WO2017092638A1 - 阿片样受体拮抗剂类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用 - Google Patents

阿片样受体拮抗剂类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用 Download PDF

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WO2017092638A1
WO2017092638A1 PCT/CN2016/107513 CN2016107513W WO2017092638A1 WO 2017092638 A1 WO2017092638 A1 WO 2017092638A1 CN 2016107513 W CN2016107513 W CN 2016107513W WO 2017092638 A1 WO2017092638 A1 WO 2017092638A1
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racemate
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PCT/CN2016/107513
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黄金昆
张连山
薛州洋
李磊
杨昌永
南文汇
孙星
王亚里
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江苏恒瑞医药股份有限公司
成都盛迪医药有限公司
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D489/00—Heterocyclic compounds containing 4aH-8, 9 c- Iminoethano-phenanthro [4, 5-b, c, d] furan ring systems, e.g. derivatives of [4, 5-epoxy]-morphinan of the formula:

Definitions

  • the present invention relates to a novel opioid receptor antagonist derivative, a preparation method thereof, and a pharmaceutical composition containing the same, and a constipation, gastroesophageal reflux caused by long-term use of an opioid analgesic, Use in conditions such as bloating.
  • Opioid analgesics produce analgesic effects through the mu receptor acting on the central nervous system, which simultaneously acts on peripheral nerves in the gastrointestinal tract, increases non-propulsive contractions in the middle of the small intestine, and reduces the site's Longitudinal peristaltic contraction.
  • the longitudinal peristaltic contraction of the intestine is the key to the passage of food through the intestines, and the slowing of the gastrointestinal tract slows the passage of food through the digestive tract.
  • opioid analgesics can also cause local anesthesia of the stomach muscles, causing gastric muscle spasm and gastric emptying disorders, inhibition of secretion of gastrointestinal secretions, etc., causing gastrointestinal dysfunction, thereby causing constipation (Opioid-induced Constipation or OIC) ).
  • Gastrointestinal side effects not only affect the quality of life of the patient, but must even stop the administration of the drug in severe cases.
  • OIC opioid-induced constipation
  • Non-targeted therapeutic drugs are mainly divided into: gastrointestinal motility drugs and laxatives.
  • Prescription drugs for promoting gastrointestinal motility commonly used in patients with gastroparesis, suitable for short-term medication, and not suitable for young people, such drugs are prone to side effects such as restlessness, drowsiness and fatigue, and are CYP2D6 inhibitors.
  • a serotonin receptor agonist that acts throughout the gastrointestinal tract but is highly cardiotoxic.
  • Certain peripheral anti-dopamine agents reduce gastrointestinal dysfunction by increasing acetylcholine levels to enhance gastrointestinal smooth muscle contraction, tension and peristalsis.
  • Rubiprosone is a type II chloride channel activator that increases intestinal secretion and promotes intestinal smoothness for the treatment of sudden chronic constipation.
  • Oral laxatives including softeners and peristaltic inducers, however, the drug alone is not effective in treating gastrointestinal dysfunction caused by opioids, because the drug only softens the feces and does not enhance gastrointestinal motility.
  • the first-line drugs for the treatment of primary constipation have little effect in treating gastrointestinal dysfunction caused by opioids due to the above reasons, and have certain side effects.
  • Targeted therapy mainly uses ⁇ receptor antagonist drugs to act on the ⁇ receptor of the peripheral nerve of the intestine, relieves the agonistic effect of opioids on the ⁇ receptor, thereby restoring the function of the peripheral nerves of the intestine and restoring the gastrointestinal tract.
  • the peristaltic function of the road plays a role in curing constipation.
  • Low blood-brain barrier pass rate, low blood-brain barrier pass rate can ensure that the drug does not cross the blood-brain barrier, avoiding the drug acting on the central nervous system, thereby reducing the central nervous system mu receptor antagonism, affecting opioids The pain of the town.
  • Peripheral nerve has good affinity
  • ⁇ receptor antagonist drugs are peripheral nerve receptors. Good affinity can relieve the stimulating effects of opioids and fundamentally eliminate the root causes of gastrointestinal dysfunction.
  • the presently disclosed mu-receptor antagonists for the treatment of gastrointestinal dysfunction include US 6,559,158, US 2005 136 031, US 5,052, 542, WO 2006 126 529, WO 2004 026 305, WO 2007 103 187.
  • the present invention aims to achieve certain results in the field of targeted treatment of gastrointestinal dysfunction caused by long-term use of opioid analgesics.
  • the keys each independently represent an R configuration, an S configuration, or a racemate
  • R is selected from a hydrogen atom, an alkyl group, a cycloalkyl group, an alkenyl group, an alkanoyl group, a carboxylate group, wherein the alkyl group, cycloalkyl group, alkenyl group, alkanoyl group, carboxylate group is optionally further one or Substituting a plurality of groups selected from the group consisting of halogen, oxo, alkyl, haloalkyl, hydroxyalkyl, alkenyl, heterocyclyl, heteroaryl;
  • R 1 is selected from a hydrogen atom, an alkyl group, a cycloalkyl group, an alkenyl group, a heterocyclic group, wherein the alkyl group, cycloalkyl group, alkenyl group, heterocyclic group is further further selected from one or more selected from halogen, Substituted by a group of a cyano group, an oxo group, an alkyl group, or a halogenated alkyl group;
  • R 2 is selected from the group consisting of a hydrogen atom, an alkyl group, an alkanoyl group, a carboxylate group, and an amide group;
  • X is selected from an oxygen atom, a sulfur atom, or an amino group, which is optionally further substituted with an alkyl group, a halogenated alkyl group, or an alkanoyl group;
  • Z is selected from oxygen or an amino group, and the amino group is optionally further substituted with an alkyl group, a halogenated alkyl group, or an alkanoyl group;
  • R 3 and R 4 are each independently selected from a hydrogen atom, an alkyl group, an alkenyl group, a cycloalkyl group, a heterocyclic group, an alkanoyl group, wherein the alkyl group, the alkenyl group, the cycloalkyl group, the heterocyclic group, the alkanoyl group Further selected by one or more groups selected from the group consisting of halogen, cyano, oxo, alkyl, haloalkyl, hydroxyalkyl, alkenyl, cycloalkyl, heterocyclyl;
  • n, o, p, q, and r are each independently selected from an integer of 0 to 15.
  • a compound of the formula (I) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof Or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein R is selected from the group consisting of a hydrogen atom, an alkyl group, and an alkanoyl group, preferably a hydrogen atom, a C 1 -C 6 alkyl group, and a C 1 -C 6 alkanoyl group, more preferably a hydrogen atom.
  • a compound of the formula (I) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof Form, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein R 1 is selected from the group consisting of a hydrogen atom, an alkyl group, a cycloalkyl group, and an alkenyl group, preferably a hydrogen atom, a C 1 -C 6 alkyl group, a C 3 -C 12 cycloalkyl group, and a C 2
  • the -C 6 alkenyl group is further preferably a hydrogen atom, a methyl group, a cyclopropyl group, and an allyl group, and more preferably an allyl group and a cyclopropyl group.
  • a compound of the formula (I) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof Form, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein R 2 is selected from the group consisting of a hydrogen atom and an alkanoyl group, preferably a hydrogen atom and a C 1 -C 6 alkanoyl group, more preferably a hydrogen atom and an acetyl group.
  • a compound of the formula (I) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof Form, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein X is selected from the group consisting of oxygen atoms.
  • a compound of the formula (I) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof Form, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein Z is selected from the group consisting of oxygen atoms.
  • a compound of the formula (I) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof a form, or a pharmaceutically acceptable salt thereof wherein R 3 and R 4 are each independently selected from the group consisting of a hydrogen atom, an alkyl group, and an alkanoyl group, preferably a hydrogen atom, a C 1 -C 6 alkyl group, and a C 1 -C 6 alkanoyl group, More preferred are a hydrogen atom, a methyl group, an ethyl group and an acetyl group.
  • a compound of the formula (I) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof Form, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein n is selected from the group consisting of 0, 1, and 2.
  • a compound of the formula (I) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof Form, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein o and p are each independently 0, 1, and 2.
  • a compound of the formula (I) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof Form, or a pharmaceutically acceptable salt thereof is configured as R.
  • the carbon atom to which the bond is attached is configured as S.
  • the carbon atom to which the bond is attached is configured as S.
  • Typical compounds of the invention include, but are not limited to:
  • the present invention also provides a compound of the formula (IA) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable form thereof Salt:
  • R, R 1 , R 2 , X, Z are as defined in the formula (I).
  • the present invention also provides a compound of the formula (I) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer, or a mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable drug thereof Using a salt method, the method includes:
  • the compound of the formula (I) and the compound of the formula (IB) are subjected to a substitution or condensation reaction under basic conditions to obtain a compound of the formula (I);
  • R, R 1 to R 4 , X, Z, m, n, o, p, q, r are as defined in the formula (I);
  • R 5 is selected from hydrogen, hydroxy, halogen, trifluoromethanesulfonyl Oxyl, and p-toluenesulfonyloxy.
  • the invention further relates to a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound of the formula (I) according to the invention or a mesogen, racemate, enantiomer, diastereomer thereof Or a mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and one or more pharmaceutically acceptable carriers, diluents or excipients.
  • the present invention further relates to a compound of the formula (I) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, Or a pharmaceutical composition comprising the same, for use in the manufacture of a medicament for the treatment of peripheral neuropathy.
  • the present invention further relates to a compound of the formula (I) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, Or a pharmaceutical composition comprising the same, for use in the manufacture of a medicament for treating a peripheral nerve disease caused by an opioid analgesic.
  • the present invention further relates to a compound of the formula (I) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, Or a pharmaceutical composition comprising the same, for use in the manufacture of a medicament for the treatment of a gastrointestinal dysfunction caused by an opioid analgesic.
  • the present invention further relates to a compound of the formula (I) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, Or a pharmaceutical composition comprising the same, for use in the manufacture of a medicament for treating a condition caused by prolonged use of an opioid analgesic, constipation, gastroesophageal reflux, bloating, acute poisoning, respiratory depression.
  • the present invention further relates to a compound of the formula (I) or a racemate, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, Or a pharmaceutical composition comprising the same, for use in the preparation of a medicament for treating constipation, gastroesophageal reflux, bloating, acute poisoning, respiratory depression disease caused by long-term use of an opioid analgesic, wherein the treatment of constipation and the like
  • the medicament is further used in combination with one or more other ones selected from the group consisting of acetaminophen, acetylcodeine, and acetylhydrocodone.
  • the invention further relates to a method of treating a peripheral nerve disease comprising administering to a patient a therapeutically effective amount of a compound of the formula (I) according to the invention or a mesogen, racemate or enantiomer thereof , a diastereomer, or a mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a pharmaceutical composition comprising the same.
  • the invention further relates to a method of treating a condition caused by prolonged use of an opioid analgesic for constipation, gastroesophageal reflux, bloating, acute poisoning, respiratory depression, comprising administering to a patient a therapeutically effective amount of the formula of the invention ( a compound represented by I), or a mesogen, a racemate, an enantiomer, a diastereomer thereof, or a mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a pharmaceutical composition comprising the same .
  • the active ingredient-containing pharmaceutical composition may be in a form suitable for oral administration, such as tablets, dragees, lozenges, aqueous or oily suspensions, dispersible powders or granules, emulsions, hard or soft capsules, or syrups or Tincture.
  • Oral compositions can be prepared according to any method known in the art for preparing pharmaceutical compositions, such compositions may contain one or more ingredients selected from the group consisting of sweeteners, flavoring agents, coloring agents, and preservatives, To provide a pleasing and tasty pharmaceutical preparation. Tablets contain the active ingredient and non-toxic pharmaceutically acceptable excipients suitable for the preparation of a tablet for admixture.
  • the aqueous suspension contains the active substance and excipients suitable for the preparation of the aqueous suspension for mixing.
  • excipients are suspending agents.
  • An oil suspension can be formulated by suspending the active ingredient in a plant.
  • the oil suspension may contain a thickening agent.
  • the above sweeteners and flavoring agents may be added to provide a palatable preparation. It can be added by adding an antioxidant.
  • the dispersible powders and granules suitable for the preparation of aqueous suspensions can be provided by the addition of water to provide the active ingredient and dispersing or wetting agents, suspending agents or one or more preservatives. Suitable dispersing or wetting agents and suspending agents can be used to illustrate the above examples. Other excipients such as sweetening, flavoring, and coloring agents may also be added. These compositions are preserved by the addition of an antioxidant.
  • compositions of the invention may also be in the form of an oil-in-water emulsion.
  • the oil phase can be a vegetable oil.
  • Suitable emulsifiers can be naturally occurring phospholipids.
  • the emulsions may also contain sweeteners, flavoring agents, preservatives, and antioxidants. Such formulations may also contain a demulcent, a preservative, a colorant, and an antioxidant.
  • the pharmaceutical composition may be in the form of a sterile injectable aqueous solution.
  • the sterile injectable preparation may be a sterile injectable oil-in-water microemulsion in which the active ingredient is dissolved in the oily phase.
  • the pharmaceutical composition may be in the form of a sterile injectable aqueous or oily suspension for intramuscular and subcutaneous administration.
  • the suspension may be formulated according to known techniques using those suitable dispersing or wetting agents and suspending agents.
  • the sterile injectable preparation may also be a sterile injectable solution or suspension prepared in a non-toxic parenterally acceptable diluent or solvent.
  • fatty acids such as oleic acid can also be prepared as an injection.
  • the compounds of the invention may be administered in the form of a suppository for rectal administration. Can be done by putting the drug at normal temperature
  • These pharmaceutical compositions are prepared by mixing a suitable non-irritating excipient which is solid but is liquid in the rectum so that it dissolves in the rectum to release the drug.
  • the dosage of the drug to be administered depends on a variety of factors including, but not limited to, the activity of the particular compound used, the age of the patient, the weight of the patient, the health of the patient, the conduct of the patient, The patient's diet, time of administration, mode of administration, rate of excretion, combination of drugs, etc.; additionally, the preferred mode of treatment, such as the mode of treatment, the daily dose of the compound of formula (I) or the type of pharmaceutically acceptable salt It can be verified according to traditional treatment options.
  • Alkyl means a saturated aliphatic hydrocarbon group, including straight chain and branched chain groups of 1 to 20 carbon atoms. An alkyl group having 1 to 10 carbon atoms is preferred, an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms is more preferred, and an alkyl group having 1 to 4 carbon atoms is most preferred, preferably a methyl group.
  • Non-limiting examples include methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, tert-butyl, sec-butyl, n-pentyl, 1,1-dimethylpropyl, 1,2-dimethylpropyl, 2,2-dimethylpropyl, 1-ethylpropyl, 2-methylbutyl, 3-methylbutyl, n-hexyl, 1-ethyl-2 -methylpropyl, 1,1,2-trimethylpropyl, 1,1-dimethylbutyl, 1,2-dimethylbutyl, 2,2-dimethylbutyl, 1, 3-dimethylbutyl, 2-ethylbutyl, 2-methylpentyl, 3-methylpentyl, 4-methylpentyl, 2,3-dimethylbutyl, n-heptyl, 2-methylhexyl, 3-methylhexyl, 4-methylhexyl, 5-methylhexyl,
  • lower alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms, non-limiting examples including methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, tert-butyl, sec-butyl Base, n-pentyl, 1,1-dimethylpropyl, 1,2-dimethylpropyl, 2,2-dimethylpropyl, 1-ethylpropyl, 2-methylbutyl, 3-methylbutyl, n-hexyl, 1-ethyl-2-methylpropyl, 1,1,2-trimethylpropyl, 1,1-dimethylbutyl, 1,2-dimethyl Butyl, 2,2-dimethylbutyl, 1,3-dimethylbutyl, 2-ethylbutyl, 2-methylpentyl, 3-methylpentyl, 4-methylpentyl Base, 2,3-dimethylbutyl and the like.
  • the alkyl group may be substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituent may be substituted at any available point of attachment, preferably one or more of the following groups, independently selected from alkyl, alkenyl, Alkynyl, alkoxy, alkylthio, alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxy, heterocycle Alkoxy, cycloalkylthio, heterocycloalkylthio, oxo, amino, haloalkyl, hydroxyalkyl, carboxy or carboxylate.
  • Cycloalkyl means a saturated or partially unsaturated monocyclic or polycyclic cyclic hydrocarbon substituent comprising from 3 to 20 carbon atoms, preferably from 3 to 12 carbon atoms, more preferably the cycloalkyl ring comprises from 3 to 10
  • the carbon atom, most preferably the cycloalkyl ring contains from 3 to 6 carbon atoms, most preferably a cyclopropyl group.
  • Non-limiting examples of monocyclic cycloalkyl groups include cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclopentenyl, cyclohexyl, cyclohexenyl, cyclohexadienyl, A cycloheptyl group, a cycloheptatrienyl group, a cyclooctyl group or the like is preferably a cyclopropyl group or a cyclohexenyl group.
  • Polycyclic cycloalkyl groups include spiro, fused, and bridged cycloalkyl groups.
  • the cycloalkyl group may be optionally substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituent is preferably one or more of the following groups independently selected from the group consisting of alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkanethio Base, alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocyclic, aryl, heteroaryl, cycloalkoxy, heterocycloalkoxy, cycloalkylthio, Heterocycloalkylthio, oxo, amino, haloalkyl, hydroxyalkyl, carboxy or carboxylate groups.
  • Alkenyl means an alkyl radical as defined above consisting of at least two carbon atoms and at least one carbon-carbon double bond, such as vinyl, 1-propenyl, 2-propenyl, 1-, 2- or 3- Butyl group and the like. A C 2-10 alkenyl group is preferred, a C 2-6 alkenyl group is more preferred, and a C 2-4 alkenyl group is most preferred.
  • the alkenyl group may be substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituent is preferably one or more of the following groups independently selected from the group consisting of alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylthio, Alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxy, heterocycloalkoxy, cycloalkylthio, hetero A cycloalkylthio group, an oxo group, an amino group, a halogenated alkyl group, a hydroxyalkyl group, a carboxyl group or a carboxylate group.
  • Alkynyl means an alkyl group as defined above consisting of at least two carbon atoms and at least one carbon-carbon triple bond, such as ethynyl, 1-propynyl, 2-propynyl, 1-, 2- or 3-butynyl and the like.
  • a C 2-10 alkynyl group is preferred, a C 2-6 alkynyl group is more preferred, and a C 2-4 alkynyl group is most preferred.
  • the alkynyl group may be substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituent is preferably one or more of the following groups independently selected from the group consisting of alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylthio, Alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxy, heterocycloalkoxy, cycloalkylthio, hetero A cycloalkylthio group, an oxo group, an amino group, a halogenated alkyl group, a hydroxyalkyl group, a carboxyl group or a carboxylate group.
  • Heterocyclyl means a saturated or partially unsaturated monocyclic or polycyclic cyclic hydrocarbon substituent comprising from 3 to 20 ring atoms wherein one or more of the ring atoms are selected from nitrogen, oxygen or S(O) m ( Wherein m is a hetero atom of the integer 0 to 2), but does not include a ring moiety of -OO-, -OS- or -SS-, and the remaining ring atoms are carbon. It preferably comprises from 3 to 12 ring atoms, wherein from 1 to 4 are heteroatoms, more preferably the heterocyclyl ring contains from 3 to 10 ring atoms, more preferably the heterocyclyl ring contains from 5 to 6 ring atoms.
  • Non-limiting examples of monocyclic heterocyclic groups include pyrrolidinyl, piperidinyl, piperazinyl, morpholinyl, thiomorpholinyl, homopiperazinyl, pyranyl, tetrahydrofuranyl and the like.
  • Polycyclic heterocyclic groups include spiro, fused, and bridged heterocyclic groups.
  • the heterocyclic group may be optionally substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituent is preferably one or more of the following groups independently selected from the group consisting of alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkanethio Base, alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocyclic, aryl, heteroaryl, cycloalkoxy, heterocycloalkoxy, cycloalkylthio, Heterocycloalkylthio, oxo, amino, haloalkyl, hydroxyalkyl, carboxy or carboxylate groups.
  • the substituent is preferably one or more of the following groups independently selected from the group consisting of alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkanethio Base, alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cyclo
  • Aryl means a 6 to 14 membered all-carbon monocyclic or fused polycyclic ring (i.e., a ring that shares a pair of adjacent carbon atoms) having a conjugated ⁇ -electron system, preferably 6 to 10 members, more preferably benzene.
  • the base and naphthyl are most preferably phenyl.
  • the aryl ring may be fused to a heteroaryl, heterocyclyl or cycloalkyl ring wherein the ring to which the parent structure is attached is an aryl ring, non-limiting examples comprising:
  • the aryl group may be substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituent is preferably one or more of the following groups, independently selected from the group consisting of alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylthio, alkane.
  • Base amino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocyclic, aryl, heteroaryl, cycloalkoxy, heterocycloalkoxy, cycloalkylthio, heterocycloalkane A thio group, an amino group, a halogenated alkyl group, a hydroxyalkyl group, a carboxyl group or a carboxylate group.
  • Heteroaryl refers to a heteroaromatic system containing from 1 to 4 heteroatoms, from 5 to 14 ring atoms, wherein the heteroatoms are selected from the group consisting of oxygen, sulfur and nitrogen.
  • the heteroaryl group is preferably 5 to 10 members, more preferably 5 or 6 members, such as thiadiazolyl, pyrazolyl, oxazolyl, oxadiazolyl, imidazolyl, triazolyl, thiazolyl, furyl , thienyl, pyridyl, pyrrolyl, N-alkylpyrrolyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, imidazolyl, tetrazolyl, and the like.
  • the heteroaryl ring may be fused to an aryl, heterocyclic or cycloalkyl ring, wherein the ring to which the parent structure is attached is a heteroaryl ring, non-limiting examples of which include:
  • the heteroaryl group may be optionally substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituent is preferably one or more of the following groups independently selected from the group consisting of alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkanethio Base, alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocyclic, aryl, heteroaryl, cycloalkoxy, heterocycloalkoxy, cycloalkylthio, Heterocycloalkylthio, amino, haloalkyl, hydroxyalkyl, carboxy or carboxylate groups.
  • Alkoxy means -O-(alkyl) and -O-(unsubstituted cycloalkyl), wherein alkyl, cycloalkyl are as defined above. Non-limiting examples include methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, cyclopropoxy, cyclobutoxy, cyclopentyloxy, cyclohexyloxy, and the like.
  • the alkoxy group may be optionally substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituent is preferably one or more of the following groups independently selected from the group consisting of an alkyl group, an alkenyl group, an alkynyl group, an alkoxy group, and an alkane group.
  • Haloalkyl means that the alkyl group is substituted by one or more halogens, wherein the alkyl group is as defined above.
  • Hydrophilicity refers to an -OH group.
  • Hydroalkyl means an alkyl group substituted by a hydroxy group, wherein the alkyl group is as defined above.
  • Halogen means fluoro, chloro, bromo or iodo, preferably fluoro or iodo.
  • Niro means -NO 2 .
  • Carboxy refers to -C(O)OH.
  • Carboxylic acid ester group means -C(O)O(alkyl) or (cycloalkyl) wherein alkyl, cycloalkyl are as defined above.
  • Alkanoyl means -C(O)R, wherein R refers to alkyl, wherein alkyl is as defined above.
  • “Amido” means -NHC(O)R, wherein R refers to alkyl, wherein alkyl is as defined above.
  • heterocyclic group optionally substituted by an alkyl group means that an alkyl group may be, but not necessarily, present, and the description includes the case where the heterocyclic group is substituted with an alkyl group and the case where the heterocyclic group is not substituted with an alkyl group.
  • Substituted refers to one or more hydrogen atoms in the group, preferably up to 5, more preferably 1 to 3, hydrogen atoms, independently of each other, substituted by a corresponding number of substituents. It goes without saying that the substituents are only in their possible chemical positions, and those skilled in the art will be able to determine (by experiment or theory) substitutions that may or may not be possible without undue effort. For example, an amino group or a hydroxyl group having a free hydrogen may be unstable when combined with a carbon atom having an unsaturated (e.g., olefinic) bond.
  • “Pharmaceutical composition” means a mixture comprising one or more of the compounds described herein, or a physiologically/pharmaceutically acceptable salt or prodrug thereof, and other chemical components, as well as other components such as physiological/pharmaceutically acceptable carriers. And excipients.
  • the purpose of the pharmaceutical composition is to promote the administration of the organism, which facilitates the absorption of the active ingredient and thereby exerts biological activity.
  • the present invention adopts the following technical solutions.
  • the method for preparing the compound of the formula (I) or a salt thereof of the present invention comprises the following steps:
  • the phenolic hydroxyl group is first protected to obtain the compound 11, and then the ketone of the chiral reduction compound 11 is converted into a hydroxyl group to obtain an important intermediate 12.
  • the structure of the compound is determined by nuclear magnetic resonance (NMR) or/and mass spectrometry (MS).
  • NMR shift ( ⁇ ) is given in units of 10 -6 (ppm).
  • the NMR was measured by a Bruker AVANCE-400 nuclear magnetic apparatus, and the solvent was deuterated dimethyl sulfoxide (DMSO-d 6 ), deuterated chloroform (CDCl 3 ), deuterated methanol (CD 3 OD), and the internal standard was four.
  • DMSO-d 6 dimethyl sulfoxide
  • CDCl 3 deuterated chloroform
  • CD 3 OD deuterated methanol
  • TMS Methyl silane
  • the measurement of the MS was carried out using a FINNIGAN LCQAd (ESI) mass spectrometer (manufacturer: Thermo, model: Finnigan LCQ advantage MAX).
  • ESI FINNIGAN LCQAd
  • the HPLC was measured using an Agilent 1200 DAD high pressure liquid chromatograph (Sunfire C18 150 x 4.6 mm column) and a Waters 2695-2996 high pressure liquid chromatograph (Gimini C18 150 x 4.6 mm column).
  • Thin layer chromatography silica gel plate uses Yantai Yellow Sea HSGF254 or Qingdao GF254 silica gel plate.
  • the specification of silica gel plate used for thin layer chromatography (TLC) is 0.15mm ⁇ 0.2mm.
  • the specification for thin layer chromatography separation and purification is 0.9mm. ⁇ 1.0mm.
  • the known starting materials of the present invention may be synthesized by or according to methods known in the art, or may be purchased from ABCR GmbH & Co. KG, Acros Organics, Aldrich Chemical Company, Accela ChemBio Inc, Dari Companies such as chemicals.
  • the reactions can all be carried out under an argon atmosphere or a nitrogen atmosphere.
  • An argon atmosphere or a nitrogen atmosphere means that the reaction flask is connected to an argon or nitrogen balloon having a volume of about 1 L.
  • the microwave reaction used a CEM Discover-S Model 908860 microwave reactor.
  • Hydrogenation reactor WDF-2 type, Weihai Automatic Control Reactor Co., Ltd.
  • the solution means an aqueous solution.
  • reaction temperature is room temperature and is 20 ° C to 30 ° C.
  • the progress of the reaction in the examples was monitored by thin layer chromatography (TLC).
  • TLC thin layer chromatography
  • the system used for the reaction was: A: dichloromethane and methanol system, B: n-hexane and ethyl acetate system, volume ratio of solvent The adjustment is made according to the polarity of the compound.
  • the column chromatography eluent system and the thin layer chromatography developer system include: A: dichloromethane and methanol system, B: n-hexane and ethyl acetate system, the volume ratio of the solvent according to the compound
  • the polarity is adjusted to adjust, and a small amount of an alkaline or acidic reagent such as triethylamine or acetic acid may be added for adjustment.
  • step 1
  • reaction was completed by TLC, and the reaction mixture was slowly added to 500 ml of water, and the reaction was quenched and extracted with n-hexane (200 ml ⁇ 4). 3, used directly in the next step.
  • Test Example 1 Determination of the affinity of the compound of the present invention for ⁇ opioid receptor
  • the ⁇ /CHO cell membrane receptor protein was prepared from the ⁇ /CHO cells constructed by Professor Liu Jinggen from the Shanghai Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Sciences.
  • [3H] Diprenorphine [3H]diprenorphine: 1.44 Pbq.mol-1, a ruthenium-labeled broad-spectrum opioid receptor antagonist available from PerkinElmer, batch number 1591933, with an effective half-life of 12 years.
  • Naloxone a broad-spectrum opioid receptor antagonist purchased from Sigma.
  • Liquid scintillation fluid PPO (2,5-diphenyloxazole), purchased from BDH Corporation.
  • POPOP 1,4-bis(5-phenylcarbazole-2)-benzene, purchased from Sigma.
  • the filter paper was dried, it was placed in a 0.5 ml Eppendorf tube, 0.5 ml liquid scintillation liquid was added, and the radioactivity was measured by a PERKIN ELMER PRI-CARB 2910 liquid scintillation counter, and the inhibition rate was calculated. The experiment was repeated twice or more, and each group was tripled.
  • Inhibition rate (total binding tube dpm - sample tube dpm) / (total binding tube dpm - non-specific binding tube dpm) ⁇ 100%
  • the ⁇ opioid receptor affinity of the compound of the present invention was determined by the above test, and the affinity dissociation constant Ki value was calculated by Prism 5.0 software, the concentration of the labeled ligand was 0.45 nM, and the equilibrium dissociation constant Kd value of the labeled ligand was 0.2nM.
  • the calculated Ki values are shown in Table 1.
  • the compounds of the invention have a strong affinity for the ⁇ opioid receptor.
  • Test Example 2 Determination of antagonistic activity of an opioid receptor agonist (enkephalin) by a compound of the present invention
  • the cell strain used in this experiment CHO-K1 cells stably expressing the opioid receptor gene, constructed by Kingsray Biotechnology Co., Ltd.
  • Enkephalin purchased from Sigma.
  • the in vitro cell assay described below can determine the antagonistic activity of a test compound against an opioid receptor agonist (enkephalin).
  • the general scheme for this test is as follows.
  • CHO-K1 cells stably expressing the opioid receptor gene were inoculated on a 384-well culture plate at a density of 15000 cells/well one day before the experiment, and then the cells were cultured at 37 ° C in a 5% carbon dioxide incubator to grow. overnight.
  • Add 20 ⁇ L of staining solution per well the next day (from After the Calcium 4assay kit (MD company, USA), add 10 ⁇ L of a series of concentration (10 ⁇ M, 1 ⁇ M, 0.1 ⁇ M, 0.01 ⁇ M, 0.001 ⁇ M, and 0.0001 ⁇ M) test compound solution (5 ⁇ final concentration), each concentration is set to two. Multiple holes. After incubating at 37 ° C for 60 minutes, it was allowed to stand at room temperature for 15 minutes. The opioid receptor agonist (enkephalin) was added and incubated for 20 s, then the fluorescence signal was read within 100 s (fluorescence imaging plate reader, MD, USA).
  • Inhibition % ⁇ 1-( ⁇ RFU compound- ⁇ RFU substrate )/( ⁇ RFU agonist control- ⁇ RFU substrate ) ⁇ *100
  • ⁇ RFU represents the relative fluorescence unit intensity difference compared to the baseline.
  • the IC 50 value can be calculated by the test compound's inhibition rate of enkephalin by a series of different concentrations.
  • Test Example 3 Compound of the present invention on mouse pain inhibition test (hot plate method)
  • the in vivo experiments described below can be used to test the prolongation of the pain threshold in mice caused by the hot plate method of the compounds of the invention.
  • the experimental method is as follows.
  • mice Female Kunming mice (purchased from Sichuan Academy of Traditional Chinese Medicine), weighing 18-22 g, were screened by 55 °C hot plate method. Mice with a basic pain threshold of 5-30s were enrolled in the experiment and randomly divided into normal group and model group. , naloxone group, NKRT-118 positive control compound group, compound 14A group, compound 14M group, compound 14C group, compound 14B group, a total of 8 groups. The normal group and the model group were given NS (0.2ml/10g), the positive drug group iv naloxone (1.43mg/kg), and the test drug group was given NKTR-118, 14A, 14M, 14C, 14B (42.9).
  • the pain response time was measured at 5 min and 30 min after iv administration of morphine (or NS).
  • the index of prolongation of pain threshold is represented by the percentage increase of pain threshold response, which is calculated as follows:
  • the compounds of the present invention can effectively prolong the pain threshold of the mouse hot plate model.
  • Test Example 4 Test for improvement of intestinal peristalsis in rats after morphine modeling by the compound of the present invention
  • the in vivo experiments described below can be used to test the improvement of intestinal peristalsis in rats after morphine modeling by the compounds of the invention.
  • the experimental protocol is as follows.
  • SD rats (purchased from Sichuan Academy of Traditional Chinese Medicine), 190-240g, were randomly divided into normal group, model group, naloxone group, NKTR-118 positive control compound group, compound 14A group, compound Group 14M, Compound 14C, Compound 14B.
  • the normal group and the model group were given NS (0.5 Ml/100g), positive drug group iv naloxone (1mg/kg), test drug group ig administration NKTR-118, 14A, 14M, 14C, 14B (30mg/kg); ig administration completed 25min (iv 5min) After iv, morphine (4 mg/kg) was administered iv, and the normal group was given NS as a control.
  • morphine or NS
  • ig was given 22.2% activated carbon
  • cervical dislocation was sacrificed, and the length of the intestine from pylorus to ileocecal was measured as the total length of the small intestine.
  • the distance from the pylorus to the ink front is used as the ink to advance the distance in the intestine, and the percentage of ink advancement is calculated. Note whether the volume of the small intestine increases in each group.
  • the compounds of the present invention can alleviate the slow intestinal peristalsis caused by morphine modeling.
  • Test Example 5 Permeability test of the compound of the present invention in the blood-brain barrier of rats
  • Rats were used as test animals, and the drug concentration in rat plasma and brain tissue was determined by LC/MS/MS method.
  • the permeability of the compound of the present invention on the blood-brain barrier of rats was investigated, and its ability to enter the center was evaluated.
  • the drug concentration in the plasma and brain tissues of the rats after administration was measured by LC/MS/MS method (mass spectrometry model API4000, American AB company; liquid phase system model LC-30AD, Shimadzu Corporation, Japan) as shown in Table 5 below.
  • mice and canine were used as test animals, respectively, and the concentration of the drug in plasma at different times after administration of the compound of the present invention by intragastric administration of mice and dogs was determined by LC/MS/MS method.
  • the pharmacokinetic behavior of the compounds of the invention in mice and dogs was investigated and their pharmacokinetic characteristics were evaluated.
  • ICR mice purchased from Shanghai Xipuer-Beikai Experimental Animal Co., Ltd.
  • 72 ICR mice purchased from Shanghai Xipuer-Beikai Experimental Animal Co., Ltd.
  • 0.1 ml of blood was collected from the eyelids before administration and 0.5, 1, 2, 4, 6, 8, 11, 24 hours after administration, placed in heparinized tubes, centrifuged at 3500 rpm for 10 minutes, and stored at -20 ° C; Eat 2 hours after the drug.
  • Beagle dogs (provided by Suzhou Xishan Zhongke Drug Research and Development Co., Ltd.) 12, male and female, divided into 3 groups; fasted overnight after intravenous administration.
  • the intravenous group before the administration and 5 minutes after the administration, 0.25, 0.5, 1.0, 2.0, 4.0, 8.0, 12.0, 24.0 h, 1.0 ml of blood was taken from the forelimb vein, placed in a heparinized test tube, and centrifuged at 3500 rpm for 10 minutes to separate the plasma. , -20 ° C to save. Eat 3 hours after administration.
  • the second cycle After one week of cleaning, the Beagle dog was intragastrically administered after fasting overnight.
  • 1.0 ml of blood was taken from the forelimb vein before and after administration, 0.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 6.0, 8.0, 12.0, 24.0 h, and placed in a heparinized test tube.
  • the plasma was separated by centrifugation at 3500 rpm for 10 minutes. , -20 ° C to save. Eat 3 hours after administration.
  • the content of the test compound in the plasma of the rat after intragastric administration was determined by LC/MS/MS method (mass spectrometry model API4000, American AB company; liquid phase system model LC-30AD, Shimadzu Corporation, Japan).
  • mice and dogs The pharmacokinetic parameters of the compounds of the invention in mice and dogs are shown in Table 6 below.
  • the compounds of the present invention have good absorption in mice and dogs, and have excellent pharmacokinetic behavior characteristics.

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Abstract

本发明涉及阿片样受体拮抗剂类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用。具体而言，本发明涉及一种通式(I)所示的纳洛酮类衍生物、其可药用盐，及其制备方法，以及它们作为治疗剂治疗因长期使用吗啡等阿片样受体激动剂而引起的便秘等疾病的用途，该药物作用于外周神经。其中通式(I)中的各取代基的定义与说明书中的定义相同。

Description

阿片样受体拮抗剂类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用 技术领域
本发明涉及一种新型阿片样受体拮抗剂类衍生物、其制备方法及含有该衍生物的药物组合物，以及其在治疗因长期使用阿片类镇痛药引起的便秘、胃食管反流、腹胀等病症中的用途。
背景技术
阿片类镇痛药通过作用于中枢神经的μ受体产生镇痛作用，该类药同时作用胃肠道内的外周神经，增加小肠中部的非推动性收缩(non-propulsive contractions)并降低该部位的纵向性蠕动收缩。肠道的纵向性蠕动收缩是食物通过肠道的关键，胃肠道蠕动减慢使得食物很难通过消化道。此外阿片类镇痛药还可以局部麻醉胃肌，造成胃肌轻瘫和胃排空障碍、抑制胃肠道分泌液的分泌等造成胃肠道功能紊乱，从而引起便秘(Opioid-induced Constipation即OIC)。胃肠道副作用不仅影响病人的生活质量，严重时甚至必须停止给药治疗。
目前治疗阿片引起便秘(OIC)的方法主要有：非靶向性和靶向性疗法。
非靶向性疗法药物主要分为：促进胃肠道动力药物和通便剂。
促进胃肠道动力的处方药，常用于胃轻瘫患者，适宜短期用药，且不适用于年轻人群，该类药物容易产生不安、困倦和疲劳等副作用，而且是CYP2D6抑制剂。五羟色胺类受体激动剂，作用于整个胃肠道，但高心脏毒性较高。某些外周抗多巴胺剂，通过提升乙酰胆碱水平来增强胃肠道平滑肌的伸缩、张力和蠕动来减缓胃肠道功能紊乱。鲁比前列酮是II型氯离子通道活化剂，可以增加肠液分泌，促使肠道平滑，用于治疗突发性慢性便秘。
口服通便剂，包括软化剂和蠕动诱导剂，然而该药物单独用在治疗阿片类药物引起的胃肠道功能紊乱却没有疗效，因为该药物只能软化粪便，不能增强胃肠道蠕动能力。治疗正原发性便秘的一线药物由于上述同样原因在治疗阿片类药物引起的胃肠道功能紊乱中疗效甚微，并且具有一定的副作用。
靶向性疗法主要是利用μ受体拮抗剂类药物作用于肠道外周神经的μ受体，解除阿片样类药物对μ受体的激动作用，从而恢复肠道外周神经的作用，恢复胃肠道的蠕动功能，起到治愈便秘的作用。
治疗长期使用阿片类镇痛药引起的胃肠道功能紊乱的药物应该具备以下特征：
1)低的血脑屏障通过率，低的血脑屏障通过率可以保证药物不会穿过血脑屏障，避免药物作用中枢神经，从而降低药物中枢神经μ受体的拮抗作用，影响阿片类药物的镇疼作用。
2)对外周神经具有良好的亲和性，μ受体拮抗剂类药物对外周神经μ受体的 良好亲和性可以解除阿片类药物的激动作用，从根本上解除胃肠道功能紊乱产生的根源。
3)低毒性；4)良好耐受性；5)良好生物利用度；6)作用时间长效。
目前公开的用于治疗胃肠道功能紊乱的μ受体拮抗剂专利申请包括US6559158、US2005136031、US5250542、WO2006126529、WO2004026305、WO2007103187。
本发明致力于在靶向性治疗长期使用阿片类镇痛药引起的胃肠道功能紊乱领域取得一定的成果。
发明内容
因此，本发明的目的在于提供一种通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐：
Figure PCTCN2016107513-appb-000001
其中：
Figure PCTCN2016107513-appb-000002
键各自独立地表示R构型、S构型或消旋体；
R选自氢原子、烷基、环烷基、烯基、烷酰基、羧酸酯基，其中所述烷基、环烷基、烯基、烷酰基、羧酸酯基任选进一步被一个或多个选自卤素、氧代基、烷基、卤代烷基、羟烷基、烯基、杂环基、杂芳基的基团所取代；
R1选自氢原子、烷基、环烷基、烯基、杂环基，其中所述的烷基、环烷基、烯基、杂环基任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、氧代基、烷基、卤代烷基的基团所取代；
R2选自氢原子、烷基、烷酰基、羧酸酯基、酰胺基；
X选自氧原子、硫原子、或氨基，所述氨基任选进一步被烷基、卤代烷基、烷酰基取代；
Z选自氧或氨基，所述氨基任选进一步被烷基、卤代烷基、烷酰基取代；
R3和R4各自独立地选自氢原子、烷基、烯基、环烷基、杂环基、烷酰基，其中所述烷基、烯基、环烷基、杂环基、烷酰基任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、氧代基、烷基、卤代烷基、羟烷基、烯基、环烷基、杂环基的基团所取代；
m、n、o、p、q、r各自独立地选自0～15的整数。
在本发明一个优选的实施方案中，一种通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中R选自氢原子、烷基、和烷酰基，优选氢原子、C1-C6烷基、和C1-C6烷酰基，更优选氢原子。
在本发明另一个优选的实施方案中，一种通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中R1选自氢原子、烷基、环烷基和烯基，优选氢原子、C1-C6烷基、C3-C12环烷基和C2-C6烯基，进一步优选氢原子、甲基、环丙基、和烯丙基，更优选烯丙基和环丙基。
在本发明另一个优选的实施方案中，一种通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中R2选自氢原子和烷酰基，优选氢原子和C1-C6烷酰基，更优选氢原子和乙酰基。
在本发明另一个优选的实施方案中，一种通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中X选自氧原子。
在本发明另一个优选的实施方案中，一种通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中Z选自氧原子。
在本发明另一个优选的实施方案中，一种通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中R3和R4各自独立地选自氢原子、烷基、和烷酰基，优选氢原子、C1-C6烷基和C1-C6烷酰基，更优选氢原子、甲基、乙基和乙酰基。
在本发明另一个优选的实施方案中，一种通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中m选自0～6的整数。
在本发明另一个优选的实施方案中，一种通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中n选自0、1和2。
在本发明另一个优选的实施方案中，一种通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中o和p各自独立地为0、1和2。
在本发明另一个优选的实施方案中，一种通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中q和r各自独立地选自0～4的整数。
在本发明另一个优选的实施方案中，一种通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐其中H上的
Figure PCTCN2016107513-appb-000003
键所连接的碳原子构型为R。
在本发明另一个优选的实施方案中，一种通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中Z上的
Figure PCTCN2016107513-appb-000004
键所连接的碳原子构型为S。
在本发明另一个优选的实施方案中，一种通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中OR2上的
Figure PCTCN2016107513-appb-000005
键所连接的碳原子构型为S。
本发明典型的化合物包括，但不限于：
Figure PCTCN2016107513-appb-000006
Figure PCTCN2016107513-appb-000007
Figure PCTCN2016107513-appb-000008
Figure PCTCN2016107513-appb-000009
本发明还提供一种通式(IA)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐：
Figure PCTCN2016107513-appb-000010
其可作为合成通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐的中间体，其中：
R、R1、R2、X、Z的定义如通式(I)中所定义。
本发明还提供一种制备通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐的方法，该方法包括：
Figure PCTCN2016107513-appb-000011
其中，
通式(IA)化合物与通式(IB)化合物在碱性条件下，进行取代或缩合反应得到通式(I)化合物；
其中：
Figure PCTCN2016107513-appb-000012
R、R1～R4、X、Z、m、n、o、p、q、r的定义如通式(I)中所定义；R5选自氢、羟基、卤素、三氟甲磺酰氧基、和对甲苯磺酸酰氧基。
本发明进一步涉及一种药物组合物，其含有治疗有效量的本发明通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，或包含其的药物组合物，在制备治疗外周神经疾病的药物中的用途。
本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，或包含其的药物组合物，在制备治疗使用阿片样类镇痛药引起的外周神经疾病的药物中的用途。
本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，或包含其的药物组合物，在制备治疗使用阿片样类镇痛药引起的胃肠道功能紊乱疾病的药物中的用途。
本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，或包含其的药物组合物，在制备治疗因长期使用阿片类镇痛药引起的便秘、胃食管反流、腹胀、急性中毒、呼吸抑制的病症的药物中的用途。
本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，或包含其的药物组合物，在制备治疗因长期使用阿片类镇痛药引起的便秘、胃食管反流、腹胀、急性中毒、呼吸抑制疾病的药物中的用途，其中所述的治疗便秘等疾病的药物进一步与另外一种或多种联合应用，所述镇痛药选自醋托啡、乙酰可待因、乙酰二氢可待因酮。
本发明进一步涉及一种治疗外周神经疾病的方法，其包括向患者使用治疗有效量的本发明通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，或包含其的药物组合物。
本发明进一步涉及一种治疗因长期使用阿片类镇痛药引起的便秘、胃食管反流、腹胀、急性中毒、呼吸抑制的病症的方法，其包括向患者使用治疗有效量的本发明通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，或包含其的药物组合物。
含活性成分的药物组合物可以是适用于口服的形式，例如片剂、糖锭剂、锭剂、水或油混悬液、可分散粉末或颗粒、乳液、硬或软胶囊，或糖浆剂或酏剂。可按照本领域任何已知制备药用组合物的方法制备口服组合物，此类组合物可含有一种或多种选自以下的成分：甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂，以提供悦目和可口的药用制剂。片剂含有活性成分和用于混合的适宜制备片剂的无毒的可药用的赋形剂。
水悬浮液含有活性物质和用于混合的适宜制备水悬浮液的赋形剂。此类赋形剂是悬浮剂。
油混悬液可通过使活性成分悬浮于植物中配制而成。油悬浮液可含有增稠剂。可加入上述的甜味剂和矫味剂，以提供可口的制剂。可通过加入抗氧化剂。
通过加入水可使适用于制备水混悬也的可分散粉末和颗粒提供活性成分和用于混合的分散剂或湿润剂、悬浮剂或一种或多种防腐剂。适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂可说明上述的例子。也可加入其他赋形剂例如甜味剂、矫味剂和着色剂。通过加入抗氧化剂保存这些组合物。
本发明的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是植物油。适宜的乳化剂可以是天然产生的磷脂。乳剂也可以含有甜味剂、矫味剂、防腐剂和抗氧剂。此类制剂也可含有缓和剂、防腐剂、着色剂和抗氧剂。
药物组合物可以是无菌注射水溶液形式。无菌注射制剂可以是其中活性成分溶于油相的无菌注射水包油微乳。
药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水或油混悬液的形式。可按已知技术，用上述那些适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制该混悬液。无菌注射制剂也可以是在无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中制备的无菌注射溶液或混悬液。此外，脂肪酸例如油酸也可以制备注射剂。
可按用于直肠给药的栓剂形式给予本发明化合物。可通过将药物与在普通温 度下为固体但在直肠中为液体，因而在直肠中会溶化而释放药物的适宜的无刺激性赋形剂混合来制备这些药物组合物。
本领域技术人员所熟知的，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但并非限定以下因素：所用特定化合物的活性、病人的年龄、病人的体重、病人的健康状况、病人的行被、病人的饮食、给药时间、给药方式、排泄的速率、药物的组合等；另外，最佳的治疗方式如治疗的模式、通式化合物(I)的日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。
发明详述
除非有相反陈述，否则下列用在说明书和权利要求书中的术语具有下述含义。
“烷基”指饱和的脂族烃基团，包括1至20个碳原子的直链和支链基团。优选含有1至10个碳原子的烷基，更优选含有1至6个碳原子的烷基，最优选含有1至4个碳原子的烷基，最佳为甲基。非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、硫醇、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、氨基、卤代烷基、羟烷基、羧基或羧酸酯基。
“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包括3至20个碳原子，优选包括3至12个碳原子，更优选环烷基环包含3至10个碳原子，最优选环烷基环包含3至6个碳原子，最佳为环丙基。单环环烷基的非限制性实施例包含环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、 环庚基、环庚三烯基、环辛基等，优选环丙基、环己烯基。多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。环烷基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、硫醇、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、氨基、卤代烷基、羟烷基、羧基或羧酸酯基。
“烯基”指由至少由两个碳原子和至少一个碳-碳双键组成的如上定义的烷基，例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-、2-或3-丁烯基等。优选C2-10烯基，更优选C2-6烯基，最优选C2-4烯基。烯基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、硫醇、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、氨基、卤代烷基、羟烷基、羧基或羧酸酯基。
“炔基”指至少由两个碳原子和至少一个碳-碳三键组成的如上所定义的烷基，例如乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-、2-或3-丁炔基等。优选C2-10炔基，更优选C2-6炔基，最优选C2-4炔基。炔基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、硫醇、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、氨基、卤代烷基、羟烷基、羧基或羧酸酯基。
“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包括3至20个环原子，其中一个或多个环原子选自氮、氧或S(O)m(其中m是整数0至2)的杂原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳。优选包括3至12个环原子，其中1～4个是杂原子，更优选杂环基环包含3至10个环原子，更优选杂环基环包含5至6个环原子。单环杂环基的非限制性实施例包含吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基、吡喃基、四氢呋喃基等。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。杂环基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、硫醇、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、氨基、卤代烷基、羟烷基、羧基或羧酸酯基。
“芳基”指具有共轭的π电子体系的6至14元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为6至10元，更优选苯基和萘基，最优选苯基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，非限制性实施例包含：
Figure PCTCN2016107513-appb-000013
芳基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、硫醇、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氨基、卤代烷基、羟烷基、羧基或羧酸酯基。
“杂芳基”指包含1至4个杂原子、5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫和氮。杂芳基优选为5至10元，更优选为5元或6元，例如噻二唑基、吡唑基、噁唑基、噁二唑基、咪唑基、三唑基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，其非限制性实例包括：
Figure PCTCN2016107513-appb-000014
杂芳基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、硫醇、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氨基、卤代烷基、羟烷基、羧基或羧酸酯基。
“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(未取代的环烷基)，其中烷基、环烷基的定义如上所述。非限制性实施例包含甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。烷氧基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自为烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、硫醇、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氨基、卤代烷基、羟烷基、羧基或羧酸酯基。
“卤代烷基”指烷基被一个或多个卤素取代，其中烷基的定义如上所述。
“羟基”指-OH基团。
“羟烷基”指被羟基取代的烷基，其中烷基的定义如上所述。
“卤素”指氟、氯、溴或碘，优选氟或碘。
“氰基”指-CN。
“硝基”指-NO2。
“氧代基”指＝O。
“羧基”指-C(O)OH。
“羧酸酯基”指-C(O)O(烷基)或(环烷基)，其中烷基、环烷基的定义如上所述。
“烷酰基”指-C(O)R，其中R指烷基，其中烷基的定义如上所述。
“酰胺基”指-NHC(O)R，其中R指烷基，其中烷基的定义如上所述。
“任选”或“任选地”意味着随后所描述地事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生地场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。
“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。
“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
本发明化合物的合成方法
为了完成本发明的目的，本发明采用如下技术方案。
本发明通式(I)所示的化合物或其盐的制备方法，包括以下步骤：
Figure PCTCN2016107513-appb-000015
方案1
其中，首先从甘油出发先用TBS保护两个端位羟基得到化合物2，然后使用苄基保护化合物2的仲羟基得到化合物3，然后脱去化合物3的两个端位羟基的保护基得到化合物4，将化合物4的两个裸露的羟基和溴代物进行取代反应得到化合物5，再使用Pd/C氢化脱去化合物5苄基得到化合物6，然后使化合物6的裸露的仲羟基进行取代反应得到化合物7，使用Pd/C氢化脱去化合物7的苄基得到化合物8，然后使化合物8的羟基和MsCl反应得到重要中间体9。
另外，从纳洛酮10出发先保护酚羟基得化合物11，然后手性还原化合物11的酮转化为羟基即得到重要中间体12。
将中间体12与中间体9在强碱的作用下进行取代反应得到化合物13，最后在酸的作用下脱去化合物13的酚羟基上的保护基得到最终产物。
具体实施方式
以下结合实施例进一步描述本发明，但这些实施例并非限制本发明的范围。
本发明实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照原料或商品制造厂商所建议的条件。未注明具体来源的试剂，为市场购买的常规试剂。
实施例
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或/和质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)、氘代氯仿(CDCl3)、氘代甲醇(CD3OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
MS的测定用FINNIGAN LCQAd(ESI)质谱仪(生产商：Thermo，型号：Finnigan LCQ advantage MAX)。
HPLC的测定使用安捷伦1200DAD高压液相色谱仪(Sunfire C18 150×4.6mm色谱柱)和Waters 2695-2996高压液相色谱仪(Gimini C18 150×4.6mm色谱柱)。
激酶平均抑制率及IC50值的测定用NovoStar酶标仪(德国BMG公司)。
薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.9mm～1.0mm。
柱层析一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。
本发明的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自ABCR GmbH&Co.KG、Acros Organics、Aldrich Chemical Company、韶远化学科技(Accela ChemBio Inc)、达瑞化学品等公司。
实施例中无特殊说明，反应能够均在氩气氛或氮气氛下进行。
氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氩气或氮气气球。
微波反应使用CEM Discover-S 908860型微波反应器。
氢化反应器：WDF-2型，威海自控反应釜有限公司。
实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。
实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃。
实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(TLC)，反应所使用的展开剂的体系有：A：二氯甲烷和甲醇体系，B：正己烷和乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节。
纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂体系包括：A：二氯甲烷和甲醇体系，B：正己烷和乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。
实施例1：化合物14A的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000016
步骤1：
Figure PCTCN2016107513-appb-000017
取2L瓶，将化合物1(92g)加入到瓶中，加入500ml DCM，搅拌下加入170g 咪唑。于0℃，将TBSCl/DCM 200ml慢慢滴加到反应瓶中，然后补加100ml DCM，搅拌反应，慢慢有白色固体析出，持续搅拌反应，升温到室温，反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液加入到500ml水中，加入1M HCl溶液200ml，将咪唑洗掉。有机相用水(500ml×2)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得油状物。通过柱色谱法(洗脱剂：PE)纯化，得到210g油状物化合物2。HNMR(400MHz,CDCl3)3.63-3.66(m,5H),2.51-2.52(d,1H),0.89(s,18H),0.07(s,12H).
步骤2：
Figure PCTCN2016107513-appb-000018
取2L三口瓶，将化合物2(96g)加入到瓶中，然后加入768ml DMF(8体积)。于0℃，将14.4g NaH分批加入到反应瓶中，搅拌反应30分钟后，将BnBr(102g)慢慢滴加到反应瓶中，反应体系改用油浴60℃加热过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液慢慢加入到500ml水中，淬灭反应，用正己烷(200ml×4)萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到123g油状物化合物3，直接用于下一步。
步骤3：
Figure PCTCN2016107513-appb-000019
将化合物3(123g)、6M HCl(250ml)、MeOH(300ml)加入到2L反应瓶中，搅拌反应过夜。次日，TLC检测反应完全，将反应液减压浓缩至干，直接通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝15：1)纯化，得17.5g油状物化合物4。HNMR(400MHz,CDCl3)7.32-7.35(m,5H),4.64(s,2H),3.54-3.77(m,5H).LC-MS:[M+H]+183.09.
步骤4：
Figure PCTCN2016107513-appb-000020
取500ml反应瓶，将化合物4(9g)、DMF(200ml)加入到瓶中，将NaH(4.0eq)分批加入到反应瓶中，有大量气泡冒出。搅拌40分钟后，将化合物4A-2(3.0eq，购自成都爱斯特)滴加到反应瓶中，于60℃加热反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液加入到500ml水中，加入DCM 200ml分液，水相用DCM(300ml×4)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。通过柱色谱法(洗脱剂：PE:EA＝1：2)纯化，得7g油状物化合物5A。LC-MS：[M+H]+387.23。
步骤5：
Figure PCTCN2016107513-appb-000021
将化合物5A(7g)、Pd/C(1.4g)、AcOH(10ml)、MeOH(70ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得5.67g油状物化合物6A。LC-MS:[M+H]+297.18。
步骤6：
Figure PCTCN2016107513-appb-000022
将化合物6A(3.5g)、DMF(40ml)加入到250ml反应瓶中，将NaH(2.0eq)分批加入到反应中，搅拌反应1h后，将化合物6A-3(2.0eq，根据专利文献WO2006076471制得)滴加到反应液中，于60℃搅拌反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液减压蒸发至干。加入DCM(100ml)、H2O(100ml)分液，水相用DCM(50ml×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝20：1)纯化，得5g油状物化合物7A。LC-MS：[M+H]+519.31。
步骤7：
Figure PCTCN2016107513-appb-000023
将化合物7A(5g)、Pd/C(1.0g)、AcOH(7.5ml)、MeOH(50ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得2.15g油状物化合物8A。LC-MS：[M+H]+429.26。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000024
将化合物8A(2g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.2g油状物化合物9A。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤9：
Figure PCTCN2016107513-appb-000025
取100ml反应瓶，将化合物10(购自成都名阳药业)(3.3g)、DIEA(7g)、DCM(45ml)加入到瓶中，于0℃将MEMCl(4.5g)滴加到反应液中，搅拌反应4h后，LC-MS检测反应完全。加入60ml水，分液，水相用DCM(20ml×3)萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。通过柱色谱法(洗脱剂：PE:EA＝1：1)纯化，得2.75g油状物化合物11。HNMR(400MHz,CDCl3)6.93-6.95(d,1H),6.62-6.64(d,1H),5.82(m,1H),5.17-5.36(m,4H),4.67(s,1H),3.87-3.90(m,2H),3.56-3.58(m,2H),3.37(s,3H),2.99-3.16(m,6H),2.56-2.60(m,2H),2.14-2.39(m,2H),2.04-2.13(m,1H),1.82-1.85(m,1H),1.58-1.62(m,2H)。LC-MS:[M+H]+416.20。
步骤10：
Figure PCTCN2016107513-appb-000026
将化合物11(2.75g)、THF(30ml)加入到100ml反应瓶中，N2保护下，于-20℃将NaBH(S-Bu)3滴加到反应中，于该温度继续搅拌反应4h后，TLC检测反应完全。加入10ml水将反应淬灭，减压浓缩除去THF。加入DCM 20ml和水20ml萃取，水相用DCM(10ml×3)萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。通过柱色谱法(洗脱剂：PE:EA＝1：1)纯化，得2.6g油状物化合物12。HNMR(400MHz,CDCl3)6.83-6.85(d,1H),6.58-6.60(d,1H),5.79-5.83(m,1H),5.55-5.57(m,1H),5.12-5.30(m,3H),4.60-4.61(m,1H),4.16-4.17(m,1H),3.89-3.94(m,1H),3.77-3.82(m,1H),3.52-3.55(m,2H),3.37(s,3H),2.89-3.11(m,5H),2.52-2.63(m,2H),2.19-2.21(m,2H),1.82-1.87(m,1H),1.50-1.53(m,3H),1.25-1.33(m,1H)。LC-MS:[M+H]+418.22。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000027
将化合物12(1.3g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中，N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0当量)，加完保持在室温反应1h。然后，将化合物9A(1.5eq)用10mL DMF和10mL甲苯溶解后，滴加到反应液中，滴加完毕，升温至70℃反应24h，TLC检测反应完全。加入水淬灭反应，减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷 萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到500mg油状物化合物13A，收率19.39％，LC-MS:[M+H]+828.47。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000028
将化合物13A(500mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中，室温加入预先制备的3.8M HCl甲醇溶液5mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调PH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化，得到200mg化合物14A，收率44.77％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.26(s,1H),6.68-6.70(d,1H),6.49-6.51(d,1H),5.79-5.81(m,1H),5.14-5.30(m,2H),4.71-4.72(m,1H),3.88-3.91(m,1H),3.76-3.79(m,3H),3.53-3.68(m,30H),3.37(s,6H),3.03-3.10(m,3H),2.88-2.89(m,1H),2.42-2.63(m,4H),2.16-2.31(m,2H),1.42-1.79(m,4H)。LC-MS:[M+H]+740.41。
实施例2：化合物14B的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000029
化合物14B
Figure PCTCN2016107513-appb-000030
步骤4：
Figure PCTCN2016107513-appb-000031
取500ml反应瓶，将化合物4(9g)、DMF(90ml)加入到瓶中，将NaH(4.0eq) 分批加入到反应瓶中，有大量气泡冒出。搅拌40分钟后，将化合物4A-1(3.0eq,购自成都爱斯特)滴加到反应瓶中，于60℃加热反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液加入到500ml水中，加入DCM 200ml分液，水相用DCM(300ml×4)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。通过柱色谱法(洗脱剂：PE:EA＝1：2)纯化，得6.8g油状物化合物5B。LC-MS：[M+H]+299.18。
步骤5：
Figure PCTCN2016107513-appb-000032
将化合物5B(6g)、Pd/C(1.2g)、AcOH(9ml)、MeOH(60ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得3.1g油状物化合物6B。LC-MS：[M+H]+209.13。
步骤6：
Figure PCTCN2016107513-appb-000033
将化合物6B(3g)、DMF(30ml)加入到100ml反应瓶中，将NaH(2.0eq)分批加入到反应中，搅拌反应1h后，将化合物6A-3(2.0eq，根据专利文献WO2006076471制得)滴加到反应液中，于60℃搅拌反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液减压蒸发至干。加入DCM(100ml)、H2O(100ml)分液，水相用DCM(50ml×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝20：1)纯化，得4.2g油状物化合物7B。LC-MS：[M+H]+431.26。
步骤7：
Figure PCTCN2016107513-appb-000034
将化合物7B(4g)、Pd/C(0.8g)、AcOH(6ml)、MeOH(40ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得2.1g油状物化合物8B。LC-MS：[M+H]+341.21。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000035
将化合物8B(2g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保 护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.1g油状物化合物9B。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000036
将化合物12(1.4g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中，N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后，将化合物9B(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中。滴加完毕，升温至70℃反应24h，TLC检测反应完全。加入水淬灭反应，减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到550mg油状物化合物13B，收率22.16％，LC-MS:[M+H]+740.41。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000037
将化合物13B(550mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中，于室温加入预先制备的3.8M HCl甲醇溶液5mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压浓缩溶剂，加入水，并用碳酸钠调PH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化，得到220mg化合物14B，收率45.42％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.18(s,1H),6.67-6.69(d,1H),6.48-6.50(d,1H),5.79-5.81(m,1H),5.14-5.21(m,2H),4.71-4.72(m,1H),3.51-3.90(m,26H),3.37(s,6H),3.08-3.10(m,3H),2.87-2.89(m,1H),2.50-2.60(m,4H),2.23-2.29(m,2H),1.20-1.59(m,4H)。LC-MS:[M+H]+652.36。
实施例3：化合物14C的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000038
化合物14C
Figure PCTCN2016107513-appb-000039
步骤6：
Figure PCTCN2016107513-appb-000040
将化合物6B(5g)、DMF(50ml)加入到100ml反应瓶中，将NaH(2.0eq)分批加入到反应中，搅拌反应1h后，将化合物6A-5(2.0eq，根据专利文献WO2006076471制得)滴加到反应液中，于60℃搅拌反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液减压蒸发至干。加入DCM(100ml)、H2O(100ml)分液，水相用DCM(50ml×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝20：1)纯化，得6.1g油状物化合物7C。LC-MS：[M+H]+519.31。
步骤7：
Figure PCTCN2016107513-appb-000041
将化合物7C(5g)、Pd/C(1g)、AcOH(7.5ml)、MeOH(50ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得2.5g油状物化合物8C。LC-MS：[M+H]+429.26。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000042
将化合物8C(2g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.1g油状物化合物9C。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000043
将化合物12(1.5g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中，N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9C(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中。滴加完毕，升温至70℃反应24h。TLC检测反应完全，加入水淬灭反应。减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到600mg油状物化合物13C，收率20.16％，LC-MS:[M+H]+828.47。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000044
将化合物13C(600mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中。于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液5mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调PH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化，得到235mg化合物14C，收率43.84％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.59(s,1H),6.68-6.70(d,1H),6.49-6.51(d,1H),5.76-5.83(m,1H),5.14-5.22(m,2H),4.70-4.71(m,1H),3.51-3.91(m,36H),3.37(s,6H),3.04-3.10(m,3H),2.88-2.89(m,1H),2.51-2.60(m,2H),2.16-2.30(m,2H),1.41-1.71(m,4H)。LC-MS:[M+H]+740.41。
实施例4：化合物14D的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000045
化合物14D
Figure PCTCN2016107513-appb-000046
步骤4：
Figure PCTCN2016107513-appb-000047
取500ml反应瓶，将化合物4(8g)、DMF(120ml)加入到瓶中，将NaH(4.0eq)分批加入到反应瓶中，有大量气泡冒出。搅拌40分钟后，将化合物4A-3(3.0eq，购自成都爱斯特)滴加到反应瓶中，于60℃加热反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液加入到500ml水中，加入DCM 200ml分液，水相用DCM(300ml×4)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。通过柱色谱法(洗脱剂：PE:EA＝1：1)纯化，得6.4g油状物化合物5D。LC-MS：[M+H]+475.28。
步骤5：
Figure PCTCN2016107513-appb-000048
将化合物5D(5g)、Pd/C(1g)、AcOH(7.2ml)、MeOH(100ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得3.8g油状物化合物6D。LC-MS：[M+H]+385.24。
步骤6：
Figure PCTCN2016107513-appb-000049
将化合物6D(3.5g)、DMF(35ml)加入到250ml反应瓶中，将NaH(2.0eq)分批加入到反应中，搅拌反应1h后，将化合物6A-1(2.0eq，根据专利WO2006076471制得)滴加到反应液中，于60℃搅拌反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液减压蒸发至干。加入DCM(100ml)、H2O(100ml)分液，水相用DCM(50ml×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝20：1)纯化，得4.2g油状物化 合物7D。LC-MS：[M+H]+519.31。
步骤7：
Figure PCTCN2016107513-appb-000050
将化合物7D(4g)、Pd/C(0.8g)、AcOH(6ml)、MeOH(40ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得2.2g油状物化合物8D。LC-MS：[M+H]+429.26。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000051
将化合物8D(2g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.2g油状物化合物9D。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000052
将化合物12(1.3g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中，N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9D(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中，滴加完毕，升温至70℃反应24h。TLC检测反应完全，加入水淬灭反应，减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到520mg油状物化合物13D，收率20.16％，LC-MS:[M+H]+828.47。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000053
将化合物13D(520mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中，于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液5mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶 剂，加入水，并用碳酸钠调PH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化，得到215mg化合物14D，收率46.28％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.20(s,1H),6.68-6.70(d,1H),6.49-6.51(d,1H),5.79-5.81(m,1H),5.14-5.21(m,2H),4.71-4.72(m,1H),3.51-3.91(m,36H),3.36(d,6H),3.08-3.10(m,3H),2.88-2.89(m,1H),2.51-2.60(m,2H),2.16-2.30(m,2H),1.41-1.71(m,4H)。LC-MS:[M+H]+740.41。
实施例5：化合物14E的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000054
化合物14E
Figure PCTCN2016107513-appb-000055
步骤6：
Figure PCTCN2016107513-appb-000056
将化合物6A(4g)、DMF(40ml)加入到250ml反应瓶中，将NaH(2.0eq)分批加入到反应中，搅拌反应1h后，将化合物6A-1(2.0eq，根据专利文献WO2006076471制得)滴加到反应液中，于60℃搅拌反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液减压蒸发至干。加入DCM(100ml)、H2O(100ml)分液，水相用DCM(50ml×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝20：1)纯化，得4.2g油状物化合物7E。LC-MS：[M+H]+431.26。
步骤7：
Figure PCTCN2016107513-appb-000057
将化合物7E(4g)、Pd/C(0.8g)、AcOH(6ml)、MeOH(40ml)加入到氢化 反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得2.3g油状物化合物8E。LC-MS：[M+H]+341.21。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000058
将化合物8E(2g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.2g油状物化合物9E。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000059
将化合物12(1.3g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中，N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9E(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中。滴加完毕，升温至70℃反应24h。TLC检测反应完全，加入水淬灭反应。减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到510mg油状物化合物13E，收率22.13％，LC-MS:[M+H]+740.41。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000060
将化合物13E(510mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中。于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液5mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调pH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化得到205mg化合物14E，收率45.64％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.47(s,1H),6.67-6.69(d,1H),6.48-6.50(d,1H),5.79-5.80(m,1H),5.14-5.21(m,2H),4.68-4.70(m,1H),3.52-3.87(m,27H),3.37(d,6H),3.09-3.11(m,2H),2.87-2.89(m,1H),2.50-2.60(m,4H),2.16-2.30(m,2H),1.41-1.71(m,4H)。LC-MS: [M+H]+652.36。
实施例6：化合物14F的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000061
化合物14F
Figure PCTCN2016107513-appb-000062
步骤6：
Figure PCTCN2016107513-appb-000063
将化合物6A(4g)、DMF(40ml)加入到250ml反应瓶中，将NaH(2.0eq)分批加入到反应中，搅拌反应1h后，将化合物6A-2(2.0eq，根据专利文献WO2006076471制得)滴加到反应液中，于60℃搅拌反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液减压蒸发至干。加入DCM(100ml)、H2O(100ml)分液，水相用DCM(50ml×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝20：1)纯化，得4.2g油状物化合物7F。LC-MS：[M+H]+475.28。
步骤7：
Figure PCTCN2016107513-appb-000064
将化合物7F(4g)、Pd/C(0.8g)、AcOH(6ml)、MeOH(40ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得2.3g油状物化合物8F。LC-MS：[M+H]+385.24。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000065
将化合物8F(2g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.2g油状物化合物9F。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000066
将化合物12(1.5g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中，N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9F(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中，滴加完毕，升温至70℃反应24h。TLC检测反应完全，加入水淬灭反应。减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到610mg油状物化合物13F，收率21.65％，LC-MS:[M+H]+784.44。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000067
将化合物13F(610mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中。于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液5mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调pH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化得到275mg化合物14F，收率50.80％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.48(s,1H),6.68-6.70(d,1H),6.49-6.51(d,1H),5.79-5.80(m,1H),5.17-5.22(m,2H),4.70-4.71(m,1H),3.54-3.87(m,30H),3.37(s,6H),3.08-3.10(m,3H),2.88(m,1H),2.51-2.60(m,4H),2.16-2.30(m,2H),1.41-1.61(m,4H)。LC-MS:[M+H]+696.39。
实施例7：化合物14G的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000068
化合物14G
Figure PCTCN2016107513-appb-000069
步骤6：
Figure PCTCN2016107513-appb-000070
将化合物6A(3g)、DMF(30ml)加入到250ml反应瓶中，将NaH(2.0eq)分批加入到反应中，搅拌反应1h后，将化合物6A-4(2.0eq，根据专利文献WO2006076471制得)滴加到反应液中，于60℃搅拌反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液减压蒸发至干。加入DCM(100ml)、H2O(100ml)分液，水相用DCM(50ml×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝20：1)纯化，得4.2g油状物化合物7G。LC-MS：[M+H]+563.34。
步骤7：
Figure PCTCN2016107513-appb-000071
将化合物7G(4g)、Pd/C(0.8g)、AcOH(6ml)、MeOH(40ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得2.3g油状物化合物8G。LC-MS：[M+H]+473.29。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000072
将化合物8G(2g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.2g油状物化合物9G。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000073
将化合物12(1.4g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中，N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9G(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中，滴加完毕，升温至70℃反应24h。TLC检测反应完全，加入水淬灭反应。减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到530mg油状物化合物13G，收率18.12％，LC-MS:[M+H]+872.49。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000074
将化合物13G(530mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中。于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液5mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调pH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化得到205mg化合物14G，收率43％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.31(s,1H),6.68-6.70(d,1H),6.49-6.51(d,1H),5.79-5.82(m,1H),5.14-5.22(m,2H),4.71-4.72(m,1H),3.51-3.91(m,38H),3.37(s,6H),3.08-3.10(m,3H),2.88-2.89(m,1H),2.41-2.58(m,4H),2.12-2.31(m,2H),1.41-1.61(m,4H)。LC-MS:[M+H]+784.44。
实施例8：化合物14H的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000075
化合物14H
Figure PCTCN2016107513-appb-000076
步骤6：
Figure PCTCN2016107513-appb-000077
将化合物6B(5g)、DMF(100ml)加入到250ml反应瓶中，将NaH(2.0eq)分批加入到反应中，搅拌反应1h后，将化合物6A-4(2.0eq，根据专利文献WO2006076471制得)滴加到反应液中，于60℃搅拌反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液减压蒸发至干。加入DCM(100ml)、H2O(100ml)分液，水相用DCM(50ml×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝20：1)纯化，得5.8g油状物化合物7H。LC-MS：[M+H]+475.28。
步骤7：
Figure PCTCN2016107513-appb-000078
将化合物7H(5g)、Pd/C(1g)、AcOH(7.5ml)、MeOH(50ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得2.3g油状物化合物8H。LC-MS：[M+H]+385.24。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000079
将化合物8H(2g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)， 无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.1g油状物化合物9H。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000080
将化合物12(1.45g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中，N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9H(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中。滴加完毕，升温至70℃反应24h。TLC检测反应完全，加入水淬灭反应。减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到560mg油状物化合物13H，收率20.56％，LC-MS:[M+H]+784.44。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000081
将化合物13H(560mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中。于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液5mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调pH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化得到215mg化合物14H，收率43.27％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.14(s,1H),6.68-6.70(d,1H),6.49-6.51(d,1H),5.79-5.80(m,1H),5.14-5.22(m,2H),4.71-4.72(m,1H),3.51-3.90(m,30H),3.37(d,6H),3.08-3.10(m,3H),2.87-2.89(m,1H),2.51-2.74(m,4H),2.16-2.30(m,2H),1.31-1.60(m,4H)。LC-MS:[M+H]+696.39。
实施例9：化合物14I的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000082
化合物14I
Figure PCTCN2016107513-appb-000083
步骤6：
Figure PCTCN2016107513-appb-000084
将化合物6B(5g)、DMF(50ml)加入到250ml反应瓶中，将NaH(2.0eq)分批加入到反应中，搅拌反应1h后，将化合物6A-6(2.0eq，根据专利文献WO 2006076471制得)滴加到反应液中，于60℃搅拌反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液减压蒸发至干。加入DCM(100ml)、H2O(100ml)分液，水相用DCM(50ml×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝20：1)纯化，得7.2g油状物化合物7I。LC-MS：[M+H]+563.34。
步骤7：
Figure PCTCN2016107513-appb-000085
将化合物7I(5g)、Pd/C(1g)、AcOH(7.5ml)、MeOH(50ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得2.4g油状物化合物8I。LC-MS：[M+H]+473.29。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000086
将化合物8I(2g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.1g油状物化合物9I。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000087
将化合物12(1.3g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中，N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9I(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中，滴加完毕，升温至70℃反应24h。TLC检测反应完全，加入水淬灭反应。减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到510mg油状物化合物13I，收率18.78％，LC-MS:[M+H]+872.49。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000088
将化合物13I(510mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中。于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液5mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调PH值到10左右。用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化得到200mg化合物14I，收率43.63％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.45(s,1H),6.69-6.71(d,1H),6.48-6.50(d,1H),5.80-5.82(m,1H),5.14-5.21(m,2H),4.71-4.72(m,1H),3.51-3.91(m,38H),3.36(s,6H),3.08-3.10(m,3H),2.88-2.89(m,1H),2.51-2.61(m,4H),2.15-2.32(m,2H),1.31-1.71(m,4H)。LC-MS:[M+H]+784.44。
实施例10：化合物14J的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000089
化合物14J
Figure PCTCN2016107513-appb-000090
步骤6：
Figure PCTCN2016107513-appb-000091
将化合物SM-6(4g，购自成都爱斯特)、DMF(50ml)加入到250ml反应瓶中，将NaH(2.0eq)分批加入到反应中，搅拌反应1h后，将化合物6A-3(2.0eq，根据专利文献WO 2006076471制得)滴加到反应液中，于60℃搅拌反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液减压蒸发至干。加入DCM(100ml)、H2O(100ml)分液，水相用DCM(50ml×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝20：1)纯化，得5.5g油状物化合物7J。LC-MS：[M+H]+343.20。
步骤7：
Figure PCTCN2016107513-appb-000092
将化合物7J(4g)、Pd/C(0.8g)、AcOH(6ml)、MeOH(40ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得2.0g油状物化合物8J。LC-MS：[M+H]+253.16。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000093
将化合物8J(1.8g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.2g油状物化合物9J。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000094
将化合物12(1.5g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中。N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9J(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中。滴加完毕，升温至70℃反应24h。TLC检测反应完全，加入水淬灭反应。减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到580mg油状物化合物13J，收率24.76％，LC-MS:[M+H]+652.36。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000095
将化合物13J(580mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中。于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液5mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调PH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化得到220mg化合物14J，收率43.88％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.36(s,1H),6.69-6.71(d,1H),6.49-6.51(d,1H),5.80-5.81(m,1H),5.14-5.21(m,2H),4.71-4.72(m,1H),3.48-3.90(m,18H),3.36(d,6H),3.09-3.10(m,3H),2.88-2.89(m,1H),2.49-2.60(m,4H),2.18-2.27(m,2H),1.41-1.72(m,4H)。LC-MS:[M+H]+564.31。
实施例11：化合物14K的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000096
化合物14K
Figure PCTCN2016107513-appb-000097
步骤6：
Figure PCTCN2016107513-appb-000098
将化合物SM-6(4g，购自成都爱斯特)、DMF(50ml)加入到250ml反应瓶中，将NaH(2.0eq)分批加入到反应中，搅拌反应1h后，将化合物6A-4(2.0eq,根据专利文献WO 2006076471制得)滴加到反应液中，于60℃搅拌反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液减压蒸发至干。加入DCM(100ml)、H2O(100ml)分液，水相用DCM(50ml×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝20：1)纯化，得5.5g油状物化合物7K。LC-MS：[M+H]+387.23。
步骤7：
Figure PCTCN2016107513-appb-000099
将化合物7K(4g)、Pd/C(0.8g)、AcOH(6ml)、MeOH(40ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得2.0g油状物化合物8K。LC-MS：[M+H]+297.18。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000100
将化合物8K(1.8g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.2g油状物化合物9K。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000101
将化合物12(1.4g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中。N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9K(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中。滴加完毕，升温至70℃反应24h。TLC检测反应完全，加入水淬灭反应。减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到525mg油状物化合物13K，收率22.5％，LC-MS:[M+H]+696.39。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000102
将化合物13K(525mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中。于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液5mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调PH值到10左右。用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化得到203mg化合物13K，收率44.26％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.29(s,1H),6.68-6.70(d,1H),6.49-6.51(d,1H),5.79-5.80(m,1H),5.14-5.21(m,2H),4.71-4.72(m,1H),3.45-3.90(m,22H),3.36(d,6H),3.09-3.10(m,3H),2.88-2.89(m,1H),2.51-2.60(m,4H),2.16-2.27(m,2H),1.25-1.60(m,4H)。LC-MS:[M+H]+608.34。
实施例12：化合物14L的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000103
化合物14L
Figure PCTCN2016107513-appb-000104
步骤6：
Figure PCTCN2016107513-appb-000105
将化合物SM-6(4g，购自成都爱斯特)、DMF(40ml)加入到250ml反应瓶中，将NaH(2.0eq)分批加入到反应中，搅拌反应1h后，将化合物6A-5(2.0eq，根据专利文献WO2006076471制得)滴加到反应液中，于60℃搅拌反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液减压蒸发至干。加入DCM(100ml)、H2O(100ml)分液，水相用DCM(50ml×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝20：1)纯化，得5.6g油状物化合物7L。LC-MS：[M+H]+431.26。
步骤7：
Figure PCTCN2016107513-appb-000106
将化合物7L(5g)、Pd/C(1g)、AcOH(7.5ml)、MeOH(50ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得2.3g油状物化合物8L。LC-MS：[M+H]+341.21。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000107
将化合物8L(1.8g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.2g油状物化合物9L。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000108
将化合物12(1.55g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中。N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9L(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中。滴加完毕，升温至70℃反应24h。TLC检测反应完全，加入水淬灭反应。减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到610mg油状物化合物13L，收率22.2％，LC-MS:[M+H]+740.41。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000109
将化合物13L(610mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中。于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液5mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调PH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化得到255mg化合物14L，收率47.47％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.47(s,1H),6.67-6.69(d,1H),6.48-6.50(d,1H),5.79-5.81(m,1H),5.14-5.21(m,2H),4.68-4.70(m,1H),3.51-3.91(m,26H),3.36(s,6H),3.04-3.10(m,3H),2.88-2.89(m,1H),2.48-2.60(m,4H),2.16-2.30(m,2H),1.41-1.61(m,4H)。LC-MS:[M+H]+652.36。
实施例13：化合物14M的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000110
化合物14M
Figure PCTCN2016107513-appb-000111
步骤6：
Figure PCTCN2016107513-appb-000112
将化合物SM-6(4g，购自成都爱斯特)、DMF(50ml)加入到250ml反应瓶中，将NaH(2.0eq)分批加入到反应中，搅拌反应1h后，将化合物6A-6(2.0eq，根据专利文献WO 2006076471制得)滴加到反应液中，于60℃搅拌反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液减压蒸发至干。加入DCM(100ml)、H2O(100ml)分液，水相用DCM(50ml×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝20：1)纯化，得5.6g油状物化合物7M。LC-MS：[M+H]+475.28。
步骤7：
Figure PCTCN2016107513-appb-000113
将化合物7M(5g)、Pd/C(1g)、AcOH(7.5ml)、MeOH(50ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得2.4g油状物化合物8M。LC-MS：[M+H]+385.24。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000114
将化合物8M(2g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.4g油状物化合物9M。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000115
将化合物12(1.5g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中。N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9M(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中。滴加完毕，升温至70℃反应24h。TLC检测反应完全，加入水淬灭反应。减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到575mg油状物化合物13M，收率20.41％，LC-MS:[M+H]+784.44。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000116
将化合物13M(575mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中。于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液5mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调PH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化得到230mg化合物14M，收率45.08％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.18(s,1H),6.68-6.70(d,1H),6.49-6.51(d,1H),5.80-5.81(m,1H),5.14-5.22(m,2H),4.71-4.72(m,1H),3.46-3.90(m,30H),3.36(d,6H),3.08-3.10(m,3H),2.88-2.89(m,1H),2.54-2.68(m,4H),2.16-2.27(m,2H),1.40-1.67(m,4H)。LC-MS:[M+H]+696.39。
实施例14：化合物14N的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000117
化合物14N
Figure PCTCN2016107513-appb-000118
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000119
将化合物6A(2g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.2g油状物化合物9N。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000120
将化合物12(1.5g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中，N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9N(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中。滴加完毕，升温至70℃反应24h。TLC检测反应完全，加入水淬灭反应。减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到420mg油状物化合物13N，收率12.41％，LC-MS:[M+H]+696.39。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000121
将化合物13N(420mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中。于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液5mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调PH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干 燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化得到130mg化合物14N，收率25.08％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.30(s,1H),6.69-6.71(d,1H),6.50-6.52(d,1H),5.79-5.80(m,1H),5.15-5.21(m,2H),4.70-4.72(m,1H),3.46-3.90(m,22H),3.37(m,6H),3.09-3.10(m,3H),2.88-2.89(m,1H),2.51-2.60(m,4H),2.16-2.27(m,2H),1.25-1.60(m,4H)。LC-MS:[M+H]+608.34。
实施例15：化合物14O的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000122
化合物14O
Figure PCTCN2016107513-appb-000123
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000124
将化合物6D(2g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.5g油状物化合物9O。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000125
将化合物12(1.5g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中。N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9O(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中。滴加完毕，升温至70℃反应24h。 TLC检测反应完全，加入水淬灭反应。减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到400mg油状物化合物13O，收率15.41％，LC-MS:[M+H]+784.44。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000126
将化合物13O(400mg)、6ml甲醇加入到50ml单口瓶中。于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液4mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调PH值到10左右。用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化得到150mg化合物14O，收率30％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.14(s,1H),6.68-6.70(d,1H),6.49-6.51(d,1H),5.80-5.83(m,1H),5.15-5.22(m,2H),4.72-4.74(m,1H),3.54-3.90(m,30H),3.39(m,6H),3.08-3.12(m,3H),2.87-2.91(m,1H),2.48-2.76(m,4H),2.17-2.32(m,2H),1.33-1.62(m,4H)。LC-MS:[M+H]+696.39。
实施例16：化合物14P的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000127
化合物14P
Figure PCTCN2016107513-appb-000128
步骤2：
Figure PCTCN2016107513-appb-000129
将化合物SM-4P(10g，购自上海安耐吉)、THF(100ml)加入到250mL反应瓶中，于0℃分批加入叔丁醇钾(2.0eq)，加完继续搅拌30分钟，保持在0℃将BnBr(1.5eq)滴加进反应液，缓慢升至20℃反应4小时。TLC检测反应完全，将反应液加入200mL水中，并用乙酸乙酯萃取(100mL×3)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，直接通过柱色谱法(洗脱剂：PE:EA＝3：1)纯化，得10.5g油状物化合物5P。LC-MS:[M+H]+223.13。
步骤3：
Figure PCTCN2016107513-appb-000130
将化合物5P(10.5g)、6M HCl(50ml)、MeOH(100ml)加入到2L反应瓶中，搅拌反应过夜。次日，TLC检测反应完全，将反应液减压浓缩至干，直接通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝15：1)纯化，得7.5g油状物化合物6P。LC-MS:[M+H]+183.09。
步骤4：
Figure PCTCN2016107513-appb-000131
取500ml反应瓶，将化合物6P(7.5g)、DMF(75ml)加入到瓶中，将NaH(4.0eq)分批加入到反应瓶中，有大量气泡冒出。搅拌40分钟后，将化合物4A-3(3.0eq，购自成都爱斯特)滴加到反应瓶中，于60℃加热反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液加入到500ml水中，加入DCM 200ml分液，水相用DCM(100ml×4)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。通过柱色谱法(洗脱剂：PE:EA＝1：2)纯化，得7g油状物化合物7P。LC-MS：[M+H]+475.28。
步骤5：
Figure PCTCN2016107513-appb-000132
将化合物7P(7g)、Pd/C(1.4g)、AcOH(10ml)、MeOH(70ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得3.2g油状物化合物8P。LC-MS：[M+H]+385.24。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000133
将化合物8P(2g)、DIEA(2.0eq)，40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.2g油状物化合物9P。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000134
将化合物12(1.5g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中，N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9P(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中。滴加完毕，升温至70℃反应24h。TLC检测反应完全，加入水淬灭反应。减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到350mg油状物化合物13P，收率15.41％，LC-MS:[M+H]+784.44。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000135
将化合物13P(350mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中。于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液4mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调PH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化得到110mg化合物14P，收率25.08％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.12(s,1H),6.68-6.70(d,1H),6.49-6.51(d,1H),5.80-5.83(m,1H),5.15-5.23(m,2H),4.71-4.73(m,1H),3.54-3.91(m,30H),3.39(m,6H),3.08-3.10(m,3H),2.87-2.90(m,1H),2.51-2.72(m,4H),2.16-2.34(m,2H),1.32-1.58(m,4H)。LC-MS:[M+H]+696.39。
实施例17：化合物14Q的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000136
化合物14Q
Figure PCTCN2016107513-appb-000137
步骤2：
Figure PCTCN2016107513-appb-000138
将化合物SM-4Q(10g，购自上海安耐吉)、THF(100ml)加入到250mL反应瓶中，0℃下分批加入叔丁醇钾(2.0eq)，加完继续搅拌30分钟，保持在0℃将BnBr(1.5eq)滴加进反应液，缓慢升至20℃反应4小时。TLC检测反应完全，将反应液加入200mL水中，并用乙酸乙酯萃取(100mL×3)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，直接通过柱色谱法(洗脱剂：PE:EA＝3：1)纯化，得10.5g油状物化合物5Q。LC-MS:[M+H]+223.13。
步骤3：
Figure PCTCN2016107513-appb-000139
将化合物5Q(10.5g)、6M HCl(50ml)、MeOH(100ml)加入到2L反应瓶中，搅拌反应过夜。次日，TLC检测反应完全，将反应液减压浓缩至干，直接通过柱色谱法(洗脱剂：DCM:MeOH＝15：1)纯化，得7.5g油状物化合物6Q。LC-MS:[M+H]+183.09。
步骤4：
Figure PCTCN2016107513-appb-000140
取500ml反应瓶，将化合物6Q(7.5g)、DMF(75ml)加入到瓶中，将NaH (4.0eq)分批加入到反应瓶中，有大量气泡冒出。搅拌40分钟后，将化合物4A-3(3.0eq，购自成都爱斯特)滴加到反应瓶中，于60℃加热反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液加入到500ml水中，加入DCM 200ml分液，水相用DCM(100ml×4)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。通过柱色谱法(洗脱剂：PE:EA＝1：2)纯化，得7g油状物化合物7Q。LC-MS：[M+H]+475.28。
步骤5：
Figure PCTCN2016107513-appb-000141
将化合物7Q(6g)、Pd/C(1.2g)、AcOH(9ml)、MeOH(60ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得3.2g油状物化合物8Q。LC-MS：[M+H]+385.24。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000142
将化合物8Q(2g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.2g油状物化合物9Q。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000143
将化合物12(1.5g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中，N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9Q(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中，滴加完毕，升温至70℃反应24h，TLC检测反应完全。加入水淬灭反应，减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到400mg油状物化合物13Q，收率14.41％，LC-MS:[M+H]+784.44。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000144
将化合物13Q(400mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中。于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液4mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调PH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化，得到120mg化合物14Q，收率25.08％。HNMR(400MHz,CDCl3)7.15(s,1H),6.69-6.71(d,1H),6.49-6.51(d,1H),5.82-5.84(m,1H),5.16-5.23(m,2H),4.71-4.73(m,1H),3.54-3.88(m,30H),3.38(d,6H),3.09-3.11(m,3H),2.80-2.90(m,1H),2.51-2.73(m,4H),2.15-2.34(m,2H),1.32-1.59(m,4H)。LC-MS:[M+H]+696.39。
实施例18：化合物14R的制备
Figure PCTCN2016107513-appb-000145
化合物14R
Figure PCTCN2016107513-appb-000146
步骤4：
Figure PCTCN2016107513-appb-000147
取500ml反应瓶，将化合物4(8g)、DMF(120ml)加入到瓶中，将NaH(4.0eq)分批加入到反应瓶中，有大量气泡冒出。搅拌40分钟后，将化合物4A-4(3.0eq，购自成都爱斯特)滴加到反应瓶中，于60℃加热反应过夜。
次日，TLC检测反应完全，将反应液加入到500ml水中，加入DCM 200ml分液，水相用DCM(300ml×4)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。 通过柱色谱法(洗脱剂：PE:EA＝1：2)纯化，得7.5g油状物化合物5R。LC-MS：[M+H]+387.23。
步骤5：
Figure PCTCN2016107513-appb-000148
将化合物5R(7g)、Pd/C(1.4g)、AcOH(10ml)、MeOH(70ml)加入到氢化反应器中，通入H2，3个大气压下加热40℃反应5h后，TLC检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩除去MeOH，通过柱色谱法(洗脱剂：DCM：MeOH＝20:1)纯化，得3.8g油状物化合物6R。LC-MS：[M+H]+297.18。
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000149
将化合物6R(2g)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入40mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到2.2g油状物化合物9R。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000150
将化合物12(1g)、10mL DMF加入至100mL单口瓶中。N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后，将化合物9R(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中。滴加完毕，升温至70℃反应24h，TLC检测反应完全。加入水淬灭反应，减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化(DCM：MeOH＝20:1)得到250mg油状物化合物13R，收率20.41％，LC-MS:[M+H]+872.49。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000151
将化合物13R(250mg)、5ml甲醇加入到50ml单口瓶中，于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液5mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调PH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过预制TLC纯化，得到120mg化合物14R，收率45.08％。LC-MS:[M+H]+784.44。
实施例19：阳性对照化合物NKTR-118的合成
Figure PCTCN2016107513-appb-000152
化合物NKTR-118
Figure PCTCN2016107513-appb-000153
步骤8：
Figure PCTCN2016107513-appb-000154
将化合物SM-8S(3g，购自上海梯希爱)、DIEA(2.0eq)、40ml DCM加入到100mL三口瓶中，N2保护下，降温至0℃，将MsCl(2.0eq)滴加入反应液中，滴加完毕，保持0℃继续反应2h，TLC检测反应完全。加入50mL DCM稀释，然后用水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，溶剂减压蒸发至干，得到3.4g油状物化合物9S。化合物未经纯化直接用于下一步反应。
步骤11：
Figure PCTCN2016107513-appb-000155
将化合物12(2g)、10mL DMF加入至50mL单口瓶中，N2保护下，于室温分批加入NaH(4.0eq)，加完保持在室温反应1h。然后将化合物9S(1.5eq)用10mLDMF和10mL甲苯溶解，滴加到反应液中。滴加完毕，升温至70℃反应24h。TLC检测反应完全，加入水淬灭反应。减压除去溶剂，加入水和二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过柱色谱法纯化(洗脱剂DCM：MeOH＝20:1)得到2.4g油状物化合物13S，收率67.8％，LC-MS:[M+H]+740.41。
步骤12：
Figure PCTCN2016107513-appb-000156
将化合物13S(2.2g)、20ml甲醇加入到50ml单口瓶中。于室温加入预制3.8M HCl甲醇溶液20mL，室温搅拌反应3小时。TLC检测反应完全，减压蒸发溶剂，加入水，并用碳酸钠调PH值到10左右，用DCM萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，通过柱色谱法纯化(洗脱剂DCM：MeOH＝15:1)得到1.65g化合物NKR-118，收率85.1％。LC-MS:[M+H]+652.36。
测试例
生物学评价
测试例1、本发明化合物对μ阿片受体亲和力测定
1)实验材料与试剂
μ/CHO细胞膜受体蛋白，由中科院上海药物所刘景根教授课题组构建的μ/CHO细胞经提膜制备。
[3H]二丙诺啡([3H]diprenorphine)：1.44Pbq.mol-1，氚标记的广谱型阿片受体拮抗剂，购自PerkinElmer公司，批号为1591933，有效半衰期为12年。
纳洛酮：广谱型阿片受体拮抗剂，购自Sigma公司。
液体闪烁液：PPO(2,5-二苯基恶唑)，购自BDH公司。
POPOP：1,4-双(5-苯基唖唑-2)-苯，购自Sigma公司。
2)实验仪器
PERKIN ELMER PRI-CARB 2910液体闪烁计数仪购自PE公司
3)实验方法
向总结合管加入相当于20-30μg的表达的膜受体蛋白和[3H]-二丙诺啡(0.45nM)，相对应的非特异性结合管加入1μM的相应的配体，样品管加入不同浓度(1nM、10nM、100nM、500nM、1nM和10mM)的化合物，终体积为100μl。30℃孵育30分钟，置冰水中终止反应。在Millipore样品收集器上经GF/C(whatman)玻璃纤维滤纸负压抽滤。用4ml 50mM Tris-HCl(PH 7.4)冲洗三次。滤纸烘干后，置于0.5ml Eppendorf管，加入0.5ml液体闪烁液，PERKIN ELMER PRI-CARB 2910液体闪烁计数仪测定放射性强度，计算抑制率，实验重复两次以上，每组三复管。
抑制率＝(总结合管dpm－样品管dpm)/(总结合管dpm－非特异性结合管dpm)×100％
4)本发明化合物的活性
本发明化合物的μ阿片受体亲和力通过以上试验进行测定，用Prism 5.0软件计算出亲和力解离常数Ki值，所加标记配体的浓度为0.45nM，标记配体的平衡解离常数Kd值为0.2nM。计算得的Ki值见表1。
表1本发明化合物对μ阿片受体亲和力Ki(nM)
实施例编号 Ki(nM)
NKTR118 13.8±0.7
14E 22.9±2.6
14J 2.4±0.01
14P 11.6±0.3
14Q 69.7±4.3
14S 50.1±0.1
14F 36.9±0.5
14A 48.0±1.8
14M 27.7±0.4
14K 30.9±0.3
14H 32.5±0.2
14D 8.4±0.1
14O 36.0±1.6
14B 6.2±0.2
14N 31.1±0.7
14C 59.1±0.1
14G 4.5±0.5
14I 85.7±1.5
14L 40.8±1.9
结论：本发明化合物对μ阿片受体有很强的亲和力。
测试例2、本发明化合物对阿片受体激动剂(脑啡肽)拮抗活性测定
1)实验材料
本实验使用的细胞株：稳定表达阿片受体基因的CHO-K1细胞，金斯瑞生物科技有限公司构建。
脑啡肽：购自Sigma。
2)实验方法
以下所述的体外细胞试验可测定受试化合物对阿片受体激动剂(脑啡肽)的拮抗活性。该试验的一般方案如下。
在实验前一天将稳定表达阿片受体基因的CHO-K1细胞以15000个细胞/孔密度，接种在384孔培养板上，然后将细胞在5％二氧化碳恒温箱内37℃进行培养，使其生长过夜。第二天每孔加入20μL染色液(来自
Figure PCTCN2016107513-appb-000157
Calcium 4assay kit，美国MD公司)后，加入10μL一系列浓度递度(10μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM和0.0001μM)的受试化合物溶液(5x终浓度)，每个浓度设两个复孔。37℃孵育60分钟后室温放置15分钟。加入阿片受体激动剂(脑啡肽)后孵育20s，然后读取100s内荧光信号(荧光成像读板仪，美国MD公司)。
抑制％＝{1-(ΔRFU化合物-ΔRFU基底)/(ΔRFU激动剂对照-ΔRFU基底)}*100
备注：ΔRFU表示与基线相比的相对荧光单位强度差值。
IC50值可通过一系列不同浓度下，受试化合物对脑啡肽的抑制率进行计算。
本发明化合物生物活性由上述分析所得，计算所得的IC50值如下表2所示。
表2本发明化合物对脑啡肽的拮抗IC50(uM)
化合物 IC50(uM)
NKTR-118 1.7
14E 0.9
14J 0.6
14P 1.0
14Q 1.3
14S 1.8
14F 2.2
14A 1.1
14M 0.8
14K 0.5
14H 1.0
14B 1.0
14C 0.2
14D 4.6
14G 0.2
14I 0.5
14L 0.1
14N 1.9
14O 1.0
结论：本发明合物均对脑啡肽有明显的拮抗作用。
测试例3、本发明化合物对小鼠痛觉抑制测试(热板法)
以下所述的体内实验可以用来测试本发明化合物对热板法引起的小鼠痛阈的延长。该实验方法如下。
雌性昆明鼠(购自四川省中医药科学研究院)，体重18～22g，55℃热板法筛选，取基础痛阈值为5～30s的小鼠进入实验，并随机分为正常组、模型组、纳洛酮组、NKRT-118阳性对照化合物组、化合物14A组、化合物14M组、化合物14C组、化合物14B组，共8组。正常组、模型组均ig给予NS(0.2ml/10g)，阳性药物组iv纳洛酮(1.43mg/kg)，受试药物组分别ig给予NKTR-118、14A、14M、14C、14B(42.9mg/kg)；ig给药完成25min(iv纳洛酮5min)后，iv给予吗啡(11.4mg/kg)，正常组iv给予NS作为对照。iv给予吗啡(或NS)后5min和30min分别测定痛反应时间。痛阈延长的指标由痛阈反应提高百分率来表示，计算方式如下：
Figure PCTCN2016107513-appb-000158
本发明化合物对小鼠热板法痛阈提高百分率见表3。
表3本发明化合物对小鼠热刺激镇痛作用的影响
Figure PCTCN2016107513-appb-000159
Figure PCTCN2016107513-appb-000160
注：与模型组相比：*p＜0.05有明显差异
结论：本发明化合物均能有效延长小鼠热板模型的痛阈。
测试例4、本发明化合物对吗啡造模后大鼠肠蠕动改善的测试
以下所述的体内实验可以用来测试本发明化合物对吗啡造模后大鼠肠蠕动的改善。该实验方案如下。
SD大鼠(购自四川省中医药科学研究院提供)，190～240g，按体重随机均分为正常组、模型组、纳洛酮组、NKTR-118阳性对照化合物组、化合物14A组、化合物14M组、化合物14C组、化合物14B组。正常组、模型组均ig给予NS(0.5 ml/100g)，阳性药物组iv纳洛酮(1mg/kg)，受试药物组分别ig给予NKTR-118、14A、14M、14C、14B(30mg/kg)；ig给药完成25min(iv 5min)后，iv给予吗啡(4mg/kg)，正常组iv给予NS作为对照。iv给予吗啡(或NS)5min后，ig给予22.2％活性炭，25min后颈椎脱臼处死，测量幽门至回盲部的肠管长度作为小肠总长度。从幽门至墨汁前沿距离作为墨汁在肠内推进距离，计算墨汁推进百分率，注意各组小肠容积是否增加。
Figure PCTCN2016107513-appb-000161
本发明化合物对吗啡造模后大鼠肠蠕动的改善结果见表4。
表4本发明化合物对大鼠肠蠕动的影响
Figure PCTCN2016107513-appb-000162
Figure PCTCN2016107513-appb-000163
注：与模型组相比*p＜0.05有明显差异
结论：本发明化合物均可改善吗啡造模后引起的肠蠕动缓慢。
药代动力学评价
测试例5、本发明化合物在大鼠血脑屏障的通透性测试
以大鼠为受试动物，应用LC/MS/MS法测定大鼠血浆和脑组织中的药物浓度，研究本发明化合物在大鼠血脑屏障上的通透性，评价其进入中枢的能力。
SD大鼠(购自西普尔-必凯实验动物有限公司)32只，雌雄各半，平均分成8组；禁食一夜后分别灌胃本发明化合物(10mg/kg)和静脉注射纳洛酮(10mg/kg)。灌胃给药组于给药后2h采血后处死(采血量0.5ml)，血样置于肝素化试管中，3500rpm离心10min分离血浆，于-20℃保存；处死后的动物断头，取脑组织，用滤纸吸干残留的血液，于液氮中速冻10min后于-20℃保存。静脉注射给药组于给药后15min取血后处死，操作方法同前。另取2只动物取空白血及脑，处理方法同给药组。
用LC/MS/MS法(质谱型号API4000，美国AB公司；液相系统型号LC-30AD，日本岛津公司)测定给药后大鼠血浆和脑组织中的药物浓度如下表5所示。
表5本发明化合物在大鼠血浆和脑组织中的浓度
Figure PCTCN2016107513-appb-000164
结论：本发明化合物透过大鼠血脑屏障的能力弱于对照药物，提示本发明化合物可以在改善肠蠕动的同时不会影响阿片类药物的镇痛活性。
测试例6、本发明化合物在小鼠和犬体内药代动力学测试
分别以小鼠和犬为受试动物，应用LC/MS/MS法测定了小鼠和犬灌胃给予本发明化合物后不同时刻血浆中的药物浓度。研究本发明的化合物在小鼠和犬体内的药代动力学行为，评价其药动学特征。
ICR小鼠(购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司)72只，雌雄各半，平均分成6组；禁食一夜后分别灌胃给药。于给药前和给药后0.5、1、2、4、6、8、11、24h由眼眶采血0.1ml，置于肝素化试管中，3500rpm离心10分钟分离血浆，于-20℃保存；给药后2h进食。
Beagle犬(苏州西山中科药物研究开发有限公司提供)12只，雌雄各半，分成3组；禁食一夜后静脉注射给药。静脉组于给药前及给药后5分钟、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、12.0、24.0h，由前肢静脉采血1.0ml，置于肝素化试管中，3500rpm离心10分钟分离血浆，-20℃保存。给药后3h进食。
第二周期：Beagle犬清洗一周后，禁食一夜后灌胃给药。灌胃组于给药前及给药后0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0、12.0、24.0h，由前肢静脉采血1.0ml，置于肝素化试管中，3500rpm离心10分钟分离血浆，-20℃保存。给药后3h进食。用LC/MS/MS法(质谱型号API4000，美国AB公司；液相系统型号LC-30AD，日本岛津公司)测定灌胃给药后大鼠血浆中的待测化合物含量。
本发明化合物在小鼠和犬体内的药代动力学参数如下表6所示。
表6本发明化合物在小鼠和犬体内的药代动力学参数
Figure PCTCN2016107513-appb-000165
Figure PCTCN2016107513-appb-000166
结论：本发明化合物在小鼠和犬体内吸收良好，具有优异的药代动力学行为特征。

Claims (21)

  1. 一种通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐：
    Figure PCTCN2016107513-appb-100001
    其中：
    Figure PCTCN2016107513-appb-100002
    键各自独立地表示R构型、S构型或消旋体；
    R选自氢原子、烷基、环烷基、烯基、烷酰基、羧酸酯基，其中所述烷基、环烷基、烯基、烷酰基、羧酸酯基任选进一步被一个或多个选自卤素、氧代基、烷基、卤代烷基、羟烷基、烯基、杂环基、杂芳基的基团所取代；
    R1选自氢原子、烷基、环烷基、烯基、杂环基，其中所述的烷基、环烷基、烯基、杂环基任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、氧代基、烷基、卤代烷基的基团所取代；
    R2选自氢原子、烷基、烷酰基、羧酸酯基、酰胺基；
    X选自氧原子、硫原子、氨基，所述氨基任选进一步被烷基、卤代烷基、烷酰基取代；
    Z选自氧或氨基，所述氨基任选进一步被烷基、卤代烷基、烷酰基取代；
    R3和R4各自独立地选自氢原子、烷基、烯基、环烷基、杂环基、烷酰基，其中所述烷基、烯基、环烷基、杂环基、烷酰基任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、氧代基、烷基、卤代烷基、羟烷基、烯基、环烷基、杂环基的基团所取代；
    m、n、o、p、q、r各自独立地选自0～15的整数。
  2. 根据权利要求1所述的通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中R选自氢原子、烷基和烷酰基，优选氢原子、C1-C6烷基、和C1-C6烷酰基，更优选氢原子。
  3. 根据权利要求1或2所述的通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中R1选自氢原子、烷基、环烷基和烯基，优选氢原子、C1-C6烷基、C3-C12环烷基和C2-C6烯基，进一步优选氢原子、甲基、环丙基和烯丙基，更优选烯丙基和环丙基。
  4. 根据权利要求1～3任一项所述的通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外 消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中R2选自氢原子和烷酰基，优选氢原子和C1-C6烷酰基，更优选氢原子和乙酰基。
  5. 根据权利要求1～4任一项所述的通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中X选自氧原子。
  6. 根据权利要求1～5任一项所述的通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中Z选自氧原子。
  7. 根据权利要求1～6任一项所述的通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中R3和R4各自独立地选自氢原子、烷基和烷酰基，优选氢原子、C1-C6烷基和C1-C6烷酰基，更优选氢原子、甲基、乙基和乙酰基。
  8. 根据权利要求1～7任一项所述的通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中m选自0～6的整数。
  9. 根据权利要求1～8任一项所述的通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中n选自0、1和2。
  10. 根据权利要求1～9任一项所述的通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中o和p各自独立地为0、1和2。
  11. 根据权利要求1～10任一项所述的通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中q和r各自独立地选自0～4的整数。
  12. 根据权利要求1～11任一项所述的通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中H上的
    Figure PCTCN2016107513-appb-100003
    键所连接的碳原子构型为R。
  13. 根据权利要求1～12任一项所述的通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外 消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中Z上的
    Figure PCTCN2016107513-appb-100004
    键所连接的碳原子构型为S。
  14. 根据权利要求1～13任一项所述的通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中OR2上的
    Figure PCTCN2016107513-appb-100005
    键所连接的碳原子构型为S。
  15. 根据权利要求1～14任一项所述的通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其选自：
    Figure PCTCN2016107513-appb-100006
  16. 一种制备根据权利要求1所述的通式(I)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐的方法，该方法包括：
    Figure PCTCN2016107513-appb-100007
    其中，
    通式(IA)化合物与通式(IB)化合物在碱性条件下，进行取代或缩合反应得到通式(I)化合物；
    其中：
    Figure PCTCN2016107513-appb-100008
    R、R1～R4、X、Z、m、n、o、p、q、r的定义如权利要求1所述；
    R5选自氢、羟基、卤素、三氟甲磺酰氧基、和对甲苯磺酸酰氧基。
  17. 一种药物组合物，其含有治疗有效量的根据权利要求1～15任一项所述的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
  18. 根据权利要求1～15任一项所述的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，或根据权利要求17所述的药物组合物，在制备治疗外周神经疾病的药物中的用途。
  19. 根据权利要求1～15任一项所述的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，或根据权利要求17所述的药物组合物，在制备治疗因长期使用阿片类镇痛药引起的便秘、胃食管反流、腹胀、急性中毒、呼吸抑制的病症的药物中的用途。
  20. 一种治疗外周神经疾病的方法，其包括向患者使用治疗有效量的根据权利要求1～15任一项所述的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，或根据权利要求17所述的药物组合物。
  21. 一种治疗因长期使用阿片类镇痛药引起的便秘、胃食管反流、腹胀、急性中毒、呼吸抑制的病症的方法，其包括向患者使用治疗有效量的根据权利要求1～15任一项所述的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，或根据权利要求17所述的药物组合物。
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