Procédé de préparation d'une formulation stable contenant
une prostaglandine du groupe E.
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plus particulièrement elle concerne un procédé de préparation d'une formulation contenant une prostaglandine du groupe E par adjonction à une prostaglandine du groupe E d'au moins un élément choisi parmi les composés thiols, les composés à haut poids moléculaire solubles à l'eau et les sels solubles à l'eau de l'acide désoxycholique et en soumettant le mélange à une lyophilisation.
Dans la description, le terme "prostaglandine du groupe E"
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une prostaglandine E2 représentée par la formule
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une prostaglandine E3 représentée par la formule
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et les dérivés de ces composés sur les chaînes latérales telles que, par exemple, la méthyl-16-prostaglandine E2 , la méthyl-3prostaglandine E2 , la diméthyl-3,16(R)-prostaglandine E2 , l'oxo-17-épi-15-prostaglandine E2 , l'hydroxy-16(R)-prostaglandine
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La prostaglandine du groupe E est un médicament présentant, même sous une faible quantité, des actions médicales variées telles que le contrôle de la force de contraction de l'utérus, un effet hypotenseur, le traitement et la prophylaxie des ulcères- des organes digestifs, le contrôle du métabolisme des lipides, une action bronchodilatatrice etc. mais, étant donné que le composé est très instable et susceptible d'être décomposé, c'est-à-dire <EMI ID=7.1>
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habituellement emmagasiné, sous forme du cristal ou d'une solution
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Pour stabiliser la prostaglandine du groupe E, on a jusqu' ici proposé un procédé dans lequel le composé est dissous dans un solvant organique tel que le N,N-diméthylacétamide contenant moins de 0,1% d'eau, comme décrit dans le brevet belge N[deg.] 790.840.
Toutefois, dans le cas d'une administration du médicament directement dans le corps humain, en particulier dans l'administration par injection, le médicament peut quelquefois être administré sous forme d'une solution organique de celui-ci ou sous forme d'une solution organique diluée avec de l'eau mais on préfère habituellement administrer le médicament sous forme de sa solution aqueuse (voir par exemple "Dispensing of Medication", 976
(1971), 7ème Edition, Mack Publishing Company).
Ceci signifie que l'on recherche une formulation stable contenant une prostaglandine du groupe E qui permette d'emmagasiner la prostaglandine du groupe E sous une forme stable et qui puisse être administrée sous forme d'une solution aqueuse dans le cas de l'administration par injection.
A la suite de diverses recherches partant du niveau technique ci-dessus exposé, on a découvert qu'une formulation contenant une prostaglandine du groupe E préparée en ajoutant à la prostaglandine du groupe E au moins un élément choisi parmi les composés thiols, les composés à haut poids moléculaire solubles à l'eau et les sels solubles à l'eau de l'acide désoxycholique et en soumettant le mélange à une lyophilisation ou à un séchage par le froid, peut être emmagasinée d'une façon stable pendant une longue durée à la température ambiante sans être décomposée et peut être administrée sous forme de sa solution aqueuse, dans le cas d'une administration par injection.
C'est-à-dire que la présente invention a pour objet un procédé de préparation d'une formulation stable contenant une prostaglandine du groupe E qui consiste à ajouter à la prostaglandine du groupe E au moins un élément choisi parmi les composés thiols, les composés à haut poids moléculaire solubles à l'eau et les sels solubles à l'eau de l'acide désoxycholique et à soumettre le mélange à une lyophilisation.
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à haut poids moléculaire solubles à l'eau et/ou les sels solubles à l'eau de l'acide désoxycholique sont utilisés comme additif dans le cas de la présente invention et des exemples de composés thiols sont le glutathion, la cystéine, l'acétylcystéine, etc , des exemples de composés à haut poids moléculaire solubles à l'eau sont les polymères solubles à l'eau naturels ou synthétiques, tels que le dextrane, la gélatine, la polyvinylpyrrolidone, la méthylcellulose, l'hydroxypropylcellulose, l'hydroxyéthylcellulose, la carboxyméthylcellulose, etc ; et des exemples de sels solubles à l'eau de l'acide désoxycholique sont le sel d'arginine, le sel de lysine , les sels de métaux alcalin, etc. de cet acide.
Dans la mise en oeuvre du procédé de la présente invention, de l'eau et au moins un élément choisi parmi les composés thiols, les composés à haut poids moléculaire solubles à l'eau et les sels solubles à l'eau de l'acide désoxycholique sont ajoutés à la prostaglandine du groupe E pour former une solution aqueuse, après contrôle du pH de la solution et application à celle-ci d'une opération conventionnelle telle que la filtration stérile, la solution est versée dans des ampoules ou fioles et la solution est ensuite soumise à une lyophilisation selon le processus usuel. De plus, le cas échéant, un excipient usuel tels que des saccharides, des aminoacides, des sels minéraux, etc peut être ajouté à la composition ci-dessus mentionnée.
Lorsqu'on utilise un sel soluble à l'eau de l'acide désoxycholique, l'acide désoxycholique et une base capable de former un sel soluble à l'eau avec l'acide, peuvent être ajoutés à la solution aqueuse pour former le sel dans la so-. lution.
De plus, une prostaglandine du groupe E est soluble dans l'eau mais il faut une longue durée pour dissoudre son cristal dans l'eau et de ce fait, lorsque l'on utilise le cristal de la prostaglandine du groupe E, il est préférable de dissoudre au préalable le cristal dans un solvant organique tel que l'éthanol, l'acétate d'éthyle, etc et de chasser ensuite le solvant organique par distillation pour fournir un solide amorphe de manière 3 accroître la surface de contact de celui-ci avec l'eau.
La quantité préférentielle d'additif utilisée dans la présente invention pour un réceptacle est de 1 à 20 mg pour le composé thiol, 5 à 250 mg pour le composé à haut poids moléculaire, en particulier 0,1 - 150 mg pour les dérivés de la cellulose parmi <EMI ID=11.1>
soluble à l'eau de l'acide désoxycholique.
De plus, si nécessaire, des additifs tels qu'un agent isotonique, un antiseptique, un excipient, un analgésique, etc peuvent être ajoutés à la somposition stable de la prostaglandine du groupe E.
Les expériences rapportées ci-après montrent que la formulation contenant la prostaglandine du groupe E, obtenue par le procédé de la présente invention, peut être emmagasinée de façon stable pendant une longue durée.
EXPERIENCE
Après avoir ajouté 1 ml d'eau par ampoule à chacun des produits lyophilisés obtenus dans les exemples 2 à 6, 2 ml d'eau au produit lyophilisé obtenu dans l'Exemple 1 et 1 ml d'eau par fiole au produit lyophilisé obtenu dans les Exemples 7 à 15, pour dissoudre le produit dans l'eau, et avoir réglé chaque solution à un
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l'acétate d'éthyle de préférence sous refroidissement à la glace. L'extrait a été séché et concentré. De plus, lorsqu' 1 ml d'eau par ampoule a été ajouté à chacun des produits lyophilisés obtenus dans les Exemples 5 et 6 pour dissoudre le produit et que la solu-
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désoxycholique a précipité et ainsi le produit a été extrait avec de l'acétate d'éthyle après avoir éliminé par filtratiôn les précipités et l'extrait a été ensuite séché et concentré. La quantité totale du concentrat a alors fait l'objet d'une chromatographie en couche mince sur gel de silice et l'adsorbat a été développé avec un mélange de chloroforme, de méthanol, d'acide acétique et d'eau dans le rapport en volumes 90 : 8 : 1 : 0,8 (lorsqu'on a utilisé les produits lyophilisés obtenus dans les Exemples 5 et 6, l'adsorbat a été développé avec un mélange d'acétate d'éthyle, d' acide acétique, d'isooctane et d'eau dans le rapport en volumes
90 : 20 : 50 : 100). Ensuite, une solution éthanolique à 5% d' acide phosphomolybdique a été pulvérisée sur le produit développé,
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quer la coloration, l'absorbance de chaque tache des produits de décomposition de la prostaglandine E2 , c'est-à-dire la prosta-
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densitomètre du type à enregistrement (Densitomètre de la Société COSMO du type Chromato Ace D-109) pour déterminer la surface de <EMI ID=16.1>
échantillon a été ensuite calculée d'après le rapport de surface. Le rapport de la teneur par ampoule en prostaglandine E2 dans cha-
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emmagasinés à 35[deg.]C pendant 30 jours (et pendant 90 jours supplémentaires pour le produit lyophilisé obtenu dans l'Exemple 1) par rapport à la teneur en prostaglandine E2 par ampoule dans les produits fraîchement lyophilisés a été calculé sous forme du pourcentage résiduel. Les résultats sont donnés dans le Tableau I.
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(*) : Le pourcentage résiduel de prostaglandine E2 dans le produit lyophilisé obtenu dans l'Exemple 1, emmagasiné pendant 90
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De plus, lorsque le cristal de prostaglandine E2 préparé sans utiliser le stabilisant de la présente invention a été emmagasiné pendant 30 jours à 35[deg.]C, le pourcentage résiduel a été de
10%.
L'effet de stabilisation des stabilisants de la présente invention pour chaque prostaglandine du groupe E2 a été ensuite déterminé en mesurant le pourcentage résiduel des formulations lyophilisées préparées conformément au procédé de la présente invention lorsque les formulations ont été emmagasinées pendant 16 jours à 45[deg.]C. Les résultats sont donnés dans le Tableau suivant.
TABLEAU Il ***
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( *: nouveau composé)
On décrira maintenant plus en détail l'invention sous formes des Exemples suivants.
EXEMPLE 1
Une solution de 100 mg de cristaux de prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de 2 litres pour mouiller la paroi du récipient avec la solution et l'éthanol a été ensuite chassé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote gazeux dans le récipient. 10 g de mêthylcellulose et
1800 ml d'eau distillée ont ensuite été ajoutés au résidu pour dissoudre la méthylcellulose et après avoir réglé le système au pH 6,5 en ajoutant une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, le
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distillée a été ensuite ajoutée à la solution pour porter le volume total à 2000 ml. La solution a alors été soumise à une filtra- <EMI ID=23.1>
des ampoules à raiscn d'un millilitre par ampoule et, après avoir soumis chaque échantillon à une lyophilisation, l'ampoule a été scellée par fusion.
EXEMPLE 2
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1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient avec la solution et l'éthanol a ensuite été éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler du gaz azote à travers le récipient. On a alors ajouté 30 g de glutathion et 1900 ml d'eau distillée au résidu pour dissoudre le glutathion et, après avoir réglé le pH à 6,5 par adjonction d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, le mélange a été brassé dans un courant de gaz azote pour dissoudre la prostaglandine E2. De l'eau distillée a alors été ajoutée à la solution pour porter le volume total à 2000 ml.
Après avoir soumis la solution à une filtration stérile selon un processus conventionnel, la solution a servi à remplir des ampoules à raison de un millilitre par ampoule et, après l'avoir soumise à lyophilisation, l'ampoule a été scellée par fusion.
EXEMPLE 3
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1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient avec la solution et l'éthanol a ensuite été éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. Ensuite, on a ajouté 400 g de dextrane 20 ayant un poids moléculaire moyen de 20.000 et 1200 ml d'eau distillée pour dissoudre le dextrane et le pH de la solution est devenu d'environ 6,5. Après avoir brassé à nouveau le mélange pour dissoudre la prostaglandine E2 , de l'eau distillée a été ajoutée à la solution ainsi formée pour porter le volume total à
2000 ml. Ensuite, après avoir soumis la solution à une filtration stérile selon le processus conventionnel, la solution a servi à remplir des ampoules à raison de un millilitre par ampoule et, après avoir lyophilisé la solution, l'ampoule a été scellée par fusion.
EXEMPLE 4
Une solution de 100 mg de cristaux de prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour <EMI ID=26.1>
mouiller la paroi du récipient avec la solution et l'éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler du gaz azote dans le récipient. On a ensuite ajouté 50 g de gélatine et 1800 ml d'eau distillée au résidu pour dissoudre la gélatine et, après avoir réglé le pH à 6,5 en ajoutant une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, le mélange a été brassé pour dissoudre la
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filtration stérile selon le processus conventionnel, la solution a servi à remplir des ampoules à raison d'un millilitre par ampoule et après, avoir lyophilisé la solution, l'ampoule a été scellée par fusion.
EXEMPLE 5
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1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient avec la solution et l'éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. 60 g d'acide désoxycholique, 29,3 g d' arginine et 1800 ml d'eau ont été ensuite ajoutés au résidu pour dissoudre le sel d'arginine de l'acide désoxycholique ainsi formé dans l'eau et, après avoir réglé le pH à 7,0 par adjonction d'acide chlorhydrique, le mélange a été brassé pour dissoudre la prostaglandine E2. De l'eau distillée à été ensuite ajoutée à la solution pour porter le volume total à 2000 ml.
Après avoir soumis la solution à une filtration stérile conformément au processus conventionnel, la solution a été mise en ampoule à raison d'un millilitre par ampoule et, après avoir lyophilisé la solution, l'ampoule a été scellée par fusion.
EXEMPLE 6
Une solution de 100 mg de cristaux de prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient avec la solution et l'éthanol a
été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. On a ensuite ajouté au résidu 20 g d'acide désoxycholique, 29,3 g d'arginine et 1800 ml d'eau pour dissoudre le sel d'arginine de l'acide désoxycholique formé dans l'eau et, après avoir réglé le pH à 8,5 par adjonction d'une solution aqueuse d'arginine, le mélange a été brassé pour dissoudre
la prostaglandine E2. Ensuite, après avoir soumis la solution à une filtration stérile, la solution a été utilisée pour remplir <EMI ID=29.1>
lisation de la solution, l'ampoule a été scellée par fusion. EXEMPLE 7
Une solution de 100 mg de cristaux de méthyl-16-prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient avec la solution et l'éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. On a ensuite ajouté au résidu 400 g de dextrane 20 ayant un poids moléculaire moyen de 20.000 et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre le dextrane et la méthyl-16-prostaglandine E2 puis de l'eau distillée a été ajoutée à la solution pour porter le volume global à 2000 ml. Après avoir soumis la solution à une filtration stérile selon le processus conventionnel, la solution a été utilisée pour remplir des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après lyophilisation de la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 8
Une solution de 100 mg de cristaux de méthyl-16-prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller les parois du récipient avec la solution et l'éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. On a ensuite ajouté au résidu 120 g de dextrane 70, ayant un poids moléculaire moyen de 70000, et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre le dextrane
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a été ensuite ajoutée à la solution pour porter le volume global à 2000 ml. La solution a été ensuite soumise à une filtration stérile selon le processus conventionnel et la solution a servi à remplir des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après lyophilisation de la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 9
Une solution de 100 mg de cristaux de méthyl-3-prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient et l'éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. On a ensuite ajouté au résidu 120 g de dextrane 20 ayant un poids moléculaire de 20000 et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre le dextrane et la méthyl-3-prostaglandine E2 et de l'eau distillée a été ensuite ajoutée à la solution pour <EMI ID=31.1>
solution à une filtration stérile selon le processus conventionnel, la solution a été répartie dans des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après lyophilisation de la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 10
Une solution de 100 mg de cristaux de la diméthyl-3,16(R)prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un réci-
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éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. On a ensuite ajouté au résidu 120 g de dextrane 20 ayant un poids moléculaire moyen de
20000 et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre le dextrane et la diméthyl-3,16(R)-prostaglandine E2 et de l'eau distillée a été ajoutée à la solution pour porter le volume global à 2000 ml. Ensuite, après avoir soumis la solution à une filtration stérile conformément au procédé conventionnel, la solution a été placée dans des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après avoir lyophilisé la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 11
Une solution de 100 mg de cristaux d'oxo-17-épi-15-prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller les parois du récipient et l'éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler dans le récipient de l'azote gazeux. On a ensuite ajouté au résidu
100 g de dextrine et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre la dextrine et ensuite, après avoir réglé le pH de celui-ci à 6,5 par adjonction d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, le mélan-
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De l'eau distillée a été ensuite ajoutée à la solution pour porter le volume total à 2000 ml. Ensuite, après avoir soumis la solution à une filtration stérile selon le processus conventionnel, la solution a été placée dans des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après avoir lyophilisé la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 12
Une solution de 100 mg de cristaux de la diméthyl-3,16(R)prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller les parois du récipient et l' <EMI ID=34.1>
&thanol a été ensuite éliminé sous pression*réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. On a ensuite ajouté au résidu 10 g de polyvinylpyrollidone et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre le polyvinylpyrollidone et, après avoir réglé le pH de celui-ci à 6,5 par adjonction d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, le mélange a été brassé pour dissoudre la diméthyl-3,16(R)-
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solution pour porter le volume global à 2000 ml. Ensuite, après avoir soumis la solution à une filtration stérile selon le processus conventionnel, la solution a été placée dans des fioles
à raison d'un millilitre par fiole et, après avoir lyophilisé la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 13
Une solution de 100 mg de cristaux de l'oxo-17-épi-15prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un réci-
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éthanol a été ensuite chassé sous pression réduite ou en faisant circuler dans le récipient de l'azote gazeux. Ensuite, on a ajouté au résidu 10 g de méthylcellulose et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre la mëthylcellulose et, après avoir réglé le pH de celui-ci à 6,5 par adjonction d'une solution aqueuse d'hydroxy-
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15-prostaglandine E2. De l'eau distillée a été ensuite ajoutée à la solution pour porter le volume global à 2000 ml. Après avoir soumis la solution à une filtration stérile, celle-ci a servi à remplir des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après lyophilisation de la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 14
Une solution de 100 mg de cristaux de l'hydroxy-16(R)prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient et l' éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler dans le récipient de l'azote gazeux. On a ensuite ajouté au résidu 40 g de glutathion et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre le glutathion et, après avoir réglé le pH de celui-ci à 6,5 par adjonction d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, le mélange a été brassé pour dissoudre l'hydroxy-16(R)-prostaglandine E2. De l'eau distillée a ensuite été ajoutée à la solution pour porter le volume global à 2000 ml.
Après avoir soumis la solution à une filtration stérile selon un processus conventionnel, la solution a été utilisée pour remplir des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après lyophilisation de la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 15
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glandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient et l'éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler dans le récipient de l'azote gazeux. On a ensuite ajouté au résidu 40 g de glutathion oxydé et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre le glutathion oxydé et, après avoir réglé le pH de celle-ci à 6,5 selon le processus conventionnel, la solution a servi à remplir des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après lyophilisation de la solution, la fiole a été scellée.
....... REVENDICATIONS
1.- Un procédé de préparation d'une formulation stable contenant une prostaglandine du groupe E caractérisé en ce que l'on ajoute à la prostaglandine du groupe E au moins un composé choisi parmi les composés thiols, les composés à haut poids moléculaire solubles à l'eau et les sels solubles à l'eau de l'acide désoxycholique et soumet la solution à une lyophilisation.