WO2013141758A1 - Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты) - Google Patents

Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты) Download PDF

Info

Publication number
WO2013141758A1
WO2013141758A1 PCT/RU2013/000187 RU2013000187W WO2013141758A1 WO 2013141758 A1 WO2013141758 A1 WO 2013141758A1 RU 2013000187 W RU2013000187 W RU 2013000187W WO 2013141758 A1 WO2013141758 A1 WO 2013141758A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
pro
pharmaceutical composition
ethyl
methyl
glu
Prior art date
Application number
PCT/RU2013/000187
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Владимир Павлович ЛОБКО
Анастасия Геннадьевна ЧЕЛЯЕВА
Original Assignee
Lobko Vladimir Pavlovich
Chelyaeva Anastasia Gennadevna
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lobko Vladimir Pavlovich, Chelyaeva Anastasia Gennadevna filed Critical Lobko Vladimir Pavlovich
Publication of WO2013141758A1 publication Critical patent/WO2013141758A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4425—Pyridinium derivatives, e.g. pralidoxime, pyridostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/06—Aluminium, calcium or magnesium; Compounds thereof, e.g. clay
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/26—Iron; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system

Definitions

  • composition with neuroprotective, antiamnestic, antioxidant, antihypoxic, neurometabolic, antiischemic activity (options)
  • the invention relates to the pharmaceutical industry and medicine and can be used in the manufacture and use of pharmaceutical compositions with a Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro polypeptide sequence having neuroprotective, antiamnestic, antioxidant, antihypoxic, neurometabolic, anti-ischemic activity.
  • Semax is a drug that effectively affects the processes associated with the formation of memory and learning, improves mnemonic functions, improves the adaptation of the human body to hypoxia, cerebral ischemia, anesthesia and other damaging effects. In other words, Semax improves the energy processes of the brain, increasing its resistance to stress
  • Semax is a good nootropic
  • Mexidol has a mechanism of action, the principal difference from the mechanism of action of traditional neuro-psychotropic drugs is its lack of specific binding to known receptors (Scientific Research Institute of Pharmacology RAMS, T. A. Voronin. Mexidol. Main effects, mechanism of action, application ( http://www.voed.ru/mexidol.htm).
  • Mexidol is an inhibitor of free radical processes, lipid peroxidation, it activates superoxide dismutase, affects the physico-chemical properties of the membrane, increases the content of polar fractions lipids (phosphotidylserine and phosphotidylinositol, etc.) in the membrane, reduces the ratio of cholesterol / phospholipids, reduces the viscosity of the lipid layer and increases the fluidity of the membrane, activates the energy-synthesizing functions of mitochondria and improves energy metabolism in the cell and, thus, protects the cell apparatus and the structure of their membranes.
  • lipids phosphotidylserine and phosphotidylinositol, etc.
  • mexidol has a modulating effect on the activity of membrane-bound enzymes, ion channels and receptor complexes, in particular, benzodiazepine, GABA, acetylcholine, increasing their ability to bind to ligands, increasing the activity of neurotransmitters and activation of synaptic processes.
  • mexidol has a pronounced lipid-lowering effect, reduces the level of total cholesterol and low density lipoproteins and increases high density lipoproteins.
  • Mexidol is determined primarily by its antioxidant properties, the ability to stabilize cell biomembranes, activate the energy synthesizing functions of mitochondria, modulate the functioning of receptor complexes and the passage of ion currents, enhance the binding of endogenous substances, improve synaptic transmission and the relationship of brain structures. Thanks to this mechanism of action, Mexidol exerts influence on key basic links in the pathogenesis of various diseases, has a wide range of effects, extremely small side effects and low toxicity, and has the ability to potentiate the action of other central active substances, especially those that realize their action as direct receptor agonists.
  • a pharmaceutical composition for the treatment of ischemic stroke comprising the Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro polypeptide sequence (RF Patent 2251429, published July 27, 2004).
  • the disadvantage of the analogue is the relatively low speed of the onset of the therapeutic effect.
  • the disadvantage of the analogue is the impossibility of its use for medicinal purposes.
  • Semax as a neuroprotector is known (Patent for the invention of the Russian Federation 2394816, published on July 20, 2010).
  • Table 7 presents the change in neurological deficit in rats after bilateral ligation of the common carotid arteries under the influence of the drug Semax, Mexidol and Amtizol.
  • Mexidol is more preferred, Semax because of the insufficient effectiveness of the latter and the impossibility of increasing its concentration in solution.
  • Semax peptide of the formula Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro is known to use the Semax peptide of the formula Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro as an antithrombotic, anticoagulant,
  • the disadvantage of the analogue is its relatively low effectiveness of the therapeutic effect. It is known to use the Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro polypeptide sequence as a memory stimulator (USSR Author's Certificate 939440, published on 06/30/1982), which is the basis of a nootropic agent and a pharmaceutical composition of nootropic action (RF Patent No. 2045958, ⁇ 16 A 61 K 38/08, 1994).
  • the disadvantage of the analogue is the relatively low speed of the onset of the therapeutic effect.
  • composition having neurotropic, antiamnestic, antihypoxic and antiischemic activity.
  • the composition as active components, contains Semax and Mexidol or their pharmaceutically acceptable salts in therapeutically effective
  • the patent provides for the use of isotopes 13 C, 15 N, etc. for making isotopic labels in a drug.
  • the isotopes determine the dynamics of the distribution of the drug in the tissues of the body.
  • Another analogue of the pharmaceutical composition variants is an agent containing mexidol and excipients: potato starch, polyvinylpyrrolidone, magnesium stearic acid, microcrystalline cellulose, milk sugar (RF patent 2145855, published May 26, 1999).
  • the drug is intended for the treatment of impaired brain functions, in particular, acute and chronic cerebrovascular disorders.
  • a stable pharmaceutical composition for injection containing Mexidol, succinic acid, trilon B and water for injection (RF Patent 2205640, published 09.04.2002).
  • the drug is prescribed intravenously and intramuscularly.
  • biologically active additive has antihypoxic and
  • the disadvantage of the analogue is the impossibility of its use as a composition for injection.
  • Another disadvantage is the low content of mexidol in a liter. About three orders of magnitude less than what is required for the injection solution.
  • the prototype of the two variants of the invention is the pharmaceutical composition (Application for invention of the Russian Federation 2006146529/15, published on July 20, 2008),
  • the objective of the prototype was to expand the arsenal of drugs with pronounced neuroprotective activity, in combination with
  • neuroprotective, antiamnestic, antioxidant, antihypoxic, neurometabolic, antiischemic activity containing 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, methionine-glutamine-histidine- polypeptide phenylalanine-prolyl-glycine-proline (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro) "coincide with the features of the claimed variants of the invention.
  • a pharmaceutically acceptable solvent is water (distilled water or water for injection).
  • a pharmaceutically acceptable excipient in the pharmaceutical composition is ammonium acetate.
  • ST - H is a covalent bond.
  • the above formulation contains a 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine cation (2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridinium) and a pharmaceutically acceptable anion, namely C 4 H 6 O 4 .
  • An ionic bond between a cation and anion is a bond between negatively and positively charged particles in a preparation.
  • the disadvantages of the prototype are the relatively low speed of the onset of the therapeutic effect, not sufficiently large therapeutic effect of the pharmaceutical product, low stability of the pharmaceutical composition over the expiration date.
  • shelf life the period during which the pharmaceutical composition retains its properties in a measure that ensures its use according to
  • Neuroprotective activity of the pharmaceutical composition - stopping and limiting damage to brain tissue that develops as a result of acute ischemia (hypoxia).
  • the medicine activates metabolic processes in the brain, protects nerve cells from attacks of free radicals and toxins, as well as from other harmful effects.
  • Antiamnestic activity of the drug is a counteraction to amnesia.
  • Amnesia is a general or partial inability to recall recent or distant events.
  • the antioxidant activity of the drug is the ability to slow the oxidation of organic compounds.
  • Antihypoxic activity of the drug - improves utilization of oxygen circulating in the body and increases the body's resistance to hypoxia (oxygen deficiency). Hypoxia is a state of oxygen starvation due to violations of the external and internal
  • Neurometabolic activity stimulates the synthesis and utilization of oxygen and glucose, increases ATP synthesis under conditions of ischemia and hypoxia by more than an order of magnitude.
  • Anti-ischemic activity of the drug prevents local anemia, often due to a vascular factor (narrowing or complete obstruction of the lumen of the artery), leading to temporary dysfunction or permanent damage to the tissue or organ.
  • Ischemia is local anemia, often caused by a vascular factor (narrowing or complete obstruction of the lumen of the artery), leading to temporary dysfunction or permanent damage to the tissue or organ.
  • vascular factor narrowing or complete obstruction of the lumen of the artery
  • the consequences of ischemia depend on the degree and rate of decrease in blood flow parameters,
  • ischemia duration of ischemia, tissue sensitivity to hypoxia, general condition of the body.
  • the organs of the central nervous system and myocardium are the most sensitive to ischemia.
  • Ischemia has a number of significant differences from hypoxia.
  • Ischemia is characterized by relative or absolute insufficiency of blood supply, which is manifested not only by local tissue hypoxia, but also by other metabolic disorders due to insufficient intake of nutrients.
  • Ischemia is a dynamic and, as a rule, potentially reversible process.
  • the likelihood of ischemic necrosis (heart attack) of the tissue directly depends on the duration and degree of decrease in local blood flow.
  • the myocardium is the muscle layer of the heart, which makes up its main mass.
  • a functional feature of the myocardium is rhythmic automatic contractions, alternating with relaxation, occur continuously throughout the life of the body.
  • composition having a neuroprotective, antiamnestic, antioxidant, antihypoxic, neurometabolic,
  • the pharmaceutical composition possessing neuroprotective, antiamnestic, antioxidant, antihypoxic, neurometabolic, antiischemic activity contains 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, methionine-glutamine-histidine-phenyl-ylacin-polyin peptide -proline (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro), and differs from the prototype in that it additionally contains mineral substances when
  • antihypoxic, neurometabolic, anti-ischemic activity contains 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, methionine-glutamine-histidine-phenylalanine-prolyl-glycine-proline polypeptide (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro) , and differs from the prototype in that it additionally contains minerals in the following ratio of components in mg / l:
  • the pharmaceutical composition is made in such a way that it contains 13 C carbon isotopes, and the ratio of the 13 C carbon isotopes to the total amount of carbon in the pharmaceutical composition is from 0.005 to 0.75.
  • the active ingredients in the pharmaceutical solution are the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate and the methionine-glutamine-histidine-phenylalanine-prolyl-glycine-proline polypeptide (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro).
  • the pharmaceutical composition is in the form of a solution, for example, in the form of a solution for injection.
  • the pharmaceutical composition has a pH value of from 4 to 7.
  • the kinematic viscosity of the pharmaceutical composition made in the form of a solution, from 1.01 to 1.23 mm 2 / s
  • the kinematic viscosity of the pharmaceutical composition is determined using a capillary viscometer.
  • the pharmaceutical composition may be in the form of nasal drops or a solution for oral administration (in particular, syrup, B AD).
  • the methionine-glutamine-histidine-phenylalanine-prolyl-glycine-proline polypeptide (or its pharmaceutically acceptable salt)
  • the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate (or its pharmaceutically acceptable salt) and minerals may use a pharmaceutically acceptable solvent.
  • the solvent in the pharmaceutical composition can be any pharmaceutically acceptable solvent.
  • water distilled water
  • another solvent may be used.
  • Ammonium acetate, sodium disulfate (sodium metabisulfate) or another pharmaceutically acceptable substance may be used as a pharmaceutically acceptable excipient.
  • the active substances and minerals are selected from the above ranges, and the rest is up to a liter of solvent. Yu
  • the technical results of the invention are:
  • the lower limit of the content in the pharmaceutical composition of the methionine-glutamine-histidine-phenylalanine-prolyl-glycine-proline polypeptide and the lower limit of the content in the pharmaceutical composition of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate can be used to treat children and pregnant women, as well as in the dietary supplement.
  • the upper limit of the content in the pharmaceutical composition of the methionine-glutamine-histidine-phenylalanine-prolyl-glycine-proline polypeptide and the upper limit of the content in the pharmaceutical composition of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate can be used to treat adults with severe a stroke.
  • compositions with upper bounds for the methionine-glutamine-histidine-phenylalanine-prolyl-glycine-proline polypeptide and the 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate preparation are concentrated formulations and may be diluted with a pharmaceutically acceptable solvent. Concentrated execution of pharmaceutical formulations is convenient during transportation and storage.
  • cardiostimulating effect while maintaining the duration of action
  • up to 95% ethyl alcohol is introduced into the drug.
  • Alcohol due to osmotic phenomena causes pain and local negative reaction, which accelerates the effect of the drug.
  • polyvinylpyrrolidone and sorbic acid These components increase the antitumor activity of the active principle.
  • the concentration of active substances in the pharmaceutical agent due to the introduction of mineral substances into the pharmaceutical composition.
  • Minerals are subdivided into macro- and microelements.
  • Macronutrients include calcium, phosphorus, magnesium, potassium, sodium, chlorine and sulfur.
  • Trace elements iron, copper, manganese, zinc, cobalt, iodine, fluorine, chromium, molybdenum, vanadium, nickel, strontium, silicon, selenium are recognized as essential for human and animal life.
  • Mineral substances in solution (in particular, in pharmaceutical composition) are contained in pharmaceutically acceptable salts, for example, succinates, chlorides, carbonates or sulfates, as well as in various pharmaceutically acceptable complex compounds.
  • Metals have a pronounced local effect on the mucous membranes. At the concentrations of mineral substances considered in the application, the local action of these substances may be astringent or irritating.
  • Figure 1 presents a chromatogram of a pharmaceutical composition with a peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro with a UV detector (210 nm). Sorbent C 18.
  • Figure 2 presents a chromatogram of a pharmaceutical composition with a peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro with an MS detector. Highlighted peak with time
  • Fig. 3 shows a chromatogram of a pharmaceutical composition with a Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro peptide with an MS detector. A peak with a retention time of 4.664 minutes is highlighted.
  • Figure 4 presents a chromatogram of a pharmaceutical composition with a peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro with an MS detector. Highlighted peak with time
  • Figure 5 presents a chromatogram of a pharmaceutical composition with a peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro with an MS detector. A peak with a retention time of 12.163 minutes is highlighted.
  • Figure 6 presents the chromatogram (left side) of the pharmaceutical composition with the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro on a column with a chiral
  • Fig presents a chromatogram of a pharmaceutical composition with a peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro on a column with a chiral sorbent and with an MS detector (220 nm). A peak with a retention time of 5.274 is highlighted.
  • Figure 9 shows a chromatogram of a pharmaceutical composition with a Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro peptide on a column with a chiral sorbent and with an MS detector (220 nm). A peak with a retention time of 6.366 is highlighted.
  • Figure 10 shows a chromatogram of a pharmaceutical composition with a Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro peptide on a column with a chiral sorbent and with an MS detector (220 nm). A peak with a retention time of 7.263 is highlighted.
  • Figure 11 presents the chromatogram (left side) of the pharmaceutical composition on a column with a chiral sorbent and with an MS detector (220 nm). A peak with a retention time of 14.648 is highlighted.
  • Fig presents a chromatogram (right side) of the pharmaceutical composition with the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro on a column with a chiral
  • Fig presents a high-resolution mass spectrum of the pharmaceutical composition with the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro.
  • FIG. 16 shows a chromatogram of a sample of a pharmaceutical composition with a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate.
  • FIG. 17 - 20 show chromatograms of a sample of pharmaceutical composition with the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate.
  • FIG. 21–23 show chromatograms of a sample of pharmaceutical composition with the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate on a chiral column.
  • FIG. 24 shows a chromatogram of a sample of a pharmaceutical composition with a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate.
  • FIG. 25 represents the MSMS of ion 438.7.
  • FIG. 26 represents the MSMS of ion 138.
  • FIG. 27 presents the determination of the mass fraction of components of a sample of a pharmaceutical composition with a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate.
  • FIG. Figure 28 shows the 1 H-MR spectrum of a sample of pharmaceutical composition containing 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate in D2O.
  • FIG. Figure 29 shows the 'H-NMR spectrum of a sample of pharmaceutical composition with a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate in DMSO.
  • FIG. 30–32 show the C-NMR spectra of a sample of a pharmaceutical composition with a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate with and without suppression.
  • FIG. 33 shows the 'H-MR spectrum of a sample of a pharmaceutical composition with a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate.
  • FIG. 34 and 35 show high resolution mass spectra of a mixture of derivatives of a pharmaceutical composition with a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate.
  • FIG. 36 is a diagram of a cavitation reactor for isotope enrichment of various mixtures.
  • FIG. 37 is a cross-sectional view of a cavitation reactor.
  • FIG. 38 is a diagram of an isotope enrichment plant.
  • Example 1 a method of introducing minerals into water.
  • Example 2 - a method of obtaining pharmaceutical compositions and verification of stability.
  • Example 3 tests for general toxicity.
  • Examples 4-8 illustrate the effectiveness of the claimed pharmaceutical compositions with neuroprotective, antiamnestic, antioxidant, antihypoxic, neurometabolic, antiischemic activity.
  • the studies were carried out using materials published in the sources / 1 - 5 /.
  • the concentrations of the Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro peptide and the 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate preparation were selected so that the results could be compared with the results of using only the 2-ethyl-6-methyl preparation -3- hydroxypyridine succinate.
  • Example 1 The introduction of mineral substances into the solution (in water) was carried out according to the method 161. There are other ways of introducing mineral substances into the solution. Solutions were prepared from pure metals using
  • the concentration of metals in solutions was controlled by the atomic absorption method for determining the contents of sodium, potassium, calcium, magnesium, iron, manganese, copper, zinc, lead, cadmium, cobolt, nickel, and chromium.
  • Example 2 For example, we describe the receipt of one pharmaceutical composition with potassium, magnesium, iron of a certain concentration.
  • the resulting solutions are poured into a reactor with a stirrer (12 L volume), the pH of the solution is adjusted to a value of 4.5.
  • the resulting solution was adjusted to a volume of 10 l with water for injection and passed through a filter. If necessary, in order to increase or decrease the concentration of active substances,
  • the pharmaceutical composition may be lyophilized. If necessary, reduce the concentration of the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate and mineral substances, for example, by half, 10 L of water was added to the resulting solution. The solution was mixed with water in a reactor with a stirrer with a volume of more than 22 l. Thus, all the formulations shown in tables 1 to 24 were obtained.
  • the control showed the qualitative performance of the pharmaceutical composition.
  • FIG. 1 to 35 illustrate studies of a separate solution with the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate (Fig. 1-15) and with the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro (Fig. 16 - 35 ) before mixing them in a 12 liter reactor.
  • Figure 1-12 presents the chromatograms of the investigated sample of the pharmaceutical composition with the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro and
  • FIG. 13 and 14 show the MSMS spectra of the pharmaceutical composition with the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro.
  • FIG. 16-24 show chromatograms of a sample of a pharmaceutical composition with a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate.
  • FIG. 25 and 26 show the MSMS of ion 438.7 and ion 138.
  • FIG. 27 presents the determination of the mass fraction of components of a sample of a pharmaceutical composition with a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate.
  • FIG. 34 and 35 show high resolution mass spectra of a mixture of derivatives of a pharmaceutical composition with a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate.
  • compositions with a different composition of mineral substances are similar (the differences are small and are comparable with the thick line in the graphs).
  • mineral substances are present in the pharmaceutical composition in quantities that ensure, at a temperature of 253 - 773K, an electric or electromagnetic field frequency in the range from 50 Hz to 100 Hz, the value of the real component of the relative dielectric constant in the range from 5 to 80.
  • the dielectric constant of the pharmaceutical composition characterizes its ability to accumulation of electric charges. It was found that the value of the actual component of the relative dielectric constant can be changed by changing the concentration (content) of the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate and mineral substances. It is advisable to increase the pharmaceutical effect to provide the value of the real component of the relative dielectric constant in the range from 5 to 80. If its value is lower or higher, then the effectiveness of the action
  • the indicator “real component of relative dielectric constant” was a control, a kind of criterion for the applicability of the pharmaceutical composition.
  • LD 5 o amounts to 1000 mg / kg with intraperitoneal administration.
  • LD 5 o is up to 3000 mg / kg, which allows the claimed compounds to be classified as non-toxic substances.
  • Example 4 The antioxidant activity of pharmaceutical compositions based on the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, mineral substances and containing 13 C isotopes, was compared with antioxidant activity Mexidol
  • the content of the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro is 0.5 mg / l
  • the content of the preparation 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate is 50,000 mg / l
  • Mexidol contained the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro - 50,000 g / l.
  • the serial numbers of the pharmaceutical formulations 49 to 56 see table 7).
  • Mexidol was also compared with pharmaceutical formulations based on the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, mineral substances and with a carbon content of 13 C equal to 0.5% and 75% of the total carbon in the pharmaceutical composition (see table 8 and 9).
  • antioxidant activity According to antioxidant activity (AO A), pharmaceutical formulations based on the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate and minerals were found to be superior to Mexidol by value up to 24%.
  • Example 5 Antihypoxic and neurometabolic activity of pharmaceutical compositions based on the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, mineral substances and containing carbon isotopes 13 C, were compared with the activity of the drug Mexidol.
  • mice were weighed 25 - 27 g for acute hypoxia / 9, 10 /.
  • Acute hypoxia (normobaric hypoxic hypoxia)
  • mice modeled by placing mice in a heat chamber with a volume of 250 cm 3 .
  • Mexidol was administered once intraperitoneally 30, 60 and 90 minutes before placing the mice in the heat chamber and stopping air from entering the heat chamber.
  • the time from the moment of drug administration to the placement of mice in a heat chamber and the termination of air access in the tables is indicated by Tv in minutes.
  • mice After placing the mice in a heat chamber, as oxygen was consumed, its concentration in the air and in the body of the mice decreased, and the amount of carbon dioxide increased. As a result, animals developed acute hypoxic hypoxia. Life expectancy (until breathing stopped) was recorded using a stopwatch and judged by its increase
  • compositions N2N2 1 - 24 exceed the effect of Mexidol by about 3%.
  • Compositions 25 - 48 in their effect exceed the action of Mexidol by no more than 5%.
  • Example 6 The neuroprotective effect of pharmaceutical compositions based on the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, mineral substances and containing 13 C carbon isotopes was compared with the neuroprotective the action of the drug Mexidol.
  • Ischemic stroke in rats was reproduced by bilateral ligation of the common carotid arteries.
  • the experimental animals were injected intraperitoneally
  • rat survival Neurological deficit in animals was determined every hour during the first 24 hours, and then 1 time per day. The severity of the condition was determined by the sum of the corresponding points.
  • the pharmaceutical composition 30 in its neuroprotective effect does not exceed the composition 29. Therefore, the composition 30 is not advisable to use.
  • the pharmaceutical composition 38 in its neuroprotective effect does not exceed the composition 39. Therefore, the composition 38 is not advisable to use.
  • composition 46 in its neuroprotective effect does not exceed composition 45. Therefore, composition 46 is not advisable to use.
  • GI Hemorrhagic stroke
  • GI Hemorrhagic stroke
  • rat craniotomy and brain tissue destruction were performed in the area of the internal capsule with the subsequent injection of the same rat into the site of blood damage (0.03 ml of blood).
  • a stroke was achieved in the area of the internal capsule with virtually no damage to neighboring brain tissues.
  • the pharmaceutical composition based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, minerals and carbon isotopes 13 C was administered to animals intraperitoneally at a dose of 20 mg per day on a rat .
  • Mexidol was also administered intraperitoneally to animals at a dose of 20 mg per day per rat.
  • the administration schedule was as follows: the first injection was carried out 2 hours after the operation, then 3 injections after 4 hours.
  • the pharmaceutical composition based on the drug 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro -Gly-Pro and minerals, as well as Mexidol were administered daily once a day for 14 days.
  • compositions with serial numbers 28-30 see the characteristics of the compounds in table 4
  • 36-48 see the characteristics of the compounds in table 5
  • 44-46 see the characteristics of the compositions in table 6.
  • the pharmaceutical composition 30 in its neuroprotective effect does not exceed the composition 29. Therefore, the composition 30 to use in practice do not
  • composition 38 in its neuroprotective effect does not exceed the composition 37. Therefore, the composition 38 is not used in practice
  • composition 46 in its neuroprotective effect does not exceed composition 45. Therefore, composition 46 is not used in practice
  • Mexidol was compared with the effectiveness of the pharmaceutical compositions N2N2 1 - 48, 169 - 192. It was found that the compositions N ° N ° 1 - 24, 169 - 192 exceed the effect of Mexidol by about 3%. Compositions 25 - 48 in their effect exceed the action of Mexidol by no more than 5%.
  • Example 7 Anti-static effect of pharmaceutical compositions based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, the peptide Met-Glu-His- Phe-Pro-Gly-Pro, minerals and carbon C isotopes, were compared with the anti-amnestic effect of Mexidol.
  • the drugs were administered once intraperitoneally 30, 60 and 90 minutes before the training of mice.
  • the safety of the conditioned reaction of passive avoidance was checked 24 hours after the amnesiac effect.
  • mice pharmaceutical formulations based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, mineral substances and carbon isotopes 13 C, as well as Mexidol actively prevent the development of amnesia of the conditioned reaction of passive avoidance (see table 32).
  • table 32 shows that pharmaceutical formulations based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, minerals and carbon C isotopes increase the speed of the onset of the therapeutic effect while maintaining the duration of action without increasing the concentration of active substances in the pharmaceutical agent.
  • the above effects can be achieved through the use of Mexidol by increasing the dose of Mexidol or its concentration in the dose. In the experiments (see table 32), the amount of Mexidol was increased from 20 mg to 40 mg per mouse.
  • mice In a scopolamine amnesia model, it was found that in mice pharmaceutical formulations based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, the Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro peptide, minerals and
  • carbon isotopes C increase the onset of the therapeutic effect while maintaining the duration of action without increasing the concentration of the pharmaceutical agent.
  • Mexidol therapeutic effect due to the use of Mexidol can be achieved by increasing its amount in injection.
  • Example 8 The anti-ischemic effect of pharmaceutical compositions based on the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, minerals and carbon isotopes C, were compared with the anti-ischemic effect of the drug Mexidol. The comparison results are presented in tables 34 and 35.
  • mice white non-linear mice (males) weighing 35 -
  • Brain ischemia was reproduced by ligation of both common carotid arteries. Animals after surgery were observed for 7 days.
  • methionine-glutamine-histidine-phenylalanine-prolyl-glycine-proline polypeptide (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro), 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate and minerals in the following
  • methionine-glutamine-histidine-phenylalanine-prolyl-glycine-proline polypeptide (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro), 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, minerals and carbon isotopes 13 C (from 0.5 to 75%) in the following ratio of components in mg / l:
  • composition of mineral substances in the pharmaceutical compositions described above was limited by the list of mineral substances (macroelements and
  • the Guide describes a method for introducing mineral substances into a solution, as well as methods for precisely controlling the amount of mineral substances in solutions.
  • any may be added or any of the following may be added (with the exception of the mineral substances already indicated in the composition), mg / l:
  • the first composition can be performed as follows:
  • neurometabolic, anti-ischemic activity containing 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, methionine-glutamine-histidine-phenylalanine-prolyl-glycine-proline polypeptide (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro),
  • Carbon C isotopes increase the resistance of molecules to
  • compositions enriched in carbon C isotopes have increased stability, they are non-toxic and, in addition, have increased neuroprotective, antiamnestic, antioxidant,
  • the reactor was manufactured according to the method described in the source / 15 /.
  • the flow rate in the reactor, along the length of the channel, varied from 10 m / s to 50 m / s.
  • Fig presents a diagram of a cavitation reactor for isotopic enrichment of various mixtures, in particular, hydrocarbon reagents to obtain the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro and 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, enriched carbon isotopes 13 C.
  • the reactor is located in the installation, which contains the pump 6NK-6x1, providing a maximum flow rate of 90 m / h, a pressure of 125 m with an electric motor power of 75 kW, the rotational speed of the electric motor rotor and pump wheel 2950 rpm. Additionally, the installation contains tanks for reagents and measuring instruments.
  • the cavitation reactor 1 (see Fig. 36) is made in the form of a flat Laval nozzle with cavitation bodies 2-9 in the channel 10.
  • Fig presents a cross section of a cavitation reactor.
  • the reactor channel in the area of cavitation bodies is divided into several channels.
  • cavitation bodies 5 and 6 divide the channel into smaller channels 13, 14 and 15. Outside, the channel is limited by walls 16 and 17, as well as two covers 1 1 and 12.
  • arrows 18 show the direction of movement of the reagent at the inlet to the reactor
  • arrow 19 shows the direction of movement of the reagent at the outlet of the reactor.
  • channels 24 and 25 are made for supplying carbon dioxide and nitrogen to the cavitation zones.
  • Installation works as follows.
  • the hydrocarbon reagent from the tank 28 is pumped through the reactor 27 through the pump 27 and enters the tank 28.
  • the pressure drop in the reactor is controlled by pressure gauges 29 and 30.
  • the temperature of the reactant is monitored by thermometer 31.
  • the reagent is heated in the tank by a heater 32.
  • the hydrocarbon reagent moves along the cavitator channel in direction 18.
  • the flow is divided into several flows. Beyond the cavitation bodies, cavitation areas arise.
  • cavitation 2 3, and 4 are cavitation zones 20, 21, 22, and 23.
  • cavitation 2 3, and 4 are cavitation zones 20, 21, 22, and 23.
  • the reagent “boils”, cavitation bubbles appear, and cavitation cavities exit the cavitation region the bubbles collapse.
  • an increase in pressure is observed to several thousand atmospheres and an increase in temperature to a thousand or more degrees Celsius.
  • carbon dioxide is supplied to the stream so that the gas enters the cavitation zone.
  • the gas-vapor mixture obtained in the reactor together with the liquid reagent enters the tank 28.
  • the gas-vapor mixture is passed through a pipe 33 to a separator with a porous partition, where the gas-vapor mixtures with 13 C and 12 C are separated.
  • the amount of 13 C carbon isotopes was controlled by high resolution mass spectroscopy.
  • the reagent was enriched with the 13 C carbon isotope to 75%.
  • compositions were obtained containing the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro with a carbon content of 13 C from 0.5% to 75% of the total carbon in the pharmaceutical composition.
  • the enrichment of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate with 13 C isotopes of carbon is carried out similarly.
  • the gas-vapor mixture obtained in the reactor together with the reagent enters the tank 28.
  • the gas-vapor mixture is passed through a pipe 33 to a separator with a porous baffle, where the gas-vapor mixtures with 14 N and 15 N are separated.
  • the reagent was enriched with a 15 N nitrogen isotope to 13.75%.
  • the value of the indicator "p" took values from 0.01% to 13.75%.
  • the indicator "p” was determined by the formula
  • n n 15 N! 00% / ( ⁇ 14 ⁇ + ⁇ 15 ⁇ ),
  • ⁇ 15 ⁇ is the number of nitrogen isotopes with a relative atomic mass of 15.0037;
  • compositions were obtained having neuroprotective, antiamnestic, antioxidant,
  • composition with neuroprotective A.
  • neurometabolic, anti-ischemic activity containing 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, methionine-glutamine-histidine-phenylalanine-prolyl-glycine-proline polypeptide (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro), characterized in that it additionally contains minerals in the following ratio of components in mg / l:
  • the pharmaceutical composition is designed in such a way that it contains nitrogen isotopes 15 ⁇ , and the ratio of the number of nitrogen isotopes 15 N to the total amount of nitrogen in the pharmaceutical composition is from 0.0001 to 0.1375.
  • neurometabolic, anti-ischemic activity containing 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, methionine-glutamine-histidine-phenylalanine-prolyl-glycine-proline polypeptide (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro),
  • the pharmaceutical composition is designed in such a way that it contains 13 C carbon isotopes, and the ratio of the 13 C carbon isotopes to the total amount of carbon in the pharmaceutical composition is from 0.005 to 0.75;
  • the pharmaceutical composition contains 15 nect ⁇ , nect ⁇ , tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyl, tyl, and, in addition, the pharmaceutical composition contains 15 nect ⁇ , and, in addition, the pharmaceutical composition contains 15 nect ⁇ , tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene, tyrene
  • compositions based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, mineral substances and with a carbon isotope content of C equal to 0.5% of the total carbon in the pharmaceutical composition
  • compositions based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, mineral substances and with a carbon isotope content of C equal to 0.5% of the total carbon in the pharmaceutical composition
  • compositions based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, mineral substances and with a carbon isotope content of C equal to 0.5% of the total carbon in the pharmaceutical composition
  • the dose of the drug is 100 mg.
  • the dose of the drug is 100 mg.
  • mice in each experiment *) The number of mice in each experiment - **) Mexidol, dose of 40 mg per mouse.
  • mice in each experiment results of checking the effect of pharmaceutical formulations based on the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, 13 C minerals and carbon isotopes, and Mexidol on mouse survival on the 7th day after bilateral ligation of the common carotid arteries.
  • the number of mice in each experiment is
  • mice in each experiment results of checking the effect of pharmaceutical formulations based on the peptide Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, 13 C minerals and carbon isotopes, and Mexidol on mouse survival on the 7th day after bilateral ligation of the common carotid arteries.
  • the number of mice in each experiment is

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области фармацевтической промышленности и медицине. Задачей настоящего изобретения является создание эффективного фармацевтического состава, обладающего нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью. Задача решается за счет того, что фармацевтический состав содержит 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, пептид Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, и от прототипа отличается тем, что дополнительно содержит минеральные вещества: калий, магний, железо. Кроме того, в фармацевтическом составе часть изотопов углерода 12С замещена на изотопы углерода 13С. Техническими результатами изобретения являются: увеличение скорости наступления лечебного эффекта, увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, повышение стабильности в течение срока годности.

Description

Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты)
Область техники, к которой относится изобретение.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и медицине и может быть использовано при изготовлении и применении фармацевтических составов с полипептидной последовательностью Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, обладающих нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью.
Уровень техники.
Важной проблемой современной медицины является создание новых средств, способных эффективно защищать, а также лечить заболевания мозга.
Эффективным направлением исследований в этой области является создание новых средств на базе препаратов Семакс и Мексидол.
Семакс - препарат, который эффективно влияет на процессы, связанные с формированием памяти и обучением, улучшает мнестические функции, улучшает адаптацию организма человека к гипоксии, церебральной ишемии, наркозу и другим повреждающим воздействиям. Другими словами, Семакс улучшает энергетические процессы мозга, повышая его устойчивость к стрессовым
повреждениям, гипоксии. Семакс является хорошим ноотропом,
нейрометаболическим стимулятором.
В свою очередь, Мексидол обладает механизмом действия, принципиальным отличием которого от механизма действия традиционных нейро-психотропных препаратов является отсутствие у него специфического связывания с известными рецепторами (НИИ Фармакологии РАМН, Т. А. Воронина. Мексидол. Основные эффекты, механизм действия, применение (http://www.voed.ru/mexidol.htm).
Мексидол является ингибитором свободно-радикальных процессов, перекисного окисления липидов, он активирует супероксиддисмутазу, оказывает влияние на физико-химические свойства мембраны, повышает содержание полярных фракций липидов (фосфотидилсерина и фосфотидилинозита и др.) в мембране, уменьшает отношение холестерол/ фосфолипиды, уменьшает вязкость липидного слоя и увеличивает текучесть мембраны, активирует энергосинтезирующие функции митохондрий и улучшает энергетический обмен в клетке и, таким образом, защищает аппарат клеток и структуру их мембран.
Вызываемое Мексидолом изменение функциональной активности
биологической мембраны приводит к конформационным изменениям белковых макромолекул синаптических мембран, вследствие чего мексидол оказывает модулирующее влияние на активность мембраносвязанных ферментов, ионных каналов и рецепторных комплексов, в частности, бензодиазепиновый, ГАМК, ацетил-холиновый, усиливая их способность к связыванию с лигандами, повышая активность нейромедиаторов и активацию синаптических процессов. Наряду с этим, мексидол обладает выраженным гиполипидемическим действием, уменьшает уровень общего холестерина и липопротеидов низкой плотности и увеличивает липопротеиды высокой плотности.
Таким образом, механизм действия Мексидола определяют прежде всего его антиоксидантные свойства, способность стабилизировать биомембраны клеток, активировать энергосинтезирующие функции митохондрий, модулировать работу рецепторных комплексов и прохождение ионных токов, усиливать связывание эндогенных веществ, улучшать синаптическую передачу и взаимосвязь структур мозга. Благодаря этому механизму действия, мексидол оказывает влияние на ключевые базисные звенья патогенеза различных заболеваний, имеет большой спектр эффектов, чрезвычайно малые побочные проявления и низкую токсичность, обладает способностью потенцировать действие других центральнодействующих веществ, в особенности тех, которые реализуют свое действие как прямые агонисты рецепторов.
В заявке заявлены два варианта фармацевтического состава. Каждый из заявленных фармацевтических составов имеет, в качестве действующих веществ полипептидную последовательность Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат. Ниже приведем аналоги, в которых описаны полипептидная
последовательность Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат.
Аналогом каждому варианту фармацевтического состава является
фармацевтическая композиция для лечения ишемического инсульта, содержащая полипептидную последовательность Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro (Патент на изобретение РФ 2251429, опубликованный 27.07.2004).
Недостатком аналога является относительно малая скорость наступления лечебного эффекта.
Кроме того, имеется аналог - патент РФ 2156087, опубликованный 20.09.2000. В патенте описана биологически активная добавка (БАД) к пище, включающая калий, марганец, цинк, железо и дополнительно 29 различных веществ. В патенте заявлено, что биологически активная добавка обладает антигипоксическими и антиоксидантными свойствами.
Недостатком аналога является невозможность его применения в лечебных целях.
Известно применение Семакса в качестве нейропротектора (Патент на изобретение РФ 2394816, опубликованный 20.07.2010). В патенте РФ 2394816 в таблице 7 представлено изменение неврологического дефицита у крыс после двусторонней перевязки общих сонных артерий под влиянием препарата Семакс, Мексидол и Амтизол. В патенте делается вывод о том, что Мексидол более предпочтителем, Семакс из-за не достаточной эффективности последнего и невозможности повышения его концентрации в растворе.
Известен аналог (Патент на изобретение РФ 2425670, опубликованный
10.08.201 1). В аналоге используют Семакс и холина альфосцерат. Препарат холина альфосцерат повышает эффективность применения Семакса.
Известно применение пептида Семакса формулы Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro в качестве антитромботического, антикоагулянтного,
фибриндеполимеризационного и фибринолитического средства (Патент
РФ2290194, опубликованный 27.12.2006).
Недостатком аналога является его относительно малая эффективность лечебного действия. Известно применение полипептидной последовательности Met-Glu-His-Phe- Pro-Gly-Pro в качестве стимулятора памяти (Авторское свидетельство СССР 939440, опубликованное 30.06.1982), который является основой ноотропного средства и фармацевтической композицией ноотропного действия (Патент РФ No 2045958, С 16 А 61 К 38/08, 1994).
Недостатком аналога является относительно малая скорость наступления лечебного эффекта.
Известна заявка на изобретение 2006146529, опубликованная 20.07.2008. В заявке описана фармацевтическая композиция, обладающая нейротропной, антиамнестической, противогипоксической и противоишемической активностью. Композиция, в качестве активных компонентов, содержит Семакс и Мексидол или их фармацевтически приемлемые соли в терапевтически эффективных
количествах. Здесь эффективность Семакса повышается за счет применения
Мексидола.
Известен также патент ЕАПВ 008591, опубликованный 29.06.2007. В патенте предложено использовать производные 3-(3,5-диоксо-4,5-дигидро-ЗН- (1,2,4)триазин-2-ил) бензамида в качестве ингибиторов Р2Х7 для лечения
различных заболеваний, в том числе ишемию при инсульте или сердечном приступе. В патенте предусмотрено использование изотопов 13 С, 15 N и др. для внесения изотопных меток в лекарственное средство. По изотопам определяют динамику распространения лекарства в тканях организма.
Другим аналогом вариантам фармацевтического состава является средство, содержащее мексидол и вспомогательные вещества: крахмал картофельный, поливинилпирролидон, магний стеариновокислый, микрокристаллическая целлюлоза, сахар молочный (патент РФ 2145855, опубликованный 26.05.1999). Лекарственное средство предназначено для лечения нарушений функций мозга, в частности, острых и хронических нарушений мозгового кровообращения.
Недостатком аналога является малая стабильность фармацевтического средства в течение срока годности.
Также аналогом всем вариантам фармацевтического состава является стабильный фармацевтический состав для инъекций, содержащий мексидол, янтарную кислоту, трилон Б и воду для инъекций (Патент РФ 2205640, опубликованный 09.04.2002). Препарат назначают внутривенно и внутримышечно.
Недостатком аналога является малая стабильность фармацевтического состава в течение срока годности.
Кроме того, имеется аналог - патент РФ 2156087, опубликованный 20.09.2000. В патенте описана биологически активная добавка к пище, включающая калий (4- 380мг/л), магний (1-510мг/л), железо (1-2100мг/л), цинк (1-1240мг/л), мексидол (1- 200мг/л) и дополнительно 29 различных веществ. В патенте заявлено, что
биологически активная добавка обладает антигипоксическими и
антиоксидантными свойствами.
Недостатком аналога является невозможность его применения в качестве состава для инъекций. Другим недостатком является малое содержание мексидола в литре. Примерно на три порядка меньше, чем требуется для инъекционного раствора.
Прототипом двум вариантам изобретения является фармацевтический состав (Заявка на изобретение РФ 2006146529/15, опубликованная 20.07.2008),
обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной,
противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, а также полипептид метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His- Phe-Pro-Gly-Pro).
Задачей прототипа было расширение арсенала лекарственных средств, обладающих выраженной нейропротекторной активностью, в сочетании с
антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической,
нейрометаболической, противоишемической активностью.
Исследования показали, что прототип не всегда эффективен при этих патологиях. Другим недостатком прототипа является относительно малая скорость наступления лечебного эффекта.
Признаки прототипа «Фармацевтический состав, обладающий
нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат, полипептид метионин-глутамин-гистидин- фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro)» совпадают с признаками заявленных вариантов изобретения.
У прототипа фармацевтически приемлемым растворителем является вода (дистиллированная вода или вода для инъекций). Фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом в фармацевтическом составе является ацетат аммония.
Структурная формула полипептида метионин-глутамин-гистидин- фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro):
Figure imgf000007_0001
Формула 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат может быть представлена в следующем виде:
Figure imgf000007_0002
Связь ]ST - Н - это ковалентная связь.
Вышеуказанный препарат содержит катион 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина (2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиний) и фармацевтически приемлемый анион, а именно С4Н6О4. Ионная связь между катионом и анионом - это связь между, отрицательно и положительно заряженными частицами в препарате.
б В качестве аниона может быть использован не только сукцинат, но и другое вещество, в частности, хлорид. Поэтому более широкая формулировка, признаков, описывающих 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиний может быть следующей:
«Фармацевтический состав, содержащий 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридиния и фармацевтически приемлемый анион».
Недостатками прототипа являются относительно малая скорости наступления лечебного эффекта, не достаточно большой лечебный эффект фармацевтического средства, низкая стабильность фармацевтического состава в течение срока годности.
Сущность изобретения.
Дадим определения терминам.
Срок годности - период, в течение которого фармацевтический состав сохраняет свои свойства в мере, обеспечивающей его использование по
назначению.
Нейропротекторная активность фармацевтического состава (препарата) - купирование и ограничения повреждений ткани мозга, развивающегося вследствие остро возникающей ишемии (гипоксии).
Лекарство активизирует метаболические процессы в головном мозге, защищает нервные клетки от атак свободных радикалов и токсинов, а также от других вредных воздействий.
Антиамнестическая активность препарата - противодействие амнезии.
Амнезия - общая или частичная неспособность вспомнить недавние или отдаленные события.
Антиоксидантная активность препарата - способность замедлять окисление органических соединений.
Противогипоксическая активность препарата - улучшает утилизацию циркулирующего в организме кислорода и повышает устойчивость организма к гипоксии (кислородной недостаточности). Гипоксия представляет собой состояние кислородного голодания вследствие нарушений внешнего и внутреннего
(тканевого, клеточного) дыхания. Нейрометаболическая активность - стимулирует синтез и утилизацию кислорода и глюкозы, увеличивает синтез АТФ в условиях ишемии и гипоксии более чем на порядок.
Противоишемическая активность препарата - предотвращает местное малокровие, чаще обусловленное сосудистым фактором (сужением или полной обтурацией просвета артерии), приводящее к временной дисфункции или стойкому повреждению ткани или органа.
Ишемия— местное малокровие, чаще обусловленное сосудистым фактором (сужением или полной обтурацией просвета артерии), приводящее к временной дисфункции или стойкому повреждению ткани или органа. Последствия ишемии зависят от степени и скорости снижения параметров кровотока,
продолжительности ишемии, чувствительности тканей к гипоксии, общего состояния организма. Самыми чувствительными к ишемии являются органы центральной нервной системы и миокард.
Ишемия имеет ряд существенных отличий от гипоксии.
Ишемия характеризуется относительной или абсолютной недостаточностью кровоснабжения, что проявляется не только локальной тканевой гипоксией, но и иными нарушениями метаболизма вследствие недостаточного поступления питательных веществ.
Ишемия— динамический, и, как правило, потенциально обратимый процесс. Вероятность ишемического некроза (инфаркта) ткани непосредственно зависит от длительности и степени снижения локального кровотока.
Миокард - мышечный слой сердца, составляющий главную его массу.
Построен из особой поперечнополосатой мышечной ткани, представляющей собой плотное соединение мышечных клеток. Функциональная особенность миокарда— ритмические автоматические сокращения, чередующиеся с расслаблениями, совершаются непрерывно в течение всей жизни организма.
Задачей настоящего изобретения является создание эффективного
фармацевтического состава, обладающего нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической,
противоишемической активностью. Задача решается за счет того, что фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью, содержит 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат, полипептид метионин-глутамин-гистидин- фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro), и от прототипа отличается тем, что дополнительно содержит минеральные вещества при
следующем соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 0.4 ' 10 - 300 ' 10 ;
полипептид метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин- пролин - 0.1 - 30;
калий - 0.001 - 158.0;
магний - 0.0001 - 70.3;
железо - 0.007 - 345.
Также задача решается за счет того, что фармацевтический состав,
обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной,
противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью, содержит 2-этил-6-метил-3 -гидроксипиридина сукцинат, полипептид метионин- глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly- Pro), и от прототипа отличается тем, что дополнительно содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат— 0.4 10 3 - 300 10 3;
полипептид метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин- пролин - 0.1 - 30;
калий - 0.001 - 158.0;
магний - 0.0001 - 70.3;
железо - 0.007 - 345,
и при этом фармацевтический состав выполнен таким образом, что содержит изотопы углерода 13 С, и отношение количества изотопов углерода 13 С к общему количеству углерода в фармацевтическом составе составляет величину от 0.005 до 0.75. Действующими веществами в фармацевтическом растворе являются препарат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и полипептид метионин-глутамин- гистидин-фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro).
Фармацевтический состав выполнен в виде раствора, например, в виде раствора для инъекций. Фармацевтический состав имеет значение рН от 4 до 7.
Кинематическая вязкость фармацевтического состава, выполненного в виде раствора, от 1.01 до 1.23 мм2/с. Кинематическую вязкость фармацевтического состава определяют с помощью капиллярного вязкозиметра.
Также фармацевтический состав может быть выполнен в виде назальных капель или раствора для приема внутрь (в частности, сиропа, Б АД).
В фармацевтическом составе кроме действующих веществ: полипептида метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин-пролин (или его фармацевтически приемлемой соли), препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат (или его фармацевтически приемлемой соли) и минеральных веществ могут использовать фармацевтически приемлемый растворитель. Кроме растворителя, в фармацевтическом составе могут
использовать фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество или фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества.
В качестве фармацевтически приемлемого растворителя может быть использована вода (дистиллированная вода), а также другой растворитель.
В качестве фармацевтически приемлемого вспомогательного вещества может быть использован ацетат аммония, натрия дисульфат (натрия метабисульфат) или другое фармацевтически приемлемое вещество.
Другими словами, основой фармацевтического состава являются
действующие вещества препарат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, полипептид метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro) и минеральные вещества в фармацевтически приемлемом растворителе, в частности, в воде.
В фармацевтическом составе действующие вещества и минеральные вещества выбирают из вышеуказанных диапазонов, а растворитель - остальное до литра. ю Техническими результатами изобретения являются:
- увеличение скорости наступления лечебного эффекта (уменьшение времени наступления лечебного эффекта) при сохранении продолжительности действия без увеличения концентрации полипептида метионин-глутамин-гистидин- фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro) и препарата 2- этил-6-метил-З-гидроксипиридина сукцинат при лечении расстройства нервной системы, ишемии и гипоксии центральной нервной системы и миокарда, амнезии, а также при повышении активности эндогенной системы и уменьшении
интенсивности свободнорадикальных процессов;
- увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации полипептида метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His- Phe-Pro-Gly-Pro) и препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат при лечении расстройства нервной системы, ишемии и гипоксии центральной нервной системы и миокарда, амнезии, а также при повышении активности эндогенной системы и уменьшении интенсивности свободнорадикальных процессов;
- повышение стабильности фармацевтического состава с полипептидом метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His- Phe-Pro-Gly-Pro) и препаратом 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат в течение срока годности.
Нижняя граница диапазона содержания в фармацевтическом составе полипептида метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин-пролин и нижняя граница содержания в фармацевтическом составе препарата 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат могут быть использованы для лечения детей и беременных, а также в составе БАД.
Верхняя граница диапазона содержания в фармацевтическом составе полипептида метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин-пролин и верхняя граница содержания в фармацевтическом составе препарата 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат могут быть использованы для лечения взрослых людей при тяжелом инсульте.
Фармацевтические составы с верхними границами диапазонов полипептида метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин-пролин и препарата 2- этил-6-метил-З-гидроксипиридина сукцинат являются концентрированными составами и могут разбавляться фармацевтически приемлемым растворителем. Концентрированное выполнение фармацевтических составов удобно при транспортировке и хранении.
В настоящее время, увеличение скорости наступления лечебного эффекта при введении лекарственных средств в организм обеспечивают:
- дозировкой средства и временем его воздействия;
- введением в раствор вспомогательного ингредиента - ускорителя скорости воздействия (частный случай регулятора скорости воздействия).
Приведем примеры.
Известен раствор (заявка РФ N 94015245, опубликованная 27.12.1995) в котором в качестве регулятора скорости воздействия используют 5-10% раствор гиалуроновой кислоты.
Известен кардиостимулирующий препарат (патент РФ N 2068697,
опубликованный 10.11.1996), содержащий яд зеленой жабы, хлорбутанодигидрат, хлористый натрий и воду. Для повышения скорости наступления
кардиостимулирующего эффекта (при сохранении продолжительности действия), обеспечиваемого указанным ядом, в препарат вводят до 95% этилового спирта. Спирт за счет осмотических явлений вызывает болевые ощущения и местную негативную реакцию, что и ускоряет действие препарата.
Известны биологически активные добавки, которые при их введении совместно с действующим началом повышают фармакологическую активность лечебных препаратов за счет оптимизации скорости усвоения действующего начала. Так в противоопухолевое средство (Авторское свидетельство СССР 1683190, опубликованное 20.04.1995) дополнительно вводят
поливинилпирролидон и сорбиновую кислоту. Эти компоненты повышают противоопухолевую активность действующего начала.
В изобретении достигается увеличение скорости наступления лечебного эффекта при сохранении продолжительности действия без увеличения
концентрации действующих вещества в фармацевтическом средстве, за счет введение в состав фармацевтического средства минеральных веществ.
Ниже приведем общие сведения о минеральных веществах.
Минеральные вещества подразделяют на макро- и микроэлементы. К макроэлементам относятся кальций, фосфор, магний, калий, натрий, хлор и сера.
Микроэлементов: железо, медь, марганец, цинк, кобальт, йод, фтор, хром, молибден, ванадий, никель, стронций, кремний, селен признаны необходимыми для жизнедеятельности человека и животных.
Макроэлементы регулируют водно-солевой обмен, поддерживают осмотическое давление в клетках и межклеточных жидкостях, что необходимо для передвижения между ними питательных и лекарственных веществ. Процессы кроветворения происходят с участием железа, меди, марганца, кальция и других минеральных веществ (элементов). Минеральные вещества (микроэлементы) активируют действие ферментов, гормонов, участвуют во всех видах обмена веществ.
Минеральные вещества (Fe, Си, Zn и другие) в растворе (в частности, в фармацевтическом составе) находятся в составе фармацевтически приемлемых солей, например, сукцинатов, хлоридов, карбонатов или сульфатов, а также в составе различных фармацевтически приемлемых комплексных соединений.
Минеральные вещества, соли металлов оказывают противомикробный эффект, инактивируя ферменты, необходимые для жизнедеятельности микроорганизмов. Инактивация ферментов происходит путем взаимодействия ионов металлов с сульфгидрильными группами ферментов.
На слизистые оболочки металлы оказывают выраженное местное действие. При рассматриваемых в заявке концентрациях минеральных веществ, местное действие этих веществ может быть вяжущим или раздражающим.
Механизм местного действия металлов обусловлен их способностью реагировать с белками тканей. В результате такого взаимодействия белки свертываются и образуют с ионами металлов альбуминаты. При этом если происходит частичное свертывание белков только в самых поверхностных слоях тканей, наблюдается вяжущий или раздражающий эффект, имеющий обратимый характер.
Проведенные исследования показали, что минеральные вещества, входящие в состав препаратов, усиливают их лечебный эффект. Обеспечивается это, в основном, за счет явно выраженного раздражающего эффекта на ткани организма, а также путем воздействия на ферментативную систему организма.
Для всех вариантов, рассматриваемых в изобретении фармацевтических составов рациональные диапазоны значений содержания минеральных веществ, следующие:
калий - 0.001 - 158.0;
магний - 0.0001 - 70.3;
железо - 0.007 - 345.
Данные диапазоны частично пересекаются с диапазонами значений
минеральных веществ в БАД (см. патент РФ 2156087). Новизна изобретения обеспечивается за счет использования в фармацевтическом составе полипептида метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His- Phe-Pro-Gly-Pro).
При разработке изобретения установлено, что увеличение скорости
наступления лечебного эффекта, увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат в фармацевтическом составе, повышение
стабильности фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат в течение срока годности, обеспечивается введением в фармацевтический состав определенных минералов (определенной комбинации минералов) в строго определенном для каждого минерала количестве. В результате проведенных исследований для каждого минерала установлен весовой диапазон в фармацевтическом составе. Использование меньшего, чем указано в диапазоне, количества минерального вещества не приводит к достижению технических результатов. Использование большего, чем указано в диапазоне, количества минерального вещества не только не приводит к достижению технических результатов, но ухудшает лечебный эффект от действия пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и препарата 2-этил-6- метил-3- гидроксипиридина сукцинат. Установлено, что с повышением
концентрации минеральных веществ в фармацевтическом составе (выше
заявленных диапазонов) они подавляют действие препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, лечебный эффект от препарата исчезает.
Дополнительное увеличение скорости наступления лечебного эффекта, увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации пептида Met-Glu- His-Phe-Pro-Gly-Pro и препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат в фармацевтическом составе, повышение стабильности фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат в течение срока годности обеспечивается частичным
12
замещением в фармацевтическом составе изотопов углерода С на изотопы углерода 13С.
Перечень фигур чертежей.
На фиг.1 представлена хроматограмма фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro с УФ-детектором (210нм). Сорбент С 18.
На фиг.2 представлена хроматограмма фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro с МС- детектором. Выделен пик с временем
удержания 4.096 мин.
На фиг.З представлена хроматограмма фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro с МС- детектором. Выделен пик с временем удержания 4.664 мин.
На фиг.4 представлена хроматограмма фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro с МС-детектором. Выделен пик с временем
удержания 5.282 мин.
На фиг.5 представлена хроматограмма фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro с МС-детектором. Выделен пик с временем удержания 12.163 мин.
На фиг.6 представлена хроматограмма (левая часть) фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro на колонке с хиральным
сорбентом и с УФ-детектором (220нм).
На фиг.7 представлена хроматограмма (правая часть) фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro на колонке с хиральным
сорбентом и с УФ-детектором (220нм). Выделен пик со временем удержания 5.274. На фиг.8 представлена хроматограмма фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro на колонке с хиральным сорбентом и с МС- детектором (220нм). Выделен пик со временем удержания 5.274.
На фиг.9 представлена хроматограмма фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro на колонке с хиральным сорбентом и с МС- детектором (220нм). Выделен пик со временем удержания 6.366.
На фиг.10 представлена хроматограмма фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro на колонке с хиральным сорбентом и с МС- детектором (220нм). Выделен пик со временем удержания 7.263.
На фиг.11 представлена хроматограмма (левая часть) фармацевтического состава на колонке с хиральным сорбентом и с МС-детектором (220нм). Выделен пик со временем удержания 14.648.
На фиг.12 представлена хроматограмма (правая часть) фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro на колонке с хиральным
сорбентом и с МС-детектором (220нм). Выделен пик со временем удержания 14.648.
На фиг.13 представлен MSMS спектр пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro (левая часть) молекулярного иона со значением Z = 153.5.
На фиг.14 представлен MSMS спектр пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro (правая часть) молекулярного иона со значением Z = 1 3.5.
На фиг.15 представлен масс-спектр высокого разрешения фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro.
На фиг. 16 представлена хроматограмма образца фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат.
На фиг. 17 - 20 представлены хроматограммы образца фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат.
На фиг. 21- 23 представлены хроматограммы образца фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат на хиральной колонке.
На фиг. 24 представлена хроматограмма образца фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат.
На фиг. 25 представлен MSMS иона 438.7. На фиг. 26 представлен MSMS иона 138.
На фиг. 27 представлено определение массовой доли компонентов образца фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат.
На фиг. 28 представлен 1Н- МР-спектр образца фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат в D2O.
На фиг. 29 представлен 'Н-ЯМР-спектр образца фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат в DMSO.
На фиг. 30 - 32 представлены С-ЯМР-спектры образца фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат с подавлением и без подавления.
На фиг. 33 представлен 'Н- МР-спектр образца фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат.
На фиг. 34 и 35 представлены масс-спектры высокого разрешения смеси производных фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат.
На фиг. 36 представлена схема кавитационного реактора для изотопного обогащения различных смесей.
На фиг. 37 представлено поперечное сечение кавитационного реактора.
На фиг. 38 представлена схема установки по изотопному обогащению.
Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения.
Изобретение иллюстрируется представленными ниже примерами.
Пример 1 - способ введения минеральных веществ в воду.
Пример 2 - способ получения фармацевтических составов и проверка на стабильность.
Пример 3 - испытания на общую токсичность.
Примеры 4-8 иллюстрируют эффективность заявленных фармацевтических составов обладающих нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью. Исследования проведены с использованием материалов, опубликованных в источниках /1 - 5/. В заявке, для наглядности, представлены сравнения действия заявленных фармацевтических составов с действием препарата Мексидол. Концентрации пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат выбирались таким образом, чтобы результаты можно было сравнить с результатами применения только препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат.
Пример 1. Введение минеральных веществ в раствор (в воду) осуществляли по методике 161. Существуют и другие способы введения минеральных веществ в раствор. Растворы готовили из чистых металлов при использовании
фармацевтически приемлемых растворителей, обеспечивающих устойчивость растворов при хранении.
Для проведения углубленных исследований, при разработке заявки на изобретение, концентрации металлов в растворах обеспечивались в следующих диапазонах, мг/л:
калий - 0.001 - 158.0;
магний - 0.0001 - 70.3;
железо - 0.007 - 345.
Кроме того, были проведены исследования на сверхбольшое содержание минеральных веществ в составах. Об этих исследованиях будет написано ниже.
Контроль концентраций металлов в растворах осуществляли атомно- абсорбционным методом определения содержания натрия, калия, кальция, магния, железа, марганца, меди, цинка, свинца, кадмия, кобольта, никеля, хрома. П.1.3.2.1 источника 161.
Также исследовались и другие фармацевтические составы, содержащие пептид Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и препарат 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат с минеральными веществами, мг/л:
медь - 0.0003 - 0.5;
марганец - 0.001 - 7.5;
цинк - 0.065 - 72.8;
кобальт - 0.0003 - 0.75;
хром 0.0006 - 1.57;
олибден— 0.0006 - 1.59;
кальций - 0.001 - 5.8;
натрий - 0.019 - 1600. Пример 2. Для примера, опишем получение одного фармацевтического состава с калием, магнием, железом определенной концентрации.
В реактор с мешалкой (объемом 5 л) наливают 4 л воды для инъекций. После чего в реактор загружают пептид Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro - 0.1мг и заливают раствор с калием (общее содержание калия 8.15 мг), заливают раствор с железом (общее содержание железа 49.4 мг), заливают раствор с магнием (общее
содержание магния 1.4 мг) при постоянном перемешивании.
В другой реактор с мешалкой (объемом 5 л) наливают 4 л воды для инъекций. После чего в эту реактор загружают препарат 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 10000мг и заливают раствор с калием (общее содержание калия 8.15 мг), заливают раствор с железом (общее содержание железа 49.4 мг), заливают раствор с магнием (общее содержание магния 1.4 мг) при постоянном
перемешивании.
После чего полученные растворы сливают в реактор с мешалкой (объемом 12 л), доводят рН раствора до значения 4,5. Полученный раствор доводят до объема 10 л водой для инъекций и пропускают через фильтр. При необходимости, с целью повышения или понижения концентрации действующих веществ,
фармацевтический состав могут подвергать лиофилизации. При необходимости уменьшить концентрацию пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил- 6-метил-З- гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ, например, в два раза, в полученный раствор добавляли 10 л воды. Смешение раствора с водой осуществляли в реакторе с мешалкой объемом более 22 л. Таким образом, были получены все составы, указанные в таблицах 1 - 24.
Контроль показал качественное выполнение фармацевтического состава.
Проведены лабораторные исследования заявленных фармацевтических составов.
В заявке на фиг. 1 - 35 проиллюстрированы исследования отдельно раствора с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат (фиг. 1 - 15) и с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro (фиг. 16 - 35) перед их смешением в реакторе объемом 12 л. На фиг.1-12 представлены хроматограммы исследованного образца фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и
минеральными веществами.
На фиг. 13 и 14 представлены MSMS спектры фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro.
А на фиг.15 представлен масс-спектр высокого разрешения
фармацевтического состава с пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro.
На фиг. 16 - 24 представлены хроматограммы образца фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат.
На фиг. 25 и 26 представлены MSMS иона 438.7 и иона 138.
На фиг. 27 представлено определение массовой доли компонентов образца фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат.
На фиг. 28 - 33 представлены !Н-ЯМР и 13С-ЯМР-спектры образца
фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат в D2O.
На фиг. 34 и 35 представлены масс-спектры высокого разрешения смеси производных фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат.
Остальные заявленные и описанные в заявке фармацевтические составы также подвергались лабораторным исследованиям. Хроматограммы образцов
фармацевтических составов с другим составом минеральных веществ аналогичны (различия малы и на графиках соизмеримы с толщенной линии).
Кроме того, исследованы электрические характеристики фармацевтических составов с препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и пептидом Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro. Установлено, что действующие вещества и
минеральные вещества присутствуют в фармацевтическом составе в количествах, обеспечивающих при температуре 253 - 773К, частоте электрического или электромагнитного поля в диапазоне от 50 Гц до 100Гц, значение действительной составляющей относительной диэлектрической проницаемости в диапазоне от 5 до 80. Диэлектрическая проницаемость фармацевтического состава характеризует его способность к накоплению электрических зарядов. Установлено, что величина действительной составляющей относительной диэлектрической проницаемости может изменяться путем изменения концентрации (содержания) пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ. Целесообразно, для повышения фармацевтического действия обеспечивать значение действительной составляющей относительной диэлектрической проницаемости в диапазоне от 5 до 80. Если её значение будут ниже или выше, то эффективность действия
фармацевтического состава может уменьшаться. Поэтому в исследованиях показатель «действительная составляющая относительной диэлектрической проницаемости» являлся контрольным, своего рода критерием применимости фармацевтического состава.
Пример 3. Испытания на общую токсичность проводили путем
внутрибрюшинного введения фармацевтических составов на базе пептида Met- Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ крысам.
Для проведения исследований концентрации компонентов в растворах выбраны, мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат—300 ' 10 ;
полипептид метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин- пролин - 30;
калий - 275.0;
магний - 105.0;
железо 556.0;
цинк 126.0;
марганец— 25.5;
медь 5.7;
кобальт 2.35;
хром 5.3;
молибден - 5.3;
кальций - 15.3;
натрий - 1890.0.
составляет величину до 1000 мг/кг при внутрибрюшинном введении. При внутримышечном введении LD5o составляет величину до 3000 мг/кг, что позволяет отнести заявляемые составы к нетоксичным веществам.
При длительном применении фармацевтических составов на базе пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ у крыс не выявило изменений со стороны органов и тканей организма (были несущественные).
Пример 4. Антиоксидантную активность фармацевтических составов на базе пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат ,минеральных веществ и содержащих изотопы 13С, сравнивали с антиоксидантной активностью препарата Мексидол
хемилюминесцентным методом 111.
В фармацевтических составах содержание пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly- Pro - 0.5мг/л, содержание препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 50 000 мг/л. Препарат Мексидол содержал пептид Met-Glu-His-Phe-Pro- Gly-Pro - 50 000г/л. Порядковые номера фармацевтических составов 49 - 56 (см. таблицу 7).
Также сравнивали действие препарата Мексидол, с фармацевтическими составами на базе пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6- метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода 13С равным 0.5% и 75% от всего углерода в фармацевтическом составе (см. таблицу 8 и 9).
Результаты сравнения фармацевтических составов с препаратом Мексидол приведены в таблице 25.
Установлено, что по антиоксидантной активности (АО А) фармацевтические составы на базе пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил- 3- гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ в основном превосходили Мексидол на величину до 24 %.
Также установлено, что по антиоксидантной активности фармацевтические составы на базе пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил- 3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода С до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе в основном превосходили Мексидол на величину до 29 %. Фармацевтические составы с порядковыми номерами 49, 57 и 65 не превосходили Мексидол.
Фармацевтические составы с порядковыми номерами 55 и 56 по АОА практически не превосходили фармацевтический состав с порядковым номером 54.
Фармацевтические составы с порядковыми номерами 63 и 64 по АОА не превосходили фармацевтический состав с порядковым номером 62.
Фармацевтические составы с порядковыми номерами 71 и 72 по АОА не превосходили фармацевтический состав с порядковым номером 70. У составов 71 и 72 наблюдалось некоторое снижение АОА.
Следовательно, фармацевтические составы с порядковыми номерами 55 и 56, 63 и 64, 71 и 72 применять в качестве антиоксидантного средства экономически не целесообразно (затратно). Кроме того, по АОА составы с порядковыми номерами 56, 64 и 72 несколько уступали Мексидолу. Исследовали также АОА
фармацевтических составов с порядковыми номерами 169 - 192.
Установлено, что по антиоксидантной активности эти фармацевтические составы в основном превосходили Мексидол на величину до 5 %.
Исследования на антиоксидантную активность фармацевтических составов также проведены по методике /8/. Результаты аналогичны вышеприведенным.
Пример 5. Противогипоксическую и нейрометаболическую активность фармацевтических составов на базе пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и содержащих изотопы углерода 13С, сравнивали с активностью препарата Мексидол.
Сравнения выполнены на белых нелинейных мышах (самцах) массой 25 - 27 г по острой гипоксии /9, 10/.
Острую гипоксию (нормобарическую гипоксическую гипоксию)
моделировали путем помещения мышей в термокамеру объемом 250 см3.
В опытах регистрировали продолжительность жизни животных после прекращения доступа воздуха в термокамеру. Животные помещались в
термокамеру поодиночке.
Мексидол вводили однократно внутрибрюшинно за 30, 60 и 90 минут до помещения мышей в термокамеру и прекращения доступа воздуха в термокамеру. Время от момента введения препарата до помещения мышей в термокамеру и прекращения доступа воздуха в таблицах обозначено Тв в минутах.
Каждый из фармацевтических составов на базе пептида Met-Glu-His-Phe-Pro- Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ, вводили однократно внутрибрюшинно также за 30, 60 и 90 минут до помещения мышей в термокамеру и прекращения доступа воздуха в термокамеру.
После помещения мышей в термокамеру, по мере потребления кислорода концентрация его в воздухе и в организме мышей снижалась, а количество углекислого газа возрастало. В результате у животных развивалась острая гипоксическая гипоксия. Продолжительность жизни (до остановки дыхания) регистрировали с помощью секундомера и по ее увеличению судили об
эффективности испытанных препаратов.
Результаты сравнения противогипоксической и нейрометаболической активности фармацевтических составов на базе пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly- Pro, препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и содержащих изотопы углерода 13С, с противогипоксической
активностью препарата Мексидол приведены в таблицах 26 - 29.
На модели острой нормобарической гипоксической гипоксии (в термокамере) установлено, что большая часть фармацевтических составов на базе пептида Met- Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ увеличивала продолжительность жизни мышей на величину до 16% по сравнению с Мексидол ом.
Установлено увеличение скорости наступления лечебного эффекта при сохранении продолжительности действия без увеличения концентрации
фармацевтического средства. Это хорошо видно в таблице 29. Заявленные препараты увеличивают скорость наступления лечебного эффекта, что сближает значения продолжительности жизни при Тв = ЗОмин и Тв =60мин и 90 мин.
Достигнуто увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации и количества пептида Met-Glu-His-Phe-Pro- Gly-Pro и препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат.
Сравнения также проведены на моделях: острой гипобарической гипоксии в вытяжной барокамере с имитацией подъема животных со скоростью 50 м/с до высоты 11000 м; острой гемической гипоксии и острой гистотоксической гипоксии.
Результаты этих сравнений аналогичны, результатам, полученным на модели острой нормобарической гипоксической гипоксии.
Кроме того, были проведены исследования по повышению концентрации пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro до величины ЗОмг/л и препарата 2-этил-6- метил-3- гидроксипиридина сукцинат до величины ЗООг/л. Наблюдалось повышение эффективности действия по сравнению с лучшими вышеупомянутыми фармацевтическими составами на базе пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат. Однако повышение эффективности не превышало 3-5%. Повышение концентрации пептида Met-Glu- His-Phe-Pro-Gly-Pro более ЗОмг/л, в частности, до 100мг/л не приводило к повышению эффективности по сравнению с лучшими фармацевтическими составами.
Также эффективность действия Мексидола соравнивали с эффективностью действия фармацевтических составов N°Ns! 1 - 48. Установлено, что составы N2N2 1 - 24 превосходят действие Мексидола примерно на 3%. Составы 25 - 48 по своему действию превосходят действие Мексидола не более чем на 5%.
Пример 6. Нейропроте торное действие фармацевтических составов на базе пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и содержащих изотопы углерода 13С сравнивали с нейропротекторным действием препарата Мексидол.
При сравнении содержание препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 10 г/л, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro - 0.1мг/л, Мексидол - 10 г/л (разбавлен водой 1 :5) .
Сравнительные исследования выполнены на белых нелинейных крысах- самцах массой 250-270 г, у которых моделировали ишемический инсульт и геморрагический инсульт.
Ишемический инсульт у крыс воспроизводили двусторонней перевязкой общих сонных артерий. Подопытным животным вводили внутрибрюшинно
Мексидол и заявленные фармацевтические составы с порядковыми номерами от 25 по 48. Характеристики этих фармацевтических составов приведены в таблицах 4 - 6.
Животных после операции наблюдали в течение 2 недель с учетом
выживаемости крыс. Неврологический дефицит у животных определяли каждый час в течение первых 24 ч, а затем 1 раз в сутки. Тяжесть состояния определяли по сумме соответствующих баллов.
Результаты исследования нейропротекторного действия препаратов
представлены в таблице 30. Анализ результатов, приведенных в таблице показал, что у крыс, получивших внутрибрюшинно Мексидол, неврологический дефицит был максимально выражен (5.3±0,1 балла) через 3, 4 и 5 сутки после двусторонней перевязки общих сонных артерий. Количество крыс в опыте - 12. Из них погибло 2 животных (16.67%).
В опытах было установлено, что составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и изотопов углерода |3С в дозах 20 мг в сутки на крысу оказывает выраженное нейропротекторное действие, в целом превосходя по выраженности действия в отношении неврологического дефицита Мексидола.
Было проведено 24 опыта с крысами, получившими внутрибрюшинно фармацевтический состав на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и изотопов углерода 13С. Количество крыс в каждом опыте - 12. В опытах погибало 10-15% животных.
Фармацевтические составы с порядковыми номерами 25, 33 и 41, а также 31, 32, 39, 40, 47, 48 по нейропротекторному действию не превосходят Мексидол (Смотри таблицу 30). Нейропротекторные действия остальных составов
превосходят нейропротекторное действие Мексидола.
Наиболее выраженое нейропротекторное действие у фармацевтических составов с порядковыми номерами 29, 30, 37, 38, 45, 46.
Однако следует учесть следующее. Фармацевтический состав 30 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 29. Поэтому состав 30 использовать не целесообразно. Фармацевтический состав 38 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 39. Поэтому состав 38 использовать не целесообразно.
Фармацевтический состав 46 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 45. Поэтому состав 46 использовать не целесообразно.
Геморрагический инсульт (ГИ) у крыс воспроизводили моделированием локального кровоизлияния в головном мозге (создание ГИ с ишемией мозга) проводили по методике /11/. В соответствие с методикой проводили трепанацию черепа крысы и деструкцию мозговой ткани в области внутренней капсулы с последующим введением в место повреждения крови этой же крысы (0,03 мл крови). Таким образом, достигали инсульт в области внутренней капсулы практически без повреждений соседних тканей мозга.
Фармацевтический состав на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и изотопов углерода 13С вводили животным внутрибрюшинно в дозе 20мг в сутки на крысу. Мексидол вводили животным внутрибрюшинно также в дозе 20мг в сутки на крысу. Схема введения была следующей: первую инъекцию осуществляли через 2 ч после операции, потом 3 инъекции через 4 ч. Затем фармацевтический состав на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и минеральных веществ, а также Мексидол вводили ежедневно один раз в сутки в течение 14 суток.
В течение 14 суток после операции оценивали координацию движений на вращающемся стержне в течение 2 минут и способность препаратов повышать выживаемость животных (см. таблицу 31).
Установлено, что фармацевтические составы с порядковыми номерами 25, 33 и 41, 31, 32, 39, 40, 47, 48 по координации движения на вращающемся стержне практически не превосходят Мексидол. Нейропротекторные действия остальных составов превосходят нейропротекторное действие препарата Мексидол.
Координация движения крыс заметно повышается при применении
составов с порядковыми номерами 28 - 30 (см. характеристики составов в таблице 4), 36-48 (см. характеристики составов в таблице 5), 44-46 (см. характеристики составов в таблице 6). Однако следует учесть следующее. Фармацевтический состав 30 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 29. Поэтому состав 30 использовать на практике не
целесообразно.
Фармацевтический состав 38 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 37. Поэтому состав 38 использовать на практике не
целесообразно.
Фармацевтический состав 46 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 45. Поэтому состав 46 использовать на практике не
целесообразно.
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и изотопов углерода 13С повышают (по сравнению с Мексидолом) выживаемость крыс после операций.
Кроме того, были проведены исследования по повышению концентрации препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат до ЗООг/л и выше, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro до величины ЗОмг/л и выше. Наблюдалось повышение эффективности действия составов с повышенными концентрациями по сравнению с лучшими вышеупомянутыми фармацевтическими составами на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His- Phe-Pro-Gly-Pro (См. таблицу 30). Эффективность действия повышалась на 3-5%. Дальнейшее повышение концентрации препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro приводило к снижению эффективности по сравнению с лучшими вышеупомянутыми
фармацевтическими составами.
Также эффективность действия Мексидола соравнивали с эффективностью действия фармацевтических составов N2N2 1 - 48, 169 - 192. Установлено, что составы N°N° 1 - 24, 169 - 192 превосходят действие Мексидола примерно на 3%. Составы 25 - 48 по своему действию превосходят действие Мексидола не более чем на 5%.
Пример 7. Антиа нестичес ое действие фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His- Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и изотопов углерода С, сравнивали с антиамнистическим действием препарата Мексидол.
Сравнения выполнены на белых нелинейных мышах (самцах) массой 25 - 27 г.
Влияние фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и изотопов углерода 13 С, и препарата Мексидол на амнезию (процессы обучения и памяти) у мышей исследовали, используя условную реакцию
пассивного избегания электрокожного раздражения. Мышей подвергали
воздействию электросудорожного шока (ток 30 мА в течение 0.3-0.5с к ушным раковинам) сразу после обучения условной реакции пассивного избегания (модель амнезии, вызванной электросудорожным шоком) /10, 12/.
Влияние фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и изотопов углерода 13 С, и препарата Мексидол на амнезию также оценивали на модели скополаминовой амнезии после обучения условной реакции пассивного избегания /10/.
Препараты вводили однократно внутрибрюшинно за 30, 60 и 90 минут до обучения мышей. Сохранность условной реакции пассивного избегания проверяли через 24 ч после амнезирующего воздействия.
На модели амнезии, вызванной электросудорожным шоком, было
обнаружено, что у мышей фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6- метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и изотопов углерода 13С, а также препарат Мексидол активно предупреждают развитие амнезии условной реакции пассивного избегания (см. таблицу 32).
Анализ таблица 32 показывает, что фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His- Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и изотопов углерода С увеличивают скорость наступления лечебного эффекта при сохранении продолжительности действия без увеличения концентрации действующих веществ в фармацевтическом средстве. Вышеперечисленные эффекты могут быть достигнуты и за счет применения Мексидола путем увеличения дозы Мексидола или его концентрации в дозе. В опытах (см. таблицу 32) количество Мексидола было увеличено с 20 мг до 40 мг на мышь.
На модели скополаминовой амнезии было обнаружено, что у мышей фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и
13
изотопов углерода С, а также препарат Мексидол также предупреждают развитие амнезии условной реакции пассивного избегания (см. таблицу 33).
Фармацевтические составы на базе пептида препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ
13
и изотопов углерода С увеличивают скорость наступления лечебного эффекта при сохранении продолжительности действия без увеличения концентрации фармацевтического средства.
Увеличение скорости наступления лечебного эффекта и увеличение
лечебного эффекта за счет использования Мексидола может быть достигнуто путем увеличения его количества в инъекции.
Пример 8. Противоишемическое действие фармацевтических составов на базе пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и изотопов углерода С, сравнивали с противоишемическим действием препарата Мексидол. Результаты сравнения представлены в таблицах 34 и 35.
Исследования проведены на белых нелинейных мышах (самцы) массой 35 -
37г.
Ишемию головного мозга воспроизводили путем перевязки обеих общих сонных артерий. Животных после операции наблюдали в течение 7 дней.
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и минеральных веществ, и препарат Мексидол вводили внутрибрюшинно в течение 7 дней. В первый день препараты вводились дважды: сразу после операции и через 3 часа после операции. Во второй, третий, и т.д. до седьмого дня препараты вводились один раз в сутки. После двусторонней перевязки общих сонных артерий (и не использовании вышеуказанных препаратов) более 90% мышей погибали в течение наблюдаемых дней.
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и изотопов углерода 13С, а также препарат Мексидол существенно увеличивали выживаемость мышей в период наблюдения. При этом концентрация пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro составляла от 0.1 до ЗОмг/л. Концентрация препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат составляла 1г/л и 300 г/л. Из таблиц 34 и 35 видно, что выживаемость мышей при использовании
большинства фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и изотопов углерода 13С выше, чем выживаемость мышей при
использовании препарата Мексидол.
Установлено, что с увеличением количества минеральных веществ в составах их действие усиливается.
Таким образом, описано применение и подтверждены технические результаты первого (по нумерации формулы изобретения) состава, содержащего, мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат— 0.4 10 3 - 300 10 3;
полипептид метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин- пролин - 0.1 - 30;
калий - 0.001 - 158.0;
магний - 0.0001 - 70.3;
железо - 0.007 - 345.
Также, описано применение и подтверждены технические результаты второго (по нумерации формулы изобретения) состава,содержащего, мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 0.4 10 3 - 300 10 3 ;
полипептид метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин- пролин - 0.1 - 30;
калий - 0.001 - 158.0;
магний - 0.0001 - 70.3;
железо - 0.007 - 345, и при этом фармацевтический состав содержит изотопы углерода С, и отношение количества изотопов углерода 13С к общему количеству углерода в фармацевтическом составе составляет величину от 0.005 до 0.75 (от 0.5% до 75%) Проведены также исследования составов содержащих:
полипептид метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин- пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro), препарат 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и минеральные вещества при следующем
соотношении компонентов в мг/л:
калий - 0.001 - 158.0;
магний - 0.0001 - - 70.3;
железо - 0.007 - 345;
медь 0.0003 - 0.5;
марганец - 0.001 - 7.5
цинк - 0.065 - 72.8
кобальт 0.0003 - 0.75;
хром - 0.0006 - 1.57;
молибден - 0.0006 - 1.59;
кальций - 0.001 - 5.8;
натрий - 0.019 - 1600.
Проведены также исследования составов содержащих:
полипептид метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин- пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro), препарат 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральные вещества и изотопы углерода 13С (от 0.5 до 75%) при следующем соотношении компонентов в мг/л:
калий - 0.001 - 158.0;
магний - 0.0001 - - 70.3;
железо - 0.007 - 345;
медь 0.0003 - 0.5;
марганец - 0.001 - 7.5
цинк - 0.065 - 72.8
кобальт - 0.0003 - 0.75;
хром - 0.0006 - 1.57; молибден - 0.0006 - 1.59;
кальций - 0.001 - 5.8;
натрий - 0.019 - 1600.
Состав минеральных веществ в выше описанных фармацевтических составах был ограничен перечнем минеральных веществ (макроэлементов и
микроэлементов) в «Руководстве по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. - М.: Федеральный центр
Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004, - 240с». В Руководстве описан метод введения минеральных веществ в раствор, а также методы точного контроля количества минеральных веществ в растворах.
В вышеперечисленных вариантах составов приведены диапазоны весовых значений (в мг/л) компонентов составов, которые по сравнению с прототипом (Мексидол) дают эффект (по техническим результатам) более чем на 3-5%.
Для практической реализации заявленных в изобретении составов, дополнительно к указанным в них минеральным веществам могут быть добавлен любой или добавлены любые из нижеприведенных (за исключением уже указанных в составе минеральных веществ), мг/л:
калий - 0.001 - 158.0;
магний - 0.0001 - 70.3;
железо - 0.007 - 345;
медь - 0.0003 - 0.5;
марганец - 0.001 - 7.5
цинк - 0.065 - 72.8
кобальт - 0.0003 - 0.75;
хром - 0.0006 - 1.57;
молибден - 0.0006 - 1.59;
кальций— 0.001 —5.8;
натрий - 0.019 - 1600.
Например, первый состав может быть выполнен следующим образом:
Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной,
антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической,
нейрометаболической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат, полипептид метионин-глутамин-гистидин- фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro),
отличающийся тем, что дополнительно содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 0.4 10 3 - 300 10 3;
полипептид метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин- пролин - 0.1 - 30;
калий - 0.001 - 158.0;
магний - 0.0001 - 70.3;
железо - 0.007 - 345;
молибден - 0.0006 - 1.59.
Или может быть выполнен следующим образом:
Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной,
антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической,
нейрометаболической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6- метил-3 -гидроксипиридина сукцинат, полипептид метионин-глутамин-гистидин- фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro),
отличающийся тем, что дополнительно содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат— 0.4 10 3 - 300 10 3;
полипептид метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин- пролин - 0.1 - 30;
калий - 0.001 - 158.0;
магний - 0.0001 - 70.3;
железо - 0.007 - 345;
кобальт - 0.0003 - 0.75;
молибден - 0.0006 - 1.59.
В настоящее время в Мире изотопы углерода С широко применяются в биохимии и медицине для диагностики. В заявке представлены результаты собственных исследований по влиянию изотопов углерода С на стабильность и эффективность действия лекарственных составов на базе пептида Met-Glu-His-Phe- Pro-Gly-Pro и препарата 2-этил-6-метил-3 -гидроксипиридина сукцинат. Установлено, что повышение стабильности заявленного фармацевтического состава в течение срока годности может быть достигнуто за счет замены (от 0.5% до 75%) изотопов углерода С на изотопы углерода С. Установлено, что изотопы углерода 13С в молекулах пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и молекулах 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат замедляют происходящие в молекулах химические реакции, формируют более прочные ковалентные связи, чем изотопы углерода 12С.
Изотопы углерода С повышают сопротивляемость молекул к
окислительному воздействию радикалов.
Изотопы углерода , 3С не токсичны. Проведенные эксперименты показывают, что кормление мышей и крыс пищей, обогащенной на 75% углеродом 13С, не приводит к побочным эффектам и ухудшению их здоровья.
В процессе экспериментальной проверки, заявленных фармацевтических составов, обогащенных изотопами углерода С установлено, что эти составы обладают повышенной стабильностью, они не токсичны и, кроме того, обладают повышенной нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной,
противогипоксической, противоишемической активностью по сравнению с фармацевтическим составом, в котором отсутствуют изотопы углерода С.
Способы производства стабильного высокообогащенного нерадиоактивного изотопа углерода- 13 широко применяются в российской и мировой
промышленности. Хорошо отработаны способы получения изотопа углерода- 13 методом газовой диффузии через пористые перегородки, диффузии в потоке пара, термодиффузии, а также методом дистилляции, изотопного обмена,
центрифугирования, электролиза, генной инженерии и др. Краткая характеристика этих методов приведена в источнике /13/.
В Московской государственной академии тонкой химической технологии им. М.В. Ломоносова отрабатывают современные нанотехнологии получения и включения атомов стабильных изотопов углерода 13С в молекулы различной структуры. В академии получают молекулы изотопномеченных соединений с различными уровнями изотопного обогащения - от долей процентов до ста процентов изотопов в веществе. Работы ведутся в интересах медицинской диагностики. В источнике /14/ приведено 165 ссылок на иностранные источники информации по изотопному обогащению различных веществ.
В свою очередь, авторы активно участвовал в работах по изотопному обогащению углеводородов, а также реагентов для получения различных
лекарственных препаратов. Обогащение реагентов изотопами углерода 13С
(замещение изотопов углерода С на изотопы углерода С) осуществляли в кавитационном реакторе конструкции профессора Кормилицына В. И. (Московский Энергетический Институт - технический университет).
Реактор был изготовлен по методике, приведенной в источнике /15/. Скорость течения в реакторе, по длине канала, изменялась от 10м/с до 50м/с.
На фиг.36 представлена схема кавитационного реактора для изотопного обогащения различных смесей, в частности, углеводородных реагентов для получения пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, обогащенных изотопами углерода 13С. Реактор расположен в установке, которая содержит насос 6НК-6х1, обеспечивающий максимальный расход 90 м /час, напор 125 м при мощности электродвигателя 75кВт, частоте оборотов ротора электродвигателя и колеса насоса 2950 об/мин. Дополнительно установка содержит емкости для реагентов и измерительные приборы.
Обогащение 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат изотопами углерода 13С осуществляют аналогично.
Схема установка представлена на фиг.38.
Кавитационный реактор 1 (см. фиг.36) выполнен в виде плоского сопла Лаваля с телами кавитации 2-9 в канале 10.
На фиг.37 представлено поперечное сечение кавитационного реактора. Канал реактора в области тел кавитации разделяется на несколько каналов. Например, тела кавитации 5 и 6 разделяют канал на более мелкие каналы 13, 14 и 15. Снаружи канал ограничивают стенки 16 и 17, а также две крышки 1 1 и 12.
На фиг.16 стрелками 18 показано направление движения реагента на входе в реактор, стрелкой 19 показано направление движения реагента на выходе из реактора. В стенке 16 выполнены каналы 24 и 25 для подачи в зоны кавитации двуокиси углерода и азота.
Установка работает следующим образом. Углеводородный реагент из емкости 28 с помощью насоса 26 прокачивается через реактор 27 и поступает обратно в емкость 28. Падение давления на реакторе контролируется манометрами 29 и 30. Температура реагента контролируется по термометру 31. Подогрев реагента в емкости осуществляют нагревателем 32.
При работе реактора углеводородный реагент движется по каналу кавитатора в направлении 18. При обтекании тел кавитации поток разделяется на несколько потоков. За телами кавитации возникают области кавитации. В частности, за телами (если смотреть по направлению движения реагента) кавитации 2, 3 и 4 располагаются зоны кавитации 20, 21, 22 и 23. При входе в область кавитации реагент «закипает», возникают кавитационные пузырьки, при выходе из области кавитации кавитационные пузырьки схлопываются. При этом, в области (в месте) схлопывания кавитационного пузырька наблюдается повышение давления до нескольких тысяч атмосфер и повышение температуры до тысячи и более градусов Цельсия. Через каналы 24 и 25 в поток подается двуокись углерода таким образом, чтобы газ попал в зоны кавитации.
Парогазовая смесь, полученная в реакторе совместно с жидким реагентом поступает в емкость 28. Далее парогазовая смесь по трубопроводу 33 поступает в сепаратор с пористой перегородкой, где парогазовые смеси с 13С и 12С разделяются.
В экспериментах реактор работал от нескольких часов до нескольких суток. Установлена прямая зависимость степени обогащения парогазовой смеси и реагента изотопом С от времени работы кавитационного реактора.
Контроль количества изотопов углерода 13С осуществлялся масс- спектроскопией высокого разрешения.
В результате экспериментов было достигнуто обогащение реагента изотопом углерода 13С до 75%.
Таким образом, были получены фармацевтические составы, содержащие пептид Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro с содержанием изотопа углерода 13С от 0.5% до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе. Обогащение 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат изотопами углерода 13С осуществляют аналогично.
Кроме того, проведены работы по обогащению реагентов для получения различных лекарственных препаратов изотопами 15N.
Замещение изотопов азота 14N на изотопы азота 15N осуществляли в вышеописанном кавитационном реакторе. При работе реактора реагент движется по каналу кавитатора в направлении 18. При обтекании тел кавитации поток разделяется на несколько потоков. За телами кавитации возникают области кавитации. При входе в область кавитации реагент «закипает», возникают кавитационные пузырьки, при выходе из области кавитации кавитационные пузырьки схлопываются. В эксперимента через каналы 24 и 25 в поток подавали подогретый до 100 - 150°С азот таким образом, чтобы газ попал в зоны кавитации.
Парогазовая смесь, полученная в реакторе совместно с реагентом поступает в емкость 28. Далее парогазовая смесь по трубопроводу 33 поступает в сепаратор с пористой перегородкой, где парогазовые смеси с 14N и 15N разделяются.
В результате экспериментов было достигнуто обогащение реагента изотопом азота 15N до 13.75%. Значение показателя «п» принимало значения от 0.01% до 13.75%.
Показатель «п» определяли по формуле
n = n15N!00% / (η14Ν+η15Ν),
где η15Ν - количество изотопов азота с относительной атомной массой 15.0037;
η14Ν - количество изотопов азота с относительной атомной массой
14,0067.
Таким образом, были получены следующие фармацевтические составы, обладающие нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной,
противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью.
А. Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной,
антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической,
нейрометаболической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат, полипептид метионин-глутамин-гистидин- фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro), отличающийся тем, что дополнительно содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 0.4 10 3 - 300 10 3;
полипептид метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин- пролин - 0.1 - 30;
калий - 0.001 - 158.0;
магний - 0.0001 - 70.3;
железо - 0.007 - 345,
и при этом фармацевтический состав выполнен таким образом, что содержит изотопы азота 15Ν , и отношение количества изотопов азота 15N к общему количеству азота в фармацевтическом составе составляет величину от 0.0001 до 0.1375.
Б. Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной,
антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической,
нейрометаболической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6- метил-3 -гидроксипиридина сукцинат, полипептид метионин-глутамин-гистидин- фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro),
отличающийся тем, что дополнительно содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 0.4 ' 10 - 300 ' 10 ;
полипептид метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин- пролин - 0.1 - 30;
калий - 0.001 - 158.0;
магний - 0.0001 - 70.3;
железо - 0.007 - 345,
и при этом фармацевтический состав выполнен таким образом, что содержит изотопы углерода 13С, и отношение количества изотопов углерода 13С к общему количеству углерода в фармацевтическом составе составляет величину от 0.005 до 0.75;
и, кроме того, фармацевтический состав содержит изотопы азота 15Ν , и отношение количества изотопов азота 15N к общему количеству азота в фармацевтическом составе составляет величину от 0.0001 до 0.1375. Таким образом, при реализации заявленных фармацевтических составов обеспечивается:
- увеличение скорости наступления лечебного эффекта (уменьшение времени наступления лечебного эффекта) при сохранении продолжительности действия без увеличения концентрации полипептида метионин-глутамин-гистидин- фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro) и препарата 2- этил-6-метил-З-гидроксипиридина сукцинат при лечении расстройства нервной системы, ишемии и гипоксии центральной нервной системы и миокарда, амнезии, а также при повышении активности эндогенной системы и уменьшении
интенсивности свободнорадикальных процессов;
- увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации полипептида метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His- Phe-Pro-Gly-Pro) и препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат при лечении расстройства нервной системы, ишемии и гипоксии центральной нервной системы и миокарда, амнезии, а также при повышении активности эндогенной системы и уменьшении интенсивности свободнорадикальных процессов;
- повышение стабильности фармацевтического состава с полипептидом метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His- Phe-Pro-Gly-Pro) и препаратом 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат в течение срока годности.
Таблица 1
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и минеральных веществ
Figure imgf000042_0001
*) нумерация фармацевтических составов сквозная.
Таблица 2
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода С равным 0.5% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000042_0002
Таблица 3
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и с содержанием и пзооттооппоовв ууггллееррооддаа 13СС ррааввнньым 75% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000043_0001
Таблица 4
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и минеральных веществ
Figure imgf000043_0002
Таблица 5
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода С равным 0.5% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000044_0001
Таблица 6
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных
1 1
веществ и с содержанием и пзооттооппоовв ууггллееррооддаа 13СС ррааввнньым 75% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000044_0002
Таблица 7
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и минеральных веществ
Figure imgf000045_0001
Таблица 8
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и с содержанием и [ззооттооппоовв ууггллееррооддаа 13СС ррааввнныым 0.5% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000045_0002
Таблица 9
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и с содержанием и взооттооппоовв ууггллееррооддаа 13СС ррааввнньым 75% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000046_0001
Таблица 10
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и минеральных веществ
Figure imgf000046_0002
Таблица 11
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и с содержанием и ззооттооппоовв ууггллееррооддаа 13СС ррааввнныым 0.5% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000047_0001
Таблица 12
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и с содержанием и пзооттооппоовв ууггллееррооддаа 1133СС ррааввнньым 75% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000047_0002
Таблица 13
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и минеральных веществ
Figure imgf000048_0001
Таблица 14
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и с содержанием и ззооттооппоовв ууггллееррооддаа ,3СС ррааввнныым 0.5% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000048_0002
Таблица 15
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода 13С равным 75% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000049_0001
Таблица 16
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и минеральных веществ
Figure imgf000049_0002
Таблица 17
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и с содержанием и ззооттооппоовв ууггллееррооддаа 13СС ррааввнныым 0.5% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000050_0001
Таблица 18
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода С равным 75% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000050_0002
Таблица 19
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и минеральных веществ
Figure imgf000051_0001
Таблица 20
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода С равным 0.5% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000051_0002
Таблица 21
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода 13С равным 75% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000052_0001
Таблица 22
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и минеральных веществ
Figure imgf000052_0002
*) нумерация фармацевтических составов сквозная. Таблица 23
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода 13С равным 0.5% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000053_0001
Таблица 24
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, минеральных веществ и с содержанием и взооттооппоовв ууггллееррооддаа 13СС ррааввнньым 75% от всего углерода в фармацевтическом составе
Figure imgf000053_0002
Таблица 25
Результаты сравнения антиоксидантной активности Мексидола, содержащего 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат 50г/л, с антиоксидантной активностью фармацевтических составов на базе препарата 2- этил-6-метил-З-гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro минеральных веществ, а также содержащих изотопы углерода 13С (порядковые номера фармацевтических составов 49 - 72)
Figure imgf000054_0001
62 4.41
63 3.51
64 3.48
65 3.51
66 3.91
67 4.05
68 4.35
69 4.53
70 4.53
71 3.50
72 3.49
Таблица 26
Результаты проверю! противогипоксической активности препарата Мексидол, доза^ 100мг (одна ампула с содержанием препарата 2- метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 50г/л)
Figure imgf000055_0001
*) доза препарата на одну мышь.
**) среднее время по испытуемым мышам в опыте. Таблица 27
Результаты проверки противогипоксической активности фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro и минеральных веществ.
Доза 100 мг. Средняя продолжительность жизни, мин
Figure imgf000056_0001
Таблица 28
Результаты проверки противогипоксической активности фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro минеральных веществ и изотопов углерода 13С. Доза препарата 100 мг.
Средняя продолжительность жизни, мин
Figure imgf000056_0002
Таблица 29
Результаты проверки противогипоксической активности фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro минеральных веществ и изотопов углерода 13С. Доза препарата 100 мг.
Средняя продолжительность жизни, мин
Figure imgf000057_0001
Таблица 30
Результаты проверки нейропротекторного действия (на модели ишемического инсульта) фармацевтических составов на базе пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly- Pro, препарата 2-этил-6-метил-3 -гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С и нейропротекторного действия препарата
Мексидол. Измерения в баллах, М±т, где т=0.1
Figure imgf000057_0002
Фармацевтические составов на базе пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ
Фарм. состав N9.25 5.0 5.1 5.2 5.3 5.4 5.3 5.2 5.1 5.0 5.0
Фарм. состав N<>26 4.7 4.7 4.7 4.7 4.7 4.6 4.5 4.4 4.4 4.3
Фарм. состав 27 4.5 4.5 4.6 4.6 4.6 4.5 4.5 4.5 4.5 4.5
Фарм. состав N228 4.3 4.4 4.6 4.6 4.6 4.5 4.4 4.4 4.4 4.4
Фарм. состав 29 4.2 4.3 4.4 4.5 4.5 4.5 4.4 4.3 4.3 4.3
Фарм. состав ЗО 4.2 4.3 4.4 4.5 4.5 4.5 4.4 4.3 4.3 4.3
Фарм. состав N°31 5.0 5.1 5.2 5.3 5.4 5.3 5.2 5.1 5.0 5.0
Фарм. состав 32 5.1 5.1 5.2 5.4 5.4 5.4 5.3 5.2 5.1 5.0
Фарм. состав NQ33 5.0 5.1 5.2 5.3 5.4 5.3 5.2 5.1 5.0 5.0
Фарм. состав Ns34 4.7 4.7 4.7 4.7 4.7 4.6 4.5 4.4 4.4 4.3
Фарм. состав 35 4.5 4.5 4.6 4.6 4.6 4.5 4.5 4.5 4.5 4.5
Фарм. состав 36 4.3 4.4 4.6 4.6 4.6 4.5 4.4 4.4 4.4 4.4
Фарм. состав 37 4.2 4.2 4.3 4.4 4.5 4.5 4.4 4.3 4.3 4.3
Фарм. состав Ns38 4.2 4.2 4.3 4.4 4.5 4.5 4.4 4.3 4.3 4.3
Фарм. состав JVb39 5.0 5.1 5.2 5.3 5.4 5.3 5.2 5.1 5.0 5.0
Фарм. состав N°40 5.1 5.2 5.2 5.4 5.4 5.4 5.3 5.2 5.1 5.0
Фарм. состав J4Q41 5.0 5.1 5.2 5.3 5.4 5.3 5.2 5.1 5.0 5.0
Фарм. состав N°42 4.6 4.6 4.6 4.6 4.6 4.6 4.5 4.4 4.4 4.3
Фарм. состав Ne43 4.5 4.5 4.5 4.5 4.6 4.5 4.5 4.5 4.5 4.5
Фарм. состав Ns44 4.3 4.3 4.4 4.5 4.5 4.5 4.4 4.4 4.4 4.4
Фарм. состав N°45 4.2 4.2 4.3 4.4 4.4 4.4 4.4 4.3 4.3 4.3
Фарм. состав N°46 4.2 4.2 4.3 4.4 4.4 4.4 4.4 4.3 4.3 4.3
Фарм. состав Ν°47 5.0 5.1 5.2 5.3 5.4 5.3 5.2 5.1 5.0 5.0
Фарм. состав N°48 5.1 5.2 5.2 5.4 5.4 5.4 5.3 5.2 5.1 5.0 Таблица 31
Результаты проверки нейропротекторного действия (на модели геморрагического инсульта) фармацевтических составов на базе пептида Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly- Pro, препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ с изотопами углерода 13С, и нейропротекторного действия препарата мексидол. Количество крыс, не удержавшихся на вращающемся стержне в течение
2 минут (количество выживших крыс)
Figure imgf000059_0001
Фарм. состав N°41 5(9) 4(9) 3(8) 1(7) 0(6)
Фарм. состав Ns42 4(10) 3(9) 2(9) 1(8) 0(8)
Фарм. состав Ν°43 4(10) 3(Ю) 2(9) 1(8) 0(8)
Фарм. состав N°44 4(10) 3(Ю) 2(9) 1(8) 0(8)
Фарм. состав Ν°45 3(10) 2(10) 2(10) 1(10) 0(10)
Фарм. состав Ν°46 3(10) 3(10) 2(10) 1(9) 0(9)
Фарм. состав Ν°47 5(9) 4(9) 3(8) 1(7) 0(6)
Фарм. состав Ν°48 6(9) 6(8) 5(8) 1(6) 0(6)
*) количество крыс, не удержавшихся на вращающемся стержне в течение 2 минут. **) количество выживших крыс к моменту контроля. На контроль предоставлялось 10 крыс.
Таблица 32
Результаты проверки влияния фармацевтических составов на базе пептида Met- Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С, а также Мексидола на амнезию у мышей, вызванную электросудорожным шоком. Число мышей с амнезией условной реакции пассивного избегания через 24 часа после амнезирующего воздействия, % (значения округлены до целого числа)
Figure imgf000060_0001
Фарм. состав N°29 17 15 14 12 12
Фарм. состав ЗО 17 15 14 12 12
Фарм. состав N°31 23 21 17 15 15
Фарм. состав 32 23 22 18 16 16
Фарм. состав N°41 23 21 17 15 15
Фарм. состав Na42 22 20 15 14 14
Фарм. состав J s43 22 20 16 15 14
Фарм. состав Ν°44 21 20 15 13 13
Фарм. состав Ν°45 15 15 14 12 11
Фарм. состав Ν°46 15 15 14 12 11
Фарм. состав Ν°47 23 21 17 15 15
Фарм. состав JNs48 23 22 18 16 16
) Количество мышей в каждом опыте - *) Мексидол, доза 40 мг на мышь.
Таблица 33
Результаты проверки влияния фармацевтических составов на базе пептида Met- Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С, а также Мексидол а на амнезию у мышей, вызванную скополамином. Число мышей с амнезией условной реакции пассивного избегания через 24 часа после амнезирующего воздействия, %
(значения округлены до целого числа)
Figure imgf000061_0001
Фарм. состав N°26 22 18 14 13 13
Фарм. состав Ν°27 21 17 13 13 12
Фарм. состав Ν«28 21 15 1 1 1 1 11
Фарм. состав Ν°29 17 13 10 10 10
Фарм. состав Ν°30 17 13 10 10 10
Фарм. состав Ν°31 23 19 15 13 13
Фарм. состав Ν°32 23 20 16 13 13
Фарм. состав N°41 23 19 15 13 13
Фарм. состав Ν242 22 18 14 13 13
Фарм. состав Ν°43 21 17 13 13 12
Фарм. состав Ν°44 21 15 11 1 1 11
Фарм. состав N°45 16 13 10 10 9
Фарм. состав Ν°46 16 13 10 10 9
Фарм. состав Ν°47 23 19 15 13 13
Фарм. состав Ν°48 23 20 16 13 13
*) Количество мышей в каждом опыте - **) Мексидол, доза 40 мг на мышь.
Таблица 34
Результаты проверки влияния фармацевтических составов на базе пептида Met- Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С, а также Мексидола на выживаемость мышей на 7-е сутки после двусторонней перевязки общих сонных артерий. Количество мышей в каждом опыте -
Figure imgf000062_0001
препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат
составляла 1г/л (препарат
разбавлен водой 1 : 50)
Фармацевтические составов на базе пептида Met-Glu-His-Phe- Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ
Фармацевтический состав N°l 93
Фармацевтический состав N°2 94
Фармацевтический состав JV»3 94
Фармацевтический состав N°4 94
Фармацевтический состав N°5 95
Фармацевтический состав N°6 96
Фармацевтический состав Ν°7 96
Фармацевтический состав Ν°8 96
Фармацевтический состав Ν°9 93
Фармацевтический состав Ν°10 94
Фармацевтический состав JV21 1 94
Фармацевтический состав Ν_>12 96
Фармацевтический состав Ν°13 97
Фармацевтический состав N°14 97
Фармацевтический состав N°15 97
Фармацевтический состав Ν°16 96
Фармацевтический состав 17 93
Фармацевтический состав N2 I 8 94
Фармацевтический состав JNT_>19 96
Фармацевтический состав JN°20 97
Фармацевтический состав J4221 97
Фармацевтический состав °22 98 Фармацевтический состав 23 98
Фармацевтический состав N°24 97
Таблица 35
Результаты проверки влияния фармацевтических составов на базе пептида Met- Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С, а также Мексидола на выживаемость мышей на 7-е сутки после двусторонней перевязки общих сонных артерий. Количество мышей в каждом опыте -
Figure imgf000064_0001
Фармацевтический состав jV°161 96
Фармацевтический состав N2I 62 96
Фармацевтический состав No 163 97
Фармацевтический состав Ν°164 97
Фармацевтический состав N2165 98
Фармацевтический состав N2I 66 98
Фармацевтический состав Nel67 98
Фармацевтический состав JV2 I 68 99
Фармацевтический состав N°89 96
Фармацевтический состав N°90 97
Фармацевтический состав jV291 97
Фармацевтический состав N292 97
Фармацевтический состав Ν°93 98
Фармацевтический состав Ν°94 99
Фармацевтический состав Ν°95 99
Фармацевтический состав Ν°96 99
Фармацевтический состав Ν°97 97
Фармацевтический состав Ν°98 97
Фармацевтический состав Ν°99 97
Фармацевтический состав ХгЮО 97
Фармацевтический состав Ν2ΙΟ Ι 99
Фармацевтический состав -Ν2ΙΟ2 99
Фармацевтический состав JYS103 99
Фармацевтический состав N_>104 100
Фармацевтический состав JV IO5 97
Фармацевтический состав N IO6 97
Фармацевтический состав JVol07 97
Фармацевтический состав N°108 97 Фармацевтический состав N°109 99
Фармацевтический состав JVel 10 99
Фармацевтический состав N°l 1 1 100
Фармацевтический состав N°l 12 100
Фармацевтический состав N°l 13 97
Фармацевтический состав N°l 14 97
Фармацевтический состав N°l 15 97
Фармацевтический состав Ν°1 16 98
Фармацевтический состав N°l 17 99
Фармацевтический состав Ν°1 18 99
Фармацевтический состав N°l 19 100
Фармацевтический состав J\°120 100
Фармацевтический состав N°121 97
Фармацевтический состав N°122 97
Фармацевтический состав Л 123 98
Фармацевтический состав N°124 98
Фармацевтический состав Ν°125 99
Фармацевтический состав N°126 100
Фармацевтический состав j\°127 100
Фармацевтический состав jY2l28 100
Фармацевтический состав No 137 97
' Фармацевтический состав N9.138 97
Фармацевтический состав Х°139 98
Фармацевтический состав Ν°140 99
Фармацевтический состав Ν°141 100
Фармацевтический состав \42 100
Фармацевтический состав Ν°143 100
Фармацевтический состав Х°144 100 Литература
1. Воронина Т. А., Островская Р.У. Методические указания по изучению ноотропной активности фармакологических веществ //Руководство по
экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. / Под ред. Фисенко В.П. - М., 2000. - С.153-158.
2. Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон П.Д. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения: пер. с англ. /Под. ред. Батуева А.С. - М.: Высш. шк., 1991. - 399 с.
3. Владимиров Ю.А., Шерстнев М.П., Азимбаев Т.К. Оценка
антиокислительной и антирадикальной активностей веществ и биологических объектов с помощью железоинициированной хемилюминесценции // Биофизика. - 1992. - Т.37, вып.6. - С.1041-1047.
4. Воронина Т.А. Отечественный препарат нового поколения мексидол:
основные эффекты, механизм действия, применение. - М., 2004. - 21 с.
5. Гусев Е.И., Скворцова В. И. Ишемия головного мозга. - М.: Медицина, 2001.
6. Руководство по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. - М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004, - 240с.
7. Владимиров Ю.А., Шерстнев М.П., Азимбаев Т.К. Оценка
антиокислительной и антирадикальной активностей веществ и биологических объектов с помощью железоинициированной хемилюминесценции // Биофизика. - 1992. - Т.37, вып.6. - С.1041-1047.
8. В.Х.Хавинсон, В.Г.Морозов, В.Н.Анисимов. Влияние эпиталамина на свободнорадикальные процессы у человека и животных. Успехи геронтологии, 1999г., выпуск 3 .
9. Методические рекомендации по экспериментальному изучению
препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве
антигипоксических средств. Под редакцией Л.Д.Лукьяновой. - М., 1990.
10. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Под редакцией Р.У.Хабриева. - М.: Минздрав РФ, 2005. 11. McGraw СР., Pashayan A.G., Wendel O.T. Cerebral infarction in the
Mongolian gerbil exacerbated by phenoxybenzaminetreatment // Stroke. - 1976 - Vol.7, No 5. - P.485-488.
12. Cumin R., Bandle E.F., Gamzu E., Haefely W.E. Effect of the novel compound antiracetam (Ro 13-5057) upon impared learning and memory in rodents //
Psychopharmacol. - 1982. - Vol.78. - P.104-11 1.
13. Разделение изотопов. Физическая энциклопедия.
http://dic.academic.ru/dic.nsf/enc _physics/ 1071 /ИЗОТОПОВ .
14. Нанотехнология и включение атомов дейтерия 2Н, углерода 13С, азота 15N, и кислорода 180 в молекулы аминокислот и белков.
http://samlib.rU/o/oleg_w_m cdocumentsandsettingsolegmosinmoidokumentynanotehnol ogijaiwkljuchenieatomowdejterija2hrtf.shtml
15. Р.Ф.Ганиев, В.И.Кормилицын, Л.И.Украинский. Волновая технология приготовления альтернативных видов топлив и эффективность их сжигания.- М.:Научно-издательский центр «Регулярная и хаотическая динамика», 2008.-116 с.

Claims

Формула изобретения
1. Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной,
антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической,
нейрометаболической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат, полипептид метионин-глутамин-гистидин- фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro),
отличающийся тем, что дополнительно содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат— 0.4 10 - 300 ' 10 ;
полипептид метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин- пролин - 0.1 - 30;
калий - 0.001 - 158.0;
магний - 0.0001 - 70.3;
железо - 0.007 - 345.
2. Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной,
антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической,
нейрометаболической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6- метил-3 -гидроксипиридина сукцинат, полипептид метионин-глутамин-гистидин- фенилаланин-пролил-глицин-пролин (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro),
отличающийся тем, что дополнительно содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 0.4 ' 10 3 - 300 ' 10 3;
полипептид метионин-глутамин-гистидин-фенилаланин-пролил-глицин- пролин - 0.1 - 30;
калий - 0.001 - 158.0;
магний - 0.0001 - 70.3;
железо - 0.007 - 345,
и при этом фармацевтический состав выполнен таким образом, что содержит изотопы углерода 13С, и отношение количества изотопов углерода 13С к общему количеству углерода в фармацевтическом составе составляет величину от 0.005 до 0.75.
3. Фармацевтический состав по любому из пп.1-2, отличающийся тем, что значение рН составляет величину от 4 до 7.
PCT/RU2013/000187 2012-03-20 2013-03-12 Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты) WO2013141758A1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA201200343 2012-03-20
EA201200343A EA020558B1 (ru) 2012-03-20 2012-03-20 Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2013141758A1 true WO2013141758A1 (ru) 2013-09-26

Family

ID=49223074

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2013/000187 WO2013141758A1 (ru) 2012-03-20 2013-03-12 Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты)

Country Status (2)

Country Link
EA (1) EA020558B1 (ru)
WO (1) WO2013141758A1 (ru)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2581120C2 (ru) * 2013-12-23 2016-04-10 Владимир Павлович Лобко Дезинфицирующее средство

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2156087C1 (ru) * 1999-11-25 2000-09-20 Товарищество с ограниченной ответственностью Фирма "Электронная медицина" Биологически активная добавка
RU2352333C2 (ru) * 2003-12-18 2009-04-20 Пфайзер Инк. Композиция прегабалина
RU2440132C2 (ru) * 2006-12-27 2012-01-20 Закрытое акционерное общество "Синтез пептидов" Композиция, обладающая нейропротективной, антиамнестической, противогипоксической и противоишемической активностью

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2156087C1 (ru) * 1999-11-25 2000-09-20 Товарищество с ограниченной ответственностью Фирма "Электронная медицина" Биологически активная добавка
RU2352333C2 (ru) * 2003-12-18 2009-04-20 Пфайзер Инк. Композиция прегабалина
RU2440132C2 (ru) * 2006-12-27 2012-01-20 Закрытое акционерное общество "Синтез пептидов" Композиция, обладающая нейропротективной, антиамнестической, противогипоксической и противоишемической активностью

Also Published As

Publication number Publication date
EA020558B1 (ru) 2014-12-30
EA201200343A1 (ru) 2013-09-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2582962C1 (ru) Средство для профилактики и лечения нейродегенеративной патологии и сосудистой деменции (варианты)
WO2013141758A1 (ru) Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты)
EA020584B1 (ru) Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты)
WO2013129977A2 (ru) Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты)
WO2013137778A1 (ru) Твердая лекарственная форма, обладающая нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты)
EA020560B1 (ru) Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты)
EA020673B1 (ru) Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты)
WO2013137777A1 (ru) Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты)
EA024401B1 (ru) Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты)
EA020559B1 (ru) Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты)
EA020538B1 (ru) Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты)
EA020539B1 (ru) Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты)
EA020521B1 (ru) Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты)
WO2014171854A1 (ru) Антиоксидантный фармацевтический состав (варианты)
EA020585B1 (ru) Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты)
WO2014070038A1 (ru) Твердая лекарственная форма, обладающая нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты)
WO2014011077A2 (ru) Фармацевтический состав, обладающий метаболическим, противокатарактным, ретинопротекторным действием (варианты)
EA022859B1 (ru) Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты)
EA023752B1 (ru) Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты)
EA022860B1 (ru) Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты)
EA020042B1 (ru) Твердая лекарственная форма, обладающая нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты)
EA020041B1 (ru) Твердая лекарственная форма, обладающая нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты)
EA020058B1 (ru) Твердая лекарственная форма, обладающая нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты)
WO2014054975A2 (ru) Фармацевтический состав, обладающий метаболическим, противокатарактным, ретинопротекторным действием (варианты)
Atayalla et al. Determination of two heavy metals (Zn and Cu) in Anti-diabetic and Iron supplements by using Atomic Absorption Spectroscopy

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 13764248

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 13764248

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1