BR112012013813B1

BR112012013813B1 - Aparelho de marcação automatizado para processamento de pelo menos uma amostra biológica disposta em uma lâmina e método automatizado para processamento de pelo menos uma amostra biológica disposta em uma lâmina

Info

Publication number: BR112012013813B1
Application number: BR112012013813-8A
Authority: BR
Inventors: Soren Damgaard Larsen; Peter Axel Valbjorn
Original assignee: Dako Denmark A/S
Priority date: 2009-12-09
Filing date: 2010-12-09
Publication date: 2020-03-17
Also published as: AU2010330454A1; RU2012126082A; US20150079592A1; WO2011069507A1; US8877485B2; EP3591374B1; CA2782892C; US10018542B2; EP3591374A1; EP2510329B1; JP2013513782A; CA2782892A1; EP2510329A1; CN102770746A; BR112012013813A2; US20110136135A1; AU2010330454B2

Abstract

patente de invenção: "aparelho e método para processamento de amostras biológicas". a presente invenção refere-se a um método e a um aparelho automatizado para o processamento de pelo menos uma amostra biológica disposta em uma lâmina. pelo menos um módulo de marcação capilar tem um retentor de bandeja de lâmina configurado para reter de modo destacável uma bandeja de lâmina configurada para reter lâminas, e um retentor de bandeja com tampa capilar configurado para reter de modo destacável uma bandeja com tampa capilar configurado para reter tampas capilares, sendo que a bandeja de lâmina pode ser removida independentemente da remoção da bandeja com tampa capilar. um primeiro recipiente de fluido tem um primeiro fluido. o aparelho é configurado para girar automaticamente as uma ou mais lâminas e para mover as tampas em direção às lâminas para formar automaticamente um vão capilar entre cada lâmina e cada tampa capilar, sendo que o dito vão capilar funciona como uma câmara capilar; e para fornecer uma quantidade do primeiro fluido para a lâmina.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "APARELHO DE MARCAÇÃO AUTOMATIZADO PARA PROCESSAMENTO DE PELO MENOS UMA AMOSTRA BIOLÓGICA DISPOSTA EM UMA LÂMINA E MÉTODO AUTOMATIZADO PARA PROCESSAMENTO DE PELO MENOS UMA AMOSTRA BIOLÓGICA DISPOSTA EM UMA LÂMINA".

REIVINDICAÇÃO DE PRIORIDADE

[0001] O presente pedido reivindica o benefício do Pedido de Patente Provisório Copendente no U.S. 61/267.906, intitulado "AN APPARATUS E METHOD FOR PROCESSING BIOLOGICAL SAMPLES", depositado no dia 9 de dezembro de 2009 e aqui incorporado a título de referência em sua totalidade.

CAMPO TÉCNICO

[0002] A presente invenção refere-se ao processamento de uma amostra biológica para, por exemplo, exame histológico e citológico. Especialmente, a presente invenção refere-se ao processamento de uma amostra biológica, por exemplo, uma seção de tecido fino, com o uso de uma pequena quantidade de um fluido de processamento. ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[0003] O processamento de amostra em aplicações imunohisto-químicas (IHC), por exemplo, e em outras análises químicas e biológicas pode envolver uma ou diversas protocolos ou sequências de processamento de tratamento como parte de uma análise de uma ou mais amostras. Tipicamente, tais protocolos de tratamento são definidos por organizações ou indivíduos que exigem análise, como patologistas ou histologistas que trabalham em um hospital, e podem ser adicionalmente definidos pelos resultados de uma análise particular a ser desenvolvida.

[0004] Um procedimento de hibridização in situ (ISH), por exemplo, um procedimento de hibridização fluorescente in situ (FISH), é tra dicionalmente um longo procedimento manual de dois dias. Foram realizadas tentativas de automatizar partes do procedimento a fim de encurtar o procedimento de processamento e de reduzir o número de etapas manuais. Por exemplo, o procedimento de pré-tratamento do primeiro dia foi automatizado com um instrumento VP2000® (Vysis, Abbott Molecular), sendo que, em tal instrumento, um robô move lâminas de um jarro para outro.

[0005] No entanto, o problema, até então, era combinar as etapas de pré-tratamento do primeiro dia e as etapas de lavagem do segundo dia com as severas exigências físicas e ambientais das etapas de desnaturação e hibridização nesse ínterim. Nessas etapas, é preferencial usar pequenos volumes de fluidos de processamento e fornecer um controle preciso da umidade na câmara de processamento que circunda a seção de tecido processado, e fornecer aquecimento e resfriamento controlados a fim de obter resultados de FISH consistentes.

[0006] Os instrumentos de marcação por IHC e ISH automatizados foram introduzidos por Ventana Medical Sistemas Inc. (BenchMark® e Discovery®) e VisionBiosistema (Bond®). Uma desvantagem desses instrumentos é que fornecem somente um volume de processamento fixo, isto é, a câmara de processamento é de um volume fixo. O volume da câmara de processamento no instrumento é de pelo menos 100 microlitros.

[0007] O instrumento BenchMark® precisa cobrir a seção de tecido a ser processada e o fluido de processamento aplicado com óleo a fim de reduzir a evaporação do fluido de processamento. Se não for coberto por óleo, a evaporação de fluido de processamento irá deteriorar o resultado do processamento.

[0008] O instrumento Bond® tem uma pequena câmara de processamento que é manualmente presa sobre cada seção de tecido e sobre cada portadora. Ao prender manualmente a câmara de processa- mento sobre cada portadora, uma cavidade de marcação individual é criada.

[0009] Na publicação PCT WO 2009/086048 A1, de Ventana Medical Sistemas Inc., a aplicação e a remoção de líquido de variação de intervalo capilar são apresentadas. Uma desvantagem desse sistema é que o mesmo exige um aparelho mecânico relativamente complexo que inclui um motor para cada estação e cada estação processa somente uma lâmina por vez.

[00010] Na publicação PCT WO 2009/074154 A2, de Dako Denmark A/S, um aparelho para processamento de uma amostra biológica disposta em uma primeira superfície plana de uma portadora é apresentado. O aparelho compreende uma segunda superfície plana disposta de modo substancialmente paralelo à dita primeira superfície plana e a uma primeira distância da dita primeira superfície plana, sendo que a dita primeira superfície plana e a dita segunda superfície plana são dispostas a um ângulo maior do que zero graus do plano horizontal; e meios de abastecimento para fornecer uma quantidade de um líquido que deve ser aplicado à dita amostra biológica. A primeira superfície plana e a dita segunda superfície plana são configuradas para serem dispostas a uma segunda distância entre si, em que a dita segunda distância é tal que a dita quantidade fornecida de líquido é distribuída através da dita amostra biológica quando a dita primeira superfície plana e a dita segunda superfície plana são conduzidas à dita segunda distância entre si.

[00011] O aparelho de processamento de amostra apresentado no documento 2009/074154 A2 não é configurado para permitir facilmente que uma bandeja de lâminas seja automaticamente inserida, processada e removida.

[00012] A patente norte americana no U.S. 6.623.701 B1, de Max-Planck Gesellschaft zur Forderung der Wissenschaften e.V., apresenta uma câmara de espécime para o tratamento de líquido de pelo menos um espécime. A câmara compreende uma placa base e uma placa portadora, entre as quais um espaço de acomodação formada por vão é formado para a espécime, através do qual a placa base e a placa portadora são mantidas juntas com um dispositivo de retenção em uma disposição de quadro, e, a fim de formar a câmara de acomodação, as mesmas são separadas uma da outra por elementos espaça-dores.

[00013] Uma desvantagem da câmara de espécime do documento U.S. 6.623.701 B1 é que cada câmara de espécime tem que ser manualmente montada antes que o processamento de uma espécime possa ser iniciado. Montar manualmente a câmara exige diversas etapas e o tempo e trabalho associados para cada etapa e exige algumas habilidades do indivíduo que monta a câmara a fim de posicionar as partes da câmara a ser disposta em sua posição correta. Esse processo de montagem manual com muitas etapas aumenta a oportunidade de erros humanos.

[00014] A publicação PCT WO 2006/116037, de Celerus Diagnostics Inc., apresenta um sistema de processamento de amostra que pode ser configurado para alcançar um rápido processamento de amostra, como um rápido processamento histoquímico. O sistema de processamento pode envolver um elemento de onda que pode usar movimentos angulares de lâmina microscópica para causar eliminação repetida e reaplicação de uma substância fluida talvez através da ação de movimentação capilar a fim de renovar um microambiente adjacente a uma amostra, como uma biopsia ou outra amostra. Através de tal renovação de um microambiente, a depleção do microambiente é evitada e o tempo necessário para o processamento de lâmina pode ser encurtado.

[00015] Desvantagens do sistema de processamento de amostra descrito no documento WO 2006/116037 se referem ao fato de que um ambiente fluido confinado ao redor de uma amostra em uma lâmina é alcançado com o uso de uma lâmina oposta que, em uma extremidade, é articulada a uma extremidade da lâmina que porta a amostra causadora. Como com os outros sistemas, múltiplas lâminas em uma única bandeja não podem ser automaticamente carregadas e descarregadas no local de processamento. Além disso, esse sistema utiliza um mecanismo de absorção na forma de um grande cartucho de material absorvível, aumentando, desse modo, o custo operacional do instrumento.

[00016] Além disso, a mistura do fluido no interior do ambiente fluido confinado é realizada através do fornecimento de um movimento angulado da lâmina oposta, isto é, através da rotação da lâmina oposta ao redor da articulação. Algumas das desvantagens dos instrumentos da técnica anterior se devem ao fato de que exigem volumes relativamente grandes, cerca de 150 a 200 microlitros, de fluido de processamento, não fornecem resultados tão bons quanto o processamento manual, não fornecem automaticamente uma câmara de processamento e não fornecem um volume variável de fluido de processamento a ser usado através do fornecimento de uma câmara de processamento que tem um volume variável. Ademais, muitos dos instrumentos da técnica anterior são relativamente complexos e exigem um grande número de partes móveis. Ademais, os instrumentos da técnica anterior exigem, com frequência, montagem manual ou fixação de uma cobertura ou tampa para formar um vão capilar ou exigem uma evaporação que impeça que o líquido seja aplicado em um acúmulo de rea-gente de processamento durante a incubação que resulta tipicamente em um volume mais alto de reagente que precisa ser aplicado.

[00017] Um objetivo da presente invenção é solucionar esses e outros problemas e desvantagens do sistema da técnica anterior. Por exemplo, um objetivo da presente invenção é superar a desvantagem de ter um mecanismo complexo que processa somente uma lâmina de cada vez.

[00018] Outro objetivo da presente invenção é superar as desvantagens de sistemas de portadora horizontal que exigem um vácuo para evacuar a câmara capilar.

[00019] Ainda outro objetivo da presente invenção é solucionar o problema de ter um volume fixo de fluido de processamento ou de exigir uma quantidade relativamente grande de fluido de processamento para protocolos automatizados quando comparada à quantidade de fluido exigido para protocolos manuais do mesmo tipo.

[00020] Outro objetivo da invenção é eliminar o problema de exigir mecanismos complexos separados para misturar um fluido em cada única lâmina.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[00021] A presente invenção refere-se à patologia molecular, isto é, ao exame a um nível molecular do DNA; mRNA e proteínas que causam ou são, de outro modo, associadas a doenças. A presente invenção refere-se ao processamento de uma amostra biológica para, por exemplo, exame histológico e citológico. Especialmente, a presente invenção refere-se ao processamento de uma amostra biológica fina, por exemplo, uma seção de tecido, com o uso de uma pequena quantidade de um fluido de processamento.

[00022] Em particular, a invenção refere-se ao processamento, por exemplo, tratamento e/ou marcação, de pelo menos uma amostra biológica, por exemplo, uma seção de tecido, acomodada em uma portadora, bem como ao controle da umidade e da temperatura durante o processamento.

[00023] Deve-se compreender que a presente invenção pode ser usadas nos campos de citologia e histologia, biologia molecular, bio química, imunologia, microbiologia e biologia celular. Em particular, a invenção refere-se aos campos de citogenética molecular e imunohis-toquímica para o processamento de amostras biológicas em imunohis-toquímica (IHC), hibridização in situ (ISH), hibridização fluorescente in situ (FISH), hibridização cromogênica in situ (CISH), marcações especiais (SS), hibridização em prata in situ (SISH), microarranjos (tecido, proteína, RNA, DNA, PNA, LNA, etc.), bem como outras aplicações químicas e/ou biológicas.

[00024] As aplicações imunológicas, por exemplo, podem envolver protocolos ou sequências de processamento que compreendem etapas, como desparafinação, recuperação de alvo e marcação, especialmente para técnicas de hibridização in situ (ISH).

[00025] O procedimento de marcação pode ser trabalhoso e pode usar muitos tipos diferentes de líquidos, por exemplo, reagentes. O protocolo de marcação pode incluir as seguintes etapas: desparafina-ção, lavagem, recuperação de antígeno, biotina endógena ou bloqueio de enzima, incubação com reagentes imunológicos, sondas moleculares, reagentes de visualização secundária e diversos reagentes de cromogênio, etapas de lavagem e contramarcação.

[00026] A presente invenção refere-se a um aparelho de marcação automatizado para o processamento de pelo menos uma amostra biológica disposta em uma lâmina. As modalidades do aparelho de marcação automatizado compreendem: pelo menos um módulo de marcação capilar que compreende: um retentor de bandeja de lâmina configurado para reter de modo destacável uma bandeja de lâmina configurada para reter uma ou mais lâminas, e um retentor de bandeja com tampa capilar configurado para reter de modo destacável uma bandeja com tampa capilar configurada para reter uma ou mais tampas capilares, em que a bandeja de lâmina pode ser removida independentemente da remoção da bandeja com tampa capilar, e um primeiro recipiente de fluido que compreende um primeiro fluido, em que o aparelho de marcação automatizado é configurado para automaticamente: controlar o retentor de bandeja de lâmina para girar as uma ou mais lâminas de uma posição de inserção para uma ou mais posições inclinadas, e controlar o retentor de bandeja com tampa capilar para mover as uma ou mais tampas capilares em direção às uma ou mais lâminas a fim de formar automaticamente um vão capilar entre cada lâmina e cada tampa capilar, em que o dito vão capilar funciona como uma câmara capilar; e para fornecer uma quantidade do primeiro fluido do recipiente de fluido para a lâmina quando na dita posição inclinada.

[00027] A presente invenção também se refere a um método automatizado para o processamento de pelo menos uma amostra biológica disposta em uma lâmina, sendo que as modalidades do método compreendem: fornecer pelo menos um módulo de marcação capilar que compreende: um retentor de bandeja de lâmina configurado para reter de modo destacável uma bandeja de lâmina configurada para reter uma ou mais lâminas, e um retentor de bandeja com tampa capilar configurado para reter de modo destacável uma bandeja com tampa capilar configurada para reter uma ou mais tampas capilares, em que a bandeja de lâmina pode ser removida independentemente da remoção da bandeja com tampa capilar, fornecer um primeiro recipiente de fluido que compreende um primeiro fluido, controlar automaticamente o retentor de bandeja de lâmina para girar as uma ou mais lâminas de uma posição de inserção para uma ou mais posições inclinadas; controlar automaticamente o retentor de bandeja com tampa capilar para mover as uma ou mais tampas capilares em direção às uma ou mais lâminas a fim de formar automaticamente um vão capilar entre cada lâmina e cada tampa capilar, em que o dito vão capilar funciona como uma câmara capilar; e fornecer automaticamente uma quantidade do primeiro fluido do recipiente de fluido para a lâmina quando na dita posição inclinada.

[00028] As modalidades preferenciais da invenção são definidas nas reivindicações dependentes.

DESCRIÇÃO DETALHADA DOS DESENHOS

[00029] Os objetivos, vantagens e efeitos, bem como recursos, da presente invenção serão mais prontamente compreendidos a partir da seguinte descrição detalhada de modalidades da invenção, quando lidas em conjunto com os desenhos anexos, nos quais: a figura 1A é uma ilustração esquemática oblíqua de uma modalidade de um aparelho de marcação automatizado que compreende um módulo de marcação capilar automatizado de IHC e um módulo de marcação capilar automatizado de ISH; a figura 1B ilustra esquematicamente uma amostra biológica disposta em uma lâmina; a figura 1C é uma vista oblíqua de seções superior e intermediária de uma modalidade de um aparelho de marcação automatizado que compreende um módulo de marcação capilar automatizado; a figura 2A é uma vista oblíqua explodida de uma modali dade de um módulo de marcação capilar automatizado que mostra um recipiente de processamento, uma bandeja com tampa capilar, uma tampa de recipiente de processamento e uma bandeja de lâmina; a figura 2B é uma vista oblíqua explodida de uma modalidade de um módulo de marcação capilar automatizado que mostra um recipiente de processamento, uma bandeja com tampa capilar, uma tampa de recipiente de processamento e uma bandeja de lâmina; a figura 3A ilustra esquematicamente uma vista em corte transversal de uma modalidade do módulo de marcação capilar em que a inserção de bandeja de lâmina vertical sucedida pela rotação é mostrada; a figura 3B ilustra esquematicamente uma vista em corte transversal de outra modalidade do módulo de marcação capilar em que a inserção de bandeja de lâmina inclinada em rotação é mostrada; a figura 4 ilustra esquematicamente uma vista em corte transversal de uma modalidade do módulo de marcação capilar em que o abastecimento de fluido inicial para uma lâmina em uma posição inclinada é mostrado; a figura 5 ilustra esquematicamente uma vista em corte transversal de uma modalidade do módulo de marcação capilar em que a rotação da bandeja com tampa capilar é mostrada; a figura 6 ilustra esquematicamente uma vista em corte transversal de uma modalidade do módulo de marcação capilar em que um vão capilar preenchido por fluido é obtido entre uma tampa capilar e uma lâmina; a figura 7 ilustra esquematicamente uma vista em corte transversal de uma modalidade do módulo de marcação capilar em que uma quantidade de um reagente é fornecida para o vão capilar preenchido por fluido; a figura 8 ilustra esquematicamente uma vista em corte transversal de uma modalidade do módulo de marcação capilar em que a tampa capilar realiza um movimento de oscilação; a figura 9 ilustra esquematicamente uma vista em corte transversal de uma modalidade do módulo de marcação capilar em que o vão capilar entre uma tampa capilar e uma lâmina é removido durante o abastecimento de fluido; a figura 10 ilustra esquematicamente uma vista em corte transversal de uma modalidade do módulo de marcação capilar em que uma tampa capilar é limpa por meio de uma lâmina do tipo limpa-dora; a figura 11 ilustra esquematicamente uma vista em corte transversal de uma modalidade do módulo de marcação capilar em que um reagente é dispensado; a figura 12 ilustra esquematicamente uma vista em corte transversal de uma modalidade do módulo de marcação capilar que compreende meios preventivos de condensação, em que um reagente é dispensado; a figura 13 ilustra esquematicamente uma modalidade de uma bandeja com tampa capilar que compreende dez tampas capilares; a figura 14A ilustra esquematicamente o fluxo de fluido em um vão capilar entre uma lâmina e uma tampa capilar sem uma ponta de gotejamento; a figura 14B ilustra esquematicamente o fluxo de fluido em um vão capilar entre uma lâmina e uma tampa capilar com uma ponta de gotejamento; a figura 14C ilustra esquematicamente o fluxo de fluido em um vão capilar entre uma lâmina e uma tampa capilar com uma ponta de gotejamento e um captor de gotícula; a figura 15A ilustra esquematicamente uma modalidade de uma tampa capilar que compreende espaçadores, uma reentrância central, uma ponta de gotejamento e uma extremidade superior chan-frada; a figura 15B ilustra esquematicamente uma modalidade de uma tampa capilar que compreende espaçadores, uma reentrância central, uma ponta de gotejamento e uma extremidade superior chan-frada com um dreno de gotícula; a figura 16A é uma vista oblíqua explodida de uma modalidade de um eliminador de bolhas combinado a um aquecedor de fluido em linha; e a figura 16B ilustra esquematicamente uma modalidade de um eliminador de bolhas e do fluxo de fluido e bolhas no interior do eliminador de bolhas.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[00030] Embora a invenção abranja diversas modificações e métodos alternativos, aparelhos e sistemas, as modalidades da invenção são mostradas nos desenhos e serão doravante descritas em detalhes. No entanto, deve-se compreender que a descrição específica e os desenhos não são destinados a limitar a invenção às formas específicas apresentadas. Ao contrário, o escopo da invenção reivindicada é destinado a incluir todas as modificações e as construções alternativas do mesmo que estejam dentro do espírito e do escopo da invenção, conforme expressado nas reivindicações anexas até o alcance total de seus equivalentes. Nos desenhos, o mesmo numeral de referência é usado para o mesmo recurso ou para um recurso similar.

[00031] Em uma modalidade da invenção e conforme esquemati-camente ilustrado na figura 1A, um aparelho de processamento de amostra automatizado 1, nessa descrição também denominado como um aparelho de marcação automatizado 1, compreende pelo menos um módulo de processamento capilar 100, nessa descrição também denominado como um módulo de marcação capilar 100, para processar pelo menos uma amostra biológica 3, como uma amostra de tecido biológico, disposto em um retentor de amostra 10, consulte a figura 1B.

[00032] A amostra biológica pode ser apresentada no retentor de amostra de diversas maneiras e potencialmente em alguma forma de preservação. Como um exemplo, uma amostra, como uma camada ou pedaço de pele, tumor ou outro tecido, pode ser preservada em for-maldeído e apresentada em um retentor de amostra com uma ou mais camadas de parafina ou outras camadas químicas que sobrepõem a amostra. As amostras preservadas com parafina podem precisar ser submetidas à desparafinação, um processo através do qual as camadas de parafina que sobrepõem e/ou infiltram a amostra são removidas. Além disso, o alvo ou amostra pode precisar ser restaurado para uma condição em que é adequado para operações de marcação - um processo conhecido como recuperação de alvo.

[00033] Conforme ora usado, automatizado é definido como uma pluralidade de etapas que são executadas através de meios substancialmente mecânicos, de computador e/ou eletrônicos. Não exclui algumas etapas de intervenção humana, como a substituição manual de um dos recursos ou etapas descritos.

[00034] Embora, nessa descrição, seja feita referência a uma lamina, deve-se compreender que a lâmina se refere a um retentor de amostra, e o retentor de amostra é qualquer meio que sustente uma amostra. Portanto, o retentor de amostra inclui qualquer suporte, como uma portadora, tubo de teste, chip, arranjo, disco ou lâmina que possa sustentar pelo menos uma amostra.

[00035] Além disso, nessa descrição, também é feita referência a uma bandeja de lâmina. No entanto, a bandeja de lâmina deve ser compreendida de modo a incluir qualquer retentor adequado para um grupo de suportes, como uma bandeja que sustente um grupo de lâminas. A bandeja de lâmina pode se referir adicionalmente a um suporte de maior escala, como um retentor de bandeja de lâmina que retém pelo menos um suporte menor, como uma pluralidade de bandejas de lâmina, sendo que cada bandeja contém uma pluralidade de lâminas. Um retentor pode reter de modo liberável, reter de modo seguro e/ou reter de tal modo a permitir o movimento, como vertical, horizontal ou pivotante ao redor de um ou mais eixos geométricos.

[00036] Conforme esquematicamente ilustrado na figura 1A, o aparelho de marcação automatizado 1 compreende um primeiro módulo de marcação capilar 100, um segundo módulo de marcação capilar 100’ e um terceiro módulo de marcação capilar 100”, porém, deve-se compreender que o número de módulos de marcação capilar pode ser variado.

[00037] Em modalidades, o primeiro, o segundo e o terceiro módulos de marcação capilar, 100, 100’ e 100” podem ser configurados para, por exemplo, aplicações imunohistoquímicas (IHC) e aplicações de hibridização in situ (ISH), respectivamente.

[00038] Conforme esquematicamente ilustrado na figura 1A, o aparelho de marcação 1 pode compreender três níveis; um primeiro nível inferior I que compreende, por exemplo, recipientes de fluido em bate-lada, refugo, válvulas e bombas; um segundo nível intermediário II que compreende, por exemplo, diversas unidades de processamento, armazenamentos de lâmina, robótica e frascos de reagente; e um terceiro nível superior III que compreende, por exemplo, uma corrediça de cobertura e unidades de controle e interfaces de comunicação. Determinados elementos, como a unidade de controle 151, podem ser posi-cionáveis no nível III para permitir, a grosso modo, uma vista a nível ocular do visor ou no nível I para que saia do trajeto ao se processar manualmente os módulos no nível II.

[00039] Conforme ilustrado, o aparelho de marcação automatizado 1 pode compreender uma ou mais unidades de processamento, como um ou mais módulos de pré-tratamento 2 , por vezes, denominados como tanques de imersão, unidades de armazenamento de lâmina 6 e um ou mais módulos de marcação capilar 100, 100', 100”.

[00040] Em modalidades, um módulo de pré-tratamento 2 pode ser configurado para desparafinação, isto é, para remoção de parafina de uma amostra biológica embutida em parafina. O módulo de pré-tratamento 2 também pode ser configurado para recuperação de alvo (por exemplo, recuperação de antígeno ou hibridização in situ), isto é, para restaurar o alvo/antígeno da amostra em uma condição em que é adequado para operações de marcação.

[00041] O aparelho de marcação automatizado 1 pode incluir estações de carregamento de amostra 17 para inserir bandejas de lâmina com amostras no aparelho para processamento. O aparelho de marcação automatizado 1 pode incluir adicionalmente estações de carregamento de acessório 21 para inserir acessórios, como tampas para protocolos de hibridização in situ.

[00042] As uma ou mais unidades de armazenamento de lâmina 6 são configuradas para armazenar uma ou mais lâminas 10 dispostas em uma ou mais bandejas de lâmina 20 configuradas para reter diversas lâminas 10 montadas lado a lado. As unidades de armazenamento de lâmina 6 são configuradas para armazenar lâminas horizontalmente, verticalmente ou em outra posição adequada.

[00043] O aparelho de marcação automatizado 1 pode compreender adicionalmente diversos recipientes 8 de fluidos em batelada 8a, como soluções de lavagem, soluções tampão, soluções de desparafi-nação, soluções de recuperação de alvo ou soluções aquosas, como água purificada, anticorpos em solução, soluções de marcação em batelada, como hematoxilina, eosina, soluções de limpeza, como solução removedora de DAB, etc. conhecidas a uma pessoa versada na técnica.

[00044] A aparelho de marcação automatizado 1 pode compreender adicionalmente tubagens 9 que conectam o(s) recipiente(s) de fluido em batelada 8 a uma ou mais unidades de processamento 2,100, 100', 100”, válvulas 7 para controlar o fluxo de fluido em batelada 8a para as uma ou mais unidades de processamento 2, 100, 100', 100”, a partir do(s) recipiente(s) de fluido em batelada 8, e uma ou mais bombas 5 configuradas para fornecer um fluxo de fluido em batelada do recipiente de fluido em batelada 8 para as uma ou mais unidades de processamento 2, 100, 100', 100”.

[00045] Ademais, o aparelho de marcação automatizado 1 pode compreender um recipiente de refugo 11 configurado para armazenar fluido de refugo que foi removido através de tubagens (não mostradas) a partir das uma ou mais unidades de processamento 2, 100, 100', 100''.

[00046] Conforme esquematicamente ilustrado na figura 1A, o aparelho de marcação automatizado 1 compreende adicionalmente um robô de lâmina 12 configurado para transportar uma ou mais lâminas 10 ou uma ou mais bandejas de lâmina 20 em direções X e Y (bem como Z), conforme indicado pelas setas X e Y. Através de um robô de lâmina 12, as lâminas/bandeja de lâmina podem ser transportadas entre diferentes unidades de processamento 2, 100, 100', 100'' e armazenamentos 6 do aparelho de marcação 100 para que as amostras biológicas dispostas nas lâminas possam ser processadas, conforme desejado.

[00047] Na figura 1A, é esquematicamente ilustrado como o robô de lâmina 12 suspende, ao longo da direção Y, uma lâmina 10 ou uma bandeja de lâmina 20 a partir de um armazenamento de lâmina 6. Além disso, conforme indicado pela seta, o robô de lâmina 12 pode se mover para a esquerda, ao longo da direção X, para, por exemplo, um primeiro módulo de marcação capilar 100, 100', 100”.

[00048] O robô de lâmina 12 pode segurar uma bandeja de lâmina 20 a partir da gaveta de amostra 17 e transportar a bandeja de lâmina 20 e as lâminas 10 para qualquer uma das estações, como placa fria 15, placa quente 4, estação de incubação 22, módulos de pré-tratamento 2, módulos de marcação 100, 100', 100”, ou módulos de descarga úmidos/secos 6, a fim de processar as amostras 3 sobre as lâminas 10.

[00049] Quando o robô de lâmina 12 está disposto em uma posição acima da posição da bandeja de lâmina do módulo de marcação capilar, o robô de lâmina 12 pode ser configurado para abaixar, ao longo da direção Y, a lâmina ou a bandeja de lâmina no módulo de marcação capilar para inserir a lâmina ou a bandeja de lâmina em uma posição correta no interior do módulo de marcação capilar, conforme indicado pela seta direcionada para baixo ao longo da direção Y na figura 1A.

[00050] Além disso, o robô de lâmina 12 pode ser configurado para posicionar a bandeja de lâmina 20 horizontalmente, verticalmente ou a um ângulo entre horizontal e vertical. Por exemplo, o robô de lâmina 20 pode segurar ou liberar a bandeja de lâmina 20 em uma orientação horizontal sobre a placa fria 15 ou a placa quente 4 ou estações de carregamento 17. Como um exemplo adicional, o robô de lâmina 12 pode segurar ou liberar a bandeja de lâmina 20 em uma orientação vertical em módulos de pré-tratamento 2 ou estações de descarrega-mento 6. Em ainda outro exemplo, o robô de lâmina 12 pode segurar ou liberar a bandeja de lâmina 20 em uma orientação angulada entre horizontal e vertical, como módulos de marcação 100, 100' e 100''.

[00051] Ademais, o aparelho de marcação automatizado 1 compreende um robô de fluido 14 para mover uma sonda 16 nas direções X e Y (bem como Z), conforme indicado pelas setas X e Y. O robô de fluido 14 pode posicionar a sonda 16 acima de um ou mais recipientes de fluido 18, estações de mistura, módulos de marcação capilar 100,100', 100'', placa fria 15 e placa quente 4.

[00052] O robô de fluido 14 pode operar, ainda, a sonda 16 para aspirar porções de reagente 18a contidas em qualquer um dos recipientes de reagente 18 a fim de transferir a porção de reagente 18a e aplicá-la a uma ou mais lâminas 10 dispostas em um ou mais do módulos de marcação capilar 100, 100', 100'' de modo a fornecer uma marcação selecionada ou tratamento da amostra na lâmina. Conforme esquematicamente ilustrado na figura 1A, um ou mais recipientes de fluido 18 podem ser dispostos em uma bandeja de recipiente de fluido 19.

[00053] Portanto, o robô de fluido 14 é configurado para mover a sonda 16 entre diferentes posições no interior do aparelho de marcação automatizado 1. O robô de fluido 14 pode ser, por exemplo, configurado para mover a sonda 16 para, por exemplo, uma posição de aspiração em um recipiente de reagente 18 e para deixar que a sonda 16 aspire uma quantidade de um reagente 18a do recipiente de reagente 18. Além disso, conforme esquematicamente ilustrado pela seta direcionada para a esquerda, ao longo da direção X, e pela seta direcionada para baixo, ao longo da direção Y, através do robô de fluido 14, a sonda 16 pode ser movida para, por exemplo, uma posição de dispen-sação em uma lâmina 10 disposta em um módulo de marcação capilar 100, 100', 100'', sendo que, em tal posição de dispensação, um volume do reagente aspirado 18a pode ser dispensado para a lâmina 10 a fim de fornecer uma marcação selecionada ou tratamento da amostra na lâmina.

[00054] Conforme esquematicamente ilustrado, por exemplo, nas figuras 7, 11 e 12, a posição de dispensação pode ser definida por uma primeira entrada de sonda 161 e/ou uma segunda entrada de sonda 163, respectivamente, dispostas em uma tampa de recipiente de processamento 160.

[00055] No entanto, deve-se compreender que o número de primeira e segunda entradas de sonda 161, 163 pode ser variado e que, em modalidades, o número de primeira e segunda entradas de sonda 161, 163 é igual ao número de lâminas que podem ser processadas no módulo de marcação capilar. Desse modo, em modalidades, na tampa de recipiente de processamento 160, uma primeira e uma segunda entrada de sonda 161,163 são dispostas para cada lâmina que pode ser processada no módulo de marcação capilar a fim de fornecer um abastecimento individual de fluido para cada lâmina.

[00056] Ademais, a câmara capilar automaticamente criada conforme aqui descrito pode ser usada em conjunto com mecanismos de dispensação de fluido, incluindo pipetas robóticas, sondas, tubos, garrafas de dispensação direta, tubulações e assim por diante.

[00057] Antes de aspirar uma quantidade de um segundo fluido diferente possível, a sonda 16 pode ser movida para um recipiente de fluido de lavagem 18' e uma quantidade do fluido de lavagem pode ser aspirada a fim de limpar a sonda 16 antes que uma quantidade de um novo fluido possível seja aspirada pela sonda 16.

[00058] Conforme esquematicamente ilustrado na figura 1A, os um ou mais recipientes de reagente 18, 18' podem ser dispostos em uma bandeja de recipiente de reagente 19. Uma pluralidade de bandejas de recipiente de reagente pode ser configurada para ser independentemente inserível e/ou removível a fim de acomodar o fluxo de trabalho contínuo, isto é, adicionar ou remover reagentes durante o processamento em andamento de lâminas.

[00059] Além disso, o aparelho de marcação automatizado 1 pode compreender adicionalmente uma corrediça de cobertura 13 configu rada para dispor um vidro de cobertura (não mostrado) em uma amostra biológica processada disposta em uma lâmina 10.

[00060] Conforme esquematicamente ilustrado na figura1A, o aparelho de marcação automatizado 1 também pode compreender uma unidade de controle 151 que compreende controle de processamento e uma interface de entrada/saída. Uma entrada adequada pode ser um teclado e uma saída adequada pode ser um monitor ou a unidade de controle 151 pode compreender um visor de tela sensível ao toque.

[00061] A figura 1C ilustra uma vista ortográfica do aparelho de marcação automatizado 1. Como na figura 1A, nas modalidades da figura 1C, o movimento das amostras nas lâminas 10 em bandejas de lâmina 20 é, em geral, das estações de carregamento 17, através das diversas estações de processamento e finalmente para as unidades de armazenamento 6 que funcionam como estações de descarregamen-to.

[00062] Para lâminas de IHC, o fluxo de trabalho de processamento de amostra é aquele em que lâminas 10 na bandeja de lâmina 20 são movidas por braço robótico 12 para a placa quente 4 se reforço é desejado. O robô de lâmina 12 move e insere a bandeja de lâmina 20 verticalmente no módulo de pré-tratamento 2 para desenceramento e, opcionalmente, recuperação de alvo.

[00063] Após o pré-tratamento, a bandeja de lâmina 20 é movida de um dos módulos de marcação 100, 100', 100”, em que os reagentes 18a são aplicados de acordo com um protocolo de IHC desejado, através de robô de fluido 14.

[00064] Após a marcação, o robô de lâmina 12 move a bandeja de lâmina 20 para as unidades de armazenamento de lâmina 6 que podem ser secas ou podem conter fluido para manter as lâminas úmidas. As unidades de armazenamento de lâmina 6 podem ser acessadas por um usuário para descarregar a bandeja de lâmina 20.

[00065] Conforme esquematicamente ilustrado na figuras 2A, 2B, 3A e 3B, uma bandeja de lâmina 20 configurada para reter uma ou mais lâminas 10 pode ser inserida em e ser removida do módulo de marcação capilar 100, 100', 100”. Na modalidade mostrada na figura 2, a bandeja de lâmina 20 é configurada para reter diversas lâminas 10, por exemplo, dez lâminas 10, porém, deve-se compreender que a bandeja de lâmina 20 pode ser configurada para reter outro número adequado de lâminas.

[00066] Ademais, uma bandeja com tampa capilar 40 configurada para reter diversas tampas capilares 30 pode ser inserida em e ser removida do módulo de marcação capilar 100,100', 100''. Na modalidade mostrada na figura 2, a bandeja com tampa capilar 40 é configurada para reter diversas tampas capilares 30, por exemplo, dez tampas capilares 30, porém, deve-se compreender que a bandeja com tampa capilar 40 pode ser configurada para reter outro número adequado de tampas capilares.

[00067] O módulo de marcação capilar 100,100',100'' compreende um recipiente de processamento 150 e uma tampa de recipiente de processamento 160. Conforme ilustrado na figura 3A e na figura 3B, a tampa de recipiente 160 é articulada em uma articulação de tampa de recipiente 162 contida no recipiente de processamento 150, através do qual a tampa de recipiente 160 pode ser girada ao redor da articulação de tampa de recipiente 162 a fim de abrir e fechar o recipiente de processamento 150. Quando o recipiente de processamento 150 está aberto, a bandeja com tampa capilar 40 com as tampas capilares 30 pode ser inserida em ou removida do recipiente de processamento 150.

[00068] Ademais, a figura 3A ilustra esquematicamente uma vista em corte transversal de uma modalidade do módulo de marcação capilar 100,100',100'' na qual a inserção e rotação de bandeja de lâmina são mostradas.

[00069] Conforme ilustrado, uma ou mais bandejas de lâmina 20 que compreendem uma ou mais lâminas 10 são inseridas no módulo de marcação capilar 100,100’,100” ao longo de uma direção vertical, conforme indicado pela seta direcionada para baixo, a partir de uma posição acima do módulo de marcação capilar para uma posição no módulo de marcação capilar.

[00070] Através das linhas pontilhadas na figura 3A, a bandeja de lâmina 20 e uma lâmina 10 são ilustradas em uma posição acima do módulo de marcação capilar, e em uma primeira posição no interior do módulo de marcação capilar. Em tal primeira posição, a lâmina é disposta ao longo da direção de inserção, por exemplo, a direção vertical. [00071] Conforme adicionalmente ilustrado, o módulo de marcação capilar 100 compreende um retentor de bandeja de lâmina 102 configurado para reter a bandeja de lâmina 20 quando inserido no módulo de marcação capilar 100,100’, 100’’. Além disso, o retentor de bandeja de lâmina 102 é disposto em uma articulação de retentor de bandeja de lâmina 104, sendo que o retentor de bandeja de lâmina 102 é configurado para girar ao redor dessa articulação 104.

[00072] Em modalidades, o retentor de bandeja de lâmina 102 é configurado para girar entre uma posição aberta, em que uma bandeja de lâmina 20 em uma posição de inserção, por exemplo, uma posição vertical, pode ser inserida em ou removida do módulo de marcação capilar 100,100’, e uma posição fechada, em que uma bandeja de lâmina 20 está em uma posição inclinada na qual a bandeja de lâmina 20 não pode ser inserida ou removida do módulo de marcação capilar 100,100’, 100’’, conforme esquematicamente ilustrado na figura 3A.

[00073] Os módulos de marcação capilar 100,100’,100’’ também podem compreender um conduto de umidade 152 disposto em uma parte inferior do recipiente de processamento 150 e configurado para reter um volume de um fluido a fim de fornecer uma umidade predefi-nida ou predeterminada no interior do módulo de marcação capilar 100,100', 100'' durante o processamento de amostras biológicas. [00074] Conforme previamente descrito, o robô de lâmina 12, consulte a figura 1A, é configurado para mover uma bandeja de lâmina 20 no interior do aparelho de marcação automatizado 1 e para inserir a bandeja de lâmina 20 em um módulo de marcação capilar 100,100', 100''. Além disso, quando a bandeja de lâmina 20 está disposta no módulo de marcação capilar 100,100',100'', os eletrônicos do aparelho de marcação automatizado 1 são configurados para girar automaticamente a bandeja de lâmina 20 e as uma ou mais lâminas 10 ao redor da articulação de retentor de bandeja de lâmina 104.

[00075] Em modalidades, a bandeja de lâmina 20 é configurado para girar da posição de inserção, por exemplo, da posição vertical, para uma ou mais posições inclinadas, por exemplo, de uma posição de inserção A para uma primeira posição inclinada B, e da primeira posição inclinada B para uma segunda posição inclinada C.

[00076] Ademais, a figura 3A ilustra esquematicamente um retentor de bandeja com tampa capilar 106 que retém uma bandeja com tampa capilar 40. O retentor de bandeja com tampa capilar 106 é configurado para reter de modo destacável uma bandeja com tampa capilar 40. O retentor de bandeja com tampa capilar 106 é disposto em uma articulação de retentor de bandeja com tampa capilar 108, sendo que o retentor de bandeja com tampa capilar 106 pode girar ao redor da articulação 108. Além disso, o retentor de bandeja com tampa capilar 106 pode compreender uma bandeja com tampa de tampa 109 configurada para engatar de modo destacável a bandeja com tampa 40.

[00077] Em modalidades, a bandeja com tampa capilar 40 compreende uma barra de tampa superior 42 e uma barra de tampa intermediária 44 configurada para reter uma tampa capilar 30. Além disso, a bandeja com tampa capilar 40 pode compreender uma barra inferior 46 configurada para se engatar de modo destacável em uma fenda 110 do retentor de bandeja com tampa capilar 106.

[00078] Conforme esquematicamente ilustrado na figura 3A, a tampa capilar 30 compreende uma superfície voltada para as barras de tampa superior e intermediária 42, 44, e prendedores 32, 34 por meio dos quais a tampa capilar 30 pode ser disposta de modo removível na bandeja com tampa capilar 40. De preferência, os prendedores 32, 34 são configurados para fornecer uma fixação flexível da tampa capilar 30 à bandeja com tampa capilar 40 para que as distâncias d1 e d2 entre a barra de tampa superior 42 e a superfície de tampa capilar voltada para a barra de tampa superior 42 e entre a barra de tampa intermediária 44 e a superfície de tampa capilar voltada para a barra de tampa intermediária 44, respectivamente, possam ser variadas.

[00079] Em modalidades, o prendedor superior 32 e o prendedor inferior 34 da tampa 30 são realizados como ganchos configurados para engatar de modo destacável a barra de tampa superior 42 e a barra de tampa intermediária 44, respectivamente, da bandeja com tampa capilar 40.

[00080] Conforme esquematicamente ilustrado na figura 3A, em modalidades, o prendedor superior 32 da tampa 30 compreende um par de ganchos e o prendedor inferior 34 da tampa 30 compreende um único gancho. No entanto, em outras modalidades, o prendedor superior 32 pode compreender um único gancho e o prendedor inferior 34 pode compreender um par de ganchos, ou os prendedores superior e inferior 32, 34 podem compreender o mesmo número de ganchos. Qualquer tipo de prendedor, como bráquetes corrediços, colunas e suspensores, pode ser usado. Os prendedores que não são rígida e fixamente presos à barra de tampa superior 42 e à barra de tampa intermediária 44 são beneficiais já que se deslocam suave e uniforme- mente sobre as lâminas.

[00081] Conforme esquematicamente ilustrado na figura 3B, a modalidade ilustrada funciona substancialmente da mesma maneira que a modalidade da figura 3A, com a exceção de que, na modalidade da figura 3B, a bandeja de lâmina 20 não gira, porém, é inserida, de outro modo, a um ângulo Θ em relação ao plano horizontal HP através do robô de lâmina 12.

[00082] O ângulo Θ pode estar no intervalo de aproximadamente 15 a 90 graus em relação ao plano horizontal HP. Ao orientar a bandeja de lâmina em um ângulo Θ, um fluxo desejado através do tempo para fluido na câmara capilar pode ser alcançado ajustando-se a relação entre as forças gravitacionais e as forças capilares que atuam no fluido.

[00083] Conforme esquematicamente ilustrado, por exemplo, nas figuras 3A a 6, a tampa capilar 30 é disposta na bandeja com tampa capilar 40 de tal modo que as distâncias d1, d2 entre a superfície da tampa capilar 30 voltada para a bandeja com tampa capilar 40 e as barras de tampa capilar superior e intermediária 42, 44 possam ser variadas entre uma distância máxima, consulte a figura 3A, e uma distância mínima, consulte a figura 6.

[00084] No entanto, deve-se compreender que as distâncias d1, d2 não precisam ser iguais ou alteradas ao mesmo tempo ou não precisam ser alteradas na mesma taxa. Portanto, a distância d1 pode ser diferente da distância d2 e, por exemplo, a distância d1 pode ter um valor máximo enquanto a distância d2 tem um valor mínimo, ou vice versa.

[00085] Em modalidades, os fluidos 8a, 18a são fornecidos para uma lâmina 10 quando a lâmina está em uma posição inclinada, por exemplo, quando a lâmina 10 está em uma posição inclinada, consulte as figuras 4, 5, 6, 7, 9 e 11.

[00086] A figura 4 ilustra esquematicamente uma vista em corte transversal de uma modalidade do módulo de marcação capilar 100, 100', 100” em que uma quantidade de fluido 8a, por meio do bocal 9c, que é fornecida para uma lâmina 10 em uma posição inclinada é mostrada.

[00087] Em modalidades, o bocal 9c é configurado com uma extremidade distal chanfrada 9c', consulte, por exemplo, a figura 3A, configurada para fornecer um bocal livre de imersão por meio do qual o fluido 8a não é vertido na lâmina 10, porém, flui sobre a lâmina 10.

[00088] Conforme esquematicamente ilustrado pelas tubagens 9, 9a e 9b, o fluido 8a é fornecido a partir de um recipiente de fluido (8, consulte a figura 1A, não mostrado na figura 4) para um preaquecedor 120 configurado para aquecer o fluido que passa pelo aquecedor 120 até uma temperatura predeterminada antes que o fluido seja fornecido para a lâmina por meio de um bocal 9c disposto em uma parte distal da tubagem 9b.

[00089] Deve-se compreender que modalidades do módulo de marcação capilar compreendem diversas tubagens 9b e bocais 9c, de preferência, uma tubagem 9b e um bocal 9c para cada lâmina que pode ser processada no módulo de marcação capilar a fim de fornecer um abastecimento individual de fluido para cada uma das lâminas dispostas no módulo de marcação capilar.

[00090] Deve-se compreender que as modalidades podem compreender uma ou mais tubagens que se desviam de um possível preaquecedor e de um possível eliminador de bolhas para que o fluido possa ser fornecido diretamente do recipiente de fluido para a(s) lâmi-na(s) sem passar por um possível preaquecedor e um possível elimi-nador de bolhas.

[00091] Portanto, em modalidades, o aparelho de marcação automatizado 1 é configurado para controlar individualmente o abasteci mento de fluido para lâminas dispostas no módulo de marcação capilar. Por exemplo, o fluido pode ser fornecido para a(s) lâmina(s) como um fluxo de fluido contínuo por um período de tempo predeterminado. [00092] O preaquecedor 120 pode ser realizado como um aquecedor resistivo em linha, um aquecedor indutivo ou qualquer tipo de aquecedor que inclua um aquecedor por micro-ondas. Por meio de tal preaquecedor, nenhum aquecedor disposto abaixo da portadora de amostra é necessário para aquecer o fluido até uma temperatura desejada.

[00093] Alternativamente, um preaquecedor 120 pode ser integrado a um eliminador de bolhas 130 ou mesmo a uma pluralidade de elimi-nadores de bolhas 130, conforme ilustrado e descrito abaixo em relação às figuras 16A e 16B.

[00094] Para algumas aplicações, por exemplo, como marcação imunohistoquímica, a temperatura predeterminada do fluido pode ser configurada para ser de aproximadamente 30 graus Celsius a fim de impedir que a lâmina seja resfriada por um tampão de enxágue relativamente frio. Ao manter a temperatura da lâmina relativamente constante, mesmo durante enxágues, a taxa de reação da imunoincubação pode ser tornado relativamente consistente, fornecendo, desse modo, resultados de marcação mais consistentes. No entanto, deve-se compreender que, para outras aplicações, como hibridização in situ, que podem ocorrer a 37 graus Celsius ou 50 graus Celsius, a temperatura predeterminada pode ser diferente e também pode ser diferente para diferentes fluidos usados para a aplicação.

[00095] As modalidades do módulo de marcação capilar 100, 100', 100” também podem compreender um eliminador de bolhas 130, consulte as figuras 3A a 12. O eliminador de bolhas 130 pode ser disposto em conjunto com o preaquecedor 120 por meio de uma tubagem 9a ou pode estar contido no preaquecedor 120. O eliminador de bolhas 130 pode ser configurado para remover bolhas do fluido preaquecido antes que o fluido preaquecido seja fornecido a uma ou mais lâminas 10 por meio de uma tubagem 9b e do bocal 9c.

[00096] Conforme esquematicamente ilustrado na figura 3 a 12, o eliminador de bolhas 130 pode compreender, em algumas modalidades, um compartimento superior 132 ao qual o fluido aquecido é fornecido e um compartimento inferior 134 através do qual o fluido aquecido que tem possíveis bolhas removidas sai do eliminador de bolhas 130. As possíveis bolhas, como bolhas de ar, irão se mover para o compartimento superior 132 a partir do qual as bolhas de ar podem ser removidas por meio de saída de gás (não mostrada). Uma ilustração e uma descrição mais detalhadas de uma modalidade de eliminador de bolhas 130 são descritas abaixo em uma seção referente às figuras 16A e 16B.

[00097] Conforme esquematicamente ilustrado, por exemplo, nas figuras 4 e 5, quando uma quantidade de um primeiro fluido 8a foi fornecida à lâmina 10, o aparelho de marcação automatizado 1 é configurado para controlar o retentor de bandeja com tampa capilar 106 para mover a bandeja com tampa capilar 40 para que uma primeira extremidade 36, por vezes denominada como uma extremidade inferior, de uma tampa capilar 30 seja movida em direção à lâmina correspondente 10 para uma posição em que protuberâncias 33 (consulte as figuras 15A e 15B) da primeira extremidade 36 da tampa capilar 30 são contíguas à lâmina 10, consulte a figura 5.

[00098] Ademais, quando as protuberâncias 33 da primeira extremidade 36 da tampa capilar 30 ficam contíguas à lâmina 10, o aparelho de marcação automatizado 1 é configurado para controlar o retentor de bandeja com tampa capilar 106 para mover a bandeja com tampa capilar 40 para que uma segunda extremidade 38, por vezes denominada como uma extremidade superior, da tampa capilar 30 seja movida em direção à lâmina correspondente 10 para uma posição em que as protuberâncias 33 (consulte as figuras 15A e 15B) da segunda extremidade 38 da tampa capilar 30 fiquem contíguas à lâmina, consulte a figura 6.

[00099] Através dos movimentos das primeira e segunda extremidades 36, 38 da tampa capilar 30, um vão capilar 31 é formado entre uma reentrância central 35 da tampa capilar 30 e uma parte central da lâmina 10, consulte as figuras 6, 14B e 15. O vão capilar pode funcionar como uma câmara capilar ou uma câmara de hibridização. O vão capilar 31 pode estar na faixa de 10 a 300 micrômetros. Em algumas modalidades, o vão será, de preferência, de aproximadamente 140 micrômetros. Diversas modalidades podem ser configuradas para fornecer o fluxo desejado através da taxa, isto é, a taxa em que uma quantidade de fluido 8a dispensado próximo a uma extremidade mais alta da lâmina 10 fará com que uma quantidade correspondente de fluido 8a escoa pela extremidade inferior da lâmina 10. A dimensão do vão pode ser ajustada para acomodar fluidos que tem viscosidade maior ou menor, e para acomodar a inclinação ou ângulo em que a lâmina 10 é posicionada em relação ao plano horizontal.

[000100] Em modalidades, a tampa que forma o vão capilar está flutuando no fluido dispensado sobre a lâmina, através da qual problemas de alinhamento de lâmina podem ser evitados.

[000101] Em modalidades, por exemplo, de um módulo de marcação capilar de ISH, o aparelho de marcação automatizado 1 é configurado para controlar o retentor de bandeja de lâmina 102 para girar automaticamente a bandeja de lâmina 20 e as uma ou mais lâminas 10 a partir da posição A de inserção, por exemplo, vertical, para uma primeira posição inclinada B, sendo que, em tal posição, uma quantidade de um fluido, por exemplo, um reagente, é dispensada sobre a lâmina ou a amostra biológica por meio da sonda 16 disposta na primeira entrada de sonda 161. O aparelho de marcação automatizado 1 é adicionalmente configurado para controlar o retentor de bandeja de lâmina 102 para girar automaticamente a bandeja de lâmina 20 e as uma ou mais lâminas 10 a partir da primeira posição inclinada B para uma segunda posição inclinada C. Ademais, quando a(s) lâmina(s) 10 está na segunda posição inclinada C, o aparelho de marcação automatizado 1 é configurado para controlar o retentor de bandeja com tampa capilar 106 para mover automaticamente a bandeja com tampa capilar 40 e a tampa capilar 30 para que a primeira extremidade 36 da tampa capilar 30 seja movida em direção à lâmina correspondente 10 para uma posição em que a primeira extremidade 36 fica contígua à lâmina 10 e para mover automaticamente a segunda extremidade 38 da tampa capilar 30 em direção à lâmina correspondente 10 para uma posição em que a segunda extremidade 38 fica contígua à lâmina 10, através da qual a tampa capilar 30 é disposta em paralelo à lâmina 10 e através da qual um vão capilar 31 é formado entre uma reentrância central 35 da tampa capilar 30 e uma parte central da lâmina 10. O vão capilar 31 compreende o reagente fornecido para a amostra biológica e, devido ao vão capilar 31, a amostra biológica pode ser processada com um pequeno volume de reagente, por exemplo, um volume no intervalo de 10 a 100 microlitros. Por exemplo, em algumas modalidades, pode ser desejável utilizar um vão capilar para processar lâminas com o uso de 10 microlitros a 20 microlitros, ou 20 microlitros a 50 microlitros em outras modalidades, ou 50 microlitros a 100 microlitros em ainda outras modalidades, conforme desejado. A figura 11 ilustra esquematicamen-te uma dispensação de reagente a partir da sonda 16 sobre uma lâmina 10, quando a lâmina 10 é disposta em uma posição B, por exemplo, a um ângulo maior do que aproximadamente 45 graus em relação ao plano horizontal. No entanto, a lâmina poderia ser disposta em outro ângulo desejado. Ao dispor a lâmina em um ângulo desejado em rela ção ao plano horizontal, a sonda 16 pode ser, por meio da primeira entrada de sonda 161, localizada acima de uma localização desejada da lâmina e, através da mesma, um volume desejado de um reagente pode ser dispensado na localização desejada da lâmina 10, por exemplo, diretamente na amostra biológica disposta na lâmina 10 se a amostra é disposta diretamente abaixo da sonda 16. Além disso, ao dispor a lâmina a uma pluralidade de diferentes ângulos, a sonda 16 pode dispensar um regente para uma pluralidade de localizações na lâmina ou na amostra.

[000102] No entanto, conforme esquematicamente ilustrado na figura 12, deve-se compreender que em outras modalidades de, por exemplo, um módulo de marcação capilar de ISH, o reagente pode ser dispensado para a mesma localização da lâmina 10 que aquela ilustrada na figura 11, por exemplo, diretamente na amostra biológica, também quando a lâmina é disposta em um ângulo menor do que o plano horizontal, conforme ilustrado na figura 12, se a tampa de processamento 160 é dotada de uma segunda entrada de sonda 163 para a sonda 16 em uma posição diretamente sobre a amostra biológica.

[000103] Em ainda outras modalidades de um módulo de marcação capilar de ISH, determinadas etapas, como a dispensação de uma sonda sobre a lâmina 10, podem ocorrer fora do módulo de marcação, por exemplo, um reagente de ISH pode ser dispensado sobre uma lâmina em uma estação horizontal aberta antes ou depois da inserção da lâmina no módulo de marcação capilar de ISH.

[000104] Em modalidades, por exemplo, de um módulo de marcação capilar de IHC, o aparelho de marcação automatizado 1 é configurado para controlar o retentor de bandeja de lâmina 102 para girar automaticamente a bandeja de lâmina 20 e as uma ou mais lâminas 10 a partir da posição vertical A para a segunda posição inclinada C, sendo que, em tal posição, uma quantidade de um fluido 8a, por exemplo, uma solução tampão, é dispensada sobre a lâmina ou a amostra biológica por meio do bocal 9c, consulte a figura 4. Ademais, o aparelho de marcação automatizado 1 é configurado para controlar o retentor de bandeja com tampa capilar 106 para mover automaticamente a bandeja com tampa capilar 40 e a tampa capilar 30 para que a primeira extremidade 36 da tampa capilar 30 seja movida em direção à lâmina correspondente 10 para uma posição em que a primeira extremidade 36 fica contígua à lâmina 10, consulte a figura 5, e para mover automaticamente a segunda extremidade 38 da tampa capilar 30 em direção à lâmina correspondente 10 para uma posição em que a segunda extremidade 38 fica contígua à lâmina 10, consulte a figura 6, através da a tampa capilar 30 é disposta em paralelo com a lâmina 10 e através da qual um vão capilar 31 é formado entre uma reentrância central 35 da tampa capilar 30 e uma parte central da lâmina 10, em que o vão capilar é preenchido com o fluido 8a fornecido. O vão capilar 31 funciona como uma câmara capilar.

[000105] Conforme esquematicamente ilustrado na figura 7, um segundo fluido, por exemplo, um reagente 18a, é fornecido para a lâmina 10 em uma posição acima do vão capilar preenchido por fluido 31, através do qual a quantidade do segundo fluido, devido à gravidade, flui para o interior do vão capilar 31 fazendo com que o fluido no vão capilar 31 seja removido do fundo do vão capilar 31 e com que o segundo fluido seja puxado para o interior do vão capilar 31 e flua de modo descendente no vão capilar 31 para cobrir a amostra biológica 3 disposta na lâmina 10, fazendo com que a amostra biológica seja processada pelo reagente.

[000106] Em modalidades, quando na primeira posição inclinada B, as uma ou mais lâminas 10 são dispostas a um ângulo Θ no intervalo de aproximadamente 20 a 90 graus em relação ao plano horizontal HP que permite que uma quantidade de reagente seja dispensada direta mente em um pequeno espécime (não mostrada) posicionado na face aberta da lâmina 10 e aproximadamente centralizado na lâmina 10. Portanto, o reagente pode ser dispensado diretamente sem utilizar o fluxo capilar através, por exemplo, uma sonda de ISH, em que pode ser desejado dispensar a sonda diretamente, ao invés de dispersá-la em um capilar preenchido por fluido. Além disso, quando na segunda posição inclinada C, as uma ou mais lâminas 10 são dispostas a um ângulo Θ no intervalo de aproximadamente 10 a 40 graus em relação ao plano horizontal HP, de preferência, no intervalo de aproximadamente 15 a 30 graus em relação ao plano horizontal HP e, com máxima preferência, aproximadamente 20 graus em relação ao plano horizontal HP, consulte a figura 3. Uma descrição adicional de modalidades adequadas para aplicações de dispensação direta, como ISH, é mostrada na figura 11 e na figura 12 e descrita abaixo nas descrições detalhadas da figura 11 e da figura 12. Em determinadas aplicações, por exemplo, em aplicações de ISH, o vão capilar formado é configurado para funcionar como uma câmara de hibridização.

[000107] Conforme esquematicamente ilustrado na figura 8, o aparelho de marcação automatizado 1 pode ser configurado para controlar o retentor de bandeja com tampa capilar 106 para mover automaticamente a bandeja com tampa capilar 40 e as uma ou mais tampas capilares 30 para frente e para trás em uma direção paralela em relação às uma ou mais lâminas 10, conforme indicado pela seta na figura 8, através da qual a depleção local de fluido ou reagente no vão capilar 31 pode ser evitada e através da qual o fluido ou reagente no vão capilar 31 pode ser misturado. Ao evitar a depleção de fluido/reagente e/ou mistura de fluido/reagente no vão capilar 31, o processamento, por exemplo, a marcação, da amostra biológica exposta ao fluido/reagente no vão capilar 31 pode ser aperfeiçoado.

[000108] Além disso, o aparelho de marcação automatizado 1 pode ser configurado para controlar o retentor de bandeja com tampa capilar 106 para mover a bandeja com tampa capilar 40 e as uma ou mais tampas capilares 30 ao longo do eixo geométrico, no sentido do comprimento, da lâmina 10, e sendo que, em algumas modalidades, o movimento pode ser de aproximadamente 1 a 5 mm e pode ter uma velocidade de aproximadamente 0 a 25 mm/s. O movimento pode ser pausado com as tampas capilares 30 em cada posição de extremidade. Outras modalidades podem incluir movimentos laterais ao invés de movimentos axiais no sentido do comprimento. Movimentos circulares também podem ser usados.

[000109] Deve-se observar que, após as etapas de incubação, um enxágue com tampão de lavagem pode ser efetuado substancialmente, conforme ilustrado na figura 6. Desse modo, com um enxágue, a etapa de incubação e reações correspondentes podem ser interrompidas e a lâmina pode estar pronto para receber reagentes adicionais, por exemplo, um segundo anticorpo, um reagente de visualização, etc. Alternativamente, quando uma lâmina foi enxaguada com tampão de lavagem, a mesma pode ser "pausada" ou permanecer sob tampão, desde que desejado, sendo que as forças capilares retêm o tampão de enxágue.

[000110] Em modalidades, conforme esquematicamente ilustrado na figura 9, o aparelho de marcação 1 é adicionalmente configurado para fornecer uma quantidade de fluido, por exemplo, um fluido de lavagem, para a lâmina 10 quando a tampa capilar 30 for removida da lâmina após o processamento de amostra, garantindo, desse modo, que a tampa 30, devido aos efeitos de sucção, não dilacera a amostra biológica, retirando a da lâmina 10, quando a tampa capilar 30 é removida. [000111] Conforme esquematicamente ilustrado na figura 10, uma ou mais lâminas de limpeza 10a disposta em uma bandeja de lâmina 20 podem ser inseridas no módulo de marcação capilar 100, 100', 100”. A lâmina de limpeza 10a compreende diversas nervuras ou cerdas ou superfície de limpeza 10b configurada para limpar uma tampa capilar 30 quando, em uso, a tampa capilar 30, por meio do retentor de bandeja com tampa capilar 106, é movida para trás e para frente em uma direção paralela à lâmina de limpeza 10a, conforme ilustrado pelas setas na figura 10.

[000112] Em algumas modalidades, uma solução de limpeza, como um removedor de DAB ou qualquer solução de limpeza de tampa desejada, pode ser combinada à lâmina de limpeza 10a a fim de aperfeiçoar a limpeza da tampa.

[000113] Em modalidades, o módulo de marcação capilar 100, 100', 100” pode ser adicionalmente configurado para impedir a condensação no módulo durante o processamento. Em modalidades, a tampa de recipiente de processamento 160 pode ser configurada para impedir a condensação no módulo de marcação capilar 100, 100', 100” e configurada, desse modo, para impedir a formação de gotículas de água no módulo de marcação capilar 100, 100', 100”, sendo que tais gotículas de água podem fazer com que um fluido, por exemplo, um reagente, dispensado para uma amostra biológica, seja diluído durante o processamento de amostra.

[000114] Conforme esquematicamente ilustrado na figura 12, a tampa de recipiente de processamento 160 pode ser dotada de uma camada preventiva de condensação 164 disposta em uma superfície interna da tampa de recipiente de processamento 160 voltada para as lâminas 10 e as tampas capilares 30, e configurada para impedir a condensação no módulo de marcação capilar 100, 100', 100”. Por exemplo, a camada preventiva de condensação 164 pode compreender alumínio ou outro material condutor de calor ou um material absorvente de fluido.

[000115] Em modalidades, a tampa de recipiente de processamento 160 pode compreender um elemento de aquecimento 168 disposto, por exemplo, no lado exterior da tampa de recipiente de processamento 160. O elemento de aquecimento 168 pode ser configurado para fornecer calor para a tampa de recipiente de processamento 160 a fim de impedir a condensação no módulo de marcação capilar.

[000116] A figura 13 ilustra esquematicamente uma vista em perspectiva de uma modalidade de uma bandeja com tampa capilar 40 que compreende dez tampas capilares 30. No entanto, deve-se compreender que a bandeja com tampa capilar pode ser configurada para qualquer número de tampas capilares.

[000117] Em modalidades e conforme esquematicamente ilustrado na figura 15A e na figura 15B, a tampa capilar 30 compreende, em uma superfície voltada para uma amostra biológica, uma superfície central 35 e duas superfícies distais projetantes 33 (por vezes denominadas como protuberâncias 33).

[000118] As superfícies distais projetantes 33 são dispostas de modo distal em relação à superfície central 35 e em lados opostos da superfície central 35. Além disso, as superfícies distais projetantes 33 são configuradas para formar espaçadores quando em contato com uma lâmina 10, formando, desse modo, o vão capilar anteriormente mencionado 31 entre a superfície central 35 da tampa capilar 30 e a lâmina 10, consulte, por exemplo, a figura 14B.

[000119] Na modalidade da figura 14C, o reservatório de entrada 39' é disposto em um formato de garfo que pode penetrar a superfície de qualquer gotícula que pode acumular na superfície, por exemplo, de uma etiqueta de lâmina, impedindo, desse modo, qualquer acúmulo e liberação repentina de fluido a partir de uma gotícula. Uma modalidade de uma forma de captura de gotícula para um reservatório de entrada é ilustrada na figura 15B.

[000120] A tampa capilar 30 pode compreender vidro e as superfí cies distais projetantes/espaçadores 33 podem compreender uma ou mais camadas de tinta ou outro material adequado que tenha uma espessura predefinida a fim de fornecer uma distância precisa entre a superfície central 35 da tampa capilar 30 e a lâmina 10.

[000121] No entanto, deve-se compreender que a tampa capilar 30 pode ser moldada em um material plástico, como policarbonato, ou outro material adequado.

[000122] Conforme esquematicamente ilustrado na figuras 15A e 15B, a tampa capilar 30 é dotada de uma superfície chanfrada 39 em uma parte central superior. A superfície chanfrada 39 é configurado para funcionar como um reservatório de entrada 39 no vão capilar 31, quando em uso, a tampa capilar 30 é disposta na lâmina 10. O reservatório de entrada 39 é configurado para reter um volume de flui-do/reagente predefinido, como um volume de até aproximadamente 300 microlitros.

[000123] Em modalidades e conforme esquematicamente ilustrado na figuras 15A e 15B, a tampa capilar 30 é dotada de uma ponta de gotejamento 37 em uma parte central inferior da tampa capilar 30. A ponta de gotejamento 37 é configurada para fornecer uma remoção controlada de fluido da parte inferior do vão capilar 31. Por meio da ponta de gotejamento 37, uma frente fluida uniforme de fluido/reagente fornecido para a parte superior do vão capilar é realizada, consulte a figura 14B, conforme comparada à frente fluida desuniforme em um vão capilar criado entre uma lâmina 10 e uma tampa 30 sem ponta de gotejamento, conforme ilustrado na figura 14A.

[000124] A figura 16A é uma vista explodida de uma modalidade de uma combinação de aquecedor de fluido/eliminador de bolhas duplo 130'. Um aquecedor 120 inclui um elemento de aquecimento 121 e um sensor de temperatura 122 para controlar a temperatura. O aquecedor 120 pode ser produzido a partir de alumínio ou outros materiais com propriedades de condução de calor desejadas. As placas não reativas 123,125 podem ser dispostas em ambos os lados do aquecedor 120 para que o fluido seja aquecido pelo aquecedor 120, porém, não entra em contato direto com o aquecedor 120. Os materiais adequados para placas não reativas podem incluir aço inoxidável ou outros materiais termicamente condutores, como polímeros termicamente condutores, que são não reativos com os fluidos que podem ser aquecidos pelo aquecedor 120.

[000125] Em uma modalidade, um primeiro eliminador de bolhas 139 e um segundo eliminador de bolhas 139' pode ser incluído em combinação dom o aquecedor de fluido/eliminador de bolhas 130'. Isso permite que o eliminador de bolhas 139 seja usado para aquecer e remover bolhas de um primeiro fluido, por exemplo, água destilada, e que o segundo eliminador de bolhas 139' seja usado para aquecer e remover bolhas a partir de um segundo fluido, por exemplo, um tampão de lavagem.

[000126] Conforme esquematicamente ilustrado na figura 16B, os eliminadores de bolhas 139 e 139' mostrados na figura 16A funcionam como a seguir. Um fluido 140 entre no eliminador de bolhas 139 através da entrada 134 e flui através do defletor 133 para sair através das saídas 135 e 137. Quaisquer bolhas 131 que possam ter sido formadas no interior do fluido irão subir para a metade superior 136 do eli-minador de bolhas e percorrer um trajeto até a saída de bolhas 132. A saída 132 pode ser fechada por uma válvula para que a pressão do ar encerrado impeça que o fluido flua para for a através da saída 132. Então, em um momento desejado, a saída 132 pode ser aberta para permitir que bolhas acumuladas 131 sejam ventiladas.

REIVINDICAÇÕES

Claims

1. Aparelho de marcação automatizado (1) para processamento de pelo menos uma amostra biológica disposta em uma lâmina, o aparelho caracterizado pelo fato de que compreende: pelo menos um módulo de marcação capilar (100, 100', 100”) que compreende: um retentor de bandeja de lâmina (102) configurado para reter de modo destacável uma bandeja de lâmina (20) configurada para reter uma ou mais lâminas (10), e um retentor de bandeja com tampa capilar (106) configurado para reter de modo destacável uma bandeja com tampa capilar (40) configurada para reter uma ou mais tampas capilares (30), em que a bandeja de lâmina (20) pode ser removida independentemente da remoção da bandeja com tampa capilar (40), e um primeiro recipiente de fluido (8) que compreende um primeiro fluido (8a), em que o aparelho de marcação automatizado (1) é configurado para automaticamente: controlar o retentor de bandeja de lâmina (102) para girar as uma ou mais lâminas (10) de uma posição de inserção para uma ou mais posições inclinadas, e controlar o retentor de bandeja com tampa capilar (106) para mover as uma ou mais tampas capilares (30) em direção às uma ou mais lâminas (10) a fim de formar automaticamente um vão capilar (31) entre cada lâmina e cada tampa capilar, em que o dito vão capilar (31) funciona como uma câmara capilar; e para automaticamente fornecer uma quantidade do primeiro de fluido (8a) do recipiente de fluido (8) para a lâmina (10) quando na dita posição inclinada.

2. Aparelho, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o aparelho de marcação automatizado (1) é configu- rado ainda para automaticamente: controlar o retentor de bandeja com tampa capilar (106) para mover uma primeira extremidade (36) de uma tampa capilar (30) em direção a uma lâmina (10) correspondente para que a primeira extremidade (36) da tampa capilar (30) fique contígua à lâmina (10), e para mover uma segunda extremidade (38) da tampa capilar (30) em direção à lâmina (10) correspondente para que a segunda extremidade da tampa capilar fique contígua à lâmina (10), através da qual um vão capilar (31) é formado entre uma reentrância central da tampa capilar e uma parte central da lâmina, sendo que o vão capilar (31) é configurado para compreender o primeiro fluido fornecido (8a).

3. Aparelho, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o aparelho de marcação automatizado (1) é configurado ainda para: por meio de uma sonda de reagente (16), fornecer diretamente uma quantidade de um reagente (18a), como o primeiro fluido (8a), para a amostra biológica (3) disposta na lâmina (10), através da qual o vão capilar (31) formado pode funcionar como uma câmara de hibridização.

4. Aparelho, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o aparelho de marcação automatizado (1) é configurado ainda para: fornecer, por meio de uma entrada de sonda ou um bocal, uma quantidade de um segundo fluido a partir de um segundo recipiente de fluido para a lâmina (10) em uma posição acima do vão capilar (31) preenchido por fluido, através da qual a quantidade do segundo fluido, devido à gravidade, flui para o interior do vão capilar (31), fazendo com que uma quantidade do primeiro fluido no vão capilar seja removido do fundo do vão capilar (31) e com que o segundo fluido seja puxado para o interior do vão capilar (31) e flua de modo descendente no vão capilar para cobrir a amostra biológica (3) disposta na lâmina (10).

5. Aparelho, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que as uma ou mais lâminas de amostra (10), quando na posição inclinada, são dispostas a um ângulo no intervalo de aproximadamente 10 a 40 graus em relação ao plano horizontal.

6. Aparelho, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que ainda compreende uma ou mais tubagens (9, 9a, 9b) conectadas a um ou mais recipientes de fluido (8), sendo que as tubagens (9, 9a, 9b) compreendem, em uma parte distal, um ou mais bocais (9c) para dispensar um fluido para as uma ou mais lâminas (10), em que o bocal é configurado com uma abertura de extremidade distal chanfrada (9c') para fornecer um bocal livre de imersão (9c) por meio do qual o fluido (8a) não é gotejado na lâmina (10), porém, flui sobre a lâmina (10).

7. Aparelho, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que ainda compreende um robô de fluido (14) configurado para operar uma sonda (16): para aspirar uma porção de um reagente contido em um recipiente de reagente (18); para transferir a porção aspirada do reagente (18a) para uma posição acima de uma lâmina (10) ou uma amostra biológica (3); para dispensar uma quantidade da porção aspirada do rea-gente (18a) para a lâmina (10) ou a amostra biológica (3).

8. Aparelho, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que o aparelho de marcação automatizado (1) é configurado para controlar o retentor de bandeja com tampa capilar (106) para mover automaticamente uma ou mais tampas capilares (30) para frente e para trás em uma direção paralela ao longo do eixo de comprimento da lâmina (10), através da qual a depleção local do fluido no vão capilar (31) é evitada e/ou o fluido no vão capilar (31) é misturado.

9. Aparelho, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que o aparelho de marcação automatizado (1) é configurado para: fornecer uma quantidade de fluido para a lâmina (10) quando a tampa capilar (30) for removida da lâmina após o processamento de amostra, garantindo, desse modo, que a tampa (30) não dilacere, devido aos efeitos de sucção, a amostra biológica (3), retirando a da lâmina (10), quando a tampa capilar (30) é removida.

10 . Aparelho, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que compreende ainda um preaquecedor (120) configurado para aquecer o fluido (8a) até uma temperatura predeterminada antes que o fluido seja dispensado para a lâmina (10).

11 . Aparelho, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que a tampa capilar (30) em uma superfície voltada para uma amostra biológica (3) compreende uma superfície central (35) e duas superfícies distais projetantes (33), sendo que as superfícies distais projetantes são dispostas de modo distal à superfície central (35) e nos lados opostos da superfície central (35), em que as superfícies distais projetantes (33) são configuradas para formar espaçadores quando em contato com uma amostra lâmina (10), sendo que as superfícies distais projetantes (33) que tem uma espessura predefinida a fim de fornecer uma distância exata entre a superfície central (35) da tampa capilar (30) e a lâmina (10) quando as superfícies distais projetantes da tampa (30) ficam contíguas à lâmina (10), formando, desse modo, o vão capilar (31) bem definido entre a superfície central (35) da tampa capilar (30) e a lâmina (10).

12 . Aparelho, de acordo com a reivindicação 11, caracteri zado pelo fato de que a tampa capilar (30) em uma parte superior central é dotada de uma superfície chanfrada (39) que funciona como um reservatório de entrada (39') no vão capilar (31), quando em uso, as superfícies distais projetantes (33) da tampa capilar (30) ficam contíguas à lâmina (10).

13 . Aparelho, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a tampa capilar (30) em uma parte central inferior é dotada de uma ponta de gotejamento (37), sendo que a ponta de gotejamento (37) é configurada para fornecer uma remoção controlada de fluido da parte inferior do vão capilar (31), através da qual uma frente fluida uniforme de fluido fornecido para a parte superior do vão capilar (31) pode ser realizada.

14 . Aparelho, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizado pelo fato de que o módulo de marcação capilar (100, 100', 100”) compreende um conduto de umidade (152) disposto em uma parte inferior de um recipiente de processamento (150) do módulo de marcação capilar (100, 100', 100”), sendo que o conduto de umidade (152) é configurado para reter um volume de líquido e impedindo, desse modo, a evaporação de fluido no módulo de marcação capilar (100, 100', 100”).

15 . Aparelho, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizado pelo fato de que o módulo de marcação capilar (100, 100', 100”) compreende ainda uma tampa de recipiente de processamento (160) configurada para impedir a condensação no interior do módulo de marcação capilar (100, 100', 100”) e configurado, desse modo, para impedir a formação de gotículas de água no módulo de marcação capilar (100, 100', 100”), sendo que tais gotículas de água podem fazer com que um fluido dispensado para uma amostra biológica (3) seja diluído durante o processamento de amostra.

16 . Aparelho, de acordo com a reivindicação 15, caracteri zado pelo fato de que a tampa de recipiente de processamento (160) é dotada de um elemento de aquecimento (168) disposto no lado exterior da tampa de recipiente de processamento (160) e configurado para fornecer calor para a tampa de recipiente de processamento (160) a fim de impedir a condensação no módulo de marcação capilar (100, 100', 100”).

17 . Método automatizado para processamento de pelo menos uma amostra biológica (3) disposta em uma lâmina (10), caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de: fornecer pelo menos um módulo de marcação capilar (100, 100', 100”) que compreende: um retentor de bandeja de lâmina (102) configurado para reter de modo destacável uma bandeja de lâmina (20) configurada para reter uma ou mais lâminas (10), e um retentor de bandeja com tampa capilar (106) configurado para reter de modo destacável uma bandeja com tampa capilar (40) configurada para reter uma ou mais tampas capilares (30), em que a bandeja de lâmina (20) pode ser removida independentemente da remoção da bandeja com tampa capilar (40), fornecer um primeiro recipiente de fluido (8) que compreende um primeiro fluido (8a), controlar automaticamente o retentor de bandeja de lâmina (102) para girar as uma ou mais lâminas (10) de uma posição de inserção para uma ou mais posições inclinadas; e controlar automaticamente o retentor de bandeja com tampa capilar (106) para mover as uma ou mais tampas capilares (30) em direção às uma ou mais lâminas (10) a fim de formar automaticamente um vão capilar (31) entre cada lâmina (10) e cada tampa capilar (30), em que o dito vão capilar (31) funciona como uma câmara capilar; e fornecer automaticamente uma quantidade do primeiro flui do (8a) do recipiente de fluido (8) para a lâmina (10) quando na dita posição inclinada.