WO2024106334A1 - デバイス、観察方法、回収方法、培養方法、及び、デバイスの製造方法 - Google Patents

Abstract

このデバイス（１）は、細胞又は粒子を個別に格納可能な試料室（２）を有するユニット（３）を複数備えるデバイスであって、前記ユニット（３）は、前記試料室（２）に対応する格納部（４）を有する格納層（５）と、前記格納部（４）に液体を流通するための構造体（６）と、を備え、複数の前記ユニット（３）は、互いに前記液体の流通がなく独立している。

Description

デバイス、観察方法、回収方法、培養方法、及び、デバイスの製造方法

　本発明は、デバイス、観察方法、回収方法、培養方法、及び、デバイスの製造方法に関する。
　本発明は、２０２２年１１月１４日に、日本に出願された特願２０２２－１８１８０３号に基づき優先権を主張し、その内容をここに援用する。

　例えば、特許文献１には、細胞をスクリーニングするための細胞スクリーニングデバイスが開示されている。細胞スクリーニングデバイスは、底板部と、底板部上に設けられ、細胞載置面を構成する細胞載置膜と、底板部上に細胞載置膜とは区画して設けられた一対の流体注入部と、底板部と細胞載置膜との間に設けられ、流体注入部まで流路端部が延びている流路と、を備える。細胞載置膜の細胞載置面には、スクリーニングすべき細胞を個別に収容可能なサイズを有する複数のウェルと、ウェルの内底面から流路に通じる貫通孔と、が形成されている。このデバイスでは、機械的な嵌合で、細胞載置膜を有する試料室と流路とが形成されている。

国際公開第２０２１／０６５７７１号

　しかし、機械的な嵌合で試料室と流路とが形成される場合は、互いに独立して流体を扱える複数の試料室を設けることが困難である。そのため、１つのデバイスの中で複数の試料（細胞又は粒子）を観察することができない可能性が高い。

　そこで本発明は、１つのデバイスの中で複数の試料（細胞又は粒子）を独立に観察することを目的とする。

（１）本発明の一態様に係るデバイスは、細胞又は粒子を個別に格納可能な試料室を有するユニットを複数備えるデバイスであって、前記ユニットは、前記試料室に対応する格納部を有する格納層と、前記格納部に液体を流通するための構造体と、を備え、複数の前記ユニットは、互いに前記液体の流通がなく独立している。

　この構成によれば、各ユニットの間で格納部が独立するため、１つのデバイスに複数の独立した試料室を設けることができる。したがって、１つのデバイスの中で複数の試料（細胞又は粒子）を独立に観察することができる。例えば、１つのデバイスの中で複数の独立した条件の実験を行うことができる。

（２）上記（１）に記載のデバイスでは、前記構造体は、前記格納部に前記液体を流通するための通液ポートを有し、前記格納層が貼り付けられた通液部材と、前記格納層を介して前記通液部材に貼り付けられ、前記試料室、前記格納層、前記通液ポートの間の前記液体の流通を可能にする流路形成体と、を備えていてもよい。
　なお、前記構造体は、前記格納部に前記液体を流通するための通液ポートを有し、前記格納層が貼り付けられた通液部材を備えていてもよい。また、前記構造体は、前記格納層を介して前記通液部材に貼り付けられ、前記試料室、前記格納層、前記通液ポートの間の前記液体の流通を可能にする流路形成体を備えていてもよい。

　この構成によれば、３つの部材（通液部材、格納層、流路形成体）でデバイスを構成可能となる。

（３）上記（２）に記載のデバイスでは、前記通液部材は、前記試料室を有し、前記格納層が貼り付けられる第１部材と、前記通液ポートを有し、前記第１部材に組み合わせられる第２部材と、を備えていてもよい。
　なお、前記通液部材は、前記試料室を有し、前記格納層が貼り付けられる第１部材を備えていてもよい。また、前記通液部材は、前記通液ポートを有し、前記第１部材に組み合わせられる第２部材と、を備えていてもよい。

　この構成によれば、通液部材を２つの部材（第１部材、第２部材）に分割することで、格納層を貼り付ける部分が第１部材のみになる。第１部材は第２部材よりも小さいので、第１部材に対応する複数の格納層を１つの基材上に形成し、これを第１部材に貼り付ける場合、上記の３つの部材のみ（単一の通液部材、格納層、流路形成体）でデバイスを構成する場合と比較して、より高密度に基材上に格納層を形成することができる。したがって、同一面積の基材当たりの格納層の取れ数を大幅に増やすことができる。

（４）上記（２）又は（３）に記載のデバイスでは、前記流路形成体は、透明な第１シートと、前記第１シートに積み重ねられ、前記通液ポートと前記試料室とをつなぐ連通穴を有する第２シートと、を備えていてもよい。
　なお、前記流路形成体は、透明な第１シートを備えていてもよい。また、前記流路形成体は、前記第１シートに積み重ねられ、前記通液ポートと前記試料室とをつなぐ連通穴を有する第２シートを備えていてもよい。

　この構成によれば、１つのユニットに１つの試料室がある場合の流路形成体を得ることができる。例えば、第１シート及び第２シートのそれぞれの片面に接着層を設けてもよい。または、第２シートの両面に接着層を設けてもよい。

（５）上記（２）又は（３）に記載のデバイスでは、前記流路形成体は、透明な第１シートと、前記第１シートに積み重ねられ、前記通液ポートと前記試料室とをつなぐ連通穴を有する第２シートと、前記第２シートに積み重ねられ、前記通液部材の前記通液ポート及び前記試料室に対応する位置に開口孔を有する第３シートと、を備えていてもよい。
　なお、前記流路形成体は、前記第２シートに積み重ねられ、前記通液部材の前記通液ポート及び前記試料室に対応する位置に開口孔を有する第３シートを備えていてもよい。

　この構成によれば、１つのユニットに複数の試料室がある場合の流路形成体を得ることができる。例えば、各シート間に接着層を設けることで、各シートを接着することができる。どのシートに接着層を設けるかの組み合わせは、下記の３通りがある。
（Ａ）第１シート、第２シート及び第３シートのそれぞれの片面に接着層を設けてもよい。
（Ｂ）第２シートの両面と第３シートの片面とに接着層を設けてもよい。
（Ｃ）第２シートの片面と第３シートの両面とに接着層を設けてもよい。

（６）上記（２）又は（３）に記載のデバイスでは、前記流路形成体は、透明な第１シートと、前記第１シートに積み重ねられ、前記通液ポートと前記試料室とをつなぐ連通穴を有する第２シートと、前記第２シートに積み重ねられ、前記通液部材の前記通液ポート及び前記試料室に対応する位置に開口孔を有する第３シートと、前記第３シートに積み重ねられ、前記第３シートと同じ平面視形状を有する第４シートと、を備え、前記第２シートの両面と前記第４シートの両面には、接着層が設けられていてもよい。
　なお、前記流路形成体は、前記第３シートに積み重ねられ、前記第３シートと同じ平面視形状を有する第４シートを備えていてもよい。また、前記第２シートの両面には、接着層が設けられていてもよい。また、前記第４シートの両面には、接着層が設けられていてもよい。

　この構成によれば、第３シートの両面には接着層を設けなくて済むため、第３シートの接着層と流通する液体との接触を可及的に減らすことができる。例えば、上記の接着層を設ける組み合わせのうち（Ａ）又は（Ｂ）を採用することで、第３シートの両面には接着層を設けなくて済むため、本効果を得ることができる。
　例えば、接着層を有しない透明な第１シートと、両面に接着層を有するシートとで流路を形成する場合、上記の第２シートと第３シートとの間に、接着層を有せず、第３シートと同じ平面視形状を有する第４シートを挿入するとよい。

（７）上記（２）から（６）の何れか一つに記載のデバイスでは、前記流路形成体の厚みは、２ｍｍ以下であってもよい。
　なお、前記流路形成体の厚みは、１．５ｍｍ以下であることが好ましく、１．０ｍｍ以下であることがより好ましく、０．５ｍｍ以下であることが更に好ましい。

　この構成によれば、流路形成体の厚みが２ｍｍ超過の場合と比較して、高倍率観察が容易となる。

（８）上記（１）から（７）の何れか一つに記載のデバイスでは、前記格納層は、前記細胞又は前記粒子が通過可能な大きさのウェル開口を有するウェルアレイフィルターであり、前記ウェル開口に対応するウェル底部を備え、前記ウェル底部は、前記液体のみを通過させる貫通孔を有していてもよい。
　なお、前記格納層は、前記細胞又は前記粒子が通過可能な大きさのウェル開口を有していてもよい。また、前記格納層は、前記ウェル開口に対応するウェル底部を備えていてもよい。また、前記ウェル底部は、前記液体のみを通過させる貫通孔を有していてもよい。

　この構成によれば、ウェルアレイフィルターを備えた１つのデバイスの中で複数の試料（細胞又は粒子）を観察することができる。

（９）上記（１）から（８）の何れか一つに記載のデバイスでは、前記格納層は、ネガ型レジストで形成されていてもよい。
　なお、前記格納層は、ポジ型レジストで形成されていてもよい。

　この構成によれば、微細加工に好適なフォトリソグラフィ（例えば、フォトレジスト塗布、露光、現像の工程）により格納層を製造することができる。

（１０）上記（１）から（９）の何れか一つに記載のデバイスでは、前記デバイスは、平面視でスライドガラスと同じ大きさの外形を有し、前記試料室は、前記デバイスに、２個、４個、６個又は８個設けられていてもよい。
　なお、前記デバイスは、平面視でスライドガラスと同じ大きさの外形を有していてもよい。また、前記試料室は、前記デバイスに、２個、４個、６個又は８個設けられていてもよい。

　この構成によれば、平面視でスライドガラスと同じ大きさのデバイスを得ることができる。

（１１）上記（１）から（９）の何れか一つに記載のデバイスでは、前記デバイスは、平面視でマイクロプレートと同じ長方形の外形を有し、前記試料室は、前記デバイスの短辺方向にＡ個、前記デバイスの長辺方向にＢ個設けられ、前記デバイスにおいて前記短辺方向に並んだ前記試料室の数Ａと前記長辺方向に並んだ前記試料室の数Ｂとの比Ａ：Ｂは、２：３、２：１．５又は２：１であってもよい。
　なお、前記デバイスは、平面視でマイクロプレートと同じ長方形の外形を有していてもよい。また、前記試料室は、前記デバイスの短辺方向にＡ個設けられていてもよい。また、前記試料室は、前記デバイスの長辺方向にＢ個設けられていてもよい。また、前記デバイスにおいて前記短辺方向に並んだ前記試料室の数Ａと前記長辺方向に並んだ前記試料室の数Ｂとの比Ａ：Ｂは、２：３、２：１．５又は２：１であってもよい。

　この構成によれば、比Ａ：Ｂが２：３である場合は、市販のマイクロプレートのウェルと同じ位置に試料室を設けることができる。例えば、マイクロプレートのウェルと同様、試料室間のピッチは、縦、横が同じにするとよい。比Ａ：Ｂが２：１．５である場合は、通液ポート１＋試料室１の配置（９６マイクロプレートに４８個の試料室を設ける場合）を、マイクロプレートの隣り合う２つのウェルと同じ位置に設けることができる。比Ａ：Ｂが２：１である場合は、通液ポート２＋試料室１の配置（９６マイクロプレートに３２個の試料室を設ける場合）を、縦又は横方向に連なった３つのウェルと同じ位置に設けることができる。例えば、試料室と２つの通液ポートとは、試料室が２つの通液ポートで挟まれるように配置するのがよい。　

（１２）上記（１）から（９）の何れか一つに記載のデバイスでは、前記デバイスは、平面視でマイクロプレートと同じ大きさの外形を有し、前記試料室は、前記デバイスに、３２個又は４８個設けられていてもよい。
　なお、前記デバイスは、平面視でマイクロプレートと同じ大きさの外形を有していてもよい。また、前記試料室は、前記デバイスに、３２個又は４８個設けられていてもよい。

　この構成によれば、平面視でマイクロプレートと同じ大きさのデバイスを得ることができる。

（１３）本発明の一態様に係る観察方法は、上記（１）から（１２）の何れか一つに記載のデバイスを用いた、顕微鏡による前記細胞又は前記粒子を個別に観察する観察方法である。
　なお、前記観察方法は、上記（１）から（１２）の何れか一つに記載のデバイスを用いていてもよい。また、前記観察方法は、顕微鏡による前記細胞又は前記粒子を個別に観察する観察方法であってもよい。

　この方法によれば、上記のデバイスを用いるため、１つのデバイスの中で複数の試料（細胞又は粒子）を独立に観察することができる。

（１４）本発明の一態様に係る回収方法は、上記（１）から（１２）の何れか一つに記載のデバイスを用いた、前記細胞又は前記粒子を個別に回収する回収方法である。
　なお、前記回収方法は、上記（１）から（１２）の何れか一つに記載のデバイスを用いていてもよい。また、前記回収方法は、前記細胞又は前記粒子を個別に回収する回収方法であってもよい。

　この方法によれば、上記のデバイスを用いるため、１つのデバイスの中で複数の試料（細胞又は粒子）を独立に回収することができる。

（１５）本発明の一態様に係る培養方法は、上記（１）から（１２）の何れか一つに記載のデバイスを用いた、前記細胞を培養する培養方法である。
　なお、前記培養方法は、上記（１）から（１２）の何れか一つに記載のデバイスを用いていてもよい。また、前記培養方法は、前記細胞を培養する培養方法であってもよい。

　この方法によれば、上記のデバイスを用いるため、１つのデバイスの中で複数の試料（細胞）を独立に培養することができる。

（１６）本発明の一態様に係るデバイスの製造方法は、上記（１）から（１２）の何れか一つに記載のデバイスの製造方法であって、前記格納部に前記液体を流通するための通液ポートを有する通液部材に、前記格納層を貼り付ける第１工程と、前記第１工程の後、前記試料室、前記格納層、前記通液ポートの間の前記液体の流通を可能にする流路形成体を、前記格納層を介して前記通液部材に貼り付ける第２工程と、を含む。
　なお、前記デバイスの製造方法は、上記（１）から（１２）の何れか一つに記載のデバイスの製造方法であってもよい。また、前記デバイスの製造方法は、前記格納部に前記液体を流通するための通液ポートを有する通液部材に、前記格納層を貼り付ける第１工程を含んでいてもよい。また、前記デバイスの製造方法は、前記第１工程の後、前記試料室、前記格納層、前記通液ポートの間の前記液体の流通を可能にする流路形成体を、前記格納層を介して前記通液部材に貼り付ける第２工程を含んでいてもよい。

　この方法によれば、２つの工程（第１工程、第２工程）により、３つの部材（通液部材、格納層、流路形成体）を備えたデバイスを得ることができる。

（１７）上記（１６）に記載のデバイスの製造方法では、前記第１工程は、前記試料室を有する第１部材に、前記格納層を貼り付ける貼付工程と、前記貼付工程の後、前記通液ポートを有する第２部材を、前記第１部材に組み合わせることで前記通液部材を作製する組合工程と、を含んでいてもよい。
　なお、前記第１工程は、前記試料室を有する第１部材に、前記格納層を貼り付ける貼付工程を含んでいてもよい。また、前記第１工程は、前記貼付工程の後、前記通液ポートを有する第２部材を、前記第１部材に組み合わせることで前記通液部材を作製する組合工程を含んでいてもよい。

　この方法によれば、通液部材を２つの部材（第１部材、第２部材）に分割することで、貼付工程において格納層を貼り付ける部分が第１部材のみになる。そのため、別の基材上に個々の格納層を作製したもの、又は、個々の格納層を連結して連続体としたものを用いる場合、上記（１６）に記載の２つの工程（第１工程、第２工程）を単に用いる場合と比較して、高密度に格納層を集合させたものを用いることができる。したがって、基材又は連続体の単位面積当たりの取れ数を大幅に増やすことができる。

　本態様のデバイス、観察方法、回収方法、培養方法、及び、デバイスの製造方法によれば、１つのデバイスの中で複数の試料（細胞又は粒子）を独立に観察することができる。

第１実施形態のデバイスの斜視図。 第１実施形態のユニットの高倍率観察の一例の説明図。 第１実施形態の独立した複数の試料室の一例の説明図。 第１実施形態のユニットの分解図。 第１実施形態の第１部材の上面図。 第１実施形態の格納層を図５のＶＩ－ＶＩ断面とともに示す図。 第１実施形態の格納層の下面図。 第１実施形態の第１部材の下面図。 図６の一部拡大図とともにキャピラリーを示す図。 第１実施形態の格納層（ウェルアレイフィルターの一例）を示す図。 第１実施形態の第２部材の上面図。 図１１のＸＩＩ－ＸＩＩ断面図。 図１２の断面図とともに第１部材を示す図。 図１１のＸＩＶ－ＸＩＶ断面図。 図１１のＸＶ－ＸＶ断面図。 図１５の断面図とともに第１部材を示す図。 第１実施形態の第２部材の下面図。 第１実施形態の流路形成体の構成の説明図。図１８（Ａ）は第１シートの上面図、図１８（Ｂ）は第２シートの上面図、図１８（Ｃ）は第３シートの上面図、図１８（Ｄ）は第４シートの上面図。 図１８のＸＩＸ－ＸＩＸ断面における流路形成体の断面図。 図１８のＸＸ－ＸＸ断面における流路形成体の断面図。 第１実施形態の流路形成体における液体の流れの一例の説明図。 第１実施形態の流路形成体における連通穴の形状の説明図。 ９６マイクロプレートに３２個の試料室を設ける場合の説明図。 第２実施形態のユニットの分解図。 第３実施形態のユニットの上面図。 第３実施形態のユニットを分解した上面図。 第３実施形態のユニットの側面図。 第３実施形態のユニットを分解した側面図。 第４実施形態のデバイスの上面図。 第５実施形態のデバイスの上面図。 第５実施形態のデバイスを用いた実験例の説明図。 第１変形例の格納層の下面図。 第２変形例の格納層の下面図。 第３変形例の格納層の下面図。 第４変形例の流路形成体における連通穴の形状の説明図。 第５変形例の流路形成体における連通穴の形状の説明図。 第６変形例の流路形成体における連通穴の形状の説明図。 第７変形例の流路形成体における連通穴の形状の説明図。 第６実施形態のデバイスの上面図。 第６実施形態のデバイスの下面図。 第６実施形態のボディ及びベースの断面を含む斜視図。 第６実施形態のボディ及びベースの断面図。 第６実施形態のデバイスにおける液体の流れの説明図。 第６実施形態のボディの上面図。 第６実施形態のボディの下面図。 第６実施形態のベースの上面図。 第６実施形態のベースの下面図。 第６実施形態の流路形成体の下面図。 第６実施形態の流路形成体を構成する接着層の下面図。 第６実施形態の流路形成体を構成するシートの下面図。 第６実施形態の格納層のレチクルパターンの一例（支持層）を示す図。 第６実施形態の格納層のレチクルパターンの一例（ウェル層）を示す図。 マイクロプレートでの試料室及び通液ポートの配置の一例を示す図。 図５３に示すＹ方向に並んだ試料室の数ＡとＸ方向に並んだ試料室の数Ｂとの比Ａ：Ｂが２：３である場合の試料室数の一例を示す図。 図５３に示すＹ方向に並んだ試料室の数ＡとＸ方向に並んだ試料室の数Ｂとの比Ａ：Ｂが２：１．５である場合の試料室数の一例を示す図。

　以下に、本発明の実施形態について図面を基に説明する。図面には、必要に応じてＸＹＺ座標系を示している。本明細書においては、必要に応じてＸＹＺ座標系に沿って各方向を定めて説明する。本実施形態において、Ｘ方向は第１方向の一例であり、水平面に沿う方向である。Ｙ方向は、水平面において第１方向と直交する第２方向の一例である。Ｚ方向は、第１方向及び第２方向のそれぞれと直交する第３方向の一例であり、鉛直方向に沿う方向である。＋Ｚ方向は、鉛直方向の上側に相当する。－Ｚ方向は、鉛直方向の下側に相当する。以下の説明で用いる図面は、本発明の特徴をわかりやすくするために、特徴となる部分を拡大して示している場合がある。以下の説明で用いる図面では、各構成要素の寸法比率などが実際と同じであるとは限らない。

＜第１実施形態＞
＜デバイス＞
　図１は、第１実施形態のデバイス１の斜視図である。図２は、第１実施形態のユニット３の高倍率観察の一例の説明図である。図３は、第１実施形態の独立した複数の試料室２の一例の説明図である。図４は、第１実施形態のユニット３の分解図である。
　図１から図４に示すように、デバイス１は、試料（細胞又は粒子）を個別に格納可能な試料室２を有するユニット３を複数備える。

　ユニット３は、試料室２に対応する格納部４を有する格納層５と、格納部４に液体を流通するための構造体６と、を備える。複数の前記ユニット３は、互いに液体の流通がなく独立している。なお、図２において、矢印Ａ１，Ａ２，Ａ３はデバイス１における液体の流通方向、矢印Ｂ１はデバイス１における試料（細胞又は粒子）の観察方向をそれぞれ示す。

＜構造体＞
　構造体６は、格納部４に液体を流通するための通液ポート７を有し、格納層５が貼り付けられた通液部材８と、格納層５を介して通液部材８に貼り付けられ、試料室２、格納層５、通液ポート７の間の液体の流通を可能にする流路形成体９と、を備える。
　なお、構造体６は、格納部４に液体を流通するための通液ポート７を有し、格納層５が貼り付けられた通液部材８を備えていてもよい。また、構造体６は、格納層５を介して通液部材８に貼り付けられ、試料室２、格納層５、通液ポート７の間の液体の流通を可能にする流路形成体９を備えていてもよい。

　例えば、流路形成体９の厚みＣ１を薄くするほど、デバイス１下面から格納層５までの距離を短くできるため、高倍率観察が容易となる。本実施形態では、構造体６の底部がデバイス１の機械的強度を担う構成ではないため、流路形成体９の厚みＣ１を薄くすることができる。流路形成体９の厚みＣ１は、機械的な嵌合で試料室と流路とが形成される場合と比較して、薄くしやすい。

　通液部材８は、試料室２を有し、格納層５が貼り付けられる第１部材１０と、通液ポート７を有し、第１部材１０に組み合わせられる第２部材２０と、を備える。本実施形態では、第１部材１０及び第２部材２０は、別体の部品である。第１部材１０及び第２部材２０は、互いに着脱可能に構成されている。
　なお、通液部材８は、試料室２を有し、格納層５が貼り付けられる第１部材１０を備えていてもよい。また、通液部材８は、通液ポート７を有し、第１部材１０に組み合わせられる第２部材２０を備えていてもよい。

　本実施形態に係るデバイス１は、平面視でマイクロプレートと同じ長方形の外形を有する。マイクロプレートは、複数のくぼみ（穴又はウェル）を有する板状部材である。マイクロプレートは、実験・検査器具としては、各ウェルを試験管又はシャーレとして利用される。例えば、マイクロプレートの平面視サイズは、長辺方向（Ｘ方向）の長さ（長辺の外寸）が１２７．７６ｍｍ（約１２８ｍｍ）、短辺方向（Ｙ方向）の長さ（短辺の外寸）が８５．４８ｍｍ（約８５ｍｍ）である。

　試料室２は、デバイス１の短辺方向（Ｙ方向）にＡ個、デバイス１の長辺方向（Ｘ方向）にＢ個設けられている。本実施形態では、デバイス１において短辺方向に並んだ試料室２の数Ａと長辺方向に並んだ試料室２の数Ｂとの比Ａ：Ｂは、２：１である。なお、比Ａ：Ｂは、上記に限らず、設計仕様に応じて変更可能である。
　なお、デバイス１は、平面視でマイクロプレートと同じ長方形の外形を有してもよい。また、試料室２は、デバイス１の短辺方向（Ｙ方向）にＡ個設けられていてもよい。また、試料室２は、デバイス１の長辺方向（Ｘ方向）にＢ個設けられていてもよい。また、デバイス１において短辺方向に並んだ試料室２の数Ａと長辺方向に並んだ試料室２の数Ｂとの比Ａ：Ｂは、２：３、２：１．５又は２：１であってもよい。

　本実施形態では、デバイス１において短辺方向に並んだ試料室２の数Ａは８個、長辺方向に並んだ試料室２の数Ｂは４個である。試料室２は、デバイス１に３２個設けられている。なお、デバイス１に設けられる試料室２の数は、上記に限らず、設計仕様に応じて変更可能である。

＜第１部材＞
　図５は、第１実施形態の第１部材１０の上面図である。図６は、第１実施形態の格納層５を図５のＶＩ－ＶＩ断面とともに示す図である。図７は、第１実施形態の格納層５の下面図である。図８は、第１実施形態の第１部材１０の下面図である。
　図の例では、図示都合上、３個の試料室２を有する第１部材１０を示す。実際は、第１部材１０は６個以上の試料室２を有する。なお、第１部材１０が有する試料室２の数は、上記に限らず、設計仕様に応じて変更可能である。

　第１部材１０を構成する材料は、試料室２に格納する対象に応じて任意に選択することができる。ただし、試料室２に細胞を格納する場合は、第１部材１０を構成する材料自体が細胞毒性を有さず（例えば、ＩＳＯ１０９９３－５及びこれに類似した規格の細胞毒性試験で細胞毒性がないことが認められたもの）、水溶液、アルコールによって細胞毒性成分が溶出しないことが必要である。さらに、第１部材１０を構成する材料は、自家蛍光が低く、ガンマ線照射、エチレンオキシド蒸気暴露、紫外線照射などの滅菌処理で著しく変質せず、アルコールに溶解しない材料が望ましい。
　なお、第１部材１０は、それ自体が細胞毒性を有さない材料、細胞毒性成分が溶出しない材料、自家蛍光が低い材料、ガンマ線照射で著しく変質しない材料、エチレンオキシド蒸気暴露で著しく変質しない材料、紫外線照射で著しく変質しない材料、滅菌処理で著しく変質しない材料、アルコールに溶解しない材料及び／又はそれらの混合物からなる群から選択される一つ以上の材料を更に含むことができ、それ自体が細胞毒性を有さず且つ細胞毒性成分が溶出しない材料を含むことが好ましい。

　第１部材１０の色は、試料室２に格納する対象に応じて任意に選択することができる。ただし、材料の自家蛍光、顕微鏡観察時の光の反射の影響を軽減するための観点からは、第１部材１０の色は、黒色であることが望ましい。

　図５から図８を併せて参照し、第１部材１０は、試料（細胞又は粒子）が通過可能な（例えば、ピペットで液体試料を添加可能な）大きさの試料室開口１１を有する筒状の筒壁部１２と、筒壁部１２が連結される板状の板壁部１３と、を備える。第１部材１０は、板壁部１３上に３個の筒壁部１２が連なった構造を有する。なお、板壁部１３上に設けられる筒壁部１２（試料室２）の数は、上記に限らず、設計仕様に応じて変更可能である。

　筒壁部１２は、円筒状に形成されている。試料室２の形状は、円柱である。なお、試料室２の形状は、上記に限らず、設計仕様に応じて変更可能である。例えば、試料室２の形状は、楕円柱、長円柱又は多角形柱であってもよい。例えば、試料室２の形状は、真円柱であることが望ましい。例えば、試料室２上部の開口径と試料室２下部（底部）の開口径とは、互いに同じであってもよいし、互いに異なっていてもよい。例えば、試料室２の形状は、試料室２下部（底部）の開口径のほうが試料室２上部の開口径よりも小さい円錐形状であってもよい。

　例えば、試料室２の開口部の形状は、円錐形状でもよいし、四角錐形状でもよい。例えば、試料室２の開口部の形状は、上記の形状に限らず、設計仕様に応じて変更することができる。

　筒壁部１２の厚みは、筒壁部１２の機械的強度を保つことができる厚みであれば、制限はない。筒壁部１２の厚みは、筒壁部１２の内周と外周との間隔（内半径と外半径との差）に相当する。例えば、筒壁部１２の厚みは、０．１ｍｍ以上２５ｍｍ以下であることが望ましい。

　試料室開口１１の内径（内寸）は、試料（細胞又は粒子）が通過可能な大きさであれば、制限はない。例えば、試料室開口１１の内径は、１ｍｍ以上５０ｍｍ以下である。例えば、格納層５の撓みを抑制する観点からは、試料室開口１１の内径は、３０ｍｍ以下であることが望ましい。例えば、観察の容易性も考慮すると、試料室開口１１の内径は、１．５ｍｍ以上１０ｍｍ以下であることがより望ましい。

　試料室２の高さは、液体を収納できるだけの容積を確保できれば、制限はない。試料室２の高さは、筒壁部１２の上端と下端との間の長さ（Ｚ方向の長さ）に相当する。言い換えると、試料室２の高さは、板壁部１３の上面と第１部材１０の上端間の距離に相当する。例えば、操作性を考慮すると、試料室２の高さは、０ｍｍ以上３０ｍｍ以下であることが望ましい。なお、板壁部１３は厚みがあるため、試料室２の高さは０ｍｍでも機能する。

　板壁部１３には、格納層５を貼り付けるための孔部１４が形成されている。孔部１４の形状は、試料室２の形状に対応する円筒状である。板壁部１３の外形の平面視形状は、長方形である。例えば、板壁部１３の平面視サイズは、長辺方向の長さ（長辺の外寸）が４．５ｍｍ以上、短辺方向の長さ（短辺の外寸）が１．５ｍｍ以上である。例えば、板壁部１３の長辺方向の長さは、マイクロプレートの長辺方向の長さ（１２７．７６ｍｍ）以下の長さであれば、制限はない。例えば、板壁部１３の短辺方向の長さは、試料室開口１１の寸法に格納層５の貼り付け寸法（格納層５を接着するための糊代の寸法）を加えた長さ以上であれば、制限はない。

　図９は、図６の一部拡大図とともに、格納部４の内容物を回収するためのキャピラリー１９を示す図である。
　図９を併せて参照し、例えば、板壁部１３において孔部１４の縁部１５（下部内周縁部）は、傾斜を持つことが望ましい。図の例では、孔部１４の縁部１５は、－Ｚ方向に向かうにつれて径方向内方に位置するように傾斜している。板壁部１３において孔部１４の縁部１５に傾斜をつけることで、試料（細胞又は粒子）をピックアップする際に、ピックアップ用のキャピラリー１９が格納部４の端（最外周）までアクセスできるようになる。

＜格納層＞
　図１０は、第１実施形態の格納層５（ウェルアレイフィルターの一例）を示す図である。
　図１０を併せて参照し、格納層５は、試料室２に対応する格納部４を有するフィルム状の部材である。本実施形態に係る格納層５は、試料（細胞又は粒子）が通過可能な大きさのウェル開口３０を有するウェルアレイフィルターであり、ウェル開口３０に対応するウェル底部３１を備える。ウェル底部３１は、液体のみを通過させる貫通孔３２を有している。
　なお、格納層５は、試料（細胞又は粒子）が通過可能な大きさのウェル開口３０を有していてもよい。また、格納層５は、ウェル開口３０に対応するウェル底部３１を備えていてもよい。また、ウェル底部３１は、液体のみを通過させる貫通孔３２を有していてもよい。

　図の例では、ウェル開口３０の平面視形状は六角形であるが、試料（細胞又は粒子）が通過可能な大きさであれば、どのような平面視形状であってもよい。図の例では、ウェル底部３１の中央部に平面視円形の貫通孔３２を２つ有するが、液体のみを通過させることが可能であれば、どのような平面視形状であってもよいし、貫通孔３２の個数も限定されない。

　なお、格納層５は、試料（細胞又は粒子）を格納可能であれば、どのようなものであってもよい。例えば、格納層５は、細胞サイズの開口径を持ったウェルの底部に液体のみを通過させる貫通孔３２を持つものであってもよい。例えば、格納層５は、ウェルの底部に貫通孔３２を有しないものであってもよい。例えば、格納層５は、ウェルの底部に単に細胞を通過させないサイズの貫通孔３２を有するものであってもよい。例えば、細胞をシングルセルとして格納する場合は、上記のうち底部に貫通孔３２を有する細胞サイズのウェル構造であることが最も望ましい。

　本実施形態に係る格納層５は、ネガ型レジストで形成されている。なお、格納層５を構成する材料は、試料室２に格納する対象に応じて任意に選択することができる。ただし、ウェル構造を持つもの、又は、細胞を通過しないサイズの貫通孔３２が規則的に整列したものである場合は、格納層５を構成する材料は、ネガ型フォトレジスト、重合性官能基を有するポリエチレングリコール又はポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）であることが望ましく、ネガ型フォトレジストが最も望ましい。
　なお、格納層５は、ネガ型フォトレジスト、重合性官能基を有するポリエチレングリコール又はポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）及び／又はそれらの混合物からなる群から選択される一つ以上の材料を更に含むことができ、ネガ型フォトレジストを含むことが好ましい。

　格納層５の表面は、細胞非接着性ポリマー又は細胞接着因子でコーティングされていてもよい。例えば、細胞非接着性ポリマーとしては、２－メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（ＭＰＣ）ポリマー、ポリオリゴエチレングリコールメタクリレート（ＰＥＧ）、ポリ－２－メトキシエチルアクリレート（ＰＭＥＡ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）等が挙げられる。

　例えば、第１部材１０に複数の試料室２を設ける場合は、第１部材１０に応じた形状を持つ格納部４を有する１枚のフィルムを第１部材１０の底部貼り付けることで、各試料室２に格納部４を設けることが望ましい。本実施形態では、試料室２に対応した位置にのみ格納部４を設けた１枚のフィルムを第１部材１０の下面に接着している。

　例えば、格納層５がウェル構造等の多孔構造を持つ場合は、第１部材１０と格納層５とを接着する際に接着剤を用いると、ウェル内部に接着剤が入り込んでしまい、接着剤が余分に必要となる。また、接着シートを用いた場合は、接着シートと格納層５との間で十分な接触面積を確保できず、十分な接着強度が得られない可能性が高い。これらを避けるためには、格納層５において試料室２に対応した部分にのみ格納部４を設け、他の部分は平坦な平坦部とすることが望ましい。このような構造とすることで、少量の接着剤で十分な接着強度を得ることができ、接着シートを用いた場合でも、接着シートと格納層５との間で十分な接触面積を確保することができる。

　例えば、格納層５において試料室２に対応した部分にのみ格納部４を設ける場合は、格納部４の平面視サイズは、試料室２下部（底部）の開口よりも大きくするとよい。これにより、試料室２全体に格納層５を設けることができる。

　例えば、格納層５において試料室２に対応した部分にのみ格納部４を設ける場合は、格納部４の外周に接着層３９を設けるとよい。これにより、格納部４と第１部材１０とを十分に接着することができるため、液漏れを抑制することができる。例えば、格納部４の外周全体に沿うように接着層３９を設けた場合は、液漏れをより効果的に抑制することができる。

＜接着層＞
　接着層３９は、フィルム（格納部４を含む格納層５）を接着するために、第１部材１０の下面に設けられる。接着層３９は、第１部材１０の下面全体に設けられてもよいし、試料室開口１１下部の周囲のみに設けられてもよい。

　接着層３９は、エポキシ系やアクリル系などの液体接着剤を任意の方法で塗布することで設けてもよいし、両面に接着層３９を有する接着シートを用いてもよい。例えば、第１部材１０及びフィルム（格納部４を含む格納層５）の表面同士を化学的、物理的に直接改質して接合できる場合は、この方法で両方を接着してもよい。

　接着層３９を構成する材料は、試料室２に格納する対象に応じて任意に選択することができる。ただし、試料室２に細胞を格納する場合は、接着層３９を構成する材料自体が細胞毒性を有さず（例えば、ＩＳＯ１０９９３－５及びこれに類似した規格の細胞毒性試験で細胞毒性がないことが認められたもの）、水溶液、アルコールによって細胞毒性成分が溶出しないことが必要である。さらに、接着層３９を構成する材料は、自家蛍光が低く、ガンマ線照射、エチレンオキシド蒸気暴露、紫外線照射などの滅菌処理で著しく変質せず、アルコールに溶解しない材料が望ましい。アルコール耐性が必要な理由は、製造時の格納層５の表面処理（例えば、格納層５そのもの、又は、格納層５を貼り付けた第１部材１０の表面処理）、使用時の格納層５のプリウェット処理にエタノールを用いるためである。
　なお、接着層３９は、それ自体が細胞毒性を有さない材料、細胞毒性成分が溶出しない材料、自家蛍光が低い材料、ガンマ線照射で著しく変質しない材料、エチレンオキシド蒸気暴露で著しく変質しない材料、紫外線照射で著しく変質しない材料、滅菌処理で著しく変質しない材料、アルコールに溶解しない材料及び／又はそれらの混合物からなる群から選択される一つ以上の材料を更に含むことができ、それ自体が細胞毒性を有さず且つ細胞毒性成分が溶出しない材料を含むことが好ましい。

　例えば、第１部材１０にフィルム（格納部４を含む格納層５）を接着する際は、接着層３９が試料室２内にはみ出るようにする。これにより、第１部材１０とフィルム（格納部４を含む格納層５）との隙間を無くすことができるため、隙間に試料（細胞又は粒子）が入り込まないようにすることができる。

＜第２部材＞
　図１１は、第１実施形態の第２部材２０の上面図である。図１２は、図１１のＸＩＩ－ＸＩＩ断面図である。図１３は、図１２の断面図とともに第１部材１０を示す図である。図１４は、　図１１のＸＩＶ－ＸＩＶ断面図である。図１５は、図１１のＸＶ－ＸＶ断面図である。図１６は、図１５の断面図とともに第１部材１０を示す図である。図１７は、第１実施形態の第２部材２０の下面図である。
　図１１から図１７を併せて参照し、第２部材２０は、デバイス１の本体を構成している。第２部材２０は、通液ポート７を有し、第１部材１０に組み合わせられる部材である。

　第２部材２０は、第１部材１０の筒壁部１２を挿入して固定するための孔２１を有する固定壁部２２を備える。固定壁部２２は、第１部材１０の板壁部１３を嵌め込んで固定するための溝２３を下面に有する。固定壁部２２の孔２１は、第１部材１０の試料室２に対応した位置に形成されている。固定壁部２２の溝２３の外形は、第１部材１０の板壁部１３が嵌まり合うように平面視長方形をなしている。

　例えば、第１部材１０と第２部材２０とを組み合わせる際は、第２部材２０の固定壁部２２の孔２１に対して、第２部材２０の下面側から第１部材１０を挿入する（例えば、図４の矢印方向）。これにより、第２部材２０の固定壁部２２の孔２１に第１部材１０の筒壁部１２を挿入するとともに、固定壁部２２の溝２３に第１部材１０の板壁部１３を嵌め込む。例えば、組み立てられた第１部材１０及び第２部材２０の下面同士は、フラットになるように構成されている。

　固定壁部２２の孔２１（試料室２に対応する孔）の周囲には、１つ以上の通液ポート７を設けることができる。第２部材２０は、通液ポート７を有する筒状の通液筒部２４を備える。なお、第２部材２０には、通液筒部２４の先端を貫通可能に開口する貫通孔が形成されていてもよい。図の例（図１１の上面視）では、通液ポート７は、平面視で固定壁部２２の孔２１（試料室２に対応する孔）を介して対称な位置に一対形成されている。

　通液ポート７は、格納部４に液体を流通できる孔であれば、どのようなものであってもよく、通液ポート７の設置数に制限はない。例えば、通液ポート７は、固定壁部２２の孔２１（試料室２に対応する孔）の両側の対称な位置に２個設けることが望ましい。これにより、試料室２の両側から同時に液体を抜くことができるため、格納層５に試料（細胞又は粒子）を偏りなく格納することができる。また、ポンプ等により、２個のうち一方の通液ポート７から液体を入れ、他方の通液ポート７から液体を抜くことで、試料室２及び流路に液体を灌流することができる。

　例えば、平面視で通液ポート７を試料室２に対して対称に２個設ける場合は、通液ポート７の中心間距離は、マルチチャンネルピペットにおいて互いに隣り合う２つのチャンネルの中心間距離の整数倍にするとよい。これにより、マルチチャンネルピペットの２つのチャンネルを使うことで、２つの通液ポート７から同時に液体を抜き出すことができる。

　図の例（図１４の断面視）では、通液ポート７の上側の開口部は、容量１００μＬのピペットチップの先端形状に対応した円錐状の孔に形成されている。通液ポート７の底部（第２部材２０の通液筒部２４の内径）は、ピペットチップの先端の開口径に対応する径を有する。

　第２部材２０は、固定壁部２２の上面に、平面視で角丸を有する矩形枠状の囲繞壁部２５を備える。囲繞壁部２５は、平面視で試料室２及び通液ポート７全体の周囲を囲うように設けられている。例えば、囲繞壁部２５には、サンプルの蒸発を防ぐために試料室２及び通液ポート７全体を覆う蓋部材（不図示）が着脱可能に取り付けられる。例えば、囲繞壁部２５は、サンプルをロードする際にデバイス１を固定するための持ち手としても機能する。

　例えば、第２部材２０の底部には、デバイス１の底面を地面に接触させないためのリブ２６が設けられていてもよい。図の例（図１２の断面視）では、リブ２６は、第２部材２０の底部において短辺の端部（Ｙ方向の外端部）に設けられている。例えば、リブ２６の高さ（Ｚ方向の長さ）は、高倍率での顕微鏡観察を可能とするため、１ｍｍ以下であることが望ましい。

　例えば、通液ポート７の貫通孔下（固定壁部２２の下面の貫通孔部に相当）の形状は、円形若しくは円錐形状又は多角錐形状である。例えば、通液ポート７の貫通孔下の形状は、円錐形状又は多角錐形状であることが望ましい。これにより、気泡が流路に溜まりにくくなる。

＜流路形成体＞
　図１８は、第１実施形態の流路形成体９の構成の説明図である。図１８（Ａ）は第１シート４１の上面図、図１８（Ｂ）は第２シート４２の上面図、図１８（Ｃ）は第３シート４３の上面図、図１８（Ｄ）は第４シート４４の上面図である。図１９は、図１８のＸＩＸ－ＸＩＸ断面における流路形成体９の断面図である。図２０は、図１８のＸＸ－ＸＸ断面における流路形成体９の断面図である。図２１は、第１実施形態の流路形成体９における液体の流れの一例の説明図である。図２２は、第１実施形態の流路形成体９における連通穴４５の形状の説明図である。　
　図１８から図２２を併せて参照し、流路形成体９は、格納層５を介して通液部材８に貼り付けられている。流路形成体９は、試料室２、格納層５、通液ポート７の間の液体の流通を可能にする構造体である。複数の試料室２を設ける場合は、流路形成体９は、各試料室２間の液体の流通を防いで独立させるためのものである。

　本実施形態に係る流路形成体９は、透明な第１シート４１と、第１シート４１に積み重ねられ、通液ポート７と試料室２とをつなぐ連通穴４５を有する第２シート４２と、第２シート４２に積み重ねられ、通液部材８の通液ポート７及び試料室２に対応する位置に開口孔４６を有する第３シート４３と、第３シート４３に積み重ねられ、第３シート４３と同じ平面視形状を有する第４シート４４と、を備える。第４シート４４は、第３シート４３の開口孔４６に対応する位置に、開口孔４７を有する。第２シート４２の両面と第４シート４４の両面とには、接着層４０が設けられている。
　なお、流路形成体９は、透明な第１シート４１を備えていてもよい。また、流路形成体９は、第１シート４１に積み重ねられ、通液ポート７と試料室２とをつなぐ連通穴４５を有する第２シート４２を備えていてもよい。また、流路形成体９は、第２シート４２に積み重ねられ、通液部材８の通液ポート７及び試料室２に対応する位置に開口孔４６を有する第３シート４３を備えていてもよい。また、流路形成体９は、第３シート４３に積み重ねられ、第３シート４３と同じ平面視形状を有する第４シート４４を備えていてもよい。また、第２シート４２の両面には、接着層４０が設けられていてもよい。また、第４シート４４の両面には、接着層４０が設けられていてもよい。

　例えば、流路形成体９の厚みＣ１は、２ｍｍ以下である。例えば、倒立顕微鏡（顕微鏡の一例）による高倍率の観察を可能にするためには、流路形成体９の厚みＣ１は、１ｍｍ以下であることが好ましく、０．５ｍｍ以下であることが更に好ましい。なお、流路形成体９の厚みＣ１は、デバイス１下面から格納層５までの距離に相当する（図２参照）。
　なお、流路形成体９の厚みＣ１は、１．５ｍｍ以下であることが好ましく、１．０ｍｍ以下であることがより好ましく、０．５ｍｍ以下であることが更に好ましい。

　流路形成体９の厚みＣ１を薄くするためには、フィルムを積層することで流路形成体９を作製することが好ましい。穴のない第１シート４１と、通液ポート７と試料室２とをつなぐ連通穴４５を有する第２シート４２と、通液部材８の通液ポート７及び試料室２に対応する位置に開口孔４６を有する第３シート４３と、第３シート４３と同じ平面視形状を有する第４シート４４と、をＺ方向に積層することで、流路形成体９を作製することができる。例えば、流路形成体９の上面を、組み立てた第１部材１０及び第２部材２０の底面に接着することで、通液ポート７と試料室２との間で液体の流通が可能になる。

　第２シート４２の連通穴４５の形状は、平面視で固定壁部２２の孔２１（第２部材２０において試料室２に対応する孔）よりも幅が広い部分があり、かつ、試料室２及び通液ポート７の開口部を囲むことができる形状であれば、制限はない。本実施形態では、第２シート４２の連通穴４５の平面視形状は、試料室２及び通液ポート７の開口部を囲む楕円形状である。第２シート４２の連通穴４５の形状は、平面視で試料室２側の幅よりも通液ポート７側の幅のほうが狭い形状である。この構成によれば、流路の容積を最小化することができる。なお、第２シート４２の連通穴４５の平面視形状は、上記に限らず、設計仕様に応じて変更することができる。

　第２シート４２の連通穴４５の容積は、連通穴４５の平面視での面積と、連通穴４５の深さ（第２シート４２の厚み）とを基に計算される。第２シート４２の連通穴４５の容積は、第１部材１０の試料室２の容積よりも小さい容積とする。

　１つのデバイス１に複数の試料室２を設ける場合は、第１シート４１及び第２シート４２に加えて、通液部材８の通液ポート７及び試料室２に対応する位置に開口孔４６を有する第３シート４３を積層するとよい。これにより、第１シート４１及び第２シート４２の嵌合部に沿って各試料室２間で液体が流通することを防ぐことができる。

　なお、流路形成体９を構成する各シートは、１枚のフィルム（単層体）からなっていてもよいし、複数のフィルムの積層体からなっていてもよい。例えば、流路形成体９を構成する各シートの構成（フィルムの枚数）は、設計仕様に応じて変更することができる。

　シート及びフィルムの積層は、シート又はフィルムの少なくとも片面に接着層４０を設けることで、互いに接着して積層するとよい。この接着層４０は、接着層４０を構成する材料自体が細胞毒性を有さず（例えば、ＩＳＯ１０９９３－５及びこれに類似した規格の細胞毒性試験で細胞毒性がないことが認められたもの）、水溶液、アルコールによって細胞毒性成分が溶出しないことが望ましい。例えば、シート及びフィルムが熱可塑性を有する場合は、積層したシート又はフィルムを加熱プレスで互いに接着して積層してもよい。
　なお、接着層４０は、それ自体が細胞毒性を有さない材料、細胞毒性成分が溶出しない材料及び／又はそれらの混合物からなる群から選択される一つ以上の材料を更に含むことができ、それ自体が細胞毒性を有さず且つ細胞毒性成分が溶出しない材料を含むことが好ましい。

　例えば、第１シート４１及び第２シート４２の各々の厚みは、流路形成体９の全体の厚みが上記の厚みＣ１（例えば２ｍｍ以下）であれば、任意である。例えば、第１シート４１の厚みは、１８８μｍ程度である。例えば、第２シート４２の厚みは、５０μｍ程度である。例えば、第３シート４３の厚みは、第１シート４１の厚みと同じ（１８８μｍ程度）である。例えば、第４シート４４の厚みは、第２シート４２の厚みと同じ（５０μｍ程度）である。

　例えば、第１シート４１は、蛍光顕微鏡の励起に用いる青から近赤外の波長領域において透明なものを用いる。例えば、第１シート４１は、第１シート４１を構成する材料自体が蛍光を発せず、ガンマ線照射、紫外線照射、エチレンオキシド蒸気への暴露などの滅菌過程を経ても着色、白濁又は変性しないものを用いる。例えば、第１シート４１を構成する材料は、シクロオレフィン・コポリマー（ＣＯＣ）又はシクロオレフィンポリマー（ＣＯＰ）であることが望ましい。
　なお、第１シート４１は、それ自体が蛍光を発しない材料、ガンマ線照射を経ても着色、白濁又は変性しない材料、紫外線照射を経ても着色、白濁又は変性しない材料、エチレンオキシド蒸気への暴露を経ても着色、白濁又は変性しない材料、滅菌過程を経ても着色、白濁又は変性しない材料及び／又はそれらの混合物からなる群から選択される一つ以上の材料を更に含むことができ、シクロオレフィン・コポリマー（ＣＯＣ）又はシクロオレフィンポリマー（ＣＯＰ）を含むことが好ましい。

　第２シート４２及び第４シート４４の少なくとも一つは、顕微鏡観察時の光の反射等を抑制するために、黒色であることが望ましい。例えば、第２シート４２及び第４シート４４は、ポリエチレンテレフタラート（ＰＥＴ）を基材とし、基材の表面にエタノールに対して耐性のある接着剤を備えたものであってもよい。　なお、第２シート４２は、ポリエチレンテレフタラート（ＰＥＴ）を基材としていてもよい。また、第２シート４２は、基材の表面にエタノールに対して耐性のある接着剤を備えたものであってもよい。
　なお、第４シート４４は、ポリエチレンテレフタラート（ＰＥＴ）を基材としていてもよい。また、第４シート４４は、基材の表面にエタノールに対して耐性のある接着剤を備えたものであってもよい。

　図２３は、９６マイクロプレートに３２個の試料室２を設ける場合の説明図である。本実施形態では、デバイス１は、平面視でマイクロプレートと同じ大きさの外形を有する。試料室２は、デバイス１に３２個設けられている。

　例えば、マイクロプレートのＸ１，Ｘ３の位置に通液ポート７を配置し、Ｘ２の位置に試料室２を配置した８連のユニット３をＸ方向に４つ並べる。これにより、９６マイクロプレートのＸ２，Ｘ５，Ｘ８，Ｘ１１列のウェルと同じ位置に試料室２を設けたデバイス１を得ることができる。このようにマイクロプレートと同じ位置に試料室２を設けることで、顕微鏡での自動観察が行いやすくなる。

　例えば、流路形成体９は、８連ユニット（ユニット３をＹ方向に８つ連ねたもの）毎に１つとしてＸ方向に４つ並べたものを貼り合わせてもよいし、デバイス１全体で１枚であってもよい。例えば、流路形成体９の枚数は、設計仕様に応じて変更することができる。

　本実施形態では、上記のデバイス１を用いることで、試料（細胞又は粒子）を、観察、回収、培養等することができる。

＜デバイスの製造方法＞
　本実施形態に係るデバイス１の製造方法は、上記のデバイス１の製造方法であって、格納部４に液体を流通するための通液ポート７を有する通液部材８に、格納層５を貼り付ける第１工程と、第１工程の後、試料室２、格納層５、通液ポート７の間の液体の流通を可能にする流路形成体９を、格納層５を介して通液部材８に貼り付ける第２工程と、を含む。

　本実施形態に係る第１工程は、試料室２を有する第１部材１０に、格納層５を貼り付ける貼付工程と、貼付工程の後、通液ポート７を有する第２部材２０を、第１部材１０に組み合わせることで通液部材８を作製する組合工程と、を含む。

　例えば、第１工程において、貼付工程では、試料室２に対応した位置にのみ格納部４を設けた１枚のフィルムを第１部材１０の下面に接着する（例えば、図６参照）。例えば、組合工程では、第２部材２０の下面側から第１部材１０を組み合わせる（例えば、図４の矢印方向）。これにより、格納層５、第１部材１０及び第２部材２０を含む組み合わせ体（格納層５及び通液部材８の結合体）が作製される。

　例えば、第２工程では、流路形成体９を、上記の結合体の下面に接着する。その後、試料室２及び通液ポート７全体を覆う蓋部材（不図示）を、通液部材８の上部に取り付ける。これにより、本実施形態に係るデバイス１が作製される。

＜作用効果＞
　以上説明したように、本実施形態に係るデバイス１は、細胞又は粒子を個別に格納可能な試料室２を有するユニット３を複数備えるデバイスである。ユニット３は、試料室２に対応する格納部４を有する格納層５と、格納部４に液体を流通するための構造体６と、を備える。複数の前記ユニット３は、互いに液体の流通がなく独立している。
　この構成によれば、各ユニット３の間で格納部４が独立するため、１つのデバイス１に複数の独立した試料室２を設けることができる。したがって、１つのデバイス１の中で複数の試料（細胞又は粒子）を独立に観察することができる。例えば、１つのデバイス１の中で複数の独立した条件の実験を行うことができる。

　本実施形態に係る構造体６は、格納部４に液体を流通するための通液ポート７を有し、格納層５が貼り付けられた通液部材８と、格納層５を介して通液部材８に貼り付けられ、試料室２、格納層５、通液ポート７の間の液体の流通を可能にする流路形成体９と、を備える。
　この構成によれば、３つの部材（通液部材８、格納層５、流路形成体９）でデバイス１を構成可能となる。

　本実施形態に係る通液部材８は、試料室２を有し、格納層５が貼り付けられる第１部材１０と、通液ポート７を有し、第１部材１０に組み合わせられる第２部材２０と、を備える。
　この構成によれば、通液部材８を２つの部材（第１部材１０、第２部材２０）に分割することで、格納層５を貼り付ける部分が第１部材１０のみになる。第１部材１０は第２部材２０よりも小さいので、第１部材１０に対応する複数の格納層５を１つの基材上に形成し、これを第１部材１０に貼り付ける場合、上記の３つの部材のみ（単一の通液部材、格納層、流路形成体）でデバイスを構成する場合と比較して、より高密度に基材上に格納層５を形成することができる。したがって、同一面積の基材当たりの格納層５の取れ数を大幅に増やすことができる。

　本実施形態に係る流路形成体９は、透明な第１シート４１と、第１シート４１に積み重ねられ、通液ポート７と試料室２とをつなぐ連通穴４５を有する第２シート４２と、第２シート４２に積み重ねられ、通液部材８の通液ポート７及び試料室２に対応する位置に開口孔４６を有する第３シート４３と、第３シート４３に積み重ねられ、第３シート４３と同じ平面視形状を有する第４シート４４と、を備える。第２シート４２の両面と第４シート４４の両面には、接着層４０が設けられている。
　この構成によれば、第３シート４３の両面には接着層４０を設けなくて済むため、第３シート４３の接着層と流通する液体との接触を可及的に減らすことができる。例えば、上記の接着層を設ける組み合わせのうち、（Ａ）第１シート４１、第２シート４２及び第３シート４３のそれぞれの片面に接着層を設ける、又は、（Ｂ）第２シート４２の両面と第３シート４３の片面とに接着層を設ける、を採用することで、第３シート４３の両面には接着層を設けなくて済むため、本効果を得ることができる。
　例えば、接着層を有しない透明な第１シート４１と、両面に接着層を有するシートとで流路を形成する場合、上記の第２シート４２と第３シート４３との間に、接着層を有せず、第３シート４３と同じ平面視形状を有する第４シート４４を挿入するとよい。

　本実施形態に係る流路形成体９の厚みＣ１は、２ｍｍ以下である。
　この構成によれば、流路形成体９の厚みＣ１が２ｍｍ超過の場合と比較して、高倍率観察が容易となる。

　本実施形態に係る格納層５は、細胞又は粒子が通過可能な大きさのウェル開口３０を有するウェルアレイフィルターである。格納層５は、ウェル開口３０に対応するウェル底部３１を備える。ウェル底部３１は、液体のみを通過させる貫通孔３２を有している。
　この構成によれば、ウェルアレイフィルターを備えた１つのデバイス１の中で複数の試料（細胞又は粒子）を観察することができる。

　本実施形態に係る格納層５は、ネガ型レジストで形成されている。
　この構成によれば、微細加工に好適なフォトリソグラフィ（例えば、フォトレジスト塗布、露光、現像の工程）により格納層５を製造することができる。

　本実施形態に係るデバイス１は、平面視でマイクロプレートと同じ長方形の外形を有する。試料室２は、デバイス１の短辺方向にＡ個、デバイス１の長辺方向にＢ個設けられている。デバイス１において短辺方向に並んだ試料室２の数Ａと長辺方向に並んだ試料室２の数Ｂとの比Ａ：Ｂは、２：１である。
　この構成によれば、比Ａ：Ｂが２：１であることで、通液ポート２＋試料室１の配置（９６マイクロプレートに３２個の試料室２を設ける場合）を、縦又は横方向に連なった３つのウェルと同じ位置に設けることができる。例えば、試料室２と２つの通液ポート７とは、試料室２が２つの通液ポート７で挟まれるように配置するのがよい。

　本実施形態に係るデバイス１は、平面視でマイクロプレートと同じ大きさの外形を有する。試料室２は、デバイス１に、３２個設けられている。
　この構成によれば、平面視でマイクロプレートと同じ大きさのデバイス１を得ることができる。

　本実施形態に係る観察方法は、上記のデバイス１を用いた、顕微鏡による細胞又は粒子を個別に観察する観察方法である。
　この方法によれば、上記のデバイス１を用いるため、１つのデバイス１の中で複数の試料（細胞又は粒子）を独立に観察することができる。
　なお、観察方法は、上記のデバイス１を用いていてもよい。また、観察方法は、顕微鏡による細胞又は粒子を個別に観察する観察方法であってもよい。

　本実施形態に係る回収方法は、上記のデバイス１を用いた、細胞又は粒子を個別に回収する回収方法である。
　この方法によれば、上記のデバイス１を用いるため、１つのデバイス１の中で複数の試料（細胞又は粒子）を独立に回収することができる。
　なお、回収方法は、上記のデバイス１を用いていてもよい。また、回収方法は、細胞又は粒子を個別に回収する回収方法であってもよい。

　本実施形態に係る培養方法は、上記のデバイス１を用いた、細胞を培養する培養方法である。
　この方法によれば、上記のデバイス１を用いるため、１つのデバイス１の中で複数の試料（細胞）を独立に培養することができる。
　なお、培養方法は、上記のデバイス１を用いていてもよい。また、培養方法は、細胞を培養する培養方法であってもよい。

　本実施形態に係るデバイス１の製造方法は、上記のデバイス１の製造方法であって、格納部４に液体を流通するための通液ポート７を有する通液部材８に、格納層５を貼り付ける第１工程と、第１工程の後、試料室２、格納層５、通液ポート７の間の液体の流通を可能にする流路形成体９を、格納層５を介して通液部材８に貼り付ける第２工程と、を含む。
　この方法によれば、２つの工程（第１工程、第２工程）により、３つの部材（通液部材８、格納層５、流路形成体９）を備えたデバイス１を得ることができる。
　なお、デバイス１の製造方法は、上記のデバイス１の製造方法であってもよい。また、デバイス１の製造方法は、格納部４に液体を流通するための通液ポート７を有する通液部材８に、格納層５を貼り付ける第１工程を含んでいてもよい。また、デバイス１の製造方法は、第１工程の後、試料室２、格納層５、通液ポート７の間の液体の流通を可能にする流路形成体９を、格納層５を介して通液部材８に貼り付ける第２工程と、を含んでいてもよい。

　本実施形態に係る第１工程は、試料室２を有する第１部材１０に、格納層５を貼り付ける貼付工程と、貼付工程の後、通液ポート７を有する第２部材２０を、第１部材１０に組み合わせることで通液部材８を作製する組合工程と、を含む。
　この方法によれば、通液部材８を２つの部材（第１部材１０、第２部材２０）に分割することで、貼付工程において格納層５を貼り付ける部分が第１部材１０のみになる。そのため、別の基材上に個々の格納層を作製したもの、又は、個々の格納層を連結して連続体としたものを用いる場合、上記の２つの工程（第１工程、第２工程）を単に用いる場合と比較して、高密度に格納層を集合させたものを用いることができる。したがって、基材又は連続体の単位面積当たりの取れ数を大幅に増やすことができる。
　なお、第１工程は、試料室２を有する第１部材１０に、格納層５を貼り付ける貼付工程を含んでいてもよい。また、第１工程は、貼付工程の後、通液ポート７を有する第２部材２０を、第１部材１０に組み合わせることで通液部材８を作製する組合工程と、を含んでいてもよい。

＜第２実施形態＞
　図２４は、第２実施形態のユニット２０３の分解図である。
　上述した第１実施形態では、通液部材８を２つの部材（第１部材１０、第２部材２０）に分割した例を挙げて説明したが、これに限らない。例えば、図２４に示すように、通液部材２０８は２つの部材（第１部材１０、第２部材２０）に分割されていなくてもよい。第２実施形態において、上述した第１実施形態と同様の構成には同一の符号を付し、詳細説明は省略する。

　本実施形態に係る通液部材２０８は、試料室２を有し、格納層５が貼り付けられる第１通液部２１０と、通液ポート７を有する第２通液部２２０と、を備える。本実施形態では、通液部材２０８は、一体物である。例えば、第１通液部２１０及び第２通液部２２０は、同一の部材で一体に形成されていてもよい。

＜作用効果＞
　以上説明したように、本実施形態に係る通液部材２０８は、一体物である。
　この構成によれば、通液部材８を２つの部材（第１部材１０、第２部材２０）に分割した場合と比較して、部品点数を削減することができる。

＜第３実施形態＞
　図２５は、第３実施形態のユニット３０３の上面図である。図２６は、第３実施形態のユニット３０３を分解した上面図である。図２７は、第３実施形態のユニット３０３の側面図である。図２８は、第３実施形態のユニット３０３を分解した側面図である。
　上述した第１実施形態では、流路形成体９を４枚のシート（第１シート４１、第２シート４２、第３シート４３及び第４シート４４）で構成した例を挙げて説明したが、これに限らない。例えば、図２５から図２８に示すように、流路形成体３０９は第３シート４３及び第４シート４４を含んでいなくてもよい。第３実施形態において、上述した第１実施形態と同様の構成には同一の符号を付し、詳細説明は省略する。

　本実施形態に係る流路形成体３０９は、透明な第１シート４１と、第１シート４１に積み重ねられ、通液ポート７と試料室２とをつなぐ連通穴４５を有する第２シート４２と、を備える。第３シート４３及び第４シート４４を含んでいなくても、穴のない第１シート４１と、通液ポート７と試料室２とをつなぐ連通穴４５を有する第２シート４２と、を積層することで、流路形成体３０９を作製することができる。

　第２シート４２の両面には、接着層４０が設けられている。第２シート４２は、顕微鏡観察時の光の反射等を抑制するために、黒色であることが望ましい。例えば、第２シート４２は、ポリエチレンテレフタラート（ＰＥＴ）を基材とし、基材の表面にエタノールに対して耐性のある接着剤を備えたものであってもよい。　

＜作用効果＞
　以上説明したように、本実施形態に係る流路形成体３０９は、透明な第１シート４１と、第１シート４１に積み重ねられ、通液ポート７と試料室２とをつなぐ連通穴４５を有する第２シート４２と、を備える。
　この構成によれば、１つのユニット３０３に１つの試料室２がある場合の流路形成体３０９を得ることができる。例えば、第２シート４２の両面に接着層を設けることに限らず、第１シート４１及び第２シート４２のそれぞれの片面に接着層を設けてもよい。

＜第４実施形態＞
　図２９は、第４実施形態のデバイス４０１の上面図である。
　上述した第１実施形態では、デバイス１が平面視でマイクロプレートと同じ長方形の外形を有する例を挙げて説明したが、これに限らない。例えば、図２９に示すように、デバイス４０１は、平面視でスライドガラスと同じ大きさの外形を有してもよい。第４実施形態において、上述した第１実施形態と同様の構成には同一の符号を付し、詳細説明は省略する。

　スライドガラスは、主に光学顕微鏡を用いた観察を行う際に、微小な試料を載せるために用いるガラス板である。通常、スライドガラスの平面視サイズは、長辺方向（Ｙ方向）の長さ（長辺の外寸）が７５ｍｍ程度、短辺方向（Ｘ方向）の長さ（短辺の外寸）が２５ｍｍ程度である。

　図の例（図２９の上面視）では、試料室２は、デバイス４０１に６個設けられている。なお、試料室２は、上記の個数に限定されず、デバイス４０１に２個、４個又は８個設けられていてもよい。例えば、デバイス４０１の平面視形状、及び、試料室２の設置数は、設計仕様に応じて変更することができる。

＜作用効果＞
　以上説明したように、本実施形態に係るデバイス４０１は、平面視でスライドガラスと同じ大きさの外形を有する。試料室２は、デバイス４０１に６個設けられている。
　この構成によれば、平面視でスライドガラスと同じ大きさのデバイス４０１を得ることができる。

＜第５実施形態＞
　図３０は、第５実施形態のデバイス５０１の上面図である。図３１は、第５実施形態のデバイス５０１を用いた実験例の説明図である。　
　上述した第１実施形態では、デバイス１において短辺方向（Ｙ方向）に並んだ試料室２の数Ａと長辺方向（Ｘ方向）に並んだ試料室２の数Ｂとの比Ａ：Ｂは、２：１である例を挙げて説明したが、これに限らない。例えば、図３０に示すように、デバイス５０１において短辺方向に並んだ試料室２の数Ａと長辺方向に並んだ試料室２の数Ｂとの比Ａ：Ｂは、２：１．５であってもよい。

　図３０及び図３１を併せて参照し、本実施形態では、デバイス５０１において短辺方向に並んだ試料室２の数Ａは８個、長辺方向に並んだ試料室２の数Ｂは６個である。試料室２は、デバイス５０１に４８個設けられている。なお、デバイス５０１に設けられる試料室２の数は、上記に限らず、設計仕様に応じて変更可能である。

　本実施形態では、デバイス５０１は、試料室２の片側のみに通液ポート７を配置した８連のユニット５０３をＸ方向に６つ並べて構成されている。例えば、マイクロプレートのＸ１の位置に通液ポート７を配置し、Ｘ２の位置に試料室２を配置した８連のユニット３をＸ方向に６つ並べる。これにより、９６マイクロプレートのＸ２，Ｘ４，Ｘ６，Ｘ８，Ｘ１０，Ｘ１２列のウェルと同じ位置に試料室２を設けたデバイス５０１を得ることができる。このようにマイクロプレートと同じ位置に試料室２を設けることで、顕微鏡での自動観察が行いやすくなる。

　このようにデバイス５０１が４８個の試料室２を有する場合は、細胞の薬剤応答をシングルセルレベルで調べることができる。例えば、６種類の薬剤応答（例えば、薬剤１から薬剤６の応答）を、濃度４条件（例えば、未添加、濃度１、濃度２、濃度３の４条件）において、実験２回分（例えば、実験１及び実験２の分）調べることができる。

＜作用効果＞
　以上説明したように、本実施形態に係るデバイス５０１は、平面視でマイクロプレートと同じ長方形の外形を有する。試料室２は、デバイス５０１の短辺方向にＡ個、デバイス５０１の長辺方向にＢ個設けられている。デバイス５０１において短辺方向に並んだ試料室２の数Ａと長辺方向に並んだ試料室２の数Ｂとの比Ａ：Ｂは、２：１．５である。
　この構成によれば、比Ａ：Ｂが２：１．５であることで、通液ポート１＋試料室１の配置（９６マイクロプレートに４８個の試料室２を設ける場合）を、マイクロプレートの隣り合う２つのウェルと同じ位置に設けることができる。

＜変形例＞
　上述した実施形態では、構造体は、格納部に液体を流通するための通液ポートを有し、格納層が貼り付けられた通液部材と、格納層を介して通液部材に貼り付けられ、試料室、格納層、通液ポートの間の液体の流通を可能にする流路形成体と、を備える例を挙げて説明したが、これに限らない。例えば、構造体は、格納部に液体を流通するための構造を有していればよい。例えば、２つの部材（格納層、構造体）のみでデバイスを構成可能としてもよい。例えば、構造体の構成態様は、設計仕様に応じて変更することができる。

　上述した実施形態では、通液部材は、試料室を有し、格納層が貼り付けられる第１部材と、通液ポートを有し、第１部材に組み合わせられる第２部材と、を備える例を挙げて説明したが、これに限らない。例えば、通液部材は、２つの部材（第１部材、第２部材）に分割されていなくてもよい。例えば、通液部材は、１つの部材のみで構成されていてもよい。例えば、通液部材の構成態様は、設計仕様に応じて変更することができる。

　上述した実施形態では、流路形成体の厚みは、２ｍｍ以下である例を挙げて説明したが、これに限らない。例えば、流路形成体の厚みは、２ｍｍ超過であってもよい。例えば、流路形成体の厚みは、設計仕様に応じて変更可能である。

　上述した実施形態では、格納層は、細胞又は粒子が通過可能な大きさのウェル開口を有するウェルアレイフィルターであり、ウェル開口に対応するウェル底部を備える。ウェル底部は、液体のみを通過させる貫通孔を有している例を挙げて説明したが、これに限らない。例えば、ウェル底部は、特定のサイズより小さい細胞又は粒子のみを通過させる貫通孔を有していてもよい。例えば、貫通孔は、液体以外も通過可能に構成されていてもよい。例えば、ウェル底部の貫通孔の態様は、設計仕様に応じて変更することができる。

　上述した実施形態では、格納層は、ネガ型レジストで形成されている例を挙げて説明したが、これに限らない。例えば、格納層は、ポジ型レジストで形成されていてもよい。例えば、格納層の形成材料は、設計仕様に応じて変更することができる。

　上述した実施形態では、構造体において短辺方向に並んだ試料室の数Ａと長辺方向に並んだ試料室の数Ｂとの比Ａ：Ｂは、２：１．５又は２：１である例を挙げて説明したが、これに限らない。例えば、比Ａ：Ｂは、２：３であってもよい。比Ａ：Ｂが２：３である場合は、市販のマイクロプレートのウェルと同じ位置に試料室を設けることができる。例えば、マイクロプレートのウェルと同様、試料室間のピッチは、縦、横が同じにするとよい。例えば、構造体は、平面視でマイクロプレートと同じ長方形の外形を有しなくてもよい。例えば、比Ａ：Ｂは、上記（２：３、２：１．５又は２：１）以外の比であってもよい。例えば、構造体の平面視形状、比Ａ：Ｂの態様、及び、試料室の数は、設計仕様に応じて変更することができる。

　上述した実施形態では、流路形成体を４枚のシート（第１実施形態）又は２枚のシート（第３実施形態）で構成した例を挙げて説明したが、これに限らない。例えば、流路形成体は、３枚のシートで構成されていてもよい。例えば、流路形成体は、透明な第１シートと、第１シートに積み重ねられ、通液ポートと試料室とをつなぐ連通穴を有する第２シートと、第２シートに積み重ねられ、通液部材の通液ポート及び試料室に対応する位置に開口孔を有する第３シートと、を備えていてもよい。この構成によれば、１つのユニットに複数の試料室がある場合の流路形成体を得ることができる。例えば、各シート間に接着層を設けることで、各シートを接着することができる。どのシートに接着層を設けるかの組み合わせは、下記の３通りがある。
（Ａ）第１シート、第２シート及び第３シートのそれぞれの片面に接着層を設けてもよい。
（Ｂ）第２シートの両面と第３シートの片面とに接着層を設けてもよい。
（Ｃ）第２シートの片面と第３シートの両面とに接着層を設けてもよい。
　例えば、流路形成体を構成するシートの枚数は、設計仕様に応じて変更することができる。

　上述した実施形態では、試料室に対応した位置にのみ格納部を設けた１枚のフィルムを第１部材の下面に接着している例を挙げて説明したが、これに限らない。図３２は、第１変形例の格納層の下面図である。図３３は、第２変形例の格納層の下面図である。図３４は、第３変形例の格納層の下面図である。例えば、図３２に示すように、格納層を構成するフィルム６０５Ａは、フィルム全体が格納部で構成されたものであってもよい。例えば、図３３に示すように、格納層を構成するフィルム６０５Ｂは、第１部材の試料室開口１１下部にのみ格納部が設けられたものであってもよい。例えば、図３４に示すように、格納層を構成するフィルム６０５Ｃにおいて、格納部の平面視形状は、試料室開口１１下部の平面視形状（円形）よりも大きい円形であってもよい。例えば、格納層の平面視形状、サイズ、及び、格納部の配置構成等は、設計仕様に応じて変更することができる。

　上述した実施形態では、流路形成体において第２シートの連通穴の平面視形状は、試料室及び通液ポートの開口部を囲む楕円形状である例を挙げて説明したが、これに限らない。図３５は、第４変形例の流路形成体における連通穴７４５Ａの形状の説明図である。図３６は、第５変形例の流路形成体における連通穴７４５Ｂの形状の説明図である。図３７は、第６変形例の流路形成体における連通穴７４５Ｃの形状の説明図である。図３８は、第７変形例の流路形成体における連通穴７４５Ｄの形状の説明図である。例えば、図３５に示すように、流路形成体において第２シートの連通穴７４５Ａの平面視形状は、試料室２の開口部を囲む円形状と通液ポート７の開口部を囲む矩形形状とを組み合わせた形状であってもよい。この構成によれば、第２シートの連通穴７４５Ａの形状は、平面視で試料室２側の幅よりも通液ポート７側の幅のほうが狭い形状であるため、流路の容積を最小化することができる。例えば、図３６に示すように、流路形成体において第２シートの連通穴７４５Ｂの平面視形状は、試料室２の開口部を囲む矩形形状と通液ポート７の開口部を囲む楕円形状とを組み合わせた形状であってもよい。この構成によれば、第２シートの連通穴７４５Ｂの形状は、平面視で試料室２側の幅よりも通液ポート７側の幅のほうが広い形状であるため、図３５に示した形状の場合と比較して、通液ポート７からの液体の吸引に要する圧力を低くすることができる。例えば、図３７に示すように、流路形成体において第２シートの連通穴７４５Ｃの平面視形状は、試料室２の開口部を囲む矩形形状と通液ポート７の開口部を囲む円形状とを組み合わせた形状であってもよい。この構成によれば、第２シートの連通穴７４５Ｃの形状は、図３６に示した形状の場合と同様、平面視で試料室２側の幅よりも通液ポート７側の幅のほうが広い形状であるため、通液ポート７からの液体の吸引に要する圧力を低くすることができる。例えば、図３８に示すように、流路形成体において第２シートの連通穴７４５Ｄの平面視形状は、試料室２の開口部を囲む円形状と通液ポート７の開口部を囲む長円形状とを細く絞った連結部分を介して組み合わせた形状であってもよい。この構成によれば、第２シートの連通穴７４５Ｄの形状は、図３５に示した形状の場合と同様、通液ポート７からの液体の吸引に要する圧力を強くしつつ、通液ポート７側の容積を十分に大きくできるので、試料室２下から観察の妨げになる気泡を流路側に移動させやすくなる。なお、第２シートの連通穴の形状は、平面視で試料室側の幅よりも通液ポート側の幅のほうが狭い形状でもよいし、平面視で試料室側の幅よりも通液ポート側の幅のほうが広い形状でもよい。例えば、第２シートの連通穴の平面視形状は、設計仕様に応じて変更することができる。

　本実施形態において観察、回収、培養等する試料（細胞又は粒子）は、特に限定されない。例えば、試料として細胞を用いる場合は、単一の細胞のみからなっていてもよいし、複数の細胞の集合体であってもよい。例えば、細胞には、細胞塊（細胞集団）が含まれる。

＜第６実施形態＞
　図３９は、第６実施形態のデバイス８０１の上面図である。図４０は、第６実施形態のデバイス８０１の下面図である。図４１は、第６実施形態のボディ８０８及びベース８５０の断面を含む斜視図である。図４２は、第６実施形態のボディ８０８及びベース８５０の断面図である。図４３は、第６実施形態のデバイス８０１における液体の流れの説明図である。
　第６実施形態において、上述した実施形態と同様の構成には同一の符号を付し、詳細説明は省略する。

　図３９から図４３に示すように、デバイス８０１は、試料（細胞又は粒子）を個別に格納可能な試料室２を有するユニット８０３を複数備える。デバイス８０１は、平面視でスライドガラスと同じ大きさの外形を有してもよい。

　ユニット８０３は、試料室２に対応する格納部４を有する格納層５と、格納部４に液体を流通するための構造体８０６と、を備える。複数のユニット８０３は、互いに液体の流通がなく独立している。なお、図４２及び図４３において、矢印はデバイス８０１（各ユニット８０３）における液体の流通方向を示す。

　デバイス８０１は、試料室２及び通液ポート７を有するボディ８０８（通液部材に相当）と、ボディ８０８が組み合わされるベース８５０と、試料室２、格納層５、通液ポート７の間の液体の流通を可能にする流路形成体８０９と、を備える。

　例えば、流路形成体８０９の厚みＣ１を薄くするほど、デバイス８０１下面から格納層５までの距離を短くできるため、高倍率観察が容易となる。本実施形態では、試料室と通液ポートとを分割した構造と比較して、流路形成体８０９の厚みＣ１を薄くしやすい。

　図４４は、第６実施形態のボディ８０８の上面図である。図４５は、第６実施形態のボディ８０８の下面図である。図４４において、１個の試料室２と１個の通液ポート７との組み合わせを太線で示す。
　図４４及び図４５を併せて参照し、ボディ８０８は、試料室２及び通液ポート７を有する。ボディ８０８は、試料室２が形成された第１筒部８１０と、通液ポート７が形成された第２筒部８２０と、を備える。第１筒部８１０及び第２筒部８２０は、Ｘ方向及びＹ方向に対して互いに斜めに連なっている。

　試料室２は、デバイス８０１の短辺方向（Ｙ方向）にＡ個、デバイス８０１の長辺方向（Ｘ方向）にＢ個設けられている。本実施形態では、デバイス８０１において短辺方向に並んだ試料室２の数Ａと長辺方向に並んだ試料室２の数Ｂとの比Ａ：Ｂは、２：３である。なお、比Ａ：Ｂは、上記に限らず、設計仕様に応じて変更可能である。

　本実施形態では、デバイス８０１において短辺方向に並んだ試料室２の数Ａは２個、長辺方向に並んだ試料室２の数Ｂは３個である。試料室２は、デバイス８０１に６個設けられている。なお、デバイス８０１に設けられる試料室２の数は、上記に限らず、設計仕様に応じて変更可能である。

　本実施形態では、通液ポート７は、試料室２に対応した位置に試料室２と同じ数設けられている。各通液ポート７は、対応する位置の試料室２に対して－Ｘ方向かつ－Ｙ方向の斜めオフセットした位置に配置されている。通液ポート７は、デバイス８０１に６個設けられている。なお、デバイス８０１に設けられる通液ポート７の配置及び数は、上記に限らず、設計仕様に応じて変更可能である。

　本実施形態では、通液ポート７の上部の形状は、逆円錐形状（上方に向かって拡径する形状）である。通液ポート７の下部の形状は、ドーム状（上方に湾曲した半球形状）である。これにより、気泡が流路に溜まりにくくなる。

　ボディ８０８を構成する材料は、試料室２に格納する対象に応じて任意に選択することができる。なお、ボディ８０８は、それ自体が細胞毒性を有さない材料、細胞毒性成分が溶出しない材料、自家蛍光が低い材料、ガンマ線照射で著しく変質しない材料、エチレンオキシド蒸気暴露で著しく変質しない材料、紫外線照射で著しく変質しない材料、滅菌処理で著しく変質しない材料、アルコールに溶解しない材料及び／又はそれらの混合物からなる群から選択される一つ以上の材料を更に含むことができ、それ自体が細胞毒性を有さず且つ細胞毒性成分が溶出しない材料を含むことが好ましい。

　ボディ８０８の色は、試料室２に格納する対象に応じて任意に選択することができる。ただし、材料の自家蛍光、顕微鏡観察時の光の反射の影響を軽減するための観点からは、ボディ８０８の色は、黒色であることが望ましい。

　本実施形態に係るボディ８０８は、試料室２及び通液ポート７を有する連通壁部８２１と、連通壁部８２１が連結される板状の基板部８２２と、隣り合う連通壁部８２１同士を連結する連結部８２３と、を備える。ボディ８０８は、１個の部品で構成されている。例えば、連通壁部８２１、基板部８２２及び連結部８２３は、同一の部材で一体に形成されていてもよい。ボディ８０８は、基板部８２２上に６個の連通壁部８２１が連なった構造を有する。なお、基板部８２２上に設けられる連通壁部８２１の数は、上記に限らず、設計仕様に応じて変更可能である。

　図４６は、第６実施形態のベース８５０の上面図である。図４７は、第６実施形態のベース８５０の下面図である。
　図４６及び図４７を併せて参照し、ベース８５０は、ボディ８０８が組み合わされる部材である。

　ベース８５０は、ボディ８０８を挿入するための開口孔８５１を有する底壁部８５２を備える。底壁部８５２は、ボディ８０８の基板部８２２を嵌め込むための凹部８５３を下面に有する。底壁部８５２の開口孔８５１は、ボディ８０８の複数の連通壁部８２１の外形に沿うように形成されている。底壁部８５２の凹部８５３の外形は、ボディ８０８の基板部８２２が嵌まり合うように平面視長方形をなしている。

　例えば、ボディ８０８とベース８５０とを組み合わせる際は、ベース８５０の底壁部８５２の開口孔８５１に対して、ベース８５０の下面側からボディ８０８を挿入する。これにより、ベース８５０の底壁部８５２の開口孔８５１にボディ８０８の連通壁部８２１を挿入するとともに、底壁部８５２の凹部８５３にボディ８０８の基板部８２２を嵌め込む。例えば、組み立てられたボディ８０８及びベース８５０の下面同士は、フラットになるように構成されている。

　ベース８５０は、底壁部８５２の上面に、平面視で角丸を有する矩形枠状の枠壁部８５５を備える。枠壁部８５５は、平面視で複数の連通壁部８２１の全体（試料室２及び通液ポート７全体）の周囲を囲うように設けられている。

　例えば、枠壁部８５５には、サンプルの蒸発を防ぐために試料室２及び通液ポート７全体を覆う蓋部材（不図示）が着脱可能に取り付けられてもよい。例えば、枠壁部８５５は、サンプルをロードする際にデバイス８０１を固定するための持ち手としても機能してもよい。

　図４８は、第６実施形態の流路形成体８０９の下面図である。図４９は、第６実施形態の流路形成体８０９を構成する接着層８４０の下面図である。図５０は、第６実施形態の流路形成体８０９を構成するシート８４１の下面図である。

　図４８から図５０を併せて参照し、流路形成体８０９は、平面視でベース８５０の外形に沿う長方形状を有する。流路形成体８０９は、試料室２、格納層５、通液ポート７の間の液体の流通を可能にする構造体である。流路形成体８０９は、各試料室２間の液体の流通を防いで独立させるためのものである。流路形成体８０９は、通液ポート７と試料室２とをつなぐ連通孔８４５を有する接着層８４０と、接着層８４０を介してベース８５０に取り付けられるシート８４１と、を備えて構成されていてもよい。

　例えば、接着層８４０は、通液ポート７と試料室２とをつなぐ流路の形を切り抜いた両面テープ（両面に接着層を有する接着シート）であってもよい。接着層８４０は、シート８４１を接着するために、ベース８５０の下面に設けられる。接着層８４０は、通液ポート７と試料室２とをつなぐ流路を除く、ベース８５０の下面全体に設けられてもよい。

　なお、接着層８４０は、両面テープに限らず、エポキシ系やアクリル系などの液体接着剤を任意の方法で塗布することで設けてもよい。例えば、ベース８５０及びシート８４１の表面同士を化学的、物理的に直接改質して接合できる場合は、この方法で両方を接着してもよい。

　接着層８４０を構成する材料は、試料室２に格納する対象に応じて任意に選択することができる。例えば、接着層８４０としては、アクリル系、シリコーン系、ゴム系の接着剤を用いた接着シートが挙げられる。なお、接着層８４０は、それ自体が細胞毒性を有さない材料、細胞毒性成分が溶出しない材料、自家蛍光が低い材料、ガンマ線照射で著しく変質しない材料、エチレンオキシド蒸気暴露で著しく変質しない材料、紫外線照射で著しく変質しない材料、滅菌処理で著しく変質しない材料、アルコールに溶解しない材料及び／又はそれらの混合物からなる群から選択される一つ以上の材料を更に含むことができ、それ自体が細胞毒性を有さず且つ細胞毒性成分が溶出しない材料を含むことが好ましい。
　なお、接着層８４０がアルコール等で溶出する成分を含んでいたとしても、溶出物を含んだアルコールに水を添加した際に析出物を発生させずに除去できるのであれば、使用できる。例えば、実施形態のデバイスは、デバイス全体をエタノールでプリウェットした後、エタノールを水に置換して使用してもよい。例えば、大半のテープでエタノールによる溶出物がある場合は、水に置換する際に、流路に通らない粒子が析出したり、水に溶解しない析出物がデバイスに付着したりすることがなければ、使用してもよい。

　例えば、シート８４１は、蛍光顕微鏡の励起に用いる青から近赤外の波長領域において透明なものを用いてもよい。なお、シート８４１は、それ自体が蛍光を発しない材料、ガンマ線照射を経ても着色、白濁又は変性しない材料、紫外線照射を経ても着色、白濁又は変性しない材料、エチレンオキシド蒸気への暴露を経ても着色、白濁又は変性しない材料、滅菌過程を経ても着色、白濁又は変性しない材料及び／又はそれらの混合物からなる群から選択される一つ以上の材料を更に含むことができ、シクロオレフィン・コポリマー（ＣＯＣ）又はシクロオレフィンポリマー（ＣＯＰ）を含むことが好ましい。

　例えば、流路形成体８０９の厚みＣ１は、２ｍｍ以下である。例えば、倒立顕微鏡（顕微鏡の一例）による高倍率の観察を可能にするためには、流路形成体８０９の厚みＣ１は、１．５ｍｍ以下であることが好ましく、１．０ｍｍ以下であることがより好ましく、０．５ｍｍ以下であることが更に好ましい。なお、流路形成体８０９の厚みＣ１は、デバイス８０１下面から格納層５までの距離に相当する（図４３参照）。

　なお、流路形成体８０９を構成するシート８４１は、１枚のフィルム（単層体）からなっていてもよいし、複数のフィルムの積層体からなっていてもよい。例えば、流路形成体８０９を構成するシート８４１の構成（フィルムの枚数）は、設計仕様に応じて変更することができる。

　例えば、シート８４１及び接着層８４０の各々の厚みは、流路形成体８０９の全体の厚みが上記の厚みＣ１（例えば２ｍｍ以下）であれば、任意である。例えば、シート８４１の厚みは、１８８μｍ程度である。例えば、接着層８４０の厚みは、５０μｍ程度である。
　なお、顕微鏡の高倍率の対物レンズは、レンズとカバーガラスとの間の媒体（例えば、空気、水、オイル等）及びガラスの厚みを考慮して焦点の位置が設計されている。実施形態のデバイスの構成では、光はレンズとデバイス底面までの媒体、流路を満たす水、格納部を通って観察対象物に達する。水はガラスに比べて屈折率が低いため、流路の高さが高く、水の層が厚いと、光学収差が大きくなり、高倍率観察が難しくなる。これを防ぐために、流路の高さは、液体の流通を妨げない範囲で低い方が良い。流路の高さは、接着層８４０の厚みで決まる。接着層８４０の厚みは、流路の水による収差の影響を少なくするために、１００μｍ以下、より好ましくは５０μｍ以下にするのが良い。接着層８４０の厚みの下限値は、液体の流通が妨げられなければ制限はないが、２０μｍ以上であることが好ましい。
　シート８４１の厚みには制限はないが、薄すぎると液体の吸引時に生じる負圧でシート８４１が上側（格納層側）に変形し、細胞が格納層外に出てしまう可能性がある。シート８４１は、液吸引時の負圧による変形が少なくなる厚みであることが好ましい。光学収差の観点では、シート８４１は屈折率がガラスに近い素材であることが好ましく、厚みも市販のカバーガラスに近い１７０μｍ以上２００μｍ以下であることが好ましい。上記から、シート８４１としては、厚み１８８μｍ程度のＣＯＣまたはＣＯＰが望ましい。

　図５１は、第６実施形態の格納層のレチクルパターンの一例（支持層）を示す図である。図５２は、第６実施形態の格納層のレチクルパターンの一例（ウェル層）を示す図である。なお、レチクルパターンは、ネガ型レジストで格納層を作る場合のパターンである。
　図５１及び図５２を併せて参照し、格納層５は、レチクル（フォトマスクの一例）を用いて作製したパターン（レチクルパターン）を有する支持層及び／又はウェル層を備えて構成されていてもよい。

　図５１及び図５２において、黒丸囲み部は、試料室２の開口部に対応する。黒丸囲み部の内側は、貫通孔があってもよい。黒丸囲み部の外側は、貫通孔がなくてもよい。例えば、支持層及び／又はウェル層に相当するフィルムをボディ８０８に対して接着剤で貼り付けてもよい。

　格納層５は、試料室２に対応する格納部４を有するフィルム状の部材である。図１０を併せて参照し、格納層５は、試料（細胞又は粒子）が通過可能な大きさのウェル開口３０を有していてもよい。また、格納層５は、ウェル開口３０に対応するウェル底部３１を備えていてもよい。また、ウェル底部３１は、液体のみを通過させる貫通孔３２を有していてもよい。

　図の例では、ウェル開口３０の平面視形状は六角形であるが、試料（細胞又は粒子）が通過可能な大きさであれば、どのような平面視形状であってもよい。図の例では、ウェル底部３１の中央部に平面視円形の貫通孔３２を２つ有するが、液体のみを通過させることが可能であれば、どのような平面視形状であってもよいし、貫通孔３２の個数も限定されない。

　格納層５を構成する材料は、試料室２に格納する対象に応じて任意に選択することができる。なお、格納層５は、ネガ型フォトレジスト、重合性官能基を有するポリエチレングリコール又はポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）及び／又はそれらの混合物からなる群から選択される一つ以上の材料を更に含むことができ、ネガ型フォトレジストを含むことが好ましい。

　図５１及び図５２を併せて参照し、支持層及びウェル層において、白抜き部（通液ポートに相当）は、レジストが無くなり、孔が開いた部分に相当する。例えば、通液ポート以外の全面に、ウェルを設けてもよい。これにより、接着剤の濡れ広がりをコントロールしてもよい。

　例えば、試料室２の部分にのみ、ウェルの底部に貫通孔を設けてもよい。すなわち、試料室２以外の部分には、貫通孔を設けなくてもよい。これにより、格納層５がボディ８０８（接着対象部材）と必要個所以外で接着してしまう事態を防ぐことができる。

　以上説明したように、本実施形態に係るデバイス８０１は、試料室２及び通液ポート７を有するボディ８０８が１個の部品で構成されている。
　この構成によれば、試料室２を有する部品と通液ポート７を有する部品とに分割した場合と比較して、部品点数を削減することができる。加えて、流路高さを低くして、高倍率観察の際の光学収差の影響を少なくすることができ、構成部品の数を減らすこともできる。

　図５３は、マイクロプレートでの試料室及び通液ポートの配置の一例を示す図である。図５４は、図５３に示すＹ方向に並んだ試料室の数ＡとＸ方向に並んだ試料室の数Ｂとの比Ａ：Ｂが２：３である場合の試料室数の一例を示す図である。図５５は、図５３に示すＹ方向に並んだ試料室の数ＡとＸ方向に並んだ試料室の数Ｂとの比Ａ：Ｂが２：１．５である場合の試料室数の一例を示す図である。

　図５３から図５５を併せて参照し、デバイスは、平面視でマイクロプレートと同じ長方形の外形を有してもよい。例えば、試料室及び通液ポートをＸ方向及びＹ方向に対して斜めに並ぶように（一対となるように）設けてもよい。例えば、試料室間のピッチの１／２の位置に通液ポートを配置してもよい。これにより、マイクロプレートにおいて互いに同じ数の試料室及び通液ポートを配置することができる。

　図５４及び図５５において、試料室数は下記の式（１）で算出される。
　試料室数＝Ａ×Ｂ×ｎ^２　・・・（１）

　例えば、通液性、操作性を考慮すると、図５４及び図５５に示すハッチング範囲をデバイスに適用することが望ましい。

　その他、本発明の趣旨を逸脱しない範囲で、上記した実施形態における構成要素を周知の構成要素に置き換えることは可能である。また、上述した各変形例を組み合わせても構わない。

　本発明のデバイス、観察方法、回収方法、培養方法、及び、デバイスの製造方法を利用すれば、１つのデバイスの中で複数の試料（細胞又は粒子）を独立に観察することが可能となる。

　１…デバイス、２…試料室、３…ユニット、４…格納部、５…格納層、６…構造体、７…通液ポート、８…通液部材、９…流路形成体、１０…第１部材、２０…第２部材、３０…ウェル開口、３１…ウェル底部、３２…貫通孔、４０…接着層、４１…第１シート、４２…第２シート、４３…第３シート、４４…第４シート、４５…連通穴、４６…開口孔、Ｃ１…流路形成体の厚み

Claims (17)

1. 　細胞又は粒子を個別に格納可能な試料室を有するユニットを複数備えるデバイスであって、
   　前記ユニットは、
   　　前記試料室に対応する格納部を有する格納層と、
   　　前記格納部に液体を流通するための構造体と、を備え、
   　複数の前記ユニットは、互いに前記液体の流通がなく独立している、
   　デバイス。
2. 　前記構造体は、
   　　前記格納部に前記液体を流通するための通液ポートを有し、前記格納層が貼り付けられた通液部材と、
   　　前記格納層を介して前記通液部材に貼り付けられ、前記試料室、前記格納層、前記通液ポートの間の前記液体の流通を可能にする流路形成体と、を備える、
   　請求項１に記載のデバイス。
3. 　前記通液部材は、
   　　前記試料室を有し、前記格納層が貼り付けられる第１部材と、
   　　前記通液ポートを有し、前記第１部材に組み合わせられる第２部材と、を備える、
   　請求項２に記載のデバイス。
4. 　前記流路形成体は、
   　　透明な第１シートと、
   　　前記第１シートに積み重ねられ、前記通液ポートと前記試料室とをつなぐ連通穴を有する第２シートと、を備える、
   　請求項２又は３に記載のデバイス。
5. 　前記流路形成体は、
   　　透明な第１シートと、
   　　前記第１シートに積み重ねられ、前記通液ポートと前記試料室とをつなぐ連通穴を有する第２シートと、
   　　前記第２シートに積み重ねられ、前記通液部材の前記通液ポート及び前記試料室に対応する位置に開口孔を有する第３シートと、を備える、
   　請求項２又は３に記載のデバイス。
6. 　前記流路形成体は、
   　　透明な第１シートと、
   　　前記第１シートに積み重ねられ、前記通液ポートと前記試料室とをつなぐ連通穴を有する第２シートと、
   　　前記第２シートに積み重ねられ、前記通液部材の前記通液ポート及び前記試料室に対応する位置に開口孔を有する第３シートと、
   　　前記第３シートに積み重ねられ、前記第３シートと同じ平面視形状を有する第４シートと、を備え、
   　前記第２シートの両面と前記第４シートの両面には、接着層が設けられている、
   　請求項２又は３に記載のデバイス。
7. 　前記流路形成体の厚みは、２ｍｍ以下である、
   　請求項２又は３に記載のデバイス。
8. 　前記格納層は、前記細胞又は前記粒子が通過可能な大きさのウェル開口を有するウェルアレイフィルターであり、
   　前記ウェル開口に対応するウェル底部を備え、
   　前記ウェル底部は、前記液体のみを通過させる貫通孔を有する、
   　請求項１又は２に記載のデバイス。
9. 　前記格納層は、ネガ型レジストで形成されている、
   　請求項１又は２に記載のデバイス。
10. 　前記デバイスは、平面視でスライドガラスと同じ大きさの外形を有し、
    　前記試料室は、前記デバイスに、２個、４個、６個又は８個設けられている、
    　請求項１又は２に記載のデバイス。
11. 　前記デバイスは、平面視でマイクロプレートと同じ長方形の外形を有し、
    　前記試料室は、前記デバイスの短辺方向にＡ個、前記デバイスの長辺方向にＢ個設けられ、
    　前記デバイスにおいて前記短辺方向に並んだ前記試料室の数Ａと前記長辺方向に並んだ前記試料室の数Ｂとの比Ａ：Ｂは、２：３、２：１．５又は２：１である、
    　請求項１又は２に記載のデバイス。
12. 　前記デバイスは、平面視でマイクロプレートと同じ大きさの外形を有し、
    　前記試料室は、前記デバイスに、３２個又は４８個設けられている、
    　請求項１又は２に記載のデバイス。
13. 　請求項１又は２に記載のデバイスを用いた、顕微鏡による前記細胞又は前記粒子を個別に観察する観察方法。
14. 　請求項１又は２に記載のデバイスを用いた、前記細胞又は前記粒子を個別に回収する回収方法。
15. 　請求項１又は２に記載のデバイスを用いた、前記細胞を培養する培養方法。
16. 　請求項１又は２に記載のデバイスの製造方法であって、
    　前記格納部に前記液体を流通するための通液ポートを有する通液部材に、前記格納層を貼り付ける第１工程と、
    　前記第１工程の後、前記試料室、前記格納層、前記通液ポートの間の前記液体の流通を可能にする流路形成体を、前記格納層を介して前記通液部材に貼り付ける第２工程と、を含む、
    　デバイスの製造方法。
17. 　前記第１工程は、
    　前記試料室を有する第１部材に、前記格納層を貼り付ける貼付工程と、
    　前記貼付工程の後、前記通液ポートを有する第２部材を、前記第１部材に組み合わせることで前記通液部材を作製する組合工程と、を含む、
    　請求項１６に記載のデバイスの製造方法。

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