WO2016003117A1 - 산형화 추출물을 포함하는 미백용 조성물 - Google Patents

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WO2016003117A1
WO2016003117A1 PCT/KR2015/006540 KR2015006540W WO2016003117A1 WO 2016003117 A1 WO2016003117 A1 WO 2016003117A1 KR 2015006540 W KR2015006540 W KR 2015006540W WO 2016003117 A1 WO2016003117 A1 WO 2016003117A1
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masterwort
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peucedanum ostruthium
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박필준
이소희
조은경
이태룡
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(주)아모레퍼시픽
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    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones

Definitions

  • the present disclosure relates to a composition comprising an acidified extract.
  • Melanin is a pigment that determines the color of a person's skin.
  • the skin color is determined by the amount and distribution of melanin.
  • the cells that make melanin are made from cells called melanocytes under the skin's epidermis and travel to the stratum corneum and fall off as skin metabolism.
  • the number of melanin forming cells is almost the same regardless of the color of the skin. Only because the amount, type, and distribution of melanin is different, the skin color is different.
  • Tyrosine is converted into DOPA by a human enzyme called Tyrosinase, and finally, a series of oxidation processes produce melanin, a dark brown polymer.
  • Melanin is made from melanocytes present in the basal layer of the skin, and it is known that the production is promoted by stimulation such as ultraviolet rays or inflammation. Therefore, it is possible to reduce the production of melanin by reducing external stimulation and blocking signal transduction, or by inhibiting the synthesis or activity of tyrosinase, a melanogenesis enzyme.
  • kojic acid, hydroquinone, arbutin, azelaic acid, aloesin, 4-butylresosocinol, resveratrol, ceramide, sphingosine-1-phosphate, sphingosylphosphorylcholine, etc. promote the degradation or control glycosylation of tyrosinase. It is known to regulate melanin production. However, they are not well utilized due to unsatisfactory whitening effects, low stability and skin irritation. Therefore, there is a need for development of a substance having excellent whitening effect and few side effects.
  • the present specification is to provide a composition having excellent skin whitening efficacy.
  • the present specification provides a composition for skin whitening containing an extract of Masterwort ( Pucedanum Ostruthium ) which is a kind of Apiaceae .
  • Skin whitening composition containing the extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) of the present specification as an active ingredient has a melanin reduction, tyrosinase activity inhibitory effect has a skin whitening effect and does not adversely affect cells Since it can be widely applied to skin external preparations, cosmetic compositions and pharmaceutical compositions.
  • FIG. 1 is a graph showing the results of a test for reducing the melanin content of the extract (Masterwort ) (Peucedanum Ostruthium ) in accordance with an aspect of the present invention and a photograph contained in the test tube before the measurement.
  • Figure 2 is a graph showing the results of a tyrosinase activity reduction experiment for the masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract according to an aspect of the present invention.
  • Korean Patent Application No. 10-2014-0080477 filed on June 30, 2014, is incorporated herein by reference in its entirety for all purposes.
  • this application claims the benefit of Korean Patent Application No. 10-2014-0080477, which is hereby incorporated by reference in its entirety.
  • the present invention may relate to a composition
  • a composition comprising Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract as an active ingredient.
  • the composition may be a composition for skin whitening, specifically may be a composition for skin whitening.
  • the composition according to the invention may be a pharmaceutical, food or cosmetic composition. Further specifically, in one aspect of the present invention, the composition according to the present invention may be a topical skin composition.
  • the present invention may relate to a skin whitening method comprising administering an extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) to a subject in need of whitening.
  • the administration may be by the method of administration described herein.
  • the present invention may relate to the use of skin whitening of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract.
  • the present invention may be directed to an extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) for use in skin whitening.
  • the present invention may relate to a composition for reducing melanin containing Masterwort (Peucedanum Ostruthium) extract as an active ingredient.
  • the present invention may be directed to a method for reducing melanin comprising administering Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract to a subject in need of melanin reduction.
  • the administration may be by the method of administration described herein.
  • the present invention may be directed to the use of melanin reduction of Masterwort (Peucedanum Ostruthium) extract.
  • the present invention may relate to an extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) for use in melanin reduction.
  • the present invention may relate to a composition for inhibiting melanin production comprising Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract as an active ingredient.
  • Masterwort Pigdanum Ostruthium
  • the present invention may be directed to a method for inhibiting melanin production comprising administering an extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) to a subject in need of inhibition of melanin production.
  • the administration may be by the method of administration described herein.
  • the present invention may relate to the use of inhibiting melanogenesis of the extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ).
  • the present invention may relate to an extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) for use in inhibiting melanin production.
  • melanin reduction may mean reducing the content of melanin existing in cells and the like
  • inhibition of melanin production may mean inhibiting melanin production in cells and the like.
  • the present invention may relate to a composition for inhibiting tyrosinase activity comprising Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract as an active ingredient.
  • Masterwort Pigdanum Ostruthium
  • the present invention may be directed to a method for inhibiting tyrosinase activity comprising administering an extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) to a subject in need thereof.
  • the present invention may relate to the use of Tyrosinase activity inhibition of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract.
  • the present invention may relate to an extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) for use in inhibiting tyrosinase activity.
  • the present invention may relate to a composition for inhibiting pigmentation, including an acidification (Masterwort ) (Peucedanum Ostruthium ) extract as an active ingredient.
  • a composition for inhibiting pigmentation including an acidification (Masterwort ) (Peucedanum Ostruthium ) extract as an active ingredient.
  • the present invention may relate to a method for inhibiting pigmentation, comprising administering an extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) to a subject in need of inhibition of pigmentation.
  • the administration may be by the method of administration described herein.
  • the present invention may relate to the use of inhibition of pigmentation of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract.
  • it may be directed to an extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) for use in inhibiting pigmentation.
  • the present invention may relate to a composition for treating, improving or preventing pigmentation including Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract as an active ingredient.
  • Masterwort Pigdanum Ostruthium
  • the present invention may relate to a composition for treating, improving or preventing pigmentation including Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract as an active ingredient.
  • the present invention may relate to a pharmaceutical composition for treating or preventing pigmentation, or a food composition for improving or preventing pigmentation, including a masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract as an active ingredient.
  • the present invention relates to a method for treating, improving or inhibiting pigmentation including administering Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract to an individual in need of treatment, improvement, inhibition or prevention of pigmentation. It may be. Specifically, the administration may be by the method of administration described herein.
  • the present invention may be directed to the use of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract for treating, improving or preventing pigmentation.
  • Masterwort Pigdanum Ostruthium
  • the present invention may relate to an extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) for use in treating, improving, inhibiting or preventing pigmentation .
  • pigmentation corresponds to a wide range of concepts including all of the pigmentation caused by a variety of causes, and specifically, but not limited to pigmentation occurring in the skin.
  • pigmentation may include senile plaques, inflammatory pigmentation, freckles, acquired dermal melanin pigmentation, hyperpigmentation, and the like, but is not limited thereto.
  • pigmentation or “hyperpigmentation” refers to actual or perceived excessively dark skin damage.
  • Skin damage can be real, ie, due to age, excessive sun exposure or disease or conditions that lead to dark skin areas. Dark skin areas may be in the form of spots, large blotches, or relatively large areas of dark color. Skin damage can also be perceived, ie perception by an individual whose shadowed portion of his / her skin is too dark and an individual with a desire to lighten the skin shade.
  • compositions herein are useful for depigmenting various skin pigmentations, eg dark patches of melanoma, ie pigmentation of the face or other parts of the body, or for spontaneously whitening skin pigmentation.
  • dark skin damage is due to an increase in melanin levels.
  • the composition according to the invention is used to treat hyperpigmentation, ie to brighten dark skin or to prevent hyperpigmentation, ie to reduce or eliminate excessive amounts of melanin production and thus prevent skin from darkening. Can be.
  • the masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract may be a concentration of 0.1ppm (w / w) to 10ppm (w / w) based on the total volume of the composition comprising the same, It is not limited to this.
  • the concentration of the extract (Masterwort ) (Peucedanum Ostruthium ) extract contained in the composition is 0.01ppm or more, 0.1ppm or more, 0.5ppm or more, 0.6ppm or more, based on the total volume of the composition, 0.7ppm, 0.8ppm, 0.9ppm, 1.0ppm, 1.1ppm, 1.2ppm, 1.3ppm, 1.4ppm, 1.5ppm, 1.6ppm, 1.7ppm, 1.8ppm, 1.9ppm More than 2.0ppm, More than 2.1ppm, More than 2.2ppm, More than 2.3ppm, More than 2.4ppm, More than 2.5ppm, More than 2.6ppm, More than 2.7ppm, More than 2.8ppm, More than 2.9ppm, More than 3ppm, More than 3.2ppm, 3.4 ppm or more, 3.6 ppm or more, 3.8 ppm or more, 4.0 ppm or more,
  • ppm or less 0 ppm or less, 5.5 ppm or less, 5.0 ppm or less, 4.5 ppm or less, 4.0 ppm or less, 3.8 ppm or less, 3.6 ppm or less, 3.4 ppm or less, 3.2 ppm or less, 3.0 ppm or less, 2.8 ppm or less, 2.6 ppm or less, 2.4 ppm or less It may be less than or equal to, 2.2 ppm or less, 2.0 ppm or less, 1.8 ppm or less, 1.6 ppm or less, 1.4 ppm or less, 1.2 ppm or less, 1.0 ppm or less, 0.8 pm or less, 0.6 ppm or less, 0.4 ppm or less, or 0.2 ppm or less.
  • the concentration of the extract is to have a unit of ppm (w / w).
  • the masterwort (Peucedanum Ostruthium ) may be one or more selected from the group consisting of leaves, flowers, stems, and roots of the masterwort (Peucedanum Ostruthium ) herb, specifically Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) It may be the leaf of the herb.
  • Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract is
  • (1) may be prepared by a manufacturing method comprising the step of extracting Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) into water, an organic solvent, or a combination thereof.
  • the method may further comprise the step of processing the stepping (Masterwort ) (Peucedanum Ostruthium ) before step (1), specifically, the processing is Masterwort (Peucedanum Ostruthium) ) May be powdered by drying and then pulverizing, but is not limited thereto, and includes a process for easily performing extraction. Specifically, the drying may be sun drying, hot air drying, evaporation drying, spray drying, or freeze drying, and more specifically, hot air drying.
  • the masterwort (Peucedanum Ostruthium ) can be extracted by using the raw ( wort ) Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) itself without any processing.
  • the method may further comprise the step of removing the solvent by distillation after extraction, specifically, the distillation may be vacuum distillation.
  • the method may further comprise the step of adding one or more of glycerin and preservative to the concentrate after distillation.
  • the method may further include filtering after the solvent removal step or the step of adding one or more of glycerin and a preservative.
  • the masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract may be one or more extracts selected from the group consisting of water, organic solvents and mixtures thereof.
  • the organic solvent may be one or more selected from the group consisting of C 1 ⁇ C 6 lower alcohol, butylene glycol, and propylene glycol, more specifically, the lower alcohol may be ethanol. .
  • the melanocyte forming cells used herein may correspond to melanocyte forming cells (Keratinocyte-adapted melanocyte, KaMC) disclosed in PCT / KR2012 / 007815 or Korean Patent Application No. 10-2011-0099728.
  • the melanocyte forming cells used herein may be obtained according to the methods and procedures disclosed in the above documents, and may also be cultured by the methods disclosed in the above documents. These melanocytes were deposited on September 14, 2011 with the Korean Collection for Type Culture (KCTC), an international depositary organization under the Budapest Treaty, and were assigned KCTC 12015BP as an accession number.
  • KCTC Korean Collection for Type Culture
  • skin refers to an organ that covers the exterior of an organism and is composed of the epidermis, dermis and subcutaneous fat layer and includes the scalp and hair as well as tissues covering the outside of the face or the entire body. to be.
  • Masterwort Pucedanum Ostruthium
  • Masterwort Pucedanum Ostruthium
  • extract includes all substances obtained by extracting the components of natural products, regardless of the extraction method, extraction solvent, extracted component or extract form, and extracts the substances obtained by extracting the components of natural products. It is a broad concept that includes all materials that can be obtained by processing or processing in a specific manner, and specifically, the processing or processing may be further fermentation or enzymatic treatment of the extract. It is a broad concept including a dry matter, and specifically, the extract herein may be a fermentation product.
  • Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract refers to a substance obtained by extracting a component of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ), regardless of the extraction method, the extraction solvent, the extracted component or the form of the extract. It contains all of the substances obtained by the extraction method including the process of treatment with heat, acid, base, enzyme, etc. in the process of extracting the components and also contains Masterwort (Peucedanum Ostruthium). This is a broad concept that includes all materials that can be obtained by extracting the components of) and then processing or treating them by other methods.
  • the processing or treatment may be to fermentation or enzymatic treatment of the extract (Masterwort ) (Peucedanum Ostruthium ) extract.
  • the masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract of the present specification may be a fermentation product.
  • Masterwort (Peucedanum Ostruthium) is in the form of an extract, or live (Masterwort ) (Peucedanum Ostruthium ), the pulverization of the herbal medicine itself, dried products of herbal medicine, herbal medicine Dry grinding of, may be a fermentation product of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ), but is not limited thereto.
  • the masterwort (Peucedanum Ostruthium ) used in the present specification is not limited in its acquisition method, and may be grown and used or purchased commercially available, and some or all of the herbaceous ground or root portion may be used. .
  • the masterwort (Peucedanum Ostruthium ) is not necessarily manufactured by drying and is not limited as long as it is a raw material in a form suitable for extracting the active ingredient of the masterwort (Peucedanum Ostruthium ).
  • the water comprises distilled or purified water
  • the organic solvent is a lower alcohol of C 1 ⁇ C 5 alcohol and acetone, ether, ethyl acetate, diethyl ether, ethyl methyl ketone and One or more selected from the group consisting of chloroform, but is not limited thereto.
  • the masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract may comprise a masterwort (Peucedanum Ostruthium ) -C 1 ⁇ C 6 alcohol extract, specifically the alcohol is methanol or ethanol Can be.
  • the masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract is obtained by a manufacturing method comprising the step of extracting the masterwort (Peucedanum Ostruthium ) with water, an organic solvent, or a mixture thereof Can be.
  • Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract may be a crude extract of water, an organic solvent, and a solvent selected from the group consisting of a combination thereof.
  • the organic solvent may be a C 1 -C 6 alcohol, and specifically, the C 1 -C 6 alcohol may be methanol or ethanol.
  • a mountain-shaped screen (Masterwort) (Peucedanum Ostruthium) an extraction with a solvent it is preferable to extract by adding a dispersion type screen (Masterwort) solvent corresponding to about 5 to about 15 times (Peucedanum Ostruthium) and Specifically, it is preferable to extract by adding about 10 times the solvent, but is not limited thereto.
  • the extraction may be used, such as hot water extraction, ethanol extraction, heat extraction, cold extraction, reflux extraction, reflux cooling extraction, or ultrasonic extraction, there is no limitation if the extraction is obvious to those skilled in the art, Extraction may be hot water extraction or ethanol extraction.
  • the extraction may be carried out at room temperature, but for more efficient extraction may be carried out under warm conditions, preferably at a temperature of about 40 to 100 °C, more preferably about 80 °C It may be, but is not limited thereto.
  • Extraction time may be performed for about 2 to about 14 hours, specifically 8 hours to 14 hours, more specifically 11 hours to 13 hours, most specifically 12 hours, but is not limited thereto. It may vary depending on conditions such as temperature.
  • the extraction may be extracted one or more times several times in order to obtain a larger amount of the active ingredient, preferably one to five times, more preferably three times the continuous extraction can be used combined extract.
  • the masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract may comprise a crude extract of the masterwort (Peucedanum Ostruthium ) as described above, the crude extract as a low polar organic solvent It may also be included as a soluble fraction of the organic solvent obtained by further extraction.
  • an organic solvent may be hexane, methylene chloride, ethyl acetate, n-butanol, and the like, but is not limited thereto.
  • the extract extracted by the above method or a soluble fraction of the extract may be used as it is, but may be used in the form of an extract by concentrating after filtration, may be used as a form of dried by drying after concentration.
  • the drying may be evaporation drying, spray drying, freeze drying, and specifically, freeze drying may be performed at -50 to -70 ° C. for 3 to 4 days.
  • the cosmetic composition according to an aspect of the present invention is not particularly limited in formulation, and may be appropriately selected as desired.
  • skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisturizing lotion, nutrition lotion, massage cream, nutrition cream, moisturizing cream, hand cream, foundation, essence, nutrition essence, pack, soap, cleansing It may be prepared in any one or more formulations selected from the group consisting of foam, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion and body cleanser, but is not limited thereto.
  • the carrier component is animal fiber, vegetable fiber, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide. And the like can be used.
  • the formulation of the cosmetic composition according to the present invention is a powder or a spray
  • lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as the carrier component, and in particular, in the case of a spray, additionally chlorofluoro Propellants such as hydrocarbon, propane / butane or dimethyl ether.
  • a solvent, solvating or emulsifying agent is used as the carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, Fatty acid esters of propylene glycol, 1,3-butylglycol oil, glycerol aliphatic esters, polyethylene glycols or sorbitan.
  • the carrier component is water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester.
  • a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester.
  • Microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxy, bentonite, agar or tracant and the like can be used.
  • an aliphatic alcohol sulfate an aliphatic alcohol ether sulfate, a sulfosuccinic acid monoester, isethionate, an imidazolinium derivative, methyl taurate, sarcosinate, Fatty acid amide ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, linolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters and the like can be used.
  • the cosmetic composition according to the present invention may further include functional additives and ingredients included in general cosmetic compositions in addition to the extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium).
  • the functional additive may include a component selected from the group consisting of water-soluble vitamins, oil-soluble vitamins, polymer peptides, polymer polysaccharides, sphingolipids and seaweed extract.
  • the present invention relates to an external preparation for skin containing Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract as an active ingredient, and the external preparation for skin is a generic term that may include anything applied outside the skin. Cosmetics of various formulations can be included here.
  • the pharmaceutical composition according to one aspect of the present invention may be various oral or parenteral formulations.
  • diluents or excipients such as fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrating agents, and surfactants are usually used.
  • Solid form preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, soft or hard capsules, and the like, which may contain at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose, or the like. Or lactose, gelatin, or the like is mixed.
  • lubricants such as magnesium stearate, talc and the like are also used.
  • Liquid preparations for oral administration include suspensions, liquid solutions, emulsions, and syrups, and various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives, in addition to commonly used simple diluents such as water and liquid paraffin, may be included.
  • Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations, suppositories.
  • non-aqueous solvent and the suspension solvent propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils such as olive oil, injectable esters such as ethyl oleate, and the like can be used.
  • As the base of the suppository witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerogelatin and the like can be used.
  • compositions herein may be used in the form of their pharmaceutically acceptable salts, and may be used alone or in combination with other pharmaceutically active compounds as well as in a suitable collection.
  • the salt is not particularly limited as long as it is pharmaceutically acceptable.
  • hydrochloric acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid, hydrofluoric acid, hydrobromic acid, formic acid acetic acid, tartaric acid, lactic acid, citric acid, fumaric acid, maleic acid, succinic acid, methanesulfonic acid , Benzene sulfonic acid, toluene sulfonic acid, naphthalene sulfonic acid and the like can be used.
  • composition of the present disclosure may be parenterally or orally administered as desired, and may be administered in one to several times so as to be administered in an amount of 0.1 to 500 mg, preferably 1 to 100 mg per kg of body weight per day. have.
  • the dosage for a particular patient may vary depending on the patient's weight, age, sex, health condition, diet, time of administration, method of administration, rate of excretion, severity of the disease, and the like.
  • the pharmaceutical composition according to one aspect of the present invention may be an oral dosage form such as powders, granules, tablets, soft or hard capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, ointments, creams, etc. It may be used in any form suitable for pharmaceutical preparations, including suppositories, injectables and sterile injectable solutions, and preferably in the form of injections or external preparations for the skin.
  • compositions according to one aspect of the invention can be administered to a mammal, such as rats, mice, livestock, humans, by various routes, such as parenteral, oral, all modes of administration can be expected, for example, It may be administered by oral, transdermally, rectal or intravenous, intramuscular, subcutaneous, intrauterine dural or intracerebroventricular injection.
  • compositions according to one aspect of the present invention may be administered by a variety of routes that can be readily applied by those skilled in the art.
  • the pharmaceutical composition according to one aspect of the present invention may be administered by a route applied to the skin surface as an external preparation for skin.
  • the food composition may be a nutraceutical composition.
  • the formulation of the food composition according to one aspect of the present invention is not particularly limited, but may be, for example, formulated into a liquid such as tablets, granules, powders, drinks, caramels, gels, bars, and the like.
  • the food composition of each formulation may be suitably selected by a person skilled in the art according to the formulation or purpose of use in addition to the active ingredient, and may be synergistic when applied simultaneously with other raw materials.
  • the dosage determination of the active ingredient is within the level of those skilled in the art, the daily dosage of which is for example from 0.1 mg / kg / day to 5000 mg / kg / day, more specifically The amount may be 50 mg / kg / day to 500 mg / kg / day, but is not limited thereto and may vary depending on various factors such as age, health condition, and complications of the subject to be administered.
  • Food composition for example, a variety of food products such as chewing gum, caramel products, candy, ice cream, confectionery, beverage products such as soft drinks, mineral water, alcoholic beverages, vitamins and minerals Functional foods.
  • food products such as chewing gum, caramel products, candy, ice cream, confectionery
  • beverage products such as soft drinks, mineral water, alcoholic beverages, vitamins and minerals Functional foods.
  • the food composition which is an aspect of the present invention, includes various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors such as synthetic and natural flavors, colorants and enhancers (such as cheese and chocolate), pectic acid and salts thereof, Alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonation agents used in carbonated beverages, and the like.
  • the functional food compositions of the present disclosure may include a pulp for the production of natural fruit juice and fruit juice beverages and vegetable beverages. These components can be used independently or in combination. The proportion of such additives is not so critical but is typically included in the range of 0 to about 20 parts by weight per 100 parts by weight of the composition herein.
  • Masterwort Pucedanum Ostruthium
  • the leaves of Masterwort were harvested, hot air dried and ground to powder.
  • the powder was extracted with an ethanol / water solution and then ethanol was removed by vacuum distillation. Glycerin and a preservative were added to this concentrate, and final filtration gave a Masterwort ( Pucedanum Ostruthium ) extract.
  • Masterwort (Pucedanum Ostruthium ) extract (ALPAFLOR® IMPERATORIA AO) prepared in the same manner as above was purchased from DSM (DSM Nutritional Products Ltd, 4002 Basel, Switzerland).
  • HMGS Human Melanocyte Growth Supplement
  • KaMC melanin-forming cells
  • KCTC12015BP Korean Collection for Type Culture
  • the medium was exchanged every two days in M-254 medium (Gibco BRL, NY, USA) with Gibco BRL, NY, USA, and the cells were densified at 95% of the plate area at 37 ° C. in a 5% CO 2 incubator. Cultured until occupied (95% confluent).
  • pigmentation material Human Endothelin 1 (EDN1), Prospecbio Co., USA) 10 nM and Example 1
  • masterwort Pigmentum Ostruthium
  • Example 1 According to the masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract according to the concentration (0, 0.1, 1, 2ppm (w / w)) was incubated for a total of 5 days.
  • the control group was treated with the pigment deposition material and the extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) according to Example 1.
  • the pigmentation substance (EDN1) corresponds to a protein encoded by the human EDN1 gene.
  • Figure 1 shows the result of calculating the amount of melanin according to Equation 1 using the photograph contained in the test tube and the quantified protein amount before measurement.
  • the extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) according to one aspect of the present invention has an effect of reducing the melanin content of the cells, according to the effects disclosed herein, skin whitening or pigmentation It can be confirmed that the same effect as the therapeutic effect.
  • the extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) according to one aspect of the present invention exhibits a significant effect on reducing tyrosinase activity, thereby reducing melanogenesis and treating bone whitening or pigmentation. It was confirmed that the effects of the specification are shown.
  • Example 1 Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) extract 8mg , vitamin E 9mg , vitamin C 9mg, galactooligosaccharide 200mg, lactose 60mg and maltose 140mg were mixed and granulated using a fluidized bed dryer and then sugar ester (sugar ester) 6 mg is added. Tablets are prepared by tableting 500 mg of these compositions in a conventional manner.
  • Injectables were prepared by conventional methods according to the compositions set forth in Table 2 below.
  • composition ratio of the said vitamin and mineral mixture was mixed and consisted with the component suitable for a health functional food in a preferable Example, you may change arbitrarily the compounding ratio.
  • Example 1 Extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) 1000 mg Citric acid 1000 mg oligosaccharide 100 g Taurine 1 g Purified water Remaining amount
  • the above ingredients are mixed according to a conventional method for preparing a health beverage, then stirred and heated at 85 ° C. for about 1 hour, and then the resulting solution is filtered and sterilized.
  • composition shown in Table 5 was prepared in the conventional method for the flexible cosmetic.
  • Example 1 Extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) 0.2 glycerin 3.0 Butylene glycol 2.0 Propylene glycol 2.0 Carboxy Vinyl Polymer 0.1 Fiji-12 nonylphenyl ether 0.2 Polysorbate 80 0.4 ethanol 10.0 Triethanolamine 0.1 Preservative, coloring, flavoring Quantity Purified water Remaining amount
  • Nutritional longevity was prepared according to the composition described in Table 6 below in a conventional manner.
  • Example 1 Extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) 1.0 glycerin 3.0 Butylene glycol 3.0 Propylene glycol 3.0 Carboxy Vinyl Polymer 0.1 Beeswax 4.0 Polysorbate 60 1.5 Caprylic / Capric Triglycerides 5.0 Squalane 5.0 Sorbitassquioleate 1.5 Liquid paraffin 0.5 Cetearyl Alcohol 1.0 Triethanolamine 0.2 Preservative, coloring, flavoring Quantity Purified water Remaining amount
  • Nutritional cream was prepared in a conventional manner according to the composition shown in Table 7.
  • Example 1 Extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) 2.0 glycerin 3.0 Butylene glycol 3.0 Liquid paraffin 7.0 Beta Glucan 7.0 Carbomer 0.1 Caprylic / Capric Triglycerides 3.0 Squalane 5.0 Cetearyl Glucoside 1.5 Sorbitan stearate 0.4 Polysorbate 60 1.2 Triethanolamine 0.1 Preservative, coloring, flavoring Quantity Purified water Remaining amount
  • Example 1 Extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) 2.0 glycerin 8.0 Butylene glycol 4.0 Liquid paraffin 45.0 Beta Glucan 7.0 Carbomer 0.1 Caprylic / Capric Triglycerides 3.0 Beeswax 4.0 Cetearyl Glucoside 1.5 Sesqui oleic acid sorbitan 0.9 Vaseline 3.0 paraffin 1.5 Preservative, coloring, flavoring Quantity Purified water Remaining amount
  • Example 1 Extract of Masterwort (Peucedanum Ostruthium ) 0.2 glycerin 4.0 Polyvinyl alcohol 15.0 Hyaluronic acid extract 5.0 Beta Glucan 7.0 Allantoin 0.1 Nonyl Phenyl Ether 0.4 Polysorbate 60 1.2 Ethanol preservative 6.0 Preservative, coloring, flavoring Quantity Purified water Remaining amount

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Abstract

본 명세서에는 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물이 개시된다. 본 명세서에 개시된 조성물은 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 포함하는 것에 의해 멜라닌 생성 감소, 또는 티로시나아제 활성 억제 효과를 나타낸다. 따라서, 이러한 효과로 인해 본 명세서의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물은 미백 효과를 나타낼 수 있으며, 그러므로 미백용 조성물로서 약학 또는 화장료 분야에서 널리 사용될 수 있다.

Description

산형화 추출물을 포함하는 미백용 조성물
본 명세서는 산형화 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것이다.
멜라닌은 사람의 피부색을 결정하는 색소로 이 멜라닌의 양과 분포에 의해 피부색이 결정된다. 멜라닌을 만드는 세포는 피부 표피 밑에 멜라닌 형성 세포(Melanocyte)라고 불리는 세포에서 만들어져서 피부의 신진대사로 각질 표면으로 이동하여 떨어져 나간다. 피부색에 관계없이 멜라닌 형성 세포의 수는 거의 동일하다. 단지 멜라닌이 생성되는 양과 종류, 분포가 다르기 때문에 피부색이 차이가 나는 것이다.
피부에서 타이로신(Tyrosine)이 타이로시나아제(Tyrosinase)라는 인체 효소에 의해 도파(DOPA)로 전환되고, 계속되는 일련의 산화과정을 통해 최종적으로 흑갈색의 중합체인 멜라닌이 생성된다.
멜라닌은 피부의 기저층에 존재하는 멜라노사이트에서 만들어지는데, 자외선이나 염증 등의 자극에 의해서 생성이 촉진된다고 알려져 있다. 따라서 외부 자극을 줄이고 신호 전달을 차단하거나, 멜라닌 생성 효소인 타이로시나아제의 합성 억제 또는 활성 저해를 통해 멜라닌의 생성을 감소시킬 수 있다.
현재 코지산, 하이드로퀴논, 알부틴, 아젤라익산, 알로에신, 4-부틸레소시놀, 레스베라트롤, 세라마이드, 스핑고신-1-인산, 스핑고실포스포릴콜린 등이 티로시나제의 분해를 촉진하거나 당화를 조절하여 멜라닌 생성을 조절할 수 있다고 알려져 있다. 그러나 이들은 만족스럽지 않은 미백 효과, 낮은 안정성, 피부 자극 때문에 그 활용도가 높지 않다. 따라서 우수한 미백 효과를 가지면서도 부작용이 적은 물질의 개발이 필요한 실정이다.
상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 본 명세서는 우수한 피부 미백 효능을 가지는 조성물을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.
상기와 같은 목적을 위해, 본 명세서는 미나리과(Apiaceae)의 일종인 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 조성물을 제공한다.
본 명세서의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 조성물은, 멜라닌 생성 감소, 타이로시나아제 활성 억제 효과를 나타내어 피부 미백 효과를 가지며 세포에 악영향을 미치지 않는 안정성을 가지므로 피부 외용제, 화장료 조성물 및 약학 조성물에 널리 적용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 측면에 따른 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물에 대한 멜라닌 함량의 감소 실험의 결과를 나타낸 그래프 및 그 측정 전 시험관에 담긴 사진이다.
도2는 본 발명의 일 측면에 따른 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물에 대한 타이로시나아제 활성 감소 실험의 결과를 나타낸 그래프이다.
2014년 6월 30일에 출원된 한국 특허 출원번호 10-2014-0080477호는 모든 목적으로서 전체가 본 명세서에 참조로 포함된다. 또한, 본 출원은 그 전체가 본 명세서에 참조로 포함되는 한국 특허 출원번호 10-2014-0080477호의 이익을 주장한다.
이하, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 본 명세서를 용이하게 실시할 수 있도록 하기 위해, 본 발명의 바람직한 실시예들에 관하여 상세히 설명한다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물에 관한 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 조성물은 피부 미백용 조성물일 수 있으며, 구체적으로 피부 미백용 조성물일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 본 발명에 따른 조성물은 약학, 식품 또는 화장료 조성물일 수 있다. 또한 구체적으로 본 발명의 일 측면에 있어서, 본 발명에 따른 조성물은 피부 외용제 조성물일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 미백이 필요한 개체에 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 투여하는 것을 포함하는 피부 미백 방법에 관한 것일 수 있다. 구체적으로 상기 투여는 본 명세서에 기재된 투여 방법에 의한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물의 피부 미백 용도에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 피부 미백에 사용하기 위한 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium ) 추출물을 유효성분으로 포함하는 멜라닌 감소용 조성물에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 멜라닌 감소가 필요한 개체에 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 투여하는 것을 포함하는 멜라닌 감소 방법에 관한 것일 수 있다. 구체적으로 상기 투여는 본 명세서에 기재된 투여 방법에 의한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium ) 추출물의 멜라닌 감소 용도에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 멜라닌 감소에 사용하기 위한 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 유효성분으로 포함하는 멜라닌 생성 억제용 조성물에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 멜라닌 생성 억제가 필요한 개체에 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 투여하는 것을 포함하는 멜라닌 생성 억제 방법에 관한 것일 수 있다. 구체적으로 상기 투여는 본 명세서에 기재된 투여 방법에 의한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물의 멜라닌 생성 억제 용도에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 멜라닌 생성 억제에 사용하기 위한 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물에 관한 것일 수 있다.
본 발명에서 “멜라닌 감소”는 기존에 세포 등에 존재하는 멜라닌 함량을 감소시키는 것을 의미할 수 있으며, “멜라닌 생성 억제”는 세포 등에서 멜라닌이 새롭게 생성되는 것을 억제하는 것을 의미할 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 유효성분으로 포함하는 타이로시나아제(tyrosinase) 활성 억제용 조성물에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 타이로시나아제 활성 억제가 필요한 개체에 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 투여하는 것을 포함하는 타이로시나아제 활성 억제 방법에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물의 타이로시나아제 활성 억제 용도에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 타이로시나아제 활성 억제에 사용하기 위한 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 유효성분으로 포함하는 색소 침착 억제용 조성물에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 색소 침착 억제가 필요한 개체에 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 투여하는 것을 포함하는 색소 침착 억제 방법에 관한 것일 수 있다. 구체적으로 상기 투여는 본 명세서에 기재된 투여 방법에 의한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물의 색소 침착 억제 용도에 관한 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 색소 침착 억제에 사용하기 위한 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 유효성분으로 포함하는 색소 침착증 치료, 개선, 또는 예방용 조성물에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 유효성분으로 포함하는 색소 침착증 치료, 개선, 또는 예방용 조성물에 관한 것일 수 있다. 구체적으로 본 발명은 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 유효성분으로 포함하는 색소 침착증 치료 또는 예방용 약학조성물, 또는 색소 침착증 개선 또는 예방용 식품 조성물에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 색소 침착증의 치료, 개선, 억제 또는 예방이 필요한 개체에 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 투여하는 것을 포함하는 색소 침착증의 치료, 개선 억제 또는 예방 방법에 관한 것일 수 있다. 구체적으로 상기 투여는 본 명세서에 기재된 투여 방법에 의한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물의 색소 침착증 치료, 개선 억제 또는 예방 용도에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 일 측면에 있어서, 색소 침착증 치료, 개선, 억제 또는 예방에 사용하기 위한 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물에 관한 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 색소 침착증은 다양한 원인에 의해서 발생한 색소 침착증을 모두 포함하는 광범위한 개념에 해당하며, 구체적으로 피부에서 발생하는 색소 침착증을 의미하는 것이나 이에 제한되지는 않는다. 구체적으로 본 발명의 일 측면에 있어서, 색소 침착증은 노인성 색소반, 염증성 색소 침착증, 주근깨, 후천성 진피 멜라닌 색소 침착증, 과다색소침착 등을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에서 “색소 침착” 또는 “과다색소침착”이라는 용어는 실제의 또는 지각된 과도하게 어두운 색의 피부 손상이다. 피부 손상은 즉, 나이, 과도한 일광 노출 또는 질환 또는 어두운 피부 영역이 되게 하는 조건 때문에 실제일 수 있다. 어두운 피부 영역은 반점(spot), 큰 반점(blotch), 또는 어두운 색의 비교적 큰 영역의 형태일 수 있다. 피부 손상은 또한 지각될 수 있는데, 즉, 그/그녀의 피부의 음영 부분이 너무 어두운 개인 및 피부 음영을 밝게 하려는 화장욕구를 갖는 개인에 의한 지각이다.
따라서, 본 명세서의 조성물은 다양한 피부 색소침착, 예를 들어, 흑색종(melanoma) 즉, 얼굴이나 몸의 다른 부분의 색소침착의 어두운 패치를 탈색시키는데 또는 자발적으로 피부 색소침착을 미백하는데 유용하다. 전형적으로, 어두운 피부 손상은 멜라닌 레벨의 상승에 기인한다. 본 발명에 따른 조성물은 과다색소 침착을 치료하는데 즉, 어두운 피부를 밝게 하거나 과다색소침착을 예방하기 위해 즉, 과도한 양의 멜라닌 생성을 감소시키거나 제거하고 그에 따라 피부가 어둡게 되는 것을 방해하기 위해 사용될 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물은 이를 포함하는 조성물의 총 부피를 기준으로 0.1ppm(w/w) 내지 10ppm(w/w)의 농도인 것일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 구체적으로 본 발명의 일 측면에 있어서, 조성물에 포함된 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물의 농도는 조성물의 총 부피를 기준으로 0.01ppm이상, 0.1ppm이상, 0.5ppm이상, 0.6ppm이상, 0.7ppm이상, 0.8ppm이상, 0.9ppm이상, 1.0ppm이상, 1.1ppm이상, 1.2ppm이상, 1.3ppm이상, 1.4ppm이상, 1.5ppm이상, 1.6ppm이상, 1.7ppm이상, 1.8ppm이상, 1.9ppm이상, 2.0ppm이상, 2.1ppm이상, 2.2ppm이상, 2.3ppm이상, 2.4ppm이상, 2.5ppm이상, 2.6ppm이상, 2.7ppm이상, 2.8ppm이상, 2.9ppm이상, 3ppm이상, 3.2ppm이상, 3.4ppm이상, 3.6ppm이상, 3.8ppm이상, 4.0ppm이상, 4.5ppm이상, 5.0ppm이상, 5.5ppm이상, 6.0ppm이상, 7.0ppm이상, 8.0ppm이상, 9.0ppm이상, 10.0ppm이상, 50ppm이상, 100ppm이상, 500ppm 이상, 또는 1000ppm이상 일 수 있으나 이에 제한되지는 않으며 2000ppm 이하, 1000ppm 이하, 500ppm 이하, 100ppm 이하, 50ppm이하, 15.0ppm 이하, 10.0ppm 이하, 8.0ppm 이하, 6.0ppm 이하, 5.5ppm 이하, 5.0ppm 이하, 4.5ppm 이하, 4.0ppm 이하, 3.8ppm 이하, 3.6ppm 이하, 3.4ppm 이하, 3.2ppm 이하, 3.0ppm 이하, 2.8ppm 이하, 2.6ppm 이하, 2.4ppm 이하, 2.2ppm 이하, 2.0ppm 이하, 1.8ppm 이하, 1.6ppm 이하, 1.4ppm 이하, 1.2ppm 이하, 1.0ppm 이하, 0.8pm 이하, 0.6ppm 이하, 0.4ppm 이하, 또는 0.2ppm 이하일 수 있다. 상기 추출물의 농도는 ppm(w/w)의 단위를 가지는 것이다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)는 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 초본의 잎, 꽃, 줄기, 및 뿌리로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 것일 수 있으며, 구체적으로 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 초본의 잎일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물은
(1) 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)를 물, 유기용매, 또는 이들의 조합으로 추출하는 단계를 포함하는 제조 방법에 의해 제조될 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 상기 방법은 (1) 단계 이전에 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)를 가공하는 단계를 더 포함할 수 있으며, 구체적으로 상기 가공은 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)를 건조한 뒤 분쇄하여 분말화 하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며 추출을 용이하게 수행하기 위한 가공을 포함한다. 구체적으로 상기 건조는 일광 건조, 열풍 건조, 증발 건조, 분무 건조, 또는 동결 건조일 수 있으며, 더 구체적으로는 열풍 건조일 수 있다. 반면, 본 발명의 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)는 별다른 가공 없이 생(生) 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 자체를 그대로 이용하여 추출할 수도 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 상기 방법은 추출 후 증류하여 용매를 제거하는 단계를 더 포함할 수 있으며, 구체적으로 상기 증류는 진공 증류일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 상기 방법은 증류 후 농축물에 글리세린 및 보존제 중 하나 이상을 첨가하는 단계를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 용매 제거 단계 또는 글리세린 및 보존제 중 하나 이상을 첨가하는 단계 이후에 여과하는 단계를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물은 물, 유기용매 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 추출물인 것일 수 있다. 구체적으로 본 발명의 일 측면에 있어서, 유기용매는 C1~C6의 저급 알코올, 부틸렌글리콜, 및 프로필렌글리콜로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 것일 수 있으며, 더 구체적으로 저급 알코올은 에탄올일 수 있다.
본 명세서에서 사용된 멜라닌형성세포는 PCT/KR2012/007815 또는 대한민국 특허출원 10-2011-0099728호에 개시된 멜라닌 형성세포(Keratinocyte-adapted melanocyte, KaMC)에 해당하는 것일 수 있다. 본 명세서에서 사용된 멜라닌 형성세포는 상기 문헌에 개시되어 있는 방법 및 절차에 따라서 수득된 것일 수 있으며, 또한 상기 문헌에 개시되어 있는 방법으로 배양될 수 있다. 이러한 멜라닌 형성세포는 부다페스트조약에 따른 국제기탁기관인 생물자원센터(Korean Collection for Type Culture, KCTC)에 2011. 9. 14.에 기탁하고 기탁번호로서 KCTC 12015BP를 부여 받은 것에 해당한다.
본 명세서에서 "피부"는 생물의 외부를 덮고 있는 기관을 의미하는 것으로서 표피, 진피 및 피하지방층으로 구성되어 있으며 얼굴 또는 몸 전체의 외부를 덮는 조직뿐만 아니라, 두피와 모발을 포함하는 최광의의 개념이다.
본 명세서에서 “산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)”는 쌍떡잎식물 산형화목 미나리과의 현화식물을 의미한다. 중부 및 남부 유럽의 산맥들에서 많이 발견되며, 다양한 리큐어와 비터스(bitters)에서 각종 향료로 사용되기도 한다.
본 명세서에서 “추출물"은 추출 방법, 추출 용매, 추출된 성분 또는 추출물의 형태를 불문하고, 천연물의 성분을 뽑아냄으로써 얻어진 물질을 모두 포함하는 것이며 또한 천연물의 성분을 뽑아내어 얻어진 물질을 추출 후 다른 방법으로 가공 또는 처리하여 얻어질 수 있는 물질을 모두 포함하는 광범위한 개념이며, 구체적으로 상기 가공 또는 처리는 추출물을 추가적으로 발효, 또는 효소처리 하는 것일 수 있다. 따라서 본 명세서에서 추출물은 발효물, 농축물, 건조물을 포함하는 광범위한 개념이며, 구체적으로 본 명세서에서 추출물은 발효물일 수 있다.
본 명세서에서 “산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)추출물”은 추출 방법, 추출 용매, 추출된 성분 또는 추출물의 형태를 불문하고, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)의 성분을 뽑아냄으로써 얻어진 물질을 모두 포함하는 것이며 그 성분을 뽑아내는 과정에서 열, 산(acid), 염기(base), 효소 등으로 처리하는 공정을 포함하는 추출 방법을 통해 얻어진 물질을 포함하며 또한 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)의 성분을 뽑아내어 얻어진 물질을 추출 후 다른 방법으로 가공 또는 처리하여 얻어질 수 있는 물질을 모두 포함하는 광범위한 개념이다. 구체적으로 상기 가공 또는 처리는 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 추가적으로 발효 또는 효소처리 등을 하는 것일 수 있다. 따라서, 본 명세서의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)추출물은 발효물 일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, “산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)”는 추출물의 형태이거나, 생(生) 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium), 생약 자체의 분쇄물, 생약의 건조물, 생약의 건조 분쇄물, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)의 발효물 일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 또한 본 명세서에서 사용되는 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)는 그 입수 방법에 제한이 없으며, 재배하여 사용하거나 시판되는 것을 구입하여 사용할 수도 있으며, 초본의 지상부 또는 뿌리부의 일부 또는 전부를 사용할 수 있다. 더 구체적으로 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 초본의 잎, 줄기, 뿌리, 및 꽃으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상이 사용될 수 있다. 본 명세서의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)의 경우 반드시 건조를 통해서 제조되는 것은 아니며 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)의 유효 성분을 추출하기에 적절한 형태의 원료라면 제한되지 않는다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 물은 증류수 또는 정제수를 포함하고, 유기 용매는 C1~C5의 저급 알코올을 예로 들 수 있는 알코올과 아세톤, 에테르, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 에틸메틸케톤 및 클로로포름으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 포함하나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물은 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)-C1~C6 알코올 추출물을 포함할 수 있고, 구체적으로 상기 알코올은 메탄올 또는 에탄올일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물은 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)를 물, 유기용매, 또는 이들의 혼합물로 추출하는 단계를 포함하는 제조 방법에 의해 수득될 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물은 물, 유기용매, 및 이들이 조합으로 구성된 그룹에서 선택된 용매의 조추출물일 수 있다. 상기 유기용매는 C1-C6 알코올일 수 있으며, 구체적으로 C1-C6 알콜은 메탄올 또는 에탄올 일 수 있다. 본 발명의 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)를 용매로 추출 시, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)의 약 5 내지 15배 정도에 해당하는 용매를 가하여 추출하는 것이 바람직하며, 구체적으로 약 10 배의 용매를 가하여 추출하는 것이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 추출은 열수 추출, 에탄올 추출, 가열 추출, 냉침 추출, 환류 추출, 환류냉각 추출, 또는 초음파 추출 등이 이용될 수 있으며, 당업자에게 자명한 추출법이라면 제한이 없으며, 구체적으로 추출은 열수추출 또는 에탄올 추출 일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 추출은 실온에서 수행할 수도 있으나, 보다 효율적인 추출을 위해서는 가온 조건 하에서 수행할 수 있으며, 바람직하게는 약 40 내지 100℃, 더욱 바람직하게는 약 80℃의 온도에서 추출할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 추출시간은 약 2 내지 약 14시간, 구체적으로는 8시간 내지 14시간, 더욱 구체적으로는 11시간 내지 13시간, 가장 구체적으로는 12시간 동안 수행할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니며, 추출 용매 및 추출 온도 등의 조건에 따라 달라질 수 있다. 상기 추출은 활성성분을 보다 다량 수득하기 위해 1 회 이상 여러 번 추출할 수 있으며, 바람직하게는 1 내지 5회, 더욱 바람직하게는 3회 연속추출하여 합한 추출액을 이용할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물은 상기와 같이 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)의 조추출물을 포함할 수 있고, 상기 조추출물을 극성이 낮은 유기 용매로 더욱 추출하여 얻어진 유기 용매의 가용성 분획물로서 포함할 수도 있다. 본 발명의 일 측면에 있어서, 유기 용매로는 헥산, 메틸렌클로라이드, 에틸 아세테이트, n-부탄올 등이 이용될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기의 방법으로 추출한 추출물 또는 그 추출물의 가용성 분획물은 그대로 사용할 수도 있으나, 여과 후 농축하여 엑기스 형태로 사용할 수 있으며, 농축 후 건조하여 건조물의 형태로서 사용할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 건조는 증발 건조, 분무 건조, 동결 건조일 수 있으며, 구체적으로 동결 건조시에는 -50 내지 -70℃ 에서 3~4일 동안 동결 건조를 수행할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 화장료 조성물은 제형이 특별히 한정되지 않으며, 목적하는 바에 따라 적절히 선택할 수 있다. 예를 들어, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물의 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에는 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물 이외에 기능성 첨가물 및 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분이 추가로 포함될 수 있다. 상기 기능성 첨가물로는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 성분을 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에는 또한, 상기 기능성 첨가물과 더불어 필요에 따라 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분을 배합해도 된다. 이외에 포함되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.
더욱이, 본 발명은 일 측면에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 외용제에 관한 것으로, 상기 피부 외용제는 피부 외부에서 도포되는 어떠한 것이라도 포함될 수 있는 총칭이며, 다양한 제형의 화장료가 여기에 포함될 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 약학 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 연질 또는 경질 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 명세서의 조성물의 약학적 투여 형태는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다. 상기 염으로는 약학적으로 허용되는 것이면 특별히 한정되지 않으며, 예를 들어 염산, 황산, 질산, 인산, 불화수소산, 브롬화수소산, 포름산 아세트산, 타르타르산, 젖산, 시트르산, 푸마르산, 말레산, 숙신산, 메탄술폰산, 벤젠술폰산, 톨루엔술폰산, 나프탈렌술폰산 등을 사용할 수 있다.
본 명세서의 조성물은 목적하는 바에 따라 비경구 투여하거나 경구 투여할 수 있으며, 하루에 체중 1 ㎏당 0.1~500 ㎎, 바람직하게는 1~100 ㎎의 양으로 투여되도록 1 내지 수회에 나누어 투여할 수 있다. 특정 환자에 대한 투여용량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강 상태, 식이, 투여 시간, 투여 방법, 배설률, 질환의 중증도 등에 따라 변화될 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 연질 또는 경질 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 연고, 크림 등의 피부 외용제, 좌제, 주사제 및 멸균 주사용액 등을 비롯하여 약제학적 제제에 적합한 어떠한 형태로든 제형화하여 사용될 수 있으며, 바람직하게는 주사제 또는 피부 외용제의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 조성물은, 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 비경구, 경구 등의 다양한 경로로 투여될 수 있으며, 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 경피(trandermally), 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 조성물은, 통상의 기술자가 용이하게 적용할 수 있는 다양한 경로로 투여될 수 있다. 특히 본 발명의 일측면에 따른약학 조성물은 피부 외용제로서 피부 표면에 도포되는 경로로 투여될 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 식품 조성물은 건강기능식품 조성물일 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 식품 조성물의 제형은 특별히 한정되지 않으나, 예를 들어, 정제, 과립제, 분말제, 드링크제와 같은 액제, 캐러멜, 겔, 바 등으로 제형화될 수 있다. 각 제형의 식품 조성물은 유효 성분 이외에 해당 분야에서 통상적으로 사용되는 성분들을 제형 또는 사용 목적에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승 효과가 일어날 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 식품 조성물에 있어서, 상기 유효 성분의 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 0.1mg/kg/일 내지 5000mg/kg/일, 보다 구체적으로는 50 mg/kg/일 내지 500 mg/kg/일이 될 수 있으나, 이에 제한되지 않으며, 투여하고자 하는 대상의 연령, 건강 상태, 합병증 등 다양한 요인에 따라 달라질 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 식품 조성물은, 예를 들어, 츄잉껌, 캐러멜 제품, 캔디류, 빙과류, 과자류 등의 각종 식품류, 청량 음료, 미네랄 워터, 알코올 음료 등의 음료 제품, 비타민이나 미네랄 등을 포함한 건강기능성 식품류일 수 있다.
상기 외에 본 발명의 일 측면인 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 증진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있다. 그 밖에 본 명세서의 기능성 식품 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 포함할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 명세서의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 포함되는 것이 일반적이다.
이하, 실시예 및 시험예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실시예 및 시험예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 하기 예에 의해 제한되는 것은 아니다.
[실시예 1] 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물의 제조
산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)의 잎 부분을 수확한 뒤 열풍 건조하고 이를 분쇄하여 분말화 하였다. 이러한 분말을 에탄올/물 용액으로 추출한 뒤 진공 증류(vacuum distillation)을 통해 에탄올을 제거하였다. 이러한 농축물에 글리세린과 보존제를 첨가하고, 최종 여과를 하여 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)추출물을 수득하였다. 하기 실험에서는 상기와 같은 방법으로 제조된 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물(ALPAFLOR® IMPERATORIA AO)을 DSM사(DSM Nutritional Products Ltd, 4002 Basel, Switzerland)로부터 구입하여 사용하였다.
[실험예 1] 멜라닌 측정 실험
(1) 세포 배양
미생물자원센터(Korean Collection for Type Culture, KCTC)에 기탁되어 있는 멜라닌 형성 세포(KaMC)(KCTC12015BP)를 6 웰 플레이트(well plate)에 인간 멜라닌형성세포 성장 보충물(Human Melanocyte Growth Supplement, HMGS) (Gibco BRL, NY, USA)를 첨가한 M-254 배지(Gibco BRL, NY, USA)에서 2일 간격으로 배지를 교환하며 37 ℃, 5% CO2 배양기에서 세포가 밀도가 플레이트 면적의 95%의 차지할 때까지(95% confluent) 배양하였다.
(2) 추출물의 처리
상기 배양되는 멜라닌형성세포가 6 웰 플레이트에서 80% 정도의 밀도가 되었을 때(약 80% confluent), 색소침착 물질(Human Endothelin 1(EDN1), Prospecbio Co., USA) 10 nM과 실시예 1에 따른 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 농도별(0, 0.1, 1, 2ppm(w/w))로 총 5일간 배양하였다. 색소침착 물질과 실시예 1에 따른 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 처리하지 않은 것을 대조군으로 하였다. 상기 색소침착 물질(EDN1)은 인간 EDN1 유전자에 의해 코딩되는 단백질에 해당한다.
(3) 세포 수거 및 단백질량 측정
6 웰 플레이트에서 배양된 멜라닌형성세포(KaMC)에 아큐타아제 용액(Accutase solution)(Millipore, CA, USA) 400ul를 넣고 1분간 교반(agitation)한 후, M-254 배지 600ul를 추가하여 총 1ml의 세포함유 배지를 수거하였다. 이후 12,000rpm에서 15분간 원심분리후 상등액을 버리고 펠렛(pellet)에 MCL 라이시스 버퍼(lysis buffer)(Sigma-Aldrich, St. Louis, USA) 20ul를 넣고 잘 섞은 후 다시 12,000rpm을 15분간 원심분리 후 상등액과 세포침전물을 따로 분리하였다.
분리된 상등액 1㎕를 96 웰 플레이트에 넣고 증류수를 넣어 최종 용량 25㎕로 만들었다. 이후 BCA Protein Assay Kit (Thermo scientific, IL, USA)를 이용하여 562nm에서 단백질 양을 정량하였다. 이러한 단백질 정량 결과는 하기 표 1에 나타내었다.
표 1
샘플 평균 (ug/ul) 표준편차
색소침착물질(Endothelin 1)(nM) 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물(ppm)
0 0 4.2949878 0.1900235
10 0 4.1254528 0.182531
0.1 4.6859126 0.1932569
1 4.1022591 0.134504
2 4.1465601 0.179561
(4) 멜라닌 검정(Melanin assay)
실험예 1의 (3) 에서 분리된 세포침전물에 1N NaOH (Sigma-Aldrich, St. Louis, USA) 70ul를 넣고 55℃에서 15분간 용해시킨후, 96웰 플레이트에 30ul씩 2개로 분주하여 475nm에서 흡광도를 측정하였다. 측정 전 시험관에 담긴 사진과 상기 정량한 단백질 양을 이용하여 하기 수학식 1에 따라 멜라닌의 양을 산출한 결과를 도 1에 나타내었다.
[수학식 1]
Figure PCTKR2015006540-appb-I000001
도 1에 도시된 바에 따르면, 본 발명의 일측면에 따른 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 처리하는 경우 색소침착 물질(EDN1)에 의해서 증가되었던 멜라닌 함량이 감소하는 것을 확인할 수 있었으며, 특히 2ppm의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 처리한 경우에는 대조군과 비슷한 수준인 102%까지 감소하였다. 또한 이러한 결과는 흡광도 측정 전 시험관 사전에서도 육안으로 확인할 수 있었다. 즉, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물의 처리 농도가 증가할수록 시험관의 색이 맑아지는 것을 육안으로 확인할 수 있었으며, 2ppm에서는 대조군과 비슷한 투명도를 나타내었다. 따라서 이러한 실험 결과에 따르면 본 발명의 일측면에 따른 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물은 세포의 멜라닌 함량을 감소시키는 효과를 나타내며, 이에 따라 본 명세서에 개시되어 있는 효과들로서 피부 미백 또는 색소 침착 등의 치료 효과와 같은 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있다.
[실험예 2] 타이로시나아제(Tyrosinase) 활성 억제 실험
실험예 1의 (3)에서 정량된 단백질량을 근거로 하여 세포 상등액에 포함된 단백질의 량 20ug을 96 웰 플레이트에 넣고 PBS(Phosphate Buffered Saline, without CaCl ＆ MgCl, Welgene, Korea)를 추가하여 최종 용량 100ul를 만들었다. 이후 2mg/ml의 농도로 PBS에 녹인 L-DOPA (L-3,4-dihydroxyphenylalanine) (Sigma-Aldrich, St. Louis, USA) 용액 100ul를 추가로 첨가하였다. L-DOPA 로부터 타이로시나아제의 작용으로 생성되는 도파크롬(dopachrome)의 생성량을 흡광도를 이용하여 비교하였다. L-DOPA첨가 후 37℃에서 인큐베이션 하면서, 10분 간격으로 475nm에서 흡광도를 측정하였다. 상기 실험예 1의 (3)에서 정량한 단백질 양을 이용하여 하기 수학식 2에 따라 타이로시나아제의 양을 산출한 결과를 도 2에 나타내었다.
[수학식 2]
Figure PCTKR2015006540-appb-I000002
도 2에 도시된 바에 따르면, 본 발명의 일측면에 따른 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 처리하는 경우 색소침착 물질에 의해서 증가되었던 타이로시나아제 활성이 감소하는 것을 확인할 수 있다. 특히 1ppm의 농도로 처리한 경우에는 대조군과 비슷한 약 106%까지 타이로시나아제 활성이 감소하였고 2ppm의 농도에서는 대조군 보다 낮은 약 87%의 활성을 나타내었다.
따라서 이러한 결과에 따르면 본 발명의 일측면에 따른 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물은 현저한 타이로시나아제 활성 감소 효과를 나타내며, 이에 따라 멜라닌 생성을 감소시키고 피부 미백 또는 색소 침착 치료와 같은 본 명세서의 효과들을 나타냄을 확인하였다.
본 발명의 일 측면에 따른 조성물의 제형예를 아래에서 설명하나, 다른 여러 가지 제형으로도 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
[제형예 1] 연질 캡슐
실시예 1의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물 8mg, 비타민 E 9mg, 비타민 C 9mg, 팜유 2mg, 식물성 경화유 8mg, 황납 4mg 및 레시틴 9mg을 혼합하고, 통상의 방법에 따라 혼합하여 연질 캡슐 충진액을 제조한다. 1 캡슐당 400㎎씩 충진하여 연질 캡슐을 제조한다. 그리고, 상기와 별도로 젤라틴 66 중량부, 글리세린 24 중량부 및 솔비톨액 10 중량부의 비율로 연질 캡슐 시트를 제조하고 상기 충진액을 충진시켜 본 발명의 일측면에 따른 조성물 400mg이 함유된 연질 캡슐을 제조한다.
[제형예 2] 정제
실시예 1의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물 8mg, 비타민 E 9mg, 비타민 C 9mg, 갈락토올리고당 200㎎, 유당 60㎎ 및 맥아당 140㎎을 혼합하고 유동층 건조기를 이용하여 과립한 후 당 에스테르(sugar ester) 6㎎을 첨가한다. 이들 조성물 500mg을 통상의 방법으로 타정하여 정제를 제조한다.
[제형예 3] 드링크제
실시예 1의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물 8mg, 비타민 E 9mg, 비타민 C 9mg, 포도당 10g, 구연산 0.6g, 및 액상 올리고당 25g을 혼합한 후 정제수 300㎖를 가하여 각 병에 200㎖씩 되도록 충진한다. 병에 충진한 후 130℃에서 4∼5초간 살균하여 드링크제를 제조한다.
[제형예 4] 과립제
실시예 1의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물 8mg, 비타민 E 9mg, 비타민 C 9mg, 무수결정 포도당 250㎎ 및 전분 550㎎을 혼합하고, 유동층 과립기를 사용하여 과립으로 성형한 후 포에 충진하여 과립제를 제조한다.
[제형예 5] 주사제
하기 표 2에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 주사제를 제조하였다.
표 2
배합 성분 함량
실시예 1의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물 10-50 mg
주사용 멸균 증류수 적량
pH 조절제 적량
[제형예 6] 건강기능식품
하기 표 3에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 건강기능식품을 제조하였다.
표 3
배합 성분 함량
실시예 1의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물 20mg
비타민 A 아세테이트 70μg
비타민 E 1.0mg
비타민 B1 0.13mg
비타민 B2 0.15mg
비타민 B6 0.5mg
비타민 B12 0.2μg
비타민 C 10mg
비오틴 10μg
니코틴산아미드 1.7mg
엽산 50μg
판토텐산 칼슘 0.5mg
황산 제1철 1.75mg
산화아연 0.82mg
탄산마그네슘 25.3mg
제1인산칼륨 15mg
제2인산칼슘 55mg
구연산칼륨 90mg
탄산칼슘 100mg
염화마그네슘 24.8mg
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강기능식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
[제형예 7] 건강 음료
하기 표 4에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 건강음료를 제조하였다.
표 4
배합 성분 함량
실시예 1의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물 1000mg
구연산 1000mg
올리고당 100 g
타우린 1g
정제수 잔량
통상의 건강 음료 제조 방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균한다.
[제형예 8] 유연화장수(스킨로션)
하기 표 5에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 유연화장수를 제조하였다.
표 5
배합 성분 함량 (중량 %)
실시예 1의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물 0.2
글리세린 3.0
부틸렌글리콜 2.0
프로필렌글리콜 2.0
카르복시비닐폴리머 0.1
피이지-12 노닐페닐에테르 0.2
폴리솔베이트 80 0.4
에탄올 10.0
트리에탄올아민 0.1
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 잔량
[제형예 9] 영양화장수(밀크로션)
하기 표 6에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양화장수를 제조하였다.
표 6
배합 성분 함량 (중량 %)
실시예 1의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물 1.0
글리세린 3.0
부틸렌글리콜 3.0
프로필렌글리콜 3.0
카르복시비닐폴리머 0.1
밀납 4.0
폴리솔베이트 60 1.5
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 5.0
스쿠알란 5.0
솔비타세스퀴올레이트 1.5
유동파라핀 0.5
세테아릴 알코올 1.0
트리에탄올아민 0.2
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 잔량
[제형예 10] 영양크림
하기 표 7에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조하였다.
표 7
배합 성분 함량(중량%)
실시예 1의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물 2.0
글리세린 3.0
부틸렌글리콜 3.0
유동파라핀 7.0
베타글루칸 7.0
카보머 0.1
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 3.0
스쿠알란 5.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
소르비탄 스테아레이트 0.4
폴리솔베이트 60 1.2
트리에탄올아민 0.1
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 잔량
[제형예 11] 마사지 크림
하기 표 8에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 마사지 크림을 제조하였다.
표 8
배합 성분 함량(중량%)
실시예 1의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물 2.0
글리세린 8.0
부틸렌글리콜 4.0
유동파라핀 45.0
베타글루칸 7.0
카보머 0.1
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 3.0
밀납 4.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
세스퀴 올레인산 소르비탄 0.9
바세린 3.0
파라핀 1.5
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 잔량
[제형예 12] 팩
하기 표 9에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 팩을 제조하였다.
표 9
배합 성분 함량(중량%)
실시예 1의 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물 0.2
글리세린 4.0
폴리비닐알콜 15.0
히알루론산 추출물 5.0
베타글루칸 7.0
알란토인 0.1
노닐 페닐에테르 0.4
폴리솔베이트 60 1.2
에탄올 방부제 6.0
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 잔량
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
[수탁번호]
기탁기관명 : 한국생명공학연구원
수탁번호 : KCTC12015BP
수탁일자 : 20110914
[미생물 기탁증]
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Claims (9)

  1. 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 유효성분으로서 포함하는 미백용 조성물.
  2. 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 유효성분으로서 포함하는 멜라닌 생성 억제용, 또는 멜라닌 감소용 조성물.
  3. 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물을 유효성분으로서 포함하는 색소 침착 억제용 조성물.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium)는 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 초본의 잎, 꽃, 줄기, 및 뿌리로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 조성물.
  5. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물은 조성물의 총 부피를 기준으로 1ppm(w/w) 이상의 농도인 것인 조성물.
  6. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 산형화(Masterwort)(Peucedanum Ostruthium) 추출물은 물, 유기용매 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 추출물인 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 유기용매는 C1~C6의 저급 알코올, 부틸렌글리콜, 및 프로필렌글리콜로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 조성물.
  8. 제7항에 있어서, 저급 알코올은 에탄올인 조성물.
  9. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물은 약학, 식품 또는 화장료 조성물인 조성물.
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