WO2021095848A1

WO2021095848A1 - 細胞の保存又は輸送器具及び細胞の輸送方法

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Publication number: WO2021095848A1
Application number: PCT/JP2020/042437
Authority: WO
Inventors: 泉小椋; 啓司繁定; 伸治美馬; 悠貴今倉; 俊後藤; 奈穂山▲崎▼
Original assignee: 富士フイルム株式会社
Priority date: 2019-11-14
Filing date: 2020-11-13
Publication date: 2021-05-20
Also published as: JP7265645B2; EP4060019A4; JPWO2021095848A1; US20220267704A1; EP4060019A1

Abstract

本発明は、細胞培養容器そのものを用いて輸送を可能とする輸送器具及び輸送方法の提供を目的とする。このとき、細胞の呼吸に必要な酸素を供給可能とする輸送器具及び輸送方法の提供を目的とする。また、輸送時の温度に対して内圧が上昇する影響による、セル内外への培地移動を抑制することができる輸送器具及び輸送方法を提供することを目的とする。本発明によれば、複数個の細胞収容容器と、上記複数個の細胞収容容器を内部に保持するための複数個の凹部を有するプレートと、上記複数個の細胞収容容器の上部開口部及び上記プレートの凹部の側壁がなす側壁上部をシールするための軟材シートであって、上記複数個の細胞収容容器の内部と外部とを通気することができる軟材シートと、を有する、細胞の保存又は輸送器具が提供される。

Description

細胞の保存又は輸送器具及び細胞の輸送方法

　本発明は、細胞の保存又は輸送器具、及び細胞の輸送方法に関する。

　複数個の細胞収容容器（セルカルチャーインサートとも言う）と、上記複数個の細胞収容容器を内部に保持するための複数個の凹部を有するプレート（ウェルプレートとも言う）とを用いてある事業所において細胞を培養した後に、培養した細胞を、他の事業所又はユーザーに輸送することがある。従来は、培養した細胞を含むセルカルチャーインサートをウェルプレートから取り外し、専用容器及びシリコーン製キャップから構成される器具に移し、培地で満たした状態で輸送するのが一般的である。しかし、輸送後の細胞の受け取り者は、上記器具から細胞を含むセルカルチャーインサートを取り出して、ウェルプレートに戻して使用することになることから、手技による細胞へのダメージが懸念され、コンタミネーションの危険も増加する。また、培養した細胞を含むセルカルチャーインサートをウェルプレートに保持したまま輸送する方法として、粘着剤付きのフィルムやシールテープでセルカルチャーインサート開口部に封をして輸送することも行われているが、ウェル内の培地（液体）が外に漏れてしまう等の問題がある。

　特許文献１や特許文献２には、セルカルチャーインサートを収納するための包装容器が記載されている。容器内の培地の漏出を防ぐため、包装容器蓋部をシリコーン又はゴム等の弾性部材を有する構成とすることも可能であることが記載されている。しかし、このような包装容器を用いて輸送した後、改めて細胞の培養を行うには、前述の通り、セルカルチャーインサートを包装容器から取り出してウェルプレートに戻す必要があり、手技による細胞へのダメージ等、種々の問題が生じる。

　特許文献３には、細胞の培養容器（セルカルチャーインサートではない）を、培養容器の上縁部を覆うカバー、押さえ部材及びクッション材と重ね合わせた状態とし、これらを上下から押圧しつつ収納する収納容器が記載されている。しかし、この収納容器は、培養した細胞を含むセルカルチャーインサートをウェルプレートに保持したまま輸送できるものではなく、受け取り者がセルカルチャーインサートで細胞を培養するには細胞の移し替えが必要になる等、やはり種々の問題が生じる。

特開２０１３－１２８４５８号公報特許第５９８２４９２号公報国際公開ＷＯ２０１８／００３０７３号パンフレット

　培養した細胞を輸送する場合、細胞を生きた状態で輸送するためには、必要な栄養や酸素を供給する培地（液体）とともに細胞を輸送する必要がある。そのためには、ウェル内の培地が外に出ることを抑制し、かつ呼吸に必要な酸素が外部より細胞収容容器の内部に供給可能となる形態での輸送が必要である。

　本発明が解決しようとする第一の課題は、細胞培養容器そのものを用いて細胞を輸送することができる、細胞の保存又は輸送器具及び細胞の輸送方法を提供することである。
　本発明が解決しようとする第二の課題は、細胞の輸送時において細胞の呼吸に必要な酸素を供給することができる、細胞の保存又は輸送器具及び細胞の輸送方法を提供することである。
　本発明が解決しようとする第三の課題は、細胞の輸送時の温度において内圧が上昇することによる影響によると考えられる培地の移動を抑制することができる、細胞の保存又は輸送器具及び細胞の輸送方法を提供することである。

　本発明者らは上記課題を解決するために鋭意検討した結果、細胞収容容器と、細胞収容容器を内部に保持するための凹部を有するプレートと、細胞収容容器の上部開口部及びプレートの凹部の側壁がなす側壁上部をシールし、かつ細胞収容容器の内部と外部とを通気することができる軟材シートとにより、細胞の保存又は輸送器具を構成することにより、上記の課題を解決できることを見出した。本発明によれば、以下の発明が提供される。

＜１＞　複数個の細胞収容容器と、
　上記複数個の細胞収容容器を内部に保持するための複数個の凹部を有するプレートと、
　上記複数個の細胞収容容器の上部開口部及び上記プレートの凹部の側壁がなす側壁上部をシールするための軟材シートであって、上記複数個の細胞収容容器の内部と外部とを通気することができる軟材シートと、
を有する、細胞の保存又は輸送器具。
＜２＞　上記軟材シートが、細胞収容容器側の軟材シート本体とその反対側に通気性を有する呼気用シートとを有してなり、軟材シート本体は、上記複数個の細胞収容容器の内部と外部を通気するための穴を有し、呼気用シートは、ＪＩＳ　Ｌ１０９２による撥水度が５ｋＰａ以上である防水性、及びＴＡＰＰＩ　Ｔ４６０によるガレー透気度が３０秒／１００ｃｍ^３以下である通気性を有する、＜１＞に記載の細胞の保存又は輸送器具。
＜３＞　上記軟材シート本体に設けられた穴の直径が１ｍｍ～８ｍｍである、＜２＞に記載の細胞の保存又は輸送器具。
＜４＞　上記軟材シート本体に設けられた穴は、
（１）上記細胞収容容器の開口部内に少なくとも１つ、及び
（２）上記細胞収容容器の上部開口部より外側、かつ、上記細胞収容容器が保持された上記プレートの凹部の上部開口部より内側に少なくとも１つ設けられている、＜２＞又は＜３＞に記載の細胞の保存又は輸送器具。
＜５＞　上記軟材シート本体に設けられた穴は、（１）上記細胞収容容器の開口部内から、（２）上記細胞収容容器の上部開口部より外側、かつ、上記細胞収容容器が保持された上記プレートの凹部の上部開口部より内側を、またぐように少なくとも一つ設けられている、＜２＞又は＜３＞に記載の細胞の保存又は輸送器具。
＜６＞　上記軟材シートまたは軟材シート本体が、ゲルシートである、＜１＞から＜５＞の何れか一に記載の細胞の保存又は輸送器具。
＜７＞　上記軟材シートまたは軟材シート本体の、ＪＩＳ　Ｋ７３１２によるアスカーＣ硬度が４０度以下である、＜１＞から＜６＞の何れか一に記載の細胞の保存又は輸送器具。
＜８＞　上記軟材シートまたは軟材シート本体の厚さが１ｍｍ以上５ｍｍ以下である、＜１＞から＜７＞の何れか一に記載の細胞の保存又は輸送器具。
＜９＞　上記細胞収容容器の底部が、微小孔を有するフィルムにより構成されている、＜１＞から＜８＞の何れか一に記載の細胞の保存又は輸送器具。
＜１０＞　上記複数個の細胞収容容器、上記プレート、及び上記軟材シートを、厚さ方向に圧縮した状態で保持するための保持部材をさらに有する、＜１＞から＜９＞の何れか一に記載の細胞の保存又は輸送器具。
＜１１＞　上記保持部材が、一組の押さえ板と複数個のボルトとを含む、＜１０＞に記載の細胞の保存又は輸送器具。
＜１２＞　上記保持部材が、外側収容容器と、外側収容容器上蓋と、上記外側収容容器と上記外側収容容器上蓋とを圧着して係止する圧着係止手段とを含む、＜１０＞に記載の細胞の保存又は輸送器具。
＜１３＞　上記複数個の細胞収容容器の少なくとも一部に細胞が収容されている＜１＞から＜１２＞の何れか一に記載の細胞の保存又は輸送器具を輸送することを含む、細胞の輸送方法。

　本発明による細胞の保存又は輸送器具、及び本発明による細胞の輸送方法によれば、細胞培養容器そのものを用いて保存又は輸送をすることができる。
　本発明による細胞の保存又は輸送器具、及び本発明による細胞の輸送方法によれば、細胞の輸送時において細胞の呼吸に必要な酸素を供給することができる。
　本発明による細胞の保存又は輸送器具、及び本発明による細胞の輸送方法によれば、細胞の輸送時において、内圧が上昇することによる影響によると考えられる培地の移動を抑制することができる。

図１は、本発明の細胞の保存又は輸送器具の一実施形態を模式的に示した展開斜視図である。図２は、収容容器（セルカルチャ―インサート）とウェルプレートの凹部（ウェル）の関係を模式的に示す拡大部分断面図である。図３は、軟材シート本体４に設けられる穴４１の形態を模式的に示す拡大平面図である。図４は、軟材シート本体４に設けられる穴４１の別の形態を模式的に示す拡大平面図である。図５は、本発明の細胞の保存又は輸送器具の別の一実施形態を模式的に示した展開斜視図である。図６は、図５に示した器具を閉じた形態を模式的に示す斜視図である。図７は、本発明の細胞の保存又は輸送器具のさらに別の一実施形態を模式的に示した展開斜視図である。図８は、本発明の細胞の保存又は輸送器具のさらに別の一実施形態を模式的に示した展開斜視図である。図９は、セルカルチャーインサートの配置を示す。図１０は、各種ゲルシートの酸素透過性を対比したグラフである。図１１は、収容容器の開口部を被覆せずウェルプレートの蓋をしたのみの状態での収容容器内の酸素濃度の経時変化を示すグラフである。図１２は、収容容器の開口部に軟材シート（穴なし）を適用した状態での収容容器内の酸素濃度の経時変化を示すグラフである。図１３は、収容容器の開口部に軟材シート（穴あり）をした状態での収容容器内の酸素濃度の経時変化を示すグラフである。図１４は、穴及び滅菌による経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）のインキュベーションの前後で対比した棒グラフである。図１５は、細胞の保存又は輸送器具を輸送中の収容容器内の温度の経時変化を示すグラフである。図１６は、細胞の保存又は輸送器具の輸送前後におけるＴＥＥＲを示すグラフである。図１７は、細胞の保存又は輸送器具の輸送前、輸送後、回復培養後におけるＴＥＥＲを示すグラフである。図１８は、輸送しないで培養した細胞と輸送後の細胞についてＣＹＰ３Ａ４活性を測定した結果を示す。

　本発明の実施形態について、以下に説明する。
　本発明は、複数個の細胞収容容器と、複数個の細胞収容容器を内部に保持するための複数個の凹部を有するプレートと、複数個の細胞収容容器の上部開口部及びプレートの凹部の側壁がなす側壁上部をシールするための軟材シートであって、複数個の細胞収容容器の内部と外部とを通気することができる軟材シートとを有する、細胞の保存又は輸送器具である。

　細胞活性を維持した輸送に必要な条件としては、
（１）輸送振動があっても培地がプレートより出ないこと；
（２）細胞が消費する酸素を外部から補填できること；及び
（３）セルの内外にある培地がポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）フィルムを介して移動しないこと：
が挙げられる。本発明の細胞の保存又は輸送器具によれば、上記の条件を満たした状態で、細胞の保存及び輸送を行うことができる。

　本発明の効果は上記した通りであるが、アプリケーション上の副次的な利点としては以下を挙げることができる。市販の細胞輸送器具は高額になりがちであり、また市販の細胞培養容器そのもので細胞を輸送することは事実上不可能であった。本発明によればこのような状況を改善し、比較的安価な市販の細胞培養容器を用いて細胞の輸送を行うことができる。また細胞培養容器そのままを使用することで、細胞を発送する者の作業、及び細胞を受け取る者の作業を簡略化できる。具体的には、細胞を入れ替える必要がなく、手技による影響、コンタミネーションの危険を大幅に軽減することができる。また、輸送による細胞へのダメージを低減させることが可能である。

［細胞収容容器］
　本発明の細胞の保存又は輸送器具は、複数個の細胞収容容器を有する。ここで複数個とは２個以上であれば特に制限されないが、好ましくは４個以上１００個以下であり、より好ましくは８個以上５０個以下であり、特に好ましくは１２個以上４０個以下である。

　細胞収容容器としては、細胞を収容しうる容器であれば特に限定されないが、好ましくは容器内で細胞を培養できる機能を有する容器が好ましい。細胞収容容器としては、例えば、セルカルチャーインサートとも称される細胞培養容器を使用してもよい。細胞収容容器の形状は特に限定されないが、略円筒形状の容器が挙げられる。細胞を培養する観点からは、容器の底部に、細胞が定着するための多孔質で培地の流動が可能な樹脂フィルムが配設されているものが好ましい。細胞収容容器の底部が、微小孔を有するフィルムにより構成されていることが好ましい。微小孔の孔径は特に制限されない。

　略円筒形状の細胞収容容器において開口部の円相当直径は３ｍｍ以上であることが好ましく、１０ｍｍ以上であることがより好ましい。上限値としては、３５ｍｍ以下であることが実際的である。

［プレート］
　本発明の好ましい実施形態に係る細胞の保存又は輸送器具は、複数個の細胞収容容器を内部に保持するための複数個の凹部を有するプレートを有する。ここで複数個とは、具体的には、２個以上であれば特に制限されないが、好ましくは４個以上１００個以下であり、より好ましくは８個以上５０個以下であり、特に好ましくは１２個以上４０個以下である。

　プレート（ウェルプレートとも言う）が有する凹部は、細胞収容容器を収納できる形態であることが好ましい。かかる事情から、ウェルプレートの凹部は、その開口部が細胞収容容器の開口部の直径より大きいことが好ましい。具体的には、細胞収容容器の開口部の円相当直径よりも２ｍｍ大きいことが好ましく、５ｍｍ大きいことがより好ましい。上限は特にないが、細胞収容容器の開口部の円相当直径に対しプラス２０ｍｍ以下であることが実際的である。プレートの凹部の深さは、上記細胞収容容器を収納できる寸法であることが好ましい。凹部の深さは細胞収容容器の深さよりも２ｍｍ以上大きいことが好ましく、５ｍｍ以上大きいことがより好ましい。上限は特にないがプラス２０ｍｍ以下であることが実際的である。具体的な寸法でいうと、ウェルプレートの凹部の開口部の開口径で４ｍｍ以上であることが好ましく、１５ｍｍ以上であることがより好ましい。上限値は４０ｍｍ以下であることが実際的である。ウェルの深さとしては、４ｍｍ以上であることが好ましく、１５ｍｍ以上であることがより好ましい。上限値は３０ｍｍ以下であることが実際的である。

［軟材シート］
　本発明の細胞の保存又は輸送器具は、複数個の細胞収容容器の上部開口部及びプレートの凹部の側壁がなす側壁上部をシールするための軟材シートであって、複数個の細胞収容容器の内部と外部とを通気することができる軟材シートを有する。

　軟材シートとして、好ましくは、細胞収容容器側の軟材シート本体とその反対側に通気性を有する呼気用シートとを有してなる。軟材シート本体には、複数個の細胞収容容器の内部と外部を通気するための穴を有することが好ましい。

　軟材シート又は軟材シート本体の厚さは特に限定されないが、段差に十分に追従し、一方で厚くなりすぎないことを考慮すると、厚さの下限値が１ｍｍ以上であることがより好ましく、２ｍｍ以上であることがさらに好ましい。厚さの上限値に特に制約はないが、コストを想定した場合、が２０ｍｍ以下であることが好ましく、１０ｍｍ以下であることがより好ましく、５ｍｍ以下であることがさらに好ましい。

　軟材シート又は軟材シート本体に穴を設ける場合には、そのサイズは、上述したセルカルチャーインサートの開口部の大きさとの関係で定められることが好ましい。軟材シート又は軟材シート本体の穴の大きさは、変形した際に穴として貫通している大きさであればよく、円にした時の直径として、０．５ｍｍ以上であることが好ましく、１ｍｍ以上であることがより好ましく、２ｍｍ以上であることがさらに好ましい。上限値は、１０ｍｍ以下であることが好ましく、８ｍｍ以下であることがより好ましく、５ｍｍ以下であることがさらに好ましい。

　穴の形状は任意に定められればよいが、円形にすることがより実際的である。あるいは、図３に示したような２つの穴が併設されている場合、２つの穴がつながった正面視においてひょうたん型（楕円形の中央の部分がくびれた形）の穴であってもよい。

　呼気用シートの厚さは特に限定されないが、厚さの下限値が０．０５ｍｍ以上であることが好ましく、０．１ｍｍ以上であることがより好ましく、０．１５ｍｍ以上であることがさらに好ましい。厚さの上限値が１ｍｍ以下であることが好ましく、０．５ｍｍ以下であることがより好ましいく、０．２ｍｍ以下であることがさらに好ましい。

　呼気用シートは防水性を有することが好ましい。例えば、ＪＩＳ　Ｌ１０９２（２００９）の撥水度で、５ｋＰａ以上であることが好ましく、６ｋＰａ以上であることがより好ましく、７ｋＰａ以上であることがさらに好ましく、８ｋＰａ以上であることが特に好ましい。撥水度の上限値は特にないが、一般的には５０ｋＰａ以下である。

　呼気用シートは通気性を有することが好ましい。通気性としては、ＴＡＰＰＩ　Ｔ４６０によるガレー透気度が３０秒／１００ｃｍ^３以下であることが好ましく、２７秒／１００ｃｍ^３以下であることがより好ましく、２５秒／１００ｃｍ^３以下であることがさらに好ましく、２２秒／１００ｃｍ^３以下であることが特に好ましい。下限値は特にないが、一般的には、５秒／１００ｃｍ^３以上である。

　穴を設けた軟材シート又は軟材シート本体に、防水性及び通気性を有する呼気用シートを設けることにより、細胞への影響を軽減した状態で、細胞を輸送することが可能になる。上記の構成を採用することにより、先行技術文献に記載のような細胞輸送のための専用容器は不要となり、細胞収容容器の上面に凹凸がある状態でも、シールを簡単に行うことができる。

　軟材シート本体に設けられた穴は、（１）細胞収容容器の開口部内に少なくとも１つ、（２）細胞収容容器の上部開口部より外側かつ、細胞収容容器が保持されたプレートの凹部の上部開口部より内側に少なくとも１つ、設けられていることが好ましい。この点は後記の図３の説明においてより詳しく説明する。

　軟材シート本体に設けられた穴は、（１）細胞収容容器の開口部から、（２）細胞収容容器の上部開口部より外側かつ、細胞収容容器が保持されたプレートの凹部の上部開口部より内側を跨いで設けられていることも好ましい。この点は後記の図４の説明においてより詳しく説明する。

　軟材シートまたは軟材シート本体は、ゲルシートであることが好ましい。軟材シートまたは軟材シート本体の、ＪＩＳ　Ｋ７３１２によるアスカーＣ硬度が４０度以下であることが好ましい。軟材シートまたは軟材シート本体の、ＪＩＳ　Ｋ７３１２によるアスカーＣ硬度は、さらに３７度以下が好ましく、３５度以下がより好ましく、３２度以下が特に好ましい。下限値は特に限定されない。

［保持部材］
　本発明の細胞の保存又は輸送器具の好ましい形態においては、複数個の細胞収容容器、プレート、及び軟材シートを、厚さ方向に圧縮した状態で保持するための保持部材をさらに有している。保持部材の第一の例としては、一組の押さえ板と複数個のボルトとを含むものが挙げられる（図１参照）。また、保持部材の第二の例としては、外側収容容器と、外側収容容器上蓋と、外側収容容器と蓋とを圧着して係止する圧着係止手段とを含むものが挙げられる（図５、６及び７参照）。第二の例の保持部材としては、例えば、市販のiP-TEC(R) 二次容器（株式会社サンプラテック、G-28516）を用いることが可能である。第二の例の保持部材を用いる場合、外側収容容器の形状によっては、複数個の細胞収容容器、プレート、及び軟材シートを外側収容容器に収容した際、厚さ方向に隙間ができ、外側収容容器上蓋と外側収容容器を圧着しても、複数個の細胞収容容器、プレート、及び軟材シートを十分に圧縮できない可能性もある。その場合、高さ調整用スペーサーをプレートの下部に配置することで、十分に圧縮することが可能になる（図８参照）。高さ調整用スペーサーの素材及び形状は特に限定されないが、例えば、適当な厚さのポリカーボネートプレートが好ましい。

［細胞の輸送方法］
　本発明の細胞の輸送方法は、複数個の細胞収容容器の少なくとも一部に細胞が収容されている、本発明の細胞の保存又は輸送器具を輸送することを含む。

　本発明に用いられる細胞の種類は特に限定されず、例えば、腸管細胞、肝細胞、血管内皮細胞、膵ベータ細胞、心筋細胞、神経細胞、皮膚上皮細胞、軟骨細胞、骨細胞、組織幹細胞、ＥＳ細胞（胚性幹細胞）、及びｉＰＳ細胞（人工多能性幹細胞）などを挙げることができる。

　腸管細胞、肝細胞、血管内皮細胞、膵ベータ細胞、心筋細胞、神経細胞、皮膚上皮細胞、軟骨細胞、骨細胞などの細胞の由来は特に限定されず、生体組織から採取した細胞でもよいし、幹細胞から誘導して得た細胞でもよい。また、細胞は、生体組織から分離した細胞（＝初代培養細胞）でもよいし、株化した細胞でもよい。

　細胞を輸送することに先立って、本発明による細胞の保存又は輸送器具を用いて細胞を培養する場合、細胞の培養温度は、４℃以上４０℃以下であることが好ましく、１０℃以上４０℃以下であることがより好ましく、２０℃以上４０℃以下であることが特に好ましい。細胞の培養のためには、空気（特に酸素）及び二酸化炭素が適度に細胞へ供給されることが好ましい。

　細胞を輸送する際には、細胞は、必要に応じて細胞培養培地と一緒に、細胞収容容器に収容することができる。
　細胞培養培地は、輸送される細胞の種類に応じて適宜選択することができ、例えば、ＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ　Ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｅａｇｌｅ　Ｍｅｄｉｕｍ）、Ｆ１２培地、ＲＰＭＩ培地（ＧＩＢＣＯ（登録商標）ＲＰＭＩ１６４０培地など）、又はこれらの混合培地などが挙げられるが、特に限定されない。細胞培養培地には、さらに血清及び抗生物質などを添加することもできる。

　細胞の輸送時における温度は特に限定されず、細胞は、常温で輸送してもよいし、１０～４０℃（好ましくは２０～４０℃、より好ましくは３０～４０℃）に調節した温度で輸送してもよい。あるいは、細胞を冷蔵（０～４℃）した状態において輸送してもよい。

　輸送時間は、特に限定されず、下限としては１時間以上、２時間以上、３時間以上、６時間以上、１２時間以上、２４時間、４８時間以上でもよく、上限としては２週間以下、又は１週間以下でもよい。

［好ましい実施形態］
　以下に、本発明の好ましい実施形態に係る細胞の保存又は輸送器具について、図面を参照しながらさらに詳細に説明する。

　図１は、本発明の細胞の保存又は輸送器具の一実施形態を模式的に示した展開斜視図である。本実施形態に係る器具１０は、押さえ板（上）１、ウェルプレートの蓋２、呼気用シート３、軟材シート本体（ゲルシート）４、細胞収容容器（セルカルチャーインサート）５、ウェルプレート本体６、押さえ板（下）７、ネジ（ボルト）１９で構成されている。

　使用に当たっては、収容容器５をウェルプレート本体のウェル（凹部）６１に挿入配置する。このとき、凹部６１には培地が容れられている。セルカルチャーインサート５の底部は培地が透過可能な構造（例えば樹脂フィルムによるメッシュ構造）とされている。したがって、セルカルチャーインサート５がウェル６１に入れられると、培地がウェル６１（外部領域Ｐ２）からセルカルチャーインサート５の内部領域Ｐ１へと流入する構造とされている（図２）。

　次に、ゲルシート４がセルカルチャーインサート５の上にこれを被覆する形で配置される。ゲルシート４の上には呼気用シート３が配設されている。本明細書においては、上記ゲルシート（軟材シート本体）４と呼気用シート３との組合せを軟材シート４２と呼ぶ。
軟材シートは予め、呼気用シート３とゲルシート４とが接合された形とされており、これをセルカルチャーインサート５に覆いかぶせるようにしてもよい。

　次いで、ウェルプレートの蓋２がかぶせられ、ウェルプレート本体６と当接し、内部を密閉する構造とされる。

　さらに本実施形態では、押さえ板（上）１及び押さえ板（下）７が準備されており、これをボルト１９でねじ止めして固定する。これにより、ゲルシート４がセルカルチャーインサート５により強固に密着すると共に、ウェルプレートの蓋２が不用意に開いてしまい、内容物がこぼれ出ることを防いでいる。

　図２は、収容容器（セルカルチャ―インサート）５とウェルプレートのウェル（凹部）６１との関係を模式的に示す部分断面図である。セルカルチャーインサート５の底部１３は、上述のとおり、培地１１が透過可能なメッシュ構造とされている。このようなメッシュ構造の底部１３は、例えばポリエチレンテレフタレートのような樹脂フィルムにより構成することができる。図２では、セルカルチャーインサート底部１３の上に細胞１２を定着した形態を示している。セルカルチャーインサート５の内部には、細胞１２を覆うのに十分な量の培地が供給される。上述のように、ウェル６１には培地１１が十分な量で満たされている。そこにセルカルチャーインサート５を挿入することで、底部１３のメッシュの側にも培地が接し、液相培養の状態が実現される。

　図２に示したように、本実施形態の器具においては、セルカルチャーインサート５の上部の開口部５１を封止するように軟材シート本体４が配設されている。軟材シート本体には例えばゲルシートが用いられる。そのため、十分な柔軟性を有しており、セルカルチャーインサートの上端部分と、ウェルプレートのウェルの側壁の上端部（側壁上部６３）で形成される段差９にも好適に対応して追従し密着する。また、ゲルシートには適度な粘着性があるため、器具を揺らしたり、横にしたり、逆さにしたりしても液漏れを生じさせることがない。

　本実施形態においては、軟材シート本体４に穴４１が空けられている。この穴があることで、上部の呼気用シートの通気性が発揮される。すなわち、穴４１を介して呼気用シート３を透過した気体（酸素）がセルカルチャーインサートの内部に供給される。この気体（酸素）が培地を通じて細胞１２に供給されることで、細胞はその健全な状態が維持される。

　軟材シート４にあけられる穴４１の形態は特に限定されないが、少なくともセルカルチャーインサートの開口部５１の領域内にあけられることが好ましい。これにより、呼気用シート３を介した気体（特に酸素）の透過による、細胞の維持機能が発揮されることは上述のとおりである。

　図３及び図４は、軟材シート本体４に設けられる穴４１の形態を模式的に示す拡大平面図である。

　図３に示した形態では、セルカルチャーインサート５の内部領域Ｐ１（以下、内部領域と省略して呼ぶことがある）内の穴４１ｄと、セルカルチャーインサート外でウェルプレート６のウェル６１の内側となる領域Ｐ２（以下、外部領域と省略して呼ぶことがある）内にある穴４１ｃが示されている。図中、図示の便宜上、穴の位置を破線で示している。
この穴の作用により、セルカルチャーインサートの内部領域Ｐ１の内圧と、外部領域Ｐ２の内圧との均衡が確保される。セルカルチャーインサートの内部領域Ｐ１と外部領域Ｐ２とは、上記のとおり、セルカルチャーインサートの底部に設けられた微小孔を有するフィルム１３を介して、培地（液体）が移動可能な状態になっている。ゲルシートに穴のない場合、セルカルチャーインサート内部領域Ｐ１の内圧が上がり、培地１１がセルカルチャーインサート内部領域Ｐ１から外部領域Ｐ２に移行し、細胞１２が露出するなどの不具合が生じるが、穴によりこの不具体が回避されるため好ましい。このように内圧が上昇する理由はいくつか考えられるが、セルカルチャーインサートの開口部５１にゲルシート４が密着する度合いが、段差９にゲルシート４が密着する度合いより僅かに強いため、セルカルチャーインサート内部領域Ｐ１のシール度合いが、外部領域Ｐ２のシール度合いより強くなるため、輸送器具を細胞に好適な温度（３５℃前後）に加温した場合、シール度合いが僅かに強いＰ１の内圧がＰ２より高くなることが挙げられる。

　図４に示した形態では、比較的大きめの穴４１Ａが設けられている。このように大きな穴４１Ａとすることで、セルカルチャーインサート内部領域Ｐ１にかかる部分４１ｅと、その外側の領域（外部領域）Ｐ２にかかる部分４１ｆとが作出され、両領域における内圧差が生じることを防ぐことができる。

　図５は、本発明の細胞の保存又は輸送器具の別の一実施形態を模式的に示した展開斜視図である。本実施形態の器具２０においては、図１に示した器具に対して、専用の押さえ板である外側収容容器上蓋１７と圧着係止具付き外側収容容器７７を採用している。このような構成を採用することにより、簡便に、圧着係止具を上蓋の方に倒し込むことにより、容易に器具を固定することができる。図６は、圧着係止具７７ａを倒し込むときの動きを示した斜視図である。本実施形態の器具によれば、面倒なねじ止め作業がなく、簡単に器具を固定することができる。図７は、本発明の細胞の保存又は輸送器具のさらに別の一実施形態を模式的に示した展開斜視図である。圧着係止具付き外側収容容器７７の、ウェルプレート本体６の収容部の深さが図５のものと比べて浅いため、より簡便にウェルプレート本体６を外側収容容器から取り出すことができる。圧着係止具付き外側収容容器７７の右端にある棒は、位置決め用のピンを示す。
　図８は、本発明の細胞の保存又は輸送器具のさらに別の一実施形態を模式的に示した展開斜視図である。圧着係止具付き外側収容容器７７は、市販のiP-TEC(R) 二次容器を用いている。ウェルプレート本体６の下部に、高さ調整用スペーサーＹが設けられている。このような構成を採用することにより、圧着係止具付き外側収容容器７７の厚さ方向の寸法に関わらず、圧着係止具付き外側収容容器７７による細胞収容容器、前記プレート、及び前記軟材シートの圧縮を十分に行うことができる。

＜セルカルチャーインサート（細胞の収容容器）＞
　本発明の細胞の保存又は輸送器具は、複数の細胞収容容器（セルカルチャーインサートとも称する）を有する。セルカルチャーインサートのセル底面には、数μmの微小孔の空いたＰＥＴフィルムがついており、フィルム上で細胞を培養することのできるものであることが好ましい。セルカルチャーインサートとして具体的には、ｃｏｒｎｉｎｇ社　ｆａｌｃｏｎ（登録商標）セルカルチャーインサートなどを使用することができる。

＜ウェルプレート＞
　ウェルプレートは、各ウェルが、セルカルチャーインサートを収容し、セル内で細胞を培養するための培地を好適に保持しうるものであることが好ましい。具体的には、ｃｏｒｎｉｎｇ社　ｆａｌｃｏｎ（登録商標）２４ウェルプレートなどを使用することができる。

＜ゲルシート（軟材シート本体）＞
　ゲルシートの具体例としては、ポリウレタン、シリコーン等の樹脂シートが挙げられる。具体的には、エクシール　ハイパーゲルｔ３，ｔ１アスカーＣ硬度３０、エクシール　人肌ゲル（ウレタン系）ｔ３　硬度０、タイカ　ラムダゲル（シリコーン系）などを好適に用いることができる。

　軟材シート本体を構成するゲルシートは、材料の特徴である低い硬度で、ウェルプレート側壁の上端部の段差に追従して高いシール性を発揮するものが好ましい。例えば、輸送時の振動で液揺れしても内部の培地を保持できるほどのシール性があることが好ましい。
細胞に必要な酸素を供給可能な呼気用穴を敷設できるものが望ましい。

　ゲルシート（軟材シート本体）に設けられる穴についての第一の具体例としては、（１）細胞収容容器の開口部内に少なくとも１つ、（２）細胞収容容器の上部開口部より外側かつ、細胞収容容器が保持されたプレートの凹部の上部開口部より内側に少なくとも１つ設けられている態様が挙げられる（図３）。あるいは、第二の具体例としては、（１）細胞収容容器の開口部内から、（２）細胞収容容器の上部開口部より外側かつ、細胞収容容器が保持されたプレートの凹部の上部開口部より内側の領域を跨いで設けられている態様が挙げられる（図４）。

＜呼気用シート（通気シート）＞
　例えば、デュポン社製　タイベック（登録商標）１０７３Ｂの呼気シートが挙げられる。軟材シート本体に設けた穴を介して、培地が外に出ないように、防水であり通気性を有するものが好ましい。例えば、ＰＥＴ系不織布が挙げられる。

＜押さえ板（保持部材）（上下）＞
　ゲルシートを適度に押し付けるために、上下の押さえ板（保持部材）とボルトとを採用する例が挙げられる。例えば、押さえ板としては、ポリカーボネートプレート　ｔ１０が挙げられる。これとボルトとの組合せである。
　押さえ板の厚さは特に限定されないが、厚さの下限値が５ｍｍ以上であることが好ましく、上限値が２０ｍｍ以下であることが好ましい。

　本発明の保存又は輸送器具の変形例として、ゲルシートのうち気体透過性のよいものを採用する例が挙げられる。これにより、呼気用シートや穴をあけることを省略することができる。参考までに上記で例示した材料について、酸素を脱気した後所定時間（１時間）後の酸素濃度について挙げておく（図１０参照）。このようにすることで、呼気用シートを採用しない構成とすることもできる。図１０中の寸法はゲルシートの厚さを意味する。

　図１０において、ハイパーゲルシートとは、「エクシール　ハイパーゲルｔ３，ｔ１アスカーＣ硬度３０」を示し、人肌ゲルとは、「エクシール　人肌ゲル（ウレタン系）ｔ３　硬度０」を示し、ラムダゲルとは、タイカ　ラムダゲル（シリコーン系）を、現行キャップとは、サンプラテック社のｉＰ－ＴＥＣディッシュカバー（所定箇所の厚みが０．５ｍｍ程度のシリコーン材質で作られたキャップ）を示す。

　図１０の測定方法については、以下の通りである。測定物であるゲルシートによって隔てられた一方を脱気して真空とし（無酸素側）、もう一方は大気に接触させ（大気側）、ゲルシートを介した大気側から無酸素側への１時間後の酸素透過量を、無酸素側に設置した酸素濃度計（ハックウルトラアナリティカル社、ＭＯＤＥＬ３６００型）を用いて測定した。

　あるいは、ゲルシートに穴をあけるのに変えて、所定の箇所を薄肉にして気体を透過させることが挙げられる。この態様においても、呼気用シートを採用する必要がなくなり、部材点数を減らすことができる。

　本発明の好ましい実施形態によれば、細胞培養に用いたウェルプレート、セルカルチャーインサートをそのまま使用し、開口部の凹凸を覆うように軟材シート本体（例えば、ゲルシート（アスカーＣ硬度で硬度４０度以下、好ましくは３０度以下））を載せ、凹凸になじませるようにシールを行うことができる。細胞への酸素供給及び輸送状態での温度（一般に３７℃）への温度上昇に伴う内圧上昇による培地のセル内外へ、細胞付与した膜を通って培地が移動することを抑制する。そのために軟材シート本体には穴を少なくとも１個、少なくともセル内部へかかるように設けることが好ましい。穴の直径は前述のとおり１～８ｍｍ程度であるが、特に限定されない。また、上記の穴からの液漏れを防止するために、ゲルシート上部には防水性かつ通気性に優れた膜（例えばタイベック（登録商標）１０７３Ｂ等）を設けた状態でウェルプレートの蓋をし、ゲルシートが破壊されず、一方で凹凸容器に倣うような力で挟持（サンド）して輸送することが好ましい。

　挟持する方法としては、プレートとボルトにより行ってもよいし（図１参照）、圧着係止具（パッキン）付きの弁当箱のような押し付け可能な蓋つき容器に収納してもよい（図５、６参照）。

　本発明を以下の実施例により具体的に説明するが、本発明は実施例により限定されるものではない。

［試料の調製］
　図１に示した器具を用いて細胞の保存輸送形態とした。このとき採用した材料を以下に記載する。

＜ウェルプレート＞
　ｃｏｒｎｉｎｇ社のｆａｌｃｏｎ（登録商標）２４ウェルプレート（４行×６列のウェルを有する）
＜セルカルチャーインサート＞
　ｃｏｒｎｉｎｇ社のｆａｌｃｏｎ（登録商標）セルカルチャーインサート
　セル底面に数μｍの微小孔の空いたＰＥＴフィルムがついている。ＰＥＴフィルム上で細胞を培養した。

＜ゲルシート＞
　エクシール　ハイパーゲル　アスカー硬度３０（タイプＣ）
　厚さ３ｍｍ
　細胞に必要な酸素供給可能な穴は下記の個々の試験で必要な形で形成した。

＜呼気用シート＞
　デュポン　タイベック（登録商標）１０７３Ｂ
　撥水度（ＪＩＳ　Ｌ１０９２）　８ｋＰａ以上
　厚さ　約０．１８ｍｍ
　通気性：ガレー透気度（ＴＡＰＰＩ　Ｔ４６０）２２ｓｅｃ／１００ｃｃ
　防水性及び通気性を有するＰＥＴ系不織布である。

＜押さえ板など＞
　ポリカーボネートプレートｔ１０（厚さ１０ｍｍ）及びボルト

＜用いた細胞＞
国際公開第２０１９／１５６２００号パンフレットに記載の方法で分化誘導した腸管上皮
＜細胞培養の条件＞
培地：国際公開第２０１９／１５６２００号パンフレットに記載の方法で腸管上皮細胞に分化誘導する際の培地及び添加物培地量：セルカルチャーインサート内－１５０μＬ／セルカルチャーインサート外－６００μＬ播種密度：6.6×10⁴cells/well

実施例１：液漏れの確認１
　上記した図１の器具のウェルに食紅で着色した水を入れた。器具のゲルシートには、直径３ｍｍの穴を、図３の４１ｃ、４１ｄに該当する位置に設けた。器具を逆さにして３時間放置した。結果として液漏れは実質的に生じなかった。わずかににじむ程度であり、液漏れの問題はなかった。

実施例２：液漏れの確認２
　上記した図１の器具のウェルに食紅で着色した水を入れた。器具のゲルシートには、直径３ｍｍの穴を、図３の４１ｃ、４１ｄに該当する位置に設けた。着色した水を入れた器具を、アズワン　ミキサー（ＴＲＩＯ　ＨＭ－１Ｎ：振幅４．５ｍｍ）上にセットし、１時間振動させてウェル内の着色水が漏れないかを確認した。このときの振動条件は、目視で最も振幅の広い条件とした。結果として、液漏れは生じなかった。

実施例３：酸素の透過の確認
　経時による酸素濃度の変化を、測定器（ＰｒｅＳｅｎｓ社　Ｆｉｂｏｘ４）により測定した。酸素濃度の測定は、ウェルプレートの底にセンサーを張り付けて行った。
　上記した図１の器具のウェル内に水を入れ、そこに窒素を吹き込み、酸素濃度を５％以下にしてから、測定を開始した。

　ウェルプレートの蓋のみを乗せた状態で酸素濃度を測定した場合には、４時間程度で酸素濃度は１８％まで回復した（図１１参照）。
　ゲルシート（穴なし）を設置した場合、４時間程度で酸素濃度は１０％までしか回復しなかった（図１２参照）。
　ゲルシート（穴あり）を設置した場合、酸素濃度は、蓋のみに対してやや立ち上りが遅く、最終的に到達した酸素濃度も低い結果であるが、約４～５時間で酸素濃度は１７％程度まで回復した（図１３参照）。従って、穴なしのゲルシートを設置した場合と比較して、十分に酸素透過可能であることがわかった。ここでの穴は直径６ｍｍであり、穴は図４の４１Ａのように開けた。

実施例４：穴の大きさ及び個数による細胞の経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）変化
　図１に示した器具を用いて細胞の保存輸送形態としたサンプルを用いて、経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）測定を行った。すなわち、保存輸送形態にして培養する前の細胞のＴＥＥＲと、保存輸送形態にして２４時間培養した後の細胞のＴＥＥＲを測定し、その変化を測定した。細胞、培養条件は、［試料の調製］に記載した通りで、培養温度は３７℃で実施した。保存輸送形態で用いたゲルシートには、それぞれ大きさ、個数の異なる穴を開け、その影響を調べた。ＴＥＥＲの測定装置及び測定方法は、以下の通りである。

＜ＴＥＥＲ測定装置＞
ＥＶＯＭ２（ＷＰＩ製）
ＥＮＤＯＨＭ－６（ＷＰＩ製）
ＣＡＢＬＡＹ，ＥＮＤＯＨＭ－２４＆９６（ＷＰＩ製）

＜ＴＥＥＲ測定方法＞
（１）培地を５００μＬ入れたＥＮＤＯＨＭ－６にセルカルチャーインサートをセットする
（２）ＥＶＯＭ２に表示された値を転記する（細胞のいないブランク用のインサートも同様に測定する）
（３）ＴＥＥＲ値を算出する（（（２）の値）－（（２）のブランクの値））×面積（０．３３ｃｍ^２）

　測定の結果を図１４に示す。
　図１４における略称の意味は以下の通りである。Φ１内外とは、直径１ｍｍの穴をセルカルチャーインサートの内外（Ｐ１，Ｐ２）に該当する位置に設けたことを示す。Φ１．５内外とは、直径１．５ｍｍの穴をセルカルチャーインサートの内外（Ｐ１，Ｐ２）に該当する位置に設けたことを示す。Φ２内外とは、直径２ｍｍの穴をセルカルチャーインサートの内外（Ｐ１，Ｐ２）に該当する位置に設けたことを示す。Φ６貫通とは、セルカルチャーインサートの内外（Ｐ１，Ｐ２）に跨ぐように直径６ｍｍの穴を設けたことを示す。

　図１４の結果からセルカルチャーインサートの内圧上昇を抑制し、細胞を良好に培養するためには、ゲルシートに穴をあけることが好ましいことが分かる。

実施例５：セル内の液移動の確認
　上記した図１の器具を用いて試験を行った。輸送器具のゲルシートは、以下３種類を用意した。
（１）穴がない場合。
（２）直径１ｍｍの穴をセルカルチャーインサートの内外（Ｐ１，Ｐ２）に該当する位置に設けた場合（図３の形態）。
（３）直径１ｍｍの穴をセルカルチャーインサートの内（Ｐ１）に該当する位置に設けた場合。
（４）直径６ｍｍの穴をセルカルチャーインサートの内外（Ｐ１，Ｐ２）を跨ぐように設けた場合（図４の形態）。
　上記（１）では、ウェルプレート３箇所に、食紅で着色した着色水を、セルカルチャーインサート内－２００μＬ／セルカルチャーインサート外－６００μＬ入れ、インキュベーターにて３７℃で２４時間経時させた。上記（２）及び（３）では、ウェルプレート６箇所に、上記（４）では、ウェルプレート１２箇所に、食紅で着色した着色水を、セルカルチャーインサート内－２００μＬ／セルカルチャーインサート外－６００μＬ入れ、それぞれ蓄熱材を入れた保温箱で輸送（約１日経過）した。経時後のウェル内の液量を観察した。

　（１）の場合、３箇所ともにセル内（Ｐ１）の液はなかった（外へ液移動した）。

　（２）、（３）及び（４）の場合、いずれのセルでもセル内の液移動はなかった。また、保温箱による輸送において内部温度を測定した結果を図１５に示す。

実施例６：実際の輸送による評価
　上記した図１の器具を使用し、図３または図４の態様で保存輸送形態とした器具を用い一般の輸送業者により細胞の輸送を行った。細胞、培養条件は、［試料の調製］に記載した通りで、また、実施例５と同様、蓄熱材を入れた保温箱で輸送（約１日経過）した。輸送前後に、下記の装置、手順でＴＥＥＲ（経上皮電気抵抗）を測定した。

　ＴＥＥＲの測定結果を図１６に示した。図中φ６は６ｍｍ径の穴をゲルシートに設けたことを意味する。このときの穴の配置は図４の４１Ａのとおりである。Φ３は３ｍｍ径の穴をゲルシートに設けたことを意味する。このときの穴の配置は図３の４１ｃ、４１ｄのとおりである。Ｔｙｐｅとは３７℃　５％ＣＯ_２で細胞を培養・保存したときの結果を表す。

　輸送後のＴＥＥＲ値は、輸送前の値と概ね同じ値を示している。実用上、十分な安定性を有していることが分かる。

実施例７：実際の輸送による評価（２）
　上記した図５の器具を使用し、図４の態様で保存輸送形態とした器具を用い一般の輸送業者により細胞の輸送を行った。細胞、培養条件は、［試料の調製］に記載したのと同様である。ただし、ウェルプレートには２４個のセルカルチャーインサートを収容し、内１２個のセルカルチャーインサートは細胞が培養されたもの、残り１２個のセルカルチャーインサートは、細胞が培養されていないものである。セルカルチャーインサートの配置は、図９の通りである（図９中、塗りつぶされた丸は細胞が培養されたセルカルチャーインサート、白色の丸は細胞が培養されていないセルカルチャーインサートを示す）。また、実施例５と同様、蓄熱材を入れた保温箱で輸送（約１日経過）した。輸送に伴う培地の漏れや、セルカルチャーインサートのズレはなかった。輸送前後及び輸送後一日の回復培養後にＴＥＥＲを、輸送後にＣＹＰ３Ａ４活性、小腸マーカー及び肝臓マーカーの遺伝子発現をそれぞれ測定した。

　ＴＥＥＲは、実施例６と同様の装置、手順で測定した。結果を図１７に示す。Ｔｙｐｅとは３７℃　５％ＣＯ_２で細胞を培養・保存したときの結果を表す。
　輸送後のＴＥＥＲ値は、輸送前の値及び輸送せずに培養した値と概ね同じ値を示している。実用上、十分な安定性を有していることが分かる。

　ＣＹＰ３Ａ４活性は、ミダゾラムの代謝産物の量から測定した。輸送後、腸管上皮細胞を５ μｍｏｌ／Ｌミダゾラムを含む培地で３７℃にてインキュベーションし、２時間経過後、培地をサンプリングした。代謝活性は、液体クロマトグラフィー－マススペクトロメーター（ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）を用いて測定した培地中の１－水酸化ミダゾラムの量より算出した。代謝実験終了後、タンパク定量を行い、代謝活性をタンパク量で補正した。結果を図１８に示す。Ｔｙｐｅとは３７℃　５％ＣＯ_２で細胞を培養・保存したときの結果を表す。
　輸送後のＣＹＰ３Ａ４活性は、輸送せずに培養した値と概ね同じ値を示している。実用上、十分な安定性を有していることが分かる。

　遺伝子発現は、輸送後の腸管上皮細胞から、ＲＮｅａｓｙ（登録商標）Ｍｉｎｉ　Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を用いてＲＮＡを抽出し測定した。操作は、添付マニュアルに従った。逆転写反応として、相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）の合成は、Ｈｉｇｈ　ｃａｐａｃｉｔｙ　ＲＮＡ－ｔｏ－ｃＤＮＡ　Ｋｉｔ（ａｐｐｌｉｅｄ　ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用した。操作は添付マニュアルに従った。
　リアルタイム逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ　ＲＴ－ＰＣＲ）は、ＴａｑＭａｎ（登録商標）　Ｇｅｎｅ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　Ｍａｓｔｅｒ　Ｍｉｘ（ａｐｐｌｉｅｄ　ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用い、ｃＤＮＡを鋳型にして行った。操作はマニュアルに従った。内在性コントロールとしてリボソームの１８Ｓを用い、測定結果を補正した。種々の遺伝子のプローブを用いてｍＲＮＡの発現量を見積もった。結果を表１に示す。表１における数値は、小腸マーカーについては、Ａｄｕｌｔ　Ｉｎｔｅｓｔｉｎｅにおける発現量を１００としたときの相対発現量を、肝臓マーカーについては、Ｃａｃｏ－２における発現量を１００としたときの相対発現量を示す。Ｔｙｐｅとは３７℃　５％ＣＯ_２で細胞を培養・保存したときの結果を表す。
　輸送後の遺伝子発現は、輸送せずに培養した値と概ね同じ値を示している。実用上、十分な安定性を有していることが分かる。

１　押さえ板（保持部材）（上）
１１　培地
１２　細胞
１３　培養フィルム
１７　外側収容容器上蓋
１９　ボルト
２　ウェルプレート蓋
３　呼気用シート（通気シート）
４　ゲルシート（軟材シート本体）
４１　穴
４１Ａ　穴
４１ｃ、４１ｄ　穴
４１ｅ、４１ｆ　穴の一部
４２　軟材シート
５　セルカルチャーインサート（細胞収容容器）
５１　セルカルチャーインサートの開口部
６　ウェルプレート
６１　ウェル（凹部）
６３　側壁上部
７　押さえ板（保持部材）（下）
７７　圧着係止具付き外側収容容器
７７ａ　圧着係止具
９　段差
１０、２０　細胞の保存又は輸送器具
Ｐ１　内部領域
Ｐ２　外部領域
Ｙ　高さ調整用スペーサー

Claims

　複数個の細胞収容容器と、
　前記複数個の細胞収容容器を内部に保持するための複数個の凹部を有するプレートと、
　前記複数個の細胞収容容器の上部開口部及び前記プレートの凹部の側壁がなす側壁上部をシールするための軟材シートであって、前記複数個の細胞収容容器の内部と外部とを通気することができる軟材シートと、
を有する、細胞の保存又は輸送器具。
　前記軟材シートが、細胞収容容器側の軟材シート本体とその反対側に通気性を有する呼気用シートとを有してなり、軟材シート本体は、前記複数個の細胞収容容器の内部と外部を通気するための穴を有し、呼気用シートは、ＪＩＳ　Ｌ１０９２による撥水度が５ｋＰａ以上である防水性、及びＴＡＰＰＩ　Ｔ４６０によるガレー透気度が３０秒／１００ｃｍ^３以下である通気性を有する、請求項１に記載の細胞の保存又は輸送器具。
　前記軟材シート本体に設けられた穴の直径が１ｍｍ～８ｍｍである、請求項２に記載の細胞の保存又は輸送器具。
　前記軟材シート本体に設けられた穴は、
（１）前記細胞収容容器の開口部内に少なくとも１つ、及び
（２）前記細胞収容容器の上部開口部より外側、かつ、前記細胞収容容器が保持された前記プレートの凹部の上部開口部より内側に少なくとも１つ設けられている、請求項２又は３に記載の細胞の保存又は輸送器具。
　前記軟材シート本体に設けられた穴は、（１）前記細胞収容容器の開口部内から、（２）前記細胞収容容器の上部開口部より外側、かつ、前記細胞収容容器が保持された前記プレートの凹部の上部開口部より内側を、またぐように少なくとも一つ設けられている、請求項２又は３に記載の細胞の保存又は輸送器具。
　前記軟材シートまたは軟材シート本体が、ゲルシートである、請求項１から５の何れか一項に記載の細胞の保存又は輸送器具。
　前記軟材シートまたは軟材シート本体の、ＪＩＳ　Ｋ７３１２によるアスカーＣ硬度が４０度以下である、請求項１から６の何れか一項に記載の細胞の保存又は輸送器具。
　前記軟材シートまたは軟材シート本体の厚さが１ｍｍ以上５ｍｍ以下である、請求項１から７の何れか一項に記載の細胞の保存又は輸送器具。
　前記細胞収容容器の底部が、微小孔を有するフィルムにより構成されている、請求項１から８の何れか一項に記載の細胞の保存又は輸送器具。
　前記複数個の細胞収容容器、前記プレート、及び前記軟材シートを、厚さ方向に圧縮した状態で保持するための保持部材をさらに有する、請求項１から９の何れか一項に記載の細胞の保存又は輸送器具。
　前記保持部材が、一組の押さえ板と複数個のボルトとを含む、請求項１０に記載の細胞の保存又は輸送器具。
　前記保持部材が、外側収容容器と、外側収容容器上蓋と、前記外側収容容器と前記外側収容容器上蓋とを圧着して係止する圧着係止手段とを含む、請求項１０に記載の細胞の保存又は輸送器具。
　前記複数個の細胞収容容器の少なくとも一部に細胞が収容されている請求項１から１２の何れか一項に記載の細胞の保存又は輸送器具を輸送することを含む、細胞の輸送方法。