BE551305A - - Google Patents

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BE551305A
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    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/1003Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor

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Description


   <Desc/Clms Page number 1> 
 



   La présente invention a pour objet un traitement de différentes matières, et   nomment   de laitances froides de poissons pour l'obtention d'acide nucléique pur et   de   ses      sels. 



   On connaît des procédés de traitement de différentes matières animales en vue de   l'obtention   d'acide nucléique, notamment par traitement des matières animales, par une lessive de soude et précipitation du nucléinate obtenu par l'alcool. Ces procédés aboutissent à des aoides nucléiques souillés. Si l'on veut obtenir un acide nucléique pur, on foit faire subir un traitement préalable à la matière pre- mière pour la débarrasser de ses impuretés organiques et minérales, et ne pratiquer l'extraction et la précipitation 

 <Desc/Clms Page number 2> 

 de l'acide nucléique que sur un produit   notablement   purifié. 



   La présente invention concerne un procédé pour l'extraction d'acide nucléique à partir de différentes ma-' tières premières, et notamment de laitances fraîches de pois- son, dans lequel on traite des laitances fraîches de poisson, dilacérées au préalable, par une lessive alcaline, et on précipite le nucléate alcalin formé par l'alcool, procédé caractérisé par ce qu'on purifie le nucléinate alcalin par un traitement à chaud à l'aide de sulfate de calcium et on précipite, à partir de la solution purifiée de nucléate alca- lin, l'acide nucléique pratiquement pur. 



   L'invention concerne encore un procédé de prépa- ration des sels de l'acide nucléique, caractérisé par ce qu'on mélange une suspension alcoolique d'acide nucléique à une solution alcoolique d'un sel du métal considéré, ce. qui donne le nucléinate métallique correspondant par double décomposition. 



   Pour l'application du procédé de la présente in- vention, on dilacère des laitances fraîches de poisson pour former une bouillie liquide. Cette bouillie est traitée par une lessive alcaline concentrée chaude. Le mélange se   liqué-   fie peu à peu et   l'hydrolyse   est arrêtée lorsque le tout est transformé en un liquide coloré. 



   On refroidit à environ 40  et précipite le nuclé- inate alcalin brut par l'alcool, lave par décantation et sé- pare le nucléinate par un moyen physique connu, par exemple par centrifugation ou filtration sous   press@@@.   



   Le précipité non séché est purifie par action à chaud du sulfate de calcium en présence   d'eau   Une première 

 <Desc/Clms Page number 3> 

 filtration à chaud pour éviter le colmatage facile des fil- tres, sera suivie d'une deuxième filtration à froid du jus obtenu pour éliminer la totalité des protéines retenues par le nucléinate alcalin. On obtient une solution limpide, fai-   blement   colorée, contenant du nucléinate alcalin pratique- ment pur. 



   1 acide nucléique est précipité de cette solu- tion purifiée par une méthode connue, par exemple par l'al- cool   chlorhydrique.   On le sépare par essorage ou centrifuga- tion, le lave à l'alcool et à   l'acétone.   On obtient un acide thymonucléique ou désoxyribosenucléique pratiquement pur. 



   Pour la fabrication des sels de l'acide nucléique or ajoute à une suspension d'acide nucléique dans l'alcool une solution alcoolique de sodium ou d'un sel du métal dont On   désire   former le nucléinate. Le nucléinate métallique se forré par double décomposition et peut être séparé par un procédé quelconque. 



  EXEMPLES - 
500 KG de laitances fraîches de poisson sont dilacérées JUSQU'à obtention   d'une   bouillie liquide. On trai- te cette bouillie par 85 litres de lessive de soude à 36  Bé, pendant 1 heure, à   80    0. On agite pendant ce chauffage, le   magna   formé initialement par l'incorporation de la soude se liquéfie peu à peu pour donner à la fin d'une heure un   liquide   brunâtre qu'on refroidit à 40  c. 



   On verse alors le liquide d'hydrolyse dans 650 litres d'alcool à 80    G-.L. Un   nucléinate de   sodium   impur pré- cipite et se dépose   rapidement.   On décante le liquide surna-   geant   et après trois lavages successifs du   précipité   à l'al- cool   @  G.L.,   le précipité est recueilli après un essorage 

 <Desc/Clms Page number 4> 

 aussi poussé que possible. 



   Le précipite essoré mais non séché est mélangé à une pâte formée de 97 litres d'eau et de 5,250 kg de sul- fate de calcium pour 75 kg de précipité. On mélange énergi-   queent   et chauffe à 80 G. Le mélange est filtré à chaud, le filtrat est refroidi et filtré de nouveau. On obtient alors un jus clair, jaune d'or. 



   8 volumes de ce jus sont versés dans un mélange tiède de 16 volumes d'alcool à 75/80  G.L. et 1,8 volumes d'acide chlorhydrique. Après agitât énergique, l'acide nu- cléique   se:dépose   sous forme d'un précipité blanc. Celui-ci est recueilli, lavé à l'alcool par décantation, essoré ou centrifugé et lavé de nouveau trois fois à l'alcool, et une fois à l'acétone. 



   On obtient une poudre blanche, légère, très fine, d'acide thymo-nucléique, contenant environ 
 EMI4.1 
 
<tb> - <SEP> azote <SEP> 15 <SEP> %
<tb> 
<tb> - <SEP> phosphore <SEP> 9 <SEP> , <SEP> 5 <SEP> %
<tb> 
<tb> - <SEP> humidité <SEP> 7 <SEP> %
<tb> 
 
Cet acide donne avec l'acétate de sodium une solu- tion stable qui ne révèle pas la présence de matières organi- ques ou minérales. 



   II. - Une partie d'acide   thyno-nucléique   obtenu dans l'exemple 1 est délayée dans de l'alcool à 85  G.L. On y ajoute une solution alcoolique de sodium, ou de sulfates de manganèse, de cuivre, de fer, de chlorure de calcium, de   magnésium   ou de cobalt ( sans que cette liste puisse avoir un caractère limitatif) etc... pour obtenir les   thymo-nuclé-   inates correspondants de sodium, manganèse, cuivre, fer,, cal- cium, magnésium, cobalt etc... qui se forment par double 

 <Desc/Clms Page number 5> 

 décomposition. 



    REVENDICATIONS,   
1 ) Procédé pour l'extraction d'acide nucléique à partir de différentes matières premières et notamment de laitances fraîches de poisson, dans lequel on traite la matière première par exemple des laitances fraîches de pois- son, dilacérées au préalable, par une lessive alcaline, et on précipite le nucléinate alcalin par l'alcool, procédé ca- ractérisé par ce qu'on purifie le nucléinate alcalin préci- pité par un traitement à chaud à l'aide de   sulfate   de cal- cium. et on précipite, à partir de la solution de nucléinate   @   alcalin purifiée, l'acide nucléique pratiquement pur par un 'alcool et d'acide chlorhydrique,   ce . qui   permet d'obtenir à partir de   matières   premières brutes de l'acide nucléique pur.

Claims (1)

  1. 2 ) Procédé conforme à la revendication 1, carac- térisé par ce que le nucléinate alcalin traité par le sulfa- te de calcium est filtré d'abord à chaud, ensuite à froid.
    3 ) Procédé conforme aux revendications 1 et 2, caractérisé par ce que l'acide nucléique est traité en sus- pension alcoolique par une solution alcoolique de sodium ou d'un sel métallique pour former, par double décomposition, le nucléinate correspondant au métal mis en oeuvre.
BE551305D BE551305A (fr)

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