WO2019069735A1 - 体力向上作用及び抗疲労作用のうちの一以上の作用を有する組成物 - Google Patents

体力向上作用及び抗疲労作用のうちの一以上の作用を有する組成物 Download PDF

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真嗣 福田
智恵 狩野
寛人 森田
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    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor

Definitions

  • the present invention relates to the use of Bacteroides uniformus to improve one or more of physical strength and fatigue resistance.
  • Physical strengths for performing activities such as labor and exercise include physical abilities that are the basis of actions such as muscle strength, endurance, and flexibility.
  • Patent Document 1 amino acid compositions that have been shown to improve endurance and have an effect on prevention, alleviation, and recovery of fatigue have been developed and reported.
  • Patent Document 2 by ingesting a fermented composition (fermented liquid) obtained by inoculating a culture medium containing rice bran and soybeans with natto bacteria, the effect of suppressing lactic acid production, the effect of suppressing blood lactate accumulation, endurance It has been shown that an improvement in strength and an anti-fatigue effect can be obtained.
  • Patent Document 3 discloses that intake of soymilk fermented product by lactic acid bacteria (Leuconostoc pseudomesenteroides ATCC 12291 strain) has an effect of increasing the amount of spontaneous exercise through the activity of preventing fatigue accumulation. It is shown. These all show the effect derived from the whole fermentation composition, and the said cell itself does not show that the said effect is exhibited.
  • Patent Document 4 shows that the endurance improvement and the anti-fatigue effect can be obtained by ingesting a bacterial powder of a red non-sulfur bacterium (Rhodobacter azotoformans BP0899 strain). .
  • Non-Patent Document 1 describes that in Bacteroides fragilis single-fixed mice, improvement in endurance was observed as compared to sterile mice.
  • Bacteroides uniformis is an anaerobic gram-negative bacillus having a size of about 0.8 ⁇ 1.5 ⁇ m, no spores, and no motility. Bacteroides uniformis is a eubacteria normally present in the intestine of many mammals including humans.
  • An object of the present invention is to provide a means which can be taken at any timing and can continuously exert one or more actions of a physical strength improvement action and an anti-fatigue action.
  • the present invention includes the following inventions.
  • a composition used to improve one or more of physical strength and fatigue resistance which comprises Bacteroides uniformus or a treated product thereof.
  • the composition of [1] which is used to improve one or more of whole body endurance and endurance at aerobic exercise.
  • the composition of [1] or [2], wherein Bacteroides uniformus is JCM5828 strain, CP3585 strain or CP3586 strain.
  • a method for improving one or more of strength and fatigue resistance in non-human animals comprising administering or ingesting Bacteroides uniformus or a treated product thereof to non-human animals.
  • ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, it can be ingested at arbitrary timing and can provide a means which can exhibit one or more effect
  • FIG. 1 is a graph showing the results of a limit swimming test before (A) administration of Bacteroides uniformus and (B) three weeks after administration initiation.
  • the present invention relates to a composition having one or more of a strength-improving action and an anti-fatigue action, which comprises Bacteroides uniformus or a treated product thereof.
  • “physical strength” relates to the physical ability that forms the basis of action that enables working such as labor and exercise, and in particular, it is possible to withstand working such as labor and exercise, and continuously It means the power of the body that makes it possible to do them. More preferably, “physical strength” means one or more of whole-body endurance and endurance during aerobic exercise that enables aerobic exercise to be continued. “Overall endurance” refers to the ability to move the body for an extended period of time, also commonly referred to as stamina.
  • improved of physical strength means one or more of promoting improvement and recovery of physical strength, and in particular, it is possible to endure and carry out activities such as labor and exercise. It means one or more of improving the strength of the body and promoting the recovery of the strength of the body, and more preferably one or more of the endurance during whole body endurance and aerobic exercise And one or more selected from the group consisting of promoting recovery of one or more of whole body endurance and endurance during aerobic exercise.
  • fatigue means that the function of the body is reduced as a result of continuous activities such as labor and exercise.
  • anti-fatigue and “improve fatigue resistance” mean one or more of alleviating fatigue, promoting recovery from fatigue, and preventing fatigue, preferably To reduce the decrease in physical function resulting from continuous activities such as labor or exercise, to promote the recovery of the decrease in the physical function, or to prevent the decrease in the physical function to prevent the physical function It means that the decrease in
  • “Bacteroides uniformus” is isolated from a mammal (eg, human, monkey, chimpanzee, cow, horse, pig, sheep, dog, cat, mouse, rat, etc.), preferably human intestine. Can be used.
  • a mammal eg, human, monkey, chimpanzee, cow, horse, pig, sheep, dog, cat, mouse, rat, etc.
  • human intestine preferably human intestine.
  • Bacteroides uniformis can be isolated according to known methods (Paola Gauffin Cano et al, PLoS One. July 2012, Volume 7, Issue 7, e 41079). That is, mammalian feces, feces and feces are diluted in an appropriate solvent, seeded on a plate medium, cultured under anaerobic conditions, and picked up from colonies appearing in the medium. As the culture medium, those described in detail below can be used, but it is preferable to use a selective separation medium that can distinguish and select Bacteroides from the efficiency of isolation (Jap. J. vet. Sci., 36, 93-98 (1974)).
  • the selected bacteria are analyzed based on the nucleotide sequence of the 16S rRNA gene to identify and clone Bacteroides uniformiformis can do.
  • the nucleotide sequence of the Bacteroides uniformis 16S rRNA gene is known and disclosed, for example, in a known database such as GenBank, and registered as NR_040866, AB050110, AB510711, L16486. Such sequence information can be used in the analysis of the 16S rRNA gene.
  • 16S rRNA gene Analysis and identification of 16S rRNA gene are based on known methods such as quantitative PCR, DGGE / TGGE, FISH, 16S rDNA cloning library method, T-RFLP, FISH-FCM, and sequencing. 80. No. 5. 421-425. 2008; J Nutr. 2004 Feb; 134 (2): 465-72; Appl. Environ. Microbiol. 64.3336-. Appl. Environ. Microbiol., 65, 4799-4807, 1999; Appl. Environ. Microbiol., 62, 2273-2278, 1996; Appl. Environ. Microbiol., 64, 3854-3859, 1 98).
  • a primer specific to the bacterium is prepared based on known nucleotide sequence information of the 16S rRNA gene of Bacteroides uniformiformis. Using the DNA extracted from the selected bacteria as a template, perform a PCR reaction using the primers, and determine whether the bacteria is Bacteroides uniformis based on the presence or absence of the PCR amplification product of the intended size. be able to. Design of specific primers and determination of PCR conditions can be performed according to a standard method (Bio-Experimental Illustrated 3 PCR: Cell Engineering Appendix: Experimental Note Series to be Viewed by the Cell; Hiroki Nakayama, Shujunsha Co., Ltd.).
  • any strain classified into Bacteroides uniformiformis, or a mutant or breeding strain thereof can be used as long as it has one or more of strength enhancing action and anti-fatigue action.
  • Bacteroides uniformis strains usable in the present invention include ATCC 8492 strain, CCUG 4942 strain, CIP 103 695 strain, DSM 6597 strain, NCTC 13054 strain, JCM 5828 strain, CP 3585 strain and CP 3586 strain.
  • it is strain JCM5828, strain CP3585 and strain CP3586.
  • the JCM5828 strain is a standard strain registered and stored in RIKEN BioResource Center, Microbial Material Development Office (3-1-1 Takanodai, Tsukuba City, Ibaraki Prefecture).
  • CP 3585 strain and CP 3586 strain were accepted on August 25, 2017 at the Patent Microorganisms Depositary Center of the National Institute of Technology and Evaluation Corporation (Department No. Nite 122-818, Azusa, Kisarazu City, Chiba Prefecture 292-0818). It has been deposited internationally as BP-02536 and NITE BP-02537.
  • Bacteroides uniformis usable in the present invention can be cultured and recovered using a conventional culture medium and culture conditions capable of culturing the bacterium.
  • the culture medium is not particularly limited as long as it can culture Bacteroides uniformis, but is not particularly limited.
  • a carbon source glucose, fructose, galactose, maltose, lactose, cellobiose, sucrose, rhamnose, amygdalin, esculin, salicin , Melibiose, trehalose, L-arabinose, ribose, D-xylose, inulin, raffinose, starch, molasses etc.
  • inorganic ammonium salts such as ammonium sulfate or ammonium nitrate, urea, amino acid, meat extract, yeast extract, polypeptone, protein Containing organic nitrogen-containing substances such as decomposition products, etc.
  • inorganic salts such as magnesium sulfate, potassium dihydrogen phosphate, potassium tartrate, zinc sulfate, magnesium sulfate, copper sul
  • a known culture medium (eg, NBGT medium, BL medium, GAM medium, etc.) suitable for culture of Bacteroides uniformus can be used.
  • the culture medium is preferably a liquid medium, but if necessary, agar or gelatin may be added and used as a solid medium or a semi-solid medium.
  • the cultivation can be carried out under anaerobic conditions at a temperature of 20 ° C. to 50 ° C., preferably 25 ° C. to 45 ° C., more preferably 35 ° C. to 37 ° C.
  • "Anaerobic conditions” may be any low-oxygen environment to the extent that Bacteroides uniformis can grow. For example, anaerobic conditions using an anaerobic chamber, an anaerobic box, a closed vessel or a culture vessel containing an oxygen scavenger, etc. It can be done.
  • the culture can be performed in any format such as stationary culture, shaking culture, tank culture, etc.
  • the culture time is not particularly limited, and can be, for example, 3 hours to 7 days.
  • the obtained culture may be used as it is, or Bacteroides uniformus may be purified or roughly purified from the culture and used. Purification or crude purification of the cells from the culture can be performed using any means, for example, centrifugation, filtration and the like.
  • Bacteroides uniformiformis used in the present invention may be a living cell or a dead cell, may be a wet cell or may be a dry cell.
  • treated products of Bacteroides uniformus can also be used.
  • examples of the "treated product” include disrupted cells and cell extract of Bacteroides uniformiformis.
  • Crushed cells can be obtained by known treatments such as physical treatment, chemical treatment, enzyme treatment, autolysis, etc., and the form is as long as it has one or more of an action to improve physical strength and an anti-fatigue action. It is not limited.
  • the disrupted cells can be obtained by subjecting the cells to a means such as a homogenizer, a ball mill, a bead mill, a dyno mill, a planetary mill, a jet mill, a French press, a cell crusher, a filter filtration and the like.
  • the physical crushing treatment may be performed wet (treated in the state of cell suspension) or may be performed dry (treated in the state of cell powder).
  • the bacterial cell extract can be obtained by performing an extraction operation from the cells or disrupted cells using an extraction solvent, and recovering a fraction having one or more of a strength improving action and an anti-fatigue action.
  • an extraction solvent for example, water, alcohol (ethanol, methanol, etc.), acetone, acetonitrile, dioxane, DMSO, DMF, diethyl ether, hexane, heptane, dichloromethane, chloroform, etc., or a mixed solvent thereof can be used. .
  • the obtained bacterial cell extract may be further subjected to an evaporator such as an evaporator to be concentrated if necessary, or one or more of the action for improving the physical strength and the anti-fatigue action may be obtained from the bacterial cell extract.
  • the fractions having may be further purified or crudely purified.
  • chromatography column, filter, ultrafiltration, salting out, solvent precipitation, solvent extraction, solvent extraction, distillation, immunoprecipitation, polyacrylamide gel electrophoresis, isoelectric focusing, dialysis, recrystallization Etc. can be appropriately selected and used in combination.
  • Bacteroides uniformiformis or a treated product thereof used in the present invention can be used in any form such as a dried product, a frozen product, an aqueous dispersion, an emulsion and the like.
  • the dried material can be obtained, for example, using any drying means such as spray drying, drum drying, vacuum drying, lyophilization, etc., and can be in the form of powder, particles, etc.
  • composition of the present invention should contain additives such as excipients, lubricants, binders, disintegrants, etc. which are usually used in the preparation of medicines and foods and drinks together with Bacteroides uniformus or a treated product thereof. And can be manufactured as a dosage form or form suitable for the intended route of administration and method of ingestion.
  • Excipients include lactose, sucrose, D-mannitol, D-sorbitol, starch, pregelatinized starch, dextrin, glucose, corn starch, crystalline cellulose, low substituted hydroxypropyl cellulose, sodium carboxymethylcellulose, gum arabic, pullulan, light Silica anhydride, synthetic aluminum silicate, magnesium aluminum metasilicate and the like can be mentioned.
  • lubricant for example, sugar esters such as sucrose fatty acid ester and glycerin fatty acid ester, calcium stearate, magnesium stearate, stearic acid, stearyl alcohol, hydrogenated oils such as powdered vegetable oils and fats, waxes such as white beeswax, Examples include talc, silicic acid, silicon and the like.
  • pregelatinized starch sucrose, gelatin, gum arabic, methylcellulose, carboxymethylcellulose, carboxymethylcellulose sodium, crystalline cellulose, sucrose, D-mannitol, trehalose, dextrin, pullulan, hydroxypropylcellulose, hydroxypropyl methylcellulose, polyvinyl alcohol Pyrrolidone etc. are mentioned.
  • Disintegrants include lactose, sucrose, starch, carboxymethylcellulose, calcium carboxymethylcellulose, sodium croscarmellose, sodium carboxymethyl starch, light anhydrous silicic acid, low substituted hydroxypropyl cellulose and the like.
  • various fats and oils for example, vegetable oils, such as soybean oil, corn oil, safflower oil, olive oil, etc.
  • Animal fats and oils such as beef tallow and sardine oil), herbal medicines (such as royal jelly and ginseng), amino acids (such as glutamine, cysteine, leucine and arginine), polyhydric alcohols (such as ethylene glycol, polyethylene glycol, propylene glycol, glycerin, Sugar alcohols such as sorbitol, erythritol, xylitol, maltitol, mannitol etc., natural polymers (eg gum arabic, agar, water soluble corn fiber, gelatin, xanthan gum, casein, gluten or gluten hydrolysate, lecithin, starch, Dekiss Phosphorus etc.), vitamins (eg vitamin C, vitamin B group etc.), minerals (eg calcium, magnesium, zinc, iron etc.), dietary fibers (eg mannan, pectin, hemicellulose etc.), surfactants (eg glycerol fatty acid ester, etc.) Sorbitan
  • composition of the present invention can also contain other ingredients that are known to have one or more of strength enhancing action and anti-fatigue action.
  • other components taurine, glutathione, carnitine, creatine, coenzyme Q10, glucuronic acid, glucuronolactone, galana extract, theanine, ⁇ -aminobutyric acid (GABA), capsaicin, capsiate, allicins, vitamins (vitamins) B 1, B 2, B 6 , B 12, C, E , etc.), various organic acids (such as citric acid), flavonoids, polyphenols, catechins, caffeine, and the like, but are not limited to.
  • the dosage form or form of the composition of the present invention is not particularly limited.
  • the medicine may be, for example, tablets, capsules, granules, powders, powders, syrups, dry syrups, solutions, suspensions, inhalants, suppositories, etc., preferably an oral preparation. It is.
  • the liquid preparation such as liquid preparation and suspension preparation is provided in a state where it can be lyophilized and stored, and used at the time of use after being dissolved in a buffer containing water, embedded saline etc. It may be In addition, those having a solid dosage form such as a tablet may be coated if necessary (for example, sugar coated tablets, gelatin coated tablets, enteric coated tablets, etc.), using known techniques. It may be a controlled release formulation such as a sustained release formulation, a delayed release formulation or an immediate release formulation.
  • Examples of food and drink include health food and drink having the form of tablets, tablets, chewable tablets, powders, powders, capsules, granules, drinks and the like (supplements, nutritional supplements, health supplements, nutritionally adjusted foods, etc.)
  • Soft drinks tea drinks, jelly drinks, sports drinks, coffee drinks, carbonated drinks, vegetable drinks, fruit juice drinks, fermented vegetable drinks, fermented fruit juice drinks, fermented milk drinks (such as yoghurt), lactic acid bacteria drinks, milk drinks, powdered drinks, It may be in the form of cocoa beverages, sweets (eg, biscuits and cookies, chocolate, candy, chewing gum, tablets), jellies and the like (without limitation).
  • Foods and beverages contain health food (including food for specific health (including food for conditional health), nutritive food, functional food for indication, and food containing a component having one or more of physical strength improving action and anti-fatigue action. , Health food, beauty food etc.
  • composition of the present invention can be in the form of feed or feed additives such as livestock, race horses, pets, etc. as well as food and drink for humans.
  • the amount of Bacteroides uniformiformis or the treated product thereof contained in the composition of the present invention may vary depending on the form and form of the composition, but generally 0.0001 to 99% by mass of the composition, The amount can be selected preferably in the range of 0.001 to 80% by mass, more preferably 0.001 to 75% by mass.
  • the amount of Bacteroides uniformiformis or the treated product thereof contained in the composition of the present invention is 1 ⁇ 10 5 to 1 ⁇ 10 17 , preferably 1 ⁇ 10 5 / kg of the composition, based on the number of cells.
  • the amount may be selected from 6 to 1 ⁇ 10 16 , more preferably 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 15 .
  • Subjects to which the composition of the present invention is administered or ingested are mammals (eg, humans, primates (monkeys, chimpanzees, etc.), livestock (bovine cattle) which require one or more of the effects of physical strength improvement and anti-fatigue effects. Horses, pigs, sheep, etc.), pets (dogs, cats, etc.), experimental animals (mice, rats, etc.)), birds, reptiles, etc., preferably mammals, and particularly preferably humans.
  • the dose or intake of the composition of the present invention may vary depending on factors such as the age and body weight of the subject, route of administration, frequency of administration / intake, physical fitness or fatigue, and any dose. Or intake may be adopted.
  • Bacteroides uniformiformis or the treated product thereof is the number of cells per day, 1 ⁇ 10 5 cells / kg to 1 ⁇ 10 15 cells / kg, preferably 1 day
  • An amount selected from 1 ⁇ 10 6 cells / kg to 1 ⁇ 10 14 cells / kg, more preferably 1 ⁇ 10 8 cells / kg to 1 ⁇ 10 13 cells / kg per day, for one or more times (eg, 2 to 5 times, preferably 2 to 3 times) can be dividedly administered or taken.
  • composition of the present invention can be effective in a small amount and in a short period, but can be administered or ingested for a long period.
  • the composition of the present invention can be continuously administered or ingested according to the above dosage, for a period of one month or more, two months or more, six months or more, one month or more, or more.
  • the composition of the present invention has one or more of strength enhancing action and anti-fatigue action. Specifically, the composition of the present invention can withstand one or more of enhancing and restoring physical strength, particularly labor and exercise, in a subject who has been administered or ingested, compared to when it is not administered or ingested.
  • One or more of improving the power of the body which makes it possible to do them, and promoting the recovery of the power of the body, more preferably the endurance during whole body endurance or aerobic exercise Improving one or more of the following: promoting overall endurance and recovery of one or more of the endurances during aerobic exercise; reducing fatigue; promoting recovery of fatigue; Reducing the decrease in physical function as a result of one or more of preventing fatigue, preferably as a result of continued work such as labor or exercise, promoting the recovery of the deterioration of the physical function, And the said physical function is low It can be prevented resulting in one or more action of be hardly occurs state reduction of the bodily functions. Based on these actions, the composition of the present invention has effects and effects on nutritional support and the like in the case of nourishment, weakness, physical fatigue and the like.
  • one or more of strength and fatigue tolerance in the subject can be improved as compared to the case where it is not administered or ingested.
  • Example 1 Bacteroides uniformis fishing fungus Human feces were diluted and seeded in selective medium (NBGT agar) and cultured under anaerobic conditions for 48 hours.
  • selective medium NBGT agar
  • the obtained colonies were picked up one by one and suspended in PBS, and a part of the suspension was inoculated on BL agar medium and cultured under anaerobic condition for 48 hours. Also, the remaining suspension was used to extract DNA, and this DNA was used as a template for quantitative PCR and 16S rRNA gene sequence determination to identify strains that are Bacteroides uniformus.
  • the identified strains were each recovered from BL agar medium, and inoculated and cultured in GAM soft agar medium.
  • Example 2 Preparation of Bacteroides uniformis suspension Two of the Bacteroides uniforms obtained in Example 1 were applied to BL agar medium and cultured for 48 hours. Then, colonies obtained for each strain were picked one by one into GAM liquid medium and cultured for further 16 hours. All cultures were performed under anaerobic conditions. The resulting strains were referred to as "CP 3585 strain” and "CP 3586 strain", respectively.
  • the supernatant was removed by centrifugation, and the collected cells were frozen at -80 ° C and stored until administration.
  • the cells were diluted with PBS to 1 ⁇ 10 9 CFU / ml to prepare a suspension of each cell.
  • JCM5828 strain which is a reference strain of Bacteroides uniformis.
  • Example 3 Effect on one or more of physical strength and fatigue
  • Animal Male C57BL / 6 mice (5 weeks old) were used. Because there is a difference in exercise capacity of each individual, limit swimming test is conducted once before administration, and mice are used as control group, JCM5828 strain administration group so that average value of limit swimming time of each group becomes almost the same.
  • SPPF Specific-pathogen free
  • FIG. 1 is a graph showing the results of the limit swimming test before (A) administration of Bacteroides uniformus and (B) three weeks after administration start.
  • the control group is shown as "control”
  • the administration group is shown as "JCM5828 strain", "CP 3585 strain” and "CP 3586 strain”, respectively.
  • Each group n 8. **: p ⁇ 0.05, *: p ⁇ 0.1 (vs control, Student T test)

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Abstract

本発明は、体力向上作用及び抗疲労作用のうちの一以上を奏することが可能な手段を提供することを目的とする。　バクテロイデス・ユニフォルミス又はその処理物を含む、体力及び疲労耐性のうち一以上を向上するために使用される組成物。

Description

体力向上作用及び抗疲労作用のうちの一以上の作用を有する組成物
　本発明は、体力及び疲労耐性のうちの一以上を向上するためのバクテロイデス・ユニフォルミスの使用に関する。
　通常、労働や運動等の活動を行う場合には、少なくともこれらの活動に耐え得るだけの体力を要する。一方、これらの活動により身体には疲労が蓄積し、身体の機能は低下する。労働や運動等の活動を日常的に行うためには、体力の維持／向上や、疲労の予防／回復が不可欠であるといえる。
　労働や運動等の活動を行うための体力には、筋力、持久力、柔軟性等の行動の基礎となる身体的能力が含まれる。
　これまでに持久力を向上させ、かつ疲労の予防、軽減、回復に効果を有するとされるアミノ酸組成物が開発・報告されている（特許文献１）。
　しかしながら、このようなアミノ酸組成物は、運動前や運動中に摂取され、その効果は一時的であり、摂取するタイミングによっては効果が期待できない場合もあった。摂取するタイミングに縛られることなく、持続的に効果を得ることが可能な手段が望まれている。
　また、これまでに特定の微生物や、発酵組成物を摂取することにより、持久力の向上や抗疲労効果が得られることが報告されている。
　特許文献２には、納豆菌を米糠類及び大豆類を含む培地に接種して得られた発酵組成物（発酵液）を摂取することにより、乳酸産生抑制効果、血中乳酸蓄積抑制効果、持久力の向上及び抗疲労効果が得られることが示されている。特許文献３には、乳酸菌（ロイコノストック・シュードメセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ　ｐｓｅｕｄｏｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）ＡＴＣＣ　１２２９１株）による豆乳発酵物を摂取することにより、疲労蓄積予防活性を通じて自発運動量を増加させる効果が得られることが示されている。これらはいずれも発酵組成物全体に由来する効果を示すものであり、当該菌体自体が上記の効果を奏することを示すものではない。
　特許文献４には、紅色非硫黄細菌（ロドバクター・アゾトフォルマンス（Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒ　ａｚｏｔｏｆｏｒｍａｎｓ）ＢＰ０８９９株）の菌体粉末を摂取することにより、持久力向上や抗疲労効果が得られることが示されている。
　非特許文献１には、バクテロイデス・フラジリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｆｒａｇｉｌｉｓ）の単独定着マウスにおいて、無菌マウスと比較して持久力の向上が認められたことが記載されている。
　バクテロイデス・ユニフォルミス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｕｎｉｆｏｒｍｉｓ）は、０．８×１．５μｍ程度の大きさを有し、芽胞を作らず、運動性を有さない嫌気性グラム陰性桿菌である。バクテロイデス・ユニフォルミスは、ヒトをはじめとする多くの哺乳動物の腸内に通常存在する真性細菌である。
特開２００８－２５５０３３号公報 特開２０１３－１７４４５号公報 特開２００８－１７９５５９号公報 ＷＯ２０１１／１０２０３５公報
Ｊ　Ｓｔｒｅｎｇｔｈ　Ｃｏｎｄ　Ｒｅｓ．２０１５　Ｆｅｂ；２９（２）：５５２－８
　しかし、バクテロイデス・ユニフォルミスを摂取することにより、どのような効果が得られるか否か、これまで明らかにされてはいなかった。
　本発明は、任意のタイミングで摂取でき、持続的に体力向上作用及び抗疲労作用のうちの一以上の作用を奏することが可能な手段を提供することを目的とする。
　本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討した結果、意外にも、バクテロイデス・ユニフォルミスを摂取することにより、上記課題を解決できることを見出し、本発明を完成させるに至った。
　すなわち、本発明は、以下の発明を包含する。
［１］　バクテロイデス・ユニフォルミス又はその処理物を含む、体力及び疲労耐性のうち一以上を向上するために使用される組成物。
［２］　全身持久力、及び有酸素運動時の持久力のうち一以上を向上するために使用される、［１］の組成物。
［３］　バクテロイデス・ユニフォルミスが、ＪＣＭ５８２８株、ＣＰ３５８５株又はＣＰ３５８６株である、［１］又は［２］の組成物。
［４］　飲食品、医薬又は飼料もしくは飼料添加物である、［１］～［３］のいずれかの組成物。
［５］　非ヒト動物に、バクテロイデス・ユニフォルミス又はその処理物を投与すること又は摂取させることを含む、非ヒト動物における体力及び疲労耐性のうち一以上を向上するための方法。
［６］　全身持久力、及び有酸素運動時の持久力のうち一以上を向上するための、［５］の方法。
［７］　バクテロイデス・ユニフォルミスＣＰ３５８５株。
［８］　バクテロイデス・ユニフォルミスＣＰ３５８６株。
　本明細書は本願の優先権の基礎である日本国特許出願２０１７－１９３１３２号の明細書および／または図面に記載される内容を包含する。
　本明細書で引用した全ての刊行物、特許および特許出願をそのまま参考として本明細書にとり入れるものとする。
　本発明によれば、任意のタイミングで摂取でき、持続的に体力向上作用及び抗疲労作用のうちの一以上の作用を奏することが可能な手段を提供することができる。
図１は、バクテロイデス・ユニフォルミスの投与開始前（Ａ）と投与開始から３週間後（Ｂ）の限界遊泳試験の結果を示すグラフ図である。
　本発明は、バクテロイデス・ユニフォルミス又はその処理物を含む、体力向上作用及び抗疲労作用のうち一以上を有する組成物に関する。
　本発明において「体力」とは、労働や運動等の活動を行うことを可能とする行動の基礎となる身体的能力に関し、特に、労働や運動等の活動に耐えることを可能とし、継続してそれらを行うことを可能とする身体の力を意味する。より好ましくは、「体力」とは、全身持久力、及び有酸素運動を継続して行うことを可能とする有酸素運動時の持久力のうちの一以上を意味する。「全身持久力」とは、一般的にスタミナとも呼ばれる、長時間身体を動かすことを可能とする能力をいう。
　本発明において「体力向上」とは、体力の向上及び回復を促進することのうちの一以上を意味し、特に、労働や運動等の活動に耐え、継続してそれらを行うことを可能とする身体の力を向上すること、及び当該身体の力の回復を促進することのうちの一以上を意味し、より好ましくは、全身持久力及び有酸素運動時の持久力のうちの一以上を向上すること、ならびに全身持久力及び有酸素運動時の持久力のうちの一以上の回復を促進することからなる群から選択される一以上を意味する。
　本発明において「疲労」とは、労働や運動等の活動が継続して行われた結果として、身体の機能が低下することを意味する。
　本発明において「抗疲労」及び「疲労耐性を向上する」とは、疲労を軽減すること、疲労の回復を促進すること、及び疲労を予防することのうちの一以上を意味し、好ましくは、労働や運動等の活動が継続して行われた結果として生じる身体機能の低下を軽減すること、当該身体機能の低下の回復を促進すること、又は当該身体機能の低下を予防して当該身体機能の低下が生じにくい状態とすることを意味する。
　「バクテロイデス・ユニフォルミス」は公知であり、バージーズ・マニュアル・オブ・バクテリオロジーＶｏｌ．４（１９８９）等に記載される公知の菌学的性質に基づいて特徴付けることができる。
　本発明において「バクテロイデス・ユニフォルミス」は、哺乳動物（例えばヒト、サル、チンパンジー、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、イヌ、ネコ、マウス、ラット等）、好ましくはヒトの腸内より単離されたものを用いることができる。
　バクテロイデス・ユニフォルミスは公知の手法に準じて単離することができる（Ｐａｏｌａ　Ｇａｕｆｆｉｎ　Ｃａｎｏ　ｅｔ　ａｌ，ＰＬｏＳ　Ｏｎｅ．Ｊｕｌｙ　２０１２，Ｖｏｌｕｍｅ　７，Ｉｓｓｕｅ　７，ｅ４１０７９）。すなわち、哺乳動物の糞便、糞便物、便を適当な溶媒中に希釈して、プレート培地に播種し、嫌気条件下にて培養を行い、培地に出現したコロニーより釣菌する。培地は下記に詳述するものを利用することができるが、単離の効率性からバクテロイデスを鑑別・選別することが可能な選択分離培地を用いることが好ましい（Ｊａｐ．Ｊ．ｖｅｔ．Ｓｃｉ．，３６，９３－９８（１９７４））。得られた菌について、グラム染色と検鏡によりグラム陰性桿菌であることを確認した後、選択された菌について、１６Ｓ　ｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列に基づく分析を行うことにより、バクテロイデス・ユニフォルミスを同定・クローニングすることができる。バクテロイデス・ユニフォルミスの１６Ｓ　ｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列は公知であり、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ等の公知のデータベースに開示されており、ＮＲ＿０４０８６６、ＡＢ０５０１１０、ＡＢ５１０７１１、Ｌ１６４８６として登録されている。１６Ｓ　ｒＲＮＡ遺伝子の分析に際しては、これらの配列情報を利用することができる。１６Ｓ　ｒＲＮＡ遺伝子の分析・同定は、定量的ＰＣＲ法、ＤＧＧＥ／ＴＧＧＥ法、ＦＩＳＨ法、１６Ｓ　ｒＤＮＡクローニングライブラリー法、Ｔ－ＲＦＬＰ法、ＦＩＳＨ－ＦＣＭ法、塩基配列決定法等の公知の手法に基づいて行うことができる（生化学．第８０巻．第５号．４２１－４２５．２００８年；Ｊ　Ｎｕｔｒ．２００４　Ｆｅｂ；１３４（２）：４６５－７２．；Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．６４．３３３６－３３４５．１９９８；Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，６５，４７９９－４８０７，１９９９；Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，６２，２２７３－２２７８，１９９６；Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，６４，３８５４－３８５９，１９９８）。例えば、定量的ＰＣＲ法によれば、バクテロイデス・ユニフォルミスの１６Ｓ　ｒＲＮＡ遺伝子の公知の塩基配列情報に基づいて、当該菌に特異的なプライマーを作製する。選択された菌より抽出されたＤＮＡを鋳型として、当該プライマーを用いてＰＣＲ反応を行い、意図されたサイズのＰＣＲ増幅産物の有無に基づいて当該菌がバクテロイデス・ユニフォルミスであるか否かを判断することができる。特異的なプライマーの設計やＰＣＲ条件の決定は、定法に従って行うことができる（バイオ実験イラストレイテッド３　本当にふえるＰＣＲ：細胞工学別紙　目で見る実験ノートシリーズ；中山広樹著　株式会社秀潤社）。
　本発明においては、バクテロイデス・ユニフォルミスに分類される任意の菌株、又は体力向上作用及び抗疲労作用のうち一以上を有する限りその変異株もしくは育種株を利用することができる。本発明において利用可能なバクテロイデス・ユニフォルミス株としては、ＡＴＣＣ８４９２株、ＣＣＵＧ４９４２株、ＣＩＰ１０３６９５株、ＤＳＭ６５９７株、ＮＣＴＣ１３０５４株、ＪＣＭ５８２８株、ＣＰ３５８５株及びＣＰ３５８６株等が挙げられる。好ましくは、ＪＣＭ５８２８株、ＣＰ３５８５株及びＣＰ３５８６株である。ＪＣＭ５８２８株は、理化学研究所　バイオリソースセンター微生物材料開発室（〒３０５－００７４　茨城県つくば市高野台３－１－１）に登録・保存されている基準株である。ＣＰ３５８５株及びＣＰ３５８６株は、２０１７年８月２５日に独立行政法人製品評価技術基盤機構特許微生物寄託センター（〒２９２－０８１８　千葉県木更津市かずさ鎌足２－５－８　１２２号室）に受託番号ＮＩＴＥ　ＢＰ－０２５３６及びＮＩＴＥ　ＢＰ－０２５３７として国際寄託されている。
　本発明で利用可能なバクテロイデス・ユニフォルミスは、当該菌を培養することができる通常の培養培地及び培養条件を用いて培養し、回収することができる。
　培養培地はバクテロイデス・ユニフォルミスを培養可能であればよく、特に限定されるものではないが、例えば、炭素源として、グルコース、フルクトース、ガラクトース、マルトース、ラクトース、セロビオース、スクロース、ラムノース、アミグダリン、エスクリン、サリシン、メリビオース、トレハロース、Ｌ－アラビノース、リボース、Ｄ－キシロース、イヌリン、ラフィノース、スターチ、糖蜜等、窒素源として、硫安、硝安等の無機アンモニウム塩、尿素、アミノ酸、肉エキス、酵母エキス、ポリペプトン、タンパク質分解物等の有機窒素含有物等、ならびに無機塩類として、硫酸マグネシウム、リン酸２水素カリウム、酒石酸カリウム、硫酸亜鉛、硫酸マグネシウム、硫酸銅、塩化カルシウム、塩化鉄、塩化マンガン等を含めることができる。バクテロイデス・ユニフォルミスの培養に好適な公知の培養培地（例えば、ＮＢＧＴ培地、ＢＬ培地、ＧＡＭ培地等）を利用することができる。培養培地は液体培地が好ましいが、必要に応じて、寒天やゼラチンを加えて、固体培地又は半流動培地として用いてもよい。
　培養は、２０℃～５０℃、好ましくは２５℃～４５℃、より好ましくは３５℃～３７℃の温度にて、嫌気条件下で行うことができる。「嫌気条件」とは、バクテロイデス・ユニフォルミスが増殖可能な程度に低酸素環境であればよく、例えば、嫌気チャンバー、嫌気ボックス、脱酸素剤を入れた密閉容器もしくは培養容器等を用いて、嫌気条件とすることができる。
　培養は、静置培養、振とう培養、タンク培養等の任意の形式で行うことが可能であり、また、培養時間は、特に制限されないが、例えば３時間～７日間とすることができる。
　培養後、得られた培養物をそのまま使用してもよいし、あるいは培養物よりバクテロイデス・ユニフォルミスを精製又は粗精製して使用してもよい。培養物からの菌体の精製又は粗精製は任意の手段を用いて行うことができ、例えば、遠心分離や濾過等を用いて行うことができる。
　本発明において使用するバクテロイデス・ユニフォルミスは、生菌体であっても又は死菌体であってもよいし、湿潤菌体であっても又は乾燥菌体であってもよい。
　本発明においては、バクテロイデス・ユニフォルミスの処理物も利用することができる。本発明において「処理物」としては、バクテロイデス・ユニフォルミスの菌体破砕物や菌体抽出物が挙げられる。
　菌体破砕物は、菌体を物理的処理、化学的処理、酵素処理、自己融解等の公知の処理により得ることができ、体力向上作用及び抗疲労作用のうち一以上を有する限りその形態は限定されない。例えば、菌体破砕物は、菌体をホモジナイザー、ボールミル、ビーズミル、ダイノミル、遊星ミル、ジェットミル、フレンチプレス、細胞破砕機、フィルター濾過等の手段に付すことにより得ることができる。物理的破砕処理は、湿式（菌体懸濁液の状態で処理）で行ってもよいし、又は乾式（菌体粉末の状態で処理）で行ってもよい。
　菌体抽出物は、菌体又は菌体の破砕物から抽出溶媒を用いて抽出操作を行い、体力向上作用及び抗疲労作用のうち一以上を有する画分を回収することによって得ることができる。抽出溶媒としては、例えば、水、アルコール（エタノール、メタノール等）、アセトン、アセトニトリル、ジオキサン、ＤＭＳＯ、ＤＭＦ、ジエチルエーテル、ヘキサン、ヘプタン、ジクロロメタン、クロロホルム等、又はそれらの混合溶媒を利用することができる。得られた菌体抽出物は、必要に応じてさらに、エバポレーター等の蒸発器に供され濃縮されてもよいし、あるいは、菌体抽出物より、体力向上作用及び抗疲労作用のうち一以上を有する画分をさらに精製又は粗精製してもよい。当該さらなる精製又は粗精製には、クロマトグラフィーカラム、フィルター、限外濾過、塩析、溶媒沈殿、溶媒抽出、蒸留、免疫沈降、ポリアクリルアミドゲル電気泳動、等電点電気泳動法、透析、再結晶等を適宜選択、組み合わせて用いることができる。
　本発明において使用するバクテロイデス・ユニフォルミス又はその処理物は、乾燥物、凍結物、水分散物、乳化物等の任意の形態で用いることができる。乾燥物は、例えば、噴霧乾燥、ドラム乾燥、真空乾燥、凍結乾燥等の任意の乾燥手段を用いて得ることができ、粉状、粒状等の形態とすることができる。
　本発明の組成物には、バクテロイデス・ユニフォルミス又はその処理物と共に、医薬や飲食品の製造において通常用いられている、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤等の添加剤を含めることができ、企図される投与経路や摂取方法に適した剤型又は形態として製造することができる。
　賦形剤としては、乳糖、白糖、Ｄ－マンニトール、Ｄ－ソルビトール、デンプン、α化デンプン、デキストリン、ブドウ糖、コーンスターチ、結晶セルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、アラビアゴム、プルラン、軽質無水ケイ酸、合成ケイ酸アルミニウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等が挙げられる。
　滑沢剤としては、例えば、ショ糖脂肪酸エステルやグリセリン脂肪酸エステルなどのシュガーエステル類、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ステアリルアルコール、粉末植物油脂などの硬化油、サラシミツロウなどのロウ類、タルク、ケイ酸、ケイ素等が挙げられる。
　結合剤としては、α化デンプン、ショ糖、ゼラチン、アラビアゴム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、結晶セルロース、白糖、Ｄ－マンニトール、トレハロース、デキストリン、プルラン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。
　崩壊剤としては、乳糖、白糖、デンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、軽質無水ケイ酸、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース等が挙げられる。
　また、本発明の組成物に利用可能な、医薬や飲食品の製造において通常用いられている添加剤の例としては、各種油脂（例えば、大豆油、コーン油、サフラワー油、オリーブ油などの植物油、牛脂、イワシ油などの動物油脂）、生薬（例えばロイヤルゼリー、人参など）、アミノ酸（例えばグルタミン、システイン、ロイシン、アルギニンなど）、多価アルコール（例えばエチレングリコール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン、糖アルコール、例としてソルビトール、エリスリトール、キシリトール、マルチトール、マンニトールなど）、天然高分子（例えばアラビアガム、寒天、水溶性コーンファイバー、ゼラチン、キサンタンガム、カゼイン、グルテン又はグルテン加水分解物、レシチン、澱粉、デキストリンなど）、ビタミン（例えばビタミンＣ、ビタミンＢ群など）、ミネラル（例えばカルシウム、マグネシウム、亜鉛、鉄など）、食物繊維（例えばマンナン、ペクチン、ヘミセルロースなど）、界面活性剤（例えばグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステルなど）、精製水、希釈剤、安定化剤、等張化剤、ｐＨ調製剤、緩衝剤、湿潤剤、溶解補助剤、懸濁化剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤、香料、酸化防止剤、甘味料、呈味成分、酸味料等が挙げられる。
　また、本発明の組成物には、体力向上作用及び抗疲労作用のうち一以上を有することが公知である他の成分を含めることができる。このような他の成分としては、タウリン、グルタチオン、カルニチン、クレアチン、コエンザイムＱ１０、グルクロン酸、グルクロノラクトン、ガラナエキス、テアニン、γ－アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、カプサイシン、カプシエイト、アリシン、ビタミン類（ビタミンＢ1、Ｂ2、Ｂ6、Ｂ12、Ｃ、Ｅ等）、各種有機酸（クエン酸等）、フラボノイド類、ポリフェノール類、カテキン類、カフェイン等が挙げられるが、これらに限定はされない。
　本発明の組成物の剤型又は形態は、特に制限されない。医薬としては例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、粉剤、シロップ剤、ドライシロップ剤、液剤、懸濁剤、吸入剤、坐剤等の剤型とすることができるが、好ましくは、経口剤である。液剤、懸濁剤などの液体製剤は、凍結乾燥化し保存し得る状態で提供され、用時、水や生埋的食塩水等を含む緩衝液等で溶解して適当な濃度に調製した後に使用されるものであってもよい。また錠剤等の固形の剤形を有するものは、必要に応じてコーティングを施されていてもよいし（例えば、糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶錠等）、公知の技術を使用して、徐放性製剤、遅延放出製剤又は即時放出製剤などの放出が制御された製剤としてもよい。
　飲食品としては例えば、錠菓、錠剤、チュアブル錠、粉剤、散剤、カプセル剤、顆粒剤、ドリンク剤等の形態を有する健康飲食品（サプリメント、栄養補助食品、健康補助食品、栄養調整食品等）、清涼飲料、茶飲料、ゼリー飲料、スポーツ飲料、コーヒー飲料、炭酸飲料、野菜飲料、果汁飲料、醗酵野菜飲料、醗酵果汁飲料、発酵乳飲料（ヨーグルトなど）、乳酸菌飲料、乳飲料、粉末飲料、ココア飲料、菓子（例えば、ビスケットやクッキー類、チョコレート、キャンディ、チューインガム、タブレット）、ゼリー等の形態とすることができる（これらに限定はされない）。
　飲食品は、体力向上作用及び抗疲労作用のうち一以上を有する成分を含有する、保健機能食品（特定保健用食品（条件付き特定保健用食品を含む）、栄養機能食品、機能性表示食品や、健康食品、美容食品等とすることができる。
　また、本発明の組成物は、ヒト用の飲食品だけでなく、家畜、競走馬、ペット等の飼料又は飼料添加物の形態とすることもできる。
　本発明の組成物に含まれるバクテロイデス・ユニフォルミス又はその処理物の量は、当該組成物の剤型や形態に応じて変化し得るが、通常、組成物に対して０．０００１～９９質量％、好ましくは０．００１～８０質量％、より好ましくは０．００１～７５質量％の範囲より選択される量とすることができる。例えば、本発明の組成物に含まれるバクテロイデス・ユニフォルミス又はその処理物の量は、菌体の数にして、組成物１ｋｇあたり、１×１０5個～１×１０17個、好ましくは１×１０6個～１×１０16個、より好ましくは１×１０7個～１×１０15個から選択される量とすることができる。
　本発明の組成物を投与又は摂取する対象（被験体）は、体力向上及び抗疲労の効果のうち一以上を必要とする哺乳動物（例えばヒト、霊長類（サル、チンパンジー等）、家畜（ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ等）、ペット（イヌ、ネコ等）、実験動物（マウス、ラット等））、鳥類、爬虫類等が挙げられるが、好ましくは哺乳動物であり、特に好ましくはヒトである。
　本発明の組成物の投与量又は摂取量は、対象の年齢及び体重、投与経路、投与・摂取回数、体力や疲労のうち一以上の程度等の要因に応じて変化し得、任意の投与量又は摂取量を採用し得る。例えば、経口的に投与又は摂取する場合には、バクテロイデス・ユニフォルミス又はその処理物を菌体の数にして、１日当たり１×１０5個／ｋｇ～１×１０15個／ｋｇ、好ましくは１日当たり１×１０6個／ｋｇ～１×１０14個／ｋｇ、より好ましくは１日当たり１×１０8個／ｋｇ～１×１０13個／ｋｇから選択される量を１回又は複数回（例えば、２～５回、好ましくは２～３回）に分けて投与又は摂取することができる。
　本発明の組成物は、微量かつ短期間で効果を奏することができるが、長期間にわたって投与又は摂取することができる。例えば、本発明の組成物を、上記用法用量にしたがい、１か月以上、２か月以上、６ヶ月以上、１年以上、又はそれ以上の期間にわたって継続して投与又は摂取することができる。
　本発明の組成物は、体力向上作用及び抗疲労作用のうち一以上を有する。具体的には、本発明の組成物は、投与又は摂取された対象において、投与又は摂取されない場合と比べて、体力を向上及び回復することのうちの一以上、特に労働や運動に耐え、継続してそれらを行うことを可能とする身体の力を向上すること、及び当該身体の力の回復を促進することのうちの一以上、より好ましくは、全身持久力や有酸素運動時の持久力のうちの一以上を向上すること、全身持久力及び有酸素運動時の持久力のうちの一以上の回復を促進すること、ならびに、疲労を軽減すること、疲労の回復を促進すること、及び疲労を予防することのうちの一以上、好ましくは労働や運動等の活動が継続して行われた結果として生じる身体機能の低下を軽減すること、当該身体機能の低下の回復を促進すること、及び当該身体機能の低下を予防して当該身体機能の低下が生じにくい状態とすることのうちの一以上の作用をもたらすことができる。これらの作用に基づいて、本発明の組成物は、滋養強壮、虚弱体質、肉体疲労等の場合における栄養補給等に効能・効果を有する。
　本発明の組成物を、上記対象に投与又は摂取させることにより、投与又は摂取されない場合と比べて、当該対象における体力及び疲労耐性のうち一以上を向上することができる。
　以下、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
実施例１．バクテロイデス・ユニフォルミスの釣菌
　ヒト由来の糞便を希釈して、選択培地（ＮＢＧＴ寒天培地）に播種し、４８時間嫌気状態で培養した。
　次いで、得られたコロニーを１つずつ拾ってＰＢＳに懸濁し、懸濁液の一部をＢＬ寒天培地に播種して４８時間嫌気状態で培養した。また、残りの懸濁液を使ってＤＮＡを抽出し、このＤＮＡを鋳型として用いて定量ＰＣＲ法ならびに１６Ｓ　ｒＲＮＡ遺伝子配列の決定を行い、バクテロイデス・ユニフォルミスである菌株を同定した。
　同定された菌株をそれぞれ、ＢＬ寒天培地より回収し、ＧＡＭ軟寒天培地に植菌・培養した。
実施例２．バクテロイデス・ユニフォルミス懸濁液の調製
　実施例１で得られたバクテロイデス・ユニフォルミスのうち２株をＢＬ寒天培地に塗布し、４８時間培養を行った。次いで、各株について得られたコロニーを１つずつＧＡＭ液体培地に拾って、さらに１６時間培養を行った。培養はすべて嫌気条件下にて行った。得られた菌株をそれぞれ、「ＣＰ３５８５株」及び「ＣＰ３５８６株」とした。
　培養終了後、遠心分離して上清を除去し、回収された菌体を－８０℃にて凍結して、投与まで保存した。
　投与に際しては、菌体を１×１０9ＣＦＵ／ｍｌになるようＰＢＳにて希釈して、各菌体の懸濁液を調製した。
　さらに、バクテロイデス・ユニフォルミスの基準株であるＪＣＭ５８２８株を用いて同様に、懸濁液を調製した。
実施例３．体力及び疲労のうち一以上に対する効果
（１）動物
　雄のＣ５７ＢＬ／６マウス（５週齢）を用いた。
　各個体の運動能力に差があるため、投与前に限界遊泳試験を１回実施し、各群の限界遊泳時間の平均値が、おおよそ同じになるように、マウスを対照群、ＪＣＭ５８２８株投与群、ＣＰ３５８５株投与群、及びＣＰ３５８６株投与群に振り分けた（各ｎ＝８）。
　各マウスは、Ｓｐｅｃｉｆｉｃ－ｐａｔｈｏｇｅｎ　ｆｒｅｅ（ＳＰＦ）環境下で飼育した。
（２）菌体の投与
　ＪＣＭ５８２８株、ＣＰ３５８５株及びＣＰ３５８６株のいずれかの懸濁液を２×１０8ＣＦＵ／日の量で毎日、実験期間（４週間）にわたって強制経口投与した。
　対照群には、同量のＰＢＳを投与した。
（３）評価方法
　菌体の投与による、体力及び疲労のうち一以上に対する効果は、限界遊泳試験により評価した（日本栄養・食糧学会誌　第６２巻　第４号　１６５－１７０（２００９））。すなわち、長さ９０ｃｍ、幅４５ｃｍで３８ｃｍの深さまで湯を満たしたアクリル水槽にポンプを接続して水槽表面に流れを発生させることにより、マウス用流水プールを作成した（京大松元式運動量測定流水槽）。流水プールにマウスを入れると、マウスは流れに逆らって遊泳し、疲労困憊すると水槽後部で水没した。遊泳開始から水没するまでの遊泳時間を測定した。限界遊泳試験は、実験期間（４週間）にわたって毎週１回実施した。
（４）結果
　投与開始前（各群への振り分けのための限界遊泳試験）と投与開始から３週目の限界遊泳試験の結果を図１に示す。なお、図１は、バクテロイデス・ユニフォルミスの投与開始前（Ａ）と投与開始から３週間後（Ｂ）の限界遊泳試験の結果を示すグラフ図である。対照群を「対照」、投与群を「ＪＣＭ５８２８株」、「ＣＰ３５８５株」及び「ＣＰ３５８６株」とそれぞれ示す。各群ｎ＝８。＊＊：ｐ＜０．０５、＊：ｐ＜０．１（ｖｓ対照、Ｓｔｕｄｅｎｔ　Ｔ検定）
　投与開始前の結果（図１（Ａ））においては、対照群とＪＣＭ５８２８株、ＣＰ３５８５株及びＣＰ３５８６株の各投与群との間において、遊泳時間に有意な差は認められなかった。一方、投与開始から３週目の結果（図１（Ｂ））においては、対照群と比較して、ＪＣＭ５８２８株、ＣＰ３５８５株及びＣＰ３５８６株の各投与群において遊泳時間の延長が認められた。
　また、投与開始前の結果（図１（Ａ））と比べて、３週目の結果（図１（Ｂ））においては、対照群の遊泳時間が短くなっていることが確認された。これは長期の実験期間にわたる疲労の蓄積によるものであると考えられる。一方、ＪＣＭ５８２８株、ＣＰ３５８５株及びＣＰ３５８６株の各投与群においてはそのような短縮は認められなかった。これは、投与した菌体による体力向上作用及び抗疲労作用のうち一以上の作用である。
　以上の結果より、バクテロイデス・ユニフォルミスの投与により、遊泳（運動）の継続時間を延長することができ、体力の向上や体力の改善もしくは回復を促進する効果が得られることが明らかとなった。また、バクテロイデス・ユニフォルミスの投与により、継続的な活動に由来する身体の機能の低下（疲労）を抑制することができ、疲労の軽減や予防、疲労の改善もしくは回復を促進する効果が得られることが明らかとなった。
　なお、実験期間にわたって、対照群と各菌体の投与群において体重変動に有意な差異は認められなかった。

Claims (8)

  1. 　バクテロイデス・ユニフォルミス又はその処理物を含む、体力及び疲労耐性のうち一以上を向上するために使用される組成物。
  2. 　全身持久力、及び有酸素運動時の持久力のうち一以上を向上するために使用される、請求項１に記載の組成物。
  3. 　バクテロイデス・ユニフォルミスが、ＪＣＭ５８２８株、ＣＰ３５８５株又はＣＰ３５８６株である、請求項１又は２に記載の組成物。
  4. 　飲食品、医薬又は飼料もしくは飼料添加物である、請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。
  5. 　非ヒト動物に、バクテロイデス・ユニフォルミス又はその処理物を投与すること又は摂取させることを含む、非ヒト動物における体力及び疲労耐性のうち一以上を向上するための方法。
  6. 　全身持久力、及び有酸素運動時の持久力のうち一以上を向上するための、請求項５に記載の方法。
  7. 　バクテロイデス・ユニフォルミスＣＰ３５８５株。
  8. 　バクテロイデス・ユニフォルミスＣＰ３５８６株。
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