BR112012020693B1 - Derivados de ciclobutano e metilciclobutano como inibidores de janus quinase e composição que os compreende - Google Patents

Abstract

derivados de ciclobutano e metilciclobutano como inibidores de janus quinase. a presente invenção refere-se aos derivados de ciclobutano e metilciclobutano, assim como os seus sais, composições, e métodos de uso, que são inibidores da janus quinase (jak) úteis no tratamento de doenças associadas com a jak incluindo, por exemplo, os distúrbios inflamatórios e autoimunes, assim como câncer e distúrbios mieloproliferativos.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para DERIVADOS DE CICLOBUTANO E METILCICLOBUTANO COMO INIBIDORES DE JANUS QUINASE E COMPOSIÇÃO QUE OS COMPREENDE.

PEDIDO RELACIONADO [0001] Este pedido reivindica a prioridade para o Pedido Provisório

U.S. No. 61/305.630, depositado em 18 de fevereiro de 2010, intitulado CYCLOBUTANE AND METHYLCYCLOBUTANE DERIVATIVES AS JANUS KINASE INHIBITORS. Os conteúdos de todas as patentes, pedidos de patente e referências citados em todo este relatório descritivo são por meio desta incorporados por referência em suas totalidades.

CAMPO DA INVENÇÃO [0002] A presente invenção refere-se aos derivados de ciclobutano e metilciclobutano, assim como os seus sais, composições, e métodos de uso. Estes compostos são inibidores da Janus quinase (JAK) úteis no tratamento de doenças associadas com a JAK incluindo, por exemplo, os distúrbios inflamatórios e autoimunes, assim como câncer e distúrbios mieloproliferativos.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO [0003] As proteínas quinases (PKs) são um grupo de enzimas que regulam diversos processos biológicos importantes incluindo o desenvolvimento, sobrevivência e diferenciação celular, a formação de órgãos e morfogênese, neovascularização, reparação e regeneração de tecidos, entre outros. As proteínas quinases exercem as suas funções fisiológicas através da catalisação da fosforilação de proteínas (ou substratos) e desse modo a modulação das atividades celulares dos substratos em vários contextos biológicos. Além das funções nos tecidos/órgãos normais, muitas proteínas quinases também desempenham papéis mais especializados em um hospedeiro de

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2/50 doenças humanas, incluindo o câncer. Um subsérie de proteínas quinases (também referidas como proteínas quinases oncogênicas), quando desregulada, pode causar a formação e o crescimento do tumor, e ainda contribuir para a manutenção e progressão tumoral. Até agora, as proteínas quinases oncogênicas representam um dos maiores e mais atraentes grupos de alvos de proteína para a intervenção de câncer e desenvolvimento de medicamentos.

[0004] A família Janus Quinase (JAK) desempenha um papel na regulação dependente de citocinas da proliferação e função das células envolvidas na resposta imune. Atualmente, existem quatro membros conhecidos da família JAK de mamífero: JAK1 (também conhecida como Janus quinase-1), JAK2 (também conhecida como Janus quinase-2), JAK3 (também conhecida como Janus quinase, leucócitos; JAKL; L-JAK e Janus quinase-3) e TYK2 (também conhecida como proteína-tirosina quinase 2). As proteínas JAK variam em tamanho de 120 a 140 kDa e compreendem sete domínios conservados de homologia JAK (JH); um deles é um domínio quinase catalítico funcional, e o outro é um domínio pseudoquinase que potencialmente servem como uma função reguladora e/ou servem como um sítio de acoplamento para STATs.

[0005] O bloqueio da transdução de sinal no nível das quinases

JAK mantém a promessa de desenvolvimento de tratamentos para as doenças inflamatórias, doenças autoimunes, doenças mieloproliferativas, e cânceres humanos, para citar alguns. A inibição das quinases JAK também é prevista de ter benefícios terapêuticos em pacientes que sofrem de distúrbios imunes da pele tais como a psoríase, e a sensibilização da pele.

[0006] Assim, agentes novos ou melhorados que inibem as quinases, tais como as Janus quinases, são continuamente necessários para o desenvolvimento de novos e mais eficazes produtos

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3/50 farmacêuticos para tratar o cancro e outras doenças. Os compostos, sais e composições aqui descritos são direcionados para estas necessidades e outras finalidades.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO [0007] A presente invenção fornece um composto que é 3ciclobutil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1il]propanonitrila, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Em algumas modalidades, o composto anteriormente mencionado é o enantiômero R ou S.

[0008] A presente invenção ainda fornece um composto que é 3(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3-(3-metilciclobutil) propanonitrila, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. A presente invenção ainda inclui os vários estereoisômeros do composto anteriormente mencionado, incluindo os enantiômeros R e S e isômeros geométricos cis e trans.

[0009] A presente invenção fornece ainda um sal de ácido fosfórico de qualquer um dos compostos de ciclobutila ou metilciclobutila aqui descritos.

[00010] A presente invenção ainda fornece uma composição compreendendo um composto como aqui descrito, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável.

[00011] A presente invenção ainda fornece métodos de tratamento de uma doença ou distúrbio associado com a JAK em um paciente compreendendo a administração ao paciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto como aqui descrito, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[00012] A presente invenção ainda fornece os compostos aqui descritos, ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis, para uso em terapia.

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4/50 [00013] A presente invenção fornece ainda o uso dos compostos aqui descritos, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, para a preparação de um medicamento para uso em terapia.

[00014] Aqui também é fornecido um método de tratamento de uma doença autoimune em um paciente compreendendo a administração a dito paciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Em uma modalidade, a doença autoimune é uma doença de pele, esclerose múltipla, artrite reumatoide, artrite psoriática, artrite juvenil, diabetes tipo I, lúpus, doença inflamatória do intestino, doença de Crohn, miastenia gravis, nefropatias de imunoglobulina, miocardite, ou distúrbios autoimunes da tiroide. Em outra modalidade, a doença autoimune é artrite reumatoide. Em mais outra modalidade, a doença autoimune é um distúrbio de pele, tal como dermatite atópica, psoríase, sensibilização da pele, irritação da pele, erupção cutânea, dermatite de contato ou sensibilização de contato alérgico.

[00015] Em outro aspecto, é aqui fornecido um método de tratamento de câncer em um paciente compreendendo a administração ao referido paciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Em uma modalidade, o câncer é um tumor sólido. Em outra modalidade, o câncer é câncer de próstata, câncer renal, câncer hepático, câncer de mama, câncer de pulmão, câncer de tireoide, sarcoma de Kaposi, doença de Castleman ou câncer no pâncreas. Em mais outra modalidade, o câncer é linfoma, leucemia, ou múltiplos mielomas.

[00016] Em mais outro aspecto, é aqui fornecido um método de tratamento de um distúrbio mieloproliferativo em um paciente compreendendo a administração a dito paciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Em uma modalidade, o distúrbio

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5/50 mieloproliferativo (MPD) é policitemia vera (PV), trombocitemia essencial (ET), mielofibrose primária (PMF), mielofibrose com metaplasia mieloide (MMM), leucemia mieloide crônica (CML), leucemia mielomonocítica crônica (CMML), síndrome hipereosinofílica (HES), mielofibrose idiopática (IMF), doença de mastócitos sistêmica (SMCD), ou mielofibrose pós policitemia vera/trombocitemia essencial (PostPV/ET MF).

[00017] Em outro aspecto, é aqui fornecido um método de tratamento de uma doença inflamatória em um paciente compreendendo a administração ao referido paciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[00018] Em ainda outro aspecto, é aqui fornecido um método de tratamento da rejeição de transplante de órgãos em um paciente, compreendendo a administração ao referido paciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[00019] Em ainda outro aspecto, é aqui fornecido um método de tratamento de olho seco em um paciente, compreendendo a administração ao referido paciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

DESCRIÇÃO DETALHADA [00020] A presente invenção fornece, inter alia, o composto de inibição da JAK:

3-ciclobutil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il] propanonitrila (Fórmula I), e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

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[00021] A presente invenção ainda fornece os compostos (R)-3ciclobutil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il] propanonitrila (Fórmula I-R) e (S)-3-ciclobutil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-

d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (Fórmula I-S), e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

[00022] A presente invenção fornece ainda o composto de inibição da JAK 3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3-(3metilciclobutil) propanonitrila (Fórmula II), e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

[00023] A presente invenção ainda fornece os isômeros cis e trans do composto de Fórmula II. Estes isômeros cis e trans são:

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7/50 [00024] 3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3((trans)-3-metilciclobutil)propanonitrila (Fórmula II-trans); e [00025] 3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3-(cis)3-metilciclobutil)propanonitrila (Fórmula II-cis).

[00026] A presente invenção ainda fornece os enantiômeros R e S do composto de Fórmula II. Estes isômeros R e S são:

[00027] (3R)-3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3((3-metilciclobutil)propanonitrila (Fórmula II-R); e [00028] (3S)-3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3(3-metilciclobutil)propanonitrila (Fórmula II-S).

[00029] A presente invenção fornece ainda os isômeros R/trans,

R/cis, S/trans, e S/cis do composto de Fórmula II. Estes isômeros são: [00030] (3R)-3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3((trans)-3-metilciclobutil)propanonitrila (Fórmula II-R/trans), [00031] (3S)-3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3((trans)-3-metilciclobutil)propanonitrila (Fórmula II-S/trans), [00032] (3R)-3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3Petição 870190113460, de 06/11/2019, pág. 13/63

8/50 ((cis)-3-metilciclobutil)propanonitrila (Fórmula II-R/cis), e [00033] (3S)-3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3((cis)-3-metilciclobutil)propanonitrila (Formula II-S/cis).

II-S/trans

II-S/cis [00034] Os compostos descritos acima são aqui referidos como os compostos da invenção. Aqui e em outros lugares, onde existem discrepâncias entre um nome de composto e uma estrutura de composto, a estrutura química irá controlar.

[00035] A presente invenção ainda fornece sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos compostos anteriormente mencionados. Em algumas modalidades, o sal farmaceuticamente aceitável é um sal de ácido fosfórico.

[00036] Os compostos aqui descritos são assimétricos (por exemplo, tendo uma ou mais estereocentros). Todos os estereoisômeros, tais como enantiômeros e diastereômeros, são planejados, a não ser que de outra maneira indicado. Os compostos da presente invenção que contêm átomos de carbono assimetricamente

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9/50 substituídos podem ser isolados em formas opticamente ativas ou racêmicas. Os métodos sobre como preparar as formas oticamente ativas são conhecidos na técnica, tais como através da resolução de misturas racêmicas ou pela síntese estereosseletiva. Os isômeros geométricos também podem estar presentes nos compostos aqui descritos, e todos tais isômeros estáveis são contemplados na presente invenção. Os isômeros geométricos cis e trans dos compostos da presente invenção são descritos e podem ser isolados como uma mistura de isômeros ou como formas isoméricas substancialmente separadas. Onde um composto capaz de estereoisomerismo (por exemplo, isomerismo ótico e/ou geométrico) for designado na sua estrutura ou nome sem referência às configurações específicas R/S ou cis/trans, pretende-se que todos tais isômeros sejam contemplados. Por exemplo, as Fórmulas I e II como representadas acima devem ser entendidas como inclusivas de isômeros tanto R quanto S e isômeros cis e trans na medida em que as moléculas levam em conta tal isomerismo.

[00037] A resolução de misturas racêmicas, ou a separação de uma mistura de isômeros óticos e/ou geométricos, pode ser realizada por qualquer um dos numerosos métodos conhecidos na técnica incluindo os métodos cromatográficos, (por exemplo, cromatografia em coluna de quiral) ou recristalização fracionada.

[00038] Os compostos da invenção também podem incluir as formas tautoméricas. As formas tautoméricas resultam da troca de uma ligação única com uma ligação dupla adjacente juntamente com a migração concomitante de um próton. As formas tautoméricas incluem tautômeros prototrópicos que são estados de protonação isomérica tendo a mesma fórmula empírica e carga total. Tautómeros prototrópico exemplares incluem pares de cetona - enol, pares de amida - ácido imídico, pares de lactama - lactima, pares de amida - ácido imídico,

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10/50 pares de enamina - imina, e as formas anulares onde um próton pode ocupar duas ou mais posições de um sistema heterocíclico, por exemplo, 1H- e 3H-imidazol, 1H-, 2H- e 4H- 1,2,4-triazol, 1H- e 2H-isoindol, e 1H- e 2H-pirazol.

[00039] Os compostos e sais da presente invenção podem ser encontrados juntamente com outras moléculas, tais como as moléculas de solvente e água, para formar hidratos e solvatos.

[00040] Os compostos e os sais da invenção também podem incluir todos os isótopos de átomos presentes interiormente. Os isótopos incluem aqueles átomos tendo o mesmo número atômico, mas diferentes números de massa. Por exemplo, os isótopos de hidrogênio incluem trítio e deutério.

[00041] Em algumas modalidades, os compostos da invenção, e seus sais, são substancialmente isolados. Por substancialmente isolado significa que o composto é pelo menos parcial ou substancialmente separado do ambiente em que foi formado ou detectado. A separação parcial pode incluir, por exemplo, uma composição enriquecida no composto ou sal da invenção. A separação substancial pode incluir composições contendo pelo menos cerca de 50%, pelo menos cerca de 60%, pelo menos cerca de 70%, pelo menos cerca de 80%, pelo menos cerca de 90%, pelo menos cerca de 95%, pelo menos cerca de 97%, ou pelo menos cerca de 99% em peso do composto da invenção, ou seu sal.

[00042] A frase farmaceuticamente aceitável é aqui utilizada para se referir àqueles compostos, sais, materiais, composições, e/ou formas de dosagem que são, dentro do discernimento médico seguro, adequados para a utilização em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem toxicidade excessiva, irritação, resposta alérgica, ou outro problema ou complicação, comensurável com uma relação benefício/risco razoável.

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11/50 [00043] A presente invenção também inclui os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos aqui descritos. Como aqui usada, a frase sais farmaceuticamente aceitáveis refere-se aos derivados dos compostos divulgados em que o composto de origem é modificado através da conversão de um ácido existente ou componente de base para a sua forma de sal. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não são limitados a estes, sais de ácidos minerais ou orgânicos de resíduos básicos tais como aminas; sais alcalinos ou orgânicos de resíduos ácidos tais como ácidos carboxílicos; e outros mais. Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção incluem os sais não tóxicos convencionais do composto de origem formado, por exemplo, de ácidos inorgânicos ou orgânicos não tóxicos. Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser sintetizados a partir do composto de origem que contém um componente básico ou acídico por métodos químicos convencionais. Geralmente, tais sais podem ser preparados pela reação das formas de ácido livre ou base destes compostos com uma quantidade estequiométrica da base ou ácido apropriado em água ou em um solvente orgânico, ou em uma mistura dos dois. As listas de sais adequados são observadas em Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418 and Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977), cada uma das quais é aqui incorporada por referência na sua totalidade.

Métodos [00044] Os compostos e sais da invenção podem inibir a atividade de uma ou mais Janus quinases (JAKs). As JAKs em que os presentes compostos se ligam e/ou inibem incluem qualquer membro da família JAK. Os presentes compostos inibem as atividades tanto da JAK1 quanto da JAK2.

[00045] Outro aspecto da presente invenção pertence aos métodos

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12/50 de tratamento de uma doença ou distúrbio associado com a JAK em um indivíduo (por exemplo, paciente) mediante a administração ao indivíduo com necessidade de tal tratamento de uma quantidade terapeuticamente eficaz ou dose de um composto ou sal da presente invenção ou uma composição farmacêutica deste. Uma doença associada com a JAK pode incluir qualquer doença, distúrbio ou condição que seja direta ou indiretamente ligado à expressão ou atividade da JAK, incluindo a superexpressão e/ou níveis de atividade anormais. Uma doença associado com a JAK também pode incluir qualquer doença, distúrbio ou condição que possa ser impedida, melhorada, ou curada mediante a modulação da atividade de JAK.

[00046] Exemplos de doenças associadas com a JAK incluem as doenças que envolvem o sistema imune incluindo, por exemplo, a rejeição de transplante de órgãos (por exemplo, rejeição de aloenxerto e doença do enxerto versus hospedeiro).

[00047] Outros exemplos de doenças associadas com a JAK incluem as doenças autoimunes tais como a esclerose múltipla, artrite reumatoide, artrite juvenil, artrite psoriática, diabetes tipo I, lúpus, psoríase, doença inflamatória do intestino, colite ulcerativa, doença de Crohn, miastenia gravis, nefropatias de imunoglobulina, distúrbios autoimunes da tiroide, e outras mais. Em algumas modalidades, a doença autoimune é um distúrbio de pele bolhosa autoimune tal como pênfigo vulgar (PV) ou penfigoide bolhoso (BP).

[00048] Outros exemplos de doenças associadas com a JAK incluem as condições alérgicas tais como asma, alergias alimentares, dermatite atópica e rinite. Outros exemplos de doenças associadas com a JAK incluem as doenças virais, tais como o vírus Epstein Barr (EBV), hepatite B, hepatite C, HIV, HTLV 1, vírus da varicela-zoster (VZV) e vírus de papiloma humano (HPV).

[00049] Outros exemplos de doenças ou condições associadas com

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13/50 a JAK incluem os distúrbios da pele tais como psoríase (por exemplo psoríase vulgar), dermatite atópica, erupção cutânea, irritação da pele, sensibilização da pele (por exemplo, dermatite de contato ou dermatite de contato alérgica). Por exemplo, certas substâncias incluindo alguns produtos farmacêuticos quando topicamente aplicadas pode causar sensibilização da pele. Em algumas modalidades, a coadministração ou a administração sequencial de pelo menos um inibidor de JAK da invenção juntamente com o agente causador da sensibilização indesejada pode ser útil no tratamento de tal sensibilização indesejada ou dermatite. Em algumas modalidades, o distúrbio de pele é tratado pela administração tópica de pelo menos um inibidor de JAK da invenção.

[00050] Em outras modalidades, a doença associada com a JAK é câncer, incluindo aquele que se caracteriza por tumores sólidos (por exemplo, câncer de próstata, câncer renal, câncer hepático, câncer pancreático, câncer gástrico, câncer de mama, câncer de pulmão, câncer de cabeça e pescoço, câncer de tireoide, glioblastoma, sarcoma de Kaposi, doença de Castleman, melanoma, etc.), cânceres hematológicos (por exemplo, linfoma, leucemia, tais como leucemia linfoblástica aguda, leucemia mieloide aguda (AML) ou mieloma múltiplo), e câncer da pele tal como linfoma cutâneo das células T (CTCL) e linfoma cutâneo de células B. Exemplo de linfomas cutâneos de células T inclui a síndrome de Sezary e micose fungoide.

[00051] As doenças associadas com a JAK podem ainda incluir aquelas caracterizadas pela expressão de uma JAK2 mutante, tal como aquelas tendo pelo menos uma mutação no domínio pseudo-quinase (por exemplo, JAK2V617F).

[00052] As doenças associadas com a JAK podem ainda incluir os distúrbios mieloproliferativos (SMP) tais como policitemia vera (PV), trombocitemia essencial (ET), mielofibrose com metaplasia mieloide

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14/50 (MMM), leucemia mieloide crônica (CML), leucemia mielomonocítica crônica (CMML), síndrome hipereosinofílica (HES), doença de mastócito sistêmica (SMCD), e outros mais. Em algumas modalidades, o distúrbio mieloproliferativo é a mielofibrose primária (PMF) ou a pós policitemia vera/mielofibrose trombocitemia essencial (Post-PV/ET MF). [00053] Outras doenças associadas com a JAK incluem inflamação e doenças inflamatórias. As doenças inflamatórias exemplares incluem doenças inflamatórias do olho (por exemplo, irite, uveíte, esclerite, conjuntivite, ou doença relacionada), doenças inflamatórias do trato respiratório (por exemplo, o trato respiratório superior incluindo o nariz e seios tais como a rinite ou sinusite ou o trato respiratório inferior incluindo bronquite, doença pulmonar obstrutiva crônica, e outras mais), miopatia inflamatória tal como miocardite, e outras doenças inflamatórias.

[00054] Os inibidores de JAK aqui descritos podem ainda ser usados para tratar a lesão por reperfusão de isquemia ou uma doença ou condição relacionada com um evento isquêmico inflamatório tal como o acidente vascular cerebral ou a parada cardíaca. Os inibidores de JAK aqui descritos podem ainda ser usados para tratar a anorexia, a caquexia, ou fadiga, tais como aquelas que resultam de ou associadas com o câncer. Os inibidores de JAK aqui descritos podem ainda ser usados para tratar a restenose, esclerodermite, ou fibrose. Os inibidores de JAK aqui descritos podem ainda ser usados para tratar as condições associadas com a hipoxia ou astrogliose tais como, por exemplo, retinopatia diabética, câncer, ou neurodegeneração. Ver, por exemplo, Dudley, A.C. et al. Biochem. J. 2005, 390(Pt 2):427-36 and Sriram, K. et al. J. Biol. Chem. 2004, 279(19):19936-47. Epub 2004 Mar 2. Os inibidores de JAK aqui descritos podem ser usados para tratar a doença de Alzheimer.

[00055] Os inibidores de JAK aqui descritos podem ainda ser

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15/50 utilizados para tratar outras doenças inflamatórias tais como a síndrome da resposta inflamatória sistêmica (SIRS) e choque séptico.

[00056] Os inibidores de JAK aqui descritos podem ainda ser usados para tratar gota e tamanho aumentado da próstata devido a, por exemplo, hipertrofia prostática benigna ou hiperplasia prostática benigna.

[00057] Os inibidores de JAK aqui descritos, assim como outros inibidores da JAK capazes de influenciar a sinalização IL-6/STAT3, podem ainda ser usados para tratar as doenças proliferativas associadas com a inflamação. A inflamação foi mostrada de estar ligada ao desenvolvimento de certos tipos de cânceres. Por exemplo, pacientes que sofrem de doença inflamatória do intestino tal como colite ulcerativa têm sido demonstrados de ter um risco muito maior de desenvolver câncer colorretal. Estes tipos de cânceres ligados à inflamação têm sido denominados de câncer associado com colite (CAC). Vários estudos têm mostrado que a sinalização IL-6/STAT3 está envolvida na promoção de CAC. Por exemplo, camundongos deficientes em células epiteliais intestinais STAT3 tiveram o tamanho de tumor diminuído e incidência em um modelo animal de CAC. Bromberg, et al., Inflammation and cancer: IL-6 and STAT3 complete the link, Cancer Cell, 15:79-80 (2009). Resultados similares foram obtidos com camundongos deficientes de IL-6, que desenvolveram menos e menores adenomas do que os camundongos do tipo silvestre. Grivennikov, et al., IL-6 and STAT3 are required for survival of intestinal epithelial cells and the development of colitis-associated cancer, Cancer Cell, 15:103-111 (2009). Ver também, Bollrath, et al., gp130Mediated STAT3 activation in enterocytes regulatres cell survival and cell-cycle progression during colitis-associated tumorigenesis, Cancer Cell, 15:91-102 (2009); e Kortylewski, et al., Regulation of the IL-23 and IL-12 balance by Stat3 signaling in the tumor microenvironment, Cancer

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Cell, 15:114-123 (2009).

[00058] Consequentemente, em algumas modalidades, os inibidores da JAK da invenção e aqueles que influenciam a sinalização IL-6/STAT3, podem ser utilizados para tratar cânceres associados com a inflamação. Em algumas modalidades, o câncer é associado com a doença inflamatória do intestino. Em algumas modalidades, a doença inflamatória do intestino é colite ulcerativa. Em algumas modalidades, a doença inflamatória do intestino é doença de Crohn. Em algumas modalidades, o câncer associado com a inflamação é o câncer associado com a colite. Em algumas modalidades, o câncer associado com a inflamação é o câncer do cólon ou o câncer colorretal. Em algumas modalidades, o câncer é o câncer gástrico, tumor carcinoide gastrointestinal, tumor estromal gastrointestinal (GIST), adenocarcinoma, câncer do intestino delgado, ou câncer retal. Em adição aos compostos aqui fornecidos, os inibidores da JAK exemplares que podem ser usados no tratamento de cânceres associados com a inflamação incluem aqueles descritos nas US 2006/0106020; US 2006/0183906; US 2007/0149506; US 2007/0135461; US 2008/0188500; US 2008/0312258; US 2008/0312259; e U.S. Ser. N° 12/270.135.

[00059] Os inibidores da JAK podem ser testados em modelos animais para a eficácia potencial no tratamento de cânceres associados com a inflamação. Por exemplo, o CAC pode ser induzido em camundongos tratados (por exemplo, com inibidores de JAK) ou não tratados pelo método resumido em Grivennikov, et al., IL-6 and STAT3 are required for survival of intestinal epithelial cells and the development of colitis-associated cancer, Cancer Cell, 15:103-111 (2009). A progressão da doença pode ser seguida através da medição do peso corporal e monitoramento de sinais de hemorragia retal e diarréia. Após o sacrifício dos animais, partes do cólon distal são removidas para

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17/50 análise.

[00060] Em algumas modalidades, os inibidores de JAK aqui descritos podem ainda ser usados para tratar um distúrbio de olho seco. Como usado aqui, distúrbio de olho seco destina-se a abranger os estados doentios resumidos em um relatório oficial recente da Dry Eye Workshop (DEWs), que definiu olho seco como uma doença multifatorial das lágrimas e da superfície ocular que resulta em sintomas de desconforto, perturbação visual e instabilidade da película lacrimal com dano potencial à superfície ocular. É acompanhado por osmolaridade aumentada da película lacrimal e inflamação da superfície ocular, Lemp, The Definition and Classification of Dry Eye Disease: Report of the Definition and Classification Subcommittee of the International Dry Eye WorkShop, The Ocular Surface, 5(2), 75-92 April 2007, que é aqui incorporado por referência na sua totalidade. O olho seco também é às vezes referido como ceratoconjuntivite seca. Em algumas modalidades, o tratamento do distúrbio de olho seco envolve a melhora de um sintoma particular de distúrbio do olho seco, tais como desconforto ocular, perturbação visual, instabilidade da película lacrimal, hiperosmolaridade da lágrima, e inflamação da superfície ocular. A utilização de inibidores de JAK para o tratamento de olho seco é fornecida na U.S. Ser. No. 12/571.834, depositada em 01 de outubro de 2009, que é aqui incorporada por referência.

[00061] Em um outro aspecto, a presente invenção fornece um método de tratamento de conjuntivite, uveíte, (incluindo a uveíte crônica), coriodite, retinite, ciclite, esclierite, episclerite ou irite; tratamento de inflamação ou dor relacionada com o transplante da córnea, LASIK (keratomileusis in sito assistida por laser), ceratectomia fotorrefrativa, ou LASEK (keratomileusis sub-epitelial assistida por laser); perda da inibição de acuidade visual relacionada com o transplante da córnea, LASIK, ceratectomia fotorrefrativa, ou LASEK; ou

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18/50 inibição da rejeição de transplante em um paciente com sua necessidade, que compreende a administração ao paciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I, ou sal farmaceuticamente aceitável ou N-óxido deste. Em algumas modalidades, o composto, ou seu sal farmaceuticamente aceitável ou N-óxido, é administrado antes da cirurgia à um paciente preste a sofrer um procedimento selecionado de transplante da córnea, LASIK, ceratectomia fotorrefrativa, e LASEK. Em algumas modalidades, o composto, ou seu sal farmaceuticamente aceitável ou N-óxido, suprime ou diminui a inflamação ou dor durante e após o procedimento. Em algumas modalidades, o composto, ou seu sal farmaceuticamente aceitável ou N-óxido, é administrado cerca de 1 dia a cerca de 2 dias antes do procedimento. Em algumas modalidades, o composto, ou seu sal farmaceuticamente aceitável ou N-óxido, é administrado no pósoperatório a um paciente que sofreu um procedimento selecionado de transplante da córnea, LASIK, ceratectomia fotorrefrativa, e LASEK. Em algumas modalidades, a inibição da perda de acuidade visual significa diminuir a perda da acuidade visual. Em algumas modalidades, o tratamento pós-operatório ou pré-operatório diminui a quantidade de cicatrizes e depósitos fibrosos após o procedimento. Em algumas modalidades, a inibição da perda de acuidade visual significa que o paciente retém a acuidade visual. Em algumas modalidades, a inibição da rejeição de transplante significa que o composto, ou sal seu farmaceuticamente aceitável ou N-óxido, é imunossupressor, impedindo assim a rejeição total do transplante da córnea.

[00062] Em uma modalidade, é aqui fornecido um método de tratamento de câncer em um indivíduo, compreendendo a administração ao indivíduo de 3-ciclobutil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila, um seu isômero, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Em outra modalidade, é aqui

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19/50 fornecido um método de tratamento de mielofibrose em um indivíduo, compreendendo a administração ao indivíduo de 3-ciclobutil-3-[4-(7Hpirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila, um seu isômero, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Em outra modalidade, é aqui fornecido um método de tratamento de artrite reumatoide (AR) em um indivíduo, que compreende a administração ao indivíduo de 3-ciclobutil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol1-il]propanonitrila, um seu isômero, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Em outra modalidade, é aqui fornecido um método de tratamento de policitemia vera (PV) em um indivíduo, compreendendo a administração ao indivíduo de 3-ciclobutil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il] propanonitrila, um seu isômero, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Em outra modalidade, é aqui fornecido um método de tratamento de trombocitemia essencial (ET) em um indivíduo, que compreende a administração ao indivíduo de 3ciclobutil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1il]propanonitrila, um seu isômero, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Em outra modalidade, é aqui fornecido um método de tratamento de um tumor sólido em um indivíduo, que compreende a administração ao indivíduo de 3-ciclobutil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il] propanonitrila, um seu isômero, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Em outra modalidade, é aqui fornecido um método de tratamento de psoríase em um indivíduo, compreendendo a administração ao indivíduo de 3-ciclobutil-3-[4-(7Hpirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila, um seu isômero, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[00063] Em uma modalidade, é aqui fornecido um método de tratamento de câncer em um indivíduo, compreendendo a administração ao indivíduo de 3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1Hpirazol-1-il)-3-(3-metilciclobutila)propanonitrila, um seu isômero, ou um

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20/50 sal farmaceuticamente aceitável deste. Em outra modalidade, é aqui fornecido um método de tratamento de mielofibrose em um indivíduo, que compreende a administração ao indivíduo de 3-(4-(7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3-(3-metilciclobutila)propanonitrila, um seu isômero, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Em outra modalidade, é aqui fornecido um método de tratamento de artrite reumatoide (RA) em um indivíduo, compreendendo a administração ao indivíduo de 3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3-(3metilciclobutila)propanonitrila, um seu isômero, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Em outra modalidade, é aqui fornecido um método de tratamento de policitemia vera (PV) em um indivíduo, que compreende a administração ao indivíduo de 3-(4-(7Hpirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3-(3-metilciclobutila) propanonitrila, um seu isômero, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Em outra modalidade, é aqui fornecido um método de tratamento de trombocitemia essencial (ET) em um indivíduo, que compreende administração ao indivíduo de 3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1Hpirazol-1-il)-3-(3-metilciclobutila)propanonitrila, um seu isômero, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Em outra modalidade, é aqui fornecido um método de tratamento de um tumor sólido em um indivíduo, compreendendo a administração ao indivíduo de 3-(4-(7Hpirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3-(3-metilciclobutila) propanonitrila, um seu isômero, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Em outra modalidade, é aqui fornecido um método de tratamento de psoríase em um indivíduo, que compreende a administração ao indivíduo de 3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3-(3metilciclobutila)propanonitrila, um seu isômero, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[00064] Como aqui utilizado, o termo contato refere-se à junção de componentes indicados em um sistema in vitro ou um sistema in vivo.

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Por exemplo, contato de uma JAK com um composto da invenção inclui a administração de um composto da presente invenção a um indivíduo ou paciente, tal como um ser humano, tendo uma JAK, assim como, por exemplo, a introdução de um composto da invenção em uma amostra contendo uma preparação celular ou purificada que contém a JAK.

[00065] Como aqui usado, o termo indivíduo ou paciente usado de modo trocável, refere-se a qualquer animal, incluindo os mamíferos, de preferência camundongos, ratos, outros roedores, coelhos, cães, gatos, suínos, bovinos, ovinos, cavalos, ou primatas, e o mais preferível seres humanos.

[00066] Como aqui utilizado, a frase quantidade terapeuticamente eficaz refere-se à quantidade de composto ativo ou agente farmacêutico que extrai a resposta biológica ou medicinal que está sendo procurada em um tecido, sistema, animal, indivíduo ou ser humano por um pesquisador, veterinário, médico ou outro clínico.

[00067] Como aqui utilizado, o termo tratar ou tratamento referese a um ou mais dentre (1) prevenção da doença; por exemplo, prevenção de uma doença, condição ou distúrbio em um indivíduo que pode estar predisposto à doença, condição ou distúrbio, mas que ainda não experimenta ou apresenta a patologia ou sintomatologia da doença; (2) inibição da doença; por exemplo, inibição de uma doença, condição ou distúrbio em um indivíduo que experimenta ou apresenta a patologia ou sintomatologia da doença, condição ou distúrbio; e (3) melhora da doença; por exemplo, melhora de uma doença, condição ou distúrbio em um indivíduo que experimenta ou apresenta a patologia ou sintomatologia da doença, condição ou distúrbio (isto é, a inversão da patologia e/ou sintomatologia) tal como a diminuição da gravidade da doença.

[00068] O termo uso inclui qualquer uma ou mais das seguintes

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22/50 modalidades da invenção, respectivamente: o uso no tratamento de um distúrbio; o uso para a fabricação de composições farmacêuticas para uso no tratamento de um distúrbio, por exemplo, na fabricação de um medicamento; métodos de uso dos compostos da invenção no tratamento destas doenças; preparações farmacêuticas tendo os compostos da invenção para o tratamento destas doenças; e compostos da invenção para uso no tratamento dessas doenças; quando apropriado e conveniente, se não mencionado de outra maneira. Em particular, as doenças a serem tratadas que são, portanto, preferidas para uso de um composto da presente invenção são selecionadas de doenças associadas com a atividade da JAK quinase.

Terapias de Combinação [00069] Um ou mais agentes farmacêuticos adicionais tais como, por exemplo, quimioterapêuticos, agentes anti-inflamatórios, esteroides, imunossupressores, assim como Bcr-Abl, Flt-3, RAF e inibidores da FAK quinase tais como, por exemplo, aqueles descritos na WO 2006/056399, ou outros agentes terapêuticos podem ser usados em combinação com os compostos ou sais da presente invenção para o tratamento de doenças, distúrbios ou condições associados com a JAK. O um ou mais agentes farmacêuticas adicionais podem ser administrados a um paciente simultânea ou sequencialmente.

[00070] O quimioterapêutico exemplar inclui os inibidores de proteossoma (por exemplo, bortezomib), talidomida, revlimid, e agentes prejudiciais ao DNA tais como melfalan, doxorrubicina, ciclofosfamida, vincristina, etoposídeo, carmustina, e outros mais.

[00071] Os esteroides exemplares incluem coriticosteroides tais como dexametasona ou prednisona.

[00072] Os inibidores de Bcr-Abl exemplares incluem os compostos, e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, dos gêneros e espécies divulgados na Patente US n^o 5.521.184, WO 04/005281 e WO

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2005/123719.

[00073] Os inibidores de Flt-3 adequados exemplares incluem compostos, e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, conforme divulgados na WO 03/037347, WO 03/099771 e WO 04/046120.

[00074] Os inibidores de RAF adequados exemplares incluem compostos, e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, conforme divulgados na WO 00/09495 e WO 05/028444.

[00075] Os inibidores de FAK adequados exemplares incluem compostos, e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, conforme divulgados na WO 04/080980, WO 04/056786, WO 03/024967, WO 01/064655, WO 00/053595, e WO 01/014402.

[00076] Em algumas modalidades, um ou mais dos compostos da invenção podem ser utilizados em combinação com um ou mais de outros inibidores da quinase incluindo imatinib, particularmente para o tratamento de pacientes resistentes ao imatinib ou outros inibidores da quinase.

[00077] Em algumas modalidades, um ou mais inibidores da JAK da invenção podem ser utilizados em combinação com um quimioterapêutico no tratamento de câncer e podem potencialmente melhorar a resposta ao tratamento em comparação com a resposta ao agente quimioterapêutico isoladamente, sem exacerbação dos seus efeitos tóxicos. Exemplos de agentes farmacêuticos adicionais utilizados no tratamento do mieloma múltiplo, por exemplo, podem incluir, sem limitação, melfalano, melfalano acrescido de prednisona [MP], doxorrubicina, dexametasona, e Velcade (bortezomib). Outros agentes adicionais utilizados no tratamento do mieloma múltiplo incluem Bcr-Abl, Flt-3, RAF e os inibidores da FAK quinase. Efeitos aditivos ou sinérgicos são resultados desejáveis da combinação de um inibidor de JAK da presente invenção com um agente adicional. Além disso, a resistência de células de mieloma múltiplo aos agentes tais como a

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24/50 dexametasona, pode ser reversível após o tratamento com um inibidor de JAK da presente invenção. Os agentes podem ser combinados com os presentes compostos em uma forma de dosagem única ou contínua, ou os agentes podem ser administrados simultânea ou sequencialmente como formas de dosagem separadas.

[00078] Em algumas modalidades, um corticosteroide tal como dexametasona é administrado a um paciente em combinação com pelo menos um inibidor de JAK onde a dexametasona é administrada intermitentemente em oposição a continuamente.

[00079] Em algumas modalidades adicionais, as combinações de um ou mais inibidores de JAK da invenção com outros agentes terapêuticos podem ser administradas a um paciente antes, durante e/ou após um transplante de medula óssea ou transplante de célula tronco.

[00080] Em algumas modalidades, pelo menos um agente terapêutico adicional pode ser usado em conexão com o tratamento de distúrbios de olho seco e outros distúrbios do olho. Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é acetonida de fluocinolona (Retisert®), ou rimexolona (AL-2178, Vexol, Alcon). Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é ciclosporina (Restasis®). Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é um corticosteroide. Em algumas modalidades, o corticosteroide é triaminolona, dexametasona, fluocinolona, cortisona, prednisolona ou flumetolona.

[00081] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é selecionado de Dehydrex™ (Holies Labs), Civamide (Opko), hialuonato de sódio (Vismed, Lantibio/TRB Chemedia), ciclosporina (ST-603, Sirion Therapeutics), ARG101(T) (testosterone, Argentis), AGR1012(P) (Argentis), ecabet sódio (Senju-Ista), gefarnate (Santen), 15-ácido (s)hidroxieicosatetraenóico (15(S)-HETE), cevilemina, doxiclina (ALTY

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0501, Alacrity), minociclina, iDestrin™ (NP50301, Nascent Pharmaceuticals), ciclosporina A (Nova22007, Novagali), oxitetraciclina (Duramycin, MOLI1901, Lantibio), CF101 (2S,3S,4R,5R)-3,4-diidróxi-5[6-[(3-iodofenil)metilamino]purin-9-il]-N-metil-oxolano-2-carbamila, CanFite Biopharma), voclosporina (LX212 ou LX214, Lux Biosciences), ARG103 (Agentis), RX-10045 (análogo sintético de resolvina, Resolvyx), DYN15 (Dyanmis Therapeutics), rivoglitazona (DE011, Daiichi Sanko), TB4 (RegeneRx), OPH-01 (Ophtalmis Monaco), PCS101 (Pericor Science), REV1-31 (Evolutec), Lacritin (Senju), rebamipide (Otsuka-Novartis), OT-551 (Othera), PAI-2 (University of Pennsylvania and Temple University), pilocarpina, tacrolimus, pimecrolimus (AMS981, Novartis), loteprednol etabonato, rituximab, diquafosol tetrassódio (INS365, Inspire), KLS-0611 (Kissei Pharmaceuticals), deidroepiandrosterona, anaquinra, efalizumab, micofenolato sódio, etanercept (Embrel®), hidroxicloroquina, NGX267 (TorreyPines Therapeutics), ou talidomida.

[00082] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é um agente antiangiogênico, agonista colinérgico, modulador do receptor TRP-1, um bloqueador do canal de cálcio, um secretagogo de mucina, estimulante MUC1, um inibidor da calcineurina, um corticosteroide, um agonista do receptor de P2Y2, um agonista do receptor muscarínico, outro inibidor da JAK, inibidor da Bcr-Abl quinase, inibidor da Flt-3 quinase, inibidor da RAF quinase, e inibidor da FAK quinase tais como, por exemplo, aqueles descritos na WO 2006/056399. Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é um derivado de tetraciclina (por exemplo, minociclina ou doxiclina).

[00083] Em algumas modalidades, os agentes terapêuticos adicionais são colírios demulcentes (também conhecidos como lágrimas artificiais), que incluem, mas não são limitados a estas, as composições contendo álcool polivinílico, hidroxipropil metilcelulose,

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26/50 glicerina, polietileno glicol (por exemplo, PEG400) e ou carboximetil celulose. As lágrimas artificiais podem ajudar no tratamento do olho seco mediante a compensação da capacidade reduzida de umedecimento e lubrificação da película lacrimal. Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é um medicamento mucolítico, tal como N-acetil-cisteína, que pode interagir com as mucoproteínas e, portanto, diminuir a viscosidade da película lacrimal. [00084] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional inclui um antibiótico, antiviral, antifúngico, anestésico, agentes antiinflamatórios incluindo anti-inflamatórios esteroides e não esteroides, e agentes antialérgicos. Exemplos de medicamentos adequados incluem aminoglicosídeos tais como amicacina, gentamicina, tobramicina, estreptomicina, netilmicina, e canamicina; fluoroquinolonas tais como ciprofloxacina, norfloxacina, ofloxacina, trovafloxacina, lomefloxacina, levofloxacina, e enoxacina; naftiridina; sulfonamidas; polimixina; cloranfenicol; neomicina; paramomomicina; colistimetato; bacitracina; vancomicina; tetraciclinas; rifampicina e seus derivados (rifampinas); ciclosserina; beta-lactâmicos; cefalosporinas; anfotericinas; fluconazol; flucitosina; natamicina; miconazol; cetoconazol; corticosteroides; diclofenaco; flurbiprofeno; cetorolaco; suprofeno; comolina; lodoxamida; levocabastina; naphazoling; antazolina; feniramimane; ou antibiótico azalida.

Formulações Farmacêuticas e Formas de Dosagem [00085] Quando empregados como produtos farmacêuticos, os compostos e sais da invenção podem ser administrados na forma de composições farmacêuticas. Estas composições podem ser preparadas de uma maneira bem conhecida na técnica farmacêutica, e podem ser administradas por uma variedade de vias, dependendo se o tratamento local ou sistêmico é desejável e após a área ser tratada. A administração pode ser tópica (incluindo transdérmica, oftálmica, epidérmica e nas

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27/50 membranas mucosas incluindo a liberação intranasal, vaginal e retal), pulmonar (por exemplo, por inalação ou insuflação de pós ou aerossóis, incluindo por nebulizador; intratraqueal ou intranasal), oral ou parenteral. A administração parenteral inclui a injeção ou infusão intravenosa, intra-arterial, subcutânea, intraperitoneal, intramuscular; administração intracraniana, por exemplo, intratecal ou intraventricular. A administração parenteral pode ser na forma de uma dose em bolo única, ou pode ser, por exemplo, por uma bomba de perfusão contínua. As composições e formulações farmacêuticas para administração tópica podem incluir emplastros transdérmicos, pomadas, loções, cremes, géis, gotas, supositórios, pulverizações, líquidos e pós. Os veículos farmacêuticos convencionais, bases aquosas, em pó ou oleosas, espessantes e outros mais podem ser necessários ou desejáveis. Preservativos, luvas e semelhantes revestidos também podem ser úteis. [00086] Esta invenção também inclui as composições farmacêuticas que contêm, como o ingrediente ativo, um ou mais dos compostos da invenção acima em combinação com um ou mais veículos farmacêuticos aceitáveis (excipientes). Na fabricação das composições da invenção, o ingrediente ativo é tipicamente misturado com um excipiente, diluído por um excipiente ou incluído dentro de um tal veículo na forma de, por exemplo, uma cápsula, sache, papel ou outro recipiente. Quando o excipiente serve como um diluente, ele pode ser um material sólido, semissólido ou líquido, que atua como um veículo, veículo ou meio para o ingrediente ativo. Assim, as composições podem estar na forma de comprimidos, pílulas, pós, pastilhas, sache, selos, elixires, suspensões, emulsões, soluções, xaropes, aerossóis (como um sólido ou em um meio líquido), pomadas contendo, por exemplo, até 10% em peso do composto ativo, cápsulas de gelatina macias e sólidas, supositórios, soluções injetáveis estéreis, e pó acondicionado de forma estéril.

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28/50 [00087] Na preparação de uma formulação, o composto ativo pode ser triturado para fornecer o tamanho de partícula apropriado antes de combinar com os outros ingredientes. Se o composto ativo for substancialmente insolúvel, ele pode ser triturado para um tamanho de partícula menor do que a malha 200. Se o composto ativo for substancialmente solúvel em água, o tamanho de partícula pode ser ajustado mediante a trituração para fornecer uma distribuição substancialmente uniforme na formulação, por exemplo, ao redor de 40 de malha.

[00088] Os compostos da invenção podem ser triturados usando procedimentos de trituração conhecidos tais como a trituração úmida para se obter um tamanho de partícula apropriado para a formação de comprimido e para outros tipos de formulação. As preparações finamente divididas (nanopartículas) dos compostos da invenção podem ser preparadas por processos conhecidos na técnica, por exemplo, ver o Pedido de Patente Internacional No. WO 2002/000196.

[00089] Alguns exemplos de excipientes adequados incluem lactose, dextrose, sacarose, sorbitol, manitol, amidos, goma acácia, fosfato de cálcio, alginatos, tragacanto, gelatina, silicato de cálcio, celulose microcristalina, polivinilpirrolidona, celulose, água, xarope, e metil celulose. As formulações podem adicionalmente incluir: agentes lubrificantes tais como talco, estearato de magnésio, e óleo mineral; agentes umectantes; emulsificantes e agentes de suspensão; agentes conservantes tais como metil- e propil-hidróxi benzoatos; agentes adoçantes; e agentes flavorizantes. As composições da invenção podem ser formuladas de modo a fornecer uma liberação rápida, sustentada ou retardada do ingrediente ativo após a administração ao paciente através do emprego de procedimentos conhecidos na técnica. [00090] As composições podem ser formuladas em uma forma de dosagem unitária, cada dosagem contendo de cerca de 5 a cerca de

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1000 mg (1 g), mais usualmente de cerca de 100 a cerca de 500 mg, do ingrediente activo. O termo formas de dosagem unitárias refere-se às unidades fisicamente discretas adequadas como dosagens unitárias para indivíduos humanos e outros mamíferos, cada unidade contendo uma quantidade predeterminada de material ativo calculada para produzir o efeito terapêutico desejado, em associação com um excipiente farmacêutico adequado.

[00091] O composto ativo pode ser eficaz sobre uma ampla faixa de dosagem e é geralmente administrado em uma quantidade farmaceuticamente eficaz. Ficará entendido, no entanto, que a quantidade do composto realmente administrada geralmente será determinada por um médico, de acordo com as circunstâncias relevantes, incluindo a condição a ser tratada, a via escolhida de administração, o composto real administrado, a idade, peso e resposta do paciente individual, a gravidade dos sintomas do paciente, e outros mais.

[00092] Para a preparação das composições sólidas tais como comprimidos, o ingrediente ativo principal é misturado com um excipiente farmacêutico para formar uma composição de préformulação sólida contendo uma mistura homogênea de um composto da presente invenção. Quando se refere a estas composições de préformulação como homogêneas, o ingrediente ativo é tipicamente disperso de forma uniforme por toda a composição de modo que a composição possa ser facilmente subdividida em formas de dosagem unitárias igualmente eficazes tais como comprimidos, pílulas e cápsulas. Esta pré-formulação sólida é então subdividida em formas de dosagem unitárias do tipo descrito acima contendo, por exemplo, de cerca de 0,1 a cerca de 1000 mg do ingrediente ativo da presente invenção.

[00093] Os comprimidos ou as pílulas da presente invenção podem

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30/50 ser revestidos ou de outra maneira combinados para fornecer uma forma de dosagem que proporciona a vantagem de ação prolongada. Por exemplo, o comprimido ou pílula pode compreender um componente de dosagem interna e um componente de dosagem externa, sendo este último na forma de um envelope sobre o primeiro. Os dois componentes podem ser separados por uma camada entérica que serve para resistir à desintegração no estômago e permitir que o componente interno passe intacto para o duodeno ou para ser retardado na libertação. Uma variedade de materiais pode ser usada para tais camadas entéricas ou revestimentos, tais materiais incluindo vários ácidos poliméricos e misturas de ácidos poliméricos com tais materiais como goma-laca, álcool cetílico e acetato de celulose.

[00094] As formas líquidas em que os compostos e composições da presente invenção podem ser incorporados para administração por via oral ou por injeção incluem soluções aquosas, xaropes adequadamente aromatizados, suspensões aquosas ou oleosas e emulsões aromatizadas com óleos comestíveis tais como óleo de semente de algodão, óleo de sésamo, óleo de coco ou óleo de amendoim, assim como elixires e veículos farmacêuticos semelhantes.

[00095] As composições para inalação ou insuflação incluem soluções e suspensões em solventes aquosos ou orgânicos farmaceuticamente aceitável, ou suas misturas, e pós. As composições líquidas ou sólidas podem conter excipientes adequados farmaceuticamente aceitáveis como descrito supra. Em algumas modalidades, as composições são administradas pela via respiratória oral ou nasal para efeito local ou sistêmico. As composições podem ser nebulizadas mediante a utilização de gases inertes. As soluções nebulizadas podem ser respiradas diretamente a partir do dispositivo de nebulização ou o dispositivo de nebulização pode ser ligado a uma tenda de capa facial, ou máquina de respiração de pressão positiva

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31/50 intermitente. As composições de solução, suspensão ou em pó podem ser administradas por via oral ou por via nasal a partir de dispositivos que liberam a formulação de uma maneira apropriada.

[00096] A quantidade do composto ou da composição administrada a um paciente irá variar dependendo do que está sendo administrado, o propósito da administração, tal como a profilaxia ou terapia, o estado do paciente, a maneira de administração, e outros mais. Em aplicações terapêuticas, as composições podem ser administradas a um paciente que já sofre de uma doença em uma quantidade suficiente para curar ou pelo menos parcialmente interromper os sintomas da doença e as suas complicações. As doses eficazes dependerão da condição doentia sendo tratada, assim como pelo julgamento do médico assistente dependendo de fatores tais como a gravidade da doença, a idade, peso e condição geral do paciente, e outros mais.

[00097] As composições administradas a um paciente pode estar na forma de composições farmacêuticas descritas acima. Estas composições podem ser esterilizadas por técnicas de esterilização convencionais, ou pode ser esterilizada por filtração. As soluções aquosas podem ser acondicionadas para uso como estão, ou liofilizadas, a preparação liofilizada sendo combinada com um veículo aquoso estéril antes da administração. O pH das preparações de composto tipicamente estará entre 3 e 11, mais preferivelmente de 5 a 9 e o mais preferível de 7 a 8. Ficará entendido que a utilização de alguns dos excipientes, veículos, ou estabilizantes anteriores resultará na formação de sais farmacêuticos.

[00098] A dosagem terapêutica dos compostos da presente invenção pode variar de acordo com, por exemplo, a utilização particular para a qual o tratamento é feito, o modo de administração do composto, a saúde e a condição do paciente, e o julgamento do médico receitador. A proporção ou concentração de um composto da invenção em uma

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32/50 composição farmacêutica pode variar dependendo de vários fatores incluindo a dosagem, características químicas (por exemplo, hidrofobicidade), e a via de administração. Por exemplo, os compostos da invenção podem ser fornecidos em uma solução aquosa de tampão fisiológico contendo cerca de 0,1 a cerca de 10% p/v do composto para a administração parenteral. Algumas faixas de dose típicas são de cerca de 1 pg/kg a cerca de 1 g/kg de peso corporal por dia. Em algumas modalidades, a faixa de dose é de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 100 mg/kg de peso corporal por dia. A dosagem provavelmente depende de tais variáveis como o tipo e extensão da progressão da doença ou distúrbio, o estado geral de saúde do paciente particular, a eficácia biológica relativa do composto selecionado, formulação do excipiente, e a sua via de administração. As doses eficazes podem ser extrapoladas a partir das curvas de dose-resposta derivadas de sistemas de teste in vitro ou em modelo animal.

[00099] Em algumas modalidades, o composto da invenção, ou seu sal farmaceuticamente aceitável, é administrado como uma composição oftálmica. Consequentemente, em algumas modalidades, os métodos compreendem a administração do composto, ou seu sal farmaceuticamente aceitável, e um veículo oftalmicamente aceitável. Em algumas modalidades, a composição oftálmica é uma composição líquida, composição semissólida, inserção, película, micropartículas ou nanopartículas. As composições oftálmicas são descritas com detalhes na U.S. Ser. N° 12/571.834, depositada em 01 de outubro de 2009, que é aqui incorporada por referência.

[000100] É ainda observado que certos aspectos da invenção, que são, por razões de clareza, descritos no contexto das modalidades específicas, também podem ser fornecidos em combinação com uma modalidade única. Inversamente, vários aspectos da invenção que são, por questões de brevidade, descritos no contexto de uma modalidade

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33/50 única, também podem ser fornecidos separadamente ou em qualquer subcombinação adequada.

[000101] Várias modificações da invenção, além daquelas aqui descritas, serão evidentes para aqueles versados na técnica a partir da descrição. Cada referência citada no presente pedido é aqui incorporada por referência na sua totalidade.

[000102] A invenção será descrita com mais detalhes por meio de exemplos específicos. Os seguintes exemplos são oferecidos para fins ilustrativos, e não são destinados para limitar a invenção de qualquer maneira. Aqueles de habilidade na técnica facilmente reconhecerão uma variedade de parâmetros não críticos que podem ser alterados ou modificados para produzir essencialmente os mesmos resultados.

EXEMPLOS

Exemplo 1 (R ou S)-3-Ciclobutil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1il]propanonitrila

Etapa 1. Ciclobutanocarboxaldeído [000103] Uma solução de sulfóxido de dimetila (34,6 ml, 0,488 mol) em cloreto de metileno (100 ml) foi adicionada a cloreto de oxalila (20,6 ml, 0,244 mol) em cloreto de metileno (700 ml, 10 mol) a -78 °C. Após 10 min, ciclobutilmetanol (Aldrich, 17,5 g, 0,203 mol) em cloreto de metileno (100 ml) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada a -78 °C durante 30 min. Uma solução de trietilamina (140 ml, 1,0 mol) em cloreto de metileno (100 ml) foi depois adicionada e a mistura foi agitada

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34/50 durante 5 h com a temperatura deixada gradualmente aquecer para a temperatura ambiente (ta). Após a extinção com água, a mistura foi separada. A camada orgânica foi lavada com água (x2), salmoura, secada por sulfato de sódio, e filtrada. O filtrado foi destilado, a coleta da fração em 86 a 92°C para fornecer o aldeído (18,6 g, 54,4%).

Etapa 2. 3-Ciclobutilacrilonitrila [000104] A uma solução de 1,00 M de terc-butóxido de potássio em tetra-hidrofurano (116 ml, 0,116 mol) a 0°C foi adicionada por gotejamento uma solução de cianometilfosfonato de dietila (Aldrich, 19,7 ml, 0,122 mol) em tetra-hidrofurano (200 ml). A reação foi aquecida para a ta e depois esfriada em 0°C outra vez. À mistura de reação foi uma solução de ciclobutanocarboxaldeído (ver a Etapa 1, 18,6 g, 0,110 mol) em tetra-hidrofurano (100 ml). A reação foi deixada aquecer para a temperatura ambiente (ta) e agitada em ta durante a noite. Após extinção com água, a mistura foi extraída com éter. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, salmoura, secadas e evaporadas para secura. A mistura bruta foi purificada em sílica gel, eluição com 0 a 40% EtOAc em hexano, para fornecer o produto desejado (5,30 g, 44,7%). LCMS calculado para C?HwN(M + H)+: m/z = 108,1; Observado:108,1.

Etapa 3. (R)-3-Ciclobutil-3-[4-(7-{[2-(trimetilsilil)etóxi]metil}-7Hpirrolo[2,3-d] pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila e (S)-3Ciclobutil-3-[4-(7-{[2-(trimetilsilil)etóxi]-metil}-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-

4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila [000105] A uma solução de 4-(1H-pirazol-4-il)-7-{[2-(trimetilsilil)etóxi] metil}-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (ver a U.S. Pub. No. US

2007/0135461, 15,6 g, 0,050 mol) em acetonitrila (124 ml, 2,37 mol) foi adicionada 3-ciclobutilacrilonitrila (5,30 g, 0,050 mol), seguido por 1,8diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (3,70 ml, 0,025 mol). A mistura resultante foi agitada em ta durante a noite, depois evaporada para

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35/50 secura. A mistura foi purificada em sílica gel, eluição com 0 a 60% EtOAc em hexano, para fornecer o produto desejado como uma mistura racêmica (16 g, 76%). LCMS calculado para C22H31N6OSKM + H)+: m/z = 423,2; Observado: 423,0. A mistura racêmica foi separada com HPLC de quiral (Coluna: ChiralCel OJ-H, 30 x 250 mm, 5 pm; Fase Móvel: 30% Etanol/70% Hexanos; Taxa de Fluxo: 24 ml/min) para fornecer dois enantiômeros. Na HPLC analítica de quiral (Coluna: ChiralCel OJ-H, 4,6 x 250 mm, 5 pm; Fase Móvel: 30% etanol/70% hexanos; Taxa de Fluxo: 0,8 ml/min): Primeiro tempo de retenção máximo: 6,6 min; Segundo tempo de retenção máximo: 8,1 min.

Etapa 4. (R ou S)-3-Ciclobutil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1Hpirazol-1-il]propanonitrila [000106] Em um frasco de fundo redondo de 500 ml ajustado com uma barra de agitação, condensador, e entrada de nitrogênio foi carregado acetonitrila (55 ml), água (4,8 ml) e (R ou S)-3-ciclobutil-3-[4(7-{[2-(trimetilsilil) etóxi]metil}-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol1-il]propanonitrila (segundo pico de separação de quiral na Etapa 3, 2,8 g, 6,6 mmol). Tetrafluoroborato de lítio (7,50 g, 0,078 mol) foi adicionado. A mistura resultante foi aquecida em refluxo durante a noite, esfriada para a temperatura ambiente e carregada com 3,00 M de hidróxido de amônio em água (9,78 ml) em porções durante um período de 5 minutos ajustando o pH para 9 a 10. Após 30 min, a mistura resultante foi purificada por RP-HPLC (coluna XBridge C18 30 x 100 mm, com volume de injeção 5 ml (~50 mg/injeção)), eluição com um gradiente de acetonitrila/água contendo 0,15% NH4OH, em uma taxa de fluxo de 60 ml/min) para fornecer o produto desejado como um base livre (1,51 g, 77,96%). LCMS calculado para CwH1?N6(M + H)+: m/z = 293,2; Observado: 293,1. ¹H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8,65 (1H, s), 8,59 (1H, s), 8,34 (1H, s), 7,50 (1H, d, J = 3,6 Hz), 6,94 (1H, d, J = 3,6 Hz), 4,69 (1H, m), 3,07 ~ 2,97 (3H, m), 2,21 (1H, m), 1,97 ~ 1,84 (5H,

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m) ppm. ee 98,8%.

[000107] O outro enantiômero pode ser preparado da mesma maneira partindo com o composto correspondente ao primeiro pico obtido a partir da separação de quiral na Etapa 3.

Exemplo 2

Sal de ácido (3R ou 3S)-3-(4-(7H-Pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol1 -il)-3-((trans)-3-metilciclobutil)propanonitrila fosfórico

Etapa 1. ácido 3-metilenociclobutanocarboxílico [000108] Em um frasco de fundo redondo equipado com um condensador foi adicionada 3-metilenociclobutanocarbonitrila (BePharma, 10,0 g, 0,107 mol). Ao frasco foi adicionada uma solução de hidróxido de potássio (24,1 g, 0,365 mol) em etanol (112 ml) e água (88 ml) e a mistura foi aquecida em 100°C. Após cerca de 2 horas, a evolução de amônia cessou e o solvente foi evaporado para secura sob pressão reduzida. Os sólidos foram dissolvidos em água (75 ml), esfriados em um banho de gelo, e acidificados para o pH de cerca de 1 com ácido clorídrico concentrado. A camada superior resultante foi extraída com diclorometano duas vezes. As camadas orgânicas foram combinadas e secadas por sulfato de magnésio anídrico. A remoção dos solventes orgânicos forneceu o produto bruto desejado (11,8 g, 97,67%).

Etapa 2. N-metóxi-N-metil-3-metilenociclobutanocarboxamida [000109] A uma mistura de ácido 3-metilenociclobutanocarboxílico (Etapa 1, 5,88 g, 52,4 mmol) em cloreto de metileno (100 ml) foi

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37/50 adicionado cloreto de oxalila (Aldrich, 5,33 ml, 62,9 mmol), seguido por uma quantidade catalítica de dimetil formamida (DMF). A reação foi agitada em ta durante 2 h, depois evaporada para secura. O cloreto ácido bruto foi dissolvido em cloreto de metileno (200 ml). À solução resultante foi adicionado cloridrato de N,O-dimetilidroxilamina ((Aldrich, 6,14 g, 62,9 mmol), seguido por trietilamina (TEA) (21,9 ml, 0,157 mol), por gotejamento, a 0°C. A reação foi agitada em ta durante a noite, e o sal de TEA HCl foi filtrado. O filtrado foi lavado com 1 N HCl, depois bicarbonato de sódio aq., salmoura, e secado por sulfato de magnésio e evaporado para secura. A amida bruta (7,30 g, 89,7%) foi usada diretamente na próxima etapa. LCMS calculado para CsHi4NO2(M + H)+: m/z = 156,1; Observado:156,3.

Etapa 3. 3-Metilenociclobutanocarbaldeído [000110] A uma suspensão de tetra-hidroaluminato de lítio (2,18 g,

57,5 mmols) em éter (200 ml) foi adicionada por gotejamento uma solução de N-metóxi-N-metil-3-metilenociclobutanocarboxamida (Etapa 2, 7,14 g, 46,0 mmol) em tetra-hidrofurano (75 ml) a -15°C. A reação foi agitada em 0 a -15°C durante 30 min, depois extinta com hidrogênio sulfato de potássio aq. A mistura resultante foi extraída com éter. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas por sulfato de magnésio, e evaporadas. O produto bruto (6,70 g, 151,5%) foi usado diretamente na próxima etapa.

Etapa 4. 3-(3-Metilenociclobutil)acrilonitrila [000111] A uma solução de 1,00 M de terc-butóxido de potássio em tetra-hidrofurano (48,3 ml, 48,3 mmol) a 0°C foi adicionada por gotejamento uma solução de cianometilfosfonato de dietila (Aldrich, 8,19 ml, 50,6 mmol) em tetra-hidrofurano (80 ml). A reação foi aquecida para a ta e depois esfriada em 0°C. À mistura de reação foi adicionada uma solução de 3-metilenociclobutanocarbaldeído (Etapa 4, 4,42 g, 46,0 mmol) em tetra-hidrofurano (40 ml). A reação foi deixada aquecer

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38/50 para a ta e depois foi agitada em ta durante a noite. Após a extinção com água, a mistura foi extraída com éter. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, salmoura, secadas e evaporadas para secura. A mistura bruta (5,90 g, 107,7%) foi usada diretamente na próxima etapa.

Etapa 5. 3-(3-Metilenociclobutil)-3-[4-(7-{[2-(trimetilsilil)etóxi]metil}-7Hpirrolo [2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila [000112] A uma solução de 4-(1H-pirazol-4-il)-7-{[2-(trimetilsilil)etóxi] metil}-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (ver a U.S. Pub. No. US

2007/0135461, 7,25 g, 23,0 mmols) em acetonitrila (57,4 ml) foi adicionada 3-(3-metilenociclobutil) acrilonitrila bruta (Etapa 4, 2,74 g, 23,0 mmols), seguido por 1,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (3,44 ml, 23,0 mmols). A mistura resultante foi agitada em ta durante o fim de semana, depois evaporada para secura. O resíduo foi purificado em sílica gel, eluição com 0 a 80% EtOAc em hexano, para fornecer o produto desejado (6,0 g, 60,1%). LCMS calculado para C23HsiN6OSí(M + H)+: m/z = 435,2; Observado: 435,4.

Etapa 6. (3R ou 3S)-3-((trans)-3-Metilciclobutil)-3-(4-(7-((2-(trimetilsilil) etóxi)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il) propanonitrila [000113] Uma mistura de 3-(3-metilenociclobutil)-3-[4-(7-{[2(trimetilsilil) etóxi]metil}-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il] propanonitrila (Etapa 5, 4,0 g, 9,2 mol) em 100 ml de metanol foi hidrogenada na presença de 0,6 g de 10% Pd/C, sob pressão de balão de hidrogênio, durante 1 h. Após a extração por filtragem do catalisador, o filtrado foi evaporado para secura e purificado em sílica gel, eluição com 0 a 100% EtOAc em hexano, para fornecer o produto desejado como uma mistura de trans- e cis-isômeros. LCMS calculado para C23H33N6OSKM + H)+: m/z = 437,3; Observado: 437,4. O produto foi submetido à purificação em coluna de HPLC em quiral duas vezes. A primeira separação por HPLC (Coluna: ChiralCel OD-H, 30 x 250 mm,

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39/50 pm; Fase Móvel: 15% etanol/85% hexanos; Taxa de Fluxo: 28 ml/min) forneceu duas frações, A e B. A fração A foi uma mistura cis/trans de um enantiômero. Tempo de Retenção: 10,51 min. A Fração B foi uma mistura cis/trans do outro enantiômero, que apresentou dois picos inseparáveis com tempos de retenção 13,05 min e 13,92 min. A primeira fração (A) foi submetida a outra separação de por HPLC em quiral (Coluna: ChiralPak IA, 20 x 250 mm, 5 pm; Fase Móvel: 10% etanol/90% hexanos; Taxa de Fluxo: 15 ml/min) para fornecer dois picos, A1 e A2, um pico correspondendo a cis e o outro a trans. De acordo com a HPLC analítica de quiral (Coluna: ChiralPak IA, 4,6 x 250 mm, 5 pm; Fase Móvel: 15% etanol/85% hexanos; Taxa de Fluxo: 1,0 ml/min): tempo de retenção do primeiro pico (A1): 11,79 min; tempo de retenção do segundo pico (A2): 12,78 min. A segunda fração (B) foi submetida à separação por HPLC em quiral (Coluna: ChiralPak IA, 20 x 250 mm, 5 pm; Fase Móvel: 15% etanol/85% hexanos; Taxa de Fluxo: 15 ml/min) para fornecer dois picos, B1 e B2 (cada pico 800 mg, 19,9%). B1 foi apresentado mais tarde por nOe para ser o cis-isômero e B2 foi apresentado para ser o trans-isômero do outro enantiômero. De acordo com HPLC analítica de quiral (Coluna: ChiralPak IA, 4,6 x 250 mm, 5 pm; Fase Móvel: 15% etanol/85% hexanos; Taxa de Fluxo: 1,0 ml/min): tempo de retenção do primeiro pico (B1): 12,48 min e tempo de retenção do segundo pico (B2): 14,16 min.

Etapa 7. (3R ou 3S)-3-(4-(7H-Pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)3-((trans)-3-metilciclobutil)propanonitrila [000114] Em um frasco de fundo redondo de 500 ml ajustado com barra de agitação, condensador e entrada de nitrogênio foi carregado acetonitrila (9,69 ml), água (0,84 ml) e 3-((trans)-3-metilciclobutil)-3-[4(7-{[2-(trimetilsilil) etóxi]metil}-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol1-il]propanonitrila (0,60 g, 1,4 mol) (B2 a partir da separação de quiral na etapa anterior (isto é, pico 2 da segunda fração)). Tetrafluoroborato

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40/50 de lítio (1,31 g, 13,7 mmols) foi adicionado. A mistura foi aquecida em refluxo durante a noite, depois carregada com 7,2 M de hidróxido de amônio em água (0,71 ml, 5,1 mmol) em porções durante um período de 5 minutos na temperatura ambiente ajustando o pH para 9 a 10. A reação foi agitada durante 2 h na temperatura ambiente. O sólido foi removido por filtração e o filtrado foi purificado em RP-HPLC ((coluna XBridge C18 30 x 100 mm, com volume de injeção 5 ml (~50 mg/injeção), eluição com um gradiente de acetonitrila/água contendo 0,15% NH4OH, em taxa de fluxo 60 ml/min) para produzir o produto desejado como base livre. LCMS calculado para Ci7HioN6(M + H)+: m/z = 307,2; Observado: 307,4. ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,08 (1H, s), 8,78 (1H, s), 8,68 (1H, s), 8,36 (1H, s), 7,59 (1H, d, J = 3,0 Hz), 6,99 (1H, d, J = 3,0 Hz), 4,78 (1H, m), 3,12 (2H, m), 2,88 (1H, m), 2,30 (1H, m), 2,06 (1H, m), 1,88 (1H, m), 1,74 (1H, m), 1,44 (1H, m), 1,08 (3H, d, J = 7,0 Hz) ppm. ee 93,3%.

[000115] O outro enantiômero pode ser preparado pelo mesmo método partindo com o composto correspondente à fração A da Etapa

6.

Etapa 8. sal de ácido (3R ou 3S)-3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)1H-pirazol-1-il)-3-((trans)-3-metilciclobutil)propanonitrila fosfórico [000116] A uma solução de (3R ou 3S)-3-((trans)-3-metilciclobutil)-3[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (Etapa 7, 0,275 g, 0,898 mmol) em álcool isopropílico (5,83 ml) foi adicionado ácido fosfórico (96,8 mg, 0,987 mmol) em 1,0 ml de isopropanol a 60°C. Após agitação durante 1 h, a mistura foi deixada esfriar para a ta. O precipitado foi extraído por filtração e secado com ar, depois enxaguado com éter etílico e secado com air mais adiante para fornecer o produto de fosfato desejado (330 mg, 90,9%).

Exemplo 3

Sal de ácido (3R ou 3S)-3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazolPetição 870190113460, de 06/11/2019, pág. 46/63

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-il)-3-((cis)-3-metilciclobutil)-propanonitrila fosfórico I

I

ΗΟ'Ϊ?ΟΗ N

Etapa 1. (3R ou 3S)-3-((cis)-3-Metilciclobutil)-3-(4-(7-((2(trimetilsilil)etóxi) metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1il)propanonitrila [000117] Em um frasco de fundo redondo de 500 ml ajustado com uma barra de agitação, condensador, e entrada de nitrogênio foi carregado acetonitrila (8,1 ml), água (0,70 ml) e (3R ou 3S)-3-((cis)-3metilciclobutil)-3-[4-(7-{[2-(trimetilsilil)etóxi]metil}-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il] propanonitrila (0,50 g, 1,1 mmol) (B1 a partir da separação de quiral descrita no Exemplo 2, Etapa 6 (isto é, pico 1 da segunda fração)). Tetrafluoroborato de lítio (1,10 g,11,4 mmol) foi adicionado. A solução foi aquecida em refluxo durante a noite. Depois uma solução de hidróxido de amônio em água (7,2 M, 0,59 ml, 4,3 mmol) foi carregada na solução em porções durante um período de 5 minutos em temperatura ambiente ajustando o pH para 9 a 10. A reação foi agitada durante 2 h em temperatura ambiente. O sólido foi removido por filtração e o filtrado foi purificada em RP-HPLC (coluna XBridge C18 30 x 100 mm, com volume de injeção 5 ml (~50 mg/injeção), eluição com um gradiente de acetonitrila/água contendo 0,15% NH4OH, em taxa de fluxo 60 ml/min) para fornecer o produto desejado. LCMS calculado para Ci7Hi9N6(M + H)+: m/z = 307,2; Observado: 307,4. ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,08 (1H, s), 8,75 (1H, s), 8,68 (1H, s), 8,36 (1H, s), 7,59 (1H, d, J = 3,0 Hz), 6,99 (1H, d, J = 3,0 Hz), 4,66 (1H, m), 3,11 (2H, m), 2,66 (1H, m), 2,20 (2H, m), 1,88 (1H, m), 1,42 (2H, m), 0,97 (3H, d, J =

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6,0 Hz) ppm. ee 99,8%.

[000118] O outro enantiômero pode ser preparado pelo mesmo método partindo com o composto correspondente para a fração A do Exemplo 2, Etapa 6.

Etapa 2. Sal de ácido (3R ou 3S)-3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)1H-pirazol-1-il)-3-((cis)-3-metilciclobutil)propanonitrila fosfórico [000119] À uma solução de (3R ou 3S)-3-((cis)-3-metilciclobutil)-3-[4(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila (Etapa 1, 0,23 g, 0,751 mmol) em álcool isopropílico (4,87 ml) foi adicionado ácido fosfórico (80,9 mg, 0,83 mmol) em 1,0 ml de isopropanol a 60°C. A mistura foi agitada durante 2 h, depois deixada esfriar para a ta. O precipitado foi extraído por filtração e secado com ar, depois enxaguado com éter etílico e secado com ar mais adiante para fornecer o produto de fosfato desejado (300 mg, 98,8%). ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,08 (1H, s), 8,75 (1H, s), 8,65 (1H, s), 8,34 (1H, s), 7,58 (1H, d, J = 2,4 Hz), 6,97 (1H, d, J = 2,4 Hz), 4,63 (1H, m), 3,09 (2H, m), 2,64 (1H, m), 2,18 (2H, m), 1,86 (1H, m), 1,40 (2H, m), 0,96 (3H, d, J = 6,4 Hz) ppm.

Exemplo A: Ensaio de JAK Quinase In vitro [000120] Os compostos aqui foram testados com relação à atividade inibidora de alvos de JAK de acordo com o seguinte ensaio in vitro descrito em Park et al., Analytical Biochemistry 1999, 269, 94-104. Os domínios catalíticos de JAK1 humana (a.a. 837-1142), JAK2 (a.a. 8281132) e JAK3 (a.a. 781-1124) com um rótulo His N-terminal foram expressos utilizando baculovírus em células de inseto e purificados. A atividade catalítica de JAK1, JAK2 ou JAK3 foi avaliada através da medição da fosforilação de um peptídeo biotinilado. O peptídeo fosforilado foi detectado pela fluorescência decidida de tempo homogêneo (HTRF). As IC50s dos compostos foram medidas para cada quinase nas reações que contêm a enzima, ATP e 500 nM peptídeo em

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43/50 mM tampão Tris (pH 7,8) com 100 mM NaCI, 5 mM DTT, e 0,1 mg/ml (0,01 %) de BSA. A concentração de ATP nas reações foi de 90 μΜ para JAK1,30 μΜ para JAK2 e 3 μΜ para JAK3. As reações foram realizadas na temperatura ambiente durante 1 h e depois interrompidas com 20 μΙ 45 mM EDTA, 300 nM SA-APC, 6 nM Eu-Py20 em tampão de ensaio (Perkin Elmer, Boston, MA). A ligação ao anticorpo rotulado com európio ocorrería durante 40 minutos e o sinal HTRF foi medido em uma leitora de placas Fusion (Perkin Elmer, Boston, MA). Os compostos dos Exemplos 1,2 e 3 foram observados de terem valores de ICso menores do que 2 nM para a JAK1 e menores do que 1 nM para a JAK2. Exemplo B: Ensaios Celulares [000121] Um ou mais compostos aqui foram testados com relação à atividade inibidora de alvos de JAK de acordo com pelo menos um dos seguintes ensaios celulares.

[000122] As linhagens celulares de câncer dependentes de citocinas e, portanto, da transdução de sinal de JAK/STAT, para o crescimento, foram plaqueadas em 6000 células por reservatório (formato de placa de 96 reservatórios) em RPMI 1640, FBS a 10%, e 1 ng/ml de citocina apropriada. Os compostos foram adicionados nas células em DMSO/meio (concentração final 0,2% DMSO) e incubados durante 72 horas a 37°C, CO2 a 5%. O efeito do composto sobre a viabilidade celular foi avaliado utilizando 0 CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay (Promega) seguido pela quantificação TopCount (Perkin Elmer, Boston, MA). Os efeitos potenciais fora do alvo dos compostos foram medidos em paralelo utilizando uma linhagem celular não orientada por JAK com a mesma leitura de ensaio. Todas as experiências foram executadas em duplicata.

[000123] As linhagens celulares acima também podem ser usadas para examinar os efeitos dos compostos sobre a fosforilação da JAK quinase ou substratos potenciais a jusante tais como proteínas STAT,

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Akt, Shp2, ou Erk. Estas experiências podem ser executadas seguinte a uma inanição de citocina durante a noite, seguido de uma préincubação breve com o composto (2 horas ou menos) e estimulação de citocina de aproximadamente 1 hora ou menos. As proteínas são então extraídas a partir de células e analisadas por técnicas familiares daqueles especializados na técnica incluindo Western blotting ou ELISA que utiliza anticorpos que podem diferenciar entre a proteína fosforilada e total. Estas experiências podem utilizar células normais ou cancerosas para investigar a atividade dos compostos sobre a biologia de sobrevivência da célula tumoral ou sobre mediadores da doença inflamatória. Por exemplo, em relação a este último, as citocinas tais como IL-6, IL-12, IL-23, ou IFN podem ser utilizadas para estimular a ativação de JAK resultando na fosforilação de proteínas STAT e potencialmente em perfis de transcrição (avaliado pela formação ou tecnologia de qPCR) ou produção e/ou secreção de proteínas, tais como IL-17. A capacidade dos compostos em inibir estes efeitos mediados pela citocina pode ser medida utilizando técnicas comuns para aqueles especializados na técnica.

[000124] Os compostos desta invenção também podem ser testados em modelos celulares designados para avaliar a sua potência e atividade contra as JAKs mutantes, por exemplo, a mutação JAK2V617F observada em distúrbios proliferativos mieloides. Estas experiências frequentemente utilizam células dependentes de citocina da linhagem de hematológica (por exemplo, BaF/3) em que as quinases tipo silvestres ou JAK mutante são expressas ectopicamente (James, C., et al. Nature 434:1144-1148; Staerk, J., et al. JBC 280:4189341899). Os parâmetros incluem os efeitos dos compostos sobre a sobrevivência celular, proliferação e JAK fosforilada, proteínas STAT, Akt ou Erk.

[000125] Certos compostos aqui foram ou podem ser avaliados

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45/50 quanto à sua atividade de inibição da proliferação de células T. Tal como o ensaio pode ser considerado um segundo ensaio de proliferação conduzido pela citocina (isto é, a JAK) e também um ensaio simplista de supressão imunológica ou inibição da ativação imune. O que se segue é um breve resumo de como tais experiências podem ser executadas. As células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) são preparadas a partir de amostras de sangue integral humano usando o método de separação Ficoll Hypaque e as células T (fração 2000) podem ser obtidas a partir de PBMCs por elutriação. As células T humanas recentemente isoladas podem ser mantidas em meio de cultura (RPMI 1640 suplementado com 10% de soro fetal bovino, 100 U/ml de penicilina, 100 pg/ml de estreptomicina) em uma densidade de 2 x 10⁶ células/ml a 37°C durante até 2 dias. Para a análise de proliferação celular estimulada pela IL-2, as células T são em primeiro lugar tratadas com Phytohemagglutinin (PHA) em uma concentração final de 10 pg/ml durante 72 h. Depois de lavar uma vez com PBS, 6000 células/reservatório são plaqueadas em placas de 96 reservatórios e tratadas com compostos em diferentes concentrações no meio de cultura na presença de 100 U/ml de IL-2 humana (ProSpec-Tany TechnoGene; Rehovot, Israel). As placas são incubadas a 37°C durante 72 h e o índice de proliferação é avaliado utilizando reagentes CelITiterGlo Luminescent seguindo o protocolo sugerido pela fabrica (Promega, Madison, Wl).

Exemplo C: Eficácia antitumoral in vivo [000126] Os compostos desta invenção podem ser avaliados em modelos humanos de xenoenxerto de tumor em camundongos imunecomprometidos. Por exemplo, uma variante tumorigênica da linhagem celular de plasmacitoma INA-6 pode ser usada para inocular camundongos SCID por via subcutânea (Burger, R., et al. Hematol J. 2:42-53, 2001). Os animais veículos de tumor podem então ser

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46/50 escolhidos ao acaso em grupos de tratamento de medicamento ou veículo e diferentes doses de compostos podem ser administradas por qualquer número das vias habituais incluindo oral, i.p., ou infusão contínua usando bombas implantáveis. O crescimento do tumor é seguido ao longo do tempo utilizando compassos de calibre. Além disso, as amostras de tumor podem ser colhidas em qualquer momento após o início do tratamento para análise como descrito acima (Exemplo B) para avaliar os efeitos de composto sobre a atividade de JAK e vias de sinalização a jusante. Além disso, a seletividade dos compostos pode ser avaliada utilizando modelos de tumor de xenoenxerto que são conduzidos por outras quinases conhecidas (por exemplo, Bcr-Abl) tais como o modelo de tumor K562.

Exemplo D: Teste de Resposta da Hipersensibilidade Retardada do Contato com a Pele de Murino [000127] Os compostos desta invenção também podem ser testados com relação às suas eficácias (da inibição de alvos de JAK) no modelo de teste de hipersensibilidade retardada de murino conduzido pela célula T. A resposta de hipersensibilidade tipo retardada de contato da pele de murino (DTH) é considerada de ser um modelo válido de dermatite de contato clínica, e outros distúrbios imunes mediados por linfócitos T da pele, tais como psoríase (Immunol Today. 1998 Jan;19(1):37-44). Múltiplas características de frações de DTH de murino com psoríase, incluindo o sistema imune infiltrado, o aumento acompanhado nas citocinas inflamatórias, e hiperproliferação queratinócita. Além disso, muitas classes de agentes que são eficazes no tratamento da psoríase na clínica também são inibidoras eficazes da resposta de DTH em camundongos (Agents Actions. 1993 Jan;38(12):116-21).

[000128] No Dia 0 e 1, os camundongos Balb/c são sensibilizadas com uma aplicação tópica, no seu abdômen raspado com o antígeno

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2,4,dinitro-fluorobenzeno (DNFB). No dia 5, as orelhas são medidas com relação a espessura utilizando micrômetro de engenharia. Esta medição é registrada e usada como uma linha de base. Ambas as orelhas dos animais são então provocadas por uma aplicação tópica de DNFB em um total de 20 μΙ_ (10 μΙ_ sobre a auricula interna e 10 μΙ_ sobre a auricula externa) em uma concentração de 0,2%. De vinte e quatro a setenta e duas horas após a provocação, as orelhas são medidas novamente. O tratamento com os compostos de teste foi fornecido através da sensibilização e fases de provocação (dia 1 ao dia 7) ou antes e durante a fase de provocação (geralmente à tarde do dia 4 ao dia 7). O tratamento dos compostos de teste (em concentração diferente) foi administrado sistêmica ou topicamente (aplicação tópica do tratamento nas orelhas). As eficácias dos compostos de teste são indicadas por uma redução no inchaço da orelha em comparação com a situação sem o tratamento. Os compostos que causam uma redução de 20% ou mais foram considerados eficazes. Em algumas experiências, os camundongos são provocados, mas não sensibilizados (controle negativo).

[000129] O efeito inibidor (ativação da inibição das vias JAK-STAT) dos compostos de teste pode ser confirmado pela análise imunoistoquímica. A ativação das vias JAK-STAT resulta na formação e translocação de fatores de transcrição funcionais. Além disso, o influxo de células imunes e a proliferação aumentada de queratinócitos também devem fornecer alterações isoladas no perfil de expressão na orelha, o que pode ser investigado e quantificado. As seções da orelha fixadas com formalina e incrustada com parafina (colhidas após a fase de provocação no modelo DTH) são submetidas à análise imunoistoquímica utilizando um anticorpo que especificamente interage com STAT3 fosforilada (clone 58E12, Cell Signaling Technologies). As orelhas de camundongo são tratadas com os compostos de teste,

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48/50 veículo, ou dexametasona (um tratamento clinicamente eficaz para a psoríase), ou sem qualquer tratamento, no modelo DTH para comparações. Os compostos de teste e a dexametasona podem produzir alterações transcricionais semelhantes tanto qualitativa quanto quantitativamente, e tanto os compostos de teste quanto a dexametasona podem reduzir o número de células infiltrantes. A administração tanto sistêmica quanto tópica dos compostos de teste pode produzir efeitos inibidores, isto é, a redução no número de células infiltrantes e inibição das alterações de transcrição.

Exemplo E: Atividade anti-inflamatória in vivo [000130] Os compostos desta invenção podem ser avaliados em modelos roedores ou não roedores designados para replicar uma resposta de inflamação isolada ou complexa. Por exemplo, os modelos de roedores de artrite podem ser usados para avaliar o potencial terapêutico dos compostos doseados preventiva ou terapeuticamente. Estes modelos incluem, mas não são limitados a estes, artrite induzida por colágeno em camundongos ou ratos, artrite induzida por adjuvante em rato, e artrite induzida por anticorpo com colágeno. As doenças autoimunes incluindo, mas não limitadas a estas, esclerose múltipla, diabetes melito tipo I, uveorretinite, tiroidite, miastenia grave, nefropatias de imunoglobulina, miocardite, sensibilização das vias aéreas (asma), lúpus, ou colite, também podem ser usadas para avaliar o potencial terapêutico dos compostos aqui descritos. Estes modelos são bem estabelecidos na comunidade de pesquisa e estão familiarizados com aqueles instruídos na técnica (Current Protocols in Immunology, Vol 3., Coligan, J.E. et al, Wiley Press.; Methods in Molecular Biology: Vol. 225, Inflammation Protocols., Winyard, P.G. and Willoughby, D.A., Humana Press, 2003.).

Exemplo F: Modelos Animais para o Tratamento do Olho Seco, Uveíte e Conjuntivite

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49/50 [000131] Os compostos podem ser avaliados em um ou mais modelos pré-clínicos do olho seco conhecidos daqueles instruídos na técnica incluindo, mas não limitado a estes, modelo de glândula lacrimal concanavalina A (ConA) de coelho, o modelo do camundongo escopolamina (subcutânea ou transdérmica), o modelo de glândula lacrimal de camundongo Botulinumn, ou qualquer um de vários modelos autoimunes de roedores espontâneos que resultam em disfunção das glândulas oculares (por exemplo, NOD-SCID, MRL/lpr, ou NZB/NZW) (Barabino et al., Experimental Eye Research 2004, 79, 613-621 e Schrader et al., Developmental Opthalmology, Karger 2008, 41, 298312, cada um dos quais é aqui incorporado por referência na sua totalidade). Os parâmetros nesses modelos podem incluir histopatologia das glândulas oculares e olho (córnea, etc.) e possivelmente o teste de Schirmer clássico ou suas versões modificadas (Barabino et al.) que medem a produção de lágrima. A atividade pode ser avaliada pela dosagem através de múltiplas vias de administração (por exemplo, sistêmica ou tópica) que podem começar antes ou depois que doença mensurável existe.

[000132] Os compostos podem ser avaliados em um ou mais modelos pré-clínicos de uveíte conhecidos daqueles especializados na técnica. Estes incluem, mas não são limitados a eles, os modelos de uveíte autoimune experimental (EAU) e uveíte induzida por endotoxina (EIU). As experiências com EAU podem ser executadas no coelho, rato ou camundongos e podem envolver a imunização passiva ou ativa. Por exemplo, qualquer um de vários antígenos da retina pode ser utilizada para sensibilizar os animais a um imunógeno relevante após o que os animais podem ser provocados de forma ocular com o mesmo antígeno. O modelo EIU é mais agudo e envolve a administração local ou sistêmica de lipopolissacarídeo em doses subletais. Os parâmetros para os modelos tanto de EIU quanto de EAU podem incluir um exame de

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50/50 fundoscopia, histopatologia, entre outros. Estes modelos são analisados por Smith et al. (Immunology and Cell Biology 1998, 76, 497-512, que é aqui incorporado por referência na sua totalidade). A atividade é avaliada pela dosagem através de múltiplas vias de administração (por exemplo, sistêmica ou tópica) que pode começar antes ou depois que a doença mensurável existe. Alguns modelos listados acima também podem desenvolver esclerite/episclerite, coriodite, ciclite, ou irite e são, portanto, úteis na investigação da atividade potencial dos compostos para o tratamento terapêutico dessas doenças.

[000133] Os compostos também podem ser avaliados em um ou mais modelos pré-clínicos de conjuntivite conhecidos daqueles especializados na técnica. Estes incluem, mas não são limitados aos modelos de roedor que utilizam porquinho da índia, rato, ou camundongo. Os modelos de porquinho da índia incluem aqueles que utilizam imunização ativa ou passiva e/ou protocolos de provocação imune com antígenos tais como ovalbumina ou tasneira (revisto em Groneberg, D.A., et al., Allergy 2003, 58, 1101-1113, que é aqui incorporado por referência na sua totalidade). Os modelos de rato e camundongo são semelhantes na estrutura geral para aqueles no porquinho da índia (também revisto por Groneberg). A atividade pode ser avaliada pela dosagem através de múltiplas vias de administração (por exemplo, sistêmicas ou tópicas) que podem começar antes ou depois que a doença mensurável existe. Os critérios para tais estudos podem incluir, por exemplo, a análise histológica, imunológica, bioquímica ou molecular de tecidos oculares tais como a conjuntiva.

[000134] Várias modificações da invenção, além daquelas aqui descritas, serão evidentes para aqueles versados na técnica a partir da descrição acima. Cada referência citada no presente pedido é aqui incorporada por referência na sua totalidade.

Claims (12)

1. REIVINDICAÇÕES

   1. Composto, caracterizado pelo fato de que é 3-ciclobutil-3[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]propanonitrila, ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.
2. 2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é (R)-3-ciclobutil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)1H-pirazol-1-il] propanonitrila, ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.
3. 3. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é (S)-3-ciclobutil-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)1H-pirazol-1-il] propanonitrila, ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.
4. 4. Composto caracterizado pelo fato de que é 3-(4-(7Hpirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3-(3metilciclobutil)propanonitrila, ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.
5. 5. Composto de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que é 3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3((trans)-3-metilciclobutil) propanonitrila ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.
6. 6. Composto de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que é (3R)-3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol1-il)-3-((trans)-3-metilciclobutil)propanonitrila ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.
7. 7. Composto de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que é (3S)-3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol1-il)-3-((trans)-3-metilciclobutil)propanonitrila ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.
8. 8. Composto de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que é 3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3-

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   2/2 ((cis)-3-metilciclobutil) propanonitrila, ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.
9. 9. Composto de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que é (3R)-3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol1-il)-3-((cis)-3-metilciclobutil) propanonitrila ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.
10. 10. Composto de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que é (3S)-3-(4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4il)-1H-pirazol-1-il)-3-((cis)-3-metilciclobutil)propanonitrila ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.
11. 11. Sal, caracterizado pelo fato de que é sal de ácido fosfórico do composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 10.
12. 12. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende o composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 10, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável.