BR112013001640A2 - anticorpo monoclonal que se liga aos epítopos de epha2 e cd44, seu uso no tratamento de câncer e na detecção de célula cancerosa, bem como composição, kit, ácido nucleico e vetor 5 de expressão - Google Patents

anticorpo monoclonal que se liga aos epítopos de epha2 e cd44, seu uso no tratamento de câncer e na detecção de célula cancerosa, bem como composição, kit, ácido nucleico e vetor 5 de expressão Download PDF

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Abstract

ANTICORPOS DE ANTÍGENO ANTITUMOR E MÉTODOS DE USO. A presente invenção refere-se a anticorpos que se ligam a antígeno CD44 associado a tumor ou antígeno EphA2 associado a tumor são divulgados neste documento, bem como composições relacionadas e métodos de uso. Métodos de uso abrangem métodos de terapias de câncer, diagnóstico e triagem.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "ANTICORPO MONOCLONAL QUE SE LIGA AOS EPÍTOPOS DE EphA2 E CD44, SEU
USO NO TRATAMENTO DE CÂNCER E NA DETECÇÃO DE CÉLULA CANCEROSA, BEM COMO COMPOSIÇÃO, KIT, ÁCIDO NUCLEICO E 5 VETOR DE EXPRESSÃO". Referência Cruzada Este pedido reivindica o benefício do Pedido de Patente Provisó- rio US 61/366.823, depositado em 22 de julho de 2010, cujo pedido é aqui incorporado por referência na sua totalidade. Declaração Quanto à Pesquisa Patrocinada pelo Governo Federal Esta invenção foi realizada com suporte governamental sob a concessão n°. CA058207 concedida pelo National In stitutes of Health. O governo tem certos direitos na invenção. Introdução Os estudos extensivos de padrões de transcrição de câncer levaram à verificação de alvos moleculares para distinguir cânceres ma- lignos dos benignos e os cânceres mais agressivos daqueles que são menos agressivos. Os cânceres frequentemente superexpressam um de- terminado número de proteínas, incluindo determinados antígenos de su- perfície de células, por exemplo, receptores de superfície celular. Os anti- corpos que se ligam a tais antígenos de superfície celular superexpressos podem facilitar a detecção e o tratamento de tais cânceres. Várias abor- dagens têm sido usadas para gerar anticorpos para receptores de super- fície celular de câncer que podem ser usados como agentes terapêuticos potenciais. A identificação de receptores de superfície celulares superex- pressos e anticorpos que se ligam a eles proporciona uma via para o de- senvolvimento de terapias do câncer, especialmente para os subtipos de câncer com pobre prognóstico e resistência às terapias convencionais. CD44 e EphA2 são dois receptores de superfície celular superexpressos, e são conhecidos a partir de perfis de transcrição e análise proteômica como sendo superexpressos em cânceres da mama basal. Os anticorpos específicos para os receptores da superfície celu- Segue-se folha 1a/105
1a/105 lar osuperexpressos sobre uma série de cânceres têm sido usados para o desenvolvimento de imunoterapêuticos alvos.
Por exemplo, HER2, CD20, e EGFR são superexpressos em uma série de tumores e os anticorpos que
Segue-se folha 2/105

Claims (17)

REIVINDICAÇÕES
1. Anticorpo monoclonal isolado, caracterizado pelo fato de que (a) se liga especificamente a um epítopo de EphA2, cujo epí- 5 topo é especificamente ligado por, ou cujo anticorpo monoclonal isolado compete pela ligação a EphA2 com, o anticorpo D2-1A7, 2D6, D2-1A9, D2- 1B1, A3H9, A3G3, A3D10, A3D1, A3C8, 1A3, 1A5, 1A8, 1A12, 1B2, 1C2, 1C7, 1D8, ou 15H11; (b) se liga especificamente a um epítopo de CD44, cujo epí- topo é especificamente ligado por, ou cujo anticorpo monoclonal isolado compete pela ligação a CD44 com, o anticorpo F2-1A6, F2-1H9, E8H11, E8H7, E8G12, E8F11, E8C9, D6G9, D6D3, D1C5, D1D1, HB8, HC2, HC4, HE3, HF1, ou HH3, ou que compete com o anticorpo F2-1A6, F2-1H9, E8H11, E8H7, E8G12, E8F11, E8C9, D6G9, D6D3, D1C5, D1D1, HB8, HC2, HC4, HE3, HF1, ou HH3, pela ligação a CD44.
2. Anticorpo monoclonal de acordo com a reivindicação 1, ca- racterizado pelo fato de que o referido anticorpo se liga especificamente a um epítopo de EphA2, cujo epítopo é especificamente ligado por um anticor- po D2-1A7, 2D6, D2-1A9, D2-1B1, A3H9, A3G3, A3D10, A3D1, A3C8, 1A3, 1A5, 1A8, 1A12, 1B2, 1C2, 1C7, 1D8, ou 15H11.
3. Anticorpo monoclonal de acordo com a reivindicação 1, e- tapa (a) ou reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que, quando ligado a EphA2 na superfície de uma célula de mamífero vivo, é internalizado dentro da célula.
4. Anticorpo monoclonal de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o referido anticorpo compreende: a) um polipeptídeo de cadeia pesada (VH) compreendendo: uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de D2-1A7; uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de 2D6; uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de D2-1A9; uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de D2-1B1;
uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de D2-A3H9; uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de D2-A3G3; uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de D2-A3D10; uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de D2-A3D1; 5 uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de D2-A3C8; uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de 1A3; uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de 1A5; uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de 1A8; uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de 1A12; uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de 1B2; uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de 1C2; uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de 1C7; uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de 1D8; ou uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de 15H11; b) um polipeptídeo de cadeia leve (VL) compreendendo: uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de D2-1A7; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de 2D6; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de D2-1A9; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de D2-1B1; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de D2-A3H9; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de D2-A3G3; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de D2-A3D10; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de D2-A3D1; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de D2-A3C8; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de 1A3; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de 1A5; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de 1A8; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de 1A12; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de 1B2; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de 1C2; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de 1C7; uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de 1D8; ou uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de 15H11; ou c) um polipeptídeo VH de acordo com a) e um polipeptídeo VL de acordo com b).
5. Anticorpo monoclonal de acordo com qualquer uma das rei- 5 vindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que o referido anticorpo é um Fv de cadeia simples (scFv), IgG, Fab, (Fab')2 ou (scFv')2.
6. Anticorpo monoclonal de acordo com qualquer uma das rei- vindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que o referido anticorpo é con- jugado a uma segunda molécula.
7. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende: um veículo farmaceuticamente aceitável; e um anticorpo monoclonal, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6.
8. Kit, caracterizado pelo fato de que compreende uma composi- ção, como definida na reivindicação 7 em um recipiente.
9. Uso de um anticorpo monoclonal, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, ou de uma composição, como definida na rei- vindicação 7, caracterizado pelo fato de que é para a fabricação de um me- dicamento para o tratamento de câncer em um indivíduo.
10. Uso de um anticorpo monoclonal, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que é para a fabri- cação de um kit para detectar uma célula cancerosa em um indivíduo.
11. Ácido nucleico isolado, caracterizado pelo fato de que com- preende uma sequência de nucleotídeos codificando uma sequência de a- minoácido de: a) um polipeptídeo de cadeia pesada variável (VH) compreen- dendo uma VH CDR1, uma VH CDR2 e uma VH CDR3 de um anticorpo, co- mo definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4; ou b) um polipeptídeo de cadeia leve variável (VL) compreendendo uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de um anticorpo, como defini- do em qualquer uma das reivindicações 1 a 4; ou c) um polipeptídeo VH compreendendo uma VH CDR1, uma VH
CDR2 e uma VH CDR3; e um polipeptídeo VL compreendendo uma VL CDR1, uma VL CDR2 e uma VL CDR3 de um anticorpo, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4.
12. Vetor de expressão, caracterizado pelo fato de que compre- 5 ende um ou mais ácido(s) nucleico(s), como definido(s) na reivindicação 11.
13. Célula hospedeira recombinante, caracterizada pelo fato de que compreende o vetor de expressão, como definido na reivindicação 12.
14. Célula hospedeira recombinante de acordo com a reivindica- ção 13, caracterizada pelo fato de que a célula expressa um anticorpo com- preendendo o polipeptídeo VH e o polipeptídeo VL da etapa c).
15. Célula hospedeira recombinante de acordo com a reivindica- ção 13, caracterizada pelo fato de que compreende: i) um vetor de expressão compreendendo uma sequência de nu- cleotídeos que codifica uma sequência de aminoácidos de um polipeptídeo de cadeia pesada variável (VH) compreendendo uma VH CDR1 compreen- dendo a sequência de aminoácidos SYAMH (SEQ ID NO:29), uma VH CDR2 compreendendo a sequência de aminoácidos VISYDGSNKYYADSVKG (SEQ ID NO: 45), e uma VH CDR3 compreendendo a sequência de aminoá- cidos ASVGATGPFDI (SEQ ID NO: 42); e ii) um vetor de expressão compreendendo uma sequência de nucleotídeos que codifica uma sequência de aminoácidos de um polipeptí- deo de cadeia leve variável (VL) compreendendo uma VL CDR1 compreen- dendo a sequência de aminoácidos QGDSLRSYYAS (SEQ ID NO:17), uma VL CDR2 compreendendo a sequência de aminoácidos GENNRPS (SEQ ID NO: 71), e uma VL CDR3 compreendendo a sequência de aminoácidos NSRDSSGTHLTV (SEQ ID NO: 60).
16. Célula hospedeira recombinante de acordo com a reivindica- ção 15, caracterizada pelo fato de que expressa um anticorpo compreen- dendo um polipeptídeo de cadeia pesada variável (VH) compreendendo a CDR1, CDR2 e CDR3 de i) e, um polipeptídeo de cadeia leve variável (VL) compreendendo a CDR1, CDR2 e CDR3 de ii).
17. Invenção, caracterizada por quaisquer formas de suas con-
cretizações ou qualquer categoria aplicável de reivindicação, por exemplo, de produto ou de processo ou uso englobadas pela matéria inicialmente descrita, revelada ou ilustrada no pedido de patente.
BR112013001640-0A 2010-07-22 2011-07-22 anticorpo monoclonal que se liga aos epítopos de epha2 e cd44, seu uso no tratamento de câncer e na detecção de célula cancerosa, bem como composição, kit, ácido nucleico e vetor 5 de expressão BR112013001640A2 (pt)

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