WO2020017022A1 - 振とう装置および分析方法 - Google Patents

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WO2020017022A1
WO2020017022A1 PCT/JP2018/027275 JP2018027275W WO2020017022A1 WO 2020017022 A1 WO2020017022 A1 WO 2020017022A1 JP 2018027275 W JP2018027275 W JP 2018027275W WO 2020017022 A1 WO2020017022 A1 WO 2020017022A1
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shaking
case
control unit
humidity
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Inventor
高橋 智一
Original Assignee
株式会社島津製作所
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    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/38Diluting, dispersing or mixing samples

Definitions

  • the present invention relates to a shaking device and an analysis method using the shaking device.
  • Patent Literature 1 Japanese Patent Application Laid-Open No. 2014-77638 discloses a plate mounting surface on which a plate-shaped storage device having a storage portion for storing an object to be stirred or mixed is removably mounted. There is described an apparatus including a plate mounting portion provided with a support unit for swingably supporting the plate mounting portion.
  • the sample in the well of the microplate is shaken and agitated while being exposed to ambient air.
  • the sample is stirred while the surrounding moisture is involved.
  • the microplate is covered, it is necessary to provide a drive unit for automatically attaching and detaching the cover.
  • an object of the present invention is to provide a shaking device and a shaking device capable of stirring a sample in a well of a microplate without involving surrounding moisture without capping the microplate.
  • the purpose is to provide the analytical method used.
  • the present invention relates to a shaking device for shaking a plate having a plurality of depressions into which a sample can be injected, wherein the case includes a case purging with a dry gas, and a plate housed in the case and carried into the case. And a shaking mechanism configured to swing.
  • the case includes an inlet through which dry gas flows in, an outlet through which gas in the case flows out, and an opening / closing door for bringing the plate into the case.
  • an electromagnetic valve is provided between the supply source of the dry gas and the suction port.
  • a flow control valve is provided between the supply source of the dry gas and the suction port.
  • a humidity sensor for measuring the humidity in the case is provided.
  • a control unit is provided for recording a temporal change in humidity measured by the humidity sensor.
  • a control unit is provided for starting purging of the case with a dry gas before carrying the plate into the case.
  • a humidity sensor for measuring the humidity in the case is provided.
  • the controller starts the purging of the inside of the case and then brings the plate into the case from the opening / closing door after the humidity in the case has reached the threshold value or less.
  • control unit causes the plate to be carried into the case from the opening / closing door after a lapse of a predetermined time from the start of purging in the case.
  • control unit causes the shaking mechanism to start shaking after the humidity in the case reaches a threshold or less after the plate is carried into the case.
  • control unit causes the shaking mechanism to start shaking after a predetermined time has elapsed after the plate is carried into the case.
  • an electromagnetic valve is provided between the supply source of the dry gas and the suction port.
  • the control unit causes the shaking mechanism to start shaking, and closes the solenoid valve to finish purging in the case.
  • the drying gas is nitrogen.
  • the present invention relates to an analysis method using a shaking device including a case that can be purged by a dry gas and a shaking mechanism housed in the case. Centrifuging the plate having, and, in parallel with the centrifuging step, starting the purging of the case with a dry gas, adding the chemical to the recess of the plate after the centrifuging, After the humidity of the plate reaches the threshold or less, the step of carrying the plate into the case, and after the plate is carried into the case, after the humidity in the case has reached the threshold or less, the plate is shaken by the shaking mechanism. And steps.
  • the sample in the well of the microplate can be stirred without involving surrounding moisture without covering the microplate.
  • FIG. 3 is a diagram illustrating a microplate 30. It is a flowchart showing the operation
  • FIG. 6 is a diagram illustrating a temporal change of humidity in a shaking case 1. It is a flow chart showing the procedure of the analysis method using shaking device 110 of a 6th embodiment.
  • FIG. 3 is a diagram illustrating an example of a hardware configuration of a control unit 40.
  • FIG. 1 is a diagram illustrating a configuration of a shaking device 10 according to the first embodiment.
  • shaking apparatus 10 includes shaking case 1, solenoid valve 2, flow regulating valve 7, shaking mechanism 6, and control unit 40.
  • the shaking mechanism 6 is housed in the shaking case 1.
  • the shaking case 1 has an inlet 4, an outlet 5, and an opening / closing door 8.
  • the shaking case 1 is made of a glass plate serving as a wall except for the inlet 4, the outlet 5, and the door 8.
  • the suction port 4 is connected to the flow control valve 7 through a pipe. Nitrogen flows into the shaking case 1 from the suction port 4.
  • the outlet 5 is connected to the thin tube 31. Nitrogen is discharged from the shaking case 1 to the tube 31 through the discharge port 5. Since the tube 31 has a thin cylindrical configuration, even after the purging of the shaking case 1 is completed, gas outside the shaking case 1 is prevented from flowing into the shaking case 1 through the outlet 5. Can be
  • the microplate 30 can be placed on the pedestal of the shaking mechanism 6.
  • the shaking mechanism 6 shakes under the control of the control unit 40, the microplate 30 shakes, and the sample in the well of the microplate 30 is stirred.
  • the rotation speed of the shaking by the shaking mechanism 6 can be adjusted by the control unit 40.
  • the solenoid valve 2 is connected to the nitrogen supply source 20 through a pipe.
  • the nitrogen supply source 20 includes a nitrogen generator, a nitrogen cylinder, a nitrogen concentration pipe, or the like.
  • the nitrogen supply source 20 supplies nitrogen as a dry gas.
  • the solenoid valve 2 is opened, nitrogen released from the nitrogen supply source 20 is sent to the shaking case 1.
  • the flow control valve 7 is connected to the solenoid valve 2 through a pipe.
  • the flow control valve 7 is constituted by, for example, a flow meter with a needle valve.
  • the flow rate adjusting valve 7 adjusts the flow rate of nitrogen sent from the nitrogen supply source 20 to the shaking case 1. This makes it possible to adjust the time required for the humidity in the shaking case 1 to reach the target humidity.
  • the control unit 40 controls the solenoid valve 2, the flow control valve 7, the shaking mechanism 6, and the door 8.
  • FIG. 2 is a diagram illustrating the microplate 30.
  • the microplate 30 has 96 wells. A sample is injected into each well. For example, at the time of screening analysis of early colorectal cancer, the sample contains cells or metabolites and pyridine having high hygroscopicity.
  • FIG. 3 is a flowchart illustrating an operation procedure of the shaking apparatus 10 according to the first embodiment.
  • the control unit 40 opens the opening / closing door 8 in the shaking case 1, brings the microplate 30 into the shaking case 1, and places the microplate 30 on the shaking mechanism 6.
  • step S102 the control unit 40 adjusts the flow rate of nitrogen from the nitrogen supply source 20 to the shaking case 1 by setting the opening of the flow control valve 7 to a default value or a value specified by the user.
  • the flow rate may be adjusted in consideration of the size of the shaking case 1 and the constraint time.
  • step S103 the control unit 40 opens the solenoid valve 2. Thereby, the gas in the shaking case 1 is replaced with nitrogen. As a result, the shaking case 1 can be kept at a low humidity.
  • step S104 the control unit 40 starts shaking of the shaking mechanism 6.
  • step S105 the control unit 40 determines whether the elapsed time from the start of shaking is equal to or greater than the threshold value THA. If the elapsed time from the start of shaking is equal to or greater than the threshold value THA, the process proceeds to step S106. If the elapsed time from the start of shaking is less than the threshold value THA, the process returns to step S105.
  • step S106 the control unit 40 ends the shaking of the shaking mechanism 6.
  • the microplate 30 in the shaking case 1 is shaken, so that the sample is stirred in a high humidity environment. Can be prevented.
  • FIG. 4 is a flowchart illustrating an operation procedure of the shaking apparatus 10 according to the second embodiment.
  • the control unit 40 closes the opening / closing door 8 in the shaking case 1.
  • step S202 the control unit 40 adjusts the flow rate of nitrogen from the nitrogen supply source 20 to the shaking case 1 by setting the opening of the flow control valve 7 to a default value or a value specified by the user.
  • step S203 the control unit 40 opens the solenoid valve 2.
  • step S204 the control unit 40 determines whether the elapsed time since opening the solenoid valve 2 is equal to or greater than a threshold value THB. If the elapsed time since opening the solenoid valve 2 is equal to or greater than the threshold THB, the process proceeds to step S205. If the elapsed time since opening the solenoid valve 2 is less than the threshold value THB, the process returns to step S204.
  • step S205 the control unit 40 opens the opening / closing door 8 in the shaking case 1, carries the microplate 30 into the shaking case 1, and places the microplate 30 on the shaking mechanism 6.
  • step S206 the control unit 40 determines whether or not the elapsed time since the microplate 30 is carried into the shaking case 1 is equal to or greater than the threshold THC. If the elapsed time since the microplate 30 has been carried into the shaking case 1 is equal to or greater than the threshold THC, the process proceeds to step S207. If the elapsed time since the microplate 30 has been carried into the shaking case 1 is less than the threshold THC, the process returns to step S206.
  • step S207 the control unit 40 starts shaking of the shaking mechanism 6.
  • step S208 the control unit 40 determines whether the elapsed time from the start of shaking is equal to or greater than the threshold value THA. If the elapsed time from the start of shaking is equal to or greater than the threshold value THA, the process proceeds to step S209. If the elapsed time from the start of shaking is less than the threshold value THA, the process returns to step S208.
  • step S209 the control unit 40 ends the shaking of the shaking mechanism 6.
  • the shaking case 1 is pre-purged by nitrogen for a predetermined time (THC), so that the sample is shaken. It is possible to prevent the sample from being exposed to a high-humidity environment not only when the sample is shaken but also before shaking the sample.
  • the humidity inside the shaking case 1 is measured by providing a humidity sensor inside the shaking case 1.
  • FIG. 5 is a diagram illustrating a configuration of a shaking device 110 according to the third embodiment.
  • the difference between the shaking device 110 of the third embodiment and the shaking device 10 of the first embodiment in FIG. 1 is that the shaking device 110 of the third embodiment is different from the shaking device 110 of FIG. It is a point to prepare.
  • the humidity sensor 3 is housed in the shaking case 1.
  • the humidity sensor 3 measures the humidity in the shaking case 1 and outputs the measurement result to the control unit 40.
  • FIG. 6 is a flowchart showing the operation procedure of the shaking apparatus 110 according to the third embodiment.
  • step S301 the control unit 40 closes the opening / closing door 8 in the shaking case 1.
  • step S302 the control unit 40 adjusts the flow rate of nitrogen from the nitrogen supply source 20 to the shaking case 1 by setting the opening of the flow control valve 7 to a default value or a value specified by the user.
  • step S303 the control unit 40 opens the solenoid valve 2.
  • step S304 the control unit 40 starts recording a log of the humidity in the shaking case 1 detected by the humidity sensor 3. By recording the humidity log, when there is an unclear point in the analysis result, it is possible to check whether the humidity in the shaking step is appropriate.
  • step S305 the control unit 40 determines whether or not the humidity in the shaking case 1 detected by the humidity sensor 3 is equal to or less than the threshold value THD. If the humidity in shaking case 1 is equal to or smaller than threshold value THD, the process proceeds to step S306. When the humidity in shaking case 1 exceeds threshold value THD, the process returns to step S305.
  • step S306 the control unit 40 opens the door 8 in the shaking case 1, carries the microplate 30 into the shaking case 1, and places the microplate 30 on the shaking mechanism 6.
  • step S307 the control unit 40 starts shaking of the shaking mechanism 6.
  • step S308 the control unit 40 determines whether the elapsed time from the start of shaking is equal to or greater than the threshold value THA. If the elapsed time from the start of shaking is equal to or greater than the threshold value THA, the process proceeds to step S309. If the elapsed time from the start of shaking is less than the threshold value THA, the process returns to step S308.
  • step S309 the control unit 40 ends the shaking of the shaking mechanism 6.
  • the shaking case 1 is rotated until the humidity of the shaking case 1 reaches a predetermined value (threshold value THD). Is pre-purged with nitrogen, so that the sample can be prevented from being exposed to a high-humidity environment not only when the sample is shaken but also before the sample is shaken.
  • the humidity in the shaking case 1 increased by opening the opening / closing door 8 of the shaking case 1 in order to carry the microplate 30 into the shaking case 1 is reduced.
  • FIG. 7 is a flowchart showing the operation procedure of the shaking apparatus 110 according to the fourth embodiment.
  • step S401 the control unit 40 closes the opening / closing door 8 in the shaking case 1.
  • step S402 the control unit 40 adjusts the flow rate of nitrogen from the nitrogen supply source 20 to the shaking case 1 by setting the opening of the flow control valve 7 to a default value or a value specified by the user.
  • step S403 the control unit 40 opens the solenoid valve 2.
  • step S404 the control unit 40 starts recording a log of the humidity in the shaking case 1 detected by the humidity sensor 3.
  • step S405 the control unit 40 determines whether the humidity in the shaking case 1 detected by the humidity sensor 3 is equal to or less than the threshold value THD. When the humidity in shaking case 1 is equal to or smaller than threshold value THD, the process proceeds to step S406. If the humidity in shaking case 1 exceeds threshold value THD, the process returns to step S405.
  • step S406 the control unit 40 opens the opening / closing door 8 in the shaking case 1, carries the microplate 30 into the shaking case 1, and places the microplate 30 on the shaking mechanism 6.
  • step S407 the control unit 40 determines whether the humidity in the shaking case 1 detected by the humidity sensor 3 is equal to or less than the threshold value THE. If the humidity in shaking case 1 is equal to or less than threshold THE, the process proceeds to step S408. If the humidity in shaking case 1 exceeds threshold value THE, the process returns to step S407.
  • the threshold value THE may be the same as the threshold value THD in step S405 in the pre-purge.
  • step S408 the control unit 40 starts shaking of the shaking mechanism 6.
  • step S409 the control unit 40 determines whether the elapsed time from the start of shaking is equal to or greater than the threshold value THA. If the elapsed time from the start of shaking is equal to or greater than the threshold value THA, the process proceeds to step S410. If the elapsed time from the start of shaking is less than the threshold value THA, the process returns to step S409.
  • step S410 the control unit 40 ends the shaking of the shaking mechanism 6.
  • the shaking case 1 has been pre-purged with nitrogen before step S406. By opening, the humidity in shaking case 1 increases. In the present embodiment, the increased humidity in the shaking case 1 can be reduced before shaking the shaking case 1 by step S407.
  • FIG. 8 is a flowchart illustrating an operation procedure of the shaking apparatus 110 according to the fifth embodiment.
  • step S501 the control unit 40 closes the opening / closing door 8 in the shaking case 1.
  • step S502 the control unit 40 adjusts the flow rate of nitrogen from the nitrogen supply source 20 to the shaking case 1 by setting the opening of the flow control valve 7 to a default value or a value specified by the user.
  • step S503 the control unit 40 opens the solenoid valve 2.
  • step S504 the control unit 40 starts recording a log of the humidity in the shaking case 1 detected by the humidity sensor 3.
  • step S505 the control unit 40 determines whether or not the humidity in the shaking case 1 detected by the humidity sensor 3 is equal to or less than the threshold value THD. If the humidity in shaking case 1 is equal to or smaller than threshold value THD, the process proceeds to step S506. When the humidity in shaking case 1 exceeds threshold value THD, the process returns to step S505.
  • step S506 the control unit 40 opens the opening / closing door 8 in the shaking case 1, brings the microplate 30 into the shaking case 1, and places the microplate 30 on the shaking mechanism 6.
  • step S507 the control unit 40 determines whether the humidity in the shaking case 1 detected by the humidity sensor 3 is equal to or less than the threshold value THE. If the humidity in shaking case 1 is equal to or smaller than threshold THE, the process proceeds to step S508. If the humidity in shaking case 1 exceeds threshold THE, the process returns to step S507.
  • step S508 the control unit 40 closes the solenoid valve 2. As a result, the release of nitrogen from the nitrogen supply source 20 is stopped. Since the discharge port 5 is connected to the thin cylindrical tube 31, even when the purging is stopped, gas outside the shaking case 1 does not flow into the shaking case 1. By stopping the release of nitrogen from the nitrogen source 20, nitrogen consumption can be reduced.
  • step S509 the control unit 40 starts shaking of the shaking mechanism 6.
  • step S510 control unit 40 determines whether the elapsed time from the start of shaking is equal to or greater than threshold value THA. If the elapsed time from the start of shaking is equal to or greater than the threshold value THA, the process proceeds to step S511. If the elapsed time from the start of shaking is less than the threshold value THA, the process returns to step S510.
  • step S511 the control unit 40 ends the shaking of the shaking mechanism 6.
  • FIG. 9 is a diagram illustrating a temporal change of humidity in shaking case 1.
  • the humidity in the shaking case 1 is reduced from 56% to 30% by the pre-purge. Thereafter, in order to carry the microplate 30 into the shaking case 1, the humidity inside the shaking case 1 is increased to slightly less than 40% by opening the opening / closing door 8 of the shaking case 1. After the microplate 30 is loaded into the shaking case 1, the purging is continued (referred to as main purging), whereby the humidity in the shaking case 1 can be reduced to 30% in a shorter time than in the pre-purge. Thereafter, the electromagnetic valve 2 is closed, and the shaking operation is started.
  • FIG. 10 is a flowchart illustrating a procedure of an analysis method using the shaking device 110 according to the sixth embodiment.
  • step S601 the microplate 30 having the well into which the sample has been injected is centrifuged in a vacuum environment by a centrifuge. Thereby, the sample in the well of the microplate 30 becomes powdery.
  • step S602 the shaking case 1 is pre-purged with nitrogen in parallel with the centrifugation step (centrifugation step).
  • the pre-purge processing is the same as the processing in steps S501 to S504 in FIG.
  • step S603 when the centrifuging step is completed, the process proceeds to step S604, and when the centrifuging step is not completed, the process returns to step S603.
  • step S604 after centrifugation, pyridine, which is a highly hygroscopic chemical, is added to the wells of the microplate 30.
  • step S605 the control unit 40 determines whether or not the humidity in the shaking case 1 detected by the humidity sensor 3 is equal to or less than the threshold value THD. If the humidity in shaking case 1 is equal to or smaller than threshold THD, the process proceeds to step S606. If the humidity in shaking case 1 exceeds threshold value THD, the process returns to step S605.
  • step S606 the control unit 40 opens the opening / closing door 8 in the shaking case 1, brings the microplate 30 into the shaking case 1, and places the microplate 30 on the shaking mechanism 6.
  • step S607 the control unit 40 determines whether or not the humidity in the shaking case 1 detected by the humidity sensor 3 is equal to or less than the threshold value THE. If the humidity in shaking case 1 is equal to or smaller than threshold THE, the process proceeds to step S608. If the humidity in shaking case 1 exceeds threshold value THE, the process returns to step S607.
  • step S608 the control unit 40 closes the solenoid valve 2.
  • step S609 the control unit 40 starts shaking of the shaking mechanism 6.
  • control unit 40 determines whether or not the elapsed time from the start of shaking is equal to or greater than threshold value THA. If the elapsed time from the start of shaking is equal to or greater than the threshold value THA, the process proceeds to step S611. If the elapsed time from the start of shaking is less than the threshold value THA, the process returns to step S610.
  • step S611 the control unit 40 ends the shaking of the shaking mechanism 6.
  • the pre-purge of the shaking case 1 is performed in parallel with the centrifuging step of the microplate 30, so that the microplate 30 is immediately shaken after the centrifuging step is completed. Can be done.
  • the present invention is not limited to the above embodiment, and includes, for example, the following modifications.
  • the shaking case 1 is purged with nitrogen.
  • the purging of the shaking case 1 may be another dry gas.
  • the shaking mechanism 6 may be configured to shake at a constant rotation speed, or may be configured to change the rotation speed.
  • the shaking mechanism may rotate at a high speed for a first time from the start of shaking, and may rotate at a low speed for a second time thereafter.
  • FIG. 11 is a diagram illustrating an example of a hardware configuration of the control unit 40.
  • the hardware of the control unit 40 includes a processor 1100 and a memory 1200 connected to the processor 1100 by a bus 1300.
  • the control unit 40 is realized by a processor 1110 such as a CPU (Central Processing Unit) executing a program stored in the memory 1200. Further, a plurality of processors and a plurality of memories may cooperate to execute the functions of the above components.
  • a processor 1110 such as a CPU (Central Processing Unit) executing a program stored in the memory 1200.
  • a plurality of processors and a plurality of memories may cooperate to execute the functions of the above components.
  • 1 shaking case 2 solenoid valve, 3 humidity sensor, 4 suction port, 5 discharge port, 6 shaking mechanism, 7 flow control valve, 8 opening / closing door, 10,110 shaking device, 20 nitrogen supply source, 30 microplate , 31 tube, 40 controller, 1100 processor, 1200 memory, 1300 bus.

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Abstract

振とう装置(10)は、試料が注入可能な複数の窪みを有するマイクロプレート(30)を振とうする。振とうケース(1)は、乾燥気体によってパージ可能に構成される。振とう機構(6)は、振とうケース(1)内に収容され、かつ振とうケース(1)に搬入されたマイクロプレート(30)を振とうするように構成される。振とうケース(1)は、乾燥気体が流入する吸入口(4)と、振とうケース(1)内の気体が流出する排出口(5)と、マイクロプレート(30)を振とうケース(1)内に搬入させるための開閉扉(8)とを含む。

Description

振とう装置および分析方法
 本発明は、振とう装置および振とう装置を用いた分析方法に関する。
 従来から、マイクロプレート内の試料を振とうすることによって撹拌する装置が知られている。たとえば、特許文献1(特開2014-77638号公報)には、撹拌又は混合の対象物が収容される収容部を備えたプレート形状の収容器具が着脱可能に載置されるプレート載置面を備えたプレート載置部と、当該プレート載置部を揺動可能に支持する支持ユニットとを備えた装置が記載されている。
特開2014-77638号公報
 しかしながら、マイクロプレートの上面には蓋がない為、マイクロプレートのウェル内の試料は、環境空気にさらされた状態で振とうされ、撹拌される。湿度が高い環境下で、吸水性の高い試料を振とうした場合には、周囲の湿気を巻き込みながら、試料が撹拌されることになる。一方、マイクロプレートに蓋をする場合、蓋の着脱を自動で行う駆動ユニットを設ける必要がある。
 それゆえに、本発明の目的は、マイクロプレートに蓋をすることなく、マイクロプレートのウェル内の試料を周囲の湿気を巻き込まずに撹拌することができる振とう装置、およびそのような振とう装置を用いた分析方法を提供することである。
 本発明は、試料が注入可能な複数の窪みを有するプレートを振とうする振とう装置であって、乾燥気体によってパージ可能なケースと、ケース内に収容され、かつケースに搬入されたプレートを振とうするように構成された振とう機構とを備える。ケースは、乾燥気体が流入する吸入口と、ケース内の気体が流出する排出口と、プレートをケース内に搬入させるための開閉扉とを含む。
 好ましくは、乾燥気体の供給源と吸入口との間に配置される電磁弁を備える。
 好ましくは、乾燥気体の供給源と吸入口との間に配置され流量調整バルブを備える。
 好ましくは、ケース内の湿度を計測する湿度センサを備える。
 好ましくは、湿度センサで計測された湿度の時間変化を記録する制御部を備える。
 好ましくは、プレートをケースに搬入する前に、乾燥気体によって、ケース内のパージを開始する制御部を備える。
 好ましくは、ケース内の湿度を計測する湿度センサを備える。制御部は、ケース内のパージを開始した後、ケース内の湿度が閾値以下に達した後、開閉扉からプレートをケース内に搬入させる。
 好ましくは、制御部は、ケース内のパージを開始した後、所定時間経過した後、開閉扉からプレートをケースに搬入させる。
 好ましくは、制御部は、プレートをケースに搬入させた後、ケース内の湿度が閾値以下に達した後、振とう機構に振とうを開始させる。
 好ましくは、制御部は、プレートをケースに搬入させた後、所定時間経過した後、振とう機構に振とうを開始させる。
 好ましくは、乾燥気体の供給源と吸入口との間に配置される電磁弁を備える。制御部は、振とう機構に振とうを開始させるとともに、電磁弁を閉じることによって、ケース内のパージを終了する。
 好ましくは、乾燥気体は、窒素である。
 本発明は、乾燥気体によってパージ可能なケースと、ケース内に収容された振とう機構とを備えた振とう装置を用いた分析方法であって、遠心機によって、試料が注入された複数の窪みを有するプレートを遠心するステップと、遠心するステップと平行して、乾燥気体によって、ケースのパージを開始するステップと、遠心の後、プレートの窪みに薬品を加えるステップと、遠心の後、ケース内の湿度が閾値以下に達した後、プレートをケース内に搬入させるステップと、プレートがケースに搬入された後、ケース内の湿度が閾値以下に達した後に、振とう機構によってプレートを振とうするステップとを備える。
 本発明によれば、マイクロプレートに蓋をすることなく、マイクロプレートのウェル内の試料を周囲の湿気を巻き込まずに撹拌することができる。
第1の実施形態の振とう装置10の構成を表わす図である。 マイクロプレート30を表わす図である。 第1の実施形態の振とう装置10の動作手順を表わすフローチャートである。 第2の実施形態の振とう装置10の動作手順を表わすフローチャートである。 第3の実施形態の振とう装置110の構成を表わす図である。 第3の実施形態の振とう装置110の動作手順を表わすフローチャートである。 第4の実施形態の振とう装置110の動作手順を表わすフローチャートである。 第5の実施形態の振とう装置110の動作手順を表わすフローチャートである。 振とうケース1内の湿度の時間変化を表わす図である。 第6の実施形態の振とう装置110を用いた分析方法の手順を表わすフローチャートである。 制御部40のハードウエア構成の例を表わす図である。
 以下、実施の形態について、図面を参照して説明する。
 [第1の実施形態]
 図1は、第1の実施形態の振とう装置10の構成を表わす図である。
 図1を参照して、振とう装置10は、振とうケース1と、電磁弁2と、流量調整バルブ7と、振とう機構6と、制御部40とを備える。
 振とうケース1内に振とう機構6が収納される。振とうケース1は、吸入口4と、排出口5と、開閉扉8とを有する。振とうケース1は、吸入口4、排出口5、および開閉扉8以外の箇所では、壁となるガラス板で構成されている。
 吸入口4は、配管を通じて流量調整バルブ7と接続する。吸入口4から窒素が振とうケース1に流入する。
 排出口5は、細いチューブ31と接続する。排出口5から窒素が振とうケース1からチューブ31へ排出される。チューブ31は、細い円柱状の構成を有するため、振とうケース1のパージの終了後でも、振とうケース1の外部の気体が排出口5を介して振とうケース1へ流入することがないようにすることができる。
 振とう機構6の台座の上にマイクロプレート30が載置可能である。振とう機構6が、制御部40による制御によって、振とうすることによって、マイクロプレート30が振とうし、マイクロプレート30のウェル内の試料が撹拌する。振とう機構6による振とうの回転数は、制御部40によって調整することができる。
 電磁弁2は、窒素供給源20と配管を通じて接続される。窒素供給源20は、窒素ジェネレータ、窒素ボンベ、または窒素集中配管などで構成される。窒素供給源20は、乾燥気体として窒素を供給する。電磁弁2が開いたときに、窒素供給源20から放出される窒素が振とうケース1に送られる。
 流量調整バルブ7は、配管を通じて電磁弁2と接続される。流量調整バルブ7は、たとえば、ニードルバルブ付フローメータで構成される。流量調整バルブ7は、窒素供給源20から振とうケース1へ送られる窒素の流量速度を調整する。これによって、振とうケース1内の湿度が目標の湿度へ到達する時間を調整することができる。
 制御部40は、電磁弁2、流量調整バルブ7、振とう機構6、および開閉扉8を制御する。
 図2は、マイクロプレート30を表わす図である。
 マイクロプレート30は、96個のウェルを有する。各ウェルに試料が注入される。たとえば、早期大腸がんのスクリーニング解析時には、試料は、細胞または代謝物と吸湿性の高いピリジンなどを含む。
 図3は、第1の実施形態の振とう装置10の動作手順を表わすフローチャートである。
 ステップS101において、制御部40は、振とうケース1内の開閉扉8を開き、マイクロプレート30を振とうケース1に搬入させて、マイクロプレート30を振とう機構6に載置する。
 ステップS102において、制御部40は、流量調整バルブ7の開度をデフォルト値またはユーザが指定した値に設定することによって、窒素供給源20から振とうケース1への窒素の流量速度を調整する。振とうケース1の大きさ、および制約時間などを考慮して、流量速度を調整することとしてもよい。
 ステップS103において、制御部40は、電磁弁2を開く。これによって、振とうケース1内の気体が窒素に置き換えられる。その結果、振とうケース1を低湿度に保つことができる。
 ステップS104において、制御部40は、振とう機構6の振とうを開始させる。
 ステップS105において、制御部40は、振とう開始からの経過時間が閾値THA以上かどうかを判定する。振とう開始からの経過時間が閾値THA以上のときには、処理がステップS106に進む。振とう開始からの経過時間が閾値THA未満のときには、処理がステップS105に戻る。
 ステップS106において、制御部40は、振とう機構6の振とうを終了させる。
 以上のように、本実施の形態によれば、窒素で振とうケース1をパージした後、振とうケース1内のマイクロプレート30を振とうするので、高湿度の環境で試料が撹拌されるのを防止することができる。
 [第2の実施形態]
 第2の実施形態では、マイクロプレート30を振とうケース1に搬入する前に、振とうケース1を窒素でプレパージする。
 図4は、第2の実施形態の振とう装置10の動作手順を表わすフローチャートである。
 ステップS201において、制御部40は、振とうケース1内の開閉扉8を閉じる。
 ステップS202において、制御部40は、流量調整バルブ7の開度をデフォルト値またはユーザが指定した値に設定することによって、窒素供給源20から振とうケース1への窒素の流量速度を調整する。
 ステップS203において、制御部40は、電磁弁2を開く。
 ステップS204において、制御部40は、電磁弁2を開いてからの経過時間が閾値THB以上かどうかを判定する。電磁弁2を開いてからの経過時間が閾値THB以上のときには、処理がステップS205に進む。電磁弁2を開いてからの経過時間が閾値THB未満のときには、処理がステップS204に戻る。
 ステップS205において、制御部40は、振とうケース1内の開閉扉8を開き、マイクロプレート30を振とうケース1に搬入させて、マイクロプレート30を振とう機構6に載置する。
 ステップS206において、制御部40は、マイクロプレート30を振とうケース1に搬入してからの経過時間が閾値THC以上かどうかを判定する。マイクロプレート30を振とうケース1に搬入してからの経過時間が閾値THC以上のときには、処理がステップS207に進む。マイクロプレート30を振とうケース1に搬入してからの経過時間が閾値THC未満のときには、処理がステップS206に戻る。
 ステップS207において、制御部40は、振とう機構6の振とうを開始させる。
 ステップS208において、制御部40は、振とう開始からの経過時間が閾値THA以上かどうかを判定する。振とう開始からの経過時間が閾値THA以上のときには、処理がステップS209に進む。振とう開始からの経過時間が閾値THA未満のときには、処理がステップS208に戻る。
 ステップS209において、制御部40は、振とう機構6の振とうを終了させる。
 以上のように、本実施の形態によれば、マイクロプレート30を振とうケース1に搬入する前に、振とうケース1を窒素で定められた時間(THC)だけプレパージするので、試料を振とうするときだけでなく、試料を振とうする前においても、試料を高湿度の環境にさらすのを防止することができる。
 [第3の実施形態]
 第3の実施形態では、振とうケース1内に湿度センサを設けることによって、振とうケース1内の湿度を測定する。
 図5は、第3の実施形態の振とう装置110の構成を表わす図である。
 第3の実施の形態の振とう装置110が、図1の第1の実施の形態の振とう装置10と相違する点は、第3の実施の形態の振とう装置110が、湿度センサ3を備える点である。
 湿度センサ3は、振とうケース1内に収納される。湿度センサ3は、振とうケース1内の湿度を測定して、測定結果を制御部40へ出力する。
 図6は、第3の実施形態の振とう装置110の動作手順を表わすフローチャートである。
 ステップS301において、制御部40は、振とうケース1内の開閉扉8を閉じる。
 ステップS302において、制御部40は、流量調整バルブ7の開度をデフォルト値またはユーザが指定した値に設定することによって、窒素供給源20から振とうケース1への窒素の流量速度を調整する。
 ステップS303において、制御部40は、電磁弁2を開く。
 ステップS304において、制御部40は、湿度センサ3によって検出された振とうケース1内の湿度のログの記録を開始する。湿度のログを記録することによって、分析結果に不明瞭な点があったときに、振とう工程での湿度が適切であったかどうかを調べることができる。
 ステップS305において、制御部40は、湿度センサ3によって検出された振とうケース1内の湿度が閾値THD以下であるかどうかを判定する。振とうケース1内の湿度度が閾値THD以下の場合に、処理がステップS306に進む。振とうケース1内の湿度度が閾値THDを超える場合に、処理がステップS305に戻る。
 ステップS306において、制御部40は、振とうケース1内の開閉扉8を開き、マイクロプレート30を振とうケース1に搬入させて、マイクロプレート30を振とう機構6に載置する。
 ステップS307において、制御部40は、振とう機構6の振とうを開始させる。
 ステップS308において、制御部40は、振とう開始からの経過時間が閾値THA以上かどうかを判定する。振とう開始からの経過時間が閾値THA以上のときには、処理がステップS309に進む。振とう開始からの経過時間が閾値THA未満のときには、処理がステップS308に戻る。
 ステップS309において、制御部40は、振とう機構6の振とうを終了させる。
 以上のように、本実施の形態によれば、マイクロプレート30を振とうケース1に搬入する前に、振とうケース1の湿度が定められた値(閾値THD)になるまで、振とうケース1を窒素でプレパージするので、試料を振とうするときだけでなく、試料を振とうする前においても、試料を高湿度の環境にさらすのを防止することができる。
 [第4の実施形態]
 第4の実施形態では、マイクロプレート30を振とうケース1に搬入するために振とうケース1の開閉扉8を開くことによって増加した振とうケース1内の湿度を減少させる。
 図7は、第4の実施形態の振とう装置110の動作手順を表わすフローチャートである。
 ステップS401において、制御部40は、振とうケース1内の開閉扉8を閉じる。
 ステップS402において、制御部40は、流量調整バルブ7の開度をデフォルト値またはユーザが指定した値に設定することによって、窒素供給源20から振とうケース1への窒素の流量速度を調整する。
 ステップS403において、制御部40は、電磁弁2を開く。
 ステップS404において、制御部40は、湿度センサ3によって検出された振とうケース1内の湿度のログを記録を開始する。
 ステップS405において、制御部40は、湿度センサ3によって検出された振とうケース1内の湿度が閾値THD以下であるかどうかを判定する。振とうケース1内の湿度度が閾値THD以下の場合に、処理がステップS406に進む。振とうケース1内の湿度度が閾値THDを超える場合に、処理がステップS405に戻る。
 ステップS406において、制御部40は、振とうケース1内の開閉扉8を開き、マイクロプレート30を振とうケース1に搬入させて、マイクロプレート30を振とう機構6に載置する。
 ステップS407において、制御部40は、湿度センサ3によって検出された振とうケース1内の湿度が閾値THE以下であるかどうかを判定する。振とうケース1内の湿度度が閾値THE以下の場合に、処理がステップS408に進む。振とうケース1内の湿度度が閾値THEを超える場合に、処理がステップS407に戻る。閾値THEは、プレパージにおけるステップS405の閾値THDと同一であってもよい。
 ステップS408において、制御部40は、振とう機構6の振とうを開始させる。
 ステップS409において、制御部40は、振とう開始からの経過時間が閾値THA以上かどうかを判定する。振とう開始からの経過時間が閾値THA以上のときには、処理がステップS410に進む。振とう開始からの経過時間が閾値THA未満のときには、処理がステップS409に戻る。
 ステップS410において、制御部40は、振とう機構6の振とうを終了させる。
 以上のように、ステップS406までに、振とうケース1が窒素でプレパージされているが、ステップS406において、マイクロプレート30を振とうケース1に搬入するために、振とうケース1の開閉扉8を開くことによって、振とうケース1内の湿度が増加する。本実施の形態では、ステップS407によって、振とうケース1を振とうする前に、振とうケース1内の増加した湿度を減少させることができる。
 [第5の実施形態]
 図8は、第5の実施形態の振とう装置110の動作手順を表わすフローチャートである。
 ステップS501において、制御部40は、振とうケース1内の開閉扉8を閉じる。
 ステップS502において、制御部40は、流量調整バルブ7の開度をデフォルト値またはユーザが指定した値に設定することによって、窒素供給源20から振とうケース1への窒素の流量速度を調整する。
 ステップS503において、制御部40は、電磁弁2を開く。
 ステップS504において、制御部40は、湿度センサ3によって検出された振とうケース1内の湿度のログを記録を開始する。
 ステップS505において、制御部40は、湿度センサ3によって検出された振とうケース1内の湿度が閾値THD以下であるかどうかを判定する。振とうケース1内の湿度度が閾値THD以下の場合に、処理がステップS506に進む。振とうケース1内の湿度度が閾値THDを超える場合に、処理がステップS505に戻る。
 ステップS506において、制御部40は、振とうケース1内の開閉扉8を開き、マイクロプレート30を振とうケース1に搬入させて、マイクロプレート30を振とう機構6に載置する。
 ステップS507において、制御部40は、湿度センサ3によって検出された振とうケース1内の湿度が閾値THE以下であるかどうかを判定する。振とうケース1内の湿度度が閾値THE以下の場合に、処理がステップS508に進む。振とうケース1内の湿度度が閾値THEを超える場合に、処理がステップS507に戻る。
 ステップS508において、制御部40は、電磁弁2を閉じる。これによって、窒素供給源20からの窒素の放出が停止される。排出口5が細い円柱状のチューブ31に接続されているので、パージを停止しても、振とうケース1の外部の気体が振とうケース1に流入することがない。窒素供給源20の窒素の放出を停止することによって、窒素の消費を低減することができる。
 ステップS509において、制御部40は、振とう機構6の振とうを開始させる。
 ステップS510において、制御部40は、振とう開始からの経過時間が閾値THA以上かどうかを判定する。振とう開始からの経過時間が閾値THA以上のときには、処理がステップS511に進む。振とう開始からの経過時間が閾値THA未満のときには、処理がステップS510に戻る。
 ステップS511において、制御部40は、振とう機構6の振とうを終了させる。
 図9は、振とうケース1内の湿度の時間変化を表わす図である。
 図9において、プレパージによって、振とうケース1内の湿度が56%から30%まで減少する。その後、マイクロプレート30を振とうケース1に搬入するために、振とうケース1の開閉扉8を開くことによって、振とうケース1内の湿度が40%弱まで増加する。マイクロプレート30の振とうケース1の搬入後、パージが続行される(本パージと呼ぶ)ことによって、プレパージよりも短時間で振とうケース1内の湿度を30%まで減少させることができる。その後、電磁弁2が閉じて、振とう動作が開始される。
 [第6の実施形態]
 図10は、第6の実施形態の振とう装置110を用いた分析方法の手順を表わすフローチャートである。
 ステップS601において、遠心機によって、試料が注入されたウェルを有するマイクロプレート30を真空環境下で遠心する。これによって、マイクロプレート30のウェル内の試料は、粉末状になる。
 ステップS602において、遠心工程(遠心するステップ)と平行して、窒素によって、振とうケース1をプレパージする。プレパージの処理は、図8のステップS501~S504の処理と同様である。
 ステップS603において、遠心するステップが終了したときに、処理がステップS604に進み、遠心するステップが終了していないときには、処理がステップS603に戻る。
 ステップS604において、遠心の後、マイクロプレート30のウェルに吸湿性の高い薬品であるピリジンを加える。
 ステップS605において、制御部40は、湿度センサ3によって検出された振とうケース1内の湿度が閾値THD以下であるかどうかを判定する。振とうケース1内の湿度度が閾値THD以下の場合に、処理がステップS606に進む。振とうケース1内の湿度度が閾値THDを超える場合に、処理がステップS605に戻る。
 ステップS606において、制御部40は、振とうケース1内の開閉扉8を開き、マイクロプレート30を振とうケース1に搬入させて、マイクロプレート30を振とう機構6に載置する。
 ステップS607において、制御部40は、湿度センサ3によって検出された振とうケース1内の湿度が閾値THE以下であるかどうかを判定する。振とうケース1内の湿度度が閾値THE以下の場合に、処理がステップS608に進む。振とうケース1内の湿度度が閾値THEを超える場合に、処理がステップS607に戻る。
 ステップS608において、制御部40は、電磁弁2を閉じる。
 ステップS609において、制御部40は、振とう機構6の振とうを開始させる。
 ステップS610において、制御部40は、振とう開始からの経過時間が閾値THA以上かどうかを判定する。振とう開始からの経過時間が閾値THA以上のときには、処理がステップS611に進む。振とう開始からの経過時間が閾値THA未満のときには、処理がステップS610に戻る。
 ステップS611において、制御部40は、振とう機構6の振とうを終了させる。
 以上のように、本実施の形態によれば、マイクロプレート30の遠心ステップと平行して、振とうケース1のプレパージを実行するので、遠心ステップを終了した後、即座にマイクロプレート30を振とうさせることができる。
 本発明は、上記の実施形態に限定されるものではなく、たとえば、以下のような変形例も含む。
 (1)乾燥気体
 上記の実施形態では、窒素によって振とうケース1をパージするものとしたが、これに限定されるものではない。振とうケース1をパージするのは、他の乾燥気体であってもよい。
 (2)振とう
 振とう機構6は、一定の回転数で振とうするものとしてよいし、回転数が変化するものとしてもよい。たとえば、振とう機構は、振とう開始から第1の時間では、高速で回転し、その後の第2の時間では、低速で回転するものとしてもよい。
 (3)制御部
 図11は、制御部40のハードウエア構成の例を表わす図である。制御部40のハードウエアは、プロセッサ1100と、プロセッサ1100とバス1300で接続されたメモリ1200とを備える。制御部40は、CPU(Central Processing Unit)などのプロセッサ1110がメモリ1200に記憶されたプログラムを実行することにより、実現される。また、複数のプロセッサおよび複数のメモリが連携して上記構成要素の機能を実行するものとしてもよい。
 今回開示された実施の形態はすべての点で例示であって制限的なものではないと考えられるべきである。本発明の範囲は上記した説明ではなくて特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲と均等の意味および範囲内でのすべての変更が含まれることが意図される。
 1 振とうケース、2 電磁弁、3 湿度センサ、4 吸入口、5 排出口、6 振とう機構、7 流量調整バルブ、8 開閉扉、10,110 振とう装置、20 窒素供給源、30 マイクロプレート、31 チューブ、40 制御部、1100 プロセッサ、1200 メモリ、1300 バス。

Claims (13)

  1.  試料が注入可能な複数の窪みを有するプレートを振とうする振とう装置であって、
     乾燥気体によってパージ可能なケースと、
     前記ケース内に収容され、かつ前記ケースに搬入された前記プレートを振とうするように構成された振とう機構とを備え、
     前記ケースは、前記乾燥気体が流入する吸入口と、前記ケース内の気体が流出する排出口と、前記プレートを前記ケース内に搬入させるための開閉扉とを含む、振とう装置。
  2.  前記乾燥気体の供給源と前記吸入口との間に配置される電磁弁を備える、請求項1記載の振とう装置。
  3.  前記乾燥気体の供給源と前記吸入口との間に配置され流量調整バルブを備える、請求項1記載の振とう装置。
  4.  前記ケース内の湿度を計測する湿度センサを備える、請求項1記載の振とう装置。
  5.  前記湿度センサで計測された湿度の時間変化を記録する制御部を備える、請求項4記載の振とう装置。
  6.  前記プレートを前記ケースに搬入する前に、前記乾燥気体によって、前記ケース内のパージを開始する制御部を備える、請求項1記載の振とう装置。
  7.  前記ケース内の湿度を計測する湿度センサを備え、
     前記制御部は、前記ケース内のパージを開始した後、前記ケース内の湿度が閾値以下に達した後、前記開閉扉から前記プレートを前記ケース内に搬入させる、請求項6記載の振とう装置。
  8.  前記制御部は、前記ケース内のパージを開始した後、所定時間経過した後、前記開閉扉から前記プレートを前記ケースに搬入させる、請求項6記載の振とう装置。
  9.  前記制御部は、前記プレートを前記ケースに搬入させた後、前記ケース内の湿度が閾値以下に達した後、前記振とう機構に振とうを開始させる、請求項7記載の振とう装置。
  10.  前記制御部は、前記プレートを前記ケースに搬入させた後、所定時間経過した後、前記振とう機構に振とうを開始させる、請求項8記載の振とう装置。
  11.  前記乾燥気体の供給源と前記吸入口との間に配置される電磁弁を備え、
     前記制御部は、前記振とう機構に振とうを開始させるとともに、前記電磁弁を閉じることによって、前記ケース内のパージを終了する、請求項9または10記載の振とう装置。
  12.  前記乾燥気体は、窒素である、請求項1記載の振とう装置。
  13.  乾燥気体によってパージ可能なケースと、前記ケース内に収容された振とう機構とを備えた振とう装置を用いた分析方法であって、
     遠心機によって、試料が注入された複数の窪みを有するプレートを遠心するステップと、
     前記遠心するステップと平行して、前記乾燥気体によって、前記ケースのパージを開始するステップと、
     前記遠心するステップの後、前記プレートの窪みに薬品を加えるステップと、
     前記遠心するステップの後、前記ケース内の湿度が閾値以下に達した後、前記プレートを前記ケース内に搬入させるステップと、
     前記プレートが前記ケースに搬入された後、前記ケース内の湿度が閾値以下に達した後に、前記振とう機構によって前記プレートを振とうするステップとを備える、分析方法。
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