WO2019164344A1 - 온도 안정성을 갖는 해충 방제용 조성물 및 이를 이용한 해충 방제 방법 - Google Patents

온도 안정성을 갖는 해충 방제용 조성물 및 이를 이용한 해충 방제 방법 Download PDF

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WO2019164344A1
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controlling pests
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김찬중
신택수
김태훈
이혜진
최재훈
김명호
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주식회사 엘지화학
주식회사 팜한농
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    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor

Definitions

  • Composition for controlling pests having temperature stability and pest control method using the same
  • the present invention relates to a pest control composition and a pest control method using the same that can be stably stored for a long time at high temperature as well as room temperature.
  • microbial crop protection agents that control the sea using pathogenic bearers have the advantage of minimizing insecticide tolerance and environmental pollution, because they use mold spores, but mass production and stable formulation, which are important for commercialization, There is still insufficient research on.
  • spores of pathogenic fungi should be prepared in the form of a liquid formulation for spray application, but when mixed with water, spores die within a week, and in powder state, all of them die within a week when exposed to high temperature. .
  • Exposure to abnormal temperatures during the distribution of crop protection agents is a common occurrence. "Because of these problems, conventional insect pathogenic fungi agents are difficult to keep stable for a long time, because there are a bunch of business hagieneun sales by exporting to another country, when storage stability is improved a great ripple effect is expected.
  • the present invention solves the problem of stabilization of pathogenic fungus spores by factors such as moisture or temperature, and provides a pest control composition and pest control method capable of long-term stable storage at room temperature as well as high temperature. .
  • porous inorganic materials having a pore size of 3 to 5 mm 3, an oily solvent, and a surfactant 2019/164344 1 »(: 1 ⁇ 1 ⁇ 2019/002234
  • it provides a method for controlling the sea, including applying the pest control composition to pests, habitat of the pest or crops vulnerable to the sea.
  • a method for stabilizing a pest control composition comprising storing and storing a pathogenic fungus or its spores, a porous material having a pore size of 3 to 5 A, an oily solvent, and a surfactant.
  • the present invention provides a composition for controlling pests and a use thereof for long-term stable storage at room temperature as well as at high temperature by combining a pathogenic bear or its spores with a porous inorganic material having a pore size of 3 to 5 A, an oily solvent and a surfactant. .
  • a pest control composition comprising a pathogenic fungus or spores thereof, a porous inorganic material having a pore size of 3 to 5 A, an oily solvent, and a surfactant.
  • a pest control method comprising the step of applying the pest control composition to pests, pest habitat or crops vulnerable to pests.
  • a method for stabilizing a pest control composition comprising the step of combining and storing a pathogenic fungus or its spores, porous inorganic materials having a pore size of 3 to 5A, an oily solvent, and a surfactant. .
  • pathogeni c fungi refers to a fungus that causes disease in an organism, and mainly proliferates through spores. “Insect pathogenic fungus, which is a preferred example of the pathogenic fungus to which the present invention is applicable.
  • (entomopathogeni c fungi) '' is a taxonomic group of fungi that belong to incomplete fungi and conjugated fungi and have pest control activity.
  • Insect pathogenic fungi are different from insect pathogenic bacteria or viruses that are infected through the feeding of a host.
  • fungal spores are attached to the host-insect shell and germinate, and then the germination tube is passed through the cuticle layer as an invasive tool or through germination This direct 2019/164344 1 »(: 1 ⁇ 1 ⁇ 2019/002234
  • Genus Isariah (/ sar / a)
  • Genus Lecanicilium Genus Nomuraae
  • Genus Phytophthora (/ 3 ⁇ 4KiopAiAora), genus Sclerotinia (/ / off / 3), genus Metatarium (Jietarhizhim), genus Paesilomyces 03 ⁇ 4 ( : / 70 /? Ces) genus, Verticillimi ) Genus, Trichoderma (7> / ⁇ : / 70/7? 73) genus, Hershtella 0% > // 3) genus, Aspergillus (3 ⁇ 49 / 3 ⁇ 477 5) genus, Ascisonia
  • These entomopathogenic fungal spores may have an insecticidal effect It may be appropriately included in an amount, preferably 0.1 to 90% by weight, 0.1 to 50% by weight, 0.1 to 30% by weight, 0.1 to 20% by weight, 0.5 to 20% by weight, or 1 based on the whole pest control composition To 15% by weight, but is not limited thereto. However, if less than the above range there may be a problem that the insecticidal effect is not sufficient due to the concentration of spores less than the effective concentration during use, there may be a problem in the stability when the storage exceeds the above range. 2019/164344 1 »(: 1 ⁇ 1 ⁇ 2019/002234
  • Spores are germ cells produced by a fungus for asexual reproduction, which can occur as adults without forming a zygote, and preferably contain conidia.
  • the pest control composition of the present disclosure includes an insect pathogenic fungus or spores thereof, which is understood to include spores, mycelium, mycelium, fruiting bodies, spore disease, or the like.
  • a germination tube is formed from the spores, until the depletion of nutrients in the spores grows, the germination tube grows and begins to penetrate the cuticle layer of the insect, while the germination tube penetrates the enzyme that dissolves the cuticle layer. Secrete.
  • the composition for controlling pests of the present invention is characterized in that the porous inorganic material having a pore size of 3 to 5A as an additive.
  • Such inorganic materials have a porous structure comprising arranged or disordered pores of pore size 3 to 5A.
  • the shape and shape of the pores may vary in spherical, channel, slit, hexagonal, etc., the inorganic material may have a variety of shapes and particle diameters, such as powder, rod, spherical, tubular or cylindrical.
  • inorganic materials include, but are not limited to, aluminosilicate, alumino phosphate, silica gel, alumina, airgel, zirconia, calcium oxide, zinc oxide, titanium oxide, and the like. More specifically, as an example of an inorganic material including 3 to 5 A of porosity, a zeolite corresponding to crystalline alumina silicate may be used, and zeolite 3A, zeolite 4A, or zeolite 5A may be exemplified.
  • Zeolite which is an example of the inorganic material, is crystalline aluminosilicate (crystal ine aluminosi 1 i cate) in which a plurality of pores are formed regularly.
  • Zeolite is an inorgani c polymer material formed by three-dimensionally connecting silicon (Si) and aluminum (A1) through an oxygen atom, and have various shapes and sizes of 3A to 100 A (0.3 nm to 10 nm) depending on the type. Structural features of having nanopore of about 35 species are currently known.
  • zeolite 3A having a pore size of about 3A zeolite 4A having a pore size of about 4A, or zeolite 5A having a pore size of about 5A are suitable for the present application.
  • the porous inorganic material of pore size 3 to 5 A herein lowers the moisture content in the composition, contributing to the long term stability of the pest control composition. Particularly, in the case of high temperature, it is confirmed that the effect of maintaining stability at high temperature is excellent because the porous inorganic material of the present invention effectively absorbs moisture and secures stability as compared to room temperature. If the pore size is less than 3 A, moisture may not be absorbed into the porous inorganic material. If the pore size is greater than 5 A, the ratio of not only moisture but also other materials to be absorbed may increase, so that water may not be effectively sawed.
  • the inorganic material is 0.1 to 1, based on 100% by weight of the pest control composition.
  • the pest control composition of the present invention may also contain a surfactant.
  • Surfactants are amphiphilic materials having both hydrophilic and lipophilic molecular groups in a molecule, and have a detergency, dispersing power, emulsifying power, solubilizing power, wetting power, bactericidal power, foaming power, and / or penetration power, and for controlling pests according to the present invention.
  • Pathogenic fungi or spores in the composition may act to hydrate, suspend or disperse to effectively express the pest control effect.
  • Surfactants include, by way of non-limiting example, hydrophilic surfactants, lipophilic surfactants or mixtures thereof.
  • the hydrophilic lipophilic balance (HLB) value of the surfactant may be about 1-20, or about 1-17.
  • the HLB of the surfactant may be 1 to 7, or 10 to 17, or 10 to 20.
  • the HLB of the surfactant may be at least 1 to less than 7, at least 10 to less than 17, or 10 to less than 20.
  • HLB is an indicator of the balance between the hydrophilicity and lipophilic (hydrophobic) of surfactants. 2019/164344 1 »(: 1 ⁇ 1 ⁇ 2019/002234
  • the surfactant may also be nonionic, anionic, cationic, or zwitterionic (or amphoteric).
  • cationic surfactants examples include dodecyl tr imethyl ammonium bromide (DTAB) or
  • CTAB Cetyl tr imethylammoni um bromide
  • anionic surfactant examples include DSS (dioctyl sul fosuccinate sodium), SDS (sodium dodecyl sul fate), LDS (li thium dodecyl sul fate), SDBS (sodium dodecyl) benzene sul fonate) or SDSA (sodium dodecyl sul fonate).
  • amphoteric surfactants include lecithin.
  • nonionic surfactants include lauryl PEG / PPG-18. 18 methicone (Lauryl
  • Cetyl Diglyceryl Tr is Tr imethyl si loxy Si lylethyl Dimethi cone, PEG-10 Dimethicone (PEG-10 dimethi cone), sorbitan monooleate, octyl phenol ethoxylate, polyethylene glycol, alkyl polyglucoside, silane polyalkylene oxide (copolymer), nonylphenol ethoxylate , Tristyrylphenol ethoxylate, polyoxyethylene alkyl ether, polyoxyethylene alkylphenyl ether, alkylallyl formaldehyde condensed polyoxyethylene ether, polyoxyethylene polyoxypropylene block polymer, polyoxyethylene polyoxypropylene alkyl Ethers, polyoxyethylene ethers of glycerin esters, polyoxyethylene ethers of sorbitan esters, sorbitol esters Reoxyethylene ether, polyethylene glycol fatty acid ester, glycer
  • Cocamide seedling cocamide ⁇ dodecyldimethylamine oxide, block copolymer of polyethylene glycol, polypropylene glycol, and silane polyalkylene oxide (copolymer), or polyoxyethylene alkyl amide
  • Triton® 114 (-102,) (-100,) (-45,) (-15, 80-10 or 00-119, or 81 ⁇ 1® Polyoxyethylene-4 -Lauryl ether (Kani 30), Polyoxyethylene- 23-Lauryl ether (Ni 35), Polyoxyethylene 2- cetyl ether (Ni 52), Polyoxyethylene-10-cetyl ether (This, polyoxy Ethylene-20 Cetyl ether (1) 58), Polyoxyethylene-2-stearyl ether (Ni72), Polyoxyethylene-10- stearyl ether ( ⁇ 76), Polyoxyethylene-2- oleyl ether 0 (1 ⁇ 93) or polyoxyethylene-10-oleyl ether ( ⁇ ⁇ 97),? Acid
  • the surfactant is 033 (( ⁇ 0 1
  • Surfactant is 0.1 to 90% by weight, 0.01 to 50% by weight, 0.01 to 30% by weight, 0.1 to 20% by weight, 0.5 to 20% by weight relative to 100% by weight of the composition for controlling pests Or, it may be 1 to 15% by weight, but is not limited thereto. However, if it is less than the above range there may be a problem that the surfactant effect does not appear sufficiently, if it exceeds the above range there may be a problem that the surfactant is not dissolved in the solvent and precipitation or precipitation occurs. 2019/164344 1 »(: 1 ⁇ 1 ⁇ 2019/002234
  • the pest control composition of the present invention may also contain an oily solvent.
  • Oily solvents refer to fatty solvents, including fatty substances that are liquid at ambient temperatures (about 20-25 ° 0), or mixtures of oils or sons of vegetable, mineral, animal or synthetic origin, which may be volatile or nonvolatile.
  • the present invention can improve the stability to moisture by using an oil-based solvent as a storage medium in order to determine the spores tend to be unstable in the water so that the spores are not exposed to moisture as much as possible.
  • the oily solvent preferably has a water content of less than 0.01 wt%, and non-limiting examples thereof include mineral oil, paraffin oil, silicone oil, vegetable oil (for example, sunflower, corn, soybean, pumpkin seed, Grape seed, olives, sesame, cotton thread (large)! 366 (1), hazelnuts, apricots, macadamia, coriander, castor or avocado oil, triglycerides of caprylic / capric acid, etc.), fish oil and animal fatty oils no.
  • the oily solvent may be used in an amount of 60 to 95 wt%, 60 to 90 wt%, 70 to 95 wt%, 70 to 90 wt%, 80 to 95 wt%, or 80 to 90 wt%, based on 100 wt% of the pest control composition. It may be, but is not limited to such.
  • the pest control composition according to the present invention can be prepared according to a known method for producing a pest control composition. For example, it may be prepared by combining a pathogenic fungus or its spores, a porous material having a pore size of 3 to 5 persons, an oily solvent, and a surfactant. Pathogenic fungi or spores thereof may be pulverized to have an appropriate particle size if necessary, and after preparing a liquid sample by adding a dispersant and a porous material to an oily solvent, and controlling the pest control according to the present invention by mixing the pulverized pathogenic spore source
  • the composition for preparation can be manufactured.
  • the pest control composition according to the present invention can be formulated in a variety of forms, it is preferable that the form of a liquid concentrate that can be sprayed.
  • the pest control composition according to the present invention shows excellent stability at high temperature as well as room temperature.
  • pests or more according to the invention for example To To 54 ° (, : from the insect pathogenic fungus 2019/164344 1 »(: 1 ⁇ 1 ⁇ 2019/002234
  • At least 1.0% of its spores can survive for at least one week.
  • composition of the present invention can be used in a method for controlling pest phase by applying the composition for controlling pests according to the present invention to pests, habitats of pests or crops vulnerable to pests.
  • pests that can be controlled by the compositions of the present embodiments include arthropods such as insects and ticks, particularly harmful arthropods such as harmful insects and harmful mites, and can illustrate:
  • Aphids shock roots
  • cotton aphids / k ⁇ /
  • fugu or aphids ⁇ ⁇ persicae cabbage powder aphids aphid ⁇ ⁇ , ⁇ /? 0, ⁇ / 3
  • Long-tailed aphids one case per case03 ⁇ padi
  • mandarin orange Stink bug ? 6 01 136
  • Bokseung Asun Terms moth [Grapholitmolesta), bean moth ⁇ Leguminivora glycinivorel la), bean moths Ltsimuraeses azukivorad, apple aemo pattern ipmalyi moth ⁇ Adoxophyesorana fasciata), car aemo pattern ipmalyi moth ⁇ Adoxophyes honmai), tea word moth (, Honona mgnanima) , Umbra pattern leaf horse moth
  • Pect inophora gossypiel la and Potato horn moth Such as Pect inophora gossypiel la and Potato horn moth (Phthorimea operculella), Fire moth (Arct i idae), such as the American White Moth (Hyphantria cunea); and Grain moth ( ⁇ Tineidae), such as moth ( ⁇ Tinea translucens) and the like;
  • Diptera Agromyzidae, for example, Hyperya (Hylemyaantiqua), Myrtleyaplatura (Agromyza oryzae) Oysterfly (Ufydre "ia griseola) Oysterfly (Chlorops oryzae) Oyster fly ( ⁇ iriomyza trifolii): melon fly ( ⁇ Dacus cucurbitae) and Mediterranean fruit flies ⁇ Ceratitis cap it at a);
  • -Grasshoppers Orthoptera: ground puppy ( ⁇ Gryl lotalpa africana), rice grasshopper (Oxya yezoensis) and rice grasshopper (Oxya japonica).
  • Leafless bee (Athalia rosae), shearing ant (worker), ⁇ Acromyrmex spp. ) And fire ants (Solenopsis spp.
  • Acar ina Tetranychidae, such as spotted mite
  • a pest control method using a composition of the present application is spraying the composition of the present application onto a pest or pest habitat of a treatment target.
  • 'Pest habitat' means not only the area where the pest actually lives, but also at least the area where the pest passes or moves. It also means the zone where the pest is preferably combated, as well as the zone where the habitat or passageway of the pest is assumed.
  • Crops corn, rice, wheat, barley, rye, oats, sorghum, cotton, soybeans, peanuts, buckwheat, sugar beet, rapeseed, sunflower, sugar cane and tobacco;
  • eggplant and vegetables eg eggplant, tomato, bell pepper, pepper, potato, etc.
  • gourd and vegetables cucumber, pumpkin, zucchini, watermelon, melon, etc.
  • cruciferous vegetables warm, turnip, horseradish, colavi, cabbage, Cabbage, black mustard, broccoli, cauliflower, rapeseed, etc.
  • asteraceae vegetables burdock, garland chrysanthemum, artichoke, lettuce, etc.
  • nari and vegetables green onions, onions, garlic, asparagus, etc.
  • Parsnips, etc. quince vegetables (spinach, chard etc.), lamiaceae vegetables (perilla, mint, basil, etc.), strawberries, sweet potatoes, yams, taro, etc .;
  • causal fruits (apples, pears, Japanese pears, Chinese quince, Chinese quince, etc.), nuclear fruits
  • -Trees other than fruit trees green tea, audi, tree flowers (azalea, camellia, hydrangea, camellia, Japanese camellia, cherry tree, lip tree, bark, cinnamon, etc.), tree lined (ash, birch) Trees, wood, eucalyptus, ginkgo, lilac, maple, oak, poplar, taegi, taiwan, sycamore, zelkova, japanese cypress, fir, pine, 2019/164344 1 »(: 1 ⁇ 1 ⁇ 2019/002234
  • grass zoysiagrass, gold grass (Zoys iania t re 11a), umbrella grass (Cynodondactylon, etc.), eargrass (ventgrass) (Agrostisalba), creeping bent grass, Hiland bent, etc.), bluegrass (meadow grass, bird grass, etc.), pescue (tall fescue, chewings fescue, creeping Creeping red fescue, etc., rygrass (darnel, lygras, etc.), ducks
  • the pest control composition of the present invention can be applied to plants or plant cultivation areas for pest control.
  • plants include stems or leaves of plants, flowers of plants, fruits of plants, seeds of plants, and the like.
  • methods of application include the application of plants to stems and leaves, such as foliage application; Application to seeds of plants; And application to areas where plants are cultivated, such as soil application and submerged application.
  • the pest control composition according to the present invention is very effective in reducing the decrease in titer due to temperature during storage of the pest control composition by excellently improving the stability problem in the moisture and temperature conditions that are a problem in the conventional pest control composition. to be.
  • 1 to 3 are graphs showing the number of activated spore colonies over time when stored at room temperature and high temperature (54 ° C.) of the control and sample for controlling pests according to an embodiment of the present invention, respectively.
  • Pathogenic spore strains include Boberia bassia bass i ana)
  • ERL836 (KCCM11506P) was used.
  • grains were cultured as a medium material.
  • the spores of Boberia bassiana ERL836 stored at ⁇ 70 ° C. were first plated in Pot ato Dextrose Agar, and then incubated at 25 ° C. for 7 days.
  • the spores were collected and inoculated in the millet and cultured for 1 week, followed by seed culture.
  • the millet was immersed in water to sufficiently contain water, and then put into a steamer and cooked for 10 minutes at a high temperature of 100 ° C. or more.
  • the cooked broth was cooled to room temperature and the seed cultures were mixed after inoculation.
  • the mixture was incubated at 25 ° C. for at least 5 days and the culture was dried at low temperature to recover spores. If the number of spores in the original agent is more than 1 X 10 9 CFU / g was used as a normal culture.
  • Silicone oils (KF96), mineral oils (8042-47-5, Sigma), paraffin oils (CAS # 64742-55-8) and sprays ( ⁇ EnSpray: paraffin oils) as oily solvents.
  • Dow5200 Liauryl PEG / PPG-18 / 18 Methicone, nonionic, HLB-6.8
  • Br ij 93 Polyoxyethylene (2) oleyl ether, noni
  • the porous material includes zeolite 4A microparticles (Zeolite 4A microparticle; pore size about 4A, diameter ⁇ 10 ,) (ZeoBuilder, South Korea), zeolite 4A rod type (Zeolite 4A rod; pore size about 4A, diameter about 1.6 ⁇ ) ( Large purified gold, Korea), molecular sieve X13 Ueolite 13X; pore size about 10A, diameter ⁇ 3 ⁇ 4im) (CAS # 63231-69-6), and S-gel (silica gel; pore size about 60 A, diameter 40-75 ,) (Sigma,
  • test sample was stored at room temperature (25 ° C.) and 54 ° C., respectively.
  • Each sample sample stored was diluted with saline (NaCl 0.85w ⁇ ) in saline solution (NaCl 0.85w ⁇ ), and then incubated in a 25 ° C incubator. activated spores via viable spore count 2019/164344 1 »(1 ⁇ 1 ⁇ 2019/002234
  • the number of colonies was counted (unit: in (011 ⁇ 111 ⁇ 1:) / 10.
  • Example 1-1 which further includes zeolite microparticles (pore size of about 4 mm, diameter of ⁇ 13 ⁇ 4 plaque) as a porous material, spore concentration is maintained throughout 6 weeks at room temperature storage. In storage, spores were observed throughout 6 weeks, and the drug efficacy level was maintained at 1.E + 05 11/1 ⁇ or higher (Fig. 1).
  • a porous material, zeolite bar in the case of Example 1-2 including (pore size of about 4 ⁇ , about 1.6ä diameter), normal temperature and Spore concentrations were maintained throughout 6 weeks in all (FIG. 1).
  • Example 2-1 including the zeolite microparticles (pore size about 4, diameter,) as a porous material, the concentration of spores is maintained until 6 weeks at room temperature storage, Even in storage, spores were observed to be at the level of drug efficacy of 1.05 + 05 ⁇ ⁇ / ⁇ until 6 weeks (Fig. 2).
  • Example 2-2 including the zeolite rod type (pore size about 4 particles, diameter about 1.6 ä) as the porous material, Spores remained above the efficacy levels for up to 6 weeks in both storage.
  • porous material having a pore size of about 3 to 5 microns among the porous materials improved the stability of the spores against moisture and high temperature. Therefore, experiments are carried out with different types of oily solvents and surfactants for porous materials having pore sizes outside of the above range, and whether the type of oily solvents or surfactants can affect the stability of spores against moisture and high temperature. I checked.
  • the pore size of the porous material is about 3 to 5 ⁇ , the stability of the spores against moisture and high temperature is improved regardless of the type of surfactant and the shape of the porous material. It can be seen that long term storage stability is maintained for more than a month.

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Abstract

본 발명은 상온 뿐 아니라 50°C 이상의 고온에서 장기간으로 안정적인 보관이 가능한 해충 방제용 조성물 및 이를 이용한 해충 방제 방법 (Temperature stable composition for controlling pests and method for controlling pests using the same)에 관한 것이다.

Description

2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
【발명의 명칭】
온도 안정성을 갖는 해충 방제용 조성물 및 이를 이용한 해충 방제 방법
【기술분야】
관련 출원（들）과의 상호 인용
본 출원은 2018년 2월 23일자 한국 특허 출원 제 10-2018- 0022158호에 기초한 우선권의 이익을 주장하며， 해당 한국 특허 출원의 문헌에 개시된 모든 내용은 본 명세서의 일부로서 포함된다.
본 발명은 상온 뿐 아니라 고온에서 장기간으로 안정적인 보관이 가능한 해충 방제용 조성물 및 이를 이용한 해충 방제 방법에 관한 것이다.
【발명의 배경이 되는 기술】
병원성 곰광이를 이용하여 해중을 방제하는 미생물 작물보호제는 화학농약과 달리 곰팡이 포자를 이용하므로 살충제 내성이나 환경오염을 최소화 할 수 있는 장점이 있으나， 상업화에 있이 중요한 사항인 대량생산 및 안정화된 제제화에 관한 연구가 아직 미흡하다. 특히, 병원성 곰팡이의 포자는 스프레이 도포를 위하여 액상 제형의 형태로 제조하여야 하나， 물과 혼합될 경우에 포자가 1주일 이내에 사멸하며, 분말 상태에서는 고온 노출 시 1주일 내 모두 사멸하게 되는 단점이 있다. 작물보호제의 유통과정 중 이상의 온도에 노출되는 경우는 흔히 발생하는 일이다. ' 이러한 문제로 인해 종래의 곤충병원성 곰팡이 제제는 장기간 안정적인 보관이 어려워, 타국으로 수출하여 판매하기에는 사업적인 무리가 있으므로， 저장 안정성이 향상되면 큰 파급효과가 기대된다.
【발명의 내용】
【해결하고자 하는 과제】
이러한 배경 하에서, 본 발명에서는 병원성 곰팡이 포자가 수분이나 온도 등의 요소에 의하여 안정성이 저해되는 문제를 해소하여， 상온 뿐 아니라 고온에서도 장기간으로 안정적인 보관이 가능한 해충 방제용 조성물 및 해충 방제 방법을 제공한다.
일 예로, 병원성 곰팡이 또는 이의 포자, 세공 크기 3 내지 5ᅀ의 다공성 무기 물질, 유상 용매, 및 계면 활성제를 포함하는, 해충 방제용 2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
조성물을 제공한다.
다른 예로， 상기 해충 방제용 조성물을 해충, 해충의 서식지 또는 해중에 취약한 작물에 적용하는 단계를 포함하는, 해중 방제 방법을 제공한다.
다른 예로, 병원성 곰팡이 또는 이의 포자， 세공 크기 3 내지 5 A의 다공성 물질， 유상 용매, 및 계면 활성제를 배합하여 보관하는 단계를 포함하는， 해충 방제용조성물의 안정화 방법을 제공한다.
【과제의 해결 수단】
본 발명에서는 병원성 곰광이 또는 이의 포자를 세공 크기 3 내지 5A의 다공성 무기 물질, 유상 용매 및 계면 활성제와 배합함으로써, 상온 뿐 아니라 고온에서도 장기간으로 안정적인 보관이 가능한 해충 방제용 조성물 및 이의 용도를 제공한다.
본 발명의 한 측면에 따라, 병원성 곰팡이 또는 이의 포자, 세공 크기 3 내지 5A의 다공성 무기 물질， 유상 용매, 및 계면 활성제를 포함하는， 해충 방제용 조성물이 제공된다.
본 발명의 다른 측면에 따라, 상기 해충 방제용 조성물을 해충, 해충의 서식지 또는 해충에 취약한 작물에 적용하는 단계를 포함하는, 해충 방제 방법이 제공된다.
본 발명의 다른 측면에 따라, 병원성 곰팡이 또는 이의 포자， 세공 크기 3 내지 5A의 다공성 무기 물질, 유상 용매, 및 계면 활성제를 배합하여 보관하는 단계를 포함하는， 해충 방제용 조성물의 안정화 방법이 제공된다.
본원에서 "병원성 곰팡이 (pathogeni c fungi )”란 유기체에 질병을 일으키는 곰팡이균을 말하며 주로 포자를 통해 증식한다. 본원 발명이 적용가능한 병원성 곰팡이의 바람직한 일예인 "곤충병원성 곰팡이
(entomopathogeni c fungi )’’는 분류학적으로 주로 불완전균류와 접합균류에 속하며, 해충 방제 활성을 가지는 곰팡이균을 의미한다. 곤충병원성 곰팡이는 숙주의 섭식을 통해 감염되는 곤충병원성 세균이나 바이러스와는 달리, 곰팡이 포자가 숙주 -곤충의 외피에 부착하여 발아한 후 침입도구인 부착기로 큐티클층을 통과하거나 포자에서 발아한 발아관이 직접 2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
큐티클층을 통과하여 곤충내부로 침입하게 되는데， 이때 물리적인 작용과 키티나제 (chitinase)， 프로테아제 (protease) , 리파제 (lipase), 에스테라제 (esterase) 등의 효소 작용이 함께 일어난다. 곤중 내부에 침입한 곰팡이는 곤충의 체내에서 증식하면서 독성 물질들을 분비하여 곤충의 면역작용을 차단하고 숙주 곤충을 사멸케 하므로， 곤충 방역 살충제로 사용가능하다.
곤충병원성 곰팡이로는 현재 700여종 이상이 보고되어 있고， 포자를 생성하여 곤충에 살충 효과를 가지는 것이라면 제한 없이 사용할 수 있다. 예를 들어，
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이사리아 (/sar/a)속, 레카니실리움、 Lecanici Ilium)속 , 노무라에아( ½?"/ 래)속，
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피토프토라 (/¾KiopAiAora)속， 스클레로티니아 ( / /끄/ 3) , 메타리지움 (Jietarhizhim)속 , 파에실로마이세스 0¾ (：/70/?少 ces)속， 버티실리움 ( Verticillimi)속， 트리코더마 (7＞/＜：/70 /7?73)속, 허슈텔라 0%＞ //3)속, 아스페르길루스 ( ¾9 /¾77 5)속, 아스키소니아
( ( 끄/크)속, 또는 메타르
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균류를 예시할 수 있다 . 구체적으로는 보베리아
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/ ) , 메타리지움 아니소플리아 (# 3/ /27· 7/크0公//， 3 , 버티실리움 레카니 ( / /(:/人// 16081111) , 아스키소니아
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6·少/· 0(九· ) 또는 노무라에 릴레이이 ( 래 1· 1에 를 예시할 수 있다. 본원의 일실시예에서 사용한 보베리아 바시아나는 톱다리개미허리노린재， 꽃노랑총채벌레 등에 대해 뛰어난 살충 효과를 가지는 균주이다.
이러한 곤충병원성 곰팡이 포자는 살충 효과를 나타낼 수
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양으로 적절히 포함될 수 있으나， 바람직하게는 해충 방제용 조성물 전체에 대하여, 0.1 내지 90 중량%, 0.1 내지 50 중량%， 0.1 내지 30 중량%, 0.1 내지 20 중량%, 0.5 내지 20 중량%, 또는 1 내지 15 중량%일 수 있지만， 이에 한정되는 것은 아니다. 다만 상기 범위에 미달하는 경우 사용시 유효 농도 미만의 포자 농도로 인하여 살충 효과가 충분하지 않은 문제가 있을 수 있고， 상기 범위를 초과하는 경우 보관 시 안정성에 문제가 있을 수 있다. 2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
포자는 곰팡이가 무성생식을 하기 위하여 생성하는 생식세포로서， 접합자를 형성하지 않고서도 성체로 발생하는 것이 가능하며 , 바람직하게는 분생포자 (conidi a)를 포함한다. 본원의 해충 방제용 조성물은 곤충병원성 곰팡이 또는 이의 포자를 포함하는데, 이는 포자， 균사， 균사체, 자실체, 포자병 또는 그 등가물을 포함하는 것으로 이해된다. 포자가 곤충의 외피에 닿으면 포자로부터 발아관이 생성되고， 포자 안의 영양분이 고갈될 때까지 발아관이 자라면서 곤충의 큐티클층을 침투하기 시작하고， 발아관이 침투하면서 큐티클층을녹이는 효소를 분비한다.
본 발명의 해충 방제용 조성물은， 특히 온도 안정성 문제를 해결하기 위하여, 첨가제로서 세공 크기 3 내지 5A의 다공성 무기 물질인 것을 특징으로 한다. 이러한 무기 물질은 세공 크기 3 내지 5A의 배열된 또는 무질서한 기공을 포함하는 다공성 구조를 가진다. 기공의 모양과 형상은 구형, 채널형, 슬릿형， 육각형 등으로 다양할 수 있고， 무기 물질은 분말 형태， 막대형, 구형, 튜브형 또는 실린더형 등 다양한 형상과 입경을 가질 수 있다. 이러한 무기 물질로는, 예를 들어 알루미노 실리케이트， 알루미노 포스페이트， 실리카겔， 알루미나， 에어로젤， 지르코니아， 칼슘옥사이드， 징크옥사이드， 타이타니움 옥사이드 등이 단독 또는 혼합으로 사용될 수 있으나 이에 한정되지는 않는다. 보다 구체적으로, 3 내지 5A의 다공성을 포함하는 무기 물질의 일예로 결정성 알루미나 실리케이트에 해당하는 제올라이트를 사용할 수 있고, 제올라이트 3A, 제올라이트 4A 또는 제올라이트 5A를 예시할수 있다.
상기 무기 물질의 일예인 제올라이트는, 복수의 기공이 규칙적으로 형성되어 있는 결정성 알루미노실리케이트 (crystal l ine aluminosi 1 i cate)이다. 제올라이트는 규소 (Si )와 알루미늄 (A1 )이 산소원자를 통해 삼차원적으로 연결되어 형성되는 무기 고분자 ( inorgani c polymer ) 물질로서， 종류에 따라 다양한 모양과 3A 내지 100 A (0.3nm 내지 10nm) 크기의 나노세공 (nanopore)을 가지는 것을 구조적 특징으로 하며 현재 약 35종이 알려져 있다. 그 중에서도， 예를 들어 세공크기가 약 3A인 제올라이트 3A, 세공크기가 약 4A인 제올라이트 4A, 또는 세공크기가 약 5 A인 제올라이트 5A가본원에 적합하다. 2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
본원에서 세공 크기 3 내지 5 A의 다공성 무기 물질은 조성물 내 수분 함량을 낮추어 해충 방제용 조성물이 장기간 안정성을 유지하는데 기여한다. 특히， 고온의 경우 상온에 비해 수분에 의한 영향이 큰 환경으로, 본원의 다공성 무기 물질이 효과적으로 수분을 흡수하여 안정성을 확보함으로써 고온에서도 안정성을 유지하는 효과가 탁월한 것으로 확인되었다. 세공 크기가 3 A 미만인 경우 다공성 무기 물질에 수분이 흡수되지 않으며， 5 A를 초과하는 경우 수분 뿐만 아니라 흡수되는 다른 물질들의 비율이 증가하여 수분을 효과적으로 톱수하지 못하는 문제가 있을 수 있다.
상기 무기 물질은 해충 방제용조성물 100 중량%에 대하여， 0. 1 내지
90 중량%, 0. 1 내지 50 중량%， 0. 1 내지 30 중량%， 0. 1 내지 20 중량%, 0.5 내지 20 중량%， 또는 1 내지 15 중량%일 수 있지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 다만 상기 범위에 미달하는 경우 중분한 수분을 돋착시키지 못하는 문제가 있을수 있다.
본 발명의 해충 방제용 조성물은 또한 계면활성제를 포함할수 있다. 계면활성제는 분자 중에 친수성 분자단과 친유성 분자단을 동시에 갖는 양친매성 물질로서, 세정력， 분산력, 유화력， 가용화력， 습윤력, 살균력, 기포력 및/또는 침투력을 가지며, 본 발명에 따른 해충 방제용 조성물 중의 병원성 곰팡이 또는 포자가 효과적으로 해충 방제 효과를 발현하도록 수화， 현탁또는 분산시키는 작용을 할수 있다.
계면활성제는, 비제한적인 예로서， 친수성 계면활성제, 친유성 계면활성제 또는 이의 혼합물을 포함한다. 예를 들어， 계면활성제의 친수성친유성 밸런스 (hydrophi 1 i c l ipophi l i c bal ance , HLB) 수치는 약 1 내지 20， 또는 약 1 내지 17일 수 있다. 일 구현예로 계면활성제의 HLB는 1 내지 7 , 또는 10 내지 17 , 또는 10 내지 20일 수 있다. 다른 구현예로 계면활성제의 HLB는 1 이상 내지 7 미만， 10 이상 내지 17 미만, 또는 10 내지 20 미만일 수 있다. 상기 HLB 범위는 계면 활성제가 효과적으로 유상 용매에 잘 녹으면서 계면 활성 효과를 나타낼 수 있는 적절한 범위를 예시한 것이나, 본 발명의 범위가 이에 제한되지 않는다. HLB는 계면활성제의 친수성과 친유성 (소수성)의 균형을 나타내는 지표로서, 바 가 2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
클수록 친수성의 비율이 크고, HLB 가 작을수록 친유성 (소수성) 비율이 큰 것으로 이해된다. 상기 계면활성제는 또한， 비이온성, 음이온성, 양이온성, 또는 쯔위터이온성 (또는 양쪽성 ) 일 수 있다.
본원에서 사용가능한 양이온성 계면활성제의 예로는 DTAB(Dodecyl tr imethyl ammonium bromide) 또는
CTAB(Cetyl tr imethylammoni um bromide) 등을 들 수 있고, 음이온성 계면활성제의 예로는 DSS(dioctyl sul fosuccinate sodium) , SDS(sodium dodecyl sul fate) , LDS( l i thium dodecyl sul fate) , SDBS( sodium dodecyl benzene sul fonate) 또는 SDSA( sodium dodecyl sul fonate) 등을 들 수 있으며， 양쪽성 계면활성제의 예로는 레시틴 ( leci thin) 등을 들 수 있고， 비이온성 계면활성제의 예로는 라우릴 PEG/PPG-18/18 메티콘 (Lauryl
PEG/PPG-18/18 Methi cone) , 세틸 디글리세릴 트리스 (트리메틸실록시)실릴에틸 디메티콘 (Cetyl Diglyceryl Tr i s Tr imethyl s i loxy)si lylethyl Dimethi cone)， PEG- 10 디메티콘 (PEG- 10 dimethi cone) , 소르비탄 모노올레에이트 (Sorb i tan monooleate) , 옥틸페놀 에톡실레이트 (Octylphe¥l Ethoxyl ate) , 폴리에틸렌글리콜, 알킬 폴리글루코사이드， 실란 폴리알킬렌옥사이드 (공중합체 ) , 노닐페놀 에톡실례이트 , 트라이스티릴페놀 에톡실레이트 , 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르， 폴리옥시에틸렌 알킬페닐 에테르， 알킬알릴 포름알데하이드 축합된 폴리옥시에틸렌 에테르， 폴리옥시에틸렌 폴리옥시프로필렌 블록 중합체, 폴리옥시에틸렌 폴리옥시프로필렌 알킬 에테르, 글리세린 에스테르의 폴리옥시에틸렌 에테르 , 소르비탄 에스테르의 폴리옥시에틸렌 에테르 , 소르비톨 에스테르의 폴리옥시에틸렌 에테르, 폴리에틸렌 글리콜 지방산 에스테르， 글리세린 에스테르， 폴리글리세린 에스테르， 소르비탄 에스테르， 프로필렌 글리콜 에스테르 , 수크로스 에스테르， 지방족 산 알칸올 아미드 , 폴리옥시에틸렌 지방산 아미드 , 알코올 에톡실레이트， 아민 에톡실레이트， 글루코사이드， 글루카미드, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리 (에틸렌 글리콜-코- 프로필렌 글리콜) , 세틸 알코올， 스테아릴 알코올, 세토스테아릴 알코올， 올레일 알코올, 옥타에틸렌 글리콜 모노도데실 에테르, 펜타에틸렌 글리콜 모노도데실 에테르, 폴리옥시프로필렌 글리콜 알킬 에테르， 데실 2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
글루코사이드， 라우릴 글루코사이드， 옥틸 글루코사이드 , 폴리옥시에틸렌 글리콜 옥틸페놀 에테르， 노녹시놀- 9 , 글리세롤 알킬 에스테르， 글리세릴 라우레이트， 폴리옥시에틸렌 글리콜 소르비탄 알킬 에스테르， 폴리소르베이트， 소르비탄 알킬 에스테르, 스판（3? ）， 코카미드 묘 코카미드 ^ ， 도데실다이메틸아민 옥사이드， 폴리에틸렌 글리콜의 블록 공중합체 , 폴리프로필렌 글리콜, 및 실란 폴리알킬렌옥사이드 （공중합체） , 또는 폴리옥시에틸렌 알킬 아미드를 포함하며, 예를 들어， 트리톤（등록상표） 114, ）（-102， ）（-100 , ）（-45， ）（-15 , 80-10 또는 00-119 , 또는 81^1（등록상표） 폴리옥시에틸렌- 4 -라우릴에테르（加니30）, 폴리옥시에틸렌- 23 -라우릴에테르（ 니35）， 폴리옥시에틸렌- 2- 세틸에테르（ 니52）, 폴리옥시에틸렌- 10 -세틸에테르（ 이, 폴리옥시에틸렌 -20 -세틸에테르（ 1 ] 58）, 폴리옥시에틸렌 -2- 스테아릴에테르（ 니72）, 폴리옥시에틸렌- 10 -스테아릴에테르（加 76）, 폴리옥시에틸렌- 2 -올레일에테르 0）1^93） 또는 폴리옥시에틸렌- 10- 올레일에테르（加니97）, ?표0400 다이올리에
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산比 등을 예시할수 있으나， 이에 제한되지 않는다.
본원의 일 구현예에서, 계면활성제는 033（（^0 1
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30（11^）, 라우릴
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메티콘, 세틸 디글리세릴 트리스（트리메틸실록시）실릴에틸 디메티콘， ?^-10 디메티콘， 소르비탄 모노올레에이트, 핵사데실 트리메틸 암모늄 브로마이드， 옥틸페놀 에톡실레이트, 폴리옥시에틸렌- 2 -올레일 에테르， 레시틴 및 ?^400 다이올리에이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있으나， 이에 제한되지 않는다.
계면활성제는 해충 방제용 조성물 100 중량%에 대하여， 0. 1 내지 90 중량%， 0. 1 내지 50 중량%， 0. 1 내지 30 중량%， 0. 1 내지 20 중량%， 0.5 내지 20 중량%， 또는 1 내지 15 중량%일 수 있지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 다만 상기 범위에 미달하는 경우 계면 활성 효과가 충분히 나타나지 않는 문제가 있을 수 있고， 상기 범위를 초과하는 경우 계면 활성제가 용매에 다 녹지 않고 침전이나 석출이 일어나는 문제가 있을 수 있다. 2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
또한 본 발명의 해충 방제용 조성물은 또한 유상 용매를 포함할 수 있다. 유상 용매는 주위 온도（약 20 내지 25°0에서 액체인 지방 물질， 또는 휘발성 또는 비휘발성일 수 있는, 식물성, 미네랄, 동물성 또는 합성 기원의 오일 또는 아들의 혼합물을 포함하는 지방상의 용매을 말한다. 본 발명은 포자가 수분에 불안정한 경향을 확인하여 포자가 최대한 수분에 노출되지 않도록 하기 위하여 유상 용매를 보존 매체로 사용하여 수분에 대한 안정성을 향상시킬 수 있다. 상기 유상 용매는 수분 함량이 0. 1중량% 미만인 것이 바람직하며， 이의 비제한적인 예로는, 구체적으로 미네랄유， 파라핀유, 실리콘유, 식물성유（예를 들어, 해바라기, 옥수수, 대두, 호박씨, 포도씨， 올리브, 참깨, 면실（대 ］! 366（1） , 헤이즐넛, 살구, 마캐다미아, 고수풀 , 피마자 또는 아보카도 오일， 카프릴/카프르산의 트리글리세리드 등）， 어유 및 동물성 지방유로 이루어진 군으로부터 포함되는 1종 이상일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
유상 용매는 해충 방제용 조성물 100 중량%에 대하여， 60 내지 95 중량%, 60 내지 90 중량%, 70 내지 95 중량%， 70 내지 90 중량%, 80 내지 95 중량%, 또는 80 내지 90 중량%， 일 수 있지만, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 해충 방제용 조성물은， 공지의 해충 방제용 조성물 제조방법에 따라 제조될 수 있다. 예를 들어, 병원성 곰팡이 또는 이의 포자， 세공 크기 3 내지 5人의 다공성 물질， 유상 용매, 및 계면 활성제를 배합하여 제조될 수 있다. 병원성 곰팡이 또는 이의 포자는 필요한 경우 적절한 입도를 가지도록 분쇄될 수 있고, 유상 용매에 분산제 및 다공성 물질을 투입하여 액상 시료를 제조한 후， 상기 분쇄된 병원성 포자 원제를 혼합하여 본 발명에 따른 해충 방제용 조성물을 제조할 수 있다. 이러한 본 발명에 따른 해충 방제용 조성물은 다양한 형태로 제제화 될 수 있으나， 스프레이가가능한 액상의 농축액 형태가바람직하다.
이러한 본 발명에 따른 해충 방제용 조성물은 상온뿐 아니라 고온에서 탁월한 안정성을 나타낸다. 구체적으로 본 발명에 따른 해충 또는 그 이상에서, 예를
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내지
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내지 54°（：에서， 상기 곤충병원성 곰팡이 2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
또는 이의 포자의 1.0% 이상이 1주일 이상 생존을 유지할 수 있다. 또한， 상온， 또는 50°（〕,
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또는 그 이상에서,
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내지 60 V, 50 V 내지 55 °0,
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내지 54°（：에서, 1주일 이상, 바람직하게는 5주 내지 6주 이상 병원성을유지하는 것을특징으로 한다.
본 발명의 조성물은 해충, 해충의 서식지 또는 해충에 취약한 작물에 본 발명에 따른 해충 방제용 조성물을 적용하여 해충상을 제어하기 위한 방법에 사용될 수 있다.
본 구현예의 조성물에 의해 방제 가능한 해충의 예는 곤충 및 진드기와 같은 절지동물， 특히 해로운 곤충 및 해로운 진드기와 같은 해로운 절지동물을포함하며, 다음을 예시할수 있다:
- 반시류
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예컨대 애멸구
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진딧물류 （쇼 크근）, 예컨대 목화진딧물 （ /크 크光 /）, 복승아혹진딧물 。他 persicae） , 양배추가루진딧물 딧물 {的크 위 · 夕 /？ 0,公/ 3 ,
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기장테두리진딧물 （1간1례03 · padi） 및 귤소리진딧물
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노린재류 （?6 01 （136） , 예컨대 풀색노린재 （ 3/ 7/7 <3） , 톱다리개미허리노린재 {1 야01寸1比
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은빛잎가루이 （公 0»/5/3 3/공£ //0///） ; 깍지벌레류 （ 어 、 , 예컨대 캘리포니아붉은깍지벌레 （ 메 ! 1크 아때 세， 샌호제깍지벌레
（（볘31：0산예）13 perniciosa） , 화살깍지벌레 （ \Jnaspiscitri） , 루비깍지벌레 （仁61）1）13 63 /77 요 , 및 이세리아깍지벌레 （ /<¾/少3 {■년 ） ; 방패벌레류 크근）; 나무이류 （/¾ //<3¾£） 등;
- 인시류 （丄6 （10야6대） : 명나방류
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예컨대 이화명나방 2019/164344 1»(：1^1{2019/002234
[ Chi lo suppressalis) , 옐로우 라이스 나무좀 (、Tryporyzaincertulas、)， 혹명나방 { Cnaphalocrocis medinal is) , 목화명나방 (Notarchaderogata) , 화랑곡나방 {Plodia interpunctel la) , 조명나방 (Ostrinia furnacal is) , 유럽조명나방 [Ostrinia nubi laris) , 배추순나방 {Hellula undalis) 및 잔디포충나방 (Pediasiateteirel lusY, 밤나방류 [Noctuidae)， 예컨대 담배거세미나방 {Spodoptera litura) , 파밤나방 {Spodoptera exigua) , 멸강나방 (Pseudalet ia separata) , 도둑나방 (Mainestra brassicae) , 검거세미나방 {Agrotis ipsilon) , . 가두배주금날개밤나비
(Plusianigrlsigna) , 토리코플루시아류 [ Thor i cop 1 us i a spp . ) , 담배밤나방류
Figure imgf000012_0001
spp . ) 및 담배나방류 (Heli cover pa . )’， 흰나비류 (Pieridae)， 예컨대 배추흰나비 U)ierisrapae、) ' 잎말이나방류 ( Tortricidae) , 예컨대 애모무늬잎말이나방류 {Adoxophyes spp . ) , 복승아순나방 [Grapholitmolesta)， 콩나방 {Leguminivora glycinivorel la) , 팥나방 Ltsimuraeses azukivorad， 사과애모무늬잎말이나방 {Adoxophyesorana fasciata) , 차애모무늬잎말이나방 {Adoxophyes honmai) , 차잎말이나방 (、Honona mgnanima) , 검모무늬잎말이나방
( Archipsfuscocupreanus ) 및 코드린나방 [ Cydia pomonel la、., 가는나방류 { Graci 1 lari idae) , 예컨대 동백가는나방 (Calopti 1 ia theivora) 및 사과굴나방 [Phyl lonorycter ringoniel la)； 심식나방류 ( Carposinidae)， 예컨대 복숭아심식나방 (Xarposina niponensis)； 굴나방류 [Lyonet i idae)， 예컨대 은무늬굴나방류
Figure imgf000012_0002
spp . ) ; 독나방류 (丄 ymantriidae、)， 예컨대 매미나방류 (Lymntna spp . )、 및 독나방류 (Euproctis s公公. ) ·， 집나방류 ( Yponomeut idae) 예컨대 배주좀나방 {Plutella xylostel la)； 뿔나방류 (Gelechi i dae) 예컨대 목화다래나방 (Pect inophora gossypiel la) 및 감자뿔나방 {Phthorimea operculella) ·， 불나방류 (Arct i idae) , 예컨대 미국흰불나방 [Hyphantria cunea)； 및 곡식좀나방류 (、Tineidae)， 예컨대 옷좀나방 (、Tinea translucens) 등;
- 총채벌레류 (Thysanoptera) : 꽃노랑총채벌레 [Frankl iniel la occidental is) , 오이총채벌레 ( Thrips pal mi) , 볼록총채벌레 {Scirtothrips dorsalis) , 파총채벌레 (Jhripstabaci) , 대만총채벌레 [Frankl inie"a 2019/164344 1»(：1^1{2019/002234
intonsa) 및 담배종채벌레 [Frankl inie"a fusca)등;
- 쌍시류 (Diptera) : 굴파리류 (Agromyzidae) , 예컨대 고자리파리 {Hylemyaantiqua) 씨고자리파리 (Hylemyaplatura) 벼잎굴파리 (Agromyza oryzae) 벼애잎굴파리 Ufydre" ia griseola) 벼노랑굴파리 [ Chlorops oryzae) , 아메리카잎굴파리 (丄 iriomyza trifolii) : 멜론파리 (、Dacus cucurbitae) 및 지중해과실파리 { Ceratitis cap it at a) 등;
- 초시류 (Coleoptera) : 28 점박이 무당벌레 (、Epi lachna vigint ioctopunctata) , 오이잎벌레 (AuJacophora femoral i s) , 벼룩잎벌레 {Phyl lotreta striolata) , 벼잎벌레 (、0ulema oryzae)， 벼뿌리바구미 [Echinocne_s squameus) , 벼물 구이 {Lissorhoptrus oryzophi lus) , 목화바구미 (Anthonomus grand is) , 팥바구미 [ Cal losobruchus chinensis) , 헌팅바구미 ( Sphenophorus vena t us) , 왜콩풍뎅이 {Popi 11 ia japonica) , 구리풍뎅이 (Anomla cuprea) , 옥수수잎벌레류 {Diabrotica spp . ) , 콜로라도감자잎벌레 (Lept inotarsa decern 1 i neat a) , 방아벌레류
{Agriotes spp . ) , and궐련벌레 {Lasioderma serricorne) 등;
- 메뚜기류 (Orthoptera) : 땅강아지 (、Gryl lotalpa africana) , 벼메뚜기 (Oxya yezoensis) 및 벼메뚜기 {Oxya japonica) 등·，
- 막시류 (Hymenoptera) : 무잎벌 {Athalia rosae) , 가위개미 (일개미 )류 {Acromyrmex spp . ) 및 불개미류 ( Solenopsis spp . )등 ;
- 진드기류 (Acar ina) : 응애류 (Tetranychidae) , 예컨대 점박이응애
( Tetranychus urticae) , 귤응애 {Panonychus citri) 및 나무응애류 ( 01 igonychus spp . )； 혹응애류 {Eriophyidae) , 예컨대 글녹응애 (Aculops pelekassi) ; 먼지응애류 ( Tarsonemidae) , 예컨대 차먼지응애
( Po lyphagotarsonemus latus)； 지응애류 [ TenuipalpidaeY， 치레응애류 Ui/d:ere///c¾e) ; 가루진드기류 (Acaridae) , 예컨대 긴털가루진드기 { Tyrophagus put rescent i ae)，’ 먼지진드기류
{Pyroglyphidae) , 예컨대 큰다리먼지진드기 {Dermtophagoides farinae) 및 세로무늬먼지진드기 [ Derma t ophago i des ptrenyssnus) \ 발톱진드기류 { Cheylet idae) , 예컨대 짧은빗살발톱진드기 { Cheyletus eruditus)， 발톱진드기 { Cheyletumalaccensis) 및 케일레투스 두레이 2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
{Cheyletus moorei）',
선충류 {Nematodes'），· 벼잎선충 iAphelenchoides besseyi） 및 딸기아선중 [Nothotylenchusacris） 등.
본원의 조성물을 사용하는 해충의 방제 방법의 일예는, 처리 표적의 해충 또는 해충 서식지에 본원의 조성물을 분무하는 것이다. ’’해충 서식지” 는 해충이 실제로 서식하는 구역뿐만 아니라, 적어도 해충이 지나가거나 이동하는 구역을 의미한다. 또한, 해충의 서식지 또는 통로가 가정되는 구역뿐만 아니라 해충이 바람직하게 퇴치되는 구역을 의미한다.
본원의 조성물 또는 방법이 적용될 수 있는 식물의 예는 다음과 같다:
- 작물류: 옥수수, 벼, 밀， 보리, 호밀, 귀리, 수수， 면화, 대두, 땅콩, 메밀, 사탕무， 평지씨， 해바라기, 사탕수수 및 담배 등;
- 채소류: 가지과 채소 （가지, 토마토， 피망， 고추， 감자 등）， 박과 채소 （오이 , 호박, 쥬키니 , 수박， 멜론 등）， 십자화과 채소 （왜무, 순무， 서양고추냉이， 콜라비， 배추， 양배추, 흑겨자， 브로콜리, 콜리플라워， 유채 등）， 국화과 채소 （우엉， 쑥갓, 아티초크, 상추 등）， 나릿과 채소 （파, 양파， 마늘, 아스파라거스 등）， 미나리과 채소 （당근， 파슬리， 셀러리， 파스닙 등）, 명아주과 채소 （시금치, 근대 등）, 꿀풀과 채소 （차조기, 민트, 바질 등）， 딸기 , 고구마， 참마, 토란등;
- 과수류: 인과류 （사과， 배, 일본배, 중국모과, 모과 등）， 핵과류
（복숭아， 자두， 승도복숭아， 비파, 체리， 살구， 프룬 등）, 감귤류 （온주 밀감, 오렌지， 레몬, 라임， 자몽 등）, 견과류 （밤， 호두, 헤이즐넛, 아몬드, 피스타치오, 캐슈넛， 마카다미아넛 등）, 베리류 （블루베리， 크랜베리， 블랙베리, 라즈베리 등）， 포도, 감, 올리브， 비파, 바나나, 커피， 대추, 코코넛, 기름 야자등;
- 과수 이외의 나무: 녹차， 오디, 화목 （진달래， 동백나무, 수국, 애기동백나무, 붓순나무 （Japanese star anise）, 벚나무, 틀립나무, 배통나무, 계화나무 등）， 가로수 （물푸레나무, 자작나무, 증증나무， 유칼립투스， 은행나무， 라일락， 단풍나무， 참나무， 포플러, 박태기나무, 대만풍나무， 플라타너스， 느티나무, 일본측백나무, 전나무, 솔송나무, 2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
노간주나무, 소나무， 가문비나무, 주목나무， 가문비나무, 느릅나무， 칠엽수 등), 산호수 (coral tree) , 나한송 (podocarpus) , 삼나무, 편백나무, 크로톤 (croton), 사철나무 iMuonymisjaponicush 홍가시나무
( Photiniaglabra) 등;
- 잔디밭 : 잔디 (한국잔디 (zoysiagrass) , 금잔디 ( Zoys iania t re 11a) 등), 우산잔디 {Cynodondactylon등)， 겨이삭 (벤트그래스) (흰겨이삭 (Agrostisalba) , 크리핑 벤트그래스 (creeping bent grass) , 하이랜드 벤트 (hi land bent) 등) , 블루그래스 (왕포아풀 (meadow grass) , 큰새포아풀 (bird grass) 등), 페스큐 (fescue) (톨페스큐 (tall fescue) , 츄잉페스큐 (chewings fescue) , 크리핑 레드 페스큐 (creeping red fescue) 등) , 라이그래스 (ryegrass) (독보리 (darnel), 라이그래스 등)， 오리새
(orchard grass), 큰조아재비 (timothy grass) 등;
- 기타: 화훼류 (장미， 카네이션, 국화, 리시언더스 (prairie gentian)) , 안개꽃, 거베라 (gerbera) , 매리골드 (marigold) , 샐비어 (salvia) , 페투니아 (petunia) , 버베나 (verbena) , 틀립 , 과꽃 (aster) , 용담 (gentian) , 백합， 팬지, 시클라멘 (cyclamen), 난초， 은방울꽃 (conval laria)， 라벤더, 스톡 (stock) , 관상용 양배추, 앵초 (primula), 포인세티아 (poinsett ia) , 글라디올러스 (gladiolus) , 카틀레야 (cattleya), 데이지 , 심비듐 (cymbidium) , 베고니아 (begonia) 등) , 바이오연료 식물 (자트로파 (Jatropha), 홍화 (safflower) , 카멜리나 (camel ina) ,스위치그래스 (switchgrass) , 억새 (Miscanthus) , 리이드 카나리 그래스 (reed canary grass) , 물대 (giant reed) , 양마 (kenaf) , 카사바 (cassava), 버드나무 (willow) 등), 관상용 식물 등.
본 발명의 해충 방제 조성물은 해충 방제를 위하여 식물 또는 식물 경작 영역에 적용될 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같은 식물에는 식물의 줄기 또는 잎， 식물의 꽃, 식물의 열매, 식물의 종자 등이 포함된다. 적용 방법의 예로는 식물의 줄기 및 잎에의 적용， 예컨대 경엽 적용; 식물의 종자에의 적용; 및 식물이 경작되는 영역에의 적용， 예컨대 토양 적용 및 침수 적용이 포함된다.
【발명의 효과】 2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
본 발명에 따른 해충 방제용 조성물은 종래 해충 방제용 조성물에서 문제가 되는 수분과 온도 조건에서의 안정성 문제를 탁월하게 개선함으로써， 해충 방제용 조성물의 보관시 온도에 의한 역가의 감소를 저감시켜 매우 효과적이다.
【도면의 간단한설명】
도 1 내지 도 3 각각 대조군 및 본 발명의 일실시예에 따른 해충 방제용 조성물 시료들의 상온 및 고온 (54°C )에서 보관시 시간에 따른 활성포자콜로니수를 즉정한그래프이다.
【발명을실시하기 위한구체적인 내용】
이하, 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 구체적으로 설명하겠으나, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐， 본 발명의 범위가 하기 실시예 및 실험예에 제한되는 것으로 해석되지 아니한다. 재료의 준비
병원성 포자 균주로는 보베리아 바시아
Figure imgf000016_0001
bass i ana)
ERL836 (KCCM11506P)를 사용하였다. 상기 곰팡이의 배양을 위해서 곡물을 배지 원료로 고체 배양을 수행하였다. 이를 위해， 우선 -70°C에서 보관하고 있는 보베리아 바시아나 ERL836의 포자를 감자한천배지 (Pot ato Dextrose Agar )에 도말한 후， 25°C에서 7 일간 배양하였다. 포자를 회수하여 기장에 접종하고 이를 1주간 배양하여 종균배양 수행하였다. 본 배양을 위해 기장을 물에 침지하여 충분히 수분을 함유하도록 한 후， 증자기에 넣어 100 °C 이상의 고온에서 10분 이상 증자하였다. 증자된 기장을 상온에서 식히고, 종균배양물을 접종 후 혼합하였다. 혼합물을 25°C에서 5 일 이상 배양하고 배양물을 저온에서 건조하여 포자를 회수하였다. 원제 내 포자수가 1 X 109 CFU/g 이상인 경우 정상배양으로 하였다.
유상 용매로서 실리콘유 (KF96)， 미네랄유 (8042-47-5， Sigma) , 파라핀유 (CAS# 64742-55-8) 및 엔스프레이 (況 EnSpray： 파라핀유
98.0-99.0% 및 보조제 (폴리옥시에틸렌라우릴 에테르， 글리세롤 모노올리에이트 및 올레산등) 1.0 2.0%함유)를사용하였다. 2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
계면활성제로서 DSS(dioctyl sulfosuccinate sodium, 음이온성, HLB=11), Dow5200 (Lauryl PEG/PPG- 18/ 18 Methicone, 비이온성, HLB-6.8), Dow5600 (Cetyl Diglyceryl Tris(Trimethylsi loxy)si lylethyl Dimethicone, 비이온성, HLB=2), KF-6017 (PEG- 10 dimethicone, HLB=4.5), SPAN80 (Sorbitan monooleate, 비이온성， HLB=4.3) , SPAN85 (Sorbitan monooleate, 비이온성, HLB=1.8), CTAB (Hexadecyl trimethyl ammonium bromide, 양이온성, HLB=9.8) , Triton X45 (Octylphenol Ethoxylate, 비이온성, HLB=9.8) , Br i j 93 (Polyoxyethylene (2) oleyl ether , 비이온성, HLB=4) , Lecithin (CAS# 8002-43-5, 쯔위터이온성， HLB=4), 및 PEG400 다이올리에이트 (PEG-8 dioleate, 비이온성, HLB=8.3)을사용하였다.
다공성 물질로는 제올라이트 4A 미세입자 (Zeolite 4A microparticle； 세공크기 약 4A, 직경 ~10，) (제오빌더, 대한민국)， 제올라이트 4A 막대형 (Zeolite 4A rod； 세공크기 약 4A , 직경 약 1.6·) (대정화금, 대한민국)， 분자체 X13 Ueolite 13X； 세공크기 약 10A, 직경 ~¾im)(CAS# 63231-69-6), 및 S-gel (silica gel; 세공크기 약 60 A , 직경 40-75 ，)(Sigma,
Supelco)를사용하였다. 실험예 1： 다공성 물질에 따른저장안정성 분석
병원성 포자 원제인 보베리아 바시아나 ERL836 배양건조물을 막자 사발로 균일하게 분쇄하였다. 각 표에 기재된 조성에 따른 유상용매， 계면활성제 및 다공성 물질의 액상 시료를 준비하였다. 구체적으로 유상용매와 다공성 물질을 혼합하고 1시간뒤 계면 활성제를 첨가한 후 볼텍싱하였고, 이후 80°C에서 30분간 멸균처리를 하고 포자 배양건조물을 첨가한 후 볼텍싱 1분을 가하여 액상 시료를 준비하였다. 상기 분쇄한 포자 배양건조물 10 중량%와 상기 액상 시료 각 100 중량%를 혼합하여 시료 샘플을 준비하였고， 대조군은 포자 배양건조물만을 사용하여 준비하였다. 각 시험 샘플을 상온 (25°C) 및 54°C에 각각 보관하였다. 보관한 각각의 시료 샘플을 1주 간격으로 총 6주까지 시료샘플 1ml을 식염수 (NaCl 0.85w八 )로 희석한 후 PDA Tartaric acid) 배지에 도말하여 25 °C 인큐베이터에서 배양하였다. viable spore count를 통해 활성포자 2019/164344 1»（그1^1{2019/002234
콜로니수를 계수（단위 : 에 （에011 이 ^ 111^ 1:）/10하였다.
[표 1]
Figure imgf000018_0004
대조군（포자 배양건조물 100%）의 경우 상온 보관 시 6주차까지 포자가 유지되었으나, 54 °0 보관 시 1주차부터 포자 관찰되지 않았는데（도 1）, 이는 포자가 고온에 불안정함을 나타낸다. 용매를 증류수에 배합한 비교예 1-1의 경우 상온과
Figure imgf000018_0001
모두에서 포자가 1주일 내에 모두 사멸하여 1 주차부터 포자가 관찰되지 않았는데, 이는 포자가 고온 뿐 아니라 수분 조건에도 매우 불안정함을 나타낸다. 유상 용매 및 계면활성제를 포함하나 다공성 물질을 전혀 포함하지 않은 비교예 1-2의 경우, 대조군과 유사하게， 상온 보관 시 6 주차까지 포자가 유지되나, 54 °0 보관에서는 1 주차부터 포자가 관찰되지 않았는데（도 1）, 이는 포자가 고온에 불안정함을 나타낸다. 그러나, 다공성 물질로서 제올라이트 미세입자（세공크기 약 4ᅀ， 직경 ~1¾패）를 추가로 포함한 실시예 1-1의 경우 상온 보관 시 6주 내내 포자 농도가 유지되고,
Figure imgf000018_0002
보관에서는 6주 내내 포자가 관찰되었고 약효 유효 수준인 1.애 + 05 11/1此 이상으로 유지되었다（도 1） . 유사하게， 다공성 물질로서 '제올라이트 막대형（세공크기 약 4人， 직경 약 1.6ä）을 포함한 실시예 1-2의 경우에도， 상온과
Figure imgf000018_0003
모두에서 6주 내내 포자 농도가 유지되었다 （도 1）. 이러한 결과를 통해, 다공성 물질의 존재가 포자의 수분 및 고온에 대한 안정성을 향상시켰음을 확인할 수 있다. 이에, 다공성 물질의 어떠한 요소가 포자의 안정성 향상에 영향을 기여했는지를 확인하기 위하여 다양한다공성 물질들을사용하여 실험을 진행하였다. 2019/164344 1»(：1^1{2019/002234
[표 2]
Figure imgf000019_0004
표 2에 나타난 것처럼, 동일한 용매 및 계면활성제를 사용한 조건에서， 다공성 물질의 종류를 달리하여 실험하였다. 다공성 물질로서 분자체 ）（13 （제올라이트 13）（; 세공크기 약 10入， 직경 ）를 포함한 비교예
Figure imgf000019_0001
보관시 3주차부터 약효 수준인 1.（犯 + 05 0比/ 이하로 안정성이 크게 떨어졌다. 반면, 다공성 물질로서 제올라이트 미세입자（세공크기 약 4 , 직경 ， ）룰 포함한 실시예 2-1의 경우 상온 보관 시 6주차까지 포자농도가 유지되고,
Figure imgf000019_0002
보관에서도 6주차까지 포자가 약효 유효 수준인 1 .애 + 05 。^/此 이상으로 관찰되었다 （도 2）. 유사하게， 다공성 물질로서 제올라이트 막대형（세공크기 약 4入, 직경 약 1.6ä）을 포함한 실시예 2-2 의 경우, 상온과
Figure imgf000019_0003
보관 모두에서 6주까지 포자가 약효 유효 수준 이상으로 유지되었다.
이러한 결과를 통해, 다공성 물질 중에서도 세공 크기가 약 3 내지 5ᅀ인 다공성 물질이 포자의 수분 및 고온에 대한 안정성을 향상시킨 것으로 추정되었다. 이에, 세공 크기가 상기 범위를 벗어나는 다공성 물질에 대하여 유상 용매 및 계면 활성제의 종류를 달리하여 실험을 진행하여, 유상 용매나 계면활성제의 종류가 포자의 수분 및 고온에 대한 안정성에 영향을 미칠 수 있는지를 확인해 보았다.
[표 3]
Figure imgf000019_0005
2019/164344 1»(：1^1{2019/002234
Figure imgf000020_0001
표 3에 나타난 것처럼, 다공성 물질로서 분자체 X13 （제올라이트 13X； 세공크기 약 10A , 직경 ~2m） 또는 S-gel （silica gel； 세공크기 약 60A， 직경 40-75 pm）을 포함하는 제형에서 , 계면활성제의 종류를 달리하여 실험하였다. 그 결과， 비교예 3-1 내지 3-8 모두 54 °C 보관시 2주차부터 포자농도가 1.0E + 05 cfu/mL미만으로 안정성이 크게 떨어졌다.
이러한 결과는, 다공성 무기 물질의 세공 크기가 10A 이상인 경우에는 계면활성제의 종류를 달리하더라도 포자의 수분 및 고온에 대한 안정성을 향상시키지 못한다는 것을 나타내는 것을 나타낸다.
따라서， 이상의 결과를 종합하여， 특정 범위의 세공 크기， 구체적으로는 10A 미만， 바람직하게는 약 3 내지 5A의 세공 크기를 가진 다공성 물질이 포자의 수분 및 고온에 대한 안정성을 향상시킨 결정적 요인임을 알수 있다. 실험예 2： 계면활성제에 따른저장안정성 분석
세공 크기가 약 3 내지 5A인 다공성 물질에 대하여, 계면 활성제의 종류를 달리하여 실험을 진행하였다. 구체적으로， 실시예 1과 동일한 방법으로 시료를 준비하고 활성포자 콜로니수를 계수（단위: CFU （Colony forming unit）/mL）하였다.
[표 4]
Figure imgf000020_0002
2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
Figure imgf000021_0001
그 결과， 실시예 4-1 내지 4-11에 나타난 바와 같이， 세공 크기가 약 3 내지 5入인 다공성 물질을 포함하는 한， 계면활성제의 종류에 상관없이 상온 및 54 모두에서 6주 내내 포자농도가유지되었다 （도 3）.
상술한 모든 결과를 종합해보면， 다공성 물질의 세공 크기가 약 3 내지 5ᅀ인 경우에는， 실험된 계면활성제의 종류 및 다공성 물질의 형상 등에 관계없이 포자의 수분 및 고온에 대한 안정성이 향상되어， 최소 한 달 이상장기간의 보관 안정성이 유지되는 것을 알수 있다.

Claims

2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
【청구범위】
【청구항 11
병원성 곰팡이 또는 이의 포자,
세공 크기 3 내지 5入의 다공성 무기 물질，
유상 용매 , 및
계면 활성제를 포함하는, 해충 방제용 조성물.
【청구항 2]
저 항에 있어서
Figure imgf000022_0001
이상에서 보관 안정성이 증진된, 해충 방제용 조성물.
【청구항 3]
제 1항에 있어서，
Figure imgf000022_0002
이상에서 상기 병원성 곰팡이 또는 이의 포자의 1 .0% 이상이 1주일 이상 생존을 유지하는 것인, 해충 방제용 조성물.
【청구항 4]
제 1항에 있어서 상기 병원성 곰팡이 또는 이의 포자가,
Figure imgf000022_0004
버티실리움（ ]베（ 11 ·）속， 트리코더마（ 7>/ ¾00 /» 3）속， 허슈텔라
（分/， //3）속， 아스페르길루스（ /공/// /속, 아스키소니아
Figure imgf000022_0003
）속의 곰광이 또는 이의 포자인 , 해충 방제용 조성물 .
【청구항 5】
제 1항에 있어서， 상기 병원성 곰팡이 또는 이의 포자가, 보베리아 바시아나 0¾<3 7£/ /13 스 355/3/73） 또는 이의 포자인 , 해충 방제용 조성물 .
【청구항 6]
제 1항에 있어서， 상기 병원성 곰팡이 또는 이의 포자가 해충 방제용 조성물 100 중량%에 대해, 0 . 1 내지 90 중량%로 포함되는 것인, 해중 방제용 조성물. 2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
【청구항 7】
제 1항에 있어서, 상기 다공성 무기 물질이 제올라이트인， 해충 방제용조성물 .
【청구항 8】
제 1항에 있어서， 상기 다공성 무기 물질이 해충 방제용 조성물 100 중량%에 대해 0. 1 내지 90 중량%포함되는 것인， 해충 방제용조성물.
【청구항 9]
제 1항에 있어서， 상기 계면활성제가 비이온성, 양이온성, 음이온성 또는 양쪽성 계면활성제인, 해충 방제용조성물.
【청구항 10】
제 1항에 있어서， 상기 계면활성제가 1 수치가 1 내지 17인 비이온성， 양이온성, 음이온성 또는 양쪽성 계면활성제인， 해충 방제용 조성물.
【청구항 11】
제 1항에 있어서, 상기 계면활성제가 此묘 수치가 1 내지 7 , 또는 10 내지 17인， 비이온성， 양이온성, 음이온성 또는 양쪽성 계면활성제인， 해충 방제용조성물.
【청구항 12】
제 1항에 있어서, 상기 계면활성제가 033（（ 0 1 3111 0311（：（ 11 6 30（11ä）, 라우릴 ?묘 ?? -18/18 메티콘, 세틸 디글리세릴 트리스（트리메틸실록시）실릴에틸 디메티콘，
Figure imgf000023_0001
디메티콘， 소르비탄 모노올레에이트， 핵사데실 트리메틸 암모늄 브로마이드, 옥틸페놀 에톡실레이트， 폴리옥시에틸렌- 2 -올레일 에테르， 레시틴 및 ?£0400 다이올리에이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인, 해충 방제용 조성물.
【청구항 13】
제 1항에 있어서， 상기 계면활성제가 해충 방제용조성물 100중량%에 대해 0. 1 내지 90 중량%로포함되는 것인, 해충 방제용조성물.
【청구항 14】
제 1항에 있어서, 상기 유상 용매가 미네랄유, 파라핀유， 실리콘유, 2019/164344 1»（：1^1{2019/002234
식물성유， 어유 및 동물성 지방유로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인， 해충 방제용조성물.
【청구항 15】
제 1항에 있어서, 스프레이용농축액 형태인, 해충 방제용조성물.
【청구항 16】
제 1항 내지 제 15항 중 어느 한 항의 해충 방제용 조성물을 해충, 해충의 서식지 또는 해충에 취약한 작물에 적용하는 단계를 포함하는， 해충 방제 방법.
【청구항 17】
병원성 곰팡이 또는 이의 포자,
세공크기 3내지 5ᅀ의 다공성 무기 물질，
유상용매， 및
계면 활성제를 배합하여 보관하는 단계를 포함하는, 제 1항 내지 제 15항중 어느 한항의 해충 방제용조성물의 안정화 방법 .
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