Procédé de préparation d'une formulation stable contenant
une prostaglandine du groupe E.
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plus particulièrement elle concerne un procédé de préparation d'une formulation contenant une prostaglandine du groupe E par adjonction à une prostaglandine du groupe E d'au moins un élément choisi parmi les composés thiols, les composés à haut poids moléculaire solubles à l'eau et les sels solubles à l'eau de l'acide désoxycholique et en soumettant le mélange à une lyophilisation.
Dans la description, le terme "prostaglandine du groupe E"
<EMI ID=2.1>
<EMI ID=3.1>
une prostaglandine E2 représentée par la formule
<EMI ID=4.1>
une prostaglandine E3 représentée par la formule
<EMI ID=5.1>
et les dérivés de ces composés sur les chaînes latérales telles que, par exemple, la méthyl-16-prostaglandine E2 , la méthyl-3prostaglandine E2 , la diméthyl-3,16(R)-prostaglandine E2 , l'oxo-17-épi-15-prostaglandine E2 , l'hydroxy-16(R)-prostaglandine
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La prostaglandine du groupe E est un médicament présentant, même sous une faible quantité, des actions médicales variées telles que le contrôle de la force de contraction de l'utérus, un effet hypotenseur, le traitement et la prophylaxie des ulcères- des organes digestifs, le contrôle du métabolisme des lipides, une action bronchodilatatrice etc. mais, étant donné que le composé est très instable et susceptible d'être décomposé, c'est-à-dire <EMI ID=7.1>
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habituellement emmagasiné, sous forme du cristal ou d'une solution
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Pour stabiliser la prostaglandine du groupe E, on a jusqu' ici proposé un procédé dans lequel le composé est dissous dans un solvant organique tel que le N,N-diméthylacétamide contenant moins de 0,1% d'eau, comme décrit dans le brevet belge N[deg.] 790.840.
Toutefois, dans le cas d'une administration du médicament directement dans le corps humain, en particulier dans l'administration par injection, le médicament peut quelquefois être administré sous forme d'une solution organique de celui-ci ou sous forme d'une solution organique diluée avec de l'eau mais on préfère habituellement administrer le médicament sous forme de sa solution aqueuse (voir par exemple "Dispensing of Medication", 976
(1971), 7ème Edition, Mack Publishing Company).
Ceci signifie que l'on recherche une formulation stable contenant une prostaglandine du groupe E qui permette d'emmagasiner la prostaglandine du groupe E sous une forme stable et qui puisse être administrée sous forme d'une solution aqueuse dans le cas de l'administration par injection.
A la suite de diverses recherches partant du niveau technique ci-dessus exposé, on a découvert qu'une formulation contenant une prostaglandine du groupe E préparée en ajoutant à la prostaglandine du groupe E au moins un élément choisi parmi les composés thiols, les composés à haut poids moléculaire solubles à l'eau et les sels solubles à l'eau de l'acide désoxycholique et en soumettant le mélange à une lyophilisation ou à un séchage par le froid, peut être emmagasinée d'une façon stable pendant une longue durée à la température ambiante sans être décomposée et peut être administrée sous forme de sa solution aqueuse, dans le cas d'une administration par injection.
C'est-à-dire que la présente invention a pour objet un procédé de préparation d'une formulation stable contenant une prostaglandine du groupe E qui consiste à ajouter à la prostaglandine du groupe E au moins un élément choisi parmi les composés thiols, les composés à haut poids moléculaire solubles à l'eau et les sels solubles à l'eau de l'acide désoxycholique et à soumettre le mélange à une lyophilisation.
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à haut poids moléculaire solubles à l'eau et/ou les sels solubles à l'eau de l'acide désoxycholique sont utilisés comme additif dans le cas de la présente invention et des exemples de composés thiols sont le glutathion, la cystéine, l'acétylcystéine, etc , des exemples de composés à haut poids moléculaire solubles à l'eau sont les polymères solubles à l'eau naturels ou synthétiques, tels que le dextrane, la gélatine, la polyvinylpyrrolidone, la méthylcellulose, l'hydroxypropylcellulose, l'hydroxyéthylcellulose, la carboxyméthylcellulose, etc ; et des exemples de sels solubles à l'eau de l'acide désoxycholique sont le sel d'arginine, le sel de lysine , les sels de métaux alcalin, etc. de cet acide.
Dans la mise en oeuvre du procédé de la présente invention, de l'eau et au moins un élément choisi parmi les composés thiols, les composés à haut poids moléculaire solubles à l'eau et les sels solubles à l'eau de l'acide désoxycholique sont ajoutés à la prostaglandine du groupe E pour former une solution aqueuse, après contrôle du pH de la solution et application à celle-ci d'une opération conventionnelle telle que la filtration stérile, la solution est versée dans des ampoules ou fioles et la solution est ensuite soumise à une lyophilisation selon le processus usuel. De plus, le cas échéant, un excipient usuel tels que des saccharides, des aminoacides, des sels minéraux, etc peut être ajouté à la composition ci-dessus mentionnée.
Lorsqu'on utilise un sel soluble à l'eau de l'acide désoxycholique, l'acide désoxycholique et une base capable de former un sel soluble à l'eau avec l'acide, peuvent être ajoutés à la solution aqueuse pour former le sel dans la so-. lution.
De plus, une prostaglandine du groupe E est soluble dans l'eau mais il faut une longue durée pour dissoudre son cristal dans l'eau et de ce fait, lorsque l'on utilise le cristal de la prostaglandine du groupe E, il est préférable de dissoudre au préalable le cristal dans un solvant organique tel que l'éthanol, l'acétate d'éthyle, etc et de chasser ensuite le solvant organique par distillation pour fournir un solide amorphe de manière 3 accroître la surface de contact de celui-ci avec l'eau.
La quantité préférentielle d'additif utilisée dans la présente invention pour un réceptacle est de 1 à 20 mg pour le composé thiol, 5 à 250 mg pour le composé à haut poids moléculaire, en particulier 0,1 - 150 mg pour les dérivés de la cellulose parmi <EMI ID=11.1>
soluble à l'eau de l'acide désoxycholique.
De plus, si nécessaire, des additifs tels qu'un agent isotonique, un antiseptique, un excipient, un analgésique, etc peuvent être ajoutés à la somposition stable de la prostaglandine du groupe E.
Les expériences rapportées ci-après montrent que la formulation contenant la prostaglandine du groupe E, obtenue par le procédé de la présente invention, peut être emmagasinée de façon stable pendant une longue durée.
EXPERIENCE
Après avoir ajouté 1 ml d'eau par ampoule à chacun des produits lyophilisés obtenus dans les exemples 2 à 6, 2 ml d'eau au produit lyophilisé obtenu dans l'Exemple 1 et 1 ml d'eau par fiole au produit lyophilisé obtenu dans les Exemples 7 à 15, pour dissoudre le produit dans l'eau, et avoir réglé chaque solution à un
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l'acétate d'éthyle de préférence sous refroidissement à la glace. L'extrait a été séché et concentré. De plus, lorsqu' 1 ml d'eau par ampoule a été ajouté à chacun des produits lyophilisés obtenus dans les Exemples 5 et 6 pour dissoudre le produit et que la solu-
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désoxycholique a précipité et ainsi le produit a été extrait avec de l'acétate d'éthyle après avoir éliminé par filtratiôn les précipités et l'extrait a été ensuite séché et concentré. La quantité totale du concentrat a alors fait l'objet d'une chromatographie en couche mince sur gel de silice et l'adsorbat a été développé avec un mélange de chloroforme, de méthanol, d'acide acétique et d'eau dans le rapport en volumes 90 : 8 : 1 : 0,8 (lorsqu'on a utilisé les produits lyophilisés obtenus dans les Exemples 5 et 6, l'adsorbat a été développé avec un mélange d'acétate d'éthyle, d' acide acétique, d'isooctane et d'eau dans le rapport en volumes
90 : 20 : 50 : 100). Ensuite, une solution éthanolique à 5% d' acide phosphomolybdique a été pulvérisée sur le produit développé,
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quer la coloration, l'absorbance de chaque tache des produits de décomposition de la prostaglandine E2 , c'est-à-dire la prosta-
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densitomètre du type à enregistrement (Densitomètre de la Société COSMO du type Chromato Ace D-109) pour déterminer la surface de <EMI ID=16.1>
échantillon a été ensuite calculée d'après le rapport de surface. Le rapport de la teneur par ampoule en prostaglandine E2 dans cha-
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emmagasinés à 35[deg.]C pendant 30 jours (et pendant 90 jours supplémentaires pour le produit lyophilisé obtenu dans l'Exemple 1) par rapport à la teneur en prostaglandine E2 par ampoule dans les produits fraîchement lyophilisés a été calculé sous forme du pourcentage résiduel. Les résultats sont donnés dans le Tableau I.
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(*) : Le pourcentage résiduel de prostaglandine E2 dans le produit lyophilisé obtenu dans l'Exemple 1, emmagasiné pendant 90
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De plus, lorsque le cristal de prostaglandine E2 préparé sans utiliser le stabilisant de la présente invention a été emmagasiné pendant 30 jours à 35[deg.]C, le pourcentage résiduel a été de
10%.
L'effet de stabilisation des stabilisants de la présente invention pour chaque prostaglandine du groupe E2 a été ensuite déterminé en mesurant le pourcentage résiduel des formulations lyophilisées préparées conformément au procédé de la présente invention lorsque les formulations ont été emmagasinées pendant 16 jours à 45[deg.]C. Les résultats sont donnés dans le Tableau suivant.
TABLEAU Il ***
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( *: nouveau composé)
On décrira maintenant plus en détail l'invention sous formes des Exemples suivants.
EXEMPLE 1
Une solution de 100 mg de cristaux de prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de 2 litres pour mouiller la paroi du récipient avec la solution et l'éthanol a été ensuite chassé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote gazeux dans le récipient. 10 g de mêthylcellulose et
1800 ml d'eau distillée ont ensuite été ajoutés au résidu pour dissoudre la méthylcellulose et après avoir réglé le système au pH 6,5 en ajoutant une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, le
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distillée a été ensuite ajoutée à la solution pour porter le volume total à 2000 ml. La solution a alors été soumise à une filtra- <EMI ID=23.1>
des ampoules à raiscn d'un millilitre par ampoule et, après avoir soumis chaque échantillon à une lyophilisation, l'ampoule a été scellée par fusion.
EXEMPLE 2
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1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient avec la solution et l'éthanol a ensuite été éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler du gaz azote à travers le récipient. On a alors ajouté 30 g de glutathion et 1900 ml d'eau distillée au résidu pour dissoudre le glutathion et, après avoir réglé le pH à 6,5 par adjonction d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, le mélange a été brassé dans un courant de gaz azote pour dissoudre la prostaglandine E2. De l'eau distillée a alors été ajoutée à la solution pour porter le volume total à 2000 ml.
Après avoir soumis la solution à une filtration stérile selon un processus conventionnel, la solution a servi à remplir des ampoules à raison de un millilitre par ampoule et, après l'avoir soumise à lyophilisation, l'ampoule a été scellée par fusion.
EXEMPLE 3
<EMI ID=25.1>
1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient avec la solution et l'éthanol a ensuite été éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. Ensuite, on a ajouté 400 g de dextrane 20 ayant un poids moléculaire moyen de 20.000 et 1200 ml d'eau distillée pour dissoudre le dextrane et le pH de la solution est devenu d'environ 6,5. Après avoir brassé à nouveau le mélange pour dissoudre la prostaglandine E2 , de l'eau distillée a été ajoutée à la solution ainsi formée pour porter le volume total à
2000 ml. Ensuite, après avoir soumis la solution à une filtration stérile selon le processus conventionnel, la solution a servi à remplir des ampoules à raison de un millilitre par ampoule et, après avoir lyophilisé la solution, l'ampoule a été scellée par fusion.
EXEMPLE 4
Une solution de 100 mg de cristaux de prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour <EMI ID=26.1>
mouiller la paroi du récipient avec la solution et l'éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler du gaz azote dans le récipient. On a ensuite ajouté 50 g de gélatine et 1800 ml d'eau distillée au résidu pour dissoudre la gélatine et, après avoir réglé le pH à 6,5 en ajoutant une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, le mélange a été brassé pour dissoudre la
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filtration stérile selon le processus conventionnel, la solution a servi à remplir des ampoules à raison d'un millilitre par ampoule et après, avoir lyophilisé la solution, l'ampoule a été scellée par fusion.
EXEMPLE 5
<EMI ID=28.1>
1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient avec la solution et l'éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. 60 g d'acide désoxycholique, 29,3 g d' arginine et 1800 ml d'eau ont été ensuite ajoutés au résidu pour dissoudre le sel d'arginine de l'acide désoxycholique ainsi formé dans l'eau et, après avoir réglé le pH à 7,0 par adjonction d'acide chlorhydrique, le mélange a été brassé pour dissoudre la prostaglandine E2. De l'eau distillée à été ensuite ajoutée à la solution pour porter le volume total à 2000 ml.
Après avoir soumis la solution à une filtration stérile conformément au processus conventionnel, la solution a été mise en ampoule à raison d'un millilitre par ampoule et, après avoir lyophilisé la solution, l'ampoule a été scellée par fusion.
EXEMPLE 6
Une solution de 100 mg de cristaux de prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient avec la solution et l'éthanol a
été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. On a ensuite ajouté au résidu 20 g d'acide désoxycholique, 29,3 g d'arginine et 1800 ml d'eau pour dissoudre le sel d'arginine de l'acide désoxycholique formé dans l'eau et, après avoir réglé le pH à 8,5 par adjonction d'une solution aqueuse d'arginine, le mélange a été brassé pour dissoudre
la prostaglandine E2. Ensuite, après avoir soumis la solution à une filtration stérile, la solution a été utilisée pour remplir <EMI ID=29.1>
lisation de la solution, l'ampoule a été scellée par fusion. EXEMPLE 7
Une solution de 100 mg de cristaux de méthyl-16-prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient avec la solution et l'éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. On a ensuite ajouté au résidu 400 g de dextrane 20 ayant un poids moléculaire moyen de 20.000 et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre le dextrane et la méthyl-16-prostaglandine E2 puis de l'eau distillée a été ajoutée à la solution pour porter le volume global à 2000 ml. Après avoir soumis la solution à une filtration stérile selon le processus conventionnel, la solution a été utilisée pour remplir des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après lyophilisation de la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 8
Une solution de 100 mg de cristaux de méthyl-16-prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller les parois du récipient avec la solution et l'éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. On a ensuite ajouté au résidu 120 g de dextrane 70, ayant un poids moléculaire moyen de 70000, et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre le dextrane
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a été ensuite ajoutée à la solution pour porter le volume global à 2000 ml. La solution a été ensuite soumise à une filtration stérile selon le processus conventionnel et la solution a servi à remplir des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après lyophilisation de la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 9
Une solution de 100 mg de cristaux de méthyl-3-prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient et l'éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. On a ensuite ajouté au résidu 120 g de dextrane 20 ayant un poids moléculaire de 20000 et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre le dextrane et la méthyl-3-prostaglandine E2 et de l'eau distillée a été ensuite ajoutée à la solution pour <EMI ID=31.1>
solution à une filtration stérile selon le processus conventionnel, la solution a été répartie dans des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après lyophilisation de la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 10
Une solution de 100 mg de cristaux de la diméthyl-3,16(R)prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un réci-
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éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. On a ensuite ajouté au résidu 120 g de dextrane 20 ayant un poids moléculaire moyen de
20000 et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre le dextrane et la diméthyl-3,16(R)-prostaglandine E2 et de l'eau distillée a été ajoutée à la solution pour porter le volume global à 2000 ml. Ensuite, après avoir soumis la solution à une filtration stérile conformément au procédé conventionnel, la solution a été placée dans des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après avoir lyophilisé la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 11
Une solution de 100 mg de cristaux d'oxo-17-épi-15-prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller les parois du récipient et l'éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler dans le récipient de l'azote gazeux. On a ensuite ajouté au résidu
100 g de dextrine et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre la dextrine et ensuite, après avoir réglé le pH de celui-ci à 6,5 par adjonction d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, le mélan-
<EMI ID=33.1>
De l'eau distillée a été ensuite ajoutée à la solution pour porter le volume total à 2000 ml. Ensuite, après avoir soumis la solution à une filtration stérile selon le processus conventionnel, la solution a été placée dans des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après avoir lyophilisé la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 12
Une solution de 100 mg de cristaux de la diméthyl-3,16(R)prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller les parois du récipient et l' <EMI ID=34.1>
&thanol a été ensuite éliminé sous pression*réduite ou en faisant circuler de l'azote dans le récipient. On a ensuite ajouté au résidu 10 g de polyvinylpyrollidone et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre le polyvinylpyrollidone et, après avoir réglé le pH de celui-ci à 6,5 par adjonction d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, le mélange a été brassé pour dissoudre la diméthyl-3,16(R)-
<EMI ID=35.1>
solution pour porter le volume global à 2000 ml. Ensuite, après avoir soumis la solution à une filtration stérile selon le processus conventionnel, la solution a été placée dans des fioles
à raison d'un millilitre par fiole et, après avoir lyophilisé la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 13
Une solution de 100 mg de cristaux de l'oxo-17-épi-15prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un réci-
<EMI ID=36.1>
éthanol a été ensuite chassé sous pression réduite ou en faisant circuler dans le récipient de l'azote gazeux. Ensuite, on a ajouté au résidu 10 g de méthylcellulose et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre la mëthylcellulose et, après avoir réglé le pH de celui-ci à 6,5 par adjonction d'une solution aqueuse d'hydroxy-
<EMI ID=37.1>
15-prostaglandine E2. De l'eau distillée a été ensuite ajoutée à la solution pour porter le volume global à 2000 ml. Après avoir soumis la solution à une filtration stérile, celle-ci a servi à remplir des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après lyophilisation de la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 14
Une solution de 100 mg de cristaux de l'hydroxy-16(R)prostaglandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient et l' éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler dans le récipient de l'azote gazeux. On a ensuite ajouté au résidu 40 g de glutathion et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre le glutathion et, après avoir réglé le pH de celui-ci à 6,5 par adjonction d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, le mélange a été brassé pour dissoudre l'hydroxy-16(R)-prostaglandine E2. De l'eau distillée a ensuite été ajoutée à la solution pour porter le volume global à 2000 ml.
Après avoir soumis la solution à une filtration stérile selon un processus conventionnel, la solution a été utilisée pour remplir des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après lyophilisation de la solution, la fiole a été scellée.
EXEMPLE 15
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glandine E2 dans 1 ml d'éthanol a été placée dans un récipient de deux litres pour mouiller la paroi du récipient et l'éthanol a été ensuite éliminé sous pression réduite ou en faisant circuler dans le récipient de l'azote gazeux. On a ensuite ajouté au résidu 40 g de glutathion oxydé et 1500 ml d'eau distillée pour dissoudre le glutathion oxydé et, après avoir réglé le pH de celle-ci à 6,5 selon le processus conventionnel, la solution a servi à remplir des fioles à raison d'un millilitre par fiole et, après lyophilisation de la solution, la fiole a été scellée.
....... REVENDICATIONS
1.- Un procédé de préparation d'une formulation stable contenant une prostaglandine du groupe E caractérisé en ce que l'on ajoute à la prostaglandine du groupe E au moins un composé choisi parmi les composés thiols, les composés à haut poids moléculaire solubles à l'eau et les sels solubles à l'eau de l'acide désoxycholique et soumet la solution à une lyophilisation.
Process for preparing a stable formulation containing
a group E prostaglandin.
<EMI ID = 1.1>
more particularly it relates to a process for preparing a formulation containing a prostaglandin of group E by adding to a prostaglandin of group E at least one element chosen from thiol compounds, compounds with high molecular weight soluble in water and the water-soluble salts of deoxycholic acid and subjecting the mixture to lyophilization.
In the description, the term "prostaglandin of group E"
<EMI ID = 2.1>
<EMI ID = 3.1>
a prostaglandin E2 represented by the formula
<EMI ID = 4.1>
a prostaglandin E3 represented by the formula
<EMI ID = 5.1>
and derivatives of these compounds on the side chains such as, for example, methyl-16-prostaglandin E2, methyl-3prostaglandin E2, dimethyl-3,16 (R) -prostaglandin E2, oxo-17-epi -15-prostaglandin E2, hydroxy-16 (R) -prostaglandin
<EMI ID = 6.1>
Group E prostaglandin is a drug that has, even in a small amount, various medical actions such as controlling the force of contraction of the uterus, hypotensive effect, treatment and prophylaxis of ulcers - digestive organs, control of lipid metabolism, bronchodilator action, etc. but, since the compound is very unstable and susceptible to decomposition, i.e. <EMI ID = 7.1>
<EMI ID = 8.1>
usually stored, as the crystal or as a solution
<EMI ID = 9.1>
To stabilize group E prostaglandin, a method has heretofore been proposed in which the compound is dissolved in an organic solvent such as N, N-dimethylacetamide containing less than 0.1% water, as described in the patent. Belgian N [deg.] 790,840.
However, in the case of administration of the drug directly into the human body, particularly in administration by injection, the drug may sometimes be administered as an organic solution thereof or as a solution. organic diluted with water but it is usually preferred to administer the drug in the form of its aqueous solution (see for example "Dispensing of Medication", 976
(1971), 7th Edition, Mack Publishing Company).
This means that we are looking for a stable formulation containing a prostaglandin of group E which allows the storage of prostaglandin of group E in a stable form and which can be administered in the form of an aqueous solution in the case of administration by injection.
As a result of various research starting from the technical level described above, it was discovered that a formulation containing a prostaglandin of group E prepared by adding to the prostaglandin of group E at least one element chosen from thiol compounds, compounds with high molecular weight water soluble and water soluble salts of deoxycholic acid and subjecting the mixture to lyophilization or cold drying, can be stored stably for a long time at at room temperature without being broken down and can be administered as its aqueous solution, in the case of administration by injection.
That is to say that the present invention relates to a process for preparing a stable formulation containing a prostaglandin of group E which consists in adding to the prostaglandin of group E at least one element chosen from thiol compounds, water soluble high molecular weight compounds and the water soluble salts of deoxycholic acid and subjecting the mixture to lyophilization.
<EMI ID = 10.1>
high molecular weight water soluble and / or water soluble salts of deoxycholic acid are used as additive in the case of the present invention and examples of thiol compounds are glutathione, cysteine, acetylcysteine, etc, examples of water soluble high molecular weight compounds are natural or synthetic water soluble polymers, such as dextran, gelatin, polyvinylpyrrolidone, methylcellulose, hydroxypropylcellulose, hydroxyethylcellulose , carboxymethylcellulose, etc; and examples of water soluble salts of deoxycholic acid are arginine salt, lysine salt, alkali metal salts, etc. of this acid.
In carrying out the process of the present invention, water and at least one element chosen from thiol compounds, water-soluble high molecular compounds and water-soluble salts of the acid deoxycholic are added to the prostaglandin of group E to form an aqueous solution, after controlling the pH of the solution and applying to it a conventional operation such as sterile filtration, the solution is poured into ampoules or vials and the solution is then subjected to lyophilization according to the usual process. In addition, where appropriate, a usual excipient such as saccharides, amino acids, inorganic salts, etc. can be added to the composition mentioned above.
When using a water soluble salt of deoxycholic acid, the deoxycholic acid and a base capable of forming a water soluble salt with the acid, can be added to the aqueous solution to form the salt. in the so-. lution.
In addition, a group E prostaglandin is soluble in water but it takes a long time to dissolve its crystal in water and therefore when using the crystal of group E prostaglandin, it is preferable to dissolve the crystal beforehand in an organic solvent such as ethanol, ethyl acetate, etc. and then to remove the organic solvent by distillation to provide an amorphous solid so as to increase the contact surface thereof with water.
The preferred amount of additive used in the present invention for a receptacle is 1 to 20 mg for the thiol compound, 5 to 250 mg for the high molecular weight compound, in particular 0.1 - 150 mg for the derivatives of the cellulose among <EMI ID = 11.1>
water soluble deoxycholic acid.
In addition, if necessary, additives such as isotonic agent, antiseptic, excipient, analgesic, etc. can be added to the stable composition of group E prostaglandin.
The experiments reported below show that the formulation containing the prostaglandin of group E obtained by the method of the present invention can be stored stably for a long time.
EXPERIENCE
After adding 1 ml of water per vial to each of the lyophilized products obtained in Examples 2 to 6, 2 ml of water to the lyophilized product obtained in Example 1 and 1 ml of water per vial to the lyophilized product obtained in Examples 7 to 15, to dissolve the product in water, and have each solution adjusted to a
<EMI ID = 12.1>
ethyl acetate preferably under ice cooling. The extract was dried and concentrated. Furthermore, when 1 ml of water per ampoule was added to each of the lyophilized products obtained in Examples 5 and 6 to dissolve the product and the solution
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deoxycholic precipitated and thus the product was extracted with ethyl acetate after filtering off the precipitates and the extract was then dried and concentrated. The total amount of the concentrate was then subjected to thin layer chromatography on silica gel and the adsorbate was developed with a mixture of chloroform, methanol, acetic acid and water in the ratio as volumes 90: 8: 1: 0.8 (when using the lyophilized products obtained in Examples 5 and 6, the adsorbate was developed with a mixture of ethyl acetate, acetic acid, isooctane and water in volume ratio
90: 20: 50: 100). Then, a 5% ethanolic solution of phosphomolybdic acid was sprayed on the developed product,
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quer the staining, the absorbance of each spot of the decomposition products of prostaglandin E2, i.e. prosta-
<EMI ID = 15.1>
recording type densitometer (Densitometer from the COSMO Company of the Chromato Ace D-109 type) for determining the area of <EMI ID = 16.1>
sample was then calculated from the area ratio. The ratio of the prostaglandin E2 content per ampoule in each
<EMI ID = 17.1>
stored at 35 [deg.] C for 30 days (and for an additional 90 days for the lyophilized product obtained in Example 1) based on the prostaglandin E2 content per ampoule in the freshly lyophilized products was calculated as the percentage residual. The results are given in Table I.
<EMI ID = 18.1>
<EMI ID = 19.1>
(*): The residual percentage of prostaglandin E2 in the lyophilized product obtained in Example 1, stored for 90
<EMI ID = 20.1>
In addition, when the prostaglandin E2 crystal prepared without using the stabilizer of the present invention was stored for 30 days at 35 [deg.] C, the residual percentage was
10%.
The stabilizing effect of the stabilizers of the present invention for each prostaglandin of group E2 was then determined by measuring the residual percentage of the lyophilized formulations prepared according to the method of the present invention when the formulations were stored for 16 days at 45 ° C. .]VS. The results are given in the following Table.
TABLE He ***
<EMI ID = 21.1>
(*: new compound)
The invention will now be described in more detail in the form of the following Examples.
EXAMPLE 1
A solution of 100 mg of prostaglandin E2 crystals in 1 ml of ethanol was placed in a 2 liter container to wet the wall of the container with the solution and the ethanol was then removed under reduced pressure or by circulating nitrogen gas in the container. 10 g of methylcellulose and
1800 ml of distilled water was then added to the residue to dissolve the methylcellulose and after adjusting the system to pH 6.5 by adding an aqueous solution of sodium hydroxide, the
<EMI ID = 22.1>
distilled water was then added to the solution to bring the total volume to 2000 ml. The solution was then subjected to a filter- <EMI ID = 23.1>
ampoules containing one milliliter per ampoule and, after subjecting each sample to lyophilization, the ampoule was melt sealed.
EXAMPLE 2
<EMI ID = 24.1>
1 ml of ethanol was placed in a two liter container to wet the wall of the container with the solution and the ethanol was then removed under reduced pressure or by flowing nitrogen gas through the container. 30 g of glutathione and 1900 ml of distilled water were then added to the residue to dissolve the glutathione and, after adjusting the pH to 6.5 by addition of an aqueous solution of sodium hydroxide, the mixture was stirred. in a stream of nitrogen gas to dissolve prostaglandin E2. Distilled water was then added to the solution to bring the total volume to 2000 ml.
After subjecting the solution to sterile filtration according to a conventional procedure, the solution was used to fill ampoules at the rate of one milliliter per ampoule and, after subjecting it to lyophilization, the ampoule was melt sealed.
EXAMPLE 3
<EMI ID = 25.1>
1 ml of ethanol was placed in a two liter container to wet the wall of the container with the solution and the ethanol was then removed under reduced pressure or by circulating nitrogen through the container. Then, 400 g of dextran having an average molecular weight of 20,000 and 1200 ml of distilled water were added to dissolve the dextran, and the pH of the solution became about 6.5. After stirring the mixture again to dissolve the prostaglandin E2, distilled water was added to the solution thus formed to bring the total volume to
2000 ml. Then, after subjecting the solution to sterile filtration according to the conventional process, the solution was used to fill ampoules at the rate of one milliliter per ampoule, and after lyophilizing the solution, the ampoule was melt sealed.
EXAMPLE 4
A solution of 100 mg of prostaglandin E2 crystals in 1 ml of ethanol was placed in a two-liter container for <EMI ID = 26.1>
wet the wall of the container with the solution and the ethanol was then removed under reduced pressure or by circulating nitrogen gas through the container. Then 50 g of gelatin and 1800 ml of distilled water were added to the residue to dissolve the gelatin, and after adjusting the pH to 6.5 by adding aqueous sodium hydroxide solution, the mixture was stirred to dissolve. the
<EMI ID = 27.1>
sterile filtration according to the conventional process, the solution was used to fill ampoules at a rate of one milliliter per ampoule and after having freeze-dried the solution, the ampoule was sealed by fusion.
EXAMPLE 5
<EMI ID = 28.1>
1 ml of ethanol was placed in a two liter container to wet the wall of the container with the solution and the ethanol was then removed under reduced pressure or by circulating nitrogen through the container. 60 g of deoxycholic acid, 29.3 g of arginine and 1800 ml of water were then added to the residue to dissolve the arginine salt of deoxycholic acid thus formed in water and, after adjusting the pH to 7.0 by addition of hydrochloric acid, the mixture was stirred to dissolve prostaglandin E2. Distilled water was then added to the solution to bring the total volume to 2000 ml.
After subjecting the solution to sterile filtration according to the conventional procedure, the solution was ampoule at the rate of one milliliter per ampoule, and after lyophilizing the solution, the ampoule was melt sealed.
EXAMPLE 6
A solution of 100 mg of prostaglandin E2 crystals in 1 ml of ethanol was placed in a two liter container to wet the wall of the container with the solution and the ethanol was added.
was then removed under reduced pressure or by circulating nitrogen through the vessel. 20 g of deoxycholic acid, 29.3 g of arginine and 1800 ml of water were then added to the residue to dissolve the arginine salt of deoxycholic acid formed in water and, after adjusting the pH to 8.5 by addition of an aqueous solution of arginine, the mixture was stirred to dissolve
prostaglandin E2. Then, after subjecting the solution to sterile filtration, the solution was used to fill <EMI ID = 29.1>
When the solution was formed, the ampoule was melt sealed. EXAMPLE 7
A solution of 100 mg of crystals of 16-methyl-prostaglandin E2 in 1 ml of ethanol was placed in a two-liter container to wet the wall of the container with the solution and the ethanol was then removed under reduced pressure or by circulating nitrogen through the container. Then 400 g of dextran having an average molecular weight of 20,000 and 1500 ml of distilled water were added to the residue to dissolve the dextran and the 16-methyl-prostaglandin E2 and then distilled water was added to the solution to bring the overall volume to 2000 ml. After subjecting the solution to sterile filtration according to the conventional procedure, the solution was used to fill vials at a rate of one milliliter per vial, and after lyophilization of the solution, the vial was sealed.
EXAMPLE 8
A solution of 100 mg of crystals of 16-methyl-prostaglandin E2 in 1 ml of ethanol was placed in a two-liter container to wet the walls of the container with the solution and the ethanol was then removed under reduced pressure or by circulating nitrogen through the container. 120 g of dextran 70, having an average molecular weight of 70,000, and 1500 ml of distilled water were then added to the residue to dissolve the dextran.
<EMI ID = 30.1>
was then added to the solution to bring the overall volume to 2000 ml. The solution was then subjected to sterile filtration according to the conventional procedure and the solution was used to fill vials at a rate of one milliliter per vial and, after lyophilization of the solution, the vial was sealed.
EXAMPLE 9
A solution of 100 mg of 3-methyl prostaglandin E2 crystals in 1 ml of ethanol was placed in a two liter container to wet the wall of the container and the ethanol was then removed under reduced pressure or by circulating. nitrogen in the container. To the residue were then added 120 g of dextran having a molecular weight of 20,000 and 1500 ml of distilled water to dissolve the dextran and the 3-methylprostaglandin E2 and then distilled water was added to the solution to <EMI ID = 31.1>
solution to sterile filtration according to the conventional procedure, the solution was distributed into vials at the rate of one milliliter per vial, and after lyophilization of the solution, the vial was sealed.
EXAMPLE 10
A solution of 100 mg of crystals of 3.16-dimethyl (R) prostaglandin E2 in 1 ml of ethanol was placed in a container.
<EMI ID = 32.1>
Ethanol was then removed under reduced pressure or by circulating nitrogen through the vessel. To the residue was then added 120 g of dextran having an average molecular weight of
20,000 and 1,500 ml of distilled water to dissolve the dextran and 3,16 (R) -prostaglandin E2 dimethyl and distilled water was added to the solution to bring the overall volume to 2000 ml. Then, after subjecting the solution to sterile filtration according to the conventional method, the solution was placed in vials at a rate of one milliliter per vial, and after lyophilizing the solution, the vial was sealed.
EXAMPLE 11
A solution of 100 mg of crystals of oxo-17-epi-15-prostaglandin E2 in 1 ml of ethanol was placed in a two liter container to wet the walls of the container and the ethanol was then removed under pressure. reduced or by circulating nitrogen gas through the container. To the residue was then added
100 g of dextrin and 1500 ml of distilled water to dissolve the dextrin and then, after adjusting the pH thereof to 6.5 by addition of an aqueous solution of sodium hydroxide, the mixture
<EMI ID = 33.1>
Distilled water was then added to the solution to bring the total volume to 2000 ml. Then, after subjecting the solution to sterile filtration according to the conventional procedure, the solution was placed in vials at the rate of one milliliter per vial, and after lyophilizing the solution, the vial was sealed.
EXAMPLE 12
A solution of 100 mg of crystals of 3,16 (R) -dimethylprostaglandin E2 in 1 ml of ethanol was placed in a two-liter container to wet the walls of the container and the <EMI ID = 34.1>
& thanol was then removed under reduced pressure or by circulating nitrogen through the vessel. 10 g of polyvinylpyrollidone and 1500 ml of distilled water were then added to the residue to dissolve the polyvinylpyrollidone and, after adjusting the pH thereof to 6.5 by addition of an aqueous solution of sodium hydroxide, the mixture was stirred to dissolve the 3,16-dimethyl (R) -
<EMI ID = 35.1>
solution to bring the overall volume to 2000 ml. Then, after subjecting the solution to sterile filtration according to the conventional process, the solution was placed in vials.
at a rate of one milliliter per vial and, after lyophilizing the solution, the vial was sealed.
EXAMPLE 13
A solution of 100 mg of crystals of oxo-17-epi-15prostaglandin E2 in 1 ml of ethanol was placed in a container.
<EMI ID = 36.1>
Ethanol was then removed under reduced pressure or by circulating nitrogen gas through the vessel. Next, 10 g of methylcellulose and 1500 ml of distilled water were added to the residue to dissolve the methylcellulose and, after adjusting the pH thereof to 6.5 by adding an aqueous solution of hydroxy-
<EMI ID = 37.1>
15-prostaglandin E2. Distilled water was then added to the solution to bring the overall volume to 2000 ml. After subjecting the solution to sterile filtration, this was used to fill vials at a rate of one milliliter per vial and, after lyophilization of the solution, the vial was sealed.
EXAMPLE 14
A solution of 100 mg of crystals of 16-hydroxy (R) prostaglandin E2 in 1 ml of ethanol was placed in a two-liter container to wet the wall of the container and the ethanol was then removed under reduced pressure. or by circulating nitrogen gas through the container. 40 g of glutathione and 1500 ml of distilled water were then added to the residue to dissolve the glutathione and, after adjusting the pH thereof to 6.5 by addition of an aqueous solution of sodium hydroxide, the mixture was stirred to dissolve hydroxy-16 (R) -prostaglandin E2. Distilled water was then added to the solution to bring the overall volume to 2000 ml.
After subjecting the solution to sterile filtration according to a conventional procedure, the solution was used to fill vials at a rate of one milliliter per vial and, after lyophilization of the solution, the vial was sealed.
EXAMPLE 15
<EMI ID = 38.1>
glandin E2 in 1 ml of ethanol was placed in a two liter container to wet the wall of the container and the ethanol was then removed under reduced pressure or by circulating nitrogen gas through the container. 40 g of oxidized glutathione and 1500 ml of distilled water were then added to the residue to dissolve the oxidized glutathione and, after adjusting the pH thereof to 6.5 according to the conventional procedure, the solution was used to fill containers. vials at a rate of one milliliter per vial and, after lyophilization of the solution, the vial was sealed.
....... CLAIMS
1.- A process for preparing a stable formulation containing a prostaglandin of group E characterized in that one adds to the prostaglandin of group E at least one compound selected from thiol compounds, compounds with high molecular weight soluble in water and water-soluble salts of deoxycholic acid and subjects the solution to lyophilization.