas a 5°C . Adicionaram-se NH₄CI (solução aquosa a10%) e EtOAc, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água e depois solução saturada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. A purificação foi efetuada por cromatografia rápida em sílica-gel (40g, heptano/EtOAc de 80/20). As frações puras foram recolhidas e concentradas, dando origem a 250 mg do intermediário (A52).

b) Preparação do	f3c-o Q-O	do intermediário (A53)
e	F3C_C< \ 7—	do intermediário (A54)

[00281] Agitou-se uma solução do intermediário (A52) (240 mg, 0,639 mmol) em HCl (37% em água, 10 mL) durante 30 minutos ao refluxo e arrefeceu-se depois à temperatura ambiente. Verteu-se a mistura reacional para cima de gelo moído e adicionou-se K₂CO₃ sólido em pequenas porções (até pH=9 - 10), e extraiu-se depois duas vezes com DCM. Juntaram-se as fases orgânicas, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se. O resíduo (136 mg) foi purificado por cromatografia em coluna em sílica-gel (15-40 pm, 25 g) com uma

70/118 mistura de solventes de DCM/metanol/acetonitrila (92/7/1) para dar 86 mg do intermediário (A53) e 33 mg do intermediário (A54).

a) Preparação do

do intermediário (A55) [00282] Reação sob N₂. Adicionou-se bromo(2-trifluorometoxi)fenil]magnésio (1M em Et₂O, 13,7 mmol) gota a gota a uma solução do intermediário (A24) (1,95 g, 9,1 mmol) em THF (20 mL) a 0°C, depois a mistura foi agitada 3 horas a 5°C. Adicionaram-se NH₄CI (solução aquosa a 10%) e EtOAc, a fase orgânica foi separada, lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio, seca (MgSO₄) e evaporada à secura. A purificação foi efetuada por cromatografia rápida em sílica-gel (40g, heptano/EtOAc de 80/20). As frações puras foram recolhidas e concentradas, dando origem a 550 mg do intermediário (A55).

b) Preparação do	O-CFj	do intermediário (A56)
e	qO o-cf3	do intermediário (A57)

[00283] Agitaram-se o intermediário (A55) (450 g, 1,2 mmol) e HCI concentrado (1,5 mL) em ácido acético (4,5 mL) ao refluxo durante a noite. Evaporaram-se os solventes. Adicionaram-se água e DCM. Adicionou-se K₂CO₃ sob a forma de pó para basificar. Removeu-se a fase orgânica e evaporou-se e purificou-se o produto impuro (350 mg) por cromatografia líquida preparativa (sílica-gel 5pm, 150x30,Omm, fase móvel (gradiente de 0,2% de NH₄OH, 98% de DCM, 2% de MeOH a 1,2% de NH₄OH, 88% de DCM, 12% de MeOH)). Recolheram-se duas frações e evaporou-se o solvente, dando origem a 140 mg do intermediário (A56) e a 63 mg do intermediário (A57).

71/118

Preparação do

intermediário (A58); também referido como intermediário (A1) [00284] Adicionou-se cloridrato de hexa-hidro-1-(fenilmetil)-4/-/ azepin-4-ona (56 g, 233 mmol) a Na₂CO₃ (saturado, solução aquosa,

1000 mL) e EtOAc (1000 mL). A mistura foi agitada durante 30 minu tos. A fase orgânica foi separada, a fase aquosa foi extraída com EtOAc (1000 mL). As fases orgânicas combinadas foram secas com

Na₂SO₄, filtradas e o solvente do filtrado evaporado. Hidrogenaram-se o resíduo e dicarbonato de terc-butila (66 g, 300 mmol) em EtOAc (800 mL) à temperatura ambiente (0,4 MPa) com Pd(OH)₂ (15 g) como catalisador. Após captação de hidrogênio (1 equivalente), o catalisador foi separado por filtração e o filtrado evaporado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em sílica-gel (eluente: éter de petróleo / EtOAc 3/ 1). Recolheram-se as frações do produto e evaporou-se o solvente, dando origem a 49 g do intermediário (A58).

a) Preparação do

intermediário (A59) [00285] Introduziram-se Mg ( 0,34 g, 14 mmol), algumas gotas de uma solução de 1-bromo-3-metóxi-benzeno (1,1 ml, 9,28 mmol) em

THF (5 mL) e iodo (0,01 g) em THF (30 mL) em um balão de três tubu laduras anidro equipado com uma entrada de nitrogênio, um funil, e um condensador de refluxo. A mistura foi cuidadosamente aquecida até a reação se iniciar, e de seguida a restante solução de 1-bromo-3metóxi-benzeno foi adicionada gota a gota a uma taxa que manteve o refluxo. Continuou-se a agitação até o iodo ter desaparecido por com pleto (cerca de 1 hora). Então a mistura foi arrefecida a 0°C. Adicio nou-se a solução do intermediário (A58) (2,0 g, 9,38 mmol) em THF(10 mL) à mistura. A mistura reacional foi agitada em um banho de gelo, e depois aquecida até à temperatura ambiente. A mistura reacional foi desativada com uma solução saturada de NH₄CI (20 mL) e agitada à

72/118 temperatura ambiente durante a noite. A fase orgânica foi separada e a fase aquosa extraída com EtOAc (3 x 50 mL). As fases orgânicas combinadas foram secas com Na₂SO₄, filtradas e o solvente do filtrado evaporado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em sílica-gel (eluente: éter de petróleo / EtOAc 10/1). Recolheram-se as frações do produto e evaporou-se o solvente, dando origem a 2,3 g do intermediário (A59).

b) Preparação do

intermediário (A60) [00286] A uma solução do intermediário (A59) (2,0 g, 6,5 mmol) em DCM (30 mL) adicionou-se gota a gota TFA (20 mL) a 0°C. Depois da adição, a mistura foi agitada durante 2 horas à temperatura ambiente. A mistura reacional foi concentrada (<35°C). A mistura foi repartida com uma solução saturada de cloreto de sódio (20 mL), Na₂CO₃ (5 g) e EtOAc (20 mL), e a fase aquosa extraída com EtOAc (3 x 20 mL). As fases orgânicas combinadas foram secas com Na₂SO₄, filtradas e o solvente evaporado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (eluente: DCM/ MeOH 30/ 1). Recolheram-se as frações puras e evaporou-se o solvente, dando origem a 0,2 g do intermediário (A60).

[00287] Os compostos que se seguem foram preparados usando o mesmo procedimento que no exemplo acima, em que 1-metóxi-3-metilbenzeno foi substituído por 1-bromo-2-metil-benzeno, 2-bromo-4fluoro-1 -metóxi-benzeno, 1 -bromo-4-cloro-benzeno, 1 -bromo-2-metóxibenzeno, 2-bromo-4-fluoro-1 -metil-benzeno, 1 -bromo-4-metóxi-benzeno, 1-bromo-3-metóxi-benzeno, 1-bromo-3-cloro-benzeno ou 1-bromo2-cloro-benzeno respectivamente.

73/118

[00288] Agitou-se uma solução de 1-bromo-2-fluoro-benzeno (1,48g, 8,5mmol) em THF anidro (50 mL) sob nitrogênio a -78°C durante 30 minutos e adicionou-se depois n-butil-lítio (2,5 M em hexano, 3,5 mL, 10,1 mmol) gota a gota a -78°C durante 5 a 10 minutos e a mistura formada foi agitada durante 30 minutos. Adicionou-se então o intermediário (A58) (1,5 g, 101 mmol) em THF (10mL) por meio de uma seringa. Depois da adição, retirou-se o banho de arrefecimento. A mistura reacional foi agitada durante 1 hora, depois desativada com HCI 1N (200 mL). A mistura foi extraída com DCM (3 x 100 mL). As fases orgânicas combinadas foram separadas e secas com Na₂SO₄ anidro, depois filtradas e concentradas em vácuo.

[00289] O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com

74/118 sílica-gel (eluente: éter de petróleo / EtOAc 10/ 1). Recolheram-se as frações puras e evaporou-se o solvente, dando origem a 1,54 g do intermediário (A73).

b) Preparação do

intermediário (A74) [00290] A uma solução do intermediário (A73) (1 g, 3,2 mmol) em

DCM (20 mL) adicionou-se gota a gota TFA (15 mL) a 0°C. Depois da adição, a mistura foi agitada durante 2 horas à temperatura ambiente.

A mistura reacional foi concentrada (<35°C). A mistura foi repartida com uma solução saturada de cloreto de sódio (5 mL), Na₂CO₃ (5 g) e EtOAc (50 mL), e a fase aquosa extraída com EtOAc (3 x 50 mL). As fases orgânicas combinadas foram secas com Na₂SO₄, filtradas e o solvente evaporado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (eluente: DCM/ MeOH 30/ 1). Recolheram-se as frações puras e evaporou-se o solvente, dando origem a 0,6 g do intermediário (A74).

[00291] Os compostos que se seguem foram preparados usando o mesmo procedimento que o do exemplo acima, em que 1-bromo-2fluoro-benzeno foi substituído por 2-bromo-1-fluoro-3-metóxi-benzeno ou 2-bromo-1,4-dimetil-benzeno respectivamente.

Intermediário (75)

Intermediário (76)

a) Preparação do

intermediário (A77) [00292] A uma solução do intermediário (A58) (5 g,23 mmol) em

THF (100 mL) adicionou-se LDA (23 mL, 46 mmol) a -78°C. A mistura

75/118 foi agitada durante 0,5 horas a - 50°C. Adicionou-se iodometano (6,5 g, 46 mmol) à mistura e agitou-se durante a noite à temperatura ambiente. A mistura reacional foi inativada com 100 mL de solução saturada de cloreto de sódio. A fase orgânica foi separada e a fase aquosa extraída com EtOAc. As fases orgânicas foram combinadas e concentradas. O produto impuro foi purificado por cromatografia em coluna em sílica-gel (eluente: éter de petróleo / EtOAc 9/1). Recolheram-se as frações do produto e evaporou-se o solvente, dando origem a 3 g do intermediário (A77).

intermediário (A78) [00293] A uma solução do intermediário (A77) (1,7 g, 7,5 mmol) em THF (50 mL) adicionou-se bromofenilmagnésio (3M, 3,7 mL, 11,2 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura reacional foi inativada com 50 mL de solução saturada de cloreto de sódio. A fase orgânica foi separada e a fase aquosa extraída com EtOAc. As fases orgânicas foram combinadas e concentradas. O produto impuro foi purificado por cromatografia em coluna em sílica-gel (eluente: éter de petróleo / EtOAc 1/1). Recolheram-se as frações do produto e evaporou-se o solvente, dando origem a 0,5 g do intermediário (A78

c) Preparação do intermediário (A79) [00294] Refluxou-se uma mistura do intermediário (A78) (0,5 g, 1,64 mmol) em HCI (10 mL, 6 mol/ L em água) durante a noite. O solvente foi removido sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo com 20 mL de água. A solução formada foi basificada a pH 10 com K₂CO₃. A solução resultante foi extraída com EtOAc (4 x 50 mL). As fases orgânicas foram combinadas e concentradas, dando origem a 0,3 g do interme

76/118 diário (A79),

Exemplo B - Preparação do Intermediário B

Jntermed>áno Θ [00295] DIPEA, Pd(OAc)₂,tri-0-tolilfosfina, DMF, ACN, pW 180°C;

b) HATU, DIPEA, DMF, 70°C; c) TFA, HCI em dioxano, DCM, RT

Preparação do intermediário (B3):

Intermediário B1 Intermediário B2 Intermediário 03

Preparação do intermediário B1 [00296] Uma solução de 2-amino-5-bromopiridina (4 g, 23,12 mmol), terc-butil-acrilato (13,42 mL, 92,48 mmol) e N,/V-di-isopropiletilamina (7,64 mL, 46,24 mmol) em DMF (60 mL) e ACN (20 mL) foi agitada e desgaseificada com N₂ durante 10 minutos. Adicionaram-se acetato de paládio (0,52 g, 2,32 mmol) e tri-O-tolilfosfina (1,41 g, 4,63 mmol) e a solução foi aquecida a 180°C usando um sistema de micro-ondas de cavidade multimodal CEM® MARS com uma potência variando de 0 a 400 W durante 30 minutos. A mistura reacional foi filtrada através de uma pequena camada de Celite® e lavada com EtOAc. A fase orgânica foi lavada com água, seca com MgSO₄, filtrada e evaporada à secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (SiOH 20-45pm, 450 g, eluente: 0,1% de NH₄OH, 97% de DCM, 3% de MeOH). Originou-se: Intermediário B1 como um pó amarelo pálido (3,55 g, 70%).

77/118

Preparação do intermediário B2 [00297] Agitou-se uma solução do Intermediário B1 (0,8 g, 3,63 mmol), ácido 5-metilnicotínico (0,9 g, 6,54 mmol), hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1 -il)-A/,N,N‘,Λ/'-tetrametilurónio CAS [148893-1 ΟΙ] (2,49 g, 6,54 mmol) e N,/V-di-isopropiletilamina (1,4 mL, 7,99 mmol) em DMF seco (16 mL) durante a noite a 70°C. A mistura foi vertida para dentro de água. A fase orgânica foi extraída com CH2CI2. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com solução saturada de cloreto de sódio, secas com MgSO₄, filtradas e concentradas. O resíduo foi cristalizado de EtOH para se obter um pó bege pálido. Rendimento: (50140532-AAA) 0,86 g (70%).

Preparação do intermediário B3 [00298] Adicionou-se ácido trifluoroacético (4,9 mL, 63,35 mmol) a uma solução do intermediário B2 (0,86 g, 2,53 mmol) em CH₂CI₂ (9 mL).A mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas, concentrada sob pressão reduzida e depois triturada com Et₂O, separada por filtração e seca sob vácuo. O resíduo foi então triturado durante a noite em cloreto de hidrogênio 4M em dioxano (8,2 mL, 32,94 mmol), 0 sólido foi separado por filtração, lavado com Et₂O e seco sob vácuo (70°C). Rendimento: Intermediário B3 como um pó branco, 0,878 g, (99%).

Preparação do intermediário B5

Intermediário B1 intermediário B4 Intermediário B5

Preparação do intermediário B4 [00299] O Composto Intermediário B4 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário B2, partindo do Intermediário B1 e de ácido nicotínico CAS [59-67-6], Rendimento: 0,35 g, 29%.

Preparação do intermediário B5

78/118 [00300] O Composto Intermediário B5 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário B3, partindo do Intermediário B4. Rendimento: 0,99 g, 99%.

Preparação do intermediário B7

Preparação do intermediário B6 [00301] O Composto Intermediário B6 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário B2, partindo do Intermediário B1 e de ácido 5metoxinicotínico CAS [1044919-31-4], Rendimento: 0,74 g, 92%.

Preparação do intermediário B7 [00302] O Composto Intermediário B7 foi preparado de acordo com os procedimentos para preparar o Intermediário B3, partindo do Intermediário B6. Rendimento: 0,75 g, 97%.

Preparação do intermediário B9

Intermediário 31 Intermediário Bfi Intermediário Θ9

Preparação do intermediário B8 [00303] O Composto Intermediário B8 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário B2, partindo do Intermediário B1 e de succinato de monometila CAS [3878-55-5], Rendimento: 0,76 g, 65%.

Preparação do intermediário B9 [00304] O Composto Intermediário B9 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário B3, partindo do Intermediário B8. Rendimento: 0,40 g, 99%.

Preparação do intermediário B11

79/118

Intermediário B11

Preparação do intermediário B10 [00305] O Composto Intermediário B10 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário B2, partindo do Intermediário B1 e de ácido

3-furoico CAS [488-93-7], Rendimento: 0,35 g, 49%.

Preparação do intermediário B11 [00306] O Composto Intermediário B11 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário B3, partindo do Intermediário B10. Rendimento: 0,38 g, 91%.

Exemplo C (Compostos Finais)

Síntese de compostos finais (Composto C)

Preparação do composto C1

[00307] O Composto C1 foi preparado a partir de 2,3,6,7-tetra-hidro-

4-fenil-1 H-azepina CAS [324784-75-95-4] (Intermediário A3) e do Intermediário B5. Agitaram-se (por exemplo durante a noite) à temperatura ambiente cerca de um equivalente molar de 1:1 da azepina e do Intermediário B5, 1-hidroxibenzotriazol (cerca de 1,2 equivalente molar, comparativamente ao Intermediário B5), um agente de acoplamento tal como o cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (por exemplo cerca de 1,2 equivalente molar, comparativamente ao Intermediário B5), base (por exemplo trietilamina, por exemplo cerca de 3 equivalentes molares comparativamente ao Intermediário B5) e solvente (por exemplo diclorometano, THF, ou similares ou misturas

80/118 dos mesmos). A mistura foi vertida para dentro de água. A fase orgânica foi extraída com CH₂CI₂. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com solução saturada de cloreto de sódio, secas com MgSO₄, filtradas e concentradas. Se possível, o resíduo pode ser cristalizado por exemplo de etanol ou de outro solvente adequado, separado por filtração e seco sob vácuo, opcionalmente a temperatura elevada. [00308] Obteve-se: Composto C1 como um pó branco, 0,027 g, (21%). p.f. 186°C.

[00309] ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm) 11,27 (s, 1H), 9,14 (s, 1H), 8,76 (d, J = 4,41 Hz, 1H), 8,71 (br. s., 1H), 8,36 (d, J = 7,88 Hz, 1H), 8,28 - 8,33 (m, 1H), 8,22 - 8,27 (m, 1H), 7,51 - 7,59 (m, 2H), 7,27 7,40 (m, 5H), 7,20 - 7,26 (m, 1H), 5,97 - 6,07 (m, 1H), 3,67 - 3,98 (m, 4H), 2,72 - 2,83 (m, 2H), 2,51 - 2,60 (m, 2H).

Preparação do composto C2

[00310] O Composto C2 foi preparado do mesmo modo que o Composto C1, a partir de 2,3,6,7-tetra-hidro-4-fenil-1 H-azepina CAS [324784-75-95-4] (Intermediário A3) e do Intermediário B11. Obtevese: Composto C2 como um pó branco 0,024 g, (6%). p.f. 156°C.

[00311] ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm) 10,82 (s, 1H), 8,67 (br. s., 1H), 8,57 (s, 1H), 8,24 - 8,30 (m, 1H), 8,18 - 8,24 (m, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,53 (d, J= 15,45 Hz, 1H), 7,27 - 7,37 (m, 5H), 7,20 - 7,26 (m, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,07-6,00 (m, 1H), 3,66 - 3,97 (m, 4H), 2,74 - 2,83 (m, 2H), 2,54 (m, 2H).

Síntese de compostos finais em que R^x representa o anel (ii): Síntese dos Compostos Finais F

81/118

R⁴

X: Ο, NH

Preparação do intermediário D

Preparação do intermediário D1

Intermediário D1 [00312] O Composto Intermediário D1 foi preparado a partir de

2,3,6,7-tetra-hidro-4-(4-fluoro-2-metoxifenil)-azepina (que foi preparada de acordo com os procedimentos descritos nesse documento, ver por exemplo a preparação dos Intermediários A acima) em que uma solução de cloreto de acriloíla (por exemplo pelo menos um equivalente, tal como cerca de 1,2 equivalentes) em um solvente (por exemplo DCM) foi adicionada gota a gota ao material de partida (2,3,6,7-tetrahidro-4-(4-fluoro-2-metoxifenil)-azepina; 1 equivalente) e base (por exemplo trietilamina, pelo menos 1 equiv. tal como 1,2 equivalente) em um solvente (por exemplo DCM), mistura essa que pode ser agitada à temperatura ambiente, após o que se pode fazer o work-up da reação (por exemplo por adição de água e DCM, separando a fase orgânica, lavando com água, secando com MgSO₄ e evporando à secura) e o produto isolado de acordo com procedimentos-padrão (por exemplo cromatografia). Rendimento: 0,27g, 65 %.

82/118

Preparação do intermediário E ου θ

CAS[769109-93-5]

X: O, NH

Preparação do intermediário E2

CAS[769109-93-5] Intermediário E1 Intermediário E2

Preparação do intermediário E1 [00313] Uma mistura de cloridrato de glicina-metiléster (4,93 g, 39,3 mmol), 2-amino-5-bromo-3-bromoetilpiridina (10 g, 19,7 mmol) e trietilamina (13,7 mL, 98,3 mmol) em DMF (100 mL), em um tubo selado, foi aquecida a 120°C usando um micro-ondas monomodal (Iniciador EXP 60 da Biotage®) com uma potência variando de 0 a 400 W durante 10 minutos. Adicionaram-se CH₂CI₂ e um mínimo de água, separouse a fase orgânica, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. Õ resíduo (6 g) foi purificado por cromatografia rápida com sílica-gel (120 g, 15-40pm, fase móvel 100% de CH₂CI₂). As frações puras foram recolhidas e concentradas para dar origem a 3 g do intermediário E1. Preparação do intermediário E2 [00314] Sob fluxo de N₂, adicionou-se NaH (0,8g, 20,1 mmol ) em pequenos pedaços a uma solução do Intermediário E1 (4,6g, 16,8 mmol) em DMF (50mL) a 5°C e a mistura foi de seguida agitada durante 2 horas à temperatura ambiente. Adicionaram-se EtOAc e um mínimo de água, separou-se a fase orgânica, saturou-se a fase aquosa com NaCI e extraiu-se com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas (MgSO₄) e evaporadas à secura. O resíduo foi cristalizado

83/118 de EtOH, o precipitado separado por filtração e seco sob vácuo para dar 1,5 g (37%) do Intermediário E2.

Preparação do intermediário E4

CAS[769109-93-5] Intermediário E3 Intermediário E4

Preparação do intermediário E3 [00315] O Intermediário E3 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário E1, partindo de 2-amino-5-bromo-3-bromoetilpiridina e de glicolato de etila. Rendimento: 1,2 g, 22%.

Preparação do intermediário E4 [00316] O Intermediário E4 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário E2, partindo do Composto 4. Rendimento: 1,2 g, 27%.

Síntese do Composto Final F

[00317] O Composto F1 foi preparado do mesmo modo que descrito anteriormente no presente documento, partindo do Intermediário E2 e do Intermediário D1. O Intermediário D1 (1,5 equivalentes) e o Intermediário E2 (1 equivalente) em um solvente apropriado (por exemplo acetonitrila e DMF, ou similares) são agitados e desgaseificados com N₂ durante 10 minutos. Adicionam-se acetato de paládio (cat.) e tri-Otolilfosfina em um tubo selado. A solução é aquecida a 180°C usando um micro-ondas monomodal (Iniciado EXP 60 da Biotage®) com uma potência variando de 0 a 400 W durante 30 minutos. É feito o work-up da mistura reacional e isola-se o produto desejado (por exemplo por cromatografia). Rendimento: Composto F1, 0,170 g, (32%). p.f. 192°C.

84/118 [00318] ¹H RMN (400 ΜΗζ, DMSO-d₆) δ 9,72 (br. s„ 1H), 8,42 (s, 1H), 7,97 (br. s., 1H), 7,50 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 7,22 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 6,85 - 7,07 (m, 3H), 5,73 - 5,80 (m, 1H), 3,60 - 3,98 (m, 11H), 2,97 (br. s„ 1H), 2,59 (br. s„ 2H), 2,44 (br. s„ 2H).

Exemplo G

Composto G2

O O

U· sA

R1; Y Ο γ '· [00319] HOBT, EDCI, NEt₃, DCM, THF, RT, 18h; b) cloroformato de cloroetila, DCE, MeOH, 50°C, 1h; c) NaH, DMF, RT, 3h.

Preparação do Composto G1

[00320] Uma mistura de CAS [709649-93-4] (3,37 g, 5,80 mmol), CAS [324784-95-4] (1,21 g, 6,96 mmol; Intermediário A3), N'(etilcarbonimidoil)-N,N-dÍmetil-1,3-propanodiamina (1,33 g, 6,96 mmol), 1hidroxibenzotriazol (0,94 g, 6,96 mmol) e trietilamina (1,93 mL, 13,9 mmol) em CH₂CI₂ (70 mL) e THF (70 mL) foi agitada durante a noite à

85/118 temperatura ambiente. Adicionaram-se água e CH₂CI₂, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. O resíduo (3,13 g) foi extraído em EtOH, separado porfiltração e seco (vácuo, 60°C) para dar 2,56 g (87%) do Composto G1.

Preparação do Composto G2 [00321] Adicionou-se cloroformiato de 1-cloroetila (0,064 mL, 0,59 mmol) a uma solução do Composto G1 (250 mg, 0,49 mmol) em MeOH (5 mL) e agitou-se de seguida a mistura a 80°C durante 1 hora e evaporou-se à secura. Depois, adicionou-se dicloroetano (5 mL) ao precipitado resultante e agitou-se a mistura a 50°C durante 1 hora. A mistura resultante foi evaporada à secura. De seguida, o restante precipitado foi extraído com K₂CO₃ (10%) e EtOAc, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água e solução saturada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. O resíduo (0,3 g) foi purificado por cromatografia rápida em sílica-gel (15-40pm 10 g, gradiente da fase móvel de 100% de CH₂CI₂ a 96% de CH₂CI₂, 4% de CH₃OH, 0,1% de NH₄OH). As frações puras foram recolhidas e evaporadas à secura. O resíduo (0,080 g) foi cristalizado de EtOH, o precipitado separado por filtração e seco para dar 0,050 g (26%) de 448162946-ΑΑΑ (Composto G2). p.f. 216°C.

Preparação do Composto G3 [00322] Adicionou-se cloreto de acetila (14,6 pL, 0,21 mmol) a uma

86/118 solução do Composto G2 (50 mg, 0,13 mmol) em trietilamina (21,5 pL, 0,15 mmol) e CH₂CI₂ (2 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. Adicionaram-se água e CH₂CI₂, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e.evaporou-se à secura para dar 0,053 g do Composto G3.

[00323] ¹H RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 9,88 (br. s., 1H), 8,49 (br. s., 1H), 8,10 (s, 1H), 7,49 (d, J = 15,5 Hz, 1H), 7,19 - 7,37 (m, 6H), 5,99 - 6,05 (m, 1H), 4,71 (br. s., 2H), 4,44 (s, 2H), 3,76 - 3,92 (m, 4H),

2,77 - 2,84 (m, 2H), 2,52 - 2,58 (m, 2H), 2,05 (s, 3H).

Preparação do Composto G4

[00324] O Composto G4 foi preparado do mesmo modo que o Composto G3, partindo do Composto G2 e de cloreto de metanossulfonila. Rendimento: 0,030 g, (50%).

[00325] ¹H RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10,28 (br. s., 1H), 8,56 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,50 (d, J = 16 Hz 1H), 7,19 - 7,37 (m, 6H), 6,02 (m, 1H), 4,55 (s, 2H), 4,15 (s, 2H), 3,72 - 3,96 (m, 4H), 2,98 (s, 3H), 2,80 (m,2H), 2,54 (m, 2H).

Exemplo H

CAS[709649-77-4] Intermediário A47 Composto H2

Preparação do Composto H1

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[00326] Uma mistura de CAS [709649-77-4] (2,2 g, 4,57 mmol), CAS [324784-95-4] (0,95 g, 5,48 mmol; Intermediário A3), N'(etilcarbonimidoil)-N,N-dimetil-1,3-propanodiamina (1,05 g, 5,48 mmol), 1hidroxibenzotriazol (0,74 g, 5,48 mmol) e trietilamina (2,2 mL, 15,9 mmol) em CH₂CI₂ (40 mL) e THF (40 mL) foi agitada durante 48 horas à temperatura ambiente. Adicionaram-se água e CH₂CI₂, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. O resíduo (3,13 g) foi extraído em EtOH, separado por filtraçâo e seco (vácuo, 60°C) para dar 1,42 g (77%) do Composto H1. p.f. 201°C.

[00327] ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d₆) δ 10,37 (s, 1H), 8,52 (s, 1H),

8,17 (br. s„ 1H), 7,47 - 7,53 (m, 1H), 7,20 - 7,37 (m, 6H), 5,99 - 6,07 (m, 1H), 3,67 - 3,96 (m, 6H), 3,42 (s, 2H), 2,74 - 2,82 (m, 2H), 2,52-

2,48 (m, 2H), 2,37 (s, 3H).

Preparação do Composto H2

[00328] O Composto H2 foi preparado do mesmo modo que o

Composto H1, partindo de CAS [709649-77-4] e do Intermediário A47 (que foi preparado de acordo com os procedimentos descritos nesse documento, ver preparação do Intermediário A). Rendimento: Composto H2, 0,06 g (7,5%).

Exemplo I

Intermediários I

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Preparação dos Compostos Finais a partir do Intermediário I (por exemplo 14)

Intermediário 14

Preparação do intermediário 14

Intermediário It Intermediário 12

Intermediário 14 Intermediário 13 [00329] NaH, DMF, 80°C; b) Br₂, DMF, RT ; c) DIPEA, Pd(OAc)₂, triO-tolilfosfina, DMF, ACN, pW, 180°C; d) TFA, HCI em dioxano, DCM,

RT

Preparação do intermediário 11 [00330] A uma suspensão de NaH (0,77 g, 19,23 mmol) em DMF (15 mL) foi adicionada gota a gota uma solução de 2-amino-3hidroxipiridina (3 g, 27,24 mmol) em DMF (15 mL) à temperatura ambiente durante um período de 10 minutos e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 20 minutos. Adicionou-se gota a gota à mistura 2-bromoisovalerato de etila CAS [609-12-1] (2,63 mL, 16,03 mmol) durante um período de 20 minutos, agitou-se a mistura reacional à temperatura ambiente durante 1 hora e a 80^qC durante 2 horas. Após arrefecimento, adicionou-se água fria, e a mistura foi extraída com EtOAc. A fase orgânica foi sucessivamente lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio, seca com MgSO₄ e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida com sílica-gel (80 g, gradiente da fase móvel Heptano/EtOAc de 85/15 a 70/30). As frações puras foram recolhidas e o solvente removido. Obteve-se: Intermediário 11 como um pó branco, 1,14 g, (37%).

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Preparação do intermediário I2 [00331] A uma solução do Intermediário 11 (1,14 g, 3,26 mmol) em DMF (24 mL) foi adicionado gota a gota bromo (0,23 mL, 4,57 mmol). A mistura reacional foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura reacional foi vertida para dentro de água com agitação vigorosa. Adicionou-se EtOAc, separou-se a fase orgânica, secou-se com MgSO₄, separou-se por filtração e evaporou-se. O resíduo foi cristalizado de EtOH e seco. Obteve-se: Intermediário I2, 0,66 g, (75%).

Preparação do intermediário I3 [00332] O Composto Intermediário I3 foi preparado de acordo com os procedimentos para preparar o Intermediário B1 (descrito anteriormente nesse documento), partindo do Intermediário I2 e de acrilato de terc-butila. Originou-se: um pó branco, 0,31 g, (40%).

[00333] Preparação do intermediário I4 [00334] O Composto Intermediário I4 foi preparado de acordo com os procedimentos para preparar o Intermediário B3 (tal como descrito anteriormente nesse documento), partindo do Intermediário I3. Obtevese: um pó branco, 0,29 g, (89%).

Síntese de compostos finais em que R^x representa o anel (iii): Exemplos dos Intermediários J e Exemplos Finais K

A J K

Preparação do intermediário A [00335] Esses compostos são/foram preparados tal como descrito anteriormente nesse documento.

Preparação do intermediário J

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[00336] Et₃N, DMF, pW; b) NaH, DMF, RT; c) DIPEA, Pd(OAc)₂, triO-tolilfosfina, DMF, ACN, pW; d) TFA, HCI, DCM, RT

Preparação do intermediário J4

Intermediário J1

Intermediário J2

CAS[769109-93-5] CAS[1214686-81-3]

O

Intermediário J4

Intermediário J3

Preparação do intermediário J1 [00337] Uma solução de 2-amino-5-bromo-3-(bromometil)piridina (15,2 g, 30,3 mmol), cloridrato do éster metílico do ácido 3morfolinocarboxílico (5,5 g, 30,3 mmol) e trietilamina (21 mL, 151 mmol) em DMF (150 mL) e a solução foi aquecida a 120°C usando um sistema de micro-ondas de cavidade monomodal CEM® MARS com uma potência variando (50%) de 0 a 400 W durante 10 minutos em um recipiente aberto. Adicionaram-se água e EtOAc, separou-se a fase orgânica, lavou-se com água, solução saturada de cloreto de sódio, secou-se com MgSO₄, filtrou-se e evaporou-se à secura. Originou-se: Intermediário J1, 11,2 g, (quantitativo).

Preparação do intermediário J2

91/118 [00338] Adicionou-se NaH em pequenos pedaços a uma solução do Intermediário J1 (13,3 g, 40,3 mmol) em DMF (100ml_) à temperatura ambiente e a mistura foi de seguida agitada durante 5 horas à temperatura ambiente. Adicionaram-se água e EtOAc, separou-se o precipitado por filtração. Separou-se a fase orgânica, lavou-se com água e depois solução saturada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO₄) e evaporou-se à secura. Juntaram-se o resíduo e o precipitado e cristalizouse de EtOH. Obteve-se: Intermediário J2, 5 g, (42%).

Preparação do intermediário J3 [00339] Uma solução do Intermediário J2 (4 g, 13,42 mmol), acrilato de terc-butila (7,8 mL, 53,7 mmol) e Λ/,A/-di-isopropiletilamina (4,4 mL, 26,83 mmol) em DMF (30 mL) e ACN (80 mL) foi agitada e desgaseificada com N₂ durante 10 minutos. Adicionaram-se acetato de paládio (0,3 g, 1,34 mmol) e tri-O-tolilfosfina (0,82 g, 2,68 mmol) e a solução foi aquecida a 180°C usando um sistema de micro-ondas de cavidade multimodal CEM® MARS com uma potência variando de 0 a 400 W durante 30 minutos. A mistura reacional foi filtrada através de uma pequena camada de Celite® e lavada com EtOAc. A fase orgânica foi lavada com água, seca com MgSO₄, filtrada e evaporada à secura. O resíduo foi extraído em EtOH, filtrado e seco sob vácuo, dando origem a: Intermediário J3, 3,1 g, (67%).

Preparação do intermediário J4 [00340] Adicionou-se ácido trifluoroacético (17,5 mL, 227,25 mmol) a uma solução do intermediário J3 (3,1 g, 8,97 mmol) em CH₂CI₂ (30 mL).A mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos, concentrada sob pressão reduzida e depois triturada com Et₂O, separada por filtração e seca sob vácuo. Obteve-se: Intermediário J4, 3,6 g, (99%).

Preparação do intermediário J8

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CAS [769109-93-5] CAS[159361-07-4]

Intermediário J5

O

Intermediário J8

Preparação do intermediário J5 [00341] O Intermediário J5 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário J1, partindo de 2-arnino-5-bromo-3-(bromometil)piridina CAS [769109-93-5] e cloridrato de tiomorfolino-3-carboxilato de etila [159381-07-4], Rendimento: 2 g, quantitativo.

Preparação do intermediário J6 [00342] O Composto Intermediário J6 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário J2, partindo do Intermediário J5. Rendimento: 0,65 g, 46%.

Preparação do Intermediário J7 [00343] O Composto Intermediário J7 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário J3, partindo do Intermediário J6. Rendimento: 0,57 g, 76%.

Preparação do intermediário J8 [00344] O Composto Intermediário J8 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário J4, partindo do Intermediário J7. Rendimento: 0,66 g, 99%.

Preparação do intermediário J14

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boc

CAS(769109*93-3] CAS[129799-0S-2]

Intermediário J9 Intermediário J10

Intermediário

Preparação do intermediário J9 [00345] O Intermediário J9 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário J1, partindo de 2-amino-5-bromo-3-(bromometil)piridina CAS [769109-93-5] e ácido 1-(1,1-dimetiletil)-3-metilester-1,3piperazinodicarboxílico [129799-08-2], Obteve-se: goma castanha, 36 g, quantitativo.

Preparação do intermediário J10 [00346] O Intermediário J10 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário J2, partindo do Intermediário J9. Obteve-se: Intermediário J10 como um pó branco, 13,8 g, 60%.

Preparação do Intermediário J11 [00347] Adicionou-se ácido trifluoroacético (15,5 mL, 201 mmol) a uma suspensão do Intermediário J10 (8,00 g, 20,1 mmol) em DCM (90 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 20 horas e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em diclorometano (200 mL) e lavado com solução aquosa saturada de NaHCO₃ (200 mL). A camada aquosa foi extraída com diclorometano (20 x 50 mL). As fases orgânicas combinadas foram secas (Na₂SO₄), filtradas e concentradas sob pressão reduzida. Obteve-se: Intermediário J11 como um sólido amarelo, 6 g, 100%.

94/118

Preparação do Intermediário J12 [00348] Adicionou-se cloreto de acila (1,86 mL, 26,0 mmol) a uma solução do Intermediário J11 (5,95 g, 20,0 mmol) e trietilamina (3,91 mL, 28,0 mmol) em DCM (100 mL) a 0°C. Deixou-se a mistura atingir a temperatura ambiente e agitou-se durante 3 dias. A mistura reacional foi diluída com diclorometano (150 mL) e lavada com água (250 mL). A fase orgânica foi seca (Na₂SO₄), filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi triturado em etanol (30 mL) e seco sob vácuo. Obteve-se: Intermediário J12 como um sólido branco, 1,41 g, 21%. Preparação do Intermediário J13 [00349] O Intermediário J13 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário J3, partindo do Intermediário J12. Obteve-se: Intermediário J13 como uma espuma laranja, 1,38 g, 86%.

Preparação do intermediário J14 [00350] O Intermediário J14 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário J4, partindo do Intermediário J13. Obteve-se: Intermediá rio J14 como um produto branco, 1 g, 94%.

Preparação do intermediário J16

Preparação do intermediário J15 [00351] O Intermediário J10 (4,30 g, 10,8 mmol) foi suspenso em uma mistura de DMF (20 mL) e acetonitrila (60 mL). Adicionaram-se acrilato de metila (2,92 mL, 32,5 mmol), di-isopropiletilamina (3,96 mL,

22,7 mmol), e tri-o-tolilfosfina (0,659 g, 2,16 mmol). A mistura resultante foi purgada com árgon e adicionou-se acetato de paládio (0,243 g;

95/118

1,08 mmol). A mistura foi purgada novamente com árgon e agitada sob refluxo (banho de óleo a 110°C) durante 19 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em ace tato de etila (500 mL) e lavado com solução aquosa saturada de NaHCOa (300 mL), e depois com solução saturada de cloreto de sódio (300 mL). A fase orgânica foi seca (Na₂SO₄), filtrada e concentrada. O resíduo (6,15 g) foi purificado por cromatografia em coluna com sílicagel (gradiente da fase móvel acetato de etila/metanol de 100/0 a 95/5). As frações do produto foram recolhidas e o solvente evaporado. O resíduo foi triturado em etanol (30 mL) e seco sob vácuo (40 °C, 1 h). Obteve-se: Intermediário J15 como um sólido branco, 3,37 g, (77%). Preparação do intermediário J16 [00352] Adicionaram-se hidróxido de sódio (0,670 g, 16,7 mmol) e água (8 mL) a uma solução do Intermediário J15 (3,37 g, 8,38 mmol) em THF (32 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 20 horas e depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água (30 mL) e adicionou-se HCI concentrado (~1.4 mL) até pH~5-6. O precipitado foi separado por filtração em um filtro de vi dro calcinado, lavado com água (15 mL) e seco sob vácuo. Originouse um sólido branco, 2,45 g, (75%).

Preparação do intermediário J20

Intermediário J20

Intermediário J17

96/118 [00353] O Intermediário J17 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário J1, partindo de 2-amino-5-bromo-3-(bromometil)piridina CAS [769109-93-5] e éster metílico do ácido 1 H-imidazol-5-carboxíllico [17325-26-7], Obteve-se: 1,42 g, 11%.

Intermediário J18 [00354] O Intermediário J18 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário J2, partindo do Intermediário J17. Obteve-se: 0,54 g, 49%.

Intermediário J19 [00355] O Intermediário J19 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário J3, partindo do Intermediário J18. Obteve-se: 0,17 g, 29%.

Intermediário J20 [00356] O Intermediário J20 foi preparado do mesmo modo que o Intermediário J4, partindo do Intermediário J19. Obteve-se: 0,23 g, 66%.

Síntese dos Compostos Finais K

Preparação do Composto K1 [00357] O Composto K1 foi preparado a partir de 2,3,6,7-tetra-hidro-

4-fenil-1 H-azepina CAS [324784-75-95-4] (Intermediário A3) e do Intermediário J8. Obteve-se: Composto K1, 0,160 g, (66%). p.f. 224°C.

[00358] ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d₆) δ 10,55 (br. s„ 1H), 8,59 -

8,62 (m, 1H), 8,12 - 8,19 (m, 1H), 7,50 - 7,56 (m, 1H), 7,27 - 7,37 (m, 5H), 7,19-7,26 (m, 1H), 5,99-6,06 (m, 1H), 3,58-4,00 (m, 6H), 2,51 -

3,18 (m, 11H).

Exemplo L - Preparação dos compostos em que R^x = (iii) e o anel

97/118 contendo Z² tem 8 membros

Intermediário L3

acoplamento de amida

Elapa 6

Geral: Todas as experiências para a síntese do esquema acima foram realizadas sob atmosfera de árgon usando solventes anidros.

Etapa 1: A preparação do Intermediário L2 foi efetuada por reação na presença do Intermediário L1, SOCI₂ (por exemplo 4 equivalentes) e MeOH (por exemplo ao refluxo).

Etapa 2: Preparação do intermediário L3 [00359] Uma mistura do Intermediário L2 (1,47 g, 9,35 mmol), do sal de HBr da 3-bromo-5-bromometil-6-amino-piridina (3,24 g, 9,35 mmol) e /V-etildi-isopropilamina (6,50 ml, 37,3 mmol) em acetonitrila (40 mL) foi agitada ao refluxo durante 3 h, depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi extraído em solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (70 mL) e extraído com diclorometano (3 x 70 mL). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (2 x 100 mL), secas com sulfato de sódio, filtradas e então concentradas sob pressão reduzida. O composto impuro foi purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (eluente: clorofórmio) e seco sob vácuo para dar origem ao Intermediário L3 (2,67 g, 83 %) como um óleo amarelado.

Etapa 3: Preparação do intermediário L4 [00360] Adicionou-se hidreto de sódio (dispersão a 60% em óleo mineral, 0,437 g, 10,9 mmol) a uma solução do Intermediário L3 (2,67 g, 7,80 mmol) em DMF (85 mL). A mistura resultante foi agitada à tem

98/118 peratura ambiente por 3 h e de seguida desativada por adição de água (10 mL) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi extraído em água (80 mL) e extraído com diclorometano/metanol (9/1, 5 x 80 mL). As fases orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi extraído em diclorometano (100 mL), lavado com solução saturada de cloreto de sódio (5 x 80 mL), seco com sulfato de sódio e concentrado sob pressão reduzida. O produto obtido foi triturado com éter dietílico (10 mL), recolhido por filtração em um filtro de vidro calcinado, lavado com éter dietílico (10 mL) e seco sob vácuo para dar origem ao Intermediário L4 (1,25 g, 52 %) como um sólido amarelado.

[00361] Ponto de fusão: 216,1-225,6°C sob decomposição (Buchi M-560, rc/min).

Etapa 4: Preparação do Intermediário L5 [00362] O Intermediário L4 (0,270 g, 0,870 mmol) foi suspenso em uma mistura de DMF (3 mL) e acetonitrila (10 mL). Adicionaram-se acrilato de terc-butila (0,510 mL, 3,48 mmol), N-etildi-isopropilamina (0,320 mL, 1,84 mmol), e tri-o-tolilfosfina (0,0530 g, 0,174 mmol). A mistura resultante foi purgada com árgon e adicionou-se acetato de paládio (0,0195 g; 0,0870 mmol). A mistura foi purgada novamente com árgon, agitada sob refluxo durante a noite e à temperatura ambiente durante 2 dias, depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi extraído em solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (20 mL) e extraído com diclorometano (3 x 20 mL). As fases orgânicas combinadas foram secas com sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo impuro foi purificado por cromatografia em coluna em sílica-gel (eluente: diclorometano/metanol 98/ 2). O produto obtido foi extraído em diclorometano (10 mL), lavado com solução saturada de cloreto de sódio (3 x 20 ml), seco com sulfato de sódio, filtrado e concentrado sob pressão reduzida para dar origem

99/118 ao Intermediário L5 (0,253 g, 81%) como uma goma amarelada.

Etapa 5: Preparação do Intermediário L6 [00363] Uma mistura do Intermediário L5 (0,253 g, 0,708 mmol) e cloreto de hidrogênio 4M em 1,4-dioxano (7,00 ml, 28,0 mmol) foi agitada à temperatura ambiente durante a noite e a 40°C durante 25 h, O precipitado foi filtrado em um funil de vidro calcinado, lavado com dioxano (2x2 mL) e éter dietílico (3x2 mL), e seco sob vácuo para dar origem ao Intermediário L6 (0,174 g, 67 %) como um sal de cloridrato sob a forma de sólido amarelado (1,8 eq. de HCI de acordo com a titulação do cloreto).

Etapa 6: Preparação do Composto Final.

[00364] Pode ser realizada uma reação de acoplamento de amida com a amina apropriada e o intermediário L6, usando um reagente de acoplamento tal como o cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3etilcarbodiimida e outros reagentes/solventes tais como o monohidrato de 1-hidroxibenzotriazol, /V-etildi-isopropilamina e DMF/DMSO.

Exemplo M

Síntese de Intermediários em que X^x representa N

Condições:

[00365] NBS, ACN, refluxo, 3 h, 70% ; b) LiAIH₄ 1M em THF, THF, 5°C até à RT, durante a noite, 20%; c) PBr₃, DCM, RT, durante a noite, 90%; d) sarcosina-etiléster, Et₃N, DMF, pw, 120°C, 20 min, 53% ; e) NaH, DMF, RT, 3h, 25% ; f) DIEA, Pd(OAc)₂, tri-O-tolilfosfina, ACN, DMF, pw, 180°C, 25 min.

[00366] Assim, os compostos intermediários (e por conseguinte os

100/118 compostos finais) em que o anel R^x representa um anel monocíclico, bicíclico ou tricíclico em que X^x representa N, podem ser preparados de acordo com o procedimento descrito neste Exemplo M.

[00367] Os restantes compostos foram preparados de acordo com os métodos divulgados nesse documento.

X. Identificação do Composto

XI. LCMS [00368] Para a caracterização dos compostos da presente invenção por LCMS, foram utilizados os seguintes métodos.

Procedimento geral A [00369] A medição por LC foi realizada usando um sistema UPLC (Cromatografia Líquida de Ultra Desempenho) Acquity (Waters) compreendendo uma bomba binária com desgaseificador, um amostrador automático, um detector de arranjo de díodos (DAD) e uma coluna como especificada nos métodos respectivos abaixo, a coluna é mantida a uma temperatura de 40°C. O fluxo a partir da coluna foi conduzido para um detector de MS. O detector de MS foi configurado com uma fonte de ionização por eletroaspersão. A voltagem na agulha capilar foi de 3 kV e a temperatura da fonte foi mantida a 130°C no Quattro (espectrômetro de massa de triplo quadrupolo da Waters). Foi utilizado nitrogênio como gás de nebulização. A aquisição dos dados foi efetuada com um sistema de dados Waters-Micromass MassLynxOpenlynx.

Procedimento geral B [00370] A medição por HPLC foi realizada usando um sistema Alliance HT 2795 (Waters) compreendendo uma bomba quaternária com desgaseificador, um amostrador automático, um detector de arranjo de díodos (DAD) e uma coluna como especificada nos métodos respectivos abaixo, a coluna é mantida a uma temperatura de 30°C. O fluxo da coluna foi separado para um espectrômetro de MS. O detector de MS

101/118 foi configurado com uma fonte de ionização por eletroaspersão. A voltagem na agulha capilar foi de 3 kV e a temperatura da fonte foi mantida a 100°C no LCT (espectrômetro de massa de Tempo de Vôo Zspray™ da Waters). Foi utilizado nitrogênio como gás de nebulização. A aquisição dos dados foi efetuada com um sistema de dados WatersMicromass MassLynx-Openlynx.

Método 1 [00371] Para além do procedimento geral A: A UPLC de fase reversa foi realizada em uma coluna C18 Waters Acquity BEH (híbrido de etilsiloxano/sílica em ponte) (1,7 pm, 2,1 x 100 mm) com uma taxa de fluxo de 0,35 mL/minuto. Duas fases móveis (fase móvel A: 95 % de acetato de amônio 7 mM/5 % de acetonitrila; fase móvel B: 100 % de acetonitrila) foram empregues para correr uma condição de gradiente desde 90 % de A e 10 % de B (mantido por 0,5 minutos) até 8 % de A e 92 % de B em 3,5 minutos, mantido por 2 minutos, e de novo para as condições iniciais em 0,5 minutos, mantido por 1,5 minuto. Foi usado um volume de injeção de 2 pL. A voltagem no cone foi de 20 V para os modos de ionização positiva e negativa. Os espectros de massa foram adquiridos por varredura de 100 a 1000 em 0,2 segundo usando um tempo de retardamento entre leituras de 0,1 segundo.

Método 2 [00372] Para além do procedimento geral A: A UPLC de fase reversa foi realizada em uma coluna C18 Waters Acquity BEH (híbrido de etilsiloxano/sílica em ponte) (1,7 pm, 2,1 x 100 mm) com uma taxa de fluxo de 0,343 mL/minuto. Duas fases móveis (fase móvel A: 95% de acetato de amônio 7 mM/5% de acetonitrila; fase móvel B: 100% de acetonitrila) foram empregues para correr uma condição de gradiente desde 84,2% de A e 15,8% de B (mantido por 0,49 minutos) até 10,5 % de A e 89,5% de B em 2,18 minutos, mantido por 1,94 minutos, e de novo para as condições iniciais em 0,73 minutos, mantido por 0,73 mi

102/118 nuto. Foi usado um volume de injeção de 2 μΙ_. A voltagem no cone foi de 20 V para os modos de ionização positiva e negativa. Os espectros de massa foram adquiridos por varrimento de 100 a 1000 em 0,2 segundo usando um tempo de retardamento entre canais de 0,1 segundo.

Método 3 [00373] Para além do procedimento geral Β: A HPLC de fase reversa foi realizada em uma coluna X-bridge C18 da Waters (3,5 pm, 4,6 x 100 mm) com uma taxa de fluxo de 0,8 mL/minuto. Duas fases móveis (fase móvel A: 100% de acetato de amônio 7 mM; fase móvel B: 100% de acetonitrila) foram empregues para operar uma condição de gradiente desde 80% de A e 20% de B (mantido durante 0,5 minuto) até 90% de B por 4,5 minutos, 90% de B por 4 minutos e reequilibrada com as condições iniciais durante 3 minutos. Foi usado um volume de injeção de 5 pL. A voltagem no cone foi de 20 V para os modos de ionização positiva e negativa. Os espectros de massa foram adquiridos por varredura de 100 a 1000 em 0,4 segundos usando um tempo de retardamento entre leituras de 0,3 segundo.

Método 4 [00374] Para além do procedimento geral Β: A HPLC de fase reversa foi realizada em uma coluna C18 Atlantis da Waters (5 pm, 3,9 x 100 mm) com uma taxa de fluxo de 0,8 mL/minuto. Três fases móveis (fase móvel A: 100% de acetato de amônio 7 mM; fase móvel B: 100% de acetonitrila; fase móvel C: 0,2% de ácido fórmico + 99,8% de água ultra-pura) foram empregues para operar uma condição de gradiente desde 50% de A e 50% de C (mantido durante 1,5 minuto) até 10% de A, 80% de B e 10% de C por 4,5 minutos, mantido por 4 minutos e reequilibrada com as condições iniciais durante 3 minutos. Foi usado um volume de injeção de 5 pL. A voltagem no cone foi de 20 V para os modos de ionização positiva e negativa. Os espectros de massa foram

103/118 adquiridos por varredura de 100 a 1000 em 0,4 segundo usando um tempo de retardamento entre leituras de 0,3 segundo.

Método 5 [00375] A medição por HPLC foi realizada usando um sistema HPLC 1100/1200 (Agilent) compreendendo uma bomba quaternária com desgaseificador, um dispositivo de autoamostragem, um detector de arranjo de díodos (DAD) e uma coluna como especificada nos métodos respectivos abaixo, a coluna é mantida à temperatura ambiente. O detector de MS (quadripolo simples do MS da Agilent) foi configurado com uma fonte de ionização por eletroaspersão-APCI. Foi utilizado nitrogênio como gás de nebulização. A aquisição de dados foi realizada com um sistema de dados Chemstation.

[00376] A HPLC de fase reversa foi realizada em uma coluna Nucleosil C18 (3 pm, 3 x 150 mm) com uma taxa de fluxo de 0,42 mL/minuto. Duas fases móveis (fase móvel A: água / TFA (0,1%) fase móvel B: 100 % de acetonitrila) foram empregues para correr uma condição de gradiente desde 98 % A por 3 minutos, até 100 % B em 12 minutos, 100 % B por 5 minutos, então de novo para 98 % A em 2 minutos, e reequilibrada com 98 % A por 6 minutos. Foi usado um volume de injeção de 2 pL. A voltagem do capilar foi de 2 kV, a descarga da corona foi mantida a 1 pA e a temperatura da fonte foi mantida a 250°C. Foi usada uma voltagem variável para o fragmentador. Espectros de massa foram adquiridos em ionização por eletropulverização e APCI em modo positivo, mediante varredura desde 100 até 1100 uma.

Método 6

Esse método emprega os seguintes parâmetros:

Agilent 1200 LC 6100 MS

Coluna: HALO C18(4,6*50 mm 2,7pm)

Fluxo: 1,8mL/min

A: H2O (0,05% FA) B: CH3CN(0,05%FA)

104/118

Tempo (min) Cone: (B%)

195

295

2,015

2,55

X2. Pontos de fusão [00377] Para vários compostos, os pontos de fusão foram obtidos com uma barra quente de Kofler, consistindo em uma placa aquecida com um gradiente linear de temperatura, um ponteiro deslizante e uma escala de temperaturas em graus Celsius.

[00378] Para um número de compostos, os pontos de fusão foram determinados com um calorímetro de varrimento diferencial (DSC). Os pontos de fusão foram medidos com um gradiente de temperatura de 10°C/minuto começando em 25 °C. A temperatura máxima foi de 350°C.

[00379] Para um número de compostos, os pontos de fusão foram obtidos com um aparelho de pontos de fusão da Büchi B-560. O meio de aquecimento foi um bloco metálico. A fusão da amostra foi visualmente observada com uma lente de amplificação e um grande contraste de luz. Os pontos de fusão foram medidos com um gradiente de temperaturas de 3 ou 10°C/minuto. A temperatura máxima foi de 300 °C.

[00380] Os restantes pontos de fusão foram determinados usando tubos capilares abertos.

Tabela X - dados de LC/MS e de pontos de fusão [00381] Para os Compostos em que R^x representa o anel (i)

Comp. N°	Tr	MH+	LCMS Método	Ponto de fusão (método)
1	2,74	425	2	186°C (Kofler)
2	2,96	414	2	156°C (Kofler)
3	2,84	473	2	122°C (Kofler)

105/118

4	2,89	428	2
5	2,95	487	2	120Ό (Kofler)
6	2,68	362	2	152’0 (Kofler)
7	2,62	348	2
8	3,2	428	2	192’C (Kofler)
9	3,21	424	2	158,31 °C / -70,01 Jg-1 (DSC)
10	2,87	428	2	138’C (Kofler)
11	2,61	414	2	120’C (Kofler)
12	3,31	362	1	188Ό (Kofler)
13	2,8	425	2	98’C (Kofler)
14	3,24	396	2	150’0 (Kofler)
15	3,07	402	2
16	3,1	429	2	169,37’C/-114,76 Jg-1 (DSC)
17	2,73	428	2	134’C (Kofler)
18	3,18	416	2	141’0 (Kofler)
19	2,97	390	2	158Ό (Kofler)
20	2,73	418	2	152Ό (Kofler)
21	3,19	320	1	184’0 (Kofler)
22	3,04	416	2	159Ό (Kofler)
23	2,53	320	2

Tabela de compostos em que R^x representa (ii), isto é, um biciclo

Comp. N°	Tr	MH+	LCMS Método	Ponto de fusão (método)
31	2,49	437	2	192’C (Kofler)
32	2,74	438	2	234Ό (Kofler)
33	1,26	409	6	125-126’C (X-4B)
34	2,43	389	2	203,18’C/-3,49 Jg-1 (DSC)
35	2,66	424	2	218,22’C/-48,79 Jg-1 (DSC)
36	2,43	389	2	203,18°C/-3,49 Jg-1 (DSC)
37	2,6	467	2
38	2,52	403	2	198,79’C/ -61,26J/g (DSC)
39	2,46	431	2
40	2,52	403	2	198,79’0/ -61,26J/g (DSC)
41	2,61	376	2	244,33’C/ -80,8 J/g (DSC)
42	2,99	465	2
43	1,25	409	6	212-213’C (X-4B)
44	3,02	509	2	198’C (Kofler)

106/118

Tabela de compostos em que R^x representa (iii), isto é, um triciclo

Comp. N°	Tr	MH*	LCMS Método	Ponto de fusão (método)
46	2,53	445	2	227,76°C/ -46,4 J/g (DSC)
47	2,4	486	2	208°C (Kofler)
48	13,62	534	5
49	2,76	461	2	224,06°C/ -60,35 J/g (DSC)
50	2,52	445	2	220°C (Kofler)
51	2,73	461	2	224°C (Kofler)
52	2,24	444	2	206°C (Kofler)

Y. Exemplos farmacológicos

Y.1 Inibição da enzima FabI : Ensaio de inibição da enzima FabI de Staphylococcus aureus [00382] Os ensaios de inibição da enzima FabI foram realizados em placas de microtitulação de 384 cavidades, em metade da área. Os compostos foram avaliados em misturas de ensaio de 40-pL contendo NaADA 100 mM, pH 6,5 (ADA = ácido N-[2-acetamido]-2-iminodiacético), crotonoílo-CoA 250 μΜ, NADH 625 μΜ e FabI ATCC 29213 de S. aureus 50 pg/mL. Os inibidores variaram tipicamente no intervalo de 50 a 0,39 μΜ. As misturas reacionais foram incubadas durante 30 minutos à temperatura ambiente e a reação foi terminada por adição de tampão Tris 200 mM (pH 9,0) para criar uma mudança de pH. O consumo de NADH foi monitorizado medindo a mudança na absorvância a 340. Comparando leituras das amostras com as dos controlos negativos (ausência de composto) e positivos (ausência de enzima), determinou-se a percentagem de inibição da atividade enzimática dos compostos. A curva mais ajustada é obtida pelo método dos mínimos quadrados. A partir dessa curva, obteve-se um valor de lC₅₀ (expresso em pg/mL), resultando em 50% de inibição da atividade enzimática.

[00383] Os resultados são apresentados na(s) tabela(s) abaixo (atividade da FabI).

107/118

Υ.2 Método in vitro para testar compostos quanto à atividade antibacteriana contra várias cepas bacterianas

Preparação de suspensões bacterianas para testes de suscetibilidade [00384] Usaram-se as bactérias seguintes: Staphylococcus aureus ATCC 29213, Staphylococcus aureus resistente a meticilina (MRSA) ATCC 700788 e Escherichia coli ATCC 35218. As bactérias usadas em esse estudo foram cultivadas por uma noite em balões contendo 100 mL de caldo de Mueller-Hinton (Difco n° catálogo 0757-17) em água desionizada esterilizada, com agitação, a 37°C. Os estoques foram armazenados a -70°C até à utilização.

[00385] As bactérias foram incubadas em uma placa de ágar de soja tríptica contendo 5 % sangue de ovelha (Becton Dickinson n° catálogo 254053) por 18-24 horas a 35°C em condições aeróbicas (primeira passagem). Para a segunda passagem, inocula-se caldo fresco de Mueller-Hinton com 5-10 colônias e o sistema é cultivado por uma noite a 35°C até ser alcançada turvação (alcançando a fase logarítmica) em condições aeróbicas. A suspensão bacteriana é então ajustada para a densidade de McFarland 0,5 e é adicionalmente diluída 1:100 em meio de caldo de Mueller Hinton. Essa é usada como inóculo.

[00386] O(s) resultado(s) é/são apresentado(s) na tabela abaixo (para STA ATCC 29213).

Teste de suscetibilidade antibacteríana: Determinação da IC₉₀ [00387] Os ensaios MIC foram efetuados pelo método da microdiluição do caldo em um formato de 96 cavidades (placas de microtitulação de fundo plano) com um volume final de 0,1 mL de caldo de Mueller Hinton contendo diluições em série de duas vezes dos compostos e inoculadas com 5x10⁵ CFU/mL de bactérias (tamanho-padrão do inóculo de acordo com as orientações CLSI). Os inibidores variam tipicamente no intervalo de 63 a 0,49 μΜ. A concentração final de DMSO no

108/118 ensaio foi 1,25 % (concentração máxima tolerável de DMSO = 6 %). Nos ensaios onde foi testado o efeito de soro humano na atividade dos compostos contra S. aureus, foi adicionado soro humano a uma concentração final de 10 %. As placas foram incubadas a 35°C por 16-20 horas. No final da incubação, o crescimento bacteriano foi quantificado fluorometricamente. Para essa finalidade, adicionou-se resazurina a todos os poços e as placas foram novamente incubadas. O tempo de incubação depende do tipo de bactérias. Uma alteração da cor de azul para rosa indicou o crescimento de bactérias. A fluorescência foi lida em um fluorômetro controlado computacionalmente (Fluoroskan Ascent FL, Labsystems) a um comprimento de onda de excitação de 540 nm e um comprimento de onda de emissão de 590 nm. A % de inibição do crescimento alcançada pelos compostos foi calculada de acordo com métodos-padrão. O IC₉₀ (expresso em pg/mL) foi definido como a concentração 90 % inibidora para o crescimento bacteriano. Um painel de compostos de referência foi simultaneamente testado para aprovação de CQ.

[00388] Os resultados são apresentados na(s) tabela(s) abaixo (STA+ HSa 10%).

Ensaios de Citotoxicidade [00389] A citotoxicidade dos compostos foi avaliada usando o ensaio de MTT. Células HelaM humanas cultivadas em placas de 96 poços foram expostas a diluições em série dos compostos testados (volume final de 0,2 mL) e incubadas por 72 horas a 37°C e 5 % de CO₂. Os inibidores variam tipicamente no intervalo de 25 a 0,8 μΜ. A concentração final de DMSO no ensaio é de 0,5 %. MTT (brometo de 3(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio, um tetrazol) foi adicionado e reduzido a formazano púrpura somente em células vivas. A solubilização dos cristais de formazano foi alcançada adicionando 100 pL de 2propanol. A viabilidade celular foi determinada medindo a absorvância

109/118 do formazano reduzido, originando uma cor púrpura, a 540 nm e 690 nm. A absorvância medida a 690 nm foi automaticamente subtraída da absorvância a 540 nm, para eliminar os efeitos de absorção inespecífica. A citotoxicidade percentual alcançada pelos compostos foi calculada de acordo com métodos comuns. A citotoxicidade é relatada como CC₅o, a concentração que causa uma redução de 50 % da viabilidade celular.

[00390] Os resultados são apresentados na(s) tabela(s) abaixo (HELAM).

Teste biológico [00391] Os compostos da invenção/exemplos foram testados nos ensaios descritos acima e verificou-se apresentarem uma certa inibição, tal como apresentado nas tabelas abaixo.

Tabela de compostos em que R^x representa (i), isto é, um monociclo

Exemplo	Comp. N°	STA (361,159) IC90 pg/mL	STA + 10% HS (361,169) IC90 pg/mL	HELAM (222,125) CC50 pg/mL	Fabl (300,235) IC50 pg/mL
	1	0,40	0,84	0,43	0,31
	2	0,44	1,43	> 10,39	0,49
0	3	0,45	1,68	1,13	0,77
0 ó	4	0,63	1,66	3,94	0,60
0 - IQ	5	0,66	2,83	7,80	0,87

110/118

Exemplo	Comp. N°	STA (361,159) IC90 pg/mL	STA+ 10% HS (361,169) IC90 pg/mL	HELAM (222,125) CC50 pg/mL	Fabl (300,235) IC50 pg/mL
d	0	6	0,69	1,90	>9,08	-0,29
XÁ	0 ) LA.J H	7	0,78	1,25	7,18	0,23
vj o	0 X1jl X/	8	0,84	6,70	5,64	0,91
A	'-X,.o	9	0,85	6,26	4,24	0,77
cF	X	10	0,92	2,07	5,44	0,82
X	%o	11	1,26	3,17	> 10,39	0,67
v_z	O jXXa H	12	1,30	1,90	> 9,08	0,22
<?	Ήλχ	13	1.41	3,08	4,29	0,53
ΛΆ	Ήχο H	14	1,45	24,11	6,27	0,89
o	0 X	15	2,84	11,85	6,59	-0,43

111/118

Exemplo	Comp. N°	STA (361,159) IC90 pg/mL	STA + 10% HS (361,169) IC90 pg/ml	HELAM (222,125) CC50 pg/mL	Fabl (300,235) IC50 pg/mL
0 o	16	3,29	6,71	7,89	0,66
c ) M T? O x	17	4,29	8,56	13,88	1,03
0 H 1 / o	18	6,29	> 26,22	2,62	0,85
0 C/^Xv r~—^ H rx	19	6,32	20,92	8,52	0,50
	20	6,69	11,77	10,02	0,39
0 ^==/ ΤΓ «H, w	21	6,75	12,86	4,78	1,24
p-XXL.	22	11,57	12,12	8,01	0,45
0 0	23	13,32	>20,15	5,30	0,96
0 Ο^'ΑΧλ / H rx	24	21,04	>22,8085	>9,08022	1,90

112/118

Exemplo	Comp. N°	STA (361,159) IC90 pg/mL	STA+ 10% HS ¢361,169) IC90 pg/mL	HELAM (222,125) CC50 pg/mL	Fabl (300,235) IC50 pg/mL
0 J w+	25	>25,461	>25,461	6,32	0,82
o	26	>25,461	>25,461	3,77	0,56
0 O iIXa. vz	27	>26,7848	>26,7848	3,83	0,89
0 CPXu /-C u w	28	>26,8466	26,24	>10,6878	0,51
0 o	29	>27,104	>27,104	3,15	1,33
	30	27,68	33,28	11,02	-0,736545

Tabela de compostos em que R^x representa (ii), isto é, um biciclo

Exemplo	Comp. N°	STA (361,159) IC90 pg/mL	STA+ 10% HS (361,169) IC90 pg/mL	HELAM (222,125) CC50 pg/mL	Fabl (300,235) IC50 pg/mL
Ç/XCQ / H 0	31	< 0,21	0,26	> 10,96	-0,407356
C^CQ / H 0 , X ./	32	0,22	0,41	10,14	0,55
0	33	0,32	0,26	> 10,26	0,51
cpypxl M \

113/118

Exemplo	Comp, N°	STA (361,159) IC90 pg/mL	STA+ 10% HS (361,169) IC90 pg/mL	HELAM (222,125) CC50 pg/mL	Fabl (300,235) IC50 pg/mL
j/xa \n H X°	34	0,37	0,38	> 9,76	0,35
___/ H	35	0,38	0,54	6,56	-0,43
0 (JT LAJ 'o	36	0,46	0,45	> 19,47	0,29
0 %/ JjCQ V w M 0	37	0,48	0,66	2,04	0,32
pX	38	0,50	0,46	> 10,11	0,33
0 0 4 j/XU Ϊ H °	39	0,51	0,75	> 10,81	0,32
0 H 0 ó	40	0,53	0,60	24,25	0,29
0 cAco. / H O	41	0,60	0,67	> 9,43	0,37
P P CQ	42	0,77	3,33	11,67	-0,70
XCú H 0	43	1,13	1,32	> 10,26	1,07

114/118

Exemplo	Comp. N°	STA (361,159) IC90 pg/mL	STA+ 10% HS (361,169) IC90 pg/mL	HELAM (222,125) CC50 pg/mL	Fabl (300,235) IC50 pg/mL
-o o 0 \	44	4,80	3,64	> 12,78	-1,43
Ub'CCÍ y-^ η o O	45	> 34,41	> 34,41	> 13,70	0,57

Tabela de compostos em que R^x representa (iii), isto é, um triciclo

Exemplo	Comp. N0	STA (361,159) IC90 pg/mL	STA+10% HS (361,169) IC90 pg/mL	HELAM (222,125) CC50 pg/mL	Fabl (300,235) IC50 pg/mL
0 O / H Ό O	46	< 0,22	0,53	>11,17	0,25
0 / H \ O	47	0,25	0,44	17,63	0,38
Y	48	<0,26	0,46	> 13,40	0,59
O	49	0,39	1,23	4,88	0,51
0 (T / H % O	50	0,64	1,58	22,02	0,31

115/118

Exemplo	Comp. N°	STA (361,159) IC90 pg/mL	STA+10% HS (361,169) IC90 pg/mL	HELAM (222,125) CC50 pg/mL	Fabl (300,235) IC50 pg/mL
O / H ‘O O	51	0,67	1,60	5,35	0,51
0 (jÇÇt o	52	6,56	4,75	> 11,14	9,48

Exemplo Z

Z.1 Solubilidade Termodinâmica [00392] O perfil de solubilidade em função do pH é efetuado à temperatura ambiente durante um período de 4 dias. É realizado um estudo de solubilidade de saturação para se determinar a solubilidade máxima em uma solução tampão particular. O composto é adicionado à respectiva solução-tampão até se atingir o ponto de saturação. Isso é seguido de agitação do frasco durante 4 dias à temperatura ambiente. Após 4 dias, as soluções são filtradas e injetadas em UPLC e determina-se a concentração usando um método genérico de HPLC.

Resultados [00393] Verifica-se que os compostos da invenção/exemplos apresentam boa solubilidade termodinâmica, os compostos podem apresentar por exemplo boas concentrações quando se empregam as seguintes soluções-tampão no teste acima: Tampão de pH 2, tampão de ΗΡ-β-CD a 10% com um pH 2, tampão de ΗΡ-β-CD a 20% com um pH 2, Tampão de pH 4, tampão de ΗΡ-β-CD a 10% com um pH 4, tampão de ΗΡ-β-CD a 20% com um pH 4, Tampão de pH 7,4, tampão de ΗΡβ-CD a 10% com um pH 7,4 e tampão de ΗΡ-β-CD a 20% com um pH

7,4.

Z.2 Espetro de Atividade Antimicrobiana [00394] As Concentrações Inibitórias Mínimas (MIC) são determi116/118 nadas de acordo com a metodologia do Instituto de Padrões Laboratoriais e Clínicos (CLSI) contra bactérias aeróbicas (CLSI M07-A8) (ver Instituto de Padrões Laboratoriais e Clínicos). 2009. Métodos para os testes de susceptibilidade antimicrobiana por diluição para bactérias que crescem aerobicamente. O documento do CLSI M07-A8, Vol. 29, N° 2.) pelo método de microdiluição do caldo com meio de caldo de Mueller-Hinton ajustado com cátions (CA-MHB) para a maioria dos organismos, exceto para Haemophilus influenza, em que é usado o caldo de meio de teste de Haemophilis (HTM), Podem ser encontradas descrições dos organismos individuais na tabela. Quando possível, testam-se cepas-padrão da ATCC.

[00395] A densidade do inóculo para o teste de suscetibilidade é padronizada para dar um inóculo final de aproximadamente 5x10⁵ CFU/mL. A MIC do caldo é determinada como a concentração' mínima de fármaco que preveniu o crescimento visível após 16-24 horas (dependente da espécie) de incubação a 35°C-37°C.

Tabela: Descrição dos organismos individuais testados

Organismo	Características	MIC do meio de teste
Staphylococcus aureus	ATCC 29213; cepa de referência MSSA	MHB
Staphylococcus aureus	ATCC 43300; cepa de referência MRSA	MHB
Staphylococcus aureus	NRS119; LZD-R; SCCmec IV; origem: US	MHB
Staphylococcus aureus	NRS120; LZD-R; SCCmec IV; origem: US	MHB
Staphylococcus aureus	NRS121; LZD-R; SCCmec IV; origem: US	MHB
Escheríchia coll	ATCC 25922; cepa de referência	MHB
Escherichia coll	mutante Tol C	MHB
Haemophilus influenzae	ATCC 49247; cepa de referência	caldo de HTM
Moraxella catarrhalis	ATCC 8176; b-lactamase negativa	MHB

[00396] São preparadas soluções-estoque dos compostos em DMSO a concentrações de 1 mg/mL. O Linezolid é preparado em DMSO a uma concentração de 2 mg/mL. Diluem-se soluções-estoque de todos os compostos em CA-MHB para dar um intervalo de diluições

117/118 de duas vezes, dependendo da sensibilidade do organismo a ser testado.

Resultados [00397] Verifica-se que os compostos da invenção/exemplos apresentam um espetro de atividade antibacteríana mais largo, pode verificar-se por exemplo que os compostos são ativos contra um número de cepas bacterianas, por exemplo S.aureus ATCC 29213, S.aureus NRS119, S.aureus NRS120, S.aureus NRS121, mutante tolC de E. coli, E. coli ATCC 25922, H. influenza ATCC 49247, M, catarrhalis ATCC 8176.

E.3 Farmacocinética In Vivo e Biodisponibilidade Oral [00398] A farmacocinética in vivo e a biodisponibilidade oral do composto dos exemplos foram/são investigadas em ratinhos macho Suíços (alimentados) depois da administração de um bólus intravenoso (i.v.) único e oral (p.o.). Para as formulações das soluções i.v. e p.o., o composto foi/é dissolvido em uma solução de ΗΡ-β-CD a 20%. O pH das formulações foi/é cerca de pH 4. Todas as formulações i.v. foram isotônicas.

Resultados [00399] Verifica-se que os compostos da invenção/exemplos apresentam boas propriedades farmacocinéticas in vivo e/ou de biodisponibilidade oral, pode verificar-se por exemplo que os compostos apresentam boas propriedades tal como medidas por parâmetros farmacocinéticos como, para formas i.v., depuração plasmática Cl, VD_Z, AUC e tempo de meia-vida, e, para formas p.o., C_max, T_max, AUC, meia-vida e biodisponibilidade oral em %.

E.4 Eficácia In Vivo [00400] O conceito de estudar o efeito in vivo de um composto antibacteriano tratando intraperitonialmente ratinhos infetados foi introduzido em 1911 para a optoquina contra pneumococci (Morgenroth e Le

118/118 vy, 1911). A popularidade do modelo provém da facilidade do seu uso com experiências de curta duração, infeções reprodutíveis e pontos finais simples.

Método [00401] Usa-se a cepa de S. aureus ATCC 29213 sensível à meticilina para infectar ratinhos fêmea albinos Suiços. Inocula-se uma cultura bacteriana de caldo Brain Heart Infusion (BHI) no dia anterior à infeção, incuba-se a 37°C durante a noite e dilui-se em caldo fresco BHI até à concentração desejada. Efetua-se uma injeção intraperitonial (i.p.) de ~5x10⁹ unidades formadoras de colônia (CFU) em um dos quadrantes inferiores laterais do abdômen. Após inoculação, os ratinhos são mantidos nas suas gaiolas sob observação diária para desenvolvimento de sinais de infeção ou morte. Para o tratamento dos ratinhos, tanto a via p.o. como i.v. podem ser utilizadas, e cada ratinho é tratado individualmente por gavagem ou por injeção i.v. Tanto as soluções como as suspensões são testadas nesse modelo. O parâmetro usado para monitorizar o curso da infeção e o efeito do tratamento é a morte ou a sobrevivência dos animais durante 3 dias pós-infeção. Uma vez que a morte podia também ser devida a efeitos secundários tóxicos, é incluído um grupo de controle de 3 ratinhos não infetados, tratados com a dose mais alta do composto testado.

Resultados [00402] Os compostos da invenção/exemplos apresentam boas propriedades de eficácia in vivo, por exemplo os compostos podem apresentar tais propriedades tal como medidas pela % de sobrevivência (seguindo o teste acima).

Claims (6)

1. REIVINDICAÇÕES

   1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula (I)

   em que cada Z^x representa independentemente -[C(R^z8)(R^z9)]n-, em que n é 1 ou 2;

   R^z8 e R^z9 representam independentemente hidrogênio ou um substituinte selecionado de entre R³ ou R⁴;

   R1 é hidrogênio, uma alquila C1-4 ou um halogênio;

   R2 é hidrogênio, uma alquila C1-4 ou um halogênio;

   R^x representa:

   (i)

   em que

   X^x representa C(H), C(R^y1) ou N;

   R^y1 representa um a três substituintes opcionais, cada um deles independentemente selecionado de entre hidrogênio, halogênio, -CN, -O-alquilaC1-6 ou alquila C1-6 (em que as duas últimas unidades alquila são opcionalmente substituídas com um ou mais átomos de flúor);

   cada R^y2 e R^y3 independentemente representa hidrogênio ou -Q1-R⁵;

   cada Q¹ independentemente representa uma ligação direta

   Petição 870190028675, de 26/03/2019, pág. 6/24
2. 2/8 ou -C(O)-;

   R⁵ representa hidrogênio, uma alquila C1-6, heterocicloalquila (em que cada um dos dois últimos grupos é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes independentemente selecionados de entre =O e Q²), arila ou heteroarila (em que os últimos dois grupos são opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes selecionados de Q³);

   Q² representa um halogênio, -CN, um -O-alquilaC1-6 (opcionalmente substituído com um ou mais átomos de flúor), uma arila ou heteroarila (em que os últimos dois grupos são opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes selecionados de entre halogênios, -CN, alquilas C1-3 ou

   -O-alquilaC1-3, sendo as duas últimas unidades alquila, elas próprias, opcionalmente substituídas por fluores);

   Q³ representa um halogênio, -CN, um -O-alquilaC1-6 ou uma alquila C1-6 (em que as duas últimas unidades alquila são opcionalmente substituídas com um ou mais substituintes flúor);

   (ii)

   em que

   X^x representa C(H) ou N;

   Z¹ representa -X1-O-X^1a-, -X²-N(R^z3)-X^2a- ou -X³-S-X^3a-;

   X¹, X² e X³ representam independentemente uma ligação direta, -C(O)- ou -C(R^z4)(R^z5)-;

   X^1a, X^2a e X^3a representam independentemente uma ligação direta ou -V1-C(R^z1)(R^z2)-;

   V¹ representa uma ligação direta ou -C(O)-;

   R^z1, R^z2, R^z3, R^z4 e R^z5 representam independentemente um

   Petição 870190028675, de 26/03/2019, pág. 7/24
3. 3/8 hidrogênio, uma alquila C1-6 (opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados de entre =O e um halogênio) ou uma heterocicloalquila (opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados de entre =O, um halogênio e uma alquila C1-3);

   (iii)

   em que

   X^x representa C(H) ou N;

   Z² representa -C(R^z6)(R^z7)- ou -C(O)-;

   Z³ representa uma ligação direta (formando por conseguinte um anel de 7 membros) ou -CH2- (formando por conseguinte um anel de 8 membros);

   o anel A representa um anel de 5 ou 6 membros contendo opcionalmente uma, dois ou três ligações duplas (e sendo por conseguinte aromático ou não aromático) e contendo opcionalmente um a três heteroátomos adicionais (por exemplo selecionados de entre N e O), e anel esse que é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes independentemente selecionados de entre =O e R^z8;

   cada R^z6, R^z7 e R^z8 representa independentemente um hidrogênio ou uma alquila C1-6 opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados de entre =O, -O-alquilaC1-4 e halogênios;

   cada R3 representa independentemente um hidrogênio, halogênio, -OR¹⁰, ou uma alquila C1-6 (opcionalmente substituída com um ou mais halogênios (por exemplo átomos de flúor);

   cada R4 representa independentemente um hidrogênio, halogênio ou -T1-R²⁰;

   cada -T¹ representa independentemente uma ligação direta,

   Petição 870190028675, de 26/03/2019, pág. 8/24
4. 4/8

   -O-, -C(O)-, -C(O)-O-, -O-C(O)-,

   -C(O)-N(R²¹)- ou -S(O)ni-;

   n1 representa 0, 1 ou 2;

   cada R¹⁰ e cada R²⁰ representa independentemente uma alquila C1-6 (opcionalmente substituída com um ou mais substituintes independentemente selecionados de entre =O e Y¹), arila ou heteroarila (em que os últimos dois grupos são opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes independentemente selecionados de Y²);

   R²¹ representa um hidrogênio ou uma alquila C1-6;

   cada Y¹ representa independentemente um halogênio, -OR³⁰, -CN, uma arila ou heteroarila (em que os últimos dois grupos são opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes selecionados de entre halogênios,

   -O-alquilaC1-3 e alquilas C1-3);

   cada Y² representa independentemente um halogênio, -OalquilaC1-6 ou uma alquila C1-6 (em que as duas últimas unidades alquila são opcionalmente substituídas com um ou mais átomos de flúor);

   cada R³⁰ representa independentemente um hidrogênio, uma alquila C1-6 (opcionalmente substituída com um ou mais átomos de flúor), arila ou heteroarila (em que os últimos dois grupos são opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes selecionados de entre halogênios, -O-alquilaC1-3 e alquilas C1-3);

   ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

   2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que os anéis contendo Z^x são: ^{3 *}

   3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que R4 representa um dos seguintes grupos opPetição 870190028675, de 26/03/2019, pág. 9/24
5. 5/8 cionalmente substituídos:

   4. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que um de Ry1 e Ry2 representa hidrogênio e o outro representa -Q1-R5.

   5. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que Q1 representa

   -C(O)-, e R5 representa hidrogênio, -CH3, -CF3, -isopropila, terc-butila, isobutila (-CH2-C(H)(CH3)2), ciclopentila, -(ciclopropil) (metila), ciclo-hexila ou um dos seguintes grupos:

   em que o substituinte Q² ou Q³ flutuante representa um ou mais substituintes no anel, tal como definido nesse documento por Q² ou Q³ (tal como apropriado).
6. 6. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que, quando Rx representa a opção (ii), Rx representa: