BR112014028706B1 - Formulação de dronedarona e associação para uso em leishmaniose - Google Patents

Formulação de dronedarona e associação para uso em leishmaniose Download PDF

Info

Publication number
BR112014028706B1
BR112014028706B1 BR112014028706-6A BR112014028706A BR112014028706B1 BR 112014028706 B1 BR112014028706 B1 BR 112014028706B1 BR 112014028706 A BR112014028706 A BR 112014028706A BR 112014028706 B1 BR112014028706 B1 BR 112014028706B1
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
dronedarone
leishmaniasis
pharmaceutically acceptable
treatment
formulation
Prior art date
Application number
BR112014028706-6A
Other languages
English (en)
Other versions
BR112014028706A2 (pt
Inventor
Stéphane Beilles
Sandra CHAMBONNET
Jean-Pierre Collaveri
Original Assignee
Sanofi
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sanofi filed Critical Sanofi
Publication of BR112014028706A2 publication Critical patent/BR112014028706A2/pt
Publication of BR112014028706B1 publication Critical patent/BR112014028706B1/pt

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
    • A61K31/343—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide condensed with a carbocyclic ring, e.g. coumaran, bufuralol, befunolol, clobenfurol, amiodarone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/133—Amines having hydroxy groups, e.g. sphingosine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/683—Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols
    • A61K31/685—Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols one of the hydroxy compounds having nitrogen atoms, e.g. phosphatidylserine, lecithin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/38—Cellulose; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

DRONEDARONA PARA USO EM LEISHMANIOSE, FORMULAÇÕES E ASSOCIAÇÕES PARA USO EM LEISHMANIOSE. A invenção refere-se à dronedarona ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis para o tratamento de leishmaniose, formulações e associações compreendendo dronedarona ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis para o tratamento da leishmaniose.

Description

[001] A presente invenção refere-se à dronedarona ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis do tratamento da leishmaniose, em particular leishmaniose cutânea com suas várias cepas ao redor do mundo e/ou leishmaniose originada de Leishmania amazo- nensis, Leishmania donovani ou Leishmania major bem como à formulação, em particular formulação tópica compreendendo dronedarona ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis, à sua preparação e à sua aplicação terapêutica.
[002] 2-n-butil-3-[4-(3-di-n-butilaminopropóxi)benzoil]-5-metilsulfo- namidobenzofurano, ou dronedarona e sais farmaceuticamente aceitáveis desta, em particular seus sais de cloridrato, são descritos na Patente Europeia EP 0 471 609 B1. Além disso, dronedarona é indicada para reduzir o risco de hospitalização da fibrilação atrial em pacientes no ritmo do seio com um histórico de fibrilação atrial (AF) paroxística ou persistente ou é indicada para a manutenção do ritmo do seio após cardioversão bem-sucedida em pacientes adultos clinicamente estáveis com fibrilação atrial (AF) paroxística ou persistente.
[003] Surpreendentemente, o requerente mostrou agora que dro- nedarona pode ser usada para tratar leishmaniose.
[004] Especialmente, o requerente propôs formulações para ad ministração tópica que são adequadas para tratar leishmaniose.
[005] De fato, para ser eficaz, tal formulação deve permitir a pe- netração/liberação do princípio ativo na camada da pele onde os parasitas estão localizados.
[006] Então seria possível obter altas concentrações do fármaco ativo localmente na derme e evitar a alta concentração plasmática do fármaco e efeitos colaterais sistêmicos associados.
[007] Um atributo adicional de tal formulação é evitar/reduzir rea ções de toxicidade da pele em contato com a formulação.
[008] Além disso, a associação da dronedarona com outros agen tes antileishmaniose é possível e tem várias vantagens como redução da dose de fármacos administrados para evitar efeitos colaterais e evitar a aparição de resistências ao tratamento escolhido com o tempo.
[009] Dessa forma, a presente invenção refere-se à formulação, em particular formulação tópica compreendendo dronedarona ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis e pelo menos um excipien- te farmaceuticamente aceitável, à sua preparação e à sua aplicação terapêutica como tratamento da leishmaniose, em particular leishmaniose cutânea e/ou leishmaniose originada de cepas de Leishmania amazonensis, Leishmania donovani ou Leishmania major.
[0010] A presente invenção refere-se a uma composição farma cêutica, em particular para a administração tópica (composição farmacêutica tópica) compreendendo dronedarona ou um de seus sais far- maceuticamente aceitáveis e pelo menos um excipiente farmaceuti- camente aceitável para a administração tópica, sua preparação e sua aplicação terapêutica como tratamento para leishmaniose, em particular leishmaniose cutânea e/ou leishmaniose originada de cepas de Leishmania amazonensis, Leishmania donovani ou Leishmania major.
[0011] A presente invenção refere-se também ao uso da droneda- rona ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis para a preparação de um medicamento para o tratamento da leishmaniose, particularmente leishmaniose cutânea e/ou a leishmaniose originada de cepas de Leishmania amazonensis, Leishmania donovani ou Leishmania major.
[0012] A presente invenção refere-se também à dronedarona ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis para o uso no tratamento da leishmaniose, particularmente leishmaniose cutânea e/ou leishmaniose originada de cepas de Leishmania amazonensis, Leish- mania donovani ou Leishmania major.
[0013] Outro objetivo da invenção é também uma associação ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis e um agente antileish- maniose. A dita associação é usada para o tratamento da leishmaniose, particularmente leishmaniose cutânea e/ou leishmaniose originada de cepas de Leishmania amazonensis, Leishmania donovani ou Leishmania major.
[0014] Em uma modalidade, o dito agente antileishmaniose é sele cionado entre os seguintes agentes:
[0015] - Miltefosina ou um dos seus derivados farmaceuticamente aceitáveis,
[0016] - Anfotericina B ou um dos seus derivados farmaceutica- mente aceitáveis,
[0017] - derivados de antimônio pentavalentes como antimoniato de meglumina.
[0018] O dito sal farmaceuticamente aceitável da dronedarona é o sal de cloridrato.
[0019] Em uma modalidade, a dita leishmaniose é originada de cepas de Leishmania resistentes a derivados de antimônio pentavalentes, e em particular cepas de Leishmania amazonensis, resistentes a derivados de antimônio pentavalente, em particular resistentes a anti- moniato de meglumina.
[0020] Pode ser mencionado que as formulações de antimoniato de meglumina são notavelmente comercializadas sob a marca comercial Glucantime®.
[0021] A dita formulação tópica ou composição farmacêutica po dem ser um gel hidroalcoólico, uma fórmula de cera hidrofílica semis- sólida, uma emulsão óleo em água ou uma água em óleo, particularmente um gel hidroalcoólico.
[0022] A dita formulação tópica ou composição farmacêutica po dem compreender um excipiente como hidroxipropilmetilcelulose (HPMC) em particular HPMC em 2% do peso total da formulação.
[0023] Em uma modalidade, a dita formulação tópica ou composi ção farmacêutica podem ser um gel hidroalcoólico compreendendo pelo menos hidroxipropilmetilcelulose como excipiente.
[0024] A dita formulação tópica ou composição farmacêutica em que dronedarona ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser usados em uma proporção de 10% em peso do princípio ativo na forma base.
[0025] Dosagens mais altas ou mais baixas podem ser apropria das; estas dosagens estão compreendidas dentro do escopo da presente invenção.
[0026] Pode ser mencionado que o termo formulação ou composi ção pode ser usado indiferentemente.
[0027] Os exemplos que seguem descrevem a preparação de cer tas formulações conforme a invenção. Estes exemplos não são limitativos, e simplesmente ilustram a presente invenção.
BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS
[0028] A Figura 1 representa o cronograma do protocolo de acordo com a invenção.
[0029] A Figura 2 representa o crescimento da lesão em camun dongos tratados por Dronedarona. Os camundongos foram infectados no Dia 0. O tratamento diário tópico iniciado no Dia 7 e continuado até o Dia 37 com todas as formulações indicadas de Dronedarona, exceto os Grupos # 6 e #7 em que o tratamento foi suspenso no Dia 32 devido à toxicidade (irritação da pele). Os tamanhos das lesões foram medidos nos tempos indicados (n=5).
[0030] A Figura 3 representacargas de parasitas em camundongos tratados por Dronedarona. No dia 39 da infecção, as cargas de parasi- tas nas orelhas de camundongos tratados com as formulações indicadas como na Fig. 2 foram determinadas pelo Ensaio por Limitação de Diluição . Médias ± DP (n=5). ** p <0,005, *** p <0,001 EXEMPLO 1
[0031] Testes contra leishmaniose cutânea foram realizados usan do o modelo experimental de infecção de camundongo BALB/c com Leishmania amazonensis.
Formulações:
[0032] As formulações são preparadas usando técnicas bem co nhecidas por um especialista na técnica. a) Dronedarona.
Figure img0001
[0033] As formulações 5, 6 e 7 são detalhadas abaixo:
Figure img0002
Figure img0003
*Água é substituída por um excipiente hidrofílico. Dessa forma, a emulsão é constituída por gotículas de óleo dispersas em uma matriz hidrofílica.
b) Formulações de Glucantime controle:
[0034] Formulação de Glucantime-PBS #8: formulação injetável de Glucantime misturada com PBS estéril (20 mg / ml), armazenada a 4°C.
[0035] Esta preparação é equivalente ao Glucantime® comercial, identificado pela OMS como um tratamento inicial para leishmaniose cutânea.
Procedimentos
[0036] a) Cronogramas do protocolo (figura 1)
[0037] b) Infecção
[0038] Camundongos de 8 semanas de idade foram infectados com 10 μl de 106 promastigotos no pavilhão auricular direito sob leve anestesia com éter.
[0039] c) Crescimento de lesão
[0040] As espessuras de orelha contralateral infectada e não infec tada foram medidas a cada 3-4 dias com um paquímetro, e os tamanhos da lesão foram expressos como a diferença entre a espessura das orelhas infectadas e não infectadas.
[0041] d) Tratamento com glucantime intralesional e dronedarona tópica
[0042] No dia 7 da infecção, os animais foram randomicamente separados em 5 animais / gaiola de camundongo (1 grupo de animais para cada formulação de dronedarona ou glucantime). Outro grupo infectado somente foi para o acompanhamento da infecção.
[0043] i) Tratamento Tópico: as orelhas infectadas foram tratadas com aproximadamente 20 mg da formulação de dronedarona tópica apropriada uma vez por dia durante 30 dias. As formulações foram coletadas do seu recipiente original com a ponta de uma espátula plástica descartável e espalhadas no lado interno do pavilhão infectado sob uma massagem de 10 segundos usando a mesma espátula:
[0044] ii) Tratamento intralesional: as orelhas infectadas foram in jetadas s.c. no lado interno da orelha infectada com 10 μl de PBS contendo 200 μg de Glucantime em pó, duas vezes por semana dos dias 7 a 37 da infecção (8 doses):
[0045] e) Sensibilização cutânea (MEST):
[0046] O Teste de Edema de Orelha em Camundongos (MEST) pode detectar confiavelmente sensibilizantes moderados a fortes, como indicado por referências OECD para teste de produtos químicos. No dia 34 da infecção, as orelhas contralaterais não infectadas foram tratadas (desafiadas) com a formulação de Dronedarona correspondente. O edema de orelha foi medido em vários momentos após o desafio (0h, 1h, 5h, 24h, 48h e 72h).
[0047] f) Sinais clínicos:
[0048] Os animais foram pesados nos dias 0 da infecção e em pe ríodos semanais, posteriormente. Os animais foram observados diariamente, para sinais de morbidade e morte. Foram registrados os sinais clínicos anormais durante estas checagens regulares. Foi registrada a observação clínica incluindo mortalidade, monitoramento de convulsões, letargia, sono, coma, salivação, diarreia, exame da lateral de jaula, cor da pele, pele, olhos e membrana mucosa, atividade motora espontânea e voluntária e necropsia - no caso do animal que morre. Qualquer aspecto excepcional das lesões tratadas como vesículas, ulceração completa, crosta, escurecimento também foram registrados de acordo com as referências internacionais (OMS / OCDE).
[0049] g) Fotografias
[0050] As fotografias das orelhas infectadas (tratadas e não trata das) foram tiradas com uma câmera digital em intervalos semanais.
[0051] h) Carga de parasitas por Ensaio por Diluição Limitante (LDA)
[0052] No dia 39 da infecção, os animais foram sacrificados sob anestesia e as orelhas infectadas foram assepticamente limpas com etanol iodado seguido de etanol somente. As orelhas foram cortadas ao longo da sua base e assepticamente pesadas. Então foram individualmente cortadas em pedaços, e suspensões de células únicas foram preparadas em PBS contendo antibióticos (1 ml / orelha) usando uma malha de aço inoxidável (Sigma). Os tecidos peneirados foram suavemente pipetados para cima e para baixo 8 x para dissociação celular. As suspensões celulares foram pré-diluídas 500x em meio M199 suplementado com soro de bezerro fetal inativado por calor 10%, antibióticos Penicilina 100 U/ml / estreptomicina 100 μg/ml, hemina 5 ug/ml e urina humana 2%), e em seguida diluídas em série 3 vezes (50 μl + 100 μl) em triplicatas em microplacas de fundo chato por um total de 24 diluições. As microplacas foram incubadas a 26°C em uma incubadora BOD umedecida. Os poços foram verificados a cada 3-4 dias para a presença de promastigotos por até 20 dias. O número de parasitas em cada orelha infectada foi calculado de acordo com a massa de tecido e a última diluição teoricamente contendo 1 amastigota de tecido.
Resultado na eficácia de formulações de dronedarona:
[0053] Dronedarona: Crescimento da lesão: A Formulação # 5 (gel aquoso) foi muito eficaz durante o tratamento, próximo ao tratamento de referência # 8 (Glucantime intralesional) (Fig. 2). Formula- ções # 6 (cera semissólida hidrofílica) e # 7 (emulsão o/a) induziram tamanhos de lesão aumentados. Isto foi devido à irritação da pele (ver MEST Fig. 4), não ao crescimento promovido do parasita (ver Fig. 3). Além disso, a suspensão dos tratamentos # 6 e # 7 no dia 32 levaram à redução rápida da espessura de orelha: posteriormente (Fig. 2).
[0054] Dronedarona: Cargas de Parasitas na orelha. No dia 39 da infecção (30 dias de tratamento), as cargas de parasitas nas orelhas foram significativamente mais baixas no grupo tratado topicamente com # 5 (gel aquoso). As formulações # 6 (cera semissólida hidrofí- lica) e # 7 (emulsão o/a) não alteraram as cargas de parasitas (Fig. 3): Conclusões
[0055] A formulação 5 foi a mais promissora no controle do cres cimento da lesão ao longo da infecção, a baixa carga de parasita no fim do experimento foi compatível com o crescimento da lesão controlado, similar ao alcançado com 8 doses de 200 μg de Glucantime intra- lesional. Os animais pareceram felizes durante o tratamento, ganharam peso normalmente e não aumentaram a sensibilidade cutânea no desafio.
EXEMPLO 2 Estudo in vitro da eficácia de dronedarona em uma cepa de Leishma- nia amazonensis, em comparação aos tratamentos de referência anti- moniato de meglumina, miltefosina e anfotericina B em condições de laboratório similares.
[0056] Uma cepa de Leishmania amazonensis (MHOM / BR / 73 / M2269) foi usada. Cloridrato de dronedarona e antimoniato de meglu- mina foram supridos por Sanofi. Anfotericina B (desoxicolato) e milte- fosina foram adquiridas em Sigma-Aldrich.
[0057] O estudo se referiu a dois modelos celulares:
[0058] - 1/ Amastigotas axênicos de L. amazonensis (parasitas iso lados)
[0059] - 2/ Amastigotas intramacrofágicos de L. amazonensis (pa rasitas hospedados em macrófagos, como encontrados na derme, durante a infecção cutânea de Leishmaniose).
[0060] O primeiro modelo celular que é cultivado em um meio ba seado em M199, permite definir a atividade intrínseca de uma substância no próprio parasita enquanto o segundo modelo celular integra a capacidade da substância de cruzar a membrana do macrófago e aquela do fagolisossoma. Os macrófagos usados são células RAW 264.7, que são cultivadas no meio baseado em DMEM com 10% de soro fetal bovino.
Determinação da IC50 de cada uma das moléculas
[0061] Soluções de dronedarona em DMSO, antimoniato de me- glumina e miltefosina em água e anfotericina B em solução (G5) de glicose isotônica foram preparadas antes de cada experimento. Avaliações in vitro foram objeto de três duplicatas de experimentos independentes. Os ensaios foram realizados quantificando DNA parasítico com SYBRGREEN como descrito por Audisio et al. (Eur. J. Med. Chem., 52: 44-50, 2012) bem como por qPCR de amastigotas intra- macrofágicos com amplificação da alfa-tubulina do parasita. Os resultados obtidos com ambos os métodos são similares.
[0062] A concentração de inibição de 50% do crescimento dos pa rasitas (IC50) foi determinada após 72 horas do contato com droneda- rona comparada com antimoniato de meglumina, miltefosina e anfote- ricina B, usados como produtos de referência.
[0063] Em amastigotas axênicos (condições do teste 1/), droneda- rona tem uma IC50 de 0,34 ± 0,06 μM, enquanto antimoniato de me- glumina tem uma IC50 de 908 ± 159 μM, miltefosina uma IC50 de 0,9 ± 0,2 μM e anfotericina B uma IC50 de 0,031 ± 0,002 μM.
[0064] Em amastigotas intramacrofágicos (condições do teste 2/), dronedarona tem uma IC50 de 0,50 ± 0,22 μM, enquanto antimoniato de meglumina tem uma IC50 de 133,63 ± 10,41 μM, miltefosina uma IC50 de 1,87 ± 0,032 μM e anfotericina B uma IC50 de 0,047 ± 0,005 μM.
Avaliação da toxicidade potencial de dronedarona em células hospedeiras humanas (macrófagos) em comparação com os fármacos de referência.
[0065] Estudo da citotoxicidade em macrófagos (células RAW 264.7)
[0066] A concentração máxima não tóxica (CMA) foi determinada pela técnica ao Azul de Tripano de acordo com o método descrito em Audisio et al. (Eur. J. Med. Chem., 52: 44-50, 2012).
[0067] A CMA da dronedarona é 12,5 μM
[0068] A CMA do antimoniato de meglumina é >200 μM.
[0069] A CMA da anfotericina B é 6,25 μM
[0070] A CMA da miltefosina é 50 μM
[0071] Então, a toxicidade da dronedarona nos macrófagos da derme é mais baixa do que a maior parte dos fármacos de referência e não impedirá seu uso terapêutico para leishmaniose cutânea.
Estudo da associação de dronedarona com antimoniato de meglumina, miltefosina e anfotericina B
[0072] A associação da dronedarona com cada um dos produtos de referência foi estudada de acordo com o método descrito por Odds et al., J. Antimicrob. Chemother., 52:1, 2003, para identificar uma ação sinérgica ou aditiva ou antagonística. O estudo compreendeu três experimentos independentes que permitiram o cálculo do Índice de Concentração Inibitória Fracionária (FICI):
[0073] - Se FICI < 0,5: Sinergia
[0074] - Se 0,5 < FICI < 4: Efeito aditivo, nenhuma interação
[0075] - Se FICI < 4: antagonismo
[0076] - Interação entre dronedarona e antimoniato de meglumina:
[0077] Em amastigotas axênicos, FICI = 0,27. Um efeito sinérgico entre dronedarona e antimoniato de meglumina foi obtido.
[0078] Em amastigotas intramacrofágicos, FICI = 0,79. Um efeito aditivo entre a dronedarona e antimoniato de meglumina foi obtido.
[0079] - Interação entre dronedarona e miltefosina:
[0080] Em amastigotas axênicos, FICI = 0,39. Uma sinergia entre dronedarona e miltefosina foi obtida.
[0081] Em amastigotas intramacrofágicos, FICI = 0,46. Uma siner gia entre dronedarona e miltefosina foi obtida.
[0082] - Interação entre dronedarona e anfotericina B:
[0083] Em amastigotas axênicos, FICI = 0,63. Um efeito aditivo entre dronedarona e anfotericina B foi obtido.
[0084] Em amastigotas intramacrofágicos, FICI = 0,54. Um efeito aditivo entre dronedarona e anfotericina B foi obtido.
Conclusões
[0085] A/ atividade de dronedarona nos parasitas, quando compa rada com os fármacos de referência:
[0086] Dronedarona apresenta uma atividade antileishmaniose for te in vitro em ambos os modelos amastigotas axênicos e amastigotas intramacrofágicos de Leishmania amazonensis, com IC50 mais baixa dentro da faixa micromolar, o que a coloca entre anfotericina B e milte- fosina, em termos de atividade. A atividade intrínseca sobre o próprio parasita é dessa forma mantida quando este está protegido no fagoli- sossoma dentro do macrófago.
[0087] B/ Atividade de dronedarona nos parasitas, em parceria com os fármacos de referência:
[0088] A interação de dronedarona com antimoniato de meglumina ou com anfotericina B é do tipo aditivo. Nenhum efeito antagonístico foi demonstrado, o que sugere que um uso concomitante da dronedarona com antimoniato de meglumina ou anfotericina B pode ser possível.
[0089] A interação de dronedarona com miltefosina é do tipo si- nérgica sugere que um uso concomitante da dronedarona com miltefo- sina pode ser de interesse, por exemplo, para reduzir as doses administradas.
EXEMPLO 3 Estudo in vitro da cepa de Leishmania amazonensis resistente a anti- moniato de meglumina (Glucantime®)
[0090] Em cepas de Leishmania amazonensis resistentes a_anti- moniato de meglumina (IC50 = 200 mm) sob a forma de promastigoto, quimiossensibilidade à dronedarona é similar àquela observada em cepas que não são resistentes a antimoniato de meglumina (princípio ativo de Glucantime®).
[0091] Isto significa que o mecanismo de ação de dronedarona nos parasitas se diferencia daquele de glucantime. A dronedarona tem um potencial para tratar cepas resistentes a Glucantime como encontrado, por exemplo, na América Latina.
EXEMPLO 4 Estudo in vitro na construção da resistência à Dronedarona com o tempo, usando a cepa de Leishmania amazonensis.
[0092] O teste consiste na cultura de longo prazo de uma cepa de L. amazonensis (forma de promastigoto), em contato com doses crescentes de dronedarona, iniciando com concentrações iniciais mais baixas do que a IC 50.
[0093] Em pontos de tempo regulares, a viabilidade e a patogeni- cidade dos parasitas são confirmadas com o movimento da cultura a amastigotas axênicos e amastigotas intramacrofágicos e cálculo da nova concentração inibitiva para 50% da população (IC50).
[0094] Após seis meses de cultura e exposição dos parasitas à dronedarona, nenhuma modificação significante da concentração inibitória (IC 50) foi observada.
[0095] Como uma referência: uma exposição similar da cepa a Glucantime levou a um aumento de IC 50 x 200.
[0096] Embora o estudo seja continuado por mais algum tempo, já pode ser afirmado que a molécula não gera uma resistência nos parasitas expostos.
EXEMPLO 5 Estudo in vitro em Leishmania donovani e Leishmania major
[0097] Para avaliar a polivalência da dronedarona como um trata mento em várias cepas de Leishmania disseminadas ao redor do mundo, com várias sensibilidades conhecidas aos fármacos de referência, testes prévios foram completados com cepas consideradas como representativas de várias zonas de endemia.
[0098] As cepas de Leishmania donovani (MHOM / ET / 67 / HU3) e Leishmania major (MHOM / SU / 73 / 5-ASKH) foram usadas para este estudo.
[0099] Cloridrato de dronedarona e antimoniato de meglumina fo ram supridos por Sanofi. Miltefosina foi adquirida em Sigma-Aldrich.
[00100] O estudo in vitro se referiu a quatro modelos celulares:
[00101] - 1/ amastigotas axênicos de L. donovani e L. major (parasi tas isolados)
[00102] - 2/ amastigotas intramacrofágicos de L. donovani e L. ma jor (parasitas apresentados em macrófagos, como encontrados na derme, durante a infecção de Leishmaniose cutânea).
[00103] O modelo de amastigotas axênicos é cultivado em um meio baseado em M199 e permite definir a atividade intrínseca de uma substância no próprio parasita enquanto o modelo de amastigotas in- tramacrofágicos integra a capacidade da substância de cruzar a membrana do macrófago e aquela dos fagolisossoma.
[00104] Os macrófagos usados são células RAW 264.7, que são cultivadas em um meio baseado em DMEM com 10% do soro fetal bo- vino.
Determinação da IC50 de dronedarona, Glucantime® e de miltefosina:
[00105] As soluções de dronedarona no DMSO, antimoniato de meglumina e miltefosina em água foram preparadas antes de cada experimento. As avaliações in vitro foram o objeto de três experimentos independentes.
[00106] Os ensaios foram realizados quantificando DNA parasítico com SYBRGREEN como descrito por Audisio et al. (Eur. J. Med. Chem., 52: 44-50, 2012).
[00107] A concentração de inibição de 50% do crescimento dos parasitas (IC50) foi determinada após 72 horas do contato com droneda- rona comparada com antimoniato de meglumina e miltefosina, usados como produtos de referência.
[00108] - Nos amastigotas axênicos de L. donovani, dronedarona tem uma IC50 de 47,38 ± 6,27 μM, enquanto antimoniato de meglumi- na tem uma IC50 >1000 mM e miltefosina uma IC50 de 13,0 ± 1,25 μM.
[00109] - Em amastigotas axênicos de L. major, dronedarona tem uma IC50 de 2,55 ± 0,51 μM, enquanto antimoniato de meglumina tem uma IC50 >1000 μM e miltefosina uma IC50 de 5,57 ± 1,50 μM.
[00110] - Nos amastigotas intramacrofágicos de L. donovani, dro- nedarona tem uma IC50 de 1,67 ± 0,10 μM, enquanto antimoniato de meglumina tem uma IC50 de 390,36 ± 40,46 μM e miltefosina uma IC50 de 0,88 ± 0,10 μM.
[00111] - Em amastigotas intramacrofágicos de L. major, droneda- rona tem uma IC50 de 1,32 ± 0,12 μM, enquanto antimoniato de me- glumina tem uma IC50 de 347,98 ± 79,87 μM e miltefosina uma IC50 de 0,72 ± 0,11 μM.
[00112] Além disso, dronedarona não apresenta toxicidade de ma- crófagos à concentração de 12,5 μM. Sua concentração citotóxica 50% (CC50) é dessa forma superior a 12,5.
Conclusões
[00113] 1- atividade in vitro de dronedarona em Leishmania dono- vani (como um modelo das cepas indianas/africanas)
[00114] Dronedarona apresenta uma atividade forte sobre amasti- gotas intramacrofágicos de L. donovani similar àquela de miltefosina, da ordem de 1-2 μM, enquanto é fracamente ativa em amastigotas axênicos. O índice terapêutico de dronedarona definida como a CC50 em amastigotas intramacrofágicos de L. donovani / IC50 é dessa forma superior a 7.
[00115] 2- atividade in vitro de dronedarona em Leishmania major (como um modelo de cepas do Oriente Médio)
[00116] Dronedarona apresenta uma atividade forte in vitro nos modelos de amastigotas axênicos e amastigotas intramacrofágicos de Leishmania major, com IC50 mais baixa do que 3 μM, o que a coloca em um nível de atividade similar àquela de miltefosina. A atividade intrínseca sobre o próprio parasita é dessa forma mantida quando este é protegido no fagolisossoma dentro do macrófago. O índice terapêutico de dronedarona definida como a CC50 em amastigotas intramacrofá- gicos de L. major / IC50 é dessa forma superior a 9.
[00117] Estes resultados tendem a demonstrar que dronedarona tem uma capacidade de originar um efeito terapêutico sobre várias cepas (3 modelos testados de todo o mundo), em concentrações similares à miltefosina, e muito mais baixas que glucantime.

Claims (14)

1. Formulação, caracterizada pelo fato de que compreende dronedarona ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis para administração tópica, em que a dita formulação é um gel hidroalcoóli- co, compreende pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável, sendo o referido excipiente farmaceuticamente aceitável hidroxi- propilmetilcelulose.
2. Formulação de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o dito sal farmaceuticamente aceitável é clori- drato de dronedarona.
3. Formulação de acordo com a reivindicação 1 ou 2, carac-terizada pelo fato de que é para uso em medicina.
4. Formulação de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que é para uso no tratamento de leishmaniose.
5. Formulação de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que é para o uso no tratamento de leishmaniose cutânea.
6. Formulação de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que é para o uso no tratamento de leishmaniose originada de cepas de Leishmania amazonensis.
7. Formulação de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que é para o uso no tratamento de leishmaniose originada de cepa de Leishmania amazonensis resistente a derivados de antimônio pentavalentes.
8. Formulação de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que o dito derivado de antimônio pentavalente é an- timoniato de meglumina.
9. Formulação de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizada pelo fato de ser para uso no tratamento de leishmaniose originada de Leishmania donovani.
10. Formulação de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizada pelo fato de ser para uso no tratamento de leishmaniose originada de Leishmania major.
11. Formulação de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizada pelo fato de que dronedarona ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis pode ser usado em uma proporção de 10% em peso do princípio ativo na forma base.
12. Associação, caracterizada pelo fato de ser de droneda- rona ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis e um agente antileischmaniose.
13. Associação de acordo com a reivindicação 12, caracterizada pelo fato de que o dito agente antileischmaniose é selecionado entre os seguintes agentes: - Miltefosina ou um dos seus derivados farmaceuticamente aceitáveis, - Anfotericina B ou um dos seus derivados farmaceutica- mente aceitáveis, - derivados de antimônio pentavalentes como antimoniato de meglumina.
14. Associação de acordo com a reivindicação 13, caracterizada pelo fato de que o dito derivado de antimônio pentavalente é antimoniato de meglumina.
BR112014028706-6A 2012-05-22 2013-05-22 Formulação de dronedarona e associação para uso em leishmaniose BR112014028706B1 (pt)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261650182P 2012-05-22 2012-05-22
US61/650,182 2012-05-22
EP12306362 2012-10-31
EP12306362.0 2012-10-31
EP12306472.7 2012-11-28
EP12306472 2012-11-28
PCT/EP2013/060513 WO2013182423A1 (en) 2012-05-22 2013-05-22 Dronedarone for use in leishmaniasis, formulations and associations for use in leishmaniasis.

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BR112014028706A2 BR112014028706A2 (pt) 2017-06-27
BR112014028706B1 true BR112014028706B1 (pt) 2023-01-10

Family

ID=49711434

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR112014028706-6A BR112014028706B1 (pt) 2012-05-22 2013-05-22 Formulação de dronedarona e associação para uso em leishmaniose

Country Status (15)

Country Link
US (2) US20150150841A1 (pt)
EP (1) EP2852385B1 (pt)
CN (1) CN104487068B (pt)
BR (1) BR112014028706B1 (pt)
CO (1) CO7160058A2 (pt)
CR (1) CR20140526A (pt)
DO (1) DOP2014000257A (pt)
EA (1) EA201492173A1 (pt)
IL (1) IL235752A0 (pt)
IN (1) IN2014KN02584A (pt)
MX (1) MX368416B (pt)
PE (1) PE20150022A1 (pt)
PL (1) PL2852385T3 (pt)
TN (1) TN2014000484A1 (pt)
WO (1) WO2013182423A1 (pt)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20200155503A1 (en) * 2017-08-03 2020-05-21 Bionoox Sa Compositions for use for treating cutaneous leishmaniasis

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2665444B1 (fr) 1990-08-06 1992-11-27 Sanofi Sa Derives d'amino-benzofuranne, benzothiophene ou indole, leur procede de preparation ainsi que les compositions les contenant.
AU2002231175A1 (en) * 2000-12-27 2002-07-08 Focal, Inc. Controlled release of anti-arrhythmic agents from a biodegradable polyethylene oxide hydrogel for local application to the heart
FR2930150B1 (fr) * 2008-06-24 2011-01-14 Sanofi Aventis Utilisation de la dronedarone pour la preparation d'un medicament destine a reguler le taux de potassium dans le sang

Also Published As

Publication number Publication date
TN2014000484A1 (en) 2016-03-30
US9700540B2 (en) 2017-07-11
CR20140526A (es) 2014-12-01
EA201492173A1 (ru) 2015-04-30
PE20150022A1 (es) 2015-02-09
US20150150841A1 (en) 2015-06-04
PL2852385T3 (pl) 2020-03-31
CO7160058A2 (es) 2015-01-15
IN2014KN02584A (pt) 2015-05-08
WO2013182423A1 (en) 2013-12-12
DOP2014000257A (es) 2014-12-15
EP2852385A1 (en) 2015-04-01
EP2852385B1 (en) 2019-08-21
IL235752A0 (en) 2015-01-29
US20160151326A1 (en) 2016-06-02
MX2014014258A (es) 2016-04-25
CN104487068B (zh) 2018-09-11
MX368416B (es) 2019-10-02
BR112014028706A2 (pt) 2017-06-27
CN104487068A (zh) 2015-04-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102014883B1 (ko) 근위축성 측삭 경화증 치료용 신규 조성물
ES2642873T3 (es) Composiciones que comprenden agonistas nicotínicos y métodos para su uso
US9782426B2 (en) Anti-viral therapeutic composition
TWI343810B (en) A pharmaceutical composition for inhibiting coronavirus
Mostafavi et al. Niosomal formulation of amphotericin B alone and in combination with glucantime: In vitro and in vivo leishmanicidal effects
JP2010524978A (ja) ウイルスにより誘発された病変の治療方法
Yabuki et al. Oral L-citrulline administration improves memory deficits following transient brain ischemia through cerebrovascular protection
AU2023204000A1 (en) Mast cell stabilizers for treatment of hypercytokinemia and viral infection
ES2891306T3 (es) Combinación de ibudilast y riluzol y métodos de utilización de los mismos
JP2004515453A (ja) 癌を化学療法および放射線療法に付する間に細胞を保護するための組成物および方法
Sharma et al. Celastrol, an oral heat shock activator, ameliorates multiple animal disease models of cell death
CN102083424A (zh) 诱导癌细胞凋亡的方法和应用
BR112013011156B1 (pt) Composição e método para tratar condições de pele
ES2702578T3 (es) Tratamiento de la inflamación dérmica crónica con norketotifeno
BR112014028706B1 (pt) Formulação de dronedarona e associação para uso em leishmaniose
JP6448641B2 (ja) アトピー性皮膚炎の治療及び／又は予防のためのアベルメクチンファミリー又はミルベマイシンファミリーの化合物
ES2753191T3 (es) Dronedarona para su uso en leishmaniasis, formulaciones y asociaciones para su uso en leishmaniasis
WO2007082974A1 (es) Uso de la mimosina o un derivado de la misma, en el tratamiento de las manifestaciones cutáneas de la psoriasis y de los desórdenes cutáneos relacionados con ésta y una composición cosmética o farmacéutica que la comprende
CA3194825A1 (en) Administration of antipurinergic compositions for treating nervous system disorders
AU2016232987A1 (en) Treatment of skin conditions
ES2596169T3 (es) Métodos y composiciones para tratar infecciones por poxvirus con una 1,4-naftoquinona como principio activo
ES2856553T3 (es) Composiciones que comprenden dihidroquercetina para uso en métodos para el tratamiento del herpes
RU2744919C1 (ru) Средство для лечения эндометрита у коров
US20220184023A1 (en) Dicarboxylic acid esters for inducing an analgesic effect
ES2719054T3 (es) Tratamiento de lesiones cutáneas asociadas a enfermedades autoinmunitarias e inflamatorias con el compuesto de arsénico As2O5

Legal Events

Date Code Title Description
B07D Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette]
B06F Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette]
B06F Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette]
B06I Publication of requirement cancelled [chapter 6.9 patent gazette]

Free format text: ANULADA A PUBLICACAO CODIGO 6.6.1 NA RPI NO 2462 DE 13/03/2018 POR TER SIDO INDEVIDA.

B07E Notification of approval relating to section 229 industrial property law [chapter 7.5 patent gazette]
B07A Application suspended after technical examination (opinion) [chapter 7.1 patent gazette]
B07A Application suspended after technical examination (opinion) [chapter 7.1 patent gazette]
B09A Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette]
B16A Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 22/05/2013, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS