WO2024085725A1 - 신규 화합물 유도체 및 이의 약학적 용도 - Google Patents

신규 화합물 유도체 및 이의 약학적 용도 Download PDF

Info

Publication number
WO2024085725A1
WO2024085725A1 PCT/KR2023/016395 KR2023016395W WO2024085725A1 WO 2024085725 A1 WO2024085725 A1 WO 2024085725A1 KR 2023016395 W KR2023016395 W KR 2023016395W WO 2024085725 A1 WO2024085725 A1 WO 2024085725A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
compound
amino
acceptable salt
pharmaceutically acceptable
benzo
Prior art date
Application number
PCT/KR2023/016395
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
홍순준
김충호
김종호
정종화
Original Assignee
고려대학교 산학협력단
경북대학교 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from KR1020230063337A external-priority patent/KR20240057318A/ko
Priority claimed from KR1020230118534A external-priority patent/KR20240056407A/ko
Application filed by 고려대학교 산학협력단, 경북대학교 산학협력단 filed Critical 고려대학교 산학협력단
Publication of WO2024085725A1 publication Critical patent/WO2024085725A1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/428—Thiazoles condensed with carbocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D275/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-thiazole or hydrogenated 1,2-thiazole rings
    • C07D275/04—Heterocyclic compounds containing 1,2-thiazole or hydrogenated 1,2-thiazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D275/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-thiazole or hydrogenated 1,2-thiazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems with hetero atoms directly attached to the ring sulfur atom

Definitions

  • the present invention relates to novel compound derivatives and their pharmaceutical uses, and specifically to novel 1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole (1,1-dioxo-1,2-) having antiplatelet activity.
  • Platelet aggregation is known to be one of the main causes of various cardiovascular diseases such as stroke, coronary heart disease, and pulmonary thromboembolism.
  • Antiplatelet agents are classified according to their mechanism into P2Y 12 antagonists, serotonin antagonists, COX inhibitors, PDE inhibitors, and glycoprotein (GP) IIb/IIIa antagonists.
  • P2Y12 antagonists inhibit platelet aggregation by preventing the ADP substance that induces platelet aggregation from binding to the receptor.
  • Drugs belonging to this group include clopidogrel and cangrelor, which were approved in 2015.
  • Serotonin receptor antagonists are substances that interfere with the action of serotonin, which is involved in platelet aggregation.
  • COX inhibitors are known to inhibit the formation of blood clots by inhibiting cyclooxygenase, an enzyme involved in the production of thromboxane A2, which promotes platelet aggregation.
  • Aspirin which belongs to this category, is known to have an inhibitory effect on platelet aggregation by irreversibly blocking the formation of thromboxane A2 in platelets when used in low doses for a long period of time.
  • PDE inhibitors inhibit the breakdown of cAMP, a substance that inhibits platelet activation by the PDE3 enzyme.
  • glycoprotein (GP) IIb/IIIa or integrin ⁇ IIb ⁇ 3) antagonists are a new class of agents that inhibit platelet interaction and thrombus formation by blocking the binding of fibrinogen to the GPIIb/IIIa complex on the platelet cell membrane, i.e., activated GPIIb/IIIa. It is an antithrombotic agent, and drugs belonging to it include abciximab and tirofiban, which were approved in 2016. Several large-scale trials have confirmed the therapeutic effect of GPIIb/IIIa inhibitors on patients with acute coronary syndrome, thus establishing GPIIb/IIIa inhibitors as the mainstay of acute coronary syndrome treatment drugs.
  • GPIIb/IIIa When platelets are activated, their GPIIb/IIIa conformation changes, which accepts the binding of fibrinogen, resulting in platelet aggregation and thrombus formation.
  • Existing GPIIb/IIIa inhibitors inhibit platelet aggregation by directly interfering with fibrinogen binding in a competitive manner, but are known to have side effects such as intracranial hemorrhage, retroperitoneal hemorrhage, and thrombocytopenia. Therefore, there is an unmet medical need for medical staff and patients, and there is a need for the development of new antiplatelet agents with a mode of action that can provide an efficient yet safe treatment option.
  • talin is a cytoskeletal protein, known to play an important role in GPIIb/IIIa activation, and is known to bind to the tail of GPIIIa.
  • GPIIb/IIIa is activated by overexpression of the integrin-binding talin head domain, suggesting that formation of the GPIIIa-talin complex may lead to activation.
  • the F3 domain of talin which mediates GPIIIa binding, binds to the membrane-distal (MD) portion of the GPIIIa tail and also binds to the membrane-proximal (MP) helix of the GPIIIa tail in a unique manner.
  • the interaction between the transmembrane domain and the membrane proximal part of GPIIb and GPIIIa, which maintains the inactivated state of GPIIb/IIIa, is interrupted by mutation of GPIIa in the MP region, resulting in activation of GPIIb/IIIa, talin-GPIIIa.
  • the interaction appears to mediate GPIIb/IIIa activation through inhibition of interactions in the membrane domain and membrane proximal portion of GPIIb and GPIIIa.
  • the present inventors have proposed a new antiplatelet agent with a novel bioisosteric framework, which is a 1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole derivative or 5 -Developed novel compound derivatives such as amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile and completed the present invention did.
  • the present invention aims to solve the above-described problems and other problems associated therewith.
  • One exemplary object of the present invention is to provide a compound of the following formula (1) or a pharmaceutically acceptable salt thereof:
  • X is O, NR 4 , NR 5 CH 2 , NR 6 NR 7 , , , or ego,
  • R 1 to R 3 are each hydrogen, halogen, amino, nitro, cyano, hydroxy, thiol, C 1-6 alkyl, C 1-6 haloalkyl, C 3-6 cycloalkyl, C 1-6 alkoxy, aryl , heteroaryl, heterocyclyl, C 1-6 alkyl linked to a heteroatom, heteroaryl linked to a heteroatom, or heterocyclyl linked to a heteroatom,
  • R 4 to R 7 are each hydrogen or C 1 -C 6 alkyl.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for inhibiting platelet aggregation containing the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile or its pharmaceutical
  • the object is to provide a pharmaceutical composition for inhibiting platelet aggregation containing a legally acceptable salt as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for preventing or treating thrombotic diseases containing the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile or its pharmaceutical To provide a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of thrombotic diseases containing a legally acceptable salt as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for preventing or treating cardiovascular disease containing the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile or its pharmaceutical To provide a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of cardiovascular disease containing a legally acceptable salt as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a food composition for inhibiting platelet aggregation containing the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile or its pharmaceutical
  • the object is to provide a food composition for inhibiting platelet aggregation containing a legally acceptable salt as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a food composition for preventing or improving thrombotic diseases containing the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile or its pharmaceutical To provide a food composition for preventing or improving thrombotic diseases containing a legally acceptable salt as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a food composition for preventing or improving cardiovascular disease containing the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile or its pharmaceutical
  • the aim is to provide a food composition for preventing or improving cardiovascular disease containing a legally acceptable salt as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a quasi-drug composition for inhibiting platelet aggregation containing the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile or its pharmaceutical
  • the aim is to provide a quasi-drug composition for inhibiting platelet aggregation containing a legally acceptable salt as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a quasi-drug composition for preventing, improving, or treating thrombotic diseases, comprising the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile or its pharmaceutical To provide a quasi-drug composition for preventing, improving or treating thrombotic diseases containing a legally acceptable salt as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a quasi-drug composition for preventing, improving, or treating cardiovascular disease, comprising the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile or its pharmaceutical To provide a quasi-drug composition for preventing, improving or treating cardiovascular disease containing a legally acceptable salt as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a feed composition for inhibiting platelet aggregation containing the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile or its pharmaceutical
  • the aim is to provide a feed composition for inhibiting platelet aggregation containing a legally acceptable salt as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a feed composition for preventing or improving thrombotic diseases containing the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile or its pharmaceutical
  • the aim is to provide a feed composition for preventing or improving thrombotic diseases containing a legally acceptable salt as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a feed composition for preventing or improving cardiovascular disease containing the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile or its pharmaceutical
  • the aim is to provide a feed composition for preventing or improving cardiovascular disease containing a legally acceptable salt as an active ingredient.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a method for preventing or treating thrombotic diseases, comprising administering the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof to an individual in need thereof.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile or its pharmaceutical
  • the present invention provides a method for preventing or treating thrombotic diseases, including the step of administering an acceptable salt to an individual in need thereof.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a method for preventing or treating cardiovascular disease, comprising administering the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof to an individual in need thereof.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile or its pharmaceutical
  • the present invention provides a method for preventing or treating cardiovascular disease, comprising administering an acceptable salt to an individual in need thereof.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a use of the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the production of a medicament for the prevention or treatment of thrombotic diseases.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl) for the production of a medicament for the prevention or treatment of thrombotic diseases.
  • -1H-pyrazole-4-carbonitrile or a pharmaceutically acceptable salt thereof is provided.
  • Another exemplary object of the present invention is to provide a use of the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the production of a medicament for preventing or treating cardiovascular diseases.
  • Another exemplary object of the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)- for the production of a medicament for the prevention or treatment of cardiovascular disease.
  • 1H-pyrazole-4-carbonitrile or a pharmaceutically acceptable salt thereof is provided.
  • the present invention provides a compound of the following formula (1) or a pharmaceutically acceptable salt thereof:
  • X is O, NR 4 , NR 5 CH 2 , NR 6 NR 7 , , , or ego,
  • R 1 to R 3 are each hydrogen, halogen, amino, nitro, cyano, hydroxy, thiol, C 1-6 alkyl, C 1-6 haloalkyl, C 3-6 cycloalkyl, C 1-6 alkoxy, aryl , heteroaryl, heterocyclyl, C 1-6 alkyl linked to a heteroatom, heteroaryl linked to a heteroatom, or heterocyclyl linked to a heteroatom,
  • R 4 to R 7 are each hydrogen or C 1 -C 6 alkyl.
  • R 1 and R 2 are each hydrogen, methyl, methoxy, trifluoromethyl (CF 3 ), tert-butyl, bromide, chloride, or fluoride. , propylmethanesulfonamide, methylmorpholine, dimethylamine, , , or and R 3 and R 4 may each be hydrogen.
  • halo refers to bromo (Br), chloro (Cl), fluoro (F), or iodo (I), and preferred halogens as substituents are bromo, chloro, Or it may be fluoro.
  • amino refers to -NH 2 .
  • nitro refers to -NO 2 .
  • cyano refers to -CN.
  • hydroxy refers to the group -OH.
  • thiol refers to -SH.
  • C 1-6 alkyl refers to a monovalent linear or branched saturated hydrocarbon moiety consisting only of carbon and hydrogen atoms, having from 1 to 6 carbon atoms.
  • alkyl groups include, but are not limited to, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, tert-butyl, tert-butyl, pentyl, n-hexyl, etc.
  • Examples of “branched alkyl” include isopropyl, isobutyl, tert-butyl, etc.
  • C 1-6 haloalkyl means C 1-6 alkyl as defined herein in which one or more hydrogens are replaced by the same or a different halogen.
  • exemplary haloalkyls include -CH 2 Cl, -CH 2 CF 3 , -CH 2 CCl 3 , perfluoroalkyl (eg -CF 3 ), and the like.
  • cycloalkyl refers to a saturated or partially unsaturated monocyclic or polycyclic hydrocarbon substituent.
  • the cycloalkyl ring contains 3 to 20 carbon atoms, preferably 3 to 12 carbon atoms, more preferably 3 to 6 carbon atoms.
  • monocyclic cycloalkyls include cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclopentenyl, cyclohexyl, cyclohexenyl, cyclohexadienyl, cycloheptyl, cycloheptatrienyl, cyclooctyl, etc. do.
  • Polycyclic cycloalkyls include cycloalkyls with spiro rings, fused rings, or bridged rings.
  • alkoxy refers to -O-(alkyl) and -O-(unsubstituted cycloalkyl), where alkyl is as defined above.
  • alkoxy include methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, cyclopropoxy, cyclobutoxy, cyclopentyloxy, cyclohexyloxy.
  • Alkoxy may be optionally substituted or unsubstituted.
  • the substituent is preferably alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylthio, alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, heteroaryl, cyclo It is one or more groups independently selected from the group consisting of alkoxyl, heterocycloalkoxyl, cycloalkylthio, heterocyclylthio, carboxy, and carboxylate.
  • aryl refers to a monovalent cyclic aromatic hydrocarbon moiety consisting of mono-, bi-, or tricyclic aromatic rings.
  • the aryl group may be substituted or unsubstituted as defined herein.
  • aryl is substituted or unsubstituted phenyl, or substituted or unsubstituted naphthyl.
  • aryl is substituted or unsubstituted phenyl.
  • heteroaryl refers to a mono group of 5 to 12, especially 6 to 10 ring atoms, containing 1, 2 or 3 ring heteroatoms selected from N, O and S and having one or more aromatic rings with the remaining ring atoms being C. refers to a cyclic, bicyclic or tricyclic radical, and the point of attachment of the heteroaryl radical is understood to be on an aromatic ring.
  • the heteroaryl may be a 5- or 6-membered monocyclic ring containing 1, 2, or 3 ring heteroatoms selected from N, O, and S, and the remaining ring atoms are C.
  • the heteroaryl ring may be substituted or unsubstituted as defined herein.
  • heteroaryl moieties include pyrrolyl, imidazolyl, pyrazolyl, triazolyl, tetrazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, oxadiazolyl, thiadiazolyl, thienyl (i.e., thienyl) phenyl), furanyl, pyranyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, pyridazinyl, quinolinyl, isoquinolinyl, benzofuryl (i.e.
  • benzofuranyl benzothiophenyl, benzothiopyranyl , benzimidazolyl, benzoxazolyl, benzoxadiazolyl, benzothiazolyl, benzothiadiazolyl, benzopyranyl, indolyl, isoindolyl, triazolyl, triazinyl, quinoxalinyl, purinyl, It includes, but is not limited to, quinazolinyl, quinolizinyl, naphthyridinyl, pteridinyl, carbazolyl, azepinyl, diazepinyl, acridinyl, etc., and each of them may be substituted or unsubstituted.
  • Preferred heteroaryls include pyrrolyl, imidazolyl, pyrazolyl, triazolyl, tetrazolyl, indolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl and pyridazinyl, each of which may be substituted or unsubstituted.
  • heterocyclyl refers to a saturated or partially unsaturated carbocyclic ring of 4 to 9 ring atoms, which in addition to carbon atoms contains 1, 2 or 3 ring heteroatoms selected from N, O and S. indicates.
  • Bicyclic means that it consists of two rings with two ring atoms in common, i.e. the bridge separating the two rings is either a single bond or a chain of one or two ring atoms.
  • the heterocyclyl ring may be substituted or unsubstituted as defined herein.
  • heterocyclyl includes azetidinyl, pyrrolidinyl, tetrahydrofuranyl, tetrahydro-thienyl, pyrazolidinyl, imidazolidinyl, oxazolidinyl, isoxazolidinyl, thiazolidinyl, pipe Ridinyl, tetrahydropyranyl, tetrahydrothiopyranyl, piperazinyl, morpholinyl, thiomorpholinyl, 1,1-dioxo-thiomorpholin-4-yl, azepanil, diazepanyl, furiferazinyl, oxazepanyl, dihydroindolyl, dihydrofuryl, dihydroimidazolinyl, dihydroxazolyl, tetrahydropyridinyl, dihydropyranyl or benzodioxolyl.
  • aryl, heteroaryl or heterocyclyl linked by heteroatoms means an aryl group, heteroaryl or heterocyclyl linked by heteroatoms O, S or Se.
  • the heteroatom is N or S.
  • the compound of Formula 1 may be 1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole or a derivative thereof, 1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole
  • the chemical structure of oxo-1,2-benzisothiazole is as follows.
  • 1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole (1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole) derivatives are pharmaceutically or foodologically acceptable within the range of having the same efficacy.
  • These salts are pharmaceutically or foodologically acceptable salts and may be basic salts or acid salts.
  • the basic salts may be used in the form of any one of organic base salts and inorganic base salts, such as sodium salts, potassium salts, and calcium salts. , lithium salt, magnesium salt, cesium salt, aminium salt, ammonium salt, triethylaminium salt, and pyridinium salt.
  • a useful type of such salt is an acid salt, an acid addition salt formed by a free acid.
  • Inorganic acids and organic acids can be used as free acids.
  • Hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, sulfurous acid, phosphoric acid, double phosphoric acid, and nitric acid can be used as inorganic acids, and citric acid, acetic acid, maleic acid, malic acid, and fumaric acid can be used as organic acids.
  • glucolic acid methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, camphorsulfonic acid, oxalic acid, malonic acid, glutaric acid, acetic acid, glycolic acid, succinic acid, tartaric acid, 4-toluenesulfonic acid, galacturonic acid, embonic acid, Glutamic acid, citric acid, aspartic acid, stearic acid, etc.
  • glucolic acid methanesulfonic acid
  • benzenesulfonic acid camphorsulfonic acid
  • oxalic acid malonic acid
  • glutaric acid acetic acid
  • glycolic acid succinic acid, tartaric acid
  • 4-toluenesulfonic acid galacturonic acid
  • embonic acid Glutamic acid
  • citric acid aspartic acid
  • stearic acid etc.
  • novel 1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole derivative of the present invention can be synthesized through the following process.
  • R 1 is hydrogen, halogen, amino, nitro, cyano, hydroxy, thiol, C 1-6 alkyl, C 1-6 haloalkyl, C 3-6 cycloalkyl, C 1-6 alkoxy, aryl, heteroaryl , heterocyclyl, C 1-6 alkyl connected to a heteroatom, aryl (heteroaryl or heterocyclyl) connected to a heteroatom, or a substituted or unsubstituted benzene ring.
  • R 2 is hydrogen, halogen, amino, nitro, cyano, hydroxy, thiol, C 1-6 alkyl, C 1-6 haloalkyl, C 3-6 cycloalkyl, C 1-6 alkoxy, aryl, heteroaryl , heterocyclyl, C 1-6 alkyl connected to a heteroatom, or aryl connected to a heteroatom (heteroaryl or heterocyclyl), adamantane, substituted or unsubstituted toluene, substituted or unsubstituted benzene ring, Substituted or unsubstituted benzimidazole, , , , , or am.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for inhibiting platelet aggregation containing the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing, improving, or treating thrombotic diseases, comprising the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing, improving, or treating cardiovascular disease, comprising the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the 1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole derivative of Formula 1 is as described above.
  • the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbon
  • a pharmaceutical composition for inhibiting platelet aggregation comprising trill or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbon
  • a pharmaceutical composition for the prevention, improvement or treatment of thrombotic diseases comprising trill or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention is 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbon
  • a pharmaceutical composition for preventing, improving, or treating cardiovascular disease containing trill or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the “thrombotic disease” includes arterial thrombosis, venous thrombosis, coronary thrombosis, deep vein thrombosis, cerebral artery thrombosis, peripheral vascular thrombosis, arterial embolism, venous embolism, renal embolism, chronic arterial occlusion, pulmonary infarction, and cerebral infarction. , cerebral hemorrhage, cerebral embolism, thrombophlebitis, and heart failure, and various thrombosis and diseases resulting therefrom, where "thrombosis” means the formation of a blood clot in a blood vessel, which inhibits the flow of blood through the circulatory system.
  • cardiovascular disease includes, but is not limited to, hypertension, ischemic heart disease, coronary artery disease, angina, myocardial infarction, arteriosclerosis, cerebrovascular disease, arrhythmia, etc.
  • prevention refers to any act of suppressing or delaying the symptoms of cardiovascular disease by administering the composition of the present invention
  • improvement refers to alleviating the symptoms of cardiovascular disease by applying the composition of the present invention. It means showing the desired effect.
  • treatment refers to any action in which symptoms of cardiovascular disease are improved or beneficially changed by administration of the composition of the present invention.
  • the pharmaceutical composition of the present invention targets and inhibits the activation of platelet glycoprotein IIb/IIIa, thereby preventing, improving or treating thrombotic or cardiovascular diseases through inhibition of platelet aggregation.
  • composition of the present invention may further include a pharmaceutically acceptable carrier.
  • Pharmaceutically acceptable carriers may further include, for example, a carrier for oral administration or a carrier for parenteral administration.
  • Carriers for oral administration may include lactose, starch, cellulose derivatives, magnesium stearate, stearic acid, etc.
  • Carriers for parenteral administration may also include water, suitable oils, saline solutions, aqueous glucose and glycols, and the like. Additionally, stabilizers and preservatives may be additionally included. Suitable stabilizers include antioxidants such as sodium bisulfite, sodium sulfite or ascorbic acid. Suitable preservatives include benzalkonium chloride, methyl- or propyl-paraben and chlorobutanol.
  • the pharmaceutical composition of the present invention can be administered to mammals, including humans, by any method.
  • it can be administered orally or parenterally, and parenteral administration methods are not limited to, but are intravenous, intramuscular, intraarterial, intramedullary, intrathecal, intracardiac, transdermal, subcutaneous, and intraperitoneal.
  • parenteral administration methods are not limited to, but are intravenous, intramuscular, intraarterial, intramedullary, intrathecal, intracardiac, transdermal, subcutaneous, and intraperitoneal.
  • the pharmaceutical composition of the present invention can be formulated into a preparation for oral administration or parenteral administration according to the administration route described above.
  • one or more buffers e.g. saline or phosphate buffered saline (PBS)
  • antioxidants e.g. saline or phosphate buffered saline (PBS)
  • bacteriostatic agents e.g. EDTA or glutathione
  • fillers e.g. EDTA or glutathione
  • extenders binders
  • adjuvants e.g. For example, aluminum hydroxide
  • suspending agents thickening agents, wetting agents, disintegrants or surfactants, diluents or excipients.
  • Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, solutions, gels, syrups, slurries, suspensions or capsules, etc.
  • These solid preparations include the pharmaceutical composition of the present invention and at least one excipient, e.g.
  • starch including corn starch, wheat starch, rice starch, potato starch, etc.
  • calcium carbonate sucrose, lactose, dextrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol and maltitol.
  • It can be prepared by mixing cellulose, methyl cellulose, sodium carboxymethyl cellulose, hydroxypropylmethyl-cellulose, or gelatin.
  • tablets or dragees can be obtained by combining the active ingredient with solid excipients, grinding them, adding suitable auxiliaries, and processing them into a granule mixture.
  • lubricants such as magnesium styrate talc are also used.
  • Liquid preparations for oral use include suspensions, oral solutions, emulsions, or syrups.
  • various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, or preservatives may be included.
  • cross-linked polyvinylpyrrolidone, agar, alginic acid, or sodium alginate may be added as a disintegrant, and anti-coagulants, lubricants, wetting agents, fragrances, emulsifiers, and preservatives may be additionally included. .
  • the pharmaceutical composition of the present invention can be formulated with a suitable parenteral carrier in the form of injections, transdermal administration, and nasal inhalation according to methods known in the art.
  • a suitable parenteral carrier in the form of injections, transdermal administration, and nasal inhalation according to methods known in the art.
  • suitable carriers include, but are not limited to, solvents or dispersion media including water, ethanol, polyols (e.g., glycerol, propylene glycol, and liquid polyethylene glycol, etc.), mixtures thereof, and/or vegetable oils. You can.
  • suitable carriers include Hanks' solution, Ringer's solution, PBS containing triethanolamine, or sterile water for injection, and isotonic solutions such as 10% ethanol, 40% propylene glycol, and 5% dextrose. .
  • isotonic solutions such as 10% ethanol, 40% propylene glycol, and 5% dextrose.
  • it may additionally contain various antibacterial and antifungal agents such as parabens, chlorobutanol, phenol, sorbic acid, thimerosal, etc.
  • the injection may additionally contain an isotonic agent such as sugar or sodium chloride.
  • transdermal administration forms such as ointments, creams, lotions, gels, external solutions, paste preparations, linear preparations, and aerol preparations are included.
  • 'transdermal administration means administering a pharmaceutical composition topically to the skin so that an effective amount of the active ingredient contained in the pharmaceutical composition is delivered into the skin.
  • compositions used according to the invention may be packaged in pressurized packs or using a suitable propellant, such as dichlorofluoromethane, trichlorofluoromethane, dichlorotetrafluoroethane, carbon dioxide or other suitable gas. It can be conveniently delivered in the form of an aerosol spray from a nebulizer.
  • the dosage unit can be determined by providing a valve that delivers a metered amount.
  • gelatin capsules and cartridges for use in inhalers or insufflators can be formulated to contain a powder mixture of the compound and a suitable powder base such as lactose or starch.
  • Formulations for parenteral administration are described in Remington's Pharmaceutical Science, 15th Edition, 1975 Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania 18042, Chapter 87: Blaug, Seymour, a text generally known in all pharmaceutical chemistry.
  • composition of the present invention can be used alone or in combination with surgery, radiation therapy, hormone therapy, chemotherapy, or methods using biological response modifiers.
  • composition of the present invention is not limited thereto, but may be implemented in the form of various compositions for external use, such as pharmaceutical compositions, quasi-drug compositions, food (including food additive) compositions, and feed (feed additive) compositions.
  • the present invention provides a quasi-drug composition for inhibiting platelet aggregation containing the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention provides a quasi-drug composition for preventing, improving or treating thrombotic diseases, comprising the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention provides a quasi-drug composition for preventing, improving or treating cardiovascular disease, comprising the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention provides 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-
  • a quasi-drug composition for inhibiting platelet aggregation containing carbonitrile or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient is provided.
  • the present invention provides 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-
  • a quasi-drug composition for preventing, improving, or treating thrombotic diseases containing carbonitrile or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention provides 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-
  • a quasi-drug composition for preventing, improving, or treating cardiovascular disease containing carbonitrile or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • quadsi-drug refers to articles used for the purpose of diagnosing, treating, alleviating, treating, or preventing diseases in humans or animals that are not instruments, machines, or devices, and that have pharmacological effects on the structure and function of humans or animals.
  • products used for the purpose of influencing it refers to products excluding those that are not instruments, machines, or devices.
  • One specific example may include preparations for internal use, but is not limited thereto, and the formulation method, dosage, and use method of quasi-drugs , components, etc. can be appropriately selected from conventional techniques known in the technical field.
  • the quasi-drug composition of the present invention may further include pharmaceutically acceptable carriers, excipients, or diluents as needed.
  • the pharmaceutically acceptable carrier, excipient, or diluent is not limited as long as it does not impair the effect of the present invention, and includes, for example, fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrants, surfactants, lubricants, sweeteners, fragrances, preservatives, etc. It can be included.
  • the present invention also provides a food composition for inhibiting platelet aggregation containing the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention also provides a food composition for preventing or improving thrombotic diseases containing the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention also provides a food composition for preventing or improving cardiovascular disease comprising the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention also provides 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole- Provided is a food composition for inhibiting platelet aggregation containing 4-carbonitrile or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention also provides 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-
  • a food composition for preventing or improving thrombotic diseases containing 4-carbonitrile or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention also provides 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-
  • a food composition for preventing or improving cardiovascular disease containing 4-carbonitrile or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the food composition of the present invention includes all forms of functional food, nutritional supplements, health food, food additives, and feed, including health functional foods. Or animals, including livestock, are used for consumption. Food compositions of this type can be prepared in various forms according to conventional methods known in the art.
  • Food compositions of this type can be prepared in various forms according to conventional methods known in the art.
  • General foods include, but are not limited to, beverages (including alcoholic beverages), fruit and its processed foods (canned fruit, bottled food, jam, marmalade, etc.), fish, meat, and their processed foods (ham, sausage, corned beef, etc.) , bread and noodles (udon, buckwheat noodles, ramen, spagate, macaroni, etc.), fruit juice, various drinks, cookies, taffy, dairy products (butter, cheese, etc.), edible plant oils, margarine, vegetable protein, retort food, frozen food. , can be manufactured by adding the above active ingredients to various seasonings (soybean paste, soy sauce, sauce, etc.).
  • nutritional supplements can be manufactured by adding the above-mentioned active ingredients to capsules, tablets, pills, etc.
  • health functional foods are not limited to this, but for example, they can be manufactured in the form of tea, juice, and drinks and consumed by liquefying, granulating, encapsulating, and powdering so that they can be consumed as health drinks.
  • the allyl isothiocyanate in the form of a food additive it can be prepared and used in the form of powder or concentrate. Additionally, it can be prepared in the form of a composition by mixing it with known active ingredients known to be effective in inhibiting platelet aggregation, thrombotic diseases, or cardiovascular diseases.
  • the food composition of the present invention contains various nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, colorants, pectic acid, salts of pectic acid, alginic acid, salts of alginic acid, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, It may contain glycerin, alcohol, or carbonating agent.
  • the present invention provides a feed composition for inhibiting platelet aggregation comprising the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention provides a feed composition for preventing or improving thrombotic diseases containing the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention provides a feed composition for preventing or improving cardiovascular disease containing the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention provides 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-
  • a feed composition for inhibiting platelet aggregation containing carbonitrile or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient is provided.
  • the present invention provides 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-
  • a feed composition for preventing or improving thrombotic diseases containing carbonitrile or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention provides 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-
  • a feed composition for preventing or improving cardiovascular disease containing carbonitrile or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the feed composition may be formulated in the form of a normal feed and may include known feed ingredients. It can also be used as a feed additive, which is added to the feed used in the form of an additive.
  • the feed additive of the present invention corresponds to supplementary feed under the Feed Management Act, and includes mineral preparations such as sodium bicarbonate (sodium bicarbonate), bentonite, magnesium oxide, and complex minerals, and trace minerals such as zinc, copper, cobalt, and selenium.
  • vitamin preparations such as kerotene, vitamin E, vitamins A, D, E, nicotinic acid, and vitamin B complex
  • protective amino acid preparations such as methionine and lysic acid
  • protective fatty acid preparations such as fatty acid calcium salts
  • probiotics lactic acid bacteria
  • yeast culture Water live bacteria such as mold fermentation products, yeast, etc. may be additionally included.
  • the feed or feed additive of the present invention can be applied to a number of animal diets, including mammals, poultry, and fish.
  • the present invention provides a method for preventing or treating thrombotic diseases, comprising administering the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof to an individual in need thereof.
  • the present invention provides 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4- Provided is a method for preventing or treating thrombotic diseases, comprising administering carbonitrile or a pharmaceutically acceptable salt thereof to an individual in need thereof.
  • the present invention provides a method for preventing or treating cardiovascular disease, comprising administering the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof to an individual in need thereof.
  • the present invention provides 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-
  • a method for preventing or treating cardiovascular disease comprising administering carbonitrile or a pharmaceutically acceptable salt thereof to an individual in need thereof.
  • the subject refers to all living organisms, such as rats, mice, and livestock, including humans, that can develop thrombotic disease or cardiovascular disease.
  • it may be a mammal, including humans.
  • the present invention provides the use of the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the production of a drug for preventing or treating thrombotic diseases.
  • the present invention provides 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trime) for the production of a drug for preventing or treating thrombotic diseases.
  • a drug for preventing or treating thrombotic diseases is provided.
  • the present invention provides the use of the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the production of a drug for preventing or treating cardiovascular diseases.
  • the present invention provides 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxy
  • 1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole derivative or 5-amino-3-(1-cyano-2-(3) according to the present invention 4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile can inhibit platelet aggregation by inhibiting the activation of glycoprotein (GP) IIb/IIIa, thereby preventing thrombotic diseases and cardiovascular diseases. It may have the effect of preventing, improving, or treating a disease.
  • GP glycoprotein IIb/IIIa
  • Figure 1 shows the results of flow cytometry analysis confirming the inhibitory effect of PAC1 binding by 1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole (Compound 1) after overexpressing talin in a cell line expressing glycoprotein IIb/IIIa. .
  • Figures 2A to 2F are flow cytometric analysis results confirming the inhibitory effect on PAC1 binding for derivatives of 1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole (compounds 2 to 31).
  • Figure 3 shows the PAC1 binding inhibition effect following treatment with 1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole derivative treatment as the degree of integrin activation induced by mGFP-conjugated talin (mGFP-THD) following treatment with derivative of Compound 1. This is the confirmed result.
  • mGFP-THD mGFP-conjugated talin
  • Figure 4a shows the results of confirming the degree of PAC1 binding by treating cells expressing only GFP and cells expressing GFP-talin with DMSO, eptifibatide, or MnCl 2 , respectively.
  • Figure 4b shows the results of flow cytometric analysis after treating cells expressing GFP-talin with compounds 7, 8, 11, 27, and 29, which significantly inhibit the binding of PAC1, respectively.
  • Figure 5 shows the results showing the inhibitory effect of the compound showing the PAC1 binding inhibitory effect compared to the control group treated with talin overexpression and eptifibatide for the compound showing the PAC1 binding inhibitory effect.
  • Figure 6 shows the results of confirming platelet aggregation by treating normal blood samples with Compound 1 together with the activator ADP or TRAP, and then checking PAC1 or p-selectin by FACS.
  • Figure 7 shows the results of measuring platelet aggregation by using blood from a normal person or a patient taking existing antiplatelet drugs, using ADP or TRAP as an activator, treating it with Compound 1, and measuring the absorbance.
  • Figure 8 shows the results of confirming platelet aggregation by using ADP or TRAP as an activator in a blood sample from a patient with cardiovascular disease taking aspirin or clopidogrel, treating it with Compound 1, and confirming PAC1 by FACS.
  • Figure 9 shows the results of measuring the change in absorbance due to micro-aggregation in a normal blood sample using ADP or TRAP as an activator and treating Compound 1 at different concentrations.
  • Figure 10 shows 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole after overexpressing talin in a cell line expressing GPIIb/IIIa. This is the result of flow cytometry analysis confirming the inhibitory effect of 4-carbonitrile (Compound 32) on PAC1 binding/integrin aIIbb3 activation.
  • Figure 11 shows PAC1 binding and GPIIb of 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile (Compound 32) This is the result of quantitatively confirming the effect of inhibiting /IIIa activation.
  • Figure 12 shows treatment of 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile (Compound 32) by concentration.
  • the case of overexpressing talin (THD) to inhibit PAC1 binding and GPIIb/IIIa activation was set as a negative control (reference value 100%), and the case treated with eptifibatide was set as a positive control (inhibition of PAC1 binding, reference value 0%). This is a quantitatively confirmed result by setting it to ,).
  • Figure 13 shows the results of confirming the inhibitory effect of compound 32 on thrombin-dependent platelet spreading by cytofluorescence immunostaining through platelet actin staining.
  • Figure 14 shows the results of confirming platelet aggregation by using ADP or TRAP as an activator in a blood sample from a patient with cardiovascular disease taking aspirin or clopidogrel, treating it with Compound 32, and confirming PAC1 by FACS.
  • Figure 15 shows the results of measuring the change in absorbance due to micro-aggregation in normal blood samples using ADP as an activator and treating compound 32 at different concentrations.
  • Thin-layer chromatography was performed using Merck silica gel 60 F254 plates (Merck, Kenilworth, NJ, USA), and flash chromatography was performed automatically using Isolera (Biotage, Uppsala, Sweden) or using Merck silica gel 60 (0.040–0.063 mm , 230-400 mesh, Merck, Kenilworth, NJ, USA).
  • 1 H- and 13 C-NMR spectra were recorded using JEOL-500 (JEOL, Tokyo, Japan) and AVANCE-500 (Brucker, Billerica, MA, USA) spectrometers, and 1 H- and 13 C-NMR chemical shifts is reported in parts per million (ppm) for TMS, and the residual solvent peak was used as an internal reference.
  • 1 H-NMR data are analyzed by chemical shift, multiplicity (br, broad signal; s, singlet; d, doublet; t, triplet; q, quartet; quint, quintet, m, multiplet, and/or multiple resonances. ), proton number, and coupling constant (Hz) were reported in that order.
  • the Chinese hamster ovary cell line (hereinafter referred to as CHO cell line) expressing integrins ⁇ IIb ⁇ 3 and A5 was provided by Dr. Mark Ginsberg (University of California, San Diego) and was supplemented with 10% FBS, 100 U/mL penicillin, 100 ⁇ g/mL streptomycin, It was maintained in DMEM (Dulbecco's modified Eagle's medium) medium supplemented with 2 mM L-glutamine and non-essential amino acids.
  • DMEM Dulbecco's modified Eagle's medium
  • 96-well plates were first coated with 5-10 ⁇ g/mL fibrinogen in phosphate-buffered saline (PBS) overnight at 4°C, followed by 2% BSA in PBS to prevent non-specific cell adhesion. Blocking was performed by additional incubation with bovine serum albumin at room temperature for 2 hours. Subconfluent cells were dissociated by trypsinization and the cell suspension was washed twice with DMEM.
  • PBS phosphate-buffered saline
  • GPIIb/IIIa glycoprotein IIb/IIIa (hereinafter referred to as GPIIb/IIIa) inhibition performance of the synthesized 1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole derivatives
  • human GP IIb/IIIa expressing A CHO cell line was used that was transfected with an activated form of talin (talin head domain (THD)) and a small amount of green fluorescent protein (GFP).
  • TFD talin head domain
  • GFP green fluorescent protein
  • the transfected cell line was removed from the culture dish, washed with culture medium (DMEM), and treated with 200 ⁇ M of each derivative and PAC1 antibody for 30 minutes. After washing, allophycocyanin-conjugated anti-IgM antibody was applied at 2 Staining was performed using secondary antibodies.
  • the stained cell lines were analyzed by flow cytometry, and the degree of PAC1 binding in cells expressing GFP, which was used as a transfection marker, was measured as Mean Fluorescence Intensity (MFI), and the inhibition rate of each derivative ( % inhibition) was calculated.
  • MFI Mean Fluorescence Intensity
  • Inhibition rate 100 - ⁇ (Compound treated sample MFI - Epitifibatide treated sample MFI) / (DMSO treated sample MFI - Epitifibatide treated sample MFI) ⁇ *100
  • the sample treated with eptifibatide is a positive control that can completely inhibit the binding of GP IIb/IIIa and PAC1, and the % inhibition value is set to 100%, and the sample treated with DMSO, a vehicle, inhibits PAC1 by talin.
  • the inhibition rate (% inhibition) value was set to 0%.
  • the blood coagulation profile, platelet activation marker expression, and leukocyte-platelet aggregation ability of 1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole (Compound 1) were measured using blood from normal people.
  • Compound 1 was treated with the blood of more than 8 patients per normal group at concentrations of 0, 50, and 200 ⁇ mol/L, and FACS (Flow cytometry) was performed using ADP and TRAP as activators.
  • the blood coagulation profile, platelet activation marker expression, and leukocyte-platelet aggregation ability by the existing antiplatelet drug Compound 1 were measured.
  • Platelet aggregation was measured using FACS in the blood of more than 7 patients per group who were taking existing antiplatelet drugs.
  • the proven effective concentration of 100 ⁇ mol/L, 7.5 ⁇ mol/L, a relatively lower concentration than the existing concentration was added to compare the effect of inhibiting platelet aggregation of low concentrations of effective/verified substances.
  • micro-aggregation generated by platelet aggregation is used as an analysis method that well reflects the reaction in the human body.
  • the change in absorbance was measured.
  • Platelet aggregation was induced by treating normal human blood with an activator, and the micro-aggregation inhibitory effect of Compound 1 over time was measured. Since the absorbance value by the number of micro-aggregates is quantified compared to before drug treatment (0 min), the larger the Y-axis value (percentage of decline over time) of the graph, the higher the micro-aggregation inhibition effect.
  • GPIIb/IIIa Activation of GPIIb/IIIa is essential for platelet aggregation, and activation of GPIIb/IIIa can be judged by its reactivity with an antibody called PAC1, which can selectively bind to activated GPIIb/IIIa, so this is an antiplatelet effect of the effective/verification material. It becomes an indicator that can measure effectiveness. Therefore, we sought to determine whether PAC1 binding by talin, the activation protein of GPIIb/IIIa, is inhibited by treatment with compounds 1 to 31 in a cell line expressing GPIIb/IIIa.
  • the synthesized 1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole derivative showed inhibitory activity on PAC1 binding, and DMSO was used as a negative control. Specifically, after expressing talin in a GPIIb/IIIa expression cell line, PAC1 binding occurred when 1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole (Compound 1) and its derivatives Compounds 2 to 31 were treated at different concentrations. The degree of inhibition was analyzed by flow cytometry ( Figures 1, 2a to 2f).
  • the x-axis represents the fluorescence intensity due to PAC1 binding
  • y represents the number of cells with the corresponding fluorescence intensity.
  • the peak shifted to the left, similar to the case of aptifibatide treatment compared to DMSO treatment (black).
  • platelet aggregation ability was measured by absorbance after treatment with the activator ADP or TRAP and Compound 1. As a result, it was confirmed that platelet aggregation was reduced by Compound 1 when ADP or TRAP was used as the activator. In particular, when TRAP was used as an activator, it was confirmed that platelet aggregation in normal subjects was significantly reduced when treated with 50 ⁇ mol/L of compound 1 (Figure 7A).
  • Thin-layer chromatography was performed using Merck silica gel 60 F254 plates (Merck, Kenilworth, NJ, USA), and flash chromatography was performed automatically using Isolera (Biotage, Uppsala, Sweden) or using Merck silica gel 60 (0.040–0.063 mm , 230-400 mesh, Merck, Kenilworth, NJ, USA).
  • 1 H- and 13 C-NMR spectra were recorded using JEOL-500 (JEOL, Tokyo, Japan) and AVANCE-500 (Brucker, Billerica, MA, USA) spectrometers, and 1 H- and 13 C-NMR chemical shifts is reported in parts per million (ppm) for TMS, and the residual solvent peak was used as an internal reference.
  • 1 H-NMR data are analyzed by chemical shift, multiplicity (br, broad signal; s, singlet; d, doublet; t, triplet; q, quartet; quint, quintet, m, multiplet, and/or multiple resonances. ), proton number, and coupling constant (Hz) were reported in that order.
  • the Chinese hamster ovary cell line (hereinafter referred to as CHO cell line) expressing integrin ⁇ IIb ⁇ 3 (GPIIb/IIIa), A5 was provided by Dr. Mark Ginsberg (University of California, San Diego) and was supplemented with 10% FBS, 100 U/mL penicillin, and 100 ⁇ g. /mL were maintained in DMEM (Dulbecco's modified Eagle's medium) supplemented with streptomycin, 2 mM L-glutamine, and non-essential amino acids.
  • DMEM Dulbecco's modified Eagle's medium
  • 96-well plates were first coated with 5-10 ⁇ g/mL fibrinogen in phosphate-buffered saline (PBS) overnight at 4°C, followed by 2% BSA in PBS to prevent non-specific cell adhesion. Blocking was performed by additional incubation with bovine serum albumin at room temperature for 2 hours. Subconfluent cells were dissociated by trypsinization and the cell suspension was washed twice with DMEM.
  • PBS phosphate-buffered saline
  • Glycoprotein of synthesized 5-amino-3-(1-cyano-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl)-1H-pyrazole-4-carbonitrile (Compound 32)
  • the activated form of talin talin head domain, THD
  • CHO cell line Chinese hamster ovary cell line
  • GPIIb/IIIa human GPIIb/IIIa
  • a cell line co-transfected with green fluorescent protein (GFP) was used. The transfected cell line was removed from the culture dish, washed with culture medium (DMEM), and then treated with compound 32 and PAC1 antibody at various concentrations for 30 minutes.
  • DMEM culture medium
  • anti-IgM antibody conjugated with allophycocyanin was used as a secondary antibody. Staining was performed using antibodies. The stained cell lines were analyzed by flow cytometry, and the degree of PAC1 binding in cells expressing GFP, which was used as a transfection marker, was measured as mean fluorescence intensity (MFI), and the concentration of compound 32 was calculated using the formula below. The inhibition rate (% inhibition) was calculated. Two or more independent experiments were performed on compound 32.
  • Inhibition rate 100 - ⁇ (Compound 32 treated sample MFI - Epitifibatide treated sample MFI) / (DMSO treated sample MFI - Epitifibatide treated sample MFI) ⁇ *100
  • the sample treated with eptifibatide is a positive control that can completely inhibit the binding of GPIIb/IIIa and PAC1, and the % inhibition value is 100%, and the sample treated with DMSO, a vehicle, shows PAC1 binding caused by talin.
  • the blood coagulation profile, platelet activation marker expression, and leukocyte-platelet aggregation ability of Compound 32 were measured by existing antiplatelet drugs.
  • Platelet aggregation was measured using FACS in the blood of more than 7 patients per group who were taking existing antiplatelet drugs.
  • concentration of 100 ⁇ mol/L the relatively low concentration of 7.5 ⁇ mol/L was added to compare the effect of low concentration effective/verified substances on platelet aggregation inhibition.
  • micro-aggregation generated by platelet aggregation is performed.
  • the change in absorbance was measured.
  • Platelet aggregation was induced by treating normal human blood with an activator, and the micro-aggregation inhibitory effect of Compound 32 over time was measured. Since the absorbance value by micro-aggregation number is quantified by comparing it to before drug treatment (0 min), the larger the Y-axis value (percentage of decline over time) of the graph, the higher the micro-aggregation inhibition effect.
  • GPIIb/IIIa Activation of GPIIb/IIIa is essential for platelet aggregation, and activation of GPIIb/IIIa can be judged by its reactivity with an antibody called PAC1, which can selectively bind to activated GPIIb/IIIa, so this is an antiplatelet effect of the effective/verification material. It becomes an indicator that can measure effectiveness. Therefore, we sought to determine whether PAC1 binding by talin, the activating protein of GPIIb/IIIa, is inhibited by treatment with compound 32 in a cell line expressing GPIIb/IIIa.
  • ACD buffer 85 mM sodium citrate , 65 ⁇ M sodium citrate, mM citric acid and 104 mM D-glucose, pH 4.4
  • the mixture was centrifuged at 200 g at room temperature and the supernatant (platelet-rich plasma, PRP) was treated with 1 U/ ⁇ L apyrase and 0.375 mM prostaglandin E1 and incubated for 10 minutes in the dark.
  • the PRP was then centrifuged at 700 g for 5 min at room temperature, and the pellet was resuspended in Walsh buffer (137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1 mM MgCl 2 , 3.3 mM NaH 2 PO 4 , and 20 mM HEPES, pH 7.4). was resuspended. Platelet suspensions were incubated on cover glasses coated with 10 ⁇ g/mL fibrinogen in the presence of agonist (ADP or thrombin), compound 32, and/or vehicle. Unbound platelets were washed with Walsh buffer, and bound platelets were fixed with 3.5% formaldehyde and stained with rhodamine-phalloidin for visualization.
  • Walsh buffer 137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1 mM MgCl 2 , 3.3 mM NaH 2 PO 4 , and 20 mM HEPES, pH 7.4
  • Walsh buffer 137 mM NaCl,
  • fluorescence and differential interference contrast images of stained platelets were obtained using an inverted fluorescence microscope equipped with a charge-coupled device camera and a 100x oil lens. Photographed using TI-E; Nikon, Tokyo, Japan. As a result of observation, it was confirmed that treatment with compound 32 effectively inhibited the platelet spreading effect induced by thrombin (FIG. 13).

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

본 발명은 신규 화합물 유도체 및 이의 약학적 용도에 관한 것으로, 구체적으로 항혈소판 활성을 가지는 신규한 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸(1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole) 유도체 또는 신규한 3-시티릴-1H-피라졸 유도체 및 이들의 약학적 용도에 관한 것이다. 본 발명에 따른 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸(1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole) 유도체 또는 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴은 당단백질(GP) IIb/IIIa의 활성화를 억제함으로써, 혈소판 응집을 저해할 수 있으므로, 혈전성 질환, 심혈관 질환의 예방, 개선 또는 치료 효과를 나타낼 수 있다.

Description

신규 화합물 유도체 및 이의 약학적 용도
본 발명은 신규 화합물 유도체 및 이의 약학적 용도에 관한 것으로, 구체적으로 항혈소판 활성을 가지는 신규한 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸(1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole) 유도체 또는 신규한 3-시티릴-1H-피라졸 유도체 및 이들의 약학적 용도에 관한 것이다.
혈소판 응집은 뇌졸중, 관상 동맥 심장 질환 및 폐 혈전 색전증과 같은 다양한 심혈관 질환의 주요 원인 중 하나로 알려져 있다.
최근 몇 년 동안 항혈소판 요법이 증가하였으나, 상당한 비율의 고위험 환자는 여전히 이를 받지 못하고 있는 것으로 파악된다. 급성 심근경색증의 비정형적 증상은 고령자에서 흔히 나타나며, 이로인한 진단의 불확실성 때문에 보통 고위험 환자에게는 처방되지 않는다.
항혈소판제는 그 기전에 따라 P2Y 12 길항제, 세로토닌 길항제, COX 억제제, PDE 억제제 및 당단백질(GP) IIb/IIIa 길항제로 분류된다. P2Y12 길항제는 혈소판 응집을 유도하는 ADP 물질이 수용체에 결합하여 작용하는 것을 방지하여 혈소판 응집을 억제하며, 이에 속하는 약물로는 2015년에 승인된 클로피도그렐(clopidogrel)과 칸그렐러(cangrelor)가 있다. 세로토닌 수용체 길항제는 혈소판 응집에 관여하는 세로토닌의 작용을 방해하는 물질을 말하며, COX 억제제는 혈소판 응집을 촉진하는 트롬복산 A2 생성에 관여하는 효소인 사이클로옥시게나제를 억제하여 혈전 생성을 억제하는 것으로 알려져 있다. 이에 속하는 아스피린은 저용량으로 장기간 사용할 경우 혈소판에서 트롬복산 A2의 형성을 비가역적으로 차단하여 혈소판 응집에 대한 억제 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다. PDE 억제제는 PDE3 효소에 의한 혈소판 활성을 억제하는 물질인 cAMP의 분해를 억제한다.
마지막으로 당단백질(GP) IIb/IIIa (또는 인테그린 αIIbβ3) 길항제는 혈소판 세포막의 GPIIb/IIIa 복합체, 즉 활성화된 GPIIb/IIIa에 대한 피브리노겐의 결합을 차단하여 혈소판 상호작용 및 혈전 형성을 억제하는 새로운 종류의 항혈전제로서, 이에 속하는 약물로는 2016년에 승인된 압식시맙(abciximab) 및 티로피반(tirofiban)이 있다. 여러 대규모 시험으로 GPIIb/IIIa 억제제의 급성 관상동맥 증후군 환자에 대한 치료 효과가 확인되었으며, 이에 따라 GPIIb/IIIa 억제제는 급성 관상동맥 증후군 치료 약물의 주류로 자리잡았다.
혈소판이 활성화되면 혈소판의 GPIIb/IIIa 형태가 바뀌고, 이는 피브리노겐의 결합을 수용하여 혈소판 응집 및 혈전 형성을 초래한다. 기존의 GPIIb/IIIa 억제제는 경쟁적인 방식으로 피브리노겐의 결합을 직접 방해하여 혈소판 응집을 억제하지만, 두개내출혈, 후복막출혈, 혈소판감소증 등의 부작용이 있는 것으로 알려져 있다. 따라서, 의료진과 환자에게는 미충족 의학적 요구가 존재하며, 효율적이지만 안전한 치료 옵션을 제공할 수 있는 작용방식을 가진 새로운 항혈소판제의 개발에 대한 필요성이 존재한다.
이러한 배경하에 새로운 항혈소판제 개발을 위한, 표적으로 탈린(talin)과 GPIIb/IIIa 간의 상호작용이 주목되었다. 탈린은 세포 골격 단백질로서, GPIIb/IIIa 활성화에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있으며, GPIIIa의 꼬리에 결합하는 것으로 알려져 있다. 여러 연구에서 인테그린-결합 탈린 헤드 도메인의 과발현에 의해 GPIIb/IIIa가 활성화됨을 확인하였는데, 이는 GPIIIa-탈린 복합체 형성이 활성화로 이어질 수 있음을 시사한다. GPIIIa 결합을 매개하는 탈린의 F3 도메인은 GPIIIa 꼬리의 막-말단(membrane-distal, MD) 부분에 결합하며, GPIIIa 꼬리의 막-근위(membrane-proximal, MP) 나선에도 독특한 방식으로 결합한다. GPIIb/IIIa의 비활성화 상태를 유지하는 GPIIb와 GPIIIa의 막도메인 (transmembrane domain)과 막 근위 부분의 상호작용은 MP 영역의 GPIIa의 돌연변이에 의해 중단되어 GPIIb/IIIa의 활성화를 야기하는바, 탈린-GPIIIa 상호작용은 GPIIb와 GPIIIa의 막도메인 및 막 근위 부분에서의 상호작용 저해를 통해 GPIIb/IIIa 활성화를 매개하는 것으로 보인다.
상기 기전을 바탕으로 항혈소판제로서 GPIIb/IIIa의 활성을 억제하는 저분자 화합물에 관한 연구들이 진행되고 있다.
본 발명자들은 신규한 생체동위원소(bioisosteric) 골격을 갖는 새로운 항혈소판제로서, 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸(1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole) 유도체 또는 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 등 신규한 화합물 유도체를 개발하고, 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 전술한 문제 및 이와 연관된 다른 문제를 해결하는 것을 목적으로 한다.
본 발명의 일 예시적 목적은 하기 화학식 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공하는 것이다:
[화학식 1]
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000001
상기 식에서,
X는 O, NR4, NR5CH2, NR6NR7,
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000002
,
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000003
,
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000004
또는
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000005
이고,
R1 내지 R3는 각각 수소, 할로겐, 아미노, 니트로, 시아노, 하이드록시, 티올, C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C3-6 사이클로알킬, C1-6 알콕시,　아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 헤테로원자로 연결된 C1-6 알킬, 헤테로원자로 연결된 헤테로아릴 또는 헤테로원자로 연결된 헤테로사이클릴이고,
R4 내지 R7는 각각 수소 또는 C1-C6 알킬이다.
본 발명의 다른 예시적 목적은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방, 개선 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방, 개선 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 사료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 사료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 개선을 위한 사료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 개선을 위한 사료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 개선을 위한 사료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 개선을 위한 사료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계;를 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계;를 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계;를 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계;를 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 심혈관 질환의 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 예시적 목적은 심혈관 질환의 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도를 제공하는 것이다.
본 명세서에 개시된 발명의 기술적 사상에 따라 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 문제점을 해결하기 위한 과제로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제는 아래의 기재로부터 통상의 기술자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 출원에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 출원에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 출원의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 출원의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
상기 목적을 달성하기 위한 일 양태로서, 본 발명은 하기 화학식 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다:
[화학식 1]
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000006
상기 식에서,
X는 O, NR4, NR5CH2, NR6NR7,
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000007
,
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000008
,
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000009
또는
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000010
이고,
R1 내지 R3는 각각 수소, 할로겐, 아미노, 니트로, 시아노, 하이드록시, 티올, C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C3-6 사이클로알킬, C1-6 알콕시,　아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 헤테로원자로 연결된 C1-6 알킬, 헤테로원자로 연결된 헤테로아릴 또는 헤테로원자로 연결된 헤테로사이클릴이고,
R4 내지 R7는 각각 수소 또는 C1-C6 알킬이다.
바람직하게 상기 R1 및 R2는 각각 수소, 메틸, 메톡시, 트리플루오로메틸(CF3), t-부틸(tert-butyl), 브로마이드(Bromide), 클로라이드(Chloride), 플루오라이드(Fluoride), 프로필메탄설폰아미드, 메틸모르폴린, 디메틸아민,
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000011
,
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000012
,
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000013
또는
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000014
이고, R3 및 R4는 각각 수소일 수 있다.
본 발명에서 용어 "할로(halo)" 또는 "할로겐"은 브로모(Br), 클로로(Cl), 플루오로(F) 또는 요오도(I)를 지칭하며, 치환체로서 바람직한 할로겐은 브로모, 클로로 또는 플루오로일 수 있다.
용어 "아미노"는 -NH2를 지칭한다.
용어 "니트로"는 -NO2를 지칭한다.
용어 "시아노"는 -CN을 지칭한다.
용어 "하이드록시"는 -OH 기를 지칭한다.
용어 "카복시"는 -C(O)OH를 지칭한다.
용어 "티올"은 -SH를 지칭한다.
용어 "C1-6 알킬"은 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는, 오직 탄소와 수소 원자로만 이루어진 1가 선형 또는 분지형 포화된 탄화수소 잔기를 의미한다. 이러한 알킬기의 예로는 메틸, 에틸, 프로필, 아이소프로필, 부틸, 아이소부틸, 2급-부틸, 3급-부틸(tert-butyl), 펜틸, n-헥실 등을 포함하나 이들로 한정되지 않는다. "분지형 알킬"의 예는 아이소프로필, 아이소부틸, 3급-부틸 등이 있다.
용어 "C1-6 할로알킬"은 하나 이상의 수소가 동일하거나 상이한 할로겐으로 치환 본원에서 정의된 바와 같은 C1-6 알킬을 의미한다. 예시적인 할로알킬은 -CH2Cl, -CH2CF3,-CH2CCl3, 퍼플루오로알킬 (예를 들어 -CF3)등을 포함한다.
용어 "사이클로알킬"은 포화 또는 부분 불포화 단환형 또는 다환형 탄화수소 치환기를 지칭한다. 사이클로알킬 고리는 3 내지 20개의 탄소 원자, 바람직하게는 3 내지 12개의 탄소 원자, 더욱 바람직하게는 3 내지 6개의 탄소 원자를 포함한다. 단환형 사이클로알킬의 비제한적인 예는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로펜텐일, 사이클로헥실, 사이클로헥센일, 사이클로헥사다이엔일, 사이클로헵틸, 사이클로헵타트라이엔일, 사이클로옥틸 등을 포함한다. 다환형 사이클로알킬은 스피로 고리, 융합 고리 또는 가교 고리를 갖는 사이클로알킬을 포함한다.
용어 "알콕시"는 -O-(알킬) 및 -O-(비치환된 사이클로알킬)를 지칭하고, 이때 알킬은 상기 정의된 바와 같다. 알콕시의 비제한적인 예는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시, 사이클로프로폭시, 사이클로부톡시, 사이클로펜틸옥시, 사이클로헥실옥시를 포함한다. 알콕시는 임의적으로 치환되거나 비치환될 수 있다. 치환된 경우, 치환기는 바람직하게는 알킬, 알켄일, 알킨일, 알콕시, 알킬티오, 알킬아미노, 할로겐, 티올, 하이드록시, 니트로, 시아노, 사이클로알킬, 헤테로사이클일, 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알콕실, 헤테로사이클로알콕실, 사이클로알킬티오, 헤테로사이클일티오, 카복시 및 카복실레이트로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기이다.
용어 "아릴"은 모노-, 바이- 또는 트라이사이클릭 방향족 고리로 이루어진 1가 사이클릭 방향족 탄화수소 잔기를 의미한다. 상기 아릴기는 본원에서 정의된 바와 같이 치환되거나 비치환될 수 있다. 일 구현예에서 아릴은 치환된 또는 비치환된 페닐, 또는 치환된 또는 비치환된 나프틸이다. 특히, 일 구현예에서 아릴은 치환된 또는 비치환된 페닐이다.
용어 "헤테로아릴"은 N, O 및 S 중에서 선택된 1, 2 또는 3개의 고리 헤테로원자를 함유하고 나머지 고리 원자가 C인 하나 이상의 방향족 고리를 갖는 5 내지 12개, 특히 6 내지 10개의 고리 원자의 모노사이클릭, 바이사이클릭 또는 트라이사이클릭 라디칼을 의미하며, 상기 헤테로아릴 라디칼의 부착 지점은 방향족 고리 상에 있을 것으로 이해된다. 상기 헤테로아릴은 N, O 및 S 중에서 선택된 1, 2 또는 3개의 고리 헤테로원자를 함유하고 나머지 고리 원자가 C인 5원 또는 6원의 모노사이클릭 고리일 수 있다. 상기 헤테로아릴 고리는 본원에서 정의된 바와 같이 치환되거나 비치환될 수 있다. 헤테로아릴 잔기의 예는 피롤릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사졸릴, 아이속사졸릴, 티아졸릴, 아이소티아졸릴, 옥사다이아졸릴, 티아다이아졸릴, 티에닐 (즉, 티오페닐), 퓨라닐, 피라닐, 피리디닐, 피리미디닐, 피라지닐, 피리다지닐, 퀴놀리닐, 아이소퀴놀리닐, 벤조퓨릴 (즉, 벤조퓨라닐), 벤조티오페닐, 벤조티오피라닐, 벤즈이미다졸릴, 벤즈옥사졸릴, 벤조옥사다이아졸릴, 벤조티아졸릴, 벤조티아다이아졸릴, 벤조피라닐, 인돌릴, 아이소인돌릴, 트라이아졸릴, 트라이아지닐, 퀴녹살리닐, 푸리닐, 퀴나졸리닐, 퀴놀리지닐, 나프티리디닐, 프테리디닐, 카바졸릴, 아제피닐, 다이아제피닐, 아크리디닐 등을 포함하나 이들로 한정되지 않으며, 이들은 각각 치환되거나 비치환될 수 있다. 바람직한 헤테로아릴은 피롤릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 인돌릴, 피리디닐, 피리미디닐, 피라지닐 및 피리다지닐을 포함하며, 이들은 각각 치환되거나 비치환될 수 있다.
용어 "헤테로사이클릴"은, 탄소 원자 이외에 N, O 및 S로부터 선택되는 1, 2 또는 3개의 고리 헤테로원자를 포함하는, 4 내지 9개의 고리 원자의 포화되거나 부분적으로 불포화된 카보사이클릭 고리를 나타낸다. 두 고리는 2개의 공통의 고리 원자를 갖는 2개의 고리로 구성됨을 의미하는데, 즉, 두 고리를 분리하는 다리는 단일 결합이거나 1 또는 2개의 고리 원자의 쇄이다. 상기 헤테로사이클릴 고리는 본원에서 정의된 바와 같이 치환되거나 비치환될 수 있다. 예를 들어, 헤테로사이클릴은 아제티디닐, 피롤리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 테트라하이드로-티에닐, 피라졸리디닐, 이미다졸리디닐, 옥사졸리디닐, 아이소옥사졸리디닐, 티아졸리디닐, 피페리디닐, 테트라하이드로피라닐, 테트라하이드로티오피라닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 1,1-다이옥소-티오모르폴린-4-일, 아제파닐, 다이아제파닐, 호모피페라지닐, 옥사제파닐, 다이하이드로인돌릴, 다이하이드로푸릴, 다이하이드로이미다졸리닐, 다이하이드로옥사졸릴, 테트라하이드로피리디닐, 다이하이드로피라닐 또는 벤조다이옥솔릴이다.
용어 "헤테로원자로 연결된 아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴"은, 헤테로원자인 O, S 또는 Se로 연결된 아릴기, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴을 의미한다. 일 구현예에서 상기 헤테로원자는 N 또는 S이다.
일 예시로, 상기 화학식 1의 화합물은 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸(1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole) 또는 이의 유도체일 수 있으며, 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸의 화학식 구조는 하기와 같다.
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000015
본 발명에 있어서, 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸(1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole) 유도체는 이와 동일한 효능을 갖는 범위 내에서 약학적 또는 식품학적으로 허용 가능한 염의 형태를 포함한다. 이러한 염은 약학적 또는 식품학적으로 허용 가능한 염으로, 염기성염 또는 산성염일 수 있으며, 염기성염은 유기 염기염, 무기 염기염 중 어느 하나의 형태로 사용할 수 있으며, 나트륨염, 칼륨염, 칼슘염, 리튬염, 마그네슘염, 세슘염, 아미늄(aminium)염, 암모늄염, 트리에칠아미늄염 및 피리디늄염으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
이러한 염의 종류로는, 산성염으로, 유리산(free acid)에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 유리산으로는 무기산과 유기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산, 브롬산, 황산, 아황산, 인산, 이중 인산, 질산 등을 사용할 수 있고, 유기산으로는 구연산, 초산, 말레산, 말산, 퓨마르산, 글루코산, 메탄설폰산, 벤젠설폰산, 캠퍼설폰산, 옥살산, 말론산, 글루타릭산, 아세트산, 글리콘산, 석신산, 타타르산, 4-톨루엔설폰산, 갈락투론산, 엠본산, 글루탐산, 시트르산, 아스파르탄산, 스테아르산 등을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않고 당업계에서 통상적으로 사용되는 다양한 무기산 및 유기산을 이용하여 형성되는 염이 모두 포함될 수 있다.
본 발명의 화학식 1 화합물인 신규 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸 및 이의 유도체의 구체적인 예는 다음과 같다:
(1) 3-(2,5-디메틸페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-(2,5-dimethylphenoxy)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(2) 3-(페닐아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-(phenylamino)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(3) 3-(벤질아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-(benzylamino)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(4) N-(4-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)옥시)페닐)-2-(티오펜-3-일)아세트아미드 (N-(4-((1,1-dioxidobenzo[d]isothiazol-3-yl)oxy)phenyl)-2-(thiophen-3-yl)acetamide);
(5) 5-클로로-N-(4-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)옥시)페닐)피라진-2-카르복사미드 (5-chloro-N-(4-((1,1-dioxidobenzo[d]isothiazol-3-yl)oxy)phenyl)pyrazine-2-carboxamide);
(6) 3-(3,5-비스(트리플루오로메틸)페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-(3,5-bis(trifluoromethyl)phenoxy) benzo[d] isothiazole 1,1-dioxide);
(7) 3-(2-(tert-부틸)페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-(2-(tert-butyl)phenoxy)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(8) 3-(3-(tert-부틸)페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-(3-(tert-butyl)phenoxy)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(9) 3-(3-브로모페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-(3-bromophenoxy)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(10) 3-(2,6-디브로모페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-(2,6-dibromophenoxy)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(11) 3-(4-(벤질옥시)페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-(4-(benzyloxy)phenoxy)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(12) 3-(4-클로로페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-(4-chlorophenoxy)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(13) 3-((4-메톡시벤질)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-((4-methoxybenzyl)amino)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(14) 3-((2-클로로벤질)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-((2-chlorobenzyl)amino)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(15) 3-((4-클로로벤질)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-((4-chlorobenzyl)amino)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(16) 3-((2-플루오로페닐)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-((2-fluorophenyl)amino)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(17) 3-((4-브로모벤질)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-((4-bromobenzyl)amino)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(18) 3-((4-플루오로페닐)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-((4-fluorophenyl)amino)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(19) 3-((3s,5s,7s)-아다만탄-1-일아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-((3s,5s,7s)-adamantan-1-ylamino)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(20) 4-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)아미노)-N-프로필벤젠술폰아미드 (4-((1,1-dioxidobenzo[d]isothiazol-3-yl)amino)-N-propylbenzenesulfonamide);
(21) 3-((2-모르폴리노페닐)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-((2-morpholinophenyl)amino)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(22) 5-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)아미노)-1,3-디메틸-1H-벤조[d]이미다졸-2(3H)-온 (5-((1,1-dioxidobenzo[d]isothiazol-3-yl)amino)-1,3-dimethyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one);
(23) (E)-3-(2-(2-히드록시벤질리덴)히드라지닐)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 ((E)-3-(2-(2-hydroxybenzylidene)hydrazinyl)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(24) (E)-3-(2-(4-메톡시벤질리덴)히드라지닐)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 ((E)-3-(2-(4-methoxybenzylidene)hydrazinyl)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(25) (E)-3-(2-(5-클로로-2-히드록시-3-메톡시벤질리덴)히드라지닐)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 ((E)-3-(2-(5-chloro-2-hydroxy-3-methoxybenzylidene)hydrazinyl)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(26) 3-(4-벤질피페라진-1-일)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (3-(4-benzylpiperazin-1-yl)benzo[d]isothiazole 1,1-dioxide);
(27) (E)-1-(4-(1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)피페라진-1-일)-3-페닐프로프-2-엔-1-온 ((E)-1-(4-(1,1-dioxidobenzo[d]isothiazol-3-yl)piperazin-1-yl)-3-phenylprop-2-en-1-one);
(28) (4-(1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)피페라진-1-일)(4-플루오로페닐)메탄온 ((4-(1,1-dioxidobenzo[d]isothiazol-3-yl)piperazin-1-yl)(4-fluorophenyl)methanone);
(29) (E)-3-(2-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)아미노)에틸)-5-(2-플루오로벤질리덴)티아졸리딘-2,4-디온 ((E)-3-(2-((1,1-dioxidobenzo[d]isothiazol-3-yl)amino)ethyl)-5-(2-fluorobenzylidene)thiazolidine-2,4-dione);
(30) (E)-3-(2-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)아미노)에틸)-5-(4-메톡시벤질리덴)티아졸리딘-2,4-디온 ((E)-3-(2-((1,1-dioxidobenzo[d]isothiazol-3-yl)amino)ethyl)-5-(4-methoxybenzylidene)thiazolidine-2,4-dione); 및
(31) (E)-5-(4-(디메틸아미노)벤질리덴)-3-(2-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)아미노)에틸)티아졸리딘-2,4-디온 ((E)-5-(4-(dimethylamino)benzylidene)-3-(2-((1,1-dioxidobenzo[d]isothiazol-3-yl)amino)ethyl)thiazolidine-2,4-dione).
본 발명의 신규한 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸 유도체는 다음의 과정을 통해 합성될 수 있다.
[반응식 1]
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000016
[반응식 2]
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000017
즉, 반응식 1을 통해 중간체 1인 3-클로로벤즈이미드-1,1-디옥사이드(3-Chlorobenzimide-1,1-dioxide)와 HO-R1을 톨루엔에서 반응시켜 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸(1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole) 유도체를 합성할 수 있다.
여기서 R1은 수소, 할로겐, 아미노, 니트로, 시아노, 하이드록시, 티올, C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C3-6 사이클로알킬, C1-6 알콕시,　아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 헤테로원자로 연결된 C1-6 알킬, 헤테로원자로 연결된 아릴(헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴) 또는 치환되거나 치환되지 않은 벤젠고리, 이다.
또한, 반응식 2를 통해 중간체 1인 3-클로로벤즈이미드-1,1-디옥사이드(3-Chlorobenzimide-1,1-dioxide)와 H2N-R2을 1,4-Dioxane 또는 THF에서 반응시켜 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸(1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole) 유도체를 합성할 수 있다.
여기서 R2은 수소, 할로겐, 아미노, 니트로, 시아노, 하이드록시, 티올, C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C3-6 사이클로알킬, C1-6 알콕시,　아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 헤테로원자로 연결된 C1-6 알킬, 또는 헤테로원자로 연결된 아릴(헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴), 아다만테인(adamantane), 치환되거나 치환되지 않은 톨루엔, 치환되거나 치환되지 않은 벤젠고리, 치환되거나 치환되지 않은 벤조이미다졸,
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000018
,
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000019
,
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000020
,
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000021
,
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000022
또는
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000023
이다.
상기 목적을 달성하기 위한 다른 양태로서, 본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 다른 양태로서, 본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 다른 양태로서, 본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방, 개선 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
화학식 1의 1, 1-디옥소-1, 2-벤즈이소티아졸 유도체는 전술한 바와 같다.
상기 목적을 달성하기 위한 다른 양태로서, 본 발명은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 다른 양태로서, 본 발명은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는혈전성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 다른 양태로서, 본 발명은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방, 개선 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 있어서, 상기 "혈전성 질환"은 동맥혈전증, 정맥혈전증, 관상동맥혈전증, 심부정맥혈전증, 뇌동맥혈전증, 말초혈관혈전증, 동맥색전증, 정맥색전증, 신장색전증, 만성동맥폐색증, 폐경색, 뇌경색, 뇌출혈, 뇌색전증, 혈전성 정맥염, 및 심부전증 등 각종 혈전증 및 이로부터 초래된 질환을 포함하며, 여기서, "혈전증"은 혈관에 혈전이 형성되어 순환계를 통한 혈액의 흐름을 저해시키는 것을 의미한다.
본 발명에 있어서, “심혈관 질환”은 고혈압, 허혈성 심장질환, 관상동맥질환, 협심증, 심근경색증, 동맥경화증, 뇌혈관질환, 부정맥 등을 포함하며, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, "예방"은 본 발명 조성물의 투여로 심혈관 질환의 증상을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하며, 본 발명에서 "개선"은 본 발명의 조성물을 적용하여 심혈관 질환의 증상을 완화시키는 효과를 나타내는 것을 의미한다. 본 발명에서 "치료"는 본 발명의 조성물의 투여로 심혈관 질환의 증상이 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 약학조성물은 일 예로, 혈소판 당단백질 IIb/IIIa를 표적으로 하여 이의 활성화를 저해함으로써, 혈소판 응집 억제를 통해 혈전성 질환 또는 심혈관 질환의 예방, 개선 또는 치료 효능을 가지고 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 더 포함할 수 있다. 약학적으로 허용되는 담체로 예컨대, 경구 투여용 담체 또는 비경구 투여용 담체를 추가로 포함할 수 있다. 경구 투여용 담체는 락토스, 전분, 셀룰로스 유도체, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 등을 포함할 수 있다.
또한 비경구 투여용 담체는 물, 적합한 오일, 식염수, 수성 글루코스 및 글리콜 등을 포함할 수 있다. 또한, 안정화제 및 보존제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 안정화제로는 아황산수소나트륨, 아황산나트륨 또는 아스코르브산과 같은 항산화제가 있다. 적합한 보존제로는 벤즈알코늄 클로라이드, 메틸- 또는 프로필-파라벤 및 클로로부탄올이 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 인간을 비롯한 포유동물에 임의의 방법으로 투여할 수 있다. 예를 들어, 경구 또는 비경구로 투여할 수 있으며, 비경구적인 투여방법으로는 이에 제한되는 것은 아니나, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골수내, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장내 투여일 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 상술한 바와 같은 투여 경로에 따라 경구 투여용 또는 비경구 투여용 제제로 제형화할 수 있다. 제형화할 경우에는 하나 이상의 완충제(예를 들어, 식염수 또는 PBS (phosphate buffered saline)), 항산화제, 정균제, 킬레이트화제(예를 들어, EDTA 또는 글루타치온), 충진제, 증량제, 결합제, 아쥬반트(예를 들어, 알루미늄 하이드록사이드), 현탁제, 농후제, 습윤제, 붕해제 또는 계면활성제, 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 액제, 겔제, 시럽제, 슬러리제, 현탁액 또는 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 약학적 조성물과 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분(옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분, 감자 전분 등 포함), 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose), 락토오스(lactose), 덱스트로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨 말티톨, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오즈 및 하이드록시프로필메틸-셀룰로즈 또는 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 예컨대, 활성성분을 고체 부형제와 배합한 다음 이를 분쇄하고 적합한 보조제를 첨가한 후 과립 혼합물로 가공함으로써 정제 또는 당의정제를 수득할 수 있다.
단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크(Talc) 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물 또는 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면, 습윤제, 감미제, 방향제 또는 보존제 등이 포함될 수 있다. 또한, 경우에 따라 가교결합 폴리비닐피롤리돈, 한천, 알긴산 또는 나트륨 알기네이트 등을 붕해제로 첨가할 수 있으며, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.
비경구적으로 투여하는 경우 본 발명의 약학적 조성물은 적합한 비경구용 담체와 함께 주사제, 경피 투여제 및 비강 흡입제의 형태로 당업계에 공지된 방법에 따라 제형화될 수 있다. 상기 주사제의 경우에는 반드시 멸균되어야 하며 박테리아 및 진균과 같은 미생물의 오염으로부터 보호되어야 한다. 주사제의 경우 적합한 담체의 예로는 이에 한정되지는 않으나, 물, 에탄올, 폴리올(예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등), 이들의 혼합물 및/또는 식물유를 포함하는 용매 또는 분산매질일 수 있다. 보다 바람직하게는, 적합한 담체로는 행크스 용액, 링거 용액, 트리에탄올 아민이 함유된 PBS 또는 주사용 멸균수, 10 % 에탄올, 40 % 프로필렌 글리콜 및 5 % 덱스트로즈와 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있다. 상기 주사제를 미생물 오염으로부터 보호하기 위해서는 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르빈산, 티메로살 등과 같은 다양한 항균제 및 항진균제를 추가로 포함할 수 있다. 또한, 상기 주사제는 대부분의 경우 당 또는 나트륨 클로라이드와 같은 등장화제를 추가로 포함할 수 있다.
경피 투여제의 경우 연고제, 크림제, 로션제, 겔제, 외용액제, 파스타제, 리니멘트제, 에어롤제 등의 형태가 포함된다. 여기에서 '경피 투여'는 약학적 조성물을 국소적으로 피부에 투여하여 약학적 조성물에 함유된 유효한 양의 활성성분이 피부 내로 전달되는 것을 의미한다.
흡입 투여제의 경우, 본 발명에 따라 사용되는 조성물은 적합한 추진제, 예를 들면, 디클로로플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 또는 다른 적합한 기체를 사용하여, 가압 팩 또는 연무기로부터 에어로졸 스프레이 형태로 편리하게 전달할 수 있다. 가압 에어로졸의 경우, 투약 단위는 계량된 양을 전달하는 밸브를 제공하여 결정할 수 있다. 예를 들면, 흡입기 또는 취입기에 사용되는 젤라틴 캡슐 및 카트리지는 화합물, 및 락토즈 또는 전분과 같은 적합한 분말 기제의 분말 혼합물을 함유하도록 제형화할 수 있다. 비경구 투여용 제형은 모든 제약 화학에 일반적으로 공지된 처방서인 문헌(Remington's Pharmaceutical Science, 15th Edition, 1975 Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania 18042, Chapter 87: Blaug, Seymour)에 기재되어 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 또는 생물학적 반응조절제를 사용하는 방법들과 병행하여 사용될 수 있다.
이러한 본 발명의 조성물은, 이에 제한되는 것은 아니나, 약학적 조성물, 의약외품 조성물, 식품(식품 첨가제 포함) 조성물, 사료(사료 첨가제) 조성물 등의 외용형태의 다양한 조성물의 형태로 구현될 수 있다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 의약외품 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방, 개선 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 의약외품 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방, 개선 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것 및 사람이나 동물의 구조와 기능에 약리학적 영향을 줄 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것을 제외한 물품을 의미하며, 일 구체예로 내복용 제제를 포함할 수 있으나 이에 제한되는 것이 아니며, 의약외품의 제제화 방법, 용량, 이용방법, 구성성분 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있다.
본 발명의 의약외품 조성물에는 상기 성분 외에 필요에 따라 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더욱 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제는 본 발명의 효과를 해하지 않는 한 제한되지 않으며, 예를 들어 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제, 윤활제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 포함할 수 있다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 또한, 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 식품 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 또한, 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 또한, 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 또한, 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 식품 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 또한, 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 또한, 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 식품 조성물은 건강기능식품을 포함한 기능성 식품(functional food), 영양 보조제(nutritional supplement), 건강식품(health food), 식품 첨가제(food additives), 및 사료 등의 모든 형태를 포함하며, 인간 또는 가축을 비롯한 동물을 취식대상으로 한다. 상기 유형의 식품 조성물은 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다.
상기 유형의 식품 조성물은 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다. 일반 식품으로는 이에 한정되지 않지만 음료(알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(과일통조림, 병조림, 잼, 마아말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(햄, 소시지 콘비이프 등), 빵류 및 면류(우동, 메밀국수, 라면, 스파게이트, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(버터, 치즈 등), 식용식물 유지, 마가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(된장, 간장, 소스 등) 등에 상기 유효성분을 첨가하여 제조할 수 있다.
또한, 영양보조제로는 캡슐, 정제, 환 등에 상기 유효성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 건강기능식품으로는 이에 한정되지 않지만 예를 들면, 차, 주스 및 드링크의 형태로 제조하여 건강음료로 음용할 수 있도록 액상화, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한, 상기 알릴 이소티오시아네이트를 식품 첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다. 또한, 혈소판 응집 억제, 혈전성 질환 또는 심혈관 질환에 효과가 있다고 알려진 공지의 활성 성분과 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다.
상기 외에 본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산, 펙트산의 염, 알긴산, 알긴산의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 또는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 사료 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 개선을 위한 사료 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 개선을 위한 사료 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 사료 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 개선을 위한 사료 조성물을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 개선을 위한 사료 조성물을 제공한다.
본 발명에 있어서, 상기 사료 조성물은, 통상의 사료 형태로 제제화될 수 있고, 알려진 사료성분을 함께 포함할 수 있다. 또한, 사용되는 사료에 첨가제 형태로 가미되는, 사료첨가제로서도 사용될 수 있다. 본 발명의 사료첨가제는 사료관리법상의 보조사료에 해당하며, 탄산수소나트륨(중조), 벤토나이트 (bentonite), 산화마그네슘, 복합광물질 등의 광물질제제, 아연, 구리, 코발트, 셀레늄 등의 미량 광물질인 미네랄제제, 케로틴, 비타민 E, 비타민 A, D, E, 니코틴산, 비타민 B 복합체 등의 비타민제, 메티오닌, 리이산 등의 보호아미노산제, 지방산 칼슘염 등의 보호지방산제, 생균제(유산균제), 효모배양물, 곰팡이 발효물 등의 생균, 효모제 등이 추가로 포함될 수 있다.
본 발명의 사료 또는 사료첨가제는 포유류, 가금 및 어류를 포함하는 다수의 동물식이에 적용할 수 있다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계;를 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계;를 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계;를 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계;를 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
본 발명에 있어서, 상기 개체는 혈전성 질환 또는 심혈관 질환이 발병될 수 있는 인간을 포함한 쥐, 생쥐, 가축 등의 모든 생물을 의미한다. 구체적인 예로, 인간을 포함한 포유동물일 수 있다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도를 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도를 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 심혈관 질환의 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도를 제공한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 심혈관 질환의 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도를 제공한다.
본 발명에 따른 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸(1,1-dioxo-1,2-benzisothiazole) 유도체 또는 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴은 당단백질(GP) IIb/IIIa의 활성화를 억제함으로써, 혈소판 응집을 저해할 수 있으므로, 혈전성 질환, 심혈관 질환의 예방, 개선 또는 치료 효과를 나타낼 수 있다.
도 1은 당단백질 IIb/IIIa을 발현하는 세포주에 탈린을 과발현 시킨 후, 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸(화합물 1)에 따른 PAC1 결합 억제효과를 확인한 유세포 분석 결과이다.
도 2a 내지 도 2f는 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸의 유도체(화합물 2 내지 31)에 대한 PAC1 결합 억제효과를 확인한 유세포 분석 결과이다.
도 3은 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸 유도체 처리에 따른 PAC1 결합 억제 효과를 화합물1의 유도체 처리에 따른 mGFP 접합된 탈린(mGFP-THD)에 의해 유도된 인테그린 활성화 정도로 확인한 결과이다.
도 4a는 GFP만을 발현하는 세포와 GFP-탈린을 발현하는 세포에 각각 DMSO, 엡티피바타이드 또는 MnCl2를 처리하여 PAC1 결합 정도를 확인한 결과이다.
도 4b는 GFP-탈린을 발현하는 세포에 PAC1의 결합을 유의하게 억제하는 화합물 7, 8, 11, 27 및 29을 각각 처리하고, 유세포 분석을 수행한 결과이다.
도 5는 PAC1 결합 억제 효과를 나타내는 화합물에 대한 탈린 과발현 및 엡티피바타이드를 처리한 대조군 대비 PAC1 결합 억제 효과를 나타내는 화합물의 억제 효과를 나타낸 결과이다.
도 6은 정상인 혈액 샘플에 활성화제인 ADP 또는 TRAP과 함께 화합물 1을 처리한 후, PAC1 또는 p-selectin을 FACS로 확인하여 혈소판 응집력을 확인한 결과이다.
도 7은 정상인 또는 기존 항혈소판제 복용 환자의 혈액을 이용하여 ADP 또는 TRAP을 활성화제로 사용하고, 화합물 1을 처리한 후 흡광도를 측정하여 혈소판 응집력을 측정한 결과이다.
도 8은 아스피린 또는 클로피도그렐을 복용한 심혈관질환 환자 혈액 샘플에 ADP 또는 TRAP을 활성화제로 사용하고, 화합물 1을 처리한 후 PAC1을 FACS로 확인하여 혈소판 응집력을 확인한 결과이다.
도 9는 정상인 혈액 샘플에서 ADP 또는 TRAP을 활성화제로 사용하고, 화합물 1을 농도별로 처리하여 마이크로-응집에 의한 흡광도 변화를 측정한 결과이다.
도 10은 GPIIb/IIIa을 발현하는 세포주에 탈린을 과발현 시킨 후, 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 (화합물 32)에 따른 PAC1 결합/integrin aIIbb3 활성화 저해 효과를 확인한 유세포 분석 결과이다.
도 11은 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 (화합물 32)의 PAC1 결합 및 GPIIb/IIIa 활성화 저해 효과를 정량적으로 확인한 결과이다.
도 12는 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 (화합물 32)의 농도별 처리에 따른 PAC1 결합 및 GPIIb/IIIa 활성화 저해 효과를 탈린(THD)을 과발현시킨 경우를 음성 대조군(기준값 100%)으로 설정하고, 엡티피바타이드를 처리한 경우를 양성 대조군(PAC1 결합 억제, 기준값 0%,)로 설정하여, 정량적으로 확인한 결과이다.
도 13은 화합물 32의 트롬빈-의존적 혈소판 퍼짐(spreading) 저해 효과를 혈소판 actin 염색을 통해 세포형광면역염색으로 확인한 결과이다.
도 14는 아스피린 또는 클로피도그렐을 복용한 심혈관질환 환자 혈액 샘플에 ADP 또는 TRAP을 활성화제로 사용하고, 화합물 32를 처리한 후 PAC1을 FACS로 확인하여 혈소판 응집력을 확인한 결과이다.
도 15는 정상인 혈액 샘플에서 ADP를 활성화제로 사용하고, 화합물 32를 농도별로 처리하여 마이크로-응집에 의한 흡광도 변화를 측정한 결과이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명의 구성 및 효과를 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이에 의해 한정되는 것은 아니다.
Ⅰ. 본 발명의 신규한 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸 유도체 합성을 위한 중간체 제조
분석방법
박막 크로마토그래피는 Merck 실리카겔 60 F254 플레이트(Merck, Kenilworth, NJ, USA)를 사용하여 수행했으며, 플래시 크로마토그래피는 Isolera(Biotage, Uppsala, Sweden)를 사용하여 자동으로 또는 Merck 실리카겔 60(0.040-0.063 mm, 230-400 메쉬, Merck, Kenilworth, NJ, USA)을 사용하여 수동으로 수행했다. 1H- 및 13C-NMR 스펙트럼은 JEOL-500(JEOL, Tokyo, Japan) 및 AVANCE-500(Brucker, Billerica, MA, USA) 분광계를 사용하여 기록되었고, 1H- 및 13C-NMR 화학적 이동은 TMS에 대한 백만분율(ppm) 단위로 보고되며, 잔류 용매 피크는 내부 기준으로 사용되었다. 1H-NMR 데이터는 화학적 이동, 다중도(br, 광범위 신호; s, 단일선; d, 이중선; t, 삼중선; q, 사중선; quint, 오중선, m, 다중선 및/또는 다중 공명), 양성자 수 및 커플링 상수(Hz) 순서로 보고되었다.
중간체 1: 3-클로로벤즈이미드-1,1-디옥사이드 (3-Chlorobenzimide-1,1-dioxide)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000024
시판되는 o-설포벤즈이미드(o-Sulfobenzimide)(2.55 g, 13.92 mmol)에 포스포러스 펜타클로라이드(Phosphorus pentachloride)(3.5 g, 16.81 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 끓는 온도에서 2시간 동안 교반하면서 환류시킨 후, 반응 혼합물을 디에틸 에테르(20 mL)에 적가하였다. 디에틸 에테르 결정체를 여과하였으며, 이 결정체는 3-클로로벤즈이미드-1,1-디옥사이드로 백색 고체로 제공되었다(591 mg, 21%): 1H NMR(500 MHz, CDCl3) δ 7.94-7.81(m, 4 H).
중간체 2: 5-클로로-N-(4-하이드록시페닐)피라진-2-카르복사미드 (5-chloro-N-(4-hydroxyphenyl)pyrazine-2-carboxamide)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000025
디클로로메탄 내 5-클로로피라진-2-카복실산(100 mg, 0.63 mmol), 4-아미노페놀(82.5 mg, 0.76 mmol) 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드(127 mg, 0.82 mmol)의 용액에 HOBt(110 mg, 0.82 mmol) 및 트리에틸아민(0.03 ml, 1.89 mmol)을 실온에서 1시간 동안 첨가하였으며, 반응 시간 후 휘발성 물질을 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트, 1:2)로 정제하여 5-클로로-N-(4-하이드록시페닐)피라진-2-카르복사미드(14 mg, 9%)를 수득하였다: 1H NMR (MeOD, 500 MHz) δ 9.11 (d, J= 1.35 Hz, 1 H), 8.76 (d, J= 1.35 Hz, 1 H), 7.55 (d, J=8.95 Hz, 2 H), 6.80 (d, J= 8.95 Hz, 2 H).
실시예 1: 3-(2,5-디메틸페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 1)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000026
톨루엔 내 3-클로로벤즈이미드-1,1-디옥사이드(중간체 1, 50 mg, 0.248 mmol)의 용액에 2,5-디메틸페놀(30.3 mg, 0.248 mmol) 및 Et3N(0.03 mL, 0.248 mmol)을 실온에서 연속적으로 첨가하였다. 동일한 온도에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 물로 급랭하고 EtOAc로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성 층은 EtOAc로 추출하였으며, 합쳐진 유기 층은 무수 MgSO4로 건조시키고, 여과하여, 진공에서 농축시켰다. 잔류물(residue)을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트, 4:1)로 정제하여 3-(2,5-디메틸페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드를 백색 고체(56 mg, 79%)로 제조하였다: 1H NMR(CDCl3, 500 MHz) δ 7.95-7.85(m, 2 H), 7.84-7.78(m, 2 H), 7.19(d, J=7.5 Hz, 1 H). 7.10-7.07(m, 2 H), 2.37(s, 3 H), 2.23(s, 3 H) 13C NMR(CDCl3, 125 MHz) δ 168.7, 150.6, 144.1, 137.7, 134.6, 133.8, 131.5, 128.3, 126.7, 126.1, 123.7, 122.3, 121.4, 21.1, 15.9 LR-ESI-MS m/z 288.07 [M+H]+.
실시예 2: 3-(페닐아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 2)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000027
1,4-디옥산 내 3-클로로벤즈이미드-1,1-디옥사이드(중간체 1, 60 mg, 0.30 mmol)의 용액에 아닐린(0.03 ml, 0.30 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 끓는 온도에서 24시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 물로 급랭하였다. 결정을 여과하고 진공에서 농축한 후, 잔류물을 3-(페닐아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드(화합물 2)를 백색 고체로서 수득하였다(47.2 mg, 60%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz)δ 10.88 (s, 1 H), 8.48 (d, J =7.4 Hz, 1 H), 8.07 (d, J =7 Hz, 1 H), 7.93-7.87(m, 4 H), 7.49 (t, J =7.55 Hz, 2 H), 7.27 (t, J =7.35,1 H) 13C NMR (DMSO, 125 MHz) δ 156.8, 140.8, 137.5, 133.8, 133.4, 129.1, 128.3, 125.7, 123.6, 122.1, 121.5 LR-ESI-MS m/z 281 [M+Na]+.
실시예 3: 3-(벤질아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 3)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000028
테트라히드로푸란 내 3-클로로벤즈이미드-1,1-디옥사이드(중간체 1, 100 mg, 0.55 mmol)의 용액에 벤질 아민(0.06 ml, 0.55 mmol)을 비등 온도에서 2.5시간 동안 첨가하였다. 반응 혼합물을 물로 급랭하고, 휘발성 물질을 감압하에 제거하였다. 혼합물을 에탄올로부터 재결정화하였으며, 잔류물을 3-(벤질아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드(화합물 3)를 백색 고체로서 수득하였다(58 mg, 38%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ9.95 (t, J =5.7 Hz, 1 H), 8.24-8.22 (m, 1 H), 8.00-7.99 (m, 1 H), 7.85-7.82 (m, 2 H), 7.41-7.37 (m, 4 H), 7.33-7.30 (m, 1 H), 4.70 (d, J=4.9 Hz, 2 H) 13C NMR (DMSO, 125 MHz) δ129.5, 142.3, 137.2, 133.6, 133.2, 128.6, 127.8, 127.6, 127.5, 123.1, 121.3, 46.0 LR-ESI-MS m/z 295 [M+Na]+.
실시예 4: N-(4-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)옥시)페닐)-2-(티오펜-3-일)아세트아미드 (화합물 4)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000029
톨루엔 내 3-클로로벤즈이미드-1,1-디옥사이드(중간체 1, 29.3 mg, 0.16 mmol)의 용액에 N-(4-하이드록시페닐)-2-(티오펜-3-일)아세트아미드(35 mg, 0.16 mmol) 및 트리메틸아민(0.02 ml, 0.16 mmol)을 실온에서 2시간 동안 첨가하였다. 반응 혼합물을 물로 급랭하고 EtOAc로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성 층은 EtOAc로 추출하였으며, 합쳐진 유기 층은 무수 MgSO4로 건조시키고, 여과하여, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 디클로로메탄/메탄올, 29:1)로 정제하여 N-(4-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)옥시)페닐)-2-(티오펜-3-일)아세트아미드(화합물 4)를 황색 고체로서 수득하였다(29.4 mg, 46%): 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ 7.93 (q, J=5.9 Hz, 2 H), 7.84-7.77 (m, 2 H), 7.55 (d, J =9 Hz, 2 H), 7.43-7.42 (m, 1 H), 7.30 (d, J=9 Hz, 2 H), 7.23 (s, 1 H), 7.09 (q, J=3.8 Hz, 1.15 Hz, 1 H), 3.80 (s, 2 H) 13C NMR (CDCl3, 125 MHz) δ169.0, 138.8, 148.2 143.8, 136.7, 134.6, 134.3, 133.8, 128.5, 127.6, 126.8, 124.2, 123.8, 122.3, 121.4, 121.1, 39.3 LR-ESI-MS m/z 421 [M+Na]+.
실시예 5: 5-클로로-N-(4-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)옥시)페닐)피라진-2-카르복사미드 (화합물 5)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000030
톨루엔 내 3-클로로벤즈이미드-1,1-디옥사이드(중간체 1, 12 mg, 0.07 mmol)의 용액에 5-클로로-N-(4-하이드록시페닐)피라진-2-카르복사미드(중간체 2, 14 mg, 0.06 mmol) 및 트리메틸아민(0.01 ml, 0.06 mmol)을 실온에서 2시간 동안 첨가하였으며, 반응 시간 후 휘발성 물질을 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트, 2:1)로 정제하여 1i를 황색 고체로서 수득하였다(10 mg, 40%): 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ 9.60(s, 1 H), 9.29(s, 1 H), 8.61(s, 1 H), 7.97-7.88(m, 2 H), 7.87-7.79(m, 4 H), 7.44(d, J =9 Hz, 2 H) 13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ168.9, 160.1, 152.8, 148.5, 144.5, 143.8, 142.6, 142.4, 136.1, 134.7, 133.8, 126.8, 123.8, 122.4, 121.8, 121.2, 31.1 LR-ESI-MS m/z 437 [M+Na]+.
하기 실시예 6 내지 31의 화합물은 화학식 1의 유도체로서 상기 전술한 방법으로부터 합성되었으며, 각 화합물의 특성은 하기와 같다.
실시예 6: 3-(3,5-비스(트리플루오로메틸)페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 6)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000031
백색 고체(14.8 mg, 18%): 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ 7.98-7.82 (m, 7 H) 13C NMR (CDCl3, 125 MHz) δ168.3, 152.0, 143.8, 135.2, 134.1, 133.9, 133.7, 125.9, 123.7, 122.7, 122.2, 121.5, 121.5 LR-ESI-MS m/z 394 [M-H]-.
실시예 7: 3-(2-(tert-부틸)페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 7)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000032
백색 고체(44.1 mg, 28%): 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ 7.97-7.95 (m, 2 H), 7.87-7.80 (m, 2 H), 7.49-7.48 (m, 1 H), 7.33-7.32 (m, 2 H), 7.30-7.27 (m, 1 H), 1.40 (s, 9 H) 13C NMR (CDCl3, 125 MHz) δ 169.1, 150.8, 144.2, 140.8, 134.6, 133.9, 127.9, 127.6, 127.4, 127.0, 123.7, 123.2, 122.4, 34.8, 30.6 HR-FAB-MS m/z 316.1005 [M+H]+ (C17H18NO3S는 316.1007로 계산됨).
실시예 8: 3-(3-(tert-부틸)페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 8)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000033
백색 액체 (145.6 mg, 93%): 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ 7.96-7.93 (m, 2 H), 7.84-7.77 (m, 2 H), 7.42-7.36 (m, 2 H), 7.323-7.315 (m, 1 H), 7.21-7.19 (m, 1 H), 1.35 (s, 9 H) 13C NMR (CDCl3, 125 MHz) δ 168.9, 154.0, 152.0, 143.8, 134.5, 133.7, 129.5, 127.1, 124.4, 123.8, 122.3, 117.9, 117.8, 35.1, 31.4 HR-FAB-MS m/z 316.1005 [M+H]+ (C17H18NO3S는 316.1007로 계산됨).
실시예 9: 3-(3-브로모페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 9)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000034
백색 고체(93.5 mg, 56%): 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ 7.95-7.92 (m, 2 H) 7.86-7.79 (m, 2 H), 7.57 (s, 1 H), 7.51-7.50 (m, 1 H), 7.36-7.35(m, 2 H) 13C NMR (CDCl3, 125 MHz) δ 168.6, 152.2, 143.8, 134.8, 133.9, 131.1, 130.7, 136.5, 124.5, 123.7, 123.0, 122.4, 120.0 LR-ESI-MS m/z 335 [M-H]-.
실시예 10: 3-(2,6-디브로모페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 10)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000035
백색 고체 (96.9 mg, 47%): 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ 8.00-7.92 (m, 2 H), 7.86-7.79 (m, 2 H), 7.63-7.61 (m, 2 H), 7.13-7.10 (m, 1 H) 13C NMR (CDCl3, 125 MHz) δ 167.6, 144.4, 134.9, 134.0, 133.1, 129.6, 125.7, 123.9, 122.5, 116.8 LR-ESI-MS m/z 438 [M+Na]+.
실시예 11: 3-(4-(벤질옥시)페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 11)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000036
황색 고체 (70.8 mg, 39%): 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ 7.94-7.93 (m, 2 H) 7.84-7.77 (m, 2 H), 7.45-7.33 (m, 5 H), 7.30-7.03 (m, 4 H), 5.10 (s, 2 H) 13C NMR (CDCl3, 125 MHz) δ 169.2, 157.6, 145.7, 143.8, 136.6, 134.5, 133.7, 128.8, 128.3, 127.7, 127.0, 123.8, 122.3, 121.8, 115.9, 70.7 LR-ESI-MS m/z 388 [M+Na]+.
실시예 12: 3-(4-클로로페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 12)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000037
백색 고체 (117.6 mg, 81%): 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ 7.95-7.93 (m, 2 H) 7.86-7.78 (m, 2 H), 7.46-7.33 (m, 4 H) 13C NMR (CDCl3, 125 MHz) δ 168.7, 150.4, 143.8, 134.7, 133.9, 133.0, 130.1, 126.6, 123.8, 122.4, 122.4 LR-ESI-MS m/z 298 [M-H]-.
실시예 13: 3-((4-메톡시벤질)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 13)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000038
주황색 고체 (82.1 mg, 55%): 1H NMR (MeOD, 500 MHz) δ 8.02 (d, J=5 Hz, 1 H), 7.91- 7.90 (m, 1 H), 7.83-7.75 (m, 2 H), 7.36 (d, J=8.75 Hz, 2 H), 6.72 (d, J=8.75 Hz, 2 H), 4.69 (s, 2 H), 3.78 (s, 3 H) 13C NMR (MeOD, 125 MHz) δ 161.4, 160.9, 143.9, 134.6, 134.3, 130.7, 130.1, 129.6, 123.6, 122.5, 115.1, 55.7, 47.4 LR-ESI-MS m/z 325 [M+Na]+.
실시예 14: 3-((2-클로로벤질)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 14)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000039
백색 고체 (73.7 mg, 59%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 9.90 (s, 1 H), 8.28-8.25 (m, 1 H), 8.02-7.98 (m, 1 H), 7.87-7.76 (m, 2 H), 7.54-7.47 (m, 2 H), 7.40-7.36 (m, 2 H), 4.77 (d, J=5.6 Hz, 2 H) 13C NMR (DMSO, 125 MHz) δ 159.7, 142.2, 134.0, 133.6, 133.2, 132.6, 129.7, 129.5, 129.4, 127.5, 127.4, 123.2, 121.3, 44.1 LR-ESI-MS m/z 329 [M+Na]+.
실시예 15: 3-((4-클로로벤질)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 15)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000040
백색 고체 (43.6 mg, 29%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 9.94 (s, 1 H), 8.21-8.19 (m, 1 H), 8.00-7.98 (m, 1 H), 7.85-7.82 (m, 2 H), 7.46-7.44 (m, 8 H), 4.69 (s, 2 H) 13C NMR (DMSO, 125 MHz) δ 159.5, 142.2, 136.3, 133.6, 133.2, 132.1, 129.6, 128.5, 127.7, 123.0, 121.3, 45.3 LR-ESI-MS m/z 329 [M+Na]+.
실시예 16: 3-((2-플루오로페닐)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 16)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000041
백색 고체 (28 mg, 45%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 11.02 (s, 1 H), 8.40 (d, J=6.8, 1 H), 8.07 (d, J=6.5 Hz, 1 H), 7.94-7.89 (m, 2 H), 7.69-7.65 (m, 1 H), 7.45-7.40 (m, 2 H), 7.36-7.32 (m, 1 H) 13C NMR (DMSO, 125 MHz) δ 158.8, 141.8, 133.9, 133.5, 129.1, 129.0, 128.0, 127.7, 124.8, 124.8, 123.5, 121.5, 116.4, 116.3 LR-ESI-MS m/z 299 [M+Na]+.
실시예 17: 3-(4-((4-브로모벤질)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 17)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000042
백색 고체 (91.6 mg, 53%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 8.22-8.19 (m, 1 H), 8.01-7.97 (m, 1 H), 7.86-7.82 (m, 2 H), 7.58 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 7.36 (d, J= 8.5 Hz, 2 H), 4.67 (s, 2 H) 13C NMR (DMSO, 125 MHz) δ 159.5, 142.2, 136.6, 133.6, 133.2, 131.4, 130.0, 127.5, 123.0, 121.3, 120.6, 45.3 LR-ESI-MS m/z 350 [M+H]+ .
실시예 18: 3-((4-플루오로페닐)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 18)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000043
연한 갈색 고체 (100 mg, 73%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 7.45 (d, J=7.1 Hz, 1 H), 8.08-8.06 (m, 1 H), 7.94-7.86 (m, 5 H), 7.37-7.32 (m, 2 H) 13C NMR (DMSO, 125 MHz) δ 156.8, 140.8, 133.8, 133.3, 128.2, 124.2, 124.2, 123.5, 121.5, 115.9, 115.7 LR-ESI-MS m/z 277 [M+H]+.
실시예 19: 3-((3s,5s,7s)-아다만탄-1-일아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 19)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000044
백색 고체 (37.8 mg, 48%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 8.41 (m, 2 H), 7.97 - 7.93 (m, 1 H), 7.81 (m, 2 H), 2.19 (m, 6 H), 2.13 (m, 3 H), 1.69 (m, 6 H), MS (317.5 [M+H]+ APCI+).
실시예 20: 4-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)아미노)-N-프로필벤젠술폰아미드 (화합물 20)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000045
백색 고체 (48.1 mg, 51%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 11.08 (s, 1 H), 8.51 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 8.14 - 8.06 (m, 3 H), 7.99 - 7.88 (m, 4 H), 7.61 (t, J = 5.9 Hz, 1 H), 2.73 (td, J = 7.2, 5.9 Hz, 2 H), 1.39 (h, J = 7.3 Hz, 2 H), 0.80 (t, J = 7.4 Hz, 3 H), MS(380.4 [M+H]+ ESI+).
실시예 21: 3-((2-모르폴리노페닐)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 21)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000046
연한 갈색 고체 (57.2 mg, 67%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 10.41 (s, 1 H), 8.38 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 8.07 (d, J = 7.4 Hz, 1 H), 7.91 (m, 2 H), 7.78 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.38 - 7.20 (m, 3 H), 3.70 (m, 4 H), 2.89 (m, 4 H), MS(344.4 [M+H]+ ESI+).
실시예 22: 5-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)아미노)-1,3-디메틸-1H-벤조[d]이미다졸-2(3H)-온 (화합물 22)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000047
백색 고체 (38.9 mg, 38%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 10.88 (s, 1 H), 8.49 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 8.07 (d, J = 7.0 Hz, 1 H), 7.91 (m, 2 H), 7.63 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 7.55 (dd, J = 8.4, 2.1 Hz, 1 H), 7.26 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 3.37 (s, 3 H), 3.33 (s, 3 H), MS(397.4 [M+H]+ ESI+).
실시예 23: (E)-3-(2-(2-히드록시벤질리덴)히드라지닐)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 23)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000048
연한 갈색 고체 (36.0 mg, 24%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 12.66 (s, 1 H), 10.73 (s, 1 H), 8.87 (s, 1 H), 8.26 (d, J = 6.4 Hz, 1 H), 8.07 (d, J = 6.7 Hz, 1 H), 7.96 - 7.84 (m, 2 H), 7.76 (dd, J = 7.8, 1.7 Hz, 1 H), 7.37 (ddd, J = 8.5, 7.2, 1.7 Hz, 1 H), 7.01 - 6.92 (m, 2 H), MS(302.4 [M+H]+ ESI+).
실시예 24: (E)-3-(2-(4-메톡시벤질리덴)히드라지닐)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 24)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000049
연한 갈색 고체 (48.6 mg, 31%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 12.46 (s, 1 H), 8.53 (s, 1 H), 8.26 (d, J = 6.5 Hz, 1 H), 8.05 (d, J = 5.7 Hz, 1 H), 7.96 - 7.83 (m, 2 H), 7.80 (d, J = 8.8 Hz, 2 H), 7.08 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 3.85 (s, 3 H), MS(316.4 [M+H]+ APCI+).
실시예 25: (E)-3-(2-(5-클로로-2-히드록시-3-메톡시벤질리덴)히드라지닐)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 25)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000050
연한 갈색 고체 (34.5 mg, 19%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 12.67 (s, 1 H), 10.34 (s, 1 H), 8.86 (s, 1 H), 8.24 (d, J = 6.5 Hz, 1 H), 8.07 (d, J = 6.1 Hz, 1 H), 7.90 (m, 2 H), 7.39 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 7.16 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 3.89 (s, 3 H), MS(366.4 [M+H]+ APCI+).
실시예 26: 3-(4-벤질피페라진-1-일)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드 (화합물 26)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000051
연한 갈색 고체 (67.3 mg, 66%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 8.24 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 8.02 (d, J = 7.2 Hz, 1 H), 7.83 (t, J = 7.4 Hz, 1 H), 7.78 (t, J = 7.7 Hz, 1 H), 7.36 (m, 4 H), 7.29 (m, 1 H), 4.14 (m, 2 H), 3.89 (m, 2 H), 3.57 (s, 2 H), 2.58 (m, 4 H), MS(342.4 [M+H]+ ESI+).
실시예 27: (E)-1-(4-(1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)피페라진-1-일)-3-페닐프로프-2-엔-1-온 (화합물 27)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000052
연한 갈색 고체 (37.0 mg, 39%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 8.22 (s, 1 H), 8.05 (d, J = 7.3 Hz, 1 H), 7.90 - 7.78 (m, 2 H), 7.75 (d, J = 6.5 Hz, 2 H), 7.56 (d, J = 15.4 Hz, 1 H), 7.47 - 7.36 (m, 3 H), 7.26 (d, J = 15.4 Hz, 1 H), 4.30 (m, 2 H), 4.03 (m, 4 H), 3.88 (m, 2 H), MS(382.6 [M+H]+ APCI+).
실시예 28: (4-(1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)피페라진-1-일)(4-플루오로페닐)메탄온 (화합물 28)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000053
연한 갈색 고체 (24.5 mg, 22%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 8.21 (s, 1 H), 8.04 (d, J = 7.3 Hz, 1 H), 7.85 (t, J = 7.4 1 Hz, 1 H), 7.80 (m, 1 H), 7.61 - 7.55 (m, 2 H), 7.33 (t, J = 8.9 Hz, 2 H), 4.26 (m, 2 H), 4.03 (m, 2 H), 3.85 (m, 2 H), 3.68 (m, 2 H), MS(396.4 [M+Na]+ ESI+).
실시예 29: (E)-3-(2-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)아미노)에틸)-5-(2-플루오로벤질리덴)티아졸리딘-2,4-디온 (화합물 29)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000054
백색 고체 (104 mg, 81%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 9.58 (s, 1 H), 8.01 (m, 1 H), 7.96 (m, 1 H), 7.88 (s, 1 H), 7.83 (m, 2 H), 7.58 (m, 2 H), 7.40 (m, 2 H), 3.96 (dd, J = 6.6, 4.7 Hz, 2 H), 3.76 (dd, J = 6.6, 4.7 Hz, 2 H), MS(454.4 [M+Na]+ ESI+).
실시예 30: (E)-3-(2-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)아미노)에틸)-5-(4-메톡시벤질리덴)티아졸리딘-2,4-디온 (화합물 30)
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000055
백색 고체 (80.8 mg, 61%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 9.56 (s, 1 H), 8.01 (m, 1 H), 7.96 (m, 1 H), 7.87 (s, 1 H), 7.83 (m, 2 H), 7.60 (d, J = 8.9 Hz, 2 H), 7.11 (d, J = 8.8 Hz, 2 H), 3.95 (dd, J = 6.6, 4.7 Hz, 2 H), 3.84 (s, 3 H), 3.74 (dd, J = 6.6, 4.7 Hz, 2 H), MS(444.5 [M+H]+ APCI+).
실시예 31: (E)-5-(4-(디메틸아미노)벤질리덴)-3-(2-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)아미노)에틸)티아졸리딘-2,4-디온 (화합물 31))
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000056
연한 갈색 고체 (55.9 mg, 41%): 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ 9.56 (s, 1 H), 8.01 (m, 1 H), 7.96 (m, 1 H), 7.86 - 7.78 (m, 2 H), 7.78 (s, 1 H), 7.46 (d, J = 9.1 Hz, 1 H), 6.83 (d, J = 9.1 Hz, 2 H), 3.94 (dd, J = 6.6, 4.8 Hz, 2 H), 3.72 (t, J = 5.8 Hz, 2 H), 3.03 (s, 6 H), MS(457.5 [M+H]+ APCI+).
실험예 1: 유도체의 활성화된 당단백질(GP) IIb/IIIa에 대한 PAC1 결합 억제효과
1.1. PAC1 결합 저해도 분석방법
(1) 세포 배양 및 세포 접착 분석
인테그린 αIIbβ3, A5를 발현하는 Chinese hamster ovary 세포주(이하, CHO 세포주)는 Mark Ginsberg 박사(University of California, San Diego)으로부터 제공받았으며, 10% FBS, 100 U/mL 페니실린, 100 μg/mL 스트렙토마이신, 2 mM L-글루타민 및 비필수 아미노산이 첨가된 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium) 배지에서 유지되었다.
세포 접착 분석은, 96웰 플레이트를 PBS(인산염 완충 식염수) 내 5-10 μg/mL 피브리노겐으로 4℃에서 밤새 1차 코팅한 다음, 비-특이적 세포 접착을 방지하기 위해 PBS 내 2% BSA(소 혈청 알부민)으로 2시간동안 상온에서 추가 배양하여 블로킹하였다. 서브컨플루언트 세포를 트립신 처리로 분리하고 세포 현탁액을 DMEM으로 2회 세척하였다.
이러한 세포의 엘리컷(aliquots)을 피브리노겐으로 코팅된 96웰 플레이트의 웰에 첨가하고 합성된 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸 또는 이의 유도체의 존재하에 CO2 인큐베이터에서 37℃에서 0.5 내지 1시간 동안 배양하였다. DMEM으로 3회 세척한 후, 남아있는 세포는 제조사의 지시에 따라 Cell Counting Kit-8(Dojindo Molecular Technologies, Rockville, MD, USA)을 사용하여 정량하였다.
(2) 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸 및 유도체의 GPIIb/IIIa 저해성능 평가
합성된 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸 유도체의 당단백질(Glycoprotein) IIb/IIIa(이하, GPIIb/IIIa) 저해 성능을 평가하기 위해, 인간의 GP IIb/IIIa를 발현하는 CHO 세포주에 활성화 형태의 탈린 (talin head domain, 이하 THD)과 소량의 green fluorescence protein (GFP)을 함께 형질감염시킨 세포주를 사용하였다. 형질감염시킨 세포주는 배양접시에서 떼어낸 후 배양액(DMEM)으로 세척 후 200 μM의 각 유도체와 PAC1 항체를 30분간 처리하였으며, 세척 후 알로피코시아닌(Allophycocyanin)이 접합된 항-IgM 항체를 2차항체로 이용하여 염색하였다. 염색된 세포주는 유세포 분석으로 분석하여 형질감염 표지자로 사용된 GFP를 발현하는 세포에서의 PAC1 결합 정도를 평균 형광 정도(Mean Fluorescence Intensity, MFI)로 측정하고, 아래 식을 이용하여 각 유도체의 억제율(% inhibition)을 계산하였다. 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸(화합물 1) 및 이의 유도체(화합물 2 내지 31)에 대하여 2회 이상 독립실험을 수행하였다.
억제율(% inhibition) = 100 - {(화합물 처리한 샘플 MFI - 엡티피바타이드(Epitifibatide) 처리 샘플 MFI) / (DMSO 처리 샘플 MFI - 엡티피바타이드 처리 샘플 MFI)}*100
위 계산식을 통해, 엡티피바타이드를 처리한 샘플은 GP IIb/IIIa와 PAC1 결합이 완전히 억제할 수 있는 양성대조군으로 % inhibition 값을 100%로, vehicle인 DMSO를 처리한 샘플은 탈린에 의한 PAC1 결합이 증가되었으나 어떠한 저해 효과도 보이지 않는 음성대조군으로 억제율(% inhibition) 값은 0%로 설정하였다.
(3) 혈소판 활성화 표지자 발현수준 분석
정상인의 혈액을 이용하여 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸(화합물 1)의 혈액응고 프로파일 및 혈소판 활성화 표지자 발현 및 백혈구-혈소판 응집능을 측정하였다. 정상인 그룹당 8명 이상의 환자 혈액에 대해 화합물 1은 0, 50 및 200 μmol/L의 농도로 처리되었으며, ADP와 TRAP을 활성화제로 사용하여 FACS (Flow cytometry; 유세포 분석)를 수행하였다.
정상인 및 현재 기존의 항혈소판제 (아스피린 또는 클로피도그렐)를 복용하고 있는 환자들의 혈액을 이용하여 효과가 검증된 약물들의 기존의 항혈소판제에 의한 혈액응고 프로파일 및 혈소판 활성화 표지자 발현 및 백혈구-혈소판 응집능을 측정하였다. 일반 환자 및 현재 기존의 항혈소판제를 복용하고 있는 환자 그룹당 8명 이상의 환자 혈액에서 흡광도를 이용한 혈소판 응집력을 측정하였으며, 화합물 1은 0, 20, 50 및 100 μmol/L의 농도로 처리하였다.
기존의 항혈소판제 (아스피린 혹은 클로피도그렐)를 복용하고 있는 심혈관질환자들의 혈액을 이용하여 화합물 1의 기존의 항혈소판제에 의한 혈액응고 프로파일 및 혈소판 활성화 표지자 발현 및 백혈구-혈소판 응집능을 측정하였다. 기존의 항혈소판제를 복용하고 있는 환자 그룹당 7명 이상의 혈액에서 FACS를 이용한 혈소판 응집력을 측정하였다. 효과가 검증된 100 μmol/L의 농도뿐만 아니라 기존의 농도보다 상대적으로 낮은 농도인 7.5 μmol/L를 추가하여 저농도의 유효/검증물질의 혈소판 응집력 저해효과를 비교하였다.
(4) 정상인 및 환자 혈액 샘플에서의 혈소판 응집능 분석
전술한 혈소판 응집능 프로파일 분석뿐만 아니라, 화합물 1의 임상 약리 효능을 추가적으로 확인하기 위하여, 전혈을 사용하며 인체 내 반응을 잘 반영하는 분석법으로서, 혈소판 응집에 의하여 생성된 마이크로-응집(micro-aggregation)에 의한 흡광도 변화를 측정하였다. 정상인의 혈액에 활성화제를 처리하여 혈소판 응집을 유도하고, 시간에 따른 화합물 1의 마이크로-응집 저해 효과를 측정하였다. 마이크로-응집 수에 의한 흡광도 값을 약물 처리 전 (0 min)과 비교하여 정량화하므로 그래프의 Y축 값 (percentage of decline over time)이 커질수록 높은 마이크로-응집 저해 효과를 나타냄을 의미한다.
1.2. PAC1 결합 억제효과 확인
혈소판 응집에는 GPIIb/IIIa의 활성화가 필수적이고, GPIIb/IIIa의 활성화는 활성화된 GPIIb/IIIa와 선택적으로 결합할 수 있는 PAC1이라는 항체와의 반응성으로 판단이 가능하므로, 이는 유효/검증물질의 항혈소판 효과를 측정할 수 있는 지표가 된다. 따라서, GPIIb/IIIa를 발현하는 세포주에서 GPIIb/IIIa의 활성화 단백질인 탈린에 의한 PAC1 결합이 화합물 1 내지 31의 처리에 의해 저해되는지 확인하고자 하였다.
합성된 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸 유도체는 PAC1 결합에 대한 억제 활성을 나타내었으며, DMSO는 음성 대조군으로 사용되었다. 구체적으로 GPIIb/IIIa 발현 세포주에 탈린을 발현시킨 후, 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸(화합물 1)과 그 유도체인 화합물 2 내지 화합물 31을 농도별로 처리하였을 때 PAC1 결합 저해도를 유세포 분석기로 분석하였다(도 1, 도 2a 내지 도 2f).
GPIIb/IIIa 발현 세포주에 탈린을 발현시킨 후, 엡티피바타이드 또는 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸(화합물 1)을 처리한 경우, PAC1 결합이 효과적으로 저해됨을 확인하였다(도 1).
또한, 화합물 1의 유도체에 대해서도 PAC1 결합 억제 효과가 있는 물질을 스크리닝하기 위해 유세포 분석을 수행하였으며(도 2a 내지 도 2f), GFP를 발현하는 세포에 대하여 평균 형광 정도(Mean Fluorescence Intensity, MFI)를 측정하여 각 유도체의 PAC1 결합 정도를 계산하였다(도 3).
PAC1 결합 정도를 확인하기 위하여, GFP만을 발현하는 세포와 GFP-탈린을 발현하는 세포에 각각 DMSO, 엡티피바타이드 또는 MnCl2를 처리하였다. 용매인 DMSO를 처리한 경우에는 기초(basal) PAC1 결합 수준을 확인할 수 있고, 엡티피바타이드와 MnCl2는 각각 PAC1 결합을 억제하거나 GPIIb/IIIa를 활성화시키는 물질로서 PAC1 결합을 정상적으로 검출할 수 있음을 확인하는 대조군으로 사용하였다(도 4a). GFP-탈린을 발현하는 세포에 PAC1의 결합을 유의하게 억제하는 화합물을 각각 처리하고, 유세포 분석을 수행하였다(도 4b). 각 히스토그램에서 x축은 PAC1 결합으로 인한 형광 세기를 나타내며, y는 해당 형광 세기를 가진 세포의 수를 의미한다. 각 화합물을 처리한 경우(빨간색)에는 DMSO 처리(검은색) 대비 앱티피바타이드를 처리한 경우와 유사하게 피크(peak)가 왼쪽으로 이동하였다.
양성 대조군으로는 엡티피바타이드를 처리하였으며, 양성 대조군의 억제율을 100% 기준으로 설정하여 각 화합물의 억제율을 계산하였다. 이러한 스크리닝을 통해 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸 유도체는 PAC1의 결합을 유의하게 억제함을 확인하였다(표 1 및 도 5).
구분 exactMS M.W
(g/mol) 		quant.(mg) DMSO(μl) % inhibition
(at 200 uM)
양성 대조군
(엡티피바타이드)		 100
화합물 1 287.1 287.3 2 69.6 79.7
화합물 4 398.0 398.5 2 50.2 30.4
화합물 7 315.1 315.4 2 63.4 78.2
화합물 8 315.1 315.4 2 63.4 55.6
화합물 9 336.9 338.2 2 59.1 25.9
화합물 10 414.9 417.1 2 48.0 3.3
화합물 11 365.1 365.4 2 54.7 82.8
화합물 12 293.0 293.7 2 68.1 37.6
화합물 19 316.1 316.4 2 63.2 5.1
화합물 22 342.1 342.4 2 58.4 4.7
화합물 23 301.1 301.3 2 66.4 1.2
화합물 25 365.0 365.8 2 54.7 2.2
화합물 26 341.1 341.4 2 58.6 29.3
화합물 27 381.1 381.5 2 52.4 69.5
화합물 28 373.1 373.4 2 53.6 35.3
화합물 29 431.0 431.5 2 46.4 82.5
화합물 30 443.1 443.5 2 45.1 41.1
화합물 31 456.1 456.5 2 43.8 21.1
정상인 혈액 샘플에서 활성화제인 ADP 및 화합물 1을 처리한 후, PAC1과 p-selectin을 FACS로 확인한 결과, 화합물 1을 처리한 경우 대조군 대비 항혈소판능이 증가함을 확인하였다(도 6). 마찬가지로, 동일 대조군에 대해 p-selectin을 FACS로 확인한 결과 역시 대조군 대비 항혈소판능이 증가함을 확인하였다. 마찬가지로 활성화제로 TRAP을 사용한 경우에도 PAC1 및 p-selectin의 FACS 결과에서 화합물 1을 처리한 경우 통계적으로 유의성이 있는 증가된 항혈소판능, 즉 혈소판 응집이 감소됨을 확인하였다(도 6).
정상인 혈액 샘플에서, 활성화제인 ADP 또는 TRAP과 화합물 1을 처리한 후, 흡광도로 혈소판 응집능을 측정한 결과, 활성화제로 ADP 또는 TRAP을 사용한 경우 모두 화합물 1에 의해 혈소판 응집이 감소됨을 확인할 수 있었다. 특히, 활성화제로 TRAP을 사용한 경우, 정상인의 혈소판 응집이 화합물 1을 50 μmol/L로 처리하였을 때 현저히 감소함을 확인하였다(도 7A).
또한, 항혈소판제를 복용하고 있는 환자 혈액 샘플에서 활성화제인 ADP 또는 TRAP과 화합물 1을 처리한 후, 흡광도로 응집능 시너지를 측정한 결과, 낮은 농도에서도 항혈소판능이 증가됨을 확인하였다. 특히, 화합물 1을 50 μmol/L로 처리한 경우 현저한 항혈소판능, 즉 혈소판 응집의 감소를 확인하여 기존의 항혈소판제에 화합물 1을 추가적으로 투여할 경우 항혈소판능에 있어서 시너지 효과를 발휘할 수 있을 것으로 판단된다(도 7B).
아스피린 또는 클로피도그렐 복용 심혈관 환자 혈액 샘플에 활성화제(ADP 또는 TRAP)과 화합물 1을 처리한 후, PAC1을 FACS로 확인한 결과, 정상인의 결과와 유사하게 화합물 1을 처리한 경우 혈소판 응집력 저해 효과를 나타냄을 확인하였다. 특히, TRAP을 활성화제로 사용하여 아스피린 복용 환자 대상으로 화합물 1의 혈소판 응집력을 측정하였을 때, 저농도인 7.5 μmol/L에서도 혈소판 응집력 저해효과를 나타냄을 확인하였다(도 8).
활성화제로 ADP를 사용하여 정상인의 혈액 내 혈소판의 마이크로-응집을 유도한 후, 화합물 1을 처리한 경우의 흡광도 변화를 측정한 결과, 생리식염수 (NS)를 처리한 군에 비하여 모든 농도에서 통계적으로 유의성 있는 저해효과를 나타냄을 확인하였다(도 9).
Ⅱ. 본 발명의 신규한 3-시티릴-1H-피라졸 유도체 합성을 위한 중간체 제조
분석방법
박막 크로마토그래피는 Merck 실리카겔 60 F254 플레이트(Merck, Kenilworth, NJ, USA)를 사용하여 수행했으며, 플래시 크로마토그래피는 Isolera(Biotage, Uppsala, Sweden)를 사용하여 자동으로 또는 Merck 실리카겔 60(0.040-0.063 mm, 230-400 메쉬, Merck, Kenilworth, NJ, USA)을 사용하여 수동으로 수행했다. 1H- 및 13C-NMR 스펙트럼은 JEOL-500(JEOL, Tokyo, Japan) 및 AVANCE-500(Brucker, Billerica, MA, USA) 분광계를 사용하여 기록되었고, 1H- 및 13C-NMR 화학적 이동은 TMS에 대한 백만분율(ppm) 단위로 보고되며, 잔류 용매 피크는 내부 기준으로 사용되었다. 1H-NMR 데이터는 화학적 이동, 다중도(br, 광범위 신호; s, 단일선; d, 이중선; t, 삼중선; q, 사중선; quint, 오중선, m, 다중선 및/또는 다중 공명), 양성자 수 및 커플링 상수(Hz) 순서로 보고되었다.
실시예 32: 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 (화합물 32)
[반응식 1]
Figure PCTKR2023016395-appb-img-000057
에탄올(5 mL) 중 5-아미노-4-시아노-3-시아노메틸피라졸(74 mg), 3,4,5-트리메톡시벤즈알데히드(98 mg) 및 피페리딘(0.05 mL)의 혼합물을 5시간 동안 환류시켰다. 휘발성 물질을 감압하에 제거하고 잔류물을 MPLC로 정제하여 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 (화합물 32, 59 mg, 36%)을 얻었다: 1H NMR((500 MHz, DMSO-d 6) δ 12.36 (br, 1 H), 7.81 (s, 1 H), 7.25 (s, 2 H), 6.68 (s, 2 H), 3.83 (s, 6 H), 3.75 (s, 3 H)), TLC(Rf 0.25 66% EtOAc in n-hexane, 254 nm), MS (APCI, 326 [M+H]+).
실험예 2: 화합물 32의 활성화된 GPIIb/IIIa에 대한 PAC1 결합 억제효과
2.1. PAC1 결합 저해도 분석방법
(1) 세포 배양 및 세포 접착 분석
인테그린 αIIbβ3(GPIIb/IIIa), A5를 발현하는 Chinese hamster ovary 세포주(이하, CHO 세포주)는 Mark Ginsberg 박사(University of California, San Diego)으로부터 제공받았으며, 10% FBS, 100 U/mL 페니실린, 100 μg/mL 스트렙토마이신, 2 mM L-글루타민 및 비필수 아미노산이 첨가된 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium) 배지에서 유지되었다.
세포 접착 분석은, 96웰 플레이트를 PBS(인산염 완충 식염수) 내 5-10 μg/mL 피브리노겐으로 4℃에서 밤새 1차 코팅한 다음, 비-특이적 세포 접착을 방지하기 위해 PBS 내 2% BSA(소 혈청 알부민)으로 2시간동안 상온에서 추가 배양하여 블로킹하였다. 서브컨플루언트 세포를 트립신 처리로 분리하고 세포 현탁액을 DMEM으로 2회 세척하였다.
이러한 세포의 엘리컷(aliquots)을 피브리노겐으로 코팅된 96웰 플레이트의 웰에 첨가하고 합성된 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴의 존재하에 CO2 인큐베이터에서 37℃에서 0.5 내지 1시간 동안 배양하였다. DMEM으로 3회 세척한 후, 남아있는 세포는 제조사의 지시에 따라 Cell Counting Kit-8(Dojindo Molecular Technologies, Rockville, MD, USA)을 사용하여 정량하였다.
(2) 화합물 32의 GPIIb/IIIa 저해성능 평가
합성된 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴(화합물 32)의 당단백질(Glycoprotein) IIb/IIIa(이하, GPIIb/IIIa) 저해 성능을 평가하기 위해, 인간의 GPIIb/IIIa를 발현하는 Chinese hamster ovary 세포주 (이하 CHO 세포주)에 활성화 형태의 탈린 (talin head domain, 이하 THD)과 소량의 green fluorescence protein (GFP)을 함께 형질감염시킨 세포주를 사용하였다. 형질감염시킨 세포주는 배양접시에서 떼어낸 후 배양액(DMEM)으로 세척 후 농도별 화합물 32와 PAC1 항체를 30분간 처리하였으며, 세척 후 알로피코시아닌(Allophycocyanin)이 접합된 항-IgM 항체를 2차항체로 이용하여 염색하였다. 염색된 세포주는 유세포 분석으로 분석하여 형질감염 표지자로 사용된 GFP를 발현하는 세포에서의 PAC1 결합 정도를 평균 형광 정도(Mean Fluorescence Intensity, MFI)로 측정하고, 아래 식을 이용하여 농도별 화합물 32의 억제율(% inhibition)을 계산하였다. 화합물 32에 대하여 2회 이상 독립실험을 수행하였다.
억제율(% inhibition) = 100 - {(화합물 32 처리한 샘플 MFI - 엡티피바타이드(Epitifibatide) 처리 샘플 MFI) / (DMSO 처리 샘플 MFI - 엡티피바타이드 처리 샘플 MFI)}*100
위 계산식을 통해, 엡티피바타이드를 처리한 샘플은 GPIIb/IIIa와 PAC1 결합이 완전히 억제할 수 있는 양성대조군으로 % inhibition 값을 100%로, vehicle인 DMSO를 처리한 샘플은 탈린에 의한 PAC1 결합이 증가되었으나 어떠한 저해 효과도 보이지 않는 음성대조군으로 억제율(% inhibition) 값은 0%로 설정하였다.
(3) 혈소판 활성화 표지자 발현수준 분석
기존의 항혈소판제 (아스피린 혹은 클로피도그렐)를 복용하고 있는 심혈관질환자들의 혈액을 이용하여 화합물 32의 기존의 항혈소판제에 의한 혈액응고 프로파일 및 혈소판 활성화 표지자 발현 및 백혈구-혈소판 응집능을 측정하였다. 기존의 항혈소판제를 복용하고 있는 환자 그룹당 7명 이상의 혈액에서 FACS를 이용한 혈소판 응집력을 측정하였다. 100 μmol/L의 농도뿐만 아니라 상대적으로 낮은 농도인 7.5 μmol/L를 추가하여 저농도의 유효/검증물질의 혈소판 응집력 저해효과를 비교하였다.
(4) 정상인 및 환자 혈액 샘플에서의 혈소판 응집능 분석
전술한 혈소판 응집능 프로파일 분석뿐만 아니라, 화합물 32의 임상 약리 효능을 추가적으로 확인하기 위하여, 전혈을 사용하며 인체 내 반응을 잘 반영하는 분석법으로서, 혈소판 응집에 의하여 생성된 마이크로-응집(micro-aggregation)에 의한 흡광도 변화를 측정하였다. 정상인의 혈액에 활성화제를 처리하여 혈소판 응집을 유도하고, 시간에 따른 화합물 32의 마이크로-응집 저해 효과를 측정하였다. 마이크로-응집 수에 의한 흡광도 값을 약물 처리 전 (0 min)과 비교하여 정량화하므로 그래프의 Y축 값 (percentage of decline over time)이 커질수록 높은 마이크로-응집 저해 효과를 나타냄을 의미한다.
2.2. PAC1 결합 억제효과 확인
혈소판 응집에는 GPIIb/IIIa의 활성화가 필수적이고, GPIIb/IIIa의 활성화는 활성화된 GPIIb/IIIa와 선택적으로 결합할 수 있는 PAC1이라는 항체와의 반응성으로 판단이 가능하므로, 이는 유효/검증물질의 항혈소판 효과를 측정할 수 있는 지표가 된다. 따라서, GPIIb/IIIa를 발현하는 세포주에서 GPIIb/IIIa의 활성화 단백질인 탈린에 의한 PAC1 결합이 화합물 32의 처리에 의해 저해되는지 확인하고자 하였다.
합성된 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴(화합물 32)은 PAC1 결합에 대한 억제 활성을 나타내었으며, DMSO는 음성 대조군으로 사용되었다. 구체적으로 GPIIb/IIIa 발현 세포주에 탈린을 발현시킨 후, 화합물 32를 농도별로 처리하였을 때 PAC1 결합 저해도를 유세포 분석기로 분석하였다.
GPIIb/IIIa 발현 세포주에 탈린을 발현시킨 후, 엡티피바타이드 또는 화합물 32를 처리한 경우, PAC1 결합이 효과적으로 저해됨을 확인하였다(도 10 및 도 11).
또한, 농도별로(200 uM, 66.7 uM, 22.2 uM, 7.41 uM) 화합물 32를 처리한 결과, 22.2 uM, 7.41 uM의 낮은 농도에서는 PAC1 결합 및 GPIIb/IIIa 활성화가 저해 효과가 20% 수준이었으나, 66.7 uM 농도에서는 40% 이상, 200 uM 농도에서는 50% 이상 PAC1 결합 및 GPIIb/IIIa 활성화 저해 효과가 나타남을 확인하였다(도 12).
실험예 3: 화합물 32의 트롬빈-의존적 혈소판 퍼짐(spreading) 저해 효과
3.1. 혈소판-피브리노겐 결합 측정
(1) 혈소판 분리 및 퍼짐 분석(spreading assay)
화합물 32가 GPIIb/IIIa를 활성화시키는 신호전달 과정에서 탈린의 상위단계에서 작용하여 활성화를 저해하는 경우에는, GPIIb/IIIa를 과발현시킨 세포주를 이용하여 화합물의 항혈소판 효과를 검증할 수 없다. 이를 극복하기 위하여 혈액은 건강한 기증자로부터 채혈하여 진행하였다. 혈소판 분리를 위해 건강한 기증자의 혈액 샘플을 3.2% 시트르산나트륨 완충액(BD, Franklin Lakes, NJ, USA)이 포함된 BD Vacutainer 튜브에 수집하고, 그 다음 혈액/구연산염 혼합물의 3 mL 샘플을 875 μL의 변형된 Tyrode 용액(140 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 0.4 mM NaH2PO4, 10 mM NaHCO3, 5 mM 덱스트로오스, 10 mM HEPES, pH 7.4), 175 μL의 ACD 완충액(85 mM 시트르산나트륨, 65 mM 시트르산 및 104 mM D-글루코스, pH 4.4) 및 1 U/μL 아피라제에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 200 g으로 원심분리하고 상청액(혈소판-풍부 혈장, PRP)을 1 U/μL 아피라제 및 0.375 mM 프로스타글란딘 E1으로 처리한 후 암실에서 10분 동안 인큐베이션하였다. 그 다음, PRP를 실온에서 5분 동안 700 g에서 원심분리하고, 펠렛을 Walsh 완충액(137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1 mM MgCl2, 3.3 mM NaH2PO4, 및 20 mM HEPES, pH 7.4)에 재현탁시켰다. 혈소판 현탁액은 작용제(ADP 또는 트롬빈), 화합물 32 및/또는 비히클의 존재하에 10 μg/mL 피브리노겐으로 코팅된 커버 글라스에서 인큐베이션하였다. 결합되지 않은 혈소판은 Walsh 완충액으로 세척하고 결합된 혈소판은 3.5% 포름알데히드로 고정하였으며 시각화를 위해 로다민-팔로이딘으로 염색하였다.
로다민(Rhodamine)이 결합된 팔로이딘(Phalloidin)으로 엑틴을 염색 후, 염색된 혈소판의 형광 및 미분 간섭 이미지(differential interference contrast images)는 전하결합소자 카메라와 100x 오일 렌즈가 장착된 도립 형광 현미경(TI-E; Nikon, Tokyo, Japan)을 사용하여 촬영되었다. 관찰 결과, 화합물 32를 처리한 경우 트롬빈에 의해 유도된 혈소판 퍼짐효과가 효과적으로 저해됨을 확인하였다(도 13).
실험예 4: 혈액 샘플을 이용한 혈소판 응집능 평가
아스피린 또는 클로피도그렐 복용 심혈관 환자 혈액 샘플에 활성화제(ADP 또는 TRAP)과 화합물 32를 처리한 후, PAC1을 FACS로 확인한 결과, 화합물 32에 의해 혈소판 응집력 저해효과가 나타남을 확인하였다. 특히, ADP 또는 TRAP을 활성화제로 사용하여 아스피린 복용 환자 대상으로 화합물 32의 혈소판 응집력을 측정하였을 때, 저농도인 7.5 μmol/L에서도 혈소판 응집력 저해효과가 나타남을 확인하였다(도 14).
활성화제로 ADP를 사용하여 정상인의 혈액 내 혈소판의 마이크로-응집을 유도한 후, 화합물 32를 처리한 경우의 흡광도 변화를 측정한 결과, 생리식염수 (NS)를 처리한 군에 비하여 모든 농도에서 통계적으로 유의성 있는 저해효과를 나타냄을 확인하였다(도 15).
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (30)

  1. 하기 화학식 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2023016395-appb-img-000058
    상기 식에서,
    X는 O, NR4, NR5CH2, NR6NR7,
    Figure PCTKR2023016395-appb-img-000059
    ,
    Figure PCTKR2023016395-appb-img-000060
    ,
    Figure PCTKR2023016395-appb-img-000061
    또는
    Figure PCTKR2023016395-appb-img-000062
    이고,
    R1 내지 R3는 각각 수소, 할로겐, 아미노, 니트로, 시아노, 하이드록시, 티올, C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C3-6 사이클로알킬, C1-6 알콕시,　아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 헤테로원자로 연결된 C1-6 알킬, 헤테로원자로 연결된 헤테로아릴 또는 헤테로원자로 연결된 헤테로사이클릴이고,
    R4 내지 R7는 각각 수소 또는 C1-C6 알킬이다.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 C1-6 알킬은 메틸(Me) 또는 t-부틸(tert-Butyl)인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 C1-6 할로알킬은 트리플루오로메틸(CF3)인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 C1-6 알콕시는 메톡시(OMe)인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 할로겐은 브로모(Br), 클로로(Cl), 또는 플루오로(F)인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  6. 제1항에 있어서,
    3-(2,5-디메틸페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 3-(페닐아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 3-(벤질아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, N-(4-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)옥시)페닐)-2-(티오펜-3-일)아세트아미드, 5-클로로-N-(4-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)옥시)페닐)피라진-2-카르복사미드, 3-(3,5-비스(트리플루오로메틸)페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 3-(2-(tert-부틸)페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 3-(3-(tert-부틸)페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 3-(3-브로모페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 3-(2,6-디브로모페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 3-(4-(벤질옥시)페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 3-(4-클로로페녹시)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 3-((4-메톡시벤질)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 3-((2-클로로벤질)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 3-((4-클로로벤질)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 3-((2-플루오로페닐)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 3-(4-((4-브로모벤질)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 3-((4-플루오로페닐)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 3-((3s,5s,7s)-아다만탄-1-일아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 4-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)아미노)-N-프로필벤젠술폰아미드, 3-((2-모르폴리노페닐)아미노)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, 5-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)아미노)-1,3-디메틸-1H-벤조[d]이미다졸-2(3H)-온, (E)-3-(2-(2-히드록시벤질리덴)히드라지닐)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, (E)-3-(2-(4-메톡시벤질리덴)히드라지닐)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, (E)-3-(2-(5-클로로-2-히드록시-3-메톡시벤질리덴)히드라지닐)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, (E)-3-(2-(5-클로로-2-히드록시-3-메톡시벤질리덴)히드라지닐)벤조[d]이소티아졸 1,1-디옥사이드, (E)-1-(4-(1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)피페라진-1-일)-3-페닐프로프-2-엔-1-온, (4-(1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)피페라진-1-일)(4-플루오로페닐)메탄온, (E)-3-(2-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)아미노)에틸)-5-(2-플루오로벤질리덴)티아졸리딘-2,4-디온, (E)-3-(2-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)아미노)에틸)-5-(4-메톡시벤질리덴)티아졸리딘-2,4-디온 및 (E)-5-(4-(디메틸아미노)벤질리덴)-3-(2-((1,1-디옥시도벤조[d]이소티아졸-3-일)아미노)에틸)티아졸리딘-2,4-디온으로 이루어진 군에서 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 약학적 조성물.
  8. 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 약학적 조성물.
  9. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  10. 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  11. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  12. 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  13. 제9항 또는 제10항에 있어서,
    상기 혈전성 질환은 동맥혈전증, 정맥혈전증, 관상동맥혈전증, 심부정맥혈전증, 뇌동맥혈전증, 말초혈관혈전증, 동맥색전증, 정맥색전증, 신장색전증, 만성동맥폐색증, 폐경색, 뇌경색, 뇌출혈, 뇌색전증, 혈전성 정맥염, 및 심부전증으로 구성되는 군에서 선택되는 것인, 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  14. 제11항 또는 제12항에 있어서,
    상기 심혈관 질환은 고혈압, 허혈성 심장질환, 관상동맥질환, 협심증, 심근경색증, 동맥경화증, 뇌혈관질환 및 부정맥으로 구성되는 군에서 선택되는 것인, 심혈관 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  15. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 식품 조성물.
  16. 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈소판 응집 억제용 식품 조성물.
  17. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물.
  18. 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물.
  19. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물.
  20. 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물.
  21. 제17항 또는 제18항에 있어서,
    상기 혈전성 질환은 동맥혈전증, 정맥혈전증, 관상동맥혈전증, 심부정맥혈전증, 뇌동맥혈전증, 말초혈관혈전증, 동맥색전증, 정맥색전증, 신장색전증, 만성동맥폐색증, 폐경색, 뇌경색, 뇌출혈, 뇌색전증, 혈전성 정맥염, 및 심부전증으로 구성되는 군에서 선택되는 것인, 혈전성 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물.
  22. 제19항 또는 제20항에 있어서,
    상기 심혈관 질환은 고혈압, 허혈성 심장질환, 관상동맥질환, 협심증, 심근경색증, 동맥경화증, 뇌혈관질환 및 부정맥으로 구성되는 군에서 선택되는 것인, 심혈관 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물.
  23. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계;를 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 치료 방법.
  24. 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계;를 포함하는 혈전성 질환의 예방 또는 치료 방법.
  25. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계;를 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 치료 방법.
  26. 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계;를 포함하는 심혈관 질환의 예방 또는 치료 방법.
  27. 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도.
  28. 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도.
  29. 심혈관 질환의 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도.
  30. 심혈관 질환의 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한 5-아미노-3-(1-시아노-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)비닐)-1H-피라졸-4-카르보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도.
PCT/KR2023/016395 2022-10-21 2023-10-20 신규 화합물 유도체 및 이의 약학적 용도 WO2024085725A1 (ko)

Applications Claiming Priority (8)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20220136451 2022-10-21
KR10-2022-0136425 2022-10-21
KR20220136425 2022-10-21
KR10-2022-0136451 2022-10-21
KR10-2023-0063337 2023-05-16
KR1020230063337A KR20240057318A (ko) 2022-10-21 2023-05-16 신규한 1,1-디옥소-1,2-벤즈이소티아졸 유도체 및 이의 약학적 용도
KR1020230118534A KR20240056407A (ko) 2022-10-21 2023-09-06 신규한 3-시티릴-1h-피라졸 유도체 및 이의 약학적 용도
KR10-2023-0118534 2023-09-06

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2024085725A1 true WO2024085725A1 (ko) 2024-04-25

Family

ID=90738283

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/KR2023/016395 WO2024085725A1 (ko) 2022-10-21 2023-10-20 신규 화합물 유도체 및 이의 약학적 용도

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2024085725A1 (ko)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4924002A (en) * 1986-05-09 1990-05-08 Warner-Lambert Company Novel process for the preparation of pyrazoles from isoxazoles
WO2012118308A2 (ko) * 2011-02-28 2012-09-07 이화여자대학교 산학협력단 피라졸 유도체를 포함하는 심혈관 질환 예방 및 치료용 조성물.
CN113264900A (zh) * 2021-06-07 2021-08-17 南京中医药大学 一种苯并异噻唑和苯并噻吩的制备方法及其医药用途

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4924002A (en) * 1986-05-09 1990-05-08 Warner-Lambert Company Novel process for the preparation of pyrazoles from isoxazoles
WO2012118308A2 (ko) * 2011-02-28 2012-09-07 이화여자대학교 산학협력단 피라졸 유도체를 포함하는 심혈관 질환 예방 및 치료용 조성물.
CN113264900A (zh) * 2021-06-07 2021-08-17 南京中医药大学 一种苯并异噻唑和苯并噻吩的制备方法及其医药用途

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DATABASE REGISTRY 15 February 2002 (2002-02-15), ANONYMOUS: "- 1H-Pyrazole-3-acetonitrile, 5-amino-4-cyano-.alpha.-[(3,4,5- trimethoxyphenyl)methylene]- (CA INDEX NAME)", XP093161712, Database accession no. 392701-94-9 *
YU YANCHENG; YU QUANWEI; LIU SIMENG; WU CHENYANG; ZHANG XIAOJIN: "Insight into the binding mode of HIF-2 agonists through molecular dynamic simulations and biological validation", EUROPEAN JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY, ELSEVIER, AMSTERDAM, NL, vol. 211, 7 November 2020 (2020-11-07), AMSTERDAM, NL , XP086465940, ISSN: 0223-5234, DOI: 10.1016/j.ejmech.2020.112999 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2019078452A1 (ko) 신규한 유도체를 유효성분으로 포함하는 tnf-관련 질환 예방 또는 치료용 조성물 및 이를 이용한 tnf 활성 억제 방법
WO2014171801A1 (ko) 아미도피리딘올 유도체 또는 이의 약제학적 허용가능한 염 및 이를 유효성분으로 함유하는 약학조성물
WO2011159137A2 (ko) 신규한 티오우레아 또는 우레아 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 ａｉｄｓ 예방 또는 치료용 약학 조성물
WO2018004213A1 (ko) Smo 저해 활성을 갖는 신규 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 암 예방 또는 치료용 조성물
WO2020106119A1 (en) Pharmaceutical composition comprising histone deacetylase 6 inhibitors
WO2015026172A1 (ko) 세포괴사 저해제로서의 인돌아미드 화합물
WO2024085725A1 (ko) 신규 화합물 유도체 및 이의 약학적 용도
WO2017039395A1 (ko) 혈소판 응집 저해 효과를 갖는 화합물 및 그 염, 그리고 이를 포함하는 혈전성 질환 예방 또는 치료용 조성물
WO2022108377A1 (ko) O-GlcNAcase 저해 활성을 갖는 화합물 및 이의 용도
WO2022103149A1 (ko) 신규한 카바졸 유도체 및 이를 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2021215624A1 (ko) 신규의 2-아릴티아졸 유도체 또는 이의 염, 이의 제조방법, 및 이를 함유하는 약학 조성물
WO2020040343A1 (en) Isoxazole derivatives and preparation process thereof
WO2019231262A1 (ko) 신규 바이페닐 유도체 화합물 및 이의 용도
WO2018194372A1 (ko) 신규 sirt 1 활성화제 및 이의 의학적 용도
WO2019093699A1 (ko) 셀레노사마필린 a와 그 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 암 예방 및 치료용 조성물
WO2020080742A1 (en) Novel (isopropyl-triazolyl)pyridinyl-substituted benzooxazinone or benzothiazinone derivatives and use thereof
WO2018030840A1 (ko) 연조직 경화용 조성물
WO2015026170A1 (ko) 세포괴사 저해제로서의 인돌 화합물
WO2014185561A1 (ko) 신규한 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 이를 유효성분으로 함유하는 ｕｃｈ－ｌ１ 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2022019663A1 (ko) 벤조퓨란계 n-아실하이드라존 유도체를 포함하는 항염증 조성물
WO2017119570A1 (ko) 티아졸리딘디온 유도체 및 그의 용도
WO2023085894A1 (ko) RORα의 활성자로서의 신규한 티오우레아 유도체 및 이를 포함하는 약학적 조성물
WO2022225259A1 (ko) 세포 노화 및 세포사멸을 유도하는 항암 조성물
WO2023182871A1 (ko) 3-페닐이속사졸 유도체 및 이를 유효성분으로 함유하는 안질환 예방 또는 치료용 약학 조성물
WO2023055020A1 (ko) 피페론구민계 화합물을 유효성분으로 포함하는 혈관질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물