WO2024108286A1 - Composição cosmética para a indução da síntese de melanina em um indivíduo ou animal; processo de produção; método cosmético e uso - Google Patents
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Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/99—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from microorganisms other than algae or fungi, e.g. protozoa or bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q5/00—Preparations for care of the hair
- A61Q5/06—Preparations for styling the hair, e.g. by temporary shaping or colouring
Definitions
- the present invention describes a new composition for inducing melanin synthesis in an individual or animal, including its use for the prevention and/or reversal of the graying process of hair strands.
- the present invention is in the fields of cosmetic, dermatological and/or pharmaceutical treatments.
- the color of hair, as well as skin, is the result of the amount and type of melanin, produced by melanocytes and transferred to keratinocytes.
- Hair follicle pigmentation involves the melanogenic activity of follicular melanocytes, the transfer of melanin granules to cortical and medullary keratinocytes and the formation of pigmented hair shafts (SLOMINSKI et al., 2005).
- Gray hair is one of the most visible indicators of aging in humans.
- the modulation of the graying process results from numerous factors, such as genetic, oxidative, psycho-emotional, metabolic, endocrine and nutritional (O'SULLIVAN et al., 2021).
- gray hair is a phenomenon associated with a decrease in the population of follicular melanocytes and a decrease in melanin content (SARIN; ARTANDI, 2007).
- SARIN ARTANDI
- melanin content a phenomenon associated with a decrease in the population of follicular melanocytes and a decrease in melanin content
- SARIN ARTANDI
- melanosomes found in the cytoplasm of melanocytes.
- Melanocytes are derived from immature melanocytes. During embryogenesis, these cells migrate from the neural crest, a transient component of the ectoderm located between the neural tube and the epidermis, reach the basal layer of the epidermis and then enter the developing hair follicles (SLOMINSKI et al., 2005; TOBIN, 2008 ).
- MITF microphthalmia-associated transcription factor
- SOX10 transcription factor SOX10 transcription factor
- Pax3 protein KIT
- FGF-2 fibroblast growth factor-2
- endothelin 3 endothelin 3 and others
- the melanin produced is transferred from the melanocytes to the keratinocytes of the hair bulb (SLOMINSKI et al., 2005).
- Melanin is produced during a complex pathway involving a series of chemical and enzymatic reactions, known as melanogenesis.
- the color that constitutes an individual's hair is the result of the activity of the enzyme tyrosinase (TYR), so its regulation and activity are crucial during the melanin synthesis process (TOBIN, 2008).
- TRP-1 tyrosinase-related protein 1
- TRP-2 tyrosinase-related protein 2
- DCT dopachrome tautomerase
- the dopachrome it can then, by spontaneous decarboxylation, generate 5, 6-dihydroxyindole (DHI) which quickly oxidizes and polymerizes to form insoluble high molecular weight dark brown-black polymers, belonging to the group of eumelanins.
- DHI 5, 6-dihydroxyindole
- TRP-2/DCT is available, dopachrome can be acted upon by this enzyme and give rise to 5,6-dihydroxy-2-carboxylic acid (DHICA), which, through the action of TRP-1, will also form eumelanin.
- DHICA 5,6-dihydroxy-2-carboxylic acid
- cysteine In the presence of cysteine, dopaquinone reacts with this molecule, forming cystenyldopa, which then oxidizes and polymerizes, giving rise to soluble red-yellow pigments, collectively known as pheomelanins (PILLAIYAR et al., 2017).
- a-melanocyte-stimulating hormone (a-MSH) agonist such as GreyverseTM (Glycerin (and) Water (and ) Palmitoyl Tetrapeptide-20 Amide - IFF Lucas Meyer) - Patent Document AU2008271875A1 .
- GreyverseTM Glycerin (and) Water (and ) Palmitoyl Tetrapeptide-20 Amide - IFF Lucas Meyer
- Another example of a product consists of the association Taxifolina Glucoside and Acetyl Tyrosine (DarkenylTM - Givaudan) - Patent document W02020089216A1. According to the results presented, the product statistically significantly induces gene expression, among other genes, of MC1 R and POMC.
- EUK-134 Ethylbisiminomethylguaiacol Manganese Chloride - Lucas Meyer Cosmetics
- EUK-134 Ethylbisiminomethylguaiacol Manganese Chloride - Lucas Meyer Cosmetics
- CN102988235 describes the association of deer antler, Radix Ginseng Rubra Radix Polygoni Multiflori, Semen soyae atricolor, and Brassica campestris oil capable of promoting natural hair repigmentation.
- KR102265875 describes a composition intended for darkening hair and preventing graying using exosomes derived from stem cells.
- WO201 4096086 describes the topical use of the microorganism
- Bifidobacterium longum in lysate form, for pro-pigmenting action.
- PI0916690 discloses the oral cosmetic use of a probiotic microorganism (i.e., a live microorganism) of Lactobacillus paracasei or its lysate for cosmetic treatment of disorders of an oily scalp, particularly scalp dandruff.
- a probiotic microorganism i.e., a live microorganism
- Lactobacillus paracasei or its lysate for cosmetic treatment of disorders of an oily scalp, particularly scalp dandruff.
- KR102570587 describes the use of a product resulting from the fermentation of a microorganism of the genus Lactobacillus, that is, a mixture obtained from the fermentation of a culture medium containing an energy source such as skimmed milk powder with Lactobacillus to prevent gray hair or improve gray hair.
- a product resulting from the fermentation of a microorganism of the genus Lactobacillus that is, a mixture obtained from the fermentation of a culture medium containing an energy source such as skimmed milk powder with Lactobacillus to prevent gray hair or improve gray hair.
- the aforementioned document at no point describes the species of microorganism tested and which generated the experimental results, contenting itself with saying that it is a Lactobacillus culture selected from a total of 4,000 species (example 1).
- the strain may be one of Lactobacillus pentosus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus casei and Lactobacillus acidophilus.
- the fermented product must contain a large amount of carboxyl groups, which react with the amino acid inside the hair strand to change the color of the strand through an external reaction to the fiber at room temperature. It is, therefore, not only a product of a different nature to the present invention, but also an agent that acts chemically on the thread, externally.
- the present invention aims to solve the constant problems in the state of the art using a new composition that surprisingly has a pro-melanogenesis effect.
- composition of the present invention showed results in inhibiting POM gene expression, in addition to decreasing the expression of MC1 R, both important biomarkers in the process of melanogenesis and, consequently, hair pigmentation. Furthermore, the composition of the present invention was shown to be capable of positively modulating the expression of other genes (e.g. TYR, DCT, TYRP-1, MITF, MYO5A, PMEL, MLPH), suggesting a different mechanism of action in relation to what is presented in the state of the art.
- other genes e.g. TYR, DCT, TYRP-1, MITF, MYO5A, PMEL, MLPH
- the composition comprises between 0.001% and 20% by weight of lysate.
- the composition comprises between 0.001% and 5% by weight of lysate. [0027] In one embodiment of the invention, the composition is for preventing and/or reversing the graying process of hair strands.
- the composition is for inducing melanin synthesis in hair follicles.
- the composition is a topical hair cosmetic composition.
- a new process for producing a composition as previously defined comprising: anaerobic cultivation of microorganisms of the species Lacticaseibacillus paracasei in culture medium until the stationary phase; total or partial inactivation and lysis of microorganisms by subjecting the medium to a temperature between 55°C and 80°C for at least 30 minutes; filtration and centrifugation; mixing the resulting lysate with at least one suitable cosmetic vehicle.
- a cosmetic method of inducing melanin synthesis in an individual or animal for preventing and/or reversing the graying process of hair strands comprising topical administration to the hair follicles of a composition as previously described, in a cosmetically suitable amount to enable said induction in an individual or animal.
- composition for inducing melanin synthesis in an individual or animal for preventing and/or reversing the graying process of hair strands is also presented.
- the composition is for application to a region of skin comprising hair follicles.
- Figure 1 Representative images of the effect of Lacticaseibacillus paracasei lysate on melanin synthesis in ex vivo hair follicles - Warthin Starry staining (x40 objective lens), comparatively the same formulation without the addition of the lysate (placebo) and a benchmark composition .
- the inventors characterized the ability of the Lacticaseibacillus paracasei lysate to stimulate the expression of a surprising number of genes related to melanin production in the hair follicle, in addition to directly demonstrating the stimulation of melanin melanin production in follicle culture.
- Lacticaseibacillus paracasei lysate was able to stimulate the gene expression of Tyrosinase (TYR), Dopachrome tautomerase (DCT), Tyrosinase-related Protein-1 (TYRP-1), Melanogenesis transcription factor -associated (MITF), Myosin 5A (MYO5A), Premelanosome Protein (PMEL), Melanophyllin (MLPH), all genes related to the pigmentation process in the hair follicle and skin.
- TLR Tyrosinase
- DCT Dopachrome tautomerase
- TYRP-1 Tyrosinase-related Protein-1
- MITF Melanogenesis transcription factor -associated
- PMEL Premelanosome Protein
- MLPH Melanophyllin
- the application of the cosmetic or dermatological or pharmaceutical compositions of the invention promotes the prevention and/or reversal of the hair graying process.
- the present invention refers to the use of a Lacticaseibacillus paracasei lysate or a fraction thereof for the preparation of a pharmaceutical and/or dermatological composition, intended for the prevention and/or reversal of hair graying process.
- the term “prevent” means to reduce the risk of manifestation of the phenomenon in question.
- a cosmetic method for treating and/or preventing the graying process comprising at least one step of administering a Lacticaseibacillus paracasei lysate or a fraction thereof to a individual in an effective quantity for the treatment and/or prevention in question.
- said lysate is applied topically to a region comprising hair follicles.
- Lacticaseibacillus paracasei also known as Lactobacillus paracasei (previous taxonomic definition of the microorganism and updated as described by Zheng et al. 2020 in the new taxonomic classification of the genus Lactobacillus in the specialized journal “International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology'), used as an active composition presented in the present patent application it is used in the form of a lysate.
- a lysate commonly denotes a material obtained after the destruction or dissolution of biological cells by a phenomenon called cell lysis, thus causing the release of intracellular biological constituents naturally contained in the cells of the microorganism in question.
- lysate is used to denote the entire lysate obtained by lysis of the microorganism in question or just a fraction of it.
- the invention relates to the application of a lysate of the species Lacticaseibacillus paracasei and/or a fraction thereof for the purposes specified herein.
- the lysate used is, therefore, formed totally or partially from intracellular biological constituents and/or constituents of cell walls and membranes.
- This cell lysis can be carried out by various technologies, for example osmotic shock, thermal shock, with ultrasound, or under mechanical stress such as centrifugation.
- the lysate is obtained by cell lysis between 55 S C and 80 S C, with centrifugation being carried out at the end of the process.
- microorganisms of the species Lacticaseibacillus paracasei are cultivated anaerobically in a suitable culture medium.
- the culture medium is inactivated and lysed, for example by heating to a temperature between 55°C and 80°C, optionally between 60°C and 65°C for 30 min by pasteurization process.
- the microorganisms are then removed by a conventional separation technique, for example membrane filtration, centrifuged and the supernatant is subsequently used as product.
- the active ingredient forming the lysate and belonging to the species Lacticaseibacillus paracasei can be formulated in a composition at a concentration of at least 0.0001% (expressed in dry weight), in particular at a concentration of 0.001 to 20% and more particularly at a concentration of 0.01 to 5% of the dry weight of the active substance in relation to the total weight of the vehicle or the composition that contains it.
- compositions according to the invention can be presented in all galenic forms normally available for the method of adopted administration.
- the carrier/vehicle can be of varied nature depending on the type of composition considered.
- compositions intended for topical administration may be an aqueous, aqueous-alcoholic or oily solution, a solution-type dispersion or lotion or serum-type dispersion, an emulsion of liquid or semi-liquid consistency, obtained by dispersing an oily phase in an aqueous phase (O/W) or vice versa (W/O), or a suspension or emulsion of soft, semi-solid or solid consistency, of the cream, aqueous or anhydrous gel type, or microemulsions, microcapsules, microparticles or vesicular dispersions of ionic and/or non-ionic type.
- the product formulation may be Benzyl alcohol: 0.80%; Ethylhexylglycerin: 0.20% and Lacticaseibacillus paracasei lysate: q.s.p 100%.
- compositions may in particular constitute creams for cleaning, protection, treatment or care, lotions, gels or mousses for scalp care, such as cleaning or disinfecting lotions or bath compositions. They can also be used for the scalp in the form of solutions, creams, gels, emulsions, mousses or in the form of aerosol compositions also containing a propellant under pressure. Specifically, they can be in the form of hair tonics, conditioners, leave ons, shampoos, among others.
- Said ingredient with anti-graying action has characteristics that allow it to be adapted into different types of products with different compositions for hair care, such as: [0060] Alcohol-free hair tonic, through compositions comprising 0.10% of xylyl sesquicaprylate, 2% PPG-5-Ceteth 20, 10% Lacticaseibacillus paracasei lysate and water q.s.p. 100%.
- compositions comprising 0.10% xylyl sesquicaprylate, 20% ethyl alcohol 96%, 2% of PPG-5-Ceteth 20, 10% Lacticaseibacillus paracasei lysate and 100% qsp water.
- Conditioner by means of compositions comprising 0.10% disodium EDTA, 1% glycerin, 0.50% cetyl trimethyl ammonium chloride, 0.22% 85% lactic acid, 3.00% alcohol keto-stearyl 30/70, 1.00% cetyl alcohol, 0.20% stearamido propyl dimethyl amine, 0.50% xilytyl sesquicaprylate, 2% Lacticaseibacillus paracasei lysate and water q.s.p. 100%.
- compositions comprising 0.10% disodium EDTA, 1% glycerin, 0.80% cetyl trimethyl ammonium chloride, 0.10% citric acid 50%, 0.22% lactic acid 85%, 3.00% keto-stearyl alcohol 30/70, 0.70% cetyl alcohol, 0.30% eyoxylated keto-stearyl alcohol 20 OE, 0.50% xylyl sesquicaprylate, 2% of Lacticaseibacillus paracasei lysate and water q.s.p. 100%.
- shampoo by means of compositions comprising 4% cocoamidopropylbetaine, 27% sodium lauryl ether sulfate, 3% sodium lauroyl sarcosinate, 1% laurel glucoside, 4% cocoamide DEA, 0.50% sesquicaprylate of xylyl, sodium chloride q.s.p, 50% citric acid solution q.s.p. pH 6.00 - 7.00, 2% Lacticaseibacillus paracase lysate in water q.s.p. 100%.
- dosage forms intended for topical administration may also contain additives common in the cosmetic, pharmaceutical and/or dermatological field, such as hydrophilic or lipophilic gelling agents, hydrophilic or lipophilic active ingredients, preservatives, antioxidants, solvents, perfumes, fillers , filters, odor absorbers and dyes.
- additives common in the cosmetic, pharmaceutical and/or dermatological field, such as hydrophilic or lipophilic gelling agents, hydrophilic or lipophilic active ingredients, preservatives, antioxidants, solvents, perfumes, fillers , filters, odor absorbers and dyes.
- additives common in the cosmetic, pharmaceutical and/or dermatological field, such as hydrophilic or lipophilic gelling agents, hydrophilic or lipophilic active ingredients, preservatives, antioxidants, solvents, perfumes, fillers , filters, odor absorbers and dyes.
- the quantities of these various additives are those classically used in the field in question, for example from 0.01 to 20% of the total weight of the composition. Depending on their nature, these
- the products can be used as cosmetic compositions, dermatological or pharmaceutical products for topical use capable of modulating the production of melanin in the hair follicle.
- These compositions may in particular constitute creams for cleaning, protection, treatment or care, lotions, gels, shampoos, conditioners or mousses for scalp care, such as cleaning or disinfecting lotions or bath compositions.
- Example 1 Assessment of the modulation of gene expression in fragments of human skin
- RNAIaterTM solution Qiagen
- the ex vivo tissue was mechanically macerated and then the RNA was extracted with a commercially available kit, quantified, and analyzed for its integrity.
- cDNA synthesis was performed with the High-Capacity cDNA Reverse Transcription® kit (Applied Biosystems) and conducted on the StepOnePlus device (Applied Biosystems). Subsequently, the cDNA was quantified in a Nanodrop Lite device (Thermo Scientific)
- High-throughput RT-qPCR was performed using the BiomarkTM HD System (Fluidigm, San Francisco, CA), associated with the IFC Controller HX, which supports the IFC 96.96 Dynamic ArrayTM.
- the cycle threshold was determined specifically for each assay using Fluidigm Software and expression results were analyzed using the delta-delta Ct method.
- Table 1 shows the average level of modulation of the expression of genes related to pigmentation in fragments treated with the Lacticaseibacillus paracasei lysate, in relation to the placebo group.
- Example 2 Evaluation of the induction of melanin synthesis in follicle culture
- lacticaseibacillus paracasei lysate 0.002% w/w
- benchmark Glycerin, Water and Palmitoyl Tetrapeptide-20 Amide - 0.002% w/w.
- an excess of hair follicles was prepared to reach the target value of 12 high-quality hair follicles per condition at the end of the experiment.
- the hair follicles were incubated for 7 days with renewal of the treatment by removing and replacing the medium after 3 and 5 days of incubation.
- the sections were deparaffinized and then subjected to the Warthin Starry staining method. Finally, the sections were observed under a microscope (40x objectives) and images were recorded. The amount of melanin was assessed by measuring the marked area of melanin normalized by the area of the bulb in the bulb (semiquantitative image analysis method).
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Abstract
A presente invenção descreve uma nova composição para a indução da síntese de melanina em um indivíduo ou animal incluindo a sua utilização para a prevenção e/ou reversão do processo de grisalhamento dos fios de cabelo.
Description
COMPOSIÇÃO COSMÉTICA PARA A INDUÇÃO DA SÍNTESE DE MELANINA EM UM INDIVÍDUO OU ANIMAL; PROCESSO DE PRODUÇÃO; MÉTODO COSMÉTICO E USO
Campo Técnico da Invenção
[0001] A presente invenção descreve uma nova composição para indução da síntese de melanina em um indivíduo ou animal incluindo a sua utilização para a prevenção e/ou reversão do processo de grisalhamento dos fios de cabelo. A presente invenção se situa nos campos de tratamentos cosméticos, dermatológicos e/ou farmacêuticos.
Antecedentes da Invenção
[0002] A cor dos cabelos, assim como da pele, é resultado da quantidade e tipo de melanina, produzida pelos melanócitos e transferida para os queratinócitos. A pigmentação do folículo piloso envolve a atividade melanogênica dos melanócitos foliculares, a transferência dos grânulos de melanina para os queratinócitos corticais e medulares e a formação de hastes capilares pigmentadas (SLOMINSKI et al., 2005).
[0003] O cabelo grisalho é um dos mais visíveis indicadores de envelhecimento em humanos. A modulação do processo de grisalhamento decorre de inúmeros fatores, tais quais genéticos, oxidativos, psicoemocionais, metabólicos, endócrinos e nutricionais (O'SULLIVAN et al., 2021 ).
[0004] Mais especificamente, o surgimento de cabelos brancos é um fenômeno associado à diminuição da população de melanócitos foliculares e à diminuição do conteúdo de melanina (SARIN; ARTANDI, 2007). Quanto à densidade de melanócitos foliculares, diversos mecanismos interferem sobre esse fator: a perda de células-tronco dos melanócitos ou sua falha na diferenciação, defeitos na migração dos melanócitos, apoptose dos melanócitos e mau funcionamento da maquinaria pigmentar (TOBIN, 2011 ).
[0005] Da mesma forma que a densidade de melanócitos, é fundamental destacar que a modulação da síntese de melanina apresenta papel igualmente
relevante. As melaninas da pele e do folículo capilar são produzidas no interior de organelas chamadas melanossomos, encontradas no citoplasma de melanócitos. Os melanócitos derivam de melanócitos imaturos. Durante a embriogênese, essas células migram da crista neural, um componente transitório da ectoderme localizado entre o tubo neural e a epiderme, alcançam a camada basal da epiderme e então entram nos folículos pilosos em desenvolvimento (SLOMINSKI et al., 2005; TOBIN, 2008). Os fatores que levam uma subpopulação dessas células da crista neural a se tornarem melanócitos permanecem pouco elucidados, porém sabe-se que vários fatores estão envolvidos, incluindo MITF (fator de transcrição associado à microftalmia), fator de transcrição SOX10, proteína Pax3, KIT, FGF-2 (fator de crescimento de fibroblastos-2), endotelina 3 e outros (TOBIN, 2008).
[0006] No folículo piloso, a melanina produzida é transferida dos melanócitos para os queratinócitos do bulbo capilar (SLOMINSKI et al., 2005). A melanina é produzida durante uma via complexa que envolve uma série de reações químicas e enzimáticas, conhecida como melanogênese. A cor que constitui o cabelo de um indivíduo é resultado da atividade da enzima tirosinase (TYR), de modo que sua regulação e atividade são cruciais durante o processo de síntese da melanina (TOBIN, 2008). Além da tirosinase, as enzimas, proteína relacionada à tirosinase 1 (TRP-1 ) e proteína relacionada a tirosinase 2 (TRP-2), também conhecida como dopacromo tautomerase (DCT), são importantes mediadores desse processo (PILLAIYAR et al., 2017).
[0007] A melanogênese se inicia com a oxidação da tirosina em dopa e desta em dopaquinona pela ação da TYR na presença de oxigênio molecular. Esse primeiro passo é limitante na síntese de melanina, já que o restante da reação pode acontecer espontaneamente em um valor de pH fisiológico (PILLAIYAR et al., 2017). A partir desse momento, a presença ou ausência de cisteína irá determinar qual pigmento, eumelanina ou feomelanina, será formado. [0008] Na ausência da cisteína, a dopaquinona é convertida em leucodopacromo e em seguida em dopacromo por auto-oxidação. O dopacromo
pode então, por descarboxilação espontânea, gerar o 5, 6-di-hidroxiindole (DHI) que rapidamente se oxida e polimeriza para formar polímeros insolúveis de alto peso molecular de tom marrom-preto escuro, pertencentes ao grupo das eumelaninas. No entanto, se o TRP-2/DCT estiver disponível, o dopacromo pode sofrer ação dessa enzima e originar o ácido 5,6-dihidroxi-2-carboxílico (DHICA), que por ação da TRP-1 também formará a eumelanina. Já na presença de cisteína, a dopaquinona reage com essa molécula, formando a cistenildopa que depois se oxida e polimeriza, dando origem a pigmentos solúveis de tom vermelho-amarelo, conhecidos coletivamente como feomelaninas (PILLAIYAR et al., 2017).
[0009] A melanogênese pode ser regulada por diversas vias. É relevante destacar que a estimulação desse processo se dá principalmente pelo peptídeo pró-opiomelanocortina (POMC) nos queratinócitos. Após a produção e subsequente clivagem dessa molécula, diferentes produtos são originados, entre eles o hormônio estimulador de melanócitos (a-MSH), o hormônio adrenocorticotrópico (ACTH), [3-lipotrofina (|3-LPH), [3-endorfina ([3-END), além de p-MSH e y-MSH. ACTH e a-MSH são considerados alguns dos principais estimuladores da melanogênese (PILLAIYAR et al., 2017; SCHERER et al., 2010).
[0010] Diferentes estratégias têm sido desenvolvidas com objetivo de reverter o processo de grisalhamento.
[0011] A reversão da hipopigmentação do folículo capilar associada a algumas deficiências nutricionais, por meio da suplementação de ferro em pacientes com anemia, já foi relatada (BHAT et al., 2013). A nível tópico, tratamentos têm sido comercializados e podem conter uma variedade de compostos (ácido para-aminobenzóico, ácido fítico, capixil, pantotenato de cálcio etc.), mas os resultados são muitas vezes inconsistentes e apenas temporários (SEHRAWAT et al., 2017). A base do tratamento é muitas vezes camuflar os cabelos brancos com corantes, com alguns estudos mostrando que os corantes capilares protegem o cabelo contra os fotodanos (SEHRAWAT et al., 2017).
Abordagens de tratamento mais promissoras envolvem compostos antienvelhecimento ou antioxidantes, a terapia com hormônio de crescimento humano recombinante e o uso do agonista do hormônio estimulante de a- melanócitos (a-MSH), como faz o Greyverse™ (Glycerin (and) Water (and) Palmitoyl Tetrapeptide-20 Amide - IFF Lucas Meyer) - Documento Patentário AU2008271875A1 . Como consequência da ativação do receptor MC1 R, Greyverse™ eleva a síntese do próprio receptor, indicando o mecanismo de ação central da atividade.
[0012] Outro exemplo de produto consiste na associação Taxifolina Glucosideo e Acetil Tirosina (Darkenyl™ - Givaudan) - Documento patentário W02020089216A1 . De acordo com resultados apresentados, o produto induz de forma estatisticamente significativa a expressão gênica, entre outros genes, de MC1 R e POMC. Ainda pode ser citado como exemplo de produto de aplicação tópica cosmética comercialmente disponível e destinado para o combate do grisalhamento o EUK-134 (Ethylbisiminomethylguaiacol Manganese Chloride - Lucas Meyer Cosmetics). Este último consiste em um mimético de duas enzimas naturais da pele, a superóxido dismutase e catalase, que exercem importante papel antioxidante e, dessa forma, atuam mais precisamente no combate ao estresse oxidativo, mas não exatamente na estimulação da síntese de melanina. [0013] Outros documentos patentários podem ser citados por descrever invenções destinadas a reverter o grisalhamento.
[0014] CN102988235 descreve a associação de chifre de cervo, Radix Ginseng Rubra Radix Polygoni Multiflori, Semen sojae atricolor, e óleo de Brassica campestris capaz de promover a repigmentação natural do cabelo.
[0015] KR102265875 descreve uma composição destinada a escurecimento dos fios e prevenção do grisalhamento a partir de exossomos derivados de células tronco.
[0016] WO201 4096086 descreve o uso tópico do micro-organismo
Bifidobacterium longum, na forma de lisado, para ação pró-pigmentante.
[0017] PI0916690 (W02010013182) revela o uso cosmético oral de um
microorganismo probiótico (ou seja, um micro-organismo vivo) de Lactobacillus paracasei ou seu lisado para tratamento cosmético de distúrbios de um couro cabeludo oleoso, particularmente de caspa do couro cabeludo.
[0018] KR102570587, por sua vez, descreve o uso de um produto resultante do fermentado de um microrganismo do gênero Lactobacillus, ou seja, uma mistura obtida a partir da fermentação de um meio de cultura contendo uma fonte de energia como pó de leite desnatado com Lactobacillus para prevenir cabelos grisalhos ou melhorar cabelos grisalhos. O referido documento em nenhum momento descreve qual a espécie do microrganismo testado e que gerou os resultados experimentais, contentando-se em dizer que é uma cultura de Lactobacillus selecionada entre um total de 4.000 espécies (exemplo 1 ). Ainda, descreve genericamente que a cepa pode ser uma entre Lactobacillus pentosus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus casei e Lactobacillus acidophilus. De acordo com a publicação, o produto fermentado deve conter uma grande quantidade de grupos carboxila, que reagem com o aminoácido dentro do fio de cabelo para mudar a cor do fio através de uma reação externa à fibra à temperatura ambiente. Trata-se, portanto, não somente de um produto de natureza distinta à presente invenção, como um agente que atua quimicamente junto ao fio, de forma externa.
[0019] Ainda, de acordo com a busca ao estado da técnica aqui realizada, são diversos os exemplos de produtos com ação antimelanogênica produzidos composições e/ou extratos de Lactobacillus, tais como os descritos em Lim, H. Y. et al. “Antiwrinkle and Antimelanogenesis Effects of Tyndallized Lactobacillus acidophilus KCCM12625P’. Int. J. Mol. Sci. 2020, 21 , 1620 que utiliza Lactobacillus acidophilus. Choi, W. S et al. “ Whitening Effects of Lactobacillus rhamnosus Associated with Its Antioxidative Activities" Korean J. Microbiol. Biotechnol. (2013), 41 (2), 183-189, que utilizam Lactobacillus rhamnosus e/ou Lactobacillus casei. Bajpai, V. K. et al. “ Partially Purified Exo-Polysaccharide from Lactobacillus Sake! Probio 65 with Antioxidant, a-Glucosidase and Tyrosinase Inhibitory Potential’ J. Food Biochemistry, 40 issue 3, (2016), p. 264-274 que
utiliza Lactobacillus sake!. Kim H. R., et al. “Lipoteichoic acid isolated from Lactobacillus plantarum inhibits melanogenesis in B16F10 mouse melanoma cells. Mol Cells”. 2015 ;38(2): 163-70 que utiliza Lactobacillus plantarum.
[0020] Demonstra-se assim que o campo técnico possuí uma alta imprevisibilidade inerente e que produtos que possam parecer similares, não serão necessariamente igualmente eficazes.
[0021] Assim, o presente pedido de patente visa apresentar novas formas de solução dos problemas constantes no estado da técnica. Do que se depreende da literatura pesquisada, não foram encontrados documentos antecipando ou sugerindo os ensinamentos da presente invenção.
Sumário da Invenção
[0022] Dessa forma, a presente invenção tem por objetivo resolver os problemas constantes no estado da técnica a partir de uma nova composição que surpreendente possui efeito pro-melanogênese.
[0023] A composição da presente invenção apresentou resultados de inibição da expressão gênica de POM, além de diminuir a expressão de MC1 R, ambos biomarcadores importantes no processo de melanogênese e, consequentemente, da pigmentação do cabelo. Ainda, a composição da presente invenção mostrou-se capaz de modular positivamente a expressão de outros genes (e.g. TYR, DCT, TYRP-1 , MITF, MYO5A, PMEL, MLPH), sugerindo um mecanismo de ação diferenciado em relação ao que se apresenta no estado da arte.
[0024] Desta forma é apresentada uma nova composição cosmética para a indução da síntese de melanina em um indivíduo ou animal compreendendo pelo menos 0,0001 % em peso de lisado de microrganismos da espécie Lacticaseibacillus paracasei.
[0025] Em uma realização da invenção, a composição compreende entre 0,001 % e 20% em peso de lisado.
[0026] Em uma realização da invenção, a composição compreende entre 0,001 % e 5% em peso de lisado.
[0027] Em uma realização da invenção, a composição é para prevenção e/ou reversão do processo de grisalhamento dos fios de cabelo.
[0028] Em uma realização da invenção, a composição é para a indução da síntese de melanina ser em folículos capilares.
[0029] Em uma realização da invenção, a composição é uma composição cosmética tópica capilar.
[0030] É também apresentado um novo processo de produção de uma composição conforme definida anteriormente compreendendo: cultivo anaeróbico de microrganismos da espécie Lacticaseibacillus paracasei em meio de cultura até a fase estacionária; inativação e lise total ou parcial dos microrganismos por submissão do meio a temperatura entre 55°C e 80°C por pelo menos 30 minutos; filtragem e centrifugação; mistura do lisado resultante com pelo menos um veículo cosmético adequado.
[0031] É também apresentado um método cosmético de indução da síntese de melanina em um indivíduo ou animal para prevenção e/ou reversão do processo de grisalhamento dos fios de cabelo, compreendendo a administração tópica sobre os folículos capilares de uma composição conforme anteriormente, em uma quantidade cosmeticamente adequada para permitir a referida indução em um indivíduo ou animal.
[0032] É também apresentado o uso da composição, conforme definida anteriomente, para a produção de uma composição cosmética para a indução da síntese de melanina em um indivíduo ou animal para prevenção e/ou reversão do processo de grisalhamento dos fios de cabelo.
[0033] Em uma realização da invenção, a composição é para aplicação sobre uma região de pele compreendendo folículos capilares.
[0034] Estes e outros objetos da invenção poderão ser imediatamente reconhecidos pelos versados na área e a seguir serão providas descrições em detalhes suficientes para sua reprodução por um técnico no assunto.
Breve Descrição das Figuras
[0035] Com o intuito de melhor definir e esclarecer o conteúdo do presente pedido de patente, é apresentada a figura a seguir:
[0036] Figura 1 : Imagens representativas do efeito do lisado de Lacticaseibacillus paracasei na síntese de melanina em folículos pilosos ex vivo - coloração Warthin Starry (lente objetiva x40), comparativamente a mesma formulação sem a adição do lisado (placebo) e uma composição benchmark.
Descrição Detalhada da Invenção
[0037] A presente descrição detalhada da invenção vem estabelecer algumas definições, não limitativas, das principais terminologias e características técnicas empregadas ao longo deste pedido de patente, bem como, fornecer exemplos de algumas das formas de realização da presente invenção a fim de que possa ser reproduzida por um técnico no assunto.
[0038] Assim, inesperadamente, os inventores observaram que certos microrganismos, em particular do tipo Lacticaseibacillus paracasei, podem ser particularmente eficazes para evitar o processo de grisalhamento dos fios, bem como, reverter seus efeitos.
[0039] Assim, como decorre dos dados apresentados nos exemplos, os inventores caracterizaram a capacidade do lisado de Lacticaseibacillus paracasei para estimular a expressão de um número surpreendente de genes relacionados a produção de melanina no folículo capilar, além de ser demonstrado diretamente o estímulo da produção de melanina em cultura de folículos.
[0040] Em particular, os inventores demonstraram que o lisado de Lacticaseibacillus paracasei foi capaz de estimular a expressão gênica de Tirosinase (TYR), Dopacromo tautomerase (DCT), Proteina-1 relacionada à Tirosinase (TYRP-1 ), Fator de transcrição Melanogenese-associada (MITF), Miosina 5A (MYO5A), Proteína Premelanosoma (PMEL), Melanofilina (MLPH), todos genes relacionados ao processo de pigmentação no folículo capilar e na pele. Além disso, em teste de cultura de folículos capilares, os inventores
demonstraram que o lisado de Lacticaseibacillus paracasei foi capaz de aumentar significativamente a produção de melanina no bulbo capilar.
[0041] Assim, a aplicação das composições cosméticas ou dermatológicas ou farmacêuticas da invenção promove a prevenção e/ou reversão do processo de grisalhamento dos fios.
[0042] De acordo com outro de seus aspectos, a presente invenção refere- se à utilização de um lisado de Lacticaseibacillus paracasei ou uma fração do mesmo para a preparação de uma composição farmacêutica e/ou dermatológica, destinada à prevenção e/ou reversão do processo de grisalhamento dos fios.
[0043] No contexto da presente invenção, o termo “prevenir” significa reduzir o risco de manifestação do fenômeno em questão.
[0044] De acordo com outro aspecto da invenção, esta refere-se a um método cosmético para tratar e/ou prevenir o processo de grisalhamento, compreendendo pelo menos uma etapa de administração de um lisado de Lacticaseibacillus paracasei ou uma fração do mesmo a um indivíduo em quantidade eficaz para o tratamento e/ou prevenção em questão.
[0045] De acordo com um aspecto adicional da presente invenção, o referido lisado é aplicado topicamente sobre uma região compreendendo folículos capilares.
[0046] Microrqanismo(s)
[0047] Como referido anteriormente, o microrganismo da espécie
Lacticaseibacillus paracasei, também conhecido como Lactobacillus paracasei (definição taxonômica anterior do microrganismo e atualizada conforme descrita por Zheng et al. 2020 na nova classificação taxonômica do gênero Lactobacillus na revista especializada “International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology’), utilizado como composição ativa apresentado no presente pedido de patente é utilizado na forma de um lisado.
[0048] Um lisado comumente denota um material obtido após a destruição ou dissolução de células biológicas por um fenômeno chamado lise celular, causando assim a liberação dos constituintes biológicos intracelulares
naturalmente contidos nas células do microrganismo em questão.
[0049] No contexto da presente invenção, o termo lisado é usado para denotar todo o lisado obtido pela lise do microrganismo em questão ou apenas uma fração do mesmo. Assim, a invenção refere-se à aplicação de um lisado da espécie Lacticaseibacillus paracasei e/ou uma fração do mesmo para as finalidades aqui especificadas.
[0050] O lisado utilizado é, portanto, formado total ou parcialmente a partir dos constituintes biológicos intracelulares e/ou dos constituintes das paredes e membranas celulares. Esta lise celular pode ser realizada por várias tecnologias, por exemplo choque osmótico, choque térmico, com ultrassom, ou sob estresse mecânico como centrifugação.
[0051] De acordo com uma forma de realização preferida da presente invenção, o lisado é obtido por lise celular entre 55 SC e 80 SC, sendo ao final do processo realizado centrifugação.
[0052] Em um exemplo, microrganismos da espécie Lacticaseibacillus paracasei são cultivados anaerobicamente em um meio de cultura adequado. Quando a fase estacionária de desenvolvimento é atingida, o meio de cultura é inativado e lisado, por exemplo por aquecimento a uma temperatura entre 55°C e 80°C, opcionalmente entre 60°C e 65°C durante 30 min por processo de pasteurização. Os microrganismos são então removidos por uma técnica de separação convencional, por exemplo filtração por membrana, centrifugados e posteriormente o sobrenadante é utilizado como produto.
[0053] O ativo formando o lisado e pertencente à espécie Lacticaseibacillus paracasei pode ser formulado em uma composição a uma concentração de pelo menos 0,0001 % (expressa em peso seco), em particular a uma concentração de 0,001 a 20% e mais particularmente a uma concentração de 0,01 a 5% do peso seco da substância ativa em relação ao peso total do veículo ou da composição que o contém.
[0054] As composições de acordo com a invenção podem apresentar-se em todas as formas galênicas normalmente disponíveis para o método de
administração adotado.
[0055] O transportador/veículo pode ser de natureza variada dependendo do tipo de composição considerada.
[0056] Mais particularmente no que diz respeito às composições destinadas à administração tópica, estas podem ser uma solução aquosa, aquoso-alcoólica ou oleosa, uma dispersão do tipo solução ou dispersão do tipo loção ou soro, uma emulsão de consistência líquida ou semilíquida, obtido por dispersão de uma fase oleosa em uma fase aquosa (O/A) ou vice-versa (A/O), ou uma suspensão ou emulsão de consistência mole, semi-sólida ou sólida, do tipo creme, aquosa ou gel anidro, ou microemulsões, microcápsulas, micropartículas ou dispersões vesiculares do tipo iônico e/ou não iônico.
[0057] Em uma concretização da presente invenção a formulação do produto pode ser Álcool benzílico: 0,80%; Etilhexilglicerina: 0,20% e lisado de Lacticaseibacillus paracasei: q.s.p 100%.
[0058] Estas composições podem nomeadamente constituir cremes para limpeza, proteção, tratamento ou cuidado, loções, géis ou mousses para o cuidado do couro cabeludo, como loções para limpeza ou desinfecção ou composições para o banho. Podem ser usados também para o couro cabeludo na forma de soluções, cremes, géis, emulsões, mousses ou na forma de composições em aerossol contendo também um propulsor sob pressão. Especificamente, podem ser na forma de tônicos capilares, condicionadores, leave on, xampus, entre outros.
[0059] O referido ingrediente com ação antigrisalhamento apresenta características que permite ser adaptada em diversos tipos de produtos com diferentes composições para os cuidados dos cabelos, como por exemplo: [0060] Tônico capilar sem álcool, por meio de composições compreendendo 0,10% de sesquicaprilato de xilitil, 2% de PPG-5-Ceteth 20, 10% de lisado de Lacticaseibacillus paracasei e água q.s.p. 100%.
[0061] Tônico capilar com álcool, por meio de composições compreendendo 0,10% sesquicaprilato de xilitil, 20% de álcool etílico 96%, 2%
de PPG-5-Ceteth 20, 10% de lisado de Lacticaseibacillus paracasei e água q.s.p. 100%.
[0062] Condicionador, por meio de composições compreendendo 0,10% de EDTA dissódico, 1 % de glicerina, 0,50% de cloreto de cetil trimetil amónio, 0,22% de ácido lático 85%, 3,00 % de álcool ceto-estearílico 30/70, 1 ,00% de álcool cetílico, 0,20% de estearamido propil dimetil amina, 0,50% de sesquicaprilato de xilitil, 2% de lisado de Lacticaseibacillus paracasei e água q.s.p. 100%.
[0063] Leave on, por meio de composições compreendendo 0,10% de EDTA dissódico, 1 % de glicerina, 0,80% de cloreto de cetil trimetil amónio, 0,10% de ácido cítrico 50%, 0,22% de ácido lático 85%, 3,00 % de álcool ceto- estearílico 30/70, 0,70% de álcool cetílico, 0,30% de álcool ceto-estearílico eyoxilado 20 OE, 0,50% de sesquicaprilato de xilitil, 2% de lisado de Lacticaseibacillus paracasei e água q.s.p. 100%.
[0064] Xampu, por meio de composições compreendendo 4% de cocoamidopropilbetáina, 27% de lauril éter sulfato de sódio, 3% de lauroil sarcosinato de sódio, 1 % de laurel glucosídeo, 4% de cocoamida DEA, 0,50% de sesquicaprilato de xilitil, cloreto de sódio q.s.p , solução de ácido cítrico 50% q.s.p. pH 6,00 - 7,00, 2% de lisado de Lacticaseibacillus paracaseie água q.s.p. 100%.
[0065] Como se sabe, as formas galênicas destinadas à administração tópica podem conter também aditivos usuais no campo cosmético, farmacêutico e/ou dermatológico, como agentes gelificantes hidrofílicos ou lipofílicos, ativos hidrofílicos ou lipofílicos, conservantes, antioxidantes, solventes, perfumes, enchimentos, filtros, absorventes de odor e corantes. As quantidades destes vários aditivos são as classicamente utilizadas no campo em questão, por exemplo de 0,01 a 20% do peso total da composição. Dependendo de sua natureza, esses aditivos podem ser introduzidos na fase gordurosa/oleosa e/ou na fase aquosa.
[0066] Os produtos podem ser utilizados como composições cosméticas,
dermatológicas ou farmacêuticas de uso tópico capazes de modular a produção de melanina no folículo capilar. Estas composições podem nomeadamente constituir cremes para limpeza, proteção, tratamento ou cuidado, loções, géis, xampus, condicionadores ou mousses para o cuidado do couro cabeludo, como loções para limpeza ou desinfecção ou composições para o banho.
[0067] Eles também podem ser usados para o couro cabeludo na forma de soluções, cremes, géis, emulsões, mousses ou na forma de composições em aerossol contendo também um propulsor sob pressão.
[0068] Exemplo 1 : Avaliação da modulação da expressão qênica em fragmentos de pele humana
[0069] Material e métodos
[0070] Explantes de pele (n=6), obtidos de procedimento cirúrgico realizado por clínica oftalmológica de cirurgia plástica, foram submetidos a cortes de 0,4 cm2. Os fragmentos obtidos foram transferidos para uma placa de cultura de células contendo um meio de cultura para tratamento com formulação contendo o lisado de Lacticaseibacillus paracasei (3% p/p) e a mesma formulação sem a adição do lisado (placebo). Após o tratamento, os fragmentos foram mantidos em ambiente úmido, 37 SC, 5% CO2 por 24 horas, e posteriormente foram coletados em solução de RNAIaterTM (Qiagen).
[0071] Após 24 horas de incubação com as formulações e armazenamento em solução de RNAIaterTM (Qiagen), 0 tecido ex vivo foi macerado mecanicamente e, em seguida, 0 RNA foi extraído com um kit comercialmente disponível, quantificado, e analisado quanto à sua integridade.
[0072] A síntese de cDNA foi realizada com 0 kit High-Capacity cDNA Reverse Transcription® (Applied Biosystems) e conduzida no dispositivo StepOnePlus (Applied Biosystems). Posteriormente, 0 cDNA foi quantificado em um aparelho Nanodrop Lite (Thermo Scientific)
[0073] A RT-qPCR de alto rendimento foi realizada utilizando 0 Sistema Biomark™ HD (Fluidigm, San Francisco, CA), associado ao IFC Controller HX, que suporta 0 IFC 96.96 Dynamic Array™. Ao final, 0 limiar do ciclo foi
determinado especificamente para cada ensaio utilizando o Software Fluidigm e os resultados de expressão foram analisados empregando o método de delta- delta Ct.
[0074] Resultados
[0075] A análise da expressão dos genes relacionados à pigmentação selecionados em fragmentos de pele tratados com formulação contendo o lisado de Lacticaseibacillus paracasei (3% p/p) foi realizada comparativamente à expressão dos mesmos genes a partir de fragmentos de pele tratados somente com formulação sem o lisado (placebo).
[0076] A Quadro 1 abaixo mostra o nível médio de modulação da expressão dos genes relacionados à pigmentação em fragmentos tratados com o lisado de Lacticaseibacillus paracasei, em relação ao grupo placebo.
Quadro 1. Porcentagem de modulação da expressão gênica relativa em fragmentos de pele tratados com formulação com lisado de Lacticaseibacillus paracasei (3%), em relação ao grupo placebo.
[0077] Exemplo 2: Avaliação da indução da síntese de melanina em cultura de folículos
[0078] Material e métodos
[0079] Folículos capilares foram dissecados e semeados em placas de 24 poços (1 folículo/poço) em meio de cultura contendo ou não (controle) o lisado de Lacticaseibacillus paracasei (0,002% p/p) e uma composição de comparação (benchmark = Glicerina, Água e Palmitoil Tetrapeptideo-20 Amida - 0,002% p/p).
Para cada condição de teste, um excesso de folículos pilosos foi preparado para atingir o valor-alvo de 12 folículos capilares de alta qualidade por condição no final do experimento. Os folículos pilosos foram incubados por 7 dias com renovação do tratamento removendo e substituindo o meio após 3 e 5 dias de incubação.
[0080] Ao final da incubação, os folículos pilosos foram fixados com solução de formaldeído. Os folículos foram então desidratados e depois embebido em parafina. Os cortes transversais foram realizados em micrótomo (5 pm de espessura).
[0081] Os cortes foram desparafinizados e em seguida submetidos ao método de coloração de Warthin Starry. Por fim, os cortes foram observados em microscópio (objetivas 40x) e foram registradas imagens. A quantidade de melanina foi avaliada medindo-se no bulbo a área marcada de melanina normalizada pela área do bulbo (método de análise de imagem semiquantitativa).
[0082] Resultados
[0083] Folículos capilares tratados com o lisado de Lacticaseibacillus paracasei elevaram em 43% os níveis de melanina em relação ao grupo controle (sem tratamento). O produto comparador, nas mesmas condições elevou em 14% os níveis de melanina nos folículos (Figura 1 ).
[0084] Conforme observado na Figura 1 , o lisado de Lacticaseibacillus paracasei foi capaz de estimular intensamente a síntese de melanina no bulbo de folículos capilares. A quantificação da área pigmentada indica um aumento de 43% em relação ao grupo controle, enquanto o benchmark foi capaz de estimular a pigmentação em 14%, nas mesmas condições experimentais.
[0085] Os exemplos aqui revelados possuem o intuito de somente exemplificar algumas das inúmeras formas de realização e utilização da presente invenção, sem limitar a interpretação de seu escopo e amplitude, bem como, sobre eventuais formas alternativas e variações configuracionais da mesma que serão definidas a partir das reivindicações aqui apresentadas.
Claims
1 . Composição cosmética para a indução da síntese de melanina em um indivíduo ou animal caracterizada por compreender pelo menos 0,0001% em peso de lisado de microrganismos da espécie Lacticaseibacillus paracasei.
2. Composição, de acordo com a reivindicação 1 , caracterizado por compreender entre 0,001% e 20% em peso de lisado.
3. Composição, de acordo com a reivindicação 1 , caracterizado por compreender entre 0,001% e 5% em peso de lisado.
4. Composição, de acordo com a reivindicação 1 , 2 ou 3, caracterizado por ser para prevenção e/ou reversão do processo de grisalhamento dos fios de cabelo.
5. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pela indução da síntese de melanina ser em folículos capilares.
6. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado por ser uma composição cosmética tópica.
7. Processo de produção de uma composição, conforme definida em qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por compreender: cultivo anaeróbico de microrganismos da espécie Lacticaseibacillus paracasei em meio de cultura até a fase estacionária; inativação e lise total ou parcial dos microrganismos por submissão do meio a temperatura entre 55°C e 80°C por pelo menos 30 minutos; filtragem e centrifugação; mistura do lisado resultante com pelo menos um veículo cosmético adequado.
8. Método cosmético de indução da síntese de melanina em um indivíduo ou animal, caracterizado por compreender a administração tópica de uma composição conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em uma quantidade cosmeticamente adequada para permitir a referida indução em um indivíduo ou animal.
9. Método, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por ser para a prevenção e/ou reversão do processo de grisalhamento dos fios de cabelo e a referida administração tópica ser sobre os folículos capilares.
10. Uso da composição, conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada por ser para a produção de uma composição cosmética para a indução da síntese de melanina em um indivíduo ou animal.
11 . Uso de acordo com a reivindicação 10, caracterizada pela composição ser para prevenção e/ou reversão do processo de grisalhamento dos fios de cabelo e para aplicação sobre uma região de pele compreendendo folículos capilares.
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-
2023
- 2023-11-22 WO PCT/BR2023/050406 patent/WO2024108286A1/pt unknown
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