BR102012007785A2 - síntese de beta-nucleosídeos - Google Patents

Abstract

síntese de beta-nucleosídeos. um processo de estereosseletivamente sintetizar b-nucleosídeo, por exemplo, 2'-deoxi-2,2'-difluorocitidina, é descrito. o processo inclui reagir um composto de tetrahidrofurano da seguinte fórmula: em que sendo que r1, r2, r3, r4, e l como definidos na especificação, com um derivado de nucleobase na presença de um agente oxidante.

Description

SÍNTESE DE BETA-NUCLEOSÍDEOS

ANTECEDENTES 2 ' -Deoxin.ucleosi.deos e seus análogos são agentes terapeut içamente importantes. Por exemplo, gencítabina, isto ê, 2'-deoxi-2,2'-di fluorocitidina, pode ser usado para tratar infecção viral e câncer. Veja, por exemplo, Patentes dos Estados Unidos 4,526.588 e 4.808.614.

Em geral, cada 2' - deoxi núcleos ídeos tem mais do que um centro quinai e pode ocorrer como múltiplos estereoisômeros. Nem todos os estereoisômeros são terapeutiçamente ativos. Várias rotinas sintéticas estereosselefi vas para 2 -deoxi -[5 -riuc 1 eosídeos foram desenvolvidas. Nenhuma delas á satisfatória, Hã uma necessidade de desenvolver uma rotina mais eficaz para estereosseletivair.ente sintetizar 2'~ deoxinúcleos ídeos.

SUMÁRIO

Um aspecto des-ta invenção se refere a um processo dei sintetização de um composto de β-núcleosideo da formula {I): if). na qual cada dentre Rj e R3, independentemente, é H, alquiia, ar 11a, aralquila, alquildiarilsi1ila, tr íalqui Isi 1 ila, triarilsilíla, P.C (O) - , RR/ NC (O) - , ROO (O) - , RC(S)-, RR'NC CS)-, ou ROC(S) - ; cada dentre R e R' , independentemente, sendo H, alquila, arila, ciedoalquila, het.erocicloa Iquíla, ou heteroarila; cada dentre R3 e R,s, independentemente, é H ou flúor; e B é em que Rs é H, alquila, ou arila; Rs é H, alquila, alquenila, halo, ou arila; X é N ou C-R", R" sendo H, alquila, alquenila, halo, ou arila; e Y é um grupo de proteção de amina. O processo inclui reagir, na presença de um agente ox.ida.nte, um composto de tetrahidrofurano da fórmula (II) : L nh. sendo que RL, R2, R3, e Rt são como definidos acima; L é flúor, cloro, brorao, ou lodo, com ura derivado de nucleobase d a. s e q u i n t e f õ r mu 1 a.: sendo que R5, R6, X, e Y são como def inidos acima e Z é um grupo de proteção de hidroxíla.

Nos processos acima, os compostos das fórmulas (I) e (II) podem caracterizar que Rt ê H, alquila, aralquíla, alqui 1 diari 1 si 1 ila, trialquilsilila, tríarilsi 1 i 1 a , ou RC (O) - ; e R2 é RC (O) - , RR ' NC <O) - , ROC {O) - , RG { S ) - r RR' NC (S} -, ou ROC (S) - ; cada dentre R e R' , independentemente, senado H, alquila, arila, cicloalquila, heterocicloalquila, ou heteroarila. Em. algumas modalidades, o composto β- nucleosídeo da fórmula (I) tem uma ou mais das seguintes características; Rt é tritíla, (CHdaC, alquildiariisi1ila, trialquilsilila, ou triarilsilila, R:; é alquil-C (O) - ou aril-C (O) (por exemplo, PhC (O) - ) , e cada dentre R3 e R4 é flúor; e o composto da fórmula (II) tem uma ou mais das seguintes características: L ê I, e Rj ê tritila, (CHj) 3C, a 1 qui 1 diarilsi 1 ila, trialquilsi 1 i 1 a, ou t.r 1 ari 1 si 1 i 1 a , R;. ê alqui1-C(O)- ou aril-C(O) (por exemplo, benzoíla); e cada dentre R3 e R.t é flúor. Observe, a ligação " -™··" " mostrada na formula (II) significa qualquer relação con f igurac iona1 entre o L substituirite e o anel de tetrahidroíurano {ambos dos quais são também mostrados na mesma fórmula), por exemplo, a, β, ou uma mistura de a e β em qualquer relação, O derivado de nucleobase usado no processo descrito acima pode caracterizar que cada dentre R3 e Re é t r imetilsilila (TMS) . O agente oxidante usado no processo pode ser Bn, H202, Cd, Clj, O3, F2, ácido 3 -cloroperbezóico (MCPBA) , azobisisobutironitrila (AIBN) , 2,2,6,6-tetrametilpiperidina 1-oxila (TEMPO), ou um sal incluindo um lon selecionado do grupo consistindo em Fe3*, Ce4*, Au3‘, Co"'*, N03', Mn04‘, Cr207J" , HSOã', e S;;0-8‘:* . Pode também ser um peroxide tal como peróxido de hidrogênio ou perõxido de sódio. A reação acima pode ser realizada em um solvente orgânico ou mistura de solvente (por exemplo, tolueno, acetoní trila, ou uma mistura de tolueno e acetonitrila) a 15-150 °C.

Um exemplo do processo acima é reagir com , na presença de (ΝΓΗ*) 2S2Oe ou K2S.2Os para formar O processo desta invenção pode também incluir converter o composto de β-nucleosídeo para um composto da fórmula. (I.I.I) : II). sendo que R3., R,t, e B são como definidos acima.

Nos processos acima, o composto da fórmula (II), um derivado de tetrahídrofurano , pode ser preparado reduz indo-se um composto de lactona da seguinte fórmula (.IV) : (IV). sendo que R,5, R4, e B são corno definidos acima, para um composto de furanose da seguinte fórmula: sendo que R3, R4, e B são como definidos acima, e convertendo-se o composto de furanose para c composto de tet.rahid.rofurano da fórmula (II). O composto da fórmula (IV), sucessivamente, pode ser preparado primeiro tratando com ácido um composto da seguinte fórmula: sendo que cada dentre R3 e R4, índependeatemente, ê H ou halo; R-? é H, aiquila, atila, cicloalquila, heteroalquila, ou hetereoarila; e cada dentre Ra e R9, independentemente, é um H ou grupo de proteção de hidroxila» ou Re e R9, juntos, são C,.-3 alquileno, em seguida reagindo o produto resultante do tratamento acima com um composto da seguinte fórmula: sendo que R:i é alquila, araiquila, alquiIdiarilsi 1 ila, trialquilsilila, trxariIsilila, alquiIcarboni1a, ou arilcarboni la; e L' ê um grupo de saída, para produzir um composto da fórmula (V): (Vi. sendo que R;i, R3, e R4 são corno definidos acima, e finalmente protegendo o grupo OH livre no composto da formula !¥.) com R2, Um grupo de saída pode afastar-se, sob ionização ou deslocamento direto, com o par de elétrons de uma de suas ligações covalentes (veja, por exemplo, F. A. Carey e R. J. Sundberg, Advanced Organíc Chemistry, 3-- Ed. Plenum Press, 1990) . Os exemplos de um grupo de saída incluem, porém não estão limitados a metanossulfonato, triflato, p-toluenossul£onato, iodeto, brometo, cloro, e tr1f1uor oa c elato, O termo "alquila" se refere a um hidrocarboneto linear ou ramificado, contendo 1-6 átomos de carbono. Os exemplos de grupos alquila incluem, porém não estão limitados a media, etila, n... propíia, i-propíla, n-butila, i-butila, e t-butila. O termo "alcóxí" se refere a um radical de O- alquila. Os exemplos de grupos alcóxi incluem, porém não estão limitados a metóxi, etoxila, e fautõxi. O termo "alquileno" se refere a um grupo de di-radical de alquila. Os exemplos de "alquileno" incluem, porém não estão limitados a, metileno e etíleno. O termo "al.quen.ila" se refere a um hidrocarboneto linear ou ramificado tendo urna ou mais ligações duplas de carbono-carbono. Os exemplos de grupos alquenila incluem, porém não estão limitados a. etenila, 1-butenila, e 2-buten .il a . O termo "aralquila" se refere a uma fração de alquila tendo um ou mais substi tuíntes de ardia. Os exemplos de grupos aralquila incluem, porém não estão limitados a., bensíla e tritila (isto é, PhjC) . O termo "arila" se refere a um sistema de anel aromático de 6-carbono monocíclico, 10-carbono biciclico, 14-carbono tricíclico, Os exemplos de grupos arila incluem, porém não estão limitados a fenila, naftíla, e antracenila, O termo "alcoxicarbonila" se refere a um radical de alquil-O-carbonila. Os exemplos de grupos alco.xi.carbo.ni.la. incluem, porém não estão limitados a metoxicarbonila, etoxícarbonila, e t-butoxilcarboníla, O termo "aroxicarbonila" se refere a um radical de arí1-0-carbonila. Os exemplos de grupos aroxicarbonila inclem, porém não estão limitados a f enoxii carboni la e 1-naft a lenoxi carboni la . O termo "am.inocarbon.ila" se refere a um radical (R) {Rr ) N-carboniia no qual cada. dentre R e R', independentemente, é H, alquila, ou arila. Os exemplos de grupos aminocarbonila incluem, porém não estão limitados a, dimetilaminocarbonila , metíletilaminocarbonila, e fení1aminocarboni1a.

Alquila, arila, alquenila, e alcóxi mencionadas aqui incluem ambas as frações substituídas e não substituídas. Os exemplos de substítuintes incluem, porém não estão limitados a halo, hidro.xi.la, amina, ciano, nitro, mercapto, alcoxicar.bon.ila, amido, carbóxi, alcanossulfonila, alquilcarbonila, earbamído, carbamila, carboxila, tloureído, tiocianato, sulfonamido, alquila, alquenila, alquirixla, alqui lõxí, arila, heteroaxila, ci.Gli.la, e heterociclila, na. qual a, alquila, alquenila, alquinila, alqui lõxí, a.rila, heteroarila, ciclíla, e heterociclila também podem ser substituídas. O termo " furano.se" se refere a uma forma de acetal cíclico de cinco membros de urn açúcar.

Outras características, objetos, e vantagens da invenção serão evidentes a partir da descrição detalhada e das reivindicações abaixo, DESCRIÇÃO DETALHADA

Esta invenção se refere a um processo eficaz para estereosseletivamente sintetizar 2'-deox inucleos ídeos, mais especificamente, gencítabina, bem como novos intermediários produzidos nesse processo.

As transformações químicas convencionais podem ser usadas para praticar esta invenção. Uma pessoa versada na técnica seria capaz de determinar agentes químicos adequados, solventes, grupos de proteção, e condições de reação para essas transformações. Informação relevante é descrita, por exemplo, em R. Larock, Comprehensi ve Organic Transformations , VCK Pub1í shers (198 9); T . W . Greene e P.G.M . Wut s, Prc.tect.ive Groups ín Organic Synthesis, 3- Ed . , John Wiley and Sons (1999); L. Fieser e M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); e L. Paquette, ed. , Enciclopédia of Reagents for Organic Synthesis, John. Wiley and Sons (1995) e edições subsequentes destes. Para propósitos ilustrativos, uma modalidade do processo desta invenção é descrita aqui.

Como descrito no Esquema 1 abaixo, o composto 1 desta, invenção pode ser sintetizado do composto 3, que pode ser preparado por um método conhecido. Veja, por exemplo, L.W. Hertel US 4.526.988 ou T.S. Chou, e outros Synthesis, 1992, 565-570. Ά remoção de acetonída no composto 3 pode ser realizada com ácido trífluoroacático em urna mistura de um solvente orgânico apropriado e agua. em temperatura, elevada para proporcionar urna mistura de t r iidrõxi -pentanoaco 4, 3,5-diidróxí lactona 5, e ácido triidróxi-pentanóico 6. A mistura é em seguida tratada com cloreto de tritila a uma temperatura bem abaixo de 100°G para fornecer lactona 5...... px*otegida 1 em uma produção elevada. Lactona 1 pode. ser usada em uma. etapa de reação seguinte sem purificação.

Esquema 1 Esquema 2 abaixo mostra uma rotina sintética para um composto de β-núcleosideo do composto 1.

Esquema 2 11 2 O grupo hidroxiia do composto 1 é primeiro protegido para formar o benzoato 7 correspondente, que ê convertido para furanose 8 por um agente de redução. A conversão de composto 8 para. iodeto 10 pode ser feita de dois modos. Um é reagir furanose 8 com I2 na presença de uma trialquilfosfina ou trialquilfosfeto e uma base. O out.ro é converter furanose 8 para o cloreto, brometo, alqu.ilsulfon.ato, e arí Isulfonato 9 correspondente, seguido por uma reação entre o mesilato resultante e iodeto, tal como iodeto de sódio, iodeto de lítio, iodeto de potássio, ou iodeto de tet raaIquilamônio, a uma temperatura elevada. O iodeto 10 pode então ser usado para reagir com uma nucleobase, por exemplo, nucleobase protegida por TMS, na presença de um agente de oxidação, para proporcionar um β-nucleosídeo 11, que ê seletivamente desprotegido para produzir 3-benzei 1-gencitabina 2. A desproteção seletiva do composto 11 pode também enriquecer o β-anômero (isto é, composto 2) . A saponificação do composto 2 com uma base pode dar origem a gencitabína.

Esta invenção caracteriza a preparação de β-núcleosideo 11 como um produto principal dei uma mistura anoméríca {isto é, a relação de α - anômero: β - anâmero é cerca de 3:1) do Composto 10, um composto de iodeto. Sem ficar preso a teoria, esta. reação pode passar pelo seguinte mecanismo S7il mostrado no Esquema 3- para obter a estereoquímíca de β-nucleosídeo 11. Uma pequena quantidade de iodeto é produzida por oxidação de um íon de iodeto por um agente oxidante. O íon de iodeto pode ser o grupo de iodo no Composto 10. Alternativamente, alguém pode adicionar uma quantidade catalítica cie sal de íodeto à solução de reação. O Íodeto resultante é em seguida reagido com Composto 10 não oxidado para formar um ion de triÍodeto, Após a saída de 13', o composto se torna um intermediário de oxônío. O intermediário de oxônio é estabilizado pelo grupo é-ster na posição C-3 do anel de tetrahidrofurano formando-se um oxônío cíclico de seis membros. Uma vez que o grupo éster está localizado na base do anel de tetrahidrof urano, então é o oxônio cíclico de seis membros. Consequentemente« a fração de nucieobase ataca o oxônío da parte superior do anel de tetrahidrofurano devido ao impedimento estéríco mínimo, desse modo fornecendo S-núcleosideo 11.

Esquema 3 A cxidação do grupo iodo é essencial par*a a formação de um composto de ]3-núcleosideo. Pode ser realizada usando um agente ox.ida.nte tendo um potencial de oxidação/redução mais elevado (Ec) do que aquele do iode t.o. Os exemplos de tal agente oxidante incluem, porém não estão limitados a, Br2, H202, 02, Cl.2( Co, P2, MC PB A, A.IBN, TEMPO, e vários ions oxidantes (por exemplo, Fe}+, Ce4*, Aui+, CoJ*, N03*, MnOi, Cr2072', USO5" e S2082~) . Certamente, se. um composto de cloreto ou brometo é usado no lugar de um composto de iodeto (isto ê, Composto 10) , alguém necessita usar um agente oxidante tendo uni potencial de oxidação/redução mais elevado (E°) do que aquele de cloreto e brometo. Os potenciais de oxidação/redução de vários agentes oxidantes são bem conhecidos na técnica. Veja, por exemplo, Vanysek, Pe.tr "Electrochemical Series" , in Handhook of Chemistry and Physics: 90* Edição, 200.9 (Chemical Rubber Company) . O solvente usado para conduzir esta reação pode ser solvente orgânico, preferivelmente selecionado daqueles que; dissolvem o Composto 10. Os exemplos incluem., porém não estão limitados a tolueno, acetonitrila, benzeno, hexano, acetona, DMSO, diçlorometano, ou uma mistura dos mesmos. Por exemplo, a reação pode ser conduzida em tolueno, acetonitrila, o.u uma mistura de; tolueno e acetonitrila.

Para praticar esta invenção, as técnicas de proteção e desproteção são necessárias. Por exemplo, os esquemas mostram o uso de grupos de proteção de hidroxila e amina na sintetização de gencitabinu, Isto é, a furanose mostrada acima contém dois grupos de proteção de hidroxila e a nucleobase também mostrada acima contém um grupo de proteção de amina. Os grupos de proteção se referem àqueles que, ao serem presos às frações ativas (por exemplo, hidroxila ou amina), previnem essas frações de interferência com uma reação subsequente e podem ser removidos por métodos convencionais apôs a .reação. Os exemplos de um grupo de proteção de hidroxila incluem, porém não estão limitados a alquila, benzida, alíla, trítíla (isto é, trifeniImeti1), acila (por exemplo, benzo11, acetila, ou HOOC-X"- CO-, X" sendo alquíleno, alquenileno, cicloalquileno, ou aríleno), silila (por exemp 1 o, tr itne tilsilil, t.r i et; i 1 s i 1 i 1, e t ~ butildiir.etilsílila) , alcoxiIcarboníla, aminocarbonila (por exemplo, dime t i latní nocarbonila, metiletilaminocarbonila, e fenilaminocarboni3 a) , alcoximetila, herxziloximetila, e alquilmercaptometíla, Os exemplos de um grupo de proteção de amina incluem, porém não estão limitados a alquila, acila, e silila. Os grupos de proteção hidroxila e amina foram descritos em T.w. Greene e Wuts, Protectíve Gxoups in Organic Synthesís, 2* Ed. , John Wiley and Sons (1991). Ambos os grupos de proteção hidroxila e amina podem ser removidos por métodos convencionais após a reação.

Para o processo sintético descrito acima, a conclusão da reação pode? ser monitorada por qualquer método convencional, por exemplo, espectro ultravioleta, espectro infravermelho, ressonância nuclear magnética, cromatografia de camada fina, cromat ogra fia de gás, e cromatograf ia liquida de alto desempenho. Após a reação ser concluída, o produto pode ser facilmente usado sem purificação devido a sua produtividade elevada ou pode ser separado da mistura dei reação por um ou mais métodos de separação convencionais, tal como cromatografia, recristalização, extração ou destilação. Pode ser também purificado para produzir pureza enant iomérica mais elevada por métodos bem conhecidos na literatura. Veja, por exemplo, Patente dos Estados Unidos 5.223.608. Os compostos desta invenção podem ser usados sem purificação ou purificados, por exemplo, por recristalização usando um solvente orgânico ou croma t og raf ia.

Os exemplos específicos abaixo devem ser considerados como meramente ilustrativos, e não límitativos do restante da descrição de qualquer forma. Sem elaboração adicional, acredita-se que alguém versado na técnica possa, com base na descrição aqui, utilizar a presente invenção para sua extensão máxima. Todas as publicações recitadas aqui são desse modo incorporadas por referência em sua total idade. Síntese de Gencitabina (, 1) Puri f i cação de 3-(2,2 -dimeti 1 - 1 , 3 - dioxolan- 4 - i 1} -2,2-dífluoro-3-hidroxipentanoato de etila. 12 13 14 R = Metila ou Etilu 3 - (2,2 - D í m e t i 1 ~ 1, 3.d i οχ o 1 a n-4 -- i 1 ) - 2,2 - d i f 1 u o r o - 3 -- hidroxipentanoato de etila bruto 12 (8 g) foi preparado de acordo com o método descrito em Pedido de; Patente dos Estados Unidos No, de; Série 11/416.380. Antes do uso, foi purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com hexano/CH2C12/EtOAc para produzir 4,6 g de (3RJ-álcool 13, 0,9 g de (3S)-álcool 14, e 0,5 g de uma mistura dos dois. (2) Preparação de 5- trit-il- {3i?) -hidrõxi-S-lactona (composto 1} 1 (3.R i-Hi droxi pentanoato puro 3 (216 g, 850 mmol) , aceton.itrila (12 00 mL) , água (60 in.L) e ácido trifluoroacético {16 mL) foram carregados em um frasco de fundo redondo cie dois gargalos de 2 litros e em seguida aquecidos a 70~75°C durante 3-4 horas com agitação. A solução foi res.fria.da em teraperatura ambiente. Após o solvente ter sido removido, o resíduo foi azeotropado com tolueno (2x100 mL) . O resíduo resultante fo.í colocado sob vácuo. Ao resíduo (incluindo 4, 5, e 6} fora adicionados sequencialmente cloreto de trifenilmetila (cloreto de tritíla, 250,5 g, 1,06 equiv., 901 mmol}, EtOAc anidroso (6 00 mL} , DMAP (1,0 g, 0,01 equiv., 8,5 mmol) , e piridina (72,9 mL, 1,06 equiv., 901 mmol.) em temperatura ambiente. A suspensão foi aquecida a 55°C (interno) durante cerca de 6 a 1.6 horas, e em seguida resfriada a GcC durante 1 hora, A mistura foi em seguida, filtrada através de uma almofada Celite e a almofada foi enxaguada com EtOAc frio. O filtrado combinado tendo o composto 1 foi usado para a próxima etapa.

5~tritila- ( 3R) -hidrõxi-2,2-difluoro δ-lactona: H1 NMR (CDC13) : δ 3,41-3,45 (dd, 1H) , 3,63-3,66 (dd, 1H) , 4,45 (m, 1H5 , 4,5.3 (m, 1H) , 7,25-7,55 (m, 15H). (3) Preparação de S-t.ritil-3 - benzo ί 1 - δ - lactona . A solução de 5-tritíl-δ-lactona 1 em EtOAc foi resfriada a 5 -10°C. A esta solução foram, sequencialmente adicionados DMAP (1,0 g, 0,01 equiv., 8,5 mmol) e piridina (78,6 mL, 1,1 equiv., 935 mmol} , seguido por adição em gotas de cloreto de henzoíla. Durante a adição, a temperatura interna foi mantida abaixo de S°C. O banho para resfriamento foi. removido e a mistura foi agitada. em temperatura ambiente durante 1.6 horas e em seguida resfriado a 0 °C, A mistura resultante foi filtra.da através de uma almofada de celite e a almofada foi enxaguada com EtOAc frio. O filtrado combinado foi concentrado para produzir 405,35 g de 5-tríti1-3-benzoi1-δ-1 ac tona 7. Hl NMR <CDC13; : δ 3,49-3,53 (dei, Ui), 3,67-3,71 (dd, 1H) , 4,7 4 {rn, 1H) , 5,81 (m, 1H) , 7,25 - 7,5 5 (m, 2 0 H ) . H1 NMR {CDCl ,i! : 5 3,27 (d, 1H, OH), 3,44 (m, 2«), 4,53 {m, 1H) , 5,50 {m, 1H) , 5,89 (m, 1H) , 7,2-8,1 (tu, 20H), ( 4 ) Preparação de benzoato de (2R, 3R) - 4,4-d.if luor.5- hidrõxi-2 - {tritiloxime.til) te.trahidrof urano -3 - i la 5 - tri i i 1 - .3-benzoi 1 -5 - lactona 7 (405,35 g , 788,6 mmol) foi transferido por éter de rnetila de terc-butila (1970 raL) para um frasco de fundo redondo de dois ou três gargalos de 5 litros sob atmosfera de nitrogênio. Um funil de adição, preso ao frasco de 5 litros, foi cheio com Red Al (238,83 rnL, 1,06 equiv. , 836 mmol) . A solução foi adicionada em gotas durante um período de 80 minutos à solução acima de lactona 7 a 0°C ao mesmo tempo em que a temperatura interna foi mant i da a 3-9 °C.

Após a adição ter sido concluída, a solução resultante foi agitada durante outros 20 minutos. A esta solução foi adicionada isopropilamina (75,5 mL, 982,5 mrnol) nesta temperatura, seguido por adição era gotas de uma solução aquosa a 20% de diidrato dibásico de titrato de sódio (1360 mL) ao mesmo tempo em que a temperatura interna foi mantida, abaixo de S°C. Após a adição ter sido concluída, a mistura foi agitada até que duas camadas separadas fossem observadas. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2x500 mL) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura. (2x100 mL) , secadas em MgSCç, filtradas e concentradas para produzir 3 95 g (76.5,5 mrnol) de benzoato de (2R,3R)- 4,4-difluor-5-hídróxi-2 - (tritiloximetí1) tetrahidiOfurano -3-ila 8. H1 NMR ÍCDCL·,} : 5 3,27 (d, 1H, OH5 , 3,44 (m, 2H) , 4,58 (m, 1H) , 5,50 (m, 1H) , 5,89 (m, 1H.) , 7,2-3,1 (m„ 2 0H} . (5) Preparação de benzoato de (2R,3R) -4,4-di fluoro-5-(metí Isul f oni lóxi) - 2 - (tritiloximeti 1) tetrahi.drofura.no - 3 - ila LacLol de 5- txd. til- 3 - benzolla 8 (2 20 g, 4 2 6,4 mrnol) e diclororne cario (8-80 rnL) foram carregados para dentro de um frasco de fundo redondo de dois gargalos a ~0 °C. Et3N (64,7 g, 639,6 mmol) foi adicionado â solução resultante, seguido por adição em gotas de uma solução de cloreto de rnesila (73,2 g, 639,6 mmol) em diclorome tanto (88 mL) para manter a temperatura interna abaixo de 10*'C, Após a solução resultante ter sido agitada durante uma hora adicional, salmoura (200 mL) foi adicionada. As camadas foram separadas. A camada orgânica foi secada em MgSCg, filtrada., e concentrada para produzir 334,4 g do mesiiatc bruto 9, Hl NME {CDC l.i) : δ 3,02 (s, 3H) , 3,56 (m, 2H) , 4,50 ím, 1H) , 5,60 (dd, 1H), 6,03 (d, 1H), 7,21-8,15 (m, 20H). (6) Preparação de benzoato de (2R,3R) -4,4-difluor-5-iodo-2- (tritiloximeti1)tetrahidrofurano -3-ila Duas metodologias foram consideradas para preparar benzoato de (2R,3E> -4,4-diflucro-5- iodo-2 -(tritiloxímetil) tetrahidrofurano - 3 -ila 10 do composto 8, Método 1: Benzoato de (2R, 3.R) -4,4-dif luor-5- (met iisulfonilóxi ) -2-{tri t iloximet.il} tetrahidrofurano -3-ila 9 (2 g, 3,37 mmol) , acetona (2 0 mL) , e Mal (.5 g, 3 3,56 mmol) foram carregados para dentro de um frasco de fundo redondo. A mistura resultante fox refluxada durante >6 horas. HP.LC indicou que todo o material de partida 9 foi consumido. A mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente e filtrada. O solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi dividido entre diclorometano (105 mL) e água (65 m.L) . A camada aquosa foi extraída com diclorometano (30 ml.) . As camadas de diclorometano combinadas foram lavadas sequencial mente com uma solução aquosa a 5% de NaHSO, (2x30 roL) , uma mistura de 1 :1 de água e salmoura <20 mL) , e salmoura (2x20 mL). A solução fox secada em MgSOç, filtrada, e concentrada paira produzir 1,68 g de benzoato de (2R# 3R) -4,4-difluor-5- iodo-2 -(crí 111oximeti1) teLrahidrofurano - 3 - ila 10. H1 NMR (CDC1:}): δ 3,44-3,5-7 <dd, 2H) , 4,41 (m, 1H), 5,60-5,65 (dd, 1H), 6,95 (d, 1H), 7,21-8,15 (m, 20H). Método 2: 3z (0,524 g) e diclorometano (8 mL) foram carregados para dentro de um frasco de fundo redondo no escuro. A. esta solução foi adicionada em gotas uma solução de Ph.jP (0,634 g) em diclorometano {8 mL) em temperatura ambiente. A suspensão resultante foi agitada nesta temperatura durante 30 minutos e imidazol (9,734 g) foi adicionado. Após a suspensão resultante ter si.do agitada durante 5 minutos em temperatura ambiente, uma solução de lactol 8 (0,8 g) em diclorometano (8 m.L) foi adicionada em gotas e a solução resultante foi agitada durante a noite em temperatura ambiente. O hexano (30 mL) fox adicionado e em seguida a suspensão foi agitada durante; 10 minutos, filtrado, e concentrado para produzir 1,1. g de benzoato de {2R,3R)-4,4-diflúor-5-iodo-2 -(tritíloximetil) t ei trahidro £ uxano - 3 - i la 10. (7.) Preparação de benzoato de (2R, 3R, 5R) -5- (4-amino-2-oxop i r i ra i d i η - 1 (2 H) - i 1) - 4,4 - d i £ 1 uor - 2 ~ (t r i t i 1 ox i rn e t. i 1) tetrahidrof urano- 3 - i.l Doador de glicoatla (-1 g) £oí adicionado a uma solução de 10 mL contendo Dí-TMS-cítosina (1,77 g) e um oxidante (1 eq.) a 80!,C±3°C. O solvente e o oxidante usados são listados na tabela abaixo. A mistura de reação foi agitada durante 16 horas e monitorada por HPLC coro um detector de ü¥ 230 nm. O solvente foi removido e o produto foi purificado por cromatografia de coluna. Hl NMR ÍCDC135 : δ 3,52-3-,63 i :::), 2H) , 4,33 (m, 1H) , 5,74 (m, 1H) , 5,78 (d, 1H) , 6,4 0 (bt, 1H) , 7,21-8,15 (m, 22H) . As relações \\fa do produto resultante são mostradas na seguinte tabela. Ré: laça o de a nome r o cie Entrada PI :P2 X Oxidante Solvente cítosina glicosilada _ _ ______ ____ __ __________ __________p/a ________ 1 Tricila Bz I NaI04 ACNb 1,9/1 2 Tricila Bz 1 DTSP5 Tolueno 4,071 3 Tritila Bz I AIBM Tolueno 1,3/1 4 Tritila Bs I OXOKA Tolueno 3,9/1 5 Trit;i La Ha I KaSaQ„ Tnlueno 5,4/1 6 Tritila Bz I (.iMH4} ;;S,0„ Tolueno 5,9/1 7 Tritila Bz I <Wí,:}2S2Q„ THF 4,5/1f 8 Tritila Bz I (NHJ jSjOs ACN 18,0/1 Tolueno/ 9 Tritila Bs I (NH,,) Í:S3Ofl ACN 5/3 11,4/1 10 Tritila Bz Br {5JH4)2S3GB Tolueno 1,9/1 5,0 / 1 { 2 % 11 Tritila Bz Cl {NH<) 3S20B Tolueno conv.) 4,9/1 {13% 12 T r Ltíla Bz Br (NH,} jS, O,, ACN conv.> 13 Tritila Bz 1 K,,S;:0, ACN 1,9/1 14 Tritila Bz I Oxone' ACN 2,5/1 a DTBP = di-terc-butíIperóxido D ACN = acetonitrila (6) Preparação de benzoato de <2R,3R,5R)-5-<4 ~ami.ua~ 2.......... cxopirimidin-1{2H>.....11} -4,4-di£luor-2....(hídroximet il> t e t, r. a h i d ro f u ran. o - 3 - i 1 a O composto bruto 11 (16,3 g) e acetonitrila (20 mL) foram carregados para dentro de um frasco de fundo redondo. A esta solução foi adicionado HCl concentrado (6 N, 3 mL·) e a suspensão resultante foi agitada durante 16 horas. A mistura de reação foi filtrada e em seguida diluída com Et: O Ac (3 0 mL) a 4 5°C, A suspensão foi filtrada e secada para produzir 3,0 g de benzoato de (2R,3R,5R0- 5 -í4-amina- 2 -ox op i r .1 m i d x n - 1 (2 H) - i 1) -4,4 -d i flúor-2- < h i drox i ni e t i 1) tetrahidrofura.no- 3 - í la 15 com uma boa relação βία. H* NMR (DMSO-dfd : δ 3,73-3,84 (dd, 2H), 4,48 (m, 1H), 5,59 (m, 1H), 6,13 (d, 1H) , 6,35 (t, 1H), 7,6 0 ím, 2H) , 7,73 í t, 1H), 8,08 (m, 3H), 8,60 (bs, 1H), 9,60 (bs, 1H), (9 ) Prepa.ração de gene i tabina 15 Jí>

Dois métodos foram usados para converter o composto 15 para composto 16, Método 1: Composto 15 (80,6 g, 2 00 mmol) e MeOH (14 6 mL) foram carregados para dentro de um frasco de fundo redondo com agitação. A esta suspensão foi adicionado lentamente NH:s a 7N em MeOH (285,7 mL, 10 equiv. ) e a suspensão resultante foi agitada durante a noite. O solvente foi removido em vácuo. O resíduo resultante foi dissolvido em água (310 mL) com aquecimento. A solução aquosa resultante foi lavada com t-butiimetiléter e em seguida as camadas foram separadas. Este processo foi repetido várias vezes até que todos os orgânicos fossem removidos. À solução aquosa foi adicionado carvão (7 g) com agitação. A suspensão foi aquecida a 40°C durante 30 minutos e foi filtrada (sem resfriamento) através de uma almofada de celite. O volume foi reduzido para ~4 5 rnL, e isopropí lamina {18 0 tnL) foi adicionado com agitação. A mistura foi adicionado HC1 concentrado (6 N, 105 mL) em temperatura ambiente com agitação. Em seguida, a suspensão em agitação foi resfriada a e mantida durante a noite a 0-4°C. A suspensão resultante; foi filtrada. O resíduo sólido foi lavado com uma mistura de 4:1 fria de isopropílamina e água (2x10 mL) e secado para produzir 44,25 g de gencitabina 16. H1 NMR ÍD20) : 53,79 (dd, 1H), 3,97 (dd, 1)1), 4,05 (m, 1H) , 4,3 0 (m, 1H) , 6,16 (rn, 1H), 6,22 (d, 1H) , 7,9 5 (d, 1H) . Método 2: Composto 15 (8,3 g, 2 0 mmol) e MeOH (14 mL) foram carregados para dentro de um frasco de fundo redondo com agitação. A esta suspensão foram adicionados CF3CH2OH (5 mL) e K2C03 (2.6 g), A suspensão resultante foi agitada durante a noite. Após o solvente ter sido removido em vácuo, o resíduo resultante foi dissolvido em água (310 mL) com aquecimento e lavada com t-butílmetiléter várias vezes. A camada aquosa foi separada e tratada com carvão (0,5 g) com agitação. A suspensão foi aquecida a 40°C durante 30 minutos e foi filtrada (sem resfriamento) através de uma almofada de celxte. O volume; foi reduzido pura cerca de 5 mL e isopropílamina {2 rnL) foi adicionado com agitação. A esta mistura foi adicionado HC1 concentrado {6 N, 10 mL) em temperatura ambiente. Em seguida, a suspensão foi resfriada a e mantida durante a noite a 0-4°C. Após a fíItração, o resíduo sólido foi lavado com uma mistura fria de; 4:1 cie isopropi lamina e água (2x5 mL) e secado para produzir 4,5 g de geneitabina 16. H1 NMR (DaO) : 5 3,7.9 (dd, III», 3,97 (dd, 1H» , 4,05 (m, 1H), 4,30 (m, 1H) , 6,16 (m, 113} , 6,2 2 (d, 1H) , 7,95 ld, 1H) .

OUTRAS MODALIDADES

Todas as características descritas nesta especificação podem ser combinadas em qualquer combinação. Cada característica descrita. nesta especificação pode ser substituída por uma característica alternativa servindo o mesmo, equivalente, ou similar propósito. Desse modo, a menos que expressamente declarado de outro modo, cada característica, descrita é somente um. exemplo de uma série genérica de equivalentes de características similares. A partir da descrição acima, alguém versado na técnica pode facilmente verificar as características essenciais da presente invenção, e sem afastar-se do espirito e escopo da mesma, pode fazer com que varias mudanças e modificações da invenção se adaptem aos vários usos e condições. Des.se modo, outras modalidades estão também dentro das reivindicações.

Claims (22)

1 . Processo para preparar um composto de β-nucleos í de o da. fórmula (I) ; caracterizado pelo fato de que cada. um R:i e R2, independentemente, é H, alquila, arila, ara.lqu.ila, alquildiariIsi1ila, trialqui1silila, triariIsilila, RC{0) RR ' NC {.O) - , ROC (O) - , RC (S ) - , RR.' NC (S) - , ou ROC í S} - ; cada um R e R' , independentemer.te, sendo íi, alquila, arila, cícloalquila, heterocícloalquila, ou heteroarila; cada um R.s e R..$, independentemente, é H ou flúor; e B é em que R5 é II, alquila, ou. arila; R() é H, alquila. alquenila, halo, ou arila; X é N ou C-R", R" sendo H, alquíla, alquenila, halo, amina, ou arila; e Y é um grupo cie proteção de amina; o processo compreendendo reagir, na presença de um agente oxidante, um composto tetrahídrofurano da fórmula. (II) : (II). sendo que Rt, Rr:, RJ# e R4 são como definidos acima e L ê cloro, brorao, ou iodo, com um derivado de nucleoba.se da seguinte fôrmu1a; sendo que R5, R6, X, e Y são como definidos acima e 2 é um grupo de proteção de hidroxila; em que o agente oxidante ê Br?, H-?0?, O?, Cl?, Oa, Fr, ácido 3-cloroperbezóico, azobisisobutironitrila, 2,2,6,6- tetramet i Ipiperí diría 1-oxila, ou um sal incluindo um lon selecionado do grupo consistindo em Fe5'*', Ce4*, Au, Co4’', ΝΟΓ. MnOd, Cr2073 ’, HSOs'", e S2032' .

2. Processo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o agente oxidante ser um sal incluindo S308*’ -

3. Processo, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o agente oxidante é (NH4) 2S2Oe OU l’b SO,

4. Processo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que cada um dos K3 e R,t ê flúor.

5. Processo, de acordo com a. reivindácação 1, caracterizado pelo fato de que R:l é tritila e L é I.

6. Processo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R2 é benzoíla.

7. Processo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o derivado de nucelobase é

8. Processo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R;. é tritila, (CH-jJjC, alquildiarilsi 1 ila , trialquiIsilila, ou triar.ilsi 1 ila; Ra é RC{O)-, R sendo alquila ou arila; e o agente oxidante é ÍMR,) 2S:G8 ou K.jS208 .

9. Processo, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que é tritila e L é I.

10. Processo, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que R_> é benzoíla.

11. Processo, cie acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo tato de que o derivado de nucleoba.se ê

12. Processo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto tetrahidrofurano ê o derivado de nucleoba.se é ; o agente oxidante é í ffiíp ou KjSjOfj; e o composto de β- núcleos ideo é

13. Processo, de? acordo com a reivindicação 1, iracterizadt pelo fato de que adicionalmente compreende a conversão do composto de β-núcleosideo para um composto da fórmula (III) *. αΐίι. sendo que R3, R4, e B são como definidos na reivindicação 1 ,

14. Processo, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que adicionalmente compreende a. conversão do composto d.e β-núcleosideo para um composto da fórmu1a (111) : (III t sendo que R3, R,, e B são como definidos na reivindicação 1.

15. Processo, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que adicionalmente compreende a. conversão do composto de β-núcleosideo para um composto mostrado abaixo:

16. Processo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que adiciona Intente compreende, antes da reação, reduzir um composto de lactona da. seguinte fórmula (IV) : ) (IV) sendo que R3, R4, e B são como definidos na. reivindicação 1, para um composto furanose da seguinte fõrmula; ; e converter o composto furanose para. o composto tetra.hid.rofurano da formula (II) ,

17. Processo, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que adicionalmente compreende, antes da redução, tratar com ácido um composto da. seguinte fórmula: sendo que cada. dentre R3 e K4, independentemente, ê H ou halo,* R-7 é H, alqui.la, arila, cicloalquila, heteroalquila, ou hetereoariia; e cada dentre Rg e R9, independentemente, é um grupo de proteção de H ou hidroxila, ou Re e R..j, juntos, são C3alquilano; reagir o· produto resultante do tratamento acima com um composto da seguinte fórmula: R i - L' , sendo que R;i é alquila, aralquila, alquildiari Isi 1 i la, trialqui Isi.1 ila, trian Isi 1 ila., alqui Icarbonila , ou ar i Icarboni la; e L' é um grupo de. salda, para produzir um composto da fórmula (V): (V), sendo que Pd , R3, e R4 são como definidos acima; e converter o composto da fórmula fV) para o composto da fórmula (IV).

18, Processo, de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que Ra é toenzoíla e L" é cloro, brorno, ou iodo.

19. Processo, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que Rx é tritila, cada dentre R3 e R,| é flúor, e B ê

20. Processo, de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que adicionalmente compreende a conversão do composto de β-núcleosideo para um composto da fórmula (III) : (UI). sendo que R3, R4, e B são como definidos na reivindíc ação 1.

21. Processo, de acordo com a reivindicação 1, caracteri i i p< lo fato de que a reação é conduzida em um solvente de tolue.no.

22. Processo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a reação é conduzida em um solvente contendo tolueno e aeetonitrila.