ES2856553T3

ES2856553T3 - Composiciones que comprenden dihidroquercetina para uso en métodos para el tratamiento del herpes

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Publication number: ES2856553T3
Application number: ES16714297T
Authority: ES
Inventors: Christian Auclair
Original assignee: BIONOOX SUISSE SA
Current assignee: BIONOOX SUISSE SA
Priority date: 2015-03-18
Filing date: 2016-03-18
Publication date: 2021-09-27
Anticipated expiration: 2036-03-18
Also published as: JP2018507895A; WO2016146843A1; US11077087B2; CA2979938A1; US20180055815A1; EP3270901A1; EP3270901B1

Abstract

Una composición que comprende dihidroquercetina y α-tocoferol y bisabolol para su uso en el tratamiento tópico de los síntomas en las mucosas del virus del herpes simple tipo 2; en donde el α-tocoferol varía de 0,05% a 5% en peso del peso total de la composición (p/p).

Description

DESCRIPCIÓN

Composiciones que comprenden dihidroquercetina para uso en métodos para el tratamiento del herpes

Campo de la invención

La presente invención se refiere al tratamiento de la infección por herpes y/o de la inflamación de las mucosas inducida por la infección por herpes, especialmente la infección por el virus del herpes simple tipo 2 (HSV-2). En particular, la presente invención se refiere a una composición que comprende dihidroquercetina, de 0,05% a 5% p/p de a-tocoferol y bisabolol para su uso en el tratamiento tópico de los síntomas relacionados con la infección por herpes, especialmente la infección por HSV-2 o la inflamación de las mucosas desencadenada por infección por herpes, especialmente infección por HSV-2.

Antecedentes de la invención

El herpes se debe a dos tipos de virus del herpes simple (HSV), el tipo 1 y el tipo 2. Ambos tipos son muy contagiosos y pueden transmitirse fácilmente de una persona a otra por contacto directo. Al menos 8 de cada 10 personas que portan el virus no saben que han sido infectadas porque a menudo hay pocos o ningún síntoma inicial. Sin embargo, ciertos factores desencadenantes pueden activar el virus y provocar un brote de herpes. Las principales situaciones desencadenantes son: estrés, enfermedad, fiebre, exposición al sol, períodos menstruales y cirugía.

Los virus del herpes simple son patógenos ubicuos adaptados al huésped que causan una amplia variedad de estados patológicos. Hasta el 80% de las infecciones por herpes simple son asintomáticas. Las infecciones sintomáticas pueden caracterizarse por una importante morbilidad y recurrencia. En hospedadores inmunodeprimidos, las infecciones pueden causar complicaciones potencialmente mortales.

La prevalencia de la infección por HSV en todo el mundo ha aumentado durante las últimas décadas, lo que la convierte en un importante problema de salud pública. El reconocimiento rápido de la infección por HSV y el inicio temprano de la terapia son de suma importancia en la gestión de la enfermedad.

Herpes genital

El herpes genital es una infección común causada por el virus del herpes simple de tipo 2. Causa ampollas dolorosas en los genitales y las áreas circundantes. El herpes genital se puede transmitir a otras personas a través del contacto sexual íntimo y puede afectar a cualquier membrana mucosa (revestimiento húmedo). El herpes genital es una enfermedad crónica, el virus permanece en el cuerpo y puede volver a activarse después de diversas circunstancias. La tasa promedio de recurrencia es de cuatro a cinco veces en los primeros dos años después de haber sido infectado. Sin embargo, con el tiempo, se activa con menos frecuencia y cada brote suele ser menos grave. El herpes genital puede causar problemas durante el embarazo. Estas complicaciones pueden ser más graves dependiendo de si ya tiene herpes genital o si lo desarrolla por primera vez durante el embarazo.

Los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades (CDC) estiman que, anualmente, 776000 personas en los Estados Unidos contraen nuevas infecciones por herpes. A nivel nacional, el 16% de las personas de 14 a 49 años tienen infección por HSV-2.

La infección por HSV-2 es más común entre las mujeres que entre los hombres (20,9% versus 11,5% en las personas de 14 a 49 años). La infección se transmite más fácilmente de hombres a mujeres que de mujeres a hombres. En los Estados Unidos, se estima que el 8,1% de los jóvenes de 14 a 49 años infectados con HSV-2 nunca han recibido un diagnóstico clínico.

No existe cura para el herpes. Sin embargo, los medicamentos antivíricos pueden prevenir o acortar los brotes durante el período de tiempo que la persona toma el medicamento. Además, la terapia supresora diaria (es decir, el uso diario de medicamentos antivíricos) para el herpes puede reducir la probabilidad de transmisión a las parejas. La Solicitud Internacional WO00/02554 describe el uso de alfa-tocoferol puro, a saber, acetato de alfa-tocoferol, en el tratamiento de epitelios de las mucosas tales como infecciones bucales o genitales por herpes.

Varios ensayos clínicos han ensayado vacunas contra la infección por herpes genital, pero actualmente no existe una vacuna disponible comercialmente. Un ensayo de vacuna mostró eficacia entre mujeres cuyas parejas estaban infectadas con HSV-2, pero solo entre mujeres que no estaban infectadas con HSV-1. Un ensayo posterior que probó la misma vacuna mostró cierta protección contra la infección genital por HSV-1, pero ninguna protección contra la infección por HSV-2 (Belshe et al., N. Engl. J. Med. 2012, 366(1): 34-43).

Por consiguiente, todavía existe la necesidad de un tratamiento antivírico del herpes y, más especialmente, del herpes genital. Se sabe que los flavonoides tienen actividad antivírica (Wang et al., Adv. Exp. Med. Biol. 1998, 439: 191 -225). Debido a la propagación mundial del HIV, desde la década de 1980, las investigaciones de la actividad antivírica de los flavonoides se han centrado principalmente en el HIV. El descubrimiento y desarrollo de flavonoides como agentes anti-HIV se han expandido en las últimas dos décadas. Algunos de los virus que se han reportado como afectados por los flavonoides son el virus del herpes simple (Wang et al., Adv. Exp. Med. Biol. 1998, 439: 191 -225; Lyu et al., Arch.

Pharm. Res. 2005, 28(11): 1293-301), virus respiratorio sincitial y adenovirus. Sin embargo, la mayoría de los estudios se realizaron in vitro y se sabe poco sobre el efecto antivírico de los flavonoides in vivo, incluso para el tratamiento del HIV. Además, según el conocimiento del solicitante, no existe ningún fármaco flavonoide clínicamente validado para tratamientos antivíricos y, en particular, para tratar la infección por herpes.

La patente europea EP 2 700 413 describe una composición que comprende dihidroquercetina; alfa-tocoferol y bisabolol en el tratamiento de la dermatitis. El solicitante descubrió sorprendentemente que la dihidroquercetina (DHQ), un compuesto natural de la familia de los flavonoides, inhibe los neutrófilos y los mastocitos que se sabe que desempeñan un papel clave en el desarrollo de la inflamación asociada a la infección por HSV.

Por lo tanto, la invención se refiere a composiciones que comprenden DHQ para su uso en un método para tratar los síntomas relacionados con la infección por HSV, especialmente los síntomas del herpes genital y la inflamación asociada de la mucosa.

Sumario

La presente invención se refiere a una composición que comprende dihidroquercetina, y de 0,05% a 5% p/p de atocoferol y bisabolol para su uso en el tratamiento tópico de los síntomas relacionados con las infecciones por HSV-2, incluso más específicamente para el tratamiento tópico de los síntomas de HSV-2 en las mucosas, es decir, áreas mucosas infectadas mediante la infección por HSV-2. En una realización, la composición es para tratar la inflamación de las mucosas inducida mediante la infección por HSV-2.

En una realización, la mucosa es genital o, en otras palabras, el herpes es herpes genital.

Según una realización, la composición a utilizar en la invención es tal que la concentración de dihidroquercetina en la composición varía de 0,1% a 10% en peso del peso total de la composición (p/p), preferiblemente de 0,5% a 8% p/p, preferiblemente de 1% a 5% p/p.

En una realización de la invención, dicha composición comprende además a-tocoferol.

En una realización específica, la composición para usar en la invención es tal que la concentración de dicho a-tocoferol varía de 0,1% a 3% p/p, preferiblemente de 0,5% a 2% p/p.

En una realización particular, la composición para usar en la invención es tal que la concentración de bisabolol varía de 0,02% a 5% en peso del peso total de la composición (p/p), preferiblemente de 0,1% a 2% p/p, preferiblemente de 0,2% a 1% p/p.

En una realización, la composición para usar en la invención comprende además un vehículo aceptable, preferiblemente una base compatible con las mucosas; preferiblemente en donde dicha composición comprende al menos un compuesto seleccionado del grupo que comprende grasa animal, grasa vegetal, alcoholes superiores, glicoles o mezclas de los mismos.

En una realización, la composición para usar en la invención comprende además al menos un componente seleccionado del grupo que comprende tensioactivos, pigmentos, estabilizadores, emolientes, humectantes o mezclas de los mismos.

En una realización, la composición para su uso según la invención comprende de 0,1% a 10% p/p de DHQ, de 0,05% a 5% p/p de a-tocoferol, de 0,02% a 5% p/p de bisabolol y una base compatible con las mucosas.

En una realización, la composición para uso según la invención comprende aproximadamente 5% p/p de DHQ, aproximadamente 1% p/p de a-tocoferol, aproximadamente 0,2% p/p de bisabolol y una base compatible con las mucosas.

En una realización, la composición para usar en la invención es una crema, un gel, un ungüento, una solución, una emulsión, especialmente una emulsión de aceite en agua, una mascarilla, una barra, una leche, una loción, un suero, una pasta, una espuma o una suspensión, y preferiblemente una crema o una barra.

En una realización particular, la composición de la invención comprende dihidroquercetina y de 0,05% a 5% p/p de atocoferol y bisabolol para su uso como composición cosmética complementaria en el tratamiento de la infección por herpes.

Definiciones

En la presente invención, los siguientes términos y expresiones tienen el siguiente significado:

• "Sujeto" se refiere a un mamífero, preferiblemente un ser humano. En una realización, un sujeto puede ser un "paciente", es decir, un animal de sangre caliente, más preferiblemente un ser humano, que/el cual está esperando recibir atención médica, o está recibiendo atención médica o fue/es/será objeto de un procedimiento médico, o es monitorizado para detectar el desarrollo de una infección por herpes. En una realización, el sujeto es un adulto (por ejemplo, un sujeto mayor de 18 años). En otra realización, el sujeto es un niño (por ejemplo, un sujeto menor de 18 años). En una realización, el sujeto es un hombre. En otra realización, el sujeto es una mujer.

• "Tratando" o "tratamiento" se refiere tanto al tratamiento terapéutico como a las medidas profilácticas o preventivas; en donde el objeto es prevenir o ralentizar (disminuir) o aliviar los síntomas relacionados con la infección por herpes. Aquellos que necesitan tratamiento incluyen aquellos que ya tienen una infección por herpes, así como aquellos que son propensos a tener una infección por herpes o aquellos en quienes se debe prevenir la infección por herpes. Un sujeto o mamífero es "tratado" con éxito para la infección por herpes si, después de recibir una cantidad terapéutica de una composición para su uso de acuerdo con la presente invención, el paciente muestra una reducción observable y/o medible en, o ausencia de, uno o más de los siguientes indicadores: reducción del número de células patógenas; reducción del porcentaje de células totales que son patógenas; y/o alivio hasta cierto punto, de uno o más de los síntomas asociados con la infección por herpes (que incluyen, sin limitación, llagas en o alrededor de los labios, en la boca, en la nariz, en los ojos, o ampollas o picazón en los genitales y las áreas circundantes); reducción de la morbilidad y mortalidad, y mejora de la calidad de vida. Los parámetros anteriores se pueden medir fácilmente mediante procedimientos de rutina familiares para un médico.

• "Cantidad terapéuticamente eficaz" significa el nivel o cantidad de la composición de la invención que se dirige, sin causar efectos secundarios negativos o adversos significativos a la diana, (1) a retrasar o prevenir la aparición de la infección por herpes; (2) ralentizar o detener la progresión, agravamiento o deterioro de uno o más síntomas de la infección por herpes; (3) mejorar los síntomas de la infección por herpes o aliviar los síntomas de la infección por herpes; o (4) reducir la gravedad o la incidencia de los síntomas de la infección por herpes. Puede administrarse una cantidad terapéuticamente eficaz antes del inicio de la infección por herpes, para una acción profiláctica o preventiva. Alternativa o adicionalmente, la cantidad terapéuticamente eficaz se puede administrar después del inicio de los síntomas de la infección por herpes, para una acción terapéutica o el mantenimiento de una acción terapéutica.

• "Composición terapéutica" describe una composición que tiene la capacidad, cuando se administra en una cantidad adecuada, de ralentizar o detener la progresión, agravamiento o deterioro de uno o más síntomas del herpes o de aliviar los síntomas del herpes.

• "Vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable" se refiere a un excipiente o vehículo que no produce una reacción adversa, alérgica u otra reacción adversa cuando se administra a un animal, preferiblemente un ser humano. Incluye todos y cada uno de los disolventes, medios de dispersión, revestimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes isotónicos y retardadores de la absorción y similares. Para la administración humana, las preparaciones inyectadas deben cumplir con los estándares de esterilidad, pirogenia, seguridad general y pureza requeridos por las oficinas reguladoras, tales como, por ejemplo, la Oficina de la FDA o la EMA.

• "Aproximadamente" precediendo una cifra significa más o menos el 10% del valor de dicha cifra.

• "Composición cosmética" se refiere a una composición destinada a estar en contacto con las diversas partes superficiales del cuerpo humano, en particular la mucosa, incluidos los labios, los genitales externos o cualquier membrana mucosa, a la vista, exclusiva o principalmente, para limpiarlos, para perfumarlos, para protegerlos, mantenerlos en buen estado, modificar su aspecto o corregir los olores corporales. En una realización, una composición cosmética de la invención tiene como objetivo reducir o prevenir la aparición de los signos visibles de las mucosas de la infección por herpes, manteniendo así la mucosa en buen estado y/o modificando sus aspectos.

• "Cosméticamente aceptable" se refiere a un componente que es adecuado para su uso en contacto con la mucosa, incluidos los labios, las partes genitales externas o cualquier membrana mucosa sin efectos secundarios adversos indebidos (tales como toxicidad, irritación, respuesta alérgica y similares).

• "Base cosméticamente aceptable" se refiere a un vehículo cosméticamente aceptable que comprende un componente lipófilo.

• "Vehículo" se refiere a una sustancia con la que se mezcla el componente de interés o en la que se disuelve el componente de interés. En una realización, el vehículo puede ser una base cosméticamente aceptable.

Descripción detallada

En un primer aspecto, esta invención se refiere a una composición que comprende dihidroquercetina (DHQ), de 0,05% a 5% p/p de a-tocoferol, y bisabolol para su uso en el tratamiento, incluido el alivio, de los síntomas de infección por HSV.

En un segundo aspecto, esta invención se refiere a una composición que comprende dihidroquercetina (DHQ), de 0,05% a 5% p/p de a-tocoferol, y bisabolol para su uso en el tratamiento de la inflamación en las áreas infectadas de la mucosa, es decir, el término "tratar (que trata) la infección por herpes" o “tratamiento de los síntomas de la infección por HSV" comprende el tratamiento de la inflamación en las áreas infectadas de la mucosa debido a, o asociada con, la infección por herpes, especialmente la infección por HSV-2. Mediante "áreas infectadas de la mucosa" se entiende cualquier parte del cuerpo donde haya inflamación, llagas y/o ampollas causadas por herpes y puedan surgir. Ejemplos de tales áreas infectadas son, sin limitación, la mucosa de labios, boca, nariz, ojos, genitales y áreas circundantes.

DHQ es el nombre común de 3,3',4',5,7-pentahidroxiflavona deshidratada, también llamada 2-(3,4-dihidroxifenil)-3,5,7-trihidroxi-4H-1 -benzopiran-4-ona deshidratada, también conocida como taxifolina. El DHQ es una alternativa valiosa a la quercetina ya que se caracteriza por una gran estabilidad química con significativas propiedades biológicas y farmacológicas conservadas y por su seguridad. La DHQ ha sido identificada como un poderoso antioxidante, segura y como conservante natural.

En una realización, la DHQ se extrae de un tipo de madera de alerce, preferiblemente de alerce siberiano. En una realización, el polvo que contiene DHQ contiene al menos 96% p/p en peso de DHQ y corresponde a los requisitos técnicos y las normas sanitarias sobre la base de informes analíticos y microbiológicos.

En una realización de la presente invención, la concentración de DHQ en la composición para su uso en la invención varía de 0,1% a 10% p/p (es decir, en peso, en peso de la composición total), preferiblemente de 0,5% a 8% p/p, más preferiblemente de 1% a 5% p/p.

El a-tocoferol, comúnmente llamado vitamina E, tiene muchas funciones biológicas, considerándose la función antioxidante como la más importante. Además, es liposoluble. Realiza su función como antioxidante en conexión con la vía de la glutatión peroxidasa y protege la membrana celular de la oxidación al reaccionar con los radicales lipídicos producidos durante la reacción en cadena de peroxidación lipídica. Este proceso eliminaría los intermedios de radicales libres reactivos y evitaría que continúe la reacción en cadena de oxidación. Los radicales a-tocoferoxilo resultantes se pueden convertir de nuevo a la forma reducida mediante la reducción por otros oxidantes tales como ascorbato, retinol o ubiquinol, así como DHQ. Sin querer ceñirse a una teoría, el solicitante sugiere que el a-tocoferol puede favorecer el reciclaje de DHQ en su forma fenólica activa.

En una realización, la concentración en la composición de la invención de a-tocoferol varía de 0,1% a 3% p/p, preferiblemente de 0,5% a 2% p/p, más preferiblemente aproximadamente 1% p/p.

El bisabolol (6-metil-2-(4-metil-3-ciclohexen-1-il)-5-hepten-2-ol, o 1-metil-4-(1,5-dimetil-1-hidroxihex-4(5)-il)ciclohexen-1) es un sesquiterpeno que se encuentra en varias plantas, como el té de hierbas y la manzanilla. Los efectos conocidos más importantes del bisabolol son propiedades antiinflamatorias, cicatrizantes, antibacterianas, antimicóticas y antiflogísticas. Por lo tanto, se utiliza mucho en productos cosméticos y de cuidado personal. Especialmente, el bisabolol puede usarse para mejorar la penetración transepidérmica, en otras palabras, puede usarse para aumentar las difusividades a través de la barrera cutánea modificada (Kadir et al., Int. J. Phann., 1991, 70: 87-94). En la presente invención, el bisabolol se usa como vehículo de DHQ y/o a-tocoferol y se cree que facilita la difusión de DHQ y/o a-tocoferol al área dérmica.

En una realización, la concentración de bisabolol varía del 0,02% al 5% p/p en peso por peso de la composición total, preferiblemente del 0,1% al 2% p/p, más preferiblemente del 0,2% al 1% p/p, incluso más preferiblemente aproximadamente 0,2% p/p.

En una realización, la composición para uso de la invención comprende o consiste en DHQ, a-tocoferol y bisabolol, en asociación con cualquier vehículo aceptable. Según una realización, la composición para usar en un método para tratar los síntomas relacionados con la infección por HSV-2, especialmente la inflamación de la mucosa relacionada con HSV-2, de acuerdo con la invención, comprende dihidroquercetina (DHQ), a-tocoferol y bisabolol, en asociación con un vehículo aceptable, especialmente un vehículo farmacéuticamente aceptable.

En una realización, la composición para su uso en el tratamiento de los síntomas relacionados con la infección por HSV-2, especialmente la inflamación de la mucosa relacionada con el HSV-2, de acuerdo con la invención, comprende:

- De 0,1% a 10% en peso del peso total de la composición de dihidroquercetina, preferiblemente de 0,5% a 8% p/p, más preferiblemente de 1% a 5% p/p,

- De 0,05% a 5% p/p de a-tocoferol, preferiblemente de 0,1% a 2,5% p/p, más preferiblemente de 0,5% a 2% p/p,

- Bisabolol y

- Un vehículo aceptable.

- De 0,02% a 5% p/p de bisabolol, preferiblemente de 0,1% a 2% p/p, más preferiblemente de 0,2% a 1% p/p, y

- Un vehículo aceptable.

Según una realización, el vehículo aceptable comprende al menos un compuesto seleccionado del grupo que comprende grasa animal, grasa vegetal, alcoholes superiores, glicoles, aceite mineral o una mezcla de los mismos.

Un ejemplo no limitativo de grasa animal es el ácido esteárico. Los ejemplos de grasa vegetal incluyen, pero no se limitan a, ácido linoleico, aceite de jojoba (también llamado aceite simmondsia chinensis), aceite de almendras dulces, aceite de aguacate o una mezcla de los mismos. Los ejemplos de alcoholes superiores incluyen, pero no se limitan a, alcohol cetearílico, alcohol estearílico, alcohol cetílico. Los ejemplos de glicoles incluyen, pero no se limitan a, propilenglicol. Los ejemplos de aceite mineral incluyen, pero no se limitan a, aceite de parafina.

Según una realización, la composición para su uso en el tratamiento de los síntomas relacionados con la infección por HSV-2, especialmente la inflamación de la mucosa relacionada con el HSV-2, de acuerdo con la invención, comprende además al menos un componente seleccionado del grupo que comprende tensioactivos, pigmentos, estabilizadores, emolientes, humectantes o una mezcla de los mismos. En una realización, la composición para usar en el tratamiento de los síntomas relacionados con la infección por HSV-2, especialmente la inflamación de la mucosa relacionada con el HSV-2, según la invención, comprende óxido de zinc y/o carbonato de zinc.

Los ejemplos de tensioactivos incluyen, pero no se limitan a, estearato de PEG-100, estearato de PEG-20 o una mezcla de los mismos. Los ejemplos de estabilizadores incluyen, pero no se limitan a, carbómero.

Los ejemplos de pigmentos incluyen, pero no se limitan a, óxido de zinc. Los ejemplos de emolientes incluyen, pero no se limitan a, triglicérido caprílico/cáprico, éter dicaprílico, estearato de glicerilo, monoestearato de glicerilo o una mezcla de los mismos. Los ejemplos de humectantes incluyen, pero no se limitan a, glicerina, sorbitol o una mezcla de los mismos.

Según una realización, la composición para usar en el tratamiento de síntomas relacionados con la infección por HSV-2, especialmente la inflamación de la mucosa relacionada con HSV-2, de acuerdo con la invención, comprende además un perfume, como por ejemplo citronelol, geraniol, limoneno, alcohol cinamílico, butil fenil metilpropional, o una mezcla de los mismos.

Según una realización, la composición para usar en el tratamiento de los síntomas relacionados con la infección por HSV-2, especialmente la inflamación de la mucosa relacionada con el HSV-2, de acuerdo con la invención, comprende además conservantes tales como, por ejemplo, imidazolidinil urea.

De acuerdo con una realización, la composición para usar en el tratamiento de síntomas relacionados con la infección por HSV-2, especialmente la inflamación de la mucosa relacionada con el HSV-2, de acuerdo con la invención, comprende además agua.

En una realización, la composición para su uso en el tratamiento de los síntomas relacionados con la infección por HSV-2, especialmente la inflamación de la mucosa relacionada con el HSV-2, de acuerdo con la invención, está diseñada para la administración tópica.

Según una realización, la composición para su uso en el tratamiento de los síntomas relacionados con la infección por HSV-2, especialmente la inflamación de la mucosa relacionada con el HSV-2, de acuerdo con la invención se encuentra en una forma adaptada a la administración tópica, tal como, por ejemplo, en forma de crema, gel, pomada, solución, emulsión, mascarilla, leche, loción, suero, pasta, barra, espuma o suspensión. En una realización preferida, la composición de la invención es una crema o una barra. En otra realización preferida, la composición para usar en un método para tratar los síntomas relacionados con la infección por HSV-2, especialmente la inflamación de la mucosa relacionada con el HSV-2, de acuerdo con la invención, es un gel. En una realización preferida adicional, la composición para usar en un método para tratar los síntomas relacionados con la infección por HSV-2, especialmente la inflamación de la mucosa relacionada con el HSV-2, de acuerdo con la invención, es una emulsión de aceite en agua.

En una realización, los síntomas relacionados con la infección por HSV-2 es una inflamación inducida por la infección por herpes en la mucosa.

En una realización, tratar los síntomas relacionados con la infección por HSV-2 significa prevenir y/o reducir los signos visibles de la infección por herpes. El término "signos visibles de infección por herpes" incluye, pero no se limita a, ampollas en la mucosa de los labios, la nariz, los ojos o los genitales y áreas circundantes.

En una realización, tratar los síntomas relacionados con la infección por HSV-2 significa prevenir y/o limitar las molestias cutáneas o mucosas inducidas por la infección por herpes. Los ejemplos de malestar inducido por la infección por herpes incluyen, pero no se limitan a, picazón y dolor.

En una realización, el sujeto está infectado por el virus del herpes simple de tipo 2.

En una realización, el sujeto corre el riesgo de ser infectado por HSV-2. Los ejemplos de riesgos incluyen, sin limitación, contactos con personas infectadas con HSV-2 o con HSV-2, en particular contactos con personas que tienen una infección activa por herpes.

En una realización, el virus del herpes está inactivo. En otra realización, el virus del herpes está activo.

En una realización, la composición para usar según la invención es para tratar un brote de herpes, especialmente una infección por HSV-2, más especialmente una inflamación de la mucosa relacionada con HSV-2. En una realización, el brote de herpes fue causado por el estrés. En otra forma de realización, el brote de herpes fue causado por una enfermedad. En otra realización, el brote de herpes fue causado por fiebre. En otra realización, el brote de herpes fue causado por la exposición al sol. En otra realización, el brote de herpes fue causado por períodos menstruales. En otra realización, el brote de herpes fue causado por una cirugía. Por lo tanto, en una realización, el sujeto está estresado, enfermo, tiene fiebre, se expuso al sol, está en un período menstrual o se sometió a una cirugía.

En una realización, el brote de herpes es el primer brote en el sujeto. En otra realización, el brote de herpes no es el primer brote en el sujeto y, por lo tanto, es al menos el segundo brote en el sujeto, tal como, por ejemplo, el segundo, tercero, 4°, 5°, 6°, 7°, 8° o más brote en el sujeto.

En una realización, el sujeto no fue tratado previamente con otro tratamiento para la infección por herpes. En otra realización, el sujeto recibió previamente uno o más de otros tratamientos para la infección por herpes antes de ser administrado con la composición como se describe en el presente documento.

En una realización, el sujeto es resistente a al menos un medicamento para tratar el herpes. Los ejemplos de tales medicamentos incluyen, sin limitación, docosanol, aciclovir, penciclovir, famciclovir, valaciclovir y cidofovir. En una realización, el sujeto es resistente a al menos una medicación antivírica. Los ejemplos de medicamentos antivíricos incluyen, sin limitación, aciclovir, penciclovir, famciclovir, valaciclovir y cidofovir. En una realización particular, el sujeto es resistente al aciclovir.

En una realización, la composición es una composición farmacéutica. En una realización, la composición es una composición terapéutica. En una realización, la composición es una composición cosmética. En una realización, la composición es una "composición cosmética complementaria" o "composición complementaria no terapéutica". En el sentido de esta invención, "composición cosmética complementaria" significa composición cosmética destinada a ayudar al paciente en el tratamiento de su malestar cutáneo o de la mucosa relacionado con la terapia. Ventajosamente, las composiciones cosméticas complementarias son seguras, no contienen componentes fototóxicos y/o fotosensibilizantes, no muestran toxicidad. Además, las composiciones cosméticas complementarias no afectan a la eficacia de la terapia.

En una realización, la composición para uso según la invención es para uso externo. En una realización, el uso de la composición según la invención requiere que la composición se aplique sobre mucosa inflamada.

En una realización, una cantidad de composición es suficiente para cubrir el área afectada de la mucosa con una capa fina de la composición.

A título indicativo, la composición para su uso se puede aplicar una, dos, tres o más veces al día, preferiblemente tres veces al día. A título indicativo, la composición a utilizar se puede aplicar durante 7, 14 o 21 días o hasta que desaparezcan los síntomas visibles de la infección por herpes.

En una realización, la composición para uso de la invención se almacena en un recipiente, preferiblemente un recipiente de vidrio. En una realización, el recipiente de vidrio se esteriliza usando un esterilizador de calor seco. En una realización, el recipiente es un recipiente de plástico. En una realización, el recipiente de plástico se esteriliza usando irradiación UV usando lámparas UV de "vidrio de cuarzo duro" de baja presión.

En una realización, la composición para uso de la invención es estable durante un año en condiciones estándar de almacenamiento.

Breve descripción de los dibujos

La Figura 1 es un gráfico que muestra el efecto inhibidor de DHQ sobre la reducción del citocromo c (producción de aniones superóxido) resultante de la activación de neutrófilos por PMA o fMLP. La reducción del citocromo c se expresa en dDO/min. La concentración de DHQ se expresa en pM. Los datos numéricos se detallan en la Tabla 1.

La Figura 2 es un gráfico que muestra el efecto inhibidor de DHQ sobre la producción de ROS resultante de la activación de neutrófilos mediante 100 ng/mL de PMA. Los datos numéricos se detallan en la Tabla 2.

La Figura 3 es un gráfico que muestra el efecto inhibidor de DHQ sobre la producción de ROS resultante de la activación de los neutrófilos mediante 10-6 M de fMLP. Los datos numéricos se detallan en la Tabla 3.

La Figura 4 es un gráfico que muestra el efecto de la DHQ sobre la desgranulación de los mastocitos según lo estimado por la liberación de beta-hexosaminidasa. La disminución de la beta-hexaminidasa liberada se expresa en porcentajes, correspondiendo el 100% a la liberación de beta-hexaminidasa en ausencia de DHQ. La concentración de DHQ se expresa en pM.

La Figura 5 es un gráfico que muestra la inhibición de la proliferación de fibroblastos en presencia de concentraciones crecientes de DHQ estimadas por la disminución de los niveles de MTT reducido. La disminución de los niveles de MTT reducido se evalúa midiendo el formazán reducido. La viabilidad celular se evalúa por el grado de reducción de MTT. La concentración de DHQ se expresa en pM.

Ejemplos

La presente invención se ilustra adicionalmente mediante los siguientes ejemplos.

Ejemplo 1: Composiciones de la invención

Composiciones tópicas que comprenden 1, 2, 5 o 10% p/p de DHQ, 0,5 o 1% p/p de a-tocoferol y 0,1 o 0,2% p/p de bisabolol, aceite de jojoba y un vehículo compatible con las mucosas.

Ejemplo 2: Efecto de DHQ sobre la activación de neutrófilos polimorfonucleares

Materiales y métodos

Se suspenden neutrófilos (5 x 105) en 0,5 mL de solución salina equilibrada de Hanks que contiene luminol 10 pM a 37°C. Luego, las células se estimulan con fMLP (N-formilmetionil-leucil-fenilalanina) 10-6 M. La quimioluminiscencia se registra con un luminómetro (Berthold-Biolumat LB937).

Se disuelve PMA (12-0-tetradecanoil-forbol-13-acetato, Consolidated Midland Corp., Brewster, N. Y.) a razón de 1 mg/mL en dimetilsulfóxido. Esta solución madre mantiene una actividad biológica completa durante varios meses cuando se almacena a 25°C en la oscuridad. A menos que se especifique lo contrario, los neutrófilos polimorfonucleares (PMN), 106/mL en BS-H, se colocan en tubos de centrífuga de plástico (Falcon n° 2070, Falcon Labware, Div. de Becton, Dickinson & Co., Oxnard, CA) y se llevan a 37°C. Se añade una solución madre de PMA para proporcionar una concentración final de 100 ng/mL de PMA. Las células "en reposo" (control) se exponen a dimetilsulfóxido al 1% (vol/vol). Se utiliza un método de quimioluminiscencia (usando luminol) para medir la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) (Dang et al., J Clin Invest. 2006, 116 (7): 2033-43; Boussetta et al., Blood.

2010, 116 (26): 5795-802). La producción de superóxido se mide mediante el ensayo de reducción de ferricitocromo c inhibible por superóxido dismutasa (SOD).

Resultados

Cuando son activados por bacterias opsonizadas, zymozan, fMLP (formil-metionil-leucil-fenilalanina) o PMA (miristato acetato de forbol), los neutrófilos experimentan una explosión oxidativa que resulta en la producción de anión superóxido y subsiguiente peróxido de hidrógeno. El estallido oxidativo está mediado principalmente por la activación de la NADPH oxidasa, enzima responsable de la producción del anión superóxido. La cuantificación del anión superóxido mediante la medición de la reducción del citocromo c (véase la Tabla 1 a continuación y la Figura 1) muestra que la adición de DHQ inhibe fuertemente la reducción del citocromo c. Este efecto resulta de la captación directa del anión superóxido o de la inhibición de la activación de la NADPH oxidasa.

Tabla 1. Efecto inhibidor de DHQ sobre la reducción del citocromo c (producción de anión superóxido) resultante de la activación de neutrófilos mediante PMA o fMLP.

("dDO" significa variación de la densidad óptica)

Con el fin de investigar más a fondo el efecto de DHQ sobre el estallido oxidativo de neutrófilos, también se midió la producción de ROS mediante quimioluminiscencia para detectar tanto el anión superóxido como el peróxido de hidrógeno.

Los neutrófilos son activados por PMA (100 ng/mL) en presencia de diferentes concentraciones de DHQ (0, 1, 10 y 100 pM) a 37°C en tampón Hanks que contiene luminol 10 pM y la quimioluminiscencia se mide con un quimioluminómetro. Recuento total de quimioluminiscencia durante 22,21 min. (integrales) correspondientes a la producción total de ROS. Los resultados correspondientes se presentan en la Tabla 2 y la Figura 2.

Tabla 2. Producción de ROS por neutrófilos desencadenada por PMA 100 ng/mL (datos experimentales correspondientes a la Figura 2).

De manera similar, los neutrófilos fueron activados por fMLP (10-6 M) en presencia de diferentes concentraciones de DHQ (0, 1, 10 y 100 pM) a 37°C en tampón de Hanks que contiene luminol 10 pM y se midió la quimioluminiscencia mediante un quimioluminómetro. Recuento total de quimioluminiscencia durante 22,21 min. (integrales) correspondientes a la producción total de ROS. Los resultados correspondientes se presentan en la Tabla 3 y la Figura 3.

Tabla 3. Producción de ROS por neutrófilos desencadenada por fMLP (10‘6 M) (datos experimentales correspondientes a la Figura 3).

El ensayo quimioluminiscente detectó todas las ROS oxidantes, incluida la forma protonada del anión superóxido y el peróxido de hidrógeno.

Los resultados de las Figuras 2 y 3 muestran que DHQ inhibe fuertemente la producción de ROS por los neutrófilos activados por PMA o fMLP. El efecto inhibidor proporcionado por DHQ parece muy eficaz ya que la adición de 1 pM en el medio de ensayo da como resultado una inhibición de alrededor del 80% de la producción de ROS en ambos experimentos.

Por tanto, estos resultados sugieren que el DHQ, además de su conocida propiedad antioxidante, inhibe la activación de la NADPH oxidasa en los neutrófilos polimorfonucleares desencadenados por fMLP o PMA. Esta propiedad se ve confirmada por el hecho de que DHQ inhibe aún más fuertemente el consumo de oxígeno de los neutrófilos polimorfonucleares desencadenados por PMA y fMLP (datos no mostrados).

Ejemplo 3: Efecto de DHQ sobre la activación de mastocitos

Materiales y métodos

Las poblaciones puras de mastocitos humanos (HMC) se obtienen mediante cultivo a largo plazo de progenitores hematopoyéticos normales humanos (células CD34+) en presencia continua del Factor de Células Madre (SCF). Fuentes de estas células CD34+ son principalmente la médula ósea, la sangre del cordón umbilical o la sangre periférica. Por lo general, las células mononucleares de la médula ósea y la sangre del cordón umbilical contienen 0,5-1% de células CD34+, mientras que la sangre periférica contiene menos que 0,1% de células CD34+.

Las células progenitoras hematopoyéticas se pueden enriquecer rápida y eficazmente hasta una pureza de aproximadamente el 85-98% mediante la selección positiva de células CD34+ marcadas magnéticamente. A continuación, las células progenitoras hematopoyéticas se marcan magnéticamente utilizando MACS CD34 MicroBeads. Las células marcadas magnéticamente se enriquecen en columnas de selección positiva en el campo magnético. De lo contrario, las células mononucleares de sangre periférica (PBMC), sangre de cordón umbilical o médula ósea pueden obtenerse mediante centrifugación en gradiente de densidad sobre Ficoll Paque®. Los métodos de fraccionamiento para producir mastocitos se describen en la técnica (véase por ejemplo Arock et al., 2008, Methods in Molecular Biology 415: 241-254).

Resultados

La desgranulación de los mastocitos se indujo mediante el tratamiento secuencial de los mastocitos con IgE, luego con anticuerpos anti-IgE. Posteriormente se midió la desgranulación evaluando la liberación de beta-hexosaminidasa, 1 h después de la estimulación con IgE (véase la Figura 4).

Los experimentos realizados demuestran que la DHQ tiene una fuerte actividad inhibidora sobre la desgranulación de mastocitos (inhibición del 80% a 100 pM y hasta 50% a 10 pM). Este resultado indica que el DHQ muestra una alta actividad inhibidora, que es superior a los inhibidores de quinasa y al cromoglicato (molécula de referencia).

Ejemplo 3: Efecto de DHQ sobre la proliferación de fibroblastos NIH-3T3

Materiales y métodos

La línea celular NIH 3T3 se adquirió en la ATCC (CRL1658). Las líneas celulares se cultivan en medio Eagles modificado de Dulbecco (DMEM) suplementado con suero de ternero recién nacido inactivado por calor al 10%, penicilina 100 UI/mL y estreptomicina 100 pg/mL (todos de Gibco BRL) a 37°C en una atmósfera humidificada de CO2 al 5%. Se disuelve DHQ en DMSO. Las células se cultivan durante 48 horas en ausencia o en presencia de diversas concentraciones de DHQ. Los fibroblastos NIH-3T3 son células inmortalizadas que imitan el fenotipo inflamatorio evaluado por la abundancia de fibras de estrés de actina y alta contractilidad.

Los efectos de DHQ sobre el crecimiento de células NIH-3T3 se determinan usando el ensayo de bromuro de 3-(4,5-dimettiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio (MTT). Brevemente, las células se cultivan en placas de 96 pocillos a 4.000 células por pocillo con concentraciones crecientes de DHQ. Después de 72 horas de incubación con el fármaco, se retira el medio y se reemplaza por medio completo MTT (10% v/v). Después de 3 horas de incubación, los cristales de formazán se disuelven en tampón que contiene SDS al 10% (p/v, Bio-Rad), dimetilformamida al 50% (Sigma), pH 4,7. La absorbancia del formazán reducido se mide a 580 nm. Los resultados se presentan en la Figura 5: El 100% de MTT reducido se atribuye a la medida realizada en ausencia de DHQ.

Resultados

Como se muestra en la Figura 5, la viabilidad celular de las células NIH-3T3 cultivadas en presencia de concentraciones crecientes de DHQ se reduce (la viabilidad celular se evalúa por el grado de reducción de MTT). Considerando que los fibroblastos NIH-3T3 son células inmortalizadas que imitan el fenotipo de los miofibroblastos, puede inferirse por tanto de estos resultados que la proliferación de fibroblastos es inhibida en presencia de concentraciones crecientes de DHQ.

Ejemplo 4

Se recogieron algunos parámetros de los síntomas en un grupo de 20 sujetos masculinos que padecían recrudescencias del virus del herpes simple genital tipo 2 (de tres a cinco brotes al año) y que mostraban inflamación de la mucosa inducida por HSV-2 y ampollas y llagas genitales, con prurito. Se trató un primer grupo de cinco sujetos (Grupo A), durante 14 días aplicando tópicamente una vez al día una composición que comprende:

- DHQ 5% p/p

- a-Tocoferol 1% p/p

- Bisabolol 0,2% p/p.

Un segundo grupo de cinco sujetos (Comparativo: Grupo B) se trató durante 14 días aplicando tópicamente una vez al día una composición que comprendía 5% p/p de a-dihidroquercetina como agente activo único.

Un tercer grupo de cinco sujetos (Comparativo: Grupo C) se trató durante 14 días aplicando tópicamente una vez al día una composición que comprendía 1% p/p de a-tocoferol como agente activo único.

Un cuarto grupo de cinco sujetos (Comparativo: Grupo D) se trató durante 14 días aplicando tópicamente una vez al día una composición al 0,2% p/p de bisabolol como agente activo único.

El grupo A informó de un alivio fuerte e inmediato y prolongado de la inflamación y el dolor, una disminución del número de ampollas y llagas. También se observó un tiempo más largo antes de que surgiera el siguiente brote.

El grupo comparativo B informó de un efecto sobre el número de ampollas y llagas después de 7 días y un alivio de la inflamación asociada.

El grupo comparativo C informó de una sensación de alivio tras la aplicación de la composición de a-tocoferol, durante aproximadamente 10 minutos a una hora. Más allá de este alivio inmediato, no se informó de ningún alivio de los síntomas.

El grupo comparativo D informó de la ausencia de efectos.

Conclusión: la asociación en una única combinación de DHQ, a-tocoferol y bisabolol parece traer un efecto sinérgico en términos de penetración y alivio inmediato de la inflamación de los pacientes, combinado con un inicio inmediato de la acción de DHQ, seguido de una acción a medio y largo plazo de DHQ. Este efecto no es observable en grupos que han sido administrados con ingredientes únicos.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una composición que comprende dihidroquercetina y a-tocoferol y bisabolol para su uso en el tratamiento tópico de los síntomas en las mucosas del virus del herpes simple tipo 2; en donde el a-tocoferol varía de 0,05% a 5% en peso del peso total de la composición (p/p).

2. La composición para su uso según la reivindicación 1, en donde la mucosa es una mucosa genital.

3. La composición para su uso según la reivindicación 1 o 2, en donde la concentración de dihidroquercetina varía de 0,1% a 10% en peso del peso total de la composición (p/p), preferiblemente de 0,5% a 8% p/p, preferiblemente de 1 % a 5% p/p.

4. La composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde la concentración de atocoferol varía de 0,1% a 3% p/p, preferiblemente de 0,5% a 2% p/p.

5. La composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la concentración de bisabolol varía de 0,02% a 5% en peso del peso total de la composición (p/p), preferiblemente de 0,1% a 2% p/p, preferiblemente de 0,2% a 1% p/p.

6. La composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde dicha composición comprende de 0,1% a 10% p/p de dihidroquercetina, de 0,05% a 5% p/p de a-tocoferol, de 0,02% a 5% p/p de bisabolol y una base compatible con las mucosas.

7. La composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en donde dicha composición comprende aproximadamente 5% p/p de dihidroquercetina, aproximadamente 1% p/p de a-tocoferol, aproximadamente 0,2% p/p de bisabolol y una base compatible con las mucosas.

8. La composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en donde la base compatible con las mucosas comprende al menos un compuesto seleccionado del grupo que comprende grasa animal, grasa vegetal, alcoholes superiores, glicoles o mezclas de los mismos.

9. La composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en donde dicha composición comprende además al menos un componente seleccionado del grupo que comprende tensioactivos, pigmentos, estabilizantes, emolientes, humectantes o mezclas de los mismos.

10. La composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde la composición es una crema, un gel, un ungüento, una solución, una emulsión, especialmente una emulsión de aceite en agua, una mascarilla, una barra, una leche, una loción, un suero, una pasta, una espuma o una suspensión, preferiblemente una crema o una barra.

11. La composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en donde la composición se administra en combinación con otro tratamiento para el herpes, preferiblemente un tratamiento oral para el herpes.