WO2018016826A1 - 3-o-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반을 포함하는 인지 기능 개선용 조성물 - Google Patents

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WO2018016826A1
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WO
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galloyl
pentahydroxyflavan
weight
pentahydroxyflavane
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PCT/KR2017/007664
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홍용덕
최민식
조시영
김정기
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(주)아모레퍼시픽
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 

Definitions

  • This specification includes 3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavan (3-O-galloyl -3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavan) It relates to a composition for improving cognitive function.
  • Neuronal dysfunction and damage can be caused by proteins that are prone to aggregation, and many neurological diseases are characterized by such conditions.
  • Such nervous system diseases include diseases such as Alzheimer's disease.
  • Alzheimer's disease is a progressive neurodegenerative disorder that results in impairment of cognitive abilities, memory loss, irreversible memory loss, disorientation, impaired discrimination, depression, forgetfulness and impaired speech ability as nerve cells in the brain are damaged.
  • Alzheimer's disease is the third leading cause of aging-related mortality after cerebrovascular disease and cancer, and the onset of illness is more than 10 years.
  • the most representative cause of Alzheimer's disease to date is abnormal aggregation of beta-amyloid (also known as ⁇ -amyloid, A ⁇ , amyloid beta). That is, beta-amyloid normally present in the brain abnormally aggregates to form amyloid plaques (A ⁇ plaque), which causes nerve cells and nerve cell junctions to be damaged and develop.
  • beta-amyloid also known as ⁇ -amyloid, A ⁇ , amyloid beta
  • the present invention relates to a substance for improving cognitive function lowering derived from a natural product, and, accordingly, an object of the present invention is to provide a composition for improving cognitive function lowering comprising a post-fermented tea fraction.
  • the present invention provides 3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane (3-O-galloyl-3,3 ', isolated from post-fermented tea fractions.
  • An object of the present invention is to provide a composition for improving cognitive decline, including 5,5 ', 7-pentahydroxyflavan) as an active ingredient.
  • 3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane (3-O-galloyl-3,3 ', 5 , 5 ', 7-pentahydroxyflavan), an isomer thereof, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a prodrug thereof, a hydrate thereof, a solvate thereof, or a post-fermented tea ketone fraction comprising the same as an active ingredient, to improve cognitive decline It provides a composition for.
  • 3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane (3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavan), an isomer thereof, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a prodrug thereof, a hydrate thereof, a solvate thereof, or an effective amount of a post-fermented tea ketone fraction comprising the same, comprising administering to an individual in need thereof.
  • 3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane 3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane
  • an isomer thereof a pharmaceutically acceptable salt thereof, a prodrug thereof, a hydrate thereof, a solvate thereof, or an effective amount of a post-fermented tea ketone fraction comprising the same, comprising administering to an individual in need thereof.
  • 3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane (3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavan), an isomer thereof, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a prodrug thereof, a hydrate thereof, a solvate thereof, or a post-fermented tea ketone fraction comprising the same, for use in improving cognitive decline and preparing a therapeutic composition.
  • 3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane (3-O-galloyl-3, 3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavan), an isomer thereof, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a prodrug thereof, a hydrate thereof, a solvate thereof, or a post-fermented tea ketone fraction comprising the same.
  • the present invention provides a composition comprising a post-fermented tea ketone fraction and a composition comprising a specific compound, it can be widely used in the field of cognitive improvement and neurodegenerative disease management.
  • Figure 1 shows the results of analyzing the fermented tea extract by high performance liquid chromatography, and shows the case of passing through and without the acetone fraction.
  • Figure 2 shows the caffeine-free chloroform: methanol 10: 1 (v / v) fraction divided into 10 sub-fractions using high-performance countercurrent chromatography (HPCCC).
  • HPCCC high-performance countercurrent chromatography
  • Figure 3 shows for fractions 1 to 5 of the ten subfractions fractionated using HPCCC.
  • Figure 4 shows for fractions 6 to 10 of the 10 subfractions fractionated using HPCCC.
  • Figure 5 shows the inhibitory effect of trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane on beta-amyloid aggregation.
  • Figure 6 shows a nuclear magnetic resonance (NMR) graph of trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavan.
  • post-fermented tea includes fermented by a separate microorganism or substance other than the enzyme present in the tea leaf.
  • the "ketone fraction” includes the fractionation of a specific substance or extract using a ketone solvent or the fraction remaining, and the extraction of these with a specific solvent again.
  • Acetone is preferred although the type of ketone is any, and the fractionation method and extraction method may be any method known to those skilled in the art.
  • isomers in particular are not only optical isomers (eg, essentially pure enantiomers, essentially pure diastereomers or mixtures thereof), but also form isomers ( conformation isomers (ie, isomers that differ only by their angles of one or more chemical bonds), position isomers (especially tautomers) or geometric isomers (eg, cis-trans isomers) do.
  • essentially pure means at least about 90%, preferably at least about 95%, of a specific compound, for example enantiomers or diastereomers, when used in connection with an enantiomer or diastereomer. More preferably at least about 97% or at least about 98%, even more preferably at least about 99%, even more preferably at least about 99.5% (w / w).
  • pharmaceutically acceptable refers to the approval of a government or equivalent regulatory body for use in animals, more specifically in humans, by avoiding significant toxic effects when used in conventional medicinal dosages. It is meant to be recognized or approved, or recognized as listed in a pharmacopoeia or other general pharmacopoeia.
  • salts means salts according to one aspect of the invention that are pharmaceutically acceptable and have the desired pharmacological activity of the parent compound.
  • the salt is formed from (1) an inorganic acid such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid, or the like; Or acetic acid, propionic acid, hexanoic acid, cyclopentanepropionic acid, glycolic acid, pyruvic acid, lactic acid, malonic acid, succinic acid, malic acid, maleic acid, fumaric acid, tartaric acid, citric acid, benzoic acid, 3- (4-hydroxybenzoyl) Benzoic acid, cinnamic acid, mandelic acid, methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, 1,2-ethane-disulfonic acid, 2-hydroxyethanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, 4-chlorobenzenes
  • prodrug refers to a drug that modulates physical and chemical properties by chemically changing a drug, and itself does not exhibit physiological activity, but the action of chemical, physiological or enzymes in the body after administration. By changing to the original drug can take effect.
  • hydrate refers to a compound to which water is bound, and is a broad concept including an inclusion compound having no chemical bonding force between water and the compound.
  • solvate means a higher order compound produced between molecules or ions of a solute and molecules or ions of a solvent.
  • 3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane (3-O-galloyl-3,3 ', 5, 5 ', 7-pentahydroxyflavan), an isomer thereof, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a prodrug thereof, a hydrate thereof, a solvate thereof, or a post-fermented tea ketone fraction comprising the same as an active ingredient for improving cognitive decline
  • a composition 3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane
  • the post-fermented tea ketone fraction may be a ketone fraction for the water-insoluble extract of the post-fermented tea.
  • the 3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane is trans-3-O-galloyl-3,3 'represented by Formula 2 below. , 5,5 ', 7-pentahydroxyflavan (Trans-3-O-galloyl-3,3', 5,5 ', 7-pentahydroxyflavan).
  • the ketone fraction may be an alcohol extract of the ketone fraction.
  • the ketone is acetone, carvon, pulegone, isolongifolanone, 2-heptanone, 2-pentanone, 3-hexanone, 3-heptanone , 4-heptanone, 2-octanone, 3-octanone, 2-nonanone, 3-nonanone, 2-undecanone, 2-tridecanone, methyl isopropyl ketone, ethyl isoamyl ketone, butyl Dencetone, methylheptenone, dimethyloctenone, geranyl acetone, farnesyl acetone, 2,3-pentadione, 2,3-hexadione, 3,4-hexadione, 2,3-heptadione, amylcyclopenta Paddy, amylcyclopentenone, 2-cyclopentyl cyclopentanone, hexylcyclopentanone, 2-n-heptylcyclopentanone,
  • the alcohol may be an alcohol alone or a mixture which can be generally used in the art, preferably ethanol.
  • the present invention provides 3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavan (3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7- pentahydroxyflavan), an isomer thereof, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a prodrug thereof, a hydrate thereof, or a solvate thereof are provided as an active ingredient.
  • the 3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxy flavan is a trans-3-O-galloyl-3,3 'of the formula (2), 5,5 ', 7-pentahydroxyflavan (Trans-3-O-galloyl-3,3', 5,5 ', 7-pentahydroxyflavan).
  • 3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane or trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5, 5 ', 7-pentahydroxyflavane, isomer thereof, pharmaceutically acceptable salt thereof, prodrug, hydrate thereof, or solvate thereof is at least 0.000001% by weight, at least 0.000005% by weight, 0.00001 Or more, 0.00005 or more, 0.0001 or more, 0.0005 or more, 0.001 or more, 0.005 or more, 0.01 or more, 0.05 or more, 0.1 or more, 0.3 or more, 0.5 or more, 0.5 At least 1%, at least 1%, at least 1.5%, at least 1.8%, at least 2%, at least 2.2%, at least 2.5%, at least 2.8%, at least 3%, at least 3.2%, 3.5 Or more, 3.8 or more, 4 or more, 4.2 or more, 4.5 or more, or 4.8 or more, 5 or less,
  • the content of the post-fermented tea ketone fraction in the composition is 0.01% by weight, 0.1% by weight, 1% by weight, 5% by weight, 10% by weight, 15% by weight relative to the total weight of the composition. 20% by weight, 25% by weight, 30% by weight, 35% by weight, 40% by weight, 45% by weight, 50% by weight, 55% by weight, 60% by weight, 65% by weight Or more, 70% or more, 75% or more, 80% or more, 85% or more, 90% or more, 95% or more, 100% or less, 95% or less, 90% or less, 85 Up to 80% by weight, up to 75% by weight, up to 70% by weight, up to 65% by weight, up to 60% by weight, up to 55% by weight, up to 50% by weight, up to 45% by weight, up to 40% by weight, 35 Up to 30% by weight, up to 25% by weight, up to 20% by weight, up to 15% by weight, up to 10% by weight, up to 5% by weight, up to 1% by weight, up to 0.1%
  • the fraction is 3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavan or trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5, 5 ', 7-pentahydroxyflavane, an isomer thereof, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a prodrug thereof, a hydrate thereof, or a solvate thereof is at least 0.0001%, at least 0.0005%, at least 0.001, based on the total weight of the fraction Or more, 0.005 or more, 0.01 or more, 0.05 or more, 0.1 or more, 0.5 or more, 1 or more, 1.5 or more, 2 or more, 2.5 or more, 3 Or more, 3.5 or more, 4 or more, or 4.5 or more, 5 or less, 5 or less, 4.5 or less, 4 or less, 3.5 or less, 3 or less, 2.5 or less 2% by weight, 1.5% by weight, 1% by weight, 0.5% by weight, 0.1% by weight, 0.05% by weight, 0.01%
  • the dosage of, 5,5 ', 7-pentahydroxyflavane, an isomer thereof, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a prodrug thereof, a hydrate thereof, or a solvate thereof is at least 0.0001 g / kg / day, 0.001 g / kg / day or more, 0.01g / kg / day or more, 0.1g / kg / day or more, 1g / kg / day or more, 2g / kg / day or more, 3g / kg / day or more, 4g / kg / day or more, 5g / kg / day or more, 6g / kg / day or more, 7g / kg / day or more, 8g / kg / day or more, 9g / kg / day
  • the cognitive decline is beta amyloid ( ⁇ -amyloid) aggregation, beta amyloid plaque formation, brain-derived neurotrophic factor (BDNF) expression and DNMT1 (DNA (cytosine-5) -methyltransferase 1) may be due to any one or more selected from the group consisting of increased expression.
  • beta amyloid ⁇ -amyloid
  • BDNF brain-derived neurotrophic factor
  • DNMT1 DNA (cytosine-5) -methyltransferase 1)
  • the cognitive decline may include one or more selected from the group consisting of memory loss, cognitive decline, discrimination decline, depression, and forgetfulness.
  • the improvement may be achieved through at least one selected from the group consisting of inhibition of aggregation of beta-amyloid, degradation of aggregated beta-amyloid, enhancement of BDNF expression, and reduction of DNMT1 expression.
  • Beta-amyloid aggregation assay using the trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane As a result, Epicatechin 3-O-gallate (ECG, 1 ⁇ g / ml), a comparative substance, exhibited 17% anti-aggregation effect compared to the control without the compound.
  • the trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane exhibited a 64% aggregation inhibitory effect compared to the control.
  • beta-amyloid coagulant inhibitory effect of trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane is shown to be a good coagulant inhibitor on the result graph (see FIG. 5). It showed a good anticoagulant effect so as to be located between (phenol red, 55% anticoagulant effect) and morin (78% anticoagulant effect).
  • trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane treatment group the aggregation was reduced after 60 minutes of reaction time. It can be seen that trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane is also effective in disassembling the aggregated beta-amyloid. Therefore, it was confirmed that the trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane of the present invention can improve the cognitive decline associated with beta-amyloid. .
  • Trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxy is also used for the prevention and treatment of diseases caused by beta-amyloid aggregation (including neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease). It was confirmed that the flavan can be usefully used.
  • trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane of the present invention enhanced BDNF expression and decreased expression of DNMT1 in neurons.
  • the present invention can be usefully used for the prevention and treatment of neurodegenerative diseases such as cognitive decline and Alzheimer's disease related to decreased BDNF expression or enhanced DNMT1 expression.
  • the composition may be a pharmaceutical composition for preventing or treating neurodegenerative diseases.
  • the neurodegenerative disease is at least one selected from the group consisting of beta amyloid aggregation, beta amyloid plaque formation, decreased BDNF expression, and increased DNMT1 expression. It may be due to.
  • the neurodegenerative disease may include Alzheimer's disease and may be accompanied by symptoms including the cognitive decline.
  • compositions according to an aspect of the present invention may be administered orally, parenteral, rectal, topical, transdermal, intravenous, intramuscular, intraperitoneal, subcutaneous.
  • Formulations for oral administration may be tablets, pills, soft and hard capsules, granules, powders, granules, solutions, emulsions or pellets, but are not limited thereto. It is not.
  • Formulations for parenteral administration may be, but are not limited to, solutions, suspensions, emulsions, gels, injections, drops, suppositories, patches or sprays.
  • the formulations can be readily prepared according to conventional methods in the art and include surfactants, excipients, hydrating agents, emulsifiers, suspending agents, salts or buffers for controlling osmotic pressure, colorants, spices, stabilizers, preservatives, preservatives or Other commercially available auxiliaries may further be included.
  • the dosage or dosage of the pharmaceutical composition according to one aspect of the present invention will vary depending on the age, sex, weight, pathology and severity of the subject to be administered, the route of administration or the judgment of the prescriber. Application dose determination based on these factors is within the level of one skilled in the art and the daily dose of the active ingredient is for example 0.001 ⁇ g / kg / day to 5000 mg / kg / day, more specifically 0.0001 mg / kg / day to 15 mg / kg / day, but is not limited thereto.
  • the composition may be a food composition.
  • the formulation of the food composition is not particularly limited, but may be, for example, formulated into tablets, granules, pills, powders, liquids such as drinks, caramels, gels, bars, tea bags, and the like.
  • the food composition of each formulation may be suitably selected by a person skilled in the art according to the formulation or purpose of use in addition to the active ingredient, and may be synergistic when applied simultaneously with other raw materials.
  • composition may be administered by various methods such as simple ingestion, drinking, injection administration, spray administration or squeeze administration.
  • the dosage determination of the active ingredient is within the level of those skilled in the art, and its daily dosage may be, for example, 0.0001 mg / kg / day to 15 mg / kg / day.
  • the present invention is not limited thereto and may vary depending on various factors such as age, health condition, complications, etc. of the subject to be administered.
  • Food composition for example, a variety of food products such as chewing gum, caramel products, candy, ice cream, confectionery, beverage products such as soft drinks, mineral water, alcoholic beverages, vitamins and minerals Functional foods.
  • food products such as chewing gum, caramel products, candy, ice cream, confectionery
  • beverage products such as soft drinks, mineral water, alcoholic beverages, vitamins and minerals Functional foods.
  • the food composition according to an aspect of the present invention is a flavor, such as various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and natural flavors, colorants and enhancers (such as cheese, chocolate), pectic acid and its Salts, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonation agents used in carbonated beverages, and the like.
  • the food compositions according to one aspect of the present invention may include a pulp for producing natural fruit juice and fruit juice beverage and vegetable beverage. These components can be used independently or in combination. The proportion of such additives is not so critical but is typically included in the range of 0 to about 50 parts by weight per 100 parts by weight of the composition according to one aspect of the invention.
  • the water content was adjusted to 40 wt% by adding water to the green tea made from green tea ( Camellia sinensis var. Yabukita ) leaves.
  • Bacillus subtillis Bacillus subtillis 5 ⁇ 10 6 cfu / g was inoculated, fermented for 3 days at 50 °C and then fermented at 80 °C 4 days.
  • the fermented tea was dried to 4 to 6% by weight of water with hot air of 70 ° C to 80 ° C, and then aged at 10 ° C for 100 days.
  • the aged tea sample was ground for 15 seconds and filtered through a stainless steel sieve of mesh size 1 mm. Thereafter, the pulverized 50mg was added to 1.5ml Eppendorf tube, 1ml of deionized water was added, stirred at a constant speed for 30 minutes in a 60 ° C constant temperature water bath, and centrifuged for 15 minutes at 25 ° C 13,000rpm. Only insoluble portions of the dried fermented green tea extract were separated.
  • 150 g of the post-fermented tea sample was fractionated with acetone to remove catechin derivatives and caffeine as much as possible, and to obtain a soluble substance in which flavonoids were concentrated.
  • 40 g of the acetone solubles were first eluted using silica gel column chromatography with a mixture of chloroform: methanol in the order of 10: 1, 5: 1, 1: 1 (v / v) to obtain each fraction. .
  • trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavan Trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7- pentahydroxyflavan, C 22 H 18 O 10 , molecular weight 442.0900
  • the structure of the separated compound is shown below.
  • the beta-amyloid aggregation inhibitory effect of the trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane was confirmed by a fluorescence assay (ThioflavinT assay).
  • beta-amyloid (A ⁇ 1-42, American Peptide Co, USA) was used at a concentration of 5 ⁇ M, and stored at -80 ° C before use. Morin (100 ⁇ M), Phenol Red (100 ⁇ M), Epicatechin 3-O-gallate (Epicatechin 3-O-gallate, ECG, 1 ⁇ g / ml), trans-3-O-galloyl-3 Each of 3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane (1 ⁇ g / ml) was diluted to adjust to this concentration.
  • trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavan treated group the trans-3-O- was reduced in the form of reduced aggregation after 60 minutes of reaction time.
  • Galoyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane was found to be effective in disassembling aggregated beta-amyloid.
  • SH-SY5Y (Neuroblastoma, Korea Cell Line Bank) cell line was seeded at 6 ⁇ well plate (FALCON) at 2 ⁇ 10 6 per well, incubated in 37 ° C., 5% CO 2 incubator for 24 hours, and then GCG 10 ⁇ M, EGCG 10 ⁇ M, conventional green tea extract (GTE) 10 ⁇ g / ml, trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane 10 ⁇ g / ml
  • GTE green tea extract
  • 5-Aza-2'deoxycytidine 5-Aza, Sigma-aldrich
  • RNA extraction kit RNeasy mini kit, Quiagen
  • TECAN ultraviolet detector
  • 1 ⁇ g of mRNA was synthesized using complementary DNA using a kit (SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit, Thermofisher scientific).
  • 1.5 1 ⁇ g of complementary DNA was taken and subjected to real-time quantitative chain polymerization using Taqman probe (Life technology) and Quantitect Probe PCR Kit (Quiagen).
  • GAPDH a housekeeping gene, was used as a reference mRNA.
  • a soft capsule sheet was prepared at a ratio of 66 parts by weight of gelatin, 24 parts by weight of glycerine, and 10 parts by weight of sorbitol solution and filled with the filler to prepare a soft capsule.
  • trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane 3 mg, lactose 440 mg, corn starch 450 mg and magnesium stearate 2 mg is mixed and soft Prepare capsule fill solution. Then, the soft capsule sheet was prepared as described above and the filling liquid was filled to prepare a soft capsule.
  • trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane 3 mg vitamin E 15 mg, vitamin C 15 mg, galactooligosaccharide 259 mg, lactose 60 mg, Maltose 140 mg was mixed and granulated using a fluidized bed dryer, and then 8 mg of sugar ester was added. The composition was compressed into tablets in a conventional manner.
  • 400 ml of purified water was added thereto, and each bottle was filled with 200 ml. After filling the bottle sterilized for 4 to 5 seconds at 30 °C to prepare a drink.
  • vitamin E 9mg, vitamin C 9mg, 250mg anhydrous glucose and starch 550mg was mixed, and formed into granules by using a fluidized bed granulator, and then filled into a granule Was prepared.
  • trans-3-O-galloyl-3,3 ', 5,5', 7-pentahydroxyflavane 9 mg of vitamin E, 9 mg of vitamin C, 250 mg of anhydrous glucose, and 550 mg of starch were used.
  • the granules were prepared by mixing, molding into granules using a fluidized bed granulator, and filling into fabrics.
  • Injectables were prepared by conventional methods according to the compositions set forth in Table 3 below.
  • Vitamin A Acetate 70 ⁇ g Vitamin E 1.0 mg Vitamin B1 0.13 mg Vitamin B2 0.15 mg Vitamin B6 0.5 mg Vitamin B12 0.2 ⁇ g Vitamin c 10 mg Biotin 10 ⁇ g Nicotinic acid amide 1.7 mg Folic acid 50 ⁇ g Calcium Pantothenate 0.5 mg Mineral mixture Ferrous sulfate 1.75 mg Zinc oxide 0.82 mg Magnesium carbonate 25.3 mg Potassium phosphate monobasic 15 mg Dicalcium Phosphate 55 mg Potassium citrate 90 mg Calcium carbonate 100 mg Magnesium chloride 24.8 mg
  • composition ratio of the vitamin and mineral mixture is a composition that is relatively suitable for health foods as an example, the composition ratio may be arbitrarily modified, and the above ingredients are mixed according to a conventional health food manufacturing method, and then the conventional method. According to the health food composition can be used.
  • the remaining amount of purified water was added to a total volume of 900 ml, and the above components were mixed according to a conventional health beverage manufacturing method, and then stirred and heated at 85 ° C. for about 1 hour, and then the resulting solution was filtered. Obtained in a sterilized 2 liter container, sterilized sealed, and then refrigerated to prepare a healthy beverage.

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Abstract

본 발명은 일 측면에서 후발효차 케톤 분획물을 유효성분으로 포함하는 인지기능 저하 개선용 조성물에 관한 것이고, 다른 측면에서 후발효차 케톤 분획물로부터 분리한 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 (3-O-galloyl-3,3',5,5',7-pentahydroxyflavan), 이의 이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물을 유효성분으로 포함하는 인지기능 저하 개선용 조성물에 관한 것이며, 본 발명의 일 측면을 이용하여 베타-아밀로이드의 응집을 효과적으로 억제할 수 있고, BDNF 발현 및 DNMT1 발현을 조절할 수 있으므로, 본 발명은 일 측면에서 인지기능 저하와 관련된 다양한 분야에 활용될 수 있을 것이다.

Description

3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반을 포함하는 인지 기능 개선용 조성물
본 명세서는 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반(3-O-galloyl -3,3',5,5',7-pentahydroxyflavan)을 포함하는 인지 기능 개선용 조성물에 관한 것이다.
생활수준의 향상과 의료산업의 발달로 암을 비롯한 난치성 질환의 치료가 가능해 지면서 인간의 수명은 증가하였으나, 그에 따른 인구의 노령화는 만성 퇴행성 신경질환의 증가를 야기하였고, 이는 오히려 삶의 질을 상대적으로 저하시키고 있다. 신경세포 기능장애 및 손상은 응집되기 쉬운 단백질에 의해 유발될 수 있고, 다수의 신경계 질환은 그러한 용태를 특징으로 한다. 이와 같은 신경계 질환은 알츠하이머병과 같은 질환을 포함한다.
알츠하이머병이란, 두뇌의 신경 세포가 손상되면서 인지능력 감퇴, 기억력 감퇴, 비가역적 기억손실, 방향감각 상실, 식별력 감퇴, 우울증, 건망증 및 언어능력 손상 장애 등의 증상을 나타내는 진행성 신경퇴행성 질병이다. 알츠하이머병은 뇌혈관 질환, 암 다음으로 3 번째로 높은 노화에 관련된 사망원인이며, 발생 시 평균 유병기간이 10년 이상이 되므로 보호자의 정신적, 경제적 부담과 더불어 사회적 부담이 증가하고 있다. 현재까지 알려진 알츠하이머병의 가장 대표적인 원인으로는 베타-아밀로이드(β-amyloid, Aβ, 아밀로이드 베타라고도 한다)의 비정상적인 응집(aggregation)을 들 수 있다. 즉, 뇌 내 정상적으로 존재하던 베타-아밀로이드가 비정상적으로 응집하여 아밀로이드 플라크(Aβ plaque)를 형성하고, 이로 인해 신경세포 및 신경세포연접이 손상되어 발병하는 것이다.
노인인구 증가에 따라 노화, 퇴행성 신경질환 및 뇌질환에 대한 치료 및 방지에 대한 필요성이 증가하고 있고, 그에 따라 이러한 노화나 질환의 예방, 치료, 완화, 및 개선 등에 대한 연구가 꾸준하게 계속되고 있으나, 기존의 물질들은 효과가 불명확하거나 부작용을 유발하는 등 문제가 있어 이러한 문제를 해결할 천연물 유래의 치료제 개발이 필요한 실정이다.
본 발명은 일 측면에서, 천연물 유래의 인지기능 저하 개선용 물질에 관한 것이고, 그에 따라 후발효차 분획물을 포함하는 인지기능 저하 개선용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 다른 측면에서, 후발효차 분획물로부터 분리한 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반(3-O-galloyl-3,3',5,5',7-pentahydroxyflavan)을 유효성분으로 포함하는 인지기능 저하 개선용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 과제를 해결하기 위하여 본 발명은 일 측면에서, 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반(3-O-galloyl-3,3',5,5',7-pentahydroxyflavan), 이의 이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물, 또는 이를 포함하는 후발효차 케톤 분획물을 유효성분으로 포함하는 인지기능 저하 개선용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 일 측면에서, 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반(3-O-galloyl-3,3',5,5',7-pentahydroxyflavan), 이의 이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물, 또는 이를 포함하는 후발효차 케톤 분획물의 유효량을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 것을 포함하는 인지기능 저하 개선 및 치료 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 다른 측면에서, 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반(3-O-galloyl-3,3',5,5',7-pentahydroxyflavan), 이의 이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물, 또는 이를 포함하는 후발효차 케톤 분획물을 인지기능 저하 개선 및 치료용 조성물의 제조에 사용하는 용도를 제공한다.
아울러, 본 발명은 다른 측면에서, 인지기능 저하 개선 및 치료를 위한 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반(3-O-galloyl-3,3',5,5',7-pentahydroxyflavan), 이의 이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물, 또는 이를 포함하는 후발효차 케톤 분획물을 제공한다.
본 발명은 일측면에서, 후발효차 케톤 분획물을 포함하는 조성물 및 특정 화합물을 포함하는 조성물을 제공하여, 인지기능 개선 관련 분야 및 신경퇴화성 질병 관리 분야에 널리 활용될 수 있다.
도 1은 후발효차 추출물을 고성능 액체 크로마토그래피로 분석한 결과로서, 아세톤 분획을 거친 경우와 거치지 않은 경우를 나타낸 것이다.
도 2는 카페인이 제거된 클로로포름:메탄올 10:1 (v/v) 분획물을 대용량 고성능 역류크로마토그래피(high-performance countercurrent chromatography, HPCCC)를 이용하여 10개의 하위 분획을 나눈 것을 나타낸 것이다.
도 3은 HPCCC를 이용하여 분획한 상기 10개의 하위 분획 중 분획 1 내지 5에 대하여 나타낸 것이다.
도 4는 HPCCC를 이용하여 분획한 상기 10개의 하위 분획 중 분획 6 내지 10에 대하여 나타낸 것이다.
도 5는 베타-아밀로이드 응집에 대한 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반의 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 6은 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반의 핵자기공명(NMR) 그래프를 나타낸 것이다.
이하, 본 명세서를 상세히 설명한다.
본 명세서에서 “후발효차”는 차 잎에 존재하는 효소가 아닌 별도의 미생물 또는 물질에 의하여 발효시킨 것을 포함한다.
본 명세서에서 “케톤 분획물”은 케톤 용매를 이용하여 특정 물질이나 추출물을 분획한 것 또는 분획하고 남은 것, 그리고 이들을 특정 용매로 다시 추출한 것을 포함한다. 상기 케톤의 종류는 불문하나 아세톤이 바람직하며, 분획 방법 및 추출방법은 당업계의 통상의 기술자에게 알려진 어떤 방법도 가능하다.
본 명세서에서 "이성질체"는 특히 광학 이성질체(optical isomers)(예를 들면, 본래 순수한 거울상 이성질체(essentially pure enantiomers), 본래 순수한 부분 입체 이성질체(essentially pure diastereomers) 또는 이들의 혼합물)뿐만 아니라, 형태 이성질체(conformation isomers)(즉, 하나 이상의 화학 결합의 그 각도만 다른 이성질체), 위치 이성질체(position isomers)(특히, 호변이성체(tautomers)) 또는 기하 이성질체(geometric isomers)(예컨대, 시스-트랜스 이성질체)를 포함한다.
본 명세서에서 "본래 순수(essentially pure)"란, 예컨대 거울상 이성질체 또는 부분 이성질체와 관련하여 사용한 경우, 거울상 이성질체 또는 부분 이성질체를 예로 들 수 있는 구체적인 화합물이 약 90% 이상, 바람직하게는 약 95% 이상, 보다 바람직하게는 약 97% 이상 또는 약 98% 이상, 보다 더 바람직하게는 약 99% 이상, 보다 더욱 더 바람직하게는 약 99.5% 이상(w/w) 존재하는 것을 의미한다.
본 명세서에서 "약학적으로 허용 가능"이란 통상의 의약적 복용량(medicinal dosage)으로 이용할 때 상당한 독성 효과를 피함으로써, 동물, 더 구체적으로는 인간에게 사용할 수 있다는 정부 또는 이에 준하는 규제 기관의 승인을 받을 수 있거나 승인 받거나, 또는 약전에 열거되거나 기타 일반적인 약전에 기재된 것으로 인지되는 것을 의미한다.
본 명세서에서 "약학적으로 허용 가능한 염"은 약학적으로 허용 가능하고 모 화합물(parent compound)의 바람직한 약리 활성을 갖는 본 발명의 일측면에 따른 염을 의미한다. 상기 염은 (1) 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등과 같은 무기산으로 형성되거나; 또는 아세트산, 프로파이온산, 헥사노산, 시클로펜테인프로피온산, 글라이콜산, 피루브산, 락트산, 말론산, 숙신산, 말산, 말레산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 3-(4-히드록시벤조일) 벤조산, 신남산, 만델산, 메테인설폰산, 에테인설폰산, 1,2-에테인-디설폰산, 2-히드록시에테인설폰산, 벤젠설폰산, 4-클로로벤젠설폰산, 2-나프탈렌설폰산, 4-톨루엔설폰산, 캄퍼설폰산, 4-메틸바이시클로 [2,2,2]-oct-2-엔-1-카르복실산, 글루코헵톤산, 3-페닐프로파이온산, 트리메틸아세트산, tert-부틸아세트산, 라우릴 황산, 글루콘산, 글루탐산, 히드록시나프토산, 살리실산, 스테아르산, 뮤콘산과 같은 유기산으로 형성되는 산 부가염(acid addition salt); 또는 (2) 모 화합물에 존재하는 산성 프로톤이 치환될 때 형성되는 염을 포함할 수 있다.
본 명세서에서 “프로드럭(prodrug)”은 어떤 약물을 화학적으로 변화시켜 물리적, 화학적 성질을 조절한 약물을 의미하며, 그 자체는 생리 활성을 나타내지 않지만 투여 후 체내에서 화학적, 생리학적 혹은 효소의 작용에 의해 원래의 약물로 바뀌어 약효를 발휘할 수 있다.
본 명세서에서 “수화물(hydrate)”은 물이 결합되어 있는 화합물을 의미하며, 물과 화합물 사이에 화학적인 결합력이 없는 내포 화합물을 포함하는 광범위한 개념이다.
본 명세서에서 “용매화물”은 용질의 분자나 이온과 용매의 분자나 이온 사이에 생긴 고차의 화합물을 의미한다.
본 발명은 일측면에서, 하기 화학식 1로 나타나는 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반(3-O-galloyl-3,3',5,5',7-pentahydroxyflavan), 이의 이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물, 또는 이를 포함하는 후발효차 케톤 분획물을 유효성분으로 포함하는 인지기능 저하 개선용 조성물을 제공한다.
Figure PCTKR2017007664-appb-C000001
일 구현예에 의하면, 상기 후발효차 케톤 분획물은 후발효차의 수불용성 추출물에 대한 케톤 분획물일 수 있다.
다른 구현예에 의하면, 상기 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반은 하기 화학식 2로 나타나는 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반(Trans-3-O-galloyl-3,3',5,5',7-pentahydroxyflavan)일 수 있다.
Figure PCTKR2017007664-appb-C000002
다른 구현예에 의하면, 상기 케톤 분획물은 케톤 분획물의 알코올 추출물일 수 있다.
다른 구현예에 의하면, 상기 케톤은 아세톤, 카르본(carvon), 풀레곤(pulegone), 이소론기폴라논(isolongifolanone), 2-헵타논, 2-펜타논, 3-헥사논, 3-헵타논, 4-헵타논, 2-옥타논, 3-옥타논, 2-노나논, 3-노나논, 2-운데카논, 2-트리데카논, 메틸이소프로필케톤, 에틸이소아밀케톤, 부틸리덴 아세톤, 메틸헵테논, 디메틸옥테논, 게라닐 아세톤, 파르네실 아세톤, 2,3-펜타디온, 2,3-헥사디온, 3,4-헥사디온, 2,3-헵타디온, 아밀시클로펜타논, 아밀시클로펜테논, 2-시클로펜틸 시클로펜타논, 헥실시클로펜타논, 2-n-헵틸시클로펜타논, cis-쟈스몬, 디히드로쟈스몬, 메틸코릴론, 2-tert-부틸시클로헥사논, p-tert-부틸시클로헥사논, 2-sec-부틸시클로헥사논, 셀러리 케톤, 크립톤, p-tert-펜틸시클로헥사논, 메틸시클로시트론, 네론, 4-시클로헥실-4-메틸-2-펜타논, 옥사이드 케톤, 에목시 프론, 메틸나프틸케톤, α-메틸아니살아세톤, 아니실 아세톤, p-메톡시 페닐 아세톤, 벤질리덴 아세톤, p-메톡시아세토페논, p-메틸아세토페논, 프로피오페논, 아세토페논, α-다이나스콘(Dynascone), 일리톤(lritone), 아이오논(ionone), 슈도아이오논(Pseudoionone), 메틸아이오논, 메틸일리톤, 2,4-디-tert-부틸시클로헥사논, 알릴아이오논, 2-아세틸-3,3-디메틸노르보르난, 베르베논, 펜콘(fenchon), 시클로펜타데카논, 시클로헥사데세논 등을 포함할 수 있고, 당업계에서 일반적으로 사용될 수 있는 용매로서의 케톤류 및 이들의 혼합물을 모두 포함할 수 있으며, 바람직하게는 아세톤일 수 있다.
또 다른 구현예에 의하면, 상기 알코올은 당업계에서 일반적으로 사용될 수 있는 알코올 단독 또는 혼합물일 수 있으며, 바람직하게는 에탄올일 수 있다.
본 발명은 다른 측면에서, 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 (3-O-galloyl-3,3',5,5',7-pentahydroxyflavan), 이의 이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물을 유효성분으로 포함하는 인지기능 저하 개선용 조성물을 제공한다.
일구현예에 의하면, 상기 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시 플라반은 상기 화학식 2의 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 (Trans-3-O-galloyl-3,3',5,5',7-pentahydroxyflavan)일 수 있다.
다른 구현예에 의하면, 상기 조성물 내의 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 또는 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반, 이의 이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물은 상기 조성물 총중량 기준으로 0.000001중량%이상, 0.000005중량%이상, 0.00001중량%이상, 0.00005중량%이상, 0.0001중량%이상, 0.0005중량%이상, 0.001중량%이상, 0.005중량%이상, 0.01중량%이상, 0.05중량%이상, 0.1중량%이상, 0.3중량%이상, 0.5중량%이상, 1중량%이상, 1.5중량%이상, 1.8중량%이상, 2중량%이상, 2.2중량%이상, 2.5중량%이상, 2.8중량%이상, 3중량%이상, 3.2중량%이상, 3.5중량%이상, 3.8중량%이상, 4중량%이상, 4.2중량%이상, 4.5중량%이상, 또는 4.8중량%이상이거나, 5중량%이하, 4.8중량%이하, 4.5중량%이하, 4.2중량%이하, 3.8중량%이하, 3.5중량%이하, 3.2중량%이하, 3중량%이하, 2.8중량%이하, 2.5중량%이하, 2.2중량%이하, 2중량%이하, 1.8중량%이하, 1.5중량%이하, 1.2중량%이하, 1중량%이하, 0.5중량%이하, 0.3중량%이하, 0.1중량%이하, 0.05중량%이하, 0.01중량%이하, 0.005중량%이하, 0.001중량%이하, 0.0005중량%이하, 0.0001중량%이하, 0.00005중량%이하, 0.00001중량%이하, 또는 0.000005중량%이하일 수 있다. 바람직하게는 0.000001 내지 5 중량%이하일 수 있다.
다른 구현예에 의하면, 상기 조성물 내 후발효차 케톤 분획물의 함량은 상 기 조성물 총중량 대비 0.01중량%이상, 0.1중량%이상, 1중량%이상, 5중량%이상, 10중량%이상, 15중량%이상, 20중량%이상, 25중량%이상, 30중량%이상, 35중량%이상, 40중량%이상, 45중량%이상, 50중량%이상, 55중량%이상, 60중량%이상, 65중량%이상, 70중량%이상, 75중량%이상, 80중량%이상, 85중량%이상, 90중량%이상, 또는 95중량%이상이거나, 100중량%이하, 95중량%이하, 90중량%이하, 85중량%이하, 80중량%이하, 75중량%이하, 70중량%이하, 65중량%이하, 60중량%이하, 55중량%이하, 50중량%이하, 45중량%이하, 40중량%이하, 35중량%이하, 30중량%이하, 25중량%이하, 20중량%이하, 15중량%이하, 10중량%이하, 5중량%이하, 1중량%이하, 0.1중량%이하, 또는 0.05중량%이하일 수 있다. 바람직하게는 0.01 중량% 내지 100 중량%일 수 있다.
다른 구현예에 의하면, 상기 분획물은 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 또는 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반, 이의 이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물이 분획물 총중량을 기준으로 0.0001중량%이상, 0.0005중량%이상, 0.001중량%이상, 0.005중량%이상, 0.01중량%이상, 0.05중량%이상, 0.1중량%이상, 0.5중량%이상, 1중량%이상, 1.5중량%이상, 2중량%이상, 2.5중량%이상, 3중량%이상, 3.5중량%이상, 4중량%이상, 또는 4.5중량%이상이거나, 5중량%이하, 4.5중량%이하, 4중량%이하, 3.5중량%이하, 3중량%이하, 2.5중량%이하, 2중량%이하, 1.5중량%이하, 1중량%이하, 0.5중량%이하, 0.1중량%이하, 0.05중량%이하, 0.01중량%이하, 0.005중량%이하, 0.001중량%이하, 또는 0.0005중량%이하일 수 있다. 바람직하게는 0.0001 중량% 내지 5 중량% 포함된 것일 수 있다.
다른 구현예에 의하면, 상기 조성물의 투여에 의한 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 또는 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반, 이의 이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물의 투여량은 0.0001g/kg/일 이상, 0.001g/kg/일 이상, 0.01g/kg/일 이상, 0.1g/kg/일 이상, 1g/kg/일 이상, 2g/kg/일 이상, 3g/kg/일 이상, 4g/kg/일 이상, 5g/kg/일 이상, 6g/kg/일 이상, 7g/kg/일 이상, 8g/kg/일 이상, 9g/kg/일 이상, 10g/kg/일 이상, 11g/kg/일 이상, 12g/kg/일 이상, 13g/kg/일 이상, 또는 14g/kg/일 이상이거나, 15g/kg/일 이하, 14g/kg/일 이하, 13g/kg/일 이하, 12g/kg/일 이하, 11g/kg/일 이하, 10g/kg/일 이하, 9g/kg/일 이하, 8g/kg/일 이하, 7g/kg/일 이하, 6g/kg/일 이하, 5g/kg/일 이하, 4g/kg/일 이하, 3g/kg/일 이하, 2g/kg/일 이하, 1g/kg/일 이하, 0.1g/kg/일 이하, 0.01g/kg/일 이하, 0.001g/kg/일 이하, 또는 0.0005g/kg/일 이하일 수 있다. 바람직하게는 0.0001g/kg/일 내지 15mg/kg/일 일 수 있다.
다른 구현예에 의하면, 상기 인지기능 저하는 베타 아밀로이드(β-amyloid)의 응집(aggregation), 베타 아밀로이드 플라크(plaque) 형성, 뇌유래신경성장인자(brain-derived neurotrophic factor, BDNF) 발현 저하 및 DNMT1(DNA (cytosine-5)-methyltransferase 1) 발현 증가로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상에 기인한 것일 수 있다.
또 다른 구현예에 의하면, 상기 인지기능 저하는 기억력 감퇴, 인지 감퇴, 식별력 감퇴, 우울증, 및 건망증으로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상을 포함하는 것일 수 있다.
또 다른 구현예에 의하면, 상기 개선은 베타-아밀로이드의 응집 억제, 응집된 베타-아밀로이드의 분해, BDNF 발현 증진 및 DNMT1 발현 감소로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 통해 이루는 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따른, 상기 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반을 이용하여 베타-아밀로이드 응집 평가(beta-Amyloid aggregation assay)를 실시한 결과, 비교대상물질인 에피카테킨 3-O-갈레이트(Epicatechin 3-O-gallate, ECG, 1μg/ml)는 화합물을 처리하지 않은 대조군(positive control)에 비해 17%의 응집억제 효과를 나타내었고, 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반은 대조군에 비해 64%의 응집억제 효과를 나타내었다. 특히, 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반의 베타-아밀로이드 응집억제 효과는 결과 그래프(도 5 참조)상 우수한 응집억제제로 알려진 페놀레드(phenol red, 55%의 응집억제 효과)와 모린(morin, 78%의 응집억제 효과) 사이에 위치할 만큼 우수한 응집억제 효과를 나타내었다. 아울러, 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 처리군에서, 반응시간 60분 후 응집(aggregation)이 감소하는 양상을 보이는 것으로 보아, 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반은 응집된 베타-아밀로이드의 분해(disassemble)에도 효과가 있는 것을 알 수 있다. 따라서, 본 발명의 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반을 이용하여 베타-아밀로이드와 관계된 인지기능 저하를 개선시킬 수 있음을 확인하였다. 또한, 베타-아밀로이드 응집에 기인하는 질병(알츠하이머병 등의 신경퇴화성 질병 포함)의 예방 및 치료에 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반을 유용하게 사용할 수 있음을 확인하였다.
또한, 본원발명의 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반은 신경세포에서 BDNF 발현을 증진시키고 DNMT1의 발현을 저하시켰다. 즉, BDNF 발현 감소 또는 DNMT1 발현 증진과 관계된 인지기능 저하, 알츠하이머병 등의 신경퇴화성 질환의 예방 및 치료에 본원발명을 유용하게 활용할 수 있음을 규명한 것이다.
본 발명의 또 다른 측면에 있어서, 상기 조성물은 신경퇴화성 질병을 예방 또는 치료하기 위한 약학 조성물일 수 있다.
일구현예에 의하면, 상기 신경퇴화성 질병은 베타 아밀로이드(β-amyloid)의 응집(aggregation), 베타 아밀로이드의 플라크(plaque) 형성, BDNF 발현 저하 및 DNMT1 발현 증가로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상에 기인한 것일 수 있다.
다른 구현예에 의하면, 상기 신경퇴화성 질병은 알츠하이머병을 포함할 수 있고, 상기 인지기능 저하를 포함하는 증상을 수반하는 것일 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 상기 약학 조성물은 경구, 비경구, 직장, 국소, 경피, 정맥 내, 근육 내, 복강 내, 피하 등으로 투여될 수 있다. 경구 투여를 위한 제형은 정제(錠劑), 환제(丸劑), 연질 및 경질 캅셀제, 과립제(顆粒劑), 산제, 세립제, 액제, 유탁제(乳濁濟) 또는 펠렛제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 비경구 투여를 위한 제형은 용액제, 현탁제, 유액제, 겔, 주사제, 점적제, 좌제(坐劑), 패취 또는 분무제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 제형은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 용이하게 제조될 수 있으며, 계면 활성제, 부형제, 수화제, 유화 촉진제, 현탁제, 삼투압 조절을 위한 염 또는 완충제, 착색제, 향신료, 안정화제, 방부제, 보존제 또는 기타 상용하는 보조제를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 상기 약학 조성물의 적용량 또는 투여량은 투여 받을 대상의 연령, 성별, 체중, 병리 상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 적용량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 유효성분의 1일 투여 용량은 예를 들어 0.001μg/kg/일 내지 5000mg/kg/일, 보다 구체적으로는 0.0001mg/kg/일 내지 15 mg/kg/일이 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또 다른 구현예에 의하면, 상기 조성물은 식품 조성물일 수 있다.
상기 식품 조성물의 제형은 특별히 한정되지 않으나, 예를 들어, 정제, 과립제, 환제, 분말제, 드링크제와 같은 액제, 캐러멜, 겔, 바, 티백 등으로 제형화될 수 있다. 각 제형의 식품 조성물은 유효 성분 이외에 해당 분야에서 통상적으로 사용되는 성분들을 제형 또는 사용 목적에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승 효과가 일어날 수 있다.
상기 조성물은 단순 섭취, 음용, 주사 투여, 스프레이 투여 또는 스퀴즈 투여 등 다양한 방법으로 투여될 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 식품 조성물에 있어서, 상기 유효 성분의 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 0.0001mg/kg/일 내지 15 mg/kg/일이 될 수 있으나, 이에 제한되지 않으며, 투여하고자 하는 대상의 연령, 건강 상태, 합병증 등 다양한 요인에 따라 달라질 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 식품 조성물은, 예를 들어, 츄잉껌, 캐러멜 제품, 캔디류, 빙과류, 과자류 등의 각종 식품류, 청량 음료, 미네랄 워터, 알코올 음료 등의 음료 제품, 비타민이나 미네랄 등을 포함한 건강기능성 식품류일 수 있다.
상기 외에, 본 발명의 일 측면에 따른 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 증진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 일측면에 따른 식품 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 포함할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않으나 본 발명의 일측면에 따른 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 50 중량부의 범위에서 포함되는 것이 일반적이다.
이하, 실시예, 실험예, 및 제형예를 들어 본 명세서의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 예는 본 명세서에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 명세서의 범주 및 범위가 하기 예에 의해 제한되는 것은 아니다.
<실시예 1> 후발효차 시료의 제조
녹차(Camellia sinensis var. Yabukita) 잎으로 만든 녹차에 물을 첨가하여 수분 함량을 40중량%으로 조정하였다. 여기에 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtillis) 5×106cfu/g을 접종하고, 50℃에서 3일간 발효시킨 후 80℃에서 4일간 발효시켰다. 발효된 차를 70℃ 내지 80℃의 열풍으로 수분 함량 4중량% 내지 6중량%까지 건조시킨 후, 10℃에서 100일간 숙성하였다.
상기 숙성된 차 시료를 15초 동안 분쇄하고, 메쉬 사이즈 1mm의 스테인리스 체로 걸렀다. 이후 분쇄된 50mg을 1.5ml Eppendorf tube 넣고 1ml의 탈이온수를 첨가하여 60℃ 항온 수조에서 30분간 일정 속도로 교반한 후, 25℃ 13,000rpm에서 15분간 원심분리하였다. 건조시킨 발효 녹차 추출물에서 물에 녹지 않는 부분만을 분리하였다.
<실시예 2> 분획물 수득 및 화합물 분리
상기 후발효차 시료 150g을 아세톤으로 분획하여 카테킨 유도체 및 카페인을 가능한한 제거하고 플라보노이드가 농축된 가용물을 수득하였다. 상기 아세톤 가용물 40 g에 대해서 일차적으로 실리카겔 컬럼크로마토그래피를 이용하여, 클로로포름:메탄올의 혼합물을 용매로 하여 10:1, 5:1, 1:1 (v/v) 순으로 용출하여 각 분획을 얻었다.
여기서, 클로로포름:메탄올 10:1 (v/v) 분획 12 g을 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC, Waters Alliance 2695 system, Waters, USA)로 분석한 결과, 상기와 같이 아세톤으로 분획하지 않은 경우 여전히 카페인이 주화합물로 존재하고 있었고, 상기와 같이 아세톤을 이용하여 분획한 후에는 카페인이 제거되었음을 확인하였다(도 1).
카페인이 제거된 클로로포름:메탄올 10:1 (v/v) 분획물 8.9 g을 대용량 고성능 역류크로마토그래피(high-performance countercurrent chromatography, HPCCC,Dynamic Extractions Ltd, UK)를 이용하여 분획하였다. 이때 사용한 용매는 n-hexane-TBME(Methyl tert-butyl ether)-BuOH-MeCN-Water (0.25:3:1:1:5, v/v)이었고, 유속은 25 ml/min 이었다. 상기 조건을 이용하여 총 10개의 하위 분획을 나누었으며(도 2), 이를 HPLC로 분석하여 각 분획에 함유된 화합물 대부분이 플라보노이드(flavonoid) 계열임을 확인하였다 (도 3, 도 4).
상기 분획물로부터 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 (Trans-3-O-galloyl-3,3',5,5',7-pentahydroxyflavan, C22H18O10, 분자량 442.0900)을 분리하였고, 분리된 화합물의 구조는 아래와 같다.
[화학식 2]
Figure PCTKR2017007664-appb-I000001
1H 핵자기공명(nuclear magnetic resonance, NMR)의 경우 용매(solvent)로 methanol-d3을 사용하였고, 기기는 Bruker Advance DPX-500(BRUKER사, USA)를 사용하였으며, 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반의 NMR 데이터는 아래와 같고 구체적인 그래프는 도 6과 같다.
1H NMR d (500Hz) 7.01(s, 2H), 6.89(s, 1H), 6.76(s, 2H), 6.04(s, 1H), 5.96(s, 1H), 5.36(m, 1H), 5.13(m, 1H), 2.83(m, 1H), 2.73(m, 1H)
<실험예 1> 베타-아밀로이드 응집 효과 확인
상기 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반의 베타-아밀로이드 응집 저해 효과를 형광분석법(ThioflavinT assay)으로 확인하였다.
구체적으로, 베타-아밀로이드(Aβ1-42, American Peptide Co, USA) 5 μM의 농도로 사용하였으며, 사용 전 -80 ℃에 보관하였다. DMSO에 모린(Morin, 100μM), 페놀레드(Phenol Red, 100μM), 에피카테킨 3-O-갈레이트(Epicatechin 3-O-gallate, ECG, 1μg/ml), 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반(1μg/ml) 각각을 희석하여 상기 농도로 조절하였다. Aβ1-42 응집 억제 정도를 특정하기 위하여 0.01 M 인산소다 완충용액 92.5 ㎕에 상기 농도로 준비된 각각의 화합물을 5 ㎕씩 가하고, 5 μM의 Aβ1-42를 2.5 ㎕ 가한 뒤, 37 ℃에서 26시간 반응시킨 후, 5 μM 티오플라빈T(ThioflavinT) 2,000 ㎕를 가하여 형광분광 분석기(RF-5300PC, SHIMADZU CORPORATION, Japan)로 측정하였다.
그 결과는 도 5과 같이 나타났다. 즉, ECG 와 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반은 각각 양성 대조군(positive control, 화합물 처리 없이 베타아밀로이드만 응집시킨 것) 대비 17%, 64% 응집억제 효과를 보였다. 특히 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반의 억제효과(64%)는, 양성 억제제(positive inhibitor)로 사용된 페놀레드(55%) 와 모린(78%) 사이에 위치할 만큼 우수한 응집억제 효과를 나타내었다. 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 처리군에서, 반응시간 60분 후 응집이 감소하는 양상으로 볼 때, 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반은 응집된 베타-아밀로이드의 분해(disassemble)에도 효과가 있는 것으로 확인되었다.
<실험예 2> 세포 내 BDNF(뇌유래신경성장인자, brain-derived neurotrophic factor) 및 DNMT1(DNA (cytosine-5)-methyltransferase 1)의 발현량 확인
SH-SY5Y(신경모세포종, 한국세포주은행) 세포주를 6웰 플레이트 (well plate, FALCON)에 웰당 2X106씩 시딩하고(seeding), 24시간 동안 37도, 5% CO2 인큐베이터에 배양 후, GCG 10 μM, EGCG 10μM, 기존 녹차 추출물 (green tea extract, GTE) 10 μg/ml, 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 10 μg/ml, 양성 대조군으로 5-Aza-2'deoxycytidine (5-Aza, Sigma-aldrich) 1 μM으로 처리하여 24시간 동안 추가 배양하였다. 그런 다음 배지를 모두 제거하고 RNA 추출 키트 (RNeasy mini kit, Quiagen사)를 이용하여 RNA를 추출하였다. 추출한 mRNA를 자외선 검출기 (TECAN사)를 이용하여 정량 후 1 μg의 mRNA를 키트 (SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit, Thermofisher scientific사) 를 이용하여 상보적인 DNA로 합성하였다. 약 1 μg의 상보적인 DNA를 취하여 Taqman probe (Life technology사)와 Quantitect Probe PCR Kit (Quiagen사)를 이용하여 실시간 정량 연쇄중합반응을 진행하였다. 이를 통해 BDNF 및 DNMT1의 발현량을 확인하였다. 이때 보정 기준 mRNA로는 housekeeping gene인 GAPDH을 이용하였다.
BDNF 및 DNMT1의 발현량은 각각 표 1 및 표 2에 나타내었다.
BDNF의 상대적 발현량
구분 %
대조군(무처리군) 100
트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 10 μg/ml 123
5-Aza-2'deoxycytidine 1 μM 149
DNMT1의 상대적 발현량
구분 %
대조군(무처리군) 100
트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 10 μg/ml 81
5-Aza-2'deoxycytidine 1 μM 65
<제형예 1> 연질 캡슐
본 발명 실시예 2에 따른 후발효차 아세톤 분획물 150mg, 락토오스 440mg, 옥수수 전분 430mg 및 스테아린산 마그네슘 2mg을 혼합하여 연질 캡슐 충진액을 제조하였다. 그리고, 상기와 별도로 젤라틴 66 중량부, 글리세린 24 중량부 및 솔비톨액 10 중량부의 비율로 연질 캡슐 시트를 제조하고 상기 충진액을 충진시켜 연질 캡슐을 제조하였다.
또한, 본 발명 실시예에 따른 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 3mg, 락토오스 440mg, 옥수수 전분 450mg 및 스테아린산 마그네슘 2mg을 혼합하여 연질 캡슐 충진액을 제조한다. 그리고, 상기와 같이 연질 캡슐 시트를 제조하고 상기 충진액을 충진시켜 연질 캡슐을 제조하였다.
<제형예 2> 정제
본 발명 실시예 2에 따른 후발효차 아세톤 분획물 150mg, 비타민 E 15mg, 비타민 C 15mg, 갈락토올리고당 250㎎, 유당 60㎎ 및 맥아당 140㎎을 혼합하고 유동층 건조기를 이용하여 과립화한 후 당 에스테르(sugar ester) 8㎎을 첨가하였다. 이 조성물을 통상의 방법으로 타정하여 정제를 제조하였다.
또한, 실시예의 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 3mg, 비타민 E 15mg, 비타민 C 15mg, 갈락토올리고당 259㎎, 유당 60㎎ 및 맥아당 140㎎을 혼합하고 유동층 건조기를 이용하여 과립화한 후 당 에스테르(sugar ester) 8㎎을 첨가하였다. 이 조성물을 통상의 방법으로 타정하여 정제를 제조하였다.
<제형예 3> 드링크제
본 발명 실시예 2에 따른 후발효차 아세톤 분획물 80mg, 비타민 E 9mg, 비타민 C 9mg, 포도당 10g, 구연산 0.6g, 및 액상 올리고당 25g을 혼합한 후 정제수 400㎖를 가하여 충진하였다. 병에 충진한 후 30℃에서 4~5 초간 살균하여 드링크제를 제조하였다.
또한, 실시예의 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 0.1mg, 비타민 E 9mg, 비타민 C 9mg, 포도당 10g, 구연산 0.6g, 및 액상 올리고당 25g을 혼합한 후 정제수 400㎖를 가하여 각 병에 200㎖씩 되도록 충진하였다. 병에 충진한 후 30℃에서 4~5 초간 살균하여 드링크제를 제조하였다.
<제형예 4> 과립제
본 발명 실시예 2에 따른 후발효차 아세톤 분획물 150mg, 비타민 E 9mg, 비타민 C 9mg, 무수결정 포도당 250㎎ 및 전분 550㎎을 혼합하고, 유동층 과립기를 사용하여 과립으로 성형한 후 포에 충진하여 과립제를 제조하였다.
또한, 실시예의 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 3mg, 비타민 E 9mg, 비타민 C 9mg, 무수결정 포도당 250㎎ 및 전분 550㎎을 혼합하고, 유동층 과립기를 사용하여 과립으로 성형한 후 포에 충진하여 과립제를 제조하였다.
<제형예 5> 주사제
하기 표 3에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 주사제를 제조하였다.
배합성분 함량
실시예 2에 따른 후발효차 아세톤 분획물 100mg
주사용 멸균 증류수 적량
pH 조절제 적량
또한, 상기 후발효차 아세톤 분획물 대신, 실시예의 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반을 3mg 사용하여 주사제를 제조하였다.
<제형예 6> 건강 식품
하기 표 4에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 건강 식품을 제조하였다.
성분 함량
실시예 2에 따라 후발효차 아세톤 분획물 150㎎
비타민 혼합물
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 ㎎
비타민 B1 0.13 ㎎
비타민 B2 0.15 ㎎
비타민 B6 0.5 ㎎
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 ㎎
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 ㎎
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎
무기질 혼합물
황산제1철 1.75 ㎎
산화아연 0.82 ㎎
탄산마그네슘 25.3 ㎎
제1인산칼륨 15 ㎎
제2인산칼슘 55 ㎎
구연산칼륨 90 ㎎
탄산칼슘 100 ㎎
염화마그네슘 24.8 ㎎
또한, 상기 후발효차 아세톤 분획물 대신, 실시예의 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반을 3mg 사용하여 건강식품을 제조하였다.
상기 비타민 및 무기질 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
<제형예 7> 건강 음료
성분 함량
실시예 2에 따른 후발효차 아세톤 분획물 50㎎
구연산 1000 ㎎
올리고당 100 g
매실농축액 2 g
타우린 1 g
정제수 잔량
총 부피 900 ㎖
상기 표 5와 같이 총 부피 900㎖가 되도록 잔량의 정제수를 첨가하여 통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2리터 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관하여 건강음료를 제조하였다.
또한, 상기 후발효차 아세톤 분획물 대신, 실시예의 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반을 0.1mg 사용하여 건강음료를 제조하였다.
이상으로 본 명세서의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 명세서의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 명세서의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (15)

  1. 하기 화학식 1로 나타나는 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반(3-O-galloyl-3,3',5,5',7-pentahydroxyflavan), 이의 이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물, 또는 이를 포함하는 후발효차 케톤 분획물을 유효성분으로 포함하는 인지기능 저하 개선용 조성물
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2017007664-appb-I000002
    .
  2. 제1항에 있어서, 상기 후발효차 케톤 분획물은 후발효차의 수불용성 추출물에 대한 케톤 분획물인, 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 케톤은 아세톤인, 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반은 하기 화학식 2로 나타나는 트랜스-3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반 (Trans-3-O-galloyl-3,3',5,5',7-pentahydroxyflavan)인, 조성물
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2017007664-appb-I000003
    .
  5. 제1항에 있어서, 상기 조성물 내 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반, 이의 이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물의 함량은 상기 조성물 총중량 대비 0.000001 중량% 내지 5 중량%인, 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 조성물 내 후발효차 케톤 분획물의 함량은 상기 조성물 총중량 대비 0.01 중량% 내지 100 중량%인, 조성물.
  7. 제1항에 있어서, 상기 분획물은 상기 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반, 이의 이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물이 분획물 총중량을 기준으로 0.0001 중량% 내지 5 중량% 포함된 것인, 조성물.
  8. 제1항에 있어서, 상기 조성물의 투여에 의한 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반(3-O-galloyl-3,3',5,5',7-pentahydroxyflavan), 이의 이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물의 투여량은 0.0001mg/kg/일 내지 15mg/kg/일인, 조성물.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 인지기능 저하는 베타 아밀로이드(β-amyloid)의 응집(aggregation), 뇌유래신경성장인자(brain-derived neurotrophic factor, BDNF) 발현 저하, 및 DNMT1(DNA (cytosine-5)-methyltransferase 1) 발현 증가로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상에 기인한 것인, 조성물.
  10. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 인지기능 저하는 기억력 감퇴, 인지 감퇴, 식별력 감퇴, 우울증, 및 건망증으로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상을 포함하는 것인, 조성물.
  11. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 개선은 베타-아밀로이드의 응집 억제, 응집된 베타-아밀로이드의 분해, BDNF 발현 증진 및 DNMT1 발현 감소로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상를 통해 이루는 것인, 조성물.
  12. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 신경퇴화성 질병을 예방 또는 치료하기 위한 약학 조성물인 조성물.
  13. 제12항에 있어서, 상기 신경퇴화성 질병은 베타 아밀로이드(β-amyloid)의 응집(aggregation), BDNF 발현 저하, 및 DNMT1 발현 증가로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상에 기인한 것인, 약학 조성물인 조성물.
  14. 제12항에 있어서, 상기 신경퇴화성 질병은 알츠하이머병인, 약학 조성물인 조성물.
  15. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 식품 조성물인, 조성물.
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