BR112012024785B1 - antagonista do receptor de cgrp, seu uso e composição farmacêutica que o compreende - Google Patents

antagonista do receptor de cgrp, seu uso e composição farmacêutica que o compreende Download PDF

Info

Publication number
BR112012024785B1
BR112012024785B1 BR112012024785-9A BR112012024785A BR112012024785B1 BR 112012024785 B1 BR112012024785 B1 BR 112012024785B1 BR 112012024785 A BR112012024785 A BR 112012024785A BR 112012024785 B1 BR112012024785 B1 BR 112012024785B1
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
compound
cgrp
pharmaceutically acceptable
treatment
antagonist
Prior art date
Application number
BR112012024785-9A
Other languages
English (en)
Other versions
BR112012024785A8 (pt
BR112012024785A2 (pt
Inventor
Prasad V. Chaturvedula
Gene M. Dubowchik
John E. Macor
Original Assignee
Bristol-Myers Squibb Company
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=43896902&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=BR112012024785(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Bristol-Myers Squibb Company filed Critical Bristol-Myers Squibb Company
Publication of BR112012024785A2 publication Critical patent/BR112012024785A2/pt
Publication of BR112012024785A8 publication Critical patent/BR112012024785A8/pt
Publication of BR112012024785B1 publication Critical patent/BR112012024785B1/pt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/416—1,2-Diazoles condensed with carbocyclic ring systems, e.g. indazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A61K31/4725—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/12—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for climacteric disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

ANTAGONISTA DO RECEPTOR DE CGRP. A descrição em geral diz respeito ao composto de fórmula I, (R)-N-(3-(7-metil-1H-indazol-5-il)-1-(4-(1-metilpiperidin-4-il)piperazin-1-il)-1-oxopropan-2-il)-4-(2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-3-il)piperidino-1-carboxamida, incluindo sais farmaceuticamente aceitáveis, que é um antagonista do receptor de CGRP. A descrição também diz respeito às composições farmacêuticas e métodos para usar o composto no tratamento de distúrbios relacionados a CGRP incluindo enxaquecas, vasodilatação neurogênica, inflamação neurogênica, lesão térmica, choque circulatório, fogacho associado com menopausa, doenças inflamatórias das vias aéreas tais como asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), e câncer.

Description

ANTAGONISTA DO RECEPTOR DE CGRP, SEU USO E COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA QUE O COMPREENDE ANTECEDENTES DA INVENÇÃO REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS DE PATENTE RELACIONADOS
[001] Este pedido de patente reivindica o benefício do pedido de patente provisório US 61/319.015 depositado em 30 de março de 2010.
[002] A descrição em geral diz respeito ao composto (R)-N-(3-(7-metil-1H-indazol-5-il)-1-(4-(1-metilpiperidin-4-il)piperazin-1-il)-1-oxopropan-2-il)-4-(2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-3-il)piperidino-1-carboxamida (Composto I ou o composto da fórmula I), incluindo sais farmaceuticamente aceitáveis, que é um antagonista do receptor de CGRP. A descrição também diz respeito às composições farmacêuticas e métodos para o uso do composto no tratamento de distúrbios relacionados a CGRP incluindo enxaquecas, vasodilatação neurogênica, inflamação neurogênica, lesão térmica, choque circulatório, fogacho associado com menopausa, doenças inflamatórias das vias aéreas tais como asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), e câncer.
[003] Peptídeo relacionado ao gene de calcitonina (CGRP) é um peptídeo de 37 aminoácidos de ocorrência natural identificado pela primeira vez em 1982 (Amara, S. G. et al, Science 1982, 298, 240244). Duas formas do peptídeo são expressadas (αCGRP e βCGRP) que diferem por um e três aminoácidos em ratos e seres humanos, respectivamente. O peptídeo é distribuído amplamente tanto no sistema nervoso periférico (PNS) como central (CNS), principalmente localizado em neurônios sensoriais aferentes e centrais, e apresenta vários efeitos biológicos, incluindo vasodilatação.
[004] Quando liberado da célula, CGRP liga-se aos receptores acoplados à proteína G específicos da superfície da célula e exerce sua ação biológica predominantemente por ativação da adenilato ci-clase intracelular (Poyner, D. R. et al, Br J Pharmacol 1992, 105, 4417; Van Valen, F. et al, Neurosci Lett 1990, 119, 195-8.). Duas classes de receptores de CGRP, CGRP1 e CGRP2, foram propostas com base nas propriedades antagonísticas do fragmento de peptídeo CGRP(8-37) e na habilidade dos análogos lineares de CGRP de ativar os receptores de CGRP2 (Juaneda, C. et al. TiPS 2000, 21, 432-438). Porém, há falta de evidência molecular para o receptor de CGRP2 (Brain, S. D. et al, TiPS 2002, 23, 51-53). O receptor de CGRP1 tem três componentes: (i) um receptor semelhante ao receptor da calcitonina (CRLR) de transmembrana 7; (ii) proteína do tipo um modificadora da atividade do receptor (RAMP1) de transmembrana simples; e (iii) a proteína intracelular de componente do receptor (RCP) (Evans B. N. et al., J Biol Chem. 2000, 275, 31438-43). RAMP1 é requerida para transporte de CRLR para a membrana plasmática e para ligação do ligante ao receptor de CGRP (McLatchie, L. M. et al, Nature 1998, 393, 333-339). RCP é requerido para transdução de sinal (Evans B. N. et al., J Biol Chem. 2000, 275, 31438-43). Há diferenças espécie-específicas conhecidas na ligação dos antagonistas de molécula pequena ao receptor de CGRP com afinidade tipicamente maior vista para o antagonismo do receptor humano que para outras espécies (Brain, S. D. et al, TiPS 2002, 23, 51-53). A sequência de aminoácido RAMP1 determina a seletividade da espécie, em particular, o resíduo de aminoácido Trp74 é responsável pelo fenótipo do receptor humano (Mallee et al. J Biol Chem 2002, 277, 14294-8).
[005] Os inibidores no nível de receptor para CGRP são postulados ser úteis em condições patofisiológicas onde a ativação do receptor de CGRP excessiva ocorreu. Alguns destas incluem vasodilatação neurogênica, inflamação neurogênica, enxaqueca, cefaleia em salvas e outras dores de cabeça, lesão térmica, choque circulatório, fogacho em menopausa, e asma. Ativação do receptor de CGRP foi implicada na patogênese de enxaqueca (Edvinsson L. CNS Drugs 2001;15(10):745-53; Williamson, D. J. Microsc. Res. Tech. 2001, 53, 167-178.; Grant, A. D. Brit. J. Pharmacol. 2002, 135, 356-362). Níveis séricos de CGRP são elevados durante a enxaqueca (Goadsby PJ, et al. Ann Neurol 1990;28:183-7) e tratamento com fármacos antienxa-queca retorna os níveis de CGRP para normal coincidente com o alívio da cefaleia (Gallai V. et al. Cephalalgia 1995;15: 384-90). Enxaqueco-sos exibem níveis de CGRP basais elevados comparados aos controles (Ashina M, et al., Pain 2000, 86(1-2):133-8.2000). Infusão de CGRP intravenosa produz cefaleia duradoura em enxaquecosos (Lassen LH, et al. Cephalalgia fev/2002;22(1):54-61). Estudos pré-clínicos em cães e rato relatam que o bloqueio de CGRP sistêmico com o peptídeo antagonista CGRP(8-37) não altera a hemodinâmica sistêmica em repouso nem o fluxo sanguíneo regional (Shen, Y-T. et al, J Pharmacol Exp Ther 2001, 298, 551-8). Desse modo, os antagonistas do receptor de CGRP podem apresentar um novo tratamento para enxaqueca que evita as responsabilidades cardiovasculares da vasoconstrição ativa associadas com agonistas não seletivos de 5-HT1B/1D, "triptanos" (por exemplo, sumatriptano).
[006] Antagonistas de CGRP mostraram eficácia em experimentações clínicas humanas. Vide Davis CD, Xu C., Curr Top Med Chem. 2008 8(16):1468-79; Benemei S, Nicoletti P, Capone JG, Geppetti P., Curr Opin Pharmacol. 2009 9(1):9-14. Epub 20 de janeiro de 2009; Ho TW, Ferrari MD, Dodick DW, Galet V, Kost J, Fan X, Leibensperger H, Froman S, Assaid C, Lines C, Koppen H, Winner PK. Lancet. 2008 372:2115. Epub 25 de novembro de 2008; Ho TW, Mannix LK, Fan X, Assaid C, Furtek C, Jones CJ, Lines CR, Rapoport AM; Neurology 2008 70:1304. Epub 3 de outubro de 2007.
[007] A invenção fornece vantagens técnicas, por exemplo, o composto é novo e inibe CGRP. Adicionalmente, o composto fornece vantagens para usos farmacêuticos, por exemplo, com respeito a um ou mais dentre seu mecanismo de ação, ligação, eficácia de inibição, seletividade alvo, solubilidade, perfis de segurança, ou biodisponibilidade.
[008] Os antagonistas do receptor de CGRP foram revelados nas publicações do PCT incluindo WO2003/104236.
DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO
[009] A invenção abrange (R)-N-(3-(7-metil-1H-indazol-5-il)-1-(4-(1-metilpiperidin-4-il)piperazin-1-il)-1-oxopropan-2-il)-4-(2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-3-il)piperidino-1-carboxamida (Composto I ou o composto da fórmula I) e composições farmacêuticas e métodos para modular CGRP e tratar pacientes com condições médicas associadas com níveis anormais de CGRP ou sinalização do receptor de CGRP.
Figure img0001
[0010] A invenção inclui todas as formas de sal farmaceuticamente aceitável dos compostos. Sais farmaceuticamente aceitáveis são aqueles em que os contraíons não contribuem significativamente para a atividade fisiológica ou toxicidade dos compostos e com tais funcionam como equivalentes farmacológicos. Estes sais podem ser feitos de acordo com as técnicas orgânicas comuns empregando reagentes comercialmente disponíveis. Algumas formas de sal aniônico incluem acetato, acistrato, besilato, brometo, cloreto, citrato, fumarato, glucou-ronato, bromidrato, cloridrato, hidroiodeto, iodeto, lactato, maleato, mesilato, nitrato, pamoato, fosfato, succinato, sulfato, tartarato, tosilato, e xinofoato. Algumas formas de sal catiônico incluem amônio, alumínio, benzatina, bismuto, cálcio, colina, dietilamina, dietanolamina, lítio, magnésio, meglumina, 4-fenilciclo-hexilamina, piperazina, potássio, sódio, trometamina, e zinco.
[0011] A invenção é intencionada incluir todos os isótopos de átomos que ocorrem nos compostos presentes. Isótopos incluem aqueles átomos tendo o mesmo número atômico, mas números de massa diferentes. Por via de exemplo geral e sem limitação, os isótopos de hidrogênio incluem deutério e trítio. Isótopos de carbono incluem 13C e 14C. Compostos isotopicamente marcados da invenção podem ser em geral preparados por técnicas convencionais conhecidas àqueles versados na técnica ou através de processos análogos àqueles descritos aqui, usando um reagente isotopicamente marcado apropriado no lugar do reagente não marcado do contrário empregado. Tais compostos podem ter uma variedade de usos potenciais, por exemplo como padrões e reagentes em determinar a atividade biológica. No caso de isótopos estáveis, tais compostos podem ter o potencial de favoravelmente modificar as propriedades biológicas, farmacológicas, ou farmacocinéticas.
MÉTODOS SINTÉTICOS
[0012] Abreviações em geral seguem as convenções usadas na técnica. Abreviações químicas usadas no relatório descritivo e Exemplos são definidas como segue: "NaHMDS" para bis(trimetilsilil)amida de sódio; "DMF" para N,N-dimetilformamida; "MeOH" para metanol; "NBS" para N-bromossuccinimida; "Ar" para arila; "TFA" para ácido trifluoroacético; "LAH" para hidreto de alumínio de lítio; "BOC", "DMSO" para dimetilsulfóxido; "h" para horas; "rt" para temperatura ambiente ou tempo de retenção (contexto ditará); "min" para minutos; "EtOAc" para acetato de etila; "THF" para tetra-hidrofurano; "EDTA" para ácido etilenodiaminatetra-acético; "Et2O" para éter dietílico; "DMAP" para 4-dimetilaminopiridina; "DCE" para 1,2-dicloroetano; "ACN" para acetonitrila; "DME" para 1,2-dimetoxietano; "HOBt" para hidrato de 1-hidroxibenzotriazol; "DIEA" para di-isopropiletilamina, "Nf" para CF3(CF2)3SO2-; e "TMOF" para trimetilortoformato.
[0013] Abreviações, como aqui usadas, são definidas como segue: "1 x" para uma vez, "2 x" para duas vezes, "3 x" para três vezes, "°C" para graus Centígrado, "eq" para equivalente ou equivalentes, "g" para grama ou gramas, "mg" para miligrama ou miligramas, "L" para litro ou litros, "mL" ou "ml" para mililitro ou mililitros, "μΙ" para microlitro ou mi-crolitros, "N" para normal, "M" para molar, "mmol" para milimole ou mi-limoles, "min" para minuto ou minutos, "h" para hora ou horas, "ta" para temperatura ambiente, "RT" para tempo de retenção, "atm" para atmosfera, "psi" para libras por polegada quadrada, "conc." para concentrado, "sat" ou "satd." para saturado, "MW" para peso molecular, "mp" para ponto de fundição, "ee" para excesso enantiomérico, "MS" ou "Especificação de Massa" para espectrometria de massa, "ESI" para espectroscopia de massa de ionização por eletropulverização, "H" para resolução alta, "HRMS" para espectrometria de massa de resolução alta, "LCMS" para espectrometria de massa de cromatografia líquida, "HPLC" para cromatografia líquida de pressão alta, "RP HPLC" para HPLC de fase reversa, "TLC" ou "tlc" para cromatografia de camada fina, "RMN" para espectroscopia de ressonância magnética nuclear, "1H" para próton, "δ" para delta, "s" para singleto, "d" para dupleto, "t" para tripleto, "q" para quarteto, "m" para multipleto, "br" para vasto, "Hz" para hertz, e "α", "β", "R", "S", "E", e "Z" são designações estere-oquímicas familiares a alguém versado na técnica.
[0014] O composto I pode ser preparado de acordo com o Esque- ma 1. Esta síntese são 14 etapas químicas e altamente convergentes, acoplando os três fragmentos principais nas últimas três etapas. Como tal, a síntese começa com a preparação dos fragmentos principais A (Esquema 2) e B (Esquema 3).
Figure img0002
[0015] A síntese do fragmento A começa com a reação de Horner-Emmons de N-Boc-4-piperidona com o ilide gerado a partir de trimetil-fosfonoacetato para fornecer 4-(2-metóxi-2-oxoetilideno)piperidino-1-carboxilato de terc-butila em rendimento excelente (Esquema 2). Hidrogenação catalítica mediada por paládio em carbono reduz a ligação dupla insaturada. Tratamento de 4-(2-metóxi-2-oxoetil)piperidino-1-carboxilato de terc-butila com LDA gera o enolato que sob captura com 2-nitrobenzaldeído fornece o nitro álcool. Redução do grupo nitro com ferro em ácido acético seguido por tratamento com cloreto de hidrogênio em dioxano completa a síntese do fragmento A.
Figure img0003
[0016] A síntese de aminoácido de indazol B começa com a ioda-ção de 2,6-dimetilanilina pela ação do monocloreto de iodo (Esquema 3). Este intermediário foi posto de lado temporariamente. Éster metílico de N-CBZ-L-serina sofre uma reação de metanossulfonila-ção/eliminação de um pote para fornecer éster metílico de N-CBZ-de-hidroalanina. Com o iodeto e de-hidroalanina em mão, eles são eficientemente acoplados usando acetato de paládio (II) em um acoplamento de Heck para fornecer o produto em 65% de rendimento. Neste momento, o centro de quiral é instalado usando uma hidrogenação assimétrica catalítica utilizando tetrafluoroborato de (-)-1,2-bis((2R,5R)-2,5-dietilfosfolano)bezeno(ciclooctadieno)ródio(I) e hidrogênio (0,41 MPa) (60 psi) para dar o aminoácido de quiral em ~96% ee. O anel de indazol é depois formado pela ação de nitrito de iso-amil. O indazol resultante é altamente cristalino. Uma recristalização de aceto-na/hexanos fornece o aminoácido de indazol em pureza excelente e com um ee 99,8% melhorado. Remoção do grupo de proteção de CBZ sob condições de hidrogenação completa a preparação do fragmento B. Aminoácido de indazol B pode também ser preparado usando resolução enzimática do aminoácido racêmico ou ceto ácido (Hanson, Ronald L.; Davis, Brian L.; Goldberg, Steven L.; Johnston, Robert M.; Parker, William L.; Tully, Thomas P.; Montana, Michael A.; Patel, Ra-mesh N. Process Research and Development, Bristol-Myers Squibb, New Brunswick, NJ, EUA. Organic Process Research & Development (2008), 12(6), 1119-1129.).
Figure img0004
[0017] Fragmentos A e B são eficientemente acoplados usando carbonato de Ν,Ν'-dissuccinimidila para instalar a metade de uréia em 78% de rendimento (Esquema 4). Saponificação do éster metílico com hidróxido de lítio dá um rendimento quase quantitativo do ácido carboxílico. Acoplamento mediado por TBTU® de ácido com 1-(1-metilpiperidin-4-il)piperazina completa a síntese do Composto I. Cromatografia instantânea fornece o produto como um pó amorfo que pode ser cristalizado de acetona para fornecer o Composto I como um pó cristalino branco fino.
Figure img0005
[0018] 4-(2-METÓXI-2-OXOETILIDENO)PIPERIDINO-1- CARBOXILATO DE TERC-BUTILA. Hidreto de sódio em óleo mineral (60%, 7,92 g, 198,02 mmoles) foi lavado com hexanos depois suspenso em dimetilformamida (220 ml). A mistura foi esfriada para 0°C. Fos-fonoacetato de trimetila (29,0 ml, 189,82 mmoles) foi adicionado a gotas à mistura de reação agitada. Após 20 min a 0°C, uma solução de N-terc-butoxicarbonil-4-piperidona (30,41 g, 152,62 mmoles) em dimetilformamida (80 ml) foi adicionada a gotas à mistura. A reação foi agitada em temperatura ambiente por 3 h e depois diluída com éter dietílico (650 ml). A mistura foi lavada uma vez com água, e a camada aquosa foi extraída uma vez com éter dietílico. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas 4 vezes com água, e a fase aquosa foi descartada. A fase orgânica foi lavada com salmoura e secada em sulfato de magnésio, filtrada, e concentrada à secura. O composto do título foi obtido como um sólido branco em 92% de rendimento. 1H-RMN (300 MHz, CDCl3): δ = 5,68 (s, 1 H), 3,66 (s, 3 H), 3,40-3,51 (m, 4 H), 2,90 (t, J = 5,49, 2 H), 2,25 (t, J = 5,49, 2 H), 1,44 (s, 9 H).
Figure img0006
[0019] 4-(2-METÓXI-2-OXOETIL)PIPERIDINO-1-CARBOXILATO DE TERC-BUTILA. Uma solução de 4-(2-metóxi-2- oxoetilideno)piperidino-1-carboxilato de terc-butila (35,71 g, 140 mmoles) em uma mistura de 1:1 acetato de etila/metanol (220 ml) foi tratada cuidadosamente com 50% úmido de 10% de paládio em carbono (3,3 g). O vaso de reação foi carregado com 0,38 MPa (55 psi) de gás de hidrogênio e a mistura foi agitada em um aparelho Parr em temperatura ambiente por 16 h. A mistura de reação foi depois filtrada para remover o catalisador e o filtrado concentrado a vácuo. O composto do título foi obtido como um óleo incolor claro em 97% de rendimento. 1H-RMN (300 MHz, CDCl3): δ = 4,04 (d, J = 10,25, 2 H), 3,64 (s, 3 H), 2,68 (t, J = 12,44, 2 H), 2,21 (d, J = 6,95, 2 H), 1,98-1,77 (m, 1 H), 1,64 (d, J = 13,54, 2 H), 1,41 (s, 9 H), 1,25-0,99 (m, 2 H).
Figure img0007
[0020] ÉSTER DE TERC-BUTILA DE ÁCIDO 4-[2-HIDRÓXI-1-METOXICARBONIL-2-(2-NITRO-FENIL)-ETIL]-PIPERIDINO-1- CARBOXÍLICO. N,N-di-isopropilamina (4,40 ml, 31,3 mmoles) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (50 ml). A mistura foi esfriada para -78°C. Butil-lítio (2,5 M em hexanos, 12,4 ml, 31 mmoles) foi adicionado a gotas à solução agitada. Após agitar a -78°C durante 30 min, uma solução de 4-(2-metóxi-2-oxoetil)piperidino-1-carboxilato de terc-butila (6,65 g, 25,8 mmoles) em tetra-hidrofurano (15 ml) foi adicionada a gotas à mistura. Agitação foi continuada a -78°C durante 1 h. Uma solução de 2-nitrobenzaldeído (3,90 g, 25,8 mmoles) em tetra-hidrofurano (20 ml) foi depois acrescentada a gotas à mistura, e depois agitação foi continuada a -78°C durante um adicional de 2,5 h. A reação foi extinguida com cloreto de amônio aquoso frio e, depois, diluída com água. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, e a fase aquosa foi descartada. O material foi secado (sulfato de magnésio) filtrada, e concentrada à secura. Cromatografia de sílica-gel forneceu o produto desejado em 94% de rendimento como espuma amarela clara. MS m/e (M- C4H8+H)+ = 353,1.
Figure img0008
[0021] ÉSTER DE TERC-BUTILA DE ÁCIDO 4-(4-HIDRÓXI-2-OXO-1,2,3,4-TETRA-HIDRO-QUINOLIN-3-IL)-PIPERIDINO-1- CARBOXÍLICO. Em um frasco de 3 gargalos equipado com uma entrada de nitrogênio, termômetro, e um agitador mecânico, éster de terc-butila de ácido 4-[2-hidróxi-1-metoxicarbonil-2-(2-nitro-fenil)-etil]-piperidino-1-carboxílico (9,93 g, 24,3 mmoles) foi dissolvido em ácido acético (1,75 moles, 100 ml). Pó de ferro (8,90 g, 159 mmoles) foi adicionado ao vaso com agitação. A mistura agitada foi lentamente aquecida para 80°C durante 30 min e depois esfriada para temperatura ambiente. Foi depois diluída com acetato de etila e filtrada através de um bloco de celite. Os sólidos foram lavados com 20% de meta-nol/acetato de etila, e depois com metanol. O filtrado foi concentrado e o resíduo dividido entre acetato de etila e bicarbonato de sódio aquoso. As camadas foram separadas. A fase aquosa resultante foi extraída duas vezes com acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas. A mistura foi lavada duas vezes com água e a fase aquosa foi descartada. O material foi secado (sulfato de magnésio), filtrado, e concentrado à secura. Cromatografia de sílica-gel forneceu o composto do título como espuma amarela clara em 77% de rendimento. MS m/e (M-H)- = 345,1.
Figure img0009
[0022] CLORIDRATO DE 3-(PIPERIDIN-4-IL)QUINOLIN-2(1H). Uma solução agitada de éster de terc-butila de ácido 4-(4-hidróxi-2-oxo-1,2,3,4-tetra-hidro-quinolin-3-il)-piperidino-1-carboxílico (5,60 g, 16,2 mmoles) em acetato de etila (70 ml) foi tratada com HCl em dioxano (4N, 40 mmoles, 10 ml). A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 45 min. Mais HCl em dioxano (4N, 120 mmoles, 30 ml) foi depois adicionado e agitação foi continuada em temperatura ambiente por 16 h. O sólido resultante foi colhido através de filtração e la- vado com acetato de etila. Foi depois suspenso em 5% água-isopropanol (100 ml) e a mistura foi aquecida a refluxo e agitada por 20 min. A mistura foi esfriada para temperatura ambiente e agitada em temperatura ambiente por 16 h. O sólido foi colhido por filtração, lavado com isopropanol, e secado sob vácuo alto. O composto do título foi obtido como sólido branco em 75% de rendimento. 1H-RMN (DMSO-d6) δ 11,85 (s, 1 H), 9,02 (bs, 1 H), 8,88 (bs, 1 H), 7,70 (t, J = 3,81 Hz, 2 H), 7,53 - 7,30 (d, J = 8,24 Hz, 1 H), 7,17 (t, J = 7,48 Hz, 2 H), 3,36 (d, J = 12,51 Hz, 2 H), 3,10 - 2,94 (m, 3 H), 2,01 (d, J = 13,43 Hz, 2 H), 1,87 - 1,73 (m, 2 H); MS m/e (M+H)+ = 229,0.
Figure img0010
[0023] CLORIDRATO DE 4-IODO-2,6-DIMETILBENZENAMINO. A uma suspensão de bicarbonato de sódio (126 g, 1,5 moles) e 2,6-dimetilanilina (61,5 ml, 500 mmoles) em metanol (700 ml) foi adicionado monocloreto de iodo (1,0 M em diclorometano, 550 ml, 550 mmoles) em temperatura ambiente por 1 h. Após adição estava completa, agitação foi continuada por 3 h. A reação foi filtrada para remover o excesso de bicarbonato de sódio e o solvente removido a vácuo. O resíduo foi redissolvido em éter dietílico (1,5 L) e tratado com ácido clorídrico (2M em éter, 375 ml, 750 mmoles). A suspensão resultante foi armazenada no congelador (-15°C) durante a noite. O sólido foi filtrado e lavado com éter dietílico até que ficasse incolor, para dar 126,5 g (89%) como um pó cinza-verde. 1H-RMN (DMSO-d6) δ 2,33 (s, 6 H), 7,48 (s, 2 H), 9,05 (bs, 3 H); 13C-RMN (DMSO-d6) δ 17,4, 91,5, 133,1, 131,2, 136,9.
Figure img0011
[0024] 2-(BENZILOXICARBONIL)ACRILATO DE METILA. A um frasco de fundo redondo de três gargalos secado ao fogo, equipado com um agitador mecânico, foram adicionados 2-(benziloxicarbonil)-3-hidroxipropanoato de (S)-metila (129 g, 509 mmoles), diclorometano anidro (2 L), e cloreto de metanossulfonila (49,3 ml, 636 mmoles). A mistura foi esfriada para -15°C, e tratada com trietilamina (213 ml, 1527 mmoles), a gotas, para assegurar que a temperatura da mistura de reação não excedesse 0°C. A adição do primeiro equivalente de trietilamina foi exotérmica. Após adição de trietilamina, a mistura foi agitada a 0°C por 30 min. O banho refrescante foi removido e a mistura agitada em temperatura ambiente por 1,5 h. A reação foi extinguida por adição de metanol (21 ml). A mistura foi lavada com 0,5% de bissulfato de potássio aquoso até que as lavagens fossem pH 5, depois bicarbonato de sódio saturado, e salmoura, secada em sulfato de sódio, e concentrada. Cromatografia instantânea (sílica-gel, 1:9 acetato de etila/hexanos) deu 111 g (92%) como um óleo incolor viscoso que se cristalizou sob repouso. 1H-RMN (DMSO-d6) δ 3,71 (s, 3 H), 5,10 (s, 2 H), 5,60 (s, 1 H), 5,76 (s, 1 H), 7,39-7,35 (m, 5 H), 8,96 (s, 1 H); 13C-RMN (DMSO-d6) δ 52,3, 65,9, 127,8, 128,1, 128,3, 128,8, 133,3, 136,3, 153,5, 163,7.
Figure img0012
[0025] 3-(4-AMINO-3,5-DIMETILFENIL)-2- (BENZILOXICARBO-NIL)ACRILATO DE (Z)-METILA. Um frasco de fundo redondo de 2 L foi carregado com sal de cloridrato de 4-iodo-2,6-dimetilbenzenamina (55 g, 194 mmoles), 2-(benziloxicarbonil)acrilato de metila (59,2 g, 252 mmoles), cloreto de tetrabutilamônio (59,2 g, 213 mmoles), acetato de paládio (II) (4,34 g, 19,4 mmoles), e tetra-hidrofurano (1,2 L, desgasifi-cado por um fluxo de nitrogênio por 30 min). A mistura foi agitada de modo que uma suspensão fosse formada e depois desgasificada por um fluxo de nitrogênio por 30 min. Trietilamina (110 ml, 789 mmoles) foi adicionada e a mistura resultante foi aquecida a refluxo por 3 h. Após esfriar para temperatura ambiente, a mistura de reação foi filtrada através de um bloco de celite, lavada com tetra-hidrofurano (2 x 100 ml), e concentrada. O resíduo foi dissolvido em diclorometano, lavado com água (3X) e salmoura (2X), secado em sulfato de sódio, e concentrado. Cromatografia instantânea (sílica-gel, usando 1:9 acetato de etila/diclorometano) deu um sólido castanho. O sólido foi recristalizado de metanol morno (210 ml) e água (100 ml). A mistura foi retida em temperatura ambiente durante a noite, depois a 0°C por 2 h, e por fim a -15°C por 2 h. O sólido resultante foi filtrado, lavado com 1:1 me-tanol/água gelada, e secado sob vácuo alto durante a noite para dar 44,7 g (65%) como um sólido castanho claro que foi uma mistura de isômeros de Z/E (73:27). 1H-RMN (DMSO-d6) δ, 2,05 (s, 6 H), 3,61 (s, 0,8 H), 3,68 (s, 2,2 H), 5,00 (s, 0,54 H), 5,13 (s, 1,46 H), 5,24 (s, 2 H), 7,40-7,21 (m, 8 H), 8,51 (s, 0,27 H), 8,79 (s, 0,73 H); 13C-RMN (DMSO-d6) δ 17,8, 51,7, 65,3, 119,4, 120,0, 120,3, 127,3, 127,7, 128,3, 130,9, 135,8, 137,2, 146,9, 154,7, 166,0.
Figure img0013
[0026] 3-(4-AMINO-3,5-DIMETILFENIL)-2- (BENZILOXICARBO- NIL)PROPANOATO DE (R)-METILA. Uma garrafa de hidrogenação Parr secada ao fogo de 2 L foi carregada com 3-(4-amino-3,5-dimetilfenil)-2-(benziloxicarbonil)acrilato de (Z)-metila (84,5 g, 239 mmoles), diclorometano (300 ml), e metanol (300 ml). A garrafa foi rodada de modo que uma suspensão marrom-claro fosse formada. A mistura foi desgasificada usando um fluxo de nitrogênio por 30 min. A esta foram adicionados rapidamente tetrafluoroborato de (-)-1,2-bis((2R,5R)-2,5-dietilfosfolano)-bezeno(ciclooctadieno) ródio (I) ([(2R,5R)-Et-DuPhosRh]BF4) (2,11 g, 3,20 mmoles). A garrafa foi prendida imediatamente a um Hidrogenador Parr. Após 5 ciclos de hidrogênio (0,41 MPa) (60 psi) e vácuo, a garrafa foi pressurizada para 0,45 MPA (65 psi) e a suspensão foi agitada em temperatura ambiente por 16 h. A reação tinha ficado homogênea. A mistura de reação foi concentrada, e o resíduo resultante purificado através de cromatografia instantânea (sílica-gel, 1:9 acetato de etila/diclorometano) para dar 82,9 g (98%). 1H-RMN (DMSO-d6) δ 2,04 (s, 6 H), 2,65 (dd, J = 13,4, 9,8 Hz, 1H), 2,82 (dd, J = 13,7, 5,2 Hz, 1 H), 3,62 (s, 3 H), 4,15-4,10 (m, 1H), 4,41 (s, 2 H), 5,00 (s, 2 H), 6,68 (s, 2 H), 7,37-7,28 (m, 5 H), 7,70 (d, J = 7,9 Hz, 1 H); 13C-RMN (DMSO-d6) δ 17,7, 35,9, 51,7, 56,1, 65,3, 120,4, 124,0, 127,5, 127,7, 128,2, 128,3, 136,9, 142,6, 155,9, 172,5.
Figure img0014
[0027] 2-(BENZILOXICARBONIL)-3-(7-METIL-1H-INDAZOL-5-IL)PROPANOATO DE (R)-METILA. 3-(4-amino-3,5-dimetilfenil)-2-(benziloxicarbonil)propanoato de (R)-metila (50,0 g, 140 mmoles) foi pesado em um frasco de fundo redondo de três gargalos de 5 L secado ao fogo, seguido pela adição de tolueno (2,4 L) e ácido acético glacial (120 ml, 2,1 moles). A mistura foi mecanicamente agitada para formar uma solução clara, e depois acetato de potássio (103 g, 1,05 moles) foi adicionado. À suspensão branca resultante, nitrito de iso-amila (20,7 ml, 154 mmoles) foi adicionado a gotas em temperatura ambiente, e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 16 h. Bicarbo- nato de sódio saturado (1 L) foi adicionado, seguido pela adição cuidadosa de bicarbonato de sódio sólido para neutralizar o ácido acético. A mistura foi extraída com uma mistura de diclorometano (2 L) e salmoura (1,5 L). Após separação, a camada aquosa foi extraída com diclorometano (500 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secadas em sulfato de sódio anidro e filtradas. Os solventes foram removidos para fornecer um sólido castanho que foi lavado com hexanos (2 L) e tolueno (150 ml). O sólido foi recristalizado a partir de acetona quente (260 ml) e hexanos (700 ml). A mistura ligeiramente turva foi deixada esfriar para temperatura ambiente lentamente, depois para 0°C durante 1,5 h, e por fim para -15°C durante 1,5 h. O sólido resultante foi filtrado e lavado com acetona/hexanos esfriados em gelo (1:1, 200 ml) para fornecer 39,1 g (76% de rendimento). HPLC analítica mostrou >98% de pureza de UV. O excesso enantiomérico (ee) foi determinado ser 99,8% (condições: coluna de Chiralpak AD, 4,6 × 250 mm, 10 μm; A = etanol, B = 0,05% de dietilamina/heptano; 85%B @1,0 mL/min por 55 min. O tempo de retenção para R foi 44,6 min e para S foi 28,8 min). 1H-RMN (DMSO-d6) δ 2,48 (s, 3 H), 2,93 (dd, J = 13,4, 10,7 Hz, 1H), 3,10 (dd, J = 13,7, 4,9 Hz, 1H), 3,63 (s, 3H), 4,32-4,27 (m, 1 H), 4,97 (s, 2 H), 7,03 (s, 1 H), 7,24-7,22 (m, 2 H), 7,29 -7,27 (m, 3 H), 7,41 (s, 1 H), 7,83 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,99 (s, 1H), 13,1 (s, 1 H); 13C-RMN (DMSO-d6) δ 16,7, 36,5, 51,8, 56,0, 65,3, 117,6, 119,6, 122,7, 127,2, 127,4, 127,6, 128,2, 129,3, 133,4, 136,8, 139,2, 155,9, 172,4. Especificação de massa: 368,16 (MH)+.
Figure img0015
[0028] 2-AMINO-3-(7-METIL-1H-INDAZOL-5-IL)PROPANOATO DE (R)-METILA. Uma garrafa de hidrogenação Parr foi carregada com 2-(benziloxicarbonil)-3-(7-metil-1H-indazol-5-il)propanoato de (R)- metila (11,0 g, 29,9 mmoles) e metanol (75 ml). A suspensão foi purgada com nitrogênio e tratada com paládio (10% em carvão, 700 mg). A garrafa foi agitada sob hidrogênio (0,10 MPa) (15 psi) durante a noite. A mistura foi filtrada através de um bloco de celite para remover o catalisador. Concentração do eluente deu 7,7 g (quant.) como um óleo que foi usado sem purificação adicional. 1H-RMN (CD3OD) δ 2,54 (s, 3 H), 2,98 (dd, J = 13,5, 7,0 Hz, 1 H), 3,09 (dd, J = 13,5, 5,9 Hz, 1 H), 3,68 (s, 3 H), 3,75 (dd, J = 7,0, 6,2 Hz, 1 H), 7,01 (s, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 7,98 (s, 1 H). Especificação de massa: 232,34 (M-H)-.
Figure img0016
[0029] 3-(7-METIL-1H-INDAZOL-5-IL)-2-(4-(2-OXO-1,2- DIHI- DROQUINOLIN-3-IL)PIPERIDINO-1-CARBOXAMIDO)PROPANOATO H DE (R)-METILA. A uma solução de cloridrato de 2-amino-3-(7-metil-1H-indazol-5-il)propanoato de (R)-metila (7,26 g, 27,0 mmoles) em dimetilformamida (50 ml) em temperatura ambiente foi adicionado carbonato de N,N'-dissuccinimidila (7,60 g, 29,7 mmoles) seguido por trietilamina (11,29 ml, 81 mmoles). A mistura resultante foi agitada por 30 min e tratada com 3-(piperidin-4-il)quinolin-2(1H)-ona (6,77 g, 29,9 mmoles) em porções. A reação foi deixada agitar por 24 h. A mistura foi concentrada, dissolvida em acetato de etila, e lavada sequencialmente com água, salmoura, e 0,5 N de HCl (2X). A fase orgânica foi secada em sulfato de magnésio, filtrada, e concentrada. O resíduo resultante foi purificado através de cromatografia instantânea (sílica-gel, 20:1 acetato de etila/metanol) para dar 11,9 g (78%). 1H-RMN (CD3OD) δ 13,0 (s, 1 H), 11,8 (s, 1 H), 7,98 (s, 1 H), 7,63 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,57 (s, 1 H), 7,45 - 7,41 (m, 2 H), 7,27 (d, J = 8,2Hz, 1 H), 7,16 (t, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,03 (s, 1 H), 6,85 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 4,31 -4,26 (m, 1 H), 4,10 - 4,08 (m, 2 H), 3,60 (s, 3 H), 3,07 - 3,01 (m, 2 H), 2,93 - 2,88 (m, 1 H), 2,77 - 2,67 (m, 2 H), 2,48 (s, 3 H), 1,78 - 1,72 (m, 2 H), 1,34 - 1,26 (m, 2 H). Especificação de massa: 488,52 (MH)+.
Figure img0017
[0030] ÁCIDO (R)-3-(7-METIL-1H-INDAZOL-5-IL)-2-(4-(2-OXO- 1,2-DIHIDROQUINOLIN-3-IL)PIPERIDINO-1-CARBOXAMIDO) PROPANOICO. Uma solução de 3-(7-metil-1H-indazol-5-il)-2-(4-(2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-3-il)piperidino-1-carboxamido)propanoato de (R)-metila (5,50 g, 11,3 mmoles) em tetra-hidrofurano (50 ml) e metanol (10 ml) foi esfriada para 0°C. A esta foi adicionada uma solução gelada (0°C) de mono-hidrato de hidróxido de lítio (0,95 g, 22,6 mmoles) em água (20 ml), a gotas por 15 min. A reação foi agitada em temperatura ambiente por 3 h adicionais. A mistura foi concentrada para remover os solventes orgânicos. O resíduo resultante foi dissolvido em uma quantidade mínima de água, esfriado para 0°C, e tratado com 1N de HCl gelado (0°C) até que o pH 2 fosse atingido. O sólido resultante foi colhido por filtração, lavado com água fria e éter, e depois secado durante a noite sob vácuo alto para dar 5,0 g (94%) como um sólido branco. 1H-RMN (DMSO-d6) δ 13,05 (bs, 1 H), 11,77 (s, 1 H), 7,98 (s, 1 H), 7,62 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,55 (s, 1 H), 7,44 (d, J = 8,2Hz, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,27 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,16 (t, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,05 (s, 1 H), 6,65 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 4,27 - 4,22 (m, 1 H), 4,10 - 4,07 (m, 2 H), 3,12 - 3,07 (m, 1 H), 3,03 - 2,99 (m, 1 H), 2,93 - 2,88 (m, 1 H), 2,77 - 2,66 (m, 2 H), 2,47 (s, 3 H), 1,77 - 1,74 (m, 2 H), 1,34 - 1,27 (m, 2 H). Especificação de massa: 474,30 (MH)+.
Figure img0018
[0031] (R)-N-(3-(7-METIL-1H-INDAZOL-5-IL)-1-(4-(1- METILPIPE-RIDIN-4-IL)PIPERAZIN-1-IL)-1-OXOPROPAN-2-IL)-4-(2-OXO-1,2-DIHIDROQUINOLIN-3-IL)PIPERIDINO-1-CARBOXAMIDA (I). Um frasco foi carregado com ácido (R)-3-(7-metil-1H-indazol-5-il)-2-(4-(2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-3-il)piperidino-1-carboxamido)propanoico (2,9 g, 6,11 mmoles), trietilamina (3,00 ml, 21,5 mmoles), 1-(1-metilpiperidin-4-il)piperazina (1,23 g, 6,72 mmoles), e dimetilformamida (10 ml). A solução resultante foi tratada com tetrafluoroborato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilurônio (2,26 g, 7,03 mmoles) em porções. A reação foi deixada agitar em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada sob vácuo para remover a dimetilformamida. O produto bruto foi dissolvido em 7% de metanol em diclorometano e purificado através de cromatografia instantânea usando 7% de metanol em diclorometano contendo 2% de hidróxido de amônio aquoso como eluente. As frações puras foram colhidas e o solvente foi removido sob vácuo. O produto desejado foi cristalizado de acetona quente para dar o Composto I em 77% de rendimento. HPLC analítica mostrou 99,0% de pureza de UV a 230 nm. O excesso enantiomérico (ee) foi determinado ser >99,9% (condições: coluna de Chiralpak AD, 4,6 × 250 mm, 10 μm; eluente: 70% (0,05% de dietilamina)/heptano/30% de etanol; @1,0 mL/min. por 45 min. Os tempos de retenção foram 18,7 min para R e 28,1 min para S). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13,01 (s, 1 H), 11,76 (s, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 7,62 (d, J = 7,10 Hz, 1 H), 7,60 (s, 1 H), 7,42 (m, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,26 (d, J = 8,25 Hz, 1 H), 7,14 (m, 1 H), 7,00 (s, 1 H), 6,69 (d, J =8,25 Hz, 1 H), 4,78 (q, J = 7,79 Hz, 1 H), 4,14 (d, J = 12,37 Hz, 2 H), 3,54 (dd, J = 9,16, 4,58 Hz, 1 H), 3,24 (m, 1 H), 3,11 (m, 1 H), 2,97 (m, 1 H), 2,89 (m, 2 H), 2,69 (m, 4 H), 2,32 (m, 1 H), 2,21 (m, 1 H), 2,07 (m, 4 H), 1,95 (t, J = 8,25 Hz, 1 H), 1,87 (m, J = 11,28, 11,28, 3,55, 3,44 Hz, 1 H), 1,76 (t, J = 12,03 Hz, 2 H), 1,68 (t, J = 11,11 Hz, 2 H), 1,53 (t, J = 8,25 Hz, 1 H), 1,32 (m, 4 H), 1,16 (m, 2 H); 13C-RMN (DMSO-d6) δ 16,80, 27,30, 30,51, 30,51, 30,67, 35,50, 38,04, 41,74, 44,00, 44,16, 45,35, 45,78, 48,14, 48,39, 51,45, 54,76, 54,76, 60,61, 114,53, 117,79, 119,29, 119,34, 121,57, 122,78, 127,46, 127,79, 129,29, 129,79, 133,31, 133,72, 136,98, 137,41, 139,12, 156,50, 161,50, 170,42. Análise de massa precisa: m/z 639,3770, [MH]+, Δ = -0,2 ppm. Rotação óptica: -27,36 (@ 589 nm, concentração = 4,71 mg/ml em metanol.
Figure img0019
[0032] SOLUBILIDADE AQUOSA. Base livre sólida foi misturada com carbonato, e tampões de etanolamina. O pH de uma terceira amostra foi ajustado com HCl. Os sólidos foram misturados com os veículos usando um misturador que foi incluso dentro de uma incubadora ajustada em 25C. Após equilibração, as amostras do sobrenadante foram retiradas, diluídas como apropriado, e analisadas por HPLC.
[0033] SOLUBILIDADE EM MEIOS AQUOSOS, DEPENDÊNCIA DO pH. Composto cristalino I converteu-se em uma fase gelatinosa durante a medição do perfil de solubilidade de pH. A ausência de uma fase cristalina em equilíbrio com água impede uma avaliação confiável da faixa de pH em que o Composto I pode ser formulado como uma solução termodinamicamente estável. Esforços para gerar uma forma de base livre cristalina do Composto I que possa ser equilibrado em água são contínuos. Os dados reunidos na fase gelatinosa são mostrados na Tabela 1.
Figure img0020
[0034] ESTABILIDADE DO ESTADO DE SOLUÇÃO. A estabilidade do estado de solução do Composto I foi avaliada como uma função de temperatura, pH, luz de intensidade alta (HIL), concentração de tampão, e concentração de fármaco. A matriz experimental usada é mostrada na Tabela 2.
Figure img0021
[0035] Tampão de succinato foi usado para todas as soluções. Para amostras expostas à luz, uma câmara de fotoestabilidade foi usada de acordo com as diretrizes de ICH (1,2 milhão lux hora exposição à luz visível e 200 watts hora/m2 para UV). As análises foram executadas a 4, 8 e 12 semanas.
[0036] Dez degradantes foram encontrados durante o estudo de estabilidade da solução. A porcentagem de cada degradante encontrado nas amostras após 12 semanas de armazenamento é listada na Tabela 3. Note que ao ponto de tempo inicial, os degradantes B e G foram os únicos degradantes presentes e suas concentrações iniciais eram 0,17% e 0,06%, respectivamente.
[0037] Avaliação espectroscópica de massa foi executada naqueles degradantes presentes em quantidade suficiente para permitir uma determinação de massa. Os resultados estão listados na Tabela 4. Dois picos são listados sob o degradante B, porque foi descoberto que dois degradantes não são bem separados pelo método de HPLC atual. Degradantes A e C correspondem aos produtos de hidrólise (figura 2).
[0038] Sob a condição mais favorável examinada, a condição I na Tabela 2, o Composto I mostrou apenas 0,3% de degradação após 12 semanas a 40C. Isto sugere que uma formulação aquosa pode ser encontrada que satisfaz as diretrizes de ICH durante pelo menos um ano de estabilidade química.
Figure img0022
Figure img0023
Figure img0024
[0039] ESTABILIDADE DA SOLUÇÃO: O EFEITO DA TEMPERATURA. O efeito da temperatura é resumido na Tabela 5. A intensificação na taxa de degradação com a temperatura é em grande parte devido à intensificação na hidrólise. Na temperatura mais alta, a degradação prosseguiu durante todo tempo para o produto C, mas em temperaturas mais baixas, a degradação agarrou no produto A (figura 2).
Figure img0025
[0040] ESTABILIDADE DA SOLUÇÃO: O EFEITO DA LUZ. O efeito da luz na estabilidade é resumido na Tabela 6. Sete degradantes foram observados para as amostras expostas à luz, três destas não apareceram nas amostras armazenadas sob qualquer outra condição. Hidrólise (degradante A) foi intensificada pela exposição à luz.
Figure img0026
Figure img0027
[0041] ESTABILIDADE DA SOLUÇÃO: O EFEITO DO pH. O efeito do pH na taxa de degradação é resumido na Tabela 7. A intensificação na taxa de degradação variou inversamente com o pH e foi dominada por uma intensificação na hidrólise. Em pH 4, a degradação prosseguiu para o produto de hidrólise C, mas em pH 5 e 6 a degradação agarrou no produto de hidrólise A.
Figure img0028
[0042] ESTABILIDADE DA SOLUÇÃO: O EFEITO DA CONCENTRAÇÃO DE TAMPÃO. Concentrações mais altas de tampão de succinato tenderam a produzir uma taxa mais alta de hidrólise para o degradante A (Tabela 8).
Figure img0029
[0043] ESTABILIDADE DA SOLUÇÃO: O EFEITO DA CONCENTRAÇÃO DE FÁRMACO. Carga de fármaco alta reduziu a taxa de hidrólise e limitou a hidrólise para formação do degradante A (Tabela 9). Degradante G que foi apenas detectado nas amostras de concentração alta, não desenvolveram notavelmente na concentração durante o estudo e pode ser simplesmente uma impureza. Degradante J pôde apenas ser detectado ao ponto de tempo final.
TABELA 9: ESTABILIDADE DA SOLUÇÃO E CONCENTRAÇÃO DO COMPOSTO I
Figure img0030
COMPETIÇÃO PARA LIGAÇÃO DE [125I1CGRP
[0044] LIGANDO DE ENSAIO. Homogeneizado de membrana de células SK-N-MC serve como a fonte de receptor. Células SK-N-MC de neuroblastoma humano são usadas para ensaios in vitro porque elas endogenamente expressam o receptor de CGRP com uma sequência idêntica ao receptor de CGRP humano clonado (Aiyar et al., 2001). As células são crescidas a 37°C em 5% de CO2 em meio consistindo em MEM com os sais de Earle e L-glutamina suplementados com 10% de soro bovino fetal para alcançar a confluência. As células são colhidas enxaguando duas vezes com solução salina tamponada de fosfato e são incubadas durante 5-10 minutos a 4°C em tampão de lise hipotô-nico consistindo em 10 mM de Tris (pH 7,4) e 5 mM de EDTA. As células são colhidas e transferidas para tubos de polipropileno e homogeneizadas usando um polytron. Os homogeneizados são centrifugados a 32.000 x g por 30 min. As pelotas são ressuspensas em tampão de lise hipotônico frio com 0,1% de coquetel de inibidor de protease mamífero e ensaiadas para concentração de proteína. O homogeneizado de membrana é depois aliquotado e armazenada a -80°C até o dia do ensaio.
[0045] A habilidade do Composto I para competir com o peptídeo endógeno de CGRP alfa humano (hαCGRP) radiomarcado ([125I]CGRP, Amersham Biosciences) é medida usando um ensaio de competição de radioligante. Composto I é solubilizado primeiro e as diluições seriais são realizadas usando 100% de DMSO. O composto é ainda diluído 25 vezes em tampão de ensaio (50 mM de Tris-Cl, pH 7,5, 5 mM de MgCl2, 0,005% de Triton X-100) e transferidos (50 μΙ) para placas de ensaio de 96 poços. [125I]-CGRP é diluído a 600 pM em tampão de ensaio e um volume de 50 μΙ é adicionado a cada poço (concentração final 15 pM em ensaio). As pelotas de membrana de SK-N-MC são descongeladas, diluídas em tampão de ensaio com 0,1% de coquetel de inibidor de protease mamífero fresco, e previamente homogeneizadas como descrito. Cinco a dez μg de proteína por poço são depois adicionados em um volume de 100 μl. As placas de ensaio são depois incubadas em temperatura ambiente (25°C) por duas horas. Os ensaios são terminados pela adição de excesso de tampão de lavagem frio (20 mM de Tris-Cl, pH 7,5, 0,1% de BSA) imediatamente seguido por filtração em filtros de fibra de vidro pré-intumescidos em 0,5% de PEI. Ligação não específica é definida com 1 μΜ de β-CGRP. Radioatividade ligada à proteína é medida usando contador de cintilação gama. O IC50 é definido como a concentração de composto requerida para inibir 50% da ligação do radioligante.
[0046] RESULTADOS. Composto I apresenta inibição dependente da concentração da ligação de [125I]CGRP ao receptor de CGRP endogenamente expresso em membranas das células SK-N-MC. A Ki média é 22,7 ± 1,6 pM.
INTERAÇÃO COM O PEPTÍDEO DE CGRP
[0047] MÉTODOS. A natureza da interação entre o peptídeo de CGRP endógeno e o Composto I é estudada em detalhes usando experimentos de ligação de saturação. Brevemente, a ligação de [125I]CGRP à preparação de membrana de células SK-N-MC é medida com concentração crescente de [125I]CGRP sem (condição de controle) ou na presença (condições de teste) de uma das duas concentrações (30 pM e 100 pM) do Composto I. Os dados de saturação são analisados com equações hiperbólicas usando software Kell (Biosoft, Cambridge, RU) para estimar a constante de dissociação (Kd) e o número máximo de sítios de ligação (Bmax). O impacto da adição do Composto I para os parâmetros de ligação (Kd. Bmax) de [125I]CGRP é medido e comparado.
[0048] RESULTADOS. Composto I dependente da concentração aumenta a constante de dissociação Kd da ligação de [125I]CGRP (diminui sua afinidade), sem significativamente alterar o número máximo de sítios de ligação da ligação de [125I]CGRP (Bmax). Isto indica um mecanismo competitivo de inibição pelo Composto I para a ligação de [125I]CGRP ao receptor humano (Tabela 10).
Figure img0031
ENSAIO FUNCIONAL CELULAR - ENSAIO DE AMP CÍCLICO
[0049] MÉTODOS. O complexo do receptor de CGRP é acoplado à classe de Gs das proteínas G. Ligação de CGRP a este complexo leva à produção de AMP cíclico (adenosina monofosfato 3'5'-cíclico) por meio de ativação Gs-dependente da adenilato ciclase.
[0050] Antagonismo funcional pelo Composto I é determinado medindo sua habilidade para inibir a formação estimulada por CGRP de AMP cíclico em células SK-N-MC inteiras ligadas. As células SK-N-MC são incubadas em temperatura ambiente com 0.3 nM de CGRP sozinho durante 30 minutos. ou pré-incubadas com várias concentrações do Composto I durante 15 minutos antes da adição de 0.3 nM de CGRP e depois ainda incubadas durante 30 minutos. O AMP Cíclico (cAMP) produzido é extraído usando o "Reagente de Lise" e sua concentração é determinada por meio de radioimunoensaio usando o kit RPA559 cAMP SPA Direct Screening Assay (Amersham Pharmacia Biotech). Os valores de IC50 são definidos como a concentração de composto requerida para inibir 50% de 0,3 nM de produção de cAMP estimulada por CGRP. Ymax é definida como o percentual de inibição máxima de 0,3 nM de produção de cAMP estimulada por CGRP.
[0051] RESULTADOS. Composto I apresenta inibição dependente da concentração da produção de cAMP estimulada por CGRP em células SK-N-MC inteiras ligadas, com um IC50 de 38,6 ± 4,2 pM, e um Ymax de 95,4 (± 1,3)%. A inibição máxima (ca. 100%) observada indica antagonismo total ao receptor de CGRP.
ANÁLISE DE SCHILD
[0052] MÉTODOS. Análise de Schild é usada para caracterizar a natureza do antagonismo do Composto I. A resposta de dose da produção de cAMP estimulada por CGRP é gerada sozinha com CGRP, ou com CGRP na presença de várias concentrações do Composto I. Especificamente, a estimulação de cAMP dose-dependente por CGRP é ensaiada com ou sem cinco concentrações diferentes do Composto I. A concentração do Composto I é representada graficamente no eixo X contra a razão de dose menos 1 no eixo Y (razão de dose é definida como o EC50 de CGRP na presença do Composto I dividido por EC50 de CGRP sozinho). Regressão linear é depois executada com os eixos X e Y transformados com log. Um declive que não difere significativamente da unidade (1) indica antagonismo competitivo. Kb é a constante de dissociação do antagonista.
[0053] RESULTADOS. Análise de Schild para o Composto I revela um declive médio de 1,02 ± 0,04 e constante de dissociação média do antagonista Kb de 21,5 ± 9,4 pM. O deslocamento mais à direita paralelo da concentração-resposta de CGRP na presença de concentração crescente do Composto I indica antagonismo competitivo pelo Composto I da produção de cAMP estimulada por CGRP. O declive de 1,02 do gráfico de Schild também confirma a interação competitiva entre o Composto I e a função de CGRP. Kb de 21,5 pM está de acordo com a ligação Ki (22,7 pM).
REVERSÃO DA DILATAÇÃO INDUZIDA POR CGRP EM ARTÉRIA INTRACRANIANA HUMANA EX VIVO
[0054] Para fornecer uma medida ex vivo que imita a condição clínica (onde a liberação de CGRP relacionada à enxaqueca precede a iniciação da terapia), os vasos são dilatados primeiro por CGRP e depois a dilatação é revertida com o Composto I. Neste protocolo de reversão, pós-tratamento do antagonista reverte a dilatação da artéria induzida por CGRP (usando uma única dose de agonista e várias doses de antagonista). Em resumo, anéis de artéria montados com fio são contraídos com íon de potássio (para imitar o tom endógeno), completamente dilatados com CGRP, e a dilatação revertida com concentrações crescentes do Composto I antagonista de CGRP. Pós-tratamento de Composto I é efetivo para reverter a dilatação induzida por CGRP estabelecida de artérias intracranianas humanas ex vivo.
[0055] AMOSTRAS DE TECIDO. As amostras de autópsia de artérias humanas são obtidas de vendedores de medição de tecido. Todos os vasos são transportados em tampão de HEPES esfriado em gelo (composição em mM: NaCl 130, KCl 4, KH2PO4 1,2, MgSO4 1,2, CaCl2 1,8, Glicose 6, NaHCO3 4, HEPES 10, EDTA 0,025). Sob recebimento, os vasos são colocados no tampão de Kreb frio (composição em mM: NaCl 118,4, KCl 4,7, KH2PO4 1,2, MgSO4 1,2, CaCl2 1,8, Glicose 10,1, NaHCO3 25) saturado com carbogênio (5% de CO2 e 95% de oxigênio).
[0056] MÉTODOS. Os vasos são limpados dos tecidos conjuntivos e cortados em segmentos cilíndricos de 4-5 mm em comprimento. Os vasos são depois montados em banhos de tecido entre dois ganchos de aço inoxidáveis; um destes é fixo e o outro é conectado a um transdutor de deslocamento de força. A tensão do vaso é registrada conti- nuamente usando um sistema de aquisição de dados (Powerlab, AD Instruments, Mountain View, CA). Os banhos de tecido contendo tampão de Krebs e os vasos montados são controlados para temperatura (37°C) e pH (7,4) e continuamente borbulhados com carbogênio. Os segmentos da artéria são permitidos equilibrar durante cerca de 30-45 minutos até um tom de repouso estável (0,25 a 0,5 g) fosse alcançado. Antes do ensaio, vasos (condicionados) são preparados com 100 mM de KCl e subsequentemente lavados.
[0057] Para testar o efeito antidilatador do Composto I, os vasos são primeiro contraídos com 10 mM de cloreto de potássio (KCl) para imitar o tom endógeno, depois completamente dilatados com 1 nM de hαCGRP, e por fim a dilatação é revertida pela adição cumulativa de concentrações crescentes do Composto I em unidades de meio log (permitindo cálculo de EC50's). Em cada concentração, os efeitos dos fármacos são expressados como % de reversão de dilatação induzida por CGRP em cada vaso. Análise dos dados é executada individualmente para cada vaso, ajustando os dados de concentração-resposta a uma função logística de quatro parâmetros através de análise de regressão não linear, para estimar os valores de EC50.
[0058] RESULTADOS. Composto I mostra reversão potente e total da dilatação induzida por CGRP das artérias intracranianas humanas ex vivo com EC50 = 880 ± 50 pM.
ANÁLISE DE SCHILD: INIBIÇÃO DA CURVA DE CONCENTRAÇÃO-RESPOSTA DE CGRP EM ARTÉRIA INTRACRANIANA HUMANA EX VIVO
[0059] Para avaliar o antagonismo funcional contra uma faixa de concentrações de CGRP, o Composto I é pré-incubado com anéis de artéria individuais no banho de tecido e depois uma curva de concentração-resposta de CGRP é gerada para alcançar dilatação total (usando agonista múltiplo e múltiplas doses de antagonista). Concen- trações mais altas do antagonista produzem um "deslocamento para a direita" na curva de concentração-resposta de CGRP, requerendo superar a presença do antagonista e alcançar dilatação total para maiores concentrações do agonista. Em resumo, anéis de artéria montados com fio são pré-incubados com antagonista, depois contraídos com KCl (para imitar o tom endógeno), e seguido por adição de concentrações crescentes de CGRP para alcançar relaxamento completo. Pré-tratamento do composto I é efetivo para inibir a dilatação induzida por CGRP de artérias intracranianas humanas ex vivo, e mostra que um deslocamento à direita paralelo da curva de concentração-resposta de CGRP.
[0060] MÉTODOS. Cada anel de artéria montado com fio é pré-incubado por 30 min com uma concentração simples (0,1-30 nM) do Composto I antagonista, depois contraído com 10 mM de KCl (para imitar o tom endógeno), seguido por adição de concentrações crescentes de CGRP para alcançar relaxamento total. A contração de KCl é deixada estabilizar-se, de modo que o tempo de pré-tratamento total do antagonista é aproximadamente 45 min antes de a aplicação de CGRP.
[0061] RESULTADOS. Composto I produz um deslocamento à direita paralelo da curva de concentração-resposta de CGRP em artérias intracranianas humanas ex vivo. Análise de Schild revela uma Kb de 91 pM. Estes resultados comparam favoravelmente aos ensaios de ligação in vitro (Ki = 22,7 pM) e funcional (Kb = 21,5 pM).
EFICÁCIA IN VIVO DO COMPOSTO I EM FLUXO SANGUÍNEO FACIAL SAGUI
[0062] Para avaliar a eficácia in vivo dos novos antagonistas do receptor de CGRP, saguis recebem uma série de quatro injeções intravenosas de hαCGRP (em intervalos de 45 min). O primeiro serve como um controle de linha base, e é seguido por liberação subcutânea do artigo de teste. Os três desafios de CGRP subsequentes fornecem uma avaliação de antagonismo de CGRP funcional in vivo. No estudo presente, o Composto I demonstrou antagonismo de CGRP robusto, duradouro.
[0063] MÉTODOS. Os saguis são anestesiados e o fluxo sanguíneo facial é aumentado por administração intravenosa (IV) de hαCGRP em intervalos de 45 min (-30, 15, 60 & 105 min). O efeito do composto de teste, liberado em 0 min, nas alterações induzidas por hαCGRPs no fluxo sanguíneo facial é medido através de fluxometria a laser de Doppler. Os compostos efetivos suprimiriam o aumento induzido por hαCGRP no fluxo sanguíneo facial visto em 15, 60 & 105 min (quando comparado ao efeito de hαCGRP de linha base visto em -30 min).
[0064] SUJEITOS: Saguis comuns adultos machos e fêmeas (Cal-lithrix jacchus) pesando 350-650 g serviram como sujeitos.
[0065] ANESTESIA E PREPARAÇÃO: Os animais são anestesiados através de inalação de isoflurano em uma câmara de indução (45% de indução rápida, mantida com 1-2,5%; Solomon et al., 1999). A anestesia é mantida liberando uma provisão constante de ar-oxigênio (50:50) e isoflurano por meio de intubação e ventilação (com monitoramento de gás sanguíneo). A temperatura do corpo é mantida a 38 ± 0,5°C por meio da colocação em uma superfície controlada de temperatura automatizada com sonda retal. Uma área pequena da pele (aprox. 1,5 cm quadrado) é removida de um ou ambos os lados da face por aplicação de um creme depilatório e/ou raspagem. As áreas cirúrgicas são cortadas e preparadas com betadina. Uma linha IV é colocada na veia safena para a administração dos compostos de teste e o agonista do receptor de CGRP hαCGRP. Adicionalmente esta linha IV fornece abstinência das amostras de sangue (max 2,5 ml, 10%) para monitoramento de gás sanguíneo e análise dos níveis plasmáticos dos compostos. Uma solução de 5% de dextrose é administrada IV para manter os níveis de açúcar do sangue. Profundidade da anestesia é monitorada medindo a pressão sanguínea e a taxa cardíaca usando um método de manguito de braço não invasivo e um oxímetro de pulso, respectivamente. Guanetidina 5-10 mg/kg IV, suplementada com 5 mg/kg IV conforme necessário, é dada para estabilizar o fluxo de pico no fluxo sanguíneo facial que do contrário mostra redução progressiva seguindo estimulação repetida (Escott et al., 1995). Fluxo sanguíneo microvascular é monitorado fixando uma sonda de fluxo Doppler a laser autoadesiva à pele facial. A sonda registra o número de células sanguíneas vermelhas que cruzam a trajetória de dois feixes de laser, multiplicado por sua velocidade (relatada como alterações no fluxo).
[0066] LIBERAÇÃO DE FÁRMACO: Os compostos de teste são administrados SC (0,1-0,6 ml/kg) na nuca. O agonista do receptor de CGRP, haCGRP, é liberado IV (1 ml/kg) a uma dose de 10 μg/kg.
[0067] PROTOCOLO DE TESTE: Para avaliar a eficácia in vivo e a duração da ação, um aumento de controle no fluxo sanguíneo facial é induzido por administração de hαCGRP (10 μg/kg IV) 30 min antes (0,5 h) para liberação do fármaco. Composto I é depois administrado em tempo zero (0 min) e hαCGRPs repetidos são liberados em intervalos de 45 min por ~2 h (dados colhidos a 0,25, 1 e 1,75 h pós-dose). Composto I é dosado a 0,003, 0,01 e 0,03 mg/kg, SC. As amostras de plasma são obtidas logo antes de cada administração de hαCGRP. Seguindo a testagem, os animais são retornados à gaiola de transporte que é colocada em uma superfície de temperatura controlada que mantém os animais aquecidos até completamente despertos e ambulantes. Os animais podem ser testados novamente após um período de repouso e de eliminação de 14-21 dias.
[0068] RESULTADOS. Composto I (0,003-0,03 mg/kg, SC) mostra inibição dose-dependente de aumentos induzidos por CGRP em fluxo sanguíneo facial de sagui. Inibição robusta (53-80%) é observada a 0,03 mg/kg em 0,25, 1 e 1,75 h pós-dose. Inibição significativa (3540%) é vista ao longo de todos os tempos de teste de pós-dose a 0,01 mg/kg. Em 0,003 mg/kg, uma inibição moderada (20%) mas significativa é observada em 0,25 h, sem afetar os tempos de teste posteriores.
[0069] Comparando a eficácia vs. exposição, os níveis de plasma ≥ 8 nM estão associados com eficácia in vivo significativa e os níveis ≥ 25 nM com eficácia máxima para o Composto I.
ESTUDOS DE IRRITAÇÃO INTRANASAL EM RATOS
[0070] COMPOSTO I E COMPOSTO III: ESTUDO DE IRRITAÇÃO INTRANASAL COMPARATIVO DE UMA SEMANA EM RATOS. Este estudo foi conduzido para comparar a irritação nasal potencial do Composto I ao Composto III quando dado intranasalmente para ratos machos por 1 semana. Ratos machos (10/grupo) foram instilados intranasalmente com as soluções do Composto I ou do Composto III (25, 75 ou 175 mg/L em 225 mM de ácido succínico, 0,02% de cloreto de benzalcônio, 1,25% de dextrose anidra, pH 5,8-6,2) uma vez diariamente a um volume de dose de 100 μL/nostril. Usando este paradigma de doseamento, doses fixas de 5, 15 ou 35 mg do artigo de teste foram liberadas diariamente. Como uma consequência, as dosagens normalizaram para o peso do corpo diminuíram com tempo à medida que os ratos cresceram. A um grupo de controle foi dado veículo de succinato e a um grupo de controle falso foi dada solução salina através de instilação intranasal. Parâmetros avaliados incluíram as observações clínicas, peso do corpo, consumo alimentar, toxicocinética, e avaliação histológica dos tecidos nasais.
[0071] Os valores para os parâmetros toxicocinéticos estão mostrados na Tabela 11.
TABELA 11: DADOS TOXICOCINÉTICOS DERIVADOS PARA O COMPOSTO I.
Figure img0032
1Não determinado por causa da exposição prolongada.
2Biodisponibilidade absoluta com base em um AUC0-24h de 7,7 μΜ·h em ratos seguindo administração intravenosa de 1 mg/kg.
3Área da superfície mucosa nasal estimada do rato = 14 cm2
[0072] Doseamento intranasal do Composto I forneceu exposição sistêmica em ratos em 24 h, e pequena diferença foi observada entre os primeiro e últimos dias de doseamento neste estudo de 1 semana.
[0073] Administração intranasal do Composto I foi bem tolerada; achados em vida foram limitados à salivação aumentada em todos os grupos de dose e controles de veículo, e foi relacionado possivelmente ao volume de doseamento excessivamente grande usado para o estudo. Salivação não observada em ratos dados solução salina.
[0074] Irritação nasal foi observada para ambos os compostos mas o Composto I claramente causou atrofia epitelial menos olfatória que o Composto III na faixa de dose (Tabela 12). O tipo de lesão observado foi consistente com as observações anteriores feitas para o Composto II. A severidade e incidência dos achados nasais demonstraram que o Composto I teve um perfil de toxicidade nasal superior ao Composto III.
Figure img0033
[0075] COMPOSTO I E COMPOSTO II: ESTUDO DE IRRITAÇÃO INTRANASAL EXPLORATÓRIA DE UMA SEMANA EM RATOS. Composto I e Composto II foram também comparados diretamente à irritação intranasal. Ratos machos (6/grupo) foram instilados intranasalmente com soluções do Composto I ou Composto II (75 ou 175 mg/L) em 225 mM de ácido succínico, 1,25% de dextrose anidra, pH 5,8-6,2) uma vez diariamente a volumes de dose de 12,5, 25 ou 100 μL/nostril. O único ponto terminal avaliado neste estudo foi avaliação histológica dos turbinados nasais.
[0076] A atrofia epitelial olfatória causada pelo Composto I foi claramente menos severa que à produzida pelo Composto II em cada dose (volume x concentração) avaliada (Tabela 13).
Figure img0034
Figure img0035
[0077] A relação de dose-resposta do Composto II foi consistente com à observada em outros estudos. Volume aumentado e concentração aumentada contribuíram para toxicidade nasal mais significativa, mas a concentração é provavelmente o fator mais importante.
[0078] Em resumo, o Composto I demonstrou superioridade ao Composto II, com respeito à irritação nasal.
[0079] POTENCIAL PARA LIBERAÇÃO NASAL. A rota de administração intranasal (IN) para antagonistas de CGRP é atrativa visto que fornece liberação não invasiva com o potencial para princípio rápido de ação. A barreira epitelial nasal altamente permeável, tecido mucoso bem perfundido, e tempo de permanência limitado de capacidade metabólica/tecido são características potencialmente úteis que suportam a liberação intranasal de um Composto como o Composto I que apresenta absorção oral muito fraca.
[0080] A viabilidade de liberação nasal foi avaliada em modelo de coelho IN comparando os perfis de concentração de plasma-tempo e parâmetros farmacocinéticos (Cmax, Tmax, AUC e biodisponibilidade) para o Composto I nasalmente liberado àquele liberado pela rota IV. A concentração de solução de doseamento e volume de liberação são incluídos nas tabelas de dados para cada estudo. As composições de veículo estão descritas nas notas de rodapé abaixo da tabela.
[0081] MÉTODOS. Grupos de três coelhos machos White da Nova Zelândia, variando em peso de 3-3,5 kg, receberam uma dose simples de fármaco em um dos tratamentos seguintes: 0,5 mg/kg injeção de bolo IV por 30 segundos, ou 0,3-3 mg/kg administrados IN com um mi-cropulverizador de seringa. Antes do doseamento IN, os coelhos foram ligeiramente sedados para fazer efeito o anestésico inalante, Sevoflu-rano. Os coelhos recuperaram a consciência em 2-5 min. As amostras seriais de sangue foram colhidas em recipientes a vácuo contendo heparina em pré-dose, 2, 5, 10, 15, 30 min e 1, 2, 4, 6, e 24 horas pós-dose. As amostras de sangue foram centrifugadas imediatamente a 4°C e o plasma separado armazenado a -80°C até análise adicional ainda pelo ensaio de LC/MS/MS.
[0082] RESULTADOS. O perfil farmacocinético indica que o Composto I é rapidamente absorvido da cavidade nasal dos coelhos quando pulverizado como uma solução. O tempo para alcançar as concentrações de pico (Tmax) ocorre dentro de 0,2-0,3 h (15-20 min) em todas as doses estudadas. A biodisponibilidade absoluta a 0,3, 1, e 3 mg/kg variou de 13 a 30% e o Cmax variou de 0,12 a 2,0 μΜ (Tabela 14).
Figure img0036
Formulação IV: 50 mM de tampão de succinato/D5W, pH 5.
Formulação IN: 50 mM de tampão de succinato, pH 5-6.
[0083] Absorção IN do Composto I no coelho foi muito rápida. Níveis de plasma >10 nM foram medidos dentro de 5 min. O fármaco foi detectado em plasma por pelo menos 6 h pós-dose e até 24 h em dose alta.
[0084] Previamente, com o Composto II houve desvio maior de linearidade quando o volume de liberação intranasal ao invés de a concentração de doseamento foi alterado. Mantendo o volume de liberação do Composto I constante e variando a concentração da solução de doseamento, o AUC e Cmax IN mostraram uma tendência à linearidade dose-dependente (Tabela 15). A variabilidade nestes parâmetros também aumentou com a dose. Em exame mais profundo, a bio- disponibilidade IN pareceu aumentar com a dose (ou concentração de doseamento) para as três doses testadas (Tabela 15).
Figure img0037
[0085] Concentrações de doseamento foram 10, 30, e 100 mg/ml em 50 mM de veículo de tampão de succinato, pH 5.
[0086] Em resumo, a rota intranasal de administração para o Composto I fornece absorção sistêmica rápida e níveis de plasma relativamente prolongados comparados à rota oral. A solubilidade aquosa alta e estabilidade de solução melhorada favoravelmente confirmam a viabilidade de um produto de pulverização nasal em um dispositivo de pulverização apropriado. Espera-se que a liberação de solução de fármaco e sua deposição na cavidade nasal em seres humanos seja mais robusta e reprodutível que o possível com modelos animais pré-clínicos IN. Formulações do Composto I são projetadas para serem liberadas em dispositivos de pulverização nasal de multidoses reutilizáveis ou de dose unitária descartável.
COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS E MÉTODOS DE TRATAMENTO
[0087] Outro aspecto da invenção é uma composição farmacêutica compreendendo o Composto I com um adjuvante, veículo, ou diluente farmaceuticamente aceitável.
[0088] Composto I será em geral dado como composição farmacêutica compreendido de uma quantidade terapeuticamente efetiva de um Composto I, ou um sal farmaceuticamente aceitável, e um veículo farmaceuticamente aceitável e pode conter excipientes convencionais. Uma quantidade terapeuticamente efetiva é a quantidade necessária para fornecer um benefício significativo ao paciente como determinado por médicos naquela técnica. Veículos farmaceuticamente aceitáveis são aqueles veículos convencionalmente conhecidos tendo perfis de segurança aceitáveis. As composições abrangem todas as formas sólidas e líquidas comuns incluindo cápsulas, tabletes, pastilhas, e pós como também suspensões líquidas, xaropes, elixires, e soluções. Composições sólidas podem ser formadas em formulações de liberação atrasada ou contínua. As composições são feitas usando técnicas de formulação comuns e excipientes convencionais (tais como agentes ligantes e umectantes) e veículos (tais como água e alcoóis).
[0089] Composições sólidas são normalmente formuladas em unidades de dosagem que fornecem de cerca de 1 a cerca de 1000 mg do ingrediente ativo por dose. Alguns exemplos de unidades de dosagem sólida são 0,1 mg, 1 mg, 10 mg, 100 mg, 500 mg, e 1.000 mg. Composições líquidas são em geral em uma faixa de dosagem de unidade de 1-100 mg/ml. Alguns exemplos de unidades de dosagem líquidas são 0,1 mg/ml, 1 mg/ml, 10 mg/ml, 25 mg/ml, 50 mg/ml, e 100 mg/ml.
[0090] A invenção abrange todos os modos convencionais de administração incluindo métodos orais, parenterais, intranasais, sublinguais, e transdérmicos. Tipicamente, a dose diária será 0,01-100 mg/kg do peso do corpo. Em geral, mais composto é requerido oralmente e menos parenteralmente. Porém, o regime de doseamento específico deveria ser determinado por um médico usando julgamento médico legal.
[0091] Outro aspecto da invenção é administração intranasal.
[0092] Os inibidores no nível de receptor para CGRP são postulados ser úteis em condições patofisiológicas onde a ativação do recep- tor de CGRP excessiva ocorreu. Alguns destes incluem vasodilatação neurogênica, inflamação neurogênica, enxaqueca, cefaleia em salvas e outras dores de cabeça, lesão térmica, choque circulatório, fogacho em menopausa, e asma. Ativação do receptor de CGRP foi implicada na patogênese de enxaqueca (Edvinsson L. CNS Drugs 2001, 15(10),745-53; Williamson, D. J. Microsc. Res. Tech. 2001, 53, 167178.; Grant, A. D. Brit. J. Pharmacol. 2002, 135, 356-362). Os níveis séricos de CGRP são elevados durante a enxaqueca (Goadsby PJ, et al. Ann Neurol 1990;28:183-7) e tratamento com fármacos antienxa-queca retorna os níveis de CGRP para normais coincidente com o alívio da cefaleia (Gallai V. et al. Cephalalgia 1995;15: 384-90). Enxa-quecosos exibem níveis de CGRP basais elevados comparados aos controles (Ashina M. et al., Pain 2000, 86(1-2), 133-8). Infusão intravenosa de CGRP produz cefaleia duradoura em enxaquecosos (Lassen L.H. et al. Cephalalgia. 2002, 22(1), 54-61). Estudos pré-clínicos em cão e rato relatam bloqueio de CGRP sistêmico com o antagonista peptídico CGRP(8-37) não altera a hemodinâmica sistêmica em repouso nem o fluxo sanguíneo regional (Shen, Y-T. et al. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2001, 298, 551-8). Desse modo, os antagonistas de receptor de CGRP podem apresentar um tratamento novo para enxaqueca que evita as responsabilidades cardiovasculares de vasoconstrição ativa associada com agonistas não seletivos de 5-HT1B/1D, "triptanos" (por exemplo, sumatriptano).
[0093] Outro aspecto da invenção é um método de inibir o receptor de CGRP compreendendo contatar o receptor de CGRP com um composto da fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0094] Outro aspecto da invenção é um método para tratar condições associadas com níveis anormais de CGRP ou sinalização do receptor de CGRP que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da fórmula I a um paciente.
[0095] Outro aspecto da invenção é o uso de um composto da fórmula I na fabricação de um medicamento para o tratamento de condições relacionadas aos níveis anormais de CGRP ou sinalização do receptor de CGRP.
[0096] Outro aspecto da invenção é um método de tratar enxaqueca ou cefaleia.
[0097] Outro aspecto da invenção é um método de tratar dor neuropática.
[0098] Outro aspecto da invenção diz respeito a um método de tratar inflamação (particularmente inflamação neurogênica), dor, lesão térmica, choque circulatório, diabetes, síndrome de Reynaud, insuficiência arterial periférica, hemorragia subaraquinoide/craniana, crescimento de tumor, fogacho associado com menopausa e outras condições o tratamento destas pode ser realizado pelo antagonismo do receptor de CGRP mediante administração das composições farmacêuticas compreendendo um composto da fórmula I como definido aqui.
[0099] Outro aspecto da invenção diz respeito aos métodos selecionados do grupo que consiste em (a) Calcitonin Receptor-Like Receptor Is Expressed on Gastrointestinal Immune Cells. Hagner, Stefan-ie; Knauer, Jens; Haberberger, Rainer; Goeke, Burkhard; Voigt, Karlheinz; McGregor, Gerard Patrick. Institute of Physiology, Philipps University, Marburg, Alemanha. Digestion (2002), 66(4), 197-203; (b) Protective effects of calcitonin gene-related peptide-mediated evodia-mine on guinea-pig cardiac anaphylaxis. Rang, Wei-Qing; Du, Yan-Hua; Hu, Chang-Ping; Ye, Feng; Tan, Gui-Shan; Deng, Han-Wu; Li, Yuan-Jian. School of Pharmaceutical Sciences, Department of Pharmacology, Central South University, Xiang-Ya Road 88, Changsha, Hunan, Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology (2003), 367(3), 306-311; (c) The experimental study on the effect calcitonin gene-related peptide on bone resorption mediated by interleukin-1. Lian, Kai; Du, Jingyuan; Rao, Zhenyu; Luo, Huaican. Department of Orthopedics, Xiehe Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan, Peop. Rep. China. Journal of Tongji Medical University (2001), 21(4), 304-307, (d) Calcitonin gene-related Peptide regulates expression of neurokinin1 receptors by rat spinal neurons. Seybold VS, McCarson KE, Mermelstein PG, Groth RD, Abrahams LG. J. Neurosci. 2003 23 (5): 1816-1824. Department of Neuroscience, University of Minnesota, Minneapolis, Minnesota 55455, e Department of Pharmacology, Toxicology, and Therapeutics, University of Kansas Medical Center, Kansas City, Kansas 66160 (e) Attenuation of antigen-induced airway hyperresponsiveness in CGRP-deficient mice. Aoki-Nagase, Tomoko; Nagase, Takahide; Oh-Hashi, Yoshio; Shindo, Takayuki; Kurihara, Yukiko; Yamaguchi, Yasuhiro; Yamamoto, Hiroshi; Tomita, Tetsuji; Ohga, Eijiro; Nagai, Ryozo; Kurihara, Hiroki; Ouchi, Yasuyoshi. Department of Geriatric Medicine, Graduate School of Medicine, University of Tokyo, Tokyo, Japão. American Journal of Physiology (2002), 283(5,Pt. 1), L963-L970; (f) Calcitonin gene-related peptide as inflammatory mediator. Springer, Jochen; Geppetti, Pierangelo; Fischer, Axel; Groneberg, David A. Charite Campus-Virchow, Department of Pediatric Pneumology and Immunology, Division of Allergy Research, Humboldt-University Berlin, Berlin, Alemanha. Pulmonary Pharmacology & Therapeutics (2003), 16(3), 121-130; e (g) Pharmacological targets for the inhibition of neurogenic inflammation. Helyes, Zsuzsanna; Pinter, Erika; Nemeth, Jozsef; Szolcsanyi, Janos. Department of Pharmacology and Pharmacotherapy, Faculty of Medicine, University of Pecs, Pecs, Hung. Current Medicinal Chemistry: Anti-Inflammatory & Anti-Allergy Agents (2003), 2(2), 191-218.
[00100] Outro aspecto desta invenção diz respeito a um método de tratamento para câncer e doenças e condições proliferativas. Antago- nistas de CGRP têm também sido propostos mostrar utilidade no tratamento de doença maligna, particularmente contra gliomas e câncer de mama que metastisam-se para o cérebro. Antagonistas de CGRP podem ser especialmente úteis contra tumores hipóxicos e na prevenção de implantação metastática. Vide publicação do pedido de patente do PCT WO2010006168.
[00101] Outro aspecto desta invenção diz respeito a um método de tratamento usando combinações dos compostos da fórmula I com um ou mais agentes selecionados do grupo que consiste em inibidores de COX-2, NSAIDS, aspirina, acetaminofeno, triptanos, ergotamina e cafeína para o tratamento de enxaqueca.
[00102] "Enxaqueca," "cefaleia," e termos relacionados são como entendidos por médicos. Enxaqueca abrange todas as classes de enxaqueca incluindo comum, clássica, em salvas, fulgurante, hemiplégi-ca, oftalmoplégica, e oftálmica.
[00103] "Terapeuticamente efetivo" significa há um benefício significativo para o paciente como entendido pelos médicos.
[00104] "Paciente" significa uma pessoa que pode se beneficiar do tratamento determinado pelos médicos.
[00105] Será evidente a alguém versado na técnica que a descrição presente não é limitada ao exemplo ilustrativo anterior, e que a mesma pode ser incorporada em outras formas específicas sem abandono dos atributos essenciais da mesma. Deseja-se, portanto, que os exemplos sejam considerados sob todos os aspectos como ilustrativos e não restritivos, referência sendo feita às reivindicações em anexo, ao invés de aos exemplos anteriores, e todas as alterações que caiam dentro do significado e faixa de equivalência das reivindicações são, portanto, intencionadas ser abrangidas na mesma.

Claims (7)

  1. Composto, caracterizado pelo fato de que é (R)-N-(3-(7-metil-1H-indazol-5-il)-1-(4-(1-metilpiperidin-4-il)piperazin-1-il)-1-oxopropan-2-il)-4-(2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-3-il)piperidino-1-carboxamida apresentando a fórmula
    Figure img0038
    ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  2. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade terapeuticamente efetiva de (R)-N-(3-(7-metil-1H-indazol-5-il)-1-(4-(1-metilpiperidin-4-il)piperazin-1-il)-1-oxopropan-2-il)-4-(2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-3-il)piperidino-1-carboxamida em associação com um adjuvante, veículo, ou diluente farmaceuticamente aceitável.
  3. Uso de um composto ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser na preparação de um medicamento para o tratamento de inflamação, dor, lesão térmica, choque circulatório, diabetes, síndrome de Reynaud, insuficiência arterial periférica, hemorragia subaraquinoi-de/craniana, crescimento de tumor, fogacho associado com menopausa.
  4. Uso de um composto ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser na preparação de um medicamento para o tratamento de enxaqueca.
  5. Uso de um composto ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser na preparação de um medicamento para o tratamento de dor neuropática.
  6. Uso de um composto ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser na preparação de um medicamento para o tratamento de uma doença proliferativa.
  7. Uso de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que a doença proliferativa é câncer de mama ou glioma.
BR112012024785-9A 2010-03-30 2011-03-11 antagonista do receptor de cgrp, seu uso e composição farmacêutica que o compreende BR112012024785B1 (pt)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US31901510P 2010-03-30 2010-03-30
US61/319,015 2010-03-30
PCT/US2011/028168 WO2011123232A1 (en) 2010-03-30 2011-03-11 Cgrp receptor antagonist

Publications (3)

Publication Number Publication Date
BR112012024785A2 BR112012024785A2 (pt) 2016-06-07
BR112012024785A8 BR112012024785A8 (pt) 2017-10-17
BR112012024785B1 true BR112012024785B1 (pt) 2020-12-01

Family

ID=43896902

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR112012024785-9A BR112012024785B1 (pt) 2010-03-30 2011-03-11 antagonista do receptor de cgrp, seu uso e composição farmacêutica que o compreende

Country Status (30)

Country Link
US (1) US8481546B2 (pt)
EP (1) EP2552906B1 (pt)
JP (1) JP5908455B2 (pt)
KR (3) KR101854249B1 (pt)
CN (1) CN102834388B (pt)
AR (1) AR080746A1 (pt)
AU (1) AU2011233627B2 (pt)
BR (1) BR112012024785B1 (pt)
CA (1) CA2794950C (pt)
CL (1) CL2012002739A1 (pt)
CY (1) CY1117593T1 (pt)
DK (1) DK2552906T3 (pt)
EA (1) EA022815B1 (pt)
ES (1) ES2562610T3 (pt)
HK (1) HK1174914A1 (pt)
HR (1) HRP20160287T1 (pt)
HU (1) HUE028735T2 (pt)
IL (1) IL221665A (pt)
MX (1) MX2012010725A (pt)
NZ (1) NZ603231A (pt)
PE (1) PE20130340A1 (pt)
PL (1) PL2552906T3 (pt)
PT (1) PT2552906E (pt)
RS (1) RS54608B1 (pt)
SG (1) SG183918A1 (pt)
SI (1) SI2552906T1 (pt)
SM (1) SMT201600078B (pt)
TW (1) TWI483937B (pt)
WO (1) WO2011123232A1 (pt)
ZA (1) ZA201207292B (pt)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB201519196D0 (en) * 2015-10-30 2015-12-16 Heptares Therapeutics Ltd CGRP Receptor Antagonists
GB201519194D0 (en) * 2015-10-30 2015-12-16 Heptares Therapeutics Ltd CGRP receptor antagonists
GB201519195D0 (en) 2015-10-30 2015-12-16 Heptares Therapeutics Ltd CGRP Receptor Antagonists
GB201707938D0 (en) 2017-05-17 2017-06-28 Univ Sheffield Compounds
US12030868B2 (en) * 2018-10-13 2024-07-09 Pfizer Ireland Pharmaceuticals Prodrugs of CGRP antagonists
EP3911409A4 (en) * 2019-01-20 2022-10-19 Biohaven Pharmaceutical Holding Company Ltd. CGRP ANTAGONISTS FOR TREATMENT OF BREAKTHROUGHT MIGRAINE
EP3952899A1 (en) 2019-04-11 2022-02-16 R.P. Scherer Technologies, LLC Formulation for oral delivery of proteins, peptides and small molecules with poor permeability
JP2023507094A (ja) * 2019-12-17 2023-02-21 バイオヘイブン・ファーマシューティカル・ホールディング・カンパニー・リミテッド Ｃｇｒｐ阻害剤の鼻腔内医薬組成物
KR20230088442A (ko) * 2020-11-19 2023-06-19 화이자 아일랜드 파마슈티컬즈 Cgrp 억제제의 개선된 전달을 위한 조성물
KR20230157986A (ko) 2021-03-02 2023-11-17 체게에르페 다이어그노스틱스 게엠베하 편투통 발생의 치료 및/또는 저감
WO2022217008A1 (en) 2021-04-09 2022-10-13 Teva Czech Industries S.R.O Solid state forms of zavegepant and process for preparation thereof
WO2023026205A1 (en) 2021-08-24 2023-03-02 Cgrp Diagnostics Gmbh Preventative treatment of migraine
WO2024046223A1 (zh) * 2022-08-30 2024-03-07 熙源安健医药（上海）有限公司 吲唑甲酰胺类衍生物及其制备方法和用途
WO2024100599A1 (en) 2022-11-09 2024-05-16 Teva Czech Industries S.R.O. Solid state forms of zavegepant hydrochloride and process for preparation thereof
CN116003387B (zh) * 2022-11-20 2024-03-26 药康众拓(北京)医药科技有限公司 一种氘代吲唑丙酰胺类化合物、药物组合物和用途

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2487976C (en) * 2002-06-05 2011-07-26 Bristol-Myers Squibb Company Calcitonin gene related peptide receptor antagonists
US7220862B2 (en) 2002-06-05 2007-05-22 Bristol-Myers Squibb Company Calcitonin gene related peptide receptor antagonists
EP1722792A1 (de) 2004-03-03 2006-11-22 Boehringer Ingelheim International GmbH Ausgewählte cgrp-antagonisten, verfahren zu deren herstellung sowie deren verwendung als arzneimittel
US7834007B2 (en) 2005-08-25 2010-11-16 Bristol-Myers Squibb Company CGRP antagonists
CN101495480B (zh) * 2006-05-03 2013-07-10 百时美施贵宝公司 作为降钙素基因相关肽受体拮抗剂的受限化合物
WO2010006168A2 (en) 2008-07-09 2010-01-14 University Of Rochester Methods of treating cancer using and agent that modulates activity of the calcitonin-gene related peptide ("cgrp") receptor

Also Published As

Publication number Publication date
HK1174914A1 (zh) 2013-06-21
JP2013523733A (ja) 2013-06-17
AU2011233627A1 (en) 2012-11-15
MX2012010725A (es) 2012-10-05
AU2011233627B2 (en) 2013-09-12
HRP20160287T1 (hr) 2016-04-08
CN102834388B (zh) 2014-07-16
CY1117593T1 (el) 2017-06-28
KR101747477B1 (ko) 2017-06-14
CN102834388A (zh) 2012-12-19
CA2794950A1 (en) 2011-10-06
PE20130340A1 (es) 2013-03-30
CA2794950C (en) 2017-09-26
KR101854249B1 (ko) 2018-05-03
EP2552906B1 (en) 2016-01-06
ZA201207292B (en) 2014-03-26
US8481546B2 (en) 2013-07-09
HUE028735T2 (en) 2017-01-30
NZ603231A (en) 2014-02-28
IL221665A (en) 2016-07-31
EA201270751A1 (ru) 2013-02-28
SG183918A1 (en) 2012-10-30
WO2011123232A1 (en) 2011-10-06
PT2552906E (pt) 2016-03-18
EA022815B1 (ru) 2016-03-31
SMT201600078B (it) 2016-04-29
TWI483937B (zh) 2015-05-11
CL2012002739A1 (es) 2013-03-22
BR112012024785A8 (pt) 2017-10-17
KR20180049168A (ko) 2018-05-10
ES2562610T3 (es) 2016-03-07
US20120059017A1 (en) 2012-03-08
KR20130076807A (ko) 2013-07-08
AR080746A1 (es) 2012-05-02
TW201139414A (en) 2011-11-16
KR20170068615A (ko) 2017-06-19
BR112012024785A2 (pt) 2016-06-07
RS54608B1 (en) 2016-08-31
JP5908455B2 (ja) 2016-04-26
PL2552906T3 (pl) 2016-06-30
DK2552906T3 (en) 2016-03-29
SI2552906T1 (sl) 2016-05-31
EP2552906A1 (en) 2013-02-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BR112012024785B1 (pt) antagonista do receptor de cgrp, seu uso e composição farmacêutica que o compreende
US11352338B2 (en) Substituted isoindolinones
ES2899581T3 (es) Compuestos y métodos para la modulación de quinasas e indicaciones para estos
ES2642737T3 (es) Sal de hemisulfato de N-(5S,6S,9R)-5-amino-6-(2,3-difluorofenil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-ciclohepta[b]piridin-9-il-4-(2-oxo-2,3-dihidro-1H-imidazo[4,5-b]piridin-1-il)piperidina-1-carboxilato
PT2997023T (pt) Derivados de bipirazole como inibidores da jak
TW202002973A (zh) 新穎經取代吲唑、其製法、包含其之醫藥製劑及其製備藥劑之用途
BR112012020693B1 (pt) Derivados de ciclobutano e metilciclobutano como inibidores de janus quinase e composição que os compreende
KR20190072665A (ko) 오피오이드 수용체 리간드와 그 용도 및 제조방법
JP2022500391A (ja) ファルネソイドｘ受容体アゴニストおよびその使用
US20230285381A1 (en) Novel dizocilpine derivatives as peripheral nmda receptor antagonists
WO2022197690A1 (en) Non-hydroxamate hdac6 inhibitors and related methods of use
TW201808932A (zh) 環狀胺衍生物之結晶及其醫藥用途
JP6603668B2 (ja) Ｎｍｄａ受容体モジュレーター及びプロドラッグ、塩、並びにこれらの使用
WO2024140754A1 (zh) 一种萘酰胺类化合物、其制备方法及其应用
CA2970232A1 (en) Pharmaceutical composition having bicyclic nitrogen-containing aromatic heterocyclic amide compound as active component

Legal Events

Date Code Title Description
B07D Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette]
B06F Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette]
B07E Notification of approval relating to section 229 industrial property law [chapter 7.5 patent gazette]

Free format text: NOTIFICACAO DE ANUENCIA RELACIONADA COM O ART 229 DA LPI

B06U Preliminary requirement: requests with searches performed by other patent offices: procedure suspended [chapter 6.21 patent gazette]
B09A Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette]
B16A Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 11/03/2011, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS.