WO2016103695A1 - 抗癌剤および輸液とそれらの製造方法ならびに抗癌物質 - Google Patents

抗癌剤および輸液とそれらの製造方法ならびに抗癌物質 Download PDF

Info

Publication number
WO2016103695A1
WO2016103695A1 PCT/JP2015/006419 JP2015006419W WO2016103695A1 WO 2016103695 A1 WO2016103695 A1 WO 2016103695A1 JP 2015006419 W JP2015006419 W JP 2015006419W WO 2016103695 A1 WO2016103695 A1 WO 2016103695A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
aqueous solution
plasma
anticancer agent
solution
potassium
Prior art date
Application number
PCT/JP2015/006419
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
水野　正明
勝 堀
史隆 吉川
広明 梶山
史 内海
香江 中村
健治 石川
圭吾 竹田
宏昌 田中
加納　浩之
Original Assignee
国立大学法人名古屋大学
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 国立大学法人名古屋大学 filed Critical 国立大学法人名古屋大学
Priority to JP2016565922A priority Critical patent/JP6736004B2/ja
Publication of WO2016103695A1 publication Critical patent/WO2016103695A1/ja

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/14—Alkali metal chlorides; Alkaline earth metal chlorides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations

Definitions

  • the technical field of this specification relates to anticancer agents and infusions, methods for producing them, and anticancer substances. More specifically, the present invention relates to an anticancer agent and an infusion solution produced using plasma, a method for producing them, and an anticancer substance.
  • Plasma technology is applied in the fields of electricity, chemistry, and materials. In recent years, medical applications have been actively studied. Inside the plasma, ultraviolet rays and radicals are generated in addition to charged particles such as electrons and ions. These have been found to have various effects on living tissues, including sterilization of living tissues.
  • Patent Document 1 discloses blood coagulation (see Example 4 of Patent Document 1, paragraphs [0063] to [0068]) and tissue sterilization (Example 5 of Patent Document 1, paragraph [ 0069]-[0074]) and leishmaniasis (see Example 6 of Patent Document 1, paragraphs [0075]-[0077]). And it is described that plasma has the effect of killing melanoma cells (malignant melanoma cells) (see Example 7 of Patent Document 1, paragraph [0078]).
  • Patent Document 2 discloses a technique for sterilizing bacteria in a liquid by irradiating plasma with a liquid adjusted to have a pH of 4.8 or less (Patent Document 2 paragraph [ 0020] etc.). Further, it is described that a superoxide anion radical, a hydroperoxy radical, etc. may have a bactericidal effect (see paragraphs [0090]-[0099] etc. of Patent Document 2).
  • Patent Document 3 paragraphs [0085]-[0087] and FIG. 16 etc.).
  • This anti-tumor aqueous solution can selectively kill cancer cells with little effect on normal cells.
  • this anti-tumor aqueous solution exerted an anti-tumor effect not only on cultured cells but also on mice (see paragraphs [0145]-[0152] and FIGS. 45 and 46 of Patent Document 3).
  • the technology of this specification has been made to solve the problems of the conventional technology described above. That is, the problem is that the cancer cells can be selectively killed with little effect on normal cells, and can be administered to the body of a patient, infusions, methods for their production, and anticancer Is to provide a substance.
  • the method for producing an anticancer agent according to the first aspect includes an aqueous solution preparation step of preparing a first aqueous solution, and a plasma irradiation step of irradiating the first aqueous solution with plasma to form a second aqueous solution.
  • the first aqueous solution comprises lactic acid, sodium lactate, potassium lactate, calcium lactate, acetic acid, sodium acetate, potassium acetate, calcium acetate, citric acid, sodium citrate, potassium citrate, Contains at least one of calcium citrate, potassium bicarbonate, and calcium bicarbonate.
  • This method for producing an anticancer agent is a method for producing an anticancer agent having an antitumor effect.
  • the anticancer agent may be Ringer's solution. Therefore, it can be used as an infusion. That is, this anticancer agent is an infusion for intravenous injection to a patient. Moreover, a patient's organ etc. can also be wash
  • the first aqueous solution is a Ringer's solution.
  • the first aqueous solution is a lactated Ringer's solution.
  • the first aqueous solution is a Ringer's acetate solution.
  • the first aqueous solution is a bicarbonated Ringer's solution.
  • the first aqueous solution contains at least one of sodium chloride, potassium chloride, and calcium chloride.
  • the method for producing an anticancer agent according to the seventh aspect includes a component addition step of adding at least one of sodium chloride, potassium chloride, and calcium chloride to the second aqueous solution to form a third aqueous solution.
  • the method for producing an anticancer agent in the eighth aspect has a freezing step of freezing the second aqueous solution or the third aqueous solution.
  • the second aqueous solution or the third aqueous solution contains sodium chloride, potassium chloride, and calcium chloride.
  • the second aqueous solution or the third aqueous solution is frozen within a range of ⁇ 196 ° C. or higher and 0 ° C. or lower.
  • the first electrode including the cylindrical portion is disposed outside the first aqueous solution, and the second electrode is disposed in the first aqueous solution.
  • gas is irradiated toward the 1st aqueous solution from the cylindrical part of the 1st electrode, and a voltage is applied between the 1st electrode and the 2nd electrode in that state.
  • the method for producing an infusion according to the eleventh aspect includes an aqueous solution preparation step of preparing a first aqueous solution, and a plasma irradiation step of irradiating the first aqueous solution with plasma to form a second aqueous solution.
  • the first aqueous solution comprises lactic acid, sodium lactate, potassium lactate, calcium lactate, acetic acid, sodium acetate, potassium acetate, calcium acetate, citric acid, sodium citrate, potassium citrate, Contains at least one of calcium citrate, potassium bicarbonate, and calcium bicarbonate.
  • the anticancer agent in the twelfth aspect is produced by irradiating a Ringer solution with plasma.
  • the infusion solution in the thirteenth aspect is manufactured by irradiating a Ringer solution with plasma.
  • the anticancer substance in the fourteenth aspect has CH 3 CO or CH 3 COCOO. And this anticancer substance selectively kills cancer cells.
  • anticancer agents and infusions that can selectively kill cancer cells with little effect on normal cells and that can be administered to the body of a patient, methods for their production, and anticancer substances Has been.
  • FIG. FIG. 2A is a cross-sectional view showing the configuration of the first plasma generator
  • FIG. B is a figure which shows the shape of an electrode
  • FIG. FIG. 3A is a cross-sectional view showing the configuration of the second plasma generator
  • FIG. B is a partial cross-sectional view in a cross section perpendicular to the longitudinal direction of the plasma region.
  • Experiment F it is a graph which shows the survival rate of SKOV3 at the time of processing SKOV3 with the aqueous solution which irradiated plasma to the lactated Ringer's solution.
  • Experiment F it is a graph which shows the survival rate of SKOV3 at the time of processing SKOV3 with the aqueous solution which irradiated the acetate ringer solution to the plasma.
  • Experiment F it is a graph which shows the survival rate of SKOV3 at the time of processing SKOV3 with the aqueous solution which irradiated the bicarbonate Ringer's solution with plasma.
  • 6 is a graph showing the result of observation of 1 H by NMR in Experiment G. It is the graph which expanded FIG. 6 is a graph showing the results of observation of 13 C by NMR in Experiment G. It is the graph which expanded FIG.
  • Anticancer agent production apparatus 1-1 Configuration of Anticancer Agent Manufacturing Device
  • the anticancer agent manufacturing device PM of the present embodiment includes a plasma irradiation unit P1 and an arm robot M1.
  • the plasma irradiation apparatus P1 is for generating plasma and irradiating the plasma toward the solution.
  • the arm robot M1 can move the position of the plasma irradiation apparatus P1 in each of the x-axis, y-axis, and z-axis directions.
  • the direction of plasma irradiation is the ⁇ z-axis direction.
  • this anticancer agent manufacturing apparatus PM can irradiate plasma only for the time by setting plasma irradiation time beforehand.
  • plasma irradiation apparatus P1 There are three types of plasma irradiation apparatus P1 (a first plasma generation apparatus P10, a second plasma generation apparatus P20, and a third plasma generation apparatus P30), as will be described later. Any method may be used. Note that the third plasma generator P30 does not have the robot arm M1 or the like as shown in FIG.
  • FIG. A is a cross-sectional view showing a schematic configuration of the plasma generator P10.
  • the plasma generator P10 is a first plasma generator that ejects plasma in the form of dots.
  • FIG. B is shown in FIG. It is a figure which shows the detail of the shape of the electrodes 2a and 2b of the plasma generator P10 of A.
  • the plasma generating apparatus P10 includes a casing unit 10, electrodes 2a and 2b, and a voltage application unit 3.
  • the casing 10 is made of a sintered body made of alumina (Al 2 O 3 ) as a raw material.
  • casing part 10 is a cylinder shape.
  • casing part 10 is 2 mm or more and 3 mm or less.
  • casing part 10 is 0.2 mm or more and 0.3 mm or less.
  • casing part 10 is 10 cm or more and 30 cm or less.
  • a gas inlet 10 i and a gas outlet 10 o are formed at both ends of the housing 10.
  • the gas inlet 10i is for introducing a gas for generating plasma.
  • the gas outlet 10 o is an irradiation unit for irradiating the outside of the housing unit 10 with plasma.
  • the direction in which the gas moves is the direction of the arrow in the figure
  • the electrodes 2a and 2b are a pair of opposed electrodes arranged to face each other.
  • the lengths of the electrodes 2 a and 2 b in the facing surface direction are smaller than the inner diameter of the housing portion 10. For example, it is about 1 mm.
  • the electrode 2a is disposed inside the casing 10 and in the vicinity of the gas inlet 10i.
  • the electrode 2b is disposed inside the housing portion 10 and in the vicinity of the gas ejection port 10o. Therefore, in the plasma generator P10, gas is introduced from the opposite side of the facing surface of the electrode 2a, and the gas is ejected to the opposite side of the facing surface of the electrode 2b.
  • the distance between the electrodes 2a and 2b is 24 cm. The distance between the electrodes 2a and 2b may be a smaller distance.
  • the voltage application unit 3 is for applying an alternating voltage between the electrodes 2a and 2b.
  • the voltage application unit 3 boosts the voltage to 9 kV using 60 Hz and 100 V, which are commercial AC voltages, and applies a voltage between the electrodes 2 a and 2 b.
  • FIG. A region where plasma is generated is defined as a plasma generation region P as indicated by the hatched line A in FIG.
  • the plasma generation region P is covered with the casing unit 10.
  • FIG. A is a sectional view showing a schematic configuration of the plasma generator P20.
  • the plasma generator P20 is a second plasma generator that ejects plasma linearly.
  • FIG. B is shown in FIG. It is a fragmentary sectional view in the cross section perpendicular
  • the plasma generating apparatus P20 includes a casing unit 11, electrodes 2a and 2b, and a voltage application unit 3.
  • the casing 11 is made of a sintered body using alumina (Al 2 O 3 ) as a raw material.
  • a gas introduction port 11 i and a large number of gas ejection ports 11 o are formed.
  • the gas inlet 11i is shown in FIG. It has a slit shape with the left-right direction of A as the longitudinal direction.
  • the slit width (the width in the left-right direction in FIG. 3.B) from the gas inlet 11i to just above the plasma region P is 1 mm.
  • the gas outlet 11o is an irradiation unit for irradiating the outside of the casing 11 with plasma.
  • the gas ejection port 11o has a cylindrical shape or a slit shape.
  • the gas outlet 11o in the case of a cylindrical shape is formed in a straight line along the longitudinal direction of the plasma region.
  • the inner diameter of the gas ejection port 11o is in the range of 1 mm to 2 mm.
  • the slit width of the gas ejection port 11o is preferably 1 mm or less. Thereby, a stable plasma is formed.
  • the gas inlet 11i introduces gas in a direction intersecting with a line connecting the electrode 2a and the electrode 2b.
  • the electrodes 2a and 2b and the voltage application unit 3 are the same as those of the plasma generator P10 shown in FIG. Similarly, a voltage is applied between the electrodes 2a and 2b using a commercial AC voltage. Thereby, plasma can be ejected in a straight line.
  • a plasma generator P20 that ejects plasma in a straight line is shown in FIG. If arranged in a line in the left-right direction of B, the plasma can be ejected in a plane over a rectangular region.
  • FIG. 4 is a conceptual diagram showing a schematic configuration of a third plasma generator P30.
  • the plasma generator P30 is for irradiating the contained solution with plasma.
  • the plasma generator P30 includes a first electrode 110, a second electrode 210, a first potential applying unit 120, a second potential applying unit 220, and a first lead wire 130.
  • the first electrode 110 has a cylindrical portion 110a.
  • the plasma gas can be supplied into the cylindrical portion 110a. That is, the inside of the first electrode 110 communicates with the gas supply unit 140.
  • the first electrode 110 blows gas from the cylindrical portion 110a toward the second electrode 210.
  • tip part of the 1st electrode 110 is carrying out the injection needle shape. That is, the tip of the first electrode 110 has an inclined surface that is inclined with respect to a direction perpendicular to the axial direction of the first electrode 110.
  • a micro hollow is formed at the tip of the first electrode 110.
  • the second electrode 210 is an electrode facing the first electrode 110.
  • the second electrode 210 is a rod-shaped electrode.
  • the second electrode 210 has a cylindrical shape. Alternatively, it may be a polygonal column shape. Alternatively, it may have a needle shape with a sharp tip.
  • the second electrode 210 has a tip portion 211.
  • the tip portion 211 of the second electrode 210 is made of an iridium alloy containing iridium.
  • an alloy of iridium and platinum Alternatively, an alloy of iridium, platinum, and osmium.
  • the iridium alloy has high hardness and excellent heat resistance. Therefore, an iridium alloy is suitable for the second electrode 210.
  • platinum may be used instead of iridium.
  • palladium may be used.
  • it may be a metal or alloy containing at least one of iridium, platinum, and palladium. Further, at the time of discharging, the second electrode 210 is immersed in the solution stored in the container 250.
  • the first potential applying unit 120 is for applying a periodically changing potential to the first electrode 110.
  • the second potential applying unit 220 is for applying a periodically changing potential to the second electrode 210.
  • one of the first potential applying unit 120 and the second potential applying unit 220 may be grounded.
  • the first lead wire 130 is for electrically connecting the first electrode 110 and the first potential applying unit 120.
  • the first lead wire 130 may be a nickel alloy or stainless steel.
  • the second lead wire 230 is for electrically connecting the second electrode 210 and the second potential applying unit 220.
  • the second lead wire 230 may be a nickel alloy or stainless steel.
  • a high-frequency voltage is applied between the first electrode 110 and the second electrode 210. That is, the first potential application unit 120 and the second potential application unit 220 are voltage application units for applying a voltage between the first electrode 110 and the second electrode 210.
  • the plasma generation apparatus P30 includes the gas supply unit 140, the gas pipe coupling connector 150, and the gas pipe 160. Therefore, the gas supply unit 140 supplies plasma gas to the inside of the cylindrical portion of the first electrode 110 via the gas pipe 160 and the gas pipe coupling connector 150.
  • the gas supply unit 140 supplies, for example, Ar gas. Alternatively, other rare gas may be supplied. Alternatively, it may contain a small amount of other gas such as oxygen gas. Therefore, the plasma gas is sprayed from the first electrode 110 toward the solution stored in the container 250.
  • FIG. 5 is a diagram showing an upper structure of the plasma generator P30.
  • the first electrode 110 has a tip 111.
  • the distal end portion 111 is disposed at a position facing the second electrode 210.
  • the tip 111 of the first electrode 110 has an inclined surface 111a.
  • the inclined surface 111 a is a surface that is inclined with respect to a surface perpendicular to the axial direction of the first electrode 110.
  • a micro hollow 111b is formed at the tip 111.
  • the micro hollow 111b is a minute recess having a length of 0.5 mm to 1 mm and a width of 0.3 mm to 0.5 mm.
  • the plasma generator P30 includes the sealing member 191 and the coupling member 192.
  • the sealing member 191 is attached to the container 250 shown in FIG. 4 and seals the inside of the container 250.
  • the coupling member 192 is a member for connecting the first electrode 110 and the gas pipe coupling connector 150 via the sealing member 191 or the like.
  • FIG. 6 is a diagram showing a lower structure of the plasma generator P30.
  • the plasma generator P30 includes the container 250, the sealing member 260, and the gantry 270.
  • the container 250 can accommodate a solution therein.
  • the solution includes an aqueous solution such as a culture solution and other aqueous solutions and organic solvents.
  • the container 250 houses the first electrode 110 and the second electrode 210 therein.
  • the container 250 is good to have a scale. This is for measuring the amount of the solution stored in the container 250.
  • the sealing member 260 is for closing the gap between the second electrode protection member 240 and the container 250.
  • An example of the sealing member 260 is O-ring.
  • Other members may be applied as long as the sealing property of the container 250 is ensured and the solution prevents the solution from leaking to the bottom of the container 250.
  • the gantry 270 is for supporting the container 250 and other members.
  • Plasma generated by plasma generator 2-1 The first plasma generator and the second plasma generator
  • the plasma generated by the plasma generators P10 and P20 is non-equilibrium atmospheric pressure plasma.
  • atmospheric pressure plasma refers to plasma having a pressure in the range of 0.5 to 2.0 atmospheres.
  • Ar gas is mainly used as the plasma generating gas.
  • electrons and Ar ions are generated in the plasma generated by the plasma generators P10 and P20.
  • Ar ions generate ultraviolet rays. Further, since this plasma is released into the atmosphere, it generates oxygen radicals, nitrogen radicals, and the like.
  • the plasma density of this plasma is in the range of 1 ⁇ 10 14 cm ⁇ 3 to 1 ⁇ 10 17 cm ⁇ 3 .
  • the plasma density in the plasma generated by the dielectric barrier discharge is about 1 ⁇ 10 11 cm ⁇ 3 to 1 ⁇ 10 13 cm ⁇ 3 . Therefore, the plasma density of the plasma generated by the plasma generators P10 and P20 is about three orders of magnitude higher than the plasma density of the plasma generated by the dielectric barrier discharge. Therefore, more Ar ions are generated inside the plasma. Therefore, the amount of radicals and ultraviolet rays is also large.
  • This plasma density is approximately equal to the electron density inside the plasma.
  • the plasma temperature at the time of this plasma generation is in the range of about 1000K to 2500K.
  • the electron temperature in this plasma is larger than the gas temperature.
  • the gas temperature is in the range of about 1000 K to 2500 K.
  • the temperature of this plasma is the temperature in the plasma region P where plasma is generated. Therefore, the plasma temperature at the position of the liquid level can be set to about room temperature by making the conditions of the plasma and the distance from the gas outlet to the liquid level different.
  • the density of triplet oxygen atoms (radical density) is in the range of 2 ⁇ 10 14 cm ⁇ 3 to 1.6 ⁇ 10 15 cm ⁇ 3 .
  • the density of the triplet oxygen atom can be adjusted by adjusting the amount of oxygen gas mixed into the argon gas.
  • FIG. 7 is a diagram schematically showing how the plasma generating device P30 generates plasma.
  • the plasma generated by the plasma generator P30 is non-equilibrium atmospheric pressure plasma.
  • the plasma gas supplied from the gas supply unit 140 is released from the first electrode 110 in the direction of the arrow K1.
  • a plasma generation region PG1 is formed between the first electrode 110 and the second electrode 210.
  • the plasma generation region PG1 in FIG. 7 is drawn conceptually.
  • the second electrode 210 is disposed inside the liquid. ing. As described above, between the first electrode 110 and the second electrode 210, there are the liquid stored in the container 250 and the atmosphere. A line connecting the first electrode and the second electrode intersects the liquid level LL1 of the liquid.
  • plasma is generated between the liquid level LL 1 of the liquid and the first electrode 110.
  • the liquid level LL1 of the liquid is recessed toward the liquid side due to the wind pressure of the plasma gas discharged from the first electrode 110 in the direction of the arrow K1.
  • the solution is partially electrolyzed and vaporized inside the liquid.
  • Plasma is also generated inside the vaporized gas.
  • Plasma generation region PG1 is in contact with liquid level LL1.
  • radicals derived from the atmosphere or water are generated. And a radical will be irradiated to a solution. Thereby, radicals react with water molecules or solutes in solution.
  • the antitumor aqueous solution of this embodiment is obtained by irradiating an aqueous solution containing L-sodium lactate with plasma.
  • This antitumor aqueous solution has an antitumor effect as described later. That is, cancer cells soaked in this anti-tumor aqueous solution die, but normal cells hardly die. Therefore, the antitumor aqueous solution of this embodiment can be used as an anticancer agent.
  • Treatment method using anticancer agent (antitumor aqueous solution) 4-1 Assumed Treatment Method The following method is assumed as a treatment method using the anticancer agent (antitumor aqueous solution) of the present embodiment.
  • Anticancer drugs are administered directly or indirectly to neoplastic lesions (whether benign or malignant) and pathologies related to neoplastic lesions (metastasis, dissemination, etc.).
  • the term “administration” as used herein refers to all acts that directly or indirectly contact or affect an organ, tissue or cell with an anticancer agent. That is, administration is, for example, spraying or exposure. Examples of the indirect administration include a case where it is included in a cloth or absorbent cotton and brought into contact with a neoplastic lesion.
  • an anticancer agent is administered directly or indirectly to a neoplastic lesion arising from a digestive organ, a hepatobiliary tract, a blood vessel, or an organ or tissue or cells associated therewith.
  • an anticancer agent is administered intrathecally, intrathoracically or intraperitoneally for dissemination (such as intrathecal, thoracic or intraperitoneal dissemination) found in brain tumors or cancer.
  • Aqueous solution preparation step First, a first aqueous solution is prepared.
  • the first aqueous solution refers to an aqueous solution before being irradiated with plasma.
  • the first aqueous solution comprises lactic acid, sodium lactate, potassium lactate, calcium lactate, acetic acid, sodium acetate, potassium acetate, calcium acetate, citric acid, sodium citrate, potassium citrate, Contains at least one of calcium citrate, potassium bicarbonate, and calcium bicarbonate.
  • the first aqueous solution may contain at least one of sodium chloride, potassium chloride, and calcium chloride.
  • the first aqueous solution is preferably a Ringer's solution.
  • the Ringer solution includes a lactated Ringer solution, an acetate Ringer solution, and a bicarbonate Ringer solution.
  • Plasma irradiation step 5-2-1 First Plasma Generator and Second Plasma Generator
  • the distance between the liquid level and the plasma jet outlet when the plasma is irradiated is, for example, 1 cm. Further, this distance may be changed within a range of 1 mm to 3 cm.
  • the plasma density of this plasma is in the range of 1 ⁇ 10 14 cm ⁇ 3 to 1 ⁇ 10 17 cm ⁇ 3 .
  • the plasma temperature in this plasma exists in the range of about 1000K or more and 2500K or less. However, the plasma temperature can be lowered to about room temperature (about 300 K) at the liquid level.
  • the oxygen radical density is in the range of 2 ⁇ 10 14 cm ⁇ 3 to 1.6 ⁇ 10 15 cm ⁇ 3 .
  • the plasma density time product should satisfy the following conditions. 1.2 ⁇ 10 18 sec ⁇ cm ⁇ 3 or more
  • the plasma density time product is a product of the plasma density in the plasma generation region and the time (irradiation time) of irradiating this aqueous solution with atmospheric pressure plasma.
  • the first aqueous solution may be irradiated with atmospheric pressure plasma generated in the plasma generation region by the plasma generation device P30.
  • the first electrode 110 is disposed outside the first aqueous solution, and the second electrode 210 is disposed in the first aqueous solution.
  • the gas is irradiated from the cylindrical portion 110a of the first electrode 110 toward the first aqueous solution. In this state, a voltage is applied between the first electrode 110 and the second electrode 210.
  • the first aqueous solution is changed to the second aqueous solution by irradiating the first aqueous solution with plasma.
  • This second aqueous solution is an anticancer agent having an antitumor effect.
  • Component addition step Next, at least one of sodium chloride, potassium chloride, and calcium chloride is added to the second aqueous solution to form a third aqueous solution.
  • Modification 6-1 Component addition step
  • the component addition step may not necessarily be performed.
  • cylindrical shape part 110a of the 1st electrode 110 is cylindrical. However, it is not limited to a cylindrical shape. As long as it is cylindrical, it may be polygonal.
  • the anticancer agent of this embodiment comprises lactic acid, sodium lactate, potassium lactate, calcium lactate, acetic acid, sodium acetate, potassium acetate, calcium acetate, Plasma is applied to a first aqueous solution containing at least one of citric acid, sodium citrate, potassium citrate, calcium citrate, potassium bicarbonate, and calcium bicarbonate. .
  • This anticancer agent suitably kills cancer cells.
  • the first aqueous solution is a Ringer's solution containing sodium chloride, potassium chloride, and calcium chloride.
  • the 2nd aqueous solution after plasma irradiation has little influence on a normal cell. Therefore, even if it is administered into the patient's body, the patient's body is hardly loaded. Therefore, there are various administration methods.
  • the manufacturing method of the anticancer agent of this embodiment has an aqueous solution preparation process, a plasma irradiation process, and a freezing process.
  • the aqueous solution preparation step and the plasma step are the same as in the first embodiment. Therefore, a freezing process is demonstrated.
  • Freezing step This freezing step is performed on the second aqueous solution or the third aqueous solution after the plasma irradiation.
  • This second aqueous solution or the third aqueous solution is an anticancer agent.
  • the second aqueous solution or the third aqueous solution is frozen.
  • the second aqueous solution or the third aqueous solution is frozen at ⁇ 196 ° C. or higher and 0 ° C. or lower.
  • a freezer for example, a biological laboratory refrigerator (for example, BioFreezer GS-5203KHC manufactured by Nippon Freezer Co., Ltd.) can be used.
  • the temperature of the second aqueous solution or the temperature of the third aqueous solution frozen in this freezer is in the range of ⁇ 28 ° C. or higher and ⁇ 14 ° C. or lower. Further, the temperature of the second aqueous solution or the temperature of the third aqueous solution is not limited to this range. Any ordinary freezing temperature may be used. For example, it is within a range of ⁇ 196 ° C. or more and 0 ° C. or less. Preferably, it is ⁇ 196 ° C. or more and ⁇ 10 ° or less. More preferably, it is ⁇ 150 ° C. or higher and ⁇ 20 ° C. or lower. More preferably, it is ⁇ 80 ° C. or higher and ⁇ 30 ° C. or lower.
  • the fourth aqueous solution in a frozen state is produced by freezing the second aqueous solution or the third aqueous solution.
  • an anticancer agent having a frozen and frozen period of 28 days or more exhibits an antitumor effect after thawing. That is, the anticancer agent can be stored frozen for a long period of time. And antitumor effect is hardly lost by freezing and thawing of this anticancer agent. This will be described later.
  • antitumor effect of second aqueous solution contains some antitumor substance.
  • This antitumor substance is not considered to be a radical such as a hydroxy radical, a superoxide anion radical, or a hydroperoxy radical, as described in Patent Document 2. The reasons are as follows: (1) The bactericidal effect and the antitumor effect are different, (2) the duration of the effect is different, (3) the relationship between the effect and pH dependence is different, There are three.
  • the anticancer agent of this embodiment has selectivity. This anticancer agent has little effect on normal cells, but selectively kills cancer cells. This means that it does not bring about a harsh living environment for all cells, but rather selectively kills cancer cells as a target.
  • Patent Document 2 describes that, for example, a superoxide anion radical can exist in water for several seconds (see paragraphs [0090]-[0093] and the like of Patent Document 2).
  • the second aqueous solution (before freezing) is considered to maintain the antitumor effect for at least 8 hours.
  • the raw material of the second aqueous solution (before freezing) and the third aqueous solution (before freezing) may be Ringer's solution.
  • the second aqueous solution (before freezing) and the third aqueous solution (before freezing) may contain sodium chloride, potassium chloride, and calcium chloride.
  • glioma was used as a cancer cell.
  • Glioma is a glioma that develops in glial cells (glial cells). That is, it is a kind of brain tumor.
  • U251SP was used as the glioma.
  • the above cancer cells were cultured in a 96-well plate to prepare a cancer cell culture medium.
  • the culture solution used is a solution in which DMEM, serum (FBS) and antibiotics (penicillin / streptomycin) are mixed.
  • the number of cells seeded per well was 5000 and 10,000.
  • the volume of the culture solution supplied per well was 0.2 mL.
  • the culture period for culturing cancer cells was 24 hours.
  • the culture components contained in DMEM are calcium chloride, ferric nitrate ⁇ 9H 2 O, magnesium sulfate (anhydrous), potassium chloride, sodium hydrogen carbonate, sodium chloride, monosodium phosphate (anhydrous), L-arginine.
  • HCl L-cystine ⁇ 2HCl, L-glutamine, glycine, L-histidine ⁇ HCl ⁇ H 2 O, L-isoleucine, L-leucine, L-lysine ⁇ HCl, L-methionine, L-phenylalanine, L-serine L-threonine, L-tryptophan, L-tyrosine ⁇ 2Na ⁇ 2H 2 O, L-valine, choline chloride, folic acid, myo-inositol, niacinamide, D-pantothenic acid, pyridoxine ⁇ HCl, riboflavin, thiamine ⁇ HCl, D-glucose, phenol red and Na.
  • an anticancer agent (antitumor aqueous solution) Separately from preparing a cancer cell culture medium, an anticancer agent (antitumor aqueous solution) was prepared.
  • the anticancer agent is a solution (PAL: Plasma Activated Lactec (Lactec is a registered trademark)) in which an aqueous solution of the same components as Lactec (registered trademark) is irradiated with plasma.
  • Lactec® contains sodium chloride, potassium chloride, calcium chloride, and sodium L-lactate.
  • the concentration of sodium chloride is 6.0 g / L.
  • the concentration of potassium chloride is 0.3 g / L.
  • the concentration of calcium chloride hydrate is 0.2 g / L.
  • the concentration of L-sodium lactate is 3.1 g / L.
  • the plasma irradiation time was 5 minutes.
  • Argon gas was used as the type of gas.
  • the distance between the plasma generation region and the solution 1 was 2 mm.
  • the distance between the first electrode 110 and the liquid surface of the solution 1 was 6 mm.
  • FIG. 8 shows a case where an anticancer agent is supplied to 5000 cells using the second plasma generator P20.
  • the vertical axis in FIG. 8 represents the ratio of the number of viable cells.
  • “Untended” indicates a case where plasma is not irradiated. And the case where this plasma was not irradiated was made into the standard as 100%.
  • the anticancer agent showed a strong antitumor effect.
  • Each of the anticancer drug diluted 4 times, diluted 16 times, and diluted 64 times showed an antitumor effect.
  • the antitumor agent diluted 256 times did not show an antitumor effect.
  • FIG. 9 shows a case where an anticancer agent is supplied to 10,000 cells using the second plasma generator P20.
  • the vertical axis in FIG. 9 represents the ratio of the number of viable cells.
  • “Untended” indicates a case where plasma is not irradiated. And the case where this plasma was not irradiated was made into the standard as 100%.
  • the anticancer agent showed a strong antitumor effect.
  • Each of the anti-cancer drugs diluted 4 times and 16 times showed antitumor effects.
  • the anti-tumor agent diluted 64 times or 256 times did not show an antitumor effect.
  • FIG. 10 shows a case where an anticancer agent is supplied to 5000 cells using the third plasma generator P30.
  • the vertical axis in FIG. 10 is the ratio of the number of viable cells.
  • “Untended” indicates a case where plasma is not irradiated. And the case where this plasma was not irradiated was made into the standard as 100%.
  • the anticancer agent exhibited a strong antitumor effect.
  • Each of the anticancer drug diluted 4 times, diluted 16 times, and diluted 64 times showed an antitumor effect.
  • the antitumor agent diluted 256 times did not show an antitumor effect.
  • FIG. 11 shows a case where an anticancer agent is supplied to 10,000 cells using the third plasma generator P30.
  • the vertical axis in FIG. 11 is the ratio of the number of viable cells.
  • “Untended” indicates a case where plasma is not irradiated. And the case where this plasma was not irradiated was made into the standard as 100%.
  • the anticancer drug showed a strong antitumor effect.
  • Each of the anti-cancer drugs diluted 4 times and 16 times showed antitumor effects.
  • the anti-tumor agent diluted 64 times or 256 times did not show an antitumor effect.
  • Experiment B (Raw material for anticancer drugs) This experiment is an experiment conducted on an anticancer agent manufactured using the plasma generator P20.
  • glioma was used as a cancer cell.
  • Glioma is a glioma that develops in glial cells (glial cells). That is, it is a kind of brain tumor.
  • U251SP was used as the glioma.
  • the above cancer cells were cultured in a 96-well plate to prepare a cancer cell culture medium.
  • the culture solution used is a solution in which DMEM, serum (FBS) and antibiotics (penicillin / streptomycin) are mixed.
  • the number of cells seeded per well was 10,000.
  • the volume of the culture solution supplied per well was 0.2 mL.
  • the culture period for culturing cancer cells was 24 hours.
  • a sample aqueous solution was prepared.
  • the sample aqueous solution was prepared by irradiating the following aqueous solution with plasma.
  • Lactec (registered trademark) was used as an infusion component.
  • Lactec® contains sodium chloride, potassium chloride, calcium chloride, and sodium L-lactate.
  • the concentration of sodium chloride is 6.0 g / L.
  • the concentration of potassium chloride is 0.3 g / L.
  • the concentration of calcium chloride hydrate is 0.2 g / L.
  • the concentration of L-sodium lactate is 3.1 g / L.
  • each of the sample aqueous solutions of Examples 1-11 shown in Table 2 has almost the same components as Lactec (registered trademark).
  • the sample aqueous solution is an aqueous solution in which solution 1 and solution 2 are mixed.
  • Solution 1 is a solution irradiated with plasma.
  • Solution 2 is a solution that was not irradiated with plasma.
  • LACTEC registered trademark
  • Example 2 of Table 2 As the solution 1, a sodium chloride aqueous solution having a concentration twice that of Lactec (registered trademark) was prepared. Further, as the solution 2, potassium chloride, calcium chloride, and L-sodium lactate were mixed, and the concentration was double that of Lactec (registered trademark). When these solutions 1 and 2 are mixed without being irradiated with plasma, the same product as LACTEC (registered trademark) is produced.
  • LACTEC registered trademark
  • Example 1 The sample aqueous solution of Example 1 is the same as ordinary Lactec (registered trademark).
  • Example 2 is NaCl-GOF (Gain of Function). That is, a sodium chloride aqueous solution is irradiated with plasma and other components are added.
  • Example 3 is KCl-GOF. That is, a potassium chloride aqueous solution is irradiated with plasma and other components are added.
  • Example 4 is CaCl 2 -GOF. That is, a calcium chloride aqueous solution is irradiated with plasma and other components are added.
  • Example 5 is L-sodium lactate-GOF. That is, L-sodium lactate aqueous solution is irradiated with plasma and other components are added.
  • Example 6 is NaCl-LOF (Loss of Function). That is, an aqueous solution containing components other than sodium chloride is irradiated with plasma and sodium chloride is added.
  • Example 7 is KCl-LOF. That is, an aqueous solution containing components other than potassium chloride is irradiated with plasma, and potassium chloride is added.
  • Example 8 is CaCl 2 -LOF. That is, an aqueous solution containing a component excluding calcium chloride is irradiated with plasma and calcium chloride is added.
  • Example 9 is L-sodium lactate-LOF. That is, an aqueous solution containing components other than L-sodium lactate is irradiated with plasma and L-sodium lactate is added.
  • Example 10 is a plasma irradiation lactec. In other words, the plasma was irradiated to twice the aqueous solution of Lactec (registered trademark), and diluted with Milli-Q water twice.
  • Example 11 is plasma irradiation water. That is, Milli-Q water is irradiated with plasma and mixed with an aqueous solution twice as much as Lactec (registered trademark).
  • the plasma irradiation time was 2 minutes.
  • the gas flow rate was 0.4 slm.
  • Argon gas was used as the type of gas.
  • the distance between the plasma generation region and the solution 1 was 13 mm.
  • the sample aqueous solutions of Examples 5-8 and 10 showed an antitumor effect.
  • the aqueous sample solution of Example 5 showed the highest antitumor effect.
  • the ratio of the number of viable cells in Example 5 was about 0.1.
  • the ratio of the number of viable cells in Example 10 was about 0.2 to 0.3.
  • the ratio of the number of viable cells in Examples 6-8 was about 0.4 to 0.5.
  • Example 5-8 and Example 10 are common in that the solution 1 contains L-sodium lactate. That is, it is shown that the anticancer agent is produced by irradiating the first aqueous solution containing L-sodium lactate with plasma. Moreover, even if sodium chloride, potassium chloride, or calcium chloride is contained, the antitumor effect is hardly lost. Therefore, for example, the anticancer agent of Example 5 can be administered into a patient's body.
  • Experiment C (freezing anticancer agent) This experiment is an experiment conducted on an anticancer agent (antitumor aqueous solution) manufactured using the plasma generator P30.
  • glioma was used as a cancer cell.
  • Glioma is a glioma that develops in glial cells (glial cells). That is, it is a kind of brain tumor.
  • U251SP was used as the glioma.
  • the above cancer cells were cultured in a 96-well plate to prepare a cancer cell culture medium.
  • the culture solution used is a solution in which DMEM, serum (FBS) and antibiotics (penicillin / streptomycin) are mixed.
  • the number of cells seeded per well was 5000.
  • the volume of the culture solution supplied per well was 0.2 mL.
  • the culture period for culturing cancer cells was 24 hours.
  • anticancer agent anticancer aqueous solution
  • an anticancer agent was prepared.
  • the anticancer agent is obtained by irradiating an aqueous solution of the same component as Lactec (registered trademark) with plasma.
  • Lactec® contains sodium chloride, potassium chloride, calcium chloride, and sodium L-lactate.
  • the concentration of sodium chloride is 6.0 g / L.
  • the concentration of potassium chloride is 0.3 g / L.
  • concentration of calcium chloride hydrate is 0.2 g / L.
  • the concentration of L-sodium lactate is 3.1 g / L.
  • the plasma irradiation time was 2 minutes.
  • Argon gas was used as the type of gas.
  • the distance between the first electrode 110 and the liquid surface of the solution 1 was 6 mm.
  • the anticancer agent was frozen inside the biofreezer GS-5203KHC (manufactured by Nippon Freezer Co., Ltd.).
  • the freezing temperature was -150 ° C.
  • the freezing time was 12 hours.
  • decompression only once, and the anticancer agent which repeated freezing and thawing twice were manufactured.
  • FIG. 13 is a graph showing changes in the ratio of the number of viable cells due to freezing and thawing.
  • shaft of FIG. 13 is a ratio of the number of viable cells.
  • the anticancer agent of 1 time and the anticancer agent diluted 4 times showed the antitumor effect. Further, the anticancer agent diluted 16 times showed a certain degree of antitumor effect. The anticancer agent diluted 64 times did not show an antitumor effect.
  • the anticancer agent of 1 time showed an antitumor effect.
  • the anticancer drug diluted 4 times showed some antitumor effect.
  • the anticancer agent diluted 16 times and the anticancer agent diluted 64 times showed no antitumor effect.
  • the anticancer agent is stored frozen, the antitumor effect can be maintained to some extent. However, its antitumor effect was lost to some extent by repeated freezing and thawing.
  • FIG. 14 is a graph showing the selectivity of anticancer agents.
  • FIG. 14 (a) is a graph showing the results for U251 cells.
  • FIG. 14 (b) is a graph showing the results for MCF10A cells.
  • FIG. 14 (c) is a graph showing the results for neonatal keratinocyte cells.
  • U251 cells are cancer cells.
  • MCF10A cells and neonatal keratinocyte cells are normal cells.
  • Lactec registered trademark
  • FIG. 14 (a) U251 cells are killed by exposure to an anticancer agent irradiated with plasma for 40 seconds.
  • FIG. 14 (b) and FIG. 14 (c) the MCF10A cells and the neonatal keratinocyte cells were not killed when exposed to an anticancer agent irradiated with plasma for 40 seconds. That is, the anticancer agent of the embodiment kills cancer cells and hardly kills normal cells. Thus, this anticancer agent can selectively kill cancer cells.
  • FIG. 15 is a diagram schematically showing the experimental method of this experiment.
  • 8-week-old female BALB / c-nu / nu nude mice manufactured by Nippon SLC Co., Ltd. were used.
  • FIG. 16 is a photograph showing a subcutaneous tumor taken out from a mouse on the 42nd day from the start of the experiment.
  • a subcutaneous tumor extracted from a mouse (Control) administered with normal Lactec (registered trademark) was a subcutaneous tumor extracted from a mouse (PAL) administered with lactec (registered trademark) irradiated with plasma.
  • PAL lactec
  • FIG. 17 is a graph showing temporal changes in the volume of subcutaneous tumors in mice.
  • the horizontal axis of FIG. 17 is the number of days.
  • the vertical axis in FIG. 17 is the volume of the subcutaneous tumor.
  • the volume V1 of the subcutaneous tumor was calculated by approximation with the following equation. That is, the shape of the subcutaneous tumor was approximated by a spheroid.
  • V1 ( ⁇ / 6) ⁇ a1 ⁇ b1 2
  • V1 Volume of subcutaneous tumor a1: Long diameter of subcutaneous tumor b1: Short diameter of subcutaneous tumor For the long diameter a1 and the short diameter b1, approximate values were measured using digital calipers.
  • a subcutaneous tumor extracted from a mouse (Control) administered with normal lactec (registered trademark) is more subcutaneous than a subcutaneous tumor removed from a mouse (PAL) administered with lactec (registered trademark) irradiated with plasma.
  • PAL lactec
  • lactec registered trademark
  • FIG. 18 is a graph showing changes in the weight of the mouse over time.
  • the horizontal axis of FIG. 18 is the number of days.
  • the vertical axis in FIG. 18 represents the weight of the mouse.
  • the body weight of the nude mice was almost the same between the mice administered with the normal lactec (registered trademark) of the first group and the mice administered with the lactec (registered trademark) irradiated with the plasma of the second group. From the start of the experiment, the weight of nude mice has been increasing but has not changed much.
  • FIG. 19 is a graph showing the volume and weight of a subcutaneous tumor excised on the 42nd day.
  • the volume V2 of the subcutaneous tumor was calculated by approximation with the following equation.
  • V2 ( ⁇ / 6) ⁇ a2 ⁇ b2 ⁇ h2
  • V2 Volume of subcutaneous tumor a2: Long diameter of subcutaneous tumor b2: Short diameter of subcutaneous tumor h2: Height (thickness) of subcutaneous tumor
  • the major axis a2, the minor axis b2, and the height h2 were measured using a digital caliper.
  • the volume of the subcutaneous tumor of mice administered with Lactec® (PAL) irradiated with plasma was administered Lactec® (Control) that was not irradiated with plasma. It was about 30% of the volume of the subcutaneous tumor in mice.
  • the weight of the subcutaneous tumor of mice administered with Lactec (registered trademark) (PAL) irradiated with plasma was as follows. It was about 30% of the weight of the subcutaneous tumor of the administered mouse.
  • Experiment F (other Ringer's solution) This experiment is an experiment conducted on an anticancer agent (antitumor aqueous solution) manufactured using the plasma generator P30.
  • Cancer cells used In this experiment ovarian cancer cells were used as cancer cells. Specifically, SKOV3 was used.
  • anticancer agent anticancer aqueous solution
  • lactate Ringer's solution acetate Ringer's solution
  • bicarbonate Ringer's solution a material for the anticancer agent.
  • the components of the lactated Ringer's solution are the same as Lactec (registered trademark) used in Experiment A and the like.
  • the Ringer acetate solution contains sodium chloride, potassium chloride, calcium chloride, and sodium acetate.
  • the concentration of sodium chloride is 6.0 g / L.
  • the concentration of potassium chloride is 0.3 g / L.
  • the concentration of calcium chloride hydrate is 0.2 g / L.
  • the concentration of sodium acetate hydrate is 3.8 g / L.
  • the bicarbonate Ringer's solution contains sodium chloride, potassium chloride, calcium chloride, magnesium chloride, sodium bicarbonate, and sodium citrate.
  • the concentration of sodium chloride is 5.84 g / L.
  • the concentration of potassium chloride is 0.3 g / L.
  • the concentration of calcium chloride is 0.22 g / L.
  • the concentration of magnesium chloride is 0.2 g / L.
  • the concentration of sodium bicarbonate is 2.35 g / L.
  • the concentration of sodium citrate is 0.2 g / L.
  • Ringer's solutions were irradiated with plasma.
  • the plasma irradiation time was 10 minutes.
  • Argon gas was used as the type of gas.
  • the distance between the first electrode 110 and the liquid surface of the solution 1 was 3 mm.
  • FIG. 21 is a graph showing the survival rate of SKOV3 when SKOV3 is treated with an aqueous solution obtained by irradiating the lactate Ringer solution with plasma. As shown in FIG. 21, the aqueous solution in which the lactate Ringer solution was irradiated with plasma showed an antitumor effect on ovarian cancer cells (SKOV3). The intensity was 78-fold dilution at a dilution rate that could kill 50% of all SKOV3 cells.
  • FIG. 22 is a graph showing the survival rate of SKOV3 when SKOV3 is treated with an aqueous solution obtained by irradiating the acetate ringer solution with plasma.
  • the aqueous solution obtained by irradiating the acetate ringer solution with plasma showed an antitumor effect on ovarian cancer cells (SKOV3).
  • the intensity was 53-fold dilution at a dilution rate that could kill 50% of all SKOV3 cells.
  • FIG. 23 is a graph showing the survival rate of SKOV3 when SKOV3 is treated with an aqueous solution in which a bicarbonate Ringer solution is irradiated with plasma.
  • the aqueous solution in which the bicarbonate Ringer's solution was irradiated with plasma showed an antitumor effect on ovarian cancer cells (SKOV3).
  • the intensity was a 1/3 fold dilution that could kill 50% of all SKOV3 cells.
  • each of the aqueous solutions in which the lactate Ringer solution, the acetate Ringer solution, and the bicarbonate Ringer solution were irradiated with plasma exhibited an antitumor effect on ovarian cancer cells (SKOV3).
  • the strength of the antitumor effect was in the order of an aqueous solution in which a lactate Ringer solution was irradiated with plasma, an aqueous solution in which an acetate Ringer solution was irradiated with plasma, and an aqueous solution in which a bicarbonate Ringer solution was irradiated with plasma.
  • the lactated Ringer's solution but also these various Ringer's solutions showed an antitumor effect when irradiated with plasma.
  • the anti-tumor effect was shown with respect to the ovarian cancer cell (SKOV3).
  • the raw material of the anticancer agent is not limited to sodium acetate but may be acetic acid, potassium acetate, or calcium acetate.
  • the raw material of the anticancer agent is not limited to sodium bicarbonate or sodium citrate, but may be citric acid, potassium citrate, calcium citrate, potassium bicarbonate, or calcium bicarbonate.
  • Experiment G (NMR) 7-1 Sodium lactate aqueous solution
  • NMR was performed on a sodium lactate aqueous solution not irradiated with plasma and a sodium lactate aqueous solution irradiated with plasma.
  • a commercially available sodium lactate aqueous solution was used.
  • the concentration of the aqueous sodium lactate solution is 50%.
  • the sodium lactate aqueous solution irradiated with plasma was produced by irradiating the sodium lactate aqueous solution with plasma for 5 minutes. At that time, a plasma generator P20 was used. Then, by using the NMR, it was observed for 1 H, 13 C.
  • FIG. 24 is a graph showing the results of 1 H observation.
  • the result of the aqueous sodium lactate solution not irradiated with plasma is shown on the upper side of FIG. The same applies to the figures after this figure.
  • the result of the sodium lactate aqueous solution irradiated with plasma is shown on the lower side of FIG.
  • a peak derived from OH, a peak derived from CH, and a peak derived from CH 3 were observed regardless of the presence or absence of plasma irradiation. There was no significant difference between the peak of the sodium lactate aqueous solution irradiated with plasma and the peak of the sodium lactate aqueous solution not irradiated with plasma.
  • FIG. 25 is an enlarged view of FIG. As shown in FIG. 25, peaks indicating structures such as CH 3 COCOOH and CH 3 CO become larger after plasma irradiation. In other respects, the appearance has not changed significantly before and after plasma irradiation.
  • FIG. 26 is a graph showing the results of observation of 13 C. As shown in FIG. 26, a peak derived from COOH, a peak derived from CH, and a peak derived from CH 3 were observed. As a result of observing 13 C, the appearance has not changed significantly before and after plasma irradiation.
  • FIG. 27 is an enlarged view of FIG. In FIG. 27, as in FIG. 26, the appearance is not significantly changed before and after the plasma irradiation.
  • the basic structure of sodium lactate does not change significantly by irradiating with plasma. And by irradiation with plasma, CH 3 COCOOH and CH 3 CO increased. Therefore, it is considered that CH 3 COCOOH and CH 3 CO contribute in some way to the antitumor effect. That is, the anticancer substance is considered to have a functional group CH 3 COCOO or a functional group CH 3 CO.
  • Experiment H (component of acetate Ringer's solution) This experiment is an experiment conducted on an anticancer agent (antitumor aqueous solution) manufactured using the plasma generator P30.
  • Cancer cells used In this experiment ovarian cancer cells were used as cancer cells. Specifically, SKOV3 was used.
  • sample aqueous solution Seven kinds of sample aqueous solutions were used in this experiment. These sample aqueous solutions are aqueous solutions manufactured by the same concept as the GOF of Experiment B. That is, the aqueous solution A1 and the aqueous solution A2 are prepared. Here, when the aqueous solution A1 and the aqueous solution A2 are mixed, the acetated Ringer's solution used in Experiment F is obtained. In this experiment, only the aqueous solution A1 is irradiated with plasma, and then the aqueous solution A1 and the aqueous solution A2 are mixed.
  • the first sample aqueous solution is a Ringer's acetate solution not irradiated with plasma.
  • the second sample aqueous solution is obtained by irradiating pure water with plasma and then mixing a high concentration Ringer's solution.
  • the third sample aqueous solution is obtained by irradiating a sodium acetate aqueous solution with plasma and then mixing the other components of the acetate Ringer solution.
  • the fourth sample aqueous solution is obtained by irradiating the acetate Ringer solution with plasma and then mixing the acetate Ringer solution.
  • the fifth sample aqueous solution is obtained by irradiating a sodium chloride aqueous solution with plasma and then mixing the other components of the acetate ringer solution.
  • the sixth sample aqueous solution is obtained by irradiating a potassium chloride aqueous solution with plasma and then mixing other components of the acetate Ringer solution.
  • the seventh sample aqueous solution is obtained by irradiating a calcium chloride aqueous solution with plasma and then mixing other components of the acetate ringer solution.
  • the components of the acetate Ringer's solution are the same as those used in Experiment F.
  • the plasma irradiation time was 5 minutes.
  • Argon gas was used as the type of gas.
  • the distance between the first electrode 110 and the liquid surface of the solution 1 was 10 mm.
  • FIG. 28 and FIG. 29 are graphs showing experimental results. As shown in FIGS. 28 and 29, the third sample aqueous solution and the fourth sample aqueous solution showed an antitumor effect. Other aqueous sample solutions did not show anti-tumor effects. This has shown that sodium acetate is a raw material of an antitumor substance among the components contained in an acetic acid Ringer solution. This result is consistent with Experiment G.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

【課題】　正常細胞にほとんど影響を与えることなく癌細胞を選択的に死滅させることができるとともに患者の体内に投与することの可能な抗癌剤および輸液とそれらの製造方法ならびに抗癌物質を提供することである。 【解決手段】　この抗癌剤の製造方法は、水溶液準備工程と、プラズマ照射工程と、を有する。水溶液準備工程では、乳酸と、乳酸ナトリウムと、乳酸カリウムと、乳酸カルシウムと、酢酸と、酢酸ナトリウムと、酢酸カリウムと、酢酸カルシウムと、クエン酸と、クエン酸ナトリウムと、クエン酸カリウムと、クエン酸カルシウムと、炭酸水素カリウムと、炭酸水素カルシウムと、のうちの少なくとも一つを含有する第１の水溶液を準備する。プラズマ照射工程では、第１の水溶液にプラズマを照射して第２の水溶液とする。

Description

抗癌剤および輸液とそれらの製造方法ならびに抗癌物質
　本明細書の技術分野は、抗癌剤および輸液とそれらの製造方法ならびに抗癌物質に関する。さらに詳細には、プラズマを利用して製造される抗癌剤および輸液とそれらの製造方法ならびに抗癌物質に関するものである。
　プラズマ技術は、電気、化学、材料の各分野に応用されている。そして、近年においては、医療への応用が活発に研究されるようになってきた。プラズマの内部では、電子やイオン等の荷電粒子の他に、紫外線やラジカルが発生する。これらには、生体組織の殺菌をはじめとして、生体組織に対する種々の効果があることが分かってきている。
　例えば、特許文献１には、プラズマの直接照射により、血液凝固（特許文献１の実施例４、段落［００６３］－［００６８］参照）と、組織滅菌（特許文献１の実施例５、段落［００６９］－［００７４］参照）と、リーシュマニア症（特許文献１の実施例６、段落［００７５］－［００７７］参照）と、に対して効果があることが記載されている。そして、プラズマは、メラノーマ細胞（悪性黒色腫細胞）を死滅させる効果があると記載されている（特許文献１の実施例７、段落［００７８］参照）。
　また、特許文献２には、ｐＨが４．８以下となるように調整された液体にプラズマを照射することにより、液体中の菌を殺菌する技術が開示されている（特許文献２の段落［００２０］等参照）。また、スーパーオキシドアニオンラジカルやヒドロペルオキシラジカル等が殺菌効果を担っている可能性がある旨が記載されている（特許文献２の段落［００９０］－［００９９］等参照）。
特表２００８－５３９００７号公報 国際公開第２００９／０４１０４９号 国際公開第２０１３／１２８９０５号
　ところで、このような癌の治療においては一般に、１）癌細胞を死滅させるとともに、２）正常細胞に影響を与えないように、癌細胞を選択的に死滅させることが好ましい。たとえ、癌細胞を死滅させることができたとしても、そのために多数の正常細胞を死滅させると、患者に加わる肉体的負担が大きいからである。そのため、このように癌細胞を選択的に死滅させる治療技術が望まれている。しかし、癌細胞を選択的に死滅させることは容易ではない。また、特許文献１では、正常細胞への影響の程度が明らかではない。
　そのため特許文献３に記載されているように、本発明者らは、癌細胞を選択的に死滅させる抗腫瘍水溶液に関する技術を研究開発した（特許文献３の段落［００８５］－［００８７］および図１６等参照）。この抗腫瘍水溶液は、正常細胞にほとんど影響を与えることなく癌細胞を選択的に死滅させることができる。また、この抗腫瘍水溶液は、培養した細胞のみならずマウスに対しても抗腫瘍効果を発揮した（特許文献３の段落［０１４５］－［０１５２］および図４５、４６等参照）。
　しかし、培養成分を含有する抗腫瘍水溶液を患者の体内に投与することは困難である。培養成分が患者の身体に与える影響を無視できないからである。
　本明細書の技術は、前述した従来の技術が有する問題点を解決するためになされたものである。すなわちその課題とするところは、正常細胞にほとんど影響を与えることなく癌細胞を選択的に死滅させることができるとともに患者の体内に投与することの可能な抗癌剤および輸液とそれらの製造方法ならびに抗癌物質を提供することである。
　第１の態様における抗癌剤の製造方法は、第１の水溶液を準備する水溶液準備工程と、第１の水溶液にプラズマを照射して第２の水溶液とするプラズマ照射工程と、を有する。第１の水溶液は、乳酸と、乳酸ナトリウムと、乳酸カリウムと、乳酸カルシウムと、酢酸と、酢酸ナトリウムと、酢酸カリウムと、酢酸カルシウムと、クエン酸と、クエン酸ナトリウムと、クエン酸カリウムと、クエン酸カルシウムと、炭酸水素カリウムと、炭酸水素カルシウムと、のうちの少なくとも一つを含有する。
　この抗癌剤の製造方法は、抗腫瘍効果を奏する抗癌剤を製造する方法である。また、この抗癌剤は、リンゲル液であってもよい。そのため、輸液として用いることができる。つまり、この抗癌剤は、患者に静脈注射をするための点滴である。また、患者の臓器等を洗浄することもできる。
　第２の態様における抗癌剤の製造方法においては、第１の水溶液は、リンゲル液である。
　第３の態様における抗癌剤の製造方法においては、第１の水溶液は、乳酸リンゲル液である。
　第４の態様における抗癌剤の製造方法においては、第１の水溶液は、酢酸リンゲル液である。
　第５の態様における抗癌剤の製造方法においては、第１の水溶液は、重炭酸リンゲル液である。
　第６の態様における抗癌剤の製造方法においては、第１の水溶液は、塩化ナトリウムと、塩化カリウムと、塩化カルシウムと、のうちの少なくとも一つを含有する。
　第７の態様における抗癌剤の製造方法は、塩化ナトリウムと、塩化カリウムと、塩化カルシウムと、のうちの少なくとも一つを第２の水溶液に添加して第３の水溶液とする成分添加工程を有する。
　第８の態様における抗癌剤の製造方法は、第２の水溶液もしくは第３の水溶液を冷凍する冷凍工程を有する。第２の水溶液もしくは第３の水溶液は、塩化ナトリウムと、塩化カリウムと、塩化カルシウムと、を含有する。
　第９の態様における抗癌剤の製造方法においては、冷凍工程では、第２の水溶液もしくは第３の水溶液を－１９６℃以上０℃以下の範囲内で冷凍する。
　第１０の態様における抗癌剤の製造方法においては、プラズマ照射工程では、筒形状部を備える第１電極を第１の水溶液の外に配置するとともに第２電極を第１の水溶液の中に配置する。そして、第１電極の筒形状部から第１の水溶液に向かってガスを照射し、その状態で第１電極と第２電極との間に電圧を印加する。
　第１１の態様における輸液の製造方法は、第１の水溶液を準備する水溶液準備工程と、第１の水溶液にプラズマを照射して第２の水溶液とするプラズマ照射工程と、を有する。第１の水溶液は、乳酸と、乳酸ナトリウムと、乳酸カリウムと、乳酸カルシウムと、酢酸と、酢酸ナトリウムと、酢酸カリウムと、酢酸カルシウムと、クエン酸と、クエン酸ナトリウムと、クエン酸カリウムと、クエン酸カルシウムと、炭酸水素カリウムと、炭酸水素カルシウムと、のうちの少なくとも一つを含有する。
　第１２の態様における抗癌剤は、リンゲル液にプラズマを照射して製造されたものである。
　第１３の態様における輸液は、リンゲル液にプラズマを照射して製造されたものである。
　第１４の態様における抗癌物質は、ＣＨ3 ＣＯまたはＣＨ3 ＣＯＣＯＯを有する。そして、この抗癌物質は、癌細胞を選択的に死滅させる。
　本明細書では、正常細胞にほとんど影響を与えることなく癌細胞を選択的に死滅させることができるとともに患者の体内に投与することの可能な抗癌剤および輸液とそれらの製造方法ならびに抗癌物質が提供されている。
実施形態のプラズマ発生装置のガス噴出口を走査するロボットアームの構成を説明するための概念図である。 図２．Ａは第１のプラズマ発生装置の構成を示す断面図であり、図２．Ｂは電極の形状を示す図である。 図３．Ａは第２のプラズマ発生装置の構成を示す断面図であり、図３．Ｂはプラズマ領域の長手方向に垂直な断面における部分断面図である。 実施形態における第３のプラズマ発生装置の概略構成を示す図である。 実施形態における第３のプラズマ発生装置の上部構造を示す概略構成図である。 実施形態における第３のプラズマ発生装置の下部構造を示す概略構成図である。 実施形態において第３のプラズマ発生装置がプラズマを照射している場合を説明するための図である。 実験Ａにおいて第２のプラズマ発生装置を用いて５０００個のＵ２５１ＳＰ細胞に対して抗癌剤を供給した場合の生存細胞数の割合を示すグラフである。 実験Ａにおいて第２のプラズマ発生装置を用いて１００００個のＵ２５１ＳＰ細胞に対して抗癌剤を供給した場合の生存細胞数の割合を示すグラフである。 実験Ａにおいて第３のプラズマ発生装置を用いて５０００個のＵ２５１ＳＰ細胞に対して抗癌剤を供給した場合の生存細胞数の割合を示すグラフである。 実験Ａにおいて第３のプラズマ発生装置を用いて１００００個のＵ２５１ＳＰ細胞に対して抗癌剤を供給した場合の生存細胞数の割合を示すグラフである。 実験Ｂにおいて１００００個のＵ２５１ＳＰ細胞に対して種々のサンプル水溶液を供給した場合の生存細胞数の割合を示すグラフである。 実験ＣにおいてＵ２５１ＳＰ細胞に対して冷凍工程および解凍工程を経た抗癌剤を供給した場合の生存細胞数の割合を示すグラフである。 実験Ｄにおいて抗癌剤の選択性を示すグラフである。 実験Ｅにおいて実験方法を説明するための図である。 実験Ｅにおいて摘出した皮下腫瘍を示す写真である。 実験Ｅにおいて皮下腫瘍の体積の時間変化を示すグラフである。 実験Ｅにおいてヌードマウスの体重変化を示すグラフである。 実験Ｅにおいて摘出した皮下腫瘍の体積および重量を示すグラフである。 実験Ｆの実験手順を示す図である。 実験Ｆにおいて乳酸リンゲル液にプラズマを照射した水溶液でＳＫＯＶ３を処理した場合のＳＫＯＶ３の生存率を示すグラフである。 実験Ｆにおいて酢酸リンゲル液にプラズマを照射した水溶液でＳＫＯＶ３を処理した場合のＳＫＯＶ３の生存率を示すグラフである。 実験Ｆにおいて重炭酸リンゲル液にプラズマを照射した水溶液でＳＫＯＶ３を処理した場合のＳＫＯＶ３の生存率を示すグラフである。 実験ＧにおいてＮＭＲにより1 Ｈを観測した結果を示すグラフである。 図２４を拡大したグラフである。 実験ＧにおいてＮＭＲにより13Ｃを観測した結果を示すグラフである。 図２６を拡大したグラフである。 実験Ｈにおいてサンプル水溶液の抗腫瘍効果を調べた実験結果を示すグラフ（その１）である。 実験Ｈにおいてサンプル水溶液の抗腫瘍効果を調べた実験結果を示すグラフ（その２）である。
　以下、具体的な実施形態について、抗癌剤および輸液とそれらの製造方法ならびに抗癌物質を例に挙げて図を参照しつつ説明する。
（第１の実施形態）
　第１の実施形態について説明する。
１．抗癌剤製造装置
１－１．抗癌剤製造装置の構成
　本実施形態の抗癌剤製造装置ＰＭは、図１に示すように、プラズマ照射部Ｐ１と、アームロボットＭ１とを有している。プラズマ照射装置Ｐ１は、プラズマを発生させるとともに、そのプラズマを溶液に向けて照射するためのものである。
　アームロボットＭ１は、図１に示すように、プラズマ照射装置Ｐ１の位置をｘ軸、ｙ軸、ｚ軸方向のそれぞれの方向に移動させることができるようになっている。なお、説明の便宜上、プラズマを照射する向きを－ｚ軸方向としている。これにより、溶液の液面と、プラズマ照射部Ｐ１との間の距離を調整することができる。また、この抗癌剤製造装置ＰＭは、予めプラズマ照射時間を設定することにより、その時間だけプラズマを照射することができるものである。
　プラズマ照射装置Ｐ１には、後述するように、３種類の方式（第１のプラズマ発生装置Ｐ１０および第２のプラズマ発生装置Ｐ２０および第３のプラズマ発生装置Ｐ３０）がある。そして、いずれの方式を用いてもよい。なお、第３のプラズマ発生装置Ｐ３０は、図１のように、ロボットアームＭ１等を有していない。
１－２．第１のプラズマ発生装置
　図２．Ａはプラズマ発生装置Ｐ１０の概略構成を示す断面図である。ここで、プラズマ発生装置Ｐ１０は、プラズマを点状に噴出する第１のプラズマ発生装置である。図２．Ｂは、図２．Ａのプラズマ発生装置Ｐ１０の電極２ａ、２ｂの形状の詳細を示す図である。
　プラズマ発生装置Ｐ１０は、筐体部１０と、電極２ａ、２ｂと、電圧印加部３と、を有している。筐体部１０は、アルミナ（Ａｌ2 Ｏ3 ）を原料とする焼結体から成るものである。そして、筐体部１０の形状は、筒形状である。筐体部１０の内径は２ｍｍ以上３ｍｍ以下である。筐体部１０の厚みは０．２ｍｍ以上０．３ｍｍ以下である。筐体部１０の長さは１０ｃｍ以上３０ｃｍ以下である。筐体部１０の両端には、ガス導入口１０ｉと、ガス噴出口１０ｏとが形成されている。ガス導入口１０ｉは、プラズマを発生させるためのガスを導入するためのものである。ガス噴出口１０ｏは、プラズマを筐体部１０の外部に照射するための照射部である。なお、ガスの移動する向きは、図中の矢印の向きである。
　電極２ａ、２ｂは、対向して配置されている対向電極対である。電極２ａ、２ｂの対向面方向の長さは、筐体部１０の内径より小さい。例えば１ｍｍ程度である。電極２ａ、２ｂには、図２．Ｂに示すように、対向面のそれぞれに凹部（ホロー）Ｈが多数形成されている。そのため、電極２ａ、２ｂの対向面は、微細な凹凸形状となっている。なお、この凹部Ｈの深さは、０．５ｍｍ程度である。
　電極２ａは、筐体部１０の内部であってガス導入口１０ｉの近傍に配置されている。電極２ｂは、筐体部１０の内部であってガス噴出口１０ｏの近傍に配置されている。そのため、プラズマ発生装置Ｐ１０では、電極２ａの対向面の反対側からガスを導入するとともに、電極２ｂの対向面の反対側にガスを噴出するようになっている。そして、電極２ａ、２ｂ間の距離は、２４ｃｍである。電極２ａ、２ｂ間の距離は、これより小さい距離であってもよい。
　電圧印加部３は、電極２ａ、２ｂ間に交流電圧を印加するためのものである。電圧印加部３は、商用交流電圧である、６０Ｈｚ、１００Ｖを用いて９ｋＶに昇圧するとともに、電極２ａ、２ｂ間に電圧を印加する。
　ガス導入口１０ｉからアルゴンを導入するとともに、電圧印加部３により、電極２ａ、２ｂ間に電圧を印加すると、筐体部１０の内部にプラズマが発生する。図２．Ａの斜線で示すように、プラズマが発生する領域をプラズマ発生領域Ｐとする。プラズマ発生領域Ｐは、筐体部１０に覆われている。
１－３．第２のプラズマ発生装置
　図３．Ａはプラズマ発生装置Ｐ２０の概略構成を示す断面図である。ここで、プラズマ発生装置Ｐ２０は、プラズマを線状に噴出する第２のプラズマ発生装置である。図３．Ｂは、図３．Ａのプラズマ発生装置Ｐ２０のプラズマ領域Ｐの長手方向に垂直な断面における部分断面図である。
　プラズマ発生装置Ｐ２０は、筐体部１１と、電極２ａ、２ｂと、電圧印加部３と、を有している。筐体部１１は、アルミナ（Ａｌ2 Ｏ3 ）を原料とする焼結体から成るものである。筐体部１１の両端には、ガス導入口１１ｉと、多数のガス噴出口１１ｏとが形成されている。ガス導入口１１ｉは、図３．Ａの左右方向を長手方向とするスリット形状をしている。ガス導入口１１ｉからプラズマ領域Ｐの直上までのスリット幅（図３．Ｂの左右方向の幅）は１ｍｍである。
　ガス噴出口１１ｏは、プラズマを筐体部１１の外部に照射するための照射部である。ガス噴出口１１ｏは、円筒形状もしくはスリット形状である。円筒形状の場合のガス噴出口１１ｏは、プラズマ領域の長手方向に沿って一直線状に形成されている。ガス噴出口１１ｏの内径は１ｍｍ以上２ｍｍ以下の範囲内である。また、スリット形状の場合には、ガス噴出口１１ｏのスリット幅を１ｍｍ以下とすることが好ましい。これにより、安定したプラズマが形成される。また、ガス導入口１１ｉは、電極２ａと電極２ｂとを結ぶ線と交差する向きにガスを導入するようになっている。
　電極２ａ、２ｂおよび電圧印加部３については、図１に示したプラズマ発生装置Ｐ１０と同じものである。そして、同様に、商用交流電圧を用いて、電極２ａ、２ｂ間に電圧を印加する。これにより、プラズマを一直線状に噴出することができる。
　また、この一直線状にプラズマを噴出するプラズマ発生装置Ｐ２０を図３．Ｂの左右方向に列状に並べて配置すれば、プラズマをある長方形の領域にわたって平面的に噴出することができる。
１－４．第３のプラズマ発生装置
　図４は、第３のプラズマ発生装置Ｐ３０の概略構成を示す概念図である。プラズマ発生装置Ｐ３０は、収容している溶液にプラズマを照射するためのものである。
　図４に示すように、プラズマ発生装置Ｐ３０は、第１電極１１０と、第２電極２１０と、第１の電位付与部１２０と、第２の電位付与部２２０と、第１のリード線１３０と、第２のリード線２３０と、ガス供給部１４０と、ガス管結合コネクター１５０と、ガス管１６０と、第１電極保護部材１７０と、第２電極保護部材２４０と、第１電極支持部材１８０と、密閉部材１９１と、結合部材１９２と、容器２５０と、封止部材２６０と、架台２７０と、を有している。
１－４－１．電極の概略構成
　第１電極１１０は、筒形状部１１０ａを有している。そして、その筒形状部１１０ａの内部にプラズマガスを供給することができるようになっている。つまり、第１電極１１０の内部は、ガス供給部１４０と連通している。第１電極１１０は、筒形状部１１０ａから第２電極２１０に向けてガスを吹き出すようになっている。そして、第１電極１１０の先端部は、注射針形状をしている。つまり、第１電極１１０の先端部は、第１電極１１０の軸方向に垂直な方向に対して傾斜する傾斜面を有している。そして、第１電極１１０の先端部には、マイクロホローが形成されている。
　第２電極２１０は、第１電極１１０と対向する電極である。第２電極２１０は、棒状電極である。第２電極２１０は、円柱形状である。もしくは、多角柱形状であってもよい。もしくは、先端の尖った針形状であってもよい。ここで、第２電極２１０は、先端部２１１を有している。第２電極２１０の先端部２１１は、イリジウムを含有するイリジウム合金でできている。例えば、イリジウムと白金との合金である。または、イリジウムと白金とオスミウムとの合金である。イリジウム合金は、硬度が高く、耐熱性に優れている。そのため、イリジウム合金は、第２電極２１０に好適である。また、イリジウムの代わりに、白金を用いてもよい。もしくは、パラジウムであってもよい。または、イリジウムと白金とパラジウムとのうちの少なくとも一種類以上を含む金属もしくは合金であるとよい。また、放電時には、第２電極２１０は、容器２５０に収容されている溶液に浸かっている。
　第１の電位付与部１２０は、第１電極１１０に周期的に変化する電位を付与するためのものである。第２の電位付与部２２０は、第２電極２１０に周期的に変化する電位を付与するためのものである。ここで、第１の電位付与部１２０と第２の電位付与部２２０とのうちのどちらか一方は、接地されていてもよい。第１のリード線１３０は、第１電極１１０と第１の電位付与部１２０とを電気的に接続するためのものである。第１のリード線１３０は、ニッケル合金もしくはステンレスであるとよい。第２のリード線２３０は、第２電極２１０と第２の電位付与部２２０とを電気的に接続するためのものである。第２のリード線２３０は、ニッケル合金もしくはステンレスであるとよい。これにより、第１電極１１０と第２電極２１０との間に高周波の電圧が印加されることとなる。つまり、第１の電位付与部１２０および第２の電位付与部２２０は、第１電極１１０と第２電極２１０との間に電圧を印加するための電圧印加部である。
１－４－２．ガス供給経路
　プラズマ発生装置Ｐ３０は、前述したように、ガス供給部１４０と、ガス管結合コネクター１５０と、ガス管１６０と、を有している。そのため、ガス供給部１４０は、ガス管１６０およびガス管結合コネクター１５０を介して、第１電極１１０の筒形状部の内部にプラズマガスを供給する。ここで、ガス供給部１４０は、例えば、Ａｒガスを供給する。もしくは、その他の希ガスを供給してもよい。もしくは、酸素ガス等その他のガスを微量含んでいてもよい。そのため、プラズマガスは、第１電極１１０から容器２５０に収容されている溶液に向けて吹き付けられることとなる。
１－４－３．上部構造の構成
　図５は、プラズマ発生装置Ｐ３０の上部構造を示す図である。図５に示すように、第１電極１１０は、先端部１１１を有している。先端部１１１は、図４に示すように、第２電極２１０に対面する位置に配置されている。第１電極１１０の先端部１１１は、傾斜面１１１ａを有している。傾斜面１１１ａは、第１電極１１０の軸方向に垂直な面に対して傾斜している面である。また、先端部１１１には、マイクロホロー１１１ｂが形成されている。マイクロホロー１１１ｂは、長さ０．５ｍｍ以上１ｍｍ以下、幅０．３ｍｍ以上０．５ｍｍ以下の微小な凹部である。
　また、前述したように、プラズマ発生装置Ｐ３０は、密閉部材１９１と、結合部材１９２と、を有している。密閉部材１９１は、図４に示す容器２５０に取り付けるとともに容器２５０の内部を密閉するためのものである。結合部材１９２は、第１電極１１０とガス管結合コネクター１５０とを、密閉部材１９１等を介して連結するための部材である。
１－４－４．下部構造の構成
　図６は、プラズマ発生装置Ｐ３０の下部構造を示す図である。前述したように、プラズマ発生装置Ｐ３０は、容器２５０と、封止部材２６０と、架台２７０と、を有している。容器２５０は、内部に溶液を収容することができるようになっている。ここで、溶液とは、培養液等の水溶液、その他の水溶液や有機溶剤をも含むこととする。また、容器２５０は、第１電極１１０および第２電極２１０を内部に収容している。また、容器２５０は、目盛を有しているとよい。容器２５０の内部に収容されている溶液の量を計量するためである。
　封止部材２６０は、第２電極保護部材２４０と、容器２５０との間の隙間を塞ぐためのものである。封止部材２６０として、例えば、オーリングが挙げられる。容器２５０の密閉性を確保し、溶液が容器２５０の底部に漏れ出すのを防止するものであれば、これ以外の部材を適用してもよい。架台２７０は、容器２５０その他の各部材を支持するためのものである。
２．プラズマ発生装置により発生されるプラズマ
２－１．第１のプラズマ発生装置および第２のプラズマ発生装置
　プラズマ発生装置Ｐ１０、Ｐ２０により発生されるプラズマは、非平衡大気圧プラズマである。ここで、大気圧プラズマとは、０．５気圧以上２．０気圧以下の範囲内の圧力であるプラズマをいう。
　本実施の形態では、プラズマ発生ガスとして、主にＡｒガスを用いる。プラズマ発生装置Ｐ１０、Ｐ２０により発生されるプラズマの内部では、もちろん、電子と、Ａｒイオンとが生成されている。そして、Ａｒイオンは、紫外線を発生する。また、このプラズマは大気中に放出されているため、酸素ラジカルや窒素ラジカル等を発生させる。
　このプラズマのプラズマ密度は、１×１０14ｃｍ-3以上１×１０17ｃｍ-3以下の範囲内である。なお、誘電体バリア放電により発生されるプラズマにおけるプラズマ密度は、１×１０11ｃｍ-3～１×１０13ｃｍ-3程度である。したがって、プラズマ発生装置Ｐ１０、Ｐ２０により発生されるプラズマのプラズマ密度は、誘電体バリア放電により発生されるプラズマのプラズマ密度に比べて、３桁程度大きい。したがって、このプラズマの内部では、より多くのＡｒイオンが生成する。そのため、ラジカルや、紫外線の発生量も多い。なお、このプラズマ密度は、プラズマ内部の電子密度にほぼ等しい。
　そして、このプラズマ発生時におけるプラズマ温度は、およそ１０００Ｋ以上２５００Ｋ以下の範囲内である。また、このプラズマにおける電子温度は、ガスの温度に比べて大きい。しかも、電子の密度が１×１０14ｃｍ-3以上１×１０17ｃｍ-3以下の範囲内の程度であるにもかかわらず、ガスの温度はおよそ１０００Ｋ以上２５００Ｋ以下の範囲内である。このプラズマの温度は、プラズマの発生しているプラズマ領域Ｐでの温度である。したがって、プラズマの条件や、ガス噴出口から液面までの距離を異なる条件とすることにより、液面の位置でのプラズマ温度を室温程度とすることができる。
　また、三重項酸素原子の密度（ラジカル密度）は、２×１０14ｃｍ-3以上１．６×１０15ｃｍ-3以下の範囲内である。アルゴンガスに対して混入する酸素ガスの量を調整することにより、この三重項酸素原子の密度を調整することができる。
２－２．第３のプラズマ発生装置
　図７は、プラズマ発生装置Ｐ３０がプラズマを発生させている様子を模式的に示す図である。プラズマ発生装置Ｐ３０により発生されるプラズマは、非平衡大気圧プラズマである。
　図７に示すように、ガス供給部１４０から供給されるプラズマガスは、第１電極１１０から矢印Ｋ１の向きに放出される。そして、第１電極１１０と第２電極２１０との間に高周波の電圧を印加すると、第１電極１１０と第２電極２１０との間にプラズマ発生領域ＰＧ１が形成される。図７のプラズマ発生領域ＰＧ１は、概念的に描かれている。
　第１の電位付与部１２０および第２の電位付与部２２０が、第１電極１１０と第２電極２１０との間に電圧を印加する電圧印加時には、第２電極２１０は、液体の内部に配置されている。このように、第１電極１１０と第２電極２１０との間には、容器２５０に収容されている液体と大気とがある。そして、第１電極と第２電極とを結ぶ線が、液体の液面ＬＬ１と交差している。
　そのため、液体の液面ＬＬ１と第１電極１１０との間にプラズマが発生する。このとき、液体の液面ＬＬ１は、第１電極１１０から矢印Ｋ１の向きに放出されるプラズマガスの風圧を受けて、液体の側に向かって凹んでいる。そして、液体の内部では溶液が部分的に電気分解し、気化する。その気化したガスの内部でもプラズマが発生する。また、プラズマ発生領域ＰＧ１は、液体の液面ＬＬ１に接触している。
　以上により、大気もしくは水に由来するラジカルが発生する。そして、溶液にラジカルが照射されることとなる。これにより、ラジカルは、水分子もしくは溶液中の溶質と反応する。
３．抗癌剤（抗腫瘍水溶液）の効果
　本実施形態の抗腫瘍水溶液は、Ｌ－乳酸ナトリウムを含有する水溶液にプラズマを照射したものである。この抗腫瘍水溶液は、後述するように、抗腫瘍効果を有する。つまり、この抗腫瘍水溶液に浸した癌細胞は死滅するが、正常細胞はほとんど死滅しない。そのため、本実施形態の抗腫瘍水溶液を抗癌剤として利用することができる。
４．抗癌剤（抗腫瘍水溶液）を用いた治療方法
４－１．想定される治療方法
　本実施形態の抗癌剤（抗腫瘍水溶液）を用いた治療方法として以下の方法を想定している。腫瘍性病変（良性、悪性を問わない）および腫瘍性病変に関する病態（転移や播種など）に対し、抗癌剤を直接または間接的に投与する。ここでいう投与とは、臓器、組織、細胞に抗癌剤を直接または間接的に接触させることあるいは影響を及ぼすすべての行為をいうものとする。つまり、投与とは、例えば、噴霧、暴露である。間接的に投与する場合として、例えば、布や脱脂綿等に含ませて腫瘍性病変に接触させる場合が挙げられる。
４－２．具体例
　例えば、消化器、肝胆道、血管またはそれらに関連する臓器または組織あるいは細胞から発生した腫瘍性病変に対し、抗癌剤を直接または間接的に投与する。または、脳腫瘍や癌にみられる播種（髄腔内、胸腔または腹腔内播種など）に対し、抗癌剤を髄腔内、胸腔または腹腔内に投与する。
５．抗癌剤（抗腫瘍水溶液）の製造方法
５－１．水溶液準備工程
　まず、第１の水溶液を準備する。第１の水溶液とは、プラズマを照射する前の水溶液のことをいう。第１の水溶液は、乳酸と、乳酸ナトリウムと、乳酸カリウムと、乳酸カルシウムと、酢酸と、酢酸ナトリウムと、酢酸カリウムと、酢酸カルシウムと、クエン酸と、クエン酸ナトリウムと、クエン酸カリウムと、クエン酸カルシウムと、炭酸水素カリウムと、炭酸水素カルシウムと、のうちの少なくとも一つを含有する。また、第１の水溶液は、塩化ナトリウムと、塩化カリウムと、塩化カルシウムとのうちの少なくとも一つを含有するものであってもよい。そして、第１の水溶液は、リンゲル液であるとよい。リンゲル液は、乳酸リンゲル液と、酢酸リンゲル液と、重炭酸リンゲル液と、を含む。
５－２．プラズマ照射工程
５－２－１．第１のプラズマ発生装置および第２のプラズマ発生装置
　次に、抗癌剤製造装置ＰＭによりプラズマ発生領域に発生させた非平衡大気圧プラズマを第１の水溶液に照射する。プラズマを照射する際における液面とプラズマ噴出口との間の距離は、例えば、１ｃｍである。また、この距離は、１ｍｍ以上３ｃｍ以下の範囲内で変えてもよい。このプラズマのプラズマ密度は、１×１０14ｃｍ-3以上１×１０17ｃｍ-3以下の範囲内である。そして、このプラズマにおけるプラズマ温度は、およそ１０００Ｋ以上２５００Ｋ以下の範囲内である。ただし、このプラズマ温度は、液面では、室温程度（３００Ｋ程度）まで下げることもできる。また、酸素ラジカル密度は、２×１０14ｃｍ-3以上１．６×１０15ｃｍ-3以下の範囲内である。これらのプラズマ条件を表１に示す。これらの条件は、あくまで一例である。
［表１］
　　条件　　　　　　　　　　　　　数値範囲
液面－噴出口距離　　　　　　　　１ｍｍ以上　　　　　　　　３ｃｍ以下
プラズマ密度　　　　 　 １×１０14ｃｍ-3以上　　 　１×１０17ｃｍ-3以下
プラズマ温度　　　　　　　　１０００Ｋ以上　　　　　　２５００Ｋ以下
　なお、抗腫瘍効果を有する抗癌剤を製造するためには、プラズマ密度時間積を、次の条件を満たすようにするとよい。
　　　１．２×１０18ｓｅｃ・ｃｍ-3以上
ここで、プラズマ密度時間積とは、プラズマ発生領域におけるプラズマ密度と、大気圧プラズマをこの水溶液に照射した時間（照射時間）との積である。
５－２－２．第３のプラズマ発生装置
　プラズマ発生装置Ｐ１０、Ｐ２０の代わりに、プラズマ発生装置Ｐ３０によりプラズマ発生領域に発生させた大気圧プラズマを第１の水溶液に照射してもよい。第１電極１１０を第１の水溶液の外に配置するとともに第２電極２１０を第１の水溶液の中に配置する。そして、第１電極１１０の筒形状部１１０ａから第１の水溶液に向かってガスを照射する。そして、その状態で第１電極１１０と第２電極２１０との間に電圧を印加する。
　このように、第１の水溶液にプラズマを照射することにより、第１の水溶液を第２の水溶液にする。この第２の水溶液は、抗腫瘍効果を備える抗癌剤である。
５－３．成分添加工程
　次に、第２の水溶液に塩化ナトリウムと、塩化カリウムと、塩化カルシウムとのうちの少なくとも一つを添加して第３の水溶液とする。
６．変形例
６－１．成分添加工程
　成分添加工程については、必ずしも実施しなくともよい場合がある。
６－２．第１電極
　本実施形態のプラズマ発生装置Ｐ３０では、第１電極１１０の筒形状部１１０ａは、円筒形状である。しかし、円筒形状に限らない。筒形状であれば、多角形形状であってもよい。
７．本実施形態のまとめ
　以上詳細に説明したように、本実施形態の抗癌剤は、乳酸と、乳酸ナトリウムと、乳酸カリウムと、乳酸カルシウムと、酢酸と、酢酸ナトリウムと、酢酸カリウムと、酢酸カルシウムと、クエン酸と、クエン酸ナトリウムと、クエン酸カリウムと、クエン酸カルシウムと、炭酸水素カリウムと、炭酸水素カルシウムと、のうちの少なくとも一つを含有する第１の水溶液にプラズマを照射したものである。この抗癌剤は、癌細胞を好適に死滅させる。また、第１の水溶液は、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、を含むリンゲル液である。そして、プラズマ照射後の第２の水溶液は、正常細胞にほとんど影響を与えない。そのため、患者の体内に投与しても、患者の身体にほとんど負荷を与えない。そのため、多様な投与方法がある。
（第２の実施形態）
　第２の実施形態について説明する。第２の実施形態では、抗癌剤の製造方法が第１の実施形態と異なっている。そのため、抗癌剤の製造方法についてのみ説明する。
１．抗癌剤（抗腫瘍水溶液）の製造方法
　本実施形態の抗癌剤の製造方法は、水溶液準備工程と、プラズマ照射工程と、冷凍工程と、を有する。水溶液準備工程およびプラズマ工程は、第１の実施形態と同様である。そのため、冷凍工程について説明する。
１－１．冷凍工程
　この冷凍工程は、プラズマを照射した後の第２の水溶液もしくは第３の水溶液に対して実施する。この第２の水溶液もしくは第３の水溶液は、抗癌剤である。この工程では、第２の水溶液もしくは第３の水溶液を冷凍する。そのために、第２の水溶液もしくは第３の水溶液を－１９６℃以上０℃以下で冷凍する。具体的には、冷凍庫に保存する。冷凍庫として、例えば、生物実験用冷蔵庫（例えば、日本フリーザー株式会社製のバイオフリーザーＧＳ－５２０３ＫＨＣ）を用いることができる。
　この冷凍庫で冷凍した第２の水溶液の温度もしくは第３の水溶液の温度は、－２８℃以上－１４℃以下の範囲内である。また、第２の水溶液の温度もしくは第３の水溶液の温度は、この範囲に限らない。通常の冷凍温度であればよい。例えば、－１９６℃以上０℃以下の範囲内である。好ましくは、－１９６℃以上－１０°以下である。より好ましくは、－１５０℃以上－２０℃以下である。さらに好ましくは、－８０℃以上―３０℃以下である。このように、冷凍工程では、第２の水溶液もしくは第３の水溶液を冷凍することにより、冷凍状態の第４の水溶液を作製する。
２．冷凍した抗癌剤（抗腫瘍水溶液）における抗腫瘍効果の持続時間
２－１．第２の水溶液（冷凍前）の抗腫瘍効果
　第２の水溶液（冷凍前）の抗腫瘍効果について説明する。冷凍前の第２の水溶液は、抗腫瘍効果を奏する。特許文献３に記載の抗癌剤の抗腫瘍効果の持続時間は、８時間以上１８時間未満であった（特許文献３参照）。第１の実施形態の抗癌剤における抗腫瘍効果の持続時間も同程度と推測できる。
２－２．第４の水溶液（冷凍後）の抗腫瘍効果
　一方、本実施形態の製造方法で製造された抗癌剤、すなわち冷凍状態の第３の水溶液では、抗腫瘍効果を保持し続ける。実際、冷凍保冷期間が２８日以上の抗癌剤は、解凍後に抗腫瘍効果を発揮する。つまり、抗癌剤は、長期間にわたって冷凍保存することができる。そして、この抗癌剤の冷凍および解凍によって、抗腫瘍効果が失われることはほとんどない。これについては後述する。
２－３．第２の水溶液（冷凍前）の抗腫瘍効果についての考察
　冷凍前の抗癌剤は、何らかの抗腫瘍物質を含んでいると考えられる。この抗腫瘍物質は、特許文献２で挙げられているような、ヒドロキシラジカル、スーパーオキシドアニオンラジカル、ヒドロペルオキシラジカル等のラジカルではないと考えられる。その理由として、（１）殺菌効果と抗腫瘍効果とは効果そのものが異なること、（２）効果の持続時間が異なること、（３）効果とｐＨ依存性との関連性が異なっていること、の３つが挙げられる。
　まず、一つ目の殺菌効果と抗腫瘍効果との違いは言うまでもない。また、本実施形態の抗癌剤は、選択性を有している。この抗癌剤は、正常細胞にはほとんど影響はないが、癌細胞を選択的に死滅させる。これは、全ての細胞に対して過酷な生存環境をもたらすのではなく、癌細胞という標的に絞って選択的に死滅させることを意味している。
　次に、持続時間について説明する。特許文献２では、例えば、スーパーオキシドアニオンラジカルは、水中でも数秒間存在できるとの記載がある（特許文献２の段落［００９０］－［００９３］等参照）。それに対して、第２の水溶液（冷凍前）は、少なくとも８時間以上抗腫瘍効果が持続すると考えられる。
３．変形例
　第２の水溶液（冷凍前）および第３の水溶液（冷凍前）の原材料は、リンゲル液であるとよい。つまり、第２の水溶液（冷凍前）および第３の水溶液（冷凍前）は、塩化ナトリウムと、塩化カリウムと、塩化カルシウムと、を含有するとよい。
１．実験Ａ（抗癌剤における抗腫瘍効果）
　本実験は、第２のプラズマ発生装置Ｐ２０および第３のプラズマ発生装置Ｐ３０を用いて製造された抗癌剤について行った実験である。
１－１．用いた癌細胞
　本実験では、癌細胞としてグリオーマを用いた。グリオーマは、神経膠細胞（グリア細胞）に発生する神経膠腫である。すなわち、脳腫瘍の一種である。グリオーマとして、具体的には、Ｕ２５１ＳＰを用いた。
１－２．実験方法
１－２－１．癌細胞の培養
　上記の癌細胞を、９６ウェルプレートに培養して癌細胞培養地を作製した。用いた培養液は、ＤＭＥＭと血清（ＦＢＳ）と抗生物質（ペニシリン・ストレプトマイシン）とを混合した溶液である。１ウェル当たりに播種した細胞数は５０００個および１００００個であった。また、１ウェル当たりに供給した培養液の容積は０．２ｍＬであった。癌細胞を培養する培養期間は２４時間であった。
　ここで、ＤＭＥＭが含有する培養成分は、塩化カルシウム、硝酸第二鉄・９Ｈ2 Ｏ、硫酸マグネシウム（無水）、塩化カリウム、炭酸水素ナトリウム、塩化ナトリウム、リン酸一ナトリウム（無水）、Ｌ－アルギニン・ＨＣｌ、Ｌ－シスチン・２ＨＣｌ、Ｌ－グルタミン、グリシン、Ｌ－ヒスチジン・ＨＣｌ・Ｈ2 Ｏ、Ｌ－イソロイシン、Ｌ－ロイシン、Ｌ－リジン・ＨＣｌ、Ｌ－メチオニン、Ｌ－フェニルアラニン、Ｌ－セリン、Ｌ－スレオニン、Ｌ－トリプトファン、Ｌ－チロシン・２Ｎａ・２Ｈ2 Ｏ、Ｌ－バリン、塩化コリン、葉酸、ｍｙｏ－イノシトール、ナイアシンアミド、Ｄ－パントテン酸、ピリドキシン・ＨＣｌ、リボフラビン、チアミン・ＨＣｌ、Ｄ－グルコース、フェノールレッド・Ｎａである。
１－２－２．抗癌剤（抗腫瘍水溶液）の作製
　癌細胞培養地を用意するのとは別に、抗癌剤（抗腫瘍水溶液）を作製した。抗癌剤は、ラクテック（登録商標）と同じ成分の水溶液にプラズマを照射した溶液（ＰＡＬ：Ｐｌａｓｍａ　Ａｃｔｉｖａｔｅｄ　Ｌａｃｔｅｃ（Ｌａｃｔｅｃは登録商標））である。ラクテック（登録商標）は、塩化ナトリウムと、塩化カリウムと、塩化カルシウムと、Ｌ－乳酸ナトリウムと、を含有する。塩化ナトリウムの濃度は、６．０ｇ／Ｌである。塩化カリウムの濃度は、０．３ｇ／Ｌである。塩化カルシウム水和物の濃度は、０．２ｇ／Ｌである。Ｌ－乳酸ナトリウムの濃度は、３．１ｇ／Ｌである。
　プラズマの照射時間は、５分であった。ガスの種類としてアルゴンガスを用いた。プラズマ発生装置Ｐ２０では、プラズマ発生領域と溶液１との間の距離は、２ｍｍであった。プラズマ発生装置Ｐ３０では、第１電極１１０と溶液１の液面との間の距離は、６ｍｍであった。
１－２－３．癌細胞培養地への抗癌剤（抗腫瘍水溶液）の供給
　次に、癌細胞を培養した９６ウェルプレートの培養液をサンプル水溶液と交換した。癌細胞がサンプル水溶液に浸かっている時間は、２４時間であった。そして、その後、サンプル水溶液を通常の培養液に交換した。その後、ＭＴＳアッセイにより、生存している細胞数の割合を調べた。
１－３．実験結果
　図８は、第２のプラズマ発生装置Ｐ２０を用いて５０００個の細胞に抗癌剤を供給した場合を示す。図８の縦軸は、生存細胞数の割合である。ここで、「Ｕｎｔｒｅａｔｅｄ」は、プラズマを照射しなかった場合を示している。そして、このプラズマを照射しなかった場合を１００％として基準にした。
　図８に示すように、抗癌剤は、強い抗腫瘍効果を示した。抗癌剤を４倍に薄めたもの、１６倍に薄めたもの、６４倍に薄めたもののそれぞれについて、抗腫瘍効果を示した。しかし、抗癌剤を２５６倍に薄めたものについては、抗腫瘍効果を示さなかった。
　図９は、第２のプラズマ発生装置Ｐ２０を用いて１００００個の細胞に抗癌剤を供給した場合を示す。図９の縦軸は、生存細胞数の割合である。ここで、「Ｕｎｔｒｅａｔｅｄ」は、プラズマを照射しなかった場合を示している。そして、このプラズマを照射しなかった場合を１００％として基準にした。
　図９に示すように、抗癌剤は、強い抗腫瘍効果を示した。抗癌剤を４倍に薄めたもの、１６倍に薄めたもののそれぞれについて、抗腫瘍効果を示した。しかし、抗癌剤を６４倍に薄めたもの、２５６倍に薄めたものについては、抗腫瘍効果を示さなかった。
　図１０は、第３のプラズマ発生装置Ｐ３０を用いて５０００個の細胞に抗癌剤を供給した場合を示す。図１０の縦軸は、生存細胞数の割合である。ここで、「Ｕｎｔｒｅａｔｅｄ」は、プラズマを照射しなかった場合を示している。そして、このプラズマを照射しなかった場合を１００％として基準にした。
　図１０に示すように、抗癌剤は、強い抗腫瘍効果を示した。抗癌剤を４倍に薄めたもの、１６倍に薄めたもの、６４倍に薄めたもののそれぞれについて、抗腫瘍効果を示した。しかし、抗癌剤を２５６倍に薄めたものについては、抗腫瘍効果を示さなかった。
　図１１は、第３のプラズマ発生装置Ｐ３０を用いて１００００個の細胞に抗癌剤を供給した場合を示す。図１１の縦軸は、生存細胞数の割合である。ここで、「Ｕｎｔｒｅａｔｅｄ」は、プラズマを照射しなかった場合を示している。そして、このプラズマを照射しなかった場合を１００％として基準にした。
　図１１に示すように、抗癌剤は、強い抗腫瘍効果を示した。抗癌剤を４倍に薄めたもの、１６倍に薄めたもののそれぞれについて、抗腫瘍効果を示した。しかし、抗癌剤を６４倍に薄めたもの、２５６倍に薄めたものについては、抗腫瘍効果を示さなかった。
２．実験Ｂ（抗癌剤の原材料）
　本実験は、プラズマ発生装置Ｐ２０を用いて製造された抗癌剤について行った実験である。
２－１．用いた癌細胞
　本実験では、癌細胞としてグリオーマを用いた。グリオーマは、神経膠細胞（グリア細胞）に発生する神経膠腫である。すなわち、脳腫瘍の一種である。グリオーマとして、具体的には、Ｕ２５１ＳＰを用いた。
２－２．実験方法
２－２－１．癌細胞の培養
　上記の癌細胞を、９６ウェルプレートに培養して癌細胞培養地を作製した。用いた培養液は、ＤＭＥＭと血清（ＦＢＳ）と抗生物質（ペニシリン・ストレプトマイシン）とを混合した溶液である。１ウェル当たりに播種した細胞数は１００００個であった。また、１ウェル当たりに供給した培養液の容積は０．２ｍＬであった。癌細胞を培養する培養期間は２４時間であった。
２－２－２．サンプル水溶液の作製
　癌細胞培養地を用意するのとは別に、サンプル水溶液を作製した。サンプル水溶液は、下記の水溶液にプラズマを照射して作製した。点滴成分として、ラクテック（登録商標）を基準とした。ラクテック（登録商標）は、塩化ナトリウムと、塩化カリウムと、塩化カルシウムと、Ｌ－乳酸ナトリウムと、を含有する。塩化ナトリウムの濃度は、６．０ｇ／Ｌである。塩化カリウムの濃度は、０．３ｇ／Ｌである。塩化カルシウム水和物の濃度は、０．２ｇ／Ｌである。Ｌ－乳酸ナトリウムの濃度は、３．１ｇ／Ｌである。
　そして、表２に示すように、１１種類のサンプル水溶液を作製した。表２に示す例１－１１のサンプル水溶液は、いずれもラクテック（登録商標）とほぼ同じ成分を有する。表２に示すように、サンプル水溶液は、溶液１と溶液２とを混合した水溶液である。溶液１は、プラズマを照射した溶液である。溶液２は、プラズマを照射しなかった溶液である。溶液１と溶液２とを混合すると、前述したラクテック（登録商標）とほぼ同じ成分となるようにしてある。つまり、塩化ナトリウムと、塩化カリウムと、塩化カルシウムと、Ｌ－乳酸ナトリウムと、を溶液１または溶液２のいずれかに混合することとした。
　例えば、表２の例２では、溶液１として、濃度がラクテック（登録商標）の２倍の塩化ナトリウム水溶液を作製した。また、溶液２として、塩化カリウムと、塩化カルシウムと、Ｌ－乳酸ナトリウムと、を混合するとともに、濃度をラクテック（登録商標）の２倍とした。これらの溶液１と溶液２とを、仮にプラズマを照射しないで混合すると、ラクテック（登録商標）と同じものが製造される。
　例１のサンプル水溶液は、通常のラクテック（登録商標）と同じものである。例２は、ＮａＣｌ－ＧＯＦ（Ｇａｉｎ　ｏｆ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ）である。つまり、塩化ナトリウム水溶液にプラズマを照射し、その他の成分を添加したものである。例３は、ＫＣｌ－ＧＯＦである。つまり、塩化カリウム水溶液にプラズマを照射し、その他の成分を添加したものである。例４は、ＣａＣｌ2 －ＧＯＦである。つまり、塩化カルシウム水溶液にプラズマを照射し、その他の成分を添加したものである。例５は、Ｌ－ｓｏｄｉｕｍｌａｃｔａｔｅ－ＧＯＦである。つまり、Ｌ－乳酸ナトリウム水溶液にプラズマを照射し、その他の成分を添加したものである。
　例６は、ＮａＣｌ－ＬＯＦ（Ｌｏｓｓ　ｏｆ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ）である。つまり、塩化ナトリウムを除く成分を含む水溶液にプラズマを照射し、塩化ナトリウムを添加したものである。例７は、ＫＣｌ－ＬＯＦである。つまり、塩化カリウムを除く成分を含む水溶液にプラズマを照射し、塩化カリウムを添加したものである。例８は、ＣａＣｌ2 －ＬＯＦである。つまり、塩化カルシウムを除く成分を含む水溶液にプラズマを照射し、塩化カルシウムを添加したものである。例９は、Ｌ－ｓｏｄｉｕｍｌａｃｔａｔｅ－ＬＯＦである。つまり、Ｌ－乳酸ナトリウムを除く成分を含む水溶液にプラズマを照射し、Ｌ－乳酸ナトリウムを添加したものである。
　例１０は、プラズマ照射ラクテックである。つまり、ラクテック（登録商標）の２倍の水溶液にプラズマを照射し、Ｍｉｌｌｉ－Ｑ水で２倍に薄めたものである。例１１は、プラズマ照射水である。つまり、Ｍｉｌｌｉ－Ｑ水にプラズマを照射し、それにラクテック（登録商標）の２倍の水溶液を混合したものである。
　プラズマの照射時間は、２分であった。ガスの流量は、０．４ｓｌｍであった。ガスの種類としてアルゴンガスを用いた。プラズマ発生領域と溶液１との間の距離は、１３ｍｍであった。
２－２－３．癌細胞培養地への抗癌剤（抗腫瘍水溶液）の供給
　次に、癌細胞を培養した９６ウェルプレートの培養液をサンプル水溶液と交換した。癌細胞がサンプル水溶液に浸かっている時間は、２４時間であった。そして、その後、サンプル水溶液を通常の培養液に交換した。その後、ＭＴＳアッセイにより、生存している細胞数の割合を調べた。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
２－３．実験結果
　実験結果を図１２に示す。図１２の縦軸は、生存細胞数の割合である。ここで、例１を基準の１とした。
　図１２に示すように、例５－８、例１０のサンプル水溶液は、抗腫瘍効果を示した。例５のサンプル水溶液が最も高い抗腫瘍効果を示した。例５の生存細胞数の割合は、０．１程度であった。例１０の生存細胞数の割合は、０．２～０．３程度であった。例６－８の生存細胞数の割合は、０．４～０．５程度であった。
　例５－８、例１０に共通する事項は、溶液１がＬ－乳酸ナトリウムを含有していることである。つまり、Ｌ－乳酸ナトリウムを含む第１の水溶液にプラズマを照射することにより、抗癌剤が製造されることを示している。また、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウムが入っていても、抗腫瘍効果が失われることはほとんどない。そのため、例えば、例５の抗癌剤を、患者の体内に投与することが可能である。
　また、本実験では、Ｌ－乳酸ナトリウムを用いた。しかし、Ｄ－乳酸ナトリウムであっても同様の効果を奏すると考えられる。また、乳酸、乳酸カリウム、乳酸カルシウムであっても同様の効果を奏すると考えられる。
３．実験Ｃ（抗癌剤の冷凍）
　本実験は、プラズマ発生装置Ｐ３０を用いて製造された抗癌剤（抗腫瘍水溶液）について行った実験である。
３－１．用いた癌細胞
　本実験では、癌細胞としてグリオーマを用いた。グリオーマは、神経膠細胞（グリア細胞）に発生する神経膠腫である。すなわち、脳腫瘍の一種である。グリオーマとして、具体的には、Ｕ２５１ＳＰを用いた。
３－２．実験方法
３－２－１．癌細胞の培養
　上記の癌細胞を、９６ウェルプレートに培養して癌細胞培養地を作製した。用いた培養液は、ＤＭＥＭと血清（ＦＢＳ）と抗生物質（ペニシリン・ストレプトマイシン）とを混合した溶液である。１ウェル当たりに播種した細胞数は５０００個であった。また、１ウェル当たりに供給した培養液の容積は０．２ｍＬであった。癌細胞を培養する培養期間は２４時間であった。
３－２－２．抗癌剤（抗腫瘍水溶液）の作製
　癌細胞培養地を用意するのとは別に、抗癌剤を作製した。抗癌剤は、ラクテック（登録商標）と同じ成分の水溶液にプラズマを照射したものである。ラクテック（登録商標）は、塩化ナトリウムと、塩化カリウムと、塩化カルシウムと、Ｌ－乳酸ナトリウムと、を含有する。塩化ナトリウムの濃度は、６．０ｇ／Ｌである。塩化カリウムの濃度は、０．３ｇ／Ｌである。塩化カルシウム水和物の濃度は、０．２ｇ／Ｌである。Ｌ－乳酸ナトリウムの濃度は、３．１ｇ／Ｌである。
　プラズマの照射時間は、２分であった。ガスの種類としてアルゴンガスを用いた。プラズマ発生装置Ｐ３０では、第１電極１１０と溶液１の液面との間の距離は、６ｍｍであった。
　そして、抗癌剤をバイオフリーザーＧＳ－５２０３ＫＨＣ（日本フリーザー株式会社製）の内部で冷凍した。冷凍温度は－１５０℃であった。冷凍時間は、１２時間であった。そして、冷凍していない抗癌剤と、１回だけ冷凍および解凍を行った抗癌剤と、冷凍および解凍を２回繰り返した抗癌剤と、を製造した。
３－２－３．癌細胞培養地への抗癌剤（抗腫瘍水溶液）の供給
　次に、癌細胞を培養した９６ウェルプレートの培養液を抗癌剤と交換した。癌細胞が抗癌剤に浸かっている時間は、２４時間であった。そして、その後、抗癌剤を通常の培養液に交換した。その後、ＭＴＳアッセイにより、生存している細胞数の割合を調べた。
３－３．実験結果
　図１３は、冷凍および解凍の実施による生存細胞数の割合の変化を示すグラフである。図１３の縦軸は、生存細胞数の割合である。
　図１３に示すように、冷凍しなかった場合には、１倍の抗癌剤と、４倍に薄めた抗癌剤とが、抗腫瘍効果を示した。また、１６倍に薄めた抗癌剤は、ある程度の抗腫瘍効果を示した。６４倍に薄めた抗癌剤は、抗腫瘍効果を示さなかった。
　図１３に示すように、冷凍および解凍を１回だけした場合には、１倍の抗癌剤は、抗腫瘍効果を示した。４倍に薄めた抗癌剤は、ある程度の抗腫瘍効果を示した。１６倍に薄めた抗癌剤および６４倍に薄めた抗癌剤は、抗腫瘍効果を示さなかった。
　図１３に示すように、冷凍および解凍を２回繰り返した場合には、１倍の抗癌剤は、抗腫瘍効果を示した。しかし、４倍に薄めた抗癌剤および１６倍に薄めた抗癌剤は、抗腫瘍効果を示さなかった。
　このように、抗癌剤を冷凍保存しても抗腫瘍効果をある程度は維持できる。ただし、その抗腫瘍効果は、冷凍および解凍の繰り返しにより、ある程度失われた。
４．実験Ｄ（抗癌剤の選択性）
　図１４は、抗癌剤の選択性を示すグラフである。図１４（ａ）は、Ｕ２５１細胞に対しての結果を示すグラフである。図１４（ｂ）は、ＭＣＦ１０Ａ細胞に対しての結果を示すグラフである。図１４（ｃ）は、新生児ケラチノサイト細胞に対しての結果を示すグラフである。前述のように、Ｕ２５１細胞は癌細胞である。ＭＣＦ１０Ａ細胞および新生児ケラチノサイト細胞は、正常細胞である。
　本実験では、これらの細胞に同等の条件でプラズマを照射したラクテック（登録商標）を用いた。図１４（ａ）では、プラズマを４０秒照射した抗癌剤に暴露することにより、Ｕ２５１細胞は死滅している。一方、図１４（ｂ）および図１４（ｃ）に示すように、プラズマを４０秒照射した抗癌剤に暴露した場合に、ＭＣＦ１０Ａ細胞および新生児ケラチノサイト細胞は死滅しなかった。つまり、実施形態の抗癌剤は、癌細胞を死滅させるとともに正常細胞をほとんど死滅させない。このように、この抗癌剤は、癌細胞を選択的に死滅させることができる。
５．実験Ｅ（生物実験）
５－１．マウス
　図１５は、本実験の実験方法を模式的に示す図である。実験用マウスとして、生後８週齢のメスのBALB/c-nu/nuヌードマウス（日本エスエルシー株式会社製）を用いた。
５－２．癌細胞
　癌細胞として、ヒト子宮頸がん細胞株（ＳｉＨａ，ＡＴＣＣ）を用いた。
５－３．実験方法
　１００μＬのＰＢＳに浮遊させた１５００細胞のヒト子宮頸がん細胞株（ＳｉＨａ）を１００μＬのマトリゲル（ＢＤ　Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社製）と混ぜ合わせて合計２００μＬの細胞懸濁液を作製した。そして、その細胞懸濁液をヌードマウスの脇腹に皮下注射した。その際に、マウス一匹あたり両脇腹に一箇所ずつ、合計２箇所に播種した。そして、細胞を播種した１０匹のヌードマウスを２つのグループに分けた。１つ目のグループのマウスには、通常のラクテック（登録商標）を両脇腹に注入した。２つ目のグループのマウスには、５．５ｍＬのラクテック（登録商標）にプラズマを１０分間照射した溶液（ＰＡＬ：Ｐｌａｓｍａ　Ａｃｔｉｖａｔｅｄ　Ｌａｃｔｅｃ）を両脇腹に注入した。このＰＡＬは、実施形態で説明した抗癌剤である。これらのラクテック等の投与を１週間に３回ずつ行った。１回あたりに一箇所に投与した量は、２００μＬであった。そして、４２日後に、これら２グループのマウスから皮下腫瘍を取り出した。
５－４．実験結果
　図１６は、実験開始から４２日目にマウスから取り出した皮下腫瘍を示す写真である。図１６に示すように、通常のラクテック（登録商標）を投与したマウス（Ｃｏｎｔｒｏｌ）から摘出した皮下腫瘍は、プラズマを照射したラクテック（登録商標）を投与したマウス（ＰＡＬ）から摘出した皮下腫瘍よりも大きい傾向にある。また、マウスによる個体差はある程度ある。しかし、同じマウスでは、左右で腫瘍の大きさの違いはほとんどなかった。
　図１７は、マウスの皮下腫瘍の体積の時間変化を示すグラフである。図１７の横軸は、日数である。図１７の縦軸は、皮下腫瘍の体積である。皮下腫瘍の体積Ｖ１については、次式で近似して算出した。つまり、皮下腫瘍の形状を回転楕円体で近似した。
　　　　Ｖ１　＝　（π／６）×ａ１×ｂ１2 
　　　　　　　　Ｖ１：皮下腫瘍の体積
　　　　　　　　ａ１：皮下腫瘍の長径
　　　　　　　　ｂ１：皮下腫瘍の短径
なお、長径ａ１、短径ｂ１については、デジタルノギスを用いておおよその値を測定した。
　図１７に示すように、通常のラクテック（登録商標）を投与したマウス（Ｃｏｎｔｒｏｌ）から摘出した皮下腫瘍は、プラズマを照射したラクテック（登録商標）を投与したマウス（ＰＡＬ）から摘出した皮下腫瘍よりも大きかった。また、通常のラクテック（登録商標）を投与したマウスでは、３０日経過後に、急激に皮下腫瘍が成長している。
　図１８は、マウスの体重の時間変化を示すグラフである。図１８の横軸は、日数である。図１８の縦軸は、マウスの体重である。ヌードマウスの体重は、１グループ目の通常のラクテック（登録商標）を投与したマウスと、２グループ目のプラズマを照射したラクテック（登録商標）を投与したマウスとで、ほとんど同じであった。また、実験開始から、ヌードマウスの体重は、増加傾向にあるが、それほど変化していない。
　図１９は、４２日目に摘出した皮下腫瘍の体積および重量を示すグラフである。皮下腫瘍の体積Ｖ２については、次式で近似して算出した。
　　　　Ｖ２　＝　（π／６）×ａ２×ｂ２×ｈ２
　　　　　　　　Ｖ２：皮下腫瘍の体積
　　　　　　　　ａ２：皮下腫瘍の長径
　　　　　　　　ｂ２：皮下腫瘍の短径
　　　　　　　　ｈ２；皮下腫瘍の高さ（厚み）
なお、長径ａ２、短径ｂ２、高さｈ２については、デジタルノギスを用いて測定した。
　図１９（ａ）に示すように、プラズマを照射したラクテック（登録商標）（ＰＡＬ）を投与したマウスの皮下腫瘍の体積は、プラズマを照射しなかったラクテック（登録商標）（Ｃｏｎｔｒｏｌ）を投与したマウスの皮下腫瘍の体積の３０％程度であった。また、図１９（ｂ）に示すように、プラズマを照射したラクテック（登録商標）（ＰＡＬ）を投与したマウスの皮下腫瘍の重量は、プラズマを照射しなかったラクテック（登録商標）（Ｃｏｎｔｒｏｌ）を投与したマウスの皮下腫瘍の重量の３０％程度であった。
　このように、プラズマを照射しなかった通常のラクテック（登録商標）には、抗がん作用は認められなかった。一方、プラズマを照射したラクテック（登録商標）では、通常のラクテック（登録商標）に比べて、皮下腫瘍の体積および重量を７０％程度抑制した。このように、プラズマを照射したラクテック（登録商標）には、抗がん作用が認められた。
６．実験Ｆ（他のリンゲル液）
　本実験は、プラズマ発生装置Ｐ３０を用いて製造された抗癌剤（抗腫瘍水溶液）について行った実験である。
６－１．用いた癌細胞
　本実験では、癌細胞として卵巣癌細胞を用いた。具体的には、ＳＫＯＶ３を用いた。
６－２．実験方法
６－２－１．癌細胞の培養
　上記の癌細胞を、９６ウェルプレートに培養して癌細胞培養地を作製した。用いた培養液は、ＲＰＭＩと血清（ＦＢＳ）と抗生物質（ペニシリン・ストレプトマイシン）とを混合した溶液である。１ウェル当たりに播種した細胞数は５０００個であった。また、１ウェル当たりに供給した培養液の容積は０．１ｍＬであった。癌細胞を培養する培養期間は２４時間であった。
６－２－２．抗癌剤（抗腫瘍水溶液）の作製
　癌細胞培養地を用意するのとは別に、抗癌剤を作製した。抗癌剤の材料として、乳酸リンゲル液と、酢酸リンゲル液と、重炭酸リンゲル液とを用いた。乳酸リンゲル液の成分は、実験Ａ等で用いたラクテック（登録商標）と同じである。
　酢酸リンゲル液は、塩化ナトリウムと、塩化カリウムと、塩化カルシウムと、酢酸ナトリウムと、を含有する。塩化ナトリウムの濃度は、６．０ｇ／Ｌである。塩化カリウムの濃度は、０．３ｇ／Ｌである。塩化カルシウム水和物の濃度は、０．２ｇ／Ｌである。酢酸ナトリウム水和物の濃度は、３．８ｇ／Ｌである。
　重炭酸リンゲル液は、塩化ナトリウムと、塩化カリウムと、塩化カルシウムと、塩化マグネシウムと、炭酸水素ナトリウムと、クエン酸ナトリウムと、を含有する。塩化ナトリウムの濃度は、５．８４ｇ／Ｌである。塩化カリウムの濃度は、０．３ｇ／Ｌである。塩化カルシウムの濃度は、０．２２ｇ／Ｌである。塩化マグネシウムの濃度は、０．２ｇ／Ｌである。炭酸水素ナトリウムの濃度は、２．３５ｇ／Ｌである。クエン酸ナトリウムの濃度は、０．２ｇ／Ｌである。
　これら３種類のリンゲル液にプラズマを照射した。プラズマの照射時間は、１０分であった。ガスの種類としてアルゴンガスを用いた。プラズマ発生装置Ｐ３０では、第１電極１１０と溶液１の液面との間の距離は、３ｍｍであった。
６－２－３．癌細胞培養地への抗癌剤（抗腫瘍水溶液）の供給
　そして、図２０に示すように、癌細胞を培養した９６ウェルプレートの培養液を抗癌剤と交換した。癌細胞が抗癌剤に浸かっている時間は、２４時間であった。そして、その後、抗癌剤を通常の培養液に交換した。その後、ＭＴＳアッセイにより、生存している細胞数の割合を調べた。
６－３．実験結果
６－３－１．乳酸リンゲル液
　図２１は、乳酸リンゲル液にプラズマを照射した水溶液でＳＫＯＶ３を処理した場合のＳＫＯＶ３の生存率を示すグラフである。図２１に示すように、乳酸リンゲル液にプラズマを照射した水溶液は、卵巣癌細胞（ＳＫＯＶ３）に対して抗腫瘍効果を示した。その強度は、全ＳＫＯＶ３細胞の５０％を死滅させうる希釈率が７８倍希釈であった。
６－３－２．酢酸リンゲル液
　図２２は、酢酸リンゲル液にプラズマを照射した水溶液でＳＫＯＶ３を処理した場合のＳＫＯＶ３の生存率を示すグラフである。図２２に示すように、酢酸リンゲル液にプラズマを照射した水溶液は、卵巣癌細胞（ＳＫＯＶ３）に対して抗腫瘍効果を示した。その強度は、全ＳＫＯＶ３細胞の５０％を死滅させうる希釈率が５３倍希釈であった。
６－３－３．重炭酸リンゲル液
　図２３は、重炭酸リンゲル液にプラズマを照射した水溶液でＳＫＯＶ３を処理した場合のＳＫＯＶ３の生存率を示すグラフである。図２３に示すように、重炭酸リンゲル液にプラズマを照射した水溶液は、卵巣癌細胞（ＳＫＯＶ３）に対して抗腫瘍効果を示した。その強度は、全ＳＫＯＶ３細胞の５０％を死滅させうる希釈率が１／３倍希釈であった。
　このように、乳酸リンゲル液と、酢酸リンゲル液と、重炭酸リンゲル液と、のそれぞれにプラズマを照射した水溶液は、いずれも卵巣癌細胞（ＳＫＯＶ３）に対して抗腫瘍効果を示した。抗腫瘍効果の強さは、乳酸リンゲル液にプラズマを照射した水溶液、酢酸リンゲル液にプラズマを照射した水溶液、重炭酸リンゲル液にプラズマを照射した水溶液、の順であった。このように、乳酸リンゲル液に限らず、これらの種々のリンゲル液は、プラズマを照射することにより抗腫瘍効果を示した。また、卵巣癌細胞（ＳＫＯＶ３）に対して抗腫瘍効果を奏した。
　また、抗癌剤の原材料は、酢酸ナトリウムに限らず、酢酸、酢酸カリウム、酢酸カルシウムであってもよいと考えられる。同様に、抗癌剤の原材料は、炭酸水素ナトリウムやクエン酸ナトリウムに限らず、クエン酸、クエン酸カリウム、クエン酸カルシウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素カルシウムであってもよいと考えられる。
７．実験Ｇ（ＮＭＲ）
７－１．乳酸ナトリウム水溶液
　本実験では、プラズマを照射していない乳酸ナトリウム水溶液と、プラズマを照射した乳酸ナトリウム水溶液と、についてＮＭＲを実施した。そのために、市販の乳酸ナトリウム水溶液を用いた。乳酸ナトリウム水溶液の濃度は５０％である。プラズマを照射した乳酸ナトリウム水溶液は、乳酸ナトリウム水溶液に５分間だけプラズマを照射することにより作製された。その際にプラズマ発生装置Ｐ２０を用いた。そして、ＮＭＲを用いて、1 Ｈ、13Ｃについて観測した。
７－２．実験結果
　図２４は、1 Ｈを観測した結果を示すグラフである。図２４の上側にプラズマを照射していない乳酸ナトリウム水溶液の結果を示す。この図以降の図も同様である。図２４の下側にプラズマを照射した乳酸ナトリウム水溶液の結果を示す。図２４に示すように、プラズマの照射の有無によらず、ＯＨに由来するピークと、ＣＨに由来するピークと、ＣＨ3 に由来するピークと、が観測された。そして、プラズマを照射した乳酸ナトリウム水溶液のピークとプラズマを照射していない乳酸ナトリウム水溶液のピークとの間で、大きな差はみられなかった。
　図２５は、図２４の拡大図である。図２５に示すように、ＣＨ3 ＣＯＣＯＯＨ、ＣＨ3 ＣＯ、といった構造を示すピークが、プラズマ照射後に大きくなっている。その他の点については、プラズマの照射前後で様相は大きく変わっていない。
　図２６は、13Ｃを観測した結果を示すグラフである。図２６に示すように、ＣＯＯＨに由来するピークと、ＣＨに由来するピークと、ＣＨ3 に由来するピークと、が観測された。13Ｃを観測した結果、プラズマの照射前後で様相は大きく変わっていない。
　図２７は、図２６の拡大図である。図２７では、図２６と同様に、プラズマの照射前後で様相は大きく変わっていない。
　このように、プラズマを照射することにより、乳酸ナトリウムの基本的構造が大きく変化するわけではない。そして、プラズマを照射することにより、ＣＨ3 ＣＯＣＯＯＨ、ＣＨ3 ＣＯが増加した。そのため、ＣＨ3 ＣＯＣＯＯＨ、ＣＨ3 ＣＯが抗腫瘍効果に何らかの形で寄与していると考えられる。つまり、抗癌物質は、官能基ＣＨ3 ＣＯＣＯＯまたは官能基ＣＨ3 ＣＯを有していると考えられる。
８．実験Ｈ（酢酸リンゲル液の成分）
　本実験は、プラズマ発生装置Ｐ３０を用いて製造された抗癌剤（抗腫瘍水溶液）について行った実験である。
８－１．用いた癌細胞
　本実験では、癌細胞として卵巣癌細胞を用いた。具体的には、ＳＫＯＶ３を用いた。
８－２．実験方法
８－２－１．癌細胞の培養
　上記の実験Ｆと同様に癌細胞を培養した。
８－２－２．サンプル水溶液の作製
　本実験では、７種類のサンプル水溶液を用いた。これらのサンプル水溶液は、実験ＢのＧＯＦと同じ考え方により製造された水溶液である。つまり、水溶液Ａ１と水溶液Ａ２とを用意する。ここで、水溶液Ａ１と水溶液Ａ２とを混合すると実験Ｆで用いた酢酸リンゲル液となる。本実験では、水溶液Ａ１のみにプラズマを照射して、その後水溶液Ａ１と水溶液Ａ２とを混合する。
　第１のサンプル水溶液は、プラズマを照射していない酢酸リンゲル液である。第２のサンプル水溶液は、純水にプラズマを照射し、その後高い濃度の酢酸リンゲル液を混合したものである。第３のサンプル水溶液は、酢酸ナトリウム水溶液にプラズマを照射し、その後酢酸リンゲル液の他の成分を混合したものである。第４のサンプル水溶液は、酢酸リンゲル液にプラズマを照射し、その後酢酸リンゲル液を混合したものである。第５のサンプル水溶液は、塩化ナトリウム水溶液にプラズマを照射し、その後酢酸リンゲル液の他の成分を混合したものである。第６のサンプル水溶液は、塩化カリウム水溶液にプラズマを照射し、その後酢酸リンゲル液の他の成分を混合したものである。第７のサンプル水溶液は、塩化カルシウム水溶液にプラズマを照射し、その後酢酸リンゲル液の他の成分を混合したものである。
　上記において、酢酸リンゲル液の成分は実験Ｆで用いたものと同じである。そして、プラズマの照射時間は、５分であった。ガスの種類としてアルゴンガスを用いた。プラズマ発生装置Ｐ３０では、第１電極１１０と溶液１の液面との間の距離は、１０ｍｍであった。
８－２－３．癌細胞培養地へのサンプル水溶液の供給
　そして、実験Ｆと同様に癌細胞にサンプル水溶液１からサンプル水溶液７を供給した。その後、ＭＴＳアッセイにより、生存している細胞数の割合を調べた。
８－３．実験結果
　図２８および図２９は、実験結果を示すグラフである。図２８および図２９に示すように、第３のサンプル水溶液および第４のサンプル水溶液は、抗腫瘍効果を示した。その他のサンプル水溶液は、抗腫瘍効果を示さなかった。これは、酢酸リンゲル液に含まれる成分のうち酢酸ナトリウムが抗腫瘍物質の原材料であることを示している。この結果は、実験Ｇと矛盾のない結果である。
Ｐ１…プラズマ照射装置
Ｍ１…ロボットアーム
ＰＭ…抗癌剤製造装置
Ｐ１０、Ｐ２０、Ｐ３０…プラズマ発生装置
１０、１１…筐体部
１０ｉ、１１ｉ…ガス導入口
１０ｏ、１１ｏ…ガス噴出口
２ａ、２ｂ…電極
Ｐ…プラズマ領域
Ｈ…凹部（ホロー）
１１０…第１電極
１２０…第１の電位付与部
１３０…第１のリード線
１４０…ガス供給部
１５０…ガス管結合コネクター
１６０…ガス管
１７０…第１電極保護部材
２１０…第２電極
２２０…第２の電位付与部
２３０…第２のリード線
２４０…第２電極保護部材
２５０…容器
２６０…封止部材
２７０…架台

Claims (14)

  1. 第１の水溶液を準備する水溶液準備工程と、
    前記第１の水溶液にプラズマを照射して第２の水溶液とするプラズマ照射工程と、
    を有し、
    　前記第１の水溶液は、
    　　乳酸と、乳酸ナトリウムと、乳酸カリウムと、乳酸カルシウムと、酢酸と、酢酸ナトリウムと、酢酸カリウムと、酢酸カルシウムと、クエン酸と、クエン酸ナトリウムと、クエン酸カリウムと、クエン酸カルシウムと、炭酸水素カリウムと、炭酸水素カルシウムと、のうちの少なくとも一つを含有すること
    を特徴とする抗癌剤の製造方法。
  2. 請求項１に記載の抗癌剤の製造方法において、
    　前記第１の水溶液は、
    　　リンゲル液であること
    を特徴とする抗癌剤の製造方法。
  3. 請求項２に記載の抗癌剤の製造方法において、
    　前記第１の水溶液は、
    　　乳酸リンゲル液であること
    を特徴とする抗癌剤の製造方法。
  4. 請求項２に記載の抗癌剤の製造方法において、
    　前記第１の水溶液は、
    　　酢酸リンゲル液であること
    を特徴とする抗癌剤の製造方法。
  5. 請求項２に記載の抗癌剤の製造方法において、
    　前記第１の水溶液は、
    　　重炭酸リンゲル液であること
    を特徴とする抗癌剤の製造方法。
  6. 請求項１から請求項５までのいずれか１項に記載の抗癌剤の製造方法において、
    　前記第１の水溶液は、
    　　塩化ナトリウムと、塩化カリウムと、塩化カルシウムと、のうちの少なくとも一つを含有すること
    を特徴とする抗癌剤の製造方法。
  7. 請求項１から請求項６までのいずれか１項に記載の抗癌剤の製造方法において、
    　塩化ナトリウムと、塩化カリウムと、塩化カルシウムと、のうちの少なくとも一つを前記第２の水溶液に添加して第３の水溶液とする成分添加工程を有すること
    を特徴とする抗癌剤の製造方法。
  8. 請求項１から請求項７までのいずれか１項に記載の抗癌剤の製造方法において、
    　前記第２の水溶液もしくは前記第３の水溶液を冷凍する冷凍工程を有し、
    　前記第２の水溶液もしくは前記第３の水溶液は、
    　　塩化ナトリウムと、塩化カリウムと、塩化カルシウムと、を含有すること
    を特徴とする抗癌剤の製造方法。
  9. 請求項８に記載の抗癌剤の製造方法において、
    　前記冷凍工程では、
    　　前記第２の水溶液もしくは前記第３の水溶液を－１９６℃以上０℃以下の範囲内で冷凍すること
    を特徴とする抗癌剤の製造方法。
  10. 請求項１から請求項９までのいずれか１項に記載の抗癌剤の製造方法において、
    　前記プラズマ照射工程では、
    　　筒形状部を備える第１電極を前記第１の水溶液の外に配置するとともに第２電極を前記第１の水溶液の中に配置し、
    　　前記第１電極の前記筒形状部から前記第１の水溶液に向かってガスを照射し、
    　　その状態で前記第１電極と前記第２電極との間に電圧を印加すること
    を特徴とする抗癌剤の製造方法。
  11. 第１の水溶液を準備する水溶液準備工程と、
    前記第１の水溶液にプラズマを照射して第２の水溶液とするプラズマ照射工程と、
    を有し、
    　前記第１の水溶液は、
    　　乳酸と、乳酸ナトリウムと、乳酸カリウムと、乳酸カルシウムと、酢酸と、酢酸ナトリウムと、酢酸カリウムと、酢酸カルシウムと、クエン酸と、クエン酸ナトリウムと、クエン酸カリウムと、クエン酸カルシウムと、炭酸水素カリウムと、炭酸水素カルシウムと、のうちの少なくとも一つを含有すること
    を特徴とする輸液の製造方法。
  12. リンゲル液にプラズマを照射して製造されたものであること
    を特徴とする抗癌剤。
  13. リンゲル液にプラズマを照射して製造されたものであること
    を特徴とする輸液。
  14. ＣＨ3 ＣＯまたはＣＨ3 ＣＯＣＯＯを有し、
    癌細胞を選択的に死滅させること
    を特徴とする抗癌物質。
PCT/JP2015/006419 2014-12-24 2015-12-23 抗癌剤および輸液とそれらの製造方法ならびに抗癌物質 WO2016103695A1 (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2016565922A JP6736004B2 (ja) 2014-12-24 2015-12-23 抗癌剤および輸液とそれらの製造方法ならびに抗癌物質

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2014261364 2014-12-24
JP2014-261364 2014-12-24

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2016103695A1 true WO2016103695A1 (ja) 2016-06-30

Family

ID=56149753

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2015/006419 WO2016103695A1 (ja) 2014-12-24 2015-12-23 抗癌剤および輸液とそれらの製造方法ならびに抗癌物質

Country Status (2)

Country Link
JP (1) JP6736004B2 (ja)
WO (1) WO2016103695A1 (ja)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018029862A1 (ja) * 2016-08-12 2018-02-15 富士機械製造株式会社 抗腫瘍水溶液製造装置
JP2019123682A (ja) * 2018-01-15 2019-07-25 Ｓｂｉファーマ株式会社 プラズマ療法によるがんまたは腫瘍の治療効果を増強
JP2019163241A (ja) * 2018-03-15 2019-09-26 国立大学法人名古屋大学 抗癌剤および抗癌物質および輸液
JPWO2019098339A1 (ja) * 2017-11-17 2019-11-14 良弘 鈴木 抗癌剤の製造方法、抗癌剤及び医薬
US10525022B2 (en) 2014-12-29 2020-01-07 Metimedi Pharmaceuticals Co., Ltd. Pharmaceutical composition for treating cancer, containing lactate metal salt
JP2020070244A (ja) * 2018-10-29 2020-05-07 株式会社Ｆｕｊｉ 腹腔内洗浄溶液の製造方法
JP2020070243A (ja) * 2018-10-29 2020-05-07 株式会社Ｆｕｊｉ 創傷治癒促進溶液の製造方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013128905A1 (ja) * 2012-02-27 2013-09-06 国立大学法人名古屋大学 抗腫瘍水溶液および抗癌剤とそれらの製造方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013128905A1 (ja) * 2012-02-27 2013-09-06 国立大学法人名古屋大学 抗腫瘍水溶液および抗癌剤とそれらの製造方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
PING CHENG ET AL.: "Ethyl pyruvate inhibits proliferation and induces apoptosis of hepatocellular carcinoma via regulation of the HMGB1-RAGE and AKT pathways", BIOCHEM BIOPHYS RES COMMUN, vol. 43, no. 4, January 2014 (2014-01-01), pages 1162 - 1168, XP028605541, DOI: doi:10.1016/j.bbrc.2013.12.064 *
WEI LIU ET AL.: "Total synthesis and cytotoxicity of (-)-jorumycin and its analogues", TETRAHEDRON, vol. 68, no. 13, 2012, pages 2759 - 64, XP028403784, DOI: doi:10.1016/j.tet.2012.02.016 *

Cited By (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10525022B2 (en) 2014-12-29 2020-01-07 Metimedi Pharmaceuticals Co., Ltd. Pharmaceutical composition for treating cancer, containing lactate metal salt
US11413261B2 (en) 2014-12-29 2022-08-16 Metimedi Pharmaceuticals Co., Ltd Pharmaceutical composition for treating cancer comprising lactate metal salt
JPWO2018029862A1 (ja) * 2016-08-12 2019-06-06 株式会社Ｆｕｊｉ 抗腫瘍水溶液製造装置
WO2018029862A1 (ja) * 2016-08-12 2018-02-15 富士機械製造株式会社 抗腫瘍水溶液製造装置
JPWO2019098339A1 (ja) * 2017-11-17 2019-11-14 良弘 鈴木 抗癌剤の製造方法、抗癌剤及び医薬
JP2019123682A (ja) * 2018-01-15 2019-07-25 Ｓｂｉファーマ株式会社 プラズマ療法によるがんまたは腫瘍の治療効果を増強
JP7503800B2 (ja) 2018-01-15 2024-06-21 Ｓｂｉファーマ株式会社 プラズマ療法によるがんまたは腫瘍の治療効果を増強
JP7478386B2 (ja) 2018-01-15 2024-05-07 Ｓｂｉファーマ株式会社 プラズマ療法によるがんまたは腫瘍の治療効果を増強
JP7371881B2 (ja) 2018-03-15 2023-10-31 国立大学法人東海国立大学機構 抗癌剤および抗癌物質および抗癌用輸液
JP2019163241A (ja) * 2018-03-15 2019-09-26 国立大学法人名古屋大学 抗癌剤および抗癌物質および輸液
JP2020070244A (ja) * 2018-10-29 2020-05-07 株式会社Ｆｕｊｉ 腹腔内洗浄溶液の製造方法
JP7199053B2 (ja) 2018-10-29 2023-01-05 株式会社Fuji 創傷治癒促進溶液の製造方法
JP7154524B2 (ja) 2018-10-29 2022-10-18 株式会社Fuji 腹腔内洗浄溶液の製造方法
JP2020070243A (ja) * 2018-10-29 2020-05-07 株式会社Ｆｕｊｉ 創傷治癒促進溶液の製造方法

Also Published As

Publication number Publication date
JP6736004B2 (ja) 2020-08-05
JPWO2016103695A1 (ja) 2017-10-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2016103695A1 (ja) 抗癌剤および輸液とそれらの製造方法ならびに抗癌物質
JP6099277B2 (ja) 抗腫瘍水溶液および抗癌剤とそれらの製造方法
Yan et al. The application of the cold atmospheric plasma-activated solutions in cancer treatment
CN108025185A (zh) 用于增强有益剂的局部应用的方法
JP6583882B2 (ja) 魚類の生産方法および稚魚の成長促進方法および魚類の成長促進剤
CN113101269B (zh) 一种基于纳米脂质体的递送系统、制备方法及应用
TWI601542B (zh) 一種用於治療肺癌之吸入式醫藥組成物及其備製方法
KR20190010542A (ko) 포유동물 조직 중의 산소량을 증가시키는 포접체를 포함하는 다중산소화된 금속 하이드록사이드
Tanaka et al. Cancer treatments using low-temperature plasma
JPWO2018088559A1 (ja) 成長促進水溶液とその製造装置並びに農作物および魚類の生産方法
JPWO2012086635A1 (ja) 心筋梗塞を予防、改善又は治療するための炭酸ガスミスト圧浴方法及び炭酸ガスミスト圧浴装置
Chen et al. Hyaluronic acid-covered piezoelectric nanocomposites as tumor microenvironment modulators for piezoelectric catalytic therapy of melanoma
WO2015125934A1 (ja) 抗癌剤の抗腫瘍効果の増強剤
JP7371881B2 (ja) 抗癌剤および抗癌物質および抗癌用輸液
JP2015183006A (ja) 心疾患を治療するための吸入式医薬組成物及びその調製法
RU2244573C2 (ru) Способ обеспечения косметической/медицинской терапии
JP6755491B2 (ja) 抗腫瘍水溶液の製造方法
JP6381111B2 (ja) 抗腫瘍水溶液および抗癌剤とそれらの製造方法
JP7154524B2 (ja) 腹腔内洗浄溶液の製造方法
JP7447290B2 (ja) プラズマ活性液を生成する医療機器および方法
Zhang et al. A NIR-driven green affording-oxygen microrobot for targeted photodynamic therapy of tumors
JP7478386B2 (ja) プラズマ療法によるがんまたは腫瘍の治療効果を増強
JP2016169164A (ja) 抗腫瘍水溶液とその製造方法
US20200383885A1 (en) Cosmetic composition comprising liquid-phase plasma capable of being stored for long period of time as active ingredient for skin regeneration or whitening
Evtina et al. Inhibition of tumor cell proliferation in vitro using atmospheric-pressure plasma jet

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 15872266

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2016565922

Country of ref document: JP

Kind code of ref document: A

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 15872266

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1