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Compositions P ¯w q
La présente invention concerne de nouveaux composés, leurs mélanges et des procédés pour les préparer.
Le brevet anglais n* 2022078 décrit un certain nombre de pyrannoquinoléines, notamment l'acide 9-éthyl-6, 9-dihydro-4, 6-dioxo-lO-propYl-4H-pyranno- [3, 2-g]quinoléine-2, 8-dicarboxylique, dont le sel disodique, le nédocromil sodium, est utile pour traiter, entre autres, l'affection obstructive réversible des voies respiratoires. Le mode d'action du nédocromil sodium est, croit-on, de mettre en jeu la prévention ou 1'inhibition de l'activation des mastocytes par différents stimuli, notamment les allergènes.
D'autres médicaments utiles pour le traitement de l'affection obstructive réversible des voies respiratoires sont les agents dits anticholinergiques.
Le mécanisme d'action de ces médicaments est fort ditférent de celui du nédocromil sodium ; ils exercent un effet bronchodilatateur du à leur antagonisme de la fixation de l'acétylcholine, dégagée par les terminaisons du nerf vague, sur les récepteurs muscariniques du muscle lisse bronchique.
La Demanderesse a découvert à présent avec surprise que des mélanges de nédocromil sodium avec des agents anticholinergiques dans le rapport thérapeu- tique approprié offrent l'avantage qu'ils sont tant palliatifs que prophylactiques, sont plus efficaces, exposent moins ä une perte de la capacité de réponse, exercent moins d'effets secondaires, réduisent l'hyperactivité bronchique, peuvent être utilisés en doses plus faibles, peuvent être administrés directement au site de l'affection, par exemple par inhalation, peuvent etre administrés moins fréquement, par exemple 1 à 2 fois par jour, peuvent être administres en thérapeutique
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à long terme, ont une action plus durable, sont plus stables, sont synergiques, suscitent une meilleure observance par le patient,
ont un goût moins désagréa- ble ou ont d'autres propriétés souhaitables par comparaison avec l'agent anticholinergique utilise isolement, le nédocromi1 sodium utilisé iso1ément ou certains autres mélanges lors d'essais sur des modèles pharmacologiques appropriés.
L'invention a pour objet un mélange pharmaceutique comprenant a) l'un ou plusieurs d'entre l'acide 9-éthyl-6, 9-di-
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hydro-4, 2, et ses sels pharmaceutiquement ac-
6-dioxo-10-propyl-4H-pyranno- [3, 2-g] quinoléine-ceptables ("constituant actif A"), en association avec b) un ou plusieurs agents anticholinergiques ou leurs dérivés pharmaceutiquement acceptables ("constituant actif B").
La Demanderesse préfère utiliser le sel disodique de l'acide 9-éthyl-6;9-dihydro-4,6-dioxo-10- propyl-4H-pyranno- [3, 2-g] quinoléine-2, 8-dicarboxylique, appelle nédocromil sodium. Elle préfère aussi utiliser un seul constituant actif A en mélange avec un agent anticholinergique comme constituant actif B.
Des agents anticholinergiques spécifiques qui peuvent itre cités sont notammentl.'atropine, ses sels pharmaceutiquement acceptables, le bromure d'ipratropium et le bromure d'oxitropium.
L'invention a aussi pour objet un sel de
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l'acide pyranno-[3, un agent anticholinergique qui est basique ou est, capable de former, un cation.
Le sel peut etre formé par un procédé de double decomposition, par exemple par réaction d'un sel approprié, comme le sel disodique, de l'acide
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9-éthyl-6, 9-dihydro-4, 6-dioxo-10-propyl-4H-pyranno- [3, 2-g]quinoléine-Z8-dicarboxylique avec un sel approprié, par exemple le chlorhydrate, sulfate ou bromure, de l'agent anticholinergique. Toutefois, dans le cas d'un agent anticholinergique basique, le sel est de
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preference préparé par réaction de l'acide 9-éthyl-6, dihydro-4, 6-dioxo-10-propyl-4H-pyranno-[3, 2-g]quinoléine-2, libre avec la base libre de
9-l'agent anticholinergique, du fait qu'un tel procédé ne donne pas de sel inorganique comme sous-produit.
La réaction peut être exécutée dans un solvant qui est inerte dans les conditions de réaction. Le solvant est de préférence un solvant dans lequel le sel souhaité est soluble, par exemple l'eau. Le sel souhaité peut être isolé et purifié, par exemple, par cristallisation ou lyophilisation.
L'invention a par conséquent pour objet le sel lorsqu'il n'est pas en solution, par exemple le sel lorsqu'il se forme sous forme sensiblement seche. ou lorsqu'il se trouve en mélange avec une quantité insuffisante de liquide, par exemple d'eau, pour le dissoudre en totalité.
Si la chose est souhaitée, le sel peut être utilisé conjointement avec un ou plusieurs autres sels de l'acide 9-éthyl-6, 9-dihydro-4, 6-dioxo-10-propyl-4H- pyranno-[3, 2-g]quinoléine-2, 8-dicarboxYlique, notamrnent son sel disodique.
Le rapport des constituants actifs A et B dans la composition peut varier dans un large intervalle, suivant, parmi d'autres facteurs, les constituants actifs particuliers utilisés et les fins spécifiques auxquelles la composition est destinée. Toutefois, la Demanderesse préfère que la composition contienne 0, 4 à 400 parties en poids et plus avantageusement 1 à 200 parties en poids de constituant actif A
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(mesuré en nédocromi1 sodium) par partie en poids de constituant actif B.
Lorsque les constituants actifs sont présents sous la forme d'un sel de l'acide
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9-éthyl-6, [3, avec un agent anticholinergique basique nécessaire nulle ou tout au plus très
9-dihydro-4, 6-dioxo-lO-propyl-4H-pyranno-Une dose appropriée de constituant actif A pour l'Inhalation se situe dans l'intervalle de 1 ä 100 mg et de préférence de 1 à 20 mg (mesurée en
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nédocromil sodium).
Il est hautement préféré que la dose de constituant B soit de nature ä exercer un effet durable pluto que transitoire.
Le mélange peut être adtninistre en doses subdivisées 1 à 6 et de préférence 2 à 4 fois par jour.
Chaque dose peut comprendre une ou plusieurs doses unitaires.
Les mélanges conformes à l'invention peuvent être préparés en mélangeant ensemble les divers constituants actifs suivant des techniques classiques et connues.
Les sels et mélanges de l'invention sont de préférence administrés en mélange avec un excipient pharmaceutiquement acceptable.
Par conséquent, suivant un autre aspect, l'invention a pour objet une composition pharmaceutique comprenant un sel ou mélange conforme à l'inven- tion en mélange avec un excipient pharmaceutiquement acceptable.
La composition comprend de préférence moins de 80% et plus avantageusement moins de 50% en poids du sel ou mélange.
Les compositions de l'invention peuvent etre
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administrées par des voies tres diverses et peuvent agir de façon systémique ou locale. Ainsi, les compo- ses peuvent être administrés directement dans le nez ou l'oeil, dans la cavité buccale, par voie oesophagienne ou sur d'autres surfaces accessibles du corps.
Les nouveaux sels ou mélanges peuvent être administrés directement sur l'organe ou la partie du corps manifestant les symptômes ou sur une région distante de celle manifestant les symptômes. La Demanderesse préfère que l'administration soit une administration par voie orale ou nasale dans les poumons. Les compositions se prêtant à l'administration par cette voie comprennent les solutions (spécialement les solutions aqueuses) pour l'administration par nébulisation, et les compositions en poudre sous pression et non sous pression.
Pour l'utilisation dans les compositions en poudre, les sels ou melanges se présentent de prefs- rence sous la forme de particules ayant un diamètre médian en masse d'environ 0, 01 à 10/K. m, plus avantageusement de 2 à 6jU. m et le plus avantageusement de 2 à 4 m. Le bromure d'ipratropium est au nombre des agents anticholinergiques préférés pour les compositions en poudre.
Les compositions en poudre non sous pression peuvent contenir un excipient inerte, par exemple du lactose grossier. Les compositions en poudre sous pression peuvent contenir un gaz comprime, par exemple de l'azote, ou un agent propulseur liquéfié, la compo-
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sition contenant environ 1 à 20% p/p du sel ou du mé- lange.
Des exemples d'excipients appropriés pour les compositions ä administrer par d'autres voies sont : pour les comprimés, capsules et dragées - la cellulose microcristalline, le phosphate de calcium,
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la terre de diatomées, un sucre (par exemple le lactose, le dextrose ou le mannitol), le talc, l'acide stéarique, l'amidon, le bicarbonate de sodium et/ou la gélatine, et pour les suppositoires-les huiles naturelles ou durcies ou les cires.
Les sels, mélanges et compositions de l'invention sont utiles parce qu'ils ont de l'activite pharmacologique chez les animaux ; en particulier, ils sont utiles parce qu'ils inhibent le dégagement et/ou l'action des médiateurs pharmacologiques qui résultent de la combinaison in vivo de certains types d'anticorps et d'antigènes spécifiques, par exemple la combinaison d'un anticorps réaginique avec l'antigène spécifique (voir l'exemple 27 du brevet anglais 00 1. 292. 601).
Les sels et compositions se sont révélés aussi inhiber la dégranulation des mastocytes et entraver les trajets réflexes chez les animaux de laboratoire et l'être humain, en particulier les réflexes associés à la fonction pulmonaire. Chez l'etre humain, les altérations tant subjectives qu'objectives qui résultent de l'inhalation d'un antigène spécifique par les sujets sensibilises sont inhibées par l'administration préalable des nouveaux sels et nouvelles compositions. Par conséquent, les nouveaux sels et nouvelles compositions sont utiles pour le traitement de l'obstruction réversible des voies respiratoires et/ou pour empêcher la sécrétion d'un excès de mucus.
Ils sont par conséquent utiles pour le traitement de l'asthme allergique, de l'asthme dit"intrinseque" (pour lequel aucune sensibilité ä un antigene extrinsèque ne peut être démontrée), de l'asthme induit par l'exercice ou analogues, de la rhinite, du poumon de fermier, de la maladie des oiseleurs, de la bronchite, des toux (notamment la coqueluche) et les obstructions nasales et bronchiques associées au rhume ordinaire. Les nouveaux sels et mé-
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langes et leurs compositions sont précieux aussi pour le traitement d'autres états dans lesquels des réactions antigène-anticorps ou une sécrétion excessive de mucus sont la cause oe l'affection ou lui sont associées.
L'invention a donc aussi pour objet un procédé de traitement de l'affection obstructive reversible des voies respiratoires, suivant lequel on administre en quantité thérapeutiquement efficace a) l'un ou plusieurs d'entre l'acide 9-éthyl-6, 9-di- hydro-4, 6-dioxo-1O-propyl-4H-pyranno-[3, 2-g]quinoléine- 2, 8-dicarboxylique et ses sels pharmaceutiquement acceptables ("constituant actif A"), en association avec b) un ou plusieurs agents anticholinergiques ou leurs dérivés pharmaceutiquement acceptables ("constituant actif B") simultanément ou séparément dans le temps à un patient souffrant d'une telle affection.
Le procédé de traitement est exécuté de préférence sur une base quotidienne régulière, par exemple 1 ä 4 fois par jour. Le procédé est exécuté de préférence pendant une longue durée, par exemple au moins 4 semaines et plus avantageusement au moins 8 semaines. Le procédé comprend de préférence l'administration simultanée de doses fixées du constituant actif A et de doses fixées du constituant actif B.
Les constituants actifs A et B peuvent etre présentés sous une forme les contenant tous deux en association ou sous une forme contenant les deux constituants actifs séparément, avec des indications ou instructions pour leurs administrations successives conformément au procédé de l'invention.
Les nouveaux sels et mélanges et leurs compositions faisant l'objet de l'invention peuvent être utilisés dans divers programmes posologiques, soit isolément, soit conjointement avec un ou plusieurs
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autres composés actifs.
Les compositions de l'invention sont illustrées sans être limitées par les exemples 1 ä 3 ci-après.
Des techniques expérimentales typiques suivant lesquelles l'activité des sels, mélanges et compositions de l'invention peut etre mise en évidence sont illustrées dans les exemples A à E.
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EXEMPLE 1 Solution à nébuliser Nédocromil sodium 0, p/v (Constituant actif A) Méthonitrate d'atropine 0, (Constituant actif B)
Eau purifiée, pharmacopée britannique pour faire 100% préparé par dissolution des constituants actifs A et B dans l'eau.
EXEMPLE 2 Composition en poudre sous pression
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Nédocromil sodium 0, (Constituant actif A) Bromure d'ipratropium 0, 2% (Constituant actif B)
Trioleate de sorbitan 0, 5%
Propulseur 114 39, 2%
Propulseur 12 58, 8%
On disperse l'ester de sorbitan dans jusqu'à la moitié du propulseur 12 ä-40*C sous agitation ä l'aide d'un mélangeur à haute dispersion. On ajoute les constituants actifs ä la dispersion resultante. On ajoute ensuite le reste du propulseur 12 à -50 C, suivi du propulseur 14 également refroidi a-50"C. On introduit les mélanges résultants ensuite dans des flacons sur lesquels on sertit ultérieurement des valves doseuses.
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EXEMPLE 3 Composition en poudre non sous pression
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<tb> Nédocromil <SEP> sodium <SEP> 40% <SEP> p/p
<tb> (Constituant <SEP> actif <SEP> A)
<tb> Brom <SEP> ure <SEP> d'ipratropium <SEP> 10% <SEP>
<tb> (Constituant <SEP> actif <SEP> B)
<tb> Lactose <SEP> 50% <SEP>
<tb>
On mélange intimement les constituants actifs (granulométrie 0, 01 à lO m) et le lactose (granulometrie 30 ä 80)'m) et on les introduit ensuite dans des capsules de gelatine dure.
EXEMPLE A Test d'anaphylaxie pulmonaire passive chez le rat
On sensibilise passivement des femelles de rats (Charles River) d'un poids de 250 g en leur injectant par voie intraveineuse 0, 5 ml d'antisérum à l'IgE de rat potentialisé actif contre l'ovalbumine.
On anesthésie les rats à la pentobarbitone sodique (70 mg/kg) par voie intraveineuse. On insère une canule dans la trachée et on ventile le rat au moyen d'une pompe respiratoire Palmer Miniature Ideal dans un système clos. On enregistre la pression ä la trachée au moyen d'une dérivation latérale de la canule
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connectee ä un transducteur de pression d'air diffé- rentielle (UPI, Pye Ether Ltd. ). On règle le rythme respiratoire a 99 coups par minute avec une pression ä la trachee de 6 cm d'eau.
On provoque la réaction chez les rats, 48 heures après la sensibilisation, avec de l'ovalbumine (25 mg/kg, voie intraveineuse) et on mesure, en picant la trachée, l'augmentationconsécutive de la pression à la trachée exprimée en pourcentage du degré maximum possible de bronchoconstriction (#PCB max).
On administre le constituant actif A et/ou le constituant actif B isolement ou en combinaison,
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par voie intraveineuse dans de La solution physiologique salée dans le délai de 1 à 5 minutes avant l'administra-
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tion de l'antigene.
On soumet les résultats de l'administration des deux composés en combinaison à une analyse de variance pour une conception factorielle avec des mesures répétées dans chaque cellule. On execute une transformation par les racines carrées avant l'analyse.
On examine plus en détail tout effet antagoniste ou synergique des deux composés en appliquant le procédé décrit par Berenbaum, Clin Exp Immunol, 28, 1 (1977). Celui-ci consiste ä calculer la grandeur :
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oü [A] est la dose de A dans la combinaison de A et B donnant un effet X. tBJ est la dose de B dans la combinaison de A et B donnant un effet X.
[Ae] est la dose de A isolément donnant un effet X. [Be] est la dose de B isolement donnant un effet X.
Si Z > 1, A et B sont synergiques.
Z = 1, A et B sont additifs.
Z < 1, A et B sont antagonistes.
EXEMPLE B Inhibition du dégagement du médiateur par les cellules
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bronchoalvéolaires Matériels H]-S-Adénosyl-L-méthionine et 32 C chez Amersham International (Amersham, Buckinghamshire, Royaume-Uni), antisérum de mouton contre 1'IgE de rat, antisérum de chèvre contre l'IgE humaine et sérum de chèvre normal des Miles Laboratories (Slough, Buckinghamshire, Royaume-Uni). On précipite le sérum
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de chèvre témoin et anti-IgE humaine avec du sulfate d'ammonium à 40% de saturation (Largman et al, Methods Enzymol (1981) 74 : 22) et, après dialyse, on ajuste la fraction des globulines au volume d'origine du sérum.
On prépare l'antigene d'ascaris a partir du liquide pseudocoelomique d'Ascaris suum adulte par chromato graphie sur Sephadex G200 (Pharmacia, Milton Keynes,
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Buckinghamshire, Royaume-Uni), en appliquant le procédé d'Ambler et al, J Immunol Meth (1972), 1, 317.
Infection et lavage bronchoalvéolaire chez des macaques
On utilise pour ces études un groupe de 20. singes Macaca arctoides d'un poids de 8-18 kg. On infecte les animaux au moyen d'A. suum et on conduit le lavage comme décrit dans Pritchard et al, Clin
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Exp Immunol, (1983), 54 le liquide de lavage dans des tubes héparinisés et on le conserve sur glace.
Traitement des cellules BAL
On filtre le liquide de lavage à travers un tamis en Nylon de 175 m et on recueille les cellules par centrifugation (450 g pendant 5 minutes à 4OC).
On lave les cellules et on les remet en suspension à la dilution de travail requise dans du tampon (Tyrode tamponné ä l'HEPES 10mM, de pH 7,4 contenant 1 mg/ml de gélatine et 5 unités/ml d'héparine). On exécute les comptages différentiels des cellules sur des préparations humides dans du colorant de Kimura (20).
Lorsqu'il ne faut mesurer que le dégagement d'histamine, on provoque la réaction chez les cellules en triple en
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ajoutant 0, ml de cellules, à une densité de mastocytes/ml, à 0, ml de tampon contenant l'agent de .
05dégagement et le constituant B (par exemple 3x10 10-6M) et du nédocromil sodium (3x10'-10'4M) isolé- ment et en combinaison ä 37*C. Après 20 minutes d'incubation à 37 C, on arrête le processus de dégagement
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par addition de 0, 25 ml de tampon glae exempt de Ca2+ et Mg2+, contenant de l'EDTA 2mM. Après centrifugation (450 g pendant 5 minutes à 4*C) on recueille 0, 2 ml de surnageant pour le dosage de l'histamine.
Dans toutes les expériences d'inhibition, on choisit pour induire la réaction un niveau submaximal quid'apres l'expe- rience de lavages antérieurs chez cet animal, fait se dégager 15 ä 25% de l'histamine totale, mais pas plus de la moitié du dégagement maximum qui peut être atteint.
Mesure de l'histamine
On mesure l'histamine par le procédé isotopique double de Beaven et al, Clin Chim Acta, (1972), 37, 97 modifié comme décrit dans Pritchard et al.
EXEMPLE C Hyper-réactivité bronchique non spécifique chez l'asth- matique adulte
Des asthmatiques adultes ayant donné leur consentement informé ont parcipé ä l'etude.
Après administration préalable des constituants A et B isolément ou en combinaison, on provoque la réaction due à 1'histamine suivant le procédé de Cockcroft, Clin Allergy, (1977), 7, 235. On fait inhaler pendant 2 minutes à intervalles de 5 minutes, des concentrations de phosphate acide d'histamine qu'on double (0, 03-8 mg/ml). On mesure le V. E. M. S. sur un spiromètre à coin sec Vitalograph avant, de même que 0,5 minute et 1,5 minute apres chaque inhalation. On cesse d'exciter la réaction lorsque le V. E. M. S. a diminué de 20% ou davantage ä partir de la mesure ä la ligne de base. on établit les courbes de réponse log-dose et on mesure le PC20 par interpolation des deux derniers points.
EXEMPLE D
On a choisi pour cette étude des volontaires humains souffrant d'asthme allergique spécifique. Chez
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ces volontaires humains, une crise d'asthme succède normalement ä une inhalation d'un antigène auquel l'interesse est spécifiquement sensible. Le degré de la réaction asthmatique provoquée par ce procédé peut être mesuré par des examens répétés de la résis- tance des voies respiratoires.
On utilise un spiromètre convenablement conçu pour mesurer le volume expiratoire maximum par seconde (V. E. M. S.) et par conséquent les modifications de la résistance des voies respiratoires.
On mesure 5 minutes après administration du médicament les modifications du V. E. M. S. induites par le medicament.
On administre aux volontaires humains, 6 heures après administration du médicament, un antigène étalon et on mesure la baisse du V. E. M. S. 5 minutes après l'administration de l'antigene.
EXEMPLE E Effet des constituants actifs A et B séparément et en combinaison pour atténuer la bronchoconstriction in- duite par l'adenosine monophosphate
On a choisi pour cette étude des volontaires bien portantsatopiques. Avant l'administration du prétraitement, on mesure les valeurs à la ligne de base pour le volume expiratoire maximum par seconde (V. E. M. S.), le débit expiratoire partiel (D. E. P.) et le débit expiratoire maximum (D. E. M.). On effectue la mesure à au moins trois occasions ou jusqu'à ce que les lectures soient stables (variation de moins de 5%). A chaque occasion, on fait inhaler le prétraitement pendant 5 minutes au moyen d'un nébuliseur Wright (fonctionnant ä un débit de 7 litres par minute) par la bouche pendant la respiration courante.
Avant de commencer à provoquer la réaction dueal'adenosine monophosphate (AMP), on mesure V. E. M. S.,
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D. E. P. et D. E. M. Chaque jour de l'etude, on provoque la réaction due à l'AMP en administrant des doses d'AMP qu'on double, chacune étant inhalée pendant 2 minutes, soit au sortir d'un nébuliseur de Wright (fonctionnant ä un débit de 6, 5 litres par minute), soit au sortir d'un nébuliseur Acorn (fonctionnant au débit de 5, 5 litres par minute) jusqu'à ce qu'il y ait une reduetion de plus de 40% du D. E. P. Le nébuliseur choisi pour chaque sujet est le même tout au long de l'etude.
On administre l'AMP en concentration de 1 mg/ml à 256 mg/ml. le diluant étant de la solution physiologique salée. On administre les doses successives ä intervalles de 5 minutes. On mesure les débits expiratoires partiels ä 0, 5 et 2, 5 minutes après chaque dose d'AMP. Par interpolation sur une courbe de réponse log-dose, on détermine la dose induisant une réduction de 40% (PD. ) du D. E. P.
Les résultats rassemblés au tableau 1 sont ceux obtenus suivant le mode opératoire de l'exemple E chez quatre volontaires. Le constituant A est 1e né- docromil sodium administré à l'état de solution aqueuse
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ä 0, 5% p/v et le constituant B est le méthonitrated'atropine administré à l'état de solution aqueuse à 0, 2% p/v. La combinaison est une solution aqueuse contenant 0, 5% p/v de nédocromil sodium et 0, 2% p/v de methonitrate d'atropine.
TABLEAU 1
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<tb> Volontaire <SEP> PD40 <SEP> (mg/mi) <SEP>
<tb> Constituant <SEP> A <SEP> Constituant <SEP> B <SEP> Combinaison
<tb> 1 <SEP> 43 <SEP> 42 <SEP> 128
<tb> 2 <SEP> 32 <SEP> 23 <SEP> 128
<tb> 3 <SEP> 17 <SEP> 12 <SEP> 44
<tb> 4 <SEP> 27 <SEP> 3, <SEP> 4 <SEP> 119
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