WO2021025444A1 - 식물유래 폴리페놀염의 대량 제조 방법 - Google Patents

식물유래 폴리페놀염의 대량 제조 방법 Download PDF

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WO2021025444A1
WO2021025444A1 PCT/KR2020/010296 KR2020010296W WO2021025444A1 WO 2021025444 A1 WO2021025444 A1 WO 2021025444A1 KR 2020010296 W KR2020010296 W KR 2020010296W WO 2021025444 A1 WO2021025444 A1 WO 2021025444A1
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stirrer
polyphenol
acetate
mass production
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PCT/KR2020/010296
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임흥섭
최홍식
양재혁
황명화
안희수
김홍렬
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주식회사 하임바이오
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    • B01J2219/00481—Means for mixing reactants or products in the reaction vessels by the use of moving stirrers within the reaction vessels

Definitions

  • the present invention relates to a method for mass-producing plant-derived polyphenol salts.
  • Polyphenolic compounds extracted from plants are referred to as natural biological response modifiers due to strong experimental evidence showing their ability to modulate the body's response to allergens, viruses and carcinogens. come. They show anti-allergic, anti-inflammatory, antibacterial and anti-cancer action.
  • polyphenolic compounds act as powerful antioxidants that prevent oxidative and free radical damage, and help prevent various diseases associated with oxidative stress.
  • it is difficult to secure sufficient amounts with high purity enough to use them as pharmaceutical compositions, and thus, they are not actually applied for medical purposes.
  • Korean Patent Laid-Open No. 10-2013-0113717 discloses "a method for fractionally purifying physiologically active substances from leaves and stems of ginseng”
  • Korean Patent Laid-Open No. 10-2017-0079469 discloses "Iso containing black beans.
  • a method for extracting flavone components” is disclosed.
  • extraction and purification are possible only through a very large number of steps, and the extraction and purification method varies depending on the type of plant and useful ingredient, and it is possible to mass-purify specific ingredients with high purity (99% or more). There are many difficulties.
  • the present invention relates to a method for mass-producing plant-derived polyphenol salts, and by using the method of the present invention, it is possible to secure a large amount of high-purity polyphenols at a level applicable to clinical use outside the laboratory scale.
  • An object of the present invention for solving the above problems is to provide a method for producing a large amount of a plant-derived polyphenol salt, and to use a large amount of polyphenol purified using the method of the present invention for medical purposes.
  • polyphenol is a kind of chemical substance found in plants, and is characterized by having at least one phenol group per molecule.
  • Polyphenols are generally classified as tannins and phenylpropanoids (flavonoids, ligrins, etc.).
  • Phenol is one hydrogen atom of benzene is substituted with a hydroxy group, and polyphenol is substituted with two or more hydroxy groups.
  • Polyphenols prevent aging because they have antioxidant effects that convert free radicals (harmful oxygen) in our body into harmless substances. In addition, it is reported to lower the risk of various diseases due to its excellent function of protecting DNA, cell-forming proteins and enzymes damaged by exposure to free radicals.
  • Polyphenolic compounds include flavonoids as their subgroup, and flavonoid compounds include:
  • Flavanones based on the chemical skeleton structure represented by Formula 1 e.g., Hesperetin, Naringenin, Eriodictyol:
  • Flavones based on the chemical skeleton structure shown in Formula 3 e.g., Luteolin, Apigenin, Tangeritin:
  • Flavonol-based compounds based on the chemical skeleton structure shown in Formula 4 e.g., Quercetin, Campferol, Myricetin, Isorhamnetin) , Pachypodol, Rhamnazin:
  • Flavan-3-ols based on the chemical skeleton structure shown in Formula 5 e.g., Catechin, Gallocatechin, Epicatechin, Epi Gallocatechin (Epigallocatechin):
  • sugar may be selected from glucose, arabinose, galactose, or the like.
  • the flavonoid-based compound includes proanthocyanidins.
  • Proanthocyanidin compounds are biopolymers composed of flavan-3-ol subunits. The polymer is primarily linked through the 4 and 8 positions and the 4 and 6 positions.
  • the proanthocyanidin is a 4,8 linked polymer having the chemical structure shown in Formula 10.
  • the flavonoid compounds include anthocyanidin compounds, proanthocyanidin compounds, flavanol compounds, flavonol compounds, flavone compounds, flavanone compounds, and isoflavone compounds.
  • the flavonoid-based compounds include flavonol-based compounds and proanthocyanidin-based compounds.
  • the flavan-3-ol-based compound has the chemical structure shown in Formula 5a:
  • R 1 represents hydrogen or an OH group.
  • the flavan-3-ol-based compound has the chemical structure shown in Formula 5b:
  • R1 is as defined above.
  • the flavan-3-ol-based compound has the chemical structure shown in Formula 5c:
  • R1 is as defined above.
  • the anthocyanidin-based compound comprises cyanidin, which has the chemical structure shown in Formula 8a:
  • the flavonoid-based compound comprises delphinidin, which has the chemical structure shown in Formula 8b:
  • the proanthocyanidin-based compound has a chemical structure represented by Formula 10a:
  • R1 is as defined above; n is 2 to 30.
  • n>10 eg, 11 to 30.
  • the compounds of formula 10a have a molecular weight of at least 1,000. In another further embodiment, the compounds of formula 10a have a molecular weight of 1,000 to 9,000 (or, 3,000 to 9,000).
  • Proanthocyanidin-based compounds are subgroups, and include procyanidin-based compounds and prodelphinidin-based compounds, which produce cyanidin and delphinidin, respectively, through acid hydrolysis.
  • At least one polyphenolic compound extracted by the method of the present invention comprises epicatechin (ie, a compound of formula 5b wherein R 1 is hydrogen).
  • polyphenols can be toxic to cells under the action of phenolic substituents.
  • Representative types of polyphenolic toxins include safrole, Gossypol, and coumarins, and in the present invention, preferably, the polyphenolic toxin is gossypol represented by Chemical Formula 11 or , But is not limited thereto.
  • the method for mass production of plant-derived polyphenol salts of the present invention to achieve the above object is characterized in that the stirring is performed with a stirrer that forms a turbulent flow in a vertical direction under the stirrer separately from the vortex formed in the reactor in accordance with the rotation direction of the stirrer. do.
  • the agitator may be installed by being supported on the connecting rod 30 from the top, bottom, or side of the reactor, and rotates with the connecting rod, or the connecting rod is fixed and only the agitator rotates.
  • the turbulence may rise from the bottom of the stirrer and be discharged to the side of the stirrer, and on the contrary, the turbulence may be in the form of flowing into the side of the stirrer and downwardly discharged to the bottom of the stirrer.
  • a stirring groove is formed at the end of the stirrer to allow the liquid to enter.
  • the stirring groove is not limited in any form as long as it is a triangular shape, or a shape capable of discharging a mixture such as a square shape, a polygonal shape, a sawtooth shape, and a comb shape.
  • the cross section of the stirrer was 13 mm in inner diameter and 17 mm in outer diameter, and a total of 10 stirring grooves were mounted in the form of teeth along the circumference of the stirrer.
  • the longitudinal length of the stirring groove is 13mm.
  • the stirrer of the present invention promotes mixing of the solute and the solvent by forming a vertical turbulence in the lower part of the stirrer separately from the vortex formed in the reactor in accordance with the rotational direction of the stirrer, and the intervention of the turbulent flow causes the solute to collide with the inner wall of the reactor. It has the effect of stably extracting the salt by blocking it.
  • the "pharmaceutical composition” means a composition administered for a specific purpose.
  • the pharmaceutical composition of the present invention contains polyphenols mass-purified from plants by the method of the present invention as an active ingredient, and sugars, proteins and pharmaceutically acceptable carriers, excipients or diluents involved therein Can include.
  • the above "pharmaceutically acceptable” carriers or excipients are meant to be approved by the regulatory department of the government, or listed in the government or other generally approved pharmacopoeia for use in vertebrates, and more particularly humans. .
  • the pharmaceutical composition in the present invention may be in the form of a suspension, solution or emulsion in an oily or aqueous carrier suitable for parenteral administration, and may contain formulation agents such as suspending, stabilizing, dissolving and/or dispersing agents. have.
  • This form can be sterilized and can be liquid. It can be stable under the conditions of manufacture and storage and can be preserved against the contaminating action of microorganisms such as bacteria and fungi.
  • the pharmaceutical composition in the present invention may be in the form of a sterile powder for reconstitution with an appropriate carrier prior to use.
  • Pharmaceutical compositions may be presented in unit-dose form, in ampoules, or in other unit-dose containers, or in multi-dose containers.
  • the pharmaceutical composition may be stored only in a sterile liquid carrier, for example freeze-dried (lyophilized), requiring the addition of water for injection immediately prior to use.
  • Immediate injection solutions and suspensions can be prepared as sterile powders, granules or tablets.
  • suitable excipients include preservatives, suspending agents, stabilizing agents, dyes, buffers, antibacterial agents, antifungal agents, and isotonic agents such as sugars or sodium chloride.
  • the term “stabilizing agent” refers to a compound optionally used in the pharmaceutical composition of the present invention to avoid the need for sulfite salts and increase shelf life.
  • Non-limiting examples of stabilizers include antioxidants.
  • the pharmaceutical composition may contain one or more pharmaceutically acceptable carriers.
  • the carrier may be a solvent or dispersion medium.
  • pharmaceutically acceptable carriers include water, saline, ethanol, polyols (eg, glycerol, propylene glycol and liquid polyethylene glycol), oils, and suitable mixtures thereof.
  • Parenteral formulations can be sterile.
  • sterilization techniques include filtration through a bacteriostatic filter, terminal sterilization, incorporation of sterile preparations, irradiation, heating, vacuum drying and freeze drying.
  • the "cosmetic composition” refers to a composition administered for a specific purpose.
  • the cosmetic composition of the present invention contains polyphenols mass-purified from plants by the method of the present invention as an active ingredient, and lotion, nutritional lotion, nutritional essence, massage cream, beauty bath water additive, body lotion, Body milk, bath oil, baby oil, baby powder, shower gel, shower cream, sunscreen lotion, sunscreen cream, suntan cream, skin lotion, skin cream, sunscreen cosmetics, cleansing milk, depilatory ⁇ cosmetic ⁇ , face And body lotion, face and body cream, skin whitening cream, hand lotion, hair lotion, cosmetic cream, jasmine oil, bath soap, water soap, beauty soap, shampoo, hand sanitizer (hand cleaner), medicinal soap (non-medical), It may be in the form of cream soap, facial wash, hair rinse, makeup soap, tooth whitening gel, and toothpaste.
  • the cosmetic composition in the present invention may further include an appropriate carrier, excipient, or diluent commonly used in the manufacture of cosmetic compositions.
  • carriers excipients or diluents that can be further added to the cosmetic composition in the present invention
  • purified water, oil, wax, fatty acid, fatty acid alcohol, fatty acid ester, surfactant, humectant, thickener, antioxidant, viscosity stabilizer, Chelating agents, buffers, lower alcohols and the like are included, but are not limited thereto.
  • whitening agents, moisturizing agents, vitamins, sunscreen agents, perfumes, dyes, antibiotics, antibacterial agents, and antifungal agents may be included as needed.
  • Hydrogenated vegetable oil, castor oil, cottonseed oil, olive oil, palm seed oil, jojoba oil, and avocado oil may be used as the oil, and waxes include beeswax, spermaceti, carnauba, candelilla, montan, ceresin, liquid paraffin, and lanolin.
  • waxes include beeswax, spermaceti, carnauba, candelilla, montan, ceresin, liquid paraffin, and lanolin.
  • Stearic acid, linoleic acid, linolenic acid, and oleic acid may be used as fatty acids
  • cetyl alcohol, octyldodecanol, oleyl alcohol, panthenol, lanolin alcohol, stearyl alcohol, and hexadecanol may be used as fatty alcohols.
  • fatty acid esters isopropyl myristate, isopropyl palmitate, and butyl stearate
  • surfactants cationic surfactants, anionic surfactants and nonionic surfactants known in the art can be used, and surfactants derived from natural products are preferred as far as possible.
  • hygroscopic agents, thickeners, antioxidants, and the like which are widely known in the cosmetic field, may be included, and the types and amounts thereof are as known in the art.
  • (a) dissolving a vegetable polyphenol in acetone; (b) preparing a mixture by mixing acetic acid with (a); And (c) stirring the mixture of (b); provides a method for mass production of a vegetable polyphenol acetate comprising, wherein the vegetable polyphenol salt is the formula 1, formula 2, formula 3, formula 4, formula 5, Formula 5a, Formula 5b, Formula 5c, Formula 6, Formula 7, Formula 8, Formula 8a, Formula 8b, Formula 9, Formula 10, Formula 10a, and Formula 11 characterized in that at least one selected from the group consisting of It provides a method for producing a large amount of vegetable polyphenol acetate, wherein the vegetable polyphenol salt is a method for producing a large amount of vegetable polyphenol acetate, characterized in that the formula (11), wherein the stirring is in accordance with the rotation direction of the stirrer, Provides a method for mass production of vegetable polyphenol acetate, characterized in that it is carried out with a stirrer that forms turbulent flow in a vertical direction at the bottom
  • It provides a method for mass production of vegetable polyphenol acetate, characterized in that forming, wherein the stirring groove is formed in any one or more shapes selected from the group consisting of a triangular shape, a square shape, a polygonal shape, a sawtooth shape, and a comb shape. It provides a method for producing a large amount of vegetable polyphenol acetate, characterized in that the acetone and acetic acid are mixed in a ratio of 1:1, and the mass production is a single It provides a method for producing a large amount of vegetable polyphenol acetate, characterized in that carried out for a mixture of 10 L or more.
  • a stirrer for mass production of vegetable polyphenol salts characterized in that a turbulent flow in a vertical direction is formed under the stirrer separately from the vortex formed in the reactor in accordance with the rotational direction of the stirrer, and the stirrer Provides a stirrer, characterized in that the stirring groove is formed at the end so that the liquid can enter, and the stirring groove is any selected from the group consisting of a triangular shape, a square shape, a polygonal shape, a sawtooth shape, and a comb shape.
  • the vegetable polyphenol salt is a polyphenol acetate
  • the vegetable polyphenol salt is the formula 1, formula 2, formula 3, Formula 4, Formula 5, Formula 5a, Formula 5b, Formula 5c, Formula 6, Formula 7, Formula 8, Formula 8a, Formula 8b, Formula 9, Formula 10, Formula 10a, and Formula 11 Any one selected from the group consisting of It provides a stirrer characterized in that the above, wherein the vegetable polyphenol salt provides a stirrer characterized in that the formula (11).
  • the present invention relates to a method for mass-producing plant-derived polyphenol salts.
  • the method of the present invention uses a stirrer that forms a vertical turbulence under the stirrer separately from a vortex formed in the reactor in accordance with the rotation direction of the stirrer. This promotes mixing of the solute and the solvent, and the interference of turbulent flow prevents the solute from colliding with the inner wall of the reactor, thereby stably extracting the salt.
  • FIG. 1 is a cross-sectional view of a stirrer for mass production of plant-derived polyphenol salts according to an embodiment of the present invention.
  • FIG. 2 is a diagram showing a vortex and turbulent flow formed by a stirrer for mass production of a plant-derived polyphenol salt according to an embodiment of the present invention.
  • FIG 3 is a diagram showing a stirring groove of a stirrer for mass production of a plant-derived polyphenol salt, and a solvent discharge to the stirring groove according to an embodiment of the present invention.
  • the stirring device of the present invention may be installed by being supported on a connecting rod from the top, bottom, or side of the reactor, and rotates with the connecting rod, or the connecting rod is fixed and only the stirrer rotates.
  • the stirrer of the present invention is characterized in that a turbulent flow in a vertical direction is formed at the bottom of the stirrer separately from the vortex formed in the reactor in accordance with the rotational direction of the stirrer.
  • a stirring groove is formed at the end of the stirrer so that the liquid can enter and exit.
  • the stirring groove is not limited in any form as long as it is a triangular shape as shown in FIG. 3 or a shape capable of discharging a mixture such as a square shape, a polygonal shape, a sawtooth shape, and a comb shape.
  • the polyphenolic compound contained in cotton seeds has been disclosed for cancer treatment in the form of acetate, but the residual solvent (acetone) used during the manufacturing process is included in the final product recovered when crystallizing it into acetate, so there is a problem of low purity. have. Conversely, if the purification step was extended to increase the purity, the recovery rate of acetate was low.
  • Reactor scale Remark 1S 1L or less reactor (lab scale) Laboratory test 2S Several to tens of L reactor (bench scale) 3S Tens to hundreds of L reactor (pilot scale) Scale-up testing before moving on to industrial scale
  • the stirrer may be installed by being supported on the connecting rod 30 from the top, bottom, or side of the reactor, and it is possible to rotate with the connecting rod, or the connecting rod is fixed and only the agitator rotates.
  • the stirrer of the present invention is characterized in that a turbulent flow in a vertical direction is formed at the bottom of the stirrer separately from the vortex formed in the reactor in accordance with the rotational direction of the stirrer.
  • the turbulence may rise from the bottom of the stirrer and be discharged to the side of the stirrer, and on the contrary, the turbulence may be in the form of flowing into the side of the stirrer and downwardly discharged to the bottom of the stirrer.
  • the flow of the liquid phase is shown in FIG. 2.
  • a stirring groove 210 is formed at the end of the stirrer so that the liquid can enter.
  • the stirring groove is not limited in any form as long as it is a triangular shape as shown in FIG. 3 or a shape capable of discharging a mixture such as a square shape, a polygonal shape, a sawtooth shape, and a comb shape.
  • the cross section of the stirrer has an inner diameter of 13 mm and an outer diameter of 17 mm, and a total of 10 stirring grooves are mounted along the agitator circumference in a serrated shape.
  • the longitudinal length of the stirring groove is 13 mm.
  • the magnetic bar since the magnetic bar is located at the bottom of the reactor, it forms a downward conical vortex that starts from the bottom and increases the rotation width as it goes upward.
  • the overhead steeler is the same as the magnetic steeler in that one vortex is formed in accordance with the rotational direction of the steeler, but the steeler can be installed by being supported by a connecting rod from the top, bottom, or side of the reactor like the stirrer of the present invention. Therefore, a vortex with a uniform rotation width is formed from the top to the bottom of the reactor.
  • Table 3 shows the results of mass reaction (scale up) by the stirring method of Preparation Example 1 and Preparation Example 3 in which acetate recovery (%) and residual solvent concentration (ppm) were similarly derived in a 1L or less reactor (lab scale). Done.
  • Polyphenol-based compounds have been shown to control various biological reactions, but there is a difficulty in securing sufficient amounts with high purity enough to utilize them as pharmaceutical compositions, and thus, they are not actually applied for medical purposes.
  • the present invention relates to a method for mass-producing plant-derived polyphenol salts, and by using the method of the present invention, it is possible to obtain a large amount of high-purity polyphenols at a level applicable to clinical use outside the laboratory scale.

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Abstract

폴리페놀계 화합물은 다양한 생체반응조절 기능이 밝혀지고 있으나, 그들을 약학조성물로서 활용할만큼 높은 순도로 충분한 양을 확보하는데 어려움이 있으므로, 실제로 이를 의학 용도로 적용하지 못하고 있는 실정이다. 따라서 본 발명은 식물유래 폴리페놀염의 대량 제조 방법에 관한 것으로, 본 발명의 방법을 이용하면 실험실 규모를 벗어나 임상에 적용 가능한 수준으로 고순도의 폴리페놀을 대량 확보하는 것이 가능하다.

Description

식물유래 폴리페놀염의 대량 제조 방법
본 발명은 식물유래 폴리페놀염의 대량 제조 방법에 관한 것이다.
식물로부터 추출된 폴리페놀계 화합물은, 알레르기 항원, 바이러스 및 발암물질에 대한 생체의 반응을 조절하는 그들의 능력을 보여주는 강력한 실험상의 증거로 인해, 천연의 생체반응조절물질(biological reponse modifier)로서 언급되어 왔다. 그것들은 항알레르기, 항염, 항균 및 항암 작용을 나타낸다. 게다가, 폴리페놀계 화합물은 산화 및 자유 라디칼 손상(oxidative and free radical damage)을 방지하는 강력한 항산화제로서 작용하며, 산화 스트레스(oxidative stress)와 연관된 다양한 질병을 막는데 도움이 된다. 그러나 폴리페놀계 화합물의 생체반응조절 기능에도 불구하고, 그들을 약학조성물로서 활용할만큼 높은 순도로 충분한 양을 확보하는데 어려움이 있으므로, 실제로 이를 의학 용도로 적용하지 못하고 있는 실정이다.
이러한 기술적 난제의 해결을 위해 식물로부터 안정적으로 유효성분을 추출하기 위한 기술이 개발되어 왔다. 일례로 한국 공개특허 제10-2013-0113717호에는 "인삼의 잎과 줄기로부터 생리활성물질을 분획정제하는 방법"을 개시하고 있고, 한국 공개특허 제 10-2017-0079469호에는 "검은 콩 함유 이소플라본 성분의 추출 방법"을 개시하고 있다. 그러나 식물유래 유용 천연물질의 경우 아주 많은 단계를 거쳐야만 추출과 정제가 가능하고, 식물 및 유용성분의 종류에 따라 추출 및 정제 방법이 달라지며, 특정 성분을 고순도(99% 이상)로 대량 정제하기에 어려움이 많은 문제점이 있다.
따라서 본 발명자들은 상기와 같은 문제를 해결하기 위해 각고의 노력을 지속한 결과 본 발명을 완성하게 되었다. 본 발명은 식물유래 폴리페놀염의 대량 제조 방법에 관한 것으로, 본 발명의 방법을 이용하면 실험실 규모를 벗어나 임상에 적용 가능한 수준으로 고순도의 폴리페놀을 대량 확보하는 것이 가능하다.
상기한 문제점을 해결하기 위한 본 발명의 목적은, 식물유래 폴리페놀염의 대량 제조 방법을 제공하고, 본 발명의 방법을 이용해 정제된 대량의 폴리페놀을 의학적 용도로 이용하는 것이다.
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당 업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
이하, 본원에 기재된 다양한 구체예가 도면을 참조로 기재된다. 하기 설명에서, 본 발명의 완전한 이해를 위해서, 다양한 특이적 상세사항, 예컨대, 특이적 형태, 조성물 및 공정 등이 기재되어 있다. 그러나, 특정의 구체예는 이들 특이적 상세 사항 중 하나 이상 없이, 또는 다른 공지된 방법 및 형태와 함께 실행될 수 있다. 다른 예에서, 공지된 공정 및 제조 기술은 본 발명을 불필요하게 모호하게 하지 않게 하기 위해서, 특정의 상세사항으로 기재되지 않는다. "한 가지 구체예" 또는 "구체예"에 대한 본 명세서 전체를 통한 참조는 구체예와 결부되어 기재된 특별한 특징, 형태, 조성 또는 특성이 본 발명의 하나 이상의 구체예에 포함됨을 의미한다. 따라서, 본 명세서 전체에 걸친 다양한 위치에서 표현된 "한 가지 구체예에서" 또는 "구체예"의 상황은 반드시 본 발명의 동일한 구체예를 나타내지는 않는다. 추가로, 특별한 특징, 형태, 조성, 또는 특성은 하나 이상의 구체예에서 어떠한 적합한 방법으로 조합될 수 있다.
명세서에서 특별한 정의가 없으면 본 명세서에 사용된 모든 과학적 및 기술적인 용어는 본 발명이 속하는 기술분야에서 당업자에 의하여 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다.
본 발명의 일 구체에에서 “폴리페놀(polyphenol)”이란, 식물에서 발견되는 화학물질의 일종으로서 분자 하나에 페놀 그룹이 한 개 이상 있는 것이 특징이다. 폴리페놀은 일반적으로 타닌, 페닐프로파노이드(플라보노이드, 리그린 등)으로 분류된다. 페놀은 벤젠의 수소원자 하나가 히드록시기로 치환된 것이며, 폴리페놀은 두 개 이상의 히드록시기로 치환된 것이다. 폴리페놀의 종류는 수천 가지가 넘는데 녹차에 든 카테킨, 포도주의 레스베라트롤, 사과, 양파의 쿼세틴 등이 있다. 과일에 많은 플라보노이드와 콩에 많은 이소플라본도 폴리페놀의 일종이다.
폴리페놀은 우리 몸에 있는 활성 산소(유해 산소)를 해가 없는 물질로 바꾸어 주는 항산화 효과가 있어 노화를 방지한다. 또한 활성 산소에 노출되어 손상되는 DNA 보호, 세포구성 단백질 및 효소를 보호하는 기능이 뛰어나 다양한 질병에 대한 위험도를 낮춘다고 보고된다. 폴리페놀계 화합물은 그 하위군으로서 플라보노이드계화합물(flavonoids)을 포함하고, 플라보노이드계 화합물은 다음을 포함한다:
(a) 화학식 1에 나타나 있는 화학적 골격 구조에 기초하는 플라바논계 화합물 (flavanones) (예를 들어, 헤스페레틴(Hesperetin), 나린제닌(Naringenin), 에리오딕티올(Eriodictyol)):
[화학식 1]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000001
(b) 화학식 2에 나타나 있는 화학적 골격 구조에 기초하는 이소플라바논계 화합물 (isoflavanones) (예를 들어, 제니스테인(Genistein), 다이드제인 (Daidzein), 글리시테인(Glycitein)):
[화학식 2]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000002
(c) 화학식 3에 나타나 있는 화학적 골격 구조에 기초하는 플라본계 화합물 (flavones) (예를 들어, 루테올린(Luteolin), 아피제닌(Apigenin), 탄제리틴(Tangeritin)):
[화학식 3]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000003
(d) 화학식 4에 나타나 있는 화학적 골격 구조에 기초하는 플라보놀계 화합물 (flavonols) (예를 들어, 퀘르세틴(Quercetin), 캠프페롤(Kaempferol), 마이리세틴(Myricetin), 이소람네틴(Isorhamnetin), 파키포돌(Pachypodol), 람나진 (Rhamnazin)):
[화학식 4]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000004
(e) 화학식 5에 나타나 있는 화학적 골격 구조에 기초하는 플라반-3-올계 화합물 (flavan-3-ols) (예를 들어, 카테킨(Catechin), 갈로카테킨(Gallocatechin), 에피카테킨(Epicatechin), 에피갈로카테킨 (Epigallocatechin)):
[화학식 5]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000005
(f) 화학식 6에 나타나 있는 화학적 골격 구조에 기초하는 플라반-3,4-다이올계 화합물 (flavan-3,4-diols):
[화학식 6]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000006
(g) 화학식 7에 나타나 있는 화학적 골격 구조에 기초하는 디하이드로플라보놀계 화합물 (dihydroflavonols):
[화학식 7]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000007
(h) 화학식 8에 나타나 있는 화학적 골격 구조에 기초하는 안토시아니딘계 화합물(anthocyanidins) (예를 들어, 시아니딘(Cyanidin), 델피니딘(Delphinidin), 말비니딘(Malvinidin), 펠라고니딘(Pelargonidin), 페오니딘(Peonidin), 페투니딘 (Petunidin)):
[화학식 8]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000008
(i) 화학식 9에 나타나 있는 화학적 골격 구조에 기초하는 안토시아닌계 화합물(anthocyanins):
[화학식 9]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000009
화학식 9에서 당(sugar)은 글루코스(glucose), 아라비노스(arabinose), 갈락토스(galactose) 또는 그와 유사한 것으로부터 선택될 수 있다.
일 구현예에 있어서, 플라보노이드계 화합물은 프로안토시아니딘계 화합물(proanthocyanidins)을 포함한다. 프로안토시아니딘계 화합물은 플라반-3-올 기본단위(subunit)로 구성되는 바이오폴리머(biopolymers)이다. 폴리머는 주로 4 및 8 위치와 4 및 6 위치를 통하여 연결된다. 추가 구현예에 있어서, 프로안토시아니딘은 화학식 10에 나타나 있는 화학구조를 갖는 4,8 연결형 폴리머이다.
[화학식 10]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000010
일 구현예에 있어서, 플라보노이드계 화합물에는 안토시아니딘계 화합물, 프로안토시아니딘계 화합물, 플라바놀계 화합물, 플라보놀계 화합물, 플라본계 화합물, 플라바논계 화합물 및 이소플라본계 화합물이 포함된다. 추가 구현예에 있어서, 플라보노이드계 화합물에는, 플라보놀계 화합물 및 프로안토시아니딘계 화합물이 포함된다.
일 구현예에 있어서, 플라반-3-올계 화합물은 화학식 5a에 나타나 있는 화학구조를 갖는다:
[화학식 5a]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000011
화학식 5a에서, R1은 수소 또는 OH 기를 나타낸다.
일 구현예에 있어서, 플라반-3-올계 화합물은 화학식 5b에 나타나 있는 화학구조를 갖는다:
[화학식 5b]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000012
화학식 5b에서, R₁은 앞에서 정의된 바와 같다.
R₁이 수소인 화학식 5b의 화합물들은 에피카테킨으로 알려져 있고, R₁이 OH기인 화학식 5b의 화합물들은 에피갈로카테킨으로 알려져 있다.
일 구현예에 있어서, 플라반-3-올계 화합물은 화학식 5c에 나타나 있는 화학구조를 갖는다:
[화학식 5c]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000013
화학식 5c에서, R₁은 앞에서 정의된 바와 같다.
R₁이 수소인 화학식 5c의 화합물들은 카테킨으로 알려져 있고, R₁이 OH기인 화학식 5c의 화합물들은 갈로카테킨으로 알려져 있다.
일 구현예에 있어서, 안토시아니딘계 화합물은 시아니딘(cyanidin)을 포함하는데, 이것은 화학식 8a에 나타나 있는 화학구조를 갖는다:
[화학식 8a]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000014
일 구현예에 있어서, 플라보노이드계 화합물은 델피니딘(delphinidin)을 포함하는데, 이것은 화학식 8b에 나타나 있는 화학구조를 갖는다:
[화학식 8b]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000015
일 구현예에 있어서, 프로안토시아니딘계 화합물은 화학식 10a에 나타나 있는 화학구조를 갖는다:
[화학식 10a]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000016
화학식 10a에서, R₁은 앞에서 정의된 바와 같으며; n 은 2 내지 30이다.
일 구현예에 있어서, n > 10 (예를 들면, 11 내지 30)이다. 추가 구현예에 있어서, 화학식 10a의 화합물들은 1,000 이상의 분자량을 갖는다. 또 다른 추가 구현예에 있어서, 화학식 10a의 화합물들은 1,000 내지 9,000의 (또는, 3,000 내지 9,000의) 분자량을 갖는다.
프로안토시아니딘계 화합물은 하위군으로서, 프로시아니딘계 화합물과 프로델피니딘계 화합물을 포함하며, 산 가수분해를 통해 이것들은 각각 시아니딘과 델피니딘을 만들어낸다.
일 구현예에 있어서, 본 발명의 방법에 의해 추출된 하나 이상의 폴리페놀계 화합물은 에피카테킨(epicatechin) (즉, R1이 수소인 화학식 5b의 화합물)을 포함한다.
특정한 폴리페놀의 경우, 페놀 치환기의 작용으로 세포에 독성을 발휘할 수 있다. 대표적은 폴리페놀성 독소의 종류로는 사프롤(safrole), 고시폴(Gossypol) 및 쿠마린(coumarins) 등이 있고, 본 발명에 있어서 바람직하게는 폴리페놀성 독소는 화학식 11로 나타나 있는 고시폴이나, 이에 한정하는 것은 아니다.
[화학식 11]
Figure PCTKR2020010296-appb-I000017
상기의 목적을 달성하기 위한 본 발명의 식물유래 폴리페놀염의 대량 제조 방법은 교반기의 회전 방향과 일치하여 반응기 내에 형성되는 와류와 별도로 교반기 하부에 수직 방향의 난류를 형성하는 교반기로 교반하는 것을 특징으로 한다.
상기의 교반기는 반응기의 상단으로부터, 하단으로부터, 또는 측면으로부터 연결봉(30)에 지지되어 설치될 수 있고, 연결봉과 함께 회전하거나, 또는 연결봉은 고정되고 교반기만 회전하는 것이 가능하다. 상기 난류는 교반기 하부에서 상승하여 교반기 측면으로 배출되는 형태일 수 있고, 이와 반대로 교반기 측면으로 유입되어 교반기 하부로 하강 배출되는 형태도 가능하다. 이를 위해 교반기 말단에는 액상의 출입이 가능하도록 교반홈이 형성된다. 교반홈은 삼각 형태이거나, 또는 사각 형태, 다각 형태, 톱니 형태, 빗살 형태 등 혼합물의 배출이 가능한 형태라면 무엇이든 제한되지 아니한다. 본 발명에서 개발한 교반 장치를 보다 구체적으로 설명하면, 교반기의 횡단면은 내측직경 13mm, 외측직경 17mm이고, 교반기 원주를 따라 톱니 형태로 총 10개의 교반홈을 탑재하였다. 교반홈의 종측 길이는 13mm이다.
본 발명의 교반기는 교반기의 회전 방향과 일치하여 반응기 내에 형성되는 와류와 별도로 교반기 하부에 수직 방향의 난류를 형성함으로서 용질과 용매의 혼합을 촉진시키고, 난류의 개입이 용질이 반응기의 내벽에 충돌하는 것을 차단함으로써 안정적으로 염이 추출되는 효과가 있다.
본 발명의 일 구체예에서 "약학조성물"이란, 특정한 목적을 위해 투여되는 조성물을 의미한다. 본 발명의 목적상, 본 발명의 약학조성물은 본 발명의 방법으로 식물로부터 대량 정제된 폴리페놀을 유효성분으로 함유하는 것이며, 이에 관여하는 당, 단백질 및 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다. 상기의 "약학적 허용 가능한" 담체 또는 부형제는 정부의 규제부에 의해 승인된 것이나, 또는 척추 동물, 그리고 보다 특별하게는 인간에게 사용을 위한 정부 또는 기타 일반적으로 승인된 약전에서 리스트된 것을 의미한다. 본 발명에서의 약학조성물은 비경구적인 투여에 적절한 유성 또는 수성 담체에 있는 현탁액, 용액 또는 에멀젼의 형태로 될 수 있고, 현탁제, 안정화제, 용해제 및/또는 분산제와 같은 제형화제를 포함할 수 있다. 본 형태는 멸균될 수 있고, 액체일 수 있다. 이것은 제조 및 저장의 조건 하에서 안정할 수 있고 세균이나 곰팡이와 같은 미생물의 오염 작용에 대해 보존될 수 있다. 대안적으로, 본 발명에서의 약학조성물은 사용 전에 적절한 담체와 재구성을 위해 멸균 분말 형태일 수 있다. 약학조성물은 단위-복용량 형태로, 앰플에, 또는 기타 단위-복용량 용기에, 또는 다-복용량 용기에 존재할 수 있다. 대안적으로, 약학조성물은 단지 멸균 액체 담체, 예를 들어 사용 바로 전에 주사용 물의 부가함을 요하는 동결-건조된(냉동건조) 상태로 보관될 수 있다. 즉시 주사용액 및 현탁액은 멸균 분말, 그래뉼 또는 타블렛으로 제조될 수 있다. 또한 적절한 부형제는 보존제, 현탁제, 안정화제, 염료, 완충제, 항균제, 항진균제, 및 등장화제, 예를 들어, 당 또는 염화나트륨을 포함한다. 여기서 사용된 것으로, 용어 "안정화제"는 설파이트 염의 필요성을 회피하고 보존 수명을 증가하기 위해 본 발명의 약학조성물에 선택적으로 사용된 화합물을 언급한다. 안정화제의 비-제한적인 예는 항산화제를 포함한다.
약학조성물은 하나 또는 그 이상의 약학적으로 허용될 수 있는 담체를 포함할 수 있다. 담체는 용매 또는 분산 배지일 수 있다. 약학적으로 허용될 수 있는 담체의 비-제한적인 예는 물, 식염수, 에탄올, 폴리올 (예, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜), 오일, 및 이들의 적절한 혼합물을 포함한다.
비경구용 제형은 멸균될 수 있다. 멸균 기술의 비-제한적인 예는 세균-억제 필터를 통한 여과, 터미날 멸균화, 멸균 제제의 합체, 방사선 조사, 가열, 진공 건조 및 동결 건조를 포함한다.
본 발명의 일 구체예에서 "화장료 조성물"이란, 특정한 목적을 위해 투여되는 조성물을 의미한다. 본 발명의 목적상, 본 발명의 화장료 조성물은 본 발명의 방법으로 식물로부터 대량 정제된 폴리페놀을 유효성분으로 함유하는 것이며, 화장수, 영양로션, 영양에센스, 마사지 크림, 미용목욕물첨가제, 바디로션, 바디밀크, 배스오일, 베이비오일, 베이비파우더, 샤워겔, 샤워크림, 선스크린로션, 선스크린크림, 선탠크림, 스킨로션, 스킨크림, 자외선차단용 화장품, 크렌징밀크, 탈모제{화장용}, 페이스 및 바디로션, 페이스 및 바디크림, 피부미백크림, 핸드로션, 헤어로션, 화장용크림, 쟈스민오일, 목욕비누, 물비누, 미용비누, 샴푸, 손세정제(핸드클리너), 약용비누{비의료용}, 크림비누, 페이셜워시, 헤어린스, 화장비누, 치아미백용 겔, 치약 등의 형태일 수 있다. 이를 위해 본 발명에서의 화장료 조성물은 화장료 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다. 본 발명에서의 화장료 조성물 내에 더 추가될 수 있는 담체, 부형제 또는 희석제로는 정제수, 오일, 왁스, 지방산, 지방산 알콜, 지방산 에스테르, 계면활성제, 흡습제(humectant), 증점제, 항산화제, 점도 안정화제, 킬레이팅제, 완충제, 저급 알콜 등이 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 또한, 필요에 따라 미백제, 보습제, 비타민, 자외선 차단제, 향수, 염료, 항생제, 항박테리아제, 항진균제를 포함할 수 있다. 상기 오일로서는 수소화 식물성유, 피마자유, 면실유, 올리브유, 야자인유, 호호바유, 아보카도유가 이용될 수 있으며, 왁스로는 밀랍, 경랍, 카르나우바, 칸델릴라, 몬탄, 세레신, 액체 파라핀, 라놀린이 이용될 수 있다. 지방산으로는 스테아르산, 리놀레산, 리놀렌산, 올레산이 이용될 수 있고, 지방산 알콜로는 세틸알콜, 옥틸도데칸올, 올레일알콜, 판텐올, 라놀린알콜, 스테아릴 알콜, 헥사데칸올이 이용될 수 있으며 지방산 에스테르로는 이소프로필미리스테이트, 이소프로필 팔미테이트, 부틸스테아레이트가 이용될 수 있다. 계면활성제로는 당업계에 알려진 양이온 계면활성제, 음이온 계면활성제 및 비이온성 계면활성제가 사용가능하며 가능한 한 천연물 유래의 계면활성제가 바람직하다. 그 외에도 화장품 분야에서 널리 알려진 흡습제, 증점제, 항산화제 등을 포함할 수 있으며, 이들의 종류와 양은 당업계에 공지된 바에 따른다.
본 발명의 일 구체예에서, (a) 식물성 폴리페놀을 아세톤에 용해하는 단계; (b) 상기 (a)에 초산을 혼합하여 혼합물을 제조하는 단계; 및 (c) 상기 (b)의 혼합물을 교반하는 단계;를 포함하는 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법을 제공하고, 상기 식물성 폴리페놀염은 상기 화학식 1, 화학식 2, 화학식 3, 화학식 4, 화학식 5, 화학식 5a, 화학식 5b, 화학식 5c, 화학식 6, 화학식 7, 화학식 8, 화학식 8a, 화학식 8b, 화학식 9, 화학식 10, 화학식 10a, 및 화학식 11로 구성된 그룹으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법을 제공하며, 상기 식물성 폴리페놀염은 상기 화학식 11인 것을 특징으로 하는 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법을 제공하며, 상기 교반은 교반기의 회전 방향과 일치하여 반응기 내에 형성되는 와류와 별도로 교반기 하부에 수직 방향의 난류를 형성시키는 교반기로 수행하는 것을 특징으로 하는 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법을 제공하며, 상기 교반기는 말단에 액상의 출입이 가능하도록 교반홈을 형성하는 것을 특징으로 하는 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법을 제공하며, 상기 교반홈은 삼각 형태, 사각 형태, 다각 형태, 톱니 형태, 및 빗살 형태로 구성되는 그룹에서 선택되는 어느 하나 이상의 형태로 형성되는 것을 특징으로 하는 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법을 제공하며, 상기 아세톤과 초산은 1:1의 비율로 혼합되는 것을 특징으로 하는 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법을 제공하며, 상기 대량 제조는 단회 10L 이상의 혼합물을 대상으로 수행되는 것을 특징으로 하는 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법을 제공한다.
본 발명의 다른 구체예에서, 식물성 폴리페놀염의 대량 제조용으로서 교반기의 회전 방향과 일치하여 반응기 내에 형성되는 와류와 별도로 교반기 하부에 수직 방향의 난류를 형성시키는 것을 특징으로 하는 교반기를 제공하고, 상기 교반기는 말단에 액상의 출입이 가능하도록 교반홈을 형성하는 것을 특징으로 하는 교반기를 제공하며, 상기 교반홈은 삼각 형태, 사각 형태, 다각 형태, 톱니 형태, 및 빗살 형태로 구성되는 그룹에서 선택되는 어느 하나 이상의 형태로 형성되는 것을 특징으로 하는 교반기를 제공하며, 상기 식물성 폴리페놀염은 폴리페놀 초산염인 것을 특징으로 하는 교반기를 제공하며, 상기 식물성 폴리페놀염은 상기 화학식 1, 화학식 2, 화학식 3, 화학식 4, 화학식 5, 화학식 5a, 화학식 5b, 화학식 5c, 화학식 6, 화학식 7, 화학식 8, 화학식 8a, 화학식 8b, 화학식 9, 화학식 10, 화학식 10a, 및 화학식 11로 구성된 그룹으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 교반기를 제공하며, 상기 식물성 폴리페놀염은 상기 화학식 11인 것을 특징으로 하는 교반기를 제공한다.
이하 상기 본 발명을 단계별로 상세히 설명한다.
본 발명은 식물유래 폴리페놀염의 대량 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법을 이용하면 실험실 규모를 벗어나 임상에 적용 가능한 수준으로 고순도의 폴리페놀을 대량 확보하는 것이 가능하다. 보다 구체적으로 본 발명의 식물유래 폴리페놀염의 대량 제조 방법은 교반기의 회전 방향과 일치하여 반응기 내에 형성되는 와류와 별도로 교반기 하부에 수직 방향의 난류를 형성하는 교반기를 이용한다. 이는 용질과 용매의 혼합을 촉진시키고, 난류의 개입이 용질이 반응기의 내벽에 충돌하는 것을 차단함으로써 안정적으로 염이 추출되는 효과를 갖는다.
도 1은 본 발명의 일 구체예에 따른, 식물유래 폴리페놀염의 대량 제조를 위한 교반기의 단면도이다.
도 2는 본 발명의 일 구체예에 따른, 식물유래 폴리페놀염의 대량 제조를 위한 교반기가 형성시키는 와류 및 난류 흐름을 나타낸 도이다.
도 3은 본 발명의 일 구체예에 따른, 식물유래 폴리페놀염의 대량 제조를 위한 교반기의 교반홈, 및 교반홈으로의 용매 배출을 나타낸 도이다.
상기 도 1 내지 도 3의 “부호의 설명"
10: 반응기
20: 교반기
30: 연결봉
210: 교반홈
폴리페놀성 화합물을 초산염으로 결정화 시 회수율, 및 순도를 향상시키기 위하여 대량 반응시에도 고순도의 정제가 가능하도록 교반 장치를 개발하였다. 상기 본 발명의 교반 장치는 반응기의 상단으로부터, 하단으로부터, 또는 측면으로부터 연결봉에 지지되어 설치될 수 있고, 연결봉과 함께 회전하거나, 또는 연결봉은 고정되고 교반기만 회전하는 것이 가능하다. 본 발명의 교반기는 교반기의 회전 방향과 일치하여 반응기 내에 형성되는 와류와 별도로 교반기 하부에 수직 방향의 난류를 형성하는 것을 특징으로 한다. 교반기 말단에는 액상의 출입이 가능하도록 교반홈이 형성된다. 교반홈은 도 3과 같이 삼각 형태이거나, 또는 사각 형태, 다각 형태, 톱니 형태, 빗살 형태 등 혼합물의 배출이 가능한 형태라면 무엇이든 제한되지 아니한다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
목화씨에 함유된 폴리페놀성 화합물은 초산염의 형태로 암 치료 용도가 개시되어 있으나, 이를 초산염으로 결정화 시 회수되는 최종 산물에 제조 공정 중에 사용되는 잔류용매(아세톤)가 포함되므로, 순도가 낮은 문제점이 있다. 반대로 순도를 높이기 위해 정제 단계를 연장하면 초산염의 회수율이 낮았다.
이를 해결하기 위해 화학물의 농도 및 비율을 조절하는 방법으로 실험실 수준(Lab scale)에서 고순도의 화학식 11의 초산염을 제조하는데 성공하였으나, 동일한 조건으로 대량 반응(scale up)시키면 다시 순도가 저하되는 문제점이 있었다.
따라서 대량 반응시에도 고순도의 정제가 가능하도록 교반 장치를 개발하였다.
본 발명의 실시예에서 의미하는 반응기의 규모는 하기 표 1에 나타내었다.
반응기 규모 비고
1S 　1L 이하 반응기(lab scale) 실험실 테스트
2S 수~수십L의 반응기(bench scale)
3S 수십~수백L의 반응기(pilot scale) 산업화(industrial scale)로 넘어가기 전의 스케일업 테스트
본 발명의 교반 장치를 도면을 참조하여 설명한다.
도 1은 반응기(10) 내에 설치된 교반기(20)를 나타낸다. 교반기는 반응기의 상단으로부터, 하단으로부터, 또는 측면으로부터 연결봉(30)에 지지되어 설치될 수 있고, 연결봉과 함께 회전하거나, 또는 연결봉은 고정되고 교반기만 회전하는 것이 가능하다. 본 발명의 교반기는 교반기의 회전 방향과 일치하여 반응기 내에 형성되는 와류와 별도로 교반기 하부에 수직 방향의 난류를 형성하는 것을 특징으로 한다. 상기 난류는 교반기 하부에서 상승하여 교반기 측면으로 배출되는 형태일 수 있고, 이와 반대로 교반기 측면으로 유입되어 교반기 하부로 하강 배출되는 형태도 가능하다. 상기 액상의 흐름을 도 2에 도시하였다. 이를 위해 교반기 말단에는 액상의 출입이 가능하도록 교반홈(210)이 형성된다. 교반홈은 도 3과 같이 삼각 형태이거나, 또는 사각 형태, 다각 형태, 톱니 형태, 빗살 형태 등 혼합물의 배출이 가능한 형태라면 무엇이든 제한되지 아니한다. 본 발명에서 개발한 교반 장치를 보다 구체적으로 설명하면, 교반기의 횡단면은 내측직경 13mm, 외측직경 17mm이고, 교반기 원주를 따라 톱니 형태로 총 10개의 교반홈을 탑재하였다. 교반홈의 종측 길이는 13mm이다.
본 발명의 교반기 효과를 평가하기 위해 하기 표 2와 같이 화학식 11을 이용하여 초산염 추출 시험을 수행하였다. 10g의 시판되는 화학식 11을 100ml의 아세톤(10T)에 용해한 후, 100ml의 초산(10T)을 투입하여 결정화하고, 웨트 케이크(wet cake)를 회수하여 건조 후 가스 크로마토그래피로 분석하였다. 본 발명의 교반기에 대한 대조군으로는 종래 이용되는 마그네틱 스틸러, 또는 오버헤드 스틸러를 이용하였다. 마그네틱 스틸러는 마그네틱바의 자석 원리를 이용하는 것으로 단일 방향으로만 회전하므로, 스틸러의 회전 방향과 일치하는 일방의 와류가 형성된다. 단, 마그네틱바가 반응기의 가장 하단에 위치하므로, 하방에서 시작되어 상방으로 향할수록 회전폭이 넓이지는 하방 원뿔형의 와류를 형성한다. 오버헤드 스틸러는 스틸러의 회전 방향과 일치하는 일방의 와류가 형성되는 것은 마그네틱 스틸러와 동일하나, 스틸러가 본 발명의 교반기와 같이 반응기의 상단으로부터, 하단으로부터, 또는 측면으로부터 연결봉에 지지되어 설치될 수 있으므로, 반응기의 상단부터 하단까지 균일한 회전폭의 와류가 형성된다.
구분 반응조건 반응기 규모 초산염 회수율(%) 아세톤 농도(ppm)
교반방법 아세톤 초산
제조예 1 마그네틱 스틸러 10T 10T 1S 9.70 3025
제조예 2 오버헤드 스틸러 10T 10T 1S 8.90 11312
제조예 3 본 발명의 교반기 10T 10T 1S 10.30 2050
상기 표 2에서와 같이 1L 이하 반응기(lab scale)에서 초산염을 결정화시킨 결과, 오버헤드 스틸러를 사용하면 초산염의 회수율이 낮고, 잔류용매(아세톤)의 농도가 높을 것을 알 수 있었다. 특히, 잔류용매 잔존량이 다른 교반기(제조예 1, 제조예 3)보다 현저하게 높았으며, 산업화를 위해 가이드되는 잔류용매 농도(<5000 ppm)를 고려할 때 산업화에 이용할 수 없는 조건인 것으로 평가되었다.
1L 이하 반응기(lab scale)에서 초산염 회수율(%), 및 잔류용매 농도(ppm)가 비슷하게 도출된 제조예 1와 제조예 3의 교반 방법으로 대량 반응(scale up)한 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
구분 반응조건 반응기 규모 초산염 회수율(%) 아세톤 농도(ppm)
교반방법 아세톤 초산
제조예 4 마그네틱 스틸러 10KT 10KT 3S 9.30 7199
제조예 5 본 발명의 교반기 10KT 10KT 3S 9.96 2510
상기 표 3에서와 같이 수십~수백L의 반응기(pilot scale)로 대량 반응시켰을 때, 제조예 4는 소규모 반응(제조예 1)에 비해서 잔류용매 농도가 2배 이상으로 높아지는 것을 알 수 있었다. 그러나 본 발명의 교반기를 사용한 제조예 5는 소규모 반응(제조예 3)과 비교하여 초산염 회수율, 및 잔류용매 농도가 유지되는 것을 알 수 있었다. 이는 본 발명의 교반기가 교반기의 회전 방향과 일치하여 반응기 내에 형성되는 와류와 별도로 교반기 하부에 수직 방향의 난류를 형성함으로서 용질과 용매의 혼합을 촉진시키고, 난류의 개입이 용질이 반응기의 내벽에 충돌하는 것을 차단함으로써 안정적으로 염이 추출되는 효과인 것으로 이해된다.
본 발명의 권리는 상기에 설명된 실시예에 한정되지 않고 청구범위에 기재된 바에 의해 정의되며, 본 발명의 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 본 발명의 기술적 요지를 벗어나지 아니하는 범위 내에서 다양한 변형과 개작하여 실시할 수 있음은 자명한 것이다.
폴리페놀계 화합물은 다양한 생체반응조절 기능이 밝혀지고 있으나, 그들을 약학조성물로서 활용할만큼 높은 순도로 충분한 양을 확보하는데 어려움이 있으므로, 실제로 이를 의학 용도로 적용하지 못하고 있는 실정이다.
따라서 본 발명은 식물유래 폴리페놀염의 대량 제조 방법에 관한 것으로, 본 발명의 방법을 이용하면 실험실 규모를 벗어나 임상에 적용 가능한 수준으로 고순도의 폴리페놀을 대량 확보하는 것이 가능하다.

Claims (14)

  1. (a) 식물성 폴리페놀을 아세톤에 용해하는 단계;
    (b) 상기 (a)에 초산을 혼합하여 혼합물을 제조하는 단계; 및
    (c) 상기 (b)의 혼합물을 교반하는 단계;를 포함하는, 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 식물성 폴리페놀염은 하기 화학식 1, 화학식 2, 화학식 3, 화학식 4, 화학식 5, 화학식 5a, 화학식 5b, 화학식 5c, 화학식 6, 화학식 7, 화학식 8, 화학식 8a, 화학식 8b, 화학식 9, 화학식 10, 화학식 10a, 및 화학식 11로 구성된 그룹으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법.
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000018
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000019
    [화학식 3]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000020
    [화학식 4]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000021
    [화학식 5]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000022
    [화학식 5a]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000023
    [화학식 5b]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000024
    [화학식 5c]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000025
    [화학식 6]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000026
    [화학식 7]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000027
    [화학식 8]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000028
    [화학식 8a]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000029
    [화학식 8b]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000030
    [화학식 9]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000031
    [화학식 10]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000032
    [화학식 10a]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000033
    [화학식 11]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000034
  3. 제 2항에 있어서,
    상기 식물성 폴리페놀염은 하기 화학식 11인 것을 특징으로 하는, 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법.
    [화학식 11]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000035
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 교반은 교반기의 회전 방향과 일치하여 반응기 내에 형성되는 와류와 별도로 교반기 하부에 수직 방향의 난류를 형성시키는 교반기로 수행하는 것을 특징으로 하는, 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법.
  5. 제 4항에 있어서,
    상기 교반기는 말단에 액상의 출입이 가능하도록 교반홈을 형성하는 것을 특징으로 하는, 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법.
  6. 제 5항에 있어서,
    상기 교반홈은 삼각 형태, 사각 형태, 다각 형태, 톱니 형태, 및 빗살 형태로 구성되는 그룹에서 선택되는 어느 하나 이상의 형태로 형성되는 것을 특징으로 하는, 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법.
  7. 제 1항에 있어서,
    상기 아세톤과 초산은 1:1의 비율로 혼합되는 것을 특징으로 하는, 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법.
  8. 제 1항에 있어서,
    상기 대량 제조는 단회 10L 이상의 혼합물을 대상으로 수행되는 것을 특징으로 하는, 식물성 폴리페놀 초산염의 대량 제조 방법.
  9. 식물성 폴리페놀염의 대량 제조용으로서,
    교반기의 회전 방향과 일치하여 반응기 내에 형성되는 와류와 별도로 교반기 하부에 수직 방향의 난류를 형성시키는 것을 특징으로 하는, 교반기.
  10. 제 9항에 있어서,
    상기 교반기는 말단에 액상의 출입이 가능하도록 교반홈을 형성하는 것을 특징으로 하는, 교반기.
  11. 제 10항에 있어서,
    상기 교반홈은 삼각 형태, 사각 형태, 다각 형태, 톱니 형태, 및 빗살 형태로 구성되는 그룹에서 선택되는 어느 하나 이상의 형태로 형성되는 것을 특징으로 하는, 교반기.
  12. 제 9항에 있어서,
    상기 식물성 폴리페놀염은 폴리페놀 초산염인 것을 특징으로 하는, 교반기.
  13. 제 9항에 있어서,
    상기 식물성 폴리페놀염은 하기 화학식 1, 화학식 2, 화학식 3, 화학식 4, 화학식 5, 화학식 5a, 화학식 5b, 화학식 5c, 화학식 6, 화학식 7, 화학식 8, 화학식 8a, 화학식 8b, 화학식 9, 화학식 10, 화학식 10a, 및 화학식 11로 구성된 그룹으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 교반기.
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000036
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000037
    [화학식 3]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000038
    [화학식 4]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000039
    [화학식 5]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000040
    [화학식 5a]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000041
    [화학식 5b]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000042
    [화학식 5c]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000043
    [화학식 6]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000044
    [화학식 7]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000045
    [화학식 8]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000046
    [화학식 8a]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000047
    [화학식 8b]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000048
    [화학식 9]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000049
    [화학식 10]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000050
    [화학식 10a]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000051
    [화학식 11]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000052
  14. 제 13항에 있어서,
    상기 식물성 폴리페놀염은 하기 화학식 11인 것을 특징으로 하는, 교반기.
    [화학식 11]
    Figure PCTKR2020010296-appb-I000053
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