WO2023026398A1 - スポット光生成装置、光学情報検知装置及び顕微鏡 - Google Patents

スポット光生成装置、光学情報検知装置及び顕微鏡 Download PDF

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WO2023026398A1
WO2023026398A1 PCT/JP2021/031166 JP2021031166W WO2023026398A1 WO 2023026398 A1 WO2023026398 A1 WO 2023026398A1 JP 2021031166 W JP2021031166 W JP 2021031166W WO 2023026398 A1 WO2023026398 A1 WO 2023026398A1
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light
modulation
optical
lens
laser light
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PCT/JP2021/031166
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English (en)
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Inventor
祐市 小澤
Original Assignee
国立大学法人東北大学
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    • GPHYSICS
    • G02OPTICS
    • G02BOPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
    • G02B21/00Microscopes
    • G02B21/06Means for illuminating specimens

Definitions

  • the present invention relates to a spotlight generation device, an optical information detection device, and a microscope.
  • a device such as a scanning laser microscope, an image recording device, or a processing device
  • at least an incident light is applied to an irradiation object, and if necessary, emitted light from the irradiation object is detected, and the detected emitted light is used to determine the irradiation object.
  • obtain information about the optical properties of Needle spot light which spreads in a direction parallel to the optical axis rather than in a direction intersecting the optical axis, may be used as the laser light (incident light) to irradiate the irradiation target.
  • Patent Document 2 discloses an image recording apparatus provided with a filter having a nonlinear optical characteristic that transmits the peak portion of the needle spot light and absorbs the side lobe portion.
  • Patent Literature 3 discloses a laser beam shaping device that includes an axicon lens that converts incident laser light into needle spot light and an annular phase element arranged on the incident side of the axicon lens.
  • Patent Document 4 discloses a beam shaping module that includes a lens that collects light having multiple wavelengths and an aperture that is arranged in the focal plane of the lens and has a specific aperture structure.
  • Patent Document 5 discloses an optical device having a multiplexed beam generation means for generating multiplexed beams with reduced sidelobes by superimposing a plurality of Bessel beams so as to cancel each other's sidelobes.
  • the beam shaping module disclosed in Patent Document 3 includes a lens for collimating laser light, a lens for condensing laser light, and an aperture mask that constitutes an aperture structure. There are many, and it is difficult to save the space of the optical system. Furthermore, in the beam generating means of the optical device disclosed in Patent Document 4, it is complicated to adjust the intensity of the multiple Bessel beams that overlap each other.
  • a method using two-photon absorption can be cited as a method of suppressing the side lobe portion, which is different from the above methods.
  • the method of suppressing the side lobe portion of the needle spot light using two-photon absorption it is somewhat difficult to handle the light source that emits the ultrashort pulsed laser light, and the selection range of the wavelength of the needle spot light determined by the light source is narrow. .
  • microscopes using two-photon excitation and ultrashort pulses are expensive due to their complex structures.
  • a spot light generator that can use a laser light source that emits a continuous wave (CW), and that can suppress the side lobe portion with a simple configuration and a high degree of freedom. According to such a spotlight generating device, it is possible to provide an inexpensive device.
  • CW continuous wave
  • the present invention provides a spot light generating device capable of suppressing side lobe portions of needle spot light in a predetermined direction, for example, in which a plurality of detectors are arranged, with a simple configuration and a high degree of freedom, and an optical system equipped with the spot light generating device.
  • An information sensing device and a microscope are provided.
  • a spot light generating device includes an optical modulator having a modulation surface configured to enable spatial amplitude modulation of incident laser light, and the laser emitted from the optical modulator.
  • a condensing element for condensing the light, and a relay disposed between the optical modulator and the condensing element on the optical axis of the laser beam for transferring an image of the pupil plane of the condensing element to the modulation plane.
  • a lens On the modulating surface, a region that transmits or reflects the incident laser light is within a predetermined angular range with respect to positions symmetrical with respect to the center in an annular region having a predetermined radius and a predetermined width from the center. A pair of arc regions separated by the inner region is formed.
  • a spot light generation device includes a radial polarization element that converts the polarization of incident laser light into radial polarization, and a modulation surface that is configured to be capable of phase-modulating the laser light emitted from the radial polarization element.
  • a condensing element for condensing the laser beam emitted from the optical modulator; and a condensing element arranged between the optical modulator and the condensing element on the optical axis of the laser beam and a relay lens for image-transferring the pupil plane of the condensing element to the modulation plane.
  • an annular region having a predetermined radius and width from the center is formed as a region that transmits or reflects the incident laser light, and the center and the annular region are symmetrical with respect to the center.
  • the phases on both sides are opposite to each other with the boundary line passing through the position of .
  • An optical information detection device is formed by a light source that emits laser light, the above-described spot light generation device, and the laser light that is condensed by the condensing element of the spot light generation device, and In a direction parallel to the optical axis of the irradiation region when the sample is irradiated within the irradiation region of the needle spot light whose size in the direction parallel to the optical axis is larger than the size in the direction intersecting the optical axis a shift spot light conversion device for separating emitted light emitted from a plurality of positions different from each other in a predetermined direction on a light receiving surface that intersects the optical axis of the emitted light; and an optical information acquisition device having a photodetector that receives the emitted light separated in a predetermined direction, and acquiring optical information on the emission position of the emitted light.
  • the detection surface of the photodetector extends in a direction optically equivalent to a direction connecting the center of the
  • a microscope according to the present disclosure includes the optical information detection device described above and an image information creation device that creates image information about the sample based on the optical information acquired from the emitted light by the optical information acquisition device.
  • the side lobe portion of the needle spot light can be suppressed in a predetermined direction with a simple configuration and a high degree of freedom.
  • FIG. 1 is a schematic diagram of a detection optical system including a spotlight generating device according to a first aspect of the invention.
  • FIG. 2 is a schematic diagram for explaining a modulation pattern in an optical modulator of the spotlight generating device shown in FIG. 1;
  • FIG. 3 is a schematic diagram of a main part of a spotlight generating device according to a second aspect of the present invention.
  • FIG. 4 is a schematic diagram for explaining a modification of the modulation pattern in the optical modulator of the spotlight generating device shown in FIG.
  • FIG. 5 is a schematic diagram for explaining a modification of the modulation pattern in the optical modulator of the spotlight generating device shown in FIG.
  • FIG. 6 is a schematic diagram of a microscope according to a third aspect of the invention.
  • FIG. 1 is a schematic diagram of a detection optical system including a spotlight generating device according to a first aspect of the invention.
  • FIG. 2 is a schematic diagram for explaining a modulation pattern in an optical modulator of the spotlight generating device shown
  • FIG. 7 is an image showing the result of measuring the relationship between the modulation pattern in the optical modulator and the light intensity distribution of the needle spot in the first embodiment.
  • FIG. 8 is an image showing the result of measuring the relationship between the modulation pattern in the optical modulator and the light intensity distribution of the needle spot in the first embodiment.
  • FIG. 9 is an image showing the result of measuring the relationship between the modulation pattern in the optical modulator and the light intensity distribution of the needle spot in the first embodiment.
  • FIG. 10 is an image showing the result of measuring the relationship between the modulation pattern in the optical modulator and the light intensity distribution of the needle spot in the first embodiment.
  • FIG. 11 is an image showing the result of measuring the relationship between the modulation pattern in the optical modulator and the light intensity distribution of the needle spot in the first embodiment.
  • FIG. 12 is a graph showing the results of measuring the relationship between the defect angle and the ratio of the peak intensity of the first side lobe to the peak intensity of the central lobe in the first example.
  • FIG. 13 is a graph showing the results of measurement of the relationship between the missing angle and the central lobe half width in the first embodiment.
  • FIG. 14 is an image showing the result of measurement of the relationship between the amplitude modulation patterns with different defect angles and the emission distribution of the fluorescence from the sample in the second example.
  • a spot light generating device 10 includes at least an optical modulator 14, a lens 16, lenses 15 and 18, a light source 12, a lens 11, and a control and a device 200 .
  • the light source 12 emits a CW laser beam L1.
  • the lens 11 collimates the laser light L1 emitted from the light source 12.
  • the collimated laser beam L1 has a wider beam area than the modulating surface 114 of the optical modulator 14, which will be described below.
  • the optical modulator 14 has a modulating surface 114 that modulates at least the amplitude of the incident laser light L1. That is, the amplitude distribution (amplitude) of the laser light L1 incident on the modulating surface 114 of the optical modulator 14 is modulated by the modulation pattern of the modulating surface 114 .
  • a spatial light modulator capable of modulating the spatial distribution of light amplitude and phase is used.
  • SLMs include, for example, a liquid crystal spatial light modulator (LCOS-SLM) that performs the above-described modulation using a liquid crystal, and a microelectromechanical system (Micro Electro Mechanical Systems) that performs the above-described modulation using a micromirror.
  • a digital micromirror device Digital Micromirror Device: DMD with MEMS
  • a reflective LCOS-SLM capable of modulating the spatial phase distribution is used as the optical modulator 14, and an aperture 31 formed in a shielding plate 33 is combined between the lens 15 and the lens 18.
  • optical system is used. Since a reflective LCOS-SLM is used, laser light L1 incident on modulating surface 114 and laser light L1 emitted from modulating surface 114 travel within regions on the same side of modulating surface 114.
  • a transmissive LCOS-SLM may be used as the optical modulator 14 . In that case, the laser beam L1 collimated by the lens 11 is incident on the modulation surface 114 from the side opposite to the side from which the amplitude-modulated laser beam L1 is emitted.
  • a modulation surface 114 of the optical modulator 14 is arranged parallel to a plane containing the ⁇ axis and the ⁇ axis.
  • the ⁇ -axis and the ⁇ -axis are orthogonal to each other, and the plane including the ⁇ -axis and the ⁇ -axis intersects the optical axis A1 of the laser light L1 incident on the modulating surface 114 and the laser light L1 emitted from the modulating surface 114 .
  • the ⁇ -axis is orthogonal to the optical axis A1.
  • the ⁇ -axis is orthogonal to the ⁇ -axis and parallel to a plane containing the optical axis A1, and forms an angle with the optical axis A1.
  • a plurality of liquid crystal molecules are arranged on the modulation surface 114 of the optical modulator 14 .
  • the modulation amount of each of the plurality of liquid crystal molecules arranged on the modulation surface 114 is controlled by a controller 200 connected to the optical modulator 14 by wire or wirelessly.
  • Control device 200 is, for example, a computer. Specifically, a computer connected to the LCOS-SLM sets a desired amount of modulation for each of the plurality of liquid crystal molecules on the modulation surface 114 via dedicated software or the like, thereby adjusting each of the plurality of liquid crystal molecules to a desired level. is phase-modulated with the modulation value of
  • a Bessel beam is formed as the needle spot light LN formed by the lens 16. Therefore, among the plurality of liquid crystal molecules arranged on the modulating surface 114, the liquid crystal molecules included in the arc areas AC on the modulating surface 114 are modulated as shown in FIG. not modulated. Since the modulating surface 114 is modulated as described above, the arc areas AC, AC are areas where the reflectance of the incident laser light L1 is high. The total light reflectance (reflectance) of the laser light L1 in the arc areas AC is at least 50% or more, preferably 60% or more, and more preferably 80% or more.
  • the total light reflectance of the laser light L1 in the arc areas AC and areas other than AC is at least 20% or less, preferably 10% or less.
  • the laser beam L1 is mostly blocked by the arc areas AC on the modulation surface 114 and the areas other than AC.
  • the reflectance or transmittance of the modulation surface 114 means that the light modulator 14 is composed of a DMD or the like and the amount of reflection of the laser beam L1 is directly controlled by the modulation surface 114. and the optical modulator 14 is equipped with a modulator that performs only phase modulation as will be described later.
  • the amplitude of the laser light L1 is modulated by spatially separating the next light and the first light and allowing only the first light to pass through the aperture 31 (reflection or transmission of the modulated region on the modulation surface 114) the light amount of the laser light L1 that has passed through the aperture 31)/(the light amount of the laser light L1 that is incident on the modulated region on the modulation surface 114). corresponds to the case
  • the arc areas AC are cut from the annular area C having the center AQ, the outer diameter r 1 and the inner diameter r 2 to both sides in the circumferential direction at a predetermined angle from the position N intersecting the ⁇ axis. It is a missing region and is formed symmetrically with respect to the ⁇ axis.
  • twice the above-described predetermined angle that is, the angle at which the annular region C is cut in the circumferential direction will be referred to as the missing angle ⁇ .
  • the defect angle ⁇ is, for example, in the range of 20° to 60°, preferably 40° to 60°. Optimization of the missing angle ⁇ will be described later.
  • the plurality of liquid crystal molecules contained in the arc areas AC, AC are phase modulated in addition to the amplitude modulation.
  • a phase modulation amount exp[ikxsin( ⁇ ⁇ )] that tilts the wavefront of the incident laser light L1 by tilting the wavefront of the incident laser light L1 with respect to the liquid crystal molecules contained in each of the arc regions AC, is expressed.
  • the light distribution direction of the liquid crystal molecules is controlled.
  • i represents an imaginary unit
  • k represents a wave number
  • x represents a position on the modulation plane 114 in a direction parallel to the ⁇ axis
  • ⁇ ⁇ represents the above-described predetermined angle.
  • the laser light L1 irradiated onto the modulation surface 114 of the optical modulator 14 is reflected and diffracted as shown in FIG.
  • reflection means specular reflection unless otherwise specified.
  • the laser light L1 emitted from the optical modulator 14 passes through the lens 15, the aperture 31, and the lens 18 in sequence.
  • the lenses 15 and 18 are arranged at least between the optical modulator 14 and the lens 16 on the optical axis A1 of the laser beam L1. are a pair of relay lenses for transferring the image of the pupil plane of the optical modulator 14 to the modulation plane 114 of the optical modulator 14 .
  • the lenses 15 and 18 are provided as relay lenses of a so-called 4f optical system.
  • the distance between the modulation surface 114 of the optical modulator 14 and the center plane of the lens 15 on the optical axis A1 is approximately equal to the focal length of the lens 15 .
  • the distance between the center plane of the lens 15 and the center plane of the lens 18 on the optical axis A1 is substantially equal to the sum of the focal length of the lens 15 and the focal length of the lens 18 .
  • the distance between the center plane of the lens 18 and the pupil plane of the lens 16 on the optical axis A1 is substantially equal to the focal length of the lens 18 .
  • an aperture 31 such as a pinhole is arranged on the focal plane of the lens 15 (that is, the Fourier plane of the modulation plane 114) on the optical axis A1.
  • the aperture 31 formed in the lens 15 and the shielding plate 33 is provided between the optical modulator 14 and the half mirror 123 on the optical axis A1.
  • the primary light of laser light L ⁇ b>1 condensed by lens 15 passes through aperture 31 .
  • the zero-order light of the laser beam L1 that is reflected by the modulation surface 114 without being phase-modulated and condensed by the lens 15 is shielded by the shielding plate 33 in which the aperture 31 is formed.
  • the wavefront of the laser light L1 is projected in a predetermined area (that is, a pair of arc areas AC, AC) of the modulation surface 114 of the reflective LCOS-SLM constituting the optical modulator 14.
  • phase modulation is performed so that the amount of phase modulation that imparts tilt appears, the 1st order light and the 0th order light are spatially separated, the 0th order light is shielded by the shielding plate 33, and only the 1st order light is exposed to the aperture. 31 results in amplitude modulation of the laser light L1. That is, when the optical modulator 14 is provided with an SLM or the like that can only perform phase modulation on the modulation surface 114, the optical modulator 14 is forward in the traveling direction of the laser beam L1 and the half mirror 123 is in the traveling direction of the laser beam L1.
  • the modulating surface 114 With a pair of rearwardly disposed lenses 15, 18 and an aperture 31 formed between the lenses 15, 18, the modulating surface 114 enables spatial amplitude modulation of the laser light L1. It functions as a modulation surface configured to Aperture 31 is located in the focal plane of lenses 15 and 18 on optical axis A1. The primary light of the laser beam L 1 that has passed through the aperture 31 is reflected by the reflecting surface 123 a of the half mirror 123 and enters the lens 16 . The lens 16 condenses the incident laser light L1. An objective lens is used for the lens 16 .
  • the lens 16 forms a needle spot light LN within a condensing area including the focal plane of the lens 16 from the incident laser light L1.
  • the dimension g of the needle spot light LN in the direction parallel to the optical axis A1 is larger than the dimension w in the direction intersecting the optical axis A1 (for example, H direction and V direction in FIG. 1).
  • a Bessel beam formed as needle spot light LN is a beam in which interference produces a central lobe E1 (ie, central spot) having a higher light intensity axially along the propagation axis than in the surroundings.
  • the light intensity distribution in the radial direction (the H direction and the V direction in FIG. 1) of the Bessel beam is represented by the square of the Bessel function, as the name suggests, and is described by the Bessel function of the first kind.
  • An intersection plane BX that intersects the optical axis A1 of the laser light L1 condensed by the lens 16 is a plane that includes the H direction and the V direction.
  • the H direction and the V direction are orthogonal to each other and orthogonal to the optical axis A1 of the laser beam L1 condensed by the lens 16 .
  • one direction with respect to the optical axis A1 is the +V direction
  • the other direction, that is, the direction parallel to and opposite to the +V direction is the -V direction.
  • the H directions one direction with respect to the optical axis A1 is the +H direction, and the other direction, that is, the direction parallel to and opposite to the +H direction is the -H direction.
  • a central lobe E1 appears at the center of the needle spot light LN, and a side lobe portion E2 appears at the outer periphery of the central lobe E1.
  • the side lobe portion E2 includes a plurality of side lobes appearing outside the central lobe E1 in the radial direction with respect to the center of the central lobe E1.
  • second side lobe SS2, . . . , m-th side lobe SSm are formed.
  • FIG. 1 is only schematically shown so that the side lobes SSm of the central lobe E1 and the side lobe portions E2 are sequentially spaced outward from the center side in the radial direction.
  • the light intensity distribution of the central lobe E1 and the side lobe portion E2 is represented by a continuous Bessel function of the first kind.
  • the position of the peak value of the highest light intensity of the central lobe E1 is the position through which the optical axis A1 passes.
  • the highest light intensity in each of the side lobes SSm of the central lobe E1 and the side lobe portion E2 may be referred to as "peak intensity”.
  • the peak intensity of the central lobe E1 is the highest, and the peak intensity of each side lobe SSm of the side lobe portion E2 is lower than the peak intensity of the central lobe E1.
  • the peak intensity of the second side lobe SS2 is lower than the peak intensity of the first side lobe SS1.
  • the relationship between the peak intensity of the (m+1)th sidelobe SS(m+1) and the peak intensity of the mth sidelobe SSm is determined by the modulation surface 114 of the optical modulator 14. varies depending on the missing angle ⁇ of the modulation pattern of .
  • the peak intensity of the first sidelobe SS1 increases as the defect angle ⁇ increases from 0° to 90°.
  • m is 2 or more, whether the peak intensity of the m-th sidelobe SSm increases or decreases as the defect angle ⁇ increases from 0° to 90° depends on the value of the defect angle ⁇ and m.
  • the light intensity attenuates while repeatedly decreasing and increasing according to the Bessel function of the first kind. That is, the peak intensity of the central lobe E1 is the highest, and the peak intensity of each side lobe SSm of the side lobe portion E2 is lower than the peak intensity of the central lobe E1.
  • the peak intensity of the (m+1)-th side lobe SS(m+1) is smaller than the peak intensity of the m-th side lobe SSm.
  • the peak intensity of the first sidelobe in the ⁇ H direction is lower than the peak intensity of the first sidelobe in the ⁇ V direction.
  • the peak intensity of the first sidelobe SS1 decreases as the defect angle ⁇ increases from 0° to 90°, and the peak intensity of the mth sidelobe SSm decreases even if m is 2 or more. do. That is, in the ⁇ H direction, as the defect angle ⁇ increases from 0° to 90°, the peak intensity of the first sidelobe SS1 is the same as the peak intensity of the first sidelobe SS1. is similarly reduced, and the overall light quantity of the side lobe portion E2 is suppressed.
  • the ratio of the peak intensity of the first side lobe SS1 to the peak intensity of the central lobe E1 in the ⁇ H directions is smaller than the ratio of the peak intensity of the first side lobe SS1 to the peak intensity of the central lobe E1 in the ⁇ V directions. Also, the ratio of the total light amount of the side lobe portions E2 to the central lobe E1 in the ⁇ H directions is smaller than the ratio of the total light amount of the side lobe portions E2 to the central lobe E1 in the ⁇ V directions.
  • the laser light L1 emitted from the light source 12 and condensed by the lens 16 is parallel to the ⁇ -axis of the modulation surface 114 of the optical modulator 14 and the V direction of the cross plane BX. It propagates at a substantially constant position in the vertical direction.
  • the side lobe portions E2 are suppressed in the ⁇ H directions more than in the ⁇ V directions because the optical modulator 14 is positioned after the optical modulator 14 on the optical axis A1 of the laser light L1 (that is, in the traveling direction of the laser light L1).
  • the ⁇ -axis of the modulating surface 114 uniquely corresponds to the H direction of the intersecting plane BX because the lens 16 is arranged in the front).
  • the portion of the modulation surface 114 shown in FIG. contribute to the suppression of
  • the ⁇ H directions in which the sidelobe portion E2 is well suppressed on the crossing plane BX uniquely correspond to the direction on the modulation plane 114 of the optical modulator 14 are the traveling direction of the laser light L1 emitted from the optical modulator 14 and It is determined by the presence or absence of bending of the optical axis A1 and the number of times of bending.
  • the control device 200 gives predetermined amplitude and phase modulation values to each of the plurality of liquid crystal molecules arranged on the modulation surface 114 of the optical modulator 14 .
  • the control device 200 is included in the arc areas AC of the modulation surface 114 based on the relationship between the missing angle ⁇ and the degree of suppression (sometimes referred to as suppression amount) of the side lobe portion E2 of the needle spot light LN. Amplitude modulation and phase modulation of liquid crystal molecules are performed.
  • the needle spot light LN is irradiated to minute regions P1, P2, and P3 at different positions on the optical axis A1 in the irradiation region of the central lobe E1
  • the needle spot light LN is irradiated with the needle spot light LN.
  • a substance (not shown) that causes an optical reaction and emits light L2 in a direction substantially parallel to and opposite to the incident direction of laser light L1
  • each of minute regions P1, P2, and P3 is formed by formation of needle spot light LN.
  • the light L2 is emitted from.
  • Light L2 is transmitted through reflecting surface 123a of half mirror 123 .
  • an optical modulator 32, a lens 25, and a plurality of photodetectors 42 are sequentially arranged ahead of the half mirror 123 in the traveling direction of the light L2. If the wavelength bands of the laser light L1 and the light L2 are different from each other, a dichroic mirror is used instead of the half mirror 123.
  • FIG. 1 An optical modulator 32, a lens 25, and a plurality of photodetectors 42 are sequentially arranged ahead of the half mirror 123 in the traveling direction of the light L2. If the wavelength bands of the laser light L1 and the light L2 are different from each other, a dichroic mirror is used instead of the half mirror 123.
  • the optical modulator 32 has a modulating surface 132 that modulates at least the amplitude of the incident light L2.
  • a plurality of liquid crystal molecules (not shown) are arranged on the modulation surface 132 .
  • the modulation amount of each of the plurality of liquid crystal molecules arranged on the modulation surface 132 is controlled by a controller (not shown) connected to the light modulator 32 .
  • the control device (not shown) is, for example, a computer, and may be provided exclusively for the optical modulator 32 or shared with the control device 200 .
  • a computer-generated hologram (CGH) 210 is formed on the modulating surface 132 of the light modulator 32 .
  • the CGH 210 is a transmissive hologram optical element that diffracts the incident light L2 and deflects the transmitted light through the lens 25, and realizes wavefront reconstruction using diffraction.
  • the light L2 emitted from each of the minute regions P1, P2, and P3 by being irradiated with the needle spot light LN is the object light of the CGH 210.
  • FIG. The CGH 210 shifts the displacement in the direction (z direction in FIG. 1) along the optical axis of the object light parallel to the optical axis A1 (that is, the optical axis A2 of the light L2) to the image plane at the imaging distance lz from the modulation surface 132.
  • a linear transformation is performed to the displacement of the IP in the H direction.
  • the amplitude distribution and phase distribution of the CGH 210 are not specified as long as the functions of the CGH 210 described above can be expressed, and may be, for example, the phase distribution determined based on Equation (6) disclosed in Japanese Patent Application Laid-Open No. 2019-117233.
  • the CGH designed by the above formula (6) is a two-dimensional phase-type multiple CGH. Specifically, the phase control pattern of the plurality of liquid crystal molecules included in the region forming the CGH 210 on the modulation surface 132 of the optical modulator 32 corresponds to the CGH pattern designed according to the above-described formula (6). CGH 210 can be displayed on surface 132 .
  • the CGH 210 or a modulation pattern other than the CGH 210 formed on the modulation surface 132 does not affect the wavefront of the incident light L2 at least in the H direction.
  • the irradiation of the sidelobe portion E2 suppressed in the H direction and the optical effect due to the irradiation hardly occur in each of the minute regions P1, P2, and P3.
  • the maximum light intensity and the light amount of the light L2 in the H direction are lower than the maximum light intensity and the light amount in the V direction on the intersection plane (not shown) that intersects the optical axis A2.
  • the modulating surface 132 the light L2 from each of the minute regions P1, P2, and P3 is diffracted, and an Airy beam curved so as to draw a parabola with respect to the optical axis A2 on the image plane IP through the lens 25 is formed.
  • a modulation pattern may be formed having an amplitude distribution or a phase distribution that forms . In that case, the condensing positions on the image plane IP of the Airy beams into which the light L2 from each of the minute regions P1, P2, and P3 is converted are different from each other.
  • the light L2 incident on the CGH 210 is diffracted by the CGH 210 and formed into an image by the lens 25 on the image plane IP.
  • the detection surfaces 142 of the plurality of photodetectors 42 are arranged along the H direction in the light collection area where the light L2 is collected on the image plane IP. Details of the condensing region are not shown in FIG. It is a region including positions Q1, Q2, and Q3.
  • the light L2 emitted from each of the minute regions P1, P2, and P3 is imaged by the CGH 210 at different positions Q1, Q2, and Q3 on the image plane IP, and the light detectors arranged at each of the positions Q1, Q2, and Q3. detected by device 42 . That is, the light L2 emitted from each of the minute areas P1, P2, and P3 is detected by the photodetectors 42 different from each other.
  • the detection of the light L2 at the image plane IP using a plurality of photodetectors 42 provides high contrast or signal-to-noise ( A Signal to Noise (SN) ratio is obtained.
  • the CGH 210 is not limited to linearly transforming the displacement in the z direction parallel to the optical axis A2 into the displacement in the H direction of the image plane IP, and may linearly transform the displacement in the V direction.
  • the detection surfaces 142 of the plurality of photodetectors 42 are arranged along the V direction. The light L2 emitted from each of the minute regions P1, P2, and P3 is separated in the V direction onto different detection surfaces 142 of the photodetector .
  • the control device 200 uses, as evaluation parameters, the FWHM of the central lobe E1 on the intersection plane BX, the FWHM of the first side lobe SS1, the ratio of the peak intensity of the central lobe E1 to the peak intensity of the first side lobe SS1, and the FWHM of the central lobe E1. At least one of the ratio between the amount of light and the amount of light of the side lobe portion E2 may be calculated.
  • the light receiving surface of a photodetector (not shown) is arranged on the intersecting plane BX of the irradiation area of the needle spot light LN, and the control device 200 is connected to the photodetector by wire or wirelessly, and the light is received by the photodetector.
  • control device 200 is connected to the plurality of photodetectors 42 by wire or wirelessly, acquires electrical output information representing the light intensity received by each of the plurality of photodetectors 42, and uses the image plane as an evaluation parameter. You may calculate the detection accuracy of the light L2 in IP, a contrast, or an SN ratio.
  • the control device 200 can set the defect angle ⁇ on the modulation surface 114 of the optical modulator 14 so that the aforementioned evaluation parameter satisfies a predetermined standard.
  • the spot light generating device 10 of the first aspect described above includes a reflective optical modulator 14 having a modulating surface 114 configured to enable spatial amplitude modulation of the incident laser beam L1. , a lens (condensing element) 16 for condensing the laser light L1 emitted from the optical modulator 14, and a lens (condensing element) 16 disposed between the optical modulator 14 and the lens 16 on the optical axis A1 of the laser light L1. and lenses (relay lenses) 15 and 18 for transferring the image of the pupil plane of the optical modulator to the modulation plane 114 .
  • a pair of circular arc areas AC are formed as reflection areas (areas) that modulate the amplitude of the incident laser light L1 and reflect the laser light L1.
  • the circular arc regions AC, AC are lost with reference to positions N, N symmetrical with respect to the center AQ in the annular region C having a predetermined radius r3 and a predetermined width t from the center AQ. It is an area that remains after being divided by a division area (area within a predetermined angle range) NC within the range of an angle (predetermined angle) ⁇ .
  • the positions N, N and the center AQ are arranged on a straight line forming a diameter.
  • Radius r 3 is represented by outer radius r 1 and inner radius r 2 as (r 1 +r 2 )/2 and is less than or equal to the radius of the region on modulating surface 114 corresponding to the pupil region of lens 16 .
  • the laser light L1 incident on the optical modulator 14 is modulated by the pair of arc areas AC, AC of the modulation surface 114 mutually conjugate with the pupil plane of the lens 16, and emitted from the modulation surface 114.
  • a needle spot light LN having a dimension g larger than the dimension w is formed.
  • the dimensions w, g are determined by the radius r3 and the radial width t.
  • a Bessel beam is formed as the needle spot light LN.
  • the spot light generating device 10 in the annular region C of the modulation surface 114, the division regions NC, NC facing each other in the direction parallel to the ⁇ axis are cut, so that the cross plane BX of the needle spot light LN
  • the side lobe portion E2 is suppressed more than the central lobe E1 in the H direction.
  • the light intensity distribution on the axis parallel to the H direction of the intersecting plane BX of the needle spot light LN is a distribution that appears when the light intensity distribution on the ⁇ -axis of the modulation surface 114 of the optical modulator 14 is converted by the Fourier transform function of the lens 16 . be.
  • the spotlight generating device 10 by separating the pair of arcuate areas AC of the modulation surface 114 of the optical modulator 14 from each other at the position N of the ⁇ -axis in the circumferential direction by the dividing area NC having the missing angle ⁇ ,
  • the side lobe portion E2 in the H direction (predetermined direction) of the needle spot light LN can be easily suppressed.
  • the side lobe portion E2 is suppressed. can prevent the light L2 (that is, the response light) from the minute region described above from entering the detection surface 142 of the photodetector 42 in the H direction of the image plane IP and being detected.
  • a reflective LCOS-SLM is used as the optical modulator 14, but a transmissive LCOS-SLM may be used as the optical modulator 14 depending on the arrangement required for the spot light generating device 10.
  • the total light transmittance (transmittance) of the laser light L1 in the arc areas AC on the modulation surface 114 is at least 50% or more, preferably 60% or more, and 80% or more. is more preferable.
  • the total light transmittance of the laser beam L1 in the arc areas AC and areas other than AC is at least 20% or less, preferably 10% or less. Even in this case, the laser light L1 is mostly blocked by the arc areas AC on the modulation surface 114 and the areas other than AC.
  • the LCOS-SLM which is an active element
  • the optical modulator 14 a pair of arc regions AC, AC are formed as openings in the shielding plate. Molded plate elements or the like may also be used. If the optical modulator 14 is a modulator that can directly amplitude-modulate the wavefront of the laser beam L1 on the modulating surface 114, such as the DMD or the plate element described above, then the lens 15 and the It is not necessary to dispose the shielding plate 33 having the aperture 31 between the lens 18 and the lens 18 .
  • the transmittance or reflectance of the laser light L1 in each of the arc area AC and the dividing area NC changes discontinuously in the circumferential direction.
  • the total light transmittance of the laser light L1 in each of the arc area AC and the division area NC is constant in the circumferential direction.
  • the total light transmittance of the laser light L1 in the arc area AC and the total light transmittance of the laser light L1 in the segmented area NC are different from each other.
  • the optical modulator 14 can be easily configured and prepared. .
  • needle spot light (spot light) LN formed from laser light L1 condensed by lens 16 is irradiated, and light L2 generated from each of minute regions P1, P2, and P3 is detected.
  • a plurality of photodetectors 42 are provided. Light L2 generated from minute regions P1, P2, and P3 is detected by photodetectors 42 different from each other.
  • the spotlight generation device 10 of the first aspect can acquire information about the light intensity of the light L2 from the plurality of photodetectors 42 with high contrast and SN ratio.
  • the H direction (first direction) in which the detection surface 142 of the photodetector 42 extends is defined by the center AQ of the modulation surface 114 of the optical modulator 14 and the position symmetrical with respect to the center AQ. It has a relative relationship with a direction (second direction) parallel to the connecting ⁇ axis. That is, the H direction and the direction parallel to the ⁇ -axis are in one-to-one correspondence. The H direction and the direction parallel to the ⁇ axis are uniquely associated with each other by the Fourier transform function of the lens 16 . In the spot light generating device 10 shown in FIG.
  • H directions are orthogonal to the direction parallel to the ⁇ axis.
  • an optical system such as a relay lens is arranged between the optical modulator 14 and the lens 16 on the optical axis A1 of the laser beam L1, or when a mirror is arranged for vertically folding the optical axis A1.
  • the H direction may be parallel to the ⁇ axis depending on the action of the optical system and mirrors while maintaining the relative relationship based on the Fourier transform described above. There is also the possibility of tilting at an angle of less than 90°.
  • a missing angle ⁇ can be set. That is, it is possible to easily set the direction in which the side lobe portion E2 of the needle spot light LN is suppressed.
  • the plurality of photodetectors 42 described above may be provided in the spotlight generation device 10 or may be provided in an optical device separate from the spotlight generation device 10 .
  • the spotlight generation device 10 of the first aspect further includes a control device 200 that controls the amplitude modulation amount of the modulation surface 114 of the active optical modulator 14 .
  • the control device 200 calculates, for example, the ratio of the peak intensity of the first side lobe SS1 (the side lobe closest to the central lobe) to the peak intensity of the central lobe E1 in the H direction of the light L2 generated by the needle spot light LN ( ) and the FWHM (full width at half maximum) of the central lobe E1 can be obtained from the plurality of optical modulators 14 .
  • the controller 200 sets the defect angle ⁇ on the modulation surface 114 of the optical modulator 14 according to at least the information on the peak intensity ratio and the FWHM.
  • the ratio of the total light amount of the side lobe portion E2 to the light amount of the central lobe E1 also increases, the light amount detected by the predetermined photodetector 42 decreases, and the predetermined light The amount of light detected by the photodetector 42 other than the detector 42 increases, resulting in an increase in the SN ratio.
  • the aforementioned predetermined value is appropriately set according to the SN ratio set in the photodetector 42, the minimum detectable light intensity, the dark current value, and the like.
  • the FWHM of the central lobe E1 becomes larger than a predetermined size
  • the light L2 incident on the detection surface 142 of the predetermined photodetector 42 protrudes excessively from the detection surface 142, and the amount of light received by the predetermined photodetector 42 decreases. As it decreases, there is a possibility that it may enter the detection surface 142 of another photodetector 42 adjacent in the H direction.
  • the aforementioned predetermined size is appropriately set according to the effective area of the detection surface 142 of the photodetector 42 .
  • the control device 200 sets the defect angle so that the peak intensity ratio increases, under the minimum condition that both the peak intensity ratio is equal to or less than a predetermined value and the FWHM of the central lobe E1 is equal to or less than a predetermined size.
  • may be set.
  • the defect angle ⁇ is optimized according to the peak intensity ratio, the information on the FWHM of the central lobe E1, and the degree of suppression of the side lobe portion E2, and the light L2 caused by the central lobe E1 can be obtained with high accuracy. can be detected.
  • control device 200 uses the aforementioned peak intensity ratio and the central lobe E1 For example, other suitable parameters may be assumed besides the FWHM of .
  • the peak intensity ratio, the FWHM of the central lobe E1, and the values of the parameters for performing the above evaluation are obtained by arranging a plurality of photodetectors or imaging devices (not shown) on a plane that is optically equivalent to the intersecting plane BX. , is obtained by connecting the photodetector or imaging device and the control device 200 by wire or wirelessly.
  • the plane that is optically equivalent to the intersecting plane BX is, for example, a direction different from the direction in which the laser beam L1 travels from the optical modulator 14 to the half mirror 123 on the optical axis A1 between the optical modulator 14 and the half mirror 123. 2 is a condensing surface when the branched laser beam L1 is condensed by a lens having the same specifications as the lens 16.
  • the light L2 generated by the needle spot light LN generated by the spot light generating device 10 is detected by the plurality of photodetectors 42, but the application of the needle spot light LN is a minute area within the irradiation area. It is not limited to generating light L2 at P1, P2, and P3.
  • the workpiece placed in the irradiation area of the needle spot light LN may be processed in the H direction, and optical information is recorded in the H direction on the recording medium placed in the irradiation area of the needle spot light LN. good too.
  • the half mirror 123 and the optical modulator 32 , the lens 25 and the photodetector 42 may be omitted, and the lens 16 may be arranged so that the optical axis A1 from the modulation surface 114 of the optical modulator 14 to the lens 16 is straight without folding.
  • a radial polarizing element 140 is arranged between the lens 11 and the optical modulator 14 on the optical axis A1 of the laser light L1 of the spot light generating device 10 .
  • the radial polarizing element 140 has a known configuration, and may be, for example, an element in which a birefringent nanolattice is formed inside a quartz substrate.
  • the polarization state of the laser light L1 collimated by the lens 11 is linear polarization, but as shown in FIG. 3, the polarization state of the laser light L1 incident on the radial polarization element 140 is radial polarization (also called radial polarization). is.
  • the light intensity distribution of the laser light L1 converted into radially polarized light has a donut shape centered on the optical axis A1 on a plane that intersects the optical axis A1.
  • the polarization directions of the laser light L1 converted into radially polarized light are radially distributed around the optical axis A1 in the plane intersecting the optical axis A1.
  • the electric field vector E ( ⁇ , ⁇ ) of the laser light L1 converted into radially polarized light is given by It is represented by the following formula (1).
  • represents an angle in the circumferential direction with respect to one side of the ⁇ -axis on a plane that includes the ⁇ -axis and the ⁇ -axis and is parallel to the modulation surface 114 .
  • the first row represents the horizontal polarization component and the second row represents the vertical polarization component.
  • a reflective LCOS-SLM capable of modulating the spatial phase distribution is used as the optical modulator 14, and a shielding plate is provided between the lens 15 and the lens 18.
  • An optical system combining an aperture 31 formed at 33 is used.
  • the missing angle ⁇ is 0°
  • the dividing region NC is not formed
  • the annular region C is formed.
  • the total light reflectance (reflectance) of the laser beam L1 is at least 50% or more, preferably 60% or more, and more preferably 80% or more.
  • the total light reflectance of the laser beam L1 in the region other than the annular region C on the modulation surface 114 is at least 20% or less, preferably 10% or less.
  • a boundary line LQ passing through the center AQ of the modulation surface 114 and parallel to the ⁇ axis one side is given the phase 0 and the other side is given the phase ⁇ . That is, on the modulation surface 114, the light distribution direction of the liquid crystal molecules is controlled so that the phase inversion of 0- ⁇ occurs with the boundary line LQ as the boundary.
  • the light distribution directions of the plurality of liquid crystal molecules included in the annular region C are controlled so as to develop the phase modulation amount exp[ikxsin( ⁇ ⁇ )].
  • the laser beam L1 irradiated onto the modulating surface 114 of the optical modulator 14 is amplitude-modulated and phase-modulated by the modulating surface 114 and reflected as shown in FIG.
  • the zero-order light is so-called background light and includes the vertically polarized component of the above equation (1).
  • the laser light L1 irradiated onto the modulation surface 114 only the horizontally polarized component is extracted in the primary light, and the primary light has the amplitude modulation component of cos ⁇ in the first row of the above equation (1).
  • the laser beam L1 is composed of a pair of arcuate beams LA and LA that are linearly symmetrical with respect to the ⁇ axis and the V direction when viewed from a plane that intersects the optical axis.
  • the modulation surface 114 of the optical modulator 14 is phase-modulated so as to cause a phase inversion of 0- ⁇ with the boundary line LQ as a boundary, so the pair of arcuate beams LA and LA are in phase with each other.
  • the modulation plane 114 were not phase-modulated with a population inversion of 0- ⁇ , the polarization directions of the pair of arcuate beams LA and LA would be reversed from the optical axis A1 along the ⁇ axis and the H direction due to radial polarization. , and the pair of arcuate beams LA, LA are in phases different from each other. Since the pair of circular arc beams LA and LA are in phase with each other, the 1st-order light of the laser light L1 emitted from the modulation surface 114 is amplitude-modulated by
  • the pair of arcuate beams LA, LA are in phase with each other and are amplitude-modulated by
  • a needle spot light LN having a high peak is formed.
  • the side lobe portion E2 in the H direction of the needle spot light LN is suppressed.
  • the overall light intensity of the side lobe portion E2 of the needle spot light LN is suppressed more strongly than the light intensity of the central lobe E1, as compared with the spotlight generating device 10 of the first aspect. be.
  • the spotlight generation device of the second aspect described above has the same configuration as the spotlight generation device 10 of the first aspect, and thereby achieves the same configuration effect.
  • the spot light generation device of the second aspect includes a radial polarization element 140 that converts the polarization of the incident laser beam L1 into radial polarization, and a phase modulation of the laser beam L1 emitted from the radial polarization element 140.
  • An optical modulator 14 having a structured modulation surface 114, a lens (condensing element) 16 for condensing the laser light L1 emitted from the optical modulator 14, and an optical modulator on the optical axis A1 of the laser light L1.
  • the modulation surface 114 is configured to allow spatial amplitude modulation of the incident laser light L1.
  • the modulation surface 114 of the optical modulator 14, which is conjugate with the pupil surface of the lens 16 has an annular shape with a radius r3 from the center AQ and a width t as a region for reflecting the incident laser light L1. A region C is formed.
  • the phases on both sides are opposite to each other with a boundary line LQ passing through the center AQ of the annular region C and the positions N, N of the annular region C that are symmetrical with respect to the center AQ. . That is, on the modulation surface 114, the laser beam L1 to be irradiated is phase-modulated so as to be given a phase inversion of 0- ⁇ with the boundary line LQ as a boundary.
  • the radially polarized laser beam L1 is applied to the modulation surface 114 that has been amplitude-modulated and phase-modulated as described above, and the pair of arc beams LA, LA is formed from the modulation surface 114.
  • the laser light L1 is emitted.
  • a pair of arcuate beams LA, LA are in phase with each other and are amplitude-modulated by
  • the side lobe portion E2 is favorably suppressed with respect to the central lobe E1 in the H direction of the intersecting surface BX.
  • the spotlight generating device of the second aspect in the H direction, the light amount of the side lobe portion E2 including the plurality of side lobes SSm in addition to the first side lobe SS1 can be suppressed as much as possible.
  • a mask may be used in which the reflectance of the irradiated laser light L1 changes continuously by
  • the polarized light of the laser light L1 irradiated onto the modulating surface 114 does not have to be radial polarized light, and may be linearly polarized light, and the radial polarizing element 140 can be omitted.
  • the side lobe portion E2 of the needle spot light LN can be easily suppressed in the H direction, as in the first and second aspects. can.
  • the microscope 300 of the third aspect includes at least an optical information detection device 150 and further includes a light source 12 and an image information creation device 60 .
  • the optical information detection device 150 includes the spotlight generation device 100 , the shifted spotlight conversion device 30 , and the optical information acquisition device 40 .
  • the light source 12 emits laser light L1 having an excitation wavelength of fluorescence L3 generated by exciting the sample S when the sample S is irradiated with the needle spot light LN, which will be described later.
  • the sample S is irradiated with the needle spot light LN whose size in the direction parallel to the optical axis A1 is larger than the size in the direction crossing the optical axis A1 of the laser light L1.
  • the longitudinal direction of the needle spot light LN when the sample S is irradiated is substantially parallel to the thickness direction of the sample S and substantially parallel to the z direction.
  • the emitted light emitted from each of a plurality of different detection regions included in the irradiation region R of the needle spot light LN on the sample S is converted into the shifted spot light L4.
  • the detection regions are sequentially positioned along the longitudinal direction of the needle spot light LN when the sample S is irradiated.
  • the shifted spot light L4 emitted from each of the plurality of detection areas reaches different positions on the light receiving surface M intersecting the optical axis A2.
  • Optical information of each of the plurality of detection areas is detected from information such as the light intensity of the shifted spot light L4 received by the light receiving surface M.
  • the spot light generating device 100 includes at least an optical modulator 14, a lens 16, a light source 12, mirrors 13, 19, 21, 162, 170, lenses 15, 18, 166, 168, 20, 22, Aperture 31 is further provided.
  • the light source 12 emits laser light L1 having a predetermined wavelength and optical characteristics such as light intensity and power.
  • the optical characteristics of the laser light L1 are such that when the needle spot light LN generated by conversion from the laser light L1 is irradiated onto the irradiation region of the sample S (irradiation region R is omitted in FIG. 6) from the direction D3, the irradiation region It is appropriately selected according to the conditions under which the light L2 emitted from the inside in a predetermined direction along the optical axis A2 can be obtained.
  • a fluorescent material is used as the sample S, for example.
  • the needle spot light LN formed from the laser light L1 is excitation light for the sample S.
  • the wavelength of the laser light L1 includes the fluorescence excitation wavelength of the sample S.
  • the optical information detection device 150 is configured to detect fluorescence (emitted light) L3 as the light L2 emitted from the sample S, the above-described predetermined direction corresponds to the incidence of the needle spot light LN on the sample S.
  • direction is meant a direction substantially parallel and opposite to the z-direction.
  • the fluorescence is emitted in a direction (predetermined direction) substantially parallel to and opposite to the z direction. Fluorescence can be detected.
  • the spot light generating device 100 In the spot light generating device 100, along the optical axis A1 of the laser light L1 emitted from the light source 12, from the rear to the front in the traveling direction of the light, between the emission surface of the light source 12 and the surface of the sample S on the incident side.
  • Mirror 13, optical modulator 14, lens 15, aperture 31, lens 18, dichroic mirror 124, mirror 162, lenses 166, 168, mirrors 170, 19, lens 20, mirror 21, lenses 22, 16 are sequentially arranged.
  • a laser beam L1 emitted from the light source 12 travels along the optical axis A1, is reflected by the mirror 13, and enters the optical modulator .
  • the laser light L1 amplitude-modulated or phase-modulated by the optical modulator 14 is diffracted by the optical modulator 14, emitted from the optical modulator 14, and travels along the optical axis A1 from the lens 15 via each optical element. do.
  • Lenses 15, 18, lenses 166, 168, and lenses 20, 22 are each suitably positioned to relay the pupil plane of lens 16 to modulation plane 114 of light modulator 14 on optical axis A1. . That is, the modulation plane 114 is equivalent to the pupil plane of the lens 16.
  • FIG. As described in the first aspect, an aperture 31 is arranged in the focal plane of the lenses 15, 18 on the optical axis A1.
  • the primary light of the laser beam L1 that has passed through the aperture 31 is reflected by the reflecting surface 124a of the dichroic mirror 124 and enters the mirror 162. As shown in FIG.
  • the mirror 162 is provided for scanning in the y direction of the x direction and the y direction, which are parallel to and orthogonal to the mounting surface of the stage T on which the sample S is mounted. Specifically, the support member 164 that supports the mirror 162 rotates in the ⁇ 1 direction, thereby scanning the laser beam L1 in the y direction. A mirror 162 is placed at a position where the pupil plane of the lens 16 is transferred. Laser light L1 reflected by mirror 162 enters mirror 170 through lenses 166 and 168 that constitute a relay lens system. Mirror 170 is provided at a position where the image is transferred by lenses 166 and 168 from a position optically equivalent to the pupil plane where mirror 162 is arranged. A mirror 170 is provided for scanning in the x-direction.
  • the support member 172 that supports the mirror 170 rotates in the ⁇ 2 direction, thereby scanning the laser beam L1 in the x direction.
  • the laser beam L 1 reflected by the mirror 170 is reflected by the mirror 19 , passes through the lens 20 , is reflected again by the mirror 21 , passes through the lens 22 , and enters the lens 16 .
  • the laser beam L1 emitted from the lens 22 along the optical axis A1 is incident on the lens 16, and is condensed by the lens 16 in directions (x direction and y direction in FIG. 1) intersecting the optical axis A1.
  • a needle spot light LN extending in a direction parallel to the axis A1 (the z-direction in FIG. 1) and spreading over an irradiation region R (not shown) inside the sample S is formed.
  • Lens 16 is supported by piezo scanner 190 .
  • the z-direction position of the lens 16 can be adjusted with high accuracy in order to finely adjust the observation position of the sample S (that is, the z-direction center position of the needle spot light LN) by the piezo scanner 190 .
  • the irradiation area is reliably irradiated with strong light, and the sample S having fluorescence properties in the irradiation area is excited all at once in the z direction.
  • the dimension g of the needle spot light LN is larger than the dimension w, the number of detection regions from which the optical information in the thickness direction, that is, the z direction of the sample S can be collectively acquired increases.
  • the sample S is mounted on the surface (mounting surface) of the stage T on the incident side of the laser beam L1.
  • the stage T is provided in the optical information detection device 150 by a supporting member or the like (not shown). Note that the stage T may be provided in the microscope 300, or may be provided in a device that is formed separately from the optical information detection device 150 or the microscope 300 and that is accessible to the optical information detection device 150. good.
  • Fluorescence L3 emitted from minute regions different from each other in the z-direction of the sample S travels halfway in the opposite direction to the route in which the laser light L1 enters the sample S, and passes through the lenses 16, 22, and 20 from the sample S. , 168 and 166 , are reflected by mirrors 21 , 19 , 170 and 162 and enter dichroic mirror 124 .
  • the fluorescence L3 passes through the reflecting surface 124a and the dichroic mirror 124 and enters the shifted spot light conversion device 30.
  • the shifted spot light conversion device 30 includes lenses 182 , 184 and 25 , an optical modulator 32 and a mirror 28 .
  • lenses 182 , 184 and 25 are sequentially arranged from the rear to the front in the traveling direction of light.
  • the shift spot light conversion device 30 shifts the fluorescence L3 emitted from a plurality of mutually different positions on the optical axis A1 within the irradiation area of the needle spot light LN on the sample S to the optical axis as it moves along the optical axis A2.
  • the light is converted into a shifted spot light L4 that shifts so that the condensed position on the image plane IP that intersects A2 changes according to the emission position of the fluorescence L3 on the sample S.
  • illustration of the image plane IP is omitted in FIG. 6, the detection planes 142 of the plurality of photodetectors 42 are arranged on the image plane IP.
  • the lenses 182 and 184 relay the image-transferred pupil plane of the lens 16 to the position where the mirror 162 is arranged on the optical axis A2 to the modulation plane 132 of the optical modulator 32. are arranged accordingly. That is, the modulation plane 132 is equivalent to the pupil plane of the lens 16.
  • FIG. The modulation pattern of the CGH 210 described in the first aspect is formed on the modulation surface 132 .
  • Optical information in the z direction of the fluorescence L3 emitted from each position in the z direction of the needle spot light LN is linearly transformed by the CGH 210 into the H direction. Shifted spot light L4 emitted from the modulation surface 132 of the optical modulator 32 enters the optical information acquisition device 40 .
  • the optical information acquisition device 40 receives the shifted spot light L4 incident from the shifted spot light conversion device 30, and acquires the optical information of the irradiation area of the needle spot light LN on the sample S from the information of the received shifted spot light L4.
  • the optical information acquisition device 40 includes a plurality of photodetectors 42 and an optical information acquisition device 48 .
  • the detection planes 142 of the plurality of photodetectors 42 are arranged in the H direction of the image plane IP.
  • the optical information acquisition device 48 is connected to the plurality of photodetectors 42 by wire or wirelessly, acquires information on the received amount of the shifted spot light L4 for each of the plurality of photodetectors 42, and is, for example, a computer.
  • the image information creation device 60 creates image information including a three-dimensional image from the information about the sample S acquired by the optical information acquisition device 40 and displays it on the monitor 62 .
  • the image information creating device 60 may be incorporated in a computer that constitutes the optical information acquiring device 48 . With such a configuration, the information of the shifted spot light L4 received by the optical information acquisition device 40 can be immediately displayed on a monitor or the like for visualization.
  • the light modulator 14 and the lens 16 are positioned on the optical axis A1 of the spot light generation device 10.
  • a mirror 162, a dichroic mirror 124 for folding back the optical axis A1, and mirrors 19 and 21 are arranged.
  • the reflecting surface of mirror 170 is optically equivalent to the pupil plane of lens 16. . Also, since the reflecting surface of the mirror 170 is image-transferred by the lenses 166 and 168 , the reflecting surface of the mirror 162 is optically equivalent to the pupil surface of the lens 16 . Furthermore, since the reflecting surface of the mirror 170 is image-transferred by the lenses 15 and 18 , the modulating surface 114 of the optical modulator 14 is optically equivalent to the pupil surface of the lens 16 . In the configuration of the optical information detection device 150 shown in FIG.
  • the modulation pattern of the modulation surface 114 of the optical modulator 14 is different from the modulation pattern of the modulation surface 114 in the configuration shown in FIG. It is rotated 90°. That is, in the configuration of the optical information detection device 150 shown in FIG. 6, a virtual line (not shown) connecting the center AQ of the modulation surface 114 of the optical modulator 14 and the positions N, N is parallel to the ⁇ axis, and the modulation surface Division regions NC, NC that divide the annular region C of 114 in the circumferential direction face each other in a direction parallel to the ⁇ axis.
  • the direction parallel to the ⁇ axis of the modulation surface 114 is optically equivalent to the y direction parallel to the mounting surface of the sample S on the stage T, and the optical modulation on the optical axis A1 It is transformed in the y-direction by each optical component between the device 14 and the lens 16 .
  • the direction parallel to the ⁇ axis of the modulation surface 114 is optically equivalent to the x direction parallel to the mounting surface of the sample S on the stage T, and the light on the optical axis A1 It is transformed in the x-direction by each optical component between modulator 14 and lens 16 .
  • the lens 20, the lens 20, and the lens 20 are arranged on the optical axis A2 of the fluorescence L3 emitted from the sample S between the image plane (light receiving plane) IP on which the lens 16 and the detection plane 142 of the photodetector 42 are arranged. 22, lenses 166, 168, lenses 182, 184, and mirrors 19, 21, 162, 170 for folding back the optical axis A2 of the fluorescence L3.
  • the course of the fluorescence L3 that is emitted from the sample S and reaches the dichroic mirror 124 from the lens 16 overlaps the course of the laser light L1 that is reflected by the dichroic mirror 124 and reaches the lens 16.
  • the course of the laser light L1 is It's the other way around.
  • Modulating surface 132 of light modulator 32 is optically equivalent to the pupil surface of lens 16 because the reflecting surface of mirror 170 is image-transferred by lenses 182 and 184 . Therefore, the y direction substantially parallel to the mounting surface of the stage T is converted to the +H direction of the image plane IP. Because the y-direction sidelobe portion E2 of the needle spot light LN is suppressed, and the wavefront of the fluorescence L3 is not affected or modulated in the course of the fluorescence L3 on the optical axis A2 from the lens 16 to the lens 25.
  • the H-direction sidelobe portion E2 of the fluorescence L3 is suppressed more than the V-direction sidelobe portion E2 at the image plane IP.
  • the detection surfaces 142 of the plurality of photodetectors 42 are arranged along the H direction, the position in the z direction where the fluorescence L3 is generated in the irradiation area of the needle spot light LN is detected.
  • the central lobe E1 of the fluorescence L3 is mainly incident on the detection surface 142 of the predetermined photodetector 42 .
  • the side lobe portion E2 is incident on the photodetectors 42 other than the predetermined photodetector 42 .
  • the plurality of photodetectors 42 detect the fluorescence L3 with high contrast and low SN ratio.
  • the control device 200 may be connected to the optical information acquisition device 40 by wire or wirelessly.
  • the control device 200 detects the intensity of light received by the predetermined photodetector 42 and the light adjacent to the predetermined photodetector 42 in the H direction.
  • the ratio of the intensity of the light received by the detector 42 to the electrical output representing the intensity of the received light may be obtained as an index of the contrast during detection of the fluorescence L3, and the modulation pattern on the modulation surface 114 of the optical modulator 14 may be optimized.
  • the optical information detection device 150 of the third aspect described above includes the light source 12, the spotlight generation device 10, the shift spotlight conversion device 30, and the optical information acquisition device 40.
  • the light source 12 emits laser light L1.
  • the needle spot light LN is formed by condensing the laser light L ⁇ b>1 with the lens (condensing element) 16 in the spot light generation device 10 .
  • the dimension (size) of the needle spot light LN in the z direction is larger than the dimension (size) in the x direction or the y direction.
  • the sample S is arranged in the irradiation range of the needle spot light LN elongated in the z direction, and the thickness direction of the sample S is substantially parallel to the z direction.
  • the shift spot light conversion device 30 converts the fluorescence (emission light) L3 emitted from a plurality of positions different from each other in the z direction (direction parallel to the optical axis) within the irradiation area of the needle spot light LN to the optical axis of the fluorescence L3.
  • the image plane (light receiving plane) IP (see FIG. 1) intersecting with A2 separates in the H direction (predetermined direction).
  • the optical information acquisition device 40 has a plurality of photodetectors 42 that receive the fluorescence L3 separated in the H direction on the image plane IP of the CGH 210 by the shifted spot light conversion device 30. (that is, minute area) optical information is acquired.
  • the detection surface 142 of the photodetector 42 is directed parallel to the ⁇ axis connecting the center AQ of the modulation surface 114 of the optical modulator 14 and the positions N, N symmetrical with respect to the center AQ. extends in the H direction, which is optically equivalent to .
  • "Optically equivalent" means that it is uniquely determined with respect to the modulation surface 114 of the optical modulator 14 according to the image transfer by a relay lens system or the like and the axial rotation on the plane intersecting the optical axis by a mirror. .
  • the optical information detection device 150 when the fluorescence L3 is generated from at least one minute area in the z direction of the irradiation area of the needle spot light LN, a predetermined photodetector corresponding to the position of the minute area in the z direction is detected.
  • the central lobe E1 of the fluorescence L3 is incident on the detection surface 142 of 42, the side lobe part E2 that can be incident on the photodetector 42 other than the predetermined photodetector 42 is suppressed as much as possible, and the fluorescence L3 received by the photodetector 42 is detected.
  • the optical information contained can be detected with high contrast and low signal-to-noise ratio.
  • the fluorescence L3 (that is, the response light) from the minute area outside the detection target is directed to the H direction of the image plane IP on which the detection plane 142 of the plurality of photodetectors 42 extends. can be prevented from entering the detection surface 142 of the predetermined photodetector 42 and being detected.
  • the needle spot light LN is two-dimensionally scanned along the H direction and the V direction as in the configuration of the optical information detection device 150 of the third aspect (that is, the y direction and the In the case of scanning in the x-direction), the above-described effect is exhibited remarkably.
  • the optical information detection device 150 including the CGH 20 and a plurality of photodetectors 42 arranged one-dimensionally along the H direction, for example, the sidelobe portion E2 in the H direction is detected for two-dimensional scanning of the needle spot light LN. If it is suppressed, it is possible to reduce signals (so-called artifacts) outside the detection target due to the side lobe part E2, which has been a problem in conventional devices.
  • the optical information detection device 150 since the spot light generation device 10 is provided, if the missing angle ⁇ is controlled in a predetermined direction passing through the center AQ on the light modulation surface 114 of the light modulator 14, the above-mentioned needle spot light can be obtained.
  • the side lobe portion E2 can be easily suppressed with a high degree of freedom in a direction optically equivalent to the predetermined direction.
  • the optical information detection device 150 may be provided with the spot light forming device of the second aspect instead of the spot light forming device 10 of the first aspect. Also, the modified examples described with respect to the spot light forming device 10 of the first aspect and the spot light forming device of the second aspect may be applied to the optical information detection device 150 .
  • the microscope 300 of the third aspect described above includes the optical information detection device 150 described above and an image information creation device that creates image information about the sample S based on the optical information acquired from the fluorescence L3 by the optical information detection device 150. 60 and.
  • the defect angle ⁇ at the modulation surface 114 of the optical modulator 14 is controlled, or the laser beam L1 is converted into radially polarized light and converted to 0-
  • the sidelobe portion E2 can be easily suppressed in a predetermined direction of the needle spot light LN with a high degree of freedom.
  • an expensive light source based on the principle of two-photon absorption is not required to suppress the side lobe portion E2.
  • the fluorescence L3 emitted from the minute region of the sample S excited by being irradiated with the needle spot light LN is used as the light L2 to be detected.
  • Light L2 is not limited to fluorescence L3.
  • the light L2 to be detected may be, for example, reflected light reflected from at least one minute area within the irradiation area when the needle spot light LN is irradiated.
  • the spotlight generation device 10 shown in FIG. 6 was configured.
  • a laser light source (model number: DJ532-40, manufacturer: Thorlab, Inc.) that emits laser light L1 having a peak wavelength of 532 nm was used.
  • LCOS-SLM (model number: SLM-100, manufacturer: Santec Corporation) was used.
  • the area of the modulating surface 114 of the LCOS-SLM used was larger than the area of the pupil plane of lens 16 .
  • the focal length of each of lenses 15, 18 was 150 mm.
  • the focal length of each of lenses 166, 168, 20 was 80 mm.
  • a tube lens with a focal length of 200 mm was used as the lens 22 .
  • a water immersion objective lens with a focal length of 5 mm and a numerical aperture of 1.15 was used as the lens 16 .
  • each of FIGS. 7 to 11 shows the two-dimensional distribution of the modulation pattern of the modulation surface 114 (that is, the pupil plane (Pupil) of the lens 16).
  • 7 to 11 show two-dimensional light intensity distributions on a plane including the x-direction and y-direction of the needle spot light LN formed on the focus plane of the lens 16.
  • FIG. A two-dimensional light intensity distribution in a plane including the x direction and the y direction of the needle spot light LN formed on the focus plane of the lens 16 is shown on the lower left side of each of FIGS. there is 7 to 11 show two-dimensional light intensity distributions on a plane including the x-direction and y-direction of the needle spot light LN formed on the focus plane of the lens 16.
  • a one-dimensional light intensity distribution in the x direction of the needle spot light LN formed on the focus plane of the lens 16 is shown on the upper right side of the bottom of each of FIGS. 7 to 11 .
  • a one-dimensional light intensity distribution in the y direction of the needle spot light LN formed on the focus plane of the lens 16 is shown at the lower right side of each of FIGS. 7 to 11 .
  • the maximum light intensity is normalized to 1.
  • the central lobe E1 formed along the optical axis A1 and the central lobe E1 in the plane including the x-direction and the y-direction intersecting the optical axis A1.
  • a side lobe portion E2 generated in the surroundings appeared.
  • the peak intensity of the central lobe E1 is higher than any peak intensity of the side lobe portions E2.
  • the total light quantity of the side lobe portions E2 with respect to the light quantity of the central lobe E1 is Increased.
  • the defect angle ⁇ increases, the first sidelobe closest to the central lobe E1 in the plane including the x-direction and the y-direction intersecting the optical axis A1 among the plurality of sidelobes included in the sidelobe portion E2.
  • the peak intensity of SS1 increased and approached the maximum light intensity of central lobe E1. As shown in FIGS. 9 and 10, when the missing angle ⁇ exceeds 40° and reaches 60°, in the sidelobe portion E2, the first sidelobe is The peak intensity of the second side lobe SS2, which is the second closest to SS1, increased, and the first side lobe S1 and the second side lobe SS2 became apparent.
  • FIG. 11 shows the measurement results for the
  • FIG. 11 in the two-dimensional light intensity distribution on the plane including the x-direction and the y-direction, when the amplitude modulation mask described in the second aspect is used, regardless of the size of the defect angle ⁇ , The side lobe portion E2 is suppressed as compared with the case of forming the pair of arc regions AC, AC described in the first mode.
  • the horizontal axis represents the defect angle ⁇ (defect angle) of the first embodiment
  • the vertical axis represents the ratio of the peak intensity of the first side lobe SS1 to the peak intensity of the central lobe E1 (that is, the peak intensity ratio).
  • FIG. 13 is a graph with the missing angle ⁇ on the horizontal axis and the FWHM of the central lobe E1 on the vertical axis.
  • the FWHM of the central lobe E1 on the vertical axis represents the ratio when the FWHM of the central lobe E1 is 1 when the missing angle ⁇ is 0°.
  • the values in the x direction of the amplitude modulation mask described in the second embodiment are indicated by dashed-dotted lines, and the values in the y direction of the amplitude modulation mask are similarly indicated by It is indicated by a two-dot chain line.
  • the peak intensity ratio increased as the defect angle ⁇ increased, and when the defect angle ⁇ was approximately 40° or more, the peak intensity ratio of the amplitude modulation mask exceeded 0.52.
  • the peak intensity ratio decreases as the defect angle ⁇ increases, and approaches the peak intensity ratio in the amplitude modulation mask; is also higher than the peak intensity ratio in the amplitude modulated mask.
  • the FWHM of the central lobe E1 decreases as the defect angle ⁇ increases, and when the defect angle ⁇ is about 50° or more, the FWHM of the central lobe E1 in the amplitude modulation mask; smaller than .89.
  • the FWHM of the central lobe E1 increased as the defect angle ⁇ increased, and when the defect angle ⁇ was about 50° or more, the FWHM of the central lobe E1 in the amplitude modulation mask was larger than 1.20. .
  • the amplitude modulation mask of the second aspect has a high sidelobe suppression effect on the y-axis, but it is about 3 ⁇ on the x-axis compared to the annular mask condensing with the missing angle ⁇ of 0° (a state in which a Bessel beam is formed). It was found to exhibit twice as large side lobes. Focusing on the two parameters of the peak intensity ratio of the first side lobe SS1 and the FWHM of the central lobe E1 from the graphs shown in FIGS. 12 and 13, under the conditions of the first embodiment, the first It has been confirmed that the defect angle ⁇ of the mask consisting of the pair of arcuate regions in the mode of (1) is preferably 40° or more and 50° or less.
  • a microscope 300 shown in FIG. 6 was constructed. However, for the purpose of observing the intensity distribution of the fluorescence L3 when the side lobe portion E2 of the needle spot light LN in the H direction is suppressed, the detection position in the z direction is not resolved, and the shift spot light is generated. I didn't. That is, no modulation pattern is formed on the modulation surface 132 of the optical modulator 32, the wavefront of the fluorescence L3 incident on the optical modulator 32 is not affected by the modulation surface 132, and the fluorescence L3 is It is assumed that the light is mostly reflected. Also, the number of photodetectors 42 is one.
  • the focal length of lens 182 was 80 mm.
  • the focal length of lens 184 was 150 mm.
  • LCOS-SLM (model number: SLM-100, manufacturer: Santec Corporation) was used.
  • the focal length of lens 25 was 300 mm.
  • the photodetector 42 a commercially available photodetector (model number: R10467U-40, manufacturer: Hamamatsu Photonics K.K.) was used.
  • sample S fluorescent beads having an average particle size of 0.2 ⁇ m were used.
  • the upper part of FIG. 14 shows two-dimensional distributions of amplitude modulation patterns when the defect angle ⁇ on the modulation surface 114 of the optical modulator 14 is 0°, 36°, 52°, and 64° from the left.
  • the lower part of FIG. 14 shows a two-dimensional image of the fluorescence emission distribution of the fluorescent beads detected by the photodetector 42 when the amplitude modulation pattern shown in the upper part is formed on the modulation surface 114 . As shown in FIG.
  • the side lobe portion E2 of the needle spot light LN can be easily configured and highly flexible in a predetermined direction. It was confirmed that it can be suppressed by

Abstract

本発明に係るスポット光生成装置は、入射するレーザー光に対して振幅変調可能に構成された変調面を有する光変調器と、前記光変調器から出射された前記レーザー光を集光する集光素子と、を備える。前記変調面では、入射する前記レーザー光を透過又は反射する領域として、中心から所定の半径及び所定の幅を有する環状領域のうち前記中心を挟んで互いに対称な位置を基準として所定の角度の範囲内の領域によって分断された一対の円弧領域が形成されている。

Description

スポット光生成装置、光学情報検知装置及び顕微鏡
 本発明は、スポット光生成装置、光学情報検知装置及び顕微鏡に関する。
 走査型レーザー顕微鏡、画像記録装置或いは加工装置等の装置では、少なくとも入射光を照射対象物に照射し、必要に応じて照射対象物からの出射光を検知し、検知した出射光から照射対象物の光学特性に関する情報を得る。照射対象物に照射するレーザー光(入射光)として、光軸に交差する方向よりも光軸に平行な方向に拡がっているニードルスポット光が用いられる場合がある。例えば、特許文献1に開示されている走査型レーザー顕微鏡では、レーザー光としてニードルスポット光を照射対象物に照射し、1回の照射につき、照射対象物から出射された応答光を光軸に交差する検出面上に少なくとも1次元にシフトしながら伝搬するエアリービームに変換すると、ニードルスポット光の長手方向で互いに異なる照射位置の照射対象物に関する光学特性をエアリービームに変換された像として互いに異なる位置で検出することができる。
 走査型レーザー顕微鏡をはじめとする装置では、ニードルスポット光の光軸に交差する交差面で最も光強度が高いピーク部分の周囲に生じ得るサイドローブ部分によって、照射対象物へのレーザー光の照射領域が所定の領域からはみ出す、或いはサイドローブ部分からの応答光も検出面に重畳してしまい、装置全体の性能が低下する場合があった。そのため、例えば、特許文献2には、ニードルスポット光のピーク部分を透過し、サイドローブ部を吸収する非線形光学特性を有するフィルターを備えた画像記録装置が開示されている。特許文献3には、入射するレーザー光をニードルスポット光に変換するアキシコンレンズと当該アキシコンレンズよりも入射側に配置された輪帯位相素子とを備えるレーザービーム整形装置が開示されている。特許文献4には、複数の波長を有する光を集光するレンズと当該レンズの焦点面に配置されて特定の開口構造が形成された開口とを備えるビーム成形モジュールが開示されている。特許文献5には、複数のベッセルビームを互いのサイドローブを打ち消すように重ねることによってサイドローブ部が低減された多重ビームを生成する多重ビーム生成手段を備えた光学装置が開示されている。
国際公開第2017/213171号 日本国特開2002-120396号公報 日本国特開2017-142402号公報 日本国特表2018-501513号公報 日本国特開2011-170052号公報
 上述のように、走査型レーザー顕微鏡をはじめとする装置では、ニードルスポット光のサイドローブ部分の抑制の検討がなされているが、例えば特許文献1に開示されている画像記録装置では、フィルターの非線形光学特性を高精度に制御することが難しく、サイドローブ部の抑制の柔軟性に欠ける。また、特許文献2に開示されているレーザービーム整形装置では、輪帯位相素子の設計及び作製に多くの手間と時間がかかる。特許文献3に開示されているビーム成形モジュールでは、レーザー光を平行化するレンズや集光するレンズ及び開口構造を構成する開口マスク等を備えるため、サイドローブ部分を抑制するための光学系の部品数が多く、当該光学系の省スペース化が難しい。さらに、特許文献4に開示されている光学装置のビーム生成手段では、互いに重ねる複数のベッセルビームの強度の調整等が複雑である。上述の各手法とは別のサイドローブ部分を抑える方法として、2光子吸収を用いる方法が挙げられる。しかしながら、2光子吸収を用いてニードルスポット光のサイドローブ部分を抑制する方法では、超短パルスレーザー光を発する光源の取り扱いがやや難しく、且つ当該光源によって決まるニードルスポット光の波長の選択幅が狭い。また、2光子励起及び超短パルスを用いた顕微鏡は、複雑な構造を備えるので高価である。これらのことから、連続波(Continuous Wave;CW)を出射するレーザー光源を用いることができ、簡易な構成で自由度の高いサイドローブ部分の抑制を可能とするスポット光生成装置が求められていた。このようなスポット光生成装置によれば、安価な装置を提供することができる。
 本発明は、例えば複数の検出器が配置されている所定の方向でニードルスポット光のサイドローブ部分を簡易な構成及び高い自由度で抑制可能なスポット光生成装置、当該スポット光生成装置を備える光学情報検知装置及び顕微鏡を提供する。
 本開示に係るスポット光生成装置は、入射するレーザー光に対して空間的な振幅変調を可能とするように構成された変調面を有する光変調器と、前記光変調器から出射された前記レーザー光を集光する集光素子と、前記レーザー光の光軸上で前記光変調器と前記集光素子との間に配置され、前記集光素子の瞳面を前記変調面に像転送するリレーレンズと、を備える。前記変調面では、入射する前記レーザー光を透過又は反射する領域として、中心から所定の半径及び所定の幅を有する環状領域のうち前記中心を挟んで互いに対称な位置を基準として所定の角度の範囲内の領域によって分断された一対の円弧領域が形成されている。
 本開示に係るスポット光生成装置は、入射するレーザー光の偏光をラジアル偏光に変換するラジアル偏光素子と、前記ラジアル偏光素子から出射された前記レーザー光に対して位相変調可能に構成された変調面を有する光変調器と、前記光変調器から出射された前記レーザー光を集光する集光素子と、前記レーザー光の光軸上で前記光変調器と前記集光素子との間に配置され、前記集光素子の瞳面を前記変調面に像転送するリレーレンズと、を備える。前記変調面では、入射する前記レーザー光を透過又は反射する領域として、中心から所定の半径及び所定の幅を有する環状領域が形成され、前記中心と前記環状領域のうち前記中心を挟んで互いに対称な位置とを通る境界線を境界として両側の位相が互いに反転している。
 本開示に係る光学情報検知装置は、レーザー光を出射する光源と、上述のスポット光生成装置と、前記レーザー光が前記スポット光生成装置の前記集光素子によって集光されることによって形成され且つ光軸に平行な方向の大きさが前記光軸に交差する方向での大きさよりも大きいニードルスポット光の照射領域内で試料に照射されたときに前記照射領域の前記光軸に平行な方向での互いに異なる複数の位置から発せられた出射光を前記出射光の光軸に交差する受光面で所定の方向に分離するシフトスポット光変換装置と、前記シフトスポット光変換装置によって前記受光面で前記所定の方向に分離された前記出射光を受光する光検出器を有し、前記出射光の出射位置の光学情報を取得する光学情報取得装置と、を備える。前記光検出器の検出面は、前記変調面の前記中心と前記中心を挟んで互いに対称な位置とを結ぶ方向と光学的に等価な方向に延在している。
 本開示に係る顕微鏡は、上述の光学情報検知装置と、前記光学情報取得装置によって前記出射光から取得された光学情報に基づいて前記試料に関するイメージ情報を作成するイメージ情報作成装置と、を備える。
 本発明によれば、所定の方向でニードルスポット光のサイドローブ部分を簡易な構成及び高い自由度で抑制することができる。
図1は、本発明に係る第1の態様のスポット光生成装置を含む検知光学系の概略図である。 図2は、図1に示すスポット光生成装置の光変調器での変調パターンを説明するための概略図である。 図3は、本発明に係る第2の態様のスポット光生成装置の要部の概略図である。 図4は、図2に示すスポット光生成装置の光変調器での変調パターンの変形例を説明するための概略図である。 図5は、図2に示すスポット光生成装置の光変調器での変調パターンの変形例を説明するための概略図である。 図6は、本発明に係る第3の態様の顕微鏡の概略図である。 図7は、第1の実施例において光変調器での変調パターンとニードルスポットの光強度分布との関係を測定した結果を示す画像である。 図8は、第1の実施例において光変調器での変調パターンとニードルスポットの光強度分布との関係を測定した結果を示す画像である。 図9は、第1の実施例において光変調器での変調パターンとニードルスポットの光強度分布との関係を測定した結果を示す画像である。 図10は、第1の実施例において光変調器での変調パターンとニードルスポットの光強度分布との関係を測定した結果を示す画像である。 図11は、第1の実施例において光変調器での変調パターンとニードルスポットの光強度分布との関係を測定した結果を示す画像である。 図12は、第1の実施例において欠損角とセントラルローブのピーク強度に対する第1サイドローブのピーク強度の比との関係を測定した結果を示すグラフである。 図13は、第1の実施例において欠損角とセントラルローブの半値幅との関係を測定した結果を示すグラフである。 図14は、第2の実施例において欠損角が互いに異なる振幅変調パターンと試料からの蛍光の発光分布との関係を測定した結果を示す画像である。
 以下、本発明を適用したスポット光生成装置、光学情報検知装置及び顕微鏡の一態様について、図面を参照して説明する。
(第1の態様)
 図1に示すように、本発明の一態様に係るスポット光生成装置10は、少なくとも光変調器14と、レンズ16と、レンズ15、18と、を備え、光源12と、レンズ11と、制御装置200と、をさらに備える。光源12は、CWであるレーザー光L1を出射する。レンズ11は、光源12から出射されたレーザー光L1をコリメートする。コリメートされたレーザー光L1は、次に説明する光変調器14の変調面114よりも広いビーム面積を有する。なお、光源12の出射面から所定のビーム面積を有するコリメート光が直接出射される場合は、レンズ11は省略される。
 光変調器14は、入射するレーザー光L1の少なくとも振幅を変調する変調面114を有する。すなわち、光変調器14の変調面114に入射したレーザー光L1の振幅分布(振幅)は、変調面114の変調パターンによって変調される。光変調器14には、例えば空間的な光の振幅や位相の分布を変調可能な空間光変調器(Spatial Light Modulator:SLM)が用いられる。SLMとしては、例えば液晶を用いて上述の変調を行う液晶空間光変調器(Liquid Crystal on Silicon:LCOS-SLM)や、マイクロミラーを用いて上述の変調を行う微小電気機械システム(Micro Electro Mechanical Systems:MEMS)を備えたデジタル・マイクロミラー・デバイス(Digital Micromirror Device:DMD)等が用いられる。本態様では、光変調器14として、空間的な位相の分布を変調可能な反射型のLCOS-SLMが用いられ、レンズ15とレンズ18との間に遮蔽板33に形成されたアパーチャー31を組み合わせた光学系が用いられている。反射型のLCOS-SLMが用いられているため、変調面114に入射するレーザー光L1と変調面114から出射するレーザー光L1とが変調面114に対して互いに同じ側の領域内で進行している。図示していないが、光変調器14として、透過型のLCOS-SLMが用いられてもよい。その場合は変調面114に対して、振幅変調されたレーザー光L1が出射する側とは反対側からレンズ11によってコリメートされたレーザー光L1が入射する。
 光変調器14の変調面114は、η軸及びξ軸を含む面に平行に配置されている。η軸及びξ軸は互いに直交し、η軸及びξ軸を含む面は変調面114に入射するレーザー光L1及び変調面114から出射するレーザー光L1の光軸A1に交差している。ξ軸は、光軸A1に直交している。η軸は、ξ軸に直交し且つ光軸A1を含む面に平行であって、光軸A1に対して角度をなす。光変調器14の変調面114には、複数の液晶分子(図示略)が配列されている。変調面114に配列された複数の液晶分子の各々の変調量は、光変調器14に有線又は無線で接続されている制御装置200によって制御されている。制御装置200は、例えばコンピュータである。具体的には、LCOS-SLMに接続されたコンピュータで専用のソフトウェア等を介して変調面114の複数の液晶分子の各々の所望の変調量を設定することによって、複数の液晶分子の各々が所望の変調値で位相変調される。
 スポット光生成装置10では、レンズ16が形成するニードルスポット光LNとしてベッセルビームが形成される。そのため、変調面114に配列された複数の液晶分子のうち、図2に示すように変調面114において円弧領域AC、ACに含まれる液晶分子は変調され、環状領域Cに含まれない液晶分子は変調されていない。変調面114が前述のように変調されていることによって、円弧領域AC、ACは、入射するレーザー光L1の反射率が高い領域である。円弧領域AC、ACでのレーザー光L1の全光反射率(反射率)は、少なくとも50%以上であり、60%以上であることが好ましく、80%以上であることがより好ましい。一方、変調面114において円弧領域AC、AC以外の領域でのレーザー光L1の全光反射率は、少なくとも20%以下であり、10%以下であることが好ましい。つまり、レーザー光L1は、変調面114において円弧領域AC、AC以外の領域によって殆ど遮光される。なお、本明細書における変調面114での反射率或いは透過率とは、光変調器14がDMD等で構成され、変調面114でレーザー光L1の反射量が直接制御される場合の変調面114での反射率或いは透過率と、後述するように光変調器14が位相変調のみを行う変調器を備え、変調面114でチルト波面を形成して変調面114のフーリエ面でレーザー光L1の0次光と1次光とを空間的に分離し、1次光のみをアパーチャー31を通過させることによってレーザー光L1が振幅変調される場合の(変調面114において変調を行った領域を反射或いは透過したレーザー光L1がアパーチャー31を通過した光量)/(変調面114において当該変調を行った領域に入射したレーザー光L1の光量)で表される比率と、の両方を含み、本態様では後者の場合に相当する。
 変調面114を正面視すると、円弧領域AC、ACは、中心AQ、外径r及び内径rを有する環状領域Cのうち、η軸と交差する位置Nから周方向両側へ所定の角度切り欠かれて残った領域であり、η軸を中心として線対称に形成されている。以下では、前述の所定の角度の2倍、すなわち環状領域Cが周方向で切り欠かれた角度を欠損角φと称する。欠損角φは、例えば20°から60°の範囲内であり、好ましくは40°から60°である。欠損角φの最適化については、後述する。
 第1の態様では、円弧領域AC、ACに含まれる複数の液晶分子が振幅変調に加えて位相変調されている。円弧領域AC、ACの各々に含まれる液晶分子に対して、入射するレーザー光L1の波面を所定の角度で傾けてチルトを付与する位相変調量exp[ikxsin(θξ)]を発現するように、当該液晶分子の配光方向が制御される。前述の位相変調量におけるiは虚数単位を表し、kは波数を表し、xは変調面114でのξ軸に平行な方向の位置を表し、θξは前述の所定の角度を表す。
 光変調器14の変調面114に照射されたレーザー光L1は、変調面114の円弧領域AC、ACに含まれる液晶分子によって振幅変調されつつ、図1に示すように反射及び回折される。なお、本明細書では特筆しない限り、反射は、鏡面反射を意味する。前述のように光変調器14から出射したレーザー光L1は、レンズ15、アパーチャー31、レンズ18と、を順次通過する。レンズ15、18は、レーザー光L1の光軸A1上で少なくとも光変調器14とレンズ16との間に配置され、本態様では光変調器14とハーフミラー123との間に配置され、レンズ16の瞳面を光変調器14の変調面114に像転送する一対のリレーレンズである。レンズ15、18は、所謂4f光学系のリレーレンズとして設けられている。つまり、光軸A1上で光変調器14の変調面114とレンズ15の中心面との離間距離は、レンズ15の焦点距離に略等しい。光軸A1上でレンズ15の中心面とレンズ18の中心面との離間距離は、レンズ15の焦点距離とレンズ18の焦点距離との和に略等しい。光軸A1上でレンズ18の中心面とレンズ16の瞳面との離間距離は、レンズ18の焦点距離に略等しい。また、光軸A1上でレンズ15の焦点面(すなわち、変調面114のフーリエ面)にピンホール等のアパーチャー31が配置されている。つまり、光軸A1上で光変調器14とハーフミラー123との間に、レンズ15と遮蔽板33に形成されたアパーチャー31が設けられている。レンズ15によって集光されるレーザー光L1の1次光は、アパーチャー31を通過する。一方、変調面114によって位相変調されずに反射し、レンズ15によって集光されるレーザー光L1の0次光はアパーチャー31が形成されている遮蔽板33によって遮蔽される。図1に示すスポット光生成装置10では、光変調器14を構成する反射型のLCOS-SLMの変調面114の所定の領域(すなわち、一対の円弧領域AC、AC)でレーザー光L1の波面にチルトを付与する位相変調量が発現するように位相変調のみが行われ、1次光と0次光が空間的に分離され、0次光が遮蔽板33で遮蔽され、1次光のみがアパーチャー31を通過することによって、結果的にレーザー光L1の振幅変調が行われている。つまり、光変調器14が変調面114で位相変調のみが可能なSLM等を備える場合、光変調器14よりもレーザー光L1の進行方向の前方且つハーフミラー123よりもレーザー光L1の進行方向の後方に配置された一対のレンズ15、18とレンズ15、18の間に形成されたアパーチャー31とを伴うことによって、変調面114がレーザー光L1に対して空間的な振幅変調を可能とするように構成された変調面として機能する。アパーチャー31は、光軸A1上でレンズ15、18の焦点面に配置されている。アパーチャー31を通ったレーザー光L1の1次光は、ハーフミラー123の反射面123aによって反射され、レンズ16に入射する。レンズ16は、入射するレーザー光L1を集光する。レンズ16には、対物レンズが用いられている。
 レンズ16は、入射するレーザー光L1から、レンズ16の焦点面を含む集光領域内でニードルスポット光LNを形成する。光軸A1に平行な方向でのニードルスポット光LNの寸法gは、光軸A1に交差する方向(図1では、例えばH方向及びV方向)の寸法wよりも大きい。ニードルスポット光LNとして形成されるベッセルビームは、干渉によって伝搬軸に沿って軸状に周囲に比べて高い光強度を有するセントラルローブE1(すなわち、中心スポット)が生成されるビームである。ベッセルビームの径方向(図1では、H方向及びV方向)の光強度分布は、名前の通りベッセル関数の二乗で表され、第1種ベッセル関数で記述される。
 レンズ16によって集光するレーザー光L1の光軸A1に交差する交差面BXは、H方向及びV方向を含む面である。H方向及びV方向は、互いに直交し、且つレンズ16によって集光するレーザー光L1の光軸A1に直交している。V方向のうち、光軸A1を基準として一方側の方向を+V方向とし、他方側、すなわち+V方向と平行且つ逆向きの方向を-V方向とする。H方向のうち、光軸A1を基準として一方側の方向を+H方向とし、他方側、すなわち+H方向と平行且つ逆向きの方向を-H方向とする。交差面BXでは、ニードルスポット光LNの中心部にセントラルローブE1が現れ、セントラルローブE1の外周部にサイドローブ部分E2が現れる。サイドローブ部分E2には、セントラルローブE1の中心を基準とする径方向でセントラルローブE1よりも外側に現れる複数のサイドローブが含まれ、径方向でセントラルローブE1に近い側から第1サイドローブSS1、第2サイドローブSS2、・・・、第mサイドローブSSmが形成される。なお、図1は、セントラルローブE1及びサイドローブ部分E2の各サイドローブSSmが径方向の中心側から外側に向けて順次間隔をあけて形成されるようにあくまで模式的に示されているが、セントラルローブE1及びサイドローブ部分E2の光強度分布は連続的な第1種ベッセル関数で表される。
 交差面BXでは、セントラルローブE1の光強度が最も高いピーク値の位置は、光軸A1が通る位置である。以下、セントラルローブE1及びサイドローブ部分E2の各サイドローブSSmの各々において最も高い光強度を「ピーク強度」という場合がある。セントラルローブE1のピーク強度が現れる位置を原点として、原点から±V方向に進むと、第1種ベッセル関数に従って光強度が減少と増加とを繰り返しつつ、減衰していく。すなわち、セントラルローブE1のピーク強度が最も高く、サイドローブ部分E2の各サイドローブSSmのピーク強度は何れもセントラルローブE1のピーク強度よりも低い。また、±V方向では、第2サイドローブSS2のピーク強度は、第1サイドローブSS1のピーク強度よりも低い。但し、mが2以上の自然数である場合には、第(m+1)サイドローブSS(m+1)のピーク強度と第mサイドローブSSmのピーク強度との高低関係は、光変調器14の変調面114の変調パターンの欠損角φによって異なる。±V方向では、欠損角φが0°から90°に増加するにしたがって、第1サイドローブSS1のピーク強度は増大する。mが2以上であれば、欠損角φが0°から90°に増加するにしたがって、第mサイドローブSSmのピーク強度が増加するか減少するかは欠損角φとmの値によって異なる。
 交差面BXのH方向においても、原点から±H方向に進むと、第1種ベッセル関数に従って光強度が減少と増加とを繰り返しつつ、減衰していく。すなわち、セントラルローブE1のピーク強度が最も高く、サイドローブ部分E2の各サイドローブSSmのピーク強度は何れもセントラルローブE1のピーク強度よりも低い。但し、±H方向では、mが自然数であれば、第(m+1)サイドローブSS(m+1)のピーク強度は、第mサイドローブSSmのピーク強度よりも減少する。また、欠損角φが同じであれば、±H方向の第1サイドローブのピーク強度は、±V方向の第1サイドローブのピーク強度よりも低い。±H方向では、欠損角φが0°から90°に増加するにしたがって、第1サイドローブSS1のピーク強度は減少し、mが2以上であっても第mサイドローブSSmのピーク強度は減少する。すなわち、±H方向では、欠損角φが0°から90°に増加するにしたがって、第1サイドローブSS1のピーク強度と同様に、第1サイドローブSS1よりも原点から径方向の外側のサイドローブのピーク強度も同様に減少し、サイドローブ部分E2の全体の光量が抑制される。
 ±H方向における第1サイドローブSS1のピーク強度のセントラルローブE1のピーク強度に対する比は、±V方向における第1サイドローブSS1のピーク強度のセントラルローブE1のピーク強度に対する比よりも小さい。また、±H方向におけるサイドローブ部分E2の全体の光量のセントラルローブE1の光量に対する比は、±V方向におけるサイドローブ部分E2の全体の光量のセントラルローブE1の光量に対する比よりも小さい。図1に示すスポット光生成装置10では、光源12から出射してレンズ16で集光するまでのレーザー光L1は、光変調器14の変調面114のξ軸や交差面BXのV方向に平行な高さ方向で略一定の位置で伝搬している。前述のように±V方向よりも±H方向でサイドローブ部分E2が抑圧されるのは、レーザー光L1の光軸A1上で光変調器14よりも後段(すなわち、レーザー光L1の進行方向の前方)にレンズ16が配置されているため、変調面114のη軸が交差面BXのH方向と一意に対応していることによる。つまり、図2に示す変調面114においてη軸を基準として欠損角φで環状領域Cから切り欠かれた部分は、レンズ16のフーリエ変換機能によって、交差面BXにおいて±H方向のサイドローブ部分E2の抑圧に寄与する。交差面BXでサイドローブ部分E2が良好に抑圧される±H方向が光変調器14の変調面114上で一意に対応する方向は、光変調器14から出射されたレーザー光L1の進行方向及び光軸A1の折り曲げの有無及び折り曲げ回数によって決まる。
 制御装置200は、光変調器14の変調面114に配列している複数の液晶分子の各々に、所定の振幅及び位相の変調値を付与する。制御装置200は、上述した欠損角φとニードルスポット光LNのサイドローブ部分E2の抑圧の度合い(抑圧量という場合がある)との関係に基づき、変調面114の円弧領域AC、ACに含まれる液晶分子の振幅変調及び位相変調を行う。
 例えば、ニードルスポット光LNの照射領域であって主にセントラルローブE1の照射領域内の光軸A1上で互いに異なる位置の微小領域P1、P2、P3にニードルスポット光LNが照射されることによって何らかの光学反応が生じ、レーザー光L1の入射方向と略平行且つ逆向きの方向に光L2を出射する物質(図示略)が存在すると、ニードルスポット光LNの形成によって微小領域P1、P2、P3の各々から光L2が出射される。光L2は、ハーフミラー123の反射面123aを透過する。例えば、ハーフミラー123よりも光L2の進行方向の前方には、光変調器32と、レンズ25と、複数の光検出器42が順次配置されている。なお、レーザー光L1と光L2の波長帯が互いに異なる場合は、ハーフミラー123に替えてダイクロイックミラーが用いられる。
 光変調器32は、入射する光L2の少なくとも振幅を変調する変調面132を有する。変調面132には、複数の液晶分子(図示略)が配列されている。変調面132に配列された複数の液晶分子の各々の変調量は、光変調器32に接続されている制御装置(図示略)によって制御されている。なお、不図示の制御装置は、例えばコンピュータであり、光変調器32に専用に設けられてもよく、制御装置200と共用されていてもよい。光変調器32の変調面132には、計算機生成ホログラム(Computer-Generated Hologram;CGH)210が形成されている。CGH210は、入射する光L2を回折させ、レンズ25を介して透過光を偏向する透過型のホログラム光学素子であって、回折を用いて波面再生を実現する。ニードルスポット光LNを照射されることによって微小領域P1、P2、P3の各々から出射される光L2は、CGH210の物体光である。CGH210は、光軸A1と平行な物体光の光軸(すなわち、光L2の光軸A2)に沿う方向(図1では、z方向)の変位を、変調面132から結像距離lzの像面IPのH方向の変位に線形変換する。CGH210の振幅分布及び位相分布は、前述のCGH210の機能を発現できれば特定されず、例えば特開2019-117233に開示されている(6)式に基づいて決定された位相分布であってもよい。前述の(6)式によって設計されたCGHは、2次元の位相型多重CGHである。具体的には、光変調器32の変調面132でCGH210を形成する領域に含まれる複数の液晶分子の位相制御パターンを前述の(6)式によって設計されたCGHパターンに対応させることによって、変調面132にCGH210を表示することができる。
 CGH210或いは変調面132に形成されるCGH210以外の変調パターンは、入射する光L2の波面に対して少なくともH方向で影響を与えない。つまり、微小領域P1、P2、P3の各々においてH方向で抑圧されたサイドローブ部分E2の照射及び当該照射による光学的作用は殆ど生じない。光軸A2に交差する交差面(図示略)において光L2のH方向の最大光強度及び光量は、V方向の最大光強度及び光量よりも低い。
 また、変調面132には、微小領域P1、P2、P3の各々からの光L2を回折させ、レンズ25を介して、像面IPにおいて光軸A2に対して放物線を描くように湾曲するエアリービームを形成する振幅分布或いは位相分布を有する変調パターンが形成されてもよい。その場合は、微小領域P1、P2、P3の各々からの光L2が変換されたエアリービームの像面IPにおける集光位置が、互いに異なる。
 CGH210に入射した光L2は、CGH210によって回折され、レンズ25によって像面IPに結像する。像面IPにおいて光L2が集光される集光領域には、複数の光検出器42の検出面142がH方向に沿って配置されている。当該集光領域の詳細は図1に示されていないが、光ニードルスポット光LNのz方向の照射領域のうち光L2が出射された微小領域P1、P2、P3が検出面142に線形変換された位置Q1、Q2、Q3を含む領域である。微小領域P1、P2、P3の各々から出射した光L2は、CGH210によって像面IPの互いに異なる位置Q1、Q2、Q3に結像し、位置Q1、Q2、Q3の各々に配置されている光検出器42によって検知される。すなわち、微小領域P1、P2、P3の各々から出射した光L2は、互いに異なる光検出器42で検知される。
 微小領域P1、P2、P3の各々から出射された光L2の主にセントラルローブE1が互いに異なる所定の光検出器42の検出面142に入射する。その際に、上述のようにニードルスポット光LNのH方向でのサイドローブ部分E2が抑制されていることによって、所定の光検出器42以外の光検出器42、例えば所定の光検出器42に隣り合う光検出器42の検出面142に微小領域P1、P2、P3の各々から出射された光L2の各々のサイドローブ部分E2が殆ど入射しない。所定の光検出器42以外の光検出器42に僅かにサイドローブ部分E2が入射した場合でも、複数の光検出器42を用いた像面IPにおける光L2の検知では高いコントラスト或いは信号対雑音(Signal to Noise;SN)比が得られる。
 なお、CGH210は、光軸A2に平行なz方向の変位を像面IPのH方向の変位に線形変換する場合に限定されず、V方向の変位に線形変換してもよい。その場合は、複数の光検出器42の検出面142がV方向に沿って配置されている。微小領域P1、P2、P3の各々から出射された光L2は、V方向で互いに異なる光検出器42の検出面142に分離される。
 制御装置200は、評価パラメータとして、交差面BXにおけるセントラルローブE1のFWHM、第1サイドローブSS1のFWHM、セントラルローブE1のピーク強度と第1サイドローブSS1のピーク強度との比、セントラルローブE1の光量とサイドローブ部分E2の光量との比等のうちの少なくとも1つ以上を算出してもよい。その場合、ニードルスポット光LNの照射領域の交差面BXに不図示の光検出器の受光面を配置し、制御装置200は当該光検出器と有線又は無線で接続され、当該光検出器で受光した光強度を表す電気出力の情報を取得すればよい。また、制御装置200は、複数の光検出器42と有線又は無線で接続され、複数の光検出器42の各々で受光した光強度を表す電気出力の情報を取得し、評価パラメータとして、像面IPでの光L2の検出精度、コントラスト或いはSN比を算出してもよい。制御装置200は、前述の評価パラメータが所定の基準を満たすように、光変調器14の変調面114における欠損角φを設定することができる。
 以上説明した第1の態様のスポット光生成装置10は、入射するレーザー光L1に対して空間的な振幅変調を可能とするように構成された変調面114を有する反射型の光変調器14と、光変調器14から出射されたレーザー光L1を集光するレンズ(集光素子)16と、レーザー光L1の光軸A1上で光変調器14とレンズ16との間に配置され、レンズ16の瞳面を変調面114に像転送するレンズ(リレーレンズ)15、18と、を備える。変調面114では、正面視したときに、入射するレーザー光L1の振幅を変調し、レーザー光L1を反射する反射領域(領域)として、一対の円弧領域AC、ACが形成されている。円弧領域AC、ACは、図2に示すように中心AQから所定の半径r及び所定の幅tを有する環状領域Cのうち、中心AQを挟んで互いに対称な位置N、Nを基準として欠損角(所定の角度)φの範囲内の分断領域(所定の角度の範囲内の領域)NCによって分断されることによって残る領域である。位置N、Nと中心AQとは、直径をなす一直線上に配置されている。半径rは、外径r及び内径rによって、(r+r)/2で表され、変調面114においてレンズ16の瞳領域に対応する領域の半径以下である。スポット光生成装置10では、光変調器14に入射するレーザー光L1をレンズ16の瞳面と互いに共役である変調面114の一対の円弧領域AC、ACによって変調し、変調面114から出射されたレーザー光L1をレンズ16によって集光することによって、寸法wよりも寸法gが大きいニードルスポット光LNが形成される。寸法w、gは、半径r及び径方向の幅tによって決まる。スポット光生成装置10では、ニードルスポット光LNとして、ベッセルビームが形成される。スポット光生成装置10では、上述のように変調面114の環状領域Cのうちη軸に平行な方向で互いに対向する分断領域NC、NCが切りかかれることによって、ニードルスポット光LNの交差面BXにおいてH方向でサイドローブ部分E2がセントラルローブE1よりも抑制される。ニードルスポット光LNの交差面BXのH方向に平行な軸の光強度分布は、光変調器14の変調面114のη軸の光強度分布がレンズ16のフーリエ変換機能によって変換されて現れる分布である。すなわち、スポット光生成装置10によれば、光変調器14の変調面114の一対の円弧領域AC、AC同士をη軸の位置Nで周方向に欠損角φの分断領域NCで隔てることによって、ニードルスポット光LNのH方向(所定の方向)でのサイドローブ部分E2を簡易に抑制することができる。また、光軸A1に交差する方向でセントラルローブE1の外側に、ニードルスポット光LNが照射されると光L2を出射し得る微小領域が存在しても、サイドローブ部分E2が抑制されていることによって前述の微小領域からの光L2(すなわち、応答光)が像面IPのH方向で光検出器42の検出面142に入射して検知されることを防止することができる。
 なお、第1の態様では、光変調器14として反射型のLCOS-SLMが用いられているが、スポット光生成装置10に求められる配置等に応じて、光変調器14として透過型のLCOS-SLM、或いは透過型のLCOS-SLM以外の空間光変調器等、すなわちDMDのように、入射するレーザー光L1の波面に対して変調面114で直接振幅変調可能な変調器が用いられてもよい。つまり、変調面114では、正面視したときに、入射するレーザー光L1の振幅を直接変調し、レーザー光L1を透過する透過領域(領域)として、一対の円弧領域AC、ACが形成されてもよい。その場合でも、変調面114において円弧領域AC、ACでのレーザー光L1の全光透過率(透過率)は、少なくとも50%以上であり、60%以上であることが好ましく、80%以上であることがより好ましい。一方、変調面114において円弧領域AC、AC以外の領域でのレーザー光L1の全光透過率は、少なくとも20%以下であり、10%以下であることが好ましい。この場合においても、レーザー光L1は、変調面114において円弧領域AC、AC以外の領域によって殆ど遮光される。
 また、第1の態様では、光変調器14として能動素子であるLCOS-SLMが用いられているが、光変調器14として遮蔽板に一対の円弧領域AC、ACが開口として形成されている受動型のプレート素子等が用いられてもよい。なお、光変調器14としてDMDや前述のプレート素子等のようにレーザー光L1の波面に対して変調面114で直接振幅変調可能な変調器が用いられる場合は、光軸A1上でレンズ15とレンズ18との間に、アパーチャー31が形成された遮蔽板33を配置する必要はない。
 第1の態様のスポット光生成装置10では、円弧領域AC及び分断領域NCの各々におけるレーザー光L1の透過率又は反射率は周方向で不連続的に変化する。具体的には、円弧領域AC及び分断領域NCの各々におけるレーザー光L1の全光透過率は周方向で一定である。円弧領域ACのレーザー光L1の全光透過率と分断領域NCのレーザー光L1の全光透過率とは、互いに異なる。スポット光生成装置10によれば、円弧領域AC及び分断領域NCの各々におけるレーザー光L1の透過率が周方向で略一定であることによって、光変調器14を容易に構成及び用意することができる。
 第1の態様では、レンズ16によって集光したレーザー光L1から形成されたニードルスポット光(スポット光)LNが照射されることによって微小領域P1、P2、P3の各々から生じた光L2を検出する複数の光検出器42が設けられている。微小領域P1、P2、P3から生じた光L2は、互いに異なる光検出器42によって検出される。第1の態様のスポット光生成装置10は、複数の光検出器42から光L2の光強度に関する情報を高いコントラスト及びSN比で取得することができる。また、光検出器42の検出面142が延在するH方向(第1方向)は、光変調器14の変調面114の中心AQと中心AQを挟んで互いに点対称(対称)な位置とを結ぶη軸に平行な方向(第2方向)と相対関係を有する。つまり、H方向とη軸に平行な方向とは、互いに1対1で対応している。H方向とη軸に平行な方向とは、レンズ16のフーリエ変換機能によって互いに一意に対応付けられている。図1に示すスポット光生成装置10では、ハーフミラー123の反射面123aへのレーザー光L1の入射方向と反射面123aからのレーザー光L1の出射方向とが互いに同じ高さの面内にあるため、H方向はξ軸に平行な方向に直交する。但し、レーザー光L1の光軸A1上で光変調器14とレンズ16との間にリレーレンズ等の光学系が配置された場合や、光軸A1を上下方向に折り返すためのミラーが配置された場合等には、前述のフーリエ変換に基づく相対関係を保ちつつ、光学系やミラーの作用に応じてH方向はξ軸と平行である可能性があり、H方向がξ軸に平行な方向に対して90°未満の角度で傾斜する可能性もある。スポット光生成装置10によれば、前述のフーリエ変換に基づく相対関係にしたがって、ニードルスポット光LNの交差面BXでサイドローブ部分E2を抑制する所望の方向に対応する変調面114での軸方向で欠損角φを設定することができる。すなわち、ニードルスポット光LNのサイドローブ部分E2を抑制する方向を容易に設定することができる。
 なお、上述の複数の光検出器42は、スポット光生成装置10が備えていてもよく、スポット光生成装置10とは別の光学装置に設けられていてもよい。
 第1の態様のスポット光生成装置10は、能動型の光変調器14の変調面114の振幅変調量を制御する制御装置200をさらに備える。制御装置200は、例えばニードルスポット光LNによって生じた光L2のH方向におけるセントラルローブE1のピーク強度に対する第1サイドローブSS1(サイドローブのうちセントラルローブに最も近いサイドローブ)のピーク強度の比(以下、ピーク強度比という場合がある)とセントラルローブE1のFWHM(半値幅)の各々に関する情報を複数の光変調器14から取得可能に構成されている。制御装置200は、少なくともピーク強度比とFWHMの各々の情報に応じて光変調器14の変調面114での欠損角φを設定する。ピーク強度比が所定値よりも大きくなると、セントラルローブE1の光量に対するサイドローブ部分E2の全体の光量の比も増大し、所定の光検出器42で検出される光量が減少すると共に、所定の光検出器42以外の光検出器42で検出される光量が増加し、SN比が高くなってしまう。前述の所定値は、光検出器42で設定されているSN比や検出可能な最小光強度、暗電流値等によって適宜設定される。また、セントラルローブE1のFWHMが所定サイズよりも大きくなると、所定の光検出器42の検出面142に入射する光L2が検出面142から過度にはみ出し、所定の光検出器42での受光量が減ると共に、H方向で隣り合う別の光検出器42の検出面142に入射する虞がある。前述の所定サイズは、光検出器42の検出面142の有効面積によって適宜設定される。例えば、制御装置200は、ピーク強度比が所定値以下であることと、セントラルローブE1のFWHMが所定サイズ以下であることの両方を満たすことを最低条件として、ピーク強度比が高まるように欠損角φを設定してもよい。スポット光生成装置10によれば、ピーク強度比及びセントラルローブE1のFWHMに関する情報、サイドローブ部分E2の抑制の度合いに応じて欠損角φを最適化し、セントラルローブE1に起因する光L2を高精度に検出することができる。
 なお、制御装置200では、欠損角φを最適化するため、サイドローブ部分E2の抑制の度合い、特に第1サイドローブSS1の抑制の度合いを評価するパラメータとして、前述のピーク強度比及びセントラルローブE1のFWHMの他に、例えば適当なパラメータが想定されてもよい。
 また、ピーク強度比及びセントラルローブE1のFWHM、上述の評価を行うためのパラメータの値は、交差面BXと光学的に等価な面に複数の光検出器又は撮像装置(図示略)が配置され、当該光検出器又は当該撮像装置と制御装置200とが有線又は無線で接続されることによって、取得される。交差面BXと光学的に等価な面とは、例えば光軸A1上で光変調器14とハーフミラー123との間でレーザー光L1が光変調器14からハーフミラー123に向かう方向とは異なる方向に分岐され、分岐されたレーザー光L1がレンズ16と同様の仕様のレンズによって集光された場合の集光面である。
 第1の態様では、スポット光生成装置10によって生成したニードルスポット光LNによって発生した光L2を複数の光検出器42で検出しているが、ニードルスポット光LNの用途は照射領域内の微小領域P1、P2、P3で光L2を発生させることに限定されない。例えば、ニードルスポット光LNの照射領域に設置された被加工物をH方向で加工してもよく、ニードルスポット光LNの照射領域に設置された被記録媒体にH方向で光学情報を記録してもよい。なお、前述の例のようにニードルスポット光LNを直接活用し、ニードルスポット光LNの照射領域内の微小領域から発せられる光を検知する必要がない場合には、ハーフミラー123、光変調器32、レンズ25及び光検出器42は省略可能であり、光変調器14の変調面114からレンズ16までの光軸A1が折り返すことなく直線となるようにレンズ16が配置されてもよい。
(第2の態様)
 以下、第2の態様以降の各態様の説明では、第1の態様で説明した構成と共通する内容については説明を省略する。また、第2の態様以降の各態様の説明では、第1の態様で説明した構成要素と同様に機能する構成要素に、第1の態様で説明した当該構成要素と同一の符号を付し、その説明を省略する。
 第2の態様のスポット光生成装置は、ラジアル偏光素子140と、光変調器14の変調面114の変調パターンを次に説明するように変更すること以外は、図1及び図2を参照して説明したスポット光生成装置10と同様である。
 第2の態様では、スポット光生成装置10のレーザー光L1の光軸A1上のレンズ11と光変調器14との間に、ラジアル偏光素子140が配置されている。ラジアル偏光素子140は、公知の構成を備え、例えば石英基板の内部に複屈折ナノ格子が形成されている素子であってもよい。レンズ11によってコリメートされたレーザー光L1の偏光状態は直線偏光であるが、図3に示すように、ラジアル偏光素子140に入射したレーザー光L1の偏光状態はラジアル偏光(又は、径偏光とも呼ばれる)である。ラジアル偏光に変換されたレーザー光L1の光強度分布は、光軸A1に交差する面で光軸A1を中心としてドーナツ状である。ラジアル偏光に変換されたレーザー光L1の偏光方向は、光軸A1に交差する面内で光軸A1を中心として径方向に沿って放射状に分布している。光変調器14の変調面114に入射するレーザー光L1の複素振幅をE(ξ,η)とすると、ラジアル偏光に変換されたレーザー光L1の電場ベクトルE(ξ,η)は、次に示す(1)式で表される。ψは、ξ軸及びη軸を含み且つ変調面114に平行な面でξ軸の一方側を基準として周方向の角度を表す。(1)式では、第1行が水平偏光成分を表し、第2行が垂直偏光成分を表す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-M000001
 図示していないが、第2の態様においても、光変調器14として、空間的な位相の分布を変調可能な反射型のLCOS-SLMが用いられ、レンズ15とレンズ18との間に遮蔽板33に形成されたアパーチャー31を組み合わせた光学系が用いられている。第2の態様では、光変調器14の変調面114では、欠損角φは0°であって、分断領域NCは形成されず、環状領域Cが形成されている。レーザー光L1の全光反射率(反射率)は、少なくとも50%以上であり、60%以上であることが好ましく、80%以上であることがより好ましい。一方、変調面114において環状領域C以外の領域でのレーザー光L1の全光反射率は、少なくとも20%以下であり、10%以下であることが好ましい。変調面114の中心AQを通ってη軸に平行な境界線LQを境界として一方側に位相0が与えられ、他方側に位相πが与えられている。すなわち、変調面114では、境界線LQを境界として0-πの位相反転が生じるように、液晶分子の配光方向が制御されている。また、環状領域Cでの環状領域Cに含まれる複数の液晶分子の配光方向は、位相変調量exp[ikxsin(θξ)]を発現するように制御されている。
 光変調器14の変調面114に照射されたレーザー光L1は、変調面114によって振幅変調及び位相変調されつつ、図3に示すように反射される。変調面114に照射されたレーザー光L1のうち、0次光は所謂背景光であり上述の(1)式の垂直偏光成分を含む。一方、変調面114に照射されたレーザー光L1のうち、1次光では水平偏光成分のみが取り出され、1次光は上述の(1)式の第1行のcosψの振幅変調成分を有する。レーザー光L1は、光軸に交差する面で見たときに、η軸及びV方向を基準として互いに線対称な一対の円弧ビームLA、LAで構成される。上述のように光変調器14の変調面114では境界線LQを境界として0-πの位相反転が生じるように位相変調されているため、一対の円弧ビームLA、LAは互いに同位相である。仮に変調面114で0-πの反転分布で位相変調されていなければ、一対の円弧ビームLA、LAの偏光方向はラジアル偏光に起因して光軸A1からξ軸及びH方向に沿って互いに反転するように外側に向き、一対の円弧ビームLA、LAは互いに異なる位相となる。一対の円弧ビームLA、LAが互いに同位相であることによって、変調面114から出射されるレーザー光L1の1次光は、|cosψ|で振幅変調され、0次光とは異なる出射角をなし、アパーチャー31を通ってハーフミラー123及びレンズ16に向かって進行する。レーザー光L1の0次光は、遮蔽板33によって遮蔽される。一対の円弧ビームLA、LAは、レンズ16によって集光され、ニードルスポット光LNが形成される。
 第2の態様では、一対の円弧ビームLA、LAが互いに同位相であって|cosψ|で振幅変調されることによって、セントラルローブE1のピーク強度がサイドローブ部分E2の各サイドローブのピーク強度よりも高いニードルスポット光LNが形成される。第2の態様においても、ニードルスポット光LNのH方向でのサイドローブ部分E2は抑制されている。また、第2の態様のスポット光生成装置では、第1の態様のスポット光生成装置10よりもニードルスポット光LNのサイドローブ部分E2の全体の光量がセントラルローブE1の光量に比べて強く抑制される。
 以上説明した第2の態様のスポット光生成装置は、第1の態様のスポット光生成装置10と同様の構成を備えることによって、当該同様の構成による効果を奏する。また、第2の態様のスポット光生成装置は、入射するレーザー光L1の偏光をラジアル偏光に変換するラジアル偏光素子140と、ラジアル偏光素子140から出射されたレーザー光L1に対して位相変調可能に構成された変調面114を有する光変調器14と、光変調器14から出射されたレーザー光L1を集光するレンズ(集光素子)16と、レーザー光L1の光軸A1上で光変調器14とレンズ16との間に配置され、レンズ16の瞳面を変調面114に像転送するレンズ15、18と、を備える。第2の態様では、第1の態様と同様に、変調面114は、入射するレーザー光L1に対して空間的な振幅変調を可能とするように構成されている。第2の態様では、レンズ16の瞳面と互いに共役である光変調器14の変調面114には、入射するレーザー光L1を反射する領域として、中心AQから半径r及び幅tを有する環状領域Cが形成されている。また、変調面114には、環状領域Cの中心AQと環状領域Cのうち中心AQを挟んで互いに対称な位置N、Nとを通る境界線LQを境界として両側の位相が互いに反転している。すなわち、変調面114では、照射されるレーザー光L1に対して境界線LQを境界として0-πの位相反転が付与されるように位相変調されている。第2の態様のスポット光生成装置では、ラジアル偏光のレーザー光L1が上述のように振幅変調及び位相変調された変調面114に照射され、変調面114から一対の円弧ビームLA、LAで構成されるレーザー光L1が出射される。一対の円弧ビームLA、LAは互いに同位相であり、|cosψ|の振幅変調が付されている。このことによって、変調面114から出射されるレーザー光L1がレンズ16によって集光された際に、交差面BXのH方向でセントラルローブE1に対してサイドローブ部分E2が良好に抑制される。第2の態様のスポット光生成装置によれば、H方向では第1サイドローブSS1に加えて複数のサイドローブSSmを含むサイドローブ部分E2の光量を極力抑えることができる。
 第2の態様のスポット光生成装置の変形例として、光変調器14として、図4に示すように、変調面114で中心AQを原点としてξ軸及びη軸をとったときにレンズ16の瞳領域116の範囲内で、照射されるレーザー光L1の反射率が図5に示すようにξ軸上で連続的に|ξ|或いは|cosψ|で変化するマスクが用いられてもよい。この場合、第1の態様と同様に、変調面114で境界線LQを境界として互いに位相反転している必要はない。また、変調面114に照射されるレーザー光L1の偏光はラジアル偏光である必要はなく、直線偏光であってよく、ラジアル偏光素子140は省略可能である。光変調器14としてこのようなマスクを用いた場合であっても、第1の態様及び第2の態様と同様に、H方向でニードルスポット光LNのサイドローブ部分E2を容易に抑制することができる。
(第3の態様)
 図6に示すように、第3の態様の顕微鏡300は、少なくとも光学情報検知装置150を備え、光源12と、イメージ情報作成装置60と、をさらに備える。光学情報検知装置150は、スポット光生成装置100と、シフトスポット光変換装置30と、光学情報取得装置40と、を備える。光源12は、後述する試料Sにニードルスポット光LNが照射された際に試料Sが励起されて発生する蛍光L3の励起波長を有するレーザー光L1を出射する。
 光学情報検知装置150では、レーザー光L1の光軸A1に交差する方向の大きさよりも光軸A1に平行な方向の大きさが大きいニードルスポット光LNが試料Sに照射される。試料Sへの照射時のニードルスポット光LNの長手方向は、試料Sの厚み方向に略平行であり、z方向に略平行である。光学情報検知装置150では、試料Sにおけるニードルスポット光LNの照射領域Rに含まれて互いに異なる複数の検知領域の各々から出射された出射光がシフトスポット光L4に変換される。検知領域は、試料Sへの照射時のニードルスポット光LNの長手方向に沿って順次位置している。光学情報検知装置150では、複数の検知領域の各々から出射されたシフトスポット光L4は、光軸A2に交差する受光面Mで互いに異なる位置に到達する。受光面Mで受光したシフトスポット光L4の光強度等の情報から複数の検知領域の各々の光学情報が検知される。
 スポット光生成装置100は、少なくとも光変調器14と、レンズ16とを備え、光源12と、ミラー13、19、21、162、170と、レンズ15、18、166、168、20、22と、アパーチャー31とをさらに備える。光源12は、所定の波長及び光強度、パワー等の光学特性を有するレーザー光L1を出射する。レーザー光L1の光学特性は、レーザー光L1から変換されて発生するニードルスポット光LNがD3方向から試料Sの照射領域(図6では、照射領域Rは省略)に照射された際に、照射領域内から光軸A2に沿って所定の方向に出射する光L2が得られる条件に従って適宜選択されている。第3の態様では、試料Sとして例えば蛍光物質が用いられる。レーザー光L1から形成されるニードルスポット光LNは、試料Sの励起光である。すなわち、レーザー光L1の波長は、試料Sの蛍光の励起波長を含んでいる。光学情報検知装置150は、試料Sから出射される光L2として蛍光(出射光)L3を検知するように構成されているため、前述の所定の方向は、ニードルスポット光LNの試料Sへの入射方向、すなわちz方向と略平行且つ逆向きの方向を意味する。本態様では、ニードルスポット光LNが照射されることによって励起された試料Sから略全方位に出射される蛍光のうち、z方向と略平行且つ逆向きの方向(所定の方向)に出射される蛍光を検知することができる。
 スポット光生成装置100では、光源12の出射面から試料Sの入射側の表面までの間に、光源12から発せられるレーザー光L1の光軸A1に沿って、光の進行方向の後方から前方に向かってミラー13、光変調器14、レンズ15、アパーチャー31、レンズ18、ダイクロイックミラー124、ミラー162、レンズ166、168、ミラー170、19、レンズ20、ミラー21、レンズ22、16が順次配置されている。光源12から発せられたレーザー光L1は、光軸A1に沿って進行し、ミラー13で反射され、光変調器14に入射する。
 光変調器14によって振幅変調や位相変調されたレーザー光L1は、光変調器14によって回折するとともに光変調器14から出射し、光軸A1に沿ってレンズ15から各光学素子を経由して進行する。レンズ15、18と、レンズ166、168と、レンズ20、22の各々は、光軸A1上で、レンズ16の瞳面を光変調器14の変調面114にリレーするように適宜配置されている。つまり、変調面114は、レンズ16の瞳面と等価である。第1の態様で説明したように、光軸A1上のレンズ15、18の焦点面には、アパーチャー31が配置されている。アパーチャー31を通過したレーザー光L1の1次光は、ダイクロイックミラー124の反射面124aで反射され、ミラー162に入射する。
 ミラー162は、試料Sが載置されているステージTの載置面と平行且つ互いに直交するx方向及びy方向のうち、y方向のスキャン用に設けられている。具体的には、ミラー162を支持する支持部材164がα1方向に回転することによって、レーザー光L1がy方向に走査される。ミラー162は、レンズ16の瞳面が転送された位置に配置されている。ミラー162で反射されたレーザー光L1は、リレーレンズ系を構成するレンズ166、168を通ってミラー170に入射する。ミラー170は、ミラー162が配置された瞳面と光学的に等価な位置からレンズ166、168によって像転送された位置に設けられている。ミラー170は、x方向のスキャン用に設けられている。具体的には、ミラー170を支持する支持部材172がα2方向に回転することによって、レーザー光L1がx方向に走査される。ミラー170で反射されたレーザー光L1は、ミラー19で反射され、レンズ20を通り、ミラー21で再度反射され、レンズ22を通り、レンズ16に入射する。
 光軸A1に沿ってレンズ22を出射したレーザー光L1は、レンズ16に入射し、レンズ16によって光軸A1に交差する方向(図1では、x方向及びy方向)で集光しつつ、光軸A1に平行な方向(図1では、z方向)で延び、試料Sの内部の照射領域R(図示略)に拡がるニードルスポット光LNが形成される。レンズ16は、ピエゾスキャナー190に支持されている。レンズ16のz方向の位置は、ピエゾスキャナー190によって試料Sの観察位置(すなわち、ニードルスポット光LNのz方向の中心位置)を微調整するために、高精度に調整可能である。ニードルスポット光LNが非回折であるため、照射領域に向けて強い光が確実に照射され、照射領域内の蛍光特性を有する試料Sがz方向で一斉に励起される。ニードルスポット光LNの寸法gが寸法wに対して大きい程、試料Sの厚み方向すなわちz方向の光学情報を一括して取得することができる検知領域の数が増える。
 図6に示すように、試料Sは、ステージTのレーザー光L1の入射側の表面(載置面)に載置されている。ステージTは、不図示の支持部材等によって光学情報検知装置150に設けられている。なお、ステージTは、顕微鏡300に設けられていてもよく、光学情報検知装置150又は顕微鏡300とは別体に形成され、且つ光学情報検知装置150がアクセス可能である装置に設けられていてもよい。
 試料Sのz方向で互いに異なる微小領域から出射された蛍光L3は、レーザー光L1が試料Sに入射する経路と略同じ経路を途中まで逆向きに進行し、試料Sからレンズ16、22、20、168、166を通り、ミラー21、19、170、162で反射され、ダイクロイックミラー124に入射する。蛍光L3は、反射面124a及びダイクロイックミラー124を透過し、シフトスポット光変換装置30に入射する。
 シフトスポット光変換装置30は、レンズ182、184、25と、光変調器32と、ミラー28と、を備える。蛍光L3の光軸A2上に沿って、光の進行方向の後方から前方に向かってレンズ182、184と、光変調器32と、ミラー28と、レンズ25が順次配置されている。
 シフトスポット光変換装置30は、試料Sにおけるニードルスポット光LNの照射領域内の光軸A1上の互いに異なる複数の位置から発せられた蛍光L3を、光軸A2に沿って移動するにしたがって光軸A2に交差する像面IPにおける集光位置が試料Sにおける蛍光L3の出射位置に応じて変化するようにシフトするシフトスポット光L4に変換する。図6では、像面IPの図示は省略されているが、像面IPには、複数の光検出器42の検出面142が配列されている。シフトスポット光変換装置30では、レンズ182、184は、光軸A2上で、ミラー162が配置されている位置に像転送されたレンズ16の瞳面を光変調器32の変調面132にリレーするように適宜配置されている。つまり、変調面132は、レンズ16の瞳面と等価である。変調面132には、第1の態様で説明したCGH210の変調パターンが形成されている。ニードルスポット光LNのz方向の各々の位置から出射した蛍光L3のz方向の光学情報は、CGH210によってH方向に線形変換される。光変調器32の変調面132から出射されるシフトスポット光L4は、光学情報取得装置40に入射する。
 光学情報取得装置40は、シフトスポット光変換装置30から入射するシフトスポット光L4を受光し、受光したシフトスポット光L4の情報から試料Sにおけるニードルスポット光LNの照射領域の光学情報を取得する。光学情報取得装置40は、複数の光検出器42と、光学情報取得装置48と、を備える。第1の態様で説明したように、複数の光検出器42の検出面142は、像面IPのH方向に配列されている。光学情報取得装置48は、複数の光検出器42と有線又は無線で接続され、複数の光検出器42ごとにシフトスポット光L4の受光量に関する情報を取得し、例えばコンピュータである。
 イメージ情報作成装置60は、光学情報取得装置40によって取得された試料Sに関する情報から三次元画像をはじめとするイメージ情報を作成し、モニター62に映し出す。なお、イメージ情報作成装置60は、光学情報取得装置48を構成するコンピュータに組み込まれていてもよい。このような構成では、光学情報取得装置40によって受光されたシフトスポット光L4の情報を即時にモニター等に映し出し、可視化することができる。
 光学情報検知装置150では、ニードルスポット光LNを試料Sに対してx方向及びy方向で走査可能にするため、スポット光生成装置10の光軸A1上で光変調器14とレンズ16との間に、レンズ15、18と、レンズ166、168と、レンズ20、22と、レーザー光L1のy方向でのスキャンを行うためのミラー162と、レーザー光L1のx方向でのスキャンを行うためのミラー162と、光軸A1を折り返すダイクロイックミラー124、ミラー19、21が配置されている。レンズ20、22によってレンズ16の瞳面が像転送され、ミラー19、21によって光軸A1が適宜折り返されているため、ミラー170の反射面は、レンズ16の瞳面と光学的に等価である。また、レンズ166、168によってミラー170の反射面が像転送されているため、ミラー162の反射面は、レンズ16の瞳面と光学的に等価である。さらに、レンズ15、18によってミラー170の反射面が像転送されているため、光変調器14の変調面114は、レンズ16の瞳面と光学的に等価である。図6に示す光学情報検知装置150の構成では、光変調器14の変調面114の変調パターンが第1の態様で説明した図1に示す構成での変調面114の変調パターンとは正面視で90°回転している。すなわち、図6に示す光学情報検知装置150の構成では、光変調器14の変調面114の中心AQと位置N、Nとを結ぶ仮想線(図示略)がξ軸に平行であり、変調面114の環状領域Cを周方向に分断する分断領域NC、NCがξ軸に平行な方向で互いに対向する。光学情報検知装置150の構成では、変調面114のξ軸に平行な方向は、ステージTにおける試料Sの載置面に平行なy方向と光学的に等価であり、光軸A1上の光変調器14とレンズ16との間の各光学部品によってy方向に変換される。同じく光学情報検知装置150の構成では、変調面114のη軸に平行な方向は、ステージTにおける試料Sの載置面に平行なx方向と光学的に等価であり、光軸A1上の光変調器14とレンズ16との間の各光学部品によってx方向に変換される。
 光学情報検知装置150では、試料Sから発せられた蛍光L3の光軸A2上でレンズ16と光検出器42の検出面142が配列された像面(受光面)IPの間に、レンズ20、22と、レンズ166、168と、レンズ182、184と、蛍光L3の光軸A2を折り返すミラー19、21、162、170が配置されている。試料Sから発せられた後にレンズ16からダイクロイックミラー124に到達する蛍光L3の進路は、ダイクロイックミラー124で反射されてからレンズ16に到達するレーザー光L1の進路と重なり、レーザー光L1の進路とは逆向きである。レンズ182、184によってミラー170の反射面が像転送されているため、光変調器32の変調面132は、レンズ16の瞳面と光学的に等価である。したがって、ステージTの載置面に略平行なy方向は、像面IPの+H方向に変換される。ニードルスポット光LNのy方向のサイドローブ部分E2が抑制され、レンズ16からレンズ25までの光軸A2上の蛍光L3の進路で蛍光L3の波面が何らかの影響を受ける、或いは変調されることないため、像面IPでは蛍光L3のH方向のサイドローブ部分E2がV方向のサイドローブ部分E2よりも抑制されている。図6に示すように、複数の光検出器42の検出面142がH方向に沿って配置されているため、ニードルスポット光LNの照射領域で蛍光L3が発生したz方向での位置に応じた所定の光検出器42の検出面142には、主に蛍光L3のセントラルローブE1が入射する。また、所定の光検出器42以外の光検出器42にサイドローブ部分E2が入射する。その結果、複数の光検出器42では、高いコントラスト及び低いSN比で蛍光L3が検出される。
 光学情報検知装置150では、制御装置200は、光学情報取得装置40と有線又は無線で接続されていてもよい。制御装置200は、例えば所定の光検出器42で蛍光L3を検出した際に、所定の光検出器42での受光強度を表す電気出力とH方向で当該所定の光検出器42に隣り合う光検出器42での受光強度を表す電気出力との比率を蛍光L3の検出時のコントラストの指標として取得し、光変調器14の変調面114での変調パターンを最適化してもよい。
 以上説明した第3の態様の光学情報検知装置150は、光源12と、スポット光生成装置10と、シフトスポット光変換装置30と、光学情報取得装置40と、を備える。光源12は、レーザー光L1を出射する。光学情報検知装置150では、スポット光生成装置10において、レーザー光L1がレンズ(集光素子)16によって集光されることによってニードルスポット光LNが形成される。ニードルスポット光LNのz方向の寸法(大きさ)は、x方向又はy方向の寸法(大きさ)よりも大きい。光学情報検知装置150では、z方向に長尺なニードルスポット光LNの照射範囲に試料Sが配置され、試料Sの厚さ方向はz方向に略平行である。シフトスポット光変換装置30は、ニードルスポット光LNの照射領域内のz方向(光軸に平行な方向)で互いに異なる複数の位置から発せられた蛍光(出射光)L3を、蛍光L3の光軸A2に交差する像面(受光面)IP(図1参照)でH方向(所定の方向)に分離する。光学情報取得装置40は、シフトスポット光変換装置30によってCGH210の像面IPにてH方向に分離された蛍光L3を受光する複数の光検出器42を有し、試料Sにおける蛍光L3の出射位置(すなわち、微小領域)の光学情報を取得する。光学情報検知装置150では、光検出器42の検出面142は、光変調器14の変調面114の中心AQと中心AQを挟んで互いに対称な位置N、Nとを結ぶξ軸に平行な方向と光学的に等価なH方向に延在している。「光学的に等価である」とは、リレーレンズ系等による像転送やミラーによる光軸に交差する面での軸回転に従って光変調器14の変調面114に対して一意に決まることを意味する。光学情報検知装置150によれば、ニードルスポット光LNの照射領域のz方向で少なくとも1つの微小領域から蛍光L3が発生した際に、z方向での微小領域の位置に応じた所定の光検出器42の検出面142に蛍光L3のセントラルローブE1を入射させ、所定の光検出器42以外の光検出器42に入射し得るサイドローブ部分E2を極力抑え、光検出器42で受光した蛍光L3に含まれる光学情報を高いコントラスト及び低いSN比で検出することができる。また、ニードルスポット光LNの光軸A1に交差する方向でセントラルローブE1の外側に、ニードルスポット光LNが照射されると励起して蛍光L3を出射し得る検知対象外の微小領域が存在しても、サイドローブ部分E2が抑制されていることによって検知対象外の微小領域からの蛍光L3(すなわち、応答光)が複数の光検出器42の検出面142が延在する像面IPのH方向で所定の光検出器42の検出面142に入射して検知されることを防止することができる。特に、第3の態様の光学情報検知装置150の構成のようにニードルスポット光LNをH方向及びV方向に沿って2次元走査する(すなわち、ステージTの試料Sの載置面においてy方向及びx方向に走査する)場合に、前述の効果が顕著に発揮される。CGH20とH方向に沿って1次元に配列された複数の光検出器42とを備える光学情報検知装置150によって、例えば、ニードルスポット光LNの2次元走査に対してH方向のサイドローブ部分E2が抑制されていれば、従来の装置で課題とされていたサイドローブ部分E2に起因する検知対象外の信号(所謂、アーティファクト)を低減することができる。
 光学情報検知装置150によれば、スポット光生成装置10を備えるため、光変調器14の光変調面114において中心AQを通る所定の方向で欠損角φを制御すれば、ニードルスポット光の前述の所定の方向と光学的に等価な方向でサイドローブ部分E2を簡易に、且つ高い自由度で抑制することができる。なお、光学情報検知装置150は、第1の態様のスポット光形成装置10に替えて、第2の態様のスポット光形成装置を備えてもよい。また、光学情報検知装置150に対して、第1の態様のスポット光形成装置10及び第2の態様のスポット光形成装置に関して説明した変形例を適用してもよい。
 以上説明した第3の態様の顕微鏡300は、上述の光学情報検知装置150と、光学情報検知装置150によって蛍光L3から取得された光学情報に基づいて試料Sに関するイメージ情報を作成するイメージ情報作成装置60と、を備える。顕微鏡300によれば、光変調器14の変調面114での欠損角φを制御する、或いはレーザー光L1をラジアル偏光に変換して変調面114で中心AQを通る境界線LQを境界として0-πの位相反転を付与しつつ、環状領域Cによって反射することによって、ニードルスポット光LNの所定の方向でサイドローブ部分E2を容易に、且つ高い自由度で抑制することができる。また、従来の方法のように、サイドローブ部分E2を抑制するために、2光子吸収の原理に基づく高価な光源を用いずに済む。
 以上、本発明に係る好ましい態様について詳述したが、本発明は上述の態様に限定されない。本発明では、特許請求の範囲内に記載された本発明の要旨の範囲内において、種々の変更が可能である。また、互いに異なる態様の構成を適宜組み合わせてもよい。
 例えば、上述の光学情報検知装置150及び顕微鏡300では、ニードルスポット光LNが照射されることによって励起された試料Sの微小領域から発せられる蛍光L3を検知対象の光L2としたが、検知対象の光L2は蛍光L3に限定されない。検知対象の光L2は、例えばニードルスポット光LNが照射されたときに照射領域内の少なくとも1つの微小領域から反射される反射光であってもよい。
 以下、本発明に係るスポット光生成装置、光学情報検知装置及び顕微鏡の実施例について説明する。なお、以下の実施例に関する記載内容に限定されない。
 第1の実施例では、図6に示すスポット光生成装置10を構成した。光源12として、532nmのピーク波長を有するレーザー光L1を出射するレーザー光源(型番;DJ532-40、製造元;Thorlab,Inc.)を用いた。光変調器14として、LCOS-SLM(型番;SLM-100、製造元;Santec株式会社)を用いた。使用したLCOS-SLMの変調面114の面積は、レンズ16の瞳面の領域よりも大きかった。レンズ15、18の各々の焦点距離は、150mmであった。レンズ166、168、20の各々の焦点距離は、80mmであった。レンズ22として、焦点距離200mmのチューブレンズを用いた。レンズ16として、焦点距離5mm、開口数1.15の水浸対物レンズを用いた。
 第1の実施例では、スポット光生成装置10の光変調器14の変調面114に第1の態様及び図2を参照して説明した振幅変調パターンを形成した。具体的には、光変調器14の変調面114に、rをレンズ16の瞳半径としたときに外径r=0.711r、内径r=0.684rである円弧領域ACを設定した。
 図7から図11の各々の上段には、変調面114(すなわち、レンズ16の瞳面(Pupil))の変調パターンの2次元分布が示されている。図7から図11の各々の中段には、レンズ16の焦点(Focus)面に形成されたニードルスポット光LNのx方向及びy方向を含む面での2次元光強度分布が示されている。図7から図11の各々の下段の左側には、レンズ16の焦点(Focus)面に形成されたニードルスポット光LNのx方向及びy方向を含む面での2次元光強度分布が示されている。図7から図11の各々の下段の中央には、レンズ16の焦点(Focus)面に形成されたニードルスポット光LNのx方向及びy方向を含む面での2次元光強度分布が示されている。図7から図11の各々の下段の右側上には、レンズ16の焦点(Focus)面に形成されたニードルスポット光LNのx方向の1次元光強度分布が示されている。図7から図11の各々の下段の右側下には、レンズ16の焦点(Focus)面に形成されたニードルスポット光LNのy方向の1次元光強度分布が示されている。なお、1次現強度分布の各グラフでは、最大光強度を1として規格化されている。
 図7には、欠損角φ=0°の場合、すなわち円弧領域AC、AC同士が周方向で接続された環状領域Cに含まれる液晶分子の配光方向を上述のように制御した場合の測定結果が示されている。図7に示すように、欠損角φ=0°の場合では、光軸A1に沿って形成されるセントラルローブE1と、光軸A1に交差するx方向及びy方向を含む面でセントラルローブE1の周囲に発生するサイドローブ部分E2とが現れた。セントラルローブE1のピーク強度は、サイドローブ部分E2の何れのピーク強度よりも高い。
 図8には、欠損角φ=20°の場合の測定結果が示されている。図9では、欠損角φ=40°の場合の測定結果が示されている。図10では、欠損角φ=60°の場合の測定結果が示されている。図7から図10に示すように、x方向及びy方向を含む面での2次元光強度分布では、欠損角φが大きくなるにしたがって、セントラルローブE1の光量に対するサイドローブ部分E2の合計光量が増大した。また、欠損角φが大きくなるにしたがって、サイドローブ部分E2に含まれる複数のサイドローブのうち、光軸A1に交差するx方向及びy方向を含む面でセントラルローブE1に最も近い第1サイドローブSS1のピーク強度が増大し、セントラルローブE1の最大光強度に近づいた。図9及び図10に示すように、欠損角φが40°を超えて60°に達すると、サイドローブ部分E2において、x方向及びy方向を含む面でセントラルローブE1に対して第1サイドローブSS1に次いで近い第2サイドローブSS2のピーク強度が増大し、第1サイドローブS1及び第2サイドローブSS2が顕在化した。
 図11には、|cosψ|の振幅変調マスクの場合の測定結果が示されている。図11に示すように、x方向及びy方向を含む面での2次元光強度分布では、第2の態様で説明した振幅変調マスクを用いた場合、欠損角φの大きさによらず、第1の態様で説明した一対の円弧領域AC、ACを形成する場合に比べてサイドローブ部分E2が抑制されている。
 図12は、横軸に第1の態様の欠損角φ(defect angle)をとり、縦軸にセントラルローブE1のピーク強度に対する第1サイドローブSS1のピーク強度の比(すなわち、ピーク強度比)をとったグラフである。図13は、横軸に欠損角φをとり、縦軸にセントラルローブE1のFWHMをとったグラフである。縦軸のセントラルローブE1のFWHMは、欠損角φが0°である場合のセントラルローブE1のFWHMを1としたときの比率を表している。図12及び図13の各グラフには、参照のために、第2の態様で説明した振幅変調マスクにおけるx方向での値が一点鎖線で示され、同じく振幅変調マスクにおけるy方向での値が二点鎖線で示されている。図12に示すように、x軸では、欠損角φが増大するにしたがってピーク強度比が増大し、欠損角φが約40°以上では振幅変調マスクにおけるピーク強度比;0.52を越した。一方、y軸では、欠損角φが増大するにしたがってピーク強度比が減少し、振幅変調マスクにおけるピーク強度比;0.048に近づくが、欠損角φが90°未満且つ90°近傍であっても振幅変調マスクにおけるピーク強度比よりも高かった。また、図13に示すように、x軸では、欠損角φが増大するにしたがってセントラルローブE1のFWHMが減少し、欠損角φが約50°以上では振幅変調マスクにおけるセントラルローブE1のFWHM;0.89よりも小さくなった。一方、y軸では、欠損角φが増大するにしたがってセントラルローブE1のFWHMが増大し、欠損角φが約50°以上では振幅変調マスクにおけるセントラルローブE1のFWHM;1.20よりも大きくなった。第2の態様の振幅変調マスクは、y軸に対するサイドローブ抑制効果が高いが、欠損角φが0°の円環マスク集光(ベッセルビームが形成される状態)と比べてx軸で約3倍大きなサイドローブを示すことがわかった。図12及び図13に示すグラフから、第1サイドローブSS1のピーク強度比とセントラルローブE1のFWHMの2つのパラメータに着目すると、第1の実施例の条件では、振幅変調マスクに相当する第1の態様の一対の円弧領域からなるマスクの欠損角φは40°以上50°以内が好適であることを確認した。
 第2の実施例では、図6に示す顕微鏡300を構成した。但し、ニードルスポット光LNのH方向でのサイドローブ部分E2が抑制された際の蛍光L3の強度分布を観察する目的で、z方向での検知位置の分解は行わず、シフトスポット光を生成しなかった。すなわち、光変調器32の変調面132には変調パターンを形成せず、光変調器32に入射する蛍光L3の波面は変調面132によって何ら作用を受けることなく、蛍光L3は光変調器32によって概ね反射されるものとした。また、光検出器42の数は1つとした。レンズ182の焦点距離は、80mmであった。レンズ184の焦点距離は、150mmであった。光変調器32として、LCOS-SLM(型番;SLM-100、製造元;Santec株式会社)を用いた。レンズ25の焦点距離は、300mmであった。光検出器42として、市販のフォトディテクタ(型番;R10467U-40、製造元;浜松ホトニクス株式会社)を用いた。また、試料Sとして平均粒径0.2μmの蛍光ビーズを用いた。
 図14の上段には、光変調器14の変調面114における欠損角φが左側から0°、36°、52°、64°であるときの振幅変調パターンの2次元分布が示されている。図14の下段には、変調面114に上段の振幅変調パターンを形成したときの蛍光ビーズの蛍光の発光分布を光検出器42で検知した2次元画像が示されている。図14に示すように、欠損角φが36°、52°、64°であるときには、欠損角φが0°である、すなわち円環マスク集光(ベッセルビームが形成される状態)と比べて紙面の縦方向、すなわち変調面114で環状領域Cを分断する分断領域NC、NCを形成した方向と光学的に等価な方向でニードルスポット光LNのサイドローブ部分E2を抑圧し、試料Sからの蛍光L3を高いコントラストで検知することができた。
 以上説明した実施例の結果から、上述の各態様のスポット光生成装置、光学情報検知装置及び顕微鏡によれば、所定の方向でニードルスポット光LNのサイドローブ部分E2を簡易な構成及び高い自由度で抑制することができることを確認した。
10、100 スポット光生成装置
14 光変調器
16 レンズ(集光素子)
114 変調面
150 光学情報検知装置
300 顕微鏡
AQ 中心
C 環状領域
 半径(所定の半径)
t 幅(所定の幅)

Claims (8)

  1.  入射するレーザー光に対して空間的な振幅変調を可能とするように構成された変調面を有する光変調器と、
     前記光変調器から出射された前記レーザー光を集光する集光素子と、
     前記レーザー光の光軸上で前記光変調器と前記集光素子との間に配置され、前記集光素子の瞳面を前記変調面に像転送するリレーレンズと、
     を備え、
     前記変調面では、入射する前記レーザー光を透過又は反射する領域として、中心から所定の半径及び所定の幅を有する環状領域のうち前記中心を挟んで互いに対称な位置を基準として所定の角度の範囲内の領域によって分断された一対の円弧領域が形成されている、
     スポット光生成装置。
  2.  前記円弧領域と前記所定の角度の範囲内の領域の各々における前記レーザー光の透過率又は反射率は周方向で不連続的に変化する、
     請求項1に記載のスポット光生成装置。
  3.  前記円弧領域と前記所定の角度の範囲内の領域の各々における前記レーザー光の透過率又は反射率は周方向で連続的に変化する、
     請求項1に記載のスポット光生成装置。
  4.  入射するレーザー光の偏光をラジアル偏光に変換するラジアル偏光素子と、
     前記ラジアル偏光素子から出射された前記レーザー光に対して位相変調可能に構成された変調面を有する光変調器と、
     前記光変調器から出射された前記レーザー光を集光する集光素子と、
     前記レーザー光の光軸上で前記光変調器と前記集光素子との間に配置され、前記集光素子の瞳面を前記変調面に像転送するリレーレンズと、
     を備え、
     前記変調面では、入射する前記レーザー光を透過又は反射する領域として、中心から所定の半径及び所定の幅を有する環状領域が形成され、前記中心と前記環状領域のうち前記中心を挟んで互いに対称な位置とを通る境界線を境界として両側の位相が互いに反転している、
     スポット光生成装置。
  5.  前記集光素子によって集光した前記レーザー光によって形成されたスポット光によって生じた光を検出する光検出器が設けられ、
     前記光検出器の検出面が延在する第1方向は前記変調面の前記中心と前記中心を挟んで互いに対称な位置とを結ぶ第2方向と相対関係を有する、
     請求項1から4の何れか一項に記載のスポット光生成装置。
  6.  前記変調面の振幅変調量を制御する制御装置を備え、
     前記制御装置は前記集光素子によって集光した前記レーザー光によって形成されたスポット光において前記変調面の前記中心と前記中心を挟んで互いに対称な位置とを結ぶ第2方向と相対関係を有する第1方向におけるセントラルローブのピーク強度に対するサイドローブのうち前記セントラルローブに最も近い第1サイドローブのピーク強度の比と前記セントラルローブの半値幅の各々に関する情報を取得し、前記情報に応じて前記所定の角度を設定する、
     請求項1から5の何れか一項に記載のスポット光生成装置。
  7.  レーザー光を出射する光源と、
     請求項1から6の何れか一項に記載のスポット光生成装置と、
     前記レーザー光が前記スポット光生成装置の前記集光素子によって集光されることによって形成され且つ光軸に平行な方向の大きさが前記光軸に交差する方向での大きさよりも大きいニードルスポット光の照射領域内で試料に照射されたときに前記照射領域の前記光軸に平行な方向での互いに異なる複数の位置から発せられた出射光を前記出射光の光軸に交差する受光面で所定の方向に分離するシフトスポット光変換装置と、
     前記シフトスポット光変換装置によって前記受光面で前記所定の方向に分離された前記出射光を受光する光検出器を有し、前記出射光の出射位置の光学情報を取得する光学情報取得装置と、
     を備え、
     前記光検出器の検出面は前記変調面の前記中心と前記中心を挟んで互いに対称な位置とを結ぶ方向と光学的に等価な方向に延在している、
     光学情報検知装置。
  8.  請求項7に記載の光学情報検知装置と、
     前記光学情報取得装置によって前記出射光から取得された光学情報に基づいて前記試料に関するイメージ情報を作成するイメージ情報作成装置と、
     を備える、
     顕微鏡。
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